JP2008508858A - マクロファージ−刺激タンパク質受容体(ron)の阻害 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、マクロファージ-刺激タンパク質受容体("MSP-R"又は"RON")に特異的な抗体を投与することを含む、哺乳動物における腫瘍及び他の疾患の治療法に関する。本発明は更に、RON活性化を阻害する、ヒト抗体を含むRONに特異的な抗体又は抗体断片を含有する組成物を提供する。
RONは、受容体チロシンキナーゼのc-metファミリーに属する。RONは、細胞外α鎖及び膜貫通β鎖で構成された、ヘテロ二量体タンパク質である。RONは最初に、1本鎖前駆体として発現され、その後α及びβ鎖へ切断される(1)。β鎖は、MSPの受容体への結合に必要であり、並びにクリングルドメイン2及び3は、RON/MSP相互作用に必要であるとると考えられる。米国公開特許第2003/0073656号。RONの細胞外ドメインは、c-metファミリー受容体の対応するドメインとほとんど相同性がないと思われる。実際、c-metファミリーの他の受容体を刺激する肝細胞増殖因子(HGF)のRON受容体への結合は、チロシンキナーゼ活性を刺激しない。WO02/083047。
RONの阻害は腫瘍又は癌細胞株の増殖を排除することができるかどうかを説明する研究は、まだ報告されていない。
本発明は、マクロファージ-刺激タンパク質受容体("MSP-R"又は"RON")に特異的な抗体を投与することを含む、哺乳動物において腫瘍及び他の疾患を治療する方法に関する。本発明は更に、RON活性化を阻害する、ヒト抗体を含む、RONに特異的な抗体又は抗体断片を含有する組成物を提供する。
本発明は、RONの活性化を阻害する抗体又はその断片の有効量を投与することによる、RONを発現する腫瘍細胞の成長、増殖、転移活性(すなわち、移動及び/又は浸潤)を阻害する方法を提供する。本発明は、RONに特異的な抗体又はその断片の治療用組成物も提供する。更に本発明は、ヒトRON受容体チロシンキナーゼに対する完全なヒト抗体を提供する。このような抗体は、IMC-41A2、IMC-41A10及びIMC-41B12、並びにその断片を含むが、これらに限定されるものではない。
グリシン(G)、アラニン(A)、バリン、(V)、ロイシン(L)及びイソロイシン(I);
アスパラギン酸(D)及びグルタミン酸(E);
アラニン(A)、セリン(S)及びトレオニン(T);
ヒスチジン(H)、リシン(K)及びアルギニン(R);
アスパラギン(N)及びグルタミン(Q);
フェニルアラニン(F)、チロシン(Y)及びトリプトファン(W)。
2種のFab抗-RON抗体(IMC-41A10及びIMC-41B12)の開発及び特徴決定
ファージディスプレイライブラリーからのヒト抗-RON Fab抗体の選択 この選択のために、3.7x1010種のクローンを含む大きいヒトFabファージディスプレイライブラリーを使用した。このライブラリーストックは、対数期に増殖し、M13K07ヘルパーファージで救済し、2YTAK培地(アンピシリン100μg/ml及びカナマイシン50g/mlを含有する2YT)中で30℃で一晩増幅した。このファージ調製物を、4%PEG/0.5M NaCl中で沈殿させ、Fcタンパク質500μg/mlを含有する3%無脂肪ミルク/PBS中に再懸濁し、37℃で1時間インキュベーションし、抗-Fc Fab断片を展示しているファージを捕獲し、他の非特異的結合をブロックした。
Claims (57)
- CDR1の配列番号2 (SYAMH);CDR2の配列番号4 (VISYDGSNKYYADSVKG)、及びCDR3の配列番号6 (FSGWPNNYYYYGMDV)からなる群より選択される1種又は複数の重鎖CDR配列を含む、RONに特異的なモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項1記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- CDR1の配列番号11 (RSSQSLLHSNGFNYVD);CDR2の配列番号13 (FGSYRAS)、及びCDR3の配列番号15 (MQALQTPPWT)からなる群より選択される1種又は複数の軽鎖CDR配列を含む、RONに特異的なモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項3記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号7の重鎖可変領域配列又は配列番号16の軽鎖可変領域配列を含む、請求項4記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、該配列を伴う重鎖及び軽鎖の両方を含む、請求項5記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号9の重鎖配列及び配列番号18の軽鎖配列を含む、請求項6記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- CDR1の配列番号50 (RSSQSLLHSNGYNYLD);CDR2の配列番号52 (LGSNRAS)、及びCDR3の配列番号54 (MQALQTPRT)からなる群より選択される1種又は複数の軽鎖CDR配列を含む、RONに特異的なモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項8記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号41の重鎖可変領域配列又は配列番号42の軽鎖可変領域配列を含む、請求項9記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、前記配列を伴う重鎖及び軽鎖の両方を含む、請求項10記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号56の重鎖配列又は配列番号58の軽鎖配列を含む、請求項11記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- CDR1の配列番号20 (SHYWS);CDR2の配列番号23 (YIYYSGSTNYNPSLKS)、及びCDR3の配列番号24 (IPNYYDRSGYYPGYWYFDL)からなる群より選択される1種又は複数の重鎖CDR配列を含む、RONに特異的なモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項13記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- CDR1の配列番号16 (TLRSGFNVDSYRIS);CDR2の配列番号17 (YKSDSDK)、及びCDR3の配列番号18 (MIWHSSAWV)からなる群より選択される1種又は複数の軽鎖CDR配列を含む、RONに特異的なモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項15記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号25の重鎖可変領域配列又は配列番号35の軽鎖可変領域配列を含む、請求項16記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、該配列を伴う重鎖及び軽鎖の両可変領域を含む、請求項17記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号27の重鎖配列を有する、請求項18記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 前記抗体が、配列番号37又は39の軽鎖配列を有する、請求項19記載のモノクローナル抗体又はその断片。
- 配列番号1、3、5、8、10、12、14、17、19、21、23、26、29、31、33、36、38、43、45、47、49、51、53、55及び57からなる群より選択される核酸配列を含む、単離された核酸分子。
- 対照配列に作動可能に連結された、請求項21記載の核酸を含む、発現ベクター。
- 請求項22記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
- 抗体の発現を可能にする条件下で、請求項23記載の宿主細胞を培養することを含む、抗体を作製する方法。
- 請求項1〜20のいずれか1項記載のモノクローナル抗体又はその断片、及び医薬として許容される担体を含有する、医薬組成物。
- 特異的結合を得るために、試料を請求項1〜20のいずれか1項記載の抗体又はその断片と接触させステップ、及びそのような結合を検出するステップを含む、試料中のRONの存在を検出する方法。
- RONに特異的な抗体又はその断片の有効量を哺乳動物に投与するステップを含む、RONを発現している哺乳動物腫瘍細胞の増殖を阻害する方法。
- RONに特異的な抗体又はその断片の有効量を哺乳動物に投与するステップを含む、RONを発現している哺乳動物腫瘍細胞の転移活性を阻害する方法。
- RONに特異的な抗体又は抗体断片を哺乳動物に投与するステップを含む、哺乳動物においてRON活性により仲介された炎症を治療する方法。
- 小型有機分子を投与するステップを更に含む、請求項27〜29のいずれか1項記載の方法であって、当該小型有機分子は、化学療法薬、抗血管新生薬又はRON活性化阻害薬である、前記方法。
- 前記抗体が、小型有機分子に結合される、請求項30記載の方法。
- 受容体チロシンキナーゼに特異的な1種又は複数の抗体を投与するステップを更に含む、請求項27〜31のいずれか1項記載の方法。
- 前記受容体チロシンキナーゼが、EGFR又はVEGFRである、請求項32記載の方法。
- 前記腫瘍細胞が、結腸、膵臓、前立腺、胃、肺、肝臓、卵巣、腎臓、乳房及び脳からなる群より選択される、請求項27、28及び30〜33のいずれか1項記載の方法。
- 前記腫瘍細胞が結腸に由来する、請求項34記載の方法。
- 前記腫瘍細胞が、上皮細胞又は神経内分泌細胞である、請求項27、28及び30〜33のいずれか1項記載の方法。
- 前記のRONに特異的な抗体又はその断片がヒト抗体である、請求項27〜36のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、MSPのRONへの結合を阻止する、請求項27〜37のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、投与量約1〜約10mg/Kgで投与される、請求項27〜38のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、投与量約3〜約8mg/Kgで投与される、請求項39記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1の配列番号2 (SYAMH);CDR2の配列番号4 (VISYDGSNKYYADSVKG)、及びCDR3の配列番号6 (FSGWPNNYYYYGMDV)からなる群より選択される1種又は複数の重鎖CDR配列を含む、請求項27〜40のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項41記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1の配列番号11 (RSSQSLLHSNGFNYVD);CDR2の配列番号13 (FGSYRAS)、及びCDR3の配列番号15 (MQALQTPPWT)からなる群より選択される1種又は複数の軽鎖CDR配列を含む、請求項27〜40のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項43記載の方法。
- 前記抗体が、配列番号7の重鎖可変領域配列又は配列番号16の軽鎖可変領域配列を含む、請求項44記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1の配列番号50 (RSSQSLLHSNGYNYLD);CDR2の配列番号52 (LGSNRAS)、及びCDR3の配列番号54 (MQALQTPRT)からなる群より選択される1種又は複数の軽鎖CDR配列を含む、請求項27〜40のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項46記載の方法。
- 前記抗体が、配列番号41の重鎖可変領域配列又は配列番号42の軽鎖可変領域配列を含む、請求項47記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1の配列番号20 (SHYWS);CDR2の配列番号23 (YIYYSGSTNYNPSLKS)、及びCDR3の配列番号24 (IPNYYDRSGYYPGYWYFDL)からなる群より選択される1種又は複数の重鎖CDR配列を含む、請求項27〜40のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項49記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1の配列番号16 (TLRSGFNVDSYRIS);CDR2の配列番号17 (YKSDSDK)、及びCDR3の配列番号18 (MIWHSSAWV)からなる群より選択される1種又は複数の軽鎖CDR配列を含む、請求項27〜40のいずれか1項記載の方法。
- 前記抗体が、CDR1、CDR2及びCDR3配列を含む、請求項51記載の方法。
- 前記抗体が、配列番号25の重鎖可変領域配列又は配列番号35の軽鎖可変領域配列を含む、請求項52記載の方法。
- 前記抗体が、該配列を伴う重鎖及び軽鎖の両可変領域を含む、請求項53記載の方法。
- 前記抗体が、配列番号27の重鎖配列及び配列番号37又は39の軽鎖配列を含む、請求項54記載の方法。
- RONに特異的な抗体又はその断片を含有する、哺乳動物においてRONを発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する治療用組成物。
- 前記抗体又はその断片がヒト抗体である、請求項56記載の治療用組成物。
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