JP2023512070A - 皮膚疾患を微生物治療するための組成物及び方法 - Google Patents

Abstract

本開示は、スキンケア組成物、スキンケア製剤、及び頭皮障害の治療を提供するための方法に関する。より詳細には、本開示は、フケ症を含む頭皮障害を治療するための、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、方法及び組成物に関する。

Description

本開示は、スキンケア組成物、スキンケア製剤、及び頭皮障害の治療を提供するための方法に関する。より詳細には、本開示は、フケ症などの頭皮障害を治療するための方法並びに少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む組成物に関する。

電子的に提出された配列表の参照
ＡＳＣＩＩテキストファイルとして本出願と共に電子的に提出する配列表（名称：２０２１０１２７＿ＮＢ４１７１４ＰＣＴ＿ＳＴ２５；サイズ：２ＫＢ；作成日：２０２１年１月２７日）の内容は本出願の一部を構成し、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

皮膚は、生物を乾燥から保護するだけでなく、生物を有害であることが多い外部の物質の侵入からも保護するバリアとして機能している。

皮膚は多様な微生物群集の生息地でもあり、その大部分は、共生（非病原性常在（ｎｏｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｐｅｒｍａｎｅｎｔ ｒｅｓｉｄｅｎｔ））又は通過（一過性（ｔｅｍｐｏｒａｒｙ ｒｅｓｉｄｅｎｔ））生物である。病原体と相互作用する場合は、微生物のみが利益を享受し、その一方で、宿主は最終的に危害を被る。皮膚上に生息する多くの皮膚病原体は、通常、共生生物として見ることができるが、微生物叢の乱れ（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｄｙｓｂｉｏｓｉｓ）（又は微生物の不均衡）、宿主の遺伝子変異、及び免疫状態が引き金となって、共生型から病原型へと変化することがある（非特許文献１）。

表皮は皮膚組織の最外領域を構成し、それ自体が、環境に対する実際の保護外皮を形成している。表皮の外層（角質層（Ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ、Ｈｏｒｎｙ ｌａｙｅｒ））は環境と接する部分であり、角質層の独特な構造が、皮膚を保護すると共に、決まった量の水と結合することによって自身の柔軟性を安定化させている（非特許文献２）。

空間的には、皮膚の微生物叢は表皮の下側の区画まで広がっていることもある（非特許文献３）。皮脂腺の密度が高い領域である顔、胸、及び背中などの部位では、プロピオニバクテリウム属菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）やマラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）などの脂肪を好む微生物の増殖が活性化される。

マラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）は、皮膚微生物叢の主要な真菌であり、ほぼ全ての人の頭皮に見られ、これらに限定されるものではないが、脂漏性皮膚炎、フケ症、及び癜風などの最も一般的な皮膚疾患に関与している。フケ症とは、皮膚の脂漏に慣用されている用語である。主に関係しているのはマラセチア・レストリクタ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｒｅｓｔｒｉｃｔａ、Ｍ．ｒｅｓｔｒｉｃｔａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ、Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）であり、有病率は人口のほぼ５０％と非常に高い（非特許文献４）。治療には、抗菌剤ではなく抗真菌剤を適用することにより、疾患を改善することができる。その元となる病原性の機序は完全には解明されていない。皮膚バリア機能が損なわれると、疾患の過程が促進される（非特許文献５）。

マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ）は脂肪酸合成酵素を持たないため、炭素源を皮脂の脂質に頼る必要がある。これらはまた、不飽和ＦＡ（例えば、オレイン酸）を有効に利用するためのデルタ２，３－エノイル－ＣｏＡイソメラーゼも欠損している。マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）は皮脂の脂肪を餌とし（トリグリセリドを分解して刺激性を有する脂肪酸にする１種又は複数種のリパーゼを分泌することによる）、皮脂の脂肪が分解されると、副産物として脂肪酸（オレイン酸など）が放出される。多くの人は遊離脂肪酸に対する感受性が高い。その理由は、遊離脂肪酸は、過剰増殖及びスケーリングを誘発する可能性や、炎症にも関与しているアラキドン酸の放出を誘発し、それに頭皮が反応して刺激を感じる可能性があるためである。この刺激に反応して、頭皮には腫れ、発赤、及び痒みが生じ始め、体が刺激源を取り去ろうとするため、皮膚細胞は通常よりも速く体から剥がれ落ちる。皮膚が剥がれ落ちることによって、目に見える薄片が頭皮に現れる。これがフケである。

Ｆｉｎｄｌｅｙ，Ｋ．ａｎｄ Ｇｒｉｃｅ，Ｅ．Ａ．，Ｔｈｅ Ｓｋｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ：Ａ Ｆｏｃｕｓ ｏｎ Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｓｋｉｎ Ｄｉｓｅａｓｅ．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ．２０１４，１０ Ｐ．Ｍ．Ｅｌｉａｓ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｒａｔｕｍ Ｃｏｒｎｅｕｍ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ Ｂａｒｒｉｅｒ，Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．１３，１９８８，９７，１０５ Ｎａｋａｔｓｕｊｉ，Ｔ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ Ｅｘｔｅｎｄｓ ｔｏ Ｓｕｂｅｐｉｄｅｒｍａｌ Ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｎｏｒｍａｌ Ｓｋｉｎ．Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０１３，４ Ｓｃｈｏｍｍｅｒ，Ｎ．Ｎ．；Ｇａｌｌｏ，Ｒ．Ｌ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２０１３，２１，６６０，６６８ Ｈａｒｄｉｎｇ，Ｃ．Ｒｅｔ ａｌ．，Ｄａｎｄｒｕｆｆ：ａ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｉｐｉｄｓ ｉｎ ｓｃａｌｐ ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ａｎｄ ｉｍｐａｉｒｅｄ ｂａｒｒｉｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｒｅｓ．２００２，２９４，２２１，２３０

頭皮障害の治療を提供するための方法及びスキンケア組成物、例えば、これらに限定されるものではないが、頭皮のフケが多い状態を治療するための方法及び組成物を見出すことが依然として求められている。

本開示は、頭皮障害の治療を提供するための組成物及び方法に関する。より詳細には、本開示は、フケ症を含む頭皮障害を治療するための方法及び少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む組成物に関する。

予期せぬことに、本発明者らは、微生物、特にヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物が、フケを誘発するマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）、特にマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の脂質分解活性により生成した遊離脂肪酸を消費することができ、それにより、それを必要としている対象のフケが多い状態を軽減することが可能になることを確認した。更に本発明者らは、予期せぬことに、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物が、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減し、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去し、且つマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減できることを確認した。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一態様において、頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢（ｅｃｏｆｌｏｒａ）のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は前記頭皮障害を軽減及び／又は治療し、この組成物は、サピエン酸（Ｃ１６：１ ｃｉｓ－６）、パルミチン酸（Ｃ１６：０）、ミリスチン酸（Ｃ１４：０）、ペトロセリン酸（Ｃ１８：１ ｃｉｓ－６）、ペンタデシル酸（Ｃ１５：０）、ステアリン酸（Ｃ１８：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）、レイック酸（ｌｅｉｃ ａｃｉｄ）、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される脂質を分解する。

一実施形態において、組成物は、頭皮障害の治療に使用するための、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含むスキンケア組成物であり、前記組成物は前記頭皮障害を軽減及び／又は治療し、この組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は前記頭皮障害を軽減及び／又は治療し、この組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療し、この組成物はマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する。

一実施形態において、組成物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物である。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するための有効量のスキンケア組成物と、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分とを含むスキンケア製品であり、前記組成物は前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、組成物は、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分と、本明細書に記載するスキンケア製剤を、スキンケア製剤の総重量に対し少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、最大で１０％と、を含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックからなる群から選択される、スキンケア製品である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、本明細書に記載するスキンケア組成物を含むスキンケア製品を前記対象に局所投与することを含む、方法である。

更に本明細書においては、本明細書に記載する組成物と、それを使用するための取扱説明書と、を含む、皮膚状態を治療するためのキットを提供する。幾つかの実施形態において、キットは、組成物を適用するように構成された１又は複数の塗布具を更に含む。

本開示の特徴及び利点は、以下の詳細な説明を読むことにより、当業者によってより容易に理解されるであろう。明確化のために別々の実施形態に関連して上に記載した及び後に記載する、本開示の特定の特徴を、組み合わせて単一の構成要素として提供することもできることを理解すべきである。反対に、簡潔化のために単一の実施形態に関連して記載した本開示の様々な特徴を、別々に又は任意のサブコンビネーションで提供することもできる。下記において、本発明の１つの幅広い態様との関連で言及される実施形態は、上に記載した本発明の他の幅広い態様のそれぞれに等しく適用できることが理解されるであろう。文脈に他の指示がない限り、以下に記載する実施形態は、組み合わせてもよいことが更に理解されるであろう。

頭皮障害
本開示の趣旨における「頭皮障害」という用語は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮の環境叢の乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの任意の組合せを包含する。

本開示の趣旨における「フケが多い状態」という用語は、頭皮の過度の乾燥又は過度の皮脂分泌によって現れ、場合によって、乾燥した若しくは脂肪性の（ｇｒｅａｓｙ）若しくは油性の（ｏｉｌｙ）フケが存在するか、若しくは掻痒さえ存在する、及び／又は表皮の炎症が存在することを特徴とし得る状態を指す。

乾燥したフケが多い状態は、頭皮が乾燥症であることを示しており、角質層の過度に速い再生が組み合わさっていることもある。乾性フケ片は、一般に、小さな白色又は灰色の薄片の形態にあり、頭皮全体及び衣服の上に広がり、見た目を不快にする。

頭皮の乾燥に伴う痒みは、紅斑、掻痒症、又は炎症さえ引き起こす可能性がある。

脂肪性若しくは油性のフケが多い状態は、脂漏性皮膚炎の一形態である。脂漏性皮膚炎に罹患している人は、紅斑が生じた頭皮が大きな脂肪性若しくは油性の黄色の鱗屑で覆われており、これが包みを形成するように蓄積する。頭皮には掻痒があり、患部に灼熱感を生じることも多い。この現象は、病原性微生物、特にマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ．）が存在することによって増幅され得る。本明細書に記載するマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）としては、マラセチア・レストリクタ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｒｅｓｔｒｉｃｔａ、Ｍ．ｒｅｓｔｒｉｃｔａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ、Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）が挙げられるが、これらに限定されない。皮脂から脂肪酸を遊離する性質を有するこれらの微生物は、表皮のバリア機能を損傷し、炎症を生じさせる可能性がある。

頭皮がフケが多い状態にあると、皮膚のバリアはバランスを失い、その健全性及び水和作用が損なわれ、環境叢が乱れる。頭皮の皮膚には刺激及び掻痒が生じ、脆く、水分が低下し、感染しやすくなる。

予期せぬことに、本発明者らは、微生物、特にヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物が、フケを誘発するマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の脂質分解活性により生成した遊離脂肪酸を消費できることを見出した。本開示に従い、微生物、特にヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物を使用することにより、フケを誘発するマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）、特にマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の脂質分解活性により産生される遊離脂肪酸を低減することができ、それにより、それを必要としている対象のフケが多い状態を軽減することが可能になる。脂肪酸は、脂肪を好む他の細菌により産生される場合もある。脂肪酸の発生を低減することにより、遊離脂肪酸によって引き起こされるフケ症及び他の皮膚疾患を軽減することができる。

この低減は、頭皮を掻く局面の低減及びその結果としてのバリア機能の損傷の低減によって現れ得る。そうなると皮膚の刺激感及び掻痒感が減り、そして存在するフケが減るか、又は消失さえする。

微生物、その断片、その細胞溶解物、その発酵物、及びその代謝物
驚くべきことに、且つ予期せぬことに、本明細書に記載する結果から、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を一緒に増殖させると、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の存在下におけるマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖が大幅に低減される（例えば、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）がマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐ．）を阻害する）ことが示され、これは、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物をフケが多い状態の微生物治療に使用できることを示している。本明細書に記載するように（表２、実施例３）、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）は無細胞培地でリパーゼ活性を発現した（リパーゼを分泌したことを示している）が、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）は、無細胞上清中で有意なリパーゼ活性を示さなかった。これは、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物のリパーゼ活性の大部分は細胞結合型（ｃｅｌｌ－ｂｏｕｎｄ）又は細胞内型（ｃｅｌｌ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ）であったためと推定される。これは、驚くべきことであると共に、微生物治療にとって好ましい特徴である。その理由は、微生物治療が終了した後にリパーゼ活性は皮膚上に残存せず、遊離脂肪酸の蓄積を引き起こさないことになるためである。本明細書に記載するように、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）のリパーゼ活性により生成したオレイン酸の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）によってではなく、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）によって効率的に消費され（実施例５、表４）、このことは、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）がオレイン酸を利用できず（したがって、オレイン酸上で増殖できないか又は増殖が弱い）、その一方で、オレイン酸がヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）に効率的に取り込まれたことを示す結果（実施例２、表１）とも一致している。オレイン酸の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は炎症誘発性と見なされているので、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物がＦＦＡを効率的に除去することは、炎症誘発性のオレイン酸ＦＡＡにより引き起こされるフケ症又は他の皮膚疾患に対抗する微生物治療の重要な特性である。

更に本発明者らは、予期せぬことに、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物が、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減させ、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去し、且つマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減できることを確認した。

本明細書において使用される「微生物」は、細菌、真菌、ウイルス、原生動物、及び他の微視的生物を指す。

幾つかの実施形態において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物を、それらの複製能を欠損させるための処理、例えば、熱曝露、乾燥、ガンマ線照射、又は紫外線照射に付すことができる。非複製性ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物は、死細胞又は細胞分裂できなくなった生細胞であり得る。非複製性ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物は、無傷細胞又は部分的若しくは完全に細胞溶解に付した細胞であり得る。幾つかの実施形態において、非複製性細胞は、無傷細胞及び細胞溶解物の混合物を含むことができる。

本明細書において使用される「プロバイオティクス」又は「プロバイオティクス微生物」という用語は、本明細書において互換的に使用され、十分な量で（局所的又は経口的に）投与すると、宿主生物に有益に作用する、即ち、宿主生物のフケが多い状態を軽減するなどの、１又は複数の実証可能な利益を与える生きた微生物（例えば、細菌又は酵母を含む）を指す。

一態様において、本発明に使用するのに適した微生物として、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物が挙げられる。

一実施形態において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される少なくとも１種の微生物である。

本明細書において使用される用語「断片（ｆｒａｃｔｉｏｎ）」又は「少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物（ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｙａｒｒｏｗｉａ）の断片」又は「少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物（ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ｏｆ Ｙａｒｒｏｗｉａ）の断片」又は「その断片」は、より詳細には、前記完全な微生物から類推して、頭皮のフケが多い状態の治療に効力を示す前記微生物の断片を指す。少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の断片としては、前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物から得られる代謝物（ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の代謝物とも称する）が挙げられる。一態様において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の断片は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の代謝に由来し、頭皮障害の治療に有効性も示す、１種又は複数種の代謝物（活性化合物）を含む。

本明細書において使用される「代謝物」又は「少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の代謝物」又は「その代謝物」又は「ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物代謝物（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ）」又は「活性代謝物」という用語は、互換的に使用され、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の代謝に由来する、頭皮障害の治療に有効性も示す任意の物質を指す。一態様において、１種又は複数種の代謝物は、頭皮障害の治療に使用するための、最小１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の培養（発酵）中に産生されたものである。頭皮障害の治療に使用するためのこのような少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の代謝物としては、一次代謝物（正常な成長、発達、及び繁殖に直接関与する代謝物）、可溶性代謝物、ペプチド、タンパク質、ヌクレオチド、二次代謝物、ポリヌクレオチド、及び多糖類が挙げられるが、これらに限定されない。

本発明の製剤に断片を直接使用してもよいこと、又は活性物質（代謝物）の１種若しくは複数種を、使用前に任意の好適な手段によって断片から単離してもよいことは明らかであろう。

一実施形態によれば、本発明に使用するのに適したヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物代謝物及び／又は断片は、溶解物の形態で投与することができる。

本明細書において使用される「細胞溶解物」又は「溶解物」という用語は、任意の好適な手段で溶解された細胞を指す。用語「細胞溶解物」又は「溶解物」は、従来、生体細胞を、細胞溶解（ｌｙｓｉｓ）として知られる現象を介して破壊又は分解（ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ）し、このようにして、対象の微生物の細胞内に天然に含まれる細胞内生体構成成分を放出させることにより得られる物質を指す。本開示の趣旨における用語「溶解物」は、対象とする微生物の溶解により得られた溶解物全体又はその断片のみを分け隔てなく指すために用いられる。したがって、使用される溶解物は、全部又は一部が、細胞内生体構成成分から、並びに細胞壁及び細胞膜の構成成分から形成されている。有利には、本発明に使用される溶解物は、対象の微生物の溶解を介して得られた全細胞溶解物（ｗｈｏｌｅ ｌｙｓａｔｅ）であり得る。この細胞溶解は、任意の好適な手段により達成することができる。これらに限定されるものではないが、浸透圧ショック、ヒートショック、超音波処理（ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ、ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ）、ホモジナイゼーション、剪断、化学的溶解、又は遠心分離型の機械的応力などにより達成することができる。

一態様において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の細胞溶解物は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の代謝に由来し、頭皮障害の治療に有効でもある１種又は複数種の代謝物（活性化合物）を含む。

細胞溶解物を本発明の製剤に直接使用してもよいこと、又は活性物質（代謝物）の１種又は複数種を、使用前に任意の好適な手段によって細胞溶解物から単離してもよいことは明らかであろう。

溶解物は、様々な形態、溶液の形態、又は粉末形態で使用することができる。微生物は、本発明による組成物中に、生きた形態、半活性（ｓｅｍｉ－ａｃｔｉｖｅ）若しくは不活性化形態、又は死んだ形態で含まれ得る。

本発明の趣旨における「不活性化された」又は「死んだ」微生物とは、培養物中にもはやコロニーを形成することができない微生物である。死んだ又は不活性化された微生物は、細胞膜が無傷であっても破壊されていてもよい。死んだ又は不活性化された微生物は、当業者に知られている任意の方法により得られたものとすることができる。

幾つかの実施形態において、細胞片は使用前に取り除かれる。一実施形態において、細胞溶解物は使用前に濾過される。一実施形態において、細胞は、例えば、超音波処理、ホモジナイゼーション、剪断、又は化学的溶解により溶解される。

本明細書において使用される用語「発酵物」は、１種又は複数種の生きた微生物株を栄養培地中で増殖させた組成物と理解されたい。一態様において、「発酵物」は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の細胞培養物から細胞を除去した上清を指す。一実施形態において、細胞は遠心分離により除去される。一実施形態において、発酵物（細胞培養物の上清）は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の細胞を培養した培養培地を濾過することにより得られる。

一態様において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の発酵物は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の代謝に由来し、頭皮障害の治療に有効でもある、１種又は複数種の代謝物（活性化合物）を含む。

発酵物を本発明の製剤に直接使用してもよいこと、又は活性物質（代謝物）の１種又は複数種を、使用前に任意の好適な手段によって発酵物から単離してもよいことは明らかであろう。

一態様において、発酵物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の発酵中に産生された可溶性代謝物などの１種又は複数種の代謝物を含むことができるが、これらに限定されない。

一実施形態において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物（ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｓｉｍ）の培養（発酵）に由来する発酵物を、本発明の方法及び／又は使用に用いることができる。

発酵物の調製に使用される栄養培地は、選択された微生物を増殖させるのに適した必要な栄養素を含む任意の培地である。好適な栄養素としては、アミノペプチド、ペプチド、酵母エキス、及び／又はビタミン類が挙げられるが、これらに限定されない。培地は、乳などの乳製品、穀類、果物、及び／又は野菜を基材とすることができる。

本明細書において使用される用語「可溶性代謝物」は、代謝物又は細胞を取り除いた細胞培養物の上清中に存在する代謝物を指す。一実施形態において、培養物は、少なくともＯＤ_６００が約０．５となる細胞密度まで増殖させる。一実施形態において、細胞は遠心分離により除去される。一実施形態において、上清は濾過される。上清を本発明の製剤に直接使用してもよいこと、又は代謝物の１種又は複数種を、使用前に任意の好適な手段によって上清から単離してもよいことは明らかであろう。

幾つかの実施形態において、本発明の組成物は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の細胞を全部又は実質的に全部除去したヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物発酵物を含むことができる。細胞を増殖培地から分離するための方法は当該技術分野においてよく知られており、物理的方法、例えば、細胞ペレット及び培養物上清を生成するための遠心分離、濾過、限外濾過、タンジェンシャルフロー濾過、全量濾過、又は逆浸透の力を利用することができる。これに替えて、又はこれに加えて、分離方法は、リガンドに基づく、例えば、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物に特異的に結合する抗体を含む方法とすることができる。抗体は磁気ビーズなどの固体支持体に結合させることができる。

幾つかの実施形態において、本発明の組成物は、それらを増殖させた培地から部分的に又は実質的に分離されたヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物を含む。ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物は、生きていてもよいし、又は非複製性（例えば熱処理によって、例えば不活性化されたもの）であってもよい。細胞は、細胞の生存能力が保存される条件下で凍結乾燥、即ち、フリーズドライに付すことができる。凍結乾燥の方法は当該技術分野においてよく知られている。

一実施形態において、発酵物は、生存不能細胞（例えば、無傷細胞）から本質的になる、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物を含むことができる。

他の実施形態において、発酵物は、生存細胞（例えば、無傷の培養不能細胞）から本質的になる、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物を含むことができる。

発酵物に関連する用語「から本質的になる」は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の少なくとも９０％が指定された特性（例えば、無傷の生存不能細胞）を有するか又は生存細胞（例えば、無傷の培養不能細胞）であることを含む。好適には、少なくとも９５％が指定された特性を有する。好適には、少なくとも９７％が指定された特性を有する。好適には、少なくとも９９％が指定された特性を有する。幾つかの実施形態においては、少なくとも１００％が指定された特性を有する。

本明細書において使用される用語「無細胞発酵物」（「発酵物上清」と同義）は、発酵物が、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の生存細胞を実質的に含まないことを意味する。

一実施形態において、組成物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の発酵に由来する発酵物上清を有効量含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、本発明の組成物並びに方法及び／又は使用に使用するための発酵物は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の生存細胞を実質的に含まなくてもよく、通常、生存細胞は０（又は実質的に０）個／ｍＬの発酵物である。

フケが多い状態などの皮膚疾患を治療するためのスキンケア組成物及びスキンケア製品
本明細書で使用される場合、用語「スキンケア組成物」は、スキンケア効果（ｓｋｉｎ ｃａｒｅ ｂｅｎｅｆｉｔ）を提供することができる少なくとも１種のスキンケア有益剤（ｓｋｉｎ ｃａｒｅ ｂｅｎｅｆｉｔ ａｇｅｎｔ）を含む組成物を指す。

本明細書において使用される用語「スキンケア有益剤」又は「活性剤」は、互換的に使用され、スキンケア効果をもたらすことができるヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又は前記微生物の断片及び／又は前記微生物の細胞溶解物及び／又は前記微生物の発酵物及び／又は前記微生物の代謝物を指す。

本明細書において使用される用語「スキンケア効果」は、皮膚に局所的に適用した場合に、活性剤（又は有効量の前記活性剤を含むスキンケア組成物及び／若しくはスキンケア製品）によってもたらされる有益な効果を指す。本発明の一態様において、スキンケア効果は、フケが多い状態の防止、フケが多い状態の軽減、フケが多い状態の治療、皮膚（頭皮）上でのマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の発生の低減、皮膚（頭皮）上のマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）が形成するバイオフィルムの除去、皮膚（頭皮）上のマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成の防止若しくは低減、皮膚のバリア機能の向上、皮膚保湿（皮膚の保湿を維持、回復、及び／又は強化することによる、皮膚の脱水からの保護）、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される。

本明細書において使用される用語「バイオフィルム」は、表面に付着した細胞外高分子マトリックス内に包埋された微生物の群落を指す。細胞外高分子マトリックスは概して、細胞外ＤＮＡ、タンパク質、及び多糖類から構成される高分子の集塊である。バイオフィルムは、１種又は複数種の微生物を有し得、水を更に含み、捕捉された他の粒状物を含み得る。微生物は、グラム陽性菌若しくはグラム陰性菌（好気性又は嫌気性）；藻類、原生動物、及び／又は酵母若しくは糸状菌であり得る。一実施形態において、バイオフィルムは、１種又は複数種のマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）を含む生存細胞である。

本明細書において使用される用語「表面」は、バイオフィルムの付着が可能になるのに十分な固まり（ｍａｓｓ）を有する任意の構造体を意味する。表面としては、硬質表面及び軟質表面が挙げられる。硬質面としては、金属、ガラス、セラミックス、木材、鉱物（岩石、石、大理石、御影石）、コンクリートなどの骨材、プラスチック、複合材料、硬質ゴム材、及び石膏が挙げられるが、これらに限定されない。他の表面は、皮膚、頭皮、又はケラチンなどの生物学的表面であり得る。

スキンケア用の更なる有益剤としては、フケ防止活性剤を挙げることができる。

フケ防止活性剤としては、例えば、角質溶解剤、例えば、サリチル酸及びその様々な形態にある硫黄、角化調整剤、例えば、亜鉛ピリチオン、ピリジンチオン塩、トリハロカルバミド、トリクロサン、アゾール化合物、抗真菌性ポリマー、アラントイン、ステロイド、例えば、局所用コルチコステロイド、タール又はポリタール（ｐｏｌｙｔａｒ）（コールタール）、ウンデシレン酸、フマル酸、アリルアミン、及びこれらの混合物、シクロピロックス、オクトピロックス、ピロクトンオラミン、プロピオン酸クロベタゾール、ベタメタゾン吉草酸エステル、ティーツリー油、タイム及びイヌハッカの混合油、局所用抗真菌剤、例えば、硫化セレン、イミダゾール（例えば、ケトコナゾール）、ヒドロキシピリドン（例えば、シクロピロックス）、自然療法薬、例えば、メラレウカ属植物（Ｍｅｌａｌｅｕｃａ ｓｐ．）油、アロエベラ、及びプロバイオティクス微生物（Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２０１０ Ａｐｒ－Ｊｕｎ；５５（２）：１３０－１３４）が挙げられる。

一態様において、スキンケア有益剤（活性剤）は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなる。スキンケア有益剤としては、脂質消費型競争（ｌｉｐｉｄ ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ）を介してフケを誘発する微生物の増殖を阻害する少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／若しくはその断片及び／若しくはその細胞溶解物及び／若しくはその発酵物及び／若しくはその代謝物、リパーゼ阻害剤、小分子、又はこれらの組合せのいずれか一つが挙げられる。少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物のスキンケア有益剤は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する剤（活性物質）及びマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する剤（活性物質）を更に含む。

一態様において、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなるスキンケア有益剤（活性剤）は、スキンケア組成物に配合される。

本発明において使用するためのスキンケア組成物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の少なくとも１種の代謝物、及び／又はヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の少なくとも１種の細胞溶解物を含むことができることが理解されるであろう。

本発明に従い使用するためのスキンケア組成物は、例えば、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を、少なくとも約０．０１重量％、約０．０５重量％、約０．１重量％、約０．２重量％、約０．３重量％、約０．４重量％、約０．５重量％、約０．６重量％、約０．７重量％、約０．８重量％、約０．９重量％、約１．０重量％、約１．５重量％、約２．０重量％、約３．０重量％、約４．０重量％、約５．０重量％、約６．０重量％、約７．０重量％、約８．０重量％、約９．０重量％、約１０．０重量％、約１１．０重量％、約１２．０重量％、約１３．０重量％、約１４．０重量％、約１５．０重量％、約１６．０重量％、約１７．０重量％、約１８．０重量％、約１９．０重量％、約２０．０重量％、約２５．０重量％、約３０．０重量％、約３５．０重量％、約４０．０約４５．０重量％、約５０．０重量％含むことができることは更に明らかであろう。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一態様において、頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であり、前記組成物は前記頭皮障害を軽減及び／又は治療し、この組成物は、サピエン酸（Ｃ１６：１ ｃｉｓ－６）、パルミチン酸（Ｃ１６：０）、ミリスチン酸（Ｃ１４：０）、ペトロセリン酸（Ｃ１８：１ ｃｉｓ－６）、ペンタデシル酸（Ｃ１５：０）、ステアリン酸（Ｃ１８：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）、レイック酸（ｌｅｉｃ ａｃｉｄ）、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される脂質を分解する。

一実施形態において、組成物は、頭皮障害の治療に使用するための、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含むスキンケア組成物であり、前記組成物は前記頭皮障害を軽減及び／又は治療し、この組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する。

一実施形態において、スキンケア組成物又はスキンケア製剤は、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分と、本明細書に記載するスキンケア製剤を、スキンケア製剤の総重量に対し重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、最大で１０％とを含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックである。

幾つかの実施形態において、本発明の組成物は、単離されたヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物と皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分である担体との組合せを含むことができる。ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物は、生きていてもよいし、又は非複製性（例えば熱処理によって、例えば不活性化されたもの）であってもよい。投与量は変化し得るが、約１０^２～約１０^１２ｃｆｕ／ｇ乾燥重量相当、例えば、１×１０^２ｃｆｕ／ｇ、５×１０^２ｃｆｕ／ｇ、１×１０^３ｃｆｕ／ｇ、５×１０^３ｃｆｕ／ｇ、１×１０^４ｃｆｕ／ｇ、５×１０^４ｃｆｕ／ｇ、１×１０^５ｃｆｕ／ｇ、５×１０^５ｃｆｕ／ｇ、１×１０^６ｃｆｕ／ｇ、５×１０^６ｃｆｕ／ｇ、１×１０^７ｃｆｕ／ｇ、５×１０^７ｃｆｕ／ｇ、１×１０^８ｃｆｕ／ｇ、５×１０^８ｃｆｕ／ｇ、１×１０^９ｃｆｕ／ｇ、５×１０^９ｃｆｕ／ｇ、１×１０^１０ｃｆｕ／ｇ、５×１０^１０ｃｆｕ／ｇ、１×１０^１１ｃｆｕ／ｇ、５×１０^１１ｃｆｕ／ｇ、１×１０^１２ｃｆｕ／ｇ乾燥重量の範囲とすることができる。

幾つかの実施形態において、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物は、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分と混合する前又は後に、従来の安定化技法を用いて安定化させることができる。

一実施形態において、スキンケア組成物は、皮膚に投与するためのスキンケア製品／製剤に配合される。

本発明に使用するためのスキンケア組成物は、１種又は複数種のプロバイオティック細菌に加えて、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を更に含むことができることが更に理解されるであろう。

スキンケア組成物は、防腐剤、ｐＨ調整剤、抗酸化剤、及びキレート剤からなる群から選択される追加の化合物を含むことができる。

防腐剤としては、パラベン、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、フェニルエチルアルコール、エチルラウリルアルギン酸塩（Ｌａｕｒｙｌ ｅｔｈｙｌ ａｒｇｉｎａｔｅ）（ＬＡＥ）、及びこれらの任意の組合せが挙げられるが、これらに限定されない。

ｐＨ調整剤としては、弱酸、強酸、ｐＨを調整することができる任意の化合物、例えばクエン酸（これに限定されない）、又はそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書に記載するスキンケア組成物又は任意の有効量の前記スキンケア組成物を、製剤及び製品に使用することができる。

本明細書において使用される「スキンケア製品」は、本明細書に記載の有効量のスキンケア組成物を含む製品を指し、例えば、化粧製品、水溶液、エマルション、セラム、ゼリー、マスク、パッチ、ローション、局所保湿剤、クリーム、パスタ剤、芳香のある軟膏（ｂａｌｍ）、軟膏、ポマード、ゲル、液体、スプレー、フォーム、キット、又はこれらの組合せのいずれか一つが挙げられるが、これらに限定されない。

一実施形態において、スキンケア製品は、皮膚／頭皮に局所的に適用するために配合される。

一実施形態において、組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するための有効量のスキンケア組成物と、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分とを含むスキンケア製品であり、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、スキンケア製品は、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分と、本明細書に記載するスキンケア製剤を、スキンケア製剤の総重量に対し重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、最大で１０％とを含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックである。

一実施形態において、スキンケア製品は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物を含む製品であって、微生物及び／又は前記微生物を含むスキンケア組成物は、ゲル、エマルション、ヒドロゲル、ルース若しくはコンパクトパウダー、懸濁液若しくは溶液、スプレー、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される少なくとも１つの形態に配合される。

本発明に使用するための局所用製剤は、クリーム、ローション、スプレー、溶液、ゲル、軟膏、パスタ剤、プラスター剤、化粧料（ｐａｉｎｔ）、生体接着剤、懸濁液などの頭皮又は皮膚表面に適用するのに適した任意の形態とすることができ、並びに／又はリポソーム、ミセル、及び／若しくはマイクロスフェアを含有するように調製することができる。この種の製剤は、体表面に製剤を適用したとき及びその後に、体表面から蒸発する水分を製剤内に保持するように、密封性の覆い（ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ ｏｖｅｒｌａｙｅｒ）と併用することができる。

局所用製剤としては、当該技術分野において知られている皮膚科用媒体中に活性成分が溶解又は分散しているもの（例えば、水性又は非水性ゲル、軟膏、油中水又は水中油エマルション）が挙げられる。この種の媒体の構成要素は、水、水性緩衝液、非水性溶媒（エタノール、イソプロパノール、ベンジルアルコール、２－（２－エトキシエトキシ）エタノール、プロピレングリコール、プロピレングリコールモノラウリン酸エステル、グリコフロール、又はグリセロールなど）、油（例えば、流動パラフィンなどの鉱油、天然若しくは合成トリグリセリド、又はジメチコンなどのシリコーン油）を含むことができる。特に、製剤の性質に加えてその意図されている用途及び適用部位に応じて、採用する皮膚科用媒体は、次に示す一覧から選択される１種又は複数種の成分（例えば、水性ゲルに配合する場合は、水以外の成分）を含むことができる：可溶化剤又は溶媒（例えば、αβ－シクロデキストリン、例えば、ヒドロキシプロピルβ－シクロデキストリン又はアルコール若しくはポリオール、例えば、エタノール、プロピレングリコール、若しくはグリセロール）；増粘剤（例えば、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、又はカルボマー）；ゲル化剤（例えば、ポリオキシエチレン－ポリオキシプロピレンコポリマー）；防腐剤（例えば、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、クロルブトール、ベンゾエート、ソルビン酸カリウム、又はＥＤＴＡ若しくはその塩）；及びｐＨ緩衝剤（リン酸二水素塩及びリン酸水素塩の混合物又はクエン酸及びリン酸水素塩の混合物など）。

スキンケア製品としては、溶媒としての水と、以下に限定されないが、活性剤、香料、着色剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、又はこれらの組合せのいずれか一つなどの水溶性添加剤（溶質）とを含む液体ローション（真溶液）が挙げられる。

スキンケア製品としては、エマルションなどの分散体（以下に限定されないが、以下のものなど：液体中液体［油中水型Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ／Ｗ］、懸濁液［固体／液体型又は液体／固体型］、エアロゾル［液体／気体型又は固体／気体型］、フォーム／ムース［気体／液体型又は気体／エマルション型又は気体／固体型］）が挙げられる。水中油型［Ｏ／Ｗ］エマルションの例としては、水相、乳化剤、脂肪相及び少なくとも１種の添加剤の組合せが挙げられるが、これらに限定されない。水相は、水、湿潤剤、及び安定剤（以下に限定されないが、合成ポリマー、カルボマー、天然ポリマー、キサンタンガム、アカシアガム、カラギーナン、ジェラン、又はこれらの組合せのいずれか一つなど）を含むことができる。乳化剤としては、アニオン性乳化剤、カチオン性乳化剤、非イオン性乳化剤、両性乳化剤、シリコーン乳化剤、自己乳化剤（ａｕｔｏ ｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ ａｇｅｎｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。脂肪相（親油性成分）としては、ロウ、バター、脂肪酸エステル、トリグリセリド、植物油、鉱油（パラフィン）、シリコーン、及び増粘剤／油ゲル化剤（ｏｉｌ ｊｅｌｌｉｆｙｉｎｇ ａｇｅｎｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。添加剤としては、防腐剤、香料（殆どの場合、親油性）、着色剤、抗酸化剤、キレート剤、活性剤、ｐＨ調整剤（クエン酸、乳酸、ＡＨＡ）、中和剤／ＮａＯＨなどの強塩基性剤、トリメチルアミン（アクリルポリマーをゲル化するため）及び粉末が挙げられるが、これらに限定されない。

スキンケア製品としては、水相（水、湿潤剤、活性剤を含む）、ゲル化剤（以下に限定されないが、合成ポリマー、天然ポリマー、キサンタンガム、アカシアガム、カラギーナン、ジェランなど）、及び添加剤（以下に限定されないが、芳香剤、高ＨＬＢ界面活性剤、着色剤、活性剤、防腐剤系、ｐＨ調整剤、中和剤、粉末など）を含む水性ゲルが挙げられる。

スキンケア製品としては、水相（水、湿潤剤）、界面活性剤、添加剤（以下に限定されないが、香料、高ＨＬＢ界面活性剤、着色剤、活性剤、防腐剤系、ｐＨ調整剤、中和剤、粉末など）、及び任意選択によるゲル化剤（以下に限定されないが、合成ポリマー、天然ポリマー、キサンタンガム、アカシアガム、カラギーナン、ジェランなど）を含む、清浄化剤／界面活性剤系（以下に限定されないが、シャンプー、シャワージェル、ミセラーウォーターなど）が挙げられる。

本明細書に記載するように、本明細書に記載する少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含むスキンケア製品又は製剤は、フケが多い状態の防止、フケが多い状態の軽減、フケが多い状態の治療、皮膚／頭皮上におけるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ．）の発生の低減、皮膚のバリア機能の向上、皮膚保湿（皮膚の保湿を維持、回復、及び／又は強化することによる、皮膚の脱水からの保護）、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択されるスキンケア効果を提供する。

本発明のスキンケア製品（製剤）には、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される担体を組み込むこともでき、これは当該技術分野において使用されている任意の担体とすることができる。その例として、水、低級アルコール、高級アルコール、多価アルコール、単糖類、二糖類、多糖類、炭化水素系油、脂肪及び油、ロウ、脂肪酸、シリコーン油、非イオン性界面活性剤、イオン性界面活性剤、シリコーン系界面活性剤、並びにこの種の担体の水系混合物及びエマルション系混合物が挙げられる。

本明細書において使用される用語「皮膚科学的に許容される」又は「皮膚科学的に許容される担体」又は「スキンケア的に許容される」又は「スキンケア的に許容される担体」は、皮膚科用又はスキンケア製剤に、望ましくない生物学的効果又は製剤の他の成分との望ましくない相互作用を引き起こすことなく組み込むことができる化合物又は組成物を指す。

本明細書において使用される「担体」又は「媒体」は、局所的に適用される組成物中に組み込むのに適した担体材料を指す。本明細書において有用な担体及び媒体としては、無毒であり、それを含有している製剤の他の成分と有害な形で相互作用しない、当該技術分野において知られている任意の材料が挙げられる。

用語「水性」は、水を含むか又は皮膚若しくは粘膜組織に適用した後に水を含むようになる製剤を指す。

本明細書に記載のスキンケア製品は、１種又は複数種の皮膚科学的又はスキンケア的に許容される公知の成分又はそれ以外の、スキンケアに使用するのに有効な成分を更に含むことができる。但し、任意成分が本明細書に記載の必須成分と物理的及び化学的に適合性があるか、さもなければ製品の安定性、審美性、又は性能を過度に損なわないことを条件とする。このような任意成分の非限定的な例は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｋｉｎ Ｃａｒｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ，Ｎｉｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００２，ａｎｄ ＣＴＦＡ Ｓｋｉｎ Ｃａｒｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｔｅｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００４．に開示されている。

一態様では、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される成分は、約１０重量％～約９９．９重量％、或いは約５０重量％～約９５重量％、或いは約７５重量％～約９５重量％の皮膚科学的に許容される担体を含む、皮膚科学的に許容される担体である。組成物と一緒に使用するのに適した担体としては、例えば、ムース、トニック、ゲル、皮膚保湿剤、及びローションの配合に使用されるものを挙げることができる。担体は、水；有機油；シリコーン、例えば、揮発性シリコーン、アミノ又は非アミノシリコーンガム又は油、及びこれらの混合物；鉱油；植物油、例えば、オリーブ油、ヒマシ油、菜種油、ヤシ油、小麦胚芽油、甘扁桃油、アボカド油、マカダミア油、アプリコット油、ベニバナ油、ククイ油、アマナズナ油、テリハボク種子油、レモン油、及びこれらの混合物；ロウ；並びに有機化合物、例えば、Ｃ_２～Ｃ_１０アルカン、アセトン、メチルエチルケトン、揮発性有機Ｃ_１～Ｃ_１２アルコール、Ｃ_１～Ｃ_２０酸及びＣ_１～Ｃ_８アルコールのエステル、例えば、酢酸メチル、酢酸ブチル、酢酸エチル、及びミリスチン酸イソプロピル、ジメトキシエタン、ジエトキシエタン、Ｃ_１０～Ｃ_３０脂肪アルコール、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、及びベヘニルアルコール；Ｃ_１０～Ｃ_３０脂肪酸、例えば、ラウリン酸及びステアリン酸；Ｃ_１０～Ｃ_３０脂肪アミド、例えば、ラウリン酸ジエタノールアミド；Ｃ_１０～Ｃ_３０脂肪アルキルエステル、例えば、Ｃ_１０～Ｃ_３０脂肪アルキルベンゾエート；ヒドロキシプロピルセルロース；並びにこれらの混合物を含み得る。一態様では、担体は、水、脂肪アルコール、揮発性有機アルコール、及びこれらの混合物を含む。当業者であれば他の担体を配合することができる。

本明細書に記載のスキンケア製品は、組成物に所望の粘度を付与するのを助けるゲル化剤を約０．１％～約１０％、或いは約０．２％～約５．０％更に含み得る。好適な任意選択的なゲル化剤の非限定的な例としては、架橋カルボン酸ポリマー；非中和型架橋カルボン酸ポリマー；非中和型架橋修飾カルボン酸ポリマー；架橋エチレン／無水マレイン酸コポリマー；非中和型架橋エチレン／無水マレイン酸コポリマー（例えば、Ｍｏｎｓａｎｔｏから市販されているＥＭＡ ８１）；非中和型架橋アルキルエーテル／アクリレートコポリマー（例えば、Ａｌｌｉｅｄ Ｃｏｌｌｏｉｄｓから市販されているＳＡＬＣＡＲＥ（商標）ＳＣ９０）；ポリアクリル酸ナトリウムの非中和型架橋コポリマー、鉱油、及びＰＥＧ－１トリデセス－６（例えば、Ａｌｌｉｅｄ Ｃｏｌｌｏｉｄｓから市販されているＳＡＬＣＡＲＥ（商標）ＳＣ９１）；メチルビニルエーテル及び無水マレイン酸の非中和型架橋コポリマー（例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｓから市販されているＳＴＡＢＩＬＥＺＥ（商標）ＱＭ－ＰＶＭ／ＭＡコポリマー）；疎水化変性された非イオン性セルロースポリマー；疎水化変性されたエトキシ化ウレタンポリマー（例えば、Ｕｎｉｏｎ Ｃａｒｂｉｄｅから市販されているアルカリ膨潤性ポリマーであるＵＣＡＲＥ（商標）Ｐｏｌｙｐｈｏｂｅ Ｓｅｒｉｅｓ）；並びにこれらの組合せが挙げられる。これに関連する用語「非中和型」は、任意選択のポリマー及びコポリマーゲル化剤材料が非中和型酸モノマーを含有していることを意味する。

皮膚科学的又はスキンケア的に許容される媒体（ｍｅｄｉｕｍ）は、脂肪物質を、製品の総重量に対して一般に約１０～約９０重量％の割合で含有することができ、ここで脂肪相は、少なくとも１種の液体、固体、又は半固体の脂肪物質を含有する。脂肪物質としては、油、ロウ、ガム状物質、及びいわゆるペースト状脂肪物質が挙げられるが、これらに限定されない。或いは、製品は、油中水型又は水中油型エマルションなどの安定した分散液の形態であってもよい。更に、スキンケア製品は、１種又は複数種の従来のスキンケア用又は皮膚科用添加剤又は補助剤、例えば、以下に限定されないが、抗酸化剤、防腐剤、充填剤、界面活性剤、ＵＶＡ及び／又はＵＶＢサンスクリーン剤、香料、増粘剤、湿潤剤、及びアニオン性、非イオン性、又は両性ポリマー、並びに染料又は顔料（着色剤）を含有し得る。

皮膚科学的に許容される担体は、少なくとも１種の乳化剤、少なくとも１種の界面活性剤、又はこれらの任意の組合せを含有する保湿製剤であってもよい。

一実施形態において、スキンケア製品は、第１スキンケア組成物及び第２スキンケア組成物を含む製品であり、第１スキンケア組成物は、有効量少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなる第１活性剤を含み、第２スキンケア組成物は、少なくとも有効量の、少なくとも１種の局所投与用第２活性剤（フケ防止活性剤、スキンコンディショニング剤、スキンケア活性成分材料など）を含む。

スキンケア組成物及びスキンケア製品は、サンスクリーン剤、保湿剤、湿潤剤、皮膚に有益な物質、界面活性剤などの付着性付与剤、閉塞剤、水分バリア、潤滑剤、皮膚軟化剤、抗老化剤、帯電防止剤、研磨剤、抗微生物剤、コンディショナー、スクラブ剤、香料、粘度付与剤、塩、脂質、リン脂質、ビタミン類、気泡安定剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、懸濁化剤、シリコーン油、シリコーン誘導体、精油、油、脂肪、脂肪酸、脂肪酸エステル、脂肪アルコール、ロウ、ポリオール、炭化水素、及びこれらの混合物を含む、スキンケア活性成分の材料を更に含み得る。

スキンケア組成物又はスキンケア製品に含まれ得る他の成分としては、皮膚疾患を治療又は予防するための、スキンケア効果を提供するための、又は皮膚に保湿効果を提供するための少なくとも１つの活性成分、例えば、酸化亜鉛、ワセリン、白色ワセリン、鉱油、タラ肝油、ラノリン、ジメチコン、硬質脂肪、ビタミンＡ、アラントイン、カラミン、カオリン、グリセリン、又はコロイド状オートミール、及びこれらの組合せ、１種又は複数種の天然保湿因子（例えば、セラミド、ヒアルロン酸、グリセリン、スクワラン、アミノ酸、コレステロール、脂肪酸、トリグリセリド、リン脂質、スフィンゴ糖脂質、尿素、リノール酸、グリコサミノグリカン、ムコ多糖、乳酸ナトリウム、又はピロリドンカルボン酸ナトリウムなど）、グリセリド、杏仁油、キャノーラ油、スクワラン、スクワレン、ヤシ油、トウモロコシ油、ホホバ油、ホホバワックス、レシチン、オリーブ油、ベニバナ油、ゴマ油、シア脂、大豆油、甘扁桃油、ヒマワリ油、ティーツリー油、シア脂、ヤシ油、コレステロール、コレステロールエステル、ワックスエステル、脂肪酸、及びオレンジ油が挙げられるが、これらに限定されない。

スキンケア製品に一般に使用されている、任意の数の皮膚科学的に許容される材料もまた、スキンコンディショニング剤及び皮膚着色剤などの本スキンケア製品に組み入れることができる。

本明細書で定義されるスキンコンディショニング剤としては、皮膚を引き締める収斂剤；死んだ皮膚細胞を除去するスクラブ剤；滑らか、柔軟、且つしなやかな外観を維持するのを助ける皮膚軟化剤；皮膚表層の水分含量を増加させる湿潤剤；皮膚表面からの水の蒸発を遅らせる閉塞剤；及び乾燥若しくは損傷した皮膚の外観を強化するか、又は剥落を減少させ、しなやかさを回復させる種々の化合物が挙げられるが、これらに限定されない。スキンコンディショニング剤は当該技術分野においてよく知られており（例えば、Ｇｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．（国際公開第０１／０７００９号パンフレット）を参照）、様々な供給元から市販されている。スキンコンディショニング剤の好適な例としては、ラクトビオン酸、グルコン酸、アルファ－ヒドロキシ酸、ベータ－ヒドロキシ酸、ポリオール、ヒアルロン酸、Ｄ，Ｌ－パンテノール、ポリサリチレート、ビタミンＡパルミテート、ビタミンＥアセテート、グリセリン、ソルビトール、シリコーン、シリコーン誘導体、ラノリン、天然油、キシリトール、フコース、ラムノース、及びトリグリセリドエステルが挙げられるが、これらに限定されない。スキンコンディショニング剤としては、ポリサリチル酸、プロピレングリコール（ＣＡＳ番号５７－５５－６、Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｍｉｄｌａｎｄ、ＭＩ）、グリセリン（ＣＡＳ番号５６－８１－５、Ｐｒｏｃｔｏｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏ．、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ、ＯＨ）、グリコール酸（ＣＡＳ番号７９－１４－１、ＤｕＰｏｎｔ Ｃｏ．、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）、乳酸（ＣＡＳ番号５０－２１－５、Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ、Ｗａｒｄ Ｈｉｌｌ、ＭＡ）、リンゴ酸（ＣＡＳ番号６１７－４８－１、Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）、クエン酸（ＣＡＳ番号７７－９２－９、Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）、酒石酸（ＣＡＳ番号１３３－３７－９、Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）、グルカル酸（ＣＡＳ番号８７－７３－０）、ガラクタル酸（ＣＡＳ番号５２６－９９－８）、３－ヒドロキシ吉草酸（ＣＡＳ番号１０２３７－７７－１）、サリチル酸（ＣＡＳ番号６９－７２－７、Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）、及び１，３プロパンジオール（ＣＡＳ番号５０４－６３－２、ＤｕＰｏｎｔ Ｃｏ．、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）が挙げられる。ポリサリチル酸は、Ｗｈｉｔｅらによる米国特許第４，８５５，４８３号明細書に記載されている方法によって調製することができ、この文献は参照により本明細書に組み込まれる。グルカル酸は、Ｍｅｒｂｏｕｈらによって記載されている方法（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．３３６：７５－７８（２００１））により合成することができる。３－ヒドロキシ吉草酸は、Ｂｒａｍｕｃｃｉによる国際公開第０２／０１２５３０号パンフレットに記載されているように調製することができる。

スキンケア組成物及びスキンケア製品は、着色剤／染料、香料、活性剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、及び抗酸化剤などのスキンケア添加剤を含むことができるが、これらに限定されない。

一実施形態において、スキンケア製品は、第１スキンケア組成物及び第２スキンケア組成物を含み、第１スキンケア組成物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなる有効量の第１活性剤を含み、第２スキンケア組成物は、少なくとも有効量の、フケ防止活性剤から選択される少なくとも１種の局所投与用第２活性剤を含む。この種のフケ防止活性剤としては、例えば、角質溶解剤、例えば、サリチル酸及びその様々な形態にある硫黄、角化調整剤、例えば、亜鉛ピリチオン、ピリジンチオン塩、トリハロカルバミド、トリクロサン、アゾール化合物、抗真菌性ポリマー、アラントイン、ステロイド、例えば、局所用コルチコステロイド、タール又はポリタール（コールタール）、ウンデシレン酸、フマル酸、アリルアミン、及びこれらの混合物、シクロピロックス、オクトピロックス、ピロクトンオラミン、プロピオン酸クロベタゾール、ベタメタゾン吉草酸エステル、ティーツリー油、タイム及びイヌハッカの混合油、局所用抗真菌剤、例えば、硫化セレン、イミダゾール（例えば、ケトコナゾール）、ヒドロキシピリドン（例えば、シクロピロックス）、自然療法薬、例えば、メラレウカ属植物（Ｍｅｌａｌｅｕｃａ ｓｐ．）油、アロエベラ、及びプロバイオティクス微生物（Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２０１０ Ａｐｒ－Ｊｕｎ；５５（２）：１３０－１３４）が挙げられる。

一実施形態において、スキンケア製品は、第１スキンケア組成物及び第２スキンケア組成物を含み、第１スキンケア組成物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなる有効量の第１活性剤を含み、第２スキンケア組成物は、少なくとも有効量の、フケ防止活性剤から選択される少なくとも１種の局所投与用第２活性剤を含み、第１スキンケア組成物は、ゲル、エマルション、ヒドロゲル、ルース若しくはコンパクトパウダー、懸濁液若しくは溶液、又はスプレー溶液からなる群から選択される少なくとも１種の形態に配合される。

本明細書に記載するスキンケア組成物及びスキンケア製品はまた、１又は複数のスキンケア効果を提供するキット、例えば、これらに限定されるものではないが、フケが多い状態を防止又は軽減するためのキットの一部とすることもできる。

一態様において、キットは、フケが多い状態を治療するための少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物と、それを必要とする対象に投与するための書面による説明書とを含むキットである。

一態様において、キットは、それを必要とする対象のフケが多い状態を治療するためのスキンケア製品を含むキットであり、前記スキンケア製品は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物と、前記スキンケア製品を、それを必要とする対象に投与するための書面による説明書とを含む。

頭皮障害を微生物治療するための方法
本明細書においては、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法を更に提供する。

一態様において、頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの任意の組合せからなる群から選択される。

一態様において、微生物は局所投与される。

一実施形態において、微生物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

本明細書に記載するスキンケア組成物及びスキンケア製品を、頭皮障害を治療するための方法に使用することができる。

一実施形態において、方法は、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であり、前記スキンケア組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含み、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、方法は、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であり、前記スキンケア組成物は、有効量のヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含み、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、方法は、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア製品を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であり、前記スキンケア製品は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含み、前記スキンケア製品は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、方法は、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア製品を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であり、前記スキンケア製品は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含み、前記スキンケア製品は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する。

一態様において、スキンケア組成物又はスキンケア製品は局所投与される。

更に本明細書においては、本明細書に記載する組成物と、それを使用するための取扱説明書とを含む、皮膚状態を治療するためのキットを提供する。幾つかの実施形態において、キットは、組成物を適用するように構成された１又は複数の塗布具を更に含む。

フケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法
本明細書においては、それを必要とする対象のフケが多い状態を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法を更に提供する。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

一態様において、微生物は局所投与される。

一態様において、微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物である。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法であり、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、単一の組成物に配合される。

一態様において、微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、局所投与される。

一実施形態において、方法は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であり、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、単一の組成物に配合され、この組成物は、対象の皮膚又は頭皮に投与される。

一実施形態において、方法は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であり、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、単一の組成物に配合され、組成物は、スキンケア用賦形剤（ｓｋｉｎ ｃａｒｅ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）、酪酸、グルコース、グリコーゲン、リン酸アスコルビルマグネシウム、セチルアルコール、ジメチコン、ミリスチン酸イソプロピル、グリセロール、プロピレングリコール、クオタニウム－５２、エタノール、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される化合物を更に含む。

本明細書に記載するスキンケア組成物及びスキンケア製品は、フケが多い状態を治療するための方法に使用することができる。

一実施形態において、方法は、フケが多い状態の治療に使用するためのスキンケア組成物を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であり、前記スキンケア組成物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含み、前記組成物は、前記フケが多い状態を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、方法は、フケが多い状態の治療に使用するためのスキンケア製品を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であり、前記スキンケア組成物は、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含み、前記組成物は、前記フケが多い状態を軽減及び／又は治療する。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法であり、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法であり、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法であり、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する。

一態様において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減する方法であって、本明細書に記載するスキンケア組成物を含むスキンケア製品を局所的に投与することを含む、方法である。

一態様において、方法は、本明細書に記載するスキンケア組成物を含むスキンケア製品を局所投与することを含む、それを必要とする対象における頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であり、スキンケア製品は、前記スキンケア製品の総重量に対し、重量基準で、前記スキンケア組成物を少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、固形化粧料、マスク、パッチ、及びスティックからなる群から選択される。

一実施形態において、方法は、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法である。

一態様において、本明細書に記載するフケが多い状態を治療するための方法は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）を阻害する。

一態様において、記載する方法は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物は、サピエン酸（Ｃ１６：１ ｃｉｓ－６）、パルミチン酸（Ｃ１６：０）、ミリスチン酸（Ｃ１４：０）、ペトロセリン酸（Ｃ１８：１ ｃｉｓ－６）、ペンタデシル酸（Ｃ１５：０）、ステアリン酸（Ｃ１８：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）、オレイン酸、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される脂質を分解する、方法である。

一般的な定義
引用した全ての特許及び非特許文献の開示は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本開示において、多数の用語及び略語が使用される。特に具体的に明記しない限り、下記の定義が適用される。

本明細書で使用される場合、本発明の１つの要素又は成分に先行する冠詞「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、その要素若しくは成分の事例（すなわち、出現）の数に関して非制限的であることが意図されている。このため、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、１つ又は少なくとも１つを含むと読まれるべきであり、要素又は成分の単数語形は、その数が明らかに単数であることを意味しない限り複数形も含む。

量、濃度、又はその他の値若しくはパラメータが、範囲、好ましい範囲、又は好ましいより高い値及び好ましいより低い値のリストとして与えられる場合、これは、範囲が別個に開示されているか否かに関わらず、任意の範囲の上限若しくは好ましいより高い値及び任意の範囲の下限若しくは好ましいより低い値の任意の対で形成されるあらゆる範囲を具体的に開示していると理解すべきである。数値の範囲が本明細書に示されている場合、他に特に明記しない限り、その範囲は、それらの端点、並びにその範囲内の全ての整数及び分数を含むことを意図する。本発明の範囲が範囲を規定するときに列挙された特定の値に限定することは意図されない。

本出願に明記される様々な範囲での数値の使用は、特に明確に示さない限り、述べられた範囲内の最小値及び最大値が両方とも単語「約」によって先行されるかのように近似値として述べられている。このように、述べられた範囲の上下のわずかな変動を用いて、この範囲内の値と同じ結果を実質的に達成することができる。また、これらの範囲の開示は、最小値と最大値との間の各値及びあらゆる値を含む連続的な範囲を意図している。本明細書で使用される場合、使用される成分又は反応物質の量を修飾する「約」という用語は、例えば、現実世界において濃縮物又は使用溶液を作成するために使用される典型的な計量及び液体取扱い手順を通して；これらの手順における偶発的誤差を通して；組成物を作成するため、又は本方法を実施するために使用される成分の製造、入手源又は純度における差などを通して発生する可能性がある数量における変動を意味している。用語「約」はまた、特定の初期混合物から生じる組成物についての異なる平衡条件に起因して異なる量も包含する。用語「約」によって修飾されているか否かに関わりなく、特許請求の範囲は、量に関する均等物を含む。

本明細書において使用される用語「投与する」又は「投与（すること）」は、１種又は複数種の微生物（微生物株）、スキンケア組成物、スキンケア製剤、及び／又はスキンケア製品を、頭皮障害の治療を必要とする対象に導入する行為を意味する。

１種又は複数種の微生物（微生物株）、スキンケア組成物、スキンケア製剤、及び／又はスキンケア製品の対象への投与は、１種又は複数種の微生物（微生物株）、スキンケア組成物、スキンケア製剤、及び／又はスキンケア製品を、頭皮、皮膚表面、及びｉｎ－ｖｉｔｒｏ又はｉｎ－ｖｉｖｏの皮膚細胞に適用又は導入することを含む。

本明細書で使用される場合、用語「生物学的汚染物質」は、以下に限定されないが、微生物、胞子、ウイルス、プリオン、及びこれらの混合物を含む、望ましくない及び／又は病原性の生物学的実体の１つ以上を指す。

本明細書で使用される場合、用語「～を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、特許請求の範囲で言及された既定の特徴、整数、工程、又は成分の存在を意味するが、１又は複数の他の特徴、整数、工程、成分、又はそれらの群の存在又は添加を排除するものではない。用語「～を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、用語「本質的に～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」及び「～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」に包含される実施形態を含むことを意図する。同様に、用語「本質的に～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」は、用語「～からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」に包含される実施形態を含むことを意図する。

本明細書で使用される場合、用語「実施形態」又は「開示」は、限定的であることを意味するものではなく、特許請求の範囲で定義されるか又は本明細書に記載される実施形態のいずれにも一般に適用される。これらの用語は、本明細書において互換的に用いられる。

本明細書で使用される場合、用語「賦形剤」は、製剤中、活性成分の担体として使用される不活性な物質を指す。賦形剤は、活性成分の貯蔵安定性など、製剤中の活性成分を安定化するために使用され得る。賦形剤はまた、活性成分を含有する製剤の増量のために使用されることもある。「活性成分」としては、本明細書に記載のスキンケア有益剤が挙げられる。

本明細書で使用される場合、用語「有効量」は、所望の効果を得るのに十分な量を指す。所望の効果としては、頭皮障害の予防、軽減、及び／又は治療、例えば、フケが多い状態の予防、軽減及び又は治療が挙げられる。

本明細書で使用される場合、「予防する」、「予防（すること）」、「予防」、及びその文法的変化形は、障害又は状態（頭皮障害など）及び／若しくはそれに付随する症状の１若しくは複数の発症又は再発を部分的に若しくは完全に遅延若しくは妨げる方法、又は対象が障害若しくは状態を獲得若しくは再獲得することを妨げる方法、又は対象が障害若しくは状態及び／若しくはそれに付随する症状の１若しくは複数を獲得若しくは再獲得するリスクを低減する方法を指す。

本明細書において、特定の特色（ｔｒａｉｔ）、特性（ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）、特徴（ｆｅａｔｕｒｅ）、生物学的プロセス、又は現象に関し使用される用語「低減（軽減）（すること）」「低減（軽減）する」、及びその文法的変化形は、その特定の特色、特性、特徴、生物学的プロセス、又は現象が少なくなることを指す。特色、特性、特徴、生物学的プロセス、又は現象は、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、又は１００％を超えて少なくなり得る。

用語「重量パーセント」、「重量百分率（重量％）」及び「重量－重量百分率（％ｗ／ｗ）」は、本明細書においては互換的に用いられる。重量パーセントは、組成物、混合物、溶液、又は製品中に含まれる質量を基準とした材料の百分率を指す。

「１６ＳｒＲＮＡ」又は「１６ＳリボソームＲＮＡ」は、原核生物のリボソームの小サブユニットを構成するｒＲＮＡを意味する。細菌の場合、この配列を利用して、分類学的操作単位を同定及び特徴付けることができる。

用語「ＩＴＳ」又は「内部転写スペーサー」は、リボソームによる転写産物内の、成熟化の過程で切り出され、分解される領域である。これらの配列は、真菌又は酵母の系統解析及び／又は同定に利用することができる。

保湿剤、ローション、又はボディローションという用語は、油と水の低～中粘度エマルションを指し、殆どは水中油型であるが、油中水型のものもあり、スキンケア用途における主要な効果としては、皮膚を水和するか又は皮膚の水分喪失を減少させる。殆ど全ての保湿剤は、皮膚軟化剤、閉塞剤、及び湿潤剤の組合せを含有する。皮膚軟化剤は、主に脂質及び油であり、水和し、皮膚の外観を改善する。多種多様な好適な皮膚軟化剤が知られており、本明細書で使用することができる（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｋｉｎ Ｃａｒｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ａｎｄ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，ｅｄｓ．Ｗｅｎｎｉｎｇｅｒ ａｎｄ ＭｃＥｗｅｎ，ｐｐ．１６５６－６１、１６２６、及び１６５４－５５（Ｔｈｅ Ｓｋｉｎ Ｃａｒｅ，Ｔｏｉｌｅｔｒｙ，ａｎｄ Ｆｒａｇｒａｎｃｅ Ａｓｓｏｃ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，７ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９７））（「ＩＣＩ Ｈａｎｄｂｏｏｋ」と呼ばれる）は、適切な材料の多くの例を含む）。ワセリン、ラノリン、及び蜜蝋などの閉塞剤は、皮膚上に疎水性バリアを作り出すことによって、経表皮水分蒸散量を減少させる。グリセロール及び尿素などの湿潤剤は、外部環境から水を引き付け、真皮から表皮への水の吸収を増強することができる。更に、保湿製剤は、エマルションの安定性を維持するために乳化剤を含有し、且つ増粘剤を使用して所望の粘度及び皮膚感触を達成することができる。香料、染料、防腐剤、治療剤、タンパク質、及び安定剤などの多種多様な他の成分が、他の消費者が好む属性を付与するために一般に添加される。

本明細書で使用される場合、参照配列に関する用語「配列同一性（％）（ｐｅｒｃｅｎｔ（％）ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｉｄｅｎｔｉｔｙ）」又は「配列類似性（％）（ｐｅｒｃｅｎｔ（％）ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ）」は、配列同一性が最大になるように、必要に応じてギャップを挿入して配列を最適にアラインメントさせた後の、参照ポリヌクレオチド配列中の残基と同一である、候補配列中のヌクレオチド残基の百分率と定義される。

本明細書で使用される場合、微生物「株」は、成長又は増殖しても遺伝子的に変化しないままである微生物（細菌又は真菌など）を指す。同一の微生物の多様性も包含される。

本明細書で使用される場合、用語「生物学的に純粋な株」は、他の微生物株を、株の複製を妨げるか又は通常の技法で検出されるのに十分な量で含まない株を意味する。本明細書に記載する生物及び培養物に関連して使用される「単離された」は、生物学的に純粋な株のみならず、天然に見られるものとは異なる形で増殖又は維持された生物の任意の培養物も包含する。

一態様では、本明細書に記載の皮膚細胞は、ヒト皮膚細胞又は動物皮膚細胞などの哺乳動物皮膚細胞である。

本明細書で使用される場合、用語「配列同一性」又は「配列類似性」は、２つのポリヌクレオチド配列、即ち、候補配列及び参照配列が、候補配列の全長に亘り同一である（即ち、配列同一性１００％）又は類似している（即ち、ヌクレオチド対ヌクレオチド基準で）ことを意味する。候補配列と参照配列との比較において、２つの配列を最適にアラインメントした場合、候補配列は、参照配列（付加も欠失も含まない）と比較して、付加又は欠失（即ち、ギャップ）を含み得る。配列同一性を求めるための配列の最適なアラインメントは、当該技術分野において知られているＡＬＩＧＮ若しくはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）などの公開されている任意の数のローカルアラインメントアルゴリズムを用いて、又は精査することにより、実施することができる。

本明細書全体を通して与えられるあらゆる数値の上限が、あらゆるより低い数値の限界を、あたかもそのようなより低い数値の限界が本明細書で明示されていたかのように含むことが意図されている。本明細書全体を通して与えられる全ての数値の下限は、全てのより高い数値の限界を、あたかもそのようなより高い数値の限界が本明細書で明示されていたかのように含むであろう。本明細書全体を通して与えられる全ての数値範囲は、そのようなより広い数値範囲内に入る全てのより狭い数値範囲を、あたかもそのようなより狭い数値範囲が本明細書で全て明示されていたかのように含むであろう。

本明細書において別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は、本発明の属する技術分野の当業者により一般に理解される意味と同様の意味を有する。

本明細書に開示される組成物及び方法の非限定的な例として、以下に示すものが挙げられる。

１．有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であって、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する、スキンケア組成物。

２．頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、実施形態１に記載のスキンケア組成物。

３．１種又は複数種のフケ防止活性剤を更に含む、実施形態１に記載のスキンケア組成物。

４．組成物は、サピエン酸（Ｃ１６：１ ｃｉｓ－６）、パルミチン酸（Ｃ１６：０）、ミリスチン酸（Ｃ１４：０）、ペトロセリン酸（Ｃ１８：１ ｃｉｓ－６）、ペンタデシル酸（Ｃ１５：０）、ステアリン酸（Ｃ１８：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）、オレイン酸、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される脂質を分解する、実施形態１に記載のスキンケア組成物。

５．組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減させる、実施形態１に記載のスキンケア組成物。

６．組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、請求項１に記載のスキンケア組成物。

７．組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、請求項１に記載のスキンケア組成物。

８．賦形剤、防腐剤、ｐＨ調整剤からなる群から選択される少なくとも１種の追加の化合物を更に含む、実施形態１に記載のスキンケア組成物。

９．ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物を含む、実施形態１に記載のスキンケア組成物。

１０．実施形態１～９のいずれか一つに記載の有効量のスキンケア組成物の、スキンケア製品における使用。

１１．実施形態１～９のいずれか一つに記載の有効量のスキンケア組成物と、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分とを含む、スキンケア製品。

１１ｂ．製品は、局所投与用に配合されている、実施形態１１に記載のスキンケア製品。

１２．スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対し、重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、最大で１０％である、実施形態１１に記載のスキンケア製品。

１２ｂ．第１スキンケア組成物及び第２スキンケア組成物を含むスキンケア製品であって、第１スキンケア組成物は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなる有効量の第１活性剤を含み、第２スキンケア組成物は、少なくとも有効量の、フケ防止活性剤から選択される少なくとも１種の局所投与用第２活性剤を含む、スキンケア製品。

１２ｃ．第１スキンケア組成物は、ゲル、エマルション、ヒドロゲル、ルース若しくはコンパクトパウダー、懸濁液若しくは溶液、又はスプレー溶液からなる群から選択される少なくとも１種の形態に配合される、実施形態１０ｂに記載のスキンケア製品。

１２ｄ．少なくとも１種の第２組成物は、ヘアローション、シャンプー、ヘアコンディショナー、もつれ解消剤（ｄｅｔａｎｇｌｅｒ）、ヘアクリーム又はゲル、整髪用スプレー、ヘアセット用ローション、トリートメント用（ｔｒｅａｔｉｎｇ）ローション、染料組成物、毛髪修復（ｒｅｓｔｒｕｃｔｕｒｉｎｇ）用ローション、パーマネントウェーブ用組成物、脱毛防止用ローション又はゲル、寄生虫駆除用シャンプー又は薬用シャンプー、及び頭皮ケア製品からなる群から選択される少なくとも１種の構成要素である、実施形態１０ｂに記載のスキンケア製品。

１３．それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法。

１３ｂ．それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法。

１３ｃ．それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含むスキンケア製品を前記対象に局所投与することを含む、方法。

１４．頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、実施形態１３に記載の方法。

１５．微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又は代謝物は、局所投与される、実施形態１３に記載の方法。

１５Ｂ．微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、局所投与される、実施形態１３ｃに記載の方法。

１６．それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法。

１６ｂ．それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含むスキンケア製品を前記対象に局所投与することを含む、方法。

１７．微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその代謝物は、局所投与される、実施形態１６に記載の方法。

１８．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、単一の組成物に配合される、実施形態１６に記載の方法。

１８ｂ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物及び／又はその代謝物は、少なくとも皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種の又は複数種の成分を更に含む組成物中にある、実施形態１６に記載の方法。

１９．組成物は、対象の皮膚又は頭皮に投与される、実施形態１６に記載の方法。

２０．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、実施形態１６に記載の方法。

２１．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）を阻害する、実施形態１６に記載の方法。

２１ｂ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する、実施形態１６に記載の方法。

２１ｃ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の断片は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する、実施形態１６に記載の方法。

２１ｄ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の細胞溶解物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する、実施形態１６に記載の方法。

１９２１ｅ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の発酵物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する、実施形態１６に記載の方法。

２１ｆ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する、実施形態１６に記載の方法。

２２．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、実施形態１６に記載の方法。

２２ｂ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の断片は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、実施形態１６に記載の方法。

２２ｃ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の細胞溶解物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、実施形態１６に記載の方法。

２２ｄ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の発酵物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、実施形態１６に記載の方法。

２２ｅ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、実施形態１６に記載の方法。

２３．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、実施形態１６に記載の方法。

２３ｂ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の断片は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、実施形態１６に記載の方法。

２３ｃ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の細胞溶解物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、実施形態１６に記載の方法。

２３ｄ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の発酵物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の形成を防止又は低減する、実施形態１６に記載の方法。

２３ｅ．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物の代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、実施形態１６に記載の方法。

２４．少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、サピエン酸（Ｃ１６：１ ｃｉｓ－６）、パルミチン酸（Ｃ１６：０）、ミリスチン酸（Ｃ１４：０）、ペトロセリン酸（Ｃ１８：１ ｃｉｓ－６）、ペンタデシル酸（Ｃ１５：０）、ステアリン酸（Ｃ１８：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）、オレイン酸、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される脂質を分解する、実施形態１６に記載の方法。

２５．組成物は、スキンケア製品として投与され、前記スキンケア製品は、前記スキンケア組成物を、前記スキンケア製品の総重量に対し、重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、マスク、パッチ、又はスティックである、実施形態１６～２４のいずれか一つに記載の方法。

２６．それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減する方法であって、実施形態１～９のいずれか一つに記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品を前記対象に局所投与することを含む、方法。

２７．スキンケア製品は、前記スキンケア組成物を、前記スキンケア製品の総重量に対し、重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、固形化粧料、マスク、パッチ、及びスティックからなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。

２８．有効量の第１化粧活性剤及び有効量の少なくとも１種の第２化粧活性剤を投与することを含む、それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、第１化粧活性剤は、少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物からなる、方法。

２９．第１及び第２化粧活性物質は、対象の皮膚又は頭皮に投与される、実施形態２８に記載の方法。

３０．第１化粧活性剤及び少なくとも１種の第２化粧活性剤は、単一の組成物中に配合される、実施形態２８に記載の方法。

３１．第１化粧活性剤及び少なくとも１種の第２活性剤は、別々の組成物中に配合される、実施形態２８に記載の方法。

３２．少なくとも１種の第２化粧活性剤は、少なくとも１種のフケ防止活性剤を含む、実施形態２８に記載の方法。

３３．少なくとも１種の第２化粧活性剤は、亜鉛ピリジンチオン、サリチル酸、二硫化セレン、タイム及びイヌハッカの混合油、オクトピロックス、及びプロバイオティクス微生物からなる群から選択される少なくとも１種の構成要素を含む、実施形態２８に記載の。

３４．少なくとも１種の第２化粧活性剤は、角質溶解剤、例えば、サリチル酸及びその様々な形態にある硫黄、角化調整剤、例えば、亜鉛ピリチオン、ピリジンチオン塩、トリハロカルバミド、トリクロサン、アゾール化合物、抗真菌ポリマー、アラントイン、ステロイド、例えば、局所用コルチコステロイド、タール又はポリタール（コールタール）、ウンデシレン酸、フマル酸、アリルアミン、及びこれらの混合物、シクロピロックス、オクトピロックス、ピロクトンオラミン、プロピオン酸クロベタゾール、ベタメタゾン吉草酸エステル、ティーツリー油、タイム及びイヌハッカの混合油、局所用抗真菌剤、例えば、硫化セレン、イミダゾール（例えば、ケトコナゾール）、ヒドロキシピリドン、例えば（例えば、シクロピロックス）、自然療法薬、例えば、メラレウカ属植物（Ｍｅｌａｌｅｕｃａ ｓｐ．）油、アロエベラ、並びにプロバイオティクス微生物からなる群から選択される少なくとも１種の構成要素を含む、２８に記載の方法。

３５．頭皮のフケが多い状態は、フケ症と、頭皮の乾燥、頭皮の過脂漏症（ｈｙｐｅｒｓｅｂｏｒｒｈｏｅａ）、環境叢のバランスの乱れ、痒掻、頭皮の炎症、又は頭皮のバリア機能のバランスの乱れとを併発している、実施形態１６に記載の方法。

３６．フケが多い状態を治療するための化粧用組成物又は皮膚科用組成物を調製するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物及び／又はその断片を、少なくとも１種の美容用又は皮膚科用賦形剤と組み合せることを含む、方法。

３７．ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の細胞の発酵物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であって、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する、組成物。

３８．ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の細胞の全部又は実質的に全部が発酵物から除去されている、実施形態３７に記載のスキンケア組成物。

３９．発酵物は、培養物上清である、実施形態３７に記載の組成物。

４０．皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分を更に含む、実施形態３７に記載の組成物。

４１．実施形態３７～４０のいずれか一つに記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品。

４２．頭皮障害の治療に使用するためのヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の発酵物。

４３．実施形態３６に記載の使用のためのヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物発酵物であって、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の細胞の全部又は実質的に全部が発酵物から除去されている、発酵物。

４４．実施形態３６に記載の使用のためのヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物発酵物であって、発酵物は、培養物上清である、発酵物。

４５．実施形態４２～４４のいずれか一つに記載の発酵物を含むスキンケア製品。

４６．ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の細胞の代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であって、前記代謝物は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物（ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｓｉｍ）の代謝に由来し、前記頭皮障害の治療に有効性も示し、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する、スキンケア組成物。

４７．皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分を更に含む、実施形態４０に記載のスキンケア組成物。

４８．実施形態４６又は４７に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品。

４９．頭皮障害の治療に使用するためのヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物の代謝物であって、前記代謝物は、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物（ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｓｉｍ）の代謝に由来し、前記頭皮障害の治療に有効性も示す、代謝物。

以下の実施例では、他に特に明記しない限り、部及び百分率は重量によるものであり、度は摂氏である。これらの実施例は、本開示の実施形態を示しているが、単に例示するためにのみ提供されていることを理解すべきである。上記の考察及びこれらの実施例から、当業者であれば様々な用法及び条件に適合させるために本開示に様々な変更及び修正を加えることができる。そのような修正もまた、添付の特許請求の範囲に含まれることが意図されている。

本明細書における以下の略語は、以下のような測定単位、手法、特性、又は化合物に対応する：「ｓｅｃ」又は「ｓ」は秒を意味し、「ｍｉｎ」は分を意味し、「ｈ」又は「ｈｒ」は時間を意味し、「μＬ」はマイクロリットルを意味し、「ｍＬ」はミリリットルを意味し、「Ｌ」はリットルを意味し、「ｍＭ」はミリモル濃度を意味し、「Ｍ」はモル濃度を意味し、「ｍｍｏｌ」はミリモルを意味し、「ｐｐｍ」は百万分率を意味し、「ｗｔ」は重量を意味し、「ｗｔ％」は重量パーセントを意味し、「ｇ」はグラムを意味し、「ｍｇ」はミリグラムを意味し、「μｇ」はマイクログラムを意味し、「ｎｇ」はナノグラムを意味し、「ｃｏｎｃ．」は濃度を意味し、「Ｔｒｔ」は処理を意味する。

実施例１
材料及び方法
酵母株
酵母は、ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）、ＣＢＳ（ＣＢＳ－ＫＮＡＷ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）、又はＰｈａｆｆ Ｙｅａｓｔ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＵＣ Ｄａｖｉｓ）からのものを用いた。使用した株は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）（ＣＢＳ ７９６６）、マラセチア・フルフル（Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ）（ＣＢＳ １８７８）、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）（ＡＴＣＣ ２０３６２、ＡＴＣＣ ９７７３、ＡＴＣＣ １８９４２、ＡＴＣＣ ２０１７７、ＣＢＳ ２０７３、Ｐｈａｆｆ ＃５０－４７）である。

増殖培地
細胞を、バクトペプトン１０ｇ／Ｌ、酵母エキス２ｇ／Ｌ、乾燥ウシ胆汁８ｇ／Ｌ、グリセロール１０ｍｌ／Ｌ、モノステアリン酸グリセロール０．５ｇ／Ｌ、Ｔｗｅｅｎ－６０ ５ｍｌ／Ｌ、オリーブ油又はパーム油２０ｍｌ／Ｌを含む改変Ｌｅｅｍｉｎｇ＆Ｎｏｔｍａｎ（ｍＬＮ）培地で培養した。合成増殖培地の場合は、酵母ニトロゲンベース（アミノ酸不含）６．７ｇ／Ｌ、リン酸二カリウム６ｇ／Ｌ、リン酸二水素カリウム４ｇ／Ｌ、及び炭素源として異なる量の脂質、及び乳化剤としてＴｗｅｅｎ－４０、－６０、又は－８０。固形培地の場合は、寒天１５ｇ／Ｌを加えた。培地をオートクレーブで１１０℃で２０分間滅菌した。

リパーゼ活性測定
オレイン酸４－メチルウンベリフェリル（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）をリパーゼの基質として使用し、ＤＭＳＯに５ｍｇ／ｍｌとなるように溶解して原液とした。次いでこれをＤＭＳＯに０．５ｍｇ／ｍｌとなるように溶解し、９６ウェルプレートで各反応に５０μｌずつ使用した。濾過（０．２２ミクロンのフィルタ）した細胞培養物１００μｌを各ウェルに添加し、５回ピペッティングすることにより混合した。蛍光強度をＴｅｃａｎ Ｓｐａｒｋ（登録商標）マイクロプレートリーダーを用いて３７℃で１０分毎に１時間測定した。励起波長及び発光波長を３５５及び４６０ｎｍとし、ゲインを５５とした。

ｑＰＣＲによる細胞計数
定量ＰＣＲ、即ちｑＰＣＲを利用して、単独及び複合培養条件下で、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）を３つの時点；１日目、４日目、及び７日目に定量した。全てのマラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）種を検出するために、Ｃｌａｖａｕｄ ｅｔ ａｌ．（２０１３），ＰＬＯＳ Ｏｎｅ，８：１０に記載されているｑＰＣＲ測定を用いた。使用したプライマー／プローブを以下に示す；フォワードプライマー１：５’ ＣＴＡＡＡＴＡＴＣＧＧＧＧＡＧＡＧＡＣＣＧＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）、リバースプライマー２：５’ ＧＴＡＣＴＴＴＴＡＡＣＴＣＴＣＴＴＴＣＣＡＡＡＧＴＧＣＴＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）、ＭＧＢプローブ１：ＦＡＭ－ＴＴＣＡＴＣＴＴＴＣＣＣＴＣＡＣＧＧＴＡＣ－ＭＧＢ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３）。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）のｑＰＣＲ測定は、ＳＮＦ１遺伝子をターゲットとしており、次に示すプライマー／プローブを含む；フォワードプライマー３：５’ ＡＣＡＣＣＡＴＴＣＣＣＣＣＣＴＡＴＣＴＧＴ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４）、リバースプライマー４：５’ ＴＧＡＣＣＡＣＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＴＧＡＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５）、プローブ２：５’ ６ＦＡＭ－ＴＧＣＣＧＧＣＧＣＡＡＡＡＣＡＣＣＴＧ－ＴＡＭＲＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６）。マラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の両方の代表的な株のゲノムＤＮＡを使用して、絶対定量用の検量線を作成した。

単独又は複合培養したヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）の培養物１ｍｌを各時点で遠心分離し、酵母をペレット化した。次いで、細胞ペレットを利用してゲノムＤＮＡを抽出した。Ｑｉａｇｅｎ ＤＮｅａｓｙ ＰｏｗｅｒＳｏｉｌ Ｐｒｏ ＤＮＡ キット（Ｑｉａｇｅｎ^ＴＭ、Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ、ＭＤ）を使用して、製造業者の指示に従いＤＮＡを抽出した。各サンプルから得られた精製ゲノムＤＮＡ１．５μｌを、マラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）又はヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）を検出するための別々の２つの反応において、それぞれ、以下に示すものと混合した；ＡＢＩ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｔａｑ Ｍａｎ Ｍｉｘ ｗ／ｏ ＵＮＧ １０μｌ、１００μＭのフォワード及びリバースプライマー０．２μｌ、Ｔａｑ Ｍａｎプローブ０．０５μｌ、並びに分子生物学グレードの水８．０５μｌ。各サンプルについて、Ｑｕａｎｔｓｔｕｄｉｏ ７ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔを用いて３反復で次に示すようにｑＰＣＲ反応を行った：１０ｍｉｎ、９５℃＋４０サイクル（９５℃、１５ｓｅｃ＋６０℃、６０ｓｅｃ）。増幅を行いながら蛍光データを収集した。

マラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の両方に関し、既知量のゲノムＤＮＡ（ｇＤＮＡ）及びそれらのｑＰＣＲから得られた対応するＣｔ値に基づき、線形回帰分析を用いて検量線を作成した。次いでこれらの検量線を用いて、３つの時点のそれぞれから得られたサンプル中の各微生物の複製数を求めた。３反復で行ったｑＰＣＲ反応の平均値を報告した。

ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）による培地中の脂質の同定及び定量
オレイン酸及びパルミチン酸の分析用標準物質として、ＮｕＣｈｅｃｋ Ｐｒｐｅ，ＩｎｃからのＵ４６Ａ（Ｃ１８：１）及びＮ１６Ａ（Ｃ１６：０）を用いた。各化合物について、後段での定量化に用いるための検量線を作成した；標準物質は重量基準でヘキサン中で調製した。ＧＣ分析時に注入する量のばらつきを補正するために、ヘキサン溶媒に内部標準としてミリスチン酸（Ｃ１４：０、Ｓｉｇｍａ ＃７００７９）を加えた（ヘキサン１００ｍＬ当たり６２ｍｇを加えた）。

Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ７８９０Ａガスクロマトグラフを使用して、遊離脂肪酸の分離及び定量化を行った。これは、７６８３Ｂデュアルインジェクションタワー（ｄｕａｌ ｉｎｊｅｃｔｏｒ ｔｏｗｅｒ）（フロント／バック）、Ｇ２６１４Ａオートサンプラー、及び水素炎イオン化型検出器（ＦＩＤ）を備えるものとした。キャリアガスとしてヘリウムを使用し、ＦＩＤの燃料ガス及び助燃ガスはＶＷＲ ２６０００－０３４水素発生器を用いて供給した。

Ａｇｉｌｅｎｔ Ｊ＆Ｗ ＤＢ－ＦＦＡＰカラム、ニトロテレフタル酸修飾ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）カラム（３０ｍ×０．２５ｍｍＩＤ×０．２５μｍ）を用いて分析を実施した。測定方法は次に示す通りである。注入口を２５０℃に設定し、セプタムを３ｍＬ／ｍｉｎでパージし、１００：１のスプリットモードで１μＬを注入した。温度プログラムは、８０℃で２分間、次いで８℃／分で２５０℃にし、１０分間保持するものとした（５０℃で３分間ポストラン）。ヘリウムキャリアガスを使用し、流量を１．８ｍＬ／ｍｉｎとし、ＦＩＤを３００℃に設定し、Ｈ_２及び空気の流量をそれぞれ４０ｍＬ／ｍｉｎ及び４５０ｍＬ／ｍｉｎとし、メイクアップガスの流量を４１．５ｍＬ／ｍｉｎとした。

マラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）を７日間培養し、培養継続中の複数の培養物を分取し、サンプルとして分析した。培養物１ｍＬを分取し、後にＧＣ－ＦＩＤでＣ１６：０及びＣ１８：１の含有量を分析する時点まで－８０℃で凍結させた。分析時には、サンプルを周囲温度で解凍させた。各サンプルを３０～６０秒間激しくボルテックスで均質化した後、２５０μＬを２ｍＬ容のマイクロ遠心管に分取した。これらを２５０μＬのヘキサンで抽出した。ＧＣ注入時のばらつきを確認するために、ヘキサンに内部標準としてＣ１４：０をスパイクした。マイクロ遠心管用カローセル型ホルダーを利用して、サンプルをボルテックスミキサーで１０分間振盪し；次いでサンプルを周囲温度で１５分間静置した後、１９００×ｇで５分間遠心分離した。抽出された遊離脂肪酸を含む上層であるヘキサン相を、後段でＧＣ－ＦＩＤにより分析するためにガラスバイアルに移し替えた。本方法により、パルミチン酸及びオレイン酸をそれぞれ１９．４ｍｉｎ及び２１．６ｍｉｎの保持時間で分離し、定量化することができた。ＧＣ分析の精度を、１７．８ｍｉｎにピークが現れる内部標準であるミリスチン酸を用いて検証したところ、測定全体を通して、ピーク面積の変動は２～５％であった。

実施例２
異なる脂質培地におけるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の培養 本実施例においては、炭素源として脂質を用いた異なる増殖培地におけるマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の増殖表現型を明らかにする。表１に示すように、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）株は全て、試験に供した脂質で非常に良好に増殖し、マラセチア・フルフル（Ｍ．ｆｕｒｆｕｒ）は、良好又は中程度に増殖した。一方、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）は、試験を行った全ての条件、特にオレイン酸（増殖せず）又はオリーブ油（弱い増殖又は増殖せず）上で増殖性が低く、パーム油又はパルミチン酸エチル上では弱い増殖性しか示さなかった。オリーブ油は、主として不飽和脂肪酸（８６％）、特にオレイン酸（７８％）から構成されている。パーム油は、主としてパルミチン酸（４４％）及びオレイン酸（４０％）から構成されている。

表１に、異なる脂質プレート上での酵母株の増殖表現型を示す。使用した脂質及び乳化剤を最上段に示す。細胞をプレート上に筋状に塗り付け、３２℃で３日間培養した。＋＋＋良好な増殖；＋＋中程度の増殖；＋弱い増殖；－増殖せず。

皮脂腺の産生物である皮脂は、脂質、主としてトリグリセリド、遊離脂肪酸、ワックスエステル、及びスクワレンの混合物である。脂肪酸の中でも、皮脂の脂質の主成分はサピエン酸及びパルミチン酸であり、それぞれ約３０％を占める。オレイン酸は少量成分であり、約２～５％である（Ａｋａｚａ，ｅｔ ａｌ．（２０１４），Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ ４１：１０６９）。

表１に示す結果は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）がオレイン酸エステル（オレイン酸）を利用することができず（したがって、その上では増殖できないか又は増殖が弱い）、パルミチン酸エステル上では僅かに増殖できたことを示している。

それとは対照的に、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｉｔｃａ）株は全て、オレイン酸エステル及びパルミチン酸エステル上で増殖可能であった。

実施例３
異なる脂質培地におけるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ．）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）のリパーゼ活性
分泌されたリパーゼの活性を測定するために、細胞培養物の分取物（１ｍｌ）を回収し、細胞を０．２２ミクロンのフィルタで取り除いた。濾過した培養物上清中のリパーゼの基質としてオレイン酸４－メチルウンベリフェリル（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を使用し、蛍光により活性を測定した。

表２に、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の細胞培養物上清のリパーゼ活性を示す。細胞を、パルミチン酸エチル１ｍｌ／Ｌ及びＴｗｅｅｎ－４０を０．５ｍｌ／Ｌ含む合成培地で、３２℃で２日間（ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ））又は５日間（マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ））振盪培養した。リパーゼ活性により加水分解されたオレイン酸４－メチルウンベリフェリルにより生じた蛍光を、活性として示した。細胞なし（培地）はバックグラウンドシグナルを示す対照である。

表２に示すように、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）は、無細胞培地中で最も高いリパーゼ活性を示した（分泌型）。他方、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２株及びＣＢＳ ２０７３株は、無細胞上清中で有意なリパーゼ活性を示さず、これらのリパーゼ活性の大部分が細胞結合型又は細胞内型であることを示唆している。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ ＃５０－４７株は培養物上清中で若干のリパーゼ活性を示した。

実施例４
マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の競合増殖試験
本実施例は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）を一緒に又は別々に増殖させた場合の経時的なバイオマス変化について記載するものである。マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）は脂肪酸合成酵素を持たないため、増殖させるためには培地中に脂質が必要であるが、培地に脂質及び乳化剤を添加することにより培地はミセル又は脂質の小滴を形成し、そのため、光学濃度による細胞増殖の監視が難しくなる。マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）はまた、液体培地中では細胞塊として増殖し、したがって、培養物の分取物をプレート上に広げてコロニーを計数する方法では細胞増殖が正確に測定されない。より正確な細胞増殖測定を行うために、ｑＰＣＲ法を用いて、ＤＮＡ含有量により細胞増殖を監視した。

表３に、パーム油を含む改変Ｌｅｅｍｉｎｇ＆Ｎｏｔｍａｎ培地を使用し、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の酵母を組み合わせて増殖競合させるか又は単独で増殖させた結果を示す。７日間の３つの異なる時点で培養物を分取し、酵母の増殖をｑＰＣＲで測定した。結果は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖は、２種の酵母を一緒に増殖させると、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を単独で増殖させた場合と比較して、影響を受ける／１０倍を超えて低減されることを示していた。一方、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の増殖は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）が存在しても、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）単独で増殖させた場合と比較して、実質的に影響を受けなかった。

表３に、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）（ＡＴＣＣ ２０３６２）を一緒に又は別々に増殖させた場合の、ｑＰＣＲに基づく細胞数を示す。パーム油２０ｍｌ／Ｌを含む１００ｍｌのｍＬＮ培地中で７日間増殖させたマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の培養物を、２つの５０ｍｌの培養物に分割し、一方の５０ｍｌの分にはヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）をＯＤ_６００が０．１になるまで加え（共培養）、もう一方の５０ｍｌの分には加えなかった（マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）単独）。「ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｙｔｉｃａ）単独」培養物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）をＯＤ_６００が０．１になるまで接種した新鮮なｍＬＮ培地５０ｍｌとした。各細胞培養物の分取物１ｍｌからゲノムＤＮＡを作製し、ｑＰＣＲ分析に使用した。

驚くべきことに、且つ予期せぬことに、表３に示すように、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を含む培地中にヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）が存在することによって、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖が有意に低下し（例えば、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）がマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ）を阻害する）、このことは、これをフケの多い状態の微生物治療に使用することができることを示している。

実施例５
ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の脂質消費に関するＧＣ分析
本実施例では、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）により消費されるオレイン酸及びパルミチン酸について記載する。これは、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）のリパーゼ活性により生成したオレイン酸の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）が、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）により消費されたことを示すものである。培地中のＦＦＡの量を測定するためにガスクロマトグラフィー（ＧＣ）を使用した。

細胞の培養にはパーム油を含む改変Ｌｅｅｍｉｎｇ＆Ｎｏｔｍａｎ（ｍＬＮ）培地を使用した。マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を１００ｍｌのｍＬＮ培地中、３２℃で７日間振盪培養し、培養物の上清を遠心分離により回収し、２つの５０ｍｌ分に分割し、２５０ｍｌのフラスコに移し替えた。一方の５０ｍｌの培養物上清には、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の一晩培養物５００μｌを、最終ＯＤ_６００が０．１になるまで添加した。ＧＣ分析用として、遠心分離の前後にサンプル（１ｍｌ）を回収した。マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の大部分を遠心分離により取り除いたが、上清から全てのマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）細胞が除去された訳ではなかった。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）を添加するか又は添加していないマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）培養物上清を、３２℃で振盪しながらインキュベートした。１、２、３、４、及び７日間インキュベートした後、ＧＣ分析用として１ｍｌ分取して回収した。

表４にＧＣ分析の結果を示す。遠心分離により大部分のマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を除去すると、パルミチン酸及びオレイン酸は両方とも有意に低下した。これは、一部のＦＦＡが細胞内にあり、遠心分離の際に沈降したことに起因する可能性がある。「マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）上清」及び「マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）上清＋ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）」のパルミチン酸及びオレイン酸のＦＦＡの量を遠心分離（０日目）後に比較した。

「マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）上清」の場合、パルミチン酸及びオレイン酸のＦＦＡの量は、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）細胞の大部分が遠心分離により除去されたので、４日目まで殆ど変化しなかった。しかしながら、７日目のサンプル中のＦＦＡは明らかに低下していた。他方、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）を「マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）上清」に添加すると、パルミチン酸及びオレイン酸は両方とも速やかに消費され、オレイン酸がパルミチン酸よりも速く消費された。

表４に、ＧＣにより定量された遊離脂肪酸を示す。マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）をパーム油２０ｍｌ／Ｌを含む１００ｍｌｍＬＮ培地中で７日間増殖させ、遠心分離した後、２つの５０ｍｌの上清分取物に分割した。一方の５０ｍｌの分取物には、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）をＯＤ_６００が０．１になるまで加え（マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）上清＋ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ））、もう一方の５０ｍｌ分にはヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）を加えなかった（マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）上清）。３２℃で振盪しながらインキュベートする間に、表に示したようにサンプルを採取し、パルミチン酸及びオレイン酸のＦＦＡを分析した。０日目のサンプルと比較したＦＦＡの相対量を括弧内に示す。

驚くべきことに、且つ予期せぬことに、表３（実施例４）に示す結果は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）及びマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を一緒に培養すると、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の存在下でマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖が有意に低下した（例えば、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）がマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ）を阻害する）ことを示しており、これは、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物をフケが多い状態の微生物治療に使用できることを示している。表２に示すように、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）は、無細胞培地中でリパーゼ活性を示した（リパーゼが分泌されたことを示す）が、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）は無細胞培地中で有意なリパーゼ活性を示さず、これはおそらく、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物のリパーゼ活性の大部分は細胞結合型又は細胞内型であったためと推定される。これは、驚くべきことであると共に、微生物治療として好ましい特徴である。その理由は、微生物治療が終了した後にリパーゼ活性は皮膚上に残存せず、遊離脂肪酸の蓄積を引き起こさないことになるためである。表４の結果はまた、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）のリパーゼ活性により生成したオレイン酸の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）が、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）によって効果的に消費されたが、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）によっては消費されなかったことも示しており、これは、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）がオレイン酸を利用できない（したがってオレイン酸上で増殖できないか又は増殖が弱い）が、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）によって効果的に取り込まれたことを示す結果（表１）とも一致している。オレイン酸の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は炎症誘発性と見なされているので、ヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属微生物がＦＦＡを効率的に除去することは、炎症誘発性のオレイン酸ＦＡＡにより引き起こされるフケ症又は他の皮膚疾患に対抗する微生物治療の重要な特性である。

実施例６
ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）細胞を含まない培地の上清（無細胞発酵物）によるマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖阻害に関するフローサイトメトリー解析
皮膚疾患に加担しているマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ．）は、脂質を合成するための脂肪酸合成酵素を持たず、したがって、増殖するために宿主の皮脂脂質に頼っている（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，（２００７）ＰＮＡＳ，１０４：１８７３０）。マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖培地として、バクトペプトン１０ｇ／Ｌ、酵母エキス２ｇ／Ｌ、乾燥ウシ胆汁８ｇ／Ｌ、グリセロール１０ｍｌ／Ｌ、モノステアリン酸グリセロール０．５ｇ／Ｌ、Ｔｗｅｅｎ－６０を５ｍｌ／Ｌ、及びパーム油２０ｍｌ／Ｌを含む改変Ｌｅｅｍｉｎｇ＆Ｎｏｔｍａｎ（ｍＬＮ）培地を使用した。

脂質及び界面活性剤をｍＬＮ培地中に存在させると脂質の乳濁液になることに加えて、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ．）が細胞塊の表現型を示すため、光学濃度測定によるか又は培養物の分取物をプレート上に広げてコロニーを計数することによって細胞増殖を監視することは困難である。この問題を回避するために、細胞染色色素を使用するフローサイトメトリーにより、脂質乳濁培地における細胞増殖を定量的に測定した。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清を作用させた（ｃｈａｌｌｅｎｇｅｄ）場合のマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖を監視するためのフローサイトメトリー解析を次に示すように実施した。

まず、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ、Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）培養物から異なる種類の発酵物を産生させるために、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２株を、ＹＰＤ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｇ／Ｌグルコース）、ＹＰＧ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｍｌ／Ｌグリセロール）、パーム油２０ｍｌ／Ｌを含むｍＬＮ、又はオリーブ油２０ｍｌ／Ｌを含むｍＬＮ培地中で、初期ＯＤ_６００を０．１とし、２５０ｒｐｍで振盪しながら３２℃で５日間培養した。ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の細胞培養物を０．２２μｍのフィルタで２回濾過して細胞を除去することにより、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の無細胞培養物上清（無細胞発酵物とも称する）を調製し、－２０℃で凍結させて保存した。

ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞発酵物によるマラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ、Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖阻害を監視するために、３日間培養したマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）接種培養物を、パーム油２０ｍｌ／Ｌを含む新鮮なｍＬＮ培地で１０倍希釈した。希釈した培養物を、次いで更に０．２Ｍのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）で５倍希釈した。２００μｌのヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清又は培地のみを、深底の９６ウェルプレート（Ｂｉｏｔｉｘ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ）で、希釈したマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）培養物８００μｌに加え、湿度を８５％と一定にして、３５０ｒｐｍで振盪しながら３２℃でインキュベートした。

異なる時点で、各培養物から５０μｌずつ分取し、Ｑｓｏｎｉｃａ Ｑ７００（Ｑｓｏｎｉｃａ、Ｎｅｗｔｏｗｎ、ＣＴ）を使用して、振幅を５とし、１秒間のオン／オフサイクルで３０秒間温和な超音波処理に付した。超音波処理した細胞培養物２０μｌを、ｐＨ７．４のリン酸干渉生理食塩水（ＰＢＳ）５０μｌ、希釈した（１：１，０００、ＰＢＳ中）Ｃｙｔｏ ＢＣ Ｇｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）１０μｌ、希釈した（１：１，０００、ＰＢＳ中）ヨウ化プロピジウム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）１０μｌ、及び希釈した（１：２００、ＰＢＳ中）コンカナバリンＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）１０μｌと混合し、室温で２０分間インキュベートした。サンプルを、Ｎｏｖｏｃｙｔｅ Ｑｕａｎｔｅｏｎ（Ａｃｅａ）を使用してフローサイトメトリーで分析した。細胞膜透過性ＤＮＡ／ＲＮＡインターカレーティング色素であるＳｙｔｏＢＣを、４８８のレーザーで励起し、５３０／帯域幅３０のフィルタを用いて検出した。ａｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４０で標識したマンノース結合性レクチンであるコンカナバリンＡを６３７ｎｍのレーザーで励起し、６６０／帯域幅２０のフィルタを用いて検出した。乳化した液滴に由来するイベントは、これらのチャンネルでは比較的シグナル強度が低いのに対し、マンノース含有量が高く、核酸含有量が高いイベントをマラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）細胞と判定した。高ｓｙｔｏＢＣ、高ＣｏｎＡイベントでゲーティングすることにより、マラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）細胞数を決定し、各サンプルのイベント／μｌ値を記録した。

表５に、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２から得られた様々な無細胞培養物上清又は抗真菌剤であるアムホテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）を添加したマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）培養物のフローサイトメトリー解析を示す。各培地対照と比較した、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖阻害率を表５に示す。数値は２反復サンプルの平均値である。

試験に供した全てのヤロウィア属菌（Ｙａｒｒｏｗｉａ）発酵物に関し、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清を添加することによって、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖は、それぞれの培地のみの対照と比較して、経時的に低下した。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清の中でも、ＹＰＤ発酵物は、３日間インキュベートした後のマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖に対する効果が最も高く、培地対照と比較して細胞数が８１％低下した。

実施例７
２種の異なるヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）株由来の無細胞培養物上清によるマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）増殖阻害のフローサイトメトリー解析
ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清を作用させた場合のマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖を、フローサイトメトリー解析法を用いて監視した。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２株又はＡＴＣＣ ９７７３株を、ＹＰＤ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｇ／Ｌグルコース）、ＹＰＧ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｍｌ／Ｌグリセロール）、パーム油２０ｍｌ／Ｌ含有ｍＬＮ（１０ｇ／Ｌバクトペプトン、２ｇ／Ｌ酵母エキス、８ｇ／Ｌ乾燥ウシ胆汁、１０ｍｌ／Ｌグリセロール、０．５ｇ／Ｌモノステアリン酸グリセロール、５ｍｌ／ＬＴｗｅｅｎ－６０）、又はオリーブ油２０ｍｌ／Ｌ含有ｍＬＮ中で、初期ＯＤ_６００を０．１とし、２５０ｒｐｍで振盪させながら３２℃で５日間培養した。ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の細胞培養物を０．２２μｍフィルタで２回濾過して細胞を除去することにより、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の無細胞培養物上清（無細胞発酵物とも称する）を調製し、－２０℃で保存した。

マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）接種培養物を、パーム油２０ｍｌ／Ｌを含む新鮮なｍＬＮ培地で１０倍希釈した。次いで、希釈した培養物を更に０．２Ｍのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）で５倍希釈した。２００μｌのヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清又は培地のみを、深底の９６ウェルプレート（Ｂｉｏｔｉｘ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）を用いて、希釈したマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）培養物８００μｌに加え、湿度を８５％と一定にして、３５０ｒｐｍで振盪しながら３２℃でインキュベートした。３日間インキュベートした後、各培養物から５０μｌを分取し、実施例６に記載したように細胞染色色素を使用して、フローサイトメーターで分析した。

各培地対照と比較した、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖阻害率を、表６に示す。数値は２反復のサンプルの平均値である。

ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の無細胞発酵物（無細胞培養物上清）を添加することにより、それぞれの培地のみの対照と比較して、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖が低減された。ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）無細胞培養物上清の中でも、ＡＴＣＣ ２０３６２及びＡＴＣＣ ９７７３のＹＰＤ発酵物から得られた無細胞培養物上清が、３日間インキュベートした後のマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）の増殖に対する効果が最も高く、培地対照と比較して約６５～６９％低減させた。

実施例８
ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）発酵物によるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムの除去
皮膚は独特な環境にあり、微生物は多くの場合バイオフィルムとして存在する（Ｂｒａｎｄｗｅｉｎ，ｅｔ ａｌ．，ＮＰＪ Ｂｉｏｆｉｌｍｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅｓ ２：３，２０１６）。バイオフィルムは皮膚の上皮表面又は毛包の内側に形成され得る。バイオフィルムは、細胞に加えて、エキソ多糖類、タンパク質、及びＤＮＡなどの細胞外成分から構成されている。この複雑な構造が、特定の化合物に対する物理的及び化学的バリアとなり得る。しかしながら、それよりも重要なのは、バイオフィルム状態にある微生物の生理機能が、浮遊状態にある微生物のそれとは大きく異なることである。これは、それらの環境ストレスに対抗する能力及び様々な抗微生物治療に抵抗する能力に関し特に当てはまり、このことが注目すべき治療上の課題となっている（Ｋｏｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １５：７４０－７５５， ２０１７）。

健康な皮膚及び不健康な皮膚の単離された酵母であるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）が両方とも、ｉｎ ｖｉｔｒｏでバイオフィルムを形成することが示された（Ａｎｇｉｏｌｅｌｌａ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄ Ｍｙｃｏｌ．０：１－７，２０２０）。マラセチア・グロボーサ（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ、Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）のこのような単離物は、バイオフィルムを形成するだけでなく、非常に高い付着力及び／又は疎水性を示す可能性もある。バイオフィルム形態にあるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）が、自身の抗真菌剤に対する感受性を有意に低下させることが示されている（Ｆｉｇｕｅｒｅｄｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ ８：８６３－８６７，２０１３；Ｂｕｍｒｏｏｇｔｈａｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ ５４：５４４－５４９，２０１６）。バイオフィルムの付着性及び疎水性が、マラセチア属微生物（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）の病原性因子であると示唆されている（Ａｌｌｅｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６：３１１，２０１５；Ａｎｇｉｏｌｅｌｌａ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ ５６：１１０－１１６，２０１８）。つまり、マラセチア属微生物（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）のバイオフィルムを除去する戦略は、この群の生物によって引き起こされる様々な皮膚状態の治療に有益となる可能性がある。

本実施例においては、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）ＡＴＣＣ ＭＹＡ－４６１２を、以下に記載するようにバイオフィルム試験の開発に使用した。

マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）ＡＴＣＣ ＭＹＡ－４６１２を、パーム油２０ｍｌ／Ｌを含むｍＬＮ培地（実施例６に記載）中、ロータリーシェーカーを用いて１００ｒｐｍの速度で３２℃で培養した。３日間インキュベートした後、培養物２５μｌを、炭素源としてパーム油を用いたｍＬＮ培地１５０μｌを含むポリスチレン製９６ウェルプレートのウェルに接種した。プレートを振盪せずに３２℃で４８時間インキュベートすることにより、マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）を、懸濁細胞（浮遊細胞）及びマイクロタイタープレートのウェル壁に付着した固着性バイオフィルム細胞の両方として増殖させた。

バイオフィルムが形成された後、増殖培地及び付着していない細胞を除去し、ウェルを１×リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄した。ＰＢＳは、ｐＨ調整された超高純度グレードのリン酸緩衝液及び生理食塩水の混合物であり、１×作用濃度に希釈したものは、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、８ｍＭ Ｎａ_２ＨＰＯ_４、及び２ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４を含有している。洗浄後、バイオフィルムを除去する効果を評価するために２種の異なるヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）（ＡＴＣＣ ２０３６２及びＡＴＣＣ ９７７３）株の無細胞上清（無細胞発酵物）２５０μｌを添加した。対照として２５０μｌの１×ＰＢＳも添加した。

実施例７に記載したように、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２株又はＡＴＣＣ ９７７３株を、ＹＰＤ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｇ／Ｌグルコース）、ＹＰＧ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｍｌ／Ｌグリセロール）、パーム油２０ｍｌ／Ｌ含有ｍＬＮ（１０ｇ／Ｌバクトペプトン、２ｇ／Ｌ酵母エキス、８ｇ／Ｌ乾燥ウシ胆汁、１０ｍｌ／Ｌグリセロール、０．５ｇ／Ｌモノステアリン酸グリセロール、５ｍｌ／Ｌ Ｔｗｅｅｎ－６０）、又はオリーブ油２０ｍｌ／Ｌ含有ｍＬＮ中で、初期ＯＤ_６００を０．１として、２５０ｒｐｍで振盪させながら３２℃で５日間増殖させた。ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の細胞培養物を０．２２μｍのフィルタで２回濾過して細胞を除去することにより、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の無細胞培養物上清（無細胞発酵物とも称する）を調製し、－２０℃で保存した。

本実施例では、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の発酵物を、オリーブ油２０ｍｌ／Ｌを含むｍＬＮ培地で生成した。ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の発酵物又は１×ＰＢＳを加えた後、バイオフィルム除去反応させるために、バイオフィルムのプレートを３２℃で１５分間振盪せずにインキュベートした。インキュベート後、上清又はＰＢＳを除去した。ウェルに残存しているバイオフィルムの量を染色後に定量した。バイオフィルムの染色は、水に溶解した０．１％クリスタルバイオレット２５０μｌを添加することにより行った。プレートを室温で３分間インキュベートした。染色後、２５０μｌの１×ＰＢＳを各ウェルに加え、結合していない染料を除去した。この処理をもう一度繰り返した。洗浄後、２５０μｌの７０％エタノールを各ウェルに加え、室温で５分間インキュベートすることにより色素を遊離させた。マイクロタイタープレートリーダーを用いて５７０ｎｍで色素の強度を測定した。ＯＤの読み取り値を用いて、各処理後に残存しているバイオフィルムの量を定量化した。ＰＢＳで処理したウェルは、バイオフィルム除去率を算出するための基準として使用した。

マラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）が形成したバイオフィルムをヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）株由来の培養物上清（発酵物）で除去した結果を表８に示す。

ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２株由来の無細胞発酵物（上清）を加えることにより、ＰＢＳ培地の対照と比較して、バイオフィルムが５２％低減され、一方、ＡＴＣＣ ９７７３株由来の上清を加えることにより、ＰＢＳ培地の対照と比較して、７３％低減された。この実験から、２種の異なるヤロウィア属菌（Ｙａｒｒｏｗｉａ）株由来の無細胞発酵物の、マラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）バイオフィルムの除去における有効性が示された。

実施例９
ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）発酵物によるマラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成の防止及び低減
先に述べたように、頭皮を含む皮膚表面の微生物叢は、主としてバイオフィルム群落として存在している。実施例８に記載したように、既に形成されている病原性バイオフィルムを除去することが重要であるのと同様に、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム成長を防止及び低減することも、脂漏性皮膚炎の治療のための他の戦略である。本実施例では、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）発酵物がマラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）のバイオフィルム形成を防止する能力を評価した。

Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓａ（マラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ））ＡＴＣＣ ＭＹＡ－４６１２をバイオフィルム成長試験に使用した。実施例６に記載したように、出発培養物として、この菌株を、パーム油２０ｍｌ／Ｌを含むｍＬＮ培地中、ロータリーシェーカーを用いて１００ｒｐｍの速度で３２℃で３日間培養した。典型的なバイオフィルム成長試験においては、溶液９０μｌを含むポリスチレン製９６ウェルプレートのウェルに培養物１０μｌを接種した。この溶液は、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）発酵物を含む又は含まない、パーム油２０ｍｌ／Ｌを含むｍＬＮ培地とした。最終体積を１００μｌとした。パーム油濃度を２０ｍｌ／Ｌとした。

実施例７に記載したように、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２株又はＡＴＣＣ ９７７３株を、ＹＰＤ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｇ／Ｌグルコース）、ＹＰＧ（１０ｇ／Ｌ酵母エキス、２０ｇ／Ｌペプトン、２０ｍｌ／Ｌグリセロール）、パーム油２０ｍｌ／Ｌ含有ｍＬＮ（１０ｇ／Ｌバクトペプトン、２ｇ／Ｌ酵母エキス、８ｇ／Ｌ乾燥ウシ胆汁、１０ｍｌ／Ｌグリセロール、０．５ｇ／Ｌモノステアリン酸グリセロール、５ｍｌ／Ｌ Ｔｗｅｅｎ－６０）、又はオリーブ油２０ｍｌ／Ｌ含有ｍＬＮ中で、初期ＯＤ_６００を０．１として、２５０ｒｐｍで振盪させながら３２℃で５日間増殖させた。ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の細胞培養物を０．２２μｍのフィルタで２回濾過して細胞を除去することにより、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の無細胞培養物上清（無細胞発酵物とも称する）を調製し、－２０℃で保存した。

本実施例においては、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）発酵物をＹＰＤを用いて生成した。低減試験には異なる濃度の発酵物（５、１０、及び２０μｌ）を使用した。対照として、等しい濃度のＹＰＤ培地（５、１０、及び２０μｌ）を使用した。バイオフィルム試験プレートを３２℃で振盪せずに４８時間インキュベートすることにより、マイクロタイタープレートのウェル壁にマラセチア・グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）のバイオフィルムを成長させた。

バイオフィルムが形成された後、増殖培地及び付着していない細胞を除去し、ウェルを１×リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄した。ＰＢＳは、ｐＨ調整されたリン酸緩衝液及び生理食塩水の混合物であり、１×作用濃度に希釈したものは、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、８ｍＭ Ｎａ_２ＨＰＯ_４、及び２ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４を含有している。ウェルに残存しているバイオフィルムの量を、水に溶解した０．１％のクリスタルバイオレット１５０μｌを添加して染色することにより定量した。色素を添加した後、室温で３分間インキュベートした。染色後、１５０μｌの１×ＰＢＳを各ウェルに加え、結合していない染料を除去した。この処理をもう一度繰り返した。洗浄後、１５０μｌの７０％エタノールを各ウェルに加え、室温で５分間インキュベートすることにより色素を遊離させた。マイクロタイタープレートリーダーを用いて５７０ｎｍで色素の強度を測定した。ＯＤの読み取り値を用いて、各処理後に残存しているバイオフィルムの量を定量化した。ＹＰＤ培地対照で処理したウェルは、ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）上清によるバイオフィルム除去率を算出するための基準として使用した。

ヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）株由来の培養物上清（発酵物）を用いた場合のマラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）バイオフィルム形成結果を表９に示す。

ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）株由来の上清５μｌを加えることにより、マラセチア・グロボース（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｇｌｏｂｏｓｅ）によるバイオフィルム形成を約３５％阻害した。上清２０μｌを加えることにより、バイオフィルム形成が８０％を超えて阻害された。この実験は、マラセチア属菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）が関与する状態の治療にヤロウィア属微生物（Ｙａｒｒｏｗｉａ）株由来の上清が強力な効果を示すことを実証するものである。

Claims (27)

1. 有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、頭皮障害の治療に使用するためのスキンケア組成物であって、前記組成物は、前記頭皮障害を軽減及び／又は治療する、スキンケア組成物。
2. 前記頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、請求項１に記載のスキンケア組成物。
3. １種又は複数種のフケ防止活性剤を更に含む、請求項１に記載のスキンケア組成物。
4. 前記組成物は、パルミチン酸、オレイン酸、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、脂質を分解する、請求項１に記載のスキンケア組成物。
5. 前記組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減させる、請求項１に記載のスキンケア組成物。
6. 前記組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、請求項１に記載のスキンケア組成物。
7. 前記組成物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、請求項１に記載のスキンケア組成物。
8. 賦形剤、防腐剤、ｐＨ調整剤からなる群から選択される少なくとも１種の追加の化合物を更に含む、請求項１に記載のスキンケア組成物。
9. ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を含む、請求項１に記載のスキンケア組成物。
10. 請求項１～９のいずれか一項に記載の有効量のスキンケア組成物の、スキンケア製品における使用。
11. 請求項１～９のいずれか一項に記載の有効量のスキンケア組成物と、皮膚科学的又はスキンケア的に許容される１種又は複数種の成分とを含む、スキンケア製品。
12. 前記スキンケア組成物の前記有効量は、前記スキンケア製品の総重量に対して重量基準で少なくとも約１％、２％、３％、４％、最大で５％である、請求項１１に記載のスキンケア製品。
13. それを必要とする対象の頭皮障害を治療するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法。
14. 前記頭皮障害は、頭皮のフケが多い状態（脂漏性皮膚炎）、頭皮環境叢のバランスの乱れ、頭皮の不快感、癜風、乾燥肌、皮膚刺激感、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
15. 前記微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又は代謝物は、局所投与される、請求項１３に記載の方法。
16. それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減するための方法であって、有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物を前記対象に投与することを含む、方法。
17. 前記微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその代謝物は、局所投与される、請求項１６に記載の方法。
18. 前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、単一の組成物に配合される、請求項１６に記載の方法。
19. 前記組成物は、前記対象の皮膚又は頭皮に投与される、請求項１６に記載の方法。
20. 前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０３６２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ９７７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ １８９４２、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＡＴＣＣ ２０１７７、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）ＣＢＳ２０７３、ヤロウィア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）Ｐｈａｆｆ＃５０－４７、又はこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
21. 前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）の増殖を低減する、請求項１６に記載の方法。
22. 前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルムを除去する、請求項１６に記載の方法。
23. 前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、マラセチア属菌種（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）のバイオフィルム形成を防止又は低減する、請求項１６に記載の方法。
24. 前記少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、パルミチン酸、オレイン酸、及びこれらの組合せのいずれか一つからなる群から選択される脂質を分解する、請求項１６に記載の方法。
25. 前記有効量の少なくとも１種のヤロウィア（Ｙａｒｒｏｗｉａ）属の微生物及び／又はその断片及び／又はその細胞溶解物及び／又はその発酵物及び／又はその代謝物は、スキンケア組成物又はスキンケア製品として投与される、請求項１６～２４のいずれか一項に記載の方法。
26. それを必要とする対象の頭皮のフケが多い状態を治療及び／又は軽減する方法であって、請求項１～９のいずれか一項に記載のスキンケア組成物を含むスキンケア製品を前記対象に局所投与することを含む、方法。
27. 前記スキンケア製品は、前記スキンケア組成物を、前記スキンケア製品の総重量に対し、重量基準で少なくとも１％、２％、３％、４％、最大で５％含む、ローション、セラム、ゼリー、クリーム、ゲル、エマルション、固形化粧料、マスク、パッチ、及びスティックからなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。