JP2023505408A - 抗ｔｓｌｐ抗体及びその使用 - Google Patents

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Abstract

抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片、これをコードする核酸分子、及びこれを調製するための方法に関する。抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、ＴＳＬＰに対する高親和性を有し、ＴＳＬＰと効果的に結合してＢａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞に関するＴＳＬＰの増殖作用を遮断すること、並びにＰＢＭＣに関する活性化及び分泌の動態におけるＴＳＬＰの能力を遮断することが可能である。同時に、抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物、並びに喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応又は自己免疫疾患を予防及び／又は治療するための医薬の調製における組成物の使用にさらに関する。【選択図】なし

Description

本発明は、治療モノクローナル抗体の分野、特に、ＴＳＬＰに対する抗体、及び疾患の治療における抗体の使用に属する。
胸腺間質性リンパ球新生因子（Thymic stromal lymphopoietin、ＴＳＬＰ）は、ＩＬ－７様炎症性サイトカインであり、微生物、物理的損傷又は炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１β及びＴＮＦ）に応答して、上皮細胞、例えば、皮膚、肺、胸腺及び胃腸管によって主に分泌され、間質細胞、ケラチノサイト、樹状細胞（ＤＣ）及びマスト細胞等によっても、病状下、例えば、炎症を受けて分泌される。ＴＳＬＰは、アレルギー性及び適応性気道炎症の開始に重要な役割を果たす。ＴＳＬＰは、喘息を有する患者の気道において、健常対照群と比較して高度に発現し、そのレベルは、ＴＨ２サイトカイン及びケモカインの発現、並びに疾患の重症度と相関する。ＴＳＬＰにより、樹状細胞（ＤＣ）の成熟が誘導され、ＯＸ４０Ｌ発現が上方制御され、ＯＸ４０－ＯＸ４０Ｌの相互作用が、Ｔ細胞により誘導される最初のＴＨ２細胞の極性化に関与する可能性があり、そのＴＨ２細胞は、分化後にサイトカイン、例えば、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１３を放出して、マスト細胞及び好酸球の浸潤並びに一連のアレルギー性炎症応答と、気道における病変との要因となり、これにより喘息発作が生じる。ＴＳＬＰは、マスト細胞及びナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞の活性化に有効であり、ＴＨ２サイトカイン、例えば、ＩＬ－１３を産生し、これにより気道炎症の発症及び進行が増悪する。
ＴＳＬＰの受容体は、ＩＬ－７Ｒα及び特有のＴＳＬＰＲ鎖からなるヘテロ二量体の受容体複合体である（ＣＲＦＬ２）。ＴＳＬＰヘテロ二量体受容体の結合により、ＳＴＡＴ５の活性化及び細胞増殖が生じる。ＴＳＬＰＲ及びＩＬ－７Ｒαは、ＤＣ細胞に高度に発現する。
したがって、高い特異性及び親和性、低い毒性及び副作用、並びに優れた臨床的有効性を有し、これによって、喘息を有する患者により多くの医薬の選択肢をもたらす抗ＴＳＬＰ抗体を開発することが、緊急かつ必要である。
発明の詳細な説明
本開示では、発明者らは、ヒトＴＳＬＰに結合可能な優れた特質を有するキメラ抗体を第１に開発した。これらに基づいて、発明者らは、キメラ抗体を試験及び修飾することにより、キメラ抗体の完全ヒト抗体を開発した。本発明の完全ヒト抗体は、キメラ抗体と実質的に同一の（又はさらに良好な）生物学的機能を有する。完全ヒト抗体は、ＴＳＬＰに対する高親和性を有するだけでなく、ＴＳＬＰにより誘導されるＢａ／Ｆ３細胞増殖を効果的に遮断し、ＰＢＭＣの活性及びサイトカイン分泌に対するＴＳＬＰの能力を遮断することも可能である。したがって、本発明は、抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物、並びに喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患の予防及び／又は治療のための医薬の調製におけるその使用にさらに関する。
本発明の抗体は、極めて高度にヒト化され、完全ヒト抗体でさえあり、そのため、免疫原性応答を引き起こすことなく、ヒト対象に安全に投与することができる。したがって、本発明の抗体は、臨床的価値が大きいものである。
本発明の抗体
一態様では、本発明は、ＴＳＬＰに結合する抗体又はその抗原結合断片であって、以下の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
（ａ）配列番号１、１７、３０、４０、５３若しくは６８に記載の重鎖可変領域（ＶＨ）に含まれる、ＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号２、１８、３１、４１、５４若しくは６９に記載の軽鎖可変領域（ＶＬ）に含まれる、ＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアント、或いは
（ｂ）配列番号１に記載のＶＨに含まれるＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号２に記載のＶＬに含まれるＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアント
を含む、抗体又はその抗原結合断片を提供する。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１７に記載のＶＨに含まれるＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号１８に記載のＶＬに含まれるＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアントを含む。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３０に記載のＶＨに含まれるＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号３１に記載のＶＬに含まれるＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアントを含む。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号４０に記載のＶＨに含まれるＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号４１に記載のＶＬに含まれるＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアントを含む。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号５３に記載のＶＨに含まれるＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号５４に記載のＶＬに含まれるＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアントを含む。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号６８に記載のＶＨに含まれるＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は配列番号６９に記載のＶＬに含まれるＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアントを含む。
特定の実施形態では、配列バリアントは、それが由来するＣＤＲと比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又は付加（例えば、１、２又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有するＣＤＲである。
特定の実施形態では、置換は、保存的置換である。
好ましくは、ＣＤＲは、ＡｂＭ、Ｃｈｏｔｈｉａ、Ｋａｂａｔ又はＩＭＧＴナンバリングシステムにより定義される。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片のＶＨ及び／又はＶＬは、ヒト由来の免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＴＳＬＰ及び／又はサルＴＳＬＰに結合する。
一態様では、本発明は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、ＴＳＬＰに結合可能な抗体又はその抗原結合断片を提供する。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤＲがＩＭＧＴナンバリングシステムにより定義される、以下の重鎖可変領域（ＶＨ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）：
（ａ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号３に記載の配列又は配列番号３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４に記載の配列又は配列番号４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５に記載の配列又は配列番号５と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号６に記載の配列又は配列番号６と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号７に記載の配列又は配列番号７と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８に記載の配列又は配列番号８と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｂ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号１９に記載の配列又は配列番号１９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号２０に記載の配列又は配列番号２０と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２１に記載の配列又は配列番号２１と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号２２に記載の配列又は配列番号２２と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２３に記載の配列又は配列番号２３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列又は配列番号２４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｃ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号３２に記載の配列又は配列番号３２と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号３３に記載の配列又は配列番号３３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３４に記載の配列又は配列番号３４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号３５に記載の配列又は配列番号３５と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２３に記載の配列又は配列番号２３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列又は配列番号２４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｄ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列又は配列番号４２と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４３に記載の配列又は配列番号４３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号４４に記載の配列又は配列番号４４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号４５に記載の配列又は配列番号４５と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号４６に記載の配列又は配列番号４６と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号４７に記載の配列又は配列番号４７と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
或いは
（ｅ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号５５に記載の配列又は配列番号５５と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号５６に記載の配列又は配列番号５６と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５７に記載の配列又は配列番号５７と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号５８に記載の配列又は配列番号５８と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５９に記載の配列又は配列番号５９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号６０に記載の配列又は配列番号６０と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤＲがＩＭＧＴナンバリングシステムにより定義される、以下の重鎖可変領域（ＶＨ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）：
（ａ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号６に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号７に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｂ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号１９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号２０に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２１に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号２２に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｃ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号３２に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号３３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号３５に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｄ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号４２に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号４４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号４５に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号４６に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号４７に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
又は
（ｅ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号５５に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号５６に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５７に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号５８に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号６０に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤＲがＡｂＭナンバリングシステムにより定義される、以下の重鎖可変領域（ＶＨ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）：
（ａ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号９に記載の配列又は配列番号９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１０に記載の配列又は配列番号１０と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号１１に記載の配列又は配列番号１１と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号１２に記載の配列又は配列番号１２と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号１３に記載の配列又は配列番号１３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８に記載の配列又は配列番号８と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｂ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号２５に記載の配列又は配列番号２５と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号２６に記載の配列又は配列番号２６と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２７に記載の配列又は配列番号２７と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号２８に記載の配列又は配列番号２８と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２９に記載の配列又は配列番号２９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列又は配列番号２４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｃ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号３６に記載の配列又は配列番号３６と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号３７に記載の配列又は配列番号３７と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３８に記載の配列又は配列番号３８と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号３９に記載の配列又は配列番号３９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２９に記載の配列又は配列番号２９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列又は配列番号２４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｄ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号４８に記載の配列又は配列番号４８と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４９に記載の配列又は配列番号４９と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５０に記載の配列又は配列番号５０と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号５１に記載の配列又は配列番号５１と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５２に記載の配列又は配列番号５２と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号４７に記載の配列又は配列番号４７と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
或いは
（ｅ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号６１に記載の配列又は配列番号６１と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号６２に記載の配列又は配列番号６２と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号６３に記載の配列又は配列番号６３と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号６４に記載の配列又は配列番号６４と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号６５に記載の配列又は配列番号６５と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号６０に記載の配列又は配列番号６０と比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加）を有する配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤＲがＡｂＭナンバリングシステムにより定義される、以下の重鎖可変領域（ＶＨ）及び／軽鎖可変領域（ＶＬ）：
（ａ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１０に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号１１に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号１２に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号１３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｂ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号２５に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号２６に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２７に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号２８に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｃ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号３６に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号３７に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３８に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号３９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
（ｄ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号４８に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４９に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５０に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号５１に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５２に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号４７に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）、
又は
（ｅ）以下の３つのＣＤＲ：配列番号６１に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号６２に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号６３に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／若しくは
以下の３つのＣＤＲ：配列番号６４に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号６５に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号６０に記載の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、上記のようにＩＭＧＴ又はＡｂＭにより定義されるＣＤＲと比較して、重鎖可変領域（ＶＨ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）における少なくとも１つのＣＤＲが、変異を含み、その変異が、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）である、重鎖可変領域（ＶＨ）及び／又は軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
好ましくは、本発明の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体若しくはその抗原結合断片のＶＨは、ヒト免疫グロブリンの重鎖可変領域（ＶＨ）に由来するフレームワーク領域（ＦＲ）を含み、及び／又は抗体若しくはその抗原結合断片のＶＬは、ヒト免疫グロブリンの軽鎖可変領域（ＶＬ）に由来するフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。したがって、特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ヒト化されている。特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、完全ヒト抗体又はその抗原結合断片である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）ヒト免疫グロブリンの重鎖フレームワーク領域、若しくはそのバリアントであって、上記バリアントが、それが由来する生殖細胞系列抗体遺伝子によりコードされるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を有するバリアント、及び／又は
（ｂ）ヒト免疫グロブリンの軽鎖フレームワーク領域、若しくはそのバリアントであって、上記バリアントが、それが由来する生殖細胞系列抗体遺伝子配列によりコードされるアミノ酸配列と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を有するバリアント
を含む。
特定の実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片のヒト化度は、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号１、１７、３０、４０、５３又は６８に記載の配列、
（ｉｉ）配列番号１、１７、３０、４０、５３又は６８に記載の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を含む配列、或いは
（ｉｉｉ）配列番号１、１７、３０、４０、５３又は６８に記載の配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び／或いは
（ｂ）（ｉｖ）配列番号２、１８、３１、４１、５４又は６９に記載の配列、
（ｖ）配列番号２、１８、３１、４１、５４又は６９に記載の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を含む配列、或いは
（ｖｉ）配列番号２、１８、３１、４１、５４又は６９に記載の配列に対する少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１に記載のＶＨ及び／又は配列番号２に記載のＶＬを含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１７に記載のＶＨ及び／又は配列番号１８に記載のＶＬを含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３０に記載のＶＨ及び／又は配列番号３１に記載のＶＬを含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、配列番号４０に記載のＶＨ及び／又は配列番号４１に記載のＶＬを含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、配列番号５３に記載のＶＨ及び／又は配列番号５４に記載のＶＬを含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、配列番号６８に記載のＶＨ及び／又は配列番号６９に記載のＶＬを含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）配列番号１に記載のＶＨ及び配列番号２に記載のＶＬ、
（ｂ）配列番号１７に記載のＶＨ及び配列番号１８に記載のＶＬ、
（ｃ）配列番号３０に記載のＶＨ及び配列番号３１に記載のＶＬ、
（ｄ）配列番号４０に記載のＶＨ及び配列番号４１に記載のＶＬ、
（ｅ）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号５４に記載のＶＬ、
（ｆ）配列番号６８に記載のＶＨ及び配列番号６９に記載のＶＬ、
（ｇ）（ａ）～（ｆ）のうちのいずれか１つにおけるＶＨ及びＶＬに対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性をそれぞれ独立的に有する、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）、或いは
（ｈ）（ａ）～（ｆ）のうちのいずれか１つにおけるＶＨ及びＶＬと比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）をそれぞれ独立的に有する、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。好ましくは、置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片の重鎖はヒト免疫グロブリンの重鎖定常領域（ＣＨ）又はそのバリアントを含み、該バリアントが、それが由来する野生型配列と比較して、アミノ酸最大５０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を有する。特定の実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片の軽鎖はヒト免疫グロブリンの軽鎖定常領域（ＣＬ）又はそのバリアントを含み、該バリアントが、それが由来する野生型配列と比較して、アミノ酸最大５０個の置換（例えば、アミノ酸最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を有する。
特定の実施形態では、定常領域は、変化、例えば、変異させて、抗ＴＳＬＰ抗体分子の特質を修飾する（例えば、以下の特性：Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、又は補体機能のうちの１つ又は複数を変化させる）。抗体定常領域における少なくとも１つのアミノ酸残基を異なる残基と置き換えることにより機能を変化させて、例えば、エフェクターリガンド（例えば、ＦｃＲ又は補体Ｃ１ｑ）に対する抗体の親和性を変化させ、これによりエフェクター機能を変化させる（例えば、低下させる）ことができる。抗体のＦｃ領域は、いくつかの重要なエフェクター機能、例えば、ＡＤＣＣ、食作用（ＡＤＣＰ）、ＣＤＣ等を媒介する。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、重鎖定常領域（Ｆｃ）を含み、これは、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ及びＩｇＥ、特には、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４、より詳細には、ＩｇＧ１（例えば、ヒトＩｇＧ１）の重鎖定常領域から選択される。一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域は、配列番号１４に記載のものである。一部の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、軽鎖定常領域を含み、これは、例えば、カッパ又はラムダ軽鎖定常領域、好ましくは、カッパ軽鎖定常領域（例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域）から選択される。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含む。一部の好ましい実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、ｕｎｉｐｒｏｔＩＤ Ｐ０１８５７に記載のヒトＩｇＧ１の定常領域（配列番号７４）を含む。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片はヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域（例えば、配列番号７４）又はそのバリアントを含み、該バリアントが、ＥＵナンバリングシステムに従って２３４、２３５、２３７、２６５、２９７、３３１、３２９及び４３４番目のうちの少なくとも１つにおいて変異している。一部の実施形態では、バリアントは、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｄ２６５Ａ、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ、Ｐ３２９Ｇ、Ｎ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｙ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｈ及びＮ４３４Ｑ変異のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、バリアントは、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＮ４３４Ａ変異のうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１の重鎖定常領域のバリアントは、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１の重鎖定常領域のバリアントは、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＮ４３４Ａを含む。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号１４に記載のＣＨ又はそのバリアントを含み、該バリアントが、配列番号１４と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を含むか、或いは配列番号１４に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する。バリアントは、ＥＵナンバリングシステムに従ってＮ２９７Ａ及び／又はＮ４３４Ａを含む。一部の実施形態では、バリアントは、Ｎ４３４Ａを含む。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号１５に記載のＣＨ又はそのバリアントを含み、該バリアントが、配列番号１５と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を有するか、或いは配列番号１５に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する。
特定の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、バリアントが、ＥＵナンバリングシステムに従って２２８及び／又は４３４番目のうちの少なくとも１つにおいて変異している、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域（例えば、配列番号７５）又はそのバリアントを含む。
一部の実施形態では、変異は、Ｓ２２８Ｐ及び／又はＮ４３４Ａを含む。一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域のバリアントは、Ｓ２２８Ｐ及びＮ４３４Ａを含む。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は配列番号７０に記載のＣＨ又はそのバリアントを含み、該バリアントが、配列番号７０と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を有するか、或いは配列番号７０に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、軽鎖定常領域又はそのバリアントを含む。一部の実施形態では、軽鎖定常領域は、カッパ軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、軽鎖定常領域は配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）又はそのバリアントを含み、該バリアントが、配列番号１６と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０又は最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の保存的置換）を含むか、或いは配列番号１６に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１４に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１５に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む。
一部の実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む。
一部の実施形態では、上記の変異（複数可）によって、抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ４又はＩｇＧ４の重鎖定常領域を含む対応する抗体又はその抗原結合断片と比較して、ＡＤＣＰ、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣ活性を有しないか又はこれらが低下する。
一部の実施形態では、上記の変異（複数可）によって、抗体又はその抗原結合断片は、上記の変異又は置換を有しない対応する抗体又はその抗原結合断片と比較して、ＡＤＣＰ、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣ活性を有しないか又はこれらが低下する。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号１に記載のＶＨ配列及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨ配列を含む配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
（ｂ）（ｉｖ）配列番号２に記載のＶＬ配列及び配列番号１６に記載のＣＬ配列を含む配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号１７に記載のＶＨ配列及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨ配列を含む配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
（ｂ）（ｉｖ）配列番号１８に記載のＶＬ配列及び配列番号１６に記載のＣＬ配列を含む配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号３０に記載のＶＨ配列及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨ配列を含む配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
（ｂ）（ｉｖ）配列番号３１に記載のＶＬ配列及び配列番号１６に記載のＣＬ配列を含む配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号４０に記載のＶＨ配列及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨ配列を含む配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
（ｂ）（ｉｖ）配列番号４１に記載のＶＬ配列及び配列番号１６に記載のＣＬ配列を含む配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号５３に記載のＶＨ配列及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨ配列を含む配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
（ｂ）（ｉｖ）配列番号５４に記載のＶＬ配列及び配列番号１６に記載のＣＬ配列を含む配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）（ｉ）配列番号６８に記載のＶＨ配列及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨ配列を含む配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
（ｂ）（ｉｖ）配列番号６９に記載のＶＬ配列及び配列番号１６に記載のＣＬ配列を含む配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換は、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、配列番号１に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）を含む重鎖、並びに配列番号２に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、配列番号１７に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）を含む重鎖、並びに配列番号１８に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）を含む重鎖、並びに配列番号３１に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、配列番号４０に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）を含む重鎖、並びに配列番号４１に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）を含む重鎖、並びに配列番号５４に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、配列番号６８に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）を含む重鎖、並びに配列番号６９に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む軽鎖を含む。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖が、
（ｉ）配列番号６６又は７３に記載の配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
軽鎖が、
（ｉｖ）配列番号６７に記載の配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
好ましくは、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換が、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、重鎖及び軽鎖を含み、重鎖が、
（ｉ）配列番号７１に記載の配列、
（ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
軽鎖が、
（ｉｖ）配列番号７２に記載の配列、
（ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
（ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
好ましくは、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換が、保存的置換である。
特定の実施形態では、本発明の抗体は、キメラ、ヒト化、又は完全ヒト抗体である。特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｄｓＦｖ）及びダイアボディからなる群から選択される。
特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、以下の特質：
（ａ）約５０ｎＭ未満、例えば、約４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０．１ｎＭ、１ｐＭ、０．１ｐＭ又はこれ未満のＫＤによるＴＳＬＰ（例えば、ヒトＴＳＬＰ）への結合、ここでＫＤは、当技術分野において周知の技術、例えば、Ｆｏｒｔｅｂｉｏ又はＥＬＩＳＡにより測定する、
（ｂ）約５０ｎＭ未満、例えば、約４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０．９ｎＭ、０．８ｎＭ、０．７ｎＭ、０．６ｎＭ、０．５ｎＭ、０．４ｎＭ、０．３ｎＭ、０．２ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭ、１ｐＭ、０．１ｐＭ又はこれ未満のＥＣ５０によるＴＳＬＰ（例えば、ヒトＴＳＬＰ）への結合、ここでＥＣ５０は、当技術分野において周知の技術、例えば、フローサイトメトリー又はＥＬＩＳＡ、例えば、親和性ＥＬＩＳＡ又は細胞競合ＥＬＩＳＡにより測定する、
（ｃ）約５０ｎＭ、例えば、約５０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０．９ｎＭ、０．８ｎＭ、０．７ｎＭ、０．６ｎＭ、０．５ｎＭ、０．４ｎＭ、０．３ｎＭ、０．２ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭ、１ｐＭ、０．１ｐＭ又はこれ未満のＩＣ５０によるＴＳＬＰのＩＬ７Ｒα／ＴＳＬＰＲへの結合の阻害、ここでＩＣ５０は、ＥＬＩＳＡにより測定する、
（ｄ）ＴＳＬＰ誘導ＯＸ４０Ｌ発現の阻害又は遮断、
（ｅ）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性及び／又は増殖の阻害又は遮断、
（ｆ）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害又は遮断、
（ｇ）Ｔｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３又はＩＬ－５の分泌の阻害又は遮断、
（ｈ）ＦｃＲｎへの結合に対する良好な親和性、
（ｉ）約６．５～約８．５、例えば、約６．５、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、約７．５、約７．７、約７．９、約８．０、約８．２又は約８．５の等電点（ＰＩ）
のうちの少なくとも１つを示し得る。
加えて、本発明の抗体は、ＦｃＲｎに対する良好な親和性を有する。特定の実施形態では、ＦｃＲｎに対する親和性のＫＤ（Ｍ）値は、１０－９のレベルである。本発明の抗体は、ｉｎ ｖｉｖｏで長期の半減期を有する。また、本発明の抗体は、良好な親水性を有する。特定の実施形態では、本発明の抗体の疎水性時間（hydrophobic time）が、クロマトグラフィーカラムにより８分～１４分の間であると定量する。
抗体誘導体
本発明による抗体又はその抗原結合断片は、例えば、別の分子（例えば、別のポリペプチド又はタンパク質）に結合させることにより、誘導体化し得る。典型的には、抗体又はその抗原結合断片の誘導体化（例えば、標識化）は、ＴＳＬＰ（特には、ヒトＴＳＬＰ）への結合に悪影響しない。したがって、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、そのような誘導体の形態も包含することを意図する。例えば、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、１つ又は複数の他の分子部分、例えば、別の抗体（例えば、二重特異性抗体を形成する）、検出試薬、医薬試薬、及び／又は別の分子（例えば、アビジン又はポリヒスチジン標識）への抗体若しくはその抗原結合断片の結合を媒介可能なタンパク質若しくはポリペプチドに（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合的又は他の手段により）結合し得る。
１種の誘導体化抗体（例えば、二重特異性抗体）は、２つ以上の抗体（同一又は異なる種類に属する）を架橋結合させることにより生成する。二重特異性抗体を得るための方法は、当技術分野において周知であり、例となる方法としては、化学的架橋結合、細胞改変（ハイブリドーマ）又は遺伝子改変が挙げられるが、これらに限定されない。
別の種の誘導体化抗体は、標識化抗体である。例えば、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、検出可能なマーカーに結合し得る。本発明の検出可能なマーカーは、蛍光、分光学、光化学、生化学、免疫学、電気、光学、又は化学により検出可能な任意の物質であり得る。そのようなマーカーは、当技術分野において周知であり、例としては、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼ等）、放射性核種（例えば、３Ｈ、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃ又は３２Ｐ）、蛍光色素（例えば、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、フルオレセイン、テトラメチルローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、フィコエリトリン（ＰＥ）、テキサスレッド、ローダミン、量子ドット又はシアニン色素誘導体（例えば、Ｃｙ７、Ａｌｅｘａ７５０））、アクリジンエステル化合物、磁気ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標））、熱量測定マーカー、例えば、コロイド金又は色ガラス若しくはプラスチック（例えば、ポリスチレン、ポリプロピレン、ラテックス等）ビーズ、及び上記のマーカーにより修飾したアビジン（例えば、ストレプトアビジン）への結合に使用するビオチンが挙げられるが、これらに限定されない。そのようなマーカーの使用は、限定されないが、米国特許第３，８１７，８３７号、第３，８５０，７５２号、第３，９３９，３５０号、第３，９９６，３４５号、第４，２７７，４３７号、第４，２７５，１４９号及び第４，３６６，２４１号を含む特許において教示されており、これらのすべては、参照により本明細書に組み込まれる。上記の検出可能なマーカーは、当技術分野において公知の方法により検出することができる。例えば、放射性マーカーは、写真用フィルム又はシンチレーション計算機を使用して検出してもよく、蛍光マーカーは、放射光を検出する光検出器を使用して検出してもよい。酵素マーカーは、酵素の基質を用意し、基質に対する酵素の作用により生成される反応産物を検出することによって一般に検出してもよく、熱量測定マーカーは、単一の視覚的発色マーカーにより検出してもよい。特定の実施形態では、そのようなマーカーは、イムノアッセイ（例えば、酵素結合イムノアッセイ、放射性イムノアッセイ、蛍光イムノアッセイ、化学発光イムノアッセイ等）において有用であり得る。特定の実施形態では、検出可能な上記のマーカーは、本発明による抗体又はその抗原結合断片に種々の長さのリンカーにより結合させて、潜在的立体障害を低減させることができる。
加えて、本発明による抗体又はその抗原結合断片はまた、化学基、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、メチル若しくはエチル、又はグリコシル基を使用することにより誘導体化し得る。これらの基は、抗体の生物学的特性を向上させること、例えば、血清半減期を向上させるために使用することができる。
したがって、本発明の一態様では、本発明によるモノクローナル抗体又はその抗原結合断片及びカップリング部分を含むコンジュゲートを提供し、ここで、そのカップリング部分は、検出可能な上記のマーカー、例えば、放射性同位体、蛍光物質、発光物質、発色物質、又は酵素である。また、カップリング部分は、治療剤であり得る。
抗体の誘導体の１つとして、本発明は、一次抗体若しくはその断片、及び追加の抗体若しくはその断片又は抗体ミメティックを含む多特異性抗体を提供し、ここで、一次抗体若しくはその断片、追加の抗体若しくはその断片又は抗体ミメティックは、本来の結合特異性を保持する。一次抗体又はその断片は、ＴＳＬＰに結合する本発明による（モノクローナル）抗体又はその抗原結合断片のうちのいずれか１つである。本発明において使用する場合、「抗体ミメティック」(antibody mimetic)は、抗体と同様に抗原に特異的に結合するが、抗体構造を有しない物質を指す。これらは、通常、約３～２０ｋＤａのモル質量を有する人工ペプチド又はタンパク質、例えば、設計したアンキリン反復タンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）及びフィノマー（ｆｙｎｏｍｅｒ）である。設計したアンキリン反復タンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）は、中国特許出願公開第１０４３４１５２９号に記載のように、ＩｇＧ抗体、ｓｃＦｖ－Ｆｃ抗体断片、又はこれらの組合せに結合させることができる。二重特異性融合ポリペプチドは、国際公開第２０１５１４１８６２号に記載のように、ＩＬ－１７ａに対するフィノマーを抗ＩＬ－６Ｒ抗体に融合させることにより生成する。
特定の実施形態では、多特異性抗体は、一次抗体又はその抗体結合断片を、他の抗体若しくはその抗原結合断片又は抗体ミメティックとカップリングさせることにより形成し、ここで、各抗体若しくはその抗原結合断片又は抗体ミメティックは、本来の結合特異性を保持し、一次抗体又はその抗体結合断片は、本発明による抗体又はその抗体結合断片である。特定の実施形態では、多特異性抗体は、二重特異性抗体又は三重特異性抗体又は四重特異性抗体である。
抗体の調製
本発明の抗体は、当技術分野において公知の種々の方法、例えば、遺伝子工学組換え技術により調製することができる。例えば、本発明の抗体の重鎖及び軽鎖遺伝子をコードするＤＮＡ分子は、化学合成又はＰＣＲ増幅により得られる。得られたＤＮＡ分子は、発現ベクターに挿入した後、宿主細胞にトランスフェクトする。次いで、トランスフェクトした宿主細胞を特定の条件下で培養して、本発明の抗体を発現させる。
本発明の抗原結合断片は、インタクトな抗体分子を加水分解することにより得ることができる（Ｍｏｒｉｍｏｔｏら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２４：１０７～１１７（１９９２）及びＢｒｅｎｎａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２２９：８１（１９８５）を参照）。加えて、これらの抗原結合断片はまた、組換え宿主細胞により直接生成することができる（Ｈｕｄｓｏｎ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１：５４８～５５７（１９９９）；Ｌｉｔｔｌｅら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ，２１：３６４～３７０（２０００）に総説が記載されている）。例えば、Ｆａｂ’断片は、宿主細胞から直接得ることができ、Ｆａｂ’断片を化学的にカップリングさせてＦ（ａｂ’）２断片を形成することができる（Ｃａｒｔｅｒら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０：１６３～１６７（１９９２））。加えて、Ｆｖ、Ｆａｂ又はＦ（ａｂ’）２断片はまた、組換え宿主細胞の培養物から直接単離することができる。これらの抗原結合断片を調製するための他の技術は、当業者に周知である。
したがって、別の態様では、本発明は、本発明による抗体若しくはその抗原結合断片、又はその重鎖可変領域及び／若しくは軽鎖可変領域、又は１つ若しくは複数のそのＣＤＲをコードする、ヌクレオチド配列を含む単離核酸分子を提供する。当技術分野において公知のコドンの縮重を考慮して、一部の実施形態では、ヌクレオチド配列は、コドンの縮重に応じて異なり得る。特定の実施形態では、ヌクレオチド配列は、コドン最適化される。
特定の実施形態では、本発明による単離核酸分子は、（ｉ）本発明による抗体若しくはその抗原結合断片の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をそれぞれコードする第１の核酸及び第２の核酸、又は（ｉｉ）本発明による抗体若しくはその抗原結合断片の、重鎖可変領域及び重鎖定常領域をコードする第１の核酸、並びに軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域をコードする第２の核酸、又は（ｉｉｉ）本発明による抗体若しくはその抗原結合断片の重鎖及び軽鎖をそれぞれコードする第１の核酸及び第２の核酸を含む。特定の実施形態では、第１及び第２の核酸は、上記（ｉ）～（ｉｉｉ）の第１及び第２の核酸のいずれか１つの縮重配列、又はこれと実質的に同一の配列を有する核酸を含む。特定の実施形態では、縮重配列又は実質的に同一の配列は、（ｉ）～（ｉｉｉ）の核酸分子と比較して、少なくとも８５％、９０％、９５％、９９％若しくはこれ以上の配列同一性、又は１つ若しくは複数のヌクレオチド置換、又はヌクレオチド３、６、１５、３０若しくは４５個以下の差異を有する配列を指す。
別の態様では、本発明による単離核酸分子を含むベクター（例えば、クローニングベクター又は発現ベクター）を提供する。特定の実施形態では、本発明によるベクターは、例えば、プラスミド、コスミド、ファージ、レンチウイルス等である。特定の実施形態では、ベクターは、本発明による抗体又はその抗原結合断片をｉｎ ｖｉｖｏで対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）において発現させることが可能である。
別の態様では、本発明による単離核酸分子を含む宿主細胞、又は本発明によるベクターを提供する。宿主細胞は、真核細胞（例えば、哺乳動物細胞、昆虫細胞、酵母細胞）又は原核細胞（例えば、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ））であり得る。好適な真核細胞は、ＮＳ０細胞、Ｖｅｒｏ細胞、Ｈｅｌａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＢＨＫ細胞、及びＭＤＣＫＩＩ細胞を含むが、これらに限定されない。好適な昆虫細胞は、Ｓｆ９細胞を含むが、これらに限定されない。特定の実施形態では、本発明の宿主細胞は、哺乳動物細胞、例えば、ＣＨＯ（例えば、ＣＨＯ－Ｋ１、ＣＨＯ－Ｓ、ＣＨＯ ＤＸＢ１１、ＣＨＯ ＤＧ４４）である。
別の態様では、抗体又はその抗原結合断片の発現が可能となる条件下で本発明による宿主細胞を培養するステップと、培養した宿主細胞培養物から抗体又はその抗原結合断片を回収するステップとを含む、本発明による抗体又はその抗原結合断片を調製する方法を提供する。
使用、治療方法、及び医薬組成物
本発明の別の態様では、本発明による、抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、及び／又はコンジュゲート、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は、本発明による抗体又はその抗原結合断片、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含む。
特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は、本発明による宿主細胞、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含み、ここで、宿主細胞は、上記の単離核酸分子又はベクターを含む。
特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は、本発明による多特異性抗体、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含む。
特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は、本発明によるコンジュゲート、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含む。
別の態様では、本発明による医薬組成物における抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートは、対象における以下の生物学的活性：
（１）ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合の阻害又は遮断、
（２）ＴＳＬＰの活性の下方制御又は除去、
（３）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御又は遮断、
（４）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害又は遮断、
（５）Ｔｈ２様サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３又はＩＬ－５の分泌の阻害又は遮断、
（６）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性化及び／又は増殖の阻害又は遮断
のうちの少なくとも１つをもたらすものとする。
本発明の医薬組成物における抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートは、ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合を阻害又は遮断することが可能である。ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合により、アレルギー性疾患及び非アレルギー性疾患を含む多様なアレルギー性炎症疾患が生じ得る。これらの疾患は、喘息（重症喘息を含む）、特発性肺線維症、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）、アレルギー性結膜炎、アレルギー性鼻炎（ＡＲ）、ネザートン症候群（ＮＳ）、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）、食物アレルギー、アレルギー性下痢、好酸球性胃腸炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、アレルギー性真菌性副鼻腔炎、関節リウマチ、ＣＯＰＤ、全身性硬化症、ケロイド、潰瘍性大腸炎、慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）及び鼻ポリープ、慢性好酸球性肺炎、好酸球性気管支炎；腹部疾患、例えば、好酸球性胃腸炎、チャーグ・ストラウス症候群；好酸球関連胃腸疾患、例えば、好酸球増加症／好酸球性多発血管炎性肉芽腫症、好酸球性食道炎及び炎症性腸疾患；蕁麻疹、全身性肥満細胞症、皮膚肥満細胞症、並びに再発性特発性血管浮腫を含むが、これらに限定されない。したがって、本発明の医薬組成物における抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートは、上記の疾患を予防又は治療することが可能である。
また、ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合は、自己免疫疾患と関連する。したがって、本発明の医薬組成物における抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートは、自己免疫疾患、例えば、糖尿病、重症筋無力症、胃炎、天疱瘡、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ループス、大腸炎、リウマチ性疾患、乾癬、及び甲状腺疾患を予防又は治療することが可能である。
特定の実施形態では、本発明の医薬組成物における抗体又はその抗原結合断片、及び追加の医薬活性剤は、別々の成分、又は単一組成物の成分として提供する。したがって、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、追加の医薬活性剤と組み合わせて又は別々に、同時に又は逐次的に投与され得る。
特定の実施形態では、医薬組成物はまた、追加の医薬活性剤を含み得る。
本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、単独で又は他の活性剤と組み合わせて投与することができる。本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、１つ又は複数の他の活性剤とは別々に、同時に又は逐次的に投与され得る。
本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、任意の好適な免疫抑制剤と組み合わせて投与することができ、吸入、鼻腔内、又は非経口投与による抗炎症剤、特に、コルチコステロイド、例えば、ブデソニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン(beclomethasonedipropionate)、プロピオン酸フルチカゾン、シクレソニド、フロ酸モメタゾン、フロ酸フルチカゾン、プロピオン酸フルチカゾン、ブデソニド、シクレソニド、プロピオン酸ベクロメタゾン、フロ酸モメタゾン、トリアムシノロンアセトニド及びプレドニゾロンが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、一定用量の吸入式コルチコステロイド、例えば、一定用量のフロ酸フルチカゾン又はプロピオン酸フルチカゾンと組み合わせて投与することができる。一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、非ステロイド性グルココルチコイド受容体アゴニスト：モンテルカスト、プランルカスト、ザフィルルカスト、アコレート等を含むＬＴＤ４アンタゴニスト又はＬＴＢ４アンタゴニスト；Ａ２Ａアゴニスト；Ａ２Ｂアンタゴニスト；ドパミン受容体アゴニスト；又はＰＤＥ４阻害剤と組み合わせて投与することができる。一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、ピルフェニドン又はニンテダニブ又はａｖＢ６アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、気管支拡張剤、例えば、ベータ２アドレナリン受容体アゴニスト及び／又はムスカリンアンタゴニストと組み合わせて投与することができる。好適なベータ２アドレナリン受容体アゴニストとしては、ビランテロール、サルメテロール、サルブタモール、ホルモテロール、サルメファモール（ｓａｌｍｅｆａｍｏｌ）、フェノテロール、カルモテロール（ｃａｒｍｏｔｅｒｏｌ）、エタンテロール（ｅｔａｎｔｅｒｏｌ）、ナミンテロール（ｎａｍｉｎｔｅｒｏｌ）、クレンブテロール、ピルブテロール、フレロブテロール（ｆｌｅｒｏｂｕｔｅｒｏｌ）、レプロテロール、バンブテロール、インダカテロール、テルブタリン及びその塩が挙げられる。好適なムスカリンアンタゴニストとしては、臭化ウメクリジニウム、臭化チオトロピウム、臭化グリコピロニウム、イプラトロピウム及びそれらの塩、例えば、臭化ウメクリジニウムの臭化水素酸塩が挙げられる。一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、一定用量のベータ２アドレナリン受容体アゴニスト及び／又はムスカリンアンタゴニスト、例えば、一定用量のビランテロールトリフェニル酢酸若しくは臭化ウメクリジニウム、又はビランテロールトリフェニル酢酸及び臭化ウメクリジニウムの両方と組み合わせて投与することができる。
本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、１つ又は複数の気管支拡張剤及び吸入式ステロイドと組み合わせて投与することができる。そのような組合せは、二重の組合せ、例えば、フロ酸フルチカゾン及びビランテロールトリフェニル酢酸、フロ酸フルチカゾン及び臭化ウメクリジニウム、プロピオン酸フルチカゾン及びサルメテロール、ブデソニド及びホルモテロール、又はモメタゾン及びホルモテロール、並びに三重の治療、例えば、フロ酸フルチカゾン及びビランテロールトリフェニル酢酸及び臭化ウメクリジニウムを含み得る。一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、一定用量の吸入式コルチコステロイド及び１つ又は複数の気管支拡張剤、例えば、一定用量のフロ酸フルチカゾン及びビランテロールトリフェニル酢酸、又はプロピオン酸フルチカゾン及びサルメテロール、又はフロ酸フルチカゾン及び臭化ウメクリジニウム、又はフロ酸フルチカゾン、ビランテロールトリフェニル酢酸及び臭化ウメクリジニウムと組み合わせて投与することができる。
一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、サイトカイン受容体のアンタゴニスト、例えば、ＣＣＲ－１、ＣＣＲ－３、ＣＣＲ－４、ＣＣＲ－５、ＣＣＲ－６、ＣＣＲ－７、ＣＣＲ－８、ＣＣＲ－９及びＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５のアンタゴニストと組み合わせて投与することができる。一実施形態では、本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、他のサイトカイン又はサイトカイン受容体の抗体、例えば、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ３１抗体、抗ＩＬ３１Ｒ抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗エンドグリン抗体、抗ＩＬ１ｂ抗体、別の抗ＴＳＬＰ抗体若しくは抗ｈＴＳＬＰＲ抗体、又はそれらの組合せと組み合わせて投与することができる。
本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、以下の：ロイコトリエンアンタゴニスト、例えば、モンテルカスト、ザフィルルカスト及びプランルカスト；ＰＤＥ４阻害剤、例えば、ロフルミラスト；キサンテン；抗ＩｇＥ抗体；ＩＬ－１３アンタゴニスト；ＩＬ－６アンタゴニスト並びにＩＬ－１、ＩＬ－３３、ＩＬ－２５又はＴＮＦ－αのアンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
本発明による抗ＴＳＬＰ抗体又はその抗原結合断片は、抗ヒスタミン剤又は鎮咳薬、例えば、塩酸セチリジン、アセトアミノフェン、フマル酸クレマスチン、プロメタジン、ロラタジン、デスロラタジン、ジフェンヒドラミン及び塩酸フェキソフェナジン、アクチバスチン（ａｃtｉｖａｓｔｉｎｅ）、アスタゾール（ａｓｔａｚｏｌｅ）、アゼラスチン、エバスチン、エピナスチン、ミゾラスチン並びにテフェナジン（ｔｅｆｅｎａｄｉｎｅ）と組み合わせて投与することができる。
本発明によるＴＳＬＰ結合抗体又はその抗原結合断片は、限定されないが、免疫抑制剤（例えば、コルチコステロイド、非ステロイド性グルココルチコイド受容体アゴニスト、ロイコトリエンＤ４アンタゴニスト、ロイコトリエンＢ４アンタゴニスト、Ａ２Ａアゴニスト、Ａ２Ｂアンタゴニスト、ドパミン受容体アゴニスト、ピルフェニドン、ニンテダニブ又はａｖＢ６アンタゴニスト）、気管支拡張剤（例えば、ベータ２アドレナリン受容体アゴニスト、ムスカリンアンタゴニスト、短時間作用性β２受容体アゴニスト、長時間作用性β２受容体アゴニスト、短時間作用性抗コリン薬、メチルキサンチン薬、長時間作用性抗コリン薬）、他のサイトカイン若しくはサイトカイン受容体アンタゴニスト若しくは抗体（例えば、ＩＬ－１３アンタゴニスト、ＩＬ－６アンタゴニスト、ＩＬ－１、ＩＬ－３３、ＩＬ－２５若しくはＴＮＦアルファのアンタゴニスト、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ３１抗体、抗ＩＬ３１Ｒ抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗エンドグリン抗体、抗ＩＬ１ｂ抗体、別の抗ＴＳＬＰ抗体又は抗ｈＴＳＬＰＲ抗体）、抗生物質、放射線療法、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、モンテルカスト、ザフィルルカスト又はプランルカスト）、ＰＤＥ４阻害剤（例えば、ロフルミラスト、キサンテン）、抗ヒスタミン剤又は鎮咳薬から選択される１つ又は複数の他の活性剤と組み合わせて投与することができる。
特定の実施形態では、医薬組成物は、他の治療と同時に、別々に又は逐次的に、例えば、追加の医薬活性剤の前、同時、又は後に投与される。
本発明の別の態様では、本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、コンジュゲート又は多特異性抗体は、（１）ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合の阻害若しくは遮断、（２）ＴＳＬＰの活性の下方制御若しくは除去、（３）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御若しくは遮断、（４）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性化及び／若しくは増殖の阻害若しくは遮断、（５）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害若しくは遮断、（６）Ｔｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３若しくはＩＬ－５のＴＳＬＰ誘導分泌の阻害若しくは遮断、並びに／又は（７）アレルギー性疾患、アレルギー応答性、若しくは自己免疫疾患の予防若しくは治療における使用のために提供する。
本発明の別の態様では、
（１）ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合の阻害若しくは遮断、
（２）ＴＳＬＰの活性の下方制御若しくは除去、
（３）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御若しくは遮断、
（４）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性化及び／若しくは増殖の阻害若しくは遮断、
（５）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害若しくは遮断、
（６）Ｔｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３若しくはＩＬ－５のＴＳＬＰ誘導分泌の阻害若しくは遮断、並びに／又は
（７）アレルギー性疾患、アレルギー応答性、若しくは自己免疫疾患の予防若しくは治療
のための医薬の調製における、本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、コンジュゲート又は多特異性抗体の使用を提供する。
特定の実施形態では、医薬の調製のために使用する場合、本発明の宿主細胞は、上記の単離核酸分子又はベクターを含む。
特定の実施形態では、抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートを医薬の調製に使用する場合、医薬は、対象（例えば、ヒト）における喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患を予防及び／又は治療するために使用する。
特定の実施形態では、対象は、非ヒト哺乳動物及びヒトを含む哺乳動物である。特定の実施形態では、対象は、ヒトである。
特定の実施形態では、本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬は、アレルギー性疾患及び非アレルギー性疾患を含むアレルギー性炎症疾患を予防及び／又は治療するために使用する。これらの疾患は、喘息（重症喘息を含む）、特発性肺線維症、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）、アレルギー性結膜炎、アレルギー性鼻炎（ＡＲ）、ネザートン症候群（ＮＳ）、好酸球性食道炎（ＥＯＥ）、食物アレルギー、アレルギー性下痢、好酸球性胃腸炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、アレルギー性真菌性副鼻腔炎、関節リウマチ、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、全身性硬化症、ケロイド、潰瘍性大腸炎、慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）及び鼻ポリープ、慢性好酸球性肺炎、好酸球性気管支炎；腹部疾患、例えば、好酸球性胃腸炎、チャーグ・ストラウス症候群；好酸球関連胃腸疾患、例えば、好酸球増加症／好酸球性多発血管炎性肉芽腫症、好酸球性食道炎及び炎症性腸疾患；蕁麻疹、全身性肥満細胞症、皮膚肥満細胞症、並びに再発性特発性血管浮腫を含むが、これらに限定されない。
特定の実施形態では、本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートは、自己免疫関連疾患を予防及び／又は治療するために使用する。特定の実施形態では、その疾患は、甲状腺機能亢進症、糖尿病、重症筋無力症、潰瘍性大腸炎、胃炎、天疱瘡、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、エリテマトーデス、関節リウマチ等を含むが、これらに限定されない。
別の態様では、本発明は、本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬組成物のうちのいずれか１つを細胞又は対象に投与するステップを含む、ｉｎ ｖｉｖｏ又はｉｎ ｖｉｔｒｏでの、（１）ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合の阻害又は遮断、（２）ＴＳＬＰの活性の下方制御又は除去、（３）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御又は遮断、（４）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害又は遮断、（５）Ｔｈ２様サイトカインのＴＳＬＰ誘導分泌の阻害又は遮断、（６）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性化及び／又は増殖の阻害又は遮断のうちの少なくとも１つのための方法を提供する。
任意選択で、追加の医薬活性剤は、抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬組成物の投与と同時、その前又は後に投与される。
特定の実施形態では、対象は、非ヒト哺乳動物及びヒトを含む哺乳動物であり、好ましくは、対象は、ヒトである。
したがって、別の態様では、本発明は、有効量の本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む、対象における喘息、アレルギー反応、アレルギー性炎症、又は自己免疫疾患を予防及び／又は治療する方法を提供する。
本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬組成物は、医薬分野において公知の任意の剤形、例えば、錠剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、溶液、ゲル、カプセル剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、舐剤、坐剤、注射剤（注射液、注射用滅菌粉末、及び濃縮注射液を含む）、吸入剤、噴霧剤等に製剤化することができる。好ましい剤形は、意図する投与経路及び治療的使用に依存する。本発明の医薬組成物は、生成及び保存条件下で滅菌され、安定でなければならず、注射剤に調製することができる。
加えて、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、投与を容易とする医薬組成物の単位剤形で存在し得る。
本発明による医薬組成物は、「治療有効量」又は「予防有効量」の本発明の抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、又はコンジュゲートを含み得る。「予防有効量」は、疾患の発症の予防、停止、又は遅延に十分な量を意味する。「治療有効量」は、疾患に罹患している患者における疾患及びその合併症の治癒、又は少なくとも部分的な予防に十分な量、例えば、０．１ｍｇ／ｍＬ～５０００ｍｇ／ｍＬを意味する。
本発明は、対象は、哺乳動物（非ヒト哺乳動物及びヒトを含む）、例えば、ヒトであり得る。
検出方法及びキット
本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ＴＳＬＰに結合可能であり、これにより試料におけるＴＳＬＰの存在又はレベルの検出において有用である。
したがって、別の態様では、本発明は、本発明による抗体又はその抗原結合断片を含むキットを提供する。特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、検出可能なマーカーを保有する。好ましい実施形態では、キットは、本発明による抗体又はその抗原結合断片を特異的に認識する二次抗体をさらに含む。好ましくは、二次抗体は、検出可能なマーカーをさらに含む。
本発明では、検出可能なマーカーは、蛍光、分光学、光化学、生化学、免疫学、電気、光学、又は化学により検出される任意の物質であり得る。そのようなマーカーが、イムノアッセイ（例えば、酵素結合イムノアッセイ、放射性イムノアッセイ、蛍光イムノアッセイ、化学発光イムノアッセイ等）に好適である得ることが特に好ましい。そのようなマーカーは、当技術分野において周知であり、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼ等）、放射性核種（例えば、３Ｈ、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃ又は３２Ｐ）、蛍光色素（例えば、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、フルオレセイン、テトラメチルローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、フィコエリトリン（ＰＥ）、テキサスレッド、ローダミン、量子ドット又はシアニン色素誘導体（例えば、Ｃｙ７、Ａｌｅｘａ７５０））、アクリジンエステル化合物、磁気ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標））、熱量測定マーカー、例えば、コロイド金又は色ガラス若しくはプラスチック（例えば、ポリスチレン、ポリプロピレン、ラテックス等）ビーズ、及び上記のマーカーにより修飾したアビジン（例えば、ストレプトアビジン）への結合に使用するビオチンが挙げられるが、これらに限定されない。そのようなマーカーの使用は、限定されないが、米国特許第３，８１７，８３７号、第３，８５０，７５２号、第３，９３９，３５０号、第３，９９６，３４５号、第４，２７７，４３７号、第４，２７５，１４９号及び第４，３６６，２４１号を含む特許において教示されており、これらのすべては、参照により本明細書に組み込まれる。本発明により包含するマーカーは、当技術分野において公知の方法により検出することができる。例えば、放射性マーカーは、写真用フィルム又はシンチレーション計算機を使用して検出してもよく、蛍光マーカーは、放射光を検出する光検出器を使用して検出してもよい。酵素マーカーは、酵素の基質を用意し、基質に対する酵素の作用により生成される反応産物を検出することによって一般に検出してもよく、熱量測定マーカーは、単一の視覚的発色マーカーにより検出してもよい。一部の実施形態では、検出可能な上記のマーカーは、本発明の組換えタンパク質に種々の長さのリンカーを介して結合させて、潜在的立体障害を低減させ得る。
別の態様では、本発明は、本発明による抗体又はその抗原結合断片を利用するステップを含む、試料におけるＴＳＬＰの存在又はレベルを検出する方法を提供する。
好ましい実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、検出可能なマーカーを保有する。
別の好ましい実施形態では、方法は、検出可能なマーカーとともに試薬を使用して、本発明による抗体又はその抗原結合断片を検出するステップをさらに含む。
方法は、診断又は非診断目的（例えば、ＴＳＬＰ－ＴＳＬＰ／ＩＬ－７Ｒａ経路試験、薬物スクリーニング、組織化学的分析等）に使用し得る。特定の実施形態では、非診断目的のための試料は、細胞試料、例えば、細胞株又はｅｘ ｖｉｖｏでの細胞培養物である。
一実施形態では、本発明は、抗体又はその抗原結合断片及びＴＳＬＰとの複合体の形成が可能となる条件下で、本発明による抗体又はその抗原結合断片と試料を接触させるステップと、複合体の形成を検出するステップとを含む、試料におけるＴＳＬＰの存在又はレベルを検出する方法を提供する。
別の態様では、
本発明は、抗体又はその抗原結合断片及びＴＳＬＰとの複合体の形成が可能となる条件下で、本発明による抗体若しくはその抗原結合断片、多特異性抗体又はコンジュゲートと対象由来の試料を接触させるステップと、
複合体の形成を検出するステップと
を含む、対象における喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患を診断する方法を提供し、ここで、健常対照と比較したＴＳＬＰのレベルの上昇は、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患を指示する。
任意選択で、対象は、非ヒト哺乳動物及びヒトを含む哺乳動物である。好ましくは、対象は、ヒトである。
好ましくは、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患は、上記のものである。
別の態様では、本発明は、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患を診断するための医薬又はキットの調製における、本発明による抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬組成物の使用を提供する。
別の態様では、試料におけるＴＳＬＰの存在又はレベルを検出するためのキットの調製における、本発明による抗体又はその抗原結合断片の使用を提供する。別の態様では、本発明は、本発明による抗体若しくはその抗原結合断片、核酸、ベクター、宿主細胞、多特異性抗体、コンジュゲート又は医薬組成物のうちの１つ又は複数を含む、診断又は治療キットを提供する。任意選択で、診断又は治療キットは、説明書も含む。
本発明による抗体又はその抗原結合断片は、ＴＳＬＰへの結合に対する高親和性、及び良好な特異性を有する。したがって、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患の予防及び／又は治療に適する。本発明の完全ヒト抗体は、極めて高度にヒト由来であり、免疫原性応答を引き起こすことなく、ヒト対象に安全に投与することができる。したがって、本発明による抗体又はその抗原結合断片は、臨床的価値が大きいものである。
用語の定義
本明細書において、他に定義しない限り、本明細書において使用するすべての科学的及び技術的用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されるものと同一の意味を有する。加えて、本明細書において使用する細胞培養、生化学、核酸化学、免疫学研究室及びその他の操作ステップは、対応する分野において広範に使用される従来のステップである。一方、本発明をより良く理解するために、関連用語の定義及び説明を以下に提供する。
本発明及び添付の特許請求の範囲において使用する場合、単数形、例えば、「１つの（ａ／ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈上明白に他に指示しない限り、複数の意味を含む。したがって、単数の単語「１つの（ａ／ａｎ）」は、「１つ又は複数（ｏｎｅ ｏｒ ｍｏｒｅ）」の意味を含む。
本発明において使用する場合、用語「抗体」は、２対のポリペプチド鎖から典型的になる免疫グロブリン分子を指し、それぞれは、軽鎖（ＬＣ）及び重鎖（ＨＣ）を有する。軽鎖は、カッパ（κ）又はラムダ（λ）のいずれかの軽鎖に分類される。重鎖は、μ、δ、γ、α又はεに分類することができ、抗体のアイソタイプは、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＥとそれぞれ定義することができる。軽鎖及び重鎖では、可変及び定常領域は、アミノ酸約１２個以上の「Ｊ」セグメントにより連結され、重鎖はまた、アミノ酸約３個以上の「Ｄ」セグメントを含む。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）からなる。重鎖定常領域は、３つのドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメインＣＬからなる。定常ドメインは、抗原への抗体の結合には直接関与しないが、種々のエフェクター機能を示し、例えば、免疫系の種々の細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１の成分（Ｃ１ｑ）を含む、宿主組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介する。また、ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる比較的保存された領域が散在する高頻度可変領域（相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる）に細分することができる。各ＶＨ及びＶＬは、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配置される３つのＣＤＲ及び４つのＦＲからなる。各重鎖／軽鎖対の可変領域（ＶＨ及びＶＬ）は、抗原結合部位をそれぞれ形成する。
本発明では、本発明による抗体又はその抗原結合断片に含まれるＣＤＲは、当技術分野において公知の種々のナンバリングシステムに従って決定し得る。特定の実施形態では、本発明による抗体又はその抗原結合断片に含まれるＣＤＲは、好ましくは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ又はＩＭＧＴナンバリングシステムにより決定する。
本発明において使用する場合、用語「フレームワーク領域」又は「ＦＲ」残基は、上に定義するＣＤＲ残基以外の抗体の可変領域内のアミノ酸残基を指す。
本発明において使用する場合、用語「生殖細胞系列抗体遺伝子」（germlineantibody gene）は、遺伝子再配列の成熟プロセス、及び特定の免疫グロブリンの発現を生じる成熟を受けない非リンパ球により発現する免疫グロブリンをコードする遺伝子である。本発明の種々の実施形態によりもたらされる利点は、生殖細胞系列抗体遺伝子によりコードされるアミノ酸配列が、成熟抗体遺伝子によりコードされるアミノ酸配列よりも重要な、個々の動物種の特性を示すアミノ酸配列構造を保持するという共通認識に由来する。したがって、この種に治療的に適用する場合、このアミノ酸配列は、この種により、外因性物質として認識され難い。
用語「抗体」は、抗体を生成するための特定のいかなる方法によっても制限されない。例えば、これは、組換え抗体、モノクローナル抗体、及びポリクローナル抗体を含む。抗体は、種々のアイソタイプの抗体、例えば、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４サブタイプ）、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、ＩｇＥ又はＩｇＭ抗体であり得る。
本発明において使用する場合、抗体の「抗原結合断片」の用語は、抗体のポリペプチド断片、例えば、完全長抗体のポリペプチド断片を指し、これは、完全長抗体が結合するものと同一の抗原に特異的に結合する能力を保持し、及び／又は抗原への特異的結合について完全長抗体と競合し、これは「抗原結合部分」としても知られる。一般には、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｃｈ．７（Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．、２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．（１９８９））を参照されたく、あらゆる目的のために、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。抗体の抗原結合断片は、組換えＤＮＡ技術、又はインタクトな抗体の酵素的若しくは化学的切断により生成することができる。抗原結合断片の非限定的な例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ｄＡｂ及び相補性決定領域（ＣＤＲ）断片、一本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、ダイアボディ、直鎖抗体、ナノボディ（例えば、Ａｂｌｙｎｘの技術による）、ドメイン抗体（例えば、Ｄｏｍａｎｔｉｓの技術による）、及びポリペプチドに対する特異的抗原結合能力の付与に十分な、抗体の少なくとも一部分を含むポリペプチドが挙げられる。修飾抗体バリアントの改変は、Ｈｏｌｌｉｇｅｒら、２００５；Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２３：１１２６～１１３６に総説が記載されている。
本発明において使用する場合、用語「完全長抗体」は、２つの「完全長重鎖」及び２つの「完全長軽鎖」からなる抗体を意味する。ここで、「完全長重鎖」は、Ｎ末端からＣ末端に、重鎖可変領域（ＶＨ）、重鎖定常領域ＣＨ１ドメイン、ヒンジ領域（ＨＲ）、重鎖定常領域ＣＨ２ドメイン、及び重鎖定常領域ＣＨ３ドメインからなるポリペプチド鎖を指し、完全長抗体がＩｇＥアイソタイプである場合、任意選択で、重鎖定常領域ＣＨ４ドメインをさらに含む。好ましくは、「完全長重鎖」は、Ｎ末端からＣ末端に、ＶＨ、ＣＨ１、ＨＲ、ＣＨ２及びＣＨ３からなるポリペプチド鎖である。「完全長軽鎖」は、Ｎ末端からＣ末端に、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）からなるポリペプチド鎖である。２対の完全長抗体鎖は、ＣＬ及びＣＨ１の間のジスルフィド架橋、並びに２つの完全長重鎖のＨＲ間のジスルフィド架橋により結合する。本発明の完全長抗体は、単一の種、例えば、ヒトに由来してもよく、キメラ抗体又はヒト化抗体であってもよい。本発明の完全長抗体は、ＶＨ及びＶＬ対によりそれぞれ形成される２つの抗原結合部位を含み、その部位は、同一の抗原を特異的に認識／結合する。
本発明において使用する場合、用語「Ｆｄ断片」は、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなる抗体断片を意味し、用語「ｄＡｂ断片」は、ＶＨドメインからなる抗体断片を意味し（Ｗａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ３４１：５４４ ５４６（１９８９））、用語「Ｆａｂ断片」は、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる抗体断片を意味し、用語「Ｆ（ａｂ’）２断片」は、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により結合する２つのＦａｂ断片を含む抗体断片を意味し、用語「Ｆａｂ’断片」は、Ｆ（ａｂ’）２断片における２つの重鎖断片を結合するジスルフィド架橋の還元により得られる断片を意味し、これは完全軽鎖、及び重鎖のＦｄ断片（ＶＨ及びＣＨ１ドメインから構成される）からなる。
本発明において使用する場合、用語「Ｆｖ断片」は、単一アームの抗体のＶＬ及びＶＨドメインからなる抗体断片を意味する。Ｆｖ断片は、完全抗原結合部位を形成可能な最も小型の抗体断片であると一般に考えられる。６つのＣＤＲにより、抗体に対する抗原結合特異性が付与されると一般に考えられる。しかし、１つの可変領域（例えば、３つの抗原特異的ＣＤＲのみを含むＦｄ断片）であっても、完全結合部位よりも低い親和性を有する可能性はあるが、抗原を認識及び結合し得る。
本発明において使用する場合、用語「Ｆｃ断片」は、抗体の第１の重鎖の第２及び第３の定常領域を、抗体の第２の重鎖の第２及び第３の定常領域にジスルフィド架橋を介して結合させることにより形成される抗体断片を意味する。抗体のＦｃ断片は、多くの異なる機能を有するが、抗原結合には関与しない。
本発明において使用する場合、用語「ｓｃＦｖ」は、ＶＬ及びＶＨドメインを含む一本鎖ポリペプチドを指し、ここで、ＶＬ及びＶＨは、リンカーにより結合する（例えば、Ｂｉｒｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２４２：４２３～４２６（１９８８）；Ｈｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：５８７９～５８８３（１９８８）；並びにＰｌｕｃｋｔｈｕｎ、Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、ｖｏｌ．１１３、Ｅｄ．Ｒｏｓｅｂｕｒｇ及びＭｏｏｒｅ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ｐｐ．２６９～３１５（１９９４）を参照）。そのようなｓｃＦｖ分子は、一般構造：ＮＨ２－ＶＬ－リンカー－ＶＨ－ＣＯＯＨ又はＮＨ２－ＶＨ－リンカー－ＶＬ－ＣＯＯＨを有し得る。当技術分野において好適なリンカーは、反復ＧＧＧＧＳアミノ酸配列又はそのバリアントからなる。例えば、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）４又はそのバリアントのリンカーを使用することができる（Ｈｏｌｌｉｇｅｒら（１９９３）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４～６４４８）。本発明において使用し得る他のリンカーは、Ａｌｆｔｈａｎら（１９９５）、ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ．８：７２５～７３１；Ｃｈｏｉら（２００１）、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：９４～１０６；Ｈｕら（１９９６）、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５６：３０５５～３０６１；Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖら（１９９９）、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：４１～５６及びＲｏｏｖｅｒｓら（２００１）、Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌに記載されている。一部の場合では、ジスルフィド架橋はまた、ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬの間に存在し得る。本発明において使用する場合、用語「ｄｉ－ｓｃＦｖ」は、２つのｓｃＦｖの結合により形成された抗体断片を指す。
本発明において使用する場合、用語「ダイアボディ」は、ＶＨ及びＶＬドメインが一本鎖ポリペプチドに発現するが、使用するリンカーが短すぎて、その鎖の２つのドメイン間で対形成できず、そのため、ドメインが他の鎖の相補性ドメインと強制的に対形成し、２つの抗原結合部位が生成されることを意味する（例えば、ＨｏｌｌｉｇｅｒＰ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４～６４４８（１９９３）及びＰｏｌｊａｋ Ｒ．Ｊ．ら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ２：１１２１～１１２３（１９９４）を参照）。
本発明において使用する場合、「抗体ミメティック」は、抗体として抗原に特異的に結合するが、抗体構造を有しないものを指す。これらは、通常、約３～２０ｋＤａのモル質量を有する人工ペプチド又はタンパク質である。例としては、設計したアンキリン反復タンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）及びフィノマーがある。設計したアンキリン反復タンパク質（ＤＡＲＰｉｎ）は、中国特許出願公開第１０４３４１５２９号に記載のように、ＩｇＧ抗体、ｓｃＦｖ－Ｆｃ抗体断片、又はこれらの組合せに結合させることができる。抗ＩＬ－１７ａフィノマーは、国際公開第２０１５１４１８６２号に記載のように、抗ＩＬ－６Ｒ抗体に結合させる。
上記抗体断片のそれぞれは、完全長抗体が結合するものと同一の抗原に特異的に結合する能力を保持し、及び／又は抗原への特異的結合について完全長抗体と競合する。
抗原結合断片（例えば、上記の抗体断片）は、所与の抗体（例えば、本発明により提供する抗体）から当業者に公知の従来技術（例えば、組換えＤＮＡ技術又は酵素的若しくは化学的切断方法）を使用して得てもよく、抗体の抗原結合断片は、インタクトな抗体に対するものと同様の方法で詳細にスクリーニングする。
本発明では、文脈上他に明白に指示しない限り、用語「抗体」に言及する場合、インタクトな抗体だけでなく、その抗原結合断片も含む。
本発明において使用する場合、用語「モノクローナル抗体」、「ＭｃＡｂ」及び「ｍＡｂ」は、同一の意味を有し、互換的に使用するが、これは、高度に相同な抗体分子の集団、すなわち、自然発生的に生じ得る天然変異を除いて同一の抗体分子の集団由来の抗体を指す。モノクローナル抗体は、抗原の単一エピトープに対する高い特異性を有する。モノクローナル抗体と比較して、ポリクローナル抗体は、通常、少なくとも２つ以上の異なる抗体を含み、これらは、通常、抗原の異なるエピトープを認識する。その上、「モノクローナル」の修飾語は、抗体の特徴が、高度に相同な抗体の集団から得られることを単に示し、抗体を調製する特定の任意の方法を必要とするとは理解されない。
本発明において使用する場合、用語「キメラ抗体」は、その軽鎖又は／及び重鎖の一方の部分が、一抗体（特定の種に由来するか又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属し得る）に由来し、軽鎖又は／及び重鎖の他方の部分が、別の抗体（同一若しくは異なる種に由来するか又は同一若しくは異なる抗体クラス若しくはサブクラスに属し得る）に由来するような抗体を意味し、これは、いずれの場合においても、標的抗原に対する結合活性を保持する（Ｃａｂｉｌｌｙらの米国特許第４，８１６，５６７号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１ ６８５５（１９８４））。
本発明では、本発明の抗体の期待される特質としては、（１）ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合の阻害又は遮断、（２）ＴＳＬＰの活性の下方制御又は除去、（３）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御又は遮断、（４）Ｔｈ２様サイトカインの分泌の阻害又は遮断、（５）アレルギー性炎症疾患の予防及び／又は治療が挙げられる。本発明のヒト化抗体は、親抗体（ヒト抗体又はマウス－ヒトキメラ抗体）の期待される上記の特質のうちの１つ又は複数を保持する。
ヒト化抗体の調製では、マウスＣＤＲ領域は、当技術分野において公知の方法を使用して、ヒトフレームワーク配列に挿入することができる（Ｗｉｎｔｅｒの米国特許第５，２２５，５３９号；米国特許第５，５３０，１０１号；第５，５８５，０８９号；第５，６９３，７６２号及びＱｕｅｅｎらの第６，１８０，３７０号；並びにＬｏ，Ｂｅｎｎｙ，Ｋ．Ｃ．，ｅｄｉｔｏｒ，ｉｎ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、ｖｏｌｕｍｅ ２４８、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ、２００４を参照）。或いは、免疫化後に内因性免疫グロブリンの生成は不可能であるが、インタクトなヒト抗体ライブラリーの生成は可能である遺伝子導入動物を利用することもできる（例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、１９９３、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：２５５１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、１９９３、Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５～２５８；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎら、１９９３、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７：３３；及びＤｕｃｈｏｓａｌら、１９９２、Ｎａｔｕｒｅ ３５５：２５８；Ｌｏｎｂｅｒｇら（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ ３６８（６４７４）：８５６～８５９；国際公開第０２／４３４７８号を参照）。抗体ヒト化の他の方法は、ファージディスプレイ技術を含む（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９９１、２２２：５８１～５９７；Ｖａｕｇｈａｎら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ １４：３０９）。
本発明において使用する場合、用語「ヒト化度」は、ヒト化抗体における非ヒトアミノ酸残基の数を評価するための指標である。ヒト化抗体のヒト化度は、例えば、ＩＭＧＴウェブサイトのＤｏｍａｉｎＧａｐＡｌｉｇｎにより、ヒトＶドメインとの可変領域配列の相同性について、予想することができる。
本発明において使用する場合、用語「特異的に結合」は、２つの分子間の非ランダム結合反応、例えば、抗体及びこれに対する抗原の間の反応を指す。特異的結合相互作用の強度又は親和性は、相互作用の平衡解離定数（ＫＤ）により示すことができる。本発明では、用語「ＫＤ」は、特定の抗体－抗原相互作用の解離平衡定数を指し、これは、抗体及び抗原の間の結合親和性を記載のために使用する。解離平衡定数が小さいほど、抗体－抗原結合が堅固であり、抗体及び抗原の間の親和性が高い。特定の実施形態では、抗原に特異的に結合する抗体（又は抗原に対して特異的な抗体）は、抗体が、約１０－８Ｍ未満、例えば、約１０－８Ｍ、１０－９Ｍ、１０－１０Ｍ又は１０－１１Ｍ以下のＫＤで抗原に結合することを意味する。一部の実施形態では、ＫＤ≦１０×１０－８Ｍである場合、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、ＴＳＬＰに特異的に結合するものと考えられる。
２つの分子間の特異的結合性は、当技術分野において周知の方法を使用して測定することができる。この方法のうちの１つは、抗原結合部位／抗原複合体の形成及び解離の速度を測定するステップを含む。「結合速度定数」（ｋａ又はｋｏｎ）及び「解離速度定数」（ｋｄｉｓ又はｋｏｆｆ）の両方は、濃度並びに会合及び解離の実際の速度から算出することができる（Ｍａｌｍｑｖｉｓｔ Ｍ、Ｎａｔｕｒｅ、１９９３、３６１：１８６～１８７を参照）。ｋｄｉｓ／ｋｏｎの比率は、解離定数ＫＤに等しい（Ｄａｖｉｅｓら、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ、１９９０；５９：４３９～４７３を参照）。ＫＤ、ｋｏｎ及びｋｄｉｓ値は、有効な任意の方法により測定することができる。特定の実施形態では、解離定数は、生物発光干渉法（例えば、ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｏｃｔｅｔアッセイ）により測定することができる。加えて、解離定数はまた、表面プラズモン共鳴技術（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ）又はＫｉｎｅｘａにより測定することができる。
本発明において使用する場合、用語「ベクター」は、ポリヌクレオチドを挿入可能な核酸媒体を指す。挿入したポリヌクレオチドによりコードされるタンパク質の発現が可能である場合、ベクターは、発現ベクターと呼ぶ。ベクターは、形質転換、形質導入、又はトランスフェクションにより宿主細胞に導入することができ、これにより、保有する遺伝物質エレメントを宿主細胞において発現させることができる。ベクターは、当業者に周知であり、プラスミド；ファージミド；コスミド；人工染色体、例えば、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、細菌人工染色体（ＢＡＣ）又はＰ１由来人工染色体（ＰＡＣ）；ファージ、例えば、λファージ又はＭ１３ファージ、及び動物ウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。ベクターとして使用可能な動物ウイルスは、レトロウイルス（レンチウイルスを含む）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス）、ポックスウイルス、バキュロウイルス、パピローマウイルス、パポバウイルス（例えば、ＳＶ４０）を含むが、これらに限定されない。ベクターは、発現を制御するエレメントを含んでもよく、プロモーター配列、転写開始配列、エンハンサー配列、選択エレメント及びレポーター遺伝子が挙げられるが、これらに限定されない。加えて、ベクターは、複製起点も含み得る。
本発明において使用する場合、用語「宿主細胞」は、ベクターを導入可能な細胞を指し、原核細胞、例えば、大腸菌、若しくは枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、真菌細胞、例えば、酵母細胞、若しくはアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、昆虫細胞、例えば、ショウジョウバエ（ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）Ｓ２細胞、若しくはＳｆ９、又は動物細胞、例えば、線維芽細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＮＳＯ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＢＨＫ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、若しくはヒト細胞が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明において使用する場合、用語「同一性」は、２つのポリペプチド又は２つの核酸間の配列適合度を指すために使用する。比較のための２つの配列の位置が、同一の塩基又はアミノ酸単量体サブユニットにより占有される（例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれの位置が、アデニンにより占有されるか、又は２つのポリペプチドのそれぞれの位置が、リジンにより占有される）場合、分子は、その位置において同一である。２つの配列間の「パーセント同一性」は、２つの配列により共有される適合する位置の数を比較する位置の数で割り１００を掛けた関数である。例えば、２つの配列において１０個の位置のうちの６個の位置が適合する場合、２つの配列は、６０％同一である。例えば、ＣＴＧＡＣＴ及びＣＡＧＧＴＴのＤＮＡ配列は、５０％の同一性を有する（計６つの位置のうちの３つの位置が適合する）。典型的には、２つの配列を比較し、最大同一性に対してアラインメントする。そのようなアラインメントは、例えば、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎら（１９７０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３～４５３の方法を使用することにより実現することができ、これは、コンピュータープログラム、例えば、Ａｌｉｇｎプログラム（ＤＮＡｓｔａｒ，Ｉｎｃ）により好都合に実施することができる。加えて、２つのアミノ酸配列間のパーセンテージ同一性は、ＧＣＧソフトウェアパッケージに組み込まれているＧＡＰプログラム（ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍより入手可能）におけるＮｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．４８：４４４～４５３（１９７０））のアルゴリズムにより、Ｂｌｏｓｓｕｍ Ｍａｔｒｉｘ６２又はＰＡＭ２５０のいずれか、１６、１４、１２、１０、８、６又は４のギャップウェイト（ｇａｐ ｗｅｉｇｈｔ）、及び１、２、３、４、５又は６のレングスウェイト（ｌｅｎｇｔｈ ｗｅｉｇｈｔ）を使用して判定することができる。また、２つのアミノ酸配列間の％同一性は、Ｅ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔｅｒ．Ａｐｐ．Ｂｉｏｓｃｉ．、４：１１～１７（１９８８））のアルゴリズムにより判定することができる。
本発明において使用する場合、「同一性％」を有する配列は、アラインメントするか又は由来する配列の重要な生物学的活性、例えば、抗体結合特異性を保持する。１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失、若しくは付加、又はこれらの任意の組合せを有する配列は、アラインメントするか又は由来する配列の重要な生物学的活性、例えば、抗体結合特異性を保持する。「同一性％」又はヌクレオチド３、６、１５、３０若しくは４５個以下の差異を有するヌクレオチド配列は、アラインメントするか又は由来するヌクレオチド配列に類似する機能を示すことがあり、例えば、発現したタンパク質のすべては、同一の抗原又は分子に特異的に結合し得る。
本発明において使用する場合、用語「保存的置換」は、有害に影響しないか、又はアミノ酸配列を含むタンパク質／ポリペプチドの予想される特質を変化させない、アミノ酸の置換を意味する。例えば、保存的置換は、当技術分野において公知の標準技術、例えば、部位特異的変異誘発、及びＰＣＲ媒介変異誘発により導入し得る。保存的アミノ酸置換は、類似の側鎖を有するアミノ酸残基、例えば、対応するアミノ酸残基に物理的又は機能的に類似する（例えば、類似のサイズ、形、電荷、共有又は水素結合を形成する能力を含む化学的特質等を有する）残基とのアミノ酸残基の置換を含む。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野において定義されている。これらのファミリーは、アルカリ性側鎖（例えば、リジン、アルギニン及びヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、極性無電荷側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、ベータ分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸を含む。したがって、対応するアミノ酸残基を、同一の側鎖ファミリー由来の別のアミノ酸残基と置き換えることが好ましい。アミノ酸の保存的置換を同定するための方法は、当技術分野において周知である（例えば、Ｂｒｕｍｍｅｌｌら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１１８０～１１８７（１９９３）；Ｋｏｂａｙａｓｈｉら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．１２（１０）：８７９～８８４（１９９９）；及びＢｕｒｋｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｅｔ ＵＳＡ ９４：４１２～４１７（１９９７）を参照されたく、これらは参照により本明細書に組み込まれる）。
本発明に関与する従来のアミノ酸２０個の編集（ｃｏｍｐｉｌａｔｉｏｎ）は、従来の用法に従う。例えば、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ－Ａ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｅ．Ｓ．Ｇｏｌｕｂ ａｎｄ Ｄ．Ｒ．Ｇｒｅｎ，Ｅｄｓ．，Ｓｉｎａｕｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ、Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ、Ｍａｓｓ．（１９９１））を参照されたく、これは参照により本明細書に組み込まれる。本発明では、用語「ポリペプチド」及び「タンパク質」は、同一の意味を有し、互換的に使用する。また、本発明では、アミノ酸は、当技術分野において周知の一文字及び三文字の略語により一般に表す。例えば、アラニンはＡ又はＡｌａ、アルギニンはＲ又はＡｒｇ、グリシンはＧ又はＧｌｙ、グルタミンはＱ又はＧｌｎとして表すことができる。
本発明において使用する場合、用語「薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤」は、対象及び活性成分と薬理学的及び／又は生理学的に適合する担体及び／又は賦形剤を意味し、これは、当技術分野において周知であり（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．Ｇｅｎｎａｒｏ ＡＲ編集、１９ｔｈ ｅｄ．Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ：Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５を参照）、ｐＨ調節剤、界面活性剤、アジュバント、イオン強度増強剤、希釈剤、浸透圧維持試薬、吸収遅延試薬、保存剤が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、ｐＨ調節剤としては、リン酸緩衝液が挙げられるが、これに限定されない。界面活性剤としては、カチオン性、アニオン性、又は非イオン性界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ－８０が挙げられるが、これに限定されない。イオン強度増強剤としては、塩化ナトリウムが挙げられるが、これに限定されない。保存剤としては、種々の抗細菌及び抗真菌剤、例えば、ｐ－ヒドロキシ安息香酸、トリクロロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール、フェノール、ソルビン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。浸透圧維持試薬としては、糖、ＮａＣｌ等が挙げられるが、これらに限定されない。吸収遅延試薬としては、モノステアリン酸及びゼラチンが挙げられるが、これらに限定されない。希釈剤としては、水、水性緩衝液（例えば、緩衝食塩水）、アルコール及びポリオール（例えば、グリセリン）等が挙げられるが、これらに限定されない。保存剤としては、種々の抗細菌及び抗真菌剤、例えば、チオメルサレート（ｔｈｉｏｍｅｒｓａｌａｔｅ）、２－フェノキシエタノール、ｐ－ヒドロキシ安息香酸、トリクロロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール、フェノール、ソルビン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。安定化剤は、当業者により一般に理解される意味を有し、これは、薬物における活性成分の所望の活性を安定化することができ、グルタミン酸ナトリウム、ゼラチン、ＳＰＧＡ、糖（例えば、ソルビトール、マンニトール、デンプン、スクロース、ラクトース、デキストラン又はグルコース）、アミノ酸（例えば、グルタミン酸、グリシン）、タンパク質（例えば、乾燥ホエイ、アルブミン又はカゼイン）又はこれらの分解産物（例えば、ラクトアルブミン加水分解物）を含むが、これらに限定されない。
本発明において使用する場合、用語「予防」は、疾患又は症状又は徴候（例えば、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患）の発症をｉｎ ｖｉｖｏで対象において予防又は遅延させるためのプロセスを指す。本発明において使用する場合、用語「治療」は、有益又は所望の臨床結果を達成するためのプロセスを指す。本発明の目的では、有益又は所望の臨床結果は、検出可能又は検出不可能にかかわらず、徴候の軽減、疾患の程度の減少、疾患状態の安定化（すなわち、悪化しないこと）、疾患進行の遅延又は緩徐化、疾患状態の回復又は緩和、及び徴候の寛解（一部又は全部にかかわらず）を含むが、これらに限定されない。加えて、「治療」はまた、予想される生存（治療しない場合）と比較した生存の延長を意味し得る。
本発明において使用する場合、用語「対象」は、哺乳動物、例えば、霊長類、例えば、非ヒト霊長類又はヒトを指す。一部の実施形態では、対象（例えば、ヒト）は、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、若しくは自己免疫疾患を有するか、又はそのような疾患を罹患するリスクを有する。
本発明において使用する場合、用語「有効量」は、所望の作用の達成又は少なくとも部分的な達成に十分な量を指す。例えば、疾患（例えば、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患）の予防のための有効量は、疾患（例えば、喘息、アレルギー性炎症、アレルギー反応、又は自己免疫疾患）の予防、停止、又は遅延に十分な量であり、治療有効量は、疾患にすでに罹患している患者の疾患及びその合併症の治癒又は少なくとも部分的な予防に十分な量を指す。そのような有効量の決定は、当業者の能力の及ぶ範囲内である。例えば、治療的使用に有効な量は、治療する疾患の重症度、患者自身の免疫系の一般状況、患者の一般状態、例えば、年齢、体重及び性別、投与経路、並びに同時に施す他の治療等に依存する。
本発明において使用する場合、用語「免疫細胞」は、造血系由来であり、免疫応答における役割を果たす細胞、例えば、リンパ球、例えば、Ｂ細胞及びＴ細胞；ナチュラルキラー細胞；骨髄系細胞、例えば、単球、マクロファージ、好酸球、マスト細胞、好塩基球、及び顆粒球を含む。
本発明において使用する場合、用語「免疫応答」は、免疫細胞（例えば、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、又は顆粒球）及び免疫細胞又は肝臓により産生される可溶性巨大分子（抗体、サイトカイン及び補体を含む）の作用を意味し、これにより、侵襲性病原体、病原体感染細胞若しくは組織、がん細胞、又は正常ヒト細胞若しくは組織の選択的損傷、破壊、又は人体からの除去が、自己免疫性又は病理学的炎症の場合に生じる。本明細書では、用語「抗原特異的Ｔ細胞応答」は、Ｔ細胞に特異的な抗原によりＴ細胞が刺激される場合、Ｔ細胞によって生じる免疫応答を指す。抗原特異的刺激に応答してＴ細胞により生じる応答の非限定的な例としては、Ｔ細胞の増殖及びサイトカイン（例えば、ＩＬ－２）の産生が挙げられる。
本発明において使用する場合、用語「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列のＦｃ領域又はアミノ酸配列バリアントのＦｃ領域）に寄与し、抗体アイソタイプにより異なる生物学的活性を指す。
用語「薬学的に許容できる」は、分子的実体、分子の断片又は組成物が動物又はヒトに適切に投与される場合、望ましくない、アレルギー性、又は他の有害反応を生じないことを意味する。薬学的に許容できる担体又はその成分として使用され得る物質の具体例としては、糖（例えば、ラクトース）、デンプン、セルロース及びその誘導体、植物油、ゼラチン、ポリオール（例えば、ポリエチレングリコール）、アルギン酸等が挙げられる。
本発明の有益な効果
先行技術と比較して、本発明の技術的解決法は、以下の有益な効果を有する。
（１）本発明の抗体は、ＴＳＬＰを高い親和性で特異的に認識／結合し、ＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７ＲＲへの結合を阻害又は遮断し、Ｂａ／Ｆ３細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏ／ｉｎ ｖｉｖｏでのＴＳＬＰ誘導による増殖を阻害又は遮断し、ＰＢＭＣのＴＳＬＰ誘導活性化及びサイトカイン分泌を遮断することができる。そのため、本発明の抗体は、マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞ＴＳＬＰ誘導活性化及び増殖を阻害又は遮断し、ＴＳＬＰ誘導ＯＸ４０Ｌ発現、オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌、又はＴｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３又はＩＬ－５のＴＳＬＰ誘導分泌を阻害又は遮断することが可能である。したがって、本発明の抗体は、喘息、他のアレルギー反応、又は自己免疫疾患の予防及び／又は治療における可能性を有する。
（２）本発明の抗体は、良好な熱安定性、親水性、等電点、及びＦｃＲｎに対する親和性を有する。
（３）本発明の抗体の一部は、完全ヒト抗体であり、そのため、免疫原性応答を引き起こすことなく、対象に安全に投与することができる。したがって、本発明の抗体は、臨床的価値が大きいものである。
略語
ＣＤＲ 免疫グロブリンの可変領域内の相補性決定領域
ＦＲ 抗体フレームワーク領域：ＣＤＲ残基以外の抗体の可変領域内のアミノ酸残基
ＶＨ 抗体の重鎖可変領域
ＶＬ 抗体の軽鎖可変領域
ＩｇＧ 免疫グロブリンＧ
ＡｂＭ ＡｂＭ ＣＤＲの定義は、Ｍａｒｔｉｎの研究（Ｍａｒｔｉｎ ＡＣＲ、Ｃｈｅｅｔｈａｍ ＪＣ、Ｒｅｅｓ ＡＲ（１９８９）Ｍｏｄｅｌｌｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｌｏｏｐｓ：Ａ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｌｇｏｒｉｔｈｍ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８６：９２６８～９２７２）に由来し、これは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの定義の部分を統合している。
Ｋａｂａｔ Ｅｌｖｉｎ Ａ．Ｋａｂａｔにより提唱された免疫グロブリンアラインメント及びナンバリングシステム（例えば、Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈＥｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９９１を参照）。
Ｃｈｏｔｈｉａ Ｃｈｏｔｈｉａらにより提唱された免疫グロブリンナンバリングシステム。リング構造領域の位置に基づいてＣＤＲ領域の境界を同定するための古典的規則である（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ＆Ｌｅｓｋ（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１～９１７；Ｃｈｏｔｈｉａら（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７８～８８３を参照）。
ＩＭＧＴ Ｌｅｆｒａｎｃらにより開始された国際免疫遺伝学情報システム（登録商標）（ＩＭＧＴ）に基づくナンバリングシステム。Ｌｅｆｒａｎｃら、Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐａｒａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：５５～７７、２００３を参照。
ｍＡｂ モノクローナル抗体
ＥＣ５０ ５０％有効性又は結合を生じる濃度
ＩＣ５０ ５０％阻害を生じる濃度
ＥＬＩＳＡ 酵素結合免疫吸着アッセイ
ＰＣＲ ポリメラーゼ連鎖反応
ＨＲＰ 西洋ワサビペルオキシダーゼ
ＴＳＬＰ 胸腺間質性リンパ球新生因子
ＴＳＬＰＲ 胸腺間質性リンパ球新生因子受容体
ＩＬ７Ｒα インターロイキン７受容体アルファサブユニット
ＴＡＲＣ 胸腺及び活性化制御ケモカイン
ｈＦｃ ヒトＩｇＧ抗体のＦｃセグメント
ＫＤ 解離平衡定数
ＣＤＲ－Ｈ１ 免疫グロブリンの重鎖可変領域内の相補性決定領域１
ＣＤＲ－Ｈ２ 免疫グロブリンの重鎖可変領域内の相補性決定領域２
ＣＤＲ－Ｈ３ 免疫グロブリンの重鎖可変領域内の相補性決定領域３
ＣＤＲ－Ｌ１ 免疫グロブリンの軽鎖可変領域内の相補性決定領域１
ＣＤＲ－Ｌ２ 免疫グロブリンの軽鎖可変領域内の相補性決定領域２
ＣＤＲ－Ｌ３ 免疫グロブリンの軽鎖可変領域内の相補性決定領域３
ヒトＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα両遺伝子を高発現するＢａ／Ｆ３細胞株の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対するキメラ抗体２５Ａ５Ｃ５の阻害活性の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対するキメラ抗体２７Ｃ２Ｂ６及び３７Ｃ２Ｄ１０の阻害活性の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対するキメラ抗体４３Ｂ１Ａ８及び９０Ｈ３Ｈ１１の阻害活性の検出を示す図である。 ヒトＴＳＬＰタンパク質に対する組換え完全ヒト抗体２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧ、２７Ｃ２Ｂ６－ｈＩｇＧ及び３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧの結合親和性の検出を示す図である。 ヒトＴＳＬＰタンパク質に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧの結合親和性の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧ、２７Ｃ２Ｂ６－ｈＩｇＧ及び３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧの阻害活性の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧの阻害活性の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧの阻害活性の検出を示す図である。 ＰＢＭＣによるＴＡＲＣの分泌に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧの阻害活性の検出を示す図である。 組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧの熱安定性（Ｔｍ）の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の阻害活性の検出を示す図である。 Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１の阻害活性の検出を示す図である。 ＰＢＭＣ細胞によるＭＤＣサイトカインの分泌に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の阻害活性の検出を示す図である。 カニクイザルにおける組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２分子の薬物動態解析を示す図である。
配列情報
本発明に関連する配列情報を以下の表に記載する。
Figure 2023505408000001
Figure 2023505408000002
本発明を、以下の実施例を参照して、ここに例示し、これらは、本発明を例示することを意図するが、制限することは意図しない。
他に指示しない限り、本発明において使用する分子生物学実験及びイムノアッセイのプロセスは、Ｊ．Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、２ｎｄ ｅｄ．、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ、１９８９；及びＦ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、３ｒｄ ｅｄ．、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、１９９５に記載のプロセスを参照して本質的に実行する。当業者は、実施例が本発明を例示することを意図し、本発明の範囲を制限することは意図しないことを理解するであろう。
実施例１：抗原の調製
ヒトＴＳＬＰ又はサルＴＳＬＰを、大腸菌又は哺乳動物細胞において発現させた。ヒトＴＳＬＰのアミノ酸配列は、ＮＣＢＩのタンパク質データベースにおけるＮＰ＿１４９０２４．１を参照する。カニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ＴＳＬＰのアミノ酸配列は、ＮＣＢＩのタンパク質データベースにおけるＸＰ＿００５５５７５５５．１を参照する。本出願において使用する抗原は、修飾形態で発現するＴＳＬＰ、例えば、ＴＳＬＰ配列のＣ末端に融合する標識としての６つの連続するヒスチジンの融合物（ＴＳＬＰ－Ｈｉｓ）を含む。上記のヒト及びサルＴＳＬＰ配列は、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（Ｎａｎｊｉｎｇ）Ｃｏ．，Ｌｔｄによりコドン最適化され、発現ベクターに合成し（すなわち、ヒトＴＳＬＰの完全コード配列を含むプラスミド）、大腸菌又は哺乳動物細胞ＨＥＫ２９３Ｆにおいて発現させ、精製した。
ＴＳＬＰの天然受容体は、ヘテロ二量体であり、これは、ヒトＴＳＬＰＲ及びヒトＩＬ７Ｒアルファ（ＩＬ７Ｒα）サブユニットから構成される。ヒトＴＳＬＰＲの配列は、Ｕｎｉｐｒｏｔ：Ｑ９ＨＣ７３．１を参照し、ヒトＩＬ７Ｒαサブユニットの配列は、ＧｅｎＢａｎｋ：ＡＡＲ０８９０８．１を参照する。ヒトｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃ融合タンパク質は、ヒトＩＬ７Ｒαの細胞外ドメイン（Ｅ２１－Ｄ２３９）、ヒトＴＳＬＰＲ受容体の細胞外ドメイン（Ｑ２３－Ｋ２３１）及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域のコード配列の部分（ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３）から直列に構成される。これは、コドン最適化後に発現ベクターｐＬＶＸに構築した。ＨＥＫ２９３Ｆの安定な発現細胞株は、ｐＬＶＸベクターを使用することにより樹立し、ｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃのタンパク質を、精製により最終的に得た。
実施例２：ヒトＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα両遺伝子を過剰発現する細胞株の構築及び同定
２．１：ヒトＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα両遺伝子を過剰発現する細胞株の構築
ヒトＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα受容体へのヒトＴＳＬＰの結合の遮断におけるヒトＴＳＬＰ抗体の有効性を検証するために、ヒトＴＳＬＰＲの完全アミノ酸コード配列（遺伝子ＩＤ：ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ：Ｑ９ＨＣ７３．１、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（Ｎａｎｊｉｎｇ）Ｃｏ．，Ｌｔｄにより合成）及びヒトＩＬ７Ｒアルファサブユニットの完全アミノ酸コード配列（遺伝子ＩＤ：ＧｅｎＢａｎｋ：ＡＡＲ０８９０８．１、ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（Ｎａｎｊｉｎｇ）Ｃｏ．，Ｌｔｄにより合成）をＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（Ｎａｎｊｉｎｇ）Ｃｏ．，Ｌｔｄによりコドン最適化されてレンチウイルスベクターｐＬＶＸ－ＩＲＥＳ－ｐｕｒｏ及びｐＬＶＸ－ＩＲＥＳ－ｚｅｏｃｉｎにクローニングし、マウスｐｒｏ－Ｂ細胞株Ｂａ／Ｆ３細胞（ＣＯＢＩＯＥＲ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ ＣＯ．，ＬＴＤから購入）を、ＭｏｈａｍｍａｄｉＺら、Ｍｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０１５ Ｓｅｐ；５７（９）：７９３～８００に記載のレンチウイルスパッケージング系を使用する調製方法により得たウイルスにより感染させた後、ピューロマイシン＋ブレオマイシンにより選択し、単一クローンをスクリーニングして、安定なモノクローナル細胞株Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒαを得た。
２．２：ヒトＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα両遺伝子を過剰発現するＢａ／Ｆ３細胞株の検出
細胞株を、フローサイトメトリーにより検出して（フローサイトメトリー：Ｂｅｃｋｍａｎ、ＣｙｔｏＦｌｅｘ；検出抗体：ＡＰＣ抗ヒトＴＳＬＰＲ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、ＡＰＣ－ａｎｔｉ－ｈｕｍａｎＩＬ７Ｒα（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ））、モノクローナル細胞がヒトＴＳＬＰＲ及びヒトＩＬ７Ｒαを適切に発現したかどうかを判定した。図１に示すように、フローサイトメトリー結果により、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒαが、両遺伝子を良好な均一性で発現するモノクローナル細胞株であることが（ほぼ１００％）示された。これは、後続の実験に使用することができる。
実施例３：マウス免疫化及びハイブリドーマ融合
３．１：マウスの免疫化
完全ヒト遺伝子導入マウスＨ２Ｌ２（ＨａｒｂｏｕｒＢｉｏＭｅｄ）を、大腸菌により発現するヒトＴＳＬＰ（ＮＰ＿１４９０２４．１）、哺乳動物細胞により発現するヒトＴＳＬＰ（ＮＰ＿１４９０２４．１）、哺乳動物細胞により発現するサルＴＳＬＰ（ＸＰ＿００５５５７５５５．１）及びヒトＴＳＬＰの完全コード配列を含むプラスミドを使用して、それぞれ複数回免疫化した。ブースター免疫化を２週毎に計５～６回実行した。免疫化中、抗ヒトＴＳＬＰ抗体の血清力価をＥＬＩＳＡにより２週毎に検出し（実施例４．１を参照）、複数回の免疫化の後、力価に応じて、最も良好な力価を有するマウスを、ハイブリドーマを生成する融合のために選択した。
３．２：融合方法
脾臓及びリンパ節の単一細胞懸濁物を混合した後、等量のＳＰ２／０骨髄腫細胞を加え、均一に混合した。細胞の混合溶液を洗浄して電気融合緩衝液により再懸濁し、ＢＴＸ－ＥＣＭ２００１電気融合装置を使用した電気融合の後、細胞懸濁液を融合チャンバーから完全融合培養培地に直ちに移して３７℃で１時間インキュベートした。細胞を１ウェルあたり２×１０４細胞の密度で９６ウェルプレートに播種した。５日間の培養後、培地を完全融合培地と交換し、７～１０日以内に、ハイブリドーマのスクリーニングのために上清を採取した。
実施例４：ハイブリドーマのスクリーニング
４．１：ヒトＴＳＬＰ結合のＥＬＩＳＡスクリーニング
可溶性ヒトＴＳＬＰ－Ｈｉｓタンパク質を、１×ＣＢＳコーティング緩衝液により１μｇ／ｍＬに希釈し、次いで、９６ウェルプレートに加えて一晩４℃でインキュベートした。９６ウェルプレートを、ＰＢＳＴで洗浄し、ブロッキング溶液（ＰＢＳ＋２％のＢＳＡ）により３７℃で２時間ブロッキングした。ハイブリドーマ上清、又は同一容量のブロッキング溶液をプレートに加え、インキュベーターにおいて３７℃で２時間インキュベートした。９６ウェルプレートにヤギ抗ラットＩｇＧ－ＨＲＰを加えて、インキュベーターにおいて３７℃で１時間インキュベートし、次いで、洗浄してＯＤを４５０ｎｍで読み取った。
４．２：サルＴＳＬＰ結合のＥＬＩＳＡスクリーニング
サルＴＳＬＰ－Ｈｉｓタンパク質を、ＣＢＳコーティング緩衝液により１μｇ／ｍＬに希釈し、次いで、９６ウェルプレートに加えて一晩４℃でインキュベートした。９６ウェルプレートを、ＰＢＳＴで洗浄し、ブロッキング溶液（ＰＢＳ＋２％のＢＳＡ）により３７℃で２時間ブロッキングした。ハイブリドーマ上清、又は同一容量のブロッキング溶液をプレートに加え、インキュベーターにおいて３７℃で２時間インキュベートした。９６ウェルプレートにヤギ抗ラットＩｇＧ－ＨＲＰを加えて、インキュベーターにおいて３７℃で１時間インキュベートし、次いで、洗浄してＯＤを４５０ｎｍで読み取った。
４．３：キメラ受容体ＩＬ７Ｒα－ＴＳＬＰＲ－ｈＦｃへのヒトＴＳＬＰ－Ｈｉｓの結合の遮断のＥＬＩＳＡスクリーニング
以下のスキームに従って、キメラ受容体ＩＬ７Ｒα－ＴＳＬＰＲ－ｈＦｃへのヒトＴＳＬＰ－Ｈｉｓの結合の遮断について、ハイブリドーマ上清又は精製抗体を定量した。
可溶性ｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃタンパク質を、１×ＣＢＳコーティング緩衝液により希釈し、次いで、９６ウェルプレートに加えて一晩４℃でインキュベートした。９６ウェルプレートを、ＰＢＳＴで洗浄し、ブロッキング溶液（ＰＢＳ＋２％のＢＳＡ）により３７℃で２時間ブロッキングした。哺乳動物細胞によって組換えにより発現させたｈＴＳＬＰ－Ｈｉｓタンパク質（＋／－）を、ハイブリドーマ上清又は同一容量のブロッキング溶液とともにプレートに加え、インキュベーターにおいて３７℃で２時間インキュベートした。９６ウェルプレートにマウス抗Ｈｉｓ－ＨＲＰを加えて、インキュベーターにおいて３７℃で１時間インキュベートし、次いで、洗浄してＯＤを４５０ｎｍで読み取った。強力な阻害率を有するハイブリドーマを候補クローンとして選択した。
親和性ＥＬＩＳＡ及び上記の競合ＥＬＩＳＡにより定量した活性に従って、陽性クローンを選択し、限界希釈方法によりサブクローニングしてサブクローンを得た。最終的には、ヒトＴＳＬＰ－Ｈｉｓ及びサルＴＳＬＰ－Ｈｉｓの両方に結合するだけでなく、キメラ受容体ｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃへのヒトＴＳＬＰ－Ｈｉｓの結合を遮断することも可能なハイブリドーマサブクローンを得た。表１に示すように、５つの単一クローンは、ヒトＴＳＬＰ（ｈＴＳＬＰ）及びサルＴＳＬＰ（ｃＴＳＬＰ）の両方に対する強力な結合能力を有し、また、ヒトＴＳＬＰのその受容体ｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃへの結合能力を、６０％を上回る阻害率で遮断した。
Figure 2023505408000003
実施例５：抗ＴＳＬＰキメラ抗体の調製
対照抗体の発現：対照抗体の配列は、ｃｈＥＭＢＬデータベースを参照する（ＩＤ：ＣＨＥＭＢＬ３７０７２２９）。対照抗体の重鎖及び軽鎖の塩基配列は、ｐＴＴ５発現ベクター内に合成し、一過性にトランスフェクトしてＣＨＯ－Ｓ細胞（Ｔｈｅｒｍｏから購入）により発現させた後、プロテインＡ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕＲｅ、ＧＥ）を使用して親和性精製を行い、対照抗体を得た。
単一ハイブリドーマクローンを無血清培地において培養して上清５０ｍＬを得た後、プロテインＡ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕＲｅ、ＧＥ）を使用して精製し、ハイブリドーマのキメラ抗体を得た。Ｈ２Ｌ２マウス抗体定常領域をラット定常領域に遺伝子修飾したため、得られた精製抗体は、完全ヒト可変領域を保有するラットＦｃを有するキメラ抗体であった。精製抗体を、分光光度法により定量してキメラ抗体２５Ａ５Ｃ５、２７Ｃ２Ｂ６、３７Ｃ２Ｄ１０、４３Ｂ１Ａ８及び９０Ｈ３Ｈ１１を得た。
実施例６：ＴＳＬＰに対する抗ＴＳＬＰキメラ抗体の親和性のＥＬＩＳＡ検出
ヒト又はサルＴＳＬＰに対するキメラ抗体２５Ａ５Ｃ５、２７Ｃ２Ｂ６、３７Ｃ２Ｄ１０、４３Ｂ１Ａ８及び９０Ｈ３Ｈ１１の親和性をＥＬＩＳＡにより定量した。特定の方法を、次に要約した：ヒト又はサルＴＳＬＰ－Ｈｉｓ抗原を９６ウェルプレート内にコーティングし、４℃で一晩の後、種々の濃度勾配により希釈した抗体をそれぞれ加え、２時間のインキュベート後、ヤギ抗ラットＦｃ－ＨＲＰ二次抗体を加え、１時間のインキュベート後、吸光度値を４５０ｎｍの波長でマイクロプレートリーダーにより読み取る。
結果を、表２に示した。ここで、キメラ抗体２５Ａ５Ｃ５及び２７Ｃ２Ｂ６はそれぞれ、対照抗体に実質的に匹敵するヒトＴＳＬＰに対する親和性を有し、一方、４３Ｂ１Ａ８及び９０Ｈ３Ｈ１１はそれぞれ、対照抗体のそれよりも高いヒトＴＳＬＰに対する親和性を有した。抗体２５Ａ５Ｃ５及び９０Ｈ３Ｈ１１は、サルＴＳＬＰに結合しなかった。一方、３７Ｃ２Ｄ１０、２７Ｃ２Ｂ６及び４３Ｂ１Ａ８はそれぞれ、サルＴＳＬＰに強力に結合する。
Figure 2023505408000004
実施例７：ＴＳＬＰ／ｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃ結合を遮断する抗ＴＳＬＰキメラ抗体の活性の競合ＥＬＩＳＡによる検出
ヒトＴＳＬＰは、ヒトｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃヘテロ二量体受容体に結合して、下流のシグナル伝達経路を活性化する。競合ＥＬＩＳＡを適用して、抗原へのキメラ受容体ｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃの結合を遮断するキメラ抗体の活性を定量した。特定のステップは、実施例４．３を参照する。勾配希釈したキメラ抗体をプレートに加えた。結果を、表３に示した。ここで、５つのキメラ抗体すべてが、ヒトＴＳＬＰのヒトｈＩＬ７Ｒα－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＦｃヘテロ二量体受容体への結合を効果的に遮断した。
Figure 2023505408000005
実施例８：Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する抗ＴＳＬＰキメラ抗体の阻害
抗ＴＳＬＰキメラ抗体の活性を、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞増殖を阻害することにより検出した。受容体タンパク質ｈＴＳＬＰＲ及びｈＩＬ７ＲαをＢａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒαの細胞表面に発現させた。ここで、これら２つの受容体タンパク質の細胞外ドメインの二量体は、ヒトＴＳＬＰに結合することができ、これらの細胞内ドメインは、シグナルをさらに伝達して細胞内ＳＴＡＴ５リン酸化を活性化し、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖を促進することができる。
特定のステップは、以下の通りであった：適切な量のＢａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα安定細胞株を採取して遠心分離し、１６４０＋１０％ＦＢＳ培養培地で２回洗浄して、培養培地における組換えマウスＩＬ３を除去し；ｈＴＳＬＰ－Ｈｉｓ（＋／－）を精製抗ＴＳＬＰキメラ抗体又は対照抗ＴＳＬＰ抗体（対照抗体）とともに各ウェルにおいて室温で３０分間インキュベートし；Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞を１ウェルあたり１．５×１０４個加えて３日間インキュベートし；ＣＣＫ８（ＲＨＩＮＯ ＢＩＯ、ＱＤＹ－００３－Ｄ）を各ウェルに加えてＯＤを４５０ｎｍで読み取り、データをエクスポートして、ＰｒｉｓｍＧｒａｐｈｐａｄソフトウェアを使用することにより細胞増殖に対するキメラ抗体の阻害を解析する。
図２Ａ～２Ｃ及び表４に示すように、５つのキメラ抗体すべてが、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖を明らかに阻害した。
Figure 2023505408000006
実施例９：抗ＴＳＬＰキメラ抗体の可変領域の増幅
ハイブリドーマ細胞を約２×１０６個に培養し、ＴＲＩｚｏｌ試薬（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉ．Ｃａｔ＃１５５９６０２６）を使用することにより溶解してＲＮＡを抽出し、次いで、ｃＤＮＡ逆転写キット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉ．Ｃａｔ＃１８０８０－２００）を適用して第１鎖ｃＤＮＡを合成した。ＩＭＧＴ及びＡｂＭの方法、並びにすべてのマウス抗体の配列解析を参照して、可変領域の上流プライマーの複数の対を、高い相同性を有する領域を選択することにより設計し、下流プライマーを、ＣＨ１相同配列を使用することにより設計し、抗体の軽及び重鎖可変領域を、プライマープールを用いたＰＣＲ増幅によって得、ＰＣＲ産物を、ＤＮＡ精製キット（Ｑｉａｇｅｎ、Ｃａｔ＃２８１０４）を使用して精製してｐＴＴ－５ベクターにクローニングし、約１０個のクローンを選択して各ライゲーション反応においてシーケンシングして、可変領域の配列を得た。これらを、ＩＭＧＴ及びＡｂＭデータベースによりさらに解析した。
Figure 2023505408000007
実施例１０：組換え抗体の発現、精製、及び結合親和性検出
２５Ａ５Ｃ５、２７Ｃ２Ｂ６、３７Ｃ２Ｄ１０、４３Ｂ１Ａ８及び９０Ｈ３Ｈ１１の軽鎖可変領域のアミノ酸配列を、軽鎖κ定常領域のアミノ酸配列（配列番号１６）にそれぞれ融合させ、これらの重鎖可変領域のアミノ酸配列を、ＩｇＧ１の重鎖定常領域のアミノ酸配列（配列番号１４）にそれぞれ融合させ、これらの配列に対応するヌクレオチド配列をｐＴＴ５ベクター内に構築した。各組換え完全ヒト抗体の重鎖及び軽鎖に対応するｐＴＴ５ベクターをＣＨＯ－Ｓ（Ｔｈｅｒｍｏから購入）に同時にトランスフェクトし、プロテインＡ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕＲｅ、ＧＥ）を使用して上清を精製し、精製した組換え完全ヒト抗体を、それぞれ２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧ、２７Ｃ２Ｂ６－ｈＩｇＧ、３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧ、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧと名付けて、それぞれをタンパク質濃度について分光光度法により定量した。
哺乳動物発現組換えヒト又はサルＴＳＬＰ－Ｈｉｓに対する抗ＴＳＬＰ組換え完全ヒト抗体の親和性の検出。特定の実験ステップは、次に要約した：ヒトＴＳＬＰ－Ｈｉｓ又はサルＴＳＬＰ－Ｈｉｓ抗原を９６ウェルプレート内にコーティングし、４℃で一晩の後、段階希釈した抗体をそれぞれ加え、２時間のインキュベート後、ＨＲＰ標識化ヤギ－ヒトＦｃ二次抗体を加え、１時間のインキュベート後、４５０ｎｍの波長で読み取る。
結果を図３Ａ～３Ｂに示し、５つの候補抗体のすべては ヒトＴＳＬＰに結合することができる。また、表６に示すように、３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧ、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧはそれぞれ、対照抗体よりも高いｈＴＳＬＰに対する親和性を有した。２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧ及び２７Ｃ２Ｂ６－ｈＩｇＧはそれぞれ、対照抗体に匹敵するｈＴＳＬＰに対する親和性を有した。２７Ｃ２Ｂ６－ｈＩｇＧ、３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧ及び４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧはそれぞれ、対照抗体に匹敵するサルＴＳＬＰに対する親和性を有した。
Figure 2023505408000008
実施例１１：ＴＳＬＰに対する抗ＴＳＬＰ完全ヒト抗体の動的親和性の検出
ＴＳＬＰに対する抗ＴＳＬＰ完全ヒトキメラ抗体の動的親和性を、一般に使用される動的親和性検出装置であるＦｏｒｔｉｂｉｏにより検出した。方法を、次に簡潔に記載した：ヒト又はサルＴＳＬＰの段階希釈を、ＰＢＳＴを用いて実行して１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５μＭ、６．２５ｎＭ、３．１２５ｎＭ、１．５６２５ｎＭ及び０ｎＭを得；ＰｒｏＡバイオセンサー（Ｐａｌｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、ＰＢＳＴ緩衝液を用いて使用前に事前に湿らせ；組換え完全ヒト抗体をＰＢＳＴにより５μｇ／ｍＬに希釈してＰｒｏＡセンサーに固定化し；次いで、抗体を固定化したセンサーをＰＢＳＴ緩衝液に配置し６０秒間平衡化してベースラインを得、抗原希釈液に移して６０秒間結合させ、次いで、ＰＢＳＴにおいて１８０秒間解離させ；解析サイクル後にセンサーを１０ｍＭのＧｌｙ（ｐＨ１．５）で再生させる。Ｄａｔｅ ａｎａｌｙｓｉｓ１１．０バージョン（Ｐａｌｌ）を使用して会合速度定数（Ｋａ）及び解離速度定数（Ｋｄ）を決定し、これは次いで、解離平衡定数（ＫＤ）の算出に使用した。
表７に示すように、ヒトＴＳＬＰに結合する２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧ、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧのＫＤ値は、対照抗体の値未満であり、強力な親和性を示した。これは、親和性ＥＬＩＳＡ結果と一致した。サルＴＳＬＰに対する結合では、２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧは、親和性を有せず、一方、３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧ、９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧ及び４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧＩｔはそれぞれ良好な結合を示し、１０－８Ｍ～１０－９Ｍオーダーの親和性を有した。
Figure 2023505408000009
実施例１２：Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体の阻害
組換え完全ヒト抗体の活性を、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖阻害方法により定量した。方法は、前述の実施例８を参照する。
結果を、表８に示した。ここで、図４Ａ～Ｃに示すように、２７Ｃ２Ｂ６－ｈＩｇＧ及び３７Ｃ２Ｄ１０－ｈＩｇＧは、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞のヒトＴＳＬＰ誘導増殖を阻害することができ、２５Ａ５Ｃ５－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧは、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞のヒトＴＳＬＰ誘導増殖の阻害に関して対照抗体に実質的に匹敵し、一方、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧは、対照抗体のそれよりも顕著に強力な阻害活性を有した（約０．２５倍）。
Figure 2023505408000010
実施例１３：胸腺及び活性化制御ケモカイン（ＴＡＲＣ）のヒトＴＳＬＰ誘導ＰＢＭＣ分泌に対する組換え完全ヒト抗体の阻害活性の検出
初代細胞における完全ヒト抗ＴＳＬＰ抗体の機能活性を、ヒトＰＢＭＣ細胞によるＴＡＲＣ（Ｔｈ２様サイトカインの１つ）のヒトＴＳＬＰ誘導分泌を阻害することにより評価した。ＰＢＭＣはＣＤ１１＋ＤＣ細胞を含み、また、研究により、ＴＳＬＰが、ＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα受容体に結合してＣＤ１１＋ＤＣ細胞を活性化し、ＯＸ４０Ｌを上方制御してＣＤ１１＋ＤＣ細胞のＴｈ２様サイトカイン（例えば、ＴＡＲＣ及びＣＣＬ２２）分泌を促進可能であることが示された。抗ＴＳＬＰ抗体は、ＤＣ細胞の表面のＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合を遮断し、これによりＤＣ細胞の活性化及びＤＣ細胞によるＴｈ２様サイトカインの分泌を遮断することができる。
方法を、次に簡潔に記載した：ヒト末梢血ＰＢＭＣを、フィコール分離溶液（ＧＥ）を使用して単離し、ｈＴＳＬＰ－Ｈｉｓ（＋／－）を組換え完全ヒト抗体又は対照抗体とともに３０分間室温でインキュベートし、ＰＢＭＣ細胞を１ウェルあたり２×１０５個加えて４８時間インキュベートする。上清を採取し、ＥＬＩＳＡによりヒトＴＡＲＣについて解析し、ＴＡＲＣ分泌に対するハイブリドーマ上清又は精製抗体の阻害を定量した。ＴＡＲＣ ＥＬＩＳＡキット（ＳｉｎｏＢｉｏｌｏｇｉｃａl）を使用して、上清におけるＴＡＲＣレベルを検出した。
結果を、表９及び図５に示した。ここで、完全ヒト抗体４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧのＥＣ５０値は、対照抗体の値よりも低く、ＰＢＭＣによるＴＡＲＣのＴＳＬＰ誘導分泌を阻害するこれらの活性が、対照抗体の活性よりも高かったことを示した。
Figure 2023505408000011
実施例１４：組換え完全ヒト抗体のＴｍ値のアッセイ
抗ＴＳＬＰ抗体のＴｍ値をＤＳＦ（示差蛍光走査技術）により測定した。特定の実験ステップは、以下の通りであった：４０×ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅ色素（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＣｏ．，Ｌｔｄ．、ＣａｔＮｏ．５６６５１）１２．５μＬ、１ｍｇ／ｍＬの完全ヒト抗ＴＳＬＰ抗体５μＬ（ＰＢＳで希釈）及び滅菌水７．５μＬをＥＰチューブにおいて混合し、試料混合物をＱ－ＰＣＲシステム（ＡＢ ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＡＢＩ、７５００）に加えて反応させた。Ｑ－ＰＣＲパラメータ設定：標的（ＲＯＸ）、プログラム（２５℃、３分；比率１％、９５℃；９５℃、２分）。結果を、ＧｒａｐｈＰｒｉｓｍソフトウェアに入力してＶ５０値を算出した。図６及び表１０に示すように、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ（７４．７２℃）及び９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧ（７２．５８℃）のＴｍ値は、対照抗体の値（６６．４７℃）よりも高く、本発明により調製した完全ヒト抗体が、より良好な熱安定性を有したことを明白に示した。
Figure 2023505408000012
実施例１５：組換え完全ヒト抗体の疎水性のアッセイ
疎水性比較を、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ＨＰＬＣにより、ＴＯＳＯＨ ＴｓｋｇｅｌＢｕｔｙ－ＮＰＲ（２．５）クロマトグラフィーカラムを併用して解析した。３つの抗体の疎水性の差を比較するために、これら３つの抗体を直接充填して解析した。移動相Ａ：１．５Ｍ（ＮＨ４）２ＳＯ４；移動相Ｂ：２５ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４（ｐＨ７．０）＋２５％ＩＰＡ。３つの抗体の保持時間は、表１１に示した。ここで、保持時間が長いほど、抗体の疎水性が強力となり、９０Ｈ３Ｈ１１－ｈＩｇＧは、対照抗体のそれに匹敵する親水性を有し、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧは、対照抗体のそれよりも良好な親水性を有し、プロセス展開及び抗体凝集が、対照抗体よりも優れることを示した。
Figure 2023505408000013
実施例１６：組換え修飾完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の調製
抗体のｉｎ ｖｉｖｏでの半減期は、これらの等電点、ＦｃＲｎに対する親和性、グリコシル化修飾、及び免疫原性に密接に関連した。４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ抗体の半減期を延長するために、ＦｃＲｎに対する親和性を、抗体の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を修飾することにより増強した。
修飾スキーム１：一方では、ＩｇＧ４の４３４番目のアミノ酸（ＥＵナンバリングシステム）をＮからＡ、他方では、２２８番目のアミノ酸（ＥＵナンバリングシステム）をＳからＰとする２つのアミノ酸変異を含むＩｇＧ４（配列番号７０）とｈＩｇＧ１Ｆｃ（配列番号１４）を置換した。
修飾スキーム２：ｈＩｇＧ１Ｆｃ（配列番号１４）の４３４番目のアミノ酸（ＥＵナンバリングシステム）においてＮをＡと置換して配列番号１５を得、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧの重鎖のＦＲ１の１６番目（Ｃｈｏｔｈｉａナンバリングシステム）においてＲをＧに変異させ、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧの軽鎖のＦＲ３の７９番目（Ｃｈｏｔｈｉａナンバリングシステム）においてＲをＱに変異させた。
上記の修飾スキーム１及び２により得られた抗体は、４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２とそれぞれ名付けた。
４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の重鎖可変領域配列は、配列番号６８であり、その重鎖定常領域配列は、配列番号１５であり、その軽鎖可変領域配列は、配列番号６９であり、その軽鎖定常領域配列は、配列番号１６である。
４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１の重鎖可変領域配列は、配列番号４０であり、その重鎖定常領域配列は、配列番号７０であり、その軽鎖可変領域配列は、配列番号４１であり、その軽鎖定常領域配列は、非亜列番号１６である。
Figure 2023505408000014
上記２つの修飾分子４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２及び４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１の重鎖及び軽鎖を、ｐＴＴ５発現ベクター内にそれぞれ構築し、プラスミドを抽出後、これらをＣＨＯ－Ｓ細胞（Ｔｈｅｒｍｏから購入）にトランスフェクトし、約１０日間の培養後、プロテインＡ（ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕＲｅ、ＧＥ）を使用して細胞上清を精製し、精製した組換え完全ヒト抗体をタンパク質含量について分光光度法により定量した。
実施例１７：ＴＳＬＰに対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の動的親和性のアッセイ
ＴＳＬＰに対する抗ＴＳＬＰ完全ヒト抗体の動的親和性をＦｏｒｔｉｂｉｏにより検出した。方法は、前述の実施例１１を参照する。結果を、表１３に示した。ここで、４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２ヒト抗体分子はそれぞれ、対照抗体のそれに劣らないｈＴＳＬＰに対する動的親和性を有した。
Figure 2023505408000015
実施例１８：組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の等電点（ＰＩ）のアッセイ
４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１、４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２及び４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧ抗体の等電点を等電点電気泳動法により検出した。これは、簡潔に次に記載した：Ｍａｕｒｉｃｅ等電点電気泳動システム（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ）をキャピラリーカートリッジと併用して解析に使用した。３つの抗体の等電点の差を比較するために、そのような３つの抗体を水で希釈し、検出システムにおいて４％の最終濃度で両性電解質３～１０（ＧＥ）を使用することによりｐＨ勾配を形成した。結果を、表１４に示した。ここで、４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の等電点は、４３Ｂ１Ａ８－ｈＩｇＧのそれよりもそれぞれ１．３及び０．４低く、修飾スキームが成功したことを示した。
Figure 2023505408000016
実施例１９：ＦｃＲｎに対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の動的親和性のアッセイ
ＦｃＲｎに対する修飾抗ＴＳＬＰ完全ヒト抗体の動的親和性をＦｏｒｔｉｂｉｏにより検出した。方法を、次に簡潔に記載した：抗ＴＳＬＰ抗体の段階希釈を、ＰＢＳＴ（ｐＨ６．０）を用いて実行して２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１２．５μＭ、６．２５ｎＭ、３．１２５ｎＭ、１．５６２５ｎＭ及び０ｎＭを得；ＳＡバイオセンサー（ＰａｌｌＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ）を、ＰＢＳＴ（ｐＨ６．０）緩衝液を用いて使用前に事前に湿らせ；ビオチン標識化ＦｃＲｎを２．３μｇ／ｍＬに希釈してＳＡセンサーに固定化し；次いで、ＦｃＲｎを固定化したセンサーをＰＢＳＴ（ｐＨ６．０）緩衝液に配置し６０秒間平衡化してベースラインを得、抗体希釈液に移して６０秒間結合させ、次いで、ＰＢＳＴ（ｐＨ６．０）において６０秒間解離させ；解析サイクル後にセンサーをＰＢＳＴ（ｐＨ７．４）で再生させる。１：１モデルを使用するＤａｔｅ ａｎａｌｙｓｉｓ １１．０バージョン（Ｐａｌｌ）を使用して会合速度定数（Ｋａ）及び解離速度定数（Ｋｄ）を決定し、これは次いで、解離平衡定数（ＫＤ）の算出に使用した。
表１５に示すように、４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２はそれぞれ、対照抗体のそれよりも低いＦｃＲｎに対する動的親和性（ＫＤ）を有し、対照抗体のそれの約２倍のＦｃＲｎに対する親和性を示した。
Figure 2023505408000017
実施例２０：Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞の増殖に対する組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の阻害活性のアッセイ
組換え完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１及び４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の活性をＢａ／Ｆ３細胞の増殖阻害方法により検出した。方法は、前述の実施例８を参照し、抗体の活性ＥＣ５０を、そのデータに基づいて解析する。結果を、表１６並びに図７Ａ及び７Ｂに示した。ここで、４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２及び４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１は、Ｂａ／Ｆ３－ｈＴＳＬＰＲ－ｈＩＬ７Ｒα細胞のヒトＴＳＬＰ誘導増殖を阻害することができ、これらのＥＣ５０値は、対照抗体の値と匹敵し、完全ヒト抗体４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２及び４３Ｂ１－Ｈ６Ｌ１がそれぞれ匹敵する、ＴＳＬＰの細胞活性を阻害する能力を有したことを示した。
Figure 2023505408000018
実施例２１：マクロファージ由来ケモカイン（ＭＤＣ）のヒトＴＳＬＰ誘導ＰＢＭＣ分泌に対する組換え完全ヒト抗体の阻害活性の検出
初代細胞における抗ＴＳＬＰ完全ヒト抗体の機能活性を、ヒトＰＢＭＣ細胞によるＭＤＣのヒトＴＳＬＰ誘導分泌を阻害することにより評価した。ＰＢＭＣは、ＤＣ細胞を含む。試験により、ＴＳＬＰが、細胞表面のＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒα受容体に結合してＤＣ細胞を活性化し、ＯＸ４０Ｌを上方制御してＤＣ細胞のＴｈ２様サイトカイン（例えば、ＴＡＲＣ及びＭＤＣ）分泌を促進可能であることが示された。抗ＴＳＬＰ抗体は、ＤＣ細胞の表面のＴＳＬＰのＴＳＬＰＲ／ＩＬ７Ｒαへの結合を遮断し、これによりＤＣ細胞の活性化及びＤＣ細胞によるＴｈ２様サイトカインの分泌を遮断することができる。
方法を、次に簡潔に記載した：ヒト末梢血ＰＢＭＣを、フィコール分離溶液（ＧＥ）を使用して単離し、ｈＴＳＬＰ－Ｈｉｓ（＋／－）を組換え完全ヒト抗体又は対照抗体とともに３０分間室温でインキュベートし、ＰＢＭＣ細胞を１ウェルあたり２×１０５個加えて１２０時間インキュベートする。上清を採取し、ＥＬＩＳＡによりヒトＭＤＣの産生について解析し、ＭＤＣの分泌に対する抗体の阻害を測定した。ＭＤＣ ＥＬＩＳＡキット（Ｒａｙｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して、上清におけるＴＡＲＣレベルを検出した。
結果を、表１７及び図８に示した。ここで、４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２及び対照抗体は、ＭＤＣのＴＳＬＰ誘導産生を顕著に阻害することができ、７．８４ｐＭ及び５．６３ｐＭのＥＣ５０値をそれぞれ有する。
Figure 2023505408000019
実施例２２：カニクイザルにおける組換え完全ヒト抗体のｉｎ ｖｉｖｏでの薬物動態解析
本出願の候補分子４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２の配列は、Ｎ４３４Ａ変異を含み、そのためＦｃＲｎに対する親和性が影響され、これによりｉｎ ｖｉｖｏでの薬物代謝の半減期が延長される。したがって、この実施例では、カニクイザルにおけるｉｎ ｖｉｖｏでの４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２分子の薬物動態を皮下注射により試験し、対照抗体のそれと比較した。方法及び結果は、以下の通りであった：４匹のカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｈａｉｎａｎ Ｊｉｎｇａｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から入手可能）を選択し、２つの群に分け、１群あたり雄１匹及び雌１匹とした。皮下注射の用量は、５ｍｇ／ｋｇであった。投与後ゼロ、５分、３０分、２時間、４時間、８時間、１日、２日、３日、４日、７日、１０日、１４日、２１日、２８日、３５日、４２日、４９日、及び５６日に血液試料を採取し、室温で１時間、凝固するまで放置し、遠心分離して血清試料を得、これは次いで、－８０℃で凍結させて試験した。血清における抗体濃度をＥＬＩＳＡにより決定し、結果を以下のように解析した：単回皮下投与の薬物動態パラメータ及び曲線は、表１８及び図９に示した。これらの結果により、４３Ｂ１－Ｈ２Ｌ２抗体がより長い長期半減期を有し、対照抗体より約１倍高い血液濃度の高ＡＵＣを有したことが示された。
Figure 2023505408000020
本発明の特定の実施形態を詳細に記載しているが、当業者は、種々の修飾及び変更が、すべての公開された教示に従って、その詳細になされることがあり、これらの教示はまた、本発明の範囲に含まれることを理解する。本発明の保護範囲は、添付の特許請求の範囲及び任意のその等価物により定義される。

Claims (26)

  1. 胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）に結合する抗体又はその抗原結合断片であって、以下の相補性決定領域（ＣＤＲ）：
    （ａ）配列番号１、１７、３０、４０、５３若しくは６８に記載の重鎖可変領域（ＶＨ）に含まれる、ＣＤＲ－Ｈ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｈ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｈ３若しくはその配列バリアント、並びに／又は
    （ｂ）配列番号２、１８、３１、４１、５４若しくは６９に記載の軽鎖可変領域（ＶＬ）に含まれる、ＣＤＲ－Ｌ１若しくはその配列バリアント、ＣＤＲ－Ｌ２若しくはその配列バリアント、及びＣＤＲ－Ｌ３若しくはその配列バリアント
    を含み、
    好ましくは、前記配列バリアントが、それが由来するＣＤＲと比較して１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失又は付加（例えば、１、２又は３つのアミノ酸の置換、欠失又は付加）を有するＣＤＲであり、好ましくは、前記置換が、保存的置換である、抗体又はその抗原結合断片。
  2. （１）ＩＭＧＴナンバリングシステムにより定義される、ＶＨ及び／又はＶＬであって、
    （１ａ）前記ＶＨが、配列番号３の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号６の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号７の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含み、
    （１ｂ）前記ＶＨが、配列番号１９の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号２０の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２１の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号２２の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２３の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、
    （１ｃ）前記ＶＨが、配列番号３２の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号３３の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３４の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号３５の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２３の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、
    （１ｄ）前記ＶＨが、配列番号４２の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４３の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号４４の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号４５の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号４６の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号４７の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、又は
    （１ｅ）前記ＶＨが、配列番号５５の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号５６の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５７の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号５８の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５９の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号６０の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む、ＶＨ及び／又はＶＬ、
    （２）ＡｂＭナンバリングシステムにより定義される、ＶＨ及び／又はＶＬであって、
    （２ａ）前記ＶＨが、配列番号９の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号１０の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号１１の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号１２の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号１３の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号８の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、
    （２ｂ）前記ＶＨが、配列番号２５の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号２６の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号２７の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号２８の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２９の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、
    （２ｃ）前記ＶＨが、配列番号３６の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号３７の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号３８の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号３９の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号２９の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号２４の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、
    （２ｄ）前記ＶＨが、配列番号４８の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号４９の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号５０の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号５１の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号５２の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号４７の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含むか、又は
    （２ｅ）前記ＶＨが、配列番号６１の配列を有するＣＤＲ－Ｈ１、配列番号６２の配列を有するＣＤＲ－Ｈ２、配列番号６３の配列を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み、及び／若しくは
    前記ＶＬが、配列番号６４の配列を有するＣＤＲ－Ｌ１、配列番号６５の配列を有するＣＤＲ－Ｌ２、配列番号６０の配列を有するＣＤＲ－Ｌ３を含む、ＶＨ及び／又はＶＬ、並びに／或いは
    （３）（１ａ）、（１ｂ）、（１ｃ）、（１ｄ）、（１ｅ）又は（２ａ）、（２ｂ）、（２ｃ）、（２ｄ）、（２ｅ）のうちのいずれか１つのＶＨ及び／又はＶＬと比較した場合、少なくとも１つのＣＤＲが変異を含み、前記変異が、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、１、２若しくは３つのアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）であり、好ましくは、前記置換が、保存的置換である、ＶＨ及び／又はＶＬを含み、
    好ましくは、ヒトＴＳＬＰ及び／又はサルＴＳＬＰに結合する、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  3. （ａ）配列番号１、１７、３０、４０、５３若しくは６８に記載のＶＨ、及び／又は配列番号２、１８、３１、４１、５４若しくは６９のいずれかに記載のＶＬ
    （ｂ）（ａ）の任意のＶＨに対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＨ、及び／又は（ａ）の任意のＶＬに対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するＶＬ、或いは
    （ｃ）（ａ）の任意のＶＨと比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有するＶＨ、及び／或いは（ａ）の任意のＶＬと比較して１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有するＶＬを含み、好ましくは、前記置換が、保存的置換である、請求項１又は２に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  4. （ａ）配列番号１に記載のＶＨ及び配列番号２に記載のＶＬ、
    （ｂ）配列番号１７に記載のＶＨ及び配列番号１８に記載のＶＬ、
    （ｃ）配列番号３０に記載のＶＨ及び配列番号３１に記載のＶＬ、
    （ｄ）配列番号４０に記載のＶＨ及び配列番号４１に記載のＶＬ、
    （ｅ）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号５４に記載のＶＬ、
    （ｆ）配列番号６８に記載のＶＨ及び配列番号６９に記載のＶＬ、
    （ｇ）（ａ）～（ｆ）のうちのいずれか１つにおけるＶＨ及びＶＬに対して、ＶＨが、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有し、及び／又はＶＬが、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する、ＶＨ及びＶＬ、或いは
    （ｈ）（ａ）～（ｆ）のうちのいずれか１つにおけるＶＨ及びＶＬと比較して、ＶＨが、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有し、及び／或いはＶＬが、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有し、好ましくは、前記置換が、保存的置換である、ＶＨ及びＶＬ
    を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  5. キメラ抗体、ヒト化抗体、又は完全ヒト抗体である、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  6. （ａ）ヒト免疫グロブリンの重鎖定常領域（ＣＨ）若しくはそのバリアント、及び／又は
    （ｂ）ヒト免疫グロブリンの軽鎖定常領域（ＣＬ）若しくはそのバリアント
    をさらに含み、前記バリアントが、それが由来する野生型配列に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するか、或いは、前記バリアントが、それが由来する野生型配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有し、好ましくは、前記置換が、保存的置換であり、
    好ましくは、前記重鎖定常領域が、ＩｇＧ重鎖定常領域、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４重鎖定常領域であり、
    好ましくは、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域を含み、
    好ましくは、前記軽鎖定常領域が、カッパ又はラムダ軽鎖定常領域であり、より好ましくは、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  7. 重鎖定常領域又はそのバリアントが、
    （１）バリアントが、ＥＵナンバリングシステムに従って２３４、２３５、２３７、２６５、２９７、３３１、３２９及び４３４番目のうちの少なくとも１つにおいて変異しており、好ましくは、バリアントが、以下の変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｄ２６５Ａ、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ、Ｐ３２９Ｇ、Ｎ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｙ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｗ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ｇ、Ｎ４３４Ｈ及びＮ４３４Ｑのうちの少なくとも１つを含み、より好ましくは、バリアントが、以下の変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＮ４３４Ａのうちの少なくとも１つを含み、より好ましくは、ＩｇＧ１バリアントが、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ及びＧ２３７Ａの変異を含み、より好ましくは、ＩｇＧ１バリアントが、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ及びＮ４３４Ａの変異を含む、ヒトＩｇＧ１の重鎖定常領域又はそのバリアント、或いは
    （２）バリアントが、配列番号１４と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の保存的置換）を含むか、又は配列番号１４に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有し、バリアントが、ＥＵナンバリングシステムに従ってＮ２９７Ａ及び／又はＮ４３４Ａを含み、好ましくは、バリアントが、Ｎ４３４Ａを含む、配列番号１４に記載のＣＨ又はそのバリアント、
    （３）配列番号１５と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の保存的置換）を含むか、又は配列番号１５に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する、配列番号１５に記載のＣＨ又はそのバリアント、或いは
    （４）バリアントが、ＥＵナンバリングシステムに従って２２８及び／又は４３４番目のうちの少なくとも１つにおいて変異しており、好ましくは、バリアントが、Ｓ２２８Ｐ及び／又はＮ４３４Ａを含み、好ましくは、バリアントが、Ｓ２２８Ｐ及びＮ４３４Ａを含む、ヒトＩｇＧ４の重鎖定常領域又はそのバリアント、或いは
    （５）バリアントが、配列番号７０と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の保存的置換）を含むか、又は配列番号７０に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する、配列番号７０に記載のＣＨ又はそのバリアントを含み、並びに／或いは
    軽鎖定常領域又はそのバリアントが、
    （６）カッパ軽鎖定常領域、或いは
    （７）バリアントが、配列番号１６と比較して、アミノ酸最大２０個の保存的置換（例えば、アミノ酸最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の保存的置換、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の保存的置換）を含むか、又は配列番号１６に対する少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する、配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）又はそのバリアントを含み、
    好ましくは、配列番号１４に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、
    好ましくは、配列番号１５に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、
    好ましくは、配列番号７０に記載の重鎖定常領域（ＣＨ）及び配列番号１６に記載の軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、
    好ましくは、前記変異又は置換によって、前記変異又は置換を含まない対応する抗体又はその抗原結合断片と比較してＡＤＣＰ、ＡＤＣＣ及び／又はＣＤＣ活性を有しないか又はこれらが低下する、請求項６に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  8. 抗体が、
    （ａ）配列番号１に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨを含む重鎖、並びに配列番号２に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載のＣＬを含む軽鎖、
    （ｂ）配列番号１７に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨを含む重鎖、並びに配列番号１８に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載のＣＬを含む軽鎖、
    （ｃ）配列番号３０に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨを含む重鎖、並びに配列番号３１に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載のＣＬを含む軽鎖、
    （ｄ）配列番号４０に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨを含む重鎖、並びに配列番号４１に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載のＣＬを含む軽鎖、
    （ｅ）配列番号５３に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨを含む重鎖、並びに配列番号５４に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載のＣＬを含む軽鎖、
    （ｆ）配列番号６８に記載のＶＨ及び配列番号１４、１５又は７０に記載のＣＨを含む重鎖、並びに配列番号６９に記載のＶＬ及び配列番号１６に記載のＣＬを含む軽鎖、或いは
    （ｇ）（ａ）～（ｆ）のうちのいずれか１つにおける重鎖及び軽鎖に対して、重鎖が、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有し、及び／又は軽鎖が、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する、重鎖及び軽鎖
    を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  9. （ａ）重鎖が、
    （ｉ）配列番号６６又は７３に記載の配列、
    （ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
    （ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
    軽鎖が、
    （ｉｖ）配列番号６７に記載の配列、
    （ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
    （ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
    好ましくは、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換が、保存的置換である、重鎖及び軽鎖、或いは
    （ｂ）重鎖が、
    （ｉ）配列番号７１に記載の配列、
    （ｉｉ）（ｉ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
    （ｉｉｉ）（ｉ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
    軽鎖が、
    （ｉｖ）配列番号７２に記載の配列、
    （ｖ）（ｉｖ）の配列と比較して、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ（例えば、アミノ酸最大５０、最大４５、最大４０、最大３５、最大３０、最大２５、最大２０、最大１５、最大１０若しくは最大５個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ、例えば、アミノ酸１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０個の置換、欠失若しくは付加、又はこれらの任意の組合せ）を有する配列、或いは
    （ｖｉ）（ｉｖ）の配列に対する少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含み、
    好ましくは、（ｉｉ）又は（ｖ）の置換が、保存的置換である、重鎖及び軽鎖を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  10. ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｄｓＦｖ）及びダイアボディからなる群から選択される、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  11. マーカーを保有し、好ましくは、検出可能なマーカー、例えば、酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ）、放射性核種、蛍光色素、発光物質（例えば、化学発光物質）又はビオチンを保有する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  12. 以下の特性：
    （ａ）約５０ｎＭ未満、例えば、約２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭ、１ｐＭ、０．１ｐＭ又はこれ未満のＫＤによるＴＳＬＰ（例えば、ヒトＴＳＬＰ）への結合、ここでＫＤは、Ｆｏｒｔｉｂｉｏ又はＥＬＩＳＡにより測定する、
    （ｂ）約５０ｎＭ未満、例えば、約２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０．９ｎＭ、０．８ｎＭ、０．７ｎＭ、０．６ｎＭ、０．５ｎＭ、０．４ｎＭ、０．３ｎＭ、０．２ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭ、１ｐＭ、０．１ｐＭ又はこれ未満のＥＣ５０によるＴＳＬＰ（例えば、ヒトＴＳＬＰ）への結合、ここでＥＣ５０は、フローサイトメトリー又はＥＬＩＳＡにより測定する、
    （ｃ）約５０ｎＭ、例えば、約５０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、０．９ｎＭ、０．８ｎＭ、０．７ｎＭ、０．６ｎＭ、０．５ｎＭ、０．４ｎＭ、０．３ｎＭ、０．２ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０１ｎＭ、１ｐＭ、０．１ｐＭ又はこれ未満のＩＣ５０によるＴＳＬＰのＩＬ７Ｒα／ＴＳＬＰＲへの結合の阻害、ここでＩＣ５０は、ＥＬＩＳＡにより測定する、
    （ｄ）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性及び／又は増殖の阻害又は遮断、
    （ｅ）ＴＳＬＰ誘導ＯＸ４０Ｌ発現の阻害又は遮断、
    （ｆ）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害又は遮断、
    （ｇ）Ｔｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３又はＩＬ－５のＴＳＬＰ誘導分泌の阻害又は遮断、
    （ｈ）ＦｃＲｎへの結合に対する良好な親和性を有すること、
    （ｉ）約６．５～約８．５、例えば、約６．５、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、約７．５、約７．７、約７．９、約８．０、約８．２又は約８．５の等電点（ＰＩ）を有すること
    のうちの少なくとも１つを示す、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。
  13. 請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする単離核酸分子。
  14. 好ましくは、クローニングベクター又は発現ベクターである、請求項１３に記載の単離核酸分子を含むベクター。
  15. 請求項１３に記載の単離核酸分子、又は請求項１４に記載のベクターを含む宿主細胞。
  16. 抗体又はその抗原結合断片の発現が可能となる条件下で請求項１５に記載の宿主細胞を培養するステップと、培養した前記宿主細胞培養物から抗体又はその抗原結合断片を回収するステップとを含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片を調製するための方法。
  17. 請求項１～１２のいずれか一項に記載の、ＴＳＬＰに結合する抗体又はその抗原結合断片、及び追加の抗体若しくはその断片又は抗体ミメティックを含み、
    好ましくは、二重特異性抗体又は三重特異性抗体又は四重特異性抗体である、多特異性抗体。
  18. カップリング部分が、検出可能なマーカー、例えば、放射性同位体、蛍光物質、発光物質、発色物質、若しくは酵素であるか、又はカップリング部分が、治療剤である、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片及びカップリング部分を含むコンジュゲート。
  19. 請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、請求項１３に記載の核酸、請求項１４に記載のベクター、請求項１５に記載の宿主細胞、請求項１７に記載の多特異性抗体、及び／又は請求項１８に記載のコンジュゲート、並びに薬学的に許容できる担体及び／又は賦形剤を含む医薬組成物。
  20. 対象における以下の生物学的活性：
    （ａ）ＴＳＬＰのＩＬ７Ｒα－ＴＳＬＰＲへの結合の阻害又は遮断、
    （ｂ）ＴＳＬＰの活性の下方制御又は除去、
    （ｃ）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御又は遮断、
    （ｄ）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性化及び／又は増殖の阻害又は遮断、
    （ｅ）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害又は遮断、
    （ｆ）Ｔｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３又はＩＬ－５のＴＳＬＰ誘導分泌の阻害又は遮断
    のうちの少なくとも１つにおいて使用される、請求項１９に記載の医薬組成物。
  21. 請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、及び／又は請求項１３に記載の核酸、及び／又は請求項１４に記載のベクター、及び／又は請求項１５に記載の宿主細胞、請求項１７に記載の多特異性抗体、及び／又は請求項１８に記載のコンジュゲート、及び／又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物、並びに任意選択で、使用説明書を含むキット。
  22. アレルギー性炎症又は自己免疫疾患を予防及び／又は治療するための医薬の調製における、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、及び／又は請求項１３に記載の核酸、及び／又は請求項１４に記載のベクター、及び／又は請求項１５に記載の宿主細胞、請求項１７に記載の多特異性抗体、及び／又は請求項１８に記載のコンジュゲート、及び／又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物の使用であって、
    任意選択で、前記アレルギー性炎症が、喘息、特発性肺線維症、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）、アレルギー性結膜炎、アレルギー性鼻炎（ＡＲ）、ネザートン症候群、好酸球性食道炎（ＥＯＥ）、食物アレルギー、アレルギー性下痢、好酸球性胃腸炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、アレルギー性真菌性副鼻腔炎、関節リウマチ、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、全身性硬化症、ケロイド、潰瘍性大腸炎、慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）及び鼻ポリープ、慢性好酸球性肺炎、好酸球性気管支炎；チャーグ・ストラウス症候群、好酸球増加症、好酸球性多発血管炎性肉芽腫症、炎症性腸疾患、蕁麻疹、全身性肥満細胞症、皮膚肥満細胞症、並びに再発性特発性血管浮腫からなる群のうちの少なくとも１つから選択され、
    任意選択で、前記自己免疫疾患が、糖尿病、重症筋無力症、胃炎、天疱瘡、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ループス、大腸炎、リウマチ性疾患、乾癬、及び甲状腺疾患からなる群から選択され、
    任意選択で、限定されないが、免疫抑制剤（例えば、コルチコステロイド、非ステロイド性グルココルチコイド受容体アゴニスト、ロイコトリエンＤ４アンタゴニスト、ロイコトリエンＢ４アンタゴニスト、Ａ２Ａアゴニスト、Ａ２Ｂアンタゴニスト、ドパミン受容体アゴニスト、ピルフェニドン、ニンテダニブ又はａｖＢ６アンタゴニスト）、気管支拡張剤（例えば、β－２アドレナリン受容体アゴニスト、ムスカリンアンタゴニスト、短時間作用性β２受容体アゴニスト、長時間作用性β２受容体アゴニスト、短時間作用性抗コリン薬、メチルキサンチン薬、長時間作用性抗コリン薬）、他のサイトカイン若しくはサイトカイン受容体アンタゴニスト若しくは抗体（例えば、ＩＬ－１３アンタゴニスト、ＩＬ－６アンタゴニスト、ＩＬ－１、ＩＬ－３３、ＩＬ－２５若しくはＴＮＦアルファのアンタゴニスト、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ３１抗体、抗ＩＬ３１Ｒ抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗エンドグリン抗体、抗ＩＬ１ｂ抗体、別の抗ＴＳＬＰ抗体又は抗ｈＴＳＬＰＲ抗体）、抗生物質、放射線療法、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、モンテルカスト、ザフィルルカスト又はプランルカスト）、ＰＤＥ４阻害剤（例えば、ロフルミラスト、キサンテン）、抗ヒスタミン剤又は鎮咳薬から選択される１つ又は複数の追加の治療薬と組み合わせた前記医薬の投与を含み、
    任意選択で、前記抗体又はその抗原結合断片が、逐次的に又は追加の治療薬と同時に投与される、使用。
  23. 有効量の請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、請求項１３に記載の核酸、請求項１４に記載のベクター、請求項１５に記載の宿主細胞、請求項１７に記載の多特異性抗体、請求項１８に記載のコンジュゲート、又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、ｉｎ ｖｉｖｏ／ｉｎ ｖｉｔｒｏでの、（ａ）ＴＳＬＰのＩＬ７Ｒα－ＴＳＬＰＲへの結合の阻害又は遮断、（ｂ）ＴＳＬＰの活性の下方制御又は除去、（ｃ）ＯＸ４０Ｌ発現の下方制御又は遮断、（ｄ）マスト細胞、ＤＣ、ＮＫＴ細胞のＴＳＬＰ誘導活性化及び／又は増殖の阻害又は遮断、（ｅ）ＴＳＬＰ誘導オステオプロテジェリン（ＯＰＧ）分泌の阻害又は遮断、（ｆ）Ｔｈ２サイトカイン、例えば、ＴＡＲＣ、ＣＣＬ２２、ＩＬ－４、ＩＬ－１３又はＩＬ－５のＴＳＬＰ誘導分泌の阻害又は遮断のうちの少なくとも１つのための方法であって、
    任意選択で、追加の治療薬が、前記抗体又はその抗原結合断片、前記核酸、前記ベクター、前記宿主細胞、前記多特異性抗体、前記コンジュゲート又は前記医薬組成物の投与と同時、その前又は後に投与される、方法。
  24. 有効量の請求項１９又は２０に記載の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含む、対象におけるアレルギー性炎症又は自己免疫疾患を予防及び／又は治療する方法であって、前記対象が哺乳動物であり、好ましくは、前記対象がヒトであり、
    任意選択で、追加の治療薬が、前記医薬組成物の投与と同時、その前又は後に投与され、
    任意選択で、前記アレルギー性炎症が、喘息、特発性肺線維症、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）、アレルギー性結膜炎、アレルギー性鼻炎（ＡＲ）、ネザートン症候群、好酸球性食道炎（ＥＯＥ）、食物アレルギー、アレルギー性下痢、好酸球性胃腸炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、アレルギー性真菌性副鼻腔炎、関節リウマチ、ＣＯＰＤ、全身性硬化症、ケロイド、潰瘍性大腸炎、慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）及び鼻ポリープ、慢性好酸球性肺炎、好酸球性気管支炎；チャーグ・ストラウス症候群、好酸球増加症、好酸球性多発血管炎性肉芽腫症、炎症性腸疾患、蕁麻疹、全身性肥満細胞症、皮膚肥満細胞症、並びに再発性特発性血管浮腫からなる群のうちの少なくとも１つから選択され、
    任意選択で、前記自己免疫疾患が、糖尿病、重症筋無力症、胃炎、天疱瘡、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ループス、大腸炎、リウマチ性疾患、乾癬、及び甲状腺疾患からなる群から選択され、
    任意選択で、追加の前記治療薬が、限定されないが、免疫抑制剤（例えば、コルチコステロイド、非ステロイド性グルココルチコイド受容体アゴニスト、ロイコトリエンＤ４アンタゴニスト、ロイコトリエンＢ４アンタゴニスト、Ａ２Ａアゴニスト、Ａ２Ｂアンタゴニスト、ドパミン受容体アゴニスト、ピルフェニドン、ニンテダニブ又はａｖＢ６アンタゴニスト）、気管支拡張剤（例えば、ベータ２アドレナリン受容体アゴニスト、ムスカリンアンタゴニスト、短時間作用性β２受容体アゴニスト、長時間作用性β２受容体アゴニスト、短時間作用性抗コリン薬、メチルキサンチン薬、長時間作用性抗コリン薬）、他のサイトカイン若しくはサイトカイン受容体アンタゴニスト若しくは抗体（例えば、ＩＬ－１３アンタゴニスト、ＩＬ－６アンタゴニスト、ＩＬ－１、ＩＬ－３３、ＩＬ－２５若しくはＴＮＦアルファのアンタゴニスト、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ３１抗体、抗ＩＬ３１Ｒ抗体、抗ＩＬ１３抗体、抗エンドグリン抗体、抗ＩＬ１ｂ抗体、別の抗ＴＳＬＰ抗体又は抗ｈＴＳＬＰＲ抗体）、抗生物質、放射線療法、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、モンテルカスト、ザフィルルカスト又はプランルカスト）、ＰＤＥ４阻害剤（例えば、ロフルミラスト、キサンテン）、抗ヒスタミン剤又は鎮咳薬から選択される、方法。
  25. 抗体又はその抗原結合断片及びＴＳＬＰとの複合体の形成が可能となる条件下で、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と試料を接触させるステップと、前記複合体の形成を検出するステップとを含む、試料におけるＴＳＬＰの存在又はレベルを検出する方法。
  26. アレルギー性炎症又は自己免疫疾患を診断するための医薬又はキットの調製における、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、又は請求項１３に記載の核酸、又は請求項１４に記載のベクター、又は請求項１５に記載の宿主細胞、又は請求項１７に記載の多特異性抗体、又は請求項１８に記載のコンジュゲート、又は請求項１９若しくは２０に記載の医薬組成物の使用であって、
    任意選択で、前記アレルギー性炎症が、喘息、特発性肺線維症、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）、アレルギー性結膜炎、アレルギー性鼻炎（ＡＲ）、ネザートン症候群、好酸球性食道炎（ＥＯＥ）、食物アレルギー、アレルギー性下痢、好酸球性胃腸炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症（ＡＢＰＡ）、アレルギー性真菌性副鼻腔炎、関節リウマチ、ＣＯＰＤ、全身性硬化症、ケロイド、潰瘍性大腸炎、慢性副鼻腔炎（ＣＲＳ）及び鼻ポリープ、慢性好酸球性肺炎、好酸球性気管支炎；チャーグ・ストラウス症候群、好酸球増加症、好酸球性多発血管炎性肉芽腫症、炎症性腸疾患、蕁麻疹、全身性肥満細胞症、皮膚肥満細胞症、並びに再発性特発性血管浮腫からなる群のうちの少なくとも１つから選択され、
    任意選択で、前記自己免疫疾患が、糖尿病、重症筋無力症、胃炎、天疱瘡、原発性胆汁性肝硬変、多発性硬化症、ループス、大腸炎、リウマチ性疾患、乾癬、及び甲状腺疾患からなる群から選択される、使用。
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