JP2023526224A - がんを治療するための、がん治療薬との組合せでの多量体抗ｄｒ５結合分子の使用 - Google Patents

がんを治療するための、がん治療薬との組合せでの多量体抗ｄｒ５結合分子の使用 Download PDF

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Abstract

本開示は、がんを治療するための治療法であって、多量体抗ＤＲ５抗体及びがん治療薬（例えば、放射線、アントラサイクリン、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ＳＭＡＣ模倣薬、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼδ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、またはこれらの任意の組合せ）による組合せ療法を含む、治療法を提供する。TIFF2023526224000048.tif63128

Description

関連出願の相互参照
本出願は、米国仮特許出願第６３／０２３，６３５号（２０２０年５月１２日出願）、同第６３／０７８，７４７号（２０２０年９月１５日出願）、同第６３／１１４，９９０号（２０２０年１１月１７日出願）、同第６３／１３１，６９８号（２０２０年１２月２９日出願）、及び同第６３／１３６，１５６号（２０２１年１月１１日出願）による利益を主張するものであり、これらは各々、その全体が参照により本出願に援用される。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、当該配列表の全体が参照により本明細書に援用される。ＡＳＣＩＩコピーは２０２１年５月１１日に作成され、名称は０３０ＷＯ１－Ｓｅｑｕｅｎｃｅ－Ｌｉｓｔｉｎｇであり、サイズは１３９，７２６バイトである。
多量体化することができる抗体及び抗体分子（例えば、ＩｇＡ及びＩｇＭ抗体）は、例えば、免疫腫瘍学及び感染性疾患の分野で、特異性の改善、アビディティーの改善、及び複数の結合標的への結合能を可能にする有望な薬物候補として浮上している。例えば、米国特許第９，９５１，１３４号（特許文献１）、第９，９３８，３４７号（特許文献２）、第１０，３５１，６３１号（特許文献３）、及び第１０，４００，０３８号（特許文献４）、米国特許出願公開第２０１９－０１００５９７号（特許文献５）、第２０１８－０００９８９７号（特許文献６）、第２０１９－０３３０３７４号（特許文献７）、第２０１９－０３３０３６０号（特許文献８）、第２０１９－０３３８０４０号（特許文献９）、第２０１９－０３３８０４１号（特許文献１０）、第２０１９－０１８５５７０号（特許文献１１）、第２０１８－０２６５５９６号（特許文献１２）、第２０１８－０１１８８１６号（特許文献１３）、第２０１８－０１１８８１４号（特許文献１４）、及び第２０１９－０００２５６６号（特許文献１５）、ならびにＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１８／１８７７０２号（特許文献１６）、第ＷＯ２０１９／１６５３４０号（特許文献１７）、及び第ＷＯ２０１９／１６９３１４号（特許文献１８）を参照（これらの内容は、その全体が参照により本明細書に援用される）。
多量体のＩｇＡまたはＩｇＭ抗体は、複数の構成要素が必ず同時に結合して生物学的シグナルを送信しなければならない特定の生物学的システムに適用するための有用なツールを提供する。例えば、真核細胞の表面上の多くの受容体タンパク質は、細胞の細胞質に対する細胞膜を横断した生物学的シグナルの活性化及び伝達を達成するために、複数の単量体またはサブユニットの同時活性化を必要とする。
１つのこのような受容体は、アポトーシス誘発腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリータンパク質ＤＲ５（ＴＲＡＩＬＲ２とも呼ばれる）である。ＤＲ５活性化には、少なくとも３個の非相互作用受容体単量体が、例えば、ＴＲＡＩＬリガンドまたはアゴニスト抗体によって架橋して、安定化した受容体３量体を形成し、細胞膜を横断したシグナル伝達をもたらすことが必要である。ＤＲ５タンパク質をクラスター化して３量体の「ラフト」にすると、シグナリングカスケードのより有効な活性化がもたらされ得る。
ＤＲ５に対する関心が高まっているのは、ＤＲ５が膀胱癌（Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｕｒｏｌｏｇｙ，７９（４）：９６８．ｅ７－１５，（２０１２）（非特許文献１））、胃癌（Ｌｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ．，３２（５）：７２３－７３２，（２０１１）（非特許文献２））、卵巣癌（Ｊｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．Ｒｅｐ．，６（２）：３１６－３２０，（２０１２）（非特許文献３））、膵管腺癌（Ｒａｊｅｓｈｋｕｍａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．，９（９）：２５８３－９２，（２０１０）（非特許文献４））、口腔扁平上皮癌（Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ． Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ４：２０６－２１７，（２０１３）（非特許文献５））及び非小細胞肺癌（Ｒｅｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃ．，８２（３）：４４１－４４８，（２０１３）（非特許文献６））で発現するという知見によるものである。これらのがんのいくつかに対する現状の標準治療には、例えば、ＤＮＡ合成の遮断、細胞分裂の遮断、またはアポトーシスの促進により、細胞成長及び代謝を途絶させる放射線または化学療法剤が含まれる。
ある特定の抗ＤＲ５モノクローナル抗体、例えば、チガツズマブ（ＣＳ－１００８，Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓａｎｋｙｏ Ｃｏ． Ｌｔｄ．、米国特許第７，２４４，４２９号（特許文献１９）で開示）は、追加の架橋剤を添加しない場合であってもインビトロ及びインビボで有効であることが分かっているが、このような抗体は有意な臨床効果をもたらしていない（Ｒｅｃｋ ｅｔ ａｌ．，２０１３を参照）。しかし、最近では、いくつかの異なる抗ＤＲ５ ＩｇＭ抗体がインビトロ及びインビボの両方ではるかに高い有効性を有することが示されている。例えば、米国特許出願公開第２０１８－０００９８９７号（特許文献６）を参照（その全体が参照により本明細書に援用される）。
抗ＤＲ５ ＩｇＭ抗体を用いた組合せ療法を含めた、治療困難な腫瘍のためのより良好な治療法及び既存の治療法の強化が必要とされている。
米国特許第９，９５１，１３４号 米国特許第９，９３８，３４７号 米国特許第１０，３５１，６３１号 第１０，４００，０３８号 米国特許出願公開第２０１９－０１００５９７号 米国特許出願公開第第２０１８－０００９８９７号 米国特許出願公開第第２０１９－０３３０３７４号 米国特許出願公開第第２０１９－０３３０３６０号 米国特許出願公開第第２０１９－０３３８０４０号 米国特許出願公開第第２０１９－０３３８０４１号 米国特許出願公開第第２０１９－０１８５５７０号 米国特許出願公開第第２０１８－０２６５５９６号 米国特許出願公開第第２０１８－０１１８８１６号 米国特許出願公開第第２０１８－０１１８８１４号 米国特許出願公開第第２０１９－０００２５６６号 ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１８／１８７７０２号 ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６５３４０号 ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６９３１４号 米国特許第７，２４４，４２９号
Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｕｒｏｌｏｇｙ，７９（４）：９６８．ｅ７－１５，（２０１２） Ｌｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ．，３２（５）：７２３－７３２，（２０１１） Ｊｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．Ｒｅｐ．，６（２）：３１６－３２０，（２０１２） Ｒａｊｅｓｈｋｕｍａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．，９（９）：２５８３－９２，（２０１０） Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ． Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ４：２０６－２１７，（２０１３） Ｒｅｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃ．，８２（３）：４４１－４４８，（２０１３）
本明細書では、がんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、治療を必要とする対象に、（ａ）有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、または６量体もしくは５量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体であって、ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～４個の抗原結合ドメイン、あるいはＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、または６量体もしくは５量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体と、（ｂ）有効量のがん治療薬であって、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、がん治療薬とを含む組合せ治療薬を投与することを含む、方法が提供される。
本明細書では、治療を必要とするがんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体を投与することを含み、ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいはＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的であり、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体が、有効量のがん治療薬とともに投与され、がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、方法が提供される。
本明細書では、治療を必要とするがんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量のがん治療薬を投与することを含み、がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含み、がん治療薬が、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する５量体または６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体とともに投与され、ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいはＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、方法が提供される。
本明細書では、治療を必要とするがんを有する対象におけるがん細胞のアポトーシスを誘導するための方法であって、（ａ）有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体であって、ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいはＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体と、（ｂ）有効量のがん治療薬であって、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、がん治療薬とを含む、組合せ治療薬を対象に投与することを含む、方法が提供される。
本明細書では、治療を必要とするがんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体を投与することを含み、ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいはＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的であり、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体が、有効量のがん治療薬とともに投与され、がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、方法が提供される。
本明細書では、治療を必要とするがんを有する対象におけるがん細胞のアポトーシスを誘導するための方法であって、有効量のがん治療薬を投与することを含み、がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含み、がん治療薬が、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する５量体または６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体とともに投与され、ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいはＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくはその誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、方法が提供される。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体を含む。いくつかの実施形態において、葉酸類似体はロイコボリンを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は白金系薬剤を含む。いくつかの実施形態において、白金系薬剤は、オキサリプラチン、カルボプラチン、またはこれらの組合せを含む。いくつかの実施形態において、白金系薬剤はオキサリプラチンを含む。いくつかの実施形態において、白金系薬剤はカルボプラチンを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はタキサンを含む。いくつかの実施形態において、タキサンはパクリタキセルを含む。いくつかの実施形態において、パクリタキセルは、溶媒ベースパクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、またはこれらの組合せを含む。いくつかの実施形態において、パクリタキセルは溶媒ベースパクリタキセルを含む。いくつかの実施形態において、パクリタキセルはｎａｂ－パクリタキセルを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤はアントラサイクリンを含む。いくつかの実施形態において、アントラサイクリンはドキソルビシンを含む。いくつかの実施形態において、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤はエトポシドを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は、ビリナパント、ＧＤＣ－０１５２、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＰＧ－１３８７、ＡＳＴＸ６６０、またはこれらの組合せを含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は２価ＳＭＡＣ模倣薬を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬はビリナパントを含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬はＡＰＧ－１３８７を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬はＧＤＣ－０１５２を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬はＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬はＤｅｂｉｏ１１４３を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬はＡＳＴＸ６６０を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は１価ＳＭＡＣ模倣薬を含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はビンカアルカロイドを含む。いくつかの実施形態において、ビンカアルカロイドはビンクリスチンを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＢＴＫ阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、ＢＴＫ阻害剤はイブルチニブを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＰＩ３Ｋδ阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋδ阻害剤はイデラリシブを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＭｃｌ－１阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、Ｍｃｌ－１阻害剤はＭＩＫ６６５を含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は抗ＶＥＧＦ抗体を含む。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブである。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は放射線を含む。
いくつかの実施形態において、当該方法はさらに、有効量の追加のがん治療薬を投与することを含む。いくつかの実施形態において、追加のがん治療薬は、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ヌクレオシド類似体、白金系薬剤、またはこれらの任意の組合せを含む。いくつかの実施形態において、追加のがん治療薬はトポイソメラーゼＩ阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、トポイソメラーゼＩ阻害剤は、イリノテカン、トポテカン、またはこれらの組合せを含む。いくつかの実施形態において、トポイソメラーゼＩ阻害剤はイリノテカンを含む。いくつかの実施形態において、追加のがん治療薬はヌクレオシド類似体を含む。いくつかの実施形態において、ヌクレオシド類似体は、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、ゲムシタビン、またはこれらの任意の組合せを含む。いくつかの実施形態において、ヌクレオシド類似体はフルオロウラシル（５－ＦＵ）を含む。いくつかの実施形態において、ヌクレオシド類似体はゲムシタビンを含む。
いくつかの実施形態において、がんは血液癌または固形腫瘍である。いくつかの実施形態において、がんは血液癌である。いくつかの実施形態において、血液癌は、白血病、リンパ腫、骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せである。いくつかの実施形態において、血液癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せである。いくつかの実施形態において、血液癌は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はドキソルビシンを含む。
いくつかの実施形態において、がんは固形腫瘍である。いくつかの実施形態において、がんは、膀胱癌、結腸直腸癌、肉腫、胃癌、肺癌、膵臓癌、黒色腫、卵巣癌、頭頚部癌、または乳癌である。
いくつかの実施形態において、がんは肉腫である。いくつかの実施形態において、肉腫は、線維肉腫、軟骨肉腫、または骨肉腫である。いくつかの実施形態において、肉腫は線維肉腫である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はドキソルビシンを含む。
いくつかの実施形態において、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含む。いくつかの実施形態において、追加の治療薬は５－ＦＵを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はロイコボリンを含む。いくつかの実施形態において、追加の治療薬はオキサリプラチンまたはイリノテカンを含む。
いくつかの実施形態において、がんは胃癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含む。
いくつかの実施形態において、がんは肺癌である。いくつかの実施形態において、肺癌は非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含む。
いくつかの実施形態において、がんは膵臓癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含む。いくつかの実施形態において、追加の治療薬はゲムシタビンを含む。
いくつかの実施形態において、がんは頭頚部癌である。いくつかの実施形態において、頭頚部癌は頭頚部肉腫である。いくつかの実施形態において、がんは乳癌である。いくつかの実施形態において、乳癌はトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬を含む。
いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬは、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲ；あるいは配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、または配列番号７３のＳｃＦｖ配列を含む抗体のＣＤＲ、あるいはＣＤＲのうちの１個以上において１つまたは２つのアミノ酸置換を伴う６個のＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬは、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬは、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号５または配列番号９０及び配列番号６のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む。いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３または４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨ及びＶＬは、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む。
ある特定の実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含むか、あるいはＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、もしくは配列番号７３に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有するＳｃＦｖ内に含まれる。
いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３または４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号５または配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３または４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号５または配列番号９０及び配列番号６に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインは、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号７及び配列番号８に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、２個の２価ＩｇＡ結合ユニットまたはその多量体化フラグメントと、Ｊ鎖またはそのフラグメントもしくはバリアントとを含む２量体のＩｇＡまたはＩｇＡ様抗体であり、各結合ユニットは、抗原結合ドメインに各々会合した２個のＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体はさらに、分泌因子、またはそのフラグメントもしくはバリアントを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントは、各々Ｃα３－ｔｐドメインを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントは、各々Ｃα１ドメイン及び／またはＣα２ドメインを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＡ重鎖定常領域はヒトＩｇＡ定常領域である。いくつかの実施形態において、各結合ユニットは、ＩｇＡ定常領域またはその多量体化フラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを各々含む２個のＩｇＡ重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含む。
いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、それぞれ５または６個の２価ＩｇＭ結合ユニットを含む５量体または６量体のＩｇＭ抗体であり、各結合ユニットは、抗原結合ドメインに各々会合した２個のＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントは、各々Ｃμ４－ｔｐドメインを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントは、各々Ｃμ１ドメイン、Ｃμ２ドメイン、及び／またはＣμ３ドメインを含む。いくつかの実施形態において、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体は５量体であり、さらに、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントまたはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＭ重鎖定常領域はヒトＩｇＭ定常領域である。いくつかの実施形態において、各結合ユニットは、ＩｇＭ定常領域またはその多量体化フラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを各々含む２個のＩｇＭ重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含む。
いくつかの実施形態において、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントは、多量体結合分子の血清半減期に影響を及ぼし得る野生型Ｊ鎖に対する１つ以上の単一アミノ酸置換、欠失、または挿入を含むバリアントＪ鎖であり、この多量体結合分子は、動物に投与されたときに、１つ以上の単一アミノ酸の置換、欠失、または挿入以外は同一である参照多量体結合分子が同じ動物種に同じ方法で投与されたときよりも長い血清半減期を示す。
いくつかの実施形態において、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントは、野生型ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｙ１０２に対応するアミノ酸位置でのアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態において、配列番号９７のＹ１０２に対応するアミノ酸は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、またはアルギニン（Ｒ）で置換されている。いくつかの実施形態において、配列番号９７のＹ１０２に対応するアミノ酸は、アラニン（Ａ）で置換されている。いくつかの実施形態において、Ｊ鎖は、バリアントヒトＪ鎖であり、配列番号９８のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントは、ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｎ４９、アミノ酸Ｓ５１、またはＮ４９及びＳ５１の両方に対応するアミノ酸位置でのアミノ酸置換を含み、配列番号９７の位置Ｓ５１に対応する単一のアミノ酸置換はスレオニン（Ｔ）置換ではない。いくつかの実施形態において、配列番号９７のＮ４９に対応する位置は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、スレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、またはアスパラギン酸（Ｄ）で置換されている。いくつかの実施形態において、配列番号９７のＮ４９に対応する位置は、アラニン（Ａ）で置換されている。いくつかの実施形態において、配列番号９７のＳ５１に対応する位置は、アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）で置換されている。いくつかの実施形態において、配列番号９７のＳ５１に対応する位置は、アラニン（Ａ）で置換されている。
いくつかの実施形態において、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントは、さらに異種ポリペプチドを含み、異種ポリペプチドは、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントと直接的または間接的に融合している。いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドは、ペプチドリンカーを介してＪ鎖またはその機能的フラグメントと融合している。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、５個以上２５個以下のアミノ酸を含む。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号９９）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１００）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０１）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０２）、またはＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０３）からなる。いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドは、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＮ末端、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＣ末端、あるいはＪ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＮ末端及びＣ末端の両方と融合している。
いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドは、多量体結合分子の吸収、分布、代謝、及び／または排泄（ＡＤＭＥ）に影響を及ぼし得る。いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドは抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドの抗原結合ドメインは、抗体またはその抗原結合フラグメントである。いくつかの実施形態において、抗原結合フラグメントは、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆｄフラグメント、Ｆｖフラグメント、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）フラグメント、またはこれらの任意の組合せを含む。いくつかの実施形態において、抗原結合フラグメントはｓｃＦｖフラグメントである。
いくつかの実施形態において、組合せ治療薬の投与は、抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体、あるいはがん治療薬の単独の投与に比べて増強された治療効果をもたらす。いくつかの実施形態において、増強された治療効果は、腫瘍成長速度の低下、腫瘍退縮、または生存期間の延長を含む。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。
図１Ａ～１Ｄは、インビトロでＭＯＬＭ１３細胞（図１Ａ）、ＭＶ４１１細胞（図１Ｂ）、ＨＴ１０８０細胞（図１Ｃ）、または初代ヒト肝細胞（図１Ｄ）に適用した一連の用量のＭａｂ Ａとドキソルビシンの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示しており、谷は拮抗作用を反映し、山は相乗作用を表す。 図１－１の説明を参照。 図１－１の説明を参照。 図２Ａ～２Ｉは、インビトロでＮＣＩＨ４６０細胞（図２Ａ）、ＮＣＩＨ２２２８細胞（図２Ｂ）、ＮＣＩＮ８７細胞（図２Ｃ）、ＰＡＮＣ１細胞（図２Ｄ）、初代ヒト肝細胞（図２Ｅ）、ＳＮＵ５細胞（図２Ｆ）、ＮＵＣＧ４細胞（図２Ｇ）、ＡＳＰＣ１細胞（図２Ｈ）、またはＢＸＰＣ３細胞（図２Ｉ）に適用した一連の用量のＭａｂ Ａとパクリタキセルの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示しており、谷は拮抗作用を反映し、山は相乗作用を表す。 図２－１の説明を参照。 図２－１の説明を参照。 図２－１の説明を参照。 図２－１の説明を参照。 図３Ａ～３Ｅは、インビトロでＮＣＩＨ４６０細胞（図３Ａ）、ＮＣＩＨ２２２８細胞（図３Ｂ）、ＮＣＩＮ８７細胞（図３Ｃ）、ＮＵＧＣ４細胞（図３Ｄ）、またはＳＮＵ５細胞（図３Ｅ）に適用した一連の用量のＭａｂ Ａとカルボプラチンの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示しており、谷は拮抗作用を反映し、山は相乗作用を表す。 図３－１の説明を参照。 図３－１の説明を参照。 図４Ａ～４Ｈは、インビトロでＮＵＧＣ４細胞（図４Ａ）、ＮＣＩＮ８７細胞（図４Ｂ）、ＳＮＵ５細胞（図４Ｃ）、ＮＣＩＨ５０８細胞（図４Ｄ）、ＨＣＴ１５細胞（図４Ｅ）、ＨＴ５５細胞（図４Ｆ）、ＮＣＩ－Ｈ２２２８細胞（図４Ｇ）、または初代ヒト肝細胞（図４Ｈ）に適用した一連の用量のＭａｂ Ａとドキソルビシンの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示しており、谷は拮抗作用を反映し、山は相乗作用を表す。 図４－１の説明を参照。 図４－１の説明を参照。 図４－１の説明を参照。 図５Ａ、５Ｃ、５Ｅ、５Ｇ、および５Ｉは、Ｍａｂ Ａ及び／または放射線（図５Ａ）、オキサリプラチン（図５Ｃ）、パクリタキセル（図５Ｅ）、イリノテカン（図５Ｇ）、もしくはＡＢＴ－１９９（図５Ｉ）で処置したマウスの経時的な腫瘍体積を示す。図５Ｂ、５Ｄ、５Ｆ、５Ｈ、および５Ｊは、Ｍａｂ Ａ及び／または放射線（図５Ｂ）、オキサリプラチン（図５Ｄ）、パクリタキセル（図５Ｆ）、イリノテカン（図５Ｈ）、もしくはＡＢＴ－１９９（図５Ｊ）で処置したマウスの経時的な生存を示す。 図５－１の説明を参照。 図５－１の説明を参照。 図６Ａ～６Ｂは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞における単剤のＭａｂ Ａ（Ａ）またはＳＭＡＣ模倣薬（Ｂ）の細胞生存率曲線を示す。 ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞におけるＭａｂ Ａとビリナパントの組合せの細胞生存率曲線を示す。 初代ヒト肝細胞におけるＭａｂ Ａとビリナパントの組合せの細胞生存率曲線を示す。 ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞におけるＭａｂ ＡとＧＤＣ－０１５２の組合せの細胞生存率曲線を示す。 初代ヒト肝細胞におけるＭａｂ ＡとＧＤＣ－０１５２との組合せの細胞生存率曲線を示す。 図９Ａ～９Ｂは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞に適用した一連の用量のＭａｂ Ａとビリナパント（Ａ）またはＧＤＣ－０１５２（Ｂ）との組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１０Ａ～１０Ｂは、ＤＲ５アゴニスト耐性腫瘍細胞における単剤のビリナパント（Ａ）またはＧＤＣ－０１５２（Ｂ）の細胞生存率曲線を示す。 図１１Ａ～１１Ｂは、ＤＲ５アゴニスト耐性腫瘍細胞におけるＭａｂ Ａとビリナパント（Ａ）またはＧＤＣ－０１５２（Ｂ）との組合せの細胞生存率曲線を示す。 図１２Ａ～１２Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ単独（図１２Ａ）、イブルチニブ単独（図１２Ｂ）、またはＭａｂ Ａ及びイブルチニブ（図１２Ｃ）で処置したＵ－９３７細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１２Ｄは、Ｕ－９３７細胞における一連の用量のＭａｂ Ａとイブルチニブの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１３Ａ～１３Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ単独（図１３Ａ）、イブルチニブ単独（図１３Ｂ）、またはＭａｂ Ａ及びイブルチニブ（図１３Ｃ）で処置したＯＣＩ－ＬＹ７細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１３Ｄは、ＯＣＩ－ＬＹ７細胞における一連の用量のＭａｂ Ａとイブルチニブの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１４Ａ～１４Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ単独（図１４Ａ）、イデラリシブ単独（図１４Ｂ）、またはＭａｂ Ａ及びイデラリシブ（図１４Ｃ）で処置したＤＯＨＨ－２細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１４Ｄは、ＤＯＨＨ－２細胞における一連の用量のＭａｂ Ａとイデラリシブの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１５Ａ～１５Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ単独（図１５Ａ）、ＭＩＫ６６５単独（図１５Ｂ）、またはＭａｂ Ａ及びＭＩＫ６６５（図１５Ｃ）で処置したＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１５Ｄは、ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞における一連の用量のＭａｂ ＡとＭＩＫ６６５の組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１６Ａ～１６Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ単独（図１６Ａ）、ＭＩＫ６６５単独（図１６Ｂ）、またはＭａｂ Ａ及びＭＩＫ６６５（図１６Ｃ）で処置したＵ－９３７細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１６Ｄは、Ｕ－９３７細胞における一連の用量のＭａｂ ＡとＭＩＫ６６５の組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１７Ａ～１７Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ単独（図１７Ａ）、ビンクリスチン単独（図１７Ｂ）、またはＭａｂ Ａ及びビンクリスチン（図１７Ｃ）で処置したＵ－９３７細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１７Ｄは、Ｕ－９３７細胞における一連の用量のＭａｂ Ａとビンクリスチンの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１８Ａ～１８Ｄは、様々な濃度のＭａｂ Ａ及びイブルチニブ（Ａ）、Ｍａｂ Ａ及びイデラリシブ（Ｂ）、Ｍａｂ Ａ及びＭＩＫ６６５（Ｃ）、またはＭａｂ Ａ及びビンクリスチン（Ｄ）で処置したヒト肝細胞の細胞生存率曲線を示す。 図１９Ａ、図１９Ｃ、図１９Ｅ、図１９Ｇ、図１９Ｉ、図１９Ｋ、図１９Ｍ、図１９Ｏ、図１９Ｑ、図１９Ｓ、図１９Ｕ、図１９Ｗ、図１９Ｙ、図１９ＡＡ、図１９ＡＣ、および図１９ＡＥは、様々な濃度のＭａｂ Ａ及びビリナパントで処置したＡ２０５８（図１９Ａ）、ＢＴ－２０（図１９Ｃ）、ＤＶ－９０（図１９Ｅ）、ＥＳ－２（図１９Ｇ）、ＨＣＣ１５（図１９Ｉ）、ＨＣＴ１１６（図１９Ｋ）、ＨＴ１０８０（図１９Ｍ）、ＫＹＳＥ４１０（図１９Ｏ）、ＭＥＷＯ（図１９Ｑ）、ＯＶＣＡＲ－５（図１９Ｓ）、ＳＫ－ＬＵ－１（図１９Ｕ）、ＳＫ－ＭＥＬ－５（図１９Ｗ）、ＳＮＵ－１（図１９Ｙ）、ＳＷ７８０（図１９ＡＡ）、ＳＷ１３５３（図１９ＡＣ）、およびＴ２４（図１９ＡＥ）細胞の細胞生存率曲線を示す。図１９Ｂ、図１９Ｄ、図１９Ｆ、図１９Ｈ、図１９Ｊ、図１９Ｌ、図１９Ｎ、図１９Ｐ、図１９Ｒ、図１９Ｔ、図１９Ｖ、図１９Ｘ、図１９Ｚ、図１９ＡＢ、図１９ＡＤ、および図１９ＡＦは、Ａ２０５８（図１９Ｂ）、ＢＴ－２０（図１９Ｄ）、ＤＶ－９０（図１９Ｆ）、ＥＳ－２（図１９Ｈ）、ＨＣＣ１５（図１９Ｊ）、ＨＣＴ１１６（図１９Ｌ）、ＨＴ１０８０（図１９Ｎ）、ＫＹＳＥ４１０（図１９Ｐ）、ＭＥＷＯ（図１９Ｒ）、ＯＶＣＡＲ－５（図１９Ｔ）、ＳＫ－ＬＵ－１（図１９Ｖ）、ＳＫ－ＭＥＬ－５（図１９Ｘ）、ＳＮＵ－１（図１９Ｚ）、ＳＷ７８０（図１９ＡＢ）、ＳＷ１３５３（図１９ＡＤ）、およびＴ２４（図１９ＡＦ）細胞における一連の用量のＭａｂ Ａとビリナパントの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図１９－１の説明を参照。 図２０Ａは、ビヒクル、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ、ビリナパント、Ｍａｂ Ｂ ＩｇＧ、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ＋ビリナパント、またはＭａｂ Ｂ ＩｇＧ＋ビリナパントで処置したマウスにおける２６日目までの経時的なＭＤＡ－ＭＢ－２３１ ＴＮＢＣ腫瘍体積を示す。図２０Ｂは、ビヒクル、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ、ビリナパント、Ｍａｂ Ｂ ＩｇＧ、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ＋ビリナパント、またはＭａｂ Ｂ ＩｇＧ＋ビリナパントで処置したマウスにおける５４日目までの経時的な腫瘍体積を示す。図２０Ｃは、ビヒクル、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ、ビリナパント、Ｍａｂ Ｂ ＩｇＧ、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ＋ビリナパント、またはＭａｂ Ｂ ＩｇＧ＋ビリナパントで処置したマウスにおける経時的な生存率を示す。 図２１Ａ～２１Ｄは、ＥＢＣ－１ ＮＳＣＬＣモデル（Ａ）、ＨＴ－１０８０線維肉腫モデル（Ｂ）、ＨＣＴ１１６結腸直腸癌モデル（Ｃ）、またはＳＡ３８４０骨肉腫ＰＤＸモデル（Ｄ）において、ビヒクル、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ、ビリナパント、またはＭａｂ Ａ ＩｇＭ＋ビリナパントで処置したマウスにおける経時的な腫瘍体積を示す。 図２２Ａおよび２２Ｃは、様々な濃度のＭａｂ Ａ及びビリナパントで処置したＤｅｔｒｏｉｔ５６２（図２２Ａ）およびＫＹＳＥ２７０（図２２Ｃ）細胞の細胞生存率曲線を示す。図２２Ｂおよび２２Ｄは、Ｄｅｔｒｏｉｔ５６２（図２２Ｂ）およびＫＹＳＥ２７０（図２２Ｄ）細胞における一連の用量のＭａｂ Ａとビリナパントの組合せから得られた相乗作用スコアの３Ｄ表面プロットを示す。 図２２－１の説明を参照。 図２３Ａ～２３Ｄは、様々な濃度のＭａｂ Ａ及びＡＰＧ－１３８７（Ａ）、ビリナパント（Ｂ）、ＡＳＴＸ６６０（Ｃ）、またはＤｅｂｉｏ１１４３（Ｄ）で処置したＥＢＣ－１細胞の細胞生存率曲線を示す。 図２４Ａは、ビヒクル、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ、ベバシズマブ、またはＭａｂ Ａ ＩｇＭ＋ベバシズマブで処置したマウスにおける経時的なＣｏｌｏ２０５腫瘍体積を示す。図２４Ｂは、ビヒクル、Ｍａｂ Ａ ＩｇＭ、ベバシズマブ、またはＭａｂ Ａ ＩｇＭ＋ベバシズマブで処置したマウスにおける経時的な生存率を示す。
詳細な説明
定義
本明細書で使用する場合、「１つの」（「ａ」または「ａｎ」）実体という用語は、１つまたは複数のその実体を指す。例えば、「１つの結合分子」は、１つ以上の結合分子を表すように理解される。したがって、「１つの」（「ａ」または「ａｎ」）、「１つ以上」、及び「少なくとも１つ」という用語は、本明細書では互換的に使用することができる。
さらに、本明細書で使用する場合の「及び／または」は、他方を伴うまたは伴わない２つの指定された特色または構成要素を具体的に開示するものとして解釈するものとする。したがって、「及び／または」という用語は、「Ａ及び／またはＢ」のような表現で使用される場合、「Ａ及びＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独）、ならびに「Ｂ」（単独）を含むように意図されている。同様に、「及び／または」という用語は、「Ａ、Ｂ、及び／またはＣ」のような表現で使用される場合、以下の実施形態の各々を包含するように意図されている：Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；ならびにＣ（単独）。
別途定義されない限り、本明細書で使用する技術的用語及び科学的用語は、本開示が関連する技術分野の当業者によって一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。例えば、ｔｈｅ Ｃｏｎｃｉｓｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ－Ｓｈｏｗ，２ｎｄ ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ；Ｔｈｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；及びｔｈｅ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓは、本開示で使用されている用語の多くについての全般的辞書を当業者に提供する。
単位、接頭語、及び記号は、国際単位系（ＳＩ）で承認された形態で示される。数値範囲は、その範囲を画定する数字を含む。別途指示されない限り、アミノ酸配列はアミノからカルボキシの方向に左から右に記載される。本明細書で提供される見出しは、本明細書全体を参照することにより得られる、本開示の様々な実施形態または実施形態の制限ではない。したがって、すぐ後に定義される用語は、明細書全体を参照することによって、より十分に定義される。
本明細書で使用する場合、「ポリペプチド」という用語は、単数の「ポリペプチド」及び複数の「ポリペプチド」を包含するように意図されており、アミド結合（ペプチド結合の別名でも知られている）によって直線的に結合した単量体（アミノ酸）から構成される分子を指す。「ポリペプチド」という用語は、２個以上のアミノ酸からなる任意の鎖（１つまたは複数）を指し、特定の長さの生成物を指すわけではない。したがって、ペプチド、ジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、「タンパク質」、「アミノ酸鎖」、または２個以上のアミノ酸からなる鎖（１個または複数個）を指すために使用されるその他の用語は、「ポリペプチド」の定義に含まれ、「ポリペプチド」という用語は、これらのいずれかの用語の代わりに使用することができる。また、「ポリペプチド」という用語は、ポリペプチドの発現後修飾の産物を指すようにも意図されており、発現後修飾としては、限定されるものではないが、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、及び既知の保護／遮断基による誘導体化、タンパク質切断、または非天然アミノ酸による修飾が挙げられる。ポリペプチドは、生物学的供給源から誘導するか、または組換え技術によって産生することができるが、指定された核酸配列から必ずしも翻訳されるわけではない。ポリペプチドは、化学合成を含む任意の方法で生成することができる。
本明細書で開示されるポリペプチドのサイズは、約３アミノ酸以上、５アミノ酸以上、１０アミノ酸以上、２０アミノ酸以上、２５アミノ酸以上、５０アミノ酸以上、７５アミノ酸以上、１００アミノ酸以上、２００アミノ酸以上、５００アミノ酸以上、１，０００アミノ酸以上、または２，０００アミノ酸以上であり得る。ポリペプチドは定義された３次元構造を有し得るが、必ずしもこのような構造を有するわけではない。定義された３次元構造を有するポリペプチドは折り畳まれていると言われ、定義された３次元構造を有するのではなく、多数の異なる立体構造をとるポリペプチドは、折り畳まれていないと言われる。本明細書で使用する場合、糖タンパク質という用語は、アミノ酸（例えば、セリンまたはアスパラギン）の酸素含有側鎖または窒素含有側鎖を介してタンパク質に付着する少なくとも１個の炭水化物部分に結合したタンパク質を指す。
「単離された」ポリペプチドまたはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、その天然の環境内にあるのではないポリペプチドが意図されている。特定の精製レベルは要求されない。例えば、単離ポリペプチドは、そのネイティブまたは天然の環境から取り出すことができる。宿主細胞内で発現した組換え産生ポリペプチド及びタンパク質は、本明細書で開示される場合、単離されているとみなされ、任意の好適な技法によって分離、分画、または部分的もしくは実質的に精製されたネイティブまたは組換えポリペプチドであるとみなされる。合成により産生されたポリペプチドは単離されているとみなされ、このようなポリペプチドは任意の好適な技法によって分離、分画、または部分的もしくは実質的に精製されたものである。
本明細書で使用する場合、「非天然ポリペプチド」という用語またはその文法上の変化形は、「天然」であるもしくは「天然」であり得る、あるいは裁判官、または行政機関もしくは司法機関によって「天然」であると判定または解釈されるポリペプチドの形態を明示的に除外し、ただしこのような形態のみを除外する、条件付き定義である。
本明細書で開示される他のポリペプチドは、上記ポリペプチドのフラグメント、誘導体、類似体、またはバリアント、及びこれらの任意の組合せである。本明細書で開示される場合、「フラグメント」、「バリアント」、「誘導体」、及び「類似体」という用語は、対応するネイティブの抗体またはポリペプチドの少なくともいくつかの特性（例えば、ある抗原に対し特異的に結合する特性）を保持する任意のポリペプチドを含む。ポリペプチドのフラグメントとしては、例えば、本明細書の他の箇所で論じられている特異的抗体フラグメントに加えて、タンパク質分解フラグメント及び欠失フラグメントが挙げられる。バリアント、例えばポリペプチドのバリアントには、上述のフラグメントが含まれ、また、アミノ酸の置換、欠失、または挿入による改変アミノ酸配列を有するポリペプチドも含まれる。ある特定の実施形態において、バリアントは非天然であり得る。天然には存在しないバリアントは、当技術分野で公知の変異誘発技法を用いて産生することができる。バリアントポリペプチドは、保存的または非保存的なアミノ酸の置換、欠失、または付加を含んでもよい。誘導体は、元のポリペプチドには見られない追加的な特徴を示すように改変されたポリペプチドである。例としては、融合タンパク質が挙げられる。本明細書で使用する場合、ポリペプチドの「誘導体」は、官能性側鎖の反応によって化学的に誘導体化された１個以上のアミノ酸を有する主題ポリペプチドも指す。また、２０種の標準的なアミノ酸のうちの１種以上の誘導体を含有するポリペプチドも「誘導体」に含まれる。例えば、４－ヒドロキシプロリンはプロリンの代用とすることができ、５－ヒドロキシリジンはリジンの代用とすることができ、３－メチルヒスチジンはヒスチジンの代用とすることができ、ホモセリンはセリンの代用とすることができ、オルニチンはリジンの代用とすることができる。
「保存的アミノ酸置換」とは、あるアミノ酸が、同様の側鎖を有する別のアミノ酸に置換される置換である。塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、極性無電荷側鎖（例えば、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分岐側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）、及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を含めた同様の側鎖を有するアミノ酸のファミリーは当技術分野で定義されている。例えば、チロシンのフェニルアラニンへの置換は保存的置換である。ある特定の実施形態において、本開示のポリペプチド、結合分子、及び抗体の配列における保存的置換は、当該アミノ酸配列を含むポリペプチド、結合分子、または抗体が、ポリペプチド、結合分子、または抗体が結合する抗原に結合するのを抑止しない。抗原結合を排除しないヌクレオチド及びアミノ酸保存的置換を特定する方法は、当技術分野で周知されている（例えば、Ｂｒｕｍｍｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１１８０－１ １８７（１９９３）；Ｋｏｂａｙａｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．１２（１０）：８７９－８８４（１９９９）；及びＢｕｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：．４１２－４１７（１９９７）を参照）。
「ポリヌクレオチド」という用語は、単一の核酸及び複数の核酸を包含するように意図されており、単離された核酸分子またはコンストラクト、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、ｃＤＮＡ、またはプラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）を指す。ポリヌクレオチドは、従来的なホスホジエステル結合または従来的でない結合（例えば、ペプチド核酸（ＰＮＡ）に見られるようなアミド結合）を含むことができる。「核酸」または「核酸配列」という用語は、ポリヌクレオチド中に存在する任意の１個以上の核酸セグメント、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡフラグメントを指す。
「単離された」核酸またはポリヌクレオチドは、その本来の環境から分離されている任意の形態の核酸またはポリヌクレオチドが意図されている。例えば、ゲル精製されたポリヌクレオチド、またはベクターに含まれるポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドは、「単離された」とみなされる。また、クローニングのための制限部位を有するように操作されたポリヌクレオチドセグメント（例えば、ＰＣＲ産物）は、「単離された」とみなされる。単離されたポリヌクレオチドのさらなる例としては、異種宿主細胞中で維持された組換えポリヌクレオチド、または緩衝液もしくは生理食塩水などの非ネイティブ溶液中にある（部分的もしくは実質的に）精製されたポリヌクレオチドが挙げられる。単離されたＲＮＡ分子としては、自然界では見られない、ポリヌクレオチドのインビボまたはインビトロＲＮＡ転写物が挙げられる。単離されたポリヌクレオチドまたは核酸はさらに、合成により産生されたこのような分子を含む。加えて、ポリヌクレオチドまたは核酸は、プロモーター、リボソーム結合部位、または転写ターミネーターなどの制御エレメントであり得るか、またはこれを含み得る。合成により産生された核酸またはポリヌクレオチドは単離されているとみなされ、このような核酸またはポリヌクレオチドは、任意の好適な技法によって分離、分画、または部分的もしくは実質的に精製されたものである。
本明細書で使用する場合、「非天然ポリヌクレオチド」という用語またはその文法上の変化形は、「天然」であるもしくは「天然」であり得る、あるいは裁判官、または行政機関もしくは司法機関によって「天然」であると判定または解釈される核酸またはポリヌクレオチドの形態を明示的に除外し、ただしこのような形態のみを除外する、条件付き定義である。
本明細書中で使用される場合、「コード領域」は、アミノ酸に翻訳されるコドンからなる核酸の一部である。「ストップコドン」（ＴＡＧ、ＴＧＡ、またはＴＡＡ）はアミノ酸に翻訳されないものの、コード領域の一部とみなすことができる。ただし、任意の隣接する配列、例えば、プロモーター、リボソーム結合部位、転写ターミネーター、イントロンなどは、コード領域の一部ではない。２個以上のコード領域が、（例えば、単一のベクター上の）単一のポリヌクレオチドコンストラクト内に、または（例えば、別々の（異なる）ベクター上の）別々のポリヌクレオチドコンストラクト内に存在してもよい。さらに、任意のベクターは、単一のコード領域を含んでも２個以上のコード領域を含んでもよく、例えば、単一のベクターが、免疫グロブリン重鎖可変領域及び免疫グロブリン軽鎖可変領域を別々にコードしてもよい。加えて、ベクター、ポリヌクレオチド、または核酸は、別のコード領域と融合したまたは融合していない異種コード領域を含んでもよい。異種コード領域としては、限定されるものではないが、特化したエレメントまたはモチーフをコードする領域、例えば、分泌シグナルペプチドまたは異種機能的ドメインが挙げられる。
ある特定の実施形態において、ポリヌクレオチドまたは核酸はＤＮＡである。ＤＮＡの場合、ポリペプチドをコードする核酸を含むポリヌクレオチドは、通常、プロモーター及び／または、１個以上のコード領域と作用可能に会合した他の転写もしくは翻訳コントロールエレメントを含むことができる。作用可能な会合とは、遺伝子産物（例えば、ポリペプチド）のためのコード領域が、制御配列（複数可）の影響下またはコントロール下で遺伝子産物を発現させるような方法で１個以上の制御配列と会合している場合にいう。２個のＤＮＡフラグメント（例えば、ポリペプチドコード領域及びそれと会合しているプロモーター）は、プロモーター機能の誘発が所望の遺伝子産物をコードするｍＲＮＡの転写をもたらす場合、及び、２個のＤＮＡフラグメント間の結合の性質が、発現制御配列における遺伝子産物の発現を指示する能力を妨害しない、またはＤＮＡテンプレートにおける転写される能力を妨害しない場合、「作用可能に会合」している。したがって、プロモーター領域が、ポリペプチドをコードする核酸と作用可能に会合していると考えられるのは、当該プロモーターが当該核酸の転写に影響を及ぼすことができた場合である。プロモーターは、所定の細胞におけるＤＮＡの実質的な転写を指示する細胞特異的プロモーターであり得る。プロモーター以外の他の転写制御エレメント、例えばエンハンサー、オペレーター、リプレッサー、及び転写終結シグナルは、細胞特異的転写を指示するためにポリヌクレオチドと作用可能に会合している可能性がある。
様々な転写制御領域が当業者に知られている。このような領域としては、限定されるものではないが、脊椎動物細胞内で機能する転写コントロール領域、例えば、限定されるものではないが、サイトメガロウイルスからのプロモーター及びエンハンサーセグメント（最初期プロモーター、イントロンＡと連携）、シミアンウイルス４０（初期プロモーター）、ならびにレトロウイルス（例えば、ラウス肉腫ウイルス）が挙げられる。その他の転写コントロール領域としては、アクチン、ヒートショックタンパク質、ウシ成長ホルモン、及びウサギβグロビンなどの脊椎動物遺伝子由来のもの、ならびに真核細胞内で遺伝子発現をコントロール可能な他の配列が挙げられる。さらなる好適な転写コントロール領域としては、組織特異的プロモーター及びエンハンサー、ならびにリンホカイン誘発性プロモーター（例えば、インターフェロンまたはインターロイキンによって誘発可能なプロモーター）が挙げられる。
同様に、様々な翻訳コントロールエレメントが当業者に知られている。このようなエレメントとしては、限定されるものではないが、リボソーム結合部位、翻訳開始及び終止コドン、ならびにピコルナウイルスに由来するエレメント（特定的には、内部リボソーム進入部位またはＩＲＥＳ（ＣＩＴＥ配列とも呼ばれる））が挙げられる。
他の実施形態において、ポリヌクレオチドはＲＮＡであり得、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、トランスファーＲＮＡ、またはリボソームＲＮＡの形態をとるＲＮＡであり得る。
ポリヌクレオチド及び核酸コード領域は、本明細書で開示されるポリヌクレオチドがコードするポリペプチドの分泌を指示する分泌またはシグナルペプチドをコードするさらなるコード領域と関連づけられてもよい。シグナル仮説によれば、哺乳類細胞によって分泌されるタンパク質は、シグナルペプチドまたは分泌リーダー配列を有し、これは、粗面小胞体全体にわたる成長中タンパク質鎖の搬出が開始したときに成熟タンパク質から切断される。当業者は、脊椎動物細胞が分泌するポリペプチドが、ポリペプチドのＮ末端と融合したシグナルペプチドを有し得、このシグナルペプチドが完全なまたは「全長」のポリペプチドから切断されて、ポリペプチドの分泌または「成熟」形態をもたらすことを認識している。ある特定の実施形態において、ネイティブシグナルペプチド、例えば、免疫グロブリン重鎖または軽鎖シグナルペプチド、または、作用可能に会合したポリペプチドの分泌を指示する能力を保持するその配列の機能的誘導体が使用される。代替的に、異種哺乳類シグナルペプチドまたはその機能的誘導体を使用することができる。例えば、野生型リーダー配列は、ヒト組織プラスミノーゲン活性化因子（ＴＰＡ）またはマウスβ－グルクロニダーゼのリーダー配列で置換することができる。
本明細書で使用する場合、「ＤＲ５」または「ＴＲＡＩＬＲ２」という用語は、様々な細胞及び組織の表面で発現する腫瘍壊死因子膜貫通受容体タンパク質のファミリーのメンバーを指し、活性化すると細胞のアポトーシスを誘発することができる。
本明細書では、ＤＲ５に結合することにより細胞アポトーシスを誘発する、ある特定の結合分子またはその抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が開示される。フルサイズの抗体について明確に言及されない限り、「結合分子」という用語は、フルサイズの抗体に加えてそのような抗体の抗原結合サブユニット、フラグメント、バリアント、類似体、または誘導体を包含し、例えば、抗体分子と同様の方法で抗原に結合するが異なるスキャフォールドを使用する、操作された抗体分子またはフラグメントを包含する。結合分子が多量体結合分子、例えば、５量体もしくは６量体のＩｇＭ抗体または２量体のＩｇＡ抗体である場合、多量体のフラグメント、バリアント、または誘導体に言及したときのそのフラグメント、バリアント、または誘導体は引き続き多量体であることを理解されたい。
本明細書で使用する場合、「結合分子」という用語は、その最も広い意味において、受容体または標的（例えば、エピトープまたは抗原決定基）に特異的に結合する分子を指す。本明細書でさらに説明するように、結合分子は、１つ以上の「結合ドメイン」、例えば、本明細書に記載の「抗原結合ドメイン」を含むことができる。結合分子の非限定的な例は、抗原特異的結合を保持する、本明細書に詳細に記載されている抗体または抗体様分子である。ある特定の実施形態において、「結合分子」は、本明細書に詳細に記載されている抗体または抗体様または抗体由来分子を含む。
本明細書で使用する場合、「結合ドメイン」または「抗原結合ドメイン」（互換的に使用することができる）という用語は、標的（例えば、エピトープ、ポリペプチド、細胞、または器官）に特異的に結合するのに必要かつ十分である結合分子（例えば、抗体または抗体様または抗体由来分子）の領域を指す。例えば、「Ｆｖ」、例えば、抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、２つの別々のポリペプチドサブユニットとして、または１つの鎖として、「結合ドメイン」とみなされる。他の抗原結合ドメインとしては、限定されるものではないが、ラクダ種に由来する抗体の単一ドメイン重鎖可変領域（ＶＨＨ）、またはフィブロネクチンスキャフォールド内で発現する６個の免疫グロブリン相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。本明細書に記載の「結合分子」（例えば、「抗体」）は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２個、またはそれ以上の「抗原結合ドメイン」を含むことができる。
「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は、本明細書では互換的に使用することができる。抗体（または本明細書で開示されるそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体、例えばＩｇＭ様抗体）は、少なくとも重鎖の可変ドメイン（例えば、ラクダ種由来）または少なくとも重鎖及び軽鎖の可変ドメインを含む。脊椎動物系における基本的な免疫グロブリン構造は、比較的十分に理解されている。例えば、Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）を参照。別段の明記がない限り、「抗体」という用語は、抗体の小さな抗原結合フラグメントからフルサイズの抗体に至るまでの任意のもの、例えば、２個の完全な重鎖及び２個の完全な軽鎖を含むＩｇＧ抗体、４個の完全な重鎖と４個の完全な軽鎖を含み、Ｊ鎖及び／または分泌因子を含むＩｇＡ抗体、あるいは１０個または１２個の完全な重鎖及び１０個または１２個の完全な軽鎖を含み、任意選択でＪ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントを含むＩｇＭ由来結合分子（例えば、ＩｇＭ抗体またはＩｇＭ様抗体）を包含する。
「免疫グロブリン」という用語は、生化学的に区別することができる様々な広範なクラスのポリペプチドを含む。当業者は、重鎖が、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロン（γ、μ、α、δ、ε）及びそれらの間のいくつかのサブクラス（例えば、γ１～γ４またはα１～α２）に分類されることを理解している。この鎖の性質が、抗体の「アイソタイプ」をそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、またはＩｇＥとして決定する。免疫グロブリンのサブクラス（サブタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２などは、十分に特徴づけられており、機能的な特殊化をもたらすことが知られている。これらの免疫グロブリンのそれぞれの修飾バージョンは、本開示を考慮すれば当業者に容易に認識可能であり、したがって、これは本開示の範囲内である。
軽鎖は、カッパまたはラムダ（κ、λ）のいずれかに分類される。各重鎖クラスは、カッパ軽鎖またはラムダ軽鎖のいずれかと結合し得る。概して、軽鎖及び重鎖は互いに共有結合しており、免疫グロブリンが、例えば、ハイブリドーマ、Ｂ細胞、または遺伝子操作された宿主細胞によって発現したとき、２個の重鎖の「テール」部分は、共有結合的なジスルフィド結合または非共有結合によって互いに結合する。重鎖の場合、アミノ酸配列は、Ｙ配置の分岐した端部のＮ末端から各鎖の底部のＣ末端まで続く。ある特定の抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）の基本構造は、ジスルフィド結合により接続して「Ｙ」構造を形成する２個の重鎖サブユニット及び２個の軽鎖サブユニットを含み、本明細書においてこの構造は「Ｈ２Ｌ２構造」または「結合ユニット」とも呼ばれる。
「結合ユニット」という用語は、本明細書では、標準的な「Ｈ２Ｌ２」免疫グロブリン構造、すなわち２個の重鎖またはそのフラグメント及び２個の軽鎖またはそのフラグメントに対応する結合分子、例えば、抗体、抗体様分子、または抗体由来分子、これらの抗原結合フラグメント、またはこれらの多量体化フラグメントを指すために使用される。ある特定の実施形態において、例えば、結合分子が２価のＩｇＧ抗体またはその抗原結合フラグメントである場合、「結合分子」及び「結合ユニット」という用語は等価である。他の実施形態において、例えば、結合分子が「多量体結合分子」、例えば、２量体のＩｇＡ抗体、２量体のＩｇＡ様抗体、２量体のＩｇＡ由来結合分子、５量体もしくは６量体のＩｇＭ抗体、５量体もしくは６量体のＩｇＭ様抗体、５量体もしくは６量体のＩｇＭ由来結合分子、またはこれらの任意の誘導体である場合、結合分子は２個以上の「結合ユニット」を含む。ＩｇＡ ２量体の場合は２個、ＩｇＭ ５量体または６量体の場合はそれぞれ５個または６個である。結合ユニットは、全長抗体の重鎖及び軽鎖を含む必要はないが、典型的には２価であり、すなわち上記で定義のように、２個の「抗原結合ドメイン」を含むと考えられる。本明細書で使用する場合、本開示で提供されるある特定の結合分子は「２量体」であり、ＩｇＡ定常領域またはその多量体化フラグメントを含む２個の２価結合ユニットを含む。本開示で提供されるある特定の結合分子は、「５量体」または「６量体」であり、ＩｇＭ定常領域またはその多量体化フラグメントもしくはバリアントを含む５または６個の２価結合ユニットを含む。結合分子、例えば、２個以上（例えば、２、５、または６個）の結合ユニットを含む抗体もしくは抗体様分子または抗体由来結合分子は、本明細書では「多量体」と呼ばれる。
本明細書で使用する場合、「Ｊ鎖」という用語は、任意の動物種のＩｇＭもしくはＩｇＡ抗体のＪ鎖、その機能的フラグメント、その誘導体、及び／またはそのバリアントを指し、これには成熟ヒトＪ鎖が含まれ、そのアミノ酸配列は配列番号９７として提示される。本明細書では、様々なＪ鎖のバリアント及び修飾されたＪ鎖誘導体が開示される。当業者が認識するであろうように、「機能的フラグメント」または「機能的バリアント」には、ＩｇＭ重鎖定常領域と会合して５量体のＩｇＭ抗体を形成することができるフラグメント及びバリアントが含まれる。
「修飾されたＪ鎖」という用語は、本明細書では、異種部位（例えば、異種ポリペプチド、例えば、Ｊ鎖配列に導入されたまたは付着した外来の結合ドメインまたは機能的ドメイン）を含むＪ鎖ポリペプチドの誘導体を指すために使用される。導入は、異種ポリペプチドもしくは他の部分の直接的もしくは間接的な融合を含めた任意の手段により、またはペプチドもしくは化学的リンカーを介した付着により、達成することができる。「修飾されたヒトＪ鎖」という用語は、限定されるものではないが、異種部位（例えば異種ポリペプチド、例えば、外来の結合ドメイン）の導入によって修飾された、配列番号９７のアミノ酸配列を含むネイティブ配列ヒトＪ鎖、またはその機能的フラグメント、またはその機能的バリアントを包含する。ある特定の実施形態において、異種部位は、ＩｇＭの５量体への、またはＩｇＡの２量体への効率的な重合、及びこのような重合体の標的への結合を妨害しない。例示的な修飾されたＪ鎖は、例えば、米国特許第９，９５１，１３４号及び同第１０，４００，０３８号、ならびに米国特許出願公開第２０１９－０１８５５７０号及び同第２０１８－０２６５５９６号に見出すことができる（これらの各々は、その全体が参照により本明細書に援用される）。
本明細書で使用する場合、「ＩｇＭ由来結合分子」という用語は、抗体の抗原結合ドメインまたはそのサブユニット、及びその任意のフラグメント（例えば、多量体化フラグメント）、バリアント、または誘導体の代わりに非抗体の結合及び／または機能的ドメインを含む、ネイティブなＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、及び他のＩｇＭ由来結合分子を一括的に指す。
本明細書で使用する場合、「ＩｇＭ様抗体」という用語は、概して、例えばＪ鎖に関連して、６量体または５量体を形成する能力を依然保持するバリアント抗体または抗体由来結合分子を指す。ＩｇＭ様抗体または他のＩｇＭ由来結合分子は、典型的には、ＩｇＭ定常領域の少なくともＣμ４－ｔｐドメインを含むが、同じ種または異なる種からの他の抗体アイソタイプ（例えば、ＩｇＧ）からの重鎖定常領域ドメインを含んでもよい。ＩｇＭ様抗体または他のＩｇＭ由来結合分子は、ＩｇＭ様抗体が６量体及び／または５量体を形成可能である限りは、同様に１つ以上の定常領域が欠失した抗体フラグメントであることができる。したがって、ＩｇＭ様抗体または他のＩｇＭ由来結合分子は、例えばハイブリッドＩｇＭ／ＩｇＧ抗体であっても、ＩｇＭ抗体の「多量体化フラグメント」であってもよい。
本明細書で使用する場合、「ＩｇＡ由来結合分子」という用語は、抗体の抗原結合ドメインまたはそのサブユニット、及びその任意のフラグメント（例えば、多量体化フラグメント）、バリアント、または誘導体の代わりに非抗体の結合及び／または機能的ドメインを含む、ネイティブなＩｇＡ抗体、ＩｇＡ様抗体、及び他のＩｇＡ由来結合分子を一括的に指す。
本明細書で使用する場合、「ＩｇＡ様抗体」という用語は、概して、例えばＪ鎖に関連して、２量体を形成する能力を依然保持するバリアント抗体または抗体由来結合分子を指す。ＩｇＡ様抗体または他のＩｇＡ由来結合分子は、典型的には、ＩｇＡ定常領域の少なくともＣα３－ｔｐドメインを含むが、同じ種または異なる種からの他の抗体アイソタイプ（例えば、ＩｇＧ）からの重鎖定常領域ドメインを含んでもよい。ＩｇＡ様抗体または他のＩｇＡ由来結合分子は、ＩｇＡ様抗体が２量体を形成可能である限りは、同様に１つ以上の定常領域が欠失した抗体フラグメントであることができる。したがって、ＩｇＡ様抗体または他のＩｇＡ由来結合分子は、例えばハイブリッドＩｇＡ／ＩｇＧ抗体であっても、ＩｇＡ抗体の「多量体化フラグメント」であってもよい。
「価数」、「２価」、「多価」、及び文法的に等価の用語は、結合ドメインの数、例えば、所与の結合分子（例えば、抗体、抗体由来、もしくは抗体様分子）における、または所与の結合ユニットにおける抗原結合ドメインの数を指す。そのため、所与の結合分子（例えば、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、他のＩｇＭ由来結合分子、またはその多量体化フラグメント）に関する「２価」、「４価」、及び「６価」という用語は、それぞれ、２個の抗原結合ドメイン、４個の抗原結合ドメイン及び６個の抗原結合ドメインが存在することを意味する。典型的なＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子は、各結合ユニットが２価である場合、１０価または１２価を有し得る。２価または多価の結合分子（例えば、抗体または抗体由来分子）は、単一特異的である（すなわち、全ての抗原結合ドメインが同じである）場合もあれば、二重特異的または多重特異的である（例えば、２個以上の抗原結合ドメインが異なる場合、例えば、同じ抗原の異なるエピトープに結合するか、または完全に異なる抗原に結合する）場合もある。
「エピトープ」という用語は、抗体、抗体様、または抗体由来分子の抗原結合ドメインに特異的に結合可能な任意の分子決定基を含む。ある特定の実施形態において、エピトープは、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリル基、またはスルホニル基などの分子の化学的に活性な表面グルーピングを含むことができ、ある特定の実施形態においては、３次元構造特性、及びまたは特定の電荷特性を有することができる。エピトープとは、抗体の抗原結合ドメインによって結合される標的の領域である。
「標的」という用語は、結合分子、例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子によって結合され得る物質を含むように最も広い意味で使用される。標的は、例えば、ポリペプチド、核酸、炭水化物、脂質、または他の分子、またはこのような分子上の最小エピトープであり得る。さらに、「標的」は、例えば、結合分子（例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子）によって結合され得るエピトープを含む細胞、器官、または生物（例えば、動物、植物、微生物、もしくはウイルス）であってもよい。
抗体、抗体様、または抗体由来分子の軽鎖と重鎖は共に、構造的相同性及び機能的相同性の領域に分類される。「定常」及び「可変」という用語は、機能的に使用される。この点において、可変軽鎖（ＶＬ）部分及び可変重鎖（ＶＨ）部分両方の可変ドメインが、抗原の認識及び特異性を決定することが理解されよう。逆に、軽鎖の定常領域ドメイン（ＣＬ）及び重鎖の定常領域ドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、またはＣＨ４）は、分泌、経胎盤移動性、Ｆｃ受容体結合、補体結合などの生物学的特性を付与する。慣例により、定常領域ドメインのナンバリングは、定常領域ドメインが抗体の抗原結合部位またはアミノ末端からより遠位になるにつれて増加する。Ｎ末端側部分は可変領域であり、Ｃ末端側部分は定常領域であり、ＣＨ３（またはＣＨ４（例えば、ＩｇＭの場合））ドメイン及びＣＬドメインは実際に、それぞれ重鎖及び軽鎖のカルボキシ末端を含む。
「全長ＩｇＭ抗体重鎖」とは、Ｎ末端からＣ末端への方向に、抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、抗体重鎖定常ドメイン１（ＣＭ１またはＣμ１）、抗体重鎖定常ドメイン２（ＣＭ２またはＣμ２）、抗体重鎖定常ドメイン３（ＣＭ３またはＣμ３）、及びテールピースを含み得る抗体重鎖定常ドメイン４（ＣＭ４またはＣμ４）を含むポリペプチドである。
「全長ＩｇＡ抗体重鎖」とは、Ｎ末端からＣ末端への方向に、抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、抗体定常重鎖定常ドメイン１（ＣＡ１またはＣα１）、抗体重鎖定常ドメイン２（ＣＡ２またはＣα２）、及びテールピースを含み得る抗体重鎖定常ドメイン３（ＣＡ３またはＣα３）を含むポリペプチドである。
上記のように、可変領域（複数可）は、結合分子（例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子）が抗原上のエピトープを選択的に認識し、特異的に結合するのを可能にする。すなわち、結合分子（例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子）のＶＬドメイン及びＶＨドメイン、または相補性決定領域（ＣＤＲ）のサブセットは、抗原結合ドメインを形成するように結合する。より具体的には、抗原結合ドメインは、ＶＨ鎖及びＶＬ鎖の各々の３個のＣＤＲによって定義することができる。ある特定の抗体は、より大きな構造を形成する。例えば、ＩｇＡは、２個のＨ２Ｌ２結合ユニット及びジスルフィド結合を介して共有結合したＪ鎖を含む分子を形成することができ、この分子はさらに分泌因子と会合することができ、ＩｇＭは、５個または６個のＨ２Ｌ２結合ユニット及び、場合によっては、ジスルフィド結合を介して共有結合したＪ鎖を含む５量体または６量体の分子を形成することができる。
抗体の抗原結合ドメイン内に存在する６個の「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、短い非連続的なアミノ酸配列であり、抗体が水性環境内で３次元構成を呈するときに抗原結合ドメインを形成するように特異的に配置される。抗原結合ドメイン内の残りのアミノ酸は、「フレームワーク」領域と呼ばれ、より小さい分子間可変性を示す。フレームワーク領域は主としてβシート立体構造を採用し、ＣＤＲは、βシート構造を接続するループを形成し、このループは場合によってはβシート構造の一部を形成する。したがって、フレームワーク領域は、鎖間の非共有結合的相互作用によってＣＤＲを正しい方向に配置するスキャフォールドを形成するように作用する。配置されたＣＤＲによって形成された抗原結合ドメインは、免疫反応性抗原上のエピトープに対し相補的な表面を定義する。この相補的表面は、抗体がその同族エピトープに対し非共有結合的に結合するのを促進する。ＣＤＲ及びフレームワーク領域をそれぞれ構成するアミノ酸は、様々な異なる方法で定義されているため、任意の所与の重鎖または軽鎖可変領域が当業者によって容易に同定することができる（“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，”Ｋａｂａｔ，Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，（１９８３）；及びＣｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１－９１７（１９８７）を参照（これらの全体が参照により本明細書に援用される））。
当技術分野内で使用及び／または許容されている用語の定義が２つ以上存在する場合、本明細書で使用する用語の定義は、反対のことが明示的に述べられていない限り、このような意味全てを含むように意図されている。具体的な例は、重鎖ポリペプチドと軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内にある非連続的な抗原結合部位を説明するための「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）という用語の使用である。これらの特定の領域は、例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９８３）及びＣｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）によって説明されており、これらの文献は参照による本明細書に援用される。Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａＣＤＲの定義は、アミノ酸を互いに比較した場合のアミノ酸の重複またはサブセットを含む。それでも、抗体またはそのバリアントのＣＤＲに言及するためのいずれかの定義（または当業者に知られている他の定義）の適用は、別段の指示がない限り、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であるように意図されている。上記で引用した各参考文献によって定義されるＣＤＲを包含する適切なアミノ酸を、比較として以下の表１に示す。特定のＣＤＲを包含する正確な残基番号は、ＣＤＲの配列及びサイズに応じて異なる。当業者は、抗体の可変領域のアミノ酸配列を考慮して、どの残基が特定のＣＤＲを含むかを通例的に決定することができる。
（表１）ＣＤＲの定義
Figure 2023526224000002
＊表１中の全てのＣＤＲ定義のナンバリングは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（下記参照）によって示されるナンバリング慣例に従う。
また、抗体可変ドメインは、ＣＤＲを含めた可変領域セグメントを特定するために、例えば、ＩＭＧＴ情報システム（ｉｍｇｔドットｃｉｎｅｓドットｆｒ／）（ＩＭＧＴ（登録商標）／Ｖ－Ｑｕｅｓｔ）を用いて分析することもできる（例えば、Ｂｒｏｃｈｅｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ，３６：Ｗ５０３－５０８，２００８を参照）。
Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．は、任意の抗体に適用可能な可変ドメイン配列のためのナンバリングシステムも定義した。当業者は、配列そのものを上回る実験データに依存せずに、この「Ｋａｂａｔナンバリング」のシステムを明瞭に任意の可変ドメイン配列に割り当てることができる。本明細書で使用する場合、「Ｋａｂａｔナンバリング」とは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９８３）によって示されるナンバリングシステムを指す。ただし、Ｋａｂａｔナンバリングシステムの使用が明示的に述べられない限り、本開示における全てのアミノ酸配列について連続したナンバリングが使用される。
ヒトＩｇＭ定常ドメインのＫａｂａｔナンバリングシステムは、Ｋａｂａｔ，ｅｔ． ａｌ．“Ｔａｂｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ，Ｖ－Ｒｅｇｉｏｎｓ，Ｃ－Ｒｅｇｉｏｎｓ，Ｊ－Ｃｈａｉｎ，Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｆｏｒ Ａｎｔｉｇｅｎ，Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｓｕｒｆａｃｅ Ａｎｔｉｇｅｎｓ，β－２ Ｍｉｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ，Ｍａｊｏｒ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ａｎｔｉｇｅｎｓ，Ｔｈｙ－１，Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ，Ｃ－Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｔｈｙｍｏｐｏｉｅｔｉｎ，Ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ，Ｐｏｓｔ－ｇａｍｍａ Ｇｌｏｂｕｌｉｎ，α－２ Ｍａｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ， ａｎｄ Ｏｔｈｅｒ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（１９９１）に見出すことができる。ＩｇＭ定常領域は、連続的に（すなわち、定常領域の最初のアミノ酸でアミノ酸＃１開始、またはＫａｂａｔナンバリングスキームを使用することによって）ナンバリングすることができる。ヒトＩｇＭ定常領域の２つのアレルを連続的に（本明細書では配列番号９１（アレルＩＧＨＭ＊０３）及び配列番号９２（アレルＩＧＨＭ＊０４）として提示）及びＫａｂａｔシステムにより比較したものを以下に示す。下線で示されたアミノ酸残基は、Ｋａｂａｔシステムでは考慮されていない（下記の二重下線で示された「Ｘ」は、セリン（Ｓ）（配列番号９１）またはグリシン（Ｇ）（配列番号９２）であり得る）。

ＩｇＭ重鎖の連続的（配列番号９１または配列番号９２）／Ｋａｂａｔのナンバリングキー
Figure 2023526224000003
結合分子、例えば、抗体、抗体様、もしくは抗体由来分子、これらの抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体、及び／またはこれらの多量体フラグメントとしては、限定されるものではないが、ポリクローナル、モノクローナル、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体、１本鎖抗体、エピトープ結合フラグメント、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、及びＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖｓ、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、１本鎖抗体、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＬまたはＶＬドメインのいずれかを含むフラグメント、Ｆａｂ発現ライブラリーによって産生されたフラグメントが挙げられる。ＳｃＦｖ分子は当技術分野で知られており、例えば、米国特許第５，８９２，０１９号に記載されている。
「特異的に結合する」とは、概して、結合分子（例えば、抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体）が、抗原結合ドメインを介しエピトープに結合し、その結合が抗原結合ドメインとエピトープとの間に何らかの相補性を伴うことを意味する。この定義によれば、結合分子（例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子）が自らの抗原結合ドメインを介し、ランダムな無関係のエピトープに結合するよりも容易にあるエピトープに結合する場合、結合分子はそのエピトープに対し「特異的に結合する」と言われる。「特異性」という用語は、本明細書では、ある特定の結合分子がある特定のエピトープに結合する相対的親和性を称するために使用される。例えば、結合分子「Ａ」は、所与のエピトープにおいて結合分子「Ｂ」よりも高い特異性を有するとみなすことができ、または結合分子「Ａ」は、関連するエピトープ「Ｄ」に対するよりも高い特異性でエピトープ「Ｃ」に結合すると言うことができる。
結合分子、例えば、本明細書で開示される抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、標的抗原に対し、５×１０－２秒－１、１０－２秒－１、５×１０－３秒－１、１０－３秒－１、５×１０－４秒－１、１０－４秒－１、５×１０－５秒－１、または１０－５秒－１、５×１０－６秒－１、１０－６秒－１、５×１０－７秒－１、または１０－７秒－１以下のオフレート（ｋ（ｏｆｆ））で結合すると言うことができる。
結合分子、例えば、本明細書で開示される抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、標的抗原に対し、１０３Ｍ－１秒－１、５×１０３Ｍ－１秒－１、１０４Ｍ－１秒－１、５×１０４Ｍ－１秒－１、１０５Ｍ－１秒－１、５×１０５Ｍ－１秒－１、１０６Ｍ－１秒－１、または５×１０６Ｍ－１秒－１、または１０７Ｍ－１秒－１以上のオンレート（ｋ（ｏｎ））で結合すると言うことができる。
結合分子、例えば、抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、参照抗体または抗原結合フラグメントの所与のエピトープとの結合をある程度遮断する範囲において、そのエピトープに優先的に結合する場合、参照抗体または抗原結合フラグメントのそのエピトープとの結合を競合的に阻害すると言われる。競合的阻害は、当技術分野で公知の任意の方法、例えば、競合ＥＬＩＳＡアッセイによって測定することができる。結合分子は、参照抗体または抗原結合フラグメントの所与のエピトープとの結合を少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％競合的に阻害すると言うことができる。
本明細書で使用する場合、「親和性」という用語は、個々のエピトープにおける、１個以上の結合ドメイン（例えば、免疫グロブリン分子の抗原結合ドメイン）との結合の強さの尺度を指す。例えば、Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）の２７～２８ページを参照。本明細書で使用する場合、「アビディティー」という用語は、抗原結合ドメイン集団と抗原との間における複合体の全体的安定性を指す。例えば、Ｈａｒｌｏｗの２９～３４ページを参照。アビディティーは、集団内の個々の抗原結合ドメインにおける特定のエピトープとの親和性と、さらに免疫グロブリン及び抗原の結合価との両方に関連する。例えば、２価のモノクローナル抗体と、高度に反復するエピトープ構造（例えば、ポリマー）との間の相互作用は、高いアビディティーの１つと考えられる。２価のモノクローナル抗体と、細胞表面に高密度で存在する受容体との間の相互作用も、高いアビディティーを有すると考えられる。
本明細書で開示される結合分子（例えば、抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体）は、その交差反応性の観点からも説明または特定することができる。本明細書で使用する場合、「交差反応性」という用語は、ある抗原に特異的な結合分子（例えば、抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体）が第２の抗原と反応する能力を指し、２つの異なる抗原物質間の関連性の尺度である。したがって、結合分子は、その形成を誘発したもの以外のエピトープに結合する場合、交差反応性である。交差反応性エピトープは、概して、誘発性エピトープと同じ相補的な構造的特徴の多くを含み、場合によっては、実際に元のエピトープよりも良好に適合する。
結合分子、例えば、抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、抗原に対するその結合親和性の観点からも説明または特定することができる。例えば、結合分子は、解離定数すなわちＫＤが５×１０－２Ｍ、１０－２Ｍ、５×１０－３Ｍ、１０－３Ｍ、５×１０－４Ｍ、１０－４Ｍ、５×１０－５Ｍ、１０－５Ｍ、５×１０－６Ｍ、１０－６Ｍ、５×１０－７Ｍ、１０－７Ｍ、５×１０－８Ｍ、１０－８Ｍ、５×１０－９Ｍ、１０－９Ｍ、５×１０－１０Ｍ、１０－１０Ｍ、５×１０－１１Ｍ、１０－１１Ｍ、５×１０－１２Ｍ、１０－１２Ｍ、５×１０－１３Ｍ、１０－１３Ｍ、５×１０－１４Ｍ、１０－１４Ｍ、５×１０－１５Ｍ、または１０－１５Ｍ以下で抗原に結合することができる。
１本鎖抗体または他の抗原結合ドメインを含めた「抗原結合抗体フラグメント」は、単独で存在する場合も、ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、もしくはＣＨ４ドメイン、Ｊ鎖、または分泌因子のうちの１つ以上と組み合わせて存在する場合もある。また、可変領域（複数可）と、ヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、もしくはＣＨ４ドメイン、Ｊ鎖、または分泌因子のうちの１つ以上との任意の組合せを含むことができる抗原結合フラグメントも含まれる。結合分子、例えば、抗体またはその抗原結合フラグメントは、鳥及び哺乳類を含めた任意の動物起源からのものとすることができる。抗体は、ヒト、マウス、ロバ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、リャマ、ウマ、またはニワトリの抗体であり得る。別の実施形態において、可変領域は、（例えば、サメからの）コンドリコイド起源であり得る。本明細書で使用する場合、「ヒト」抗体は、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体を含み、また、ヒト免疫グロブリンライブラリーから、または１つ以上のヒト免疫グロブリンに対しトランスジェニックな動物から単離された抗体を含み、後述のように、及び例えばＫｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ ｅｔ ａｌ．による米国特許第５，９３９，５９８号で説明されているように、場合によっては内在的免疫グロブリンを発現することがあり、また発現しないこともある。本開示の実施形態に従えば、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子は、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子が多量体（例えば、６量体もしくは５量体）を形成できる限り、抗体の抗原結合フラグメント（例えば、ｓｃＦｖフラグメント）を含むことができ、本明細書で提供されるＩｇＡ様抗体、または他のＩｇＡ由来結合分子は、ＩｇＡ抗体、ＩｇＡ様抗体、または他のＩｇＡ由来結合分子が多量体（例えば、二量体）を形成できる限り、抗体の抗原結合フラグメント（例えば、ｓｃＦｖフラグメント）を含むことができる。本明細書で使用される場合、このようなフラグメントは「多量体化フラグメント」を含む。
本明細書で使用する場合、「重鎖サブユニット」という用語は、免疫グロブリン重鎖に由来するアミノ酸配列を含み、結合分子（例えば、重鎖サブユニットを含む抗体、抗体様、または抗体由来分子）は、ＶＨドメイン、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ（例えば、上部、中部、及び／または下部ヒンジ領域）ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、ＣＨ４ドメイン、またはこれらのバリアントもしくはフラグメントのうちの少なくとも１個を含むことができる。例えば、結合分子（例えば、抗体、抗体様、もしくは抗体由来分子、またはこれらのフラグメント（例えば、多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体））は、限定されるものではないが、ＶＨドメインに加えて、ＣＨ１ドメイン；ＣＨ１ドメイン、ヒンジ、及びＣＨ２ドメイン；ＣＨ１ドメイン及びＣＨ３ドメイン；ＣＨ１ドメイン、ヒンジ、及びＣＨ３ドメイン；またはＣＨ１ドメイン、ヒンジドメイン、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメインを含むことができる。ある特定の実施形態において、結合分子（例えば、抗体、抗体様、もしくは抗体由来分子、またはこれらのフラグメント（例えば、多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体））は、ＶＨドメインに加えて、ＣＨ３ドメイン及びＣＨ４；またはＣＨ３ドメイン、ＣＨ４ドメイン、及びＪ鎖を含むことができる。さらに、本開示で使用するための結合分子（例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子）は、ある特定の定常領域部分、例えば、ＣＨ２ドメインの全部または一部が欠如してもよい。当業者は、このようなドメイン（例えば、重鎖サブユニット）が、元の免疫グロブリン分子とはアミノ酸配列が異なるように修飾されてもよいことを理解するであろう。本開示の実施形態によれば、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子は、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子が多量体（例えば、６量体または５量体）を形成できるようにするのに十分なＩｇＭ重鎖定常領域部分を含む。本明細書で使用される場合、このようなフラグメントは「多量体化フラグメント」を含む。
本明細書で使用する場合、「軽鎖サブユニット」という用語は、免疫グロブリン軽鎖に由来するアミノ酸配列を含む。軽鎖サブユニットは少なくともＶＬを含み、さらに、ＣＬ（例えば、ＣκまたはＣλ）ドメインを含んでもよい。
結合分子（例えば、抗体、抗体様、抗体由来分子、これらの抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体、またはこれらの多量体化フラグメント）は、結合分子が認識または特異的に結合する標的（例えば、標的抗原）のエピトープ（複数可）または一部（複数可）の観点から説明または特定することができる。抗体の抗原結合ドメインと特異的に相互作用する標的抗原の一部は、「エピトープ」または「抗原決定基」である。標的抗原は、単一のエピトープまたは少なくとも２個のエピトープを含むことができ、抗原のサイズ、立体構造、及びタイプに応じて、任意の数のエピトープを含むことができる。
本明細書中で使用する場合、「ジスルフィド結合」という用語は、（例えば、ポリペプチドのシステイン残基内の）２個の硫黄原子間に形成された共有結合を含む。アミノ酸システインはチオール基を含み、このチオール基によって第２のチオール基とのジスルフィド結合または架橋が形成され得る。ジスルフィド結合は、「鎖内」、すなわち、単一のポリペプチドまたはポリペプチドサブユニット内のシステイン残基を結合する場合もあれば、「鎖間」、すなわち、２つの別々のポリペプチドサブユニット、例えば、抗体重鎖及び抗体軽鎖、抗体重鎖同士、またはＩｇＭもしくはＩｇＡ抗体重鎖定常領域及びＪ鎖を結合する場合もある。
本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」という用語は、免疫反応性領域または部位が第１の種から得られるかまたはそれに由来し、定常領域（インタクト、部分的、または修飾されたものであり得る）が第２の種から得られる抗体を指す。いくつかの実施形態において、標的結合領域または部位は、非ヒト供給源（例えば、マウスまたは霊長類）に由来し、定常領域はヒトのものである。
「多重特異性抗体」または「二重特異性抗体」という用語は、単一の抗体分子内の、２個以上の異なるエピトープに対する抗原結合ドメインを有する抗体、抗体様、または抗体由来分子を指す。カノニカルな抗体構造に追加される他の結合分子は、２つの結合特異性を用いて構築され得る。二重特異的または多重特異的抗体によるエピトープ結合は、同時であっても経時的であってもよい。トリオーマ及びハイブリッドハイブリドーマは、二重特異的抗体を分泌することができる細胞株の２つの例である。二重特異的抗体は、組換え手段によって構築することもできる（Ｓｔｒｏｈｌｅｉｎ ａｎｄ Ｈｅｉｓｓ，Ｆｕｔｕｒｅ Ｏｎｃｏｌ．６：１３８７－９４（２０１０）；Ｍａｂｒｙ ａｎｄ Ｓｎａｖｅｌｙ，ＩＤｒｕｇｓ．１３：５４３－９（２０１０））。二重特異的抗体はダイアボディでもあってもよい。
本明細書で使用する場合、「操作された抗体」という用語は、可変ドメイン、定常領域、及び／またはＪ鎖が、１個以上のアミノ酸の少なくとも部分的な置換えによって改変されている抗体を指す。ある特定の実施形態において、既知の特異性を有する抗体からの全体のＣＤＲを異種抗体のフレームワーク領域に移植することができる。代替的ＣＤＲは、フレームワーク領域が由来する抗体と同じクラスに由来するか、またはサブクラスの抗体であっても由来することができるが、ＣＤＲは、異なるクラスの抗体、例えば異なる種からの抗体に由来することもできる。既知の特異性を有する非ヒト抗体からの１つ以上の「ドナー」ＣＤＲがヒト重鎖または軽鎖フレームワーク領域に移植される操作された抗体は、本明細書では「ヒト化抗体」と呼ばれる。ある特定の実施形態において、全てのＣＤＲがドナー可変領域からの完全なＣＤＲで置き換えられるわけではないが、それでもドナーの抗原結合能力をレシピエントの可変ドメインに移行させることができる。例えば、第５，５８５，０８９号、第５，６９３，７６１号、第５，６９３，７６２号、及び第６，１８０，３７０号に記載の説明を考慮すれば、これは十分に当業者の技能範囲内であり、通例の実験を行うことにより、または試行錯誤試験により、機能的な操作された抗体またはヒト化抗体が得られる。
本明細書で使用する場合、「操作された」という用語は、合成手段（例えば、組換え技術、インビトロペプチド合成、ペプチド、核酸、もしくはグリカンの酵素的もしくは化学的カップリング、またはこれらの技法の何らかの組合せ）による核酸またはポリペプチド分子の操作を含む。
本明細書で使用する場合、「結合した」、「融合した」、もしくは「融合」という用語、または他の文法上の等価物は、互換的に使用することができる。これらの用語は、化学的結合体化または組換え手段を含めた任意の手段により、２つ以上のエレメントまたは要素が共に連結することを指す。「インフレーム融合」とは、２つ以上のポリヌクレオチドオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）が連結して、元のＯＲＦの翻訳リーディングフレームを維持する方式で、連続的なより長いＯＲＦを形成することを指す。したがって、組換え融合タンパク質は、元のＯＲＦによってコードされたポリペプチドに対応する２つ以上のセグメントを含む単一のタンパク質である（これらのセグメントは、自然界では通常そのように連結されることはない）。リーディングフレームは、融合したセグメント全体にわたってこのように連続的に作製されるものの、セグメントは、例えば、インフレームリンカー配列によって、物理的または空間的に分離することができる。例えば、免疫グロブリン可変領域のＣＤＲをコードするポリヌクレオチドは、インフレームで融合することができるが、「融合」ＣＤＲが連続的なポリペプチドの一部として同時翻訳される限り、少なくとも１個の免疫グロブリンフレームワーク領域または追加のＣＤＲ領域をコードするポリヌクレオチドによって分離することができる。
本明細書で使用する場合、「架橋」という用語は、第３の分子によって２個以上の分子を一緒に連結することを指す。例えば、同じ抗原に特異的に結合する２つの結合ドメインを有する２価の抗体は、例えば、細胞上で発現するときに、その抗原の２つのコピーを「架橋」することができる。ＤＲ５を含めた多くのＴＮＦスーパーファミリー受容体タンパク質は、活性化のために細胞表面の３つ以上の受容体の架橋を必要とする。ＤＲ５タンパク質の架橋とは、例えば、本明細書に開示される結合分子を、細胞表面で発現したＤＲ５に接触させて、少なくとも３個のＤＲ５単量体が１個以上の結合分子によって同時に結合するようにし、それにより受容体を活性化させることを意味する。
ポリペプチドの文脈において、「線状配列」または「配列」とは、アミノ末端からカルボキシル末端への方向におけるポリペプチド内のアミノ酸の順序であり、配列内で隣り合ったアミノ酸は、ポリペプチドの一次構造内で連続している。ポリペプチドの別の一部に対し「アミノ末端側」または「Ｎ末端側」であるポリペプチドの一部は、連続したポリペプチド鎖内で先に現れる一部である。同様に、ポリペプチドの別の一部に対し「カルボキシ末端側」または「Ｃ末端側」であるポリペプチドの一部は、連続したポリペプチド鎖内で後に現れる一部分である。例えば、典型的な抗体において、可変ドメインは定常領域に対し「Ｎ末端側」であり、定常領域は可変ドメインに対し「Ｃ末端側」である。
本明細書で使用する場合、「発現」という用語は、遺伝子が生化学物質、例えばポリペプチドを生成するプロセスを指す。このプロセスは、細胞内における遺伝子の機能的存在の任意の顕在化を含み、これには、限定されるものではないが、遺伝子ノックダウンならびに一過性発現及び安定性発現の両方が含まれる。これには、限定されるものではないが、ＲＮＡ（例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ））への遺伝子転写、及びポリペプチド（複数可）へのこのようなｍＲＮＡの翻訳が含まれる。最終的所望産物が生化学物質である場合、発現にはその生化学物質及び任意の前駆体の創出が含まれる。遺伝子の発現は「遺伝子産物」をもたらす。本明細書で使用する場合、遺伝子産物は、核酸（例えば、遺伝子の転写によって生成されるメッセンジャーＲＮＡ）、または転写物から翻訳されるポリペプチドのいずれかであり得る。本明細書に記載される遺伝子産物にはさらに、転写後修飾（例えば、ポリアデニル化）を伴う核酸、または翻訳後修飾（例えば、メチル化、グリコシル化、脂質の付加、他のタンパク質サブユニットとの会合、タンパク質分解切断など）を伴うポリペプチドが含まれる。
本明細書で使用する場合、「がん」及び「がん性」とは、細胞集団が非制御性の細胞成長によって特徴づけられる、哺乳類における生理的状態を指すか、またはそのような状態を説明する。がんは、例えば、固形腫瘍もしくは悪性腫瘍、または血液癌もしくは悪性腫瘍として分類することができる。いずれのタイプも、転移として離れた部位に移動し得る。固形腫瘍は、例えば、肉腫、癌腫、黒色腫、またはこれらの転移として分類することができる。
「増殖性障害」及び「増殖性疾患」という用語は、がんなどの異常な細胞増殖に関連する障害を指す。本明細書で使用する場合、「腫瘍」及び「新生物」とは、過剰な細胞成長または増殖から生じる任意の組織腫瘤を指し、良性（非がん性）の病変、または前がん性を含めた悪性（がん性）の病変のいずれかである。
本明細書で使用する場合、「転移（単数）」、「転移（複数）」、「転移性」という用語、及び他の文法上の等価物は、起点部位（例えば、原発腫瘍）から身体の他の領域へと拡散または移行し、新たな位置での同様のがん性病変発生を伴う、がん細胞を指す。「転移性（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ）」または「転移性（ｍｅｔａｓｔａｓｉｚｉｎｇ）」細胞とは、隣接する細胞との接着的接触を喪失し、血流またはリンパを介して疾患の原発部位から移動して隣接する身体構造に侵入する細胞である。これらの用語は、転移のプロセスも指し、これには、限定されるものではないが、原発腫瘍からのがん細胞の分離、循環に対する腫瘍細胞の血管内侵入、腫瘍細胞の生存及び離れた部位への移動、循環から新たな部位への付着及び血管外遊出、ならびに離れた部位でのミクロコロニー化、ならびに離れた部位での腫瘍成長及び発生が含まれる。
このような固形腫瘍の例としては、例えば、扁平上皮がん、腺癌、基底細胞癌、腎細胞癌、乳房の腺管癌、軟部組織肉腫、骨肉腫、黒色腫、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肺の腺癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌、胃癌、膵臓癌、神経内分泌癌、膠芽腫、子宮頚癌、卵巣癌、肝臓癌、腎臓癌、脳癌、ヘパトーマ、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、食道癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、頭頚部癌、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せが挙げられる。
血液癌または悪性腫瘍の例としては、白血病、リンパ腫、骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、有毛細胞白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せが挙げられる。
ある特定の実施形態において、本明細書で提供される方法による治療に適用可能ながんとしては、限定されるものではないが、肉腫、乳癌、卵巣癌、子宮頚癌、頭頚部癌、ＮＳＣＬＣ、食道癌、胃癌、腎臓癌、肝臓癌、膀胱癌、結腸直腸癌、及び膵臓癌が挙げられる。
「治療有効量」という用語は、対象、例えば、ヒトにおける疾患または障害を「治療する」、または場合によっては「防止する」のに有効な抗体、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、有機小分子、または他の薬物の量を指す。がんの場合、治療有効量の薬物は、以下のことが可能である：がん細胞の数を低減すること；がん細胞の分裂を遅らせるもしくは停止すること；腫瘍サイズの増加を低減するもしくは遅らせること；がん細胞の周囲臓器への浸潤（例えば、がんの軟部組織及び骨への拡散を含む）を阻害する、例えば、抑制する、遅らせる、防止する、停止する、遅延させる、もしくは逆行させること；腫瘍転移を阻害する、例えば、抑制する、遅らせる、防止する、縮小する、停止する、遅延させる、もしくは逆行させること；腫瘍成長を阻害する、例えば、抑制する、遅らせる、防止する、停止する、遅延させる、もしくは逆行させること；がんに関連する症状のうちの１つ以上をある程度まで軽減すること；罹患率及び死亡率を低減すること；クオリティーオブライフを改善すること；またはこのような効果の組合せ。薬物は、既存のがん細胞の成長を防止する及び／または殺滅する限りにおいて、細胞分裂抑制性及び／または細胞傷害性と呼ばれ得る。
「治療する」もしくは「治療」もしくは「治療すること」、または「緩和する」もしくは「緩和すること」などの用語は、診断された病的状態または障害を治癒する、遅くする、その症状を軽減する、及び／またはその進行を停止するもしくは遅くする治療措置を指す。「防止する」、「防止」、「回避する」、「抑止」などの用語は、診断未確定の標的とされる病的状態または障害の発生を防止する予防的または防止的措置を指す。したがって、治療を必要とする者には、障害を既に有する者及び／または障害を有する傾向にある者が含まれ得る。
患者は、以下のうちの１つ以上を示す場合、本開示の方法に従って首尾よく「治療」されている：がん細胞の数の減少もしくは完全な不在；腫瘍サイズの低減；または腫瘍の成長の遅延もしくは逆行、例えば、抑制、防止、遅延、縮小、遅延、もしくは転移（例えば、軟部組織及び骨へのがんの拡散を含めた、周囲臓器へのがん細胞の浸潤）の逆行；腫瘍転移の阻害、例えば、抑制、遅延、防止、収縮、逆行、遅延、もしくは不在；腫瘍成長の阻害、例えば、抑制、遅延、防止、縮小、逆行、遅延、もしくは欠如；特定のがんに関連する１つ以上の症状の軽減；罹患率及び死亡率の低減；クオリティーオブライフの改善；または効果の何らかの組合せ。有益なまたは望ましい臨床的結果としては、以下に限定されないが、症状の緩和、疾患程度の減弱、疾患状態の安定化（すなわち、悪化していないこと）、疾患進行の遅延または遅くすること、疾患状態の改善または軽減、及び軽快（部分的または全体的）が挙げられ、検出可能なものも検出不可能なものも含まれる。「治療」は、治療を受けていない場合に予想される生存期間に比べて生存期間を延長することも意味する場合がある。治療が必要な者としては、状態もしくは障害を既に有する者、ならびに状態もしくは障害を有する傾向にある者、または状態もしくは障害を防止する必要がある者が挙げられる。
「対象」または「個体」または「動物」または「患者」または「哺乳類」は、任意の対象を意味する。ある特定の実施形態において、対象は、診断、予後、または治療が所望される哺乳類対象である。哺乳類対象には、ヒト、飼育動物、家畜、及び動物園、スポーツ、または愛玩動物、例えば、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、ブタ、ウシ、クマなどが含まれる。
本明細書で使用する場合、「治療から利益を得る対象」という用語は、所与の治療剤（例えば、１個以上の抗原結合ドメインを含む結合分子（例えば、抗体））の投与から利益を得ると考えられる全ての見込みのある対象のうちの対象のサブセットを指す。このような結合分子（例えば、抗体）は、例えば、診断手順及び／または疾患の治療もしくは防止のために使用することができる。
本明細書で使用する場合、「血清半減期」または「血漿半減期」という用語は、薬物（例えば、結合分子、例えば、抗体、抗体様、または抗体由来分子、またはそのフラグメント（例えば、多量体化フラグメント））の投与後、血清または血漿濃度が５０％低減するのにかかる時間（例えば、分、時間、または日単位）を指す。２つの半減期が説明され得る。一方はアルファ半減期、α半減期、またはｔ１／２αであり、これは、中央区画（例えば、静脈内投与の場合は血液）から末梢区画（例えば、組織または器官）への薬物の再分配のプロセスに起因する血漿濃度の低下率である。もう一方はベータ半減期、β半減期、またはｔ１／２半減期であり、これは、排泄または代謝のプロセスに起因する低下率である。
本明細書で使用する場合、「血漿薬物濃度－時間曲線下面積」または「ＡＵＣ」という用語は、薬物を投与した後の実際の身体の薬物に対する曝露を反映するものであり、ｍｇ＊ｈ／Ｌで表される。この曲線下面積は、例えば、時間０（ｔ０）から無限大（∞）まで測定することができ、体内からの薬物の排出速度及び投与される用量に依存する。
本明細書で使用する場合、「平均滞留時間」または「ＭＲＴ」という用語は、薬物が体内に留まる時間の平均的な時間の長さを意味する。
本明細書で使用する「医薬的に許容される」または「薬理学的に許容される」とは、生物学的にまたは別の意味で望ましくないわけではない材料を意味し、例えば、このような材料は、いかなる顕著な望ましくない生物学的影響をもたらすこともなく、自らが含まれる組成物のいかなる他の構成要素とも有害な様式で相互作用することもなく、患者に投与する医薬組成物に組み込むことができる。医薬的に許容される担体または賦形剤は、毒性試験及び製造試験の要求水準を満たし、及び／または米国食品医薬品局が作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇｕｉｄｅに含まれていることが好ましい。
「医薬的に許容される塩」とは、遊離（非塩）化合物の生物学的活性の少なくとも一部を保持し、薬物または医薬品として個体に投与することができる塩のことである。このような塩としては、例えば、以下のものが挙げられる：（１）無機酸で形成される酸付加塩（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）、または有機酸で形成される酸付加塩（例えば、酢酸、シュウ酸、プロピオン酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸など）；（２）親物質中に存在する酸性プロトンが、金属イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、もしくはアルミニウムイオン）によって置き換えられたとき、または有機塩基と配位結合したときに形成される塩。許容される有機塩基としては、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンなどが挙げられる。塩の調製に使用することができる無機塩基としては、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムなどが挙げられる。医薬的に許容される塩は、製造プロセス中にｉｎ ｓｉｔｕで調製することも、遊離酸または遊離塩基の形態の精製された本発明の化合物をそれぞれ好適な有機または無機の塩基または酸と別々に反応させ、このようにして形成された塩を後続の精製中に単離することによって調製することもできる。
本明細書で使用する場合、「賦形剤」という用語は、本発明の化合物を有効成分として含む錠剤などの薬物または医薬品の製造で使用することができる不活性または非活性の物質を意味する。様々な物質が賦形剤という用語に包含され得、このような物質には、限定されるものではないが、結合剤、崩壊剤、コーティング剤、圧縮／カプセル化助剤、クリームもしくはローション、滑沢剤、非経口投与用溶液、チュアブル錠用材料、甘味料もしくは香味料、懸濁／ゲル化剤、または湿式造粒剤として使用される任意の物質が含まれる。結合剤としては、例えば、カルボマー、ポビドン、キサンタンガムなどが挙げられ、コーティング剤としては、例えば、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ゲランガム、マルトデキストリン、腸溶性コーティングなどが挙げられ、圧縮／カプセル化助剤としては、例えば、炭酸カルシウム、ブドウ糖、果糖ｄｃ（ｄｃ＝「直接圧縮性」）、蜂蜜ｄｃ、乳糖（無水物または一水和物、任意選択でアスパルテーム、セルロース、または微結晶性セルロースとの組合せ）、デンプンｄｃ、ショ糖などが挙げられ、崩壊剤としては、例えば、クロスカルメロースナトリウム、ゲランガム、デンプングリコール酸ナトリウムなどが挙げられ、クリームまたはローションとしては、例えば、マルトデキストリン、カラギーナンなどが挙げられ、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、フマル酸ステアリルナトリウムなどが挙げられ、チュアブル錠の材料としては、例えば、ブドウ糖、果糖ｄｃ、乳糖（一水和物、任意選択でアスパルテームまたはセルロースとの組合せ）などが挙げられ、懸濁／ゲル化剤としては、例えば、カラギーナン、デンプングリコール酸ナトリウム、キサンタンガムなどが挙げられ、甘味料としては、例えば、アスパルテーム、ブドウ糖、果糖ｄｃ、ソルビトール、ショ糖ｄｃなどが挙げられ、湿式造粒剤としては、例えば、炭酸カルシウム、マルトデキストリン、微結晶性セルロースなどが挙げられる。
ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、及び他のＩｇＭ由来結合分子
ＩｇＭは、抗原による刺激に応答してＢ細胞によって産生される最初の免疫グロブリンである。天然のＩｇＭは、血清中に約１．５ｍｇ／ｍｌで天然に存在し、半減期は約５日である。ＩｇＭは５量体または６量体分子であるため、５または６個の結合ユニットを含む。ＩｇＭ結合ユニットは、典型的には、２個の軽鎖及び２個の重鎖を含む。ＩｇＧ重鎖定常領域は、３個の重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）を含み、一方ＩｇＭの重鎖（μ）定常領域はさらに、第４の定常ドメイン（ＣＨ４）を含み、Ｃ末端「テールピース」を含む。ヒトＩｇＭ定常領域は、典型的には、配列番号９１（例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ｐｉｒ｜｜Ｓ３７７６８、ＣＡＡ４７７０８．１、及びＣＡＡ４７７１４．１、アレルＩＧＨＭ＊０３と同一）または配列番号９２（例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ｓｐ｜Ｐ０１８７１．４、アレルＩＧＨＭ＊０４と同一）のアミノ酸配列を含む。ヒトＣμ１領域は、配列番号９１または配列番号９２の約アミノ酸５から約アミノ酸１０２の範囲であり、ヒトＣμ２領域は、配列番号９１または配列番号９２の約アミノ酸１１４から約アミノ酸２０５の範囲であり、ヒトＣμ３領域は、配列番号９１または配列番号９２の約アミノ酸２２４から約アミノ酸３１９の範囲であり、Ｃμ４領域は、配列番号９１または配列番号９２の約アミノ酸３２９から約アミノ酸４３０の範囲であり、テールピースは、配列番号９１または配列番号９２の約アミノ酸４３１から約アミノ酸４５３の範囲である。
軽微な配列バリエーションを伴ったヒトＩｇＭ定常領域の他の形態及びアレルが存在し、これには、限定されるものではないが、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＣＡＢ３７８３８．１及びｐｉｒ｜｜ＭＨＨＵが含まれる。本開示の他の箇所に記載され、特許請求の対象である配列番号９１または配列番号９２に対応する位置のアミノ酸の置換、挿入、及び／または欠失は、同様に代替のヒトＩｇＭ配列及び他の種のＩｇＭ定常領域アミノ酸配列に組み込むことができる。
各ＩｇＭ重鎖定常領域は、結合ドメイン（例えば、抗原結合ドメイン、例えば、ｓｃＦｖもしくはＶＨＨ、または抗原結合ドメインのサブユニット、例えば、ＶＨ領域）と会合することができる。例示的な抗原結合ドメイン、例えば、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する結合ドメインは、本明細書の他の箇所に記載されている。ある特定の実施形態において、結合ドメインは、非抗体結合ドメインであり得る、例えば、受容体外部ドメイン、リガンドまたはその受容体結合フラグメント、サイトカインまたはその受容体結合フラグメント、成長因子またはその受容体結合フラグメント、神経伝達物質またはその受容体結合フラグメント、ペプチドもしくはタンパク質ホルモンまたはその受容体結合フラグメント、免疫チェックポイントモジュレーターリガンドまたはその受容体結合フラグメント、あるいは細胞外マトリックスタンパク質の受容体結合フラグメントであり得る。例えば、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ ＵＳ２０１９／０５７７０２号を参照（その全体が参照により本明細書に援用される）。
５個のＩｇＭ結合ユニットは、追加の小さなポリペプチド鎖（Ｊ鎖）、またはその機能的フラグメント、バリアント、もしくは誘導体と複合体を形成し、本明細書の他の箇所で論じられている５量体のＩｇＭ抗体またはＩｇＭ様抗体を形成することができる。ヒトＪ鎖の前駆体形態は、配列番号９６として提示される。シグナルペプチドは、配列番号９６のアミノ酸１から約アミノ酸２２に及び、成熟ヒトＪ鎖は、配列番号９６の約アミノ酸２３からアミノ酸１５９に及ぶ。成熟ヒトＪ鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列を含む。
例示的なバリアントＪ鎖及び修飾されたＪ鎖は、本明細書の他の箇所に示されている。Ｊ鎖を伴わない場合、ＩｇＭ抗体またはＩｇＭ様抗体は、典型的には、集合して最大１２個の抗原結合ドメインを含む６量体となる。Ｊ鎖を伴う場合、ＩｇＭ抗体またはＩｇＭ様抗体は、典型的には、集合して最大１０個の抗原結合ドメインを含む５量体となり、Ｊ鎖が、追加の抗原結合ドメイン（複数可）を含む１つ以上の異種ポリペプチドを含む修飾されたＪ鎖である場合は、それ以上の抗原結合ドメインを含む５量体となる。５または６個のＩｇＭ結合ユニットの５量体または６量体のＩｇＭ抗体またはＩｇＭ様抗体への集合は、Ｃμ４ドメイン及びテールピースドメインに関係すると考えられている。例えば、Ｂｒａａｔｈｅｎ，Ｒ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：４２７５５－４２７６２（２００２）を参照。したがって、本開示で提供される５量体または６量体のＩｇＭ抗体は、典型的には、少なくともＣμ４及びテールピースドメイン（本明細書では一括的にＣμ４－ｔｐとも呼ばれる）を含む。したがって、ＩｇＭ重鎖定常領域の「多量化フラグメント」は、少なくともＣμ４－ｔｐドメインを含む。ＩｇＭ重鎖定常領域はさらに、Ｃμ３ドメインもしくはそのフラグメント、Ｃμ２ドメインもしくはそのフラグメント、Ｃμ１ドメインもしくはそのフラグメント、及び／または他のＩｇＭ重鎖ドメインを含むことができる。ある特定の実施形態において、ＩｇＭ由来結合分子、例えば、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子は、完全なＩｇＭ重（μ）鎖定常ドメイン（例えば、配列番号９１もしくは配列番号９２）、またはそのバリアント、誘導体、もしくは類似体（例えば、本明細書で提供されるもの）を含むことができる。
ある特定の実施形態において、本開示は、５量体または６量体の結合分子であって、結合分子が、１０または１２個のＩｇＭ由来重鎖を含み、ＩｇＭ由来重鎖が、標的（例えば、ＤＲ５）に特異的に結合する結合ドメインに各々会合したＩｇＭ重鎖定常領域を含む、結合分子を提供する。ある特定の実施形態において、本開示は、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、またはＩｇＭ由来結合分子を提供し、これらは、単一の結合ユニットから構成された結合分子（例えば、２価のＩｇＧ抗体）と比較して、改善された結合特性または生物学的活性を有する。例えば、５量体または６量体の結合分子は、細胞（例えば、腫瘍細胞）の表面上の３個以上のＤＲ５分子をより効率的に架橋し、それによって細胞のアポトーシスを容易にすることができる。本明細書で提供される結合分子は、同様に、合成またはキメラ構造から構成された多価の結合分子と比較して独特の特性を有することができる。例えば、ヒトＩｇＭ定常領域を使用することで、キメラ定常領域または合成的構造を含む結合分子に比べて免疫原性を低減し、よって安全性を高めることができる。さらに、ＩｇＭベースの結合分子は、一貫して６量体または５量体のオリゴマーを形成し、より均質な発現産物をもたらす。優れた補体固定は、ＩｇＭベースの結合分子の有利なエフェクター機能でもあり得る。
ある特定の実施形態において、本開示は、５または６個の２価の結合ユニットを含むＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、またはＩｇＭ由来結合分子であって、各結合ユニットが、その抗原結合ドメインまたはサブユニットに各々会合した２個のＩｇＭまたはＩｇＭ様重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントもしくはバリアントを含む、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、またはＩｇＭ由来結合分子を提供する。ある特定の実施形態において、各結合ユニットに含まれる２個のＩｇＭ重鎖定常領域は、ヒト重鎖定常領域である。いくつかの実施形態において、重鎖はグリコシル化されている。いくつかの実施形態において、重鎖はグリコシル化に影響を及ぼすように変異してもよい。
本開示で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来の結合分子が５量体である場合、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子は、典型的には、さらにＪ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントを含む。ある特定の実施形態において、Ｊ鎖は、本明細書の他の箇所に記載されているように、Ｊ鎖に付着した１つ以上の異種部位をさらに含む、修飾されたＪ鎖またはそのバリアントである。ある特定の実施形態において、Ｊ鎖は、本開示の他の箇所で論じられているように、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子の血清半減期に影響を及ぼす（例えば、強化する）ように変異してもよい。ある特定の実施形態において、Ｊ鎖は、本開示の他の箇所で論じられているように、グリコシル化に影響を及ぼすように変異してもよい。
ＩｇＭ重鎖定常領域は、Ｃμ１ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、Ｃμ２ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、Ｃμ３ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、及び／またはＣμ４ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアントのうちの１つ以上を含むことができ、ただし、定常領域がＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子において所望の機能を果たす（例えば、第２のＩｇＭ定常領域と会合して、１個、２個、もしくはそれ以上の抗原結合ドメイン（複数可）を有する結合ユニットを形成する、及び／または他の結合ユニット（５量体の場合にはさらにＪ鎖）と会合して６量体もしくは５量体を形成する）ことができることを条件とする。ある特定の実施形態において、個別の結合ユニット内の２個のＩｇＭ重鎖定常領域またはそのフラグメントもしくはバリアントは各々、Ｃμ４ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、テールピース（ｔｐ）またはそのフラグメントもしくはバリアント、あるいはＣμ４ドメインとＴＰまたはそのフラグメントもしくはバリアントとの組合せを含む。ある特定の実施形態において、個別の結合ユニット内の２個のＩｇＭ重鎖定常領域またはそのフラグメントもしくはバリアントは各々さらに、Ｃμ３ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、Ｃμ２ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、Ｃμ１ドメインまたはそのフラグメントもしくはバリアント、あるいはこれらの任意の組合せを含む。
ある特定の実施形態において、所与の結合ユニット内の２個のＩｇＭ重鎖定常領域の各々は、抗原結合ドメイン、例えば、抗体のＦｖ部分、例えば、ヒトまたはマウス抗体のＶＨ及びＶＬと会合しており、このとき、ＶＬは軽鎖定常領域と会合してもよい。本明細書で提供される結合分子において、結合分子の少なくとも３個の抗原結合ドメインは、ＤＲ５結合ドメイン、すなわち、ＤＲ５（例えば、ヒトＤＲ５）に対し特異的に結合することができる結合ドメインである。
いくつかの実施形態において、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子の結合ユニットは、２個の軽鎖を含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子の結合ユニットは、２個のフラグメント軽鎖を含む。いくつかの実施形態において、軽鎖はカッパ軽鎖である。いくつかの実施形態において、軽鎖はラムダ軽鎖である。いくつかの実施形態において、各結合ユニットは、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖を含む。
ＩｇＡ抗体、ＩｇＡ様抗体、他のＩｇＡ由来結合分子
ＩｇＡは粘膜免疫において決定的な役割を担っており、産生される総免疫グロブリンの約１５％を構成する。ＩｇＡは、単量体または２量体の分子である。ＩｇＡ結合ユニットは、２個の軽鎖及び２個の重鎖を含む。ＩｇＡは、３個の重鎖定常ドメイン（Ｃα１、Ｃα２、Ｃα３）を含み、またＣ末端側の「テールピース」を含む。ヒトＩｇＡは２つのサブタイプ、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２を有する。ヒトＩｇＡ１定常領域は、典型的にはアミノ酸配列の配列番号９３を含む。ヒトＣα１ドメインは、配列番号９３の約アミノ酸６から約アミノ酸９８に及び、ヒトＩｇＡ１ヒンジ領域は、配列番号９３の約アミノ酸１０２から約アミノ酸１２４に及び、ヒトＣα３ドメインは、配列番号９３の約アミノ酸２２８から約アミノ酸３３０に及び、テールピースは、配列番号９３の約アミノ酸３３１から約アミノ酸３５２に及ぶ。ヒトＩｇＡ２定常領域は、典型的にはアミノ酸配列の配列番号９４を含む。ヒトＣα１ドメインは、配列番号９４の約アミノ酸６から約アミノ酸９８に及び、ヒトＩｇＡ２ヒンジ領域は、配列番号９４の約アミノ酸１０２から約アミノ酸１１１に及び、ヒトＣα２ドメインは、配列番号９４の約アミノ酸１１３から約アミノ酸２０６に及び、ヒトＣα３ドメインは、配列番号９４の約アミノ酸２１５から約アミノ酸３１７に及び、テールピースは、配列番号９４の約アミノ酸３１８から約３４０に及ぶ。
２個のＩｇＡ結合ユニットは、分泌ＩｇＡ（ｓＩｇＡ）抗体を形成するために、２個のさらなるポリペプチド鎖、Ｊ鎖（例えば、配列番号９７または配列番号９８）及び分泌因子（前駆体：配列番号９５、成熟型：配列番号９５のアミノ酸１９から６０３）を有する複合体を形成することができる。ＩｇＡ結合ユニットの２量体ｓＩｇＡ抗体への集合は、Ｃα３ドメイン及びテールピース（本明細書では一括的にＣα３－ｔｐドメインとも呼ばれる）に関係すると考えられている。したがって、本開示で提供される２量体のｓＩｇＡ結合分子は、典型的には、少なくともＣα３及びテールピースドメインを含むＩｇＡ定常領域を含む。
ＩｇＡ重鎖定常領域はさらに、Ｃα２ドメインもしくはそのフラグメント、ＩｇＡヒンジ領域、Ｃα１ドメインまたはそのフラグメント、及び／または他のＩｇＡ重鎖ドメインを含むことができる。ある特定の実施形態において、本明細書で提供されるＩｇＡ抗体またはＩｇＡ様結合分子は、完全なＩｇＡ重（α）鎖定常ドメイン（例えば、配列番号９３または配列番号９４）、またはそのバリアント、誘導体、もしくは類似体を含むことができる。いくつかの実施形態において、ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントは、ヒトＩｇＡ定常領域である。
いくつかの実施形態において、ＩｇＡ抗体、ＩｇＡ様抗体、または他のＩｇＡ由来結合分子の結合ユニットは、２個の軽鎖を含む。いくつかの実施形態において、ＩｇＡ抗体、ＩｇＡ様抗体、または他のＩｇＡ由来結合分子の結合ユニットは、２個の軽鎖を含む。いくつかの実施形態において、軽鎖はカッパ軽鎖である。いくつかの実施形態において、軽鎖はラムダ軽鎖である。いくつかの実施形態において、各結合ユニットは、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖を含む。
いくつかの実施形態において、本開示は、ＤＲ５に対し特異的に結合することができる２量体結合分子、例えば、本明細書で定義されている２個のＩｇＡ「結合ユニット」を有する結合分子またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体を提供する。本明細書で提供される結合分子は、単一の結合ユニット（例えば、２価のＩｇＧ抗体）から構成された結合分子と比較して、改善された結合特性または生物学的活性を有することができる。例えば、ＩｇＡ結合分子は、細胞（例えば、腫瘍細胞）の表面上の３個以上のＤＲ５単量体をより効率的に架橋し、それによって細胞のアポトーシスを容易にすることができる。さらに、ＩｇＡ結合分子は、本明細書で提供される結合分子により大きな組織分布を提供する粘膜部位に達することができる。ＩｇＡベース結合分子の使用により、例えば、本明細書で提供される結合分子のより大きな組織分布を可能にすることができる。粘膜分布は、ある特定のがん、例えば、肺癌、胃癌、卵巣癌、結腸直腸癌、または扁平上皮癌に有益であり得る。同様に、本明細書で提供される２量体結合分子は、５個または６個の結合ユニットを含む結合分子、例えば、６量体または５量体ＩｇＭ抗体と区別できる結合特性または生物学的活性を有することができる。例えば、２量体結合分子はより小さく、例えば、固形腫瘍でのより良好な組織侵入を達成することができる。
ある特定の実施形態において、本開示は、２個の２価結合ユニット含む２量体の結合分子であって、各結合ユニットが２個のＩｇＡ重鎖定常領域またはそのフラグメントを含む、結合分子を提供する。ある特定の実施形態において、２個のＩｇＡ重鎖定常領域は、ヒト重鎖定常領域である。
本明細書で提供される２量体ＩｇＡ結合分子はさらに、Ｊ鎖またはそのフラグメントもしくはバリアントを含むことができる。本明細書で提供される２量体ＩｇＡ結合分子はさらに、分泌因子またはそのフラグメントもしくはバリアントを含むことができる。
ＩｇＡ重鎖定常領域は、Ｃα１ドメイン、Ｃα２ドメイン、及び／またはＣα３ドメインのうちの１個以上を含むことができるが、定常領域が結合分子内で所望の機能を果たすことができること、例えば、軽鎖定常領域と会合して抗原結合ドメインの形成を容易にする、または別のＩｇＡ結合ユニットと会合して２量体結合分子を形成することができることを条件とする。ある特定の実施形態において、個別の結合ユニット内の２個のＩｇＡ重鎖定常領域またはそのフラグメントはそれぞれ、Ｃα３ドメインもしくはそのフラグメント、テールピース（ＴＰ）もしくはそのフラグメント、またはＣα３ドメイン、ＴＰ、もしくはそのフラグメントの任意の組合せを含む。ある特定の実施形態において、個別の結合ユニット内の２個のＩｇＡ重鎖定常領域またはそのフラグメントはそれぞれ、さらに、Ｃα２ドメインもしくはそのフラグメント、Ｃα１ドメインまたはもしくはそのフラグメント、またはＣα１ドメインもしくはそのフラグメント及びＣα２ドメインもしくはそのフラグメントを含む。
ある特定の実施形態において、所与の結合ユニット内の２個のＩｇＡ重鎖定常領域の各々は、抗原結合ドメイン、例えば、抗体のＦｖ部分、例えば、ヒトまたはマウス抗体のＶＨ及びＶＬと会合しており、このとき、ＶＬは軽鎖定常領域と会合してもよい。本明細書で提供される結合分子において、結合分子の少なくとも３個の抗原結合ドメインは、ＤＲ５結合ドメイン、すなわち、ＤＲ５（例えば、ヒトＤＲ５）に対し特異的に結合することができる結合ドメインである。
Ｊ鎖及びその機能的フラグメントまたはバリアント
ある特定の実施形態において、本明細書で提供される２量体または５量体結合分子は、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントを含む。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される多量体結合分子は５量体であり、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントを含む。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される結合分子は２量体であり、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントを含む。いくつかの実施形態において、２量体または５量体結合分子は、天然のＪ鎖配列（例えば、成熟ヒトＪ鎖配列（例えば、配列番号９７））を含むことができる。代替的に、いくつかの実施形態において、２量体または５量体の結合分子は、バリアントＪ鎖配列（例えば、グリコシル化の低減または重合Ｉｇ受容体（例えば、ｐＩｇＲ）への結合の低減を伴う本明細書に記載のバリアント配列）を含むことができる。いくつかの実施形態において、２量体または５量体の結合分子は、天然またはバリアントＪ鎖の機能的フラグメントを含むことができる。当業者が認識するであろうように、この文脈における「機能的フラグメント」または「機能的バリアント」は、結合ユニット（例えば、ＩｇＭまたはＩｇＡ重鎖定常領域）と会合して、５量体のＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、もしくはＩｇＭ由来結合分子、または２量体のＩｇＡ抗体、ＩｇＡ様抗体、もしくはＩｇＡ由来結合分子を形成することができる、及び／またはある特定の免疫グロブリン受容体（例えば、ｐＩｇＲ）に会合することができる、フラグメント及びバリアントを含む。
ある特定の実施形態において、Ｊ鎖は、例えば、異種部分、または２つ以上の異種部分（例えば、ポリペプチド）の導入により、結合分子がその結合標的（複数可）と集合及び結合する能力を妨げることなく、修飾することができる。米国特許第９，９５１，１３４号及び同第１０，４００，０３８号、ならびに米国特許出願公開第２０１９－０１８５５７０及び同第２０１８－０２６５５９６を参照（これらの各々は、その全体が参照により本明細書に援用される）。
したがって、本開示によって提供される結合分子（本明細書の他の箇所に記載されている多重特異性ＩｇＡ、ＩｇＡ様、ＩｇＭ、またはＩｇＭ様抗体を含む）は、Ｊ鎖またはそのフラグメントもしくはバリアントに導入（例えば、融合または化学的に結合体化）された異種部位（例えば、異種ポリペプチド）を含む、修飾されたＪ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントを含むことができる。ある特定の実施形態において、異種ポリペプチドは、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＮ末端、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＣ末端、あるいはＪ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＮ末端及びＣ末端の両方に融合することができる。ある特定の実施形態において、異種ポリペプチドは、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアント内で内部的に融合することができる。いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドは、グリコシル化部位またはその付近でＪ鎖に導入することができる。いくつかの実施形態において、異種ポリペプチドは、Ｃ末端から約１０アミノ酸残基以内、またはＮ末端から約１０アミノ酸残基以内でＪ鎖に導入することができる。ある特定の実施形態において、異種ポリペプチドは、配列番号９７の成熟ヒトＪ鎖内に、配列番号９７のシステイン残基９２から１０１の間に、またはＪ鎖配列（例えば、Ｊ鎖バリアントもしくはＪ鎖の機能的フラグメント）内の同等の位置に導入することができる。さらなる実施形態において、異種ポリペプチドは、グリコシル化部位またはその付近で配列番号９７の成熟ヒトＪ鎖に導入することができる。さらなる実施形態において、異種ポリペプチドは、Ｃ末端から約１０アミノ酸残基以内、またはＮ末端から約１０アミノ酸残基以内で配列番号９７の成熟ヒトＪ鎖に導入することができる。
ある特定の実施形態において、異種部位は、Ｊ鎖とインフレームで融合した、あるいはＪ鎖またはそのフラグメントもしくはバリアントと化学的に結合体化した、ペプチドまたはポリペプチド配列であり得る。ある特定の実施形態において、異種ポリペプチドは、ペプチドリンカーを介してＪ鎖またはその機能的フラグメントと融合している。任意の好適なリンカーを使用することができ、例えば、ペプチドリンカーは、少なくとも５個のアミノ酸、少なくとも１０個のアミノ酸、少なくとも２０個のアミノ酸、少なくとも３０個のアミノ酸、またはそれ以上、などを含むことができる。ある特定の実施形態において、ペプチドリンカーは、５個以上２５個以下のアミノ酸を含む。ある特定の実施形態において、ペプチドリンカーは、５個のアミノ酸、１０個のアミノ酸、１５個のアミノ酸、２０個のアミノ酸、または２５個のアミノ酸からなることができる。ある特定の実施形態において、ペプチドリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号９９）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１００）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０１）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０２）、またはＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０３）からなる。
ある特定の実施形態において、異種部分は、Ｊ鎖と結合体化した化学部分であり得る。Ｊ鎖に付着させる異種部位としては、限定されるものではないが、結合部位、例えば、抗体もしくはその抗原結合フラグメント（例えば、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子）、サイトカイン（例えば、ＩＬ－２もしくはＩＬ－１５（例えば、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ ＵＳ２０１９／０５７７０２号を参照（その全体が参照により本明細書に援用される）））、結合分子の半減期を増加させることができる安定化ペプチド（例えば、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）もしくはＨＳＡ結合分子）、または異種の化学部分（例えば、ポリマーもしくは細胞毒素）を挙げることができる。
いくつかの実施形態において、修飾されたＪ鎖は抗原結合ドメインを含むことができ、抗原結合ドメインとしては、限定されるものではないが、標的抗原に対し特異的に結合することができるポリペプチドが挙げられる。ある特定の実施形態において、修飾されたＪ鎖と会合した抗原結合ドメインは、抗体またはその抗原結合フラグメントであり得る。ある特定の実施形態において、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ抗原結合ドメインまたは（例えば、ラクダ科もしくはコンドリクトイド（ｃｏｎｄｒｉｃｔｈｏｉｄ）の抗体に由来する）１本鎖抗原結合ドメインであり得る。ある特定の実施形態において、標的は、標的エピトープ、標的抗原、標的細胞、または標的器官である。
抗原結合ドメインは、Ｊ鎖の機能または会合した多量体の結合分子（例えば、５量体ＩｇＭもしくは２量体ＩｇＡ抗体）の機能を妨害することなく、抗原結合ドメインがその結合標的に結合することを可能にする任意の位置でＪ鎖に導入することができる。挿入位置としては、限定されるものではないが、Ｃ末端もしくはその付近、Ｎ末端もしくはその付近、またはＪ鎖の３次元構造に基づいてアクセス可能な内部の位置が挙げられる。
血清半減期の増加をもたらすバリアントＪ鎖
ある特定の実施形態において、Ｊ鎖は、参照Ｊ鎖に比べて１つ以上の単一アミノ酸の置換、欠失、または挿入を含む機能的バリアントＪ鎖であり、参照Ｊ鎖は、この１つ以上の単一アミノ酸の置換、欠失、または挿入以外はバリアントＪ鎖と同一である。例えば、ある特定のアミノ酸の置換、欠失、または挿入は、対象動物に投与されたときに、バリアントＪ鎖における１つ以上の単一アミノ酸の置換、欠失、または挿入以外は同一である参照ＩｇＭ由来結合分子を同じ動物種に同じ方法を用いて投与されたときよりも長い血清半減期を示すＩｇＭ由来結合分子をもたらすことができる。ある特定の実施形態において、バリアントＪ鎖は、参照Ｊ鎖に比べて１、２、３、または４つの単一アミノ酸の置換、欠失、または挿入を含むことができる。
ある特定の実施形態において、Ｊ鎖（例えば、修飾Ｊ鎖）は、成熟野生型ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｙ１０２に対応するアミノ酸位置でのアミノ酸置換を含む。「成熟野生型ヒトＪ鎖のアミノ酸Ｙ１０２に対応するアミノ酸」とは、Ｊ鎖の配列内でヒトＪ鎖のＹ１０２に相同のアミノ酸を意味する。例えば、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６９３１４号を参照（その全体が参照により本明細書に援用される）。配列番号９７のＹ１０２に対応する位置は、少なくとも４３種の他の種のＪ鎖アミノ酸配列内で保存されている。米国特許第９，９５１，１３４号の図４を参照（参照により本明細書に援用される）。配列番号９７のＹ１０２に対応する位置でのある特定の変異は、ある特定の免疫グロブリン受容体（例えば、ヒトもしくはマウスのＦｃαμ受容体、マウスのＦｃμ受容体、及び／またはヒトもしくはマウスの重合Ｉｇ受容体（ｐＩｇＲ））がバリアントＪ鎖を含むＩｇＭ５量体に結合するのを阻害し得る。
配列番号９７のＹ１０２に対応するアミノ酸における変異を含む多量体結合分子は、動物に投与されたときに、置換以外は同一の対応する多量体結合分子を同じ方法で同じ種に投与されたときよりも、血清半減期を改善する。ある特定の実施形態において、配列番号９７のＹ１０２に対応するアミノ酸は、任意のアミノ酸で置換することができる。ある特定の実施形態において、配列番号９７のＹ１０２に対応するアミノ酸は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、またはアルギニン（Ｒ）で置換することができる。特定の実施形態において、配列番号９７のＹ１０２に対応するアミノ酸は、アラニンで置換することができる。特定の実施形態において、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントは、本明細書で「Ｊ＊」と呼ばれるバリアントヒトＪ鎖であり、配列番号９８のアミノ酸配列を含む。
野生型Ｊ鎖は、典型的には、１つのＮ－結合型グリコシル化部位を含む。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される多量体結合分子のバリアントＪ鎖またはその機能的フラグメントは、アスパラギン（Ｎ）結合グリコシル化モチーフＮ－Ｘ１－Ｓ／Ｔ内の変異（例えば、成熟ヒトＪ鎖（配列番号９７）またはＪ＊（配列番号９８）のアミノ酸４９（モチーフＮ６）に対応するアミノ酸位置で始まる変異）を含み、配列中、Ｎはアスパラギンであり、Ｘ１はプロリン以外の任意のアミノ酸であり、Ｓ／Ｔはセリンまたはスレオニンであり、変異はそのモチーフにおけるグリコシル化を防止する。ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６９３１４号で示されているように、この部位におけるグリコシル化を防止する変異は、本明細書で提供される多量体結合分子が、対象動物に投与されたときに、バリアントＪ鎖におけるグリコシル化を防止する変異（単数または複数）以外は同一である参照多量体結合分子が同じ動物種に同じ方法で投与されたときよりも長い血清半減期を示す結果をもたらし得る。
例えば、ある特定の実施形態において、本明細書で提供される５量体のＩｇＭ由来結合分子または２量体のＩｇＡ由来結合分子のバリアントＪ鎖またはその機能的フラグメントは、配列番号９７または配列番号９８のアミノ酸Ｎ４９またはアミノ酸Ｓ５１に対応するアミノ酸位置でアミノ酸置換を含むことができるが、ただし、Ｓ５１に対応するアミノ酸がスレオニン（Ｔ）で置換されていないか、またはバリアントＪ鎖が配列番号９７または配列番号９８のアミノ酸Ｎ４９及びＳ５１の両方に対応するアミノ酸位置にアミノ酸置換を含むことを条件とする。ある特定の実施形態において、配列番号９７または配列番号９８のＮ４９に対応する位置は、任意のアミノ酸、例えば、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、スレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、またはアスパラギン酸（Ｄ）で置換されている。特定の実施形態において、配列番号９７または配列番号９８のＮ４９に対応する位置は、アラニン（Ａ）で置換することができる。別の特定の実施形態において、配列番号９７または配列番号９８のＮ４９に対応する位置は、アスパラギン酸（Ｄ）で置換することができる。
バリアントＩｇＭ定常領域
本明細書で提供される多量体結合分子のＩｇＭ重鎖定常領域は、本明細書で提供される多量体結合分子にある特定の望ましい特性をもたらすように操作することができる。例えば、ある特定の実施形態において、ＩｇＭ重鎖定常領域は、本明細書で提供される多量体結合分子に血清半減期の強化をもたらすように操作することができる。ＩｇＭ由来結合分子の血清半減期を強化することができる例示的なＩｇＭ重鎖定常領域変異は、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６９３１４号で開示されている（その全体が参照により本明細書に援用される）。例えば、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、またはＩｇＭ由来結合分子のバリアントＩｇＭ重鎖定常領域は、野生型ヒトＩｇＭ定常領域（例えば、配列番号９１または配列番号９２）のアミノ酸Ｓ４０１、Ｅ４０２、Ｅ４０３、Ｒ３４４、及び／またはＥ３４５に対応する位置のアミノ酸置換を含むことができる。「野生型ヒトＩｇＭ定常領域のアミノ酸Ｓ４０１、Ｅ４０２、Ｅ４０３、Ｒ３４４、及び／またはＥ３４５に対応するアミノ酸」とは、ヒトＩｇＭ定常領域のＳ４０１、Ｅ４０２、Ｅ４０３、Ｒ３４４、及び／またはＥ３４５と相同である任意の種のＩｇＭ定常領域の配列内のアミノ酸を意味する。ある特定の実施形態において、配列番号９１または配列番号９２のＳ４０１、Ｅ４０２、Ｅ４０３、Ｒ３４４、及び／またはＥ３４５に対応するアミノ酸は、任意のアミノ酸（例えば、アラニン）で置換することができる。
ある特定の実施形態において、本明細書で提供されるＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子は、補体の存在下での細胞に対する補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性が、ＣＤＣ活性の低減をもたらす変異以外は同一である対応する参照ＩｇＭ定常領域を有する参照ＩｇＭ抗体、ＩｇＭ様抗体、または他のＩｇＭ由来結合分子よりも、低減を示すように操作することができる。これらのＣＤＣ変異は、本明細書で提供される血清半減期の増加をもたらすいずれかの変異と組み合わせることができる。「対応する参照ヒトＩｇＭ定常領域」とは、ＣＤＣ活性に影響を及ぼす定常領域内の修飾（単数または複数）以外はバリアントＩｇＭ定常領域と同一であるヒトＩｇＭ定常領域を意味する。ある特定の実施形態において、バリアントヒトＩｇＭ定常領域は、例えば、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ／２０１８／１８７７０２号（その全体が参照により本明細書に援用される）に記載のように、野生型ヒトＩｇＭ定常領域に対し（例えば、Ｃμ３ドメインにおける）１つ以上のアミノ酸置換を含む。ＣＤＣを測定するためのアッセイは当業者に周知されており、例示的なアッセイは、例えば、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ／２０１８／１８７７０２号に記載されている。
ある特定の実施形態において、ＣＤＣ活性の低減を付与するバリアントヒトＩｇＭ定常領域は、配列番号９１（ヒトＩｇＭ定常領域アリルＩＧＨＭ＊０３）または配列番号９２（ヒトＩｇＭ定常領域アリルＩＧＨＭ＊０４）の位置Ｌ３１０、Ｐ３１１、Ｐ３１３、及び／またはＫ３１５において、野生型ヒトＩｇＭ定常領域に対応するアミノ酸置換を含む。ある特定の実施形態において、ＣＤＣ活性の低減を付与するバリアントヒトＩｇＭ定常領域は、配列番号９１または配列番号９２の位置Ｐ３１１において、野生型ヒトＩｇＭ定常領域に対応するアミノ酸置換を含む。他の実施形態において、本明細書で提供されるバリアントＩｇＭ定常領域は、配列番号９１または配列番号９２の位置Ｐ３１３において、野生型ヒトＩｇＭ定常領域に対応するアミノ酸置換を含む。他の実施形態において、本明細書で提供されるバリアントＩｇＭ定常領域は、配列番号９１または配列番号９２のＰ３１１及び配列番号９１または配列番号９２のＰ３１３の位置において、野生型ヒトＩｇＭ定常領域に対応する置換の組合せを含む。これらのプロリン残基は、独立して、任意のアミノ酸（例えば、アラニン、セリン、またはグリシン）で置換することができる。
ヒト及びある特定の非ヒト霊長類のＩｇＭ定常領域は、典型的には、５個の天然のアスパラギン（Ｎ）結合グリコシル化モチーフまたは部位を含む。本明細書で使用する場合、「Ｎ－結合型グリコシル化モチーフ」は、アミノ酸配列Ｎ－Ｘ１－Ｓ／Ｔを含むか、またはそれからなり、配列中、Ｎはアスパラギンであり、Ｘ１はプロリン（Ｐ）以外の任意のアミノ酸であり、Ｓ／Ｔはセリン（Ｓ）またはスレオニン（Ｔ）である。グリカンは、アスパラギン残基の窒素原子に付着している。例えば、Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ Ｋ，Ｔａｙｌｏｒ ＭＥ（２００６），Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ（２ｎｄ ｅｄ．）Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，ＵＳＡを参照。Ｎ－結合型グリコシル化モチーフは、位置４６（「Ｎ１」）、２０９（「Ｎ２」）、２７２（「Ｎ３」）、２７９（「Ｎ４」）、及び４４０（「Ｎ５」）で始まる配列番号９１または配列番号９２のヒトＩｇＭ重鎖一定領域内に存在する。これらの５個のモチーフは、非ヒト霊長類のＩｇＭ重鎖定常領域内に保存されており、この５個のうちの４個はマウスＩｇＭ重鎖定常領域内に保存されている。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書で提供される多量体結合分子のＩｇＭ重鎖定常領域は、５個のＮ－結合型グリコシル化モチーフ：Ｎ１、Ｎ２、Ｎ３、Ｎ４、及びＮ５を含む。いくつかの実施形態において、各ＩｇＭ重鎖定常領域上のＮ－結合型グリコシル化モチーフ（例えば、Ｎ１、Ｎ２、及びＮ３）のうちの少なくとも３個が複合体グリカンによって占有される。
ある特定の実施形態において、Ｎ－Ｘ１－Ｓ／Ｔモチーフの少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、または少なくとも４個は、そのモチーフでのグリコシル化を防止するアミノ酸の挿入、欠失、または置換を含むことができる。ある特定の実施形態において、ＩｇＭ由来の多量体結合分子は、モチーフＮ１、モチーフＮ２、モチーフＮ３、モチーフＮ５、またはモチーフＮ１、Ｎ２、Ｎ３、もしくはＮ５のうちの２個以上、３個以上の任意の組合せ、もしくは４個全てにおいてアミノ酸の挿入、欠失、または置換を含むことができ、このアミノ酸の挿入、欠失、または置換が、そのモチーフにおけるグリコシル化を防止する。いくつかの実施形態において、ＩｇＭ定常領域は、配列番号９１（ヒトＩｇＭ定常領域アレルＩＧＨＭ＊０３）または配列番号９２（ヒトＩｇＭ定常領域アレルＩＧＨＭ＊０４）の位置４６、２０９、２７２、または４４０において、野生型ヒトＩｇＭ定常領域に対し２つ以上の置換を含む。例えば、米国仮出願第６２／８９１，２６３号を参照（その全体が参照により本明細書に援用される）。
ＤＲ５結合ドメイン
本明細書で提供されるＤＲ５結合分子、例えば、抗ＤＲ５抗体またはそのフラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、それぞれ２個、５個、または６個の２価結合ユニットを含む２量体、５量体、または６量体であり得る。結合ユニットは、全長であるか、または結合機能を保持するそのバリアントもしくはフラグメントであり得る。
各結合ユニットは、２個のＩｇＡまたはＩｇＭ重鎖定常領域またはそのフラグメントを含み、それぞれが抗原結合ドメインと会合している。上記のように、抗原結合ドメインは、エピトープに対し特異的に結合するのに必要かつ十分である結合分子の領域である。本明細書に記載される「結合分子」は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２個以上の「抗原結合ドメイン」を含むことができる。
本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子は、ＤＲ５に対し特異的かつアゴニスト的に結合する少なくとも３個の抗原結合ドメインを含むことができる。上記のように、ＤＲ５は活性化されると、結合したＤＲ５タンパク質を発現する細胞のアポトーシスを誘発し得る。現在理解されているところでは、アポトーシスは、複数の受容体タンパク質が一緒に結合して受容体分子の架橋を引き起こし、シグナルが細胞膜を横断してＤＲ５を発現する細胞のサイトゾルに伝達されたときに生じる。
本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体結合分子は、細胞の表面に発現される少なくとも３つのＤＲ５単量体を架橋することができる。本明細書で提供されるＤＲ５結合分子の２量体、５量体、または６量体の性質のために、分子は細胞上の３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２個ものＤＲ５単量体と架橋することができる。次いで、受容体タンパク質は互いに空間的に接近し、それにより受容体タンパク質の架橋及び活性化に寄与する。本明細書で提供されるＤＲ５結合分子の２価結合ユニットのうちの５個全てまたは６個全てが受容体に結合し、単一細胞上でそれぞれ最大１０個または１２個のＤＲ５単量体に結合すると、受容体の架橋及び活性化が起こり得る。
各結合ユニットは２価であるため、各結合分子は、４個（２量体結合分子の場合）、１０個（５量体結合分子の場合）、または１２個（６量体結合分子の場合）のＤＲ５単量体に結合することができる。
本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子の結合により受容体が活性化されると、細胞はいずれも上記のようにアポトーシスを経る。
ある特定の実施形態において、本明細書で開示される２量体、５量体、または６量体の結合分子は、同様にＤＲ５に対し特異的に結合しＤＲ５を作動する２価ＩｇＧ抗体またはそのフラグメントの相当量よりも高い効力で、ＤＲ５媒介アポトーシスを誘発することができる。理論に束縛されることは望まないが、提供される結合分子が２量体、５量体、または６量体であることにより、また各結合ユニットが２価であることにより、このような結合分子が、単独のいかなる単一の結合ユニット（例えば、同等のＩｇＧ結合ユニット）よりも高い効力で、先にＤＲ５について特徴づけられた受容体媒介機能を誘発する可能性がある。ＩｇＧ結合ユニットは２価であり、２個の結合部位を含むが、過去の臨床研究で示されたように、２個のＤＲ５受容体と１個のＩｇＧ分子との結合は、架橋剤などの他の構成要素の添加なしでは有効でない可能性がある。
「効力」または「結合特性の改善」とは、所与のアッセイにおいて、例えば、ＥＬＩＳＡもしくはウェスタンブロットに基づくカスパーゼアッセイ、ＦＡＣＳ分析により見られるようなアネキシンｖ染色、またはその他のアッセイにおいて、所与の生物学的結果、例えば、ＤＲ５単量体の２０％、５０％、または９０％の活性化を達成するのに必要な所与の結合分子の最小量を意味する。または、インビボ腫瘍アッセイにおける腫瘍成長速度の低減もしくは生存期間の増加。
本明細書で提供される結合分子は、２量体、５量体、または６量体であるため、それぞれ４、１０、または１２個もの抗原結合ドメインを含むことができる。各抗原結合ドメインは、ＤＲ５に対し特異的に結合し、かつ作動することができる。さらに、各抗原結合ドメインは、ＤＲ５の１つの特定のエピトープに特異的であり得る。
したがって、単一の２量体、５量体、または６量体の結合分子は、ａ）ＤＲ５上の単一のエピトープに同時に結合する、またはｂ）ＤＲ５上の多くの異なるエピトープに結合することができる。
本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子の結合ユニットは、ヒト、ヒト化、またはキメラ免疫グロブリン結合ユニットであり得る。免疫グロブリン配列をヒト化する方法は、当技術分野で周知されている。したがって、２量体、５量体、または６量体の結合分子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、直接ヒト配列からのものであっても、ヒト化またはキメラ（すなわち、複数の異なる種からの配列によってコードされる）であってもよい。
ＤＲ５を発現する細胞は、任意の動物細胞であり得る。例えば、１つの実施形態において、細胞はヒト細胞である。例えば、細胞は、霊長類、げっ歯類、イヌ、ウマなどのいずれか１つ以上の細胞であってもよい。さらに、ＤＲ５を発現する細胞はがん細胞であってもよい。すなわち、細胞は、悪性または良性である腫瘍内の細胞であってもよい。
本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子は、その抗原結合ドメインが、ＤＲ５に対し特異的に結合することが知られている配列によってコードされるように、遺伝子操作することができる。多くのグループがモノクローナル抗体の可変領域の配列を発表しており、ほとんどのＩｇＧアイソタイプは特徴づけられ、ＤＲ５に対し特異的に結合することが知られている。ＤＲ５に対し特異的に結合することが知られている非限定的な免疫グロブリン可変ドメイン配列を表２及び３に示す。当業者は、これらの公開された配列を免疫グロブリン構造、例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ構造、またはその生物学的に活性または機能的な多量体フラグメント、バリアント、もしくは誘導体に操作することができる。クローン化可変領域を遺伝子操作して免疫グロブリンドメインにし、このようなコンストラクトを発現させ精製する方法は公開されており、当業者の技能範囲内である。
したがって、ある特定の実施形態において、本明細書で提供されるＤＲ５結合ドメインは、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列、あるいは配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、または配列番号７３のＳｃＦｖ配列を含む抗ＤＲ５ ｍＡｂの、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、または１個以上のＣＤＲにおける１、２、３、４、または５つの単一アミノ酸置換を伴う６個の免疫グロブリン相補性決定領域を含む。
いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるＤＲ５結合ドメインは、それぞれ配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗ＤＲ５ ｍＡｂの、６つの免疫グロブリン相補性決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、または１個以上のＣＤＲにおける１、２、３、４、もしくは５つの単一アミノ酸置換を伴う６個の免疫グロブリン相補性決定領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるＤＲ５結合ドメインは、それぞれ配列番号５及び配列番号６のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗ＤＲ５ ｍＡｂの、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、または１個以上のＣＤＲにおける１、２、３、４、もしくは５個の単一アミノ酸置換を有する６個の免疫グロブリン相補性決定領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるＤＲ５結合ドメインは、それぞれ配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗ＤＲ５ ｍＡｂの、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、または１個以上のＣＤＲにおける１、２、３、４、もしくは５個の単一アミノ酸置換を有する６個の免疫グロブリン相補性決定領域を含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるＤＲ５結合ドメインは、それぞれ配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗ＤＲ５ ｍＡｂの、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３、または１個以上のＣＤＲにおける１、２、３、４、もしくは５個の単一アミノ酸置換を有する６個の免疫グロブリン相補性決定領域を含む。
（表２）抗ＤＲ５抗体ＶＨ（または重鎖）及びＶＬ（軽鎖）配列
Figure 2023526224000004
Figure 2023526224000005
Figure 2023526224000006
Figure 2023526224000007
（表３）抗ＤＲ５ ｓｃＦｖ配列
Figure 2023526224000008
Figure 2023526224000009
ある特定の実施形態において、ＤＲ５結合ドメインはＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９に対し、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含むか、あるいはＶＨ及びＶＬは、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、または配列番号７３に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有するＳｃＦｖに含まれる。
ある特定の実施形態において、ＤＲ５結合ドメインはＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８に対し、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態において、ＤＲ５結合ドメインはＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号５及び配列番号６に対し、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態において、ＤＲ５結合ドメインはＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、配列番号９０及び配列番号６に対し、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態において、ＤＲ５結合ドメインはＶＨ及びＶＬを含み、ＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号７及び配列番号８に対し、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む。
本開示に基づいて様々な異なる２量体、５量体、及び６量体の結合分子が、当業者によって企図され得、これら自体も本開示に含まれるが、ある特定の実施形態では、上記のような結合分子は、結合分子内の各結合ユニットが、各々がＩｇＡまたはＩｇＭの定常領域またはそのフラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを含む２個のＩｇＡまたはＩｇＭ重鎖と、各々が免疫グロブリン軽鎖の定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含むように提供される。
さらに、ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット、または結合分子の少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニットは、上記のようなＤＲ５結合ドメインのうちの２個を含む。ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内の、または結合分子の少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニット内の２個のＤＲ５結合ドメインは、互いに異なっていても、同一であってもよい。
ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内の、または結合分子の少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニット内の２個のＩｇＡまたはＩｇＭ重鎖は、同一である。ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内の、または少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニット内の２個の同一のＩｇＡまたはＩｇＭ重鎖は、表２及び３に開示される重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。
ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内の、または結合分子の少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニット内の２個の軽鎖は、同一である。ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内の、または少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニット内の２個の同一の軽鎖は、カッパ軽鎖（例えば、ヒトカッパ軽鎖）、またはラムダ軽鎖（例えば、ヒトラムダ軽鎖）である。ある特定の実施形態において、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内の、または少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニット内の２個の同一の軽鎖はそれぞれ、表２及び３に開示される軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。
ある特定の実施形態において、本開示によって提供される２量体、５量体、または６量体の少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の結合ユニットは、各結合ユニットにおいて、各々が表２及び３に開示される同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む２個の同一のＩｇＡまたはＩｇＭ重鎖定常領域と、各々が表２及び３に開示される重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む２個の同一の軽鎖とを含む。この実施形態によれば、結合分子の少なくとも１個の結合ユニット内のＤＲ５結合ドメイン、または結合分子の少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、もしくは少なくとも６個の結合ユニットは、同一であってもよい。さらにこの実施形態によれば、本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子は、本明細書で記載されているＤＲ５結合ドメインの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、少なくとも１０個、少なくとも１１個、または少なくとも１２個のコピーを含むことができる。ある特定の実施形態において、結合ユニットのうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個は同一であってもよく、ある特定の実施形態においては、結合ユニットは、同一の結合ドメインを含んでもよく、例えば、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、少なくとも１０個、少なくとも１１個、または少なくとも１２個のＤＲ５結合ドメインが同一であってもよい。
ある特定の実施形態において、本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子は、他の結合分子と比較して有利な構造的または機能的特性を有することができる。例えば、同じ抗原結合ドメインを有する対応する２価の結合分子に対する２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合。生物学的アッセイとしては、限定されるものではないが、ＥＬＩＳＡ及びウエスタンブロットカスパーゼアッセイ、ならびにアネキシンｖなどのアポトーシス細胞死を示す染色を用いたＦＡＣＳ分析が挙げられる。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子は、ＤＲ５結合ドメインと同じＤＲ５エピトープに対し特異的に結合する単一特異的な２価ＩｇＧ１抗体またはそのフラグメントの相当量よりも高い効力で、ＤＲ５発現細胞のアポトーシスを誘発することができる。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体の結合分子は、表２及び３に示される抗体であるかまたは表２及び３に示される抗体と同じＶＨ及びＶＬ領域を含む単一特異的な２価抗ＤＲ５モノクローナル抗体またはそのフラグメントの相当量よりも高い効力で、ＤＲ５発現細胞のアポトーシスを誘発することができる。
使用方法
本開示は、がんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、または６量体もしくは５量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ抗体、またはこれらの多量体化フラグメントであって、当該ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらのフラグメントの３～１２個の抗原結合ドメインがＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、または６量体もしくは５量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ抗体、またはこれらの多量体化フラグメントと、有効量のがん治療薬（例えば、放射線、アントラサイクリン、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、またはこれらの任意の組合せ）との組合せを含む、組合せ治療薬を対象に投与することによって行う、方法を提供する。例示的な抗ＤＲ５ ＩｇＡまたはＩｇＡ様抗体及びＩｇＭまたはＩｇＭ様抗体ならびに例示的ながん治療薬は、本明細書の他の箇所に詳細に記載されている。追加の組合せ治療薬は、例えば、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６５３４０号（その全体が参照により本明細書に援用される）に示されている。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される組合せ治療薬の投与は、腫瘍もしくは悪性細胞の成長を部分的もしくは完全に阻害することができ、対象における腫瘍の進行及び悪性細胞の成長を遅延させることができ、対象における転移拡散を防止することができ、対象の腫瘍サイズを低減して、例えば、より好結果の外科的除去が可能になり、及び／または対象における正の治療応答の任意の組合せをもたらすことができる。達成され得る例示的な治療応答は、本明細書に記載されている。
ある特定の実施形態において、組合せ治療薬の投与は、抗ＤＲ５ ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体またはＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体またはがん治療薬（例えば、放射線、アントラサイクリン、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、またはこれらの任意の組合せ）の単独の投与に比べて増強された治療効果をもたらすことができる。ある特定の実施形態において、改善された治療効果は、各個々の治療法の相加的効果よりも大きくなり得る。ある特定の実施形態において、例えば、腫瘍成長遅延（ＴＧＤ）の増加、腫瘍退縮（例えば、完全腫瘍退縮）の頻度の増加、または生存期間の増加において測定される、いずれかの治療法単独に対する治療効果の改善は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１５０％、少なくとも２００％、少なくとも２５０％、少なくとも３００％、少なくとも３５０％、少なくとも４００％、少なくとも４５０％、少なくとも５００％、少なくとも５５０％、少なくとも６００％、少なくとも６５０％、少なくとも７００％、少なくとも７５０％、少なくとも８００％、少なくとも８５０％、少なくとも９００％、少なくとも９５０％、または少なくとも１０００％である。ある特定の実施形態において、例えば、腫瘍成長遅延（ＴＧＤ）の増加、腫瘍退縮（例えば、完全腫瘍退縮）の頻度の増加、または生存期間の増加において測定される、個別に投与される両方の治療法の相加的効果に対する治療効果の改善は、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１５０％、少なくとも２００％、少なくとも２５０％、少なくとも３００％、少なくとも３５０％、少なくとも４００％、少なくとも４５０％、少なくとも５００％、少なくとも５５０％、少なくとも６００％、少なくとも６５０％、少なくとも７００％、少なくとも７５０％、少なくとも８００％、少なくとも８５０％、少なくとも９００％、少なくとも９５０％、または少なくとも１０００％である。ある特定の実施形態において、改善は、完全腫瘍退縮及び／または完全生存であり得る。活性改善は、例えば、使用される用量を低減することができ、または標準治療による殺滅に抵抗性である細胞をより有効に殺滅することができる。「抵抗性」とは、所与の腫瘍またはがんのタイプに対する「標準治療」の活性を任意の程度で低減することを意味する。
ある特定の実施形態において、本明細書で提供される併用治療法は、がん治療を必要とする対象に有効用量として投与されたときに、例えば、腫瘍成長の緩徐化、腫瘍成長の失速、または既存腫瘍のサイズの低減により、がん治療を容易にすることができる。
ある特定の実施形態において、ＤＲ５発現細胞は不死化細胞株、例えばがん細胞である。「がん」、「腫瘍」、「がん性」、及び「悪性」という用語は、典型的には制御されていない細胞成長を特徴とする哺乳類の生理的状態を指すまたは説明する。がんの例としては、限定されるものではないが、腺癌、リンパ腫、芽腫、黒色腫、肉腫、及び白血病を含めた癌腫が挙げられる。より特定的なこのようながんの例としては、骨肉腫、軟骨肉腫、線維肉腫、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃腸癌、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、膵臓癌、髄芽腫、子宮頚癌、卵巣癌、肝臓癌（例えば、肝臓癌腫及びヘパトーマ）、膀胱癌、乳癌（ホルモン媒介乳癌を含む。例えば、Ｉｎｎｅｓ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｂｒ． Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ９４：１０５７－１０６５を参照）及びトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫）、唾液腺癌、腎臓癌（例えば、腎細胞癌及びウィルムス腫瘍）、基底細胞癌、黒色腫、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、精巣癌、食道癌、様々な種類の頭頚部癌（限定されるものではないが、扁平上皮細胞癌を含む）、ならびに粘液性起源のがん（例えば、粘液性卵巣癌、胆管癌（肝臓）、及び腎乳頭状癌）が挙げられる。粘膜分布、例えば、本明細書で提供されるＩｇＡベース結合分子によって提供される粘膜分布は、ある特定のがん、例えば、肺癌、卵巣癌、結腸直腸癌、または扁平上皮癌に対し有益であり得る。
がん治療のための組成物の有効用量は、投与手段、標的部位、患者の生理的状態、患者がヒトであるか動物であるか、投与される他の薬剤、及び処置が予防的なものであるか治療的なものであるかを含めた、多くの異なる因子に応じて変動する。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される治療方法は、組成物が非がん細胞（例えば、正常なヒト肝細胞）に対するよりもがん細胞に対し高い細胞傷害性を示す（例えば、より高い程度でアポトーシスを誘発する）点から、安全性を高めることができる。通常、患者はヒトであるが、トランスジェニック哺乳類を含めた非ヒト哺乳類も治療することができる。当業者に知られている通例の方法を用いて治療用量を滴定して、安全性及び有効性を最適化することができる。
本開示の組成物は、任意の好適な方法により、例えば、経口、非経口、吸入スプレー、局所的、経直腸、経鼻、頬側、経膣で、または移植リザーバーを介して、投与することができる。本明細書で使用する場合、「非経口的」という用語は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内、及び頭蓋内の注射、または点滴技法を含む。
治療が行われる対象は、治療を必要とする任意の動物、例えば哺乳類とすることができ、ある特定の実施形態において、対象はヒト対象である。
最も単純な形態では、対象に投与される調製物は、がん治療薬と組み合わせて従来の剤形で投与される、本明細書で提供される２量体、５量体、もしくは６量体抗ＤＲ５抗体、またはその抗原結合多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は化学療法剤である。したがって、いくつかの実施形態において、抗ＤＲ５抗体及び化学療法剤は、本明細書の他の箇所に記載されている医薬賦形剤、担体、または希釈剤と組み合わせることができる。いくつかの実施形態において、抗ＤＲ５抗体及び化学療法剤は、別々の医薬組成物で投与され得る。
本明細書で提供されるＤＲ５結合分子またはその抗原結合多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、本明細書の他の箇所に記載されている任意の好適な方法により、例えば、静脈内注入により投与され得る。ある特定の実施形態において、本明細書で提供されるＤＲ５結合分子またはその抗原結合多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体は、腫瘍内に、または腫瘍細胞付近に導入することができる。
限定されるものではないが、乳房、肺、膵臓、卵巣、腎臓、結腸、及び膀胱の癌腫、ならびに黒色腫、肉腫、及びリンパ腫を含めた全てのタイプの腫瘍がこのアプローチによる治療を適用可能である。粘膜分布は、ある特定のがん、例えば、肺癌、卵巣癌、結腸直腸癌、または扁平上皮癌に有益であり得る。
したがって、いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法は、がんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であり、がんは、血液癌または固形腫瘍である。いくつかの実施形態において、がんは、血液癌、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せ、固形腫瘍である。いくつかの実施形態において、がんは、固形腫瘍、例えば、膀胱癌、結腸直腸癌、肉腫（例えば、線維肉腫）、胃癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、または膵臓癌である。
放射線
放射線療法は、電離放射線をがん性腫瘍に局所的に適用するものである。放射線療法の目標は、がん性細胞のＤＮＡを損傷して細胞死に至らせることである。放射線療法は、膀胱癌、結腸直腸癌、肉腫、胃癌、肺癌、及び膵臓癌を含めた様々ながんの治療で広く使用されている。いくつかの実施形態において、がん治療薬は放射線療法を含み、がんは非転移性癌、例えば、非転移性膀胱癌、結腸直腸癌、肉腫、胃癌、肺癌、及び膵臓癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は放射線療法を含み、当該方法はさらに、有効量の１つ以上の化学療法剤（例えば、本明細書で開示される化学療法剤）を投与することを含む。いくつかの実施形態において、化学療法剤は、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ヌクレオシド類似体、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、ｂ細胞リンパ腫２（ＢＣＬ－２）阻害剤、またはこれらの任意の組合せである。例示的な化学療法剤及び化学療法剤の組合せについては、本明細書の他の箇所及びＰＣＴ出願公開第ＷＯ２０１９／１６５３４０号でより詳細に論じられている。
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤
トポイソメラーゼＩＩは、この酵素の阻害がＤＮＡ切断及びがん細胞のアポトーシスをもたらすことから、化学療法の重要な標的となっている。トポイソメラーゼＩＩ阻害剤の例としては、エトポシド及びアントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン及びドキソルビシン）がある。ドキソルビシンは、乳癌、肉腫、卵巣癌、膀胱癌、肺癌、及び多発性骨髄腫を含む様々ながんの治療に使用されている。
ダウノルビシン（ＣＡＳ登録番号：２０８３０－８１－３）は、以下の式：
Figure 2023526224000010
を有する。
ドキソルビシン（ＣＡＳ登録番号：２３２１４－９２－８）は、以下の式：
Figure 2023526224000011
を有する。
エトポシド（ＣＡＳ登録番号：３３４１９－４２－０）は、以下の式：
Figure 2023526224000012
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は静脈内投与される。いくつかの実施形態において、がん治療薬はトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含み、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、がん治療薬はトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含み、がんは、肺癌、肉腫、または血液癌（例えば、本明細書で開示される血液癌、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される１つ以上の追加のがん治療薬を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はトポイソメラーゼ阻害剤を含み、当該方法はさらに、有効量の放射線療法を適用することを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はエトポシドを含み、がんは肺癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はエトポシドを含み、がんは血液癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はエトポシドを含み、がんは急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はエトポシドを含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される１つ以上の追加のがん治療薬を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はエトポシドを含み、当該方法はさらに、有効量の放射線療法を適用することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はエトポシドを含み、当該方法はさらに、有効量の放射線療法を適用することをさらに含み、がんは、肉腫または血液癌（例えば、本明細書で開示される血液癌、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））である。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はアントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）を含み、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、がん治療薬はアントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）を含み、がんは、肉腫または血液癌（例えば、本明細書で開示される血液癌、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はドキソルビシンを含み、がんは肉腫である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はドキソルビシンを含み、がんは血液癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はドキソルビシンを含み、がんは急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はアントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）を含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される１つ以上の追加のがん治療薬を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）を含み、当該方法はさらに、有効量の放射線療法を適用することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はアントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）を含み、当該方法はさらに、有効量の放射線療法を適用することを含み、がんは、肉腫または血液癌（例えば本明細書で開示される血液癌、例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））である。
葉酸類似体
葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）は、ある特定の化学療法の毒性作用を低減するために使用されている。ロイコボリン、例えばロイコボリンカルシウム（葉酸カルシウム）は、「ＦＯＬＦＯＸ」及び「ＦＯＬＦＩＲＩ」化学療法レジメンの構成要素である。「ＦＯＬＦＯＸ」は、ロイコボリンカルシウム（葉酸カルシウム）、５－フルオロウラシル、及びオキサリプラチンを含む。「ＦＯＬＦＩＲＩ」レジメンは、ロイコボリンカルシウム（葉酸カルシウム）、５－フルオロウラシル、及びイリノテカンを含む。ＦＯＬＦＩＲＩ及びＦＯＬＦＯＸは、進行期及び転移性の結腸直腸癌の治療に広く使用されている。
ロイコボリン（ＣＡＳ登録番号：１４９２－１８－８）は、以下の式：
Figure 2023526224000013
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、葉酸類似体は静脈内投与される。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される１つ以上の追加のがん治療薬を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の５－フルオロウラシルを投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量のイリノテカンを投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量のオキサリプラチンを投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の５－フルオロウラシル及びイリノテカンを投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の５－フルオロウラシル及びオキサリプラチンを投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、任意選択でＦＯＬＦＯＸまたはＦＯＬＦＩＲＩの１つ以上の他の構成要素と組み合わせて、有効量の放射線療法を適用することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、任意選択でＦＯＬＦＯＸまたはＦＯＬＦＩＲＩの１つ以上の他の構成要素と組み合わせて、有効量のベバシズマブを投与することを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される５－フルオロウラシルを投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量のイリノテカンを投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量のオキサリプラチンを投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される５－フルオロウラシル及びイリノテカンを投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、有効量の本明細書で開示される５－フルオロウラシル及びオキサリプラチンを投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、任意選択でＦＯＬＦＯＸまたはＦＯＬＦＩＲＩの１つ以上の他の構成要素と組み合わせて、有効量の放射線療法を適用することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は葉酸類似体（例えば、ロイコボリン）を含み、当該方法はさらに、任意選択でＦＯＬＦＯＸまたはＦＯＬＦＩＲＩの１つ以上の他の構成要素と組み合わせて、有効量のベバシズマブを投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。
白金系薬剤
白金系薬剤は、様々ながんの治療に一般的に使用されている。白金系薬剤は、ＤＮＡの架橋を引き起こしてがん細胞死滅に至らせると考えられている。白金系薬剤の例としては、シスプラチン、カルボプラチン、及びオキサリプラチンが挙げられる。
シスプラチン（ＣＡＳ登録番号：１５６６３－２７－１）は、以下の式：
Figure 2023526224000014
を有する。
カルボプラチン（ＣＡＳ登録番号：４１５７５－９４－４）は、以下の式：
Figure 2023526224000015
を有する。
オキサリプラチン（ＣＡＳ 登録番号：６３１２１－００－６）は、以下の式：
Figure 2023526224000016
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチン）を含み、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、がん治療薬は白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチン）を含み、がん治療薬は静脈内投与される。いくつかの実施形態において、がん治療薬は白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチン）を含み、がんは、胃癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））、または結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は白金系薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチン）を含み、当該方法はさらに、有効量の放射線療法を適用することを含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、がんは胃癌または結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、がんは胃癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、当該方法はさらに、放射線療法の効果量を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、当該方法はさらに、放射線療法の効果量を投与することを含み、がんは胃癌である。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、当該方法はさらに、ロイコボリン及び／または５－フルオロウラシルの効果量を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、当該方法はさらに、ロイコボリン及び／または５－フルオロウラシルの効果量を投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、当該方法はさらに、１）ロイコボリン及び／または５－フルオロウラシル、ならびに２）放射線療法の効果量を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はオキサリプラチンを含み、当該方法はさらに、１）ロイコボリン及び／または５－フルオロウラシル、ならびに２）放射線療法の効果量を投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、がんは胃癌または肺癌（例えば、ＮＳＣＬＣ）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、がんは胃癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、当該方法はさらに、放射線療法の効果量を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、当該方法はさらに、放射線療法の効果量を投与することを含み、がんは胃癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、がんは肺癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、がんはＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、当該方法はさらに、放射線療法の効果量を投与することを含み、がんは肺癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はカルボプラチンを含み、当該方法はさらに、放射線療法の効果量を投与することを含み、がんはＮＳＣＬＣである。
タキサン
タキサンは、広く使用されている化学療法剤である。タキサンは、微小管機能を途絶してがん細胞の分裂を防止することにより作用すると考えられている。タキサンの例としては、パクリタキセル及びドセタキセルが挙げられる。タキサンは水に難溶性である。典型的には、タキサンは、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ ＥＬ（登録商標）（ポリオキシル３５水添ヒマシ油）などの溶媒とともに製剤化される。また、アルブミンナノ粒子（ｎａｂ）（例えば、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（ｎａｂ－パクリタキセル））などの代替的な製剤も開発されている。
パクリタキセル（ＣＡＳ登録番号：３３０６９－６２－４）は、以下の式：
Figure 2023526224000017
を有する。
ドセタキセル（ＣＡＳ登録番号：１１４９７７－２８－５）は、以下の式：
Figure 2023526224000018
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はタキサン（例えば、パクリタキセルまたはドセタキセル）を含む。いくつかの実施形態において、タキサンは静脈内投与される。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセル（例えば、溶媒ベースパクリタキセルまたはアルブミンナノ粒子（ｎａｂ）－パクリタキセル）を含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はタキサン（例えば、パクリタキセルまたはドセタキセル）を含み、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、がん治療薬はタキサン（例えば、パクリタキセルまたはドセタキセル）を含み、がんは肺癌（例えば、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ））または膵臓癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、がんは肺癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、がんはＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、がんは膵臓癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに、放射線療法を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに、放射線療法を投与することを含み、がんはＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに放射線療法を投与することを含み、がんは膵臓癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに、ゲムシタビンを投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに、ゲムシタビン及び放射線療法を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに、ゲムシタビンを投与することを含み、がんは膵臓癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はパクリタキセルを含み、当該方法はさらに、ゲムシタビン及び放射線療法を投与することを含み、がんは膵臓癌である。
トポイソメラーゼＩ阻害剤
トポイソメラーゼは、がん化学療法における一般的な標的であり、様々な阻害剤が開発されており、現在も開発中である。Ｉ型トポイソメラーゼを阻害する化合物は、がん化学療法剤として現在使用され、または開発中である。特に、天然のＩ型トポイソメラーゼ阻害剤カンプトテシンの２つの誘導体、イリノテカン（７－エチル－１０－［４－（１－ピペリジノ）－１－ピペリジノ］カルボニルオキシ－カンプトテシン、別名ＣＰＴ－１１）、及びトポテカン（９－［（ジメチルアミノ）メチル］－１０－ヒドロキシ－（４Ｓ）－カンプトテシン）が、現在様々ながんの治療向けに販売されている。イリノテカンは、進行段階及び転移性の結腸直腸癌の治療で広く使用されているロイコボリンカルシウム（フォリン酸カルシウム）、５－フルオロウラシル、及びイリノテカンからなる「ＦＯＬＦＩＲＩ」レジメンの一部である。いくつかの実施形態において、トポイソメラーゼＩ阻害剤は静脈内投与される。
イリノテカン（ＣＡＳ登録番号１００２８６－９０－６）は、以下の式：
Figure 2023526224000019
を有する。
トポテカン（ＣＡＳ登録番号１２３９４８－８７－８）は、以下の式：
Figure 2023526224000020
を有する。
化学療法薬ヌクレオシド類似体
ゲムシタビン（２’，２’－ジフルオロ２’デオキシシチジン、またはｄＦｄＣ）（ＣＡＳ登録番号９５０５８－８１－４）は、化学療法として使用されるヌクレオシド類似体である。ゲムシタビンは、例えば、乳癌、膵臓癌、肺癌、及び卵巣癌の治療用にＦＤＡ承認済みである。ゲムシタビンは、以下の式：
Figure 2023526224000021
を有する。
この薬物は、ピリミジン類似体として、ＤＮＡ複製中、急速に成長する腫瘍細胞の核酸の構成単位の１つ（この場合はシチジン）を置き換える。このプロセスにより、新しいヌクレオシドが「欠陥」ヌクレオシドに結合できずアポトーシス（細胞の「自殺」）が生じるため、腫瘍の成長が阻止される。ゲムシタビンは、非小細胞肺癌、膵臓癌、膀胱癌、乳癌といった様々な癌腫で使用されている。ゲムシタビンは、多くの膵臓癌の標準治療である。
その他のＦＤＡ承認済みのがん治療用ヌクレオシド類似体としては、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、及び非ホジキンリンパ腫の治療用のシトシンアラビノシド（ａｒａ－Ｃまたはシタラビン）（ｗｗｗ＿ｄｏｔ＿ｄｒｕｇｓ＿ｄｏｔ＿ｃｏｍ／ｍｏｎｏｇｒａｐｈ／ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ．ｈｔｍｌ（２０１８年１１月１４日確認））、ならびに結腸癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、基底細胞癌、及び子宮頚癌の治療用のフルオロウラシル（５－ＦＵ）（ｗｗｗ＿ｄｏｔ＿ｄｒｕｇｓ＿ｄｏｔ＿ｃｏｍ／ｍｏｎｏｇｒａｐｈ／ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ．ｈｔｍｌ（２０１８年１１月１４日確認））が挙げられる。Ａｒａ－Ｃ（ＣＡＳ登録番号１４７－９４－４）は、以下の式：
Figure 2023526224000022
を有する。
５－ＦＵ（ＣＡＳ登録番号５１－２１－８）は、以下の式：
Figure 2023526224000023
を有する。
いくつかの実施形態において、化学療法剤のヌクレオシド類似体は、静脈内、髄腔内、または皮下に投与される。いくつかの実施形態において、化学療法剤のヌクレオシド類似体は静脈内投与される。
ＳＭＡＣ模倣薬
第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）は、ミトコンドリアタンパク質で、アポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）に結合し、ＩＡＰにおけるカスパーゼ（アポトーシス促進タンパク質のクラス）に結合する能力を阻害する。ＩＡＰはカスパーゼにアンタゴニスト的に結合するため、ＩＡＰのＳＭＡＣ結合はアポトーシス促進性である。ＳＭＡＣの活性を模倣する様々なＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＳＴＸ６６０、ＧＤＣ－０１５２、及びＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６が開発されている。内在性ＳＭＡＣは２価であり、同様にいくつかのＳＭＡＣ模倣薬（例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、及びＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）も２価である。一方、いくつかのＳＭＡＣ模倣薬（例えば、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＳＴＸ６６０、及びＧＤＣ－０１５２）は１価である。
ビリナパント（米国特許第８，２８３，３７２号、ＣＡＳ登録番号１２６０２５１－３１－７）は、以下の式：
Figure 2023526224000024
を有する。
ＡＰＧ－１３８７（Ｌｉ，Ｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０１６，３８１：１４－２２）は、以下の式：
Figure 2023526224000025
を有する。
Ｄｅｂｉｏ１１４３（ＡＴ－４０６／ＳＭ－４０６；Ｃａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０１１；５４（８）：２７１４－２７２６）は、以下の式：
Figure 2023526224000026
を有する。
ＡＳＴＸ６６０（Ｗａｒｄ，ＧＡ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．２０１８ Ｊｕｌ；１７（７）：１３８１－１３９１）は、以下の式：
Figure 2023526224000027
を有する。
ＧＤＣ－０１５２／ＲＧ－７４１９（Ｆｌｙｇａｒｅ，ＪＡ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５５：４１０１－４１１３ （２０１２）、ＣＡＳ登録番号８７３６５２－４８－３）は、以下の式：
Figure 2023526224000028
を有する。
ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６（ＣＡＳ登録番号：１１０７６６４－４４－７）は、米国特許第７，５７９，３２０号に記載されている。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬を含む。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６である。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は１価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＳＴＸ６６０、及びＧＤＣ－０１５２である。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は、経口投与または静脈内投与される。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は２価のＳＭＡＣ模倣薬であり、ＳＭＡＣ模倣薬は静脈内投与される。いくつかの実施形態において、ＳＭＡＣ模倣薬は１価のＳＭＡＣ模倣薬であり、ＳＭＡＣ模倣薬は経口投与される。いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＳＴＸ６６０、ＧＤＣ－０１５２、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、がんは本明細書で開示されるがんである。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、がんは頭頚部癌（例えば、頭頚部肉腫）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は２価のＳＭＡＣ模倣薬（例えば、ビリナパント）を含み、がんは頭頚部癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は２価のＳＭＡＣ模倣薬（例えば、ビリナパント）を含み、がんは頭頚部肉腫である。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は２価のＳＭＡＣ模倣薬（例えば、ビリナパント）を含み、がんは結腸直腸癌である。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、がんは乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬は２価のＳＭＡＣ模倣薬（例えば、ビリナパント）を含み、がんは乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）である。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、当該方法はさらに、放射線療法を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、当該方法はさらに、放射線療法を投与することを含み、がんは頭頚部癌（例えば、頭頚部肉腫）である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、当該方法はさらに、放射線療法を投与することを含み、がんは結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、がん治療薬はＳＭＡＣ模倣薬（例えば、１価または２価のＳＭＡＣ模倣薬、例えば、ビリナパント、ＡＰＧ－１３８７、またはＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６）を含み、当該方法はさらに、放射線を投与することを含み、がんは乳癌（例えば、トリプルネガティブ乳癌）である。
ビンカアルカロイド
ビンカアルカロイドは、微小管の重合を阻害し、そのため細胞分裂を阻害する、抗微小管及び抗有糸分裂剤のクラスである。この理由により、ビンカアルカロイドはがん化学療法として使用されている。様々なビンカアルカロイド（例えば、ビンクリスチン）が開発されている。ビンクリスチン（ＣＡＳ登録番号：５７－２２－７）は、以下の式：
Figure 2023526224000029
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はビンカアルカロイド（例えば、ビンクリスチン）であり、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、ビンカアルカロイドは静脈内投与される。
ＢＴＫ阻害剤
ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）は、Ｂ細胞の発生において重要なタンパク質である。したがって、Ｂ細胞関連がんの治療のために様々なＢＴＫ阻害剤（例えば、イブルチニブ）が開発されている。イブルチニブ（ＣＡＳ登録番号：９３６５６３－９６－１）は、以下の式：
Figure 2023526224000030
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＢＴＫ阻害剤（例えば、イブルチニブ）であり、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、ＢＴＫ阻害剤は経口投与される。
ＰＩ３Ｋδ阻害剤
ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）の阻害は、Ｂ細胞において増殖を防止しアポトーシスを誘導する。したがって、Ｂ細胞関連癌の治療のために様々なＰＩ３Ｋδ阻害剤（例えばイデラリシブ）が開発されている。イデラリシブ（ＣＡＳ登録番号：８７０２８１－８２－６）は、以下の式：
Figure 2023526224000031
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＰＩ３Ｋδ阻害剤（例えば、イデラリシブ）であり、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、ＰＩ３Ｋδ阻害剤は経口投与される。
Ｍｃｌ－１阻害剤
骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）は抗アポトーシス性抗増殖性タンパク質である。したがって、癌の治療のために様々なＭｃｌ－１阻害剤（例えば、ＭＩＫ６６５／Ｓ－６４３１５）が開発されている。ＭＩＫ６６５／Ｓ－６４３１５（ＣＡＳ登録番号：１７９９６３１－７５－６）は、以下の式：
Figure 2023526224000032
を有する。
いくつかの実施形態において、がん治療薬はＭｃｌ－１阻害剤（例えば、ＭＩＫ６６５／Ｓ－６４３１５）であり、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、Ｍｃｌ－１阻害剤は静脈内投与される。
抗ＶＥＧＦ抗体
血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、血管新生を促進することが知られているタンパク質である。ＶＥＧＦを阻害する抗体であるベバシズマブ（ＣＡＳ登録番号：２１６９７４－７５－３）は、結腸直腸癌、非小細胞肺癌、膠芽腫、腎細胞癌、子宮頸癌、上皮性卵巣癌、卵管癌、原発性腹膜癌、または肝細胞癌の治療向けに承認されている。本明細書で使用する場合、「ベバシズマブ」という用語は、ベバシズマブ及びベバシズマブバイオシミラー（例えば、ベバシズマブ－ａｗｗｂ及びベバシズマブ－ｂｖｚｒ）を含む。
いくつかの実施形態において、がん治療薬は抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、ベバシズマブ）であり、がんは本明細書で開示されるがんである。いくつかの実施形態において、抗ＶＥＧＦ抗体は静脈内投与される。
医薬組成物及び投与方法
本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子を調製しそれを必要とする対象に投与する方法は、既知であるか、または本開示の観点から容易に決定される。ＤＲ５結合分子の投与経路は、例えば、経口、非経口、吸入、または局所であり得る。本明細書で使用する場合、非経口という用語は、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、直腸、または膣内の投与を含む。これらの投与形態は好適な形態として企図されているが、別の投与形態の例として、注射用溶液、詳細には静脈内または動脈内の注射または点滴用の溶液が考えられる。好適な医薬組成物は、緩衝液（例えば、酢酸、リン酸、またはクエン酸緩衝液）、界面活性剤（例えば、ポリソルベート）、任意選択で安定化剤（例えば、ヒトアルブミン）などを含むことができる。
本明細書で論じられるように、本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子は、ＤＲ５を発現するがんのインビボ治療のための医薬有効量で投与することができる。この点において、本開示の結合分子及び化合物は、投与を容易にし、かつ活性薬剤の安定性を促進するように製剤化され得ることが理解されよう。したがって、医薬組成物は、医薬的に許容される無毒性の無菌担体、例えば、生理食塩水、無毒性緩衝液、保存料などを含むことができる。本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子の医薬有効量は、標的に対する有効な結合を達成し、かつ治療利益を達成するのに十分な量を意味する。本明細書で提供されるがん治療薬の医薬有効量は、治療利益を達成するのに十分な量を意味する。好適な製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．）１６ｔｈ ｅｄ．（１９８０）に記載されている。
本明細書で提供されるある特定の医薬組成物は、許容される剤形で経口投与することができ、このような剤形には、例えば、カプセル、錠剤、水性懸濁液または溶液が含まれる。ある特定の医薬組成物は、経鼻エアロゾルまたは吸入によって投与することもできる。このような組成物は、食塩水溶液として、ベンジルアルコールもしくはその他の好適な防腐剤、生体利用能を強化するための吸収促進剤、及び／またはその他の従来的な可溶化剤もしくは分散剤を用いて調製され得る。
単一の剤形を作製するために担体材料と組み合わされ得る２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子またはがん治療薬の量は、治療される対象及び特定の投与様式に応じて変動する。組成物は、単回用量、複数回用量として、または注入物において確立された期間にわたり、投与することができる。薬用量レジメンも、最適な所望の応答（例えば、治療または予防応答）をもたらすように調整され得る。
本明細書に記載される化合物は、任意の医薬的に許容される形態（例えば、医薬的に許容される塩の形態、または遊離塩基もしくは遊離酸の形態（その形態が医薬的に許容される場合））で投与することができる。本明細書に記載される化合物またはその医薬的に許容される塩は、医薬的に許容される担体または賦形剤中にある状態で投与することができる。
本開示の範囲に従って、本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子は、治療効果をもたらすのに十分な量で治療を必要とする対象に投与することができる。本明細書で提供される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子は、公知の技法に従って、本開示の抗体またはその抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体を従来的な医薬的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることにより調製した従来的な剤形で、対象に投与することができる。医薬的に許容される担体または希釈剤の形態及び特性は、それが組み合わされる活性成分の量、投与経路、及び他の周知の可変要素によって規定され得る。
「治療有効用量もしくは治療有効量」または「有効量」とは、投与されたときに、ＤＲ５を発現するがんを有する患者の治療に対し正の治療応答をもたらす２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子の量が意図されている。
がん治療のための本明細書で開示される組成物の治療有効用量は、投与手段、標的部位、患者の生理的状態、患者がヒトであるか動物であるか、投与される他の薬剤、及び処置が予防的なものであるか治療的なものであるかを含めた、多くの異なる因子に応じて変動する。ある特定の実施形態において、対象または患者はヒトであるが、トランスジェニック哺乳類を含めた非ヒト哺乳類が治療されてもよい。当業者に知られている通例の方法を用いて治療用量を滴定して、安全性及び有効性を最適化することができる。ある特定の実施形態において、ＤＲ５結合分子またはがん治療薬の有効量は、単剤としてのＤＲ５結合分子またはがん治療薬の有効量よりも少ない量である。
投与される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子の量は、本開示を考慮すれば過度の実験を伴うことなく当業者により容易に決定される。投与様式及び２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子のそれぞれの量に影響を及ぼす因子としては、限定されるものではないが、治療を受ける個体における疾患の重症度、疾患の履歴、ならびに年齢、身長、体重、健康状態、及び物理的状態が挙げられる。同様に、投与される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子の量は、投与様式、及び対象がこの薬剤の単回用量を受けるか多回用量を受けるかに依存する。
いくつかの実施形態において、本明細書で開示される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子及び本明細書で開示されるがん治療薬は、同時に投与される。いくつかの実施形態において、本明細書で開示される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子及びがん治療薬は、経時的に投与される。いくつかの実施形態において、当該方法は、がん治療薬を投与する前に、２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子を投与することを含む。いくつかの実施形態において、２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子は、がん治療薬を投与する少なくとも１分前、５分前、１０分前、１５分前、３０分前、１時間前、２時間前、４時間前、６時間前、１２時間前、１日前、２日前、３日前、１週間前、または２週間前に投与される。いくつかの実施形態において、２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子は、がん治療薬を投与する１分～１か月前（例えば、１分～２週間前、１分～３日前、１分～１日前、１５分～２週間前、１５分～３日前、１５分～１日前、１時間～２週間前、１時間～３日前、１時間～１日前、６時間～２週間前、６時間～３日前、６時間～１日前、１日～２週間前、または１日～３日前）に投与される。
いくつかの実施形態において、当該方法は、２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子を投与する前に、がん治療薬を投与することを含む。いくつかの実施形態において、がん治療薬は、２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子を投与する少なくとも１分前、５分前、１０分前、１５分前、３０分前、１時間前、２時間前、４時間前、６時間前、１２時間前、１日前、２日前、３日前、１週間前、または２週間前に投与される。いくつかの実施形態において、がん治療薬は、２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子を投与する１分～１か月前（例えば、１分～２週間前、１分～３日前、１分～１日前、１５分～２週間前、１５分～３日前、１５分～１日前、１時間～２週間前、１時間～３日前、１時間～１日前、６時間～２週間前、６時間～３日前、６時間～１日前、１日～２週間前、または１日～３日前）に投与される。
また、本開示は、ＤＲ５を発現するがんを治療、防止、または管理するための医薬の製造における２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子の使用も提供する。
キット及び製造物品
また、本明細書では、本明細書で開示される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子と、本明細書に記載のいずれかの方法に従って使用するための説明書とを含むキットも提供される。
また、本明細書では、本明細書で開示される２量体、５量体、または６量体のＤＲ５結合分子と、本明細書に記載のいずれかの方法で使用するためのがん治療薬とを含むキットも提供される。
また、本明細書では、本明細書で開示される２量体、５量体、もしくは６量体のＤＲ５結合分子及び／またはがん治療薬、ならびに本明細書に記載の方法のいずれかに従う使用説明書を含むキットであって、がん治療薬が第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、またはこれらの任意の組合せである、キットも提供される。
キットで提供される説明書は、典型的には、ラベルまたは添付文書（例えば、キットに含まれる紙シート）上の書面による説明書であるが、機械可読な説明書（例えば、磁気または光学記憶ディスクに載せられた説明書）も許容され、また、ウェブサイトに誘導するハイパーリンクまたはバーコードなどの電子的に保存される説明書への参照を提供するラベルまたは添付文書も同様に許容される。
本開示は、別段の指示がない限り、細胞生物学、細胞培養、分子生物学、トランスジェニック生物学、微生物学、組換えＤＮＡ、及び免疫学の従来的技法を用い、このような技法は当業者の技能範囲内である。このような技法は、文献内で十分に説明されている。例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ， ｅｄ．（２０１２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（４ｔｈ ｅｄ．；Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．（１９９２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＮＹ）；Ｄ．Ｎ．Ｇｌｏｖｅｒ ａｎｄ Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ，ｅｄｓ．，（１９９５）ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ ２ｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ），Ｖｏｌｕｍｅｓ １－４；Ｇａｉｔ，ｅｄ．（１９９０）Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ）；Ｍｕｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．米国特許第４，６８３，１９５号；Ｈａｍｅｓ ａｎｄ Ｈｉｇｇｉｎｓ，ｅｄｓ．（１９８５）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ）；Ｈａｍｅｓ ａｎｄ Ｈｉｇｇｉｎｓ，ｅｄｓ．（１９８４）Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ（ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ）；Ｆｒｅｓｈｎｅｙ（２０１６）Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌｓ，７ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｗｉｌｅｙ－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ）；Ｗｏｏｄｗａｒｄ，Ｊ．，Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｃｅｌｌｓ Ａｎｄ Ｅｎｚｙｍｅｓ（ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ）（１９８５）；Ｐｅｒｂａｌ（１９８８）Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ Ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ；２ｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）；Ｍｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｃａｌｏｓ ｅｄｓ．（１９８７）Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ Ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）；Ｓ．Ｃ．Ｍａｋｒｉｄｅｓ（２００３）Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ）；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｓ．１５１－１５５（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎ．Ｙ．）；Ｍａｙｅｒ ａｎｄ Ｗａｌｋｅｒ，ｅｄｓ．（１９８７）Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ）；Ｗｅｉｒ ａｎｄ Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．；及びＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ）を参照。
抗体工学の一般原理は、例えば、Ｓｔｒｏｈｌ，Ｗ．Ｒ．，ａｎｄ Ｌ．Ｍ．Ｓｔｒｏｈｌ（２０１２），Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（Ｗｏｏｄｈｅａｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）に記載されている。タンパク質工学の一般原理は、例えば、Ｐａｒｋ ａｎｄ Ｃｏｃｈｒａｎ，ｅｄｓ．（２００９），Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｄｅｓｉｇｎ（ＣＤＣ Ｐｒｅｓｓ）に記載されている。免疫学の一般原理は、例えば、Ａｂｂａｓ ａｎｄ Ｌｉｃｈｔｍａｎ（２０１７）Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ９ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）に記載されている。さらに、当技術分野で知られている免疫学の標準的方法は、例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ Ｏｎｌｉｎｅ Ｌｉｂｒａｒｙ）；Ｗｉｌｄ，Ｄ．（２０１３），Ｔｈｅ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ （Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ）；Ｇｒｅｅｎｆｉｅｌｄ，ｅｄ．（２０１３），Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ）；及びＯｓｓｉｐｏｗ ａｎｄ Ｆｉｓｃｈｅｒ，ｅｄｓ．，（２０１４），Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ）で得ることができる。
例示的な実施形態
提供される実施形態は以下の通りである。
実施形態１．治療を必要とするがんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、
（ａ）有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体であって、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、前記５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体と、
（ｂ）有効量のがん治療薬であって、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、前記がん治療薬と
を含む組合せ治療薬を前記対象に投与することを含む、前記方法。
実施形態２．治療を必要とするがんの対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体を投与することを含み、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的であり、
前記５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、前記２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、有効量のがん治療薬とともに投与され、前記がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、前記方法。
実施形態３．治療を必要とするがんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量のがん治療薬を投与することを含み、前記がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含み、
前記がん治療薬が、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体とともに投与され、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインがＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、前記方法。
実施形態４．治療を必要とするがんを有する対象におけるがん細胞のアポトーシスを誘導するための方法であって、
（ａ）有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体であって、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、前記５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体と、
（ｂ）有効量のがん治療薬であって、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、前記がん治療薬と
を含む組合せ治療薬を前記対象に投与することを含む、前記方法。
実施形態５．治療を必要とするがんの対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体を投与することを含み、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的であり、
前記５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、前記２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、有効量のがん治療薬とともに投与され、前記がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、前記方法。
実施形態６．治療を必要とするがんを有する対象におけるがん細胞のアポトーシスを誘導するための方法であって、有効量のがん治療薬を投与することを含み、前記がん治療薬が、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含み、
前記がん治療薬が、有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体とともに投与され、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインがＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、前記方法。
実施形態７．前記がん治療薬が葉酸類似体を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態８．前記葉酸類似体がロイコボリンを含む、実施形態７に記載の方法。
実施形態９．前記がん治療薬が白金系薬剤を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１０．前記白金系薬剤が、オキサリプラチン、カルボプラチン、またはこれらの組合せを含む、実施形態９に記載の方法。
実施形態１１．前記白金系薬剤がオキサリプラチンを含む、実施形態９または実施形態１０に記載の方法。
実施形態１２．前記白金系薬剤がカルボプラチンを含む、実施形態９～１１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１３．前記がん治療薬がタキサンを含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１４．前記タキサンがパクリタキセルを含む、実施形態１３に記載の方法。
実施形態１５．前記パクリタキセルが、溶媒ベースパクリタキセル、ｎａｂ－パクリタキセル、またはこれらの組合せを含む、実施形態１４に記載の方法。
実施形態１６．前記パクリタキセルが溶媒ベースパクリタキセルを含む、実施形態１４または実施形態１５に記載の方法。
実施形態１７．前記パクリタキセルがｎａｂ－パクリタキセルを含む、実施形態１４または実施形態１５に記載の方法。
実施形態１８．前記がん治療薬がトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１９．前記トポイソメラーゼＩＩ阻害剤がアントラサイクリンを含む、実施形態１８に記載の方法。
実施形態２０．前記アントラサイクリンがドキソルビシンを含む、実施形態１９に記載の方法。
実施形態２１．前記トポイソメラーゼＩＩ阻害剤がエトポシドを含む、実施形態１８に記載の方法。
実施形態２２．前記がん治療薬が放射線を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態２３．前記がん治療薬がＳＭＡＣ模倣薬を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態２４．前記ＳＭＡＣ模倣薬が、ビリナパント、ＧＤＣ－０１５２、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＰＧ－１３８７、ＡＳＴＸ６６０、またはこれらの組合せを含む、実施形態２３に記載の方法。
実施形態２５．前記ＳＭＡＣ模倣薬が２価のＳＭＡＣ模倣薬を含む、実施形態２３または実施形態２４に記載の方法。
実施形態２６．前記ＳＭＡＣ模倣薬がビリナパントを含む、実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態２７．前記ＳＭＡＣ模倣薬がＡＰＧ－１３８７を含む、実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態２８．前記ＳＭＡＣ模倣薬がＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６を含む、実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態２９．前記ＳＭＡＣ模倣薬が１価のＳＭＡＣ模倣薬を含む、実施形態２３または実施形態２４に記載の方法。
実施形態３０．前記ＳＭＡＣ模倣薬がＧＤＣ－０１５２を含む、実施形態２３、２４、または２９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態３１．前記ＳＭＡＣ模倣薬がＤｅｂｉｏ１１４３を含む、実施形態２３、２４、または２９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態３２．前記ＳＭＡＣ模倣薬がＡＳＴＸ６６０を含む、実施形態２３、２４、または２９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態３３．前記がん治療薬がビンカアルカロイドを含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態３４．前記ビンカアルカロイドがビンクリスチンを含む、実施形態３３に記載の方法。
実施形態３５．前記がん治療薬がＢＴＫ阻害剤を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態３６．前記ＢＴＫ阻害剤がイブルチニブを含む、実施形態３５に記載の方法。
実施形態３７．前記がん治療薬がＰＩ３Ｋδ阻害剤を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態３８．前記ＰＩ３Ｋδ阻害剤がイデラリシブを含む、実施形態３７に記載の方法。
実施形態３９．前記がん治療薬がＭｃｌ－１阻害剤を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態４０．前記Ｍｃｌ－１阻害剤がＭＩＫ６６５を含む、実施形態３９に記載の方法。
実施形態４１．前記がん治療薬が抗ＶＥＧＦ抗体を含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態４２．前記抗ＶＥＧＦ抗体がベバシズマブである、実施形態４１に記載の方法。
実施形態４３．有効量の追加のがん治療薬を投与することをさらに含む、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態４４．前記追加のがん治療薬が、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ヌクレオシド類似体、白金系薬剤、またはこれらの任意の組合せを含む、実施形態４３に記載の方法。
実施形態４５．前記追加のがん治療薬がトポイソメラーゼＩ阻害剤を含む、実施形態４３または実施形態４４に記載の方法。
実施形態４６．前記トポイソメラーゼＩ阻害剤が、イリノテカン、トポテカン、またはこれらの組合せを含む、実施形態４５に記載の方法。
実施形態４７．前記トポイソメラーゼＩ阻害剤がイリノテカンを含む、実施形態４５または実施形態４６に記載の方法。
実施形態４８．前記追加のがん治療薬がヌクレオシド類似体を含む、実施形態４３～４７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態４９．前記ヌクレオシド類似体が、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、ゲムシタビン、またはこれらの任意の組合せを含む、実施形態４８に記載の方法。
実施形態５０．前記ヌクレオシド類似体がフルオロウラシル（５－ＦＵ）を含む、実施形態４９に記載の方法。
実施形態５１．前記ヌクレオシド類似体がゲムシタビンを含む、実施形態４９に記載の方法。
実施形態５２．前記がんが血液癌または固形腫瘍である、実施形態１～５１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態５３．前記がんが血液癌である、実施形態５２に記載の方法。
実施形態５４．前記血液癌が、白血病、リンパ腫、骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せである、実施形態５２または５３に記載の方法。
実施形態５５．前記血液癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せである、実施形態５２～５４のいずれか１つに記載の方法。
実施形態５６．前記血液癌が急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である、実施形態５２～５５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態５７．前記がん治療薬がドキソルビシンを含む、実施形態５３～５６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態５８．前記がんが固形腫瘍である、実施形態５２に記載の方法。
実施形態５９．前記がんが、膀胱癌、結腸直腸癌、肉腫、胃癌、肺癌、膵臓癌、黒色腫、卵巣癌、頭頚部癌、または乳癌である、実施形態５２または５８に記載の方法。
実施形態６０．前記がんが肉腫である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態６１．前記肉腫が、線維肉腫、軟骨肉腫、または骨肉腫である、実施形態６０に記載の方法。
実施形態６２．前記肉腫が線維肉腫である、実施形態６０に記載の方法。
実施形態６３．前記がん治療薬がドキソルビシンを含む、実施形態６０～６２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態６４．前記がんが結腸直腸癌である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態６５．前記がん治療薬がオキサリプラチンを含む、実施形態６４に記載の方法。
実施形態６６．前記追加の治療薬が５－ＦＵを含む、実施形態６５に記載の方法。
実施形態６７．前記がん治療薬がロイコボリンを含む、実施形態６４に記載の方法。
実施形態６８．前記追加の治療薬がオキサリプラチンまたはイリノテカンを含む、実施形態６７に記載の方法。
実施形態６９．前記がんが胃癌である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態７０．前記がん治療薬がカルボプラチンを含む、実施形態６９に記載の方法。
実施形態７１．前記がん治療薬がオキサリプラチンを含む、実施形態６９に記載の方法。
実施形態７２．前記がん治療薬がパクリタキセルを含む、実施形態６９に記載の方法。
実施形態７３．前記がんが肺癌である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態７４．前記肺癌が非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である、実施形態７３に記載の方法。
実施形態７５．前記がん治療薬がカルボプラチンを含む、実施形態７３または実施形態７４に記載の方法。
実施形態７６．前記がん治療薬がパクリタキセルを含む、実施形態７３または実施形態７４に記載の方法。
実施形態７７．前記がんが膵臓癌である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態７８．前記がん治療薬がパクリタキセルを含む、実施形態７７に記載の方法。
実施形態７９．前記追加の治療薬がゲムシタビンを含む、実施形態７８に記載の方法。
実施形態８０．前記がんが頭頚部癌である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態８１．前記頭頚部癌が頭頚部肉腫である、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８２．前記がんが乳癌である、実施形態５２、５８、または５９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態８３．前記乳癌がトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である、実施形態８２に記載の方法。
実施形態８４．前記抗体またはその多量体化フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲ；あるいは配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、または配列番号７３のＳｃＦｖ配列を含む抗体のＣＤＲ、あるいは前記ＣＤＲのうちの１個以上において１つまたは２つのアミノ酸置換を伴う６個のＣＤＲを含む、実施形態１～８３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態８５．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３が、それぞれ配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む、実施形態８４に記載の方法。
実施形態８６．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３が、それぞれ配列番号５または配列番号９０及び配列番号６のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む、実施形態８５に記載の方法。
実施形態８７．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３または４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３が、それぞれ配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む、実施形態８５に記載の方法。
実施形態８８．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含むか、あるいは前記ＶＨ及び前記ＶＬが、それぞれ配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、もしくは配列番号７３に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有するＳｃＦｖ内に含まれる、実施形態１～８４のいずれか１つに記載の方法。
実施形態８９．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３または４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、それぞれ配列番号５または配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、実施形態８８に記載の方法。
実施形態９０．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３または４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、それぞれ配列番号５または配列番号９０及び配列番号６に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、実施形態８９に記載の方法。
実施形態９１．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは３～１２個の抗原結合ドメインが、抗体ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、それぞれ配列番号７及び配列番号８に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、実施形態８９に記載の方法。
実施形態９２．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、２個の２価ＩｇＡ結合ユニットまたはその多量体化フラグメントと、Ｊ鎖またはそのフラグメントもしくはバリアントとを含む２量体のＩｇＡまたはＩｇＡ様抗体であり、各結合ユニットが、抗原結合ドメインに各々会合した２個のＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントを含む、実施形態１～９１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態９３．前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、分泌因子またはそのフラグメントもしくはバリアントをさらに含む、実施形態９２に記載の方法。
実施形態９４．前記ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃα３－ｔｐドメインを含む、実施形態９２または実施形態９３に記載の方法。
実施形態９５．前記ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃα１ドメイン及び／またはＣα２ドメインを含む、実施形態９４に記載の方法。
実施形態９６．前記ＩｇＡ重鎖定常領域がヒトＩｇＡ定常領域である、実施形態９２～９５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態９７．各結合ユニットが、前記ＩｇＡ定常領域またはその多量体化フラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを各々含む２個のＩｇＡ重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含む、実施形態９２～９６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態９８．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、それぞれ５または６個の２価ＩｇＭ結合ユニットを含む５量体または６量体のＩｇＭ抗体であり、各結合ユニットが、抗原結合ドメインに各々会合した２個のＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントを含む、実施形態１～９１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態９９．前記ＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃμ４－ｔｐドメインを含む、実施形態９８に記載の方法。
実施形態１００．前記ＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃμ１ドメイン、Ｃμ２ドメイン、及び／またはＣμ３ドメインを含む、実施形態９９に記載の方法。
実施形態１０１．前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、５量体であり、かつＪ鎖またはその機能的フラグメントまたはそのバリアントをさらに含む、実施形態９８～１００のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１０２．前記ＩｇＭ重鎖定常領域がヒトＩｇＭ定常領域である、実施形態９８～１０１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１０３．各結合ユニットが、前記ＩｇＭ定常領域またはその多量体化フラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを各々含む２個のＩｇＭ重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含む、実施形態９８～１０２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１０４．前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントが、多量体結合分子の血清半減期に影響を及ぼし得る野生型Ｊ鎖に対する１つ以上の単一アミノ酸置換、欠失、または挿入を含むバリアントＪ鎖であり、前記多量体結合分子が、動物に投与されたときに、前記１つ以上の単一アミノ酸の置換、欠失、または挿入以外は同一である参照多量体結合分子が同じ動物種に同じ方法で投与されたときよりも長い血清半減期を示す、実施形態１０１～１０３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１０５．前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントが、野生型ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｙ１０２に対応するアミノ酸位置でのアミノ酸置換を含む、実施形態１０４に記載の方法。
実施形態１０６．配列番号９７のＹ１０２に対応する前記アミノ酸が、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、またはアルギニン（Ｒ）で置換されている、実施形態１０５に記載の方法。
実施形態１０７．配列番号９７のＹ１０２に対応する前記アミノ酸がアラニン（Ａ）で置換されている、実施形態１０６に記載の方法。
実施形態１０８．前記Ｊ鎖が、バリアントヒトＪ鎖であり、配列番号９８のアミノ酸配列を含む、実施形態１０７に記載の方法。
実施形態１０９．前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントが、ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｎ４９、アミノ酸Ｓ５１、またはＮ４９及びＳ５１の両方に対応するアミノ酸位置でのアミノ酸置換を含み、配列番号９７の位置Ｓ５１に対応する単一のアミノ酸置換がスレオニン（Ｔ）置換ではない、実施形態１０４に記載の方法。
実施形態１１０．配列番号９７のＮ４９に対応する前記位置が、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、スレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、またはアスパラギン酸（Ｄ）で置換されている、実施形態１０９に記載の方法。
実施形態１１１．配列番号９７のＮ４９に対応する前記位置がアラニン（Ａ）で置換されている、実施形態１１０に記載の方法。
実施形態１１２．配列番号９７のＳ５１に対応する前記位置が、アラニン（Ａ）またはグリシン（Ｇ）で置換されている、実施形態１０９～１１１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１１３．配列番号９７のＳ５１に対応する前記位置がアラニン（Ａ）で置換されている、実施形態１１２に記載の方法。
実施形態１１４．前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントが、異種ポリペプチドをさらに含み、前記異種ポリペプチドが、前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントと直接的または間接的に融合している、実施形態９２～９７または１０１～１１３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１１５．前記異種ポリペプチドが、ペプチドリンカーを介して前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントと融合している、実施形態１１４に記載の方法。
実施形態１１６．前記ペプチドリンカーが、５個以上２５個以下のアミノ酸を含む、実施形態１１５に記載の方法。
実施形態１１７．前記ペプチドリンカーが、ＧＧＧＧＳ（配列番号９９）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１００）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０１）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０２）、またはＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１０３）からなる、実施形態１１５または１１６に記載の方法。
実施形態１１８．前記異種ポリペプチドが、前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＮ末端、Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＣ末端、あるいはＪ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントのＮ末端及びＣ末端の両方と融合している、実施形態１１４～１１７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１１９．前記異種ポリペプチドが、多量体結合分子の吸収、分布、代謝、及び／または排泄（ＡＤＭＥ）に影響を及ぼし得る、実施形態１１４～１１８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１２０．前記異種ポリペプチドが抗原結合ドメインを含む、実施形態１１４～１１８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１２１．前記異種ポリペプチドの前記抗原結合ドメインが、抗体またはその抗原結合フラグメントである、実施形態１２０に記載の方法。
実施形態１２２．前記抗原結合フラグメントが、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆｄフラグメント、Ｆｖフラグメント、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）フラグメント、またはこれらの任意の組合せを含む、実施形態１２１に記載の方法。
実施形態１２３．前記抗原結合フラグメントがｓｃＦｖフラグメントである、実施形態１２１または実施形態１２２に記載の方法。
実施形態１２４．前記組合せ治療薬の投与が、前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体、あるいは前記がん治療薬の単独の投与に比べて増強された治療効果をもたらす、実施形態１～１２３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態１２５．前記増強された治療効果が、腫瘍成長速度の低下、腫瘍退縮、または生存期間の延長を含む、実施形態１２４に記載の方法。
実施形態１２６．前記対象がヒトである、実施形態１～１２５のいずれか１つに記載の方法。
上記で引用された全ての参考文献、及び本明細書で引用された全ての参考文献は、その全体が参照により本明細書に援用される。
以下の実施例は、限定としてではなく、例として提供するものである。
以下の実施例では、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及び抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ｂを使用した。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及び抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ｂを米国特許出願公開第２０１８－０００９８９７号に記載の通りに構築した。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａは、表２に示すように、ＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列番号９０及び配列番号６と、配列番号９８を含むＪ鎖とを含み、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ｂは、表２に示すように、ＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列番号７及び配列番号８を含み、Ｊ鎖は含まない。
実施例１：インビトロでの化学療法剤の組合せ
抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａと化学療法剤との組合せによるインビトロでの効力を、腫瘍細胞株と初代ヒト肝細胞において以下のように評価した。腫瘍細胞（表４に示す）または初代ヒト肝細胞（ＢｉｏＩＶＴ Ｘ００８００１）を播種し、翌日に細胞を、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及び化学療法剤（表４に示す）を組み合わせた段階希釈液で処置した。３７℃で７２時間後、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、ルミノメーターで細胞生存率を読み取った。
各々の試験した細胞株及び各々の試験した化学療法剤と抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとの組合せにおける相乗作用を、表形式のデータフレームに集約した。このデータフレームを統計計算言語Ｒの入力として使用し、各単一化合物に対しシグモイド用量応答を適合させた。相乗作用（２つの化合物の組合せによる効果がそれらの相加効果のみの場合よりも大きいこととして定義）についてもＲで計算した。相乗作用スコア化に選択した参照モデルはＢｌｉｓｓ独立性（ＢＩ）であり、薬物Ａ及びＢにおける効果Ｅという観点で表現したものである。
ＥＡ＋ＥＢ－ＥＡＥＢ＝ＥＡＢ
ＢＩは、各薬物の効果が互いに独立して作用することを想定している。ＢＩを使用するという選択は、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａに比べて各化学療法剤が別々の異なる作用機序を有することに基づくものである。ＢＩからの相乗作用スコアは一連の用量の組合せに対し生成され、負のスコアは拮抗作用を反映し、正のスコアは相乗作用を表す。これらのスコアを、一連の用量の組合せを表す２Ｄ次元に対し、拮抗作用の谷及び相乗作用の山を伴う３次元表面プロットで可視化する。平均Ｂｌｉｓｓスコアを表４に示す。ドキソルビシン、パクリタキセル、カルボプラチン、及びオキサリプラチンで処置した例示的ながん細胞株または健康な肝細胞における全体の最大Ｂｌｉｓｓスコア、最大ＢｌｉｓｓにおけるＭａｂ Ａ及び化合物の濃度、ならびに化合物、Ｍａｂ Ａ、及び組合せの細胞傷害性パーセントを表５に示す。ドキソルビシン、パクリタキセル、カルボプラチン、及びオキサリプラチンの例示的な３Ｄ表面プロットを、それぞれ、図１Ａ～１Ｄ、図２Ａ～２Ｉ、図３Ａ～３Ｅ、及び図４Ａ～４Ｈに示す。
（表４）化学療法剤の組合せ
Figure 2023526224000033
Figure 2023526224000034
（表５）最大Ｂｌｉｓｓの比較
Figure 2023526224000035
実施例２：インビボでの放射線の組合せ
２×１０６ Ｃｏｌｏ２０５腫瘍細胞（結腸腺癌腫瘍から単離した結腸直腸癌細胞）を雌のＮＣｒヌードマウスの側腹部の皮下移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、２Ｇｙ／動物の標的放射線を５日オン、続いて２日オフ、続いて５日オンで投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及び放射線の処置レジメンの組合せを投与した。腫瘍体積（ｎ＝１０動物／群）を図５Ａに示し、全生存期間を図５Ｂに示す。１５日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及び標的放射線による組合せ療法は、標的放射線単独に比べて腫瘍体積を有意に低減した。組合せ療法は、放射線単独に比べて、全生存期間を有意に延長しなかった。
実施例３：インビボでのオキサリプラチンの組合せ
２×１０６ Ｃｏｌｏ２０５腫瘍細胞を雌のＮＣｒヌードマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、８ｍｇ／ｋｇのオキサリプラチンを週１回３週間腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びオキサリプラチンの処置レジメンの組合せを投与した。腫瘍体積（ｎ＝１０動物／群）を図５Ｃに示し、全生存期間を図５Ｄに示す。１５日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びオキサリプラチンによる組合せ療法は、オキサリプラチン単独に比べて腫瘍体積を有意に低減した。また、組合せ処置は、オキサリプラチン単独に比べて全生存期間も有意に延長した。
実施例４：インビボでのパクリタキセルの組合せ
２×１０６ Ｃｏｌｏ２０５腫瘍細胞を雌のＮＣｒヌードマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、２５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルを１日おきに合計５回用量静脈内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びパクリタキセルの処置レジメンの組合せを投与した。腫瘍体積（ｎ＝１０動物／群）を図５Ｅに示し、全生存期間を図５Ｆに示す。１５日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びパクリタキセルによる組合せ療法は、単剤のパクリタキセル処置群に比べて腫瘍体積を有意に低減しなかった。また、組合せ処置は、パクリタキセル単独に比べて全生存期間を有意に延長することもなかった。ただし、１００日目の試験終了時に、パクリタキセル処置群では１０頭中２頭が視認できる腫瘍を有さず、一方組合せ群では１０頭中８頭が腫瘍を有しなかった。
実施例５：インビボでのイリノテカンの組合せ
２×１０６ Ｃｏｌｏ２０５腫瘍細胞を雌のＮＣｒヌードマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、１００ｍｇ／ｋｇのイリノテカンを週１回３週間腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びイリノテカンの処置レジメンの組合せを投与した。腫瘍体積（ｎ＝１０動物／群）を図５Ｇに示し、全生存期間を図５Ｈに示す。１５日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びイリノテカンによる組合せ療法は、イリノテカン単独に比べて腫瘍体積を有意に低減した。また、組合せ処置は、イリノテカン単独に比べて全生存期間も有意に延長した。
実施例６：インビボでのＡＢＴ－１９９の組合せ
１×１０７ ＤＯＨＨ－２腫瘍細胞を雌のＣＢ．１７ ＳＣＩＤマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、１００ｍｇ／ｋｇのＡＢＴ－１９９（ベネトクラクス）を１日１回２１日間経口投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びＡＢＴ－１９９の処置レジメンの組合せを投与した。腫瘍体積（ｎ＝１０動物／群）を図５Ｉに示し、全生存期間を図５Ｊに示す。１６日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ ＡとＡＢＴ－１９９との組合せ療法は、いずれの単独治療と比べても腫瘍体積を低減したが、組合せ療法とＡＢＴ－１９９単独療法との差は統計的有意差に達しなかった。組合せ処置は、いずれの単独治療に比べても全生存期間を有意に延長した。
実施例７：インビトロでのＳＭＡＣ模倣薬の組合せ
抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ ＡとＳＭＡＣ模倣薬ｂｉｒｉｎａｐａｎｔまたはＧＤＣ－０１５２との組合せのインビトロでの効力を、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞及び初代ヒト肝細胞において以下のように評価した。腫瘍細胞または初代ヒト肝細胞（ＢｉｏＩＶＴ Ｘ００８００１）を播種し、翌日に細胞を、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びアポトーシス促進剤／ＳＭＡＣ模倣薬の単独のまたは組み合わせた段階希釈液で処置した。３７℃で７２時間後、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、ルミノメーターで細胞生存率を読み取った。
単剤のＭａｂ ＡまたはＳＭＡＣ模倣薬の細胞生存率曲線を、それぞれ図６Ａ及び図６Ｂに示す。単剤のＭａｂ Ａは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞に対し部分的な細胞傷害性を示し、単剤のビリナパントまたはＧＤＣ－０１５２は、ほとんど細胞傷害性を示していない。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞または初代ヒト肝細胞におけるＭａｂ Ａとビリナパントとの組合せの細胞生存率曲線を、それぞれ図７Ａ及び図７Ｂに示す。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞または初代ヒト肝細胞におけるＭａｂ ＡとＧＤＣ－０１５２との組合せの細胞生存率曲線を、それぞれ図８Ａ及び図８Ｂに示す。ビリナパント及びＧＤＣ－０１５２のＩＣ５０値をそれぞれ表６及び表７に示す。
（表６）ビリナパントのＩＣ５０値
Figure 2023526224000036
（表７）ＧＤＣ－０１５２のＩＣ５０値
Figure 2023526224000037
各々の試験した細胞株及び各々の試験したＳＭＡＣ模倣薬と抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとの組合せにおける相乗作用を、表形式のデータフレームに集約した。このデータフレームを統計計算言語Ｒの入力として使用し、各単一化合物に対しシグモイド用量応答を適合させた。相乗作用（２つの化合物の組合せによる効果がそれらの相加効果のみの場合よりも大きいこととして定義）についてもＲで計算した。相乗作用スコア化に選択した参照モデルはＢｌｉｓｓ独立性（ＢＩ）であり、薬物Ａ及びＢにおける効果Ｅという観点で表現したものである。
ＥＡ＋ＥＢ－ＥＡＥＢ＝ＥＡＢ
ＢＩは、各薬物の効果が互いに独立して作用することを想定している。ＢＩを使用するという選択は、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａに比べて各化学療法剤が別々の異なる作用機序を有することに基づくものである。ＢＩからの相乗作用スコアは一連の用量の組合せに対し生成され、負のスコアは拮抗作用を反映し、正のスコアは相乗作用を表す。これらのスコアを、一連の用量の組合せを表す２Ｄ次元に対し、拮抗作用の谷及び相乗作用の山を伴う３次元表面プロットで可視化する。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞におけるビリナパント及びＧＤＣ－０１５２の３Ｄ表面プロットを、それぞれ図９Ａ及び図９Ｂに示す。また、Ｌｏｅｗｅモデルを用いて相乗作用のスコア化も完了した。同様の相乗作用レベルが見出された（データは示さない）。
Ｍａｂ ＡとＧＤＣ－０１５２またはビリナパントとの組合せは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞に対し、強力で相乗的な細胞傷害性をもたらす。これらの組合せは、初代ヒト肝細胞には実質的な細胞傷害性をもたらさない。
実施例８：ＤＲ５アゴニスト耐性腫瘍細胞におけるインビトロでのＳＭＡＣ模倣薬の組合せ
０．１μｇ／ｍＬの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ｂの存在下でＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を培養して、感受性細胞を排除し、ＤＲ５アゴニスト耐性細胞集団を富化することにより、ＤＲ５アゴニスト耐性ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を生成した。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ ＡとＳＭＡＣ模倣薬ビリナパントまたはＧＤＣ－０１５２との組合せのインビトロでの効力を、実施例８に記載の方法に従ってＤＲ５アゴニスト耐性腫瘍細胞において評価した。単剤のビリナパントまたはＧＤＣ－０１５２の細胞生存率曲線を、それぞれ図１０Ａ及び図１０Ｂに示す。単剤のビリナパントまたはＧＤＣ－０１５２は、ほとんど細胞傷害性を示していない。Ｍａｂ ＡとビリナパントまたはＧＤＣ－０１５２との組合せの細胞生存率曲線を、それぞれ図１１Ａ及び図１１Ｂに示す。ビリナパント及びＧＤＣ－０１５２のＩＣ５０値をそれぞれ表８及び表９に示す。Ｍａｂ ＡとＳＭＡＣ模倣薬との組合せは、ＤＲ５アゴニストに対する耐性を獲得したＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞に対し、強力で相乗的な細胞傷害性をもたらす。
（表８）ビリナパントのＩＣ５０値
Figure 2023526224000038
（表９）ＧＤＣ－０１５２のＩＣ５０値
Figure 2023526224000039
実施例９：インビトロでの化学療法剤の組合せ
抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａと、ＢＴＫ阻害剤イブルチニブ、ＰＩ３Ｋδ阻害剤イデラリシブ、Ｍｃｌ－１阻害剤ＭＩＫ６６５、またはビンクリスチンとの組合せのインビトロでの効力を、腫瘍細胞株及び初代ヒト肝細胞において以下のように評価した。腫瘍細胞または初代ヒト肝細胞（ＢｉｏＩＶＴ Ｘ００８００１）を播種し、翌日に細胞を、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及び化学療法剤／標的剤の単独または組み合わせの段階希釈液で処置した。３７℃で７２時間後、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、ルミノメーターで細胞生存率を読み取った。
各々の試験した細胞株及び各々の試験した化学療法剤／標的剤と抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとの組合せにおける相乗作用を、表形式のデータフレームに集約した。このデータフレームを統計計算言語Ｒの入力として使用し、各単一化合物に対しシグモイド用量応答を適合させた。相乗作用（２つの化合物の組合せによる効果がそれらの相加効果のみの場合よりも大きいこととして定義）についてもＲで計算した。相乗作用スコア化に選択した参照モデルはＢｌｉｓｓ独立性（ＢＩ）であり、薬物Ａ及びＢにおける効果Ｅという観点で表現したものである。
ＥＡ＋ＥＢ－ＥＡＥＢ＝ＥＡＢ
ＢＩは、各薬物の効果が互いに独立して作用することを想定している。ＢＩを使用するという選択は、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａに比べて各化学療法剤が別々の異なる作用機序を有することに基づくものである。ＢＩからの相乗作用スコアは一連の用量の組合せに対し生成され、負のスコアは拮抗作用を反映し、正のスコアは相乗作用を表す。これらのスコアを、一連の用量の組合せを表す２Ｄ次元に対し、拮抗作用の谷及び相乗作用の山を伴う３次元表面プロットで可視化する。また、Ｌｏｅｗｅモデルを用いて相乗作用のスコア化も完了した。同様の相乗作用レベルが見出された（データは示さない）。
Ｕ－９３７細胞における単剤のＭａｂ Ａまたはイブルチニブの細胞生存率曲線を、それぞれ図１２Ａ及び図１２Ｂに示す。単剤のＭａｂ ＡはＵ－９３７細胞に部分的な細胞傷害性を示し、単剤のイブルチニブは細胞傷害性をほとんど示していない。Ｕ－９３７腫瘍細胞におけるＭａｂ Ａとイブルチニブとの組合せの細胞生存率曲線を図１２Ｃに示す。Ｕ－９３７細胞におけるＭａｂ Ａ及びイブルチニブの相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを図１２Ｄに示す。Ｍａｂ Ａとイブルチニブとの組合せは、Ｕ－９３７細胞に弱い相乗的な細胞傷害性をもたらす。
ＯＣＩ－ＬＹ７細胞における単剤のＭａｂ Ａまたはイブルチニブの細胞生存率曲線を、それぞれ図１３Ａ及び図１３Ｂに示す。単剤のＭａｂ ＡはＯＣＩ－ＬＹ７細胞に部分的な細胞傷害性を示し、単剤のイブルチニブは試験した最高濃度でのみ細胞傷害性を示している。ＯＣＩ－ＬＹ７腫瘍細胞におけるＭａｂ Ａとイブルチニブとの組合せの細胞生存率曲線を図１３Ｃに示す。ＯＣＩ－ＬＹ７細胞におけるＭａｂ Ａ及びイブルチニブの相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを図１３Ｄに示す。Ｍａｂ Ａとイブルチニブとの組合せは、ＯＣＩ－ＬＹ７細胞に相乗的な細胞傷害性も拮抗的な細胞傷害性ももたらさない。
ＤＯＨＨ－２細胞における単剤のＭａｂ Ａまたはイデラリシブの細胞生存率曲線を、それぞれ図１４Ａ及び図１４Ｂに示す。単剤のＭａｂ ＡはＤＯＨＨ－２細胞に完全な細胞傷害性を示し、単剤のイデラリシブは試験した最高濃度でのみ細胞傷害性を示している。ＤＯＨＨ－２腫瘍細胞におけるＭａｂ Ａとイデラリシブとの組合せの細胞生存率曲線を図１４Ｃに示す。ＤＯＨＨ－２細胞におけるＭａｂ Ａ及びイデラリシブの相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを図１４Ｄに示す。Ｍａｂ Ａとイデラリシブとの組合せは、ＤＯＨＨ－２細胞に相乗的な細胞傷害性も拮抗的な細胞傷害性ももたらさない。
ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞における単剤のＭａｂ ＡまたはＭＩＫ６６５の細胞生存率曲線を、それぞれ図１５Ａ及び図１５Ｂに示す。単剤のＭａｂ ＡはＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞に部分的な細胞傷害性を示し、単剤のＭＩＫ６６５は完全な細胞傷害性を示している。ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２腫瘍細胞におけるＭａｂ ＡとＭＩＫ６６５との組合せの細胞生存率曲線を図１５Ｃに示す。ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞におけるＭａｂ Ａ及びＭＩＫ６６５の相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを図１５Ｄに示す。Ｍａｂ ＡとＭＩＫ６６５との組合せは、ＷＳＵ－ＤＬＣＬ２細胞に相乗的な細胞傷害性をもたらす。
Ｕ－９３７細胞における単剤のＭａｂ ＡまたはＭＩＫ６６５の細胞生存率曲線を、それぞれ図１６Ａ及び図１６Ｂに示す。単剤のＭａｂ ＡはＵ－９３７細胞に部分的な細胞傷害性を示し、単剤のＭＩＫ６６５は完全な細胞傷害性を示している。Ｕ－９３７腫瘍細胞におけるＭａｂ ＡとＭＩＫ６６５との組合せの細胞生存率曲線を図１６Ｃに示す。Ｕ－９３７細胞におけるＭａｂ Ａ及びＭＩＫ６６５の相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを図１６Ｄに示す。Ｍａｂ ＡとＭＩＫ６６５との組合せは、Ｕ－９３７細胞に弱い相乗的な細胞傷害性をもたらす。
Ｕ－９３７細胞における単剤のＭａｂ Ａまたはビンクリスチンの細胞生存率曲線を、それぞれ図１７Ａ及び図１７Ｂに示す。単剤のＭａｂ ＡはＵ－９３７細胞に部分的な細胞傷害性を示し、単剤のビンクリスチンは強力な細胞傷害性を示している。Ｕ－９３７腫瘍細胞におけるＭａｂ Ａとビンクリスチンとの組合せの細胞生存率曲線を図１７Ｃに示す。Ｕ－９３７細胞におけるＭａｂ Ａ及びビンクリスチンの相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを図１７Ｄに示す。Ｍａｂ Ａとビンクリスチンとの組合せは、Ｕ－９３７細胞に弱い相乗的な細胞傷害性をもたらす。
非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）腫瘍細胞株におけるＭａｂ Ａと化学療法剤／標的剤との組合せの相乗作用スコアを表１０に示す。
（表１０）ＮＨＬにおける化学療法剤と標的剤との組合せ
Figure 2023526224000040
初代ヒト肝細胞における抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとイブルチニブ、イデラリシブ、ＭＩＫ６６５、またはビンクリスチンとの組合せの細胞生存率曲線を、それぞれ図１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、及び１８Ｄに示す。Ｍａｂ Ａとイブルチニブ、イデラリシブ、及びビンクリスチンとの組合せは、初代ヒト肝細胞に実質的な細胞傷害性をもたらさない。単剤のＭＩＫ６６５は初代ヒト肝細胞に細胞傷害性を引き起こすが、これは、Ｍａｂ Ａとの組合せでは実質的に強化されない。
実施例１０：インビトロでのビリナパントの組合せ
抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せのインビトロでの効力を、様々な腫瘍細胞株において以下のように評価した。腫瘍細胞または初代ヒト肝細胞（ＢｉｏＩＶＴ Ｘ００８００１）を播種し、翌日に細胞を、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの単独のまたは組み合わせた段階希釈液で処置した。３７℃で７２時間後、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、ルミノメーターで細胞生存率を読み取った。Ａ２０５８、ＢＴ－２０、ＤＶ－９０、ＥＳ－２、ＨＣＣ１５、ＨＣＴ１１６、ＨＴ１０８０、ＫＹＳＥ４１０、ＭＥＷＯ、ＯＶＣＡＲ－５、ＳＫ－ＬＵ－１、ＳＫ－ＭＥＬ－５、ＳＮＵ－１、ＳＷ７８０、ＳＷ１３５３、及びＴ２４における抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せの細胞生存率曲線を、それぞれ図１９Ａ、１９Ｃ、１９Ｅ、１９Ｇ、１９Ｉ、１９Ｋ、１９Ｍ、１９Ｏ、１９Ｑ、１９Ｓ、１９Ｕ、１９Ｗ、１９Ｙ、１９ＡＡ、１９ＡＣ、及び１９ＡＥに示す。相乗作用は、先の実施例に記載されているように定量した。Ａ２０５８、ＢＴ－２０、ＤＶ－９０、ＥＳ－２、ＨＣＣ１５、ＨＣＴ１１６、ＨＴ１０８０、ＫＹＳＥ４１０、ＭＥＷＯ、ＯＶＣＡＲ－５、ＳＫ－ＬＵ－１、ＳＫ－ＭＥＬ－５、ＳＮＵ－１、ＳＷ７８０、ＳＷ１３５３、及びＴ２４細胞における相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを、それぞれ図１９Ｂ、１９Ｄ、１９Ｆ、１９Ｈ、１９Ｊ、１９Ｌ、１９Ｎ、１９Ｐ、１９Ｒ、１９Ｔ、１９Ｖ、１９Ｘ、１９Ｚ、１９ＡＢ、１９ＡＤ、及び１９ＡＦに示す。様々な腫瘍細胞株におけるＭａｂ Ａとビリナパントとの組合せの平均Ｂｌｉｓｓ相乗作用スコア、及びビリナパントの様々な濃度で定量されたＩＣ５０値を表１１～１３に示す。
（表１１）ビリナパントの平均Ｂｌｉｓｓスコア及びＩＣ５０値
Figure 2023526224000041
（表１２）ビリナパントの平均Ｂｌｉｓｓスコア及びＩＣ５０値
Figure 2023526224000042
（表１３）ビリナパントの平均Ｂｌｉｓｓスコア及びＩＣ５０値
Figure 2023526224000043
実施例１１：インビボでのビリナパントの組合せ
ＭＤＡ－ＭＢ－２３１－トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）モデル
５×１０６ ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞を雌のＮＣｒ ｎｕ／ｎｕマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに１１回用量静脈内投与するか、２．５ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに７回用量腹腔内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＧ Ｍａｂ Ｂを１日おきに３回用量静脈内投与するか、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＧ Ｍａｂ Ｂ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与した（ｎ＝１０動物／群）。２６日目までの経時的な腫瘍体積を図２０Ａに示す。５４日目までの腫瘍体積を図２０Ｂに示し、全生存期間を図２０Ｃに示す。２２日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントによる組合せ療法は、ビリナパント単独に比べて腫瘍体積を有意に低減した。抗ＤＲ５ ＩｇＧ Ｍａｂ Ｂとビリナパントとの組合せも、ビリナパント単独に比べて腫瘍体積を有意に低減したが、腫瘍成長阻害は抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを用いた場合に比べて非常に小さいものであった。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せは、ビリナパント単独に比べて全生存期間も有意に延長した。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せ処置群の全ての動物が少なくとも部分奏効を達成し、１０頭中４頭の動物が１００日目に腫瘍を有しなかった。
ＥＢＣ－１非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）モデル
３×１０６ ＥＢＣ－１腫瘍細胞を雌のＢＡＬＢ／Ｃヌードマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～２００ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに１１回用量静脈内投与するか、３０ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに７回用量腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与した（ｎ＝１０動物／群）。個別の動物の体重減少が１５％を超えた場合は休薬日を与え、体重減少が１０％未満に回復したら投与を再開した。
経時的な腫瘍体積を図２１Ａに示す。ビリナパント群の３頭のマウス及び組合せ処置群の６頭のマウスが体重減少のために投与を見合わせたものの、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せ療法は、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ単独に比べて腫瘍体積を有意に低減し、試験３１日目時点で１０頭中９頭のマウスが腫瘍を有しなかった。
ＨＴ－１０８０－線維肉腫モデル
１×１０７ ＨＴ－１０８０腫瘍細胞を雌のＮＣｒ ｎｕ／ｎｕマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに１１回用量静脈内投与するか、３０ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに２回用量腹腔内投与し、続いて１５ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに５回用量腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与した（ｎ＝１０動物／群）。
経時的な腫瘍体積を図２１Ｂに示す。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントによる組合せ療法は、いずれの単剤単独に比べても腫瘍体積を有意に低減し、組合せ処置群の全てのマウスが試験２７日目時点で腫瘍を有しなかった。
ＨＣＴ１１６－結腸直腸癌モデル
５×１０６ ＨＣＴ１１６腫瘍細胞を雌のｎｕ／ｎｕマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が７５～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに１１回用量静脈内投与するか、１５ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに７回用量腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与した（ｎ＝１０動物／群）。
経時的な腫瘍体積を図２１Ｃに示す。抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せ療法は腫瘍体積を部分的に低減したが、試験１９日目には統計的有意差に達しなかった。
ＳＡ３８４０－骨肉腫ＰＤＸモデル
直径２～３ｍｍのＳＡ３８４０腫瘍断片を、雌のＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～２００ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに１１回用量静脈内投与するか、３０ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに７回用量腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与した（ｎ＝５動物／群）。個別の動物の体重減少が１５％を超えた場合は休薬日を与え、体重減少が１０％未満に回復したら投与を再開した。
経時的な腫瘍体積を図２１Ｄに示す。ビリナパント群及び組合せ投与群の各１頭が体重減少のために投与を見合わせたものの、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントによる組合せ療法は、ビヒクル対照群に比べて腫瘍体積を有意に低減した。
ＯＶ１５６３１及びＯＶ１５８４１卵巣ＰＤＸモデル
直径２～３ｍｍのＯＶ１５６３１及びＯＶ１５８４１の腫瘍断片を、雌のＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～２００ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計１１回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに１１回用量静脈内投与するか、３０ｍｇ／ｋｇのビリナパントを３日おきに７回用量腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの処置レジメンの組合せを投与した（ｎ＝５動物／群）。これらのモデルでは、組合せによる相乗作用は見られなかった。
実施例１２：頭頚部癌におけるインビトロでのビリナパントの組合せ
抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せのインビトロでの効力を、様々な頭頚部腫瘍細胞株において以下のように評価した。腫瘍細胞を播種し、翌日に細胞を、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びビリナパントの単独のまたは組み合わせた段階希釈液で処置した。３７℃で７２時間後、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、ルミノメーターで細胞生存率を読み取った。Ｄｅｔｒｏｉｔ５６２及びＫＹＳＥ２７０における抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａとビリナパントとの組合せの例示的な細胞生存率曲線を、それぞれ図２２Ａ及び図２２Ｃに示す。相乗作用は、先の実施例に記載されているように定量した。Ｄｅｔｒｏｉｔ５６２細胞及びＫＹＳＥ２７０細胞における相乗作用スコア３Ｄ表面プロットを、それぞれ図２２Ｂ及び図２２Ｄに示す。様々な頭頚部腫瘍細胞株におけるＭａｂ Ａとビリナパントとの組合せの平均Ｂｌｉｓｓスコアを表１４に示す。
（表１４）頭頚部腫瘍細胞株におけるビリナパントとの組合せ
Figure 2023526224000044
実施例１３：インビトロでのＳＭＡＣ模倣薬の組合せ
抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａと様々なＳＭＡＣ模倣薬との組合せのインビトロでの効力を、様々な腫瘍細胞株において以下のように評価した。腫瘍細胞または初代ヒト肝細胞（ＢｉｏＩＶＴ Ｘ００８００１）を播種し、翌日に細胞を、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びＳＭＡＣ模倣薬の単独のまたは組み合わせた段階希釈液で処置した。３７℃で７２時間後、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、ルミノメーターで細胞生存率を読み取った。ＥＢＣ－１細胞における抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ ＡとＡＰＧ－１３８７、ビリナパント、ＡＳＴＸ６６０、及びＤｅｂｉｏ１１４３との組合せの例示的な細胞生存率曲線を、それぞれ図２３Ａ～図２３Ｄに示す。相乗作用は、先の実施例に記載されているように定量した。様々な腫瘍細胞株におけるＭａｂ ＡとＳＭＡＣ模倣薬との組合せの平均Ｂｌｉｓｓ相乗作用スコアを表１５に示す。平均すると、２価のＳＭＡＣ模倣薬であるビリナパント及びＡＰＧ－１３８７は、１価のＳＭＡＣ模倣薬であるＤｅｂｉｏ１１４３及びＡＳＴＸ６６０よりも高い平均Ｂｌｉｓｓスコアを有する。
（表１５）固形腫瘍細胞株におけるＳＭＡＣ模倣薬との組合せの平均Ｂｌｉｓｓスコア
Figure 2023526224000045
実施例１４：インビボでのベバシズマブの組合せ
２×１０６ Ｃｏｌｏ２０５腫瘍細胞を雌のＮＣｒヌードマウスの側腹部の皮下に移植した。平均腫瘍体積が１００～１５０ｍｍ３に達したら、マウスに、ビヒクルを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇの抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａを１日おきに合計７回用量静脈内投与するか、５ｍｇ／ｋｇのベバシズマブを２週に１回５週間腹腔内投与するか、または抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びベバシズマブの処置レジメンの組合せを投与した。腫瘍体積（ｎ＝１０動物／群）を図２４Ａに示し、全生存期間を図２４Ｂに示す。１９日目（全ての対照動物が試験に参加した最後の日）において、抗ＤＲ５ ＩｇＭ Ｍａｂ Ａ及びベバシズマブによる組合せ療法は、ベバシズマブ単独に比べて腫瘍体積を有意に低減した。また組合せ処置は、いずれの単剤単独に比べても全生存期間を有意に延長した。
（表１６）本開示における他の配列
Figure 2023526224000046
Figure 2023526224000047

Claims (31)

  1. 治療を必要とするがんを有する対象における悪性細胞の成長を阻害する、遅延させる、または低減するための方法であって、
    （ａ）有効量の、ＤＲ５に特異的かつアゴニスト的に結合する、５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体であって、前記ＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～１２個の抗原結合ドメイン、あるいは前記ＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、またはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の３～４個の抗原結合ドメインが、ＤＲ５特異的かつアゴニスト的である、前記５量体もしくは６量体のＩｇＭもしくはＩｇＭ様抗体、または２量体のＩｇＡもしくはＩｇＡ様抗体、あるいはこれらの多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、または誘導体と、
    （ｂ）有効量のがん治療薬であって、第２のミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）模倣薬、放射線、葉酸類似体、白金系薬剤、タキサン、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ビンカアルカロイド、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ホスホイノシチド３キナーゼデルタ（ＰＩ３Ｋδ）阻害剤、骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）阻害剤、抗ＶＥＧＦ抗体、またはこれらの任意の組合せを含む、前記がん治療薬と
    を含む組合せ治療薬を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  2. 前記がん治療薬がＳＭＡＣ模倣薬を含み、前記ＳＭＡＣ模倣薬が２価のＳＭＡＣ模倣薬を含む、請求項１に記載の方法。
  3. 前記ＳＭＡＣ模倣薬がビリナパントを含む、請求項２に記載の方法。
  4. 前記がん治療薬が、ロイコボリン、オキサリプラチン、カルボプラチン、パクリタキセル、アントラサイクリン、エトポシド、ビンクリスチン、イブルチニブ、イデラリシブ、ＭＩＫ６６５、ベバシズマブ、ビリナパント、ＧＤＣ－０１５２、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ４０８２６、Ｄｅｂｉｏ１１４３、ＡＰＧ－１３８７、ＡＳＴＸ６６０、またはこれらの任意の組合せを含む、請求項１に記載の方法。
  5. 有効量の追加のがん治療薬を投与することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
  6. 前記追加のがん治療薬が、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ヌクレオシド類似体、白金系薬剤、またはこれらの任意の組合せを含む、請求項５に記載の方法。
  7. 前記追加のがん治療薬が、イリノテカン、トポテカン、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、ゲムシタビン、またはこれらの任意の組合せを含む、請求項６に記載の方法。
  8. 前記がんが血液癌である、請求項１に記載の方法。
  9. 前記血液癌が、白血病、リンパ腫、骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せである、請求項８に記載の方法。
  10. 前記血液癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、慢性リンパ性白血病、ヘアリー細胞白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、これらの任意の転移、またはこれらの任意の組合せである、請求項８に記載の方法。
  11. 前記がんが固形腫瘍である、請求項１に記載の方法。
  12. 前記がんが、膀胱癌、結腸直腸癌、肉腫、胃癌、肺癌、膵臓癌、頭頚部癌、黒色腫、卵巣癌、または乳癌である、請求項１１に記載の方法。
  13. 前記がんが、線維肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部肉腫、またはトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である、請求項１２に記載の方法。
  14. 前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の前記３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは前記３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、
    （ａ）６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３であって、それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲ、あるいは配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、または配列番号７３のＳｃＦｖ配列を含む抗体のＣＤＲ、あるいは前記ＣＤＲのうちの１個以上において１つまたは２つのアミノ酸置換を伴う６個のＣＤＲを含む、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３；ならびに／あるいは
    （ｂ）それぞれ配列番号１及び配列番号２；配列番号３及び配列番号４；配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６；配列番号７及び配列番号８；配列番号９及び配列番号１０；配列番号１１及び配列番号１２；配列番号１３及び配列番号１４；配列番号１５及び配列番号１６；配列番号１７及び配列番号１８；配列番号１９及び配列番号２０；配列番号２１及び配列番号２２；配列番号２３及び配列番号２４；配列番号２５及び配列番号２６；配列番号２７及び配列番号２８；配列番号２９及び配列番号３０；配列番号３１及び配列番号３２；配列番号３３及び配列番号３４；配列番号３５及び配列番号３６；配列番号３７及び配列番号３８；配列番号３９及び配列番号４０；配列番号４１及び配列番号４２；配列番号４３及び配列番号４４；配列番号４５及び配列番号４６；配列番号４７及び配列番号４８；配列番号４９及び配列番号５０；配列番号５１及び配列番号５２；配列番号５３及び配列番号５４；配列番号５５及び配列番号５６；配列番号８２及び配列番号８３；配列番号８４及び配列番号８５；配列番号８６及び配列番号８７；または配列番号８８及び配列番号８９に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列
    を含むか、あるいは前記ＶＨ及び前記ＶＬが、それぞれ配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、もしくは配列番号７３に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有するＳｃＦｖ内に含まれる、請求項１に記載の方法。
  15. 前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の前記３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは前記３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、
    （ａ）６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３であって、それぞれ配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３；ならびに／あるいは
    （ｂ）それぞれ配列番号５もしくは配列番号９０及び配列番号６、または配列番号７及び配列番号８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列
    を含む、請求項１４に記載の方法。
  16. 前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体の前記３もしくは４個の抗原結合ドメインまたは前記３～１２個の抗原結合ドメインが、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨ及び前記ＶＬが、
    （ａ）６個の免疫グロブリン相補性決定領域：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３であって、それぞれ配列番号７及び配列番号８のＶＨ及びＶＬのアミノ酸配列を含む抗体のＣＤＲを含む、前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３；ならびに／または
    （ｂ）それぞれ配列番号７及び配列番号８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列
    を含む、請求項１５に記載の方法。
  17. 前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、２個の２価ＩｇＡ結合ユニットまたはその多量体化フラグメントと、Ｊ鎖またはそのフラグメントもしくはバリアントとを含む２量体のＩｇＡまたはＩｇＡ様抗体であり、各結合ユニットが、抗原結合ドメインに各々会合した２個のＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量化フラグメントを含み、前記ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量化フラグメントが、各々Ｃα３－ｔｐドメインを含む、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。
  18. 前記ＩｇＡ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃα１ドメイン及び／またはＣα２ドメインを含む、請求項１７に記載の方法。
  19. 前記ＩｇＡ重鎖定常領域がヒトＩｇＡ定常領域である、請求項１７に記載の方法。
  20. 各結合ユニットが、前記ＩｇＡ定常領域またはその多量体化フラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを各々含む２個のＩｇＡ重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含む、請求項１７に記載の方法。
  21. 前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、それぞれ５または６個の２価ＩｇＭ結合ユニットを含む５量体または６量体のＩｇＭ抗体であり、各結合ユニットが、抗原結合ドメインに各々会合した２個のＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントを含み、前記ＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃμ４－ｔｐドメインを含む、請求項１～１６いずれか１項に記載の方法。
  22. 前記ＩｇＭ重鎖定常領域またはその多量体化フラグメントが、各々Ｃμ１ドメイン、Ｃμ２ドメイン、及び／またはＣμ３ドメインを含む、請求項２１に記載の方法。
  23. 前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体が、５量体であり、かつＪ鎖またはその機能的フラグメントまたはそのバリアントをさらに含む、請求項２１に記載の方法。
  24. 前記ＩｇＭ重鎖定常領域がヒトＩｇＭ定常領域である、請求項２１に記載の方法。
  25. 各結合ユニットが、前記ＩｇＭ定常領域またはその多量体化フラグメントに対しアミノ末端側に位置するＶＨを各々含む２個のＩｇＭ重鎖と、免疫グロブリン軽鎖定常領域に対しアミノ末端側に位置するＶＬを各々含む２個の免疫グロブリン軽鎖とを含む、請求項２１に記載の方法。
  26. 前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントが、多量体結合分子の血清半減期に影響を及ぼし得る野生型Ｊ鎖に対する１つ以上の単一アミノ酸置換、欠失、または挿入を含むバリアントＪ鎖であり、前記多量体結合分子が、動物に投与されたときに、前記１つ以上の単一アミノ酸置換、欠失、または挿入以外は同一である参照多量体結合分子が同じ動物種に同じ方法で投与されたときよりも長い血清半減期を示す、請求項２３に記載の方法。
  27. 前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントが、
    （ａ）野生型ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｙ１０２に対応するアミノ酸位置でのアミノ酸置換、
    （ｂ）野生型ヒトＪ鎖（配列番号９７）のアミノ酸Ｙ１０２に対応するアミノ酸位置でのアラニン（ａ）置換、または
    （ｃ）配列番号９８のアミノ酸配列
    を含む、請求項２６に記載の方法。
  28. 前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントが、異種ポリペプチドをさらに含み、前記異種ポリペプチドが、前記Ｊ鎖またはその機能的フラグメントもしくはバリアントに直接的または間接的に融合している、請求項２６に記載の方法。
  29. 前記組合せ治療薬の投与が、前記抗体またはその多量体化抗原結合フラグメント、バリアント、もしくは誘導体、あるいは前記がん治療薬の単独の投与に比べて増強された治療効果をもたらす、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。
  30. 前記増強された治療効果が、腫瘍成長速度の低下、腫瘍退縮、または生存期間の延長を含む、請求項２９に記載の方法。
  31. 前記対象がヒトである、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。
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