TW202143994A

TW202143994A - 環孢素類似物於治療纖維化之用途

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Publication number: TW202143994A
Application number: TW110105739A
Authority: TW
Inventors: 達倫優瑞; 丹尼爾翠派尼爾; 派翠克馬優; 羅伯佛斯特
Original assignee: 美商希皮恩製藥公司
Priority date: 2020-02-19
Filing date: 2021-02-19
Publication date: 2021-12-01
Also published as: BR112022016522A2; CA3171882A1; US20210260153A1; KR20220143059A; IL295452A; AU2021224676A1; JP2023514837A; MX2022010201A; WO2021168161A1; EP4106791A1; CN115427060A

Abstract

本發明揭示包括適用於預防、治療或反轉纖維化之方法、組成物及套組。該方法包含向有彼等需要之個體投予包含環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物之組成物。該組成物及套組包含環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物之組成物。

Description

環孢素類似物於治療纖維化之用途

本發明大抵關於分子生物學及醫學之領域。一個態樣係關於用親環素抑制劑預防、治療及反轉纖維化。相關申請案的交互參照

本申請案主張於2020年2月19日提出申請之美國臨時專利申請案第62/978,526號及2020年2月25日提出申請之美國臨時專利申請案第62/981,383號之優先權。這些相關申請案各者之內容全文以引用方式併入本文中。

纖維化係一種特徵為不受控制的纖維性結締組織蛋白質沉積及減少廓清之病理病況，且最終導致致死、末期器官結疤。組織纖維化可發生在所有器官。纖維化病症的臨床治療仍非常具挑戰性，例如，自發性肺纖維化(IPF)及硬皮症的治療性選項極度有限。

需要找到有效預防、治療及反轉影響各種器官之纖維化(包括非肝纖維化)的抗纖維化劑。

本發明包括一種用於治療非肝纖維化之方法。該方法可例如包含向有治療需要之個體投予包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的組成物：

其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. H； ii. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； iii. 經N-取代或未經取代之醯基保護之胺； iv. N-取代或未經取代之胺； v. 羧酸； vi. 腈； vii. 酯； viii. 酮； ix. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基；及 x. 經取代或未經取代之芳基； xi. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈，其可選地含有選自由氫、酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環、鹵素及側氧基所組成之群組的取代基； xii. 芳族基，其含有選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基；及 xiii. (xi)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈與(xii)之芳族基的組合；且 d. R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈。

有治療需要之個體可為罹患非肝纖維化之個體。該方法可包含減少該個體之非肝纖維化的量。在一些實施態樣中，該個體之非肝纖維化的量係減少5%、10%、20%或超過20%。該方法可包含減少該個體之非肝纖維化的形成。在一些實施態樣中，該個體之非肝纖維化的形成係減少5%、10%、20%或超過20%。

非肝纖維化之非限制性實例包括肺、肝、腎、心臟、皮膚、眼、胃腸道、腹膜、骨髓、肌肉、血管、血管分布或彼等之任何組合的纖維化。在一些實施態樣中，有治療需要之個體係罹患纖維化病症之個體，該纖維化病症選自由自發性肺纖維化(IPF)、心纖維化、皮膚纖維化、腎纖維化或彼等之組合所組成之群組。

本發明亦包括一種用於預防或延緩纖維化的開始之方法。該方法可例如包含向有預防或延緩需要之個體投予包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的組成物：

有預防或延緩需要之個體可為例如具有發展纖維化之風險之個體。在一些實施態樣中，個體之發展纖維化之風險相較於未經治療之個體係減少至少5%、10%、20%或超過20%。在一些實施態樣中，個體之纖維化的開始係延緩至少一個月、一年或超過一年。

在一些實施態樣中，方法包含減少纖維化形成，其中該個體之纖維化形成相較於未經治療之個體係減少至少一個月、一年或超過一年。

本發明亦包括一種用於減少纖維化或反轉纖維化之方法。該方法可例如包含向有減少或反轉需要之個體投予包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的組成物：

在一些實施態樣中，有減少或反轉需要之個體係罹患纖維化之個體。在一些實施態樣中，方法包含抑制個體之纖維化形成。在一些實施態樣中，纖維化係非肝纖維化。在一些實施態樣中，非肝纖維化包含肺、腎、心臟、皮膚、眼、胃腸道、腹膜、骨髓、肌肉、血管、血管分布或彼等之任何組合的纖維化。在一些實施態樣中，有減少或反轉需要之個體係罹患纖維化病症之個體，該纖維化病症選自由肺纖維化、心纖維化、皮膚纖維化、腎纖維化、肝纖維化或彼等之組合所組成之群組。

在一些實施態樣中，有減少或反轉需要之個體係罹患自發性肺纖維化(IPF)之個體。在一些實施態樣中，纖維化係肝纖維化，例如肝硬化。在一些實施態樣中，肝硬化係與病毒性肝炎、血吸蟲病及慢性酒精中毒相關聯。

在一些實施態樣中，具有式L之環孢素類似物係CRV431：

在一些實施態樣中，組成物包含治療或預防有效量的式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物。

在一些實施態樣中，非肝纖維化或纖維化係由治療劑、損傷或彼等之組合誘導。在一些實施態樣中，非肝纖維化或纖維化係與在創傷、發炎、組織修復、免疫反應、細胞性增生、腫瘤或彼等之組合之後發生的細胞外基質成分累積相關聯。在一些實施態樣中，非肝纖維化或纖維化係與主要器官疾病、纖維增生病症、創傷相關結疤或彼等之組合相關聯。在一些實施態樣中，纖維化係與下列相關聯：間質性肺疾病、肝硬化、非酒精性脂肪肝疾病、非酒精性脂肪肝炎、腎疾病、心臟或血管疾病、眼疾病、全身性及局部硬皮症、蟹足腫、肥厚性瘢痕、動脈粥樣硬化、再狹窄、Dupuytren氏攣縮、手術併發症、化學治療劑藥物誘導纖維化、放射誘導纖維化、意外損傷及燒燙傷、腹膜後纖維化、腹膜纖維化/腹膜結疤或彼等之組合。在一些實施態樣中，與間質性肺疾病相關聯之纖維化係類肉瘤病、矽沉著病、藥物反應、感染、膠原蛋白血管疾病、類風濕性關節炎、全身性硬化症、硬皮症、肺纖維化、自發性肺纖維化、尋常性間質性肺炎、間質性肺疾病、隱源性致纖維性肺泡炎、阻塞性細支氣管炎、支氣管擴張症或彼等之組合。

方法可例如相較於未經治療之個體減少該個體之纖維化形成至少5%、10%、20%、50%、70%、90%或超過90%。

在一些實施態樣中，方法包含相較於未經治療之個體延緩該個體之纖維化形成。個體可為例如哺乳動物(例如人類)。在一些實施態樣中，組成物包含一或多種醫藥上可接受之賦形劑。在一些實施態樣中，組成物包含一或多種額外治療劑。

在一些實施態樣中，方法進一步包含向有彼等需要之個體投予一或多種額外治療劑。在一些實施態樣中，一或多種額外治療劑包含額外抗纖維化劑。在一些實施態樣中，一或多種額外治療劑包含第II型干擾素受體促效劑、吡非尼酮(pirfenidone)及吡非尼酮類似物、尼達尼布(nintedanib)及尼達尼布類似物、抗血管生成劑、抗發炎劑、IL-1拮抗劑、血管張力素轉換酶(ACE)抑制劑、血管張力素受體阻斷劑及醛固酮拮抗劑、絲裂黴素C(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、腺苷酸環化酶活化子、β-腎上腺素受體促效劑、類黃酮、肥胖細胞穩定劑、磷酸二酯酶抑制劑、原花青素(procyanidin)或彼等之組合。

在一些實施態樣中，一或多種額外治療劑中至少一者係與該組成物共投予至該個體。在一些實施態樣中，一或多種額外治療劑中至少一者係在投予該組成物之前、投予該組成物之後或投予該組成物之前及之後投予至該個體。組成物可藉由例如靜脈內投予、口服投予、腸胃外投予向個體投予。組成物可呈例如粉末、丸劑、錠劑、微錠劑、微粒劑(pellet)、細微粒劑(micropellet)、膠囊、含有微錠劑之膠囊、液體、氣溶膠或奈米粒子之形式。在一些實施態樣中，組成物係以10 mg至250 mg之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的有效每日劑量向個體投予。

本發明亦包括一種醫藥組成物，其包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物以用於預防或治療纖維化、或用於預防或減少纖維化形成、或用於反轉纖維化、或用於減少纖維化的量、或用於延緩纖維化的開始：

在一些實施態樣中，環孢素類似物係CRV431：

在一些實施態樣中，醫藥組成物係用於靜脈內投予、口服投予或腸胃外投予。在一些實施態樣中，醫藥組成物係呈粉末、丸劑、錠劑、微錠劑、微粒劑(pellet)、細微粒劑(micropellet)、膠囊、含有微錠劑之膠囊、液體、氣溶膠或奈米粒子之形式。

本發明包括一種套組，其包含：本發明揭示之醫藥組成物；及標籤，其中該標籤指示下列一或多項： (a)該套組係用於預防或治療纖維化， (b)該套組係用於減少或抑制纖維化形成， (c)該套組係用於反轉纖維化， (d)該套組係用於減少纖維化的量，及 (e)該套組係用於延緩纖維化的開始。

在一些實施態樣中，套組進一步包含識別具有發展纖維化之風險之個體的說明、識別罹患纖維化之個體的說明或該兩者。

在下列實施方式中，所參照的是形成本發明的一部分之隨附圖式。在圖式中，類似符號一般識別類似成分，除非上下文另行說明。實施方式、圖式及申請專利範圍中描述之例示性實施態樣並無限制之意。可採用其他實施態樣並可作出其他變化，而不背離本發明呈現之主題的精神或範疇。將輕易理解的是，本發明在本文所大致描述且於圖式中例示之態樣可以各式各樣的不同組態配置、取代、組合、分離及設計，彼等所有皆在本發明中明白考慮且為本發明之一部分。

所有在本發明中提到之專利、公開專利申請案、其他出版物及來自GenBank及其他資料庫之序列整體就相關技術方面係以引用方式併入本發明中。定義

除非另行定義，否則此處所使用之所有技術及科學用語和本揭露所屬技術領域中具有通常知識者所通常瞭解之意義相同。見例如Singleton et al., Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 2nd ed., J. Wiley & Sons(New York, NY 1994)；Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (Cold Spring Harbor, NY 1989)。就本發明之目的而言，下列用語係定義如下。

如本發明所使用，「個體(subject)」係指治療、觀察或實驗之目標之動物。「動物(animal)」包括冷血及溫血脊椎動物及無脊椎動物，例如魚、甲殼類動物、爬蟲類及特別是哺乳動物。「哺乳動物(mammal)」包括但不限於小鼠；大鼠；兔；天竺鼠；犬；貓；綿羊；山羊；牛；馬；靈長動物諸如猴、黑猩猩及猿、及特別是人類。

如本發明所使用，「患者(patient)」係指由醫療專業人員諸如醫師(即，對抗醫學之醫師或骨科醫學之醫師)或獸醫師治療之個體，以嘗試治癒或至少改善特定疾病或病症之效應或在第一時間預防疾病或病症的發生。

如本發明所使用，「投予(administration/administering)」係指向脊椎動物給予醫藥活性成分劑量之方法。

如本發明所使用，「劑量(dosage)」係指活性成分(例如環孢素類似物，包括CRV431)的組合量。

如本發明所使用，「單位劑量(unit dosage)」係指以單一劑量向患者投予之治療劑的量。

如本發明所使用，「每日劑量(daily dosage)」係指一天中向患者投予之治療劑的總量。

如本發明所使用，「治療有效量(therapeutically effective amount)」或「醫藥有效量(pharmaceutically effective amount)」係指具有治療效應之治療劑的量。當單獨或與一或多種額外治療劑組合投予時可用於治療之醫藥活性成分之劑量係治療有效量。因此，如本發明所使用，治療有效量是指由臨床試驗結果及/或模型動物研究判斷之產生所欲治療效應之治療劑的量。

如本發明所使用，用語「治療(treat/treatment/treating)」係指為了預防性及/或治療性目的而向個體投予治療劑或醫藥組成物。用語「預防性治療(prophylactic treatment)」係指治療尚未展現疾病或病況之症狀的個體，但該個體容易罹患特定疾病或病況或另外具有特定疾病或病況之風險，藉此該治療減少患者將發展疾病或病況的可能性。用語「治療性治療(therapeutic treatment)」係指向已經罹患疾病或病況之個體投予治療。如本發明所使用，「治療效應(therapeutic effect)」在一些程度上緩解疾病或病症之一或多個症狀。例如，可藉由個體溝通的主觀不適減少(例如患者自評問卷中註記的減少不適)觀察到治療效應。

如本發明所使用，用語「預防(prophylaxis/prevention)」係指預防性治療個體例如哺乳動物(包括人類)的亞臨床疾病狀態，以減少臨床疾病狀態的發生機率。基於相較於一般族群增加罹患臨床疾病狀態之風險的已知因子，選擇用於預防性療法之個體。「預防」療法可分成(a)初級預防及(b)二級預防。初級預防係定義為在尚未呈現臨床疾病狀態之個體中的治療，然而二級預防係定義為預防相同或類似臨床疾病狀態的第二次發生。纖維化

纖維化係一種病理病況，其中發生纖維性結締組織的過量累積。在一些情況下，纖維化被認為是組織或器官的急性或慢性壓力的結果，其特徵在於細胞外基質沉積、血管/管(tubule)/道(duct)/呼吸道暢通性減少及功能障礙，最終導致器官衰竭。在器官或組織中過量纖維性結締組織的形成可發生在反應性或修復性過程中。反應性纖維化係可逆性過程，出現在功能細胞壞死不存在下(即受影響細胞維持存活)，然而修復性纖維伴隨細胞死亡之後的瘢痕形成。纖維化可影響所有組織及器官系統，包括但不限於心臟、肝臟、肺、骨骼肌、腎、眼、血管、皮膚、腦、骨髓、胃腸道、腹膜及血管分布。纖維化代表一些慢性組織疾病的末期階段：骨骼肌組織(例如失養性肌肉疾病)、心臟及血管組織(例如心肌梗塞)、肝臟組織(例如非酒精性脂肪肝疾病/肝硬化)、肺組織(例如自發性肺纖維化)及腎組織(例如慢性腎疾病/腎纖維化)，這些慢性組織疾病代表全世界所有死亡的近半數。纖維化及纖維化病症可與主要器官相關聯，包括但不限於肺、肝、腎、心臟、皮膚、眼、胃腸道、腹膜、骨髓或彼等之組合。如本文所述，纖維化可為非肝纖維化，其係存在於及/或影響非肝組織及肝以外器官之纖維化。非肝纖維化之非限制性實例包括影響心臟、肺、骨骼肌、腎、眼、血管、皮膚、腦、骨髓、胃腸道、腹膜及血管分布之纖維化。非肝纖維化病症之實例包括但不限於與肺、腎、心臟、皮膚、眼、胃腸道、腹膜、骨髓、肌肉(例如骨骼肌)、血管、血管分布或彼等之任何組合相關聯的纖維化病況。

如本發明所使用，纖維化疾病或病況係特徵在於形成過量纖維性結締組織的任何疾病或病況。這些疾病的常見特徵係纖維化細胞的過度增生，且組織或器官纖維化通常包括肺纖維化、肝纖維化、慢性胰臟炎、硬皮症、腎小球纖維化及由放射性化學療法及組織移植造成之多個器官纖維化。過量纖維性結締組織的形成可回應於修復性或反應性過程。纖維化包括但不限於肺纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化、皮膚纖維化(例如腎性全身性纖維化及蟹足腫纖維化)、縱膈纖維化、心臟纖維化、腎纖維化、基質纖維化、硬膜外纖維化、上皮纖維化、自發性纖維化、肝硬化及彼等之任何組合。

在一些實施態樣中，纖維化係在創傷、發炎、組織修復、免疫反應、細胞性增生及腫瘤之後發生細胞外基質成分累積的纖維化病況。纖維化及纖維化病症之非限制性實例包括但不限於：囊腫纖維化；與主要器官疾病相關聯的纖維化及纖維化病症，包括但不限於間質性肺疾病(ILD)、肝硬化、非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)及非酒精性脂肪肝炎(NASH)(肝纖維化)、腎疾病(腎纖維化)、心臟或血管疾病(心臟纖維化)及眼疾病；纖維增生病症，包括但不限於全身性及局部硬皮症、蟹足腫及肥厚性瘢痕、動脈粥樣硬化、再狹窄及Dupuytren氏攣縮；與創傷相關聯之結疤，包括但不限於手術併發症、化學治療劑藥物誘導纖維化(例如博來黴素誘導纖維化)、放射誘導纖維化、意外損傷及燒燙傷；腹膜後纖維化(Ormond氏疾病)；及接受腹膜透析患者中之腹膜纖維化/腹膜結疤(通常在腎移植之後)。

纖維化可為眼纖維化，其包括但不限於：起因於眼疾病或病症之眼纖維化，諸如糖尿病視網膜病、細菌感染、病毒感染、真菌感染、阿米巴原蟲感染、眼創傷、化學性角膜灼傷、熱角膜灼傷、眼翳、青光眼、手術創傷、Fuch氏角膜內皮失養症(FECD)、增生性玻璃體視網膜病(PVR，例如前增生性玻璃體視網膜病(前PVR))或彼等之組合。眼纖維化可為例如視網膜纖維化、角膜纖維化、結膜纖維化、小樑網之纖維化或彼等之組合。眼纖維化可包含例如角膜霧霾、角膜結疤、小樑泡或彼等之組合。眼纖維化可起因於例如角膜灼傷、眼翳、FECD、青光眼或彼等之組合。在一些實施態樣中，眼纖維化包含與抗VEGF治療相關聯之視網膜纖維化。

腎纖維化係一種纖維化病況，其中纖維化發生在因腎組織發炎所致之瘢痕累積，其中一部分的腎硬化且失去其功能。腎的硬化可導致慢性腎衰竭，其可伴隨貧血、凝血病症、高血壓、心肺器官及胃腸道之各種併發症及感染。如果腎功能下降，例如低於正常的百分之15，則腎臟產生較少紅血球生成素，導致紅血球生產降低。此外，由非活性尿液分泌造成的尿毒症減少紅血球生命週期且造成強烈貧血。此外，尿毒症的開始增加全身性感染的可能性，其係發展敗血症的主要因子。在一些情況下，腎疾病(可與糖尿病相關聯)可損害腎臟並使腎臟結疤，導致進行性功能喪失，亦導致高血壓疾病。腎纖維化可發生在腎疾病的任何階段，從慢性腎疾病(CKD)至末期腎疾病(ESRD)。腎纖維化可因心血管疾病諸如高血壓或糖尿病而發展，兩者皆對腎功能造成重大影響而促進纖維化反應。在一些情況下，腎纖維化亦可為自發性(無已知原因)，且某些基因粒線體疾病亦呈現腎纖維化表徵及相關症狀。

肺的纖維化病症包括例如肺纖維化、自發性肺纖維化(IPF)、尋常性間質性肺炎(UIP)、間質性肺疾病(ILD)、隱源性致纖維性肺泡炎(CFA)、阻塞性細支氣管炎及支氣管擴張症。間質性肺疾病(ILD)包括其中肺發炎及纖維化係最終共同病理學途徑之病症，例如類肉瘤病、矽沉著病、藥物反應、感染及膠原蛋白血管疾病諸如類風濕性關節炎及全身性硬化症(硬皮症)。IPF係最常見的ILD類型。已知IPF係藉由連續刺激上皮細胞或杯狀細胞所造成的受損區域之異常癒合過程造成，但其刺激因子尚未知。肺的發炎可能不直接造成肺纖維化，但已知肺纖維化因為在肺發炎之後癒合至正常組織的過程中自發性肺纖維化患者與正常人之間的差異而發生。另一纖維化機制係經由T輔助第2型細胞介素活化及增生纖維母細胞所致之細胞外基質的沉積及纖維化。

肝臟的纖維化(肝纖維化)可定義為因為肝臟慢性發炎所致之細胞外基質的過度沉積。如果慢性肝疾病因為此類細胞外基質過度沉積而持續存在，其最終因為肝臟內部結構扭曲、肝臟細胞數量降低而進展成肝硬化。涉及肝纖維化之代表性細胞包括肝星狀細胞、Kupffer細胞及內皮細胞。經活化之肝星狀細胞係細胞外基質生產的主要來源，且肝星狀細胞涉及增加各種細胞外基質(包括膠原蛋白)的生產。Kupffer細胞位於肝臟的竇狀隙中，且經活化之Kupffer細胞所生產的物質影響周圍的肝細胞、內皮細胞及肝星狀細胞，藉此促進肝纖維化。內皮細胞不僅扮演調節肝臟血流的必要角色，但亦涉及生長因子及細胞外基質的生產，該生長因子及細胞外基質涉及藉由發炎或肝纖維化之肝星狀細胞的增生。影響肝纖維化之細胞介素包括轉變生長因子β(TGF-β)及血小板衍生性生長因子(PDGF)。TGF-β係最強效的促進肝星狀細胞纖維化之細胞介素，且肝星狀細胞本身係TGF-β之主要來源。PDGF係最強效的促進肝星狀細胞之分裂及增生的細胞介素。在過去，肝纖維化過程被認為是不可逆的現象，但近來，有報告指出可逆地改變。因此，其可為動態過程。因此，正確測量此類變化變得具有臨床重要性。在一些實施態樣中，肝纖維化係肝硬化，包括例如與病毒性肝炎、血吸蟲病及慢性酒精中毒相關聯之肝硬化。

在一些實施態樣中，纖維化與心臟疾病、眼疾病或彼等之組合相關聯。已知心臟疾病可導致損害心臟泵送能力之瘢痕組織。心臟纖維化病況之非限制性實例包括心房纖維化、心肌內膜纖維化及彼等之任何組合。眼疾病包括但不限於黃斑部退化及視網膜及玻璃體視網膜病，其可損害視力。纖維化可為肌肉纖維化，例如反應性肌肉纖維化。肌肉纖維化可為心臟纖維化，其包括但不限於間質性心臟纖維化、血管周圍心臟纖維化、骨骼肌纖維化及彼等之組合。

心臟纖維化可經由各種獨特機制在患者的心臟疾病之致病機轉中扮演重要角色。纖維化心肌重塑可損害心室舒張功能，導致發展保留射出率心衰竭。發展心房纖維化可使個體易發心房過速性心律不整。另外，膠原蛋白沉積於心室心肌可造成心室心律不整發生率增加及在代謝異常個體觀察到之猝死。再者，在一些患者中，右心室發生纖維化變化可阻擾右心室功能。此外，在梗塞之後代謝異常相關調節修復性纖維化反應可使這些個體易於發展梗塞後心衰竭。消除纖維化可有利於減少代謝改變個體中之心臟發病率及死亡率。

如本文所述，纖維化病症可為例如纖維化血管疾病、囊腫纖維化、肺纖維化、自發性肺纖維化、肌肉骨骼纖維化、腎纖維化疾病、與HIV相關聯之淋巴結纖維化、發炎性肺纖維化、胰纖維化、肝纖維化、心肌纖維化或彼等之組合。

纖維化可為年齡誘導(例如因組織損傷或心血管疾病所致)、損傷誘導或壓力誘導。年齡誘導纖維化可為心臟、腎、血管、肝、腦、腸、皮膚、胰及肺或彼等之任何組合的年齡誘導纖維化。纖維化可為例如心臟纖維化、肝纖維化、腦纖維化、腎纖維化、血管纖維化、肺纖維化、皮膚纖維化或彼等之任何組合。皮膚纖維化病症之非限制性實例包括異常傷口癒合、皺紋、橘皮組織及皮膚腫瘤性纖維化、血管病變、血管炎、燒燙傷口過度癒合、糖尿病足症候群、關節纖維化、Peyronie氏疾病及彼等之任何組合。腦纖維化病況之非限制性實例包括神經膠細胞性瘢痕。在一些實施態樣中，纖維化病況係動脈硬化、關節纖維化、克隆氏病、Dupuytren氏攣縮、蟹足腫、縱膈纖維化、骨髓纖維化、Peyronie氏疾病(PD)、腎性全身性纖維化、進行性大量纖維化、腹膜後纖維化、燒燙傷瘢痕、任何器官之手術後纖維化、尿道纖維化、糖尿病腎病變、硬皮症/全身性硬化症或彼等之任何組合。纖維化病況可涉及胃腸道系統之器官，例如肝臟、小腸、大腸或胰臟；呼吸系統之器官，例如肺；心血管系統之器官，例如心臟或血管；皮膚；神經系統之器官，例如腦；泌尿系統之器官，例如腎；及/或肌肉骨骼系統之器官，例如肌肉組織。在一些實施態樣中，纖維化或纖維化病況具有已知原因及/或觸發因子，例如皮膚燒燙傷、手術後纖維化或彼等之組合。在一些實施態樣中，纖維化或纖維化病況不具有已知原因及/或觸發因子。預防及治療之方法

本發明包括用於治療纖維化(例如一或多種纖維化疾病/病症)之方法、組成物及套組。方法、組成物及套組可例如減輕或改善有減輕或改善需要之個體的一或多個纖維化症狀。本發明亦揭示用於預防(包括初級預防及二級預防)纖維化(例如一或多種纖維化疾病/病症)之方法、組成物及套組。此外，提供用於預防或延緩纖維化的開始之方法、組成物及套組。本發明揭示之方法、組成物及套組可在一些實施態樣中反轉個體的纖維化、減少或抑制纖維化形成及/或減少纖維化的量。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。

在一些實施態樣中，方法包含識別具有纖維化之個體。在一些實施態樣中，方法包含識別具有發展纖維化之風險之個體。套組可包含識別具有纖維化之個體的說明、識別具有發展纖維化之風險之個體的說明或該兩者。

方法可例如包含：向有需要之個體投予包含環孢素類似物(例如，CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、立體異構物之組成物。在一些實施態樣中，有需要之個體係具有發展纖維化之風險之個體。在一些實施態樣中，個體尚未發展纖維化。例如，個體係在預防措施(例如用本發明揭示之預防纖維化之方法或預防纖維化之組成物治療)不存在下可能或將發展纖維化之個體。在一些實施態樣中，有需要之個體係罹患纖維化之個體。在一些實施態樣中，有需要之個體係具有一或多個纖維化症狀之個體。在一些實施態樣中，有需要之個體係最近罹患纖維化之個體。

例如，本發明揭示之方法、組成物及套組可用於預防具有發展纖維化之風險之個體(例如尚未發展纖維化但在纖維化預防治療不存在下可能或將發展纖維化之個體)的纖維化的開始。此外，本發明揭示之方法、組成物及套組可用於延緩具有發展纖維化之風險之個體(例如在纖維化預防治療不存在下將在更早的時間發展纖維化之個體)的纖維化的開始。如本發明所述，具有發展纖維化之風險之個體係尚未罹患纖維化之個體，且因此該個體並無纖維化進展。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩。延緩可為例如一或多秒、一或多分鐘、一或多小時、一或多天、一或多週、一或多月或一或多年。在一些實施態樣中，經治療之個體的延緩係相對於相同個體(若他/她未接受治療)。在一些實施態樣中，經治療之個體的延緩係相對於未經治療之個體。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩(或經延緩約)5、10、15、20、25、30、35、40、50、75、100、150、200、250、300、350天或介於這些值中任何者之間的範圍。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩(或經延緩約)一、二、三、四、五、六、七、八、九、十、十一、十二個月或年或介於這些值中任何者之間的範圍。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩至少(或至少約)一、二、三、四、五、六、七、八、九、十個月或年。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩至少(或至少約)一、二、三、四、五、六、七、八、九、十或超過十個小時。

在一些實施態樣中，個體的纖維化(例如組織纖維化)係經反轉。反轉可為(或約為)個體的既有纖維化的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，反轉可至少為(或至少約為)個體的既有纖維化的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或超過95%。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。

在一些實施態樣中，個體的纖維化(例如組織纖維化)的量係經減少。個體的纖維化減少的量可為(或約為)1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，個體的纖維化減少的量可至少為(或至少約為)的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或超過95%。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。

在一些實施態樣中，個體的纖維化(例如組織纖維化)形成係經減少。個體的纖維化形成的減少可為(或約為)1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，個體的纖維化形成的減少可至少為(或至少約為)的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或超過95%。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。經治療之個體的纖維化形成的減少可為相對於相同個體(若他/她未接受治療)。在一些實施態樣中，經治療之個體的纖維化形成的減少係相對於未經治療之個體。

本發明揭示之一或多種環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物之治療有效性可使用已知用於測量個體之纖維化的量(例如受影響之器官、組織或區域中的纖維化)之方法測定。個體可為例如罹患纖維化之患者或最近罹患纖維化之患者。個體之纖維化的量可藉由所屬技術領域中具有通常知識者已知用於判定纖維化的量之方法測定。例如且不限地，纖維化的量可藉由下列測定：自個體採集肌肉活體組織切片、將肌肉切成切片並如所屬技術領域中已知之染色技術(例如蘇木精及伊紅(H&E)染色及/或Masson氏三色染色)所示評估纖維化的量。作為另一實例，纖維化的量可藉由使用磁振造影(MRI)在活體內測定。

可藉由本發明揭示之組成物、方法或套組達成之例示性治療性終點可為經本發明揭示之一或多種環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物及可選地一或多種額外治療劑(例如抗纖維化劑)投予之個體的纖維化的量減少。個體的纖維化的相對量可例如藉由組織活體組織切片及後續組織學定量，包括但不限於定量Evans氏藍染料攝取作為肌纖維或細胞性損害之量度(例如Heydemann et al., Neuromuscular Disorders 15 (9-10): 601-9(2005)所述)、如Swaggart et al., Physiol Genomics 43: 24-31(2011)所述之定量羥基脯胺酸含量或兩者。在一些實施態樣中，經本發明揭示之一或多種環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物及可選地一或多種額外治療劑(例如抗纖維化劑)投予之個體的纖維化的量相較於未經如此治療之患者係減少(或減少約)1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、100%或在1%至100%內之任何值或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，經本發明揭示之一或多種環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物及可選地一或多種額外治療劑(例如抗纖維化劑)投予之個體的纖維化的量相較於未經如此治療之患者係減少至少(或減少至少約)1%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%。

功能測定可用於測定本發明揭示之化合物於例如治療纖維化、預防纖維化、反轉纖維化、減少纖維化的量、延緩纖維化的開始、減少或抑制纖維化形成或彼等之任何組合的有效性。例如，化合物可於抑制膠原蛋白凝膠收縮作為肌纖維母細胞收縮性(一種肌纖維母細胞的特徵功能，其將肌纖維母細胞與纖維母細胞分開)之量度中測試。裝載膠原蛋白凝膠與纖維母細胞且在TGF-β1刺激之後測量收縮。預期有效化合物抑制TGF-β1誘導之膠原蛋白收縮。化合物之療效亦可於抑制ECM蛋白質生產中測試，其係肌纖維母細胞重要的特徵功能之一。

本發明揭示之方法可應用於治療具有例如下列之個體：器官功能異常、結疤、正常細胞外基質平衡改變、膠原蛋白沉積增加、膠原蛋白體積分率增加、纖維母細胞分化成肌纖維母細胞、基質金屬蛋白酶水準減少及基質金屬蛋白酶之組織抑制劑水準增加、第I型前膠原蛋白之N端或C端前肽(PINP或PICP)水準增加、第I型膠原蛋白C端肽(CTP或CITP)水準降低、藉由各種非侵入性成像技術所測量之膠原蛋白沉積增加及心臟功能損害及藉由蛋白尿及白蛋白尿增加、腎小球過濾速率降低或肌酸酐水準倍增所測量之腎功能損害。治療劑

如本發明所使用，用語「抗纖維化劑(antifibrotic agent)」係指在哺乳動物中具有抗纖維化活性(例如預防、減少或反轉纖維化)之劑(例如化學化合物或生物製劑)。抗纖維化劑可具有不同作用機轉，例如一些減少身體受影響區域中之膠原蛋白或另一種蛋白質的形成，而一些增強膠原蛋白的分解代謝或移除。本發明包括具有減少纖維化組織的存在之活性的抗纖維化劑，與各該劑功能之特定作用機轉無關。抗纖維化劑之一些非限制性實例係描述於美國專利第5,720,950號，其係以引用方式併入本文中。額外抗纖維化劑包括但不限於：第II型干擾素受體促效劑(例如干擾素-γ)；吡非尼酮及吡非尼酮類似物；抗血管生成劑，諸如VEGF拮抗劑、VEGF受體拮抗劑、bFGF拮抗劑、bFGF受體拮抗劑、TGF-β拮抗劑、TGF-β受體拮抗劑；抗發炎劑、IL-1拮抗劑諸如IL-1Ra、血管張力素轉換酶(ACE)抑制劑、血管張力素受體阻斷劑及醛固酮拮抗劑。

包括本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的抗纖維化劑可用於治療個體的纖維化(例如纖維化病症)或用於初級預防或二級預防纖維化(例如纖維化病症)。環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可例如在個體(例如具有發展纖維化之風險之個體)中延緩纖維化的開始。環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可例如在個體中反轉纖維化。環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可用於減少或抑制個體的纖維化形成。環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可用於減少個體的纖維化的量。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。

本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可預防纖維化(例如組織纖維化)發生。例如，這些抗纖維化劑可禁止個體的纖維化形成、延緩個體的纖維化的開始或該兩者。延緩可為例如一或多秒、一或多分鐘、一或多小時、一或多天、一或多週、一或多月或一或多年。經治療之個體的延緩可為相對於相同個體(若他/她未接受治療)或相對於未經治療之個體。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩(或經延緩約)5、10、15、20、25、30、35、40、50、75、100、150、200、250、300、350天或介於這些值中任何者之間的範圍。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩(或經延緩約)一、二、三、四、五、六、七、八、九、十、十一、十二個月或年或介於這些值中任何者之間的範圍。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩至少(或至少約)一、二、三、四、五、六、七、八、九、十個月或年。在一些實施態樣中，纖維化的開始係經延緩至少(或至少約)一、二、三、四、五、六、七、八、九、十或超過十個小時。

本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可反轉個體的纖維化(例如組織纖維化)。反轉可為(或約為)個體的既有纖維化的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，反轉可至少為(或至少約為)個體的既有纖維化的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或超過95%。

本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可減少個體的纖維化(例如組織纖維化)的量。個體的纖維化減少的量可為(或約為)1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，個體的纖維化減少的量可至少為(或至少約為)的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或超過95%。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。

本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物可減少個體的纖維化(例如組織纖維化)的形成。個體的纖維化形成的減少可為(或約為)1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或介於這些值中任二者之間的範圍。在一些實施態樣中，個體的纖維化形成的減少可至少為(或至少約為)的1%、2%、5%、8%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或超過95%。纖維化在一些實施態樣中係非肝纖維化。經治療之個體的纖維化形成的減少可為相對於相同個體(若他/她未接受治療)或相對於未經治療之個體。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係下式L之化合物：

在一些實施態樣中，R1-R2係選自由下列所組成之群組：

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、

及

。在一些實施態樣中，R1-R2包含介於2與5個碳之間的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈，其可選地經選自由氫、酮、羥基、腈、鹵素、側氧基、羧酸、酯及1,3-二氧戊環所組成之群組的取代基取代。

在一些實施態樣中，R2係選自由下列所組成之群組：

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、

、

、

、

、

、

及

；R5係介於1與10個碳長度之間的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈；且R6係介於1與10個碳長度之間的單羥基化、二羥基化、三羥基化或多羥基化飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，R23係選自由下列所組成之群組：

、

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、

、

、

、

、

及

。在一些實施態樣中，R23包含可選地經取代之烷基，包括可選地經取代之C1-C3烷基。烷基可經胺基取代且可包含C1-C3-Ala，其中化合物包含胺基酸3之D-差向異構物，該胺基酸3係R23所連接之胺基酸。在一些實施態樣中，R23可為MeAla。在一些實施態樣中，R23係1至6、1至5、1至4、1至3或2個碳長度之直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，式L中之

係選自由下列所組成之群組：

、

、

、

、

、

、

、

、

及

。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係下式L之化合物：

其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； ii. 羧酸； iii. 腈； iv. 酯； v. 酮； vi. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基； vii. 經取代或未經取代之芳基； viii. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈，其經選自由酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環及側氧基所組成之群組的取代基取代； ix. 芳族基，其經選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基取代；及 x. viii)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈與ix)之芳族基的組合；且 d. R23係未經取代之C₁ -C₃ 烷基。

在一些實施態樣中，R’係H。

在一些實施態樣中，R1係5至8個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，R2係選自由下列所組成之群組：

、

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、

、

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、

、

、

、

、

、

、

及

； R5係介於1與10個碳長度之間的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈；且R6係介於1與10個碳長度之間的單羥基化、二羥基化、三羥基化或多羥基化飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，R1-R2係選自由下列所組成之群組：

、

、

、

、

、

、

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、

、

及

。在一些實施態樣中，R1-R2係經選自由酮、羥基、腈、側氧基、羧酸、酯及1,3-二氧戊環所組成之群組的取代基取代。在一些實施態樣中，R1-R2係至少6個碳原子長度。

在一些實施態樣中，式L中之

係選自由下列所組成之群組：

、

及

。

在一些實施態樣中，R23係選自由下列所組成之群組：-CH₃ 及-CH₂ CH₃ 。在一些實施態樣中，R23係甲基。在一些實施態樣中，化合物包含胺基酸3之D-差向異構物，該胺基酸3係R23所連接之胺基酸。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係選自由下列所組成之群組的化合物：

其中： R係

R’係H或乙醯基；且異構物係胺基酸3之異構物形式，該胺基酸3係R23所連接之胺基酸。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係下式L之化合物：

其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； ii. 羧酸； iii. 腈； iv. 酯； v. 酮； vi. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基； vii. 經取代或未經取代之芳基； viii. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈，其經選自由酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環及側氧基所組成之群組的取代基取代； ix. 芳族基，其經選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基取代；及 x. (viii)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈與(ix)之芳族基的組合；且 d. R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈，其中R1-R2係至少6個碳原子長度。

在一些實施態樣中，R’係H。

在一些實施態樣中，R1-R2係選自由下列所組成之群組：

、

及

。在一些實施態樣中，R1-R2係經選自由酮、羥基、腈、側氧基、羧酸、酯及1,3-二氧戊環所組成之群組的取代基取代。

在一些實施態樣中，R23係選自由下列所組成之群組：

、

、

、

、

、

、

及

。在一些實施態樣中，R23包含可選地經取代之C₁ -C₃ 烷基。在一些實施態樣中，R23係經胺基取代。在一些實施態樣中，R23係C₁ -C₃ 烷基且化合物包含胺基酸3之D-差向異構物，該胺基酸3係R23所連接之胺基酸。在一些實施態樣中，R23係甲基。在一些實施態樣中，R23係1至6個碳長度之直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，式L中之

係選自由下列所組成之群組：

、

及

。

在一些實施態樣中，R1-R2係

，R23係甲基且化合物係胺基酸3之D-差向異構物，該胺基酸3係R23所連接之胺基酸。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係下式L之化合物：

其中： R’係H或乙醯基； R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； R2係N-取代或未經取代之醯基保護胺；且 R23係甲基或乙基。

在一些實施態樣中，R’係H。

在一些實施態樣中，R2係

；其中R5係介於1與10個碳長度之間的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，R1-R2係選自由下列所組成之群組：

；

；及

。

在一些實施態樣中，R23係甲基。

在一些實施態樣中，式L中之

係

。

在一些實施態樣中，R’、R1-R2及R23及該等化合物之異構物係選自下列：

其中異構物係胺基酸3之異構物形式，該胺基酸3係R23所連接之胺基酸。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係下式L之化合物：

其中： R’係H或乙醯基； R1-R2係選自由下列所組成之群組：

、

及

；且 R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，R’係H。

在一些實施態樣中，R1-R2係

。

在一些實施態樣中，式L中之

係

。

在一些實施態樣中，R23係選自由下列所組成之群組：

、

及

。在一些實施態樣中，R23係

或

。在一些實施態樣中，R23係

。在一些實施態樣中，R23(a)包含可選地經取代之C1-C3烷基；(b)係經胺基取代；(c)係C1-C3-Ala且該化合物包含D-差向異構物；(d)係MeAla；且/或(e)係1至6、1至5、1至4、1至3或2個碳長度之直鏈或支鏈脂族碳鏈。

在一些實施態樣中，環孢素類似物係小分子親環素抑制劑CRV431(顯示於下)，其係環孢素A(CsA)之衍生物，該環孢素A係由十一個胺基酸所組成之中性環肽，其中胺基酸1及3經化學修飾。

CRV431係在臨床發展下用於治療肝臟疾病包括肝纖維化及肝細胞癌之小分子親環素抑制劑。在臨床前研究中，CRV431顯示對抗一些病毒包括B型肝炎、C型肝炎及HIV的抗病毒活性及在一些活體內模型中在肝臟的抗纖維化活性。CRV431可在NASH之實驗模型中減少起源於非酒精性脂肪肝炎(「NASH」)及肝細胞癌腫瘤負荷的肝纖維化。

如本發明包括活體外研究所揭示，CRV431可降低衍生自各種不同器官之纖維母細胞的細胞外基質(ECM)分子、膠原蛋白及纖維黏連蛋白生產。這些細胞類型過度生產膠原蛋白及纖維黏連蛋白造成受損器官的纖維化結疤，且CRV431可降低多種細胞類型的膠原蛋白及纖維黏連蛋白生產。這些結果顯示CsA之衍生物(諸如CRV431)可在各種疾病及各種細胞、組織及器官中發揮抗纖維化活性。

例如，如本發明所述，CRV431可降低衍生自五種細胞類型之纖維母細胞(包括來自自發性肺纖維化(「IPF」)患者之肺纖維母細胞、心臟纖維母細胞、皮膚纖維母細胞、腎膈細胞及LX2肝星狀細胞系)的細胞外基質(ECM)分子、膠原蛋白及纖維黏連蛋白生產。已知IPF係亟需新治療之侵略性纖維化疾病。如本發明所述，CRV431以類似量值劑量依賴性降低所有細胞類型的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白分泌，如藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)所測量。不論細胞是否用促纖維化劑轉變生長因子β(TGFβ)刺激，抑制程度均類似，與對於ECM合成之直接效應一致。CRV431在臨床相關濃度下劑量依賴性降低ECM生產達至多55%，不造成細胞存活性的任何減少。如本發明所揭示，CRV431可用於藉由抑制親環素B而減少ECM生產，且與此觀察一致的是，用小干擾RNA(siRNA)下調親環素B類似地降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白分泌。

纖維化結疤係許多疾病中器官功能異常的主要病理特徵及驅動因子，包括肝硬化、IPF、慢性腎疾病及數種心臟病況。然而，非常少治療可用於消除結疤。大多數治療嘗試藉由靶向纖維母細胞之刺激來減少纖維化，但這些傳訊事件可因患者、纖維化疾病類型或疾病階段而異。在不受任何特定理論的限制下，使用CRV431治療(肝臟以及肝以外器官中之)纖維化疾病係有利的，因為在一些實施態樣中，CRV431之效應不依賴於刺激信號的類型。

在一些實施態樣中，方法可包含向有彼等需要之個體投予一或多種額外治療劑。例如，組成物可包含一或多種額外抗纖維化劑。抗纖維化劑之非限制性實例包括：第II型干擾素受體促效劑(例如干擾素-γ)；吡非尼酮及吡非尼酮類似物；尼達尼布及尼達尼布類似物、抗血管生成劑諸如VEGF拮抗劑、VEGF受體拮抗劑、bFGF拮抗劑、bFGF受體拮抗劑、TGF-β拮抗劑、TGF-β受體拮抗劑；抗發炎劑、IL-1拮抗劑諸如IL-1Ra、血管張力素轉換酶(ACE)抑制劑、血管張力素受體阻斷劑及醛固酮拮抗劑、絲裂黴素C(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、腺苷酸環化酶活化子、β-腎上腺素受體促效劑、類黃酮、肥胖細胞穩定劑、磷酸二酯酶抑制劑及原花青素及彼等之任何組合。

在一些實施態樣中，額外治療劑(例如額外抗纖維化劑)係與包含本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物中之一或多者的組成物共投至個體。在一些實施態樣中，額外治療劑係在投予包含本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物中之一或多者的組成物之前及/或在投予包含本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物中之一或多者的組成物之後向個體投予。套組、組成物及投予方法

在一些實施態樣中，本發明包括套組，其包含：環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物及指示套組之用途的標籤。在一些實施態樣中，標籤指示套組係用於預防個體的纖維化，例如纖維化病症。在一些實施態樣中，標籤指示套組係用於治療個體的纖維化，例如纖維化病症。在一些實施態樣中，標籤指示套組係用於減少個體的纖維化的量。在一些實施態樣中，標籤指示套組係用於延緩個體的纖維化的開始。在一些實施態樣中，標籤指示套組係用於減少或抑制個體的纖維化形成。在一些實施態樣中，標籤指示套組係用於反轉個體的纖維化。

在一些實施態樣中，本發明亦提供用於預防纖維化(例如纖維化病症)、治療纖維化(例如纖維化病症)、減少纖維化的量、延緩纖維化的開始、減少或抑制纖維化形成、反轉纖維化或彼等之任何組合的組成物，其包含：本發明揭示之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物中之一或多者。

纖維化可為影響心臟、肝臟、肺、骨骼肌、腎、眼、血管、皮膚、腦、骨髓、胃腸道、腹膜、血管分布或彼等之任何組合的纖維化。在一些實施態樣中，纖維化係非肝纖維化。纖維化病症可為本發明揭示之纖維化病症中任一者，包括但不限於：視網膜纖維化、角膜纖維化、結膜纖維化、小樑網纖維化、腎纖維化、肺纖維化、自發性肺纖維化(IPF)、尋常性間質性肺炎(UIP)、間質性肺疾病(ILD)、隱源性致纖維性肺泡炎(CFA)、阻塞性細支氣管炎、支氣管擴張症、肝硬化、肝纖維化、纖維化血管疾病、囊腫纖維化、肺纖維化、自發性肺纖維化、肌肉骨骼纖維化、腎纖維化疾病、與HIV相關聯之淋巴結纖維化、發炎性肺纖維化、胰纖維化、心臟纖維化、血管纖維化、心肌纖維化或彼等之組合。

在一些實施態樣中，組成物係穩定自我微乳化藥物遞送系統(「SMEDDS」)調配物，其包含環孢素A之衍生物或類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物。組成物可例如使環孢素A之衍生物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物具有良好溶解度且使在人類具有顯著血液暴露。在一些實施態樣中，組成物進一步包含聚氧乙烯蓖麻油(亦稱為聚氧乙烯40氫化蓖麻油、聚乙二醇甘油羥基硬脂酸酯及PEG-40氫化蓖麻油，諸如Cremophor® RH40及Kolliphor® RH40)。在一些實施態樣中，組成物包含乙醇。在一些實施態樣中，組成物包含二伸乙甘醇單乙基醚(亦稱為2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇，諸如Transcutol^® )。在一些實施態樣中，組成物包含丙二醇(PG)。在一些實施態樣中，組成物包含單亞油酸甘油酯，諸如Maisine^® CC。在一些實施態樣中，組成物包含維生素E。包含環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽之各種醫藥組成物/藥物遞送系統(例如SMEDDS調配物)已於PCT專利申請案公開號WO 2020/112562中描述(其內容全文以引用方式併入本文中)。

在一些實施態樣中，系統包含1/1/5/5/2.4/4或1/1.5/2.5/5/2.4/5重量比之維生素E、Maisine^® CC、丙二醇、Transcutol^® 、乙醇及Cremophor^® RH40。系統可例如包含濃度約10 mg/mL至約90 mg/mL之環孢素類似物(例如CRV431)，包括10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL、60 mg/mL、70 mg/mL、80 mg/mL、90 mg/mL、介於這些值中任二者之間的範圍或在10 mg/mL至90 mg/mL內之任何值。在一些實施態樣中，系統包含濃度約90 mg/mL之環孢素類似物(例如CRV431)。在一些實施態樣中，系統包含濃度為(或約為)70 mg/mL之環孢素類似物(例如CRV431)。

組成物可為例如醫藥組成物，其包含環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物及一或多種醫藥上可接受之賦形劑。在一些實施態樣中，組成物係藉由靜脈內投予、鼻投予、肺投予、口服投予或腸胃外投予向個體投予。在一些實施態樣中，組成物係呈粉末、丸劑、錠劑、微錠劑、微粒劑(pellet)、細微粒劑(micropellet)、膠囊、含有微錠劑之膠囊、液體、氣溶膠、懸浮液或奈米粒子之形式。在一些實施態樣中，組成物係向個體投予一天一次、二次或三次。在一些實施態樣中，組成物係在緊急狀況下(例如手術進行中)向個體投予一次或二次。在一些實施態樣中，組成物係在至少一天、至少二天、至少三天、至少一週或超過一週的時程內向個體投予。在一些實施態樣中，組成物係以10 mg至250 mg之環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的有效每日劑量向個體投予。

環孢素類似物(例如CRV431)之治療有效量及投予頻率及治療長度可取決於各種因子，包括增生性疾病諸如癌症的性質及嚴重性、環孢素類似物(例如CRV431)的效力、投予模式、個體的年齡、體重、整體健康、性別及飲食及個體對治療的反應，且可由主治醫師判定。在一些實施態樣中，本發明所述之用於治療或預防增生性疾病諸如癌症或用於減少或抑制增生性疾病之一或多個症狀的環孢素類似物(例如CRV431)之治療有效量係約0.1至200 mg、0.1至150 mg、0.1至100 mg、0.1至50 mg、0.1至30 mg、0.5至20 mg、0.5至10 mg或1至10 mg(例如每天或每劑量)或由主治醫師視為適當者，其可以單一劑量或分開劑量投予。在一些實施態樣中，本發明所述之用於治療或預防增生性疾病諸如癌症或用於減少或抑制增生性疾病之一或多個症狀的環孢素類似物(例如CRV431)之治療有效劑量(例如每天或每劑量)係約0.1至1 mg(例如約0.1 mg、0.5 mg或1 mg)、約1至5 mg(例如約1 mg、2 mg、3 mg、4 mg或5 mg)、約5至10 mg(例如約5 mg、6 mg、7 mg、8 mg、9 mg或10 mg)、約10至20 mg(例如約10 mg、15 mg或20 mg)、約20至30 mg(例如約20 mg、25 mg或30 mg)、約30至40 mg(例如約30 mg、35 mg或40 mg)、約40至50 mg(例如約40 mg、45 mg或50 mg)、約50至100 mg(例如約50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mg或100 mg)、約100至150 mg(例如約100 mg、125 mg或150 mg)或約150至200 mg(例如約150 mg、175 mg或200 mg)。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)之治療有效劑量係投予一天一或多次(例如二、三次或超過三次)、或每二或三天一次、或一週一次、二次或三次、或由主治醫師視為適當者。在一些實施態樣中，組成物包含治療或預防有效量的環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物。

環孢素類似物(例如CRV431)亦可以不規則方式給藥。例如，環孢素類似物(例如CRV431)可在一段30分鐘、一小時、二小時或超過二小時的期間以不規則方式投予一次、二次或三次。另外，環孢素類似物(例如CRV431)可在需要時(視需要)服用。例如，環孢素類似物(例如CRV431)可以不論規則或不規則方式投予1、2、3、4、5次或超過5次，直到增生性疾病/病況(例如癌症)改善。一旦增生性疾病/病況(例如癌症)達成緩解，可選地可中止環孢素類似物(例如CRV431)之投藥。如果疾病病症/病況回復，則可恢復環孢素類似物(例如CRV431)以不論規則或不規則方式之投予。環孢素類似物(例如CRV431)之適當劑量、投藥頻率及治療長度可由主治醫師判定。

環孢素類似物(例如CRV431)亦可預防性使用以治療或預防增生性疾病諸如癌症、或預防或減少增生性疾病(例如纖維化)之一或多個症狀、或減少或抑制增生性疾病(例如纖維化)之一或多個症狀的開始。環孢素類似物(例如CRV431)的預防有效量可為本發明所述之環孢素類似物(例如CRV431)的任何治療有效量。

環孢素類似物(例如CRV431)可經由任何合適途徑投予。環孢素類似物(例如CRV431)之潛在投予途徑包括但不限於口服、腸胃外(包括肌肉內、皮下、皮內、血管內、靜脈內、動脈內、髓內及鞘內)、腔內、腹膜內及局部(包括皮膚/皮上、穿皮、黏膜、穿黏膜、鼻內[例如藉由鼻噴霧或滴劑]、眼內[例如藉由眼滴劑]、肺[例如藉由口或鼻吸入]、頰側、舌下、直腸及陰道)。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係口服投予(例如作為膠囊或錠劑，可選地具有腸溶衣)。在其他實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係腸胃外投予(例如靜脈內、皮下或皮內)。在進一步實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係局部投予(例如皮膚、皮上、穿皮、黏膜、穿黏膜、頰側或舌下)。

在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係在無食物下投予。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係在進餐之前或之後至少約1或2小時投予。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係在晚餐之後至少約2小時投予。環孢素類似物(例如CRV431)亦可實質上與食物同時服用(例如進餐之前或之後約0.5、1或2小時內或隨餐)。

在一些需要更快速建立環孢素類似物(例如CRV431)之治療性水準之實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係依照投予起始劑量及隨後(i)一或多個額外起始劑量，接著一或多個治療有效維持劑量，或(ii)一或多個治療有效維持劑量而無額外起始劑量之投藥時程由主治醫師視為適當者投予。藥物的起始劑量一般大於後續維持劑量(例如大於約1.5、2、3、4或5倍)且設計為更快速地建立藥物之治療性水準。一或多個治療有效維持劑量可為本發明所述之任何治療有效劑量。在一些實施態樣中，起始劑量高於維持劑量約三倍。在一些實施態樣中，投予環孢素類似物(例如CRV431)之起始劑量，隨後在適當時間之後(例如約12或24小時之後)及之後的療法持續期間投予環孢素類似物(例如CRV431)之維持劑量；例如，在第1天投予環孢素類似物(例如CRV431)之起始劑量及在第2天及之後的療法持續期間投予維持劑量。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係以第1天約1.5、3、15或30 mg(例如3×約0.5、1、5或10 mg)口服(例如作為錠劑)之起始劑量投予，隨後以每日一次、可選地睡前約0.5、1、5或10 mg口服(例如作為錠劑)之維持劑量投予至少約2週、1個月(4週)、6週、2個月、10週、3個月、4個月、5個月、6個月、1年、1.5年、2年、3年或超過3年(例如至少約6週、2個月、3個月或6個月)。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係以第1天約15 mg(例如3×約5 mg)口服(例如作為錠劑)之起始劑量投予，隨後以每日一次、可選地睡前約5 mg口服(例如作為錠劑)之維持劑量投予至少約2週、1個月、6週、2個月、3個月、6個月、1年、1.5年、2年、3年或超過3年(例如至少約6週、2個月、3個月或6個月)。

在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)之第一起始劑量係在第1天投予，第二起始劑量係在第2天投予且維持劑量係在第3天及之後的療法持續期間投予。在一些實施態樣中，第一起始劑量高於維持劑量約三倍，且第二起始劑量高於維持劑量約二倍。

如本文所揭示，治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))可經調配用於以醫藥組成物投予，該醫藥組成物包含生理上可接受之表面活性劑、載劑、稀釋劑、賦形劑、順滑劑、懸浮劑、膜形成物質、包覆助劑或彼等之組合。在一些實施態樣中，治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))係經調配用於與醫藥上可接受之載劑或稀釋劑一起投予。治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))可如同醫藥領域所例行之用標準醫藥上可接受之載劑及/或賦形劑調配為藥物。調配物之確切性質將取決於數種因子，包括所欲投予途徑。在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係經調配用於口服、靜脈內、胃內、血管內或腹膜內投予。可使用標準醫藥調配技術，諸如該些揭示於Remington's The Science及Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins(2005)者，其全文以引用方式併入本文中。

用語「醫藥上可接受之載劑」或「醫藥上可接受之賦形劑」包括任何及所有溶劑、分散介質、包覆劑、抗菌劑、抗真菌劑、等滲劑、吸收延緩劑及類似物。該等用於醫藥活性物質之介質及劑之用途係該領域所廣為周知。除非任何習用介質或劑與該活性成分不相容，彼於治療組成物中之用途係經考慮。此外，可包括諸如所屬技術領域中經常使用之各種佐劑。醫藥組成物中包括各種組分之考慮係描述於例如Gilman et al.(Eds.)(1990); Goodman and Gilman' s: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Pergamon Press(其全文以引用方式併入本文中)。

可作用為醫藥上可接受之載劑或其組分之物質的一些實例係糖諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物諸如鈉羧甲基纖維素、粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；固態潤滑劑諸如硬脂酸及硬脂酸鎂；硫酸鈣；植物油諸如花生油、棉花籽油、芝麻油、橄欖油、玉米油及可可豆油；多元醇諸如丙二醇、甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；海藻酸；乳化劑諸如TWEENS；潤濕劑諸如月桂基硫酸鈉；著色劑；調味劑；製錠劑、穩定劑；抗氧化劑；保存劑；無致熱原水；等張鹽水；及磷酸鹽緩衝溶液。

與主題治療劑搭配使用之醫藥上可接受之載劑的選擇基本上係由組成物欲投予之方式決定。

本文所述之組成物較佳地係以單位劑量形式提供。如本發明所使用，「單位劑量形式」係含有一定量之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))的組成物，該一定量適用於根據優良醫學實務以單一劑量向動物較佳地哺乳動物個體投予。然而，單一或單位劑量形式製劑不表示該劑型係每天投予一次或每療程投予一次。該等劑型係考慮投予每天一次、二次、三次或超過三次，且可在一段時間(例如約30分鐘至約2至6小時)作為輸注投予或作為連續輸注投予，且可在療程期間給予超過一次，但不特別排除單一投予。所屬技術領域中具有通常知識者將認可調配物不特別考慮整個療程，且此決定係由所屬治療領域中具有通常知識者做出而非根據調配物決定。

如上述可用之組成物可呈用於多種投予途徑(例如口服、鼻、直腸、局部(包括穿皮)、眼、大腦內、顱內、鞘內、動脈內、靜脈內、肌肉內或其他腸胃外投予途徑)之多種合適形式中之任何者。所屬技術領域中具有通常知識者將理解口服及鼻組成物包括藉由吸入投予且使用可用方法製成之組成物。取決於所欲之特定投予途徑，可使用所屬技術領域中廣知之多種醫藥上可接受之載劑。醫藥上可接受之載劑包括例如固體或液體填料、稀釋劑、增溶劑、界面活性劑及包封物質。可包括可選的醫藥活性材料，該醫藥活性材料實質上不干擾治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))之抑制活性。與治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))搭配採用之載劑的量足以提供實用數量的材料以投予每單位劑量的治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))。用於製造本文所述之方法中可用之劑型的技術及組成物係描述於下列參考文獻(所有皆以引用方式併入本文中)：Modern Pharmaceutics, 4th Ed., Chapters 9 and 10(Banker & Rhodes, editors, 2002)；Lieberman et αί,, Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets(1989)及Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 8th Edition (2004)。

可使用各種口服劑型，包括諸如錠劑、膠囊及顆粒劑之固體形式。錠劑可為經壓錠、研製錠劑、腸溶衣錠、糖衣錠、膜衣錠或多重壓錠，其含有合適黏合劑、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、調味劑、誘導流動劑及熔化劑。液體口服劑型包括水溶液、乳液、懸浮液、由非起泡顆粒劑重構的溶液及/或懸浮液及由起泡顆粒劑重構的起泡製劑，其含有合適溶劑、保存劑、乳化劑、懸浮劑、稀釋劑、甜味劑、熔化劑、著色劑及調味劑。

適用於製備經口投予之單位劑型的醫藥上可接受之載劑係所屬技術領域中廣知。錠劑一般包含習知醫藥上可相容之佐劑作為惰性稀釋劑(諸如碳酸鈣、碳酸鈉、甘露醇、乳糖及纖維素)；黏合劑(諸如澱粉、明膠及蔗糖)；崩解劑(諸如澱粉、海藻酸及交聯羧甲纖維素)；潤滑劑(諸如硬脂酸鎂、硬脂酸及滑石)。助流劑(諸如二氧化矽)可用於改善粉末混合物之流動特徵。可添加著色劑(諸如FD&C染料)用於外觀。甜味劑及調味劑(諸如阿司巴丹、糖精、薄荷腦、薄荷及水果風味)係可咀嚼錠劑之可用佐劑。膠囊一般包含以上揭示之一或多種固體稀釋劑。載劑組分的選擇取決於次要考慮如味道、成本及貯存穩定性，其並非關鍵且可由所屬技術領域中具有通常知識者輕易選擇。

經口組成物亦包括液體溶液、乳液、懸浮液及類似物。適用於製備此類組成物之醫藥上可接受之載劑係所屬技術領域中廣知的。用於漿料、酏劑、乳液及懸浮液之載劑的典型組分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液體蔗糖、山梨醇及水。以懸浮液而言，典型懸浮劑包括鈉羧甲基纖維素AVICEL RC-591、黃蓍膠及藻酸鈉；典型潤濕劑包括卵磷脂及聚山梨酯80；及典型保存劑包括對羥苯甲酸甲酯及苯甲酸鈉。經口液體組成物亦可含有一或多種組分，諸如以上揭示之甜味劑、調味劑及著色劑。

可用於達成全身性遞送主題治療劑之其他組成物包括舌下、頰側及鼻劑型。此類組成物一般包含一或多種可溶性填料物質諸如蔗糖、山梨醇及甘露醇；及黏合劑諸如阿拉伯膠、微晶型纖維素、羧甲基纖維素及羥丙基甲基纖維素。亦可包括以上揭示之助流劑、潤滑劑、甜味劑、著色劑、抗氧化劑及調味劑。

以局部用途而言，採用含有本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))之乳膏、軟膏、凝膠、溶液或懸浮液等。局部調配物通常可包含醫藥載劑、共溶劑、乳化劑、穿透增強劑、保存系統及軟化劑。

以靜脈內投予而言，本文所述之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))及組成物可溶解或分散於醫藥上可接受之稀釋劑諸如鹽水或右旋糖溶液中。可包括合適賦形劑以達成所欲pH，包括但不限於NaOH、碳酸鈉、乙酸鈉、HC1及檸檬酸。在各種實施態樣中，最終組成物之pH從2至8不等，或較佳地4至7。抗氧化賦形劑可包括亞硫酸氫鈉、丙酮亞硫酸氫鈉、甲醛鈉、烴硫酸鹽、硫脲及EDTA。見於最終靜脈內組成物中之合適賦形劑的其他非限制性實例包括磷酸鈉或磷酸鉀、檸檬酸、酒石酸、明膠及碳水化合物諸如右旋糖、甘露醇及右旋糖苷。進一步可接受之賦形劑係描述於Powell, et al., Compendium of Excipients for Parenteral Formulations, PDA J Pharm Sci and Tech 1998, 52 238-31 1及Nema et al., Excipients and Their Role in Approved Injectable Products: Current Usage and Future Directions, PDA J Pharm Sci and Tech 2011, 65 287-332(兩者全文皆以引用方式併入本文中)。亦可包括抗微生物劑以達成制菌或制真菌溶液，包括但不限於硝酸苯汞、硫柳汞、苄索氯銨、氯化苄烷銨、苯酚、甲酚及氯丁醇。

用於靜脈內投予之組成物可以一或多種固體形式提供給醫護人員，其在投予之前不久經合適稀釋劑諸如無菌水、鹽水或右旋糖液重構。在其他實施態樣中，組成物係以即可腸胃外投予之溶液提供。在仍其他實施態樣中，組成物係以在投予之前經進一步稀釋之溶液提供。在包括投予本文所述之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))與另一劑之組合的實施態樣中，該組合可作為混合物提供給醫護人員，或醫護人員可在投予之前將兩劑混合，或兩劑可分開投予。

在非人動物研究中，潛在產品之應用係以較高劑量水準開始，且劑量降低直到不再達成所欲效應或不良反應消失。劑量可具有廣泛範圍，視所欲效應及治療適應症而定。一般而言，劑量可介於約0.1 mg/kg與4000 mg/kg體重之間，較佳地介於約80 mg/kg與1600 mg/kg體重之間。可替代地，如所屬技術領域中具有通常知識者所理解，劑量可基於並根據患者之體表面積計算。

取決於所欲治療之病況的嚴重性及反應性，投藥亦可為單一投予緩釋組成物，且治療療程持續數天至數週或直到達成治癒或達成疾病狀態的減輕。所投予之組成物的量當然將取決於許多因子，包括所欲治療之個體、疾病的嚴重性、投予方式、處方醫師的判斷。本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))或治療劑之組合可以每天0, 1 mg/kg至4000 mg/kg患者體重之劑量口服或經由注射投予。成人之劑量範圍通常自1 g至100 g/天。以離散單位提供之錠劑或其他呈現形式可方便地含有一定量之本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))或治療劑之組合，其在該劑量下或作為同一者之多個係有效的，例如含有1 g至60 g之單位(例如約5 g至20 g、約10 g至50 g、約20 g至40 g或約25 g至35 g)。向患者投予之治療劑的精確量將是主治醫師的責任。然而，所採用之劑量將取決於一些因子，包括患者的年齡及性別、所欲治療之精確病症及其嚴重性。此外，投予途徑可視病況及其嚴重性而異。取決於此類參數，治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))之典型劑量可為每kg體重0.02 g至1.25 g，例如每kg體重0.1 g至0.5 g。在一些實施態樣中，治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))之劑量可為1 g至100 g，例如10 g至80 g、15 g至60 g、20 g至40 g或25 g至35 g。醫師將能夠判定任何特定個體需要的治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))劑量。

本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))或治療劑之組合的醫藥組成物之確切調配物、投予途徑及劑量可由個別醫師視患者病況選擇。一般而言，向患者投予之組成物的劑量範圍可為約0.1至約4000 mg/kg患者體重。劑量可為視患者需要在一或多天療程中所給予之單一個劑量或一系列二或更多個劑量。在已針對至少一些病況建立治療劑之人類劑量的情況下，本發明將使用該些相同劑量或介於所建立人類劑量之約0.1%與約5000%之間、更佳的介於約25%與約1000%之間的劑量。若未建立人類劑量，如新開發醫藥化合物之情況下，可自衍生自如動物毒性研究及療效研究這類體外或體內研究之ED₅₀ 或ID₅₀ 值或其他適當值推導出合適人類劑量。

應注意，主治醫師會瞭解如何及何時因毒性或器官功能異常而終止、中斷或調整投予。相反地，主治醫師亦瞭解若臨床反應不充足(排除毒性)，則將治療調整至較高水準。管理所關注病症時投予劑量之量值將隨所治療病況之嚴重性及投予途徑而異。病況之嚴重程度可例如部分地依據標準預後評估方法來評估。另外，劑量及可能的給藥頻率亦將根據個別患者之年齡、體重及反應而異。與以上討論之計畫類似的計畫可用於獸醫學。

雖然確切劑量將根據每種藥物判定，但在大多數情況下，可作出關於劑量的一些通則。在投予醫藥上可接受的鹽之情況下，劑量可以游離鹼形式計算。在一些實施態樣中，組成物係每天投予1至4次。替代地，本發明揭示之組成物可藉由連續靜脈輸注例如以各活性成分至多每天100 g的劑量投予。如所屬技術領域中具有通常知識者所理解，在某些情形下，可能需要以超過或甚至遠超過上文所述之較佳劑量範圍之量投予本發明揭示之組成物，以便有效且積極地治療特別是侵襲性疾病或感染。在一些實施態樣中，本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))或治療劑之組合將投予一段連續療法的期間，例如達一週或超過一週、或數月或數年。

在一些實施態樣中，本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))或治療劑之組合的投藥方案係投予一段時間，該段時間可為例如至少約1週至至少約4週、至少約4週至至少約8週、至少約4週至至少約12週、至少約4週至至少約16週或超過16週。本發明揭示之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))或治療劑之組合的投藥方案可為投予一天三次、一天兩次、每天一次、每隔一天一次、一週三次、每隔一週一次、每月三次、每月一次、實質上連續或連續。

環孢素類似物(例如CRV431)可單獨投予或呈組成物(例如醫藥組成物)之形式。在一些實施態樣中，醫藥組成物包含環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、晶籠化合物、多形體、前藥或代謝物及一或多種醫藥上可接受之載劑或賦形劑。組成物可選地可含有如本文所述之一或多種額外治療劑。醫藥組成物含有治療有效量的治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))及一或多種醫藥上可接受之載劑或賦形劑，且係經調配用於治療性用途向個體投予。以醫藥組成物之內容物的目的而言，用語「治療劑(therapeutic agent)」、「活性成分(active ingredient)」、「活性劑(active agent)」及「藥物(drug)」涵蓋前藥。

醫藥組成物含有呈實質上純的形式之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))。在一些實施態樣中，治療劑的純度係至少約95%、96%、97%、98%或99%。在一些實施態樣中，治療劑的純度係至少約98%或99%。此外，醫藥組成物係實質上不含污染物或雜質。在一些實施態樣中，醫藥組成物中除殘餘溶劑以外之污染物或雜質的水準相對於預期活性及非活性成分之合併重量係不超過約5%、4%、3%、2%或1%。在一些實施態樣中，醫藥組成物中除殘餘溶劑以外之污染物或雜質的水準相對於預期活性及非活性成分之合併重量係不超過約2%或1%。如例如聯邦食品藥物及化妝品法§501(a)(2)(B)及國際醫藥法規協和會Q7準則所建議或規範，醫藥組成物通常根據現行優良製造規範(GMP)製備。

醫藥上可接受之載劑及賦形劑包括醫藥上可接受之材料、媒劑及物質。賦形劑之非限制性實例包括液體及固體填料、稀釋劑、黏合劑、潤滑劑、助流劑、助溶劑、界面活性劑、分散劑、崩解劑、乳化劑、潤濕劑、懸浮劑、增稠劑、溶劑、等張劑、緩衝劑、pH調整劑、穩定劑、保存劑、抗氧化劑、抗微生物劑、抗菌劑、抗真菌劑、吸收延緩劑、甜味劑、調味劑、著色劑、佐劑、包封材料及包覆材料。此類賦形劑於醫藥調配物之用途係所屬技術領域中已知。例如，習知媒劑及載劑包括但不限於油(例如植物油，諸如芝麻油)、水性溶劑(例如鹽水、磷酸鹽緩衝鹽水[PBS]及等張溶液[例如Ringer氏溶液])及溶劑(例如二甲亞碸[DMSO]及醇[例如乙醇、甘油及丙二醇])。除了與活性成分不相容之任何習知載劑或賦形劑以外，本揭露涵蓋習知載劑及賦形劑於含有治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))之調配物中的用途。見例如Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins(Philadelphia, Pennsylvania [2005])；Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5th Ed., Rowe et al., Eds., The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association(2005)；Handbook of Pharmaceutical Additives, 3rd Ed., Ash and Ash, Eds., Gower Publishing Co.(2007)；及Pharmaceutical Preformulation and Formulation, Gibson, Ed., CRC Press(Boca Raton, Florida, 2004)。

適當調配物可取決於各種因子，諸如選擇之投予模式。包含環孢素類似物(例如CRV431)之醫藥組成物的潛在投予模式包括但不限於口服、腸胃外(包括肌肉內、皮下、皮內、血管內、靜脈內、動脈內、腹膜內、髓內、鞘內及局部)、腔內及局部(包括皮膚/皮上、穿皮、黏膜、穿黏膜、鼻內[例如藉由鼻噴霧或滴劑]、肺[例如藉由口或鼻吸入]、頰側、舌下、直腸[例如藉由栓劑]及陰道[例如藉由栓劑])。

作為實例，適用於口服投予之環孢素類似物(例如CRV431)的調配物可呈現為例如食團；錠劑、膠囊、丸劑、扁囊劑或菱形錠；粉末或顆粒劑；半固體、舐劑、糊劑或凝膠；於水性液體或/及非水性液體中之溶液或懸浮液；或油在水中液體乳液或水在油中液體乳液。

錠劑可含有環孢素類似物(例如CRV431)摻合例如填料或惰性稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣、乳糖、甘露醇或微晶型纖維素)、結合劑(例如澱粉、明膠、阿拉伯膠、海藻酸或彼等之鹽或微晶型纖維素)、潤滑劑(例如硬脂酸、硬脂酸鎂、滑石或二氧化矽)及崩散劑(例如交聚維酮、交聯羧甲纖維素鈉或矽酸膠)及可選地界面活性劑(例如月桂基硫酸鈉)。錠劑可為未經包覆或可包覆例如保護活性成分免於胃之酸性環境之腸溶衣或延緩活性成分在胃腸道崩解及吸收之材料，且藉此在較長的時間期間提供持續作用。在一些實施態樣中，錠劑包含環孢素類似物(例如CRV431)、甘露醇、微晶型纖維素、硬脂酸鎂、二氧化矽、交聯羧甲纖維素鈉及月桂基硫酸鈉及可選地單水乳糖，且錠劑可選地經膜(例如Opadry^® )包覆。

推入式(Push-fit)膠囊或二件式硬明膠膠囊可含有環孢素類似物(例如CRV431)摻合例如填料或惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣、白陶土或乳糖)、黏合劑(例如澱粉)、助流劑或潤滑劑(例如滑石或硬脂酸鎂)及崩解劑(例如交聚維酮)及可選地穩定劑或/及保存劑。以軟膠囊或單件式明膠膠囊而言，環孢素類似物(例如CRV431)可溶解或懸浮於合適液體(例如液體聚乙二醇或油性介質諸如脂肪油、花生油、橄欖油或液體石蠟)中，且液體填充膠囊可含有一或多種其他液體賦形劑或/及半固體賦形劑諸如穩定劑或/及兩親性劑(例如甘油、丙二醇或山梨醇之脂肪酸酯)。

用於口服投予之組成物亦可經調配為在水性液體或/及非水性液體中之溶液或懸浮液或為油在水中液體乳液或水在油中液體乳液。環孢素類似物(例如CRV431)之可分散粉末或顆粒劑可與水性液體、有機溶劑或/及油之任何合適組合及任何合適賦形劑(例如分散劑、潤濕劑、懸浮劑、乳化劑或/及保存劑之任何組合)混合以形成溶液、懸浮液或乳液。

環孢素類似物(例如CRV431)亦可經調配用於藉由注射或輸注之腸胃外投予以規避胃腸道吸收及首渡效應。代表性腸胃外途徑係靜脈內。

靜脈內投予之額外優點包括直接投予治療劑至全身性循環以達成快速全身性效應及若有需要連續或/及以大體積投予劑之能力。用於注射或輸注之可呈例如在油性或水性媒劑中之溶液、懸浮液或乳液之形式，且可含有賦形劑諸如懸浮劑、分散劑或/及穩定劑。例如，水性或非水性(例如油性)無菌注射溶液可含有環孢素類似物(例如CRV431)連同賦形劑諸如抗氧化劑、緩衝劑、制菌劑及使調配物與個體血液等張之溶質。水性或非水性無菌懸浮液可含有環孢素類似物(例如CRV431)連同賦形劑諸如懸浮劑及增稠劑及可選地穩定劑及增加環孢素類似物(例如CRV431)之溶解度之劑以允許製備更濃縮溶液或懸浮液。作為另一實例，用於注射或輸注(例如皮下或靜脈內)之無菌水溶液可含有環孢素類似物(例如CRV431)、NaCl、緩衝劑(例如檸檬酸鈉)、保存劑(例如間甲酚)及可選地鹼(例如NaOH)或/及酸(例如HC1)以調整pH。

以局部投予而言，環孢素類似物(例如CRV431)可經調配為例如頰側或舌下錠劑或丸劑。頰側或舌下錠劑或丸劑可避免首渡效應且規避胃腸道吸收。頰側或舌下錠劑或丸劑可設計為提供更快釋放環孢素類似物(例如CRV431)以更快速攝取至全身性循環。除了治療有效量的環孢素類似物(例如CRV431)之外，頰側或舌下錠劑或丸劑可含有合適賦形劑，包括但不限於填料及稀釋劑(例如甘露醇及山梨醇)、結合劑(例如碳酸鈉)、潤濕劑(例如碳酸鈉)、崩解劑(例如交聚維酮及交聯羧甲纖維素鈉)、潤滑劑(例如二氧化矽[包括膠體二氧化矽]及硬脂醯反丁烯二酸鈉)、穩定劑(例如碳酸氫鈉)、調味劑(例如綠薄荷風味)、甜味劑(例如蔗糖素)及著色劑(例如黃色氧化鐵)之任何組合。

以局部投予而言，環孢素類似物(例如CRV431)亦可經調配用於鼻內投予。鼻黏膜提供大的表面積、有孔內皮、高度血管上皮下層及高吸收速率，且因此允許高生體可用率。再者，鼻內投予避免首渡效應且可導入顯著濃度的環孢素類似物(例如CRV431)至中樞神經系統，允許環孢素類似物(例如CRV431)經由延髓咳嗽中樞的孤束核(迷走輸入神經終止處)阻斷中樞咳嗽反射。鼻內溶液或懸浮配方可包含環孢素類似物(例如CRV431)連同賦形劑諸如溶解度增強劑(例如丙二醇)、保濕劑(例如甘露醇或山梨醇)、緩衝劑及水，及可選地保存劑(例如氯化苄烷銨)、黏膜黏附劑(例如羥乙基纖維素)或/及穿透增強劑。在一些實施態樣中，鼻噴霧調配物包含環孢素類似物(例如CRV431)、微晶型纖維素、羧甲基纖維素鈉、右旋糖及水及可選地酸(例如HC1)以調整pH。鼻內溶液或懸浮配方可藉由任何合適手段投予至鼻腔，該手段包括但不限於滴管、吸量管或使用例如計量霧化噴霧泵之噴霧。額外局部投予模式係肺，包括藉由口吸入及鼻吸入。

在一些實施態樣中，環孢素類似物(例如CRV431)係自持續釋放組成物遞送。如本發明所使用，用語「持續釋放組成物(sustained-release composition)」涵蓋持續釋放、延長釋放、緩釋型、緩慢釋放及控制釋放組成物、系統及裝置。使用持續釋放組成物可具有優點，諸如改善在時間期間內遞送至目標位置之藥物或其活性代謝物的量輪廓，包括在延長時間期間內遞送治療有效量的藥物或其活性代謝物。在一些實施態樣中，持續釋放組成物在至少約1天、2天、3天、1週、2週、3週、1個月、2個月、3個月或超過3個月的期間內遞送環孢素類似物(例如CRV431)。在一些實施態樣中，持續釋放組成物係藥物包封系統，諸如由例如可生物降解聚合物或/及水凝膠製成之奈米粒子、微粒或膠囊。在一些實施態樣中，持續釋放組成物包含水凝膠。可構成水凝膠之聚合物的非限制性實例可包括聚乙烯醇、丙烯酸酯聚合物(例如聚丙烯酸鈉)及其他具有相對大量親水基(例如羥基或/及羧酸酯基團)之均聚物及共聚物。在一些實施態樣中，持續釋放藥物包封系統包含膜封閉貯槽，其中貯槽含有藥物且膜係藥物可通透。此類藥物遞送系統可呈例如穿皮貼布之形式。

在一些實施態樣中，持續釋放組成物係口服劑型，諸如錠劑或膠囊。例如，藥物可包埋在不溶的有孔基質中，以使溶解藥物必須脫離基質才可經由胃腸道吸收。替代地，藥物可包埋在腫脹以形成凝膠的基質中，而藥物經由凝膠離開。持續釋放亦可藉由單一層或多層滲透控制釋放口服遞送系統(OROS)達成。OROS係一種錠劑，其具有半通透外膜及其中之一或多個小型雷射鑽孔。當錠劑通過身體時，水經由滲透通過半通透膜吸收，且所產生之滲透壓將藥物推出錠劑的孔且進入胃腸道中而可在該處吸收。

持續釋放組成物可經調配為聚合奈米粒子或微粒，其中聚合粒子可例如藉由吸入或注射或自植入物遞送。在一些實施態樣中，聚合植入物或聚合奈米粒子或微粒係由可生物降解聚合物構成。在一些實施態樣中，可生物降解聚合物包含乳酸或/及甘醇酸[例如基於L-乳酸之共聚物，諸如聚(L-乳交酯-共-乙交酯)或聚(L-乳酸-共-D,L-2-羥基辛酸)]。例如，由聚乳酸或/及聚乙醇酸構成之可生物降解聚合微球可作為持續釋放肺藥物遞送系統。可選擇聚合植入物或聚合奈米粒子或微粒之可生物降解聚合物以使聚合物在大約治療期預期結束時實質上完全降解，且使聚合物的降解副產物如聚合物係可生物相容。

以環孢素類似物(例如CRV431)之延緩或持續釋放而言，組成物亦可經調配為可例如肌肉內或皮下植入或注射入個體之貯劑。貯劑調配物可設計為在較長時間期間內例如在至少約1週、2週、3週、1個月、6週、2個月、3個月或超過3個月的期間內遞送環孢素類似物(例如CRV431)。例如，環孢素類似物(例如CRV431)可與聚合材料(例如聚乙二醇(PEG)、聚乳酸(PLA)或聚乙醇酸(PGA)或彼等之共聚物(例如PLGA))、疏水性材料(例如作為油中之乳液)或/及離子交換樹脂調配，或作為略溶性衍生物(例如略溶性鹽)。作為例示實例，環孢素類似物(例如CRV431)可併入或包埋於由PLGA構成之持續釋放微粒且經調配為每月貯劑。

環孢素類似物(例如CRV431)亦可含有或分散於基質材料中。基質材料可包含聚合物(例如乙烯-乙酸乙烯酯)且藉由控制化合物自例如貯槽之溶解或/及擴散來控制化合物之釋放，且當含有於貯槽中時可增強化合物之穩定性。此類釋放系統可設計為持續釋放系統，可組態為例如穿皮或穿黏膜貼布，且可含有可加速化合物釋放之賦形劑諸如遇水膨脹性材料(例如水凝膠)，其協助將化合物推出貯槽。

釋放系統可在需要具時間變異之血漿水準時提供按時調節釋放輪廓(例如脈衝式釋放)，或需要恆定血漿水準時提供更連續或一致的釋放輪廓。脈衝式釋放可自個別貯槽或複數個貯槽達成。例如，當各貯槽提供單一脈衝時，多個脈衝(「脈衝式」釋放)係藉由按時錯開來自多個貯槽之各者的單一脈衝釋放達成。

此外，包含環孢素類似物(例如CRV431)之醫藥組成物可調配為例如脂質體、微胞(例如該些由可生物降解天然或/及合成聚合物構成者，諸如乳糖體)、微球、微粒或奈米粒子，不論是否設計用於持續釋放。

醫藥組成物可以所屬技術領域中已知之任何合適方式製造，例如藉由習知混合、溶解、懸浮、造粒、糖衣錠製造、研調、乳化、包封、截留或壓製過程。

醫藥組成物可以單位劑量形式呈現為單一劑量，其中所有活性及非活性成分組合於合適系統，且組分不需要混合以形成欲投予之組成物。單位劑量形式可含有有效劑量或其適當分率之治療劑(例如環孢素類似物(例如CRV431))。單位劑量形式之代表性實例包括用於口服投予之錠劑、膠囊或丸劑及用於口或鼻吸入之小瓶或安瓿中之粉末。

本發明揭示之醫藥組成物可呈現為套組，其中活性成分、賦形劑及載劑(例如溶劑)係提供於二或更多個分開的容器(例如安瓿、小瓶、試管、瓶或注射器)中且需要組合以形成欲投予之組成物。套組可含有儲存、製備及投予組成物(例如靜脈注射溶液)之說明。

套組可含有所有活性及非活性成分於單位劑量形式中或活性成分及非活性成分於二個或超過二個分開的容器中，且可含有使用醫藥組成物之說明。在一些實施態樣中，套組包含環孢素類似物(例如CRV431)或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、晶籠化合物、多形體、前藥或代謝物及用於投予化合物之說明。實例

以上討論之實施態樣的一些態樣在下列實例中進一步詳細揭示，其並非以任何方式意圖限制本發明之範圍。實例1 測定CRV431在來自多個不同器官之纖維母細胞中的抗纖維化活性

在本實例中，使用五種不同類型的纖維母細胞，包括(1)來自自發性肺纖維化(「IPF」)患者之肺纖維母細胞、(2)心臟纖維母細胞、(3)皮膚纖維母細胞、(4)腎膈細胞及(5)LX2肝星狀細胞系，以測定CRV431降低生產ECM分子、膠原蛋白及纖維黏連蛋白之能力。

如此實例所示，CRV431以類似量值劑量依賴性降低所有五種類型纖維母細胞的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白分泌，如藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)所測量。不論細胞是否用促纖維化劑轉變生長因子β(TGFβ)刺激，抑制程度均類似，與對於ECM合成之直接效應一致。此外，CRV431在臨床相關濃度下劑量依賴性降低ECM生產達至多55%，不造成細胞存活性的任何減少。如本發明所揭示，CRV431可用於藉由抑制親環素B而減少ECM生產，且與此假設一致的是，用小干擾RNA(siRNA)下調親環素B類似地降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白分泌。

人LX-2肝星狀細胞(Millipore-σ, Cat. # SCC064)係培養於96孔板。在三重複孔中施加處理(每孔施加100 ul處理)達24小時。處理開始時細胞近乎長滿。處理結束時的細胞存活性分析顯示，CRV431處理無一影響細胞存活性。藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)測定在處理結束時所收集之用過的培養基的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白(來自Abcam之前膠原蛋白ELISA抗體對(ab216064)及纖維黏連蛋白ELISA抗體對(ab222262))。在未施加至細胞之培養基中未偵測到前膠原蛋白及纖維黏連蛋白。在培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白水準係由來自3重複孔(空心圓圈)之平均值± SD(誤差線)表示。如圖1A及圖1B所示，在0.1 ng/ml TGFβ不存在或存在下，CRV431均劑量依賴性降低培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

來自自發性肺纖維化(IPF)患者之人肺纖維母細胞(Lonza Bioscience, Cat. # CC-7231)係培養於96孔板。在三重複孔中施加處理(每孔施加100 ul處理)達6天。處理開始時細胞近乎長滿。處理結束時的細胞存活性分析顯示，CRV431處理無一影響細胞存活性。藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)測定在處理結束時所收集之用過的培養基的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白(來自Abcam之前膠原蛋白ELISA抗體對(ab216064)及纖維黏連蛋白ELISA抗體對(ab222262))。在未施加至細胞之培養基中未偵測到前膠原蛋白及纖維黏連蛋白。在培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白水準係由來自3重複孔(空心圓圈)之平均值± SD(誤差線)表示。如圖2A及圖2B所示，在0.4 ng/ml TGFβ不存在或存在下，CRV431均劑量依賴性降低培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

人心臟纖維母細胞(Lonza Bioscience, Cat. #CC-2903)係培養於96孔板。在三重複孔中施加處理(每孔施加100 ul處理)達6天。處理開始時細胞近乎長滿。處理結束時的細胞存活性分析顯示，CRV431處理無一影響細胞存活性。藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)測定在處理結束時所收集之用過的培養基的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白(來自Abcam之前膠原蛋白ELISA抗體對(ab216064)及纖維黏連蛋白ELISA抗體對(ab222262))。在未施加至細胞之培養基中未偵測到前膠原蛋白及纖維黏連蛋白。在培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白水準係由來自3重複孔(空心圓圈)之平均值± SD(誤差線)表示。如圖3A及圖3B所示，在0.4 ng/ml TGFβ不存在或存在下，CRV431均劑量依賴性降低培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

人腎膈細胞(ScienCell, Cat. # 4200(SC))係培養於96孔板。在三重複孔中施加處理(每孔施加100 ul處理)達2天，接著重新施加達額外2天。處理開始時細胞近乎長滿。4天處理結束時的細胞存活性分析顯示，CRV431處理無一影響細胞存活性。藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)測定在處理第2至4天所收集之用過的培養基的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白(來自Abcam之前膠原蛋白ELISA抗體對(ab216064)及纖維黏連蛋白ELISA抗體對(ab222262))。在未施加至細胞之培養基中未偵測到前膠原蛋白及纖維黏連蛋白。在培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白水準係由來自3重複孔(空心圓圈)之平均值± SD(誤差線)表示。如圖4A及圖4B所示，在0.4 ng/ml TGFβ不存在或存在下，CRV431均劑量依賴性降低培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

人成人皮膚纖維母細胞(Lonza Bioscience, Cat. # CC-2511)係培養於96孔板。在三重複孔中施加處理(每孔施加100 ul處理)達1天，接著重新施加達額外一天。處理開始時細胞近乎長滿。4天處理結束時的細胞存活性分析顯示，CRV431處理無一影響細胞存活性。藉由酶連接免疫吸附測定(ELISA)測定在處理第1至2天所收集之用過的培養基的前膠原蛋白及纖維黏連蛋白(來自Abcam之前膠原蛋白ELISA抗體對(ab216064)及纖維黏連蛋白ELISA抗體對(ab222262))。在未施加至細胞之培養基中未偵測到前膠原蛋白及纖維黏連蛋白。在培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白水準係由來自3重複孔(空心圓圈)之平均值±SD(誤差線)表示。如圖5A及圖5B所示，在10 ng/ml表皮生長因子(EGF)或0.4 ng/ml TGFβ不存在或存在下，CRV431均劑量依賴性降低培養基中前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。實例2 使用CRV431處理培養中之人精確切割IPF肺切片

此實例描述利用精確切割肺切片進行之研究。將來自經活體組織切片證實自發性肺纖維化(IPF)患者的移出肺組織之精確切割切片培養6天。在培養第2天將處理施加至每處理6重複切片，且在培養第3、4、及5天每日替換。

為了產生圖6A所示之分泌標記結果(%每日平均變化)，在第3、4、5、及6天收集用過的培養基(24-hr間隔)以藉由ELISA測量六個發炎及纖維化標記的分泌：單核球趨化蛋白(MCP-1)、介白素6(IL-6)、基質金屬蛋白酶7 (MMP-7)、金屬蛋白酶組織抑制劑1(TIMP1)、玻尿酸及膠原蛋白1α1。6個重複切片之各藥物處理的平均分泌水準係表現為每天處理相對於DMSO媒劑處理之百分比變化，接著計算4個每日處理間隔之平均百分比變化。

為了產生圖6B所示之基因表現結果，RNA係在藥物或媒劑處理4天之後的培養第6天自6個按照處理之匯合肺切片單離，且藉由反轉錄-聚合酶連鎖反應(RT-PCR) 評估6個發炎及纖維化標記：MCP-1、IL-6、TGFβ、TIMP1、膠原蛋白1α1及α-平滑肌肌動蛋白(αSMA)。β肌動蛋白係用來作為參考基因以計算各目標基因RNA之相對水準。以5 μM濃度施加之CRV431降低所有標記的平均每日分泌及基因表現，類似於Alk5i(TGFβ受體激酶之抑制劑)、吡非尼酮(IPF之核准治療)及尼達尼布(IPF之核准治療)。實例3 使用CRV431治療小鼠單側輸尿管阻塞(UUO)模型中之腎纖維化

此實例描述在腎纖維化之小鼠單側輸尿管阻塞(UUO)模型中進行之研究。本研究使用七週齡雌性C57BL/6小鼠(n=每組8隻小鼠)。虛假組小鼠無接受UUO。剩餘小鼠經歷左側輸尿管完全手術結紮。媒劑及CRV431係藉由每日經口餵食管以50mg/kg/天投予達13天(始於手術當天)。小鼠在第14天犧牲，且左腎經組織學處理並用Sirius紅染色纖維化膠原蛋白。各組織學切片之Sirius紅染色的百分比係以型態測定學在各腎的5個切片中測量。結果顯示於圖7A(顯示個別組織切片中之Sirius紅)及圖7B(顯示個別小鼠中之Sirius紅(每隻小鼠5個組織切片))。單因子ANOVA合併Tukey多重比較顯示，當資料按照切片及按照動物呈現時，CRV431治療產生統計顯著性降低的Sirius紅染色。實例4 CRV431於人精確切割肝切片(PCLS)中之抗纖維化活性

此實例描述用人PCLS進行之研究以判定CRV431之抗纖維化活性，其中觀察到來自所有5個人供體之PCLS具有一些原先既有的纖維化，其受到TGFβ+PDGF-BB刺激增加7至11%的面積分率。CRV431係五種預防TGFβ+PDGF-BB誘導之組織纖維化之NASH候選藥物中最有效者。大部分CRV431處理切片比起在外源性TGFβ+ PDGF-BB不存在下培養6天之後的媒劑處理切片亦顯示較少纖維化。降低組織纖維化伴隨膠原蛋白1α1、纖維黏連蛋白、玻尿酸、IL-6及MCP-1分泌減少，且伴隨如藉由qRT-PCR顯示之膠原蛋白1α1、αSMA、TIMP1、IL-6及MCP-1的RNA水準減少。RNA-Seq分析類似地顯示，CRV431降低許多纖維化相關基因的表現，包括超過10個膠原蛋白基因、膠原蛋白羥化酶及氧化酶、ACTA2、VEGF及TIMP。供體當中的基因表現有顯著差異，使得所有供體中少於200個基因的表現受到CRV431普遍地改變。許多這些泛供體轉錄變化與文獻中描述之基因的抗NASH、抗纖維化及抗致癌活性一致。在TGFβ+PDGF-BB不存在下，受到CRV431普遍影響之顯著性基因係ESM1 (RNA降低2.2倍；-2.2)、NCOA3(-2.7)、IFI44L(-4.8)、mIR-194-2(-7.9)及DKK1(RNA增加3.8倍；+3.8)。在外源性TGFβ+PDGF-BB存在下，受到CRV431普遍影響之顯著性基因係LOXL2 (-1.9)、UBD/FAT10(-2.0)、ESM1(-2.6)、STRA6(-3.1)、RCCD1(-3.6)及DUOX2(-4.5)。在不受任何特定理論的束縛下，據信本發明所述之結果指示CRV431能夠預防纖維化形成及反轉纖維化。

PCLS係獲自5個經歷肝癌切除的人供體。自切除的健康邊緣收集重複切片，並取決於實驗規程培養4或6天。在非刺激規程中，將切片培養6天，且整個期間用DMSO媒劑或5 μM CRV431處理。在刺激規程中，將切片靜置1天，接著投予細胞介素TGFβ及PDGF-BB達3天以刺激發炎及纖維化。DMSO媒劑、CRV431(1及5 μM)、Alk5i (10 μM)、奧貝膽酸(obeticholic acid)(5 μM)、艾拉非諾(elafibranor)(5 μM)、瑞美替倫(resmetirom)(5 μM)及阿雷美羅(Aramchol)(5 μM)係個別與TGFβ+PDGF-BB併行投予作為刺激規程中之藥物處理。每日替換培養基處理。

在PCLS上進行四種類型的評估：(a)發炎及纖維化生物標記分泌至培養基、(b)Sirius紅之組織學染色及定量作為組織纖維化之量度、(c)藉由RT-PCR之發炎及纖維化生物標記的基因表現、及(d)完全轉錄體之RNA定序(RNA-Seq)。四種類型的評估各者係描述於下：

(a)生物標記分泌。每日自各處理的重複切片收集用過的培養基。使用ELISA定量單核球趨化蛋白(MCP-1)、介白素6(IL-6)、金屬蛋白酶組織抑制劑1(TIMP1)、玻尿酸、纖維黏連蛋白及膠原蛋白1α1的分泌。對各供體而言，各處理組生物標記分泌的平均水準係表現為相對於DMSO媒劑之百分比變化、所有供體平均之百分比及最後自所有評估天數計算的平均每日百分比變化。結果顯示於圖8A(分泌標記-%每日平均變化)。

(b)Sirius紅組織學染色。PCLS在實驗結束時經組織學處理且用Sirius紅染色以顯示組織纖維化。Sirius紅係以型態測定學在組織切片中定量為各處理之10個切片中具有Sirius紅染色的百分比面積。在非刺激規程中，Sirius紅染色之數量係相對於媒劑組表現。在刺激規程中，Sirius紅染色之數量係相對於非刺激PCLS(0%)及TGFβ+ PDGF-BB刺激+媒劑PCLS(100%)表現。結果顯示於圖8B (組織纖維化的Sirius紅染色)。

(c)藉由RT-PCR之基因表現。RNA係在實驗結束時按照治療自重複肝臟切片單離且藉由RT-PCR評估5個發炎及纖維化標記：MCP-1、IL-6、TIMP1、αSMA及膠原蛋白1α1。β肌動蛋白係用來作為參考基因以計算各目標基因RNA之相對水準。以5 μM濃度施加之CRV431降低所有標記的平均每日分泌及基因表現，類似於Alk5i(TGFβ受體激酶之抑制劑)、吡非尼酮(IPF之核准治療)及尼達尼布(IPF之核准治療)。結果顯示於圖8C(藉由RT-PCR之基因表現)。

(d)藉由RNA-Seq之基因表現。完全轉錄體之RNA定序(每樣本3千萬讀數)係在來自3個供體來自非刺激及刺激規程之媒劑及5 μM CRV431處理組上進行。資料藉由生物資訊學軟體程式分析以識別在媒劑與CRV431處理之間差別表現的基因。

以針對(d)所做的評估而言，研究對應3個不同供體切片且經歷4種不同處理的12個樣本。在此分析中進行的比較係：(1)TGFb/PDGF+CRV vs TGFb/PDGF+媒劑(V)及(2)非刺激+CRV vs非刺激+媒劑。表1顯示樣本ID及對應處理。

品質管制檢查係於所有樣本中實施。所有樣本具有超過3千萬讀數，且幾乎所有序列中之鹼基的品質分數平均＞35。預期重複水準因為其係RNA定序，且預期樣本中存在相同RNA之不同拷貝。所有樣本具有良好的讀數量及品質，因此所有樣本通過QC檢查並包括於分析中。

按組別比較TGFb/PDGF+CRV431 vs TGFb/PDGF+媒劑。產生主成分分析(PCA)圖以分析樣本分布(圖9A)，其顯示供體的強烈效應，因為它們基於供體而叢聚在一起；然而，處理之間亦有差異，因為它們如圖9B所示在PCA圖中分開。

在圖9C之MA圖中，將平均計數對對數倍數變化作圖。紅色顯示在TGFb/PDGF+CRV與TGFb/PDGF+媒劑之比較中表現不同的顯著基因(p-調整＜0.05)。

亦產生熱圖以作出在TGFb/PDGF+CRV與TGFb/PDGF+媒劑之比較中顯著不同表現之基因的圖(p-調整＜0.05，對數倍數變化＞0.5)。按組別分組之樣本的熱圖係顯示於圖10A，以觀察在組別中呈現之不同表現模式(藍色=媒劑；紅色=CRV)。亦將相同顯著基因作成另一熱圖(圖10B)，但現在為了觀察供體之間的差異將樣本按供體分組作圖(藍色=媒劑；紅色=CRV)。

此外，將顯著命中作成火山圖(圖11)，其中顯著基因以紅色作圖且標示彼等之對應符號ID。下調及上調係相對於CRV處理。

表2顯示在TGFb/PDGF+CRV與TGFb/PDGF+媒劑之比較中所識別之顯著不同表現基因(p-調整＞0.05，對數倍數變化＞ 0.5)。倍數變化係相對於處理(CRV)。

如PCA分析所示，供體有強烈效應。因此，各供體係經個別分析。實施按供體之TGFb/PDGF+CRV341 vs TGFb/PDGF+媒劑之計數比較。首先，選擇計數數量差異(TGFb/PDGF+媒劑-TGFb/PDGF+CRV)＜-300的基因。因此媒劑組比起CRV處理少至少300個拷貝。換句話說，處理比起媒劑多至少300個拷貝。在針對各供體個別作此選擇之後，作出文氏圖顯示所有三個供體之間的重疊。如圖12A所示，117個基因在CRV處理樣本比起媒劑多至少300個拷貝。

接著，選擇計數數量差異(TGFb/PDGF+媒劑-TGFb/PDGF+CRV)＞300的基因，因此選擇該些在媒劑樣本比起CRV處理多至少300個拷貝的基因。因此，它們在CRV處理比起媒劑少至少300個拷貝。在針對各供體個別作選擇之後，作出文氏圖顯示所有三個供體之間的重疊。如圖12B所示，279個基因在CRV處理比起媒劑少至少300個拷貝。

接著按組別比較非刺激+CRV431 vs非刺激+媒劑。產生主成分分析(PCA)圖以分析樣本分布(圖13A)。如預期地，觀察到供體的強烈效應，因為它們基於供體而非處理而叢聚再一起。但處理之間有差異，因為它們在PCA圖中分開(圖13B)。

以圖13C顯示之MA圖而言，將平均計數對對數倍數變化作圖。紅色顯示在非刺激+CRV與非刺激+媒劑之比較中表現不同的顯著基因(p-調整＜0.05)。

藉由作出在非刺激+CRV與非刺激+媒劑之比較中顯著不同表現之基因的圖來產生熱圖(p-調整＜0.05，對數倍數變化＞0.5)。首先，顯示按組別分組之樣本的熱圖(圖14A)，以觀察在組別中呈現之不同表現模式(藍色=媒劑；紅色=CRV)。接著，將相同顯著基因作成熱圖(圖14B)，但現在為了觀察供體之間的差異將樣本按供體分組作圖(藍色=媒劑；紅色=CRV)。

將顯著命中作成火山圖(圖15)。顯著基因以紅色作圖且標示其對應符號ID。下調及上調之基因係相對於CRV處理。

表3提供在非刺激+CRV與非刺激+媒劑之比較中所識別之顯著不同表現基因(p-調整＞0.05，對數倍數變化＞ 0.5)。所示之倍數變化係相對於CRV處理。

接著按供體比較非刺激+CRV431 vs非刺激+媒劑。如PCA所示，供體有強烈效應。因此，如先前比較重複分析。首先，選擇計數數量差異(非刺激+媒劑-非刺激+CRV)＜-300的基因，因此媒劑組比起CRV處理少至少300個拷貝。換句話說，CRV處理比起媒劑多至少300個拷貝。在針對各供體個別作此選擇之後，作出文氏圖顯示所有三個供體之間的重疊。如圖16A所示，210個基因在CRV處理比起媒劑多至少300個拷貝。接著，選擇計數數量差異(非刺激+媒劑-非刺激+CRV)＞300的基因，因此選擇該些在媒劑樣本比起CRV處理多至少300個拷貝的基因。因此，處理組比起媒劑少至少300個拷貝。在針對各供體個別作選擇之後，作出文氏圖顯示所有三個供體之間的重疊。如圖16B所示，255個基因在CRV處理比起媒劑少300個或少於300個拷貝。

在先前描述實施態樣之至少一些中，在一實施態樣所使用之一或多個元件可互換用於另一實施態樣中，除非此類替換在技術上不可行。所屬技術領域中具有通常知識者將理解，可對上述方法及結構作出各種其他省略、新增及修改而不背離主張權利的主題範疇。所有此類修改及變化皆意欲落在由隨附之權利要求所定義之主題範疇內。

關於本發明使用實質上任何複數及/或單數用語，所屬技術領域中具有通常知識者可視適合上下文及/或應用之情況，從複數轉換成單數及/或從單數轉換成複數。各種單數/複數排列組合可在本文中明確闡述以求清晰。如本說明書及隨附之權利要求中所使用者，單數形式之「一(a, an)」及「該(the)」包含複數之指涉物除非上下文另外清楚地說明。任何本發明中之「或(or)」意欲涵蓋「及/或(and/or)」，除非另行說明。

所屬技術領域中具有通常知識者將理解一般來說，在本發明及特別是隨附之權利要求(例如隨附之權利要求主體)中使用之用語通常意圖作為「開放式」用語(例如用語「包括(including)」應解讀為「包括但不限於(including but not limited to)」，用語「具有(having)」應解讀為「具有至少(having at least)」，用語「包括(includes)」應解讀為「包括但不限於(includes but is not limited to)」等)。所屬技術領域中具有通常知識者將進一步理解，如果意圖導入特定數目的請求項記述，那麼這樣的意圖將會明白地記述在請求項中，如果沒有該記述，便無此意圖。例如，為協助理解，下列隨附之權利要求可含有導入性短語「至少一個(at least one)」及「一或多個(one or more)」的使用來導入請求項記述。然而，此類短語之使用不應被解讀為表示藉由不定冠詞「一(a/an)」所導入之請求項記述限制含有該導入請求項記述之任何特定請求項為含有僅一個該記述之實施態樣，即使當相同請求項包括導入性短語「一或多個」或「至少一個」及不定冠詞諸如「一」時(例如「一」應解讀為意指「至少一個」或「一或多個」)；這也成立於用於導入請求項記述之定冠詞的使用。此外，即使明白地記述特定數目的導入請求項記述，所屬技術領域中具有通常知識者將認可該記述應解讀為意指至少該記述數目(例如，無其他修飾語之「二個記述」之裸記述是指至少二個記述或二個或超過二個記述)。另外，在使用類似於「A、B及C中之至少一者等」之慣例的情況下，該架構一般意圖為所屬技術領域中具有通常知識者所將理解之慣例意義(例如，「具有A、B及C中之至少一者之系統」將包括但不限於具有僅A、僅B、僅C、A及B一起、A及C一起、B及C一起及/或A、B及C一起等之系統)。在使用類似於「A、B或C中之至少一者等」之慣例的情況下，該架構一般意圖為所屬技術領域中具有通常知識者所將理解之慣例意義(例如，「具有A、B或C中之至少一者之系統」將包括但不限於具有僅A、僅B、僅C、A及B一起、A及C一起、B及C一起及/或A、B及C一起等之系統)。所屬技術領域中具有通常知識者將進一步理解，呈現二個或超過二個替代用語之幾乎任何轉折詞及/或短語，不論在說明、請求項或圖式中，應理解為考慮包括該等用語中之一者、該等用語中之任一者或兩個用語的可能性。

此外，當本發明之特徵或態樣係以馬庫西群組之用語描述時，所屬技術領域中具有通常知識者將了解本發明亦藉此以該馬庫西群組之任何個別成員或成員子群之用語描述。

如所屬技術領域中具有通常知識者所將理解的，以任何及所有目的而言，諸如就提供書面說明方面，在本文中揭示之所有範圍亦涵蓋任何及所有可能的子範圍及彼等之子範圍的組合。任何列出範圍可輕易地被辨識為充分描述且使相同範圍得以被拆解成至少相等的兩等分、三等分、四等分、五等分、十等分等。作為非限制性實例，在本文中討論之各範圍可輕易地被拆解為下三分之一、中間三分之一及上三分之一等。如所屬技術領域中具有通常知識者所亦將理解的，所有諸如「至多(up to)」、「至少(at least)」、「高於(greater than)」、「低於(less than)」的用語及類似用語包括所記述之數目且係指後續可拆解成如上所討論之子範圍的範圍。最後，如所屬技術領域中具有通常知識者所將理解的，範圍包括各個別成員。因此，例如具有1至3個物件之群組係指具有1、2或3個物件之群組。類似地，具有1至5個物件之群組係指具有1、2、3、4或5個物件之群組等。

雖然本發明已揭示各種態樣及實施態樣，其他態樣及實施態樣將為所屬技術領域中具有通常知識者顯而易見。本發明揭示之各種態樣及實施態樣係為了說明之目的，且無意限制由下列請求項所指示之真實範疇及精神。

[圖1A至圖1B]係直方圖，其顯示在人LX-2肝星狀細胞培養中，由CRV431處理造成之劑量依賴性降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

[圖2A至圖2B]係直方圖，其顯示在人IPF肺纖維母細胞培養中，由CRV431處理造成之劑量依賴性降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

[圖3A至圖3B]係直方圖，其顯示在人心臟纖維母細胞培養中，由CRV431處理造成之劑量依賴性降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

[圖4A至圖4B]係直方圖，其顯示在人腎膈細胞培養中，由CRV431處理造成之劑量依賴性降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

[圖5A至圖5B]係直方圖，其顯示在人皮膚纖維母細胞培養中，由CRV431處理造成之劑量依賴性降低前膠原蛋白及纖維黏連蛋白的豐度。

[圖6A]之圖顯示人精確切割IPF肺切片培養中分泌標記之%每日平均變化。[圖6B]之圖顯示在相同人精確切割IPF肺切片培養中的基因表現。

[圖7A至圖7B]之圖顯示CRV431在腎纖維化之小鼠單側輸尿管阻塞(UUO)模型中之抗纖維化活性。

[圖8A至圖8C]之圖顯示CRV431在人精確切割肝臟切片(PCLS)中之抗纖維化活性。

[圖9A至圖9B]係PCA圖，其顯示TGFb/PDGF +CRV431 vs TGFb/PDGF+媒劑按組別比較之樣本及供體分布。

[圖9C]係MA圖，且[圖10A至圖10B]係TGFb/PDGF+CRV431 vs TGFb/PDGF+媒劑按組別比較所產生之熱圖。

[圖11]係火山圖，其顯示TGFb/PDGF+ CRV431 vs TGFb/PDGF+媒劑按組別比較所識別之顯著不同表現基因。

[圖12A至圖12B]係文氏圖，其顯示所有三個供體之間的顯著基因重疊。

[圖13A至圖13B]係PCA圖，其顯示非刺激+CRV431 vs非刺激+媒劑按組別比較之樣本及供體分布。

[圖13C]係MA圖，且圖[14A至圖14B]係非刺激+CRV431 vs非刺激+媒劑按組別比較所產生之熱圖。

[圖15]係火山圖，其顯示非刺激+CRV431 vs非刺激+媒劑按組別比較所識別之顯著不同表現基因。

[圖16A至圖16B]係文氏圖，其顯示非刺激+CRV431 vs非刺激+媒劑按供體比較之所有三個供體之間的顯著基因重疊。

Claims

一種用於治療非肝纖維化之方法，其包含向有治療需要之個體投予包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的組成物：
其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. H； ii. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； iii. 經N-取代或未經取代之醯基保護之胺； iv. N-取代或未經取代之胺； v. 羧酸； vi. 腈； vii. 酯； viii. 酮； ix. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基；及 x. 經取代或未經取代之芳基； xi. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈，其可選地含有選自由氫、酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環、鹵素及側氧基所組成之群組的取代基； xii. 芳族基，其含有選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基；及 xiii. (xi)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈與(xii)之芳族基的組合；且 d. R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈。
如請求項1之方法，其中該有治療需要之個體係罹患非肝纖維化之個體。
如請求項1至2中任一項之方法，其包含減少該個體之非肝纖維化的量。
如請求項3之方法，其中該個體之非肝纖維化的量係減少5%、10%、20%或超過20%。
如請求項1至2中任一項之方法，其包含減少該個體之非肝纖維化的形成。
如請求項5之方法，其中該個體之非肝纖維化的形成係減少5%、10%、20%或超過20%。
如請求項1至6中任一項之方法，其中該非肝纖維化包含肺、腎、心臟、皮膚、眼、胃腸道、腹膜、骨髓、肌肉、血管、血管分布或彼等之任何組合的纖維化。
如請求項1至6中任一項之方法，其中該有治療需要之個體係罹患纖維化病症之個體，該纖維化病症選自由自發性肺纖維化(IPF)、心纖維化、皮膚纖維化、腎纖維化或彼等之組合所組成之群組。
一種用於預防或延緩纖維化的開始之方法，其包含向有預防或延緩需要之個體投予包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的組成物：
其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. H； ii. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； iii. 經N-取代或未經取代之醯基保護之胺； iv. N-取代或未經取代之胺； v. 羧酸； vi. 腈； vii. 酯； viii. 酮； ix. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基；及 x. 經取代或未經取代之芳基； xi. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈，其可選地含有選自由氫、酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環、鹵素及側氧基所組成之群組的取代基； xii. 芳族基，其含有選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基；及 xiii. (xi)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈與(xii)之芳族基的組合；且 d. R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈。
如請求項9之方法，其中該有預防或延緩需要之個體係具有發展纖維化之風險之個體。
如請求項9至10中任一項之方法，其中該有預防或延緩需要之個體係不具有纖維化進展之個體。
如請求項10至11中任一項之方法，該個體之發展纖維化之風險相較於未經治療之個體係減少至少5%、10%、20%或超過20%。
如請求項9至12中任一項之方法，該個體之纖維化的開始係延緩至少一個月、一年或超過一年。
如請求項9至13中任一項之方法，其包含減少纖維化形成，其中該個體之纖維化形成相較於未經治療之個體係減少至少一個月、一年或超過一年。
一種用於減少纖維化或反轉纖維化之方法，其包含向有減少或反轉需要之個體投予包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的組成物：
其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. H； ii. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； iii. 經N-取代或未經取代之醯基保護之胺； iv. N-取代或未經取代之胺； v. 羧酸； vi. 腈； vii. 酯； viii. 酮； ix. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基；及 x. 經取代或未經取代之芳基； xi. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈，其可選地含有選自由氫、酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環、鹵素及側氧基所組成之群組的取代基； xii. 芳族基，其含有選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基；及 xiii. (xi)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈與(xii)之芳族基的組合；且 d. R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈。
如請求項15之方法，其中該有減少或反轉需要之個體係罹患纖維化之個體。
如請求項9至16中任一項之方法，其包含抑制該個體之纖維化形成。
如請求項9至17中任一項之方法，其中該纖維化係非肝纖維化。
如請求項18之方法，其中該非肝纖維化包含肺、腎、心臟、皮膚、眼、胃腸道、腹膜、骨髓、肌肉、血管、血管分布或彼等之任何組合的纖維化。
如請求項9至17中任一項之方法，其中該有減少或反轉需要之個體係罹患纖維化病症之個體，該纖維化病症選自由肺纖維化、心纖維化、皮膚纖維化、腎纖維化、肝纖維化或彼等之組合所組成之群組。
如請求項9至17中任一項之方法，其中該有減少或反轉需要之個體係罹患自發性肺纖維化(IPF)之個體。
如請求項9至17中任一項之方法，其中該纖維化係肝纖維化。
如請求項22之方法，其中該肝纖維化係肝硬化。
如請求項23之方法，其中該肝硬化係與病毒性肝炎、血吸蟲病及慢性酒精中毒相關聯。
如請求項1至24中任一項之方法，其中該具有式L之環孢素類似物係CRV431：
如請求項1至25中任一項之方法，其中該組成物包含治療或預防有效量的式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物。
如請求項1至26中任一項之方法，其中該非肝纖維化或纖維化係由治療劑、損傷或彼等之組合誘導。
如請求項1至26中任一項之方法，其中該非肝纖維化或纖維化係與在創傷、發炎、組織修復、免疫反應、細胞性增生、腫瘤或彼等之組合之後發生的細胞外基質成分累積相關聯。
如請求項1至26中任一項之方法，其中該非肝纖維化或纖維化係與主要器官疾病、纖維增生病症、創傷相關結疤或彼等之組合相關聯。
如請求項9至26中任一項之方法，其中該纖維化係與下列相關聯：間質性肺疾病、肝硬化、非酒精性脂肪肝疾病、非酒精性脂肪肝炎、腎疾病、心臟或血管疾病、眼疾病、全身性及局部硬皮症、蟹足腫、肥厚性瘢痕、動脈粥樣硬化、再狹窄、Dupuytren氏攣縮、手術併發症、化學治療劑藥物誘導纖維化、放射誘導纖維化、意外損傷及燒燙傷、腹膜後纖維化、腹膜纖維化/腹膜結疤或彼等之組合。
如請求項30之方法，其中該與間質性肺疾病相關聯之纖維化係類肉瘤病、矽沉著病、藥物反應、感染、膠原蛋白血管疾病、類風濕性關節炎、全身性硬化症、硬皮症、肺纖維化、自發性肺纖維化、尋常性間質性肺炎、間質性肺疾病、隱源性致纖維性肺泡炎、阻塞性細支氣管炎、支氣管擴張症或彼等之組合。
如請求項9至31中任一項之方法，其包含相較於未經治療之個體減少該個體之纖維化形成至少5%、10%、20%、50%、70%、90%或超過90%。
如請求項9至31中任一項之方法，其包含相較於未經治療之個體延緩該個體之纖維化形成。
如請求項1至33中任一項之方法，其中該個體係哺乳動物。
如請求項1至33中任一項之方法，其中該個體係人類。
如請求項1至35中任一項之方法，其中該組成物包含一或多種醫藥上可接受之賦形劑。
如請求項1至36中任一項之方法，其中該組成物包含一或多種額外治療劑。
如請求項1至36中任一項之方法，其進一步包含向該有彼等需要之個體投予一或多種額外治療劑。
如請求項37或38之方法，其中該一或多種額外治療劑包含額外抗纖維化劑。
如請求項37或38之方法，其中該一或多種額外治療劑包含第II型干擾素受體促效劑、吡非尼酮(pirfenidone)及吡非尼酮類似物、尼達尼布(nintedanib)及尼達尼布類似物、抗血管生成劑、抗發炎劑、IL-1拮抗劑、血管張力素轉換酶(ACE)抑制劑、血管張力素受體阻斷劑及醛固酮拮抗劑、絲裂黴素C(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、腺苷酸環化酶活化子、β-腎上腺素受體促效劑、類黃酮、肥胖細胞穩定劑、磷酸二酯酶抑制劑、原花青素(procyanidin)或彼等之組合。
如請求項37至40中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑中至少一者係與該組成物共投予至該個體。
如請求項37至40中任一項之方法，其中該一或多種額外治療劑中至少一者係在投予該組成物之前、投予該組成物之後或投予該組成物之前及之後投予至該個體。
如請求項1至42中任一項之方法，其中該組成物係藉由靜脈內投予、口服投予、腸胃外投予向該個體投予。
如請求項1至43中任一項之方法，其中該組成物係呈粉末、丸劑、錠劑、微錠劑、微粒劑(pellet)、細微粒劑(micropellet)、膠囊、含有微錠劑之膠囊、液體、氣溶膠或奈米粒子之形式。
如請求項1至44中任一項之方法，其中該組成物係以10 mg至250 mg之該環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物的有效每日劑量向該個體投予。
一種醫藥組成物，其包含下式L之環孢素類似物或其醫藥上可接受之鹽、溶劑合物或立體異構物以用於預防或治療纖維化、或用於預防或減少纖維化形成、或用於反轉纖維化、或用於減少纖維化的量、或用於延緩纖維化的開始：
其中： a. R’係H或乙醯基； b. R1係2至15個碳原子長度的飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族碳鏈； c. R2係選自由下列所組成之群組： i. H； ii. 未經取代、N-取代或N,N-雙取代之醯胺； iii. 經N-取代或未經取代之醯基保護之胺； iv. N-取代或未經取代之胺； v. 羧酸； vi. 腈； vii. 酯； viii. 酮； ix. 羥基、二羥基、三羥基或多羥基烷基；及 x. 經取代或未經取代之芳基； xi. 飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈，其可選地含有選自由氫、酮、羥基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊環、鹵素及側氧基所組成之群組的取代基； xii. 芳族基，其含有選自由鹵素、酯及硝基所組成之群組的取代基；及 xiii. (xi)之飽和或不飽和直鏈或支鏈脂族鏈與(xii)之芳族基的組合；且 d. R23係飽和或不飽和直鏈或支鏈的可選地經取代之脂族碳鏈。
如請求項46之醫藥組成物，其中該環孢素類似物係CRV431：
如請求項46之醫藥組成物，其中該醫藥組成物係用於靜脈內投予、口服投予或腸胃外投予。
如請求項46至48中任一項之醫藥組成物，其中該醫藥組成物係呈粉末、丸劑、錠劑、微錠劑、微粒劑、細微粒劑、膠囊、含有微錠劑之膠囊、液體、氣溶膠或奈米粒子之形式。
一種套組，其包含：如請求項46至49中任一項之醫藥組成物；及標籤，其中該標籤指示下列一或多項： (a)該套組係用於預防或治療纖維化， (b)該套組係用於減少或抑制纖維化形成， (c)該套組係用於反轉纖維化， (d)該套組係用於減少纖維化的量，及 (e)該套組係用於延緩纖維化的開始。
如請求項50之套組，其進一步包含識別具有發展纖維化之風險之個體的說明、識別罹患纖維化之個體的說明或該兩者。