JP2023507446A

JP2023507446A - 酵素による糖エステルおよび／または糖アルコールエステルの製造方法

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Publication number: JP2023507446A
Application number: JP2022537633A
Authority: JP
Inventors: マリアンフォンホーフヤン; ユリアンリービッヒシュテファン; ヘニングヴェンクハンス; フリーデリケエックシュタインマリット; カラコクスナイ; ヤヴォルスキーマキシム
Original assignee: Evonik Operations GmbH
Current assignee: Evonik Operations GmbH
Priority date: 2019-12-20
Filing date: 2020-12-17
Publication date: 2023-02-22
Also published as: CN114787368A; WO2021122972A1; WO2021122973A1; BR112022011988A2; EP3839052A1; JP2023507448A; BR112022011457A2; CN114829617A; US20230023141A1; BR112022011453A2; EP4077698A1; JP2023507450A; CN114787118A; EP4077697A1; WO2021122971A1; EP4077696A1; US20230033620A1; US20230055814A1

Abstract

本発明の主題は、酵素による糖エステルおよび／または糖アルコールエステルの製造方法、ならびに糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを含む混合組成物である。

Description

先行技術
糖および糖アルコールの脂肪酸エステルは、界面活性特性を有し、その天然原料ベースおよび持続可能性ゆえに、特に食品分野および化粧品産業における用途に適している。

糖または糖アルコールの脂肪酸エステルは、従来、ピリジンの存在下で糖または糖アルコールを脂肪酸塩化物と反応させることにより合成される（Surfactants, K. Kosswig in Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry, Online, Wiley-VCH, Weinheim, 2000, https://doi.org/10.1002/14356007.a25_747）。しかし、先行技術に記載されたこのプロセスの欠点は、食品または化粧品分野における用途ではそのような溶媒の使用が許容されないこと、さらに相応する溶媒除去には、晶析、ろ過または蒸留などの追加のプロセスステップが必要であることである。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、脂肪酸塩化物を使用する場合にはＨＣｌの定量的な遊離であり、それというのも、ＨＣｌは反応器の金属表面の腐食を招きかねないためである。

特に工業規模で使用される先行技術の代替的なプロセスでは、例えば水酸化ナトリウムなどの塩基性触媒の存在下で、溶媒の非存在下で２００～２５０℃の温度で糖または糖アルコールを遊離脂肪酸または脂肪酸アルキルエステルと反応させる（Roempp, Georg Thieme Verlag KG, 2019 索引語“Sorbitans” und Surfactants, K. Kosswig in Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry, Online, Wiley-VCH, Weinheim, 2000, https://doi.org/10.1002/14356007.a25_747）。しかし、先行技術に記載されたこのプロセスの欠点は、例えばソルビトールを前述の条件下で反応させる際に、副反応として糖または糖アルコールの脱水が起こることである。この副反応は、すでに約１４０℃からでも酸性触媒の存在下で起こる。例えば、ソルビトールは、まず（水分子の損失により）脱水されてソルビタンとなり、さらに（さらなる水分子の損失により）脱水されてイソソルビドとなる。使用される糖または糖アルコールは、このようにして親水性を失い、したがって界面活性剤の親水性頭部基としてはますます適さなくなる。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、生じる副反応が、得られる生成物の暗い色調を招くことであり、これは、得られた生成物を例えば化粧品配合物で使用できるようにするために、例えば過酸化水素や活性炭などの漂白剤によるさらなる処理を必要とする場合がある。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、発生する副反応によって、得られた生成物において劣悪な匂いが生じ、これが化粧品配合物に用いられる香料と好ましくない相互作用を生じ得ることである。

例えば２－メチル－２－ブタノール、ピリジン、ジメチルホルムアミドまたは２－ピロリドンなどの有機溶媒の希薄溶液中での、酵素触媒による糖または糖アルコールの脂肪酸エステルの製造が記載されている（A. Ducret, A. Giroux, M. Trani, and R. Lortie, Characterization of enzymatically prepared biosurfactants, J. Am. Oil Chem. Soc. 1996, 73, 109-113, doi: 10.1007/BF02523456; M. Therisod, A. M. Klibanov, Facile enzymatic preparation of monoacylated sugars in pyridine, J. Am. Chem. Soc., 1986, 108 (18), pp 5638-5640; J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1989,0, 1057-1061,10.1039/P19890001057; A. E. M. Janssen, C. Klabbers, M. C. R. Franssen, K. van’t Riet, Enzymatic synthesis of carbohydrate esters in 2-pyrrolidone, Enzyme and Microbial Technology, 1991, 13 (7), 565-572）。しかし、先行技術に記載されたこれらのプロセスの欠点は、食品または化粧品分野における用途ではそのような溶媒の使用が許容されないこと、さらに相応する溶媒除去には、晶析、ろ過または蒸留などの大量のエネルギーを消費する追加のプロセスステップが必要であることである。

酵素の希薄水溶液を用いた酵素による糖または糖アルコールの脂肪酸エステルの合成は、A. E. M. Janssen, A. G. Lefferts, K. van’t Riet, Enzymatic synthesis of carbohydrate esters in aqueous media, Biotechnology Letters 1990, 12 (10), 711-716, DOI https://doi.org/10.1007/BF01024726; H. Seino, T. Uchibori, T. Nishitani, et al., Enzymatic synthesis of carbohydrate esters of fatty acid (I) esterification of sucrose, glucose, fructose and sorbitol, J. Am. Oil Chem. Soc. 1984, 61 1761-1765, https://doi.org/10.1007/BF02582144、および国際公開第９４１２６５１号に記載されている。先行技術に記載されたこのプロセスの欠点は、晶析、ろ過または蒸留などの水性系から生成物を単離するために追加的に必要とされるエネルギーのかかるプロセスステップ、および緩衝水性系の場合にはさらに塩負荷の除去である。ここでのさらなる欠点は、アシル供与体として脂肪酸を使用する場合の水の存在が、生成物側への平衡位置のシフトを阻害することである。さらなる欠点は、酵素は通常、特定の水分活性で性能の最大値を示すことである。

T. Itoh, Ionic Liquids as Tool to Improve Enzymatic Organic Synthesis, Chemical Reviews 2017, 117, 10567-10607には、イオン液体を溶媒とする、酵素触媒による糖または糖アルコールの脂肪酸エステルの製造が開示されている。しかし、先行技術に記載されたこれらのプロセスの欠点は、イオン液体は食品分野または化粧品産業における下流用途のために生成物に残ることができないため、イオン液体を除去するために、例えば晶析、ろ過または蒸留などの少なくとも１つの追加のエネルギー集約的なプロセスステップが必要であることである。先行技術に記載されたこれらのプロセスのさらなる欠点は、イオン液体が石油化学原料から製造され、それゆえ、それらの使用が食品分野または化粧品産業における天然で持続可能な用途にとって望ましくないことである。先行技術に記載されたプロセスのさらなる欠点は、アシル供与体としての脂肪酸ビニルエステルの使用であり、なぜならば、これらは、反応中に毒性学的に懸念のあるアセトアルデヒドを放出し、これが工業規模での取扱いを複雑にし、さらに食品分野または化粧品産業における用途に望ましくないためである。さらに、脂肪酸ビニルエステルは、例えば、水銀、カドミウム、パラジウムまたは銀塩などの毒性学的に懸念のある金属触媒の存在下で、例えばアセチレンまたはエチレンなどの石油化学原料から製造され（G. Roscher, Vinyl Esters in Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry, Online, Wiley-VCH, Weinheim, 2012, DOI: 10.1002/14356007.a27_419）、これにより、これらの原料を食品分野または化粧品産業における天然で持続可能な用途で使用することができなくなる。

深共晶混合物を形成するための塩化コリン（または他のアンモニウム塩またはホスホニウム塩）の存在下での酵素触媒による糖または糖アルコールの脂肪酸エステルの製造も記載されている（S. Siebenhaller, C. Muhle-Goll, B. Luy, F. Kirschhoefer, G. Brenner-Weiss, E. Hiller, et al., Sustainable enzymatic synthesis of glycolipids in a deep eutectic solvent system, J. Mol. Catal. B Enzym. 2016, 133, 281-287, doi: 10.1016/j.molcatb.2017.01.015）。しかし、先行技術に記載されたこのプロセスの欠点は、塩化コリンまたは他のアンモニウム塩もしくはホスホニウム塩が生成物中に残存する場合、その塩特性ゆえに、糖または糖アルコールの脂肪酸エステルの使用プロファイルに悪影響を与えかねないことである。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、工業的に利用可能な品質の塩化コリンは石油化学原料であるため、生成物におけるその存在は、食品分野または化粧品産業における天然で持続可能な用途には望ましくないことである。したがって、先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、塩化コリンまたは他のアンモニウム塩もしくはホスホニウム塩を除去するために、例えば晶析、ろ過または蒸留などの少なくとも１つの追加のプロセスステップが必要であることである。

ハチミツまたはアガベシロップ中に含まれる個々の糖の、アシル供与体としての脂肪酸ビニルエステルを用いた酵素触媒によるエステル化は、S. Siebenhaller, J. Gentes, A. Infantes, C. Muhle-Goll, F. Kirschhoefer, G. Brenner-Weiss, K. Ochsenreither, C. Syldatk, Lipase-Catalyzed Synthesis of Sugar Esters in Honey and Agave Syrup, Front. Chem. 2018, 6, Artikel 24, 1-9, doi: 10.3389/fchem.2018.00024）に記載されている。先行技術に記載されたこのプロセスの欠点は、アシル供与体としての脂肪酸ビニルエステルの使用であり、なぜならば、これらは、反応中に毒性学的に懸念のあるアセトアルデヒドを放出し、これが工業規模での取扱いを複雑にし、さらに食品分野または化粧品産業における用途に望ましくないためである。さらに、脂肪酸ビニルエステルは、例えば、水銀、カドミウム、パラジウムまたは銀塩などの毒性学的に懸念のある金属触媒の存在下で、例えばアセチレンまたはエチレンなどの石油化学原料から製造され（G. Roscher, Vinyl Esters in Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry, Online, Wiley-VCH, Weinheim, 2012, DOI: 10.1002/14356007.a27_419）、これにより、これらの原料を食品分野または化粧品産業における天然で持続可能な用途で使用することができなくなる。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、糖および糖アルコールの総量に対して、アシル供与体を最高でせいぜい０．０６６当量しか使用しないことである。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、大過剰の糖および糖アルコールが使用されることから、糖および糖アルコールの脂肪酸エステルの単離のために、例えば抽出、晶析、ろ過または蒸留などの少なくとも１つのさらなる追加のプロセスステップを必要とすることである。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、使用される大過剰の糖および糖アルコールが工業的規模では不経済であり、さらに使用される糖および糖アルコールの煩雑な再循環を必要とすることである。先行技術に記載されたこのプロセスのさらなる欠点は、基質としてハチミツを使用する場合にはグルコースエステルのみが検出され、基質としてアガベシロップを使用する場合にはフルクトースエステルのみが検出され、すなわちそれぞれ、ハチミツまたはアガベシロップ中に含まれる糖成分のうち１つしか実際にはエステル化されないことである。

特開昭５８－１１６６８８号公報には、酵素触媒による多糖類ならびに／または単糖類およびオリゴ糖の混合物のエステル化が開示されており、したがって、オリゴ糖あるいは多糖類が常に含まれている。反応は、溶媒としての水またはヘキサン中で実施され、比較例では、溶媒なしまたは少量の溶媒ではほとんど転化が達成できないことが示されている。

韓国特許第２０１８０００７１２９号明細書には、酵素を用いたサッカロースのエステル化による、サッカロースエステル、フルクトースエステルおよびグルコースエステルの混合物の製造方法が開示されている。このプロセスは、使用されるラウリン酸が溶解した形で存在する程度に水で希釈された溶液中で実施される。水性でかつ酸性の条件により、サッカロースは反応の過程で対応する単糖に分解され、エステル化される。アシル基は、得られるエステル化糖に対して常に過少量で使用されるため、生成物は常に未反応の糖を含む。得られるエステルの大部分を占めるのは常に、サッカロースエステルである。この先行技術のプロセスのさらなる欠点は、得られる異なる糖エステルの比率を予測または制御することができないことである。

本発明の課題は、先行技術のプロセスの少なくとも１つの欠点を克服することができる、糖部分あるいは糖アルコール部分に特に４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含む糖エステルおよび／または糖アルコールエステルの製造方法を提供することであった。特に、糖エステルおよび／または糖アルコールエステルは、４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を有する良好に入手可能な糖あるいは糖アルコールにより表すことができる。

発明の詳細な説明
驚くべきことに、以下に記載する方法により本発明の課題を解決できることが判明した。

本発明の主題は、糖部分あるいは糖アルコール部分に特に４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含む糖エステルおよび／または糖アルコールエステルから選択される少なくとも２つを含む混合組成物を酵素により製造する方法であって、
Ｂ）糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物と、少なくとも１つのアシル基供与体、好ましくは脂肪酸アシル基供与体、特に脂肪酸エステルおよび脂肪酸から選択される脂肪酸アシル基供与体、特に好ましくは脂肪酸とをリパーゼの存在下で反応させるプロセスステップであって、糖および糖アルコールは、特に４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含むものとするプロセスステップを含む、方法である。

本発明のさらなる主題は、糖部分あるいは糖アルコール部分に特に４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含む特定の糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを含む混合組成物である。

本発明の利点は、本発明による方法を溶媒の非存在下で実施できることである。

さらに本発明の利点は、本発明による方法を、天然で持続可能な合成成分を使用して実施できることである。

本発明のさらなる利点は、本発明による糖エステルおよび／または糖アルコールエステルが均質な反応混合物で得られ、エステル化度が低くてもこの特性が得られることである。

本発明のさらなる利点は、本発明による糖エステルおよび／または糖アルコールエステルが、優れた色特性を有することである。

本発明のさらなる利点は、本発明による糖エステルおよび／または糖アルコールエステルが匂いをわずかしか有しておらず、特にカラメル特有の匂いがほとんど感じられないことである。

本発明の利点は、基質を混合物中でうまく転化させることができるが、一方で、溶媒の非存在下でのその単独の転化は成功しないことである。

本発明のさらなる利点は、例えばソルビトールからのソルビタンのように、使用される糖／糖アルコールから、水の除去によって望ましくない副生成物が形成されないことである。

本発明のさらなる利点は、得られた糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを、配合物、特に化粧品配合物に非常に容易に組み込めることである。

本発明のさらなる利点は、得られた糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを用いて、穏やかな配合物を製造できることである。

本発明のさらなる利点は、得られた糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを用いて、特に良好な皮膚感触を有する配合物を製造できることである。

本発明のさらなる利点は、得られた糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを用いて、石油化学成分を含まない持続可能な配合物を製造できることである。

本発明のさらなる利点は、得られた糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを、ＨＣｌまたはアセトアルデヒドの定量的な遊離なしに製造できることである。

本発明のさらなる利点は、反応バッチの良好な混和性ゆえに反応を気泡塔で実施することができ、その結果、より長い触媒寿命を達成できることである。

本発明のさらなる利点は、糖および／または糖アルコールの総物質量に対して多量のアシル供与体を使用できることである。

本発明のさらなる利点は、使用される糖および糖アルコールのエステルが均質な反応混合物で得られるため、例えば抽出、晶析、ろ過または蒸留などの追加のプロセスステップが不要であることである。

本発明のさらなる利点は、反応中に、使用される糖成分および糖アルコール成分のうち２つ以上がエステル化されることである。

本発明のさらなる利点は、比較的低いエステル化度で反応させた場合に、均質な溶融物が得られることである。

本発明の主題は、糖部分あるいは糖アルコール部分に特に４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含む糖エステルおよび／または糖アルコールエステルから選択される少なくとも２つを含む混合組成物を酵素により製造する方法であって、
Ｂ）糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物と、少なくとも１つのアシル基供与体、好ましくは脂肪酸アシル基供与体、特に脂肪酸エステルおよび脂肪酸から選択される脂肪酸アシル基供与体、特に好ましくは脂肪酸とをリパーゼの存在下で反応させるプロセスステップを含む、方法である。

本発明における「糖エステルおよび／または糖アルコールエステルから選択される２つ」という用語は、２つのエステルが、その糖あるいはその糖アルコールの点で異なることを意味すると理解されるべきである。したがって、糖残基および／または糖アルコール残基の点で異なる２つの残基を有するエステルが含まれていなければならない。

特に断らない限り、示されたすべてのパーセンテージ（％）は、重量パーセンテージである。

本発明によれば、例えば、アガロース、アミロペクチン、アミロース、セルロース、キチン、シクロデキストリン、デキストラン、フルクタン、グリコーゲン、ヒアルロン酸、イヌリン、イソメリシトース、マルトヘキソース、マルトペントース、マルトテトロース、マルトトリオース、メリジトース、ペクチン、ラフィノース、スタキオース、デンプン、デンプン加水分解物、ウンベリフェロース、セロビオース、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、ラクツロース、マルチトール、マルトース、マルツロース、スクロース、トレハロース、トレハルロース、アリトール、アルロース、アルトリトール、アラビニトール、アラビノース、デオキシリボース、エリスリトール、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、イジトール、マンニトール、マンノース、ラムノース、リビトール、リボース、ソルビトール、ソルボース、スレイトール、キシリトールおよびキシロースといったすべての糖および糖アルコールを使用することができる。

好ましくは、本発明によれば、糖および糖アルコールは、４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含む糖および糖アルコールの群から選択される。

好ましくは、本発明によれば、４～１２個の炭素原子を含む糖および糖アルコールの群からの糖および糖アルコールは、
セロビオース、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、ラクツロース、マルチトール、マルトース、マルツロース、サッカロース、トレハロース、トレハルロース、アリトール、アルロース、アルトリトール、アラビニトール、アラビノース、デオキシリボース、エリスリトール、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、イジトール、マンニトール、マンノース、ラムノース、リビトール、リボース、ソルビトール、ソルボース、スレイトール、キシリトールおよびキシロースから選択され、ここで、アリトール、アルロース、アルトリトール、アラビニトール、アラビノース、セロビオース、デオキシリボース、エリスリトール、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、イジトール、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、ラクツロース、マルチトール、マルトース、マルツロース、マンニトール、マンノース、ラムノース、リビトール、リボース、ソルビトール、ソルボース、スレイトール、トレハルロース、キシリトールおよびキシロースが特に好ましく、エリスリトール、フルクトース、グルコース、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、マルチトール、マルトース、マルツロース、マンニトール、ソルビトール、ソルボース、キシリトールおよびキシロースが非常に特に好ましい。

好ましくは、本発明によれば、４～６個の炭素原子を含む糖および糖アルコールの群の糖および糖アルコールは、アリトール、アルロース、アルトリトール、アラビニトール、アラビノース、デオキシリボース、エリスリトール、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、イジトール、マンニトール、マンノース、ラムノース、リビトール、リボース、ソルビトール、ソルボース、スレイトール、キシリトールおよびキシロースから選択され、ここで、エリスリトール、フルクトース、グルコース、ソルビトール、キシリトールおよびキシロースが特に好ましい。

特に好ましくは、本発明によれば、糖および糖アルコールは、群から選択される。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物として、以下のものを含む混合物は除外されることを特徴とする：
グルコース、フルクトースおよびマルトースであって、混合物中に含まれるすべての糖および糖アルコールに対してそれぞれ４０重量％～５０重量％のグルコース含有量および４７重量％～５７重量％のフルクトース含有量を有するもの、ならびに
グルコース、フルクトースおよびサッカロースであって、混合物中に含まれるすべての糖および糖アルコールに対してそれぞれ５重量％～２４重量％のグルコース含有量および７５重量％～９４重量％のフルクトース含有量を有するもの。

本発明によれば、任意のアシル基供与体を使用することができる。これらは、例えば、カルボン酸エステルまたはカルボン酸自体、およびそれらの混合物である。好ましくは、本発明によれば、アシル基供与体として使用されるカルボン酸エステルは、最大６個の炭素原子を有するアルカノールおよびポリオールをベースとするエステル、特に好ましくは最大３個の炭素原子を有するアルカノールおよびポリオールをベースとするエステル、非常に特に好ましくはグリセロールエステルから選択される。特に好ましくは、本発明によれば、アシル基供与体として使用されるカルボン酸エステルは、トリグリセリド、特に天然の脂肪および油から選択され、特に好ましくは、ヤシ油、パーム核油、オリーブ油、パーム油、アルガン油、ヒマシ油、亜麻仁油、ババス油、菜種油、藻類油、ゴマ油、大豆油、アボカド油、ホホバ油、サフラワー油、アーモンド油、綿実油、シアバター、ヒマワリ油、クプアスバター、および多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡＳ）の高い割合を有する油を含む群から選択され、特に好ましくはこれらからなる群から選択される。特に後述するアシル基を含むソルビタンエステル、モノグリセリドおよびジグリセリドも同様に好ましく使用することができる。

好ましくは、本発明によれば、アシル基供与体は、特に天然脂肪酸のアシル基の群から選択されるアシル基を提供する脂肪酸アシル基供与体から選択される。天然脂肪酸は、天然に存在する植物油または動物油をベースに製造することができ、好ましくは６～３０個の炭素原子、特に８～２２個の炭素原子を有する。天然脂肪酸は一般に非分岐であり、通常は偶数個の炭素原子からなる。任意の二重結合は、シス配置を有する。例としては、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ペラルゴン酸（オレイン酸のオゾン分解から得られる）、イソステアリン酸、ステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸、ジヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸（リシノール酸の熱分解から得られる）、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ペトロセリン酸、エライジン酸、アラキン酸、ベヘン酸、エルカ酸、ガドレイン酸、リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸およびアラキドン酸が挙げられる。

好ましくは、本発明によれば、アシル基供与体として、カルボン酸、特に脂肪酸が使用され、特に好ましくは、具体的に前述された脂肪酸が使用される。

好ましくは、本発明によれば、アシル基供与体としてのビニルエステルは、これらが反応中に毒性学的に懸念のあるアセトアルデヒドを放出し、これが工業規模での取扱いを複雑にし、さらに食品分野または化粧品産業における用途に望ましくないことから除外されている。さらに、脂肪酸ビニルエステルは、例えば、水銀、カドミウム、パラジウムまたは銀塩などの毒性学的に懸念のある金属触媒の存在下で、例えばアセチレンまたはエチレンなどの石油化学原料から製造され（G. Roscher, Vinyl Esters in Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry, Online, Wiley-VCH, Weinheim, 2012, DOI: 10.1002/14356007.a27_419）、これにより、これらの原料を食品分野または化粧品産業における天然で持続可能な用途で使用することができなくなる。

特に、本発明によれば好ましくは、糖および糖アルコールは、エリスリトール、フルクトース、グルコース、ソルビトール、キシリトールおよびキシロースから選択され、アシル基供与体は、カプロン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシレン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、イソステアリン酸、ステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸、ジヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ペトロセリン酸、エライジン酸、アラキン酸、ベヘン酸、エルカ酸、ガドレイン酸、リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸およびアラキドン酸の群からの少なくとも１つから選択される。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物は、コリン塩、アンモニウム塩およびホスホニウム塩からなる群から選択される物質を、２重量％未満、好ましくは１重量％未満、特に好ましくは０．１重量％未満の量で含み、特にこれらの物質のいずれも含まず、ここで、重量パーセンテージは、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物中のステップＢ）におけるすべての糖および糖アルコールに対するものである。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において、すべての糖および糖アルコール対すべてのアシル基供与体中に含まれるアシル基のモル比が、１．００：０．０８～１．００：１０．００、好ましくは１．００：０．５０～１．００：７．００、特に好ましくは１．００：１．２５～１．００：２．２５、あるいは特に好ましくは１．００：２．００～１．００：４．５０の範囲にあることを特徴とする。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において、すべての糖および糖アルコール中のすべての第一級ヒドロキシル基対すべてのアシル基供与体中に含まれるアシル基のモル比が、１．００：０．１０～１．００：３．００、特に好ましくは１．００：１．２５～１．００：２．２５の範囲にあることを特徴とする。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において、４～６個の炭素原子を有する糖および／または糖アルコールを含む混合物が使用され、４～６個の炭素原子を有するすべての糖および糖アルコール中のすべての第一級ヒドロキシル基対すべてのアシル基供与体中に含まれるアシル基のモル比が、１．００：０．２０～１．００：１．５の範囲にあることが特徴である。

本発明により好ましく使用されるリパーゼは、固体担体上に固定化されている。プロセスステップＢ）において本発明により好ましく使用されるリパーゼは、サーモミセス・ラヌギノサス（Thermomyces lanuginosus）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｏ５９９５２）、カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）由来のリパーゼＡおよびＢ（アクセッション番号Ｐ４１３６５）、ムコール・ミイヘイ（Mucor miehei）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ１９５１５）、フミコラｓｐ．（Humicola sp.）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｏ５９９５２）、リゾムコール・ジャバニカス（Rhizomucor javanicus）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｓ３２４９２）、リゾプス・オリゼ（Rhizopus oryzae）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ６１８７２）、カンジダ・ルゴサ（Candida rugosa）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ２０２６１、Ｐ３２９４６、Ｐ３２９４７、Ｐ３２９４およびＰ３２９４９）、リゾプス・ニベウス（Rhizopus niveus）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ６１８７１）、ペニシリウム・カメンベルティ（Penicillium camemberti）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ２５２３４）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）由来のリパーゼ（ＡＢＧ７３６１３、ＡＢＧ７３６１４およびＡＢＧ３７９０６）およびペニシリウム・シクロピウム（Penicillium cyclopium）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ６１８６９）、ならびにそれぞれそれらのアミノ酸レベルで少なくとも６０％、好ましくは少なくとも８０％、好ましくは少なくとも９０％、特に好ましくは少なくとも９５％、９８％または９９％の相同性を有するものを含む群から選択されるリパーゼである。

アミノ酸レベルで相同である酵素は、本発明において定義されるラウリン酸プロピル単位で、好ましくは参照配列と比較して少なくとも５０％、特に少なくとも９０％の酵素活性を有する。

市販の例、および本発明による方法において同様に好ましく使用されるカルボン酸エステルヒドロラーゼは、市販品のＬｉｐｏｚｙｍｅＴＬＩＭ、Ｎｏｖｏｚｙｍ４３５、ＬｉｐｏｚｙｍｅＩＭ２０、ＬｉｐａｓｅＳＰ３８２、ＬｉｐａｓｅＳＰ５２５、ＬｉｐａｓｅＳＰ５２３、（いずれもＮｏｖｏｚｙｍｅｓＡ／Ｓ社、バウスヴェア、デンマークの市販品）、ＣｈｉｒａｚｙｍｅＬ２、ＣｈｉｒａｚｙｍｅＬ５、ＣｈｉｒａｚｙｍｅＬ８、ＣｈｉｒａｚｙｍｅＬ９（いずれもＲｏｃｈｅＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ社、マンハイム、ドイツの市販品）、Ｐｕｒｏｌｉｔｅ社のＣＡＬＢＩｍｍｏＰｌｕｓＴＭ、およびリパーゼＭ「アマノ」、リパーゼＦ－ＡＰ１５「アマノ」、リパーゼＡＹ「アマノ」、リパーゼＮ「アマノ」、リパーゼＲ「アマノ」、リパーゼＡ「アマノ」、リパーゼＤ「アマノ」、リパーゼＧ「アマノ」（いずれもアマノ社、日本の市販品）であった。

本発明における「アミノ酸レベルでの相同性」は、「アミノ酸の同一性」を意味すると理解され、これは公知の方法により決定することができる。一般に、特定の要件を考慮したアルゴリズムを有する特定のコンピュータプログラムが使用される。同一性を決定するための好ましい方法ではまず、比較すべき配列間の最大のアラインメントが生成される。同一性を決定するためのコンピュータプログラムには、これらに限定されるわけではないが、以下のものを含むＧＣＧプログラムパッケージが含まれる：
－ＧＡＰ（Deveroy, J. et al., Nucleic Acid Research 12 (1984), p.387, Genetics Computer Group University of Wisconsin, Medicine (WI)、および
－ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮおよびＦＡＳＴＡ（Altschul, S. et al., Journal of Molecular Biology 215 (1990), p.403-410。ＢＬＡＳＴプログラムは、National Center For Biotechnology Information (NCBI)および他の情報源（BLAST Handbook, Altschul S. et al., NCBI NLM NIH Bethesda ND 22894; Altschul S. et al., 上記）から入手することができる。

当業者は、２つのヌクレオチド配列またはアミノ酸配列間の類似性または同一性の計算のために様々なコンピュータプログラムが利用可能であることを認識している。例えば、２つのアミノ酸配列間の同一性のパーセンテージは、例えば、NeedlemanおよびWunsch（J. Mol. Biol.(48).444-453 (1970)）によるアルゴリズムにより決定でき、これはＧＣＧソフトウェアパッケージ（http://www.gcg.comで入手可能）のＧＡＰプログラムに統合されており、Ｂｌｏｓｓｏｍ６２行列またはＰＡＭ２５０行列、１６、１４、１２、１０、８、６または４のギャップ重み、および１、２、３、４、５または６の長さの重みを用いる。当業者であれば、異なるパラメータを使用することにより若干異なる結果が得られるが、全体として２つのアミノ酸配列間の同一性パーセンテージが大きく異なることはないことを認識するであろう。Ｂｌｏｓｓｏｍ６２行列は、通常、デフォルト設定（ギャップ重み：１２、長さ重み：１）を適用して使用される。

本発明では、上記アルゴリズムによる同一性が６０％であることは、６０％の相同性を意味する。より高い同一性についても同様である。

好ましくは、本発明によれば、プロセスステップＢ）は、２０℃～１６０℃、好ましくは３５℃～１３０℃、特に５０℃～１１０℃の範囲の反応温度で実施される。

好ましくは、本発明によれば、プロセスステップＢ）は、１バール未満、好ましくは０．５バール未満、特に好ましくは０．０５バール未満の圧力で実施される。

あるいは好ましくは、本発明によれば、プロセスステップＢ）は、反応バッチに少なくとも１つの不活性ガスが通される気泡塔反応器において実施され、このガスは、好ましくは、窒素およびアルゴンを含む群から選択され、好ましくは窒素およびアルゴンからなる群から選択される。この文脈において、本発明によれば、ガス流が１～６０ｋｇ／ｈ、好ましくは５～２５ｋｇ／ｈ、さらにより好ましくは１０～１４ｋｇ／ｈであることが好ましい。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物とアシル基供与体との合計が、反応バッチ全体の少なくとも１０重量％、好ましくは少なくとも８６重量％、特に好ましくは少なくとも９０重量％を占めることを特徴とする。それに応じて、出発物質の上記の高い重量割合は、例えば水やヘキサンのような溶媒の存在のための余地をほとんど残さない。

本発明により好ましい方法は、本方法において、溶媒、特に水またはヘキサンが、最大で５重量％、好ましくは最大で２重量％の量で添加され、特に好ましくは全く添加されないことを特徴とし、ここで、重量パーセンテージは、反応バッチ全体に対するものである。

本発明により好ましい方法は、プロセスステップＢ）において形成される副生成物、例えば、使用されるアシル基供与体が酸である場合には水、使用されるアシル基供与体がエステルである場合には対応するアルコールが、除去されることを特徴とする。これは、例えば蒸留によって可能である。

好ましくは、本発明によれば、本発明による方法は、プロセスステップＡ）、すなわち、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを、固体形態または水に溶解した形態で互いに空間的に別々に提供してそれらを混合することで、プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物を得るプロセスステップを含む。ここで、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物とアシル基供与体との合計が、反応バッチ全体の少なくとも１０重量％、好ましくは少なくとも８６重量％、特に好ましくは少なくとも９０重量％に達するように、水の除去によって、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物とアシル基供与体とを濃縮することが特に好ましい場合がある。

この文脈において、プロセスステップＡ）が、プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物の含水量を１７重量％未満、好ましくは１４重量％未満、特に好ましくは１０重量％未満に低減することを含むことが特に好ましく、ここで、重量パーセンテージは、プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物の全体に対するものである。

好ましくは、本発明によれば、本発明による方法は、リパーゼを分離するプロセスステップＣ）を含む。

同様に好ましくは、本発明によれば、本発明による方法は、プロセスステップＤ）、すなわち、糖エステルおよび／または糖アルコールエステルから選択される少なくとも２つを含む混合組成物を、０．１μ～１２５０μ、好ましくは０．５μ～１００μの目開きを有するフィルター、特にバッグフィルターに通してろ過するプロセスステップを含む。

好ましくは、本発明によれば、プロセスステップＤ）は、２０℃～１５０℃、特に４０℃～１２０℃の温度範囲で実施される。

好ましくは、本発明によれば、プロセスステップＤ）は、１バール～２５バール、特に１．５バール～１０バールの圧力範囲で実施される。

好ましくは、本発明によれば、本発明による方法は、任意にプロセスステップＣ）およびＤ）以外にさらなる精製ステップを含まない。

本発明のさらなる主題は、本発明による方法によって得られる、糖部分あるいは糖アルコール部分に特に４～１２個、好ましくは４～６個の炭素原子を含む糖エステルおよび糖アルコールエステルから選択される少なくとも２つを含む混合組成物である。

さらに本発明の主題は、糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを含む混合組成物であって、糖エステルおよび／または糖アルコールエステルの糖および／または糖アルコール残基が、アリトール、アルロース、アルトリトール、アラビニトール、アラビノース、セロビオース、デオキシリボース、エリスリトール、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、イジトール、イジトール、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、ラクツロース、マルチトール、マルトース、マルツロース、マンニトール、マンノース、ラムノース、リビトール、リボース、サッカロース、ソルビトール、ソルボース、スレイトール、トレハロース、トレハルロース、キシリトールおよびキシロース、好ましくは、エリスリトール、フルクトース、グルコース、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、マルチトール、マルトース、マルツロース、マンニトール、サッカロース、ソルビトール、ソルボース、キシリトールおよびキシロース、特に好ましくは、エリスリトール、フルクトース、グルコース、ソルビトール、キシリトールおよびキシロースの残基の群から選択される少なくとも２つの糖および／または糖アルコール残基から選択され、エステル残基は、脂肪酸、好ましくは、カプロン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシレン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、イソステアリン酸、ステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸、ジヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ペトロセリン酸、エライジン酸、アラキン酸、ベヘン酸、エルカ酸、ガドレイン酸、リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸およびアラキドン酸の酸残基の群の少なくとも１つのアシル基から選択されることを特徴とする混合組成物である。

本発明により好ましい混合組成物は、糖部分あるいは糖アルコール部分に、好ましくは４～６個の炭素原子を含む。

本発明により好ましい混合組成物は、糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを少なくとも５０重量％、好ましくは少なくとも８０重量％、特に好ましくは少なくとも９５重量％の量で含み、ここで、重量パーセンテージは、混合組成物全体に対するものである。

本発明により好ましい混合組成物は、含まれる糖エステルおよび／または糖アルコールエステルが、１．００以上、特に１．００～７．００、特に好ましくは１．２５～２．２５、あるいは特に好ましくは２．００～４．５０のエステル化度を有することを特徴とする。

以下に示す実施例は、本発明を例示的に説明するものであり、本明細書および特許請求の範囲の全体から適用範囲が明らかである本発明を、実施例で挙げた実施形態に限定する意図は全くない。

実施例：
酸価の測定方法
酸価の好適な測定方法は、特にＤＧＦＣ－Ｖ２、ＤＩＮＥＮＩＳＯ２１１４、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．５．１、ＩＳＯ３６８２およびＡＳＴＭＤ９７４に準拠した方法である。

使用される酵素の比活性のＰＬＵでの測定方法：
ＰＬＵ（ラウリン酸プロピル単位）での酵素活性を調べるために、１－プロパノールとラウリン酸とを等モル比で６０℃にて均一に混合する。酵素を加えて反応を開始させ、時間を計って反応させる。反応混合物から一定時間ごとにサンプルを採取し、反応したラウリン酸の含有量を水酸化カリウム溶液による滴定で測定する。ＰＬＵでの酵素活性は、当該酵素１ｇが６０℃で１分間に１マイクロモルのラウリン酸プロピルを合成する速度から求められる、これに関しては、米国特許出願公開第２００７００８７４１８号明細書、特に［０１８５］も参照されたい。

色数の決定方法
アリコート（約１０ｇ；キュベットが十分に満たされるように）を、Ｌｉｃｏ６９０分光測色計において１１ｍｍ丸型キュベットにて９０℃で測定し、それぞれ示された色数を記録した。

例１：キシリトールと２．００ｅｑ．のカプリル酸との酵素によるエステル化（本発明によらない）
キシリトール（６０．０ｇ、０．３９４モル、１．００ｅｑ．）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１１３．７０ｇ、０．７８８モル、２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して８０℃に加熱し、１時間後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．２１ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、４５１１０ＰＬＵに相当）を添加した。この混合物を８０℃、１５ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、無色であり、１．８ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例２：フルクトースと２．００ｅｑ．のカプリル酸との酵素によるエステル化（本発明によらない）
フルクトース（８３．３１ｇ、０．４６２モル、１．００ｅｑ．）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１３３．３６ｇ、０．９２５モル、２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して８０℃に加熱し、３０分後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（６．５０ｇ；ＦｅｒｍｅｎｔａＢＩＯＣＡＴＡＬＹＳＴＣＡＬＢ_ＴＡ１００００ＮＬＴ９５％、６３７８８ＰＬＵに相当）を添加した。この混合物を８０℃、２０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で不均質であり、赤色を呈し、約１４０．５ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた（不均質であるため、酸価の一義的な測定は不可能であった）。

例３：例１および例２の物理的混合物（本発明によらない）
例１に記載のとおりに得られたエステル（４２．００ｇ）と、例２に記載のとおりに得られたエステル（１８．００ｇ）との混合物を、撹拌しながらＮ_２を通して１時間かけて８０℃に加熱した。得られた生成物は、溶融物中で不均質で、濁っており、橙色を呈し、約４０ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた（不均質であるため、酸価の一義的な測定は不可能であった）。

例４：キシリトールとフルクトース（７０：３０）と２．００ｅｑ．のカプリル酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（４２．００ｇ、０．２７６モル）とＤ－（－）－フルクトース（１８．００ｇ、０．１００モル）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１０８．４０ｇ、０．７５２モル、キシリトールとフルクトースとの合計初期重量に対して２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して８０℃に加熱し、１時間後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．０５ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、４３７２４ＰＬＵに相当）を添加した。この混合物を８０℃、１５ミリバールで２７時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明で帯黄色を呈し、２．４ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例５：キシリトールと１．５０ｅｑ．のカプリル酸との酵素によるエステル化（本発明によらない）
キシリトール（８９．１４ｇ、０．５８６モル、１．００ｅｑ．）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１２６．７ｇ、０．８７９モル、１．５０ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して８０℃に加熱し、３０分後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（６．４７ｇ；ＦｅｒｍｅｎｔａＢＩＯＣＡＴＡＬＹＳＴＣＡＬＢ_ＴＡ１００００ＮＬＴ９５％、６３４９３ＰＬＵに相当）を添加した。この混合物を８０℃、２０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、無色澄明であり、１．３ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例６：ソルビトールと１．５０ｅｑ．のカプリル酸との酵素によるエステル化（本発明によらない）
ソルビトール（９８．０９ｇ、０．５３８モル、１．００ｅｑ．）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１１６．４７ｇ、０．８０８モル、１．５０ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して１００℃に加熱し、３０分後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（６．４４ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、５５７５９ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を９０℃、５０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。得られた生成物は、２４時間後、不均質で淡黄色を呈し、約１０～１１ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた（不均質であるため、酸価の一義的な測定は不可能であった）。

例７：例５と例６との物理的混合物
例５に記載のとおりに得られたエステル（４２．００ｇ）と、例６に記載のとおりに得られたエステル（１８．００ｇ）との混合物を、撹拌しながらＮ_２を通して１時間かけて８０℃に加熱した。得られた生成物は、溶融物中で不均質であり、３．７ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例８：キシリトールとソルビトール（７０：３０）と１．５０ｅｑ．のカプリル酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（６４．１５ｇ、０．４２１モル）とソルビトール（２７．４９ｇ、０．１５１モル）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１２３．８１ｇ、０．８５９モル、キシリトールとソルビトールとの合計初期重量に対して１．５０ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して８０℃に加熱し、３０分後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（６．０２ｇ；ＦｅｒｍｅｎｔａＢＩＯＣＡＴＡＬＹＳＴＣＡＬＢ_ＴＡ１００００ＮＬＴ９５％、５９０７７ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を８０℃、２０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗を通してろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、無色澄明であり、１．６ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例９：キシリトールとソルビトール（６６：３４）と２．００ｅｑ．の工業グレードのオレイン酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（１１．７２ｇ、０．０７７モル）とソルビトール（６．０１ｇ、０．０３３モル）とオレイン酸（酸価２００ｍｇＫＯＨ／ｇ、ヨウ素価９２．３ｇＩ_２／１００ｇ、６１．７ｇ、０．２２モル、キシリトールとソルビトールとの合計初期重量に対して２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して９０℃に加熱し、３０分後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（２．３ｇ；ＦｅｒｍｅｎｔａＢＩＯＣＡＴＡＬＹＳＴＣＡＬＢ_ＴＡ１００００ＮＬＴ９５％、５９０７７ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を８０℃、１０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、わずかに濁って淡黄色を呈し、２．０ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１０：キシリトールとソルビトール（７０：３０）と２．００ｅｑ．の工業グレードのオレイン酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（２８．０ｇ、０．１８４モル）とソルビトール（１２．０ｇ、０．０６６モル）とオレイン酸（酸価２００ｍｇＫＯＨ／ｇ、ヨウ素価９２．３ｇＩ_２／１００ｇ、１４０．２ｇ、０．５０モル、キシリトールとソルビトールとの合計初期重量に対して２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して８０℃に加熱し、１時間後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．４０ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、４６７５４ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を８０℃、２５ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、わずかに濁って淡黄色を呈し、１．９ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１１：キシリトールと２．００ｅｑ．のステアリン酸との酵素によるエステル化（本発明によらない）
キシリトール（４０．００ｇ、０．２６３モル、１．００ｅｑ．）とステアリン酸（酸価１９８ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９２％、１４８．１８ｇ、０．５２６モル、２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して９０℃まで加熱し、１時間後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．６５ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、４８９１９ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を９０℃、１５ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を８０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗を通してろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明で、淡黄色を呈し、１．３ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１２：フルクトースと２．００ｅｑ．のステアリン酸との酵素によるエステル化（本発明によらない）
フルクトース（４２．００ｇ、０．２３３モル、１．００ｅｑ．）とステアリン酸（酸価１９８ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９２％、１３２．４２ｇ、０．４８２モル、２．００ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して９０℃まで加熱し、１時間後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．１８ｇ；ＦｅｒｍｅｎｔａＢＩＯＣＡＴＡＬＹＳＴＣＡＬＢ_ＴＡ１００００ＮＬＴ９５％、５０８３４ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を９０℃、１５ミリバールで５１時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を９０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明で、橙赤色を呈し、１４．７ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１３：例１１と例１２との物理的混合物
例１１に記載のとおりに得られたエステル（４２．００ｇ）と例１２に記載のとおりに得られたエステル（１８．００ｇ）との混合物を、撹拌しながらＮ_２を通して１時間かけて８０℃に加熱した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明で、橙色を呈し、５．１ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１４：キシリトールとフルクトース（７０：３０）と２．００ｅｑ．のステアリン酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（２８．０ｇ、０．１８４モル）とフルクトース（１２．０ｇ、０．０６７モル）との混合物を撹拌しながら１３０℃に加熱し、２時間後に９０℃に冷却した。その後、撹拌しながらＮ_２を通してステアリン酸（酸価１９８ｍｇＫＯＨ／ｇ、約９５％、１４２．１４ｇ、０．５０１モル、２．００ｅｑ．）を添加した。９０℃で３０分間撹拌した後、固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、５．４６ｇ、４７２７４ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を９０℃、１０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。続いて、酵素を除去するために、この混合物を８０℃、２バールのＮ_２圧力で、ＳｅｉｔｚＴ－７５０デプスフィルターを備えたフィルタープレスを通してろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明であり、３．２ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１５：キシリトールとソルビトールとフルクトース（５０：２５：２５）と１．９１ｅｑ．のカプリル酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（３９．５９ｇ、０．２６０モル）とソルビトール（１９．８０ｇ、０．１０９モル）とフルクトース（１９．８０ｇ、０．１１０モル）とカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１３８．０５ｇ、０．９５７モル、キシリトールとソルビトールとフルクトースとの合計初期重量に対して１．９１ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して１００℃に加熱し、１時間撹拌した。続いて、この混合物を８０℃に冷却し、固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．９２ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、５１２５７ＰＬＵに相当）を添加し、８０℃、２０ミリバールで２４時間さらに撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を、ブラックリボンフィルター付きのブフナー漏斗を通して９０℃でろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明で黄色を呈し、３．１ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１６：キシリトールとソルビトールとグルコース（６５：２５：１０）と１．９１ｅｑ．のカプリル酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（５２．１２ｇ、０．３４２モル）、ソルビトール（２０．０５ｇ、０．１１０モル）、グルコース（８．０２ｇ、０．０４５モル）およびカプリル酸（酸価３８９ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９８％、１３６．９１ｇ、０．９４９モル、キシリトールとソルビトールとグルコースの合計初期重量に対して１．９１ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して１００℃に加熱し、１時間撹拌した。その後、混合物を８０℃まで冷却し、固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（５．９１ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、５１１７０ＰＬＵに相当）を添加し、混合物を８０℃、２０ミリバールで２４時間さらに撹拌し、その間に生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を９０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、澄明で淡黄色を呈し、１０．０ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１７：キシリトールとソルビトール（７０：３０）と１．５０ｅｑ．のラウリン酸との混合物の酵素によるエステル化（本発明による）
キシリトール（５１．７ｇ、０．３４０モル）とソルビトール（２２．１６ｇ、０．１２２モル）とラウリン酸（酸価２８０ｍｇＫＯＨ／ｇ、＞９９％、１３８．６０ｇ、０．６９２モル、キシリトールとソルビトールとの合計初期重量に対して１．５０ｅｑ．）との混合物を撹拌しながらＮ_２を通して１００℃に加熱し、６０分後に固定化酵素カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）リパーゼＢ（６．０２ｇ；ＰｕｒｏｌｉｔｅＤ５６１９、５２１２２ＰＬＵに相当）を添加した。続いて、この混合物を９５℃、５０ミリバールで２４時間撹拌し、この間、生成した水を連続的に留去した。その後、酵素を除去するために、この混合物を９０℃でブラックリボンフィルター付きブフナー漏斗にてろ過した。得られた生成物は、溶融物中で均質であり、わずかに濁り、淡黄色ないしほぼ無色であり、０．８ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有していた。

例１８：先行技術に対する本発明による例の区別
以下の例は、本発明の主題を詳細に説明するためのものであり、当該主題をこれらの例に限定するものではない。これらの例は、本発明による方法が先行技術に対して利点を有することを示すことを意図している。ここで、先行技術の代表物として、本発明によらない例を選択した。

技術的効果：均質性および匂い
表１は、本発明による例４と、本発明によらない例１、２および３とを、反応経過、均質性および匂いの観点から比較したものである。

表１から分かるように、本発明によらない例２は、２４時間の反応時間後に不均質であり、依然として約１４０．５ｍｇＫＯＨ／ｇの高い残留酸価を有し、さらに依然としてカプリル酸などの短鎖脂肪酸の場合に不快と感じられる顕著な脂肪酸の匂いを有している。これに対して、２４時間の反応時間後の本発明によらない例１は、均質であり、残留酸価はわずか＜１．３ｍｇＫＯＨ／ｇであるものの、この例についても、脂肪酸の顕著な匂いが検出できる。同じことが、例１と例２との物理的混合物（例３）にも当てはまる。本発明による例４においてのみ、２４時間の反応時間後に低い残留酸価（すなわち、脂肪酸の高い転化率）、均質な生成物、および心地よい匂い（ポップコーン様）が達成される。

技術的効果：比較的低いエステル化度でも均質である
表２には、本発明による例８と、本発明によらない例５および例６とを、反応経過および均質性の点で比較したものである。

表２から分かるように、本発明によらない例５は、８０℃で、溶融物中で沈殿物の形で相分離を示す。この現象は、本発明によらない例６においてさらに顕著であり、例５と例６との物理的混合物（例７）においても発生する。本発明による例８のみが、１：１．５（糖／脂肪酸の物質量比）という比較的低いエステル化度にもかかわらず、８０℃で、溶融物中で均質であり、相分離を示さない。

技術的効果：色および反応性（すなわち、脂肪酸の転化の程度）
表３は、本発明による例１４と本発明によらない例１３とを、反応経過および色の点で比較したものである。

表３から分かるように、物理的混合物（例１３）は、本発明による方法生成物（例１４）よりもはるかに劣悪な色を示す。

配合物例
以下の例は、本発明による組成物が多数の化粧品配合物に使用できることを示すものである。

Claims

糖エステルおよび／または糖アルコールエステルから選択される少なくとも２つを含む混合組成物を酵素により製造する方法であって、
Ｂ）糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物と、少なくとも１つのアシル基供与体、好ましくは脂肪酸アシル基供与体、特に脂肪酸エステルおよび脂肪酸から選択される脂肪酸アシル基供与体、特に好ましくは脂肪酸とをリパーゼの存在下で反応させるプロセスステップ
を含む、方法。
前記糖および糖アルコールは、アガロース、アリトール、アルロース、アルトリトール、アミロペクチン、アミロース、アラビニトール、アラビノース、セロビオース、セルロース、キチン、シクロデキストリン、デオキシリボース、デキストラン、エリスリトール、フルクタン、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、グリコーゲン、ヒアルロン酸、イジトール、イヌリン、イソマルト、イソマルツロース、イソメリジトース、ラクチトール、ラクトース、ラクツロース、マルチトール、マルトヘキソース、マルトペントース、マルトース、マルトテトロース、マルトトリオース、マルツロース、マンニトール、マンノース、メリジトース、ペクチン、ラフィノース、ラムノース、リビトール、リボース、サッカロース、ソルビトール、ソルボース、スタキオース、デンプン、デンプン加水分解物、スレイトール、トレハルロース、ウンベリフェロース、キリトールおよびキシロースの群から選択される、請求項１記載の方法。
前記アシル基供与体は、脂肪酸アシル基供与体から選択され、前記脂肪酸アシル基供与体は特に、カプロン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシレン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、イソステアリン酸、ステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸、ジヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ペトロセリン酸、エライジン酸、アラキン酸、ベヘン酸、エルカ酸、ガドレイン酸、リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸およびアラキドン酸のアシル基の群から選択されるアシル基を提供する、請求項１または２記載の方法。
前記プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物は、コリン塩、アンモニウム塩およびホスホニウム塩からなる群から選択される物質を、２重量％未満、好ましくは１重量％未満、特に好ましくは０．１重量％未満の量で含み、特にこれらの物質のいずれも含まず、ここで、前記重量パーセンテージは、前記糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物中のプロセスステップＢ）におけるすべての糖および糖アルコールに対するものである、請求項１から３までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＢ）において、すべての糖および糖アルコール対すべてのアシル基供与体中に含まれるアシル基のモル比は、１．００：０．０８～１．００：１０．００、好ましくは１．００：０．５００～１．００：７．００、特に好ましくは１．００：１．２５～１．００：２．２５、あるいは特に好ましくは１．００：２．００～１．００：４．５０の範囲にある、請求項１から４までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＢ）において、すべての糖および糖アルコール中のすべての第一級ヒドロキシル基対すべてのアシル基供与体中に含まれるアシル基のモル比は、１．００：０．１０～１．００：３．００、特に好ましくは１．００：１．２５～１．００：２．２５の範囲にある、請求項１から５までのいずれか１項記載の方法。
前記リパーゼは、サーモミセス・ラヌギノサス（Thermomyces lanuginosus）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｏ５９９５２）、カンジダ・アンタークティカ（Candida antarctica）由来のリパーゼＡおよびＢ（アクセッション番号Ｐ４１３６５）、ムコール・ミイヘイ（Mucor miehei）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ１９５１５）、フミコラｓｐ．（Humicola sp.）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｏ５９９５２）、リゾムコール・ジャバニカス（Rhizomucor javanicus）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｓ３２４９２）、リゾプス・オリゼ（Rhizopus oryzae）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ６１８７２）、カンジダ・ルゴサ（Candida rugosa）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ２０２６１、Ｐ３２９４６、Ｐ３２９４７、Ｐ３２９４およびＰ３２９４９）、リゾプス・ニベウス（Rhizopus niveus）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ６１８７１）、ペニシリウム・カメンベルティ（Penicillium camemberti）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ２５２３４）、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）由来のリパーゼ（ＡＢＧ７３６１３、ＡＢＧ７３６１４およびＡＢＧ３７９０６）およびペニシリウム・シクロピウム（Penicillium cyclopium）由来のリパーゼ（アクセッション番号Ｐ６１８６９）、ならびにそれぞれそれらのアミノ酸レベルで少なくとも６０％の相同性を有するものを含む群から選択される、請求項１から６までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＢ）を、２０℃～１６０℃、好ましくは３５℃～１３０℃、特に５０℃～１１０℃の範囲の反応温度で行う、請求項１から７までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＢ）を、１バール未満、好ましくは０．５バール未満、特に好ましくは０．０５バール未満の圧力で行う、請求項１から８までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＢ）において、前記糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物と前記アシル基供与体との合計が、反応バッチ全体の少なくとも１０重量％、好ましくは少なくとも８６重量％、特に好ましくは少なくとも９０重量％を占める、請求項１から９までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＢ）において形成される副生成物、例えば、前記使用されるアシル基供与体が酸である場合には水、前記使用されるアシル基供与体がエステルである場合には対応するアルコールを除去する、請求項１から１０までのいずれか１項記載の方法。
Ａ）前記糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを、固体形態または水に溶解した形態で互いに空間的に別々に提供してそれらを混合することで、前記プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物を得るプロセスステップ
を含む、請求項１から１１までのいずれか１項記載の方法。
プロセスステップＡ）は、前記プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物の含水量を１７重量％未満、好ましくは１４重量％未満、特に好ましくは１０重量％未満に低減することを含み、ここで、前記重量パーセンテージは、前記プロセスステップＢ）において使用され、糖および糖アルコールから選択される少なくとも２つを含む混合物の全体に対するものである、請求項１２記載の方法。
請求項１から１３までのいずれか１項記載の方法により得ることができる、糖エステルおよび糖アルコールエステルから選択される少なくとも２つを含む混合組成物。
糖エステルおよび／または糖アルコールエステルを含む混合組成物において、前記糖エステルおよび／または糖アルコールエステルの糖および／または糖アルコール残基は、アリトール、アルロース、アルトリトール、アラビニトール、アラビノース、セロビオース、デオキシリボース、エリスリトール、フルクトース、フコース、ガラクチトール、ガラクトース、グルコース、イジトール、イソマルト、イソマルツロース、ラクチトール、ラクトース、ラクツロース、マルチトール、マルトース、マルツロース、マンニトール、マンノース、ラムノース、リビトール、リボース、サッカロース、ソルビトール、ソルボース、スレイトール、トレハルロース、キシリトールおよびキシロースの残基の群から選択される少なくとも２つの糖および／または糖アルコール残基から選択され、エステル残基は、脂肪酸の酸残基の群の少なくとも１つのアシル基から選択されることを特徴とする、混合組成物。