JP2022532918A - Ｍｃｌ－１阻害剤抗体－薬物コンジュゲートおよび使用方法 - Google Patents

Ｍｃｌ－１阻害剤抗体－薬物コンジュゲートおよび使用方法 Download PDF

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Abstract

ヒト腫瘍学標的に結合する抗体－薬物コンジュゲートが開示される。抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分を含む。本開示はさらに、本明細書において提供される抗体－薬物コンジュゲートを投与することによるがんの治療における使用のための方法および組成物に関する。Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分を含むリンカー－薬物コンジュゲートおよびその調製方法も開示される。

Description

関連出願
本出願は、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１９年５月２０日に出願された米国仮特許出願第６２／８５０，０９８号の３５ Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下での出願日に対する利益および優先権を主張する。
本開示は、Ｍｃｌ－１阻害剤と、抗原標的、例えば、腫瘍または他のがん細胞上で発現された抗原を結合する抗体またはその抗原結合性断片とを含む抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）に関する。本開示はさらに、標的抗原を発現するがんの処置および／もしくは診断において有用な、かつ／またはＭｃｌ－１発現および／もしくは活性を調節することにより処置に適用できる方法ならびに組成物、ならびにその組成物の調製方法に関する。Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分を含むリンカー－薬物コンジュゲートおよびその調製方法も開示される。
アポトーシスまたはプログラム細胞死は、胚発生および組織恒常性の維持にとって極めて重要な生理的過程である。アポトーシス型細胞死は一般に、核の凝縮およびＤＮＡ断片化などの形態学的変化、ならびに細胞の主要構造成分に損傷を与え得るカスパーゼの活性化などの生化学的変化を伴う。アポトーシスの制御は複雑であり、典型的には、いくつかの細胞内シグナル伝達経路の活性化または抑制を伴う（Cory et al. (2002) Nature Review Cancer 2:647-656）。
アポトーシスの制御解除は、ある特定の病態に関連する。例えば、アポトーシスの増加は、パーキンソン病、アルツハイマー病などの神経変性疾患、および虚血に関連する。逆に、アポトーシスにおける欠損は、がんの発生ならびに化学療法抵抗性、自己免疫疾患、炎症性疾患およびウイルス感染においてある役割を果たし得る。アポトーシスの欠如は、がんの表現型の特徴のうちの１つである（Hanahan et al. (2000) Cell 100:57-70）。Ｂｃｌ－２ファミリーの抗アポトーシスタンパク質は、結腸がん、乳がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、膀胱がん、卵巣がん、前立腺がん、慢性リンパ性白血病、リンパ腫、骨髄腫および膵臓がんなどの多くのタイプのがんに関連する。
骨髄細胞白血病１（Ｍｃｌ－１）（抗アポトーシスＢｃｌ－２ファミリーメンバー）は、細胞生存の制御因子である。Ｍｃｌ－１遺伝子の増幅および／またはＭｃｌ－１タンパク質の過剰発現が複数のがん型において観察されており、腫瘍発生に関係付けられる（Beroukhim et al. (2010) Nature 463(7283):899-905）。Ｍｃｌ－１は、ヒトがんにおいて最も頻繁に増幅される遺伝子のうちの１つであり、様々な抗がん剤に対する薬物耐性を媒介することが示されている決定的な生存因子でもある。
Ｍｃｌ－１は、Ｂｉｍ、Ｎｏｘａ、ＢａｋおよびＢａｘなどのプロアポトーシスタンパク質に結合し、その死誘導活性を中和することにより細胞生存を促進すると考えられる。Ｍｃｌ－１の阻害は、これらのプロアポトーシスタンパク質を放出し、しばしば、生存のためにＭｃｌ－１に依存する腫瘍細胞におけるアポトーシスを誘導する。したがって、アポトーシスシグナル伝達経路においてＭｃｌ－１またはその上流および／もしくは下流のタンパク質を治療標的にすることは、様々な悪性腫瘍を処置するための、およびある特定のヒトがんにおいて薬物耐性を克服するための有望な戦略となり得る。
一部の実施形態では、本開示は、部分的に、がん細胞に対する生物学的活性を有する新規な抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物を提供する。この化合物は、哺乳動物において腫瘍増殖を減速、阻害および／もしくは逆転することができ、かつ／またはヒトがん患者の処置に有用であり得る。さらに具体的には、本開示は、一部の実施形態では、がん細胞を結合し、死滅させることができるＡＤＣ化合物に関する。一部の実施形態では、本明細書に開示のＡＤＣ化合物は、Ｍｃｌ－１阻害剤を全長抗体または抗原結合性断片に結合するリンカーを含む。一部の実施形態では、ＡＤＣ化合物は、結合後に標的細胞内に内部移行することもできる。
一部の実施形態では、ＡＤＣ化合物は、式（１）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｄ）ｐ（１）
（式中、Ａｂは、抗体またはその抗原結合性断片であり、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤であり、
Ｌは、ＡｂをＤに共有結合するリンカーであり、
ｐは、１～１６の整数である）
により表すことができる。一部の実施形態では、Ａｂは、がん細胞を標的にする抗体またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、ｐは、１～８の整数である。一部の実施形態では、ｐは、１～５の整数である。一部の実施形態では、ｐは、２～４の整数である。一部の実施形態では、ｐは２である。一部の実施形態では、ｐは４である。一部の実施形態では、ｐは、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により決定される。
一部の実施形態では、リンカー（Ｌ）は、結合基と、少なくとも１つのスペーサー基と、少なくとも１つの切断可能な基とを含む。いくつかの場合では、切断可能な基は、ピロリン酸基および／または自壊性基を含む。特定の実施形態では、Ｌは、結合基と、少なくとも１つの架橋スペーサー基と、ピロリン酸基および／または自壊性基を含む少なくとも１つの切断可能な基とを含む。
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ａ）：
Figure 2022532918000001
 （式中、Ｒ１は結合基であり、Ｌ１は架橋スペーサー基であり、Ｅは切断可能な基である）のものであるリンカー－薬物（または「リンカー－ペイロード」）部分－（Ｌ－Ｄ）を含む。
一部の実施形態では、切断可能な基はピロリン酸基を含む。一部の実施形態では、切断可能な基は
Figure 2022532918000002
 を含む。
一部の実施形態では、架橋スペーサー基はポリオキシエチレン（ＰＥＧ）基を含む。いくつかの場合では、ＰＥＧ基は、ＰＥＧ１、ＰＥＧ２、ＰＥＧ３、ＰＥＧ４、ＰＥＧ５、ＰＥＧ６、ＰＥＧ７、ＰＥＧ８、ＰＥＧ９、ＰＥＧ１０、ＰＥＧ１１、ＰＥＧ１２、ＰＥＧ１３、ＰＥＧ１４およびＰＥＧ１５から選択されてよい。一部の実施形態では、架橋スペーサー基は－ＣＯ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２－を含んでよい。他の実施形態では、架橋スペーサー基は、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ヘプタノイルまたはオクタノイル基を含む。一部の実施形態では、架橋スペーサー基はヘキサノイル基を含む。
一部の実施形態では、結合基は、マレイミド基、チオール基、シクロオクチン基およびアジド基から選択される少なくとも１つの反応性基から形成されている。例えば、マレイミド基は構造：
Figure 2022532918000003
 を有してよい。
アジド基は構造：－Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ－を有してよい。
シクロオクチン基は構造：
Figure 2022532918000004
 を有してよく、ここで、
Figure 2022532918000005
 は、抗体との結合である。
いくつかの場合では、シクロオクチン基は構造：
Figure 2022532918000006
 を有し、ここで、
Figure 2022532918000007
 は、抗体との結合である。
一部の実施形態では、結合基は、
Figure 2022532918000008
 を含む式を有し、ここで、
Figure 2022532918000009
 は、抗体との結合である。
一部の実施形態では、抗体は、
Figure 2022532918000010
 から選択される結合基によりリンカー（Ｌ）に連結されており、
ここで、
Figure 2022532918000011
 は、抗体との結合であり、ここで、
Figure 2022532918000012
 は、架橋スペーサー基との結合である。
一部の実施形態では、架橋スペーサー基は、切断可能な基に連結されている。
一部の実施形態では、架橋スペーサー基は－ＣＯ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２－である。
一部の実施形態では、切断可能な基は－ピロリン酸－ＣＨ２－ＣＨ２－ＮＨ２－である。
一部の実施形態では、切断可能な基は、Ｍｃｌ－１阻害剤（Ｄ）に連結されている。
一部の実施形態では、切断可能な基は、フェニル－ピリミジニル基を介してＭｃｌ－１阻害剤（Ｄ）基に連結されている。
一部の実施形態では、リンカーは、結合基と、少なくとも１つの架橋スペーサー基と、ペプチド基と、少なくとも１つの切断可能な基とを含む。
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ｂ）：
Figure 2022532918000013
 （式中、Ｒ１は結合基であり、Ｌ１は架橋スペーサーであり、Ｌｐは、１～６個のアミノ酸残基を含むペプチド基であり、Ｅは切断可能な基であり、Ｌ２は架橋スペーサーであり、ｍは、０または１であり、ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）のものであるリンカー－薬物部分－（Ｌ－Ｄ）を含む。いくつかの場合では、ｍは１であり、架橋スペーサーは、
Figure 2022532918000014
 を含む。
一部の実施形態では、少なくとも１つの架橋スペーサーはＰＥＧ基を含む。いくつかの場合では、ＰＥＧ基は、ＰＥＧ１、ＰＥＧ２、ＰＥＧ３、ＰＥＧ４、ＰＥＧ５、ＰＥＧ６、ＰＥＧ７、ＰＥＧ８、ＰＥＧ９、ＰＥＧ１０、ＰＥＧ１１、ＰＥＧ１２、ＰＥＧ１３、ＰＥＧ１４およびＰＥＧ１５から選択される。いくつかの場合では、少なくとも１つの架橋スペーサーは、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＰＥＧ３－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２＊＊、＊－ＮＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊、ポリヒドロキシアルキル基および＊－Ｃ（Ｏ）－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｎ（ＣＨ３）－Ｃ（Ｏ）－＊＊（式中、＊＊は、結合基との少なくとも１つの架橋スペーサーの直接結合点または間接結合点を示し、＊は、ペプチド基との少なくとも１つの架橋スペーサーの直接結合点または間接結合点を示す）から選択される。
一部の実施形態では、Ｌ１は、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＰＥＧ３－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２＊＊、＊－ＮＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊およびポリヒドロキシアルキル基（式中、＊＊は、Ｒ１とのＬ１の直接結合点または間接結合点を示し、＊は、ＬｐとのＬ１の直接結合点または間接結合点を示す）から選択される。
一部の実施形態では、ｍは１であり、Ｌ２は－Ｃ（Ｏ）－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｎ（ＣＨ３）－Ｃ（Ｏ）－である。
一部の実施形態では、ペプチド基は、１～１２個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、１～１０個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、１～８個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、１～６個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基は、１～４個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基は、１～３個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基は、１～２個のアミノ酸残基を含む。いくつかの場合では、アミノ酸残基は、Ｌ－グリシン（Ｇｌｙ）、Ｌ－バリン（Ｖａｌ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－システイン酸（スルホ－Ａｌａ）、Ｌ－リシン（Ｌｙｓ）、Ｌ－イソロイシン（Ｉｌｅ）、Ｌ－フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、Ｌ－メチオニン（Ｍｅｔ）、Ｌ－アスパラギン（Ａｓｎ）、Ｌ－プロリン（Ｐｒｏ）、Ｌ－アラニン（Ａｌａ）、Ｌ－ロイシン（Ｌｅｕ）、Ｌ－トリプトファン（Ｔｒｐ）およびＬ－チロシン（Ｔｙｒ）から選択される。例えば、ペプチド基は、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｌｙｓおよび／またはスルホ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａを含んでよい。一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、
Figure 2022532918000015
 基に結合された１個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、
Figure 2022532918000016
 基を含む。
いくつかの場合では、ペプチド基は、
Figure 2022532918000017
 から選択される基を含む。
一部の実施形態では、自壊性基は、パラ－アミノベンジル－カルバメート、パラ－アミノベンジル－アンモニウム、パラ－アミノ－（スルホ）ベンジル－アンモニウム、パラ－アミノ－（スルホ）ベンジル－カルバメート、パラ－アミノ－（アルコキシ－ＰＥＧ－アルキル）ベンジル－カルバメート、パラ－アミノ－（ポリヒドロキシカルボキシテトラヒドロピラニル）アルキル－ベンジル－カルバメートまたはパラ－アミノ－（ポリヒドロキシカルボキシテトラヒドロピラニル）アルキル－ベンジル－アンモニウムを含む。
一部の実施形態では、ｍは１であり、架橋スペーサーは、
Figure 2022532918000018
 を含む。
一部の実施形態では、リンカー－薬物部分－（Ｌ－Ｄ）は、
Figure 2022532918000019
Figure 2022532918000020
Figure 2022532918000021
Figure 2022532918000022
 から選択される化合物から形成されている。
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、
Figure 2022532918000023
Figure 2022532918000024
Figure 2022532918000025
Figure 2022532918000026
Figure 2022532918000027
 から選択される式を含み、
ここで、
Figure 2022532918000028
 は、抗体との結合である、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）を含む。
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ｃ）：
Figure 2022532918000029
 （式中、Ｒ１は結合基であり、Ｌ１は架橋スペーサーであり、Ｌｐは、１～６個のアミノ酸を含むペプチド基であり、ＤはＭｃｌ－１阻害剤であり、Ｇ１－Ｌ２－Ａは自壊性スペーサーであり、Ｌ２は、結合、メチレン、ネオペンチレンまたはＣ２－Ｃ３アルケニレンであり、Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000030
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、Ｌ３はスペーサー部分であり、Ｒ２は親水性部分である）のものであるリンカー薬物基－（Ｌ－Ｄ）を含む。
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、式（Ｄ）：
Figure 2022532918000031
 （式中、Ｒ１は結合基であり、Ｌ１は架橋スペーサーであり、Ｌｐは、１～６個のアミノ酸を含むペプチド基であり、Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000032
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、Ｌ３はスペーサー部分であり、Ｒ２は親水性部分である）のものであるリンカー薬物基－（Ｌ－Ｄ）を含む。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022532918000033
 または＊－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）－＊＊を含み、ここで、各ｎは、１～１２の整数であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示す。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022532918000034
 であり、ｎは、１～１２の整数であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示す。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022532918000035
 であり、ｎは１であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示す。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022532918000036
 であり、ｎは１２であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示す。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022532918000037
 であり、ｎは、１～１２の整数であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示す。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
Figure 2022532918000038
 を含み、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示す。
一部の実施形態では、Ｌ１は、
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊を含む架橋スペーサーであり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示し、ここで、Ｘ１は、
Figure 2022532918000039
 であり、
各ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から独立して選択され、
各ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から独立して選択され、
各ｔは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９および３０から独立して選択される。
一部の実施形態では、Ｒ２は、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、ポリオール、ポリサルコシン、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000040
 基で置換されたＣ２－Ｃ６アルキルを含む親水性部分である。一部の実施形態では、Ｒ２は、
Figure 2022532918000041
 （式中、ｎは、１～６の間の整数である）、
Figure 2022532918000042
 である。
一部の実施形態では、親水性部分は、式：
Figure 2022532918000043
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲａ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒａまたは－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａであり、Ｒ’は、ＯＨ、－ＯＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲａ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒａまたは－ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａであり、ｍおよびｎのそれぞれは、２～２５の間（例えば、３～２５の間）の整数である）のポリエチレングリコールを含む。
一部の実施形態では、親水性部分は、
Figure 2022532918000044
 を含む。
一部の実施形態では、親水性部分は、ポリサルコシン、例えば、以下の部分
Figure 2022532918000045
 （式中、ｎは、３～２５の間の整数であり、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）を含むポリサルコシンを含む。
一部の実施形態では、Ｌ３は、構造
Figure 2022532918000046
 （式中、
Ｗは、－ＣＨ２－、－ＣＨ２Ｏ－、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－、
－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、－ＮＨＳ（Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、
Ｘは、結合、トリアゾリルまたは－ＣＨ２－トリアゾリル－である）
を有するスペーサー部分である。
一部の実施形態では、Ｌ３は、構造
Figure 2022532918000047
 （式中、
Ｗは、－ＣＨ２－、－ＣＨ２Ｏ－、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－、
－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、－ＮＨＳ（Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、
Ｘは、－ＣＨ２－トリアゾリル－Ｃ１～４アルキレン－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－、－Ｃ４－６シクロアルキレン－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－または－ＣＨ２－トリアゾリル－Ｃ１～４アルキレン－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－であり、ここで、各ｎは独立して、１、２または３である）
を有するスペーサー部分である。
一部の実施形態では、結合基は、少なくとも１つの反応性基を含む反応により形成される。いくつかの場合では、結合基は、リンカーに結合されている第１の反応性基と、抗体に結合されているか、または抗体のアミノ酸残基である第２の反応性基とを反応させることにより形成される。
一部の実施形態では、反応性基のうちの少なくとも１つは、
チオール、
マレイミド、
ハロアセトアミド、
アジド、
アルキン、
シクロオクテン、
トリアリールホスフィン、
オキサノルボルナジエン、
シクロオクチン、
ジアリールテトラジン、
モノアリールテトラジン、
ノルボルネン、
アルデヒド、
ヒドロキシルアミン、
ヒドラジン、
ＮＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、
ケトン、
ビニルスルホン、
アジリジン、
アミノ酸残基、
Figure 2022532918000048
 、－ＯＮＨ２、－ＮＨ２、
Figure 2022532918000049
 、－Ｎ３、
Figure 2022532918000050
 、－ＳＨ、－ＳＲ３、－ＳＳＲ４、－Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｉ、
Figure 2022532918000051
 、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、
Figure 2022532918000052
Figure 2022532918000053
 を含み、
ここで、
各Ｒ３は、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
各Ｒ４は、２－ピリジルまたは４－ピリジルであり、
各Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌおよび－ＯＨから独立して選択され、
各Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌ、－ＮＨ２、－ＯＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）２、－ＣＮ、－ＮＯ２および－ＯＨから独立して選択され、
各Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシおよび－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択される。
一部の実施形態では、第１の反応性基および第２の反応性基は、
チオールおよびマレイミド、
チオールおよびハロアセトアミド、
チオールおよびビニルスルホン、
チオールおよびアジリジン、
アジドおよびアルキン、
アジドおよびシクロオクチン、
アジドおよびシクロオクテン、
アジドおよびトリアリールホスフィン、
アジドおよびオキサノルボルナジエン、
ジアリールテトラジンおよびシクロオクテン、
モノアリールテトラジンおよびノルボルネン、
アルデヒドおよびヒドロキシルアミン、
アルデヒドおよびヒドラジン、
アルデヒドおよびＮＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、
ケトンおよびヒドロキシルアミン、
ケトンおよびヒドラジン、
ケトンおよびＮＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、
ヒドロキシルアミンおよび
Figure 2022532918000054
 、
アミンおよび
Figure 2022532918000055
 、または
ＣｏＡもしくはＣｏＡ類似体およびセリン残基
を含む。
一部の実施形態では、結合基は、
Figure 2022532918000056
Figure 2022532918000057
Figure 2022532918000058
Figure 2022532918000059
 から選択される基を含み、
ここで、
Ｒ３２は、Ｈ、Ｃ１～４アルキル、フェニル、ピリミジンまたはピリジンであり、
Ｒ３５は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フェニル、または１～３個の－ＯＨ基で置換されたＣ１～４アルキルであり、
各Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシおよび－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択され、
Ｒ３７は、Ｈ、フェニルおよびピリジンから独立して選択され、
ｑは、０、１、２または３であり、
Ｒ８は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ９は、Ｈ、－ＣＨ３またはフェニルである。
一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、１～６個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基（Ｌｐ）は、１～４個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基は、１～３個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ペプチド基は、１～２個のアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、アミノ酸残基は、Ｌ－グリシン（Ｇｌｙ）、Ｌ－バリン（Ｖａｌ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－システイン酸（スルホ－Ａｌａ）、Ｌ－リシン（Ｌｙｓ）、Ｌ－イソロイシン（Ｉｌｅ）、Ｌ－フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、Ｌ－メチオニン（Ｍｅｔ）、Ｌ－アスパラギン（Ａｓｎ）、Ｌ－プロリン（Ｐｒｏ）、Ｌ－アラニン（Ａｌａ）、Ｌ－ロイシン（Ｌｅｕ）、Ｌ－トリプトファン（Ｔｒｐ）およびＬ－チロシン（Ｔｙｒ）から選択される。一部の実施形態では、ペプチド基は、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｌｅｕ－Ｃｉｔ、スルホ－Ａｌａ－Ｖａｌおよび／またはスルホ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む。一部の実施形態では、Ｌｐは、
Figure 2022532918000060
 から選択される。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000061
 （式中、
Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000062
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000063
 （式中、
Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000064
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000065
 （式中、
Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000066
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000067
 （式中、
各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３および－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択され、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000068
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000069
 （式中、
各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３および－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択され、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000070
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000071
 （式中、
Ｘａは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは独立して、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000072
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000073
 （式中、
Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000074
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000075
 （式中、
Ｘｂは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは独立して、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000076
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000077
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000078
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000079
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000080
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000081
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000082
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000083
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000084
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000085
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000086
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000087
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000088
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000089
 （式中、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000090
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、リンカー－薬物基－（Ｌ－Ｄ）は、式：
Figure 2022532918000091
 （式中、
各Ｒは独立して、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000092
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
の化合物を含むか、またはそれから形成されている。
一部の実施形態では、Ａは結合である。
一部の実施形態では、Ｒは－ＣＨ３である。
一部の実施形態では、Ｍｃｌ－１阻害剤（Ｄ）は、式（Ｉ）：
Figure 2022532918000093
 （式中、
環Ｄ０は、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、
環Ｅ０は、フリル、チエニルまたはピロリル環であり、
Ｘ０１、Ｘ０３、Ｘ０４およびＸ０５は互いに独立して、炭素原子または窒素原子であり、
Ｘ０２は、Ｃ－Ｒ０２６基または窒素原子であり、
Figure 2022532918000094
 は、環が芳香族であることを意味し、
Ｙ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０３基であり、
Ｚ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０４基であり、
Ｒ０１は、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－Ｃｙ０８、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
Ｒ０２、Ｒ０３、Ｒ０４およびＲ０５は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、
－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０３１、
－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または
－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０１、Ｒ０２）、（Ｒ０２、Ｒ０３）、（Ｒ０３、Ｒ０４）または（Ｒ０４、Ｒ０５）は、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、ハロゲン、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１またはオキソから選択される１個もしくは２個の基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０６およびＲ０７は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、
－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、
－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、
－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０６、Ｒ０７）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１またはオキソで必要に応じて置換されており、
Ｗ０は、－ＣＨ２－基、－ＮＨ－基または酸素原子であり、
Ｒ０８は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、－ＣＨＲ０ａＲ０ｂ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０９は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、－Ｃｙ０２、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－Ｃｙ０３、－（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル－Ｏ－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０３、ハロゲン原子、シアノ基、－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１４または－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１４Ｒ０１４’であり、
Ｒ０１０は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、アリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、（Ｃ１～Ｃ６）シクロアルキルアルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキルまたは－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｏ－Ｃｙ０４であり、
あるいは対（Ｒ０９、Ｒ０１０）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、
Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、窒素は、水素原子および線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基から選択される１個または２個の基で置換されてよく、ここで、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されており、
Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－Ｃｙ０６－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０７、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ０１１、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＯＲ０１１、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＯＲ０１１、－ＳＯ２－Ｒ０１１、および－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１であり、
Ｒ０１３、Ｒ０１３’、Ｒ０１４およびＲ０１４’は互いに独立して、水素原子または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０ａは、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０ｂは、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－Ｒ０ｃ基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０ｃＲ０ｃ’基または－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０ｃ）２基であり、
Ｒ０ｃおよびＲ０ｃ’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、シクロアルキル基、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシカルボニル（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０ｃ、Ｒ０ｃ’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員から構成される非芳香族環を形成し、これは、窒素原子に加えて、酸素および窒素から選択される１～３個のヘテロ原子を含んでよく、ここで、窒素は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０は互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基を表し、それらのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
Ｃｙ０９は
Figure 2022532918000095
 であり、
またはＣｙ０９は、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル；および－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’から選択される基で置換されているヘテロアリール基であり、
Ｒ０１５は、水素原子；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基；または－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基であり、
Ｒ０１６は、水素原子；ヒドロキシ基；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基；（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－Ｖ０－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２基；－Ｏ－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ０２０基；－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ０２０基；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０２２Ｒ０２３基；または－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基であり、
Ｒ０１７は、水素原子；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；－ＣＨ２－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２基；ヒドロキシ基；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基；－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基；またはアルドン酸であり、
Ｍ＋は、薬学的に許容される一価カチオンであり、
Ｕ０は、結合または酸素原子であり、
Ｖ０は、－（ＣＨ２）ｓ０－基または－Ｃ（Ｏ）－基であり、
Ｒ０１８は、水素原子または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０１９は、水素原子またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２０は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２１およびＲ０２１’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０２１、Ｒ０２１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０２２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－（ＣＨ２）ｐ０－ＮＲ０２４Ｒ０２４’基または－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基であり、
Ｒ０２３は、水素原子または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０２２、Ｒ０２３）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～１８個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～５個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロシクロアルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０２４およびＲ０２４’は互いに独立して、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０２４、Ｒ０２４’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員から構成される芳香族または非芳香族環を形成し、これは、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含んでよく、ここで、得られた環は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０２５は、水素原子、ヒドロキシ基またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２６は、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、またはシアノ基であり、
Ｒ０２７は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２８は、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）（Ｏ－）基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）（ＯＲ０３０）基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０３０）（ＯＲ０３０’）基、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－基、－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－Ｏ－基、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０基、－Ｃｙ０１０、－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０２９基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０２９基または－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０２９Ｒ０２９’基であり、
Ｒ０２９およびＲ０２９’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基または線状もしくは分枝状アミノ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基を表し、
Ｒ０３０およびＲ０３０’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０３１は
Figure 2022532918000096
 であり、ここで、アンモニウムカチオンは必要に応じて、双性イオン型として存在するか、または一価のアニオン性対イオンを有し、
ｎ０は、０または１に等しい整数であり、
ｐ０は、０、１、２または３に等しい整数であり、
ｑ０は、１、２、３または４に等しい整数であり、
ｒ０およびｓ０は、独立して０または１に等しい整数であり、
ここで、最大で、Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、リンカーに共有結合されており、ここで、原子の価数を、それに結合された１個または複数の置換基が超えない）
の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む。
一部の実施形態では、Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０は、互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、ハロ；－（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ；－（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル；－（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０；
－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２；－ＣＨ２－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；
－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル；
－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル；または－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’から選択される１個または複数の基で必要に応じて置換されている。
一部の実施形態では、Ｄは、式（ＩＩ）：
Figure 2022532918000097
 （式中、
Ｚ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０４基であり、
Ｒ０１は、ハロゲン原子、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状または分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状または分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル基、ヒドロキシ基、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、－Ｃｙ０８、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’であり、
Ｒ０２、Ｒ０３およびＲ０４は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、
－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０３１、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または
－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０２、Ｒ０３）または（Ｒ０３、Ｒ０４）は、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、環は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１およびオキソから選択される基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０６およびＲ０７は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、
－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０６、Ｒ０７）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１およびオキソから選択される基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０８は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリール－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０９は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状または分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、線状または分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、－Ｃｙ０２、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－Ｃｙ０３、－（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル－Ｏ－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０３、ハロゲン原子、シアノ基、－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１４、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１４Ｒ０１４’であり、
Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、Ｎ原子は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、ここで、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されており、
Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、
－Ｃｙ０５－Ｃｙ０６－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０７、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ０１１、
－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＯＲ０１１、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＯＲ０１１、
－ＳＯ２－Ｒ０１１、または－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１を表し、
Ｒ０１３、Ｒ０１３’、Ｒ０１４およびＲ０１４’は互いに独立して、水素原子、または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７およびＣｙ０８は互いに独立して、必要に応じて置換されたシクロアルキル基、必要に応じて置換されたヘテロシクロアルキル基、必要に応じて置換されたアリール基または必要に応じて置換されたヘテロアリール基であり、
Ｃｙ０９は
Figure 2022532918000098
 であり、
ここで、Ｒ０１５、Ｒ０１６およびＲ０１７は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
Ｒ０３１は
Figure 2022532918000099
 であり、ここで、Ｒ０２７およびＲ０２８は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
ここで、最大で、Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、リンカーに共有結合されている）
の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む。
一部の実施形態では、Ｄは、式（ＩＩＩ）：
Figure 2022532918000100
 （式中、
Ｒ０１は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０３は、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’または
Figure 2022532918000101
 であり、
ここで、Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、Ｎ原子は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基から選択される１個または２個の基で置換されてよく、
ここで、Ｒ０２７は水素原子であり、Ｒ０２８は、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－基または－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基であり、
Ｒ０９は、線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基または－Ｃｙ０２であり、
Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６または－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９であり、
Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０５およびＣｙ０６は互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
Ｃｙ０９は
Figure 2022532918000102
 であり、
Ｒ０１５、Ｒ０１６およびＲ０１７は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
ここで、最大で、Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、リンカーに共有結合されている）
の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む。
一部の実施形態では、Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６は、互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、ハロ；－（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ；－（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル；－（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０；－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０；
－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２；－ＣＨ２－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；
－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル；
－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル；または－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’から選択される１個または複数の基で必要に応じて置換されている。
一部の実施形態では、Ｒ０１は、メチルまたはエチルである。
一部の実施形態では、Ｒ０３は－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’（式中、Ｒ０１１およびＲ０１１’は、それらを保持している窒素原子と一緒に、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で置換されてよいピペラジニル基を形成する）である。
一部の実施形態では、Ｒ０３は、式：
Figure 2022532918000103
 （式中、Ｒ０２７は水素原子であり、Ｒ０２８は－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０基であり、ｐ０は、０、１、２または３に等しい整数であり、ここで、Ｒ０３０は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基を表す）
を含む。
一部の実施形態では、Ｒ０３は、式：
Figure 2022532918000104
 （式中、
Figure 2022532918000105
 は、リンカーとの結合である）
を含む。
一部の実施形態では、Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０は互いに独立して、必要に応じて置換されたシクロアルキル基、必要に応じて置換されたヘテロシクロアルキル基、必要に応じて置換されたアリール基または必要に応じて置換されたヘテロアリール基であり、ここで、必要に応じた置換基は、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルケニル基、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ２－Ｃ６）アルキニル基、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、必要に応じて置換された（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｓ－、ヒドロキシ、オキソ（もしくは適切な場合にはＮ－オキシド）、ニトロ、シアノ、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０’、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０’、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０’Ｒ０’’、－ＮＲ０’Ｒ０’’、－（Ｃ＝ＮＲ０’）－ＯＲ０’’、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、トリフルオロメトキシまたはハロゲンから選択され、ここで、Ｒ０’およびＲ０’’は、それぞれ独立して水素原子または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、ここで、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されている。
一部の実施形態では、Ｒ０９は、Ｃｙ０２基、好ましくはアリール基、より好ましくはフェニル基である。一部の実施形態では、Ｃｙ０２は、必要に応じて置換されたアリール基である。
一部の実施形態では、Ｃｙ０５は、ピラゾリル基およびピリミジニル基から選択されるヘテロアリール基を含む。
一部の実施形態では、Ｃｙ０５はピリミジニル基である。
一部の実施形態では、Ｃｙ０５はピリミジニル基であり、Ｃｙ０６はフェニル基である。
一部の実施形態では、リンカー（Ｌ）は、Ｌから式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のＲ０３までの共有結合によりＤに結合されている。一部の実施形態では、リンカー（Ｌ）は、Ｌから式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のＲ０９までの共有結合によりＤに結合されている。
一部の実施形態では、Ｄは、
Figure 2022532918000106
Figure 2022532918000107
 もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む。
一部の実施形態では、－（Ｌ－Ｄ）は、表Ａから選択される化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／またはその薬学的に許容される塩から形成されている。表Ａ中の化合物について、それらの電子電荷に応じて、これらの化合物は、１個の薬学的に許容される一価のアニオン性対イオンＭ１ －を含むことができる。一部の実施形態では、一価のアニオン性対イオンＭ１ －は、臭化物、塩化物、ヨウ化物、酢酸、トリフルオロ酢酸、安息香酸、メシル酸、トシル酸、トリフル酸、ギ酸または同種のものから選択され得る。一部の実施形態では、一価のアニオン性対イオンＭ１ －は、トリフルオロ酢酸またはギ酸である。
Figure 2022532918000108
Figure 2022532918000109
Figure 2022532918000110
Figure 2022532918000111
Figure 2022532918000112
Figure 2022532918000113
Figure 2022532918000114
Figure 2022532918000115
Figure 2022532918000116
Figure 2022532918000117
Figure 2022532918000118
Figure 2022532918000119
Figure 2022532918000120
Figure 2022532918000121
Figure 2022532918000122
Figure 2022532918000123
Figure 2022532918000124
Figure 2022532918000125
Figure 2022532918000126
Figure 2022532918000127
Figure 2022532918000128
Figure 2022532918000129
Figure 2022532918000130
Figure 2022532918000131
Figure 2022532918000132
Figure 2022532918000133
Figure 2022532918000134
Figure 2022532918000135
Figure 2022532918000136
Figure 2022532918000137
Figure 2022532918000138
Figure 2022532918000139
Figure 2022532918000140
Figure 2022532918000141
Figure 2022532918000142
Figure 2022532918000143
Figure 2022532918000144
Figure 2022532918000145
Figure 2022532918000146
Figure 2022532918000147
Figure 2022532918000148
Figure 2022532918000149
Figure 2022532918000150
Figure 2022532918000151
Figure 2022532918000152
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、表１ａに示された構造のいずれか１つによる式を有する。
Figure 2022532918000153
Figure 2022532918000154
Figure 2022532918000155
Figure 2022532918000156
Figure 2022532918000157
Figure 2022532918000158
Figure 2022532918000159
Figure 2022532918000160
Figure 2022532918000161
Figure 2022532918000162
Figure 2022532918000163
Figure 2022532918000164
一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、表１ｂに示された構造のいずれか１つによる式を有する。
Figure 2022532918000165
Figure 2022532918000166
Figure 2022532918000167
Figure 2022532918000168
Figure 2022532918000169
Figure 2022532918000170
Figure 2022532918000171
Figure 2022532918000172
Figure 2022532918000173
Figure 2022532918000174
Figure 2022532918000175
Figure 2022532918000176
本明細書で使用される場合、「Ｌ／Ｐ」は、本明細書に開示のリンカー－ペイロード、リンカー－薬物またはリンカー－化合物を指し、「Ｌ＃－Ｐ＃」および「Ｌ＃－Ｃ＃」という用語は、本明細書に開示のある特定のリンカー－薬物を指すために同義で使用され、一方、「Ｐ＃」および「Ｃ＃」というコードは、特に指定のない限りある特定の化合物を指すために同義で使用される。例えば、「Ｌ１－Ｃ１」および「Ｌ１－Ｐ１」はいずれも、本明細書に開示の同じリンカー－ペイロード構造を指し、一方、「Ｃ１」および「Ｐ１」はいずれも、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む本明細書に開示の同じ化合物を示す。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、がん細胞上の標的抗原に結合する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号１５（ＨＣＤＲ１）、配列番号１６（ＨＣＤＲ２）および配列番号１７（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号１８（ＬＣＤＲ１）、配列番号１９（ＬＣＤＲ２）および配列番号２０（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、１５２位および３７５位にシステイン残基（Ｃ）を含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、１５６位および３７９位にシステイン残基（Ｃ）を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＣＤ３３抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）および配列番号２３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）および配列番号２６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、２９７位にグルタミン残基（Ｑ）を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＰＣＡＤ抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号３３（ＨＣＤＲ１）、配列番号３４（ＨＣＤＲ２）および配列番号３５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号３６（ＬＣＤＲ１）、配列番号３７（ＬＣＤＲ２）および配列番号３８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＨＥＲ２抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号３９（ＨＣＤＲ１）、配列番号４０（ＨＣＤＲ２）および配列番号４１（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号４２（ＬＣＤＲ１）、配列番号４３（ＬＣＤＲ２）および配列番号４４（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、２９７位にグルタミン残基（Ｑ）を含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、２９７位にセリン残基（Ｓ）を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＣＤ３８抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＣＤ４６抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＣＤ４８抗体または抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗ＣＤ７９ｂ抗体または抗原結合性断片である。
本明細書において同じく提供されるのは、一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲート（例えば、本明細書に記載の例示的な抗体－薬物コンジュゲートのいずれか）の複数コピーを含む組成物である。一部の実施形態では、組成物中の抗体－薬物コンジュゲートの平均ｐは、約２～約４である。
本明細書において同じく提供されるのは、一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲート（例えば、本明細書に記載の例示的な抗体－薬物コンジュゲートのいずれか）または組成物（例えば、本明細書に記載の例示的な組成物のいずれか）と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物である。
本明細書においてさらに提供されるのは、一部の実施形態では、記載されたＡＤＣ化合物および組成物のための、例えばがんの処置における、治療的使用である。一部の実施形態では、本開示は、がん（例えば、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２など、ＡＤＣの抗体または抗原結合性断片によって標的にされた抗原を発現するがん）を処置する方法を提供する。一部の実施形態では、本開示は、対象におけるがん細胞集団の拡大を低減または減速する方法を提供する。一部の実施形態では、本開示は、がんを有するか、または有することが疑われる対象が本明細書に開示のＡＤＣ化合物または組成物での処置に応答するかどうか判定する方法を提供する。
例示的な実施形態は、がんを有するか、または有することが疑われる対象を処置する方法であって、対象に治療有効量の抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）を投与することを含む方法である。一部の実施形態では、がんは標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がんは、腫瘍または血液がんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。
別の例示的な実施形態は、対象における腫瘍の増殖を低減または阻害する方法であって、対象に治療有効量の抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）を投与することを含む方法である。一部の実施形態では、腫瘍は標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、腫瘍は、乳がん、胃がん、膀胱がん、脳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、黒色腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、腫瘍は胃がんである。一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物の投与は、腫瘍の増殖を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％または少なくとも約９９％低減または阻害する。
別の例示的な実施形態は、対象におけるがん細胞集団の拡大を低減または減速する方法であって、対象に治療有効量の抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）を投与することを含む方法である。一部の実施形態では、がん細胞集団は標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がん細胞集団は、腫瘍または血液がんに由来する。一部の実施形態では、がん細胞集団は、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんに由来する。一部の実施形態では、がん細胞集団は、リンパ腫または胃がんに由来する。一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物の投与は、がん細胞集団を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％または少なくとも約９９％低減する。一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物の投与は、がん細胞集団の拡大を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％または少なくとも約９９％減速する。
別の例示的な実施形態は、がんを有するか、または有することが疑われる対象の処置における使用のための抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）である。一部の実施形態では、がんは標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がんは、腫瘍または血液がんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。
別の例示的な実施形態は、がんを有するか、または有することが疑われる対象の処置における抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）の使用である。一部の実施形態では、がんは標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がんは、腫瘍または血液がんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。
別の例示的な実施形態は、がんを有するか、または有することが疑われる対象を処置するための医薬の製造方法における抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）の使用である。一部の実施形態では、がんは標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がんは、腫瘍または血液がんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。
別の例示的な実施形態は、対象からの生物学的試料を用意すること；試料を抗体－薬物コンジュゲートと接触させること；および試料中のがん細胞との抗体－薬物コンジュゲートの結合を検出することにより、がんを有するか、または有することが疑われる対象が抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物（例えば、本明細書に開示の例示的な抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物のいずれか）での処置に応答するかどうか判定する方法である。一部の実施形態では、試料中のがん細胞は標的抗原を発現する。一部の実施形態では、がんは標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣物）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰ Ｉ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がんは、腫瘍または血液がんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。一部の実施形態では、試料は、組織生検試料、血液試料または骨髄試料である。
記載されたＡＤＣ化合物および組成物を作製する方法も開示される。例示的な実施形態は、コンジュゲーションを可能にする条件下、Ｍｃｌ－１阻害剤に連結された切断可能なリンカーと抗体または抗原結合性断片を反応させることにより抗体－薬物コンジュゲートを作製する方法である。
細菌性トランスグルタミナーゼ（ＢＴＧ）を使用する例示的な部位特異的抗体コンジュゲーションを示す図である。 Ａ４－Ｆｕｋ細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ３８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＫＭＳ０２１ ＢＭ細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ３８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ４８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＯＰＭ－２細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ４８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＡＭＯ１細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ４８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＲＳ４、１１細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ７９ｂ標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＨＣＣ１９５４細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、およびＨＥＲ２標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＨＣＣ２２１８細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、およびＨＥＲ２標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ３３標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＭＯＬＭ－１３細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＣＤ３３標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞での遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、ＢＣＭＡ標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣの用量応答曲線を示す。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＣＤ３３ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＣＤ３３ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＣＴＧ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＨＥＲ２ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＨＣＣ１９５４細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＣＴＧ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＨＥＲ２ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＨＣＣ１９５４細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＢＣＭＡ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＢＣＭＡ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＢＣＭＡ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての試験した抗ＢＣＭＡ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 アイソタイプ対照ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、または抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ７－Ｐ１（１０および／または３０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶで１回投与、ｎ＝６）で処置した際のＮＣＩ－Ｈ９２９を移植した雌のＳＣＩＤマウスの腫瘍体積（ｍｍ３）を示す。 アイソタイプ対照ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、または抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ７－Ｐ１（１０および／または３０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶで１回投与、ｎ＝６）で処置した際のＮＣＩ－Ｈ９２９を移植した雌のＳＣＩＤマウスの体重減少のパーセンテージ（％）を示す。 ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞において抗ＣＤ４８ ＡＤＣを試験するＣＴＧ細胞生存率アッセイの結果を示す。 ＫＨＭ１Ｂ細胞において抗ＣＤ４８ ＡＤＣを試験するＣＴＧ細胞生存率アッセイの結果を示す。 ＫＭＳ２１ＢＭ細胞において抗ＣＤ４８ ＡＤＣを試験するＣＴＧ細胞生存率アッセイの結果を示す。 抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレントまたは異なる抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ ＦｃサイレントＡＤＣ（２０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶで１回投与、ｎ＝６）で処置した際の無作為化後の時間（日数）でのＨ９２９を移植した雌のＳＣＩＤマウスの腫瘍体積（ｍｍ３）を示す。 抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレントまたは異なる抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ ＦｃサイレントＡＤＣ（２０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶで１回投与、ｎ＝６）で処置した際の無作為化後の時間（日数）でのＨ９２９を移植した雌のＳＣＩＤマウスの体重減少の％を示す。 ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、または抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１（３０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶで１回投与、ｎ＝８）で処置した際の無作為化後の時間（日数）でのＨ９２９を移植した雌のＳＣＩＤマウスの腫瘍体積（ｍｍ３）を示す。 ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、または抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１（３０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶで１回投与、ｎ＝８）で処置した際の無作為化後の時間（日数）でのＨ９２９を移植した雌のＳＣＩＤマウスの体重減少の％を示す。 ＣＴＧ細胞生存率アッセイの結果を示す。抗ＣＤ４６－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ Ａｂ Ｃ－Ｌ９－Ｃ１および対応するペイロードＣ１は、ＫＭＳ２１ＢＭ細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全てのＡＤＣは、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞の生存率において単剤での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善される一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全てのＡＤＣは、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞の生存率において単剤での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善される一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、ＡＭＯ１細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善された一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、ＡＭＯ１細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善された一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善される一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。 ＭＴＴ細胞生存率アッセイの結果を示す。全ての抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善される一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。 ＫＭＳ－２１ＢＭ、ＫＭＳ－２０、ＫＭＳ－２７、およびＮＣＩ－Ｈ９２９に対するＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１、アイソタイプＩｇＧ１－Ｌ７－Ｐ１ ＡＤＣ、およびＭＣＬ－１遊離ペイロードＰ１の阻害活性を示す。 ＫＭＳ－２１ＢＭ、ＫＭＳ－２０、ＫＭＳ－２７、およびＮＣＩ－Ｈ９２９に対するベネトクラクスと組み合わせたＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１、アイソタイプＩｇＧ１－Ｌ７－Ｐ１ ＡＤＣ、およびＭＣＬ－１遊離ペイロードＰ１の阻害活性を示す。 ＫＭＳ－２１ＢＭ、ＫＭＳ－２０、ＫＭＳ－２７、およびＮＣＩ－Ｈ９２９に対するベネトクラクスと組み合わせたＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１、アイソタイプＩｇＧ１－Ｌ７－Ｐ１ ＡＤＣ、およびＭＣＬ－１遊離ペイロードＰ１の阻害活性を示す。
開示される組成物および方法は、本開示の一部を形成する添付の図面と関連させた以下の詳細な説明への参照によって、より容易に理解することができる。
本文全体にわたり、本記載は組成物および組成物を使用する方法に言及する。本開示が組成物に関連する特性または実施形態を説明または特許請求する場合、そのような特性または実施形態は、組成物を使用する方法に等しく使用可能である。同様に、本開示が組成物を使用する方法に関連する特性または実施形態を説明または特許請求する場合、そのような特性または実施形態は、組成物に等しく使用可能である。
値の範囲が表現される場合、これは範囲内の任意の特定の値を使用する実施形態を含む。さらに、範囲内で述べられる値への言及は、その範囲内の各およびあらゆる値を含む。すべての範囲は、それらの端点を含み、組合せ可能である。同様に、値が近似として表現されるとき、先行詞「約」を使用することによって、特定の値が別の実施形態を形成することが理解される。特定の数値への言及は、文脈上別段に明記されていない限り、少なくともその特定の値を含む。「または」の使用は、その使用の特定の文脈上別段に記されていない限り、「および／または」を意味することとなる。本明細書で引用されているすべての引用文献は、任意の目的のために参照により組み込まれる。参照と本明細書とが矛盾する場合、本明細書が優先される。
本明細書の文脈上別段に示されない限り、例えば接続の特定の点を表す記号の不在下で、構造または構造の断片が描かれる場合、それ自体またはＡＤＣの他の構成成分へ結合させて使用することができ、これは任意の方向で、例えば抗体を化学的部分、例えばリンカー－薬物に任意の好適な結合点で結合させて、使用することができる。しかし示される場合、ＡＤＣの構成成分は、所与の式において示される方向で結合している。例えば式（１）がＡｂ－（Ｌ－Ｄ）ｐとして説明され、群「－（Ｌ－Ｄ）」が
Figure 2022532918000177
 として説明される場合、式（１）の緻密な構造は
Figure 2022532918000178
 である。これは
Figure 2022532918000179
 ではない。
明瞭にするために、別個の実施形態の文脈において本明細書で記載される、開示される組成物および方法のある特定の特性はまた、単一の実施形態において組み合わせて提供されてもよいことが諒解される。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈において記載される、開示される組成物および方法の様々な特性はまた、別個にもしくは任意の部分組合せにおいて提供されてもよい。
本出願全体にわたり使用される場合、抗体薬物コンジュゲートは、「標的抗原／抗体－リンカー－ペイロード」という一般形式の命名規則を使用して特定することができる。例のみとして、抗体薬物コンジュゲートが「標的Ｘ－Ｌ０－Ｐ０」と称される場合、そのようなコンジュゲートは、標的Ｘに結合する抗体、Ｌ０と命名されるリンカーおよびＰ０と命名されるペイロードを含むであろう。あるいは、抗体薬物コンジュゲートが「抗標的Ｘ－Ｌ０－Ｐ０」と称される場合、そのようなコンジュゲートは、標的Ｘに結合する抗体、Ｌ０と命名されるリンカーおよびＰ０と命名されるペイロードを含むであろう。あるいは、抗体薬物コンジュゲートが「ＡｂＸ－Ｌ０－Ｐ０」と称される場合、そのようなコンジュゲートは、ＡｂＸと命名される抗体、Ｌ０と命名されるリンカーおよびＰ０と命名されるペイロードを含むであろう。非特異的アイソタイプ対照抗体を含む対照抗体薬物コンジュゲートは、「アイソタイプ対照ＩｇＧ１－Ｌ０－Ｐ０」または「ＩｇＧ１－Ｌ０－Ｐ０」として言及されることがある。
本明細書で示される任意の式は、化合物の標識されていない形態ならびに同位体で標識された形態を表すことも意図されている。同位体で標識された化合物は、１つまたは複数の原子が選択された原子量または質量数を有する原子により置換されていることを除いて、本明細書で示される式により表される構造を有する。本発明の化合物中に組み入れることのできる同位体には、例えば水素、炭素、窒素、酸素、フッ素および塩素の同位体、例えば３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆおよび３６Ｃｌが挙げられる。したがって、本開示は、例えば、放射性同位体、例えば３Ｈおよび１４Ｃを含む上述の同位体のいずれかの１つまたは複数を組み込む化合物、またはその中に非放射性同位体、例えば２Ｈおよび１３Ｃが存在するものを含むことを理解されたい。そのような同位体で標識された化合物は、代謝試験（１４Ｃを用いる）、反応動力学試験（例えば２Ｈまたは３Ｈを用いる）、検出もしくはイメージング技術、例えば薬物もしくは物質の組織分布アッセイを含む陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）もしくは単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）において、または患者の放射線処置において、有用である。特に、１８Ｆまたは標識された化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ試験に特に望ましいことがある。同位体で標識された化合物は、一般的に、当業者に公知の従来の技術により、例えば以前採用された標識されていない試薬の代わりに適切な同位体で標識された試薬を使用して、調製することができる。
定義
記載の態様に関する様々な用語が、本明細書および特許請求の範囲の全体にわたり使用される。そのような用語は、特に断りのない限り、当該技術分野における通常の意味を与えられることとなる。他の具体的に定義された用語は、本明細書で提供される定義と一致する方法で解釈されることとなる。
本明細書で使用される場合、単数形「１つの」（「ａ」、「ａｎ」）および「その」（「ｔｈｅ」）は、文脈上別段に記されていない限り、複数形を含む。「含む（comprising）」、「有する」、「化学式のものである」におけるような「のものである」、「含む（including）」および「含有する」という用語は、特に断りのない限り、オープンな用語（すなわち「限定されるものではないが、含む」を意味する）と解釈される。加えて、「含む（comprising）」または別のオープンエンドの用語が一実施形態において使用される場合はいつでも、同じ実施形態を中間的な用語「から本質的になる」またはクローズな用語「からなる」を使用してより狭く特許請求することができることを理解されたい。
「約」または「およそ」という用語は、数値および範囲の文脈において使用される場合、本明細書に含有される教示から当業者に明らかであるような、実施形態を意図されているように行うことができるような、列挙された値または範囲に近似するかまたはそれに近い値または範囲を指す。一部の実施形態では、約は、数量のプラスまたはマイナス２０％、１５％、１０％、５％、１％、０．５％または０．１％を意味する。一実施形態では、「約」という用語は、特定の値よりも１０％多いかまたは少ない値の範囲を指す。別の実施形態では、「約」という用語は、特定の値よりも５％多いかまたは少ない値の範囲を指す。別の実施形態では、「約」という用語は、特定の値よりも１％多いかまたは少ない値の範囲を指す。
「抗体－薬物コンジュゲート」、「抗体コンジュゲート」、「コンジュゲート」、「イムノコンジュゲート」および「ＡＤＣ」という用語は互換的に使用され、１つまたは複数の抗体または抗原結合性断片と連結する１つまたは複数の治療化合物（例えばＭｃｌ－１阻害剤）を指す。一部の実施形態では、ＡＤＣは、一般式：Ａｂ－（Ｌ－Ｄ）ｐ（式１）（式中、Ａｂ＝抗体または抗原結合性断片、Ｌ＝リンカー部分、Ｄ＝薬物部分（例えばＭｃｌ－１阻害剤薬物部分）およびｐ＝抗体または抗原結合性断片あたりの薬物部分の数である）により定義される。Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分を含むＡＤＣでは、「ｐ」は、抗体または抗原結合性断片に連結したＭｃｌ－１阻害剤化合物の数を指す。
「抗体」という用語は、最も広い意味で、免疫グロブリン分子の可変領域中の少なくとも１つの抗原認識部位を通して、標的、例えばタンパク質、ポリペプチド、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質または上記の組合せを認識し特異的に結合する、免疫グロブリン分子を指す。抗体は、ポリクローナルもしくはモノクローナルの、複数鎖もしくは単鎖の、または無傷免疫グロブリンであることができ、天然供給源または組換え供給源に由来することができる。「無傷」抗体は、典型的に、ジスルフィド結合により相互接続されている少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質である。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書でＶＨと略される）および重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書でＶＬと略される）および軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と名付けられるより保存的な領域が介在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と名付けられる超可変性の領域にさらに細分することができる。各ＶＨおよびＶＬは、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシル末端へと配列される、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成される。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えばエフェクター細胞）および古典的補体系の第１の構成成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組織または因子への、免疫グロブリンの結合を媒介することができる。抗体は、モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、ラクダ化抗体（camelised antibody）またはキメラ抗体であることができる。抗体は、任意のアイソタイプ（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスのものであることができる。抗体は、無傷抗体またはその抗原結合性断片であることができる。
「抗体断片」または「抗原結合性断片」または「機能性抗体断片」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原（例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２）のエピトープと特異的に相互作用する（例えば結合、立体障害、安定化／不安定化、空間的分布により）能力を保持する少なくとも１つの抗体の部分を指す。抗原結合性断片は、抗原発現細胞中に内在化する能力も保持することができる。一部の実施形態では、抗原結合性断片は、免疫エフェクター活性も保持する。抗体、抗体断片、抗原結合性断片等の用語は、より大きな巨大分子、例えばＡＤＣの文脈における抗体由来の結合ドメインの使用を包含することを意図されている。全長抗体の断片は、全長抗体の抗原結合機能を行うことができることが示されている。抗体断片の例には、限定されるものではないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ抗体断片、ジスルフィド連結したＦｖｓ（ｓｄＦｖ）、ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、線状抗体、単一ドメイン抗体、例えばｓｄＡｂ（ＶＬまたはＶＨのいずれか）、ラクダＶＨＨドメイン、抗体断片、例えばヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価の断片から形成された多重特異性抗体、ならびに抗体の単離されたＣＤＲまたは他のエピトープ結合断片が挙げられる。抗原結合性断片は、単一ドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、ナノボディ、イントラボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、二重特異性または多重特異性抗体構築物、ＡＤＣ、ｖ－ＮＡＲおよびｂｉｓ－ｓｃＦｖ中に組み込むこともできる（例えば、Holliger and Hudson (2005) Nat Biotechnol. 23(9):1126-36を参照されたい）。抗原結合性断片は、ポリペプチドをベースとする足場、例えばフィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）中に移植することもできる（フィブロネクチンポリペプチドミニボディを説明する米国特許第６，７０３，１９９号明細書を参照されたい）。「ｓｃＦｖ」という用語は、軽鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗原結合性断片および重鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗原結合性断片を含む融合タンパク質を指し、ここで軽鎖および重鎖可変領域は、例えば合成リンカー、例えば短い可撓性のポリペプチドリンカーを介して連続して連結され、単一鎖ポリペプチドとして発現することが可能であり、ここでｓｃＦｖは、それが由来する無傷抗体の特異性を保持する。指定のない限り、ｓｃＦｖは、ＶＬおよびＶＨ可変領域をいずれかの順序で有することができ、例えばポリペプチドのＮ末端およびＣ末端に対して、ｓｃＦｖはＶＬ－リンカー－ＶＨを含むことができるか、またはＶＨ－リンカー－ＶＬを含むことができる。抗原結合性断片は当業者に公知の従来の技術を使用して得られ、結合断片は、無傷抗体と同じ方法で、有用性（例えば結合親和性、内在化）についてスクリーニングされる。抗原結合性断片は、例えば、無傷タンパク質の切断、例えばプロテアーゼまたは化学的切断により調製することができる。
「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原特異性および結合親和性を付与する抗体可変領域中のアミノ酸の配列を指す。例えば一般的に、各重鎖可変領域中には３つのＣＤＲ（例えばＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、各軽鎖可変領域中には３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３）が存在する。所与のＣＤＲの正確なアミノ酸配列境界は、Kabat et al. (1991)“Sequences of Proteins of Immunological Interest,” 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）；Al-Lazikani et al. (1997) J Mol Biol. 273(4):927-48（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）；ＩｍＭｕｎｏＧｅｎＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）番号付け（Lefranc (2001) Nucleic Acids Res. 29(1):207-9; Lefranc et al. (2003) Dev Comp Immunol. 27(1):55-77)（「ＩＭＧＴ」番号付けスキーム）により記載されるものを含む多数の周知のスキームのいずれか、またはそれらの組合せを使用して決定することができる。所与のＣＤＲ領域（例えばＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、ＨＣ ＣＤＲ３、ＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２またはＬＣ ＣＤＲ３）についての組み合わされたＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ番号付けスキームでは、一部の実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲの一部と定義されたアミノ酸残基と共に、Ｋａｂａｔ ＣＤＲの一部と定義されるアミノ酸残基に対応する。本明細書で使用される場合、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキームにより定義されたＣＤＲは、「超可変ループ」と称される場合もある。
一部の実施形態では、Ｋａｂａｔの下で、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、３１～３５（ＨＣＤＲ１）（例えば３５位の後の挿入）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けられ；軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）中のＣＤＲアミノ酸残基は、２４～３４（ＬＣＤＲ１）（例えば２７位の後の挿入）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）および８９～９７（ＬＣＤＲ３）と番号付けられる。一部の実施形態では、Ｃｈｏｔｈｉａの下で、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸は、２６～３２（ＨＣＤＲ１）（例えば３１位の後の挿入）、５２～５６（ＨＣＤＲ２）および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と番号付けられ；ＶＬ中のアミノ酸残基は、２６～３２（ＬＣＤＲ１）（例えば３０位の後の挿入）、５０～５２（ＬＣＤＲ２）および９１～９６（ＬＣＤＲ３）と番号付けられる。ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの両方のＣＤＲ定義を組み合わせることにより、一部の実施形態では、ＣＤＲは、例えばヒトＶＨ中のアミノ酸残基２６～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）および９５～１０２（ＨＣＤＲ３）およびヒトＶＬ中のアミノ酸残基２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）および８９～９７（ＬＣＤＲ３）を含むかまたはそれからなる。一部の実施形態では、ＩＭＧＴの下で、ＶＨ中のＣＤＲアミノ酸残基は、およそ２６～３５（ＣＤＲ１）、５１～５７（ＣＤＲ２）および９３～１０２（ＣＤＲ３）と番号付けられ、ＶＬ中のＣＤＲアミノ酸残基は、およそ２７～３２（ＣＤＲ１）、５０～５２（ＣＤＲ２）および８９～９７（ＣＤＲ３）と番号付けられる。一部の実施形態では、ＩＭＧＴの下で、抗体のＣＤＲ領域は、プログラムＩＭＧＴ／Ｄｏｍａｉｎ Ｇａｐ Ａｌｉｇｎを使用して決定することができる。
「モノクローナル抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、実質的に相同な抗体の集団から得られた抗体を指し、すなわち集団を構成する個々の抗体は、少量で生じることのある天然に存在する突然変異の可能性を除き、同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原エピトープに対するものである。対照的に、従来の（ポリクローナル）抗体製剤には、典型的に、異なるエピトープに対する（またはそれに特異的な）多くの抗体が挙げられる。修飾語句「モノクローナル」は、実質的に相同な抗体の集団から得られるような抗体の特性を表し、任意の特定の方法による必要とされる抗体の作製としては解釈されない。例えば、本開示により使用されることとなるモノクローナル抗体は、例えば、Kohler et al. (1975) Nature 256:495により最初に記載されたハイブリドーマ法により作製することができ、または組換えＤＮＡ法（例えば米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照されたい）により作製することができる。モノクローナル抗体は、例えば、Clackson et al. (1991)Nature352:624-8、およびMarks et al. (1991)J Mol Biol.222:581-97において記載された技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーから単離することもできる。この用語は、単一分子組成物の抗体分子の製剤も含む。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープについての単一の結合特異性および親和性を示す。
本明細書で記載されるモノクローナル抗体は、非ヒト、ヒト、またはヒト化であることができる。この用語は「キメラ」抗体を具体的に含み、ここで重鎖および／または軽鎖の部分は、特定の種に由来するかまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する対応する抗体中の配列と同一または相同であり、一方で鎖の残部は別の種に由来するかまたは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の、ならびにこれらが標的抗原と特異的に結合する、および／または所望の生物活性を示す限り、そのような抗体の断片中の、対応する配列と同一であるかまたは相同である。
「ヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトにより産生される抗体またはヒトにより産生される抗体のアミノ酸配列を有する抗体を指す。この用語は、フレームワークおよびＣＤＲ領域の両方がヒト由来の配列に由来する可変領域を有する抗体を含む。さらに抗体が定常領域を含有する場合、定常領域も、そのようなヒト配列、例えばヒト生殖細胞系配列、またはヒト生殖細胞系配列の突然変異バージョン、またはKnappik et al. ((2000) J Mol Biol. 296(1):57-86)において記載されるようなヒトフレームワーク配列分析に由来するコンセンサスフレームワーク配列を含有する抗体に由来する。免疫グロブリン可変ドメイン、例えばＣＤＲの構造および位置は、周知の番号付けスキーム、例えばＫａｂａｔ番号付けスキーム、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム、またはＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａとの組合せ、および／またはＩｍＭｕｎｏＧｅｎＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）番号付けを使用して定義することができる。本発明のヒト抗体は、ヒト配列によりコードされていないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏのランダムまたは部位特異的突然変異誘発により、もしくはｉｎ ｖｉｖｏの体細胞突然変異により誘発される突然変異、または安定性または作製を促進するための保存的置換）を含むことができる。しかし、「ヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、他の哺乳動物種、例えばマウスの生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を含むことは意図されない。
「組換えヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、組換え手段により調製、発現、生成または単離されるヒト抗体、例えば、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてのトランスジェニックもしくはトランス染色体である動物（例えばマウス）またはそれから調製されたハイブリドーマから単離された抗体、ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞、例えばトランスフェクトーマから単離された抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体、および他のＤＮＡ配列へのヒト免疫グロブリン遺伝子配列のすべてまたは一部のスプライシングを伴う任意の他の手段により調製、発現、生成または単離される抗体を指す。そのような組換えヒト抗体は、フレームワークおよびＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかし、一部の実施形態では、そのような組換えヒト抗体は、ｉｎ ｖｉｔｒｏの突然変異誘発（または、ヒトＩｇ配列についてのトランスジェニック動物が使用される場合、ｉｎ ｖｉｖｏの体細胞突然変異誘発）を受けることができ、よって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系ＶＨおよびＶＬ配列に由来し関連する一方で、ｉｎ ｖｉｖｏのヒト抗体生殖細胞系レパートリー中に天然に存在しないであろう配列である。
「キメラ抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、免疫グロブリン分子のアミノ酸配列が２つ以上の種に由来する抗体を指す。一部の事例では、重鎖および軽鎖の両方の可変領域は、所望の特異性、親和性および活性を有する１つの種に由来する抗体の可変領域に対応し、一方で定常領域は、別の種（例えばヒト）の種における免疫反応を最小化するために、後者の種に由来する抗体と相同である。
本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、非ヒト（例えばマウス）抗体およびヒト抗体からの配列を含有する抗体の形態を指す。そのような抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有するキメラ抗体の一種である。一般に、ヒト化抗体は、すべてまたは実質的にすべての超可変ループが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、すべてまたは実質的にすべてのフレームワーク（ＦＲ）領域がヒト免疫グロブリン配列のものである、実質的にすべての少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインを含むこととなる。ヒト化抗体は、必要に応じて、典型的にはヒト免疫グロブリンのものである免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部も含むこととなる。ヒト化抗体は、抗体特異性、親和性および／または活性を改良および最適化するために、Ｆｖフレームワーク領域および／または置換された非ヒト残基中のいずれかにおける残基の置換によりさらに修飾することができる。
「Ｆｃ領域」という用語は、本明細書で使用される場合、ＣＨ３、ＣＨ２および抗体の定常ドメインのヒンジ領域の少なくとも一部を含むポリペプチドを指す。必要に応じて、Ｆｃ領域は、一部の抗体クラスにおいて存在するＣＨ４ドメインを含むことができる。Ｆｃ領域は、抗体の定常ドメインのヒンジ領域全体を含むことができる。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗体のＦｃ領域およびＣＨ１領域を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗体のＦｃ領域およびＣＨ３領域を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、抗体のＦｃ領域、ＣＨ１領域および定常ドメインからのカッパ／ラムダ領域を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、定常領域、例えば重鎖定常領域および／または軽鎖定常領域を含む。一部の実施形態では、そのような定常領域は野生型定常領域と比較して修飾される。すなわち、ポリペプチドは、３つの重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、またはＣＨ３）および／または軽鎖定常領域ドメイン（ＣＬ）の１つまたは複数に対する変更または修飾を含むことができる。修飾の例には、１つまたは複数のドメイン中の１つまたは複数のアミノ酸の付加、欠失または置換が挙げられる。そのような変更は、エフェクター機能、半減期等を最適化するために含められてもよい。
「内在化」は、抗体または抗原結合性断片への言及において本明細書で使用される場合、細胞に結合する際に細胞の脂質二重膜を通過して、内部の区画、好ましくは細胞中の分解性の区画へと取り込まれる（すなわち「内在化する」）ことが可能な抗体または抗原結合性断片を指す。例えば、抗ＨＥＲ２抗体の内在化は、細胞膜上のＨＥＲ２と結合した後に細胞中に取り込まれることが可能であるものである。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣ中で使用される抗体または抗原結合性断片は、細胞表面抗原（例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２）を標的とし、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である（すなわち、ＡＤＣは、抗原結合後に細胞膜を通って移行する）。一部の実施形態では、内在化抗体または抗原結合性断片は、細胞表面上の受容体に結合する。細胞膜上の受容体を標的とする内在化抗体または内在化抗原結合性断片は、受容体媒介性エンドサイトーシスを誘発することができる。一部の実施形態では、内在化抗体または内在化抗原結合性断片は、受容体媒介性エンドサイトーシスを介して細胞中に取り込まれる。
「非内在化」は、抗体または抗原結合性断片への言及において本明細書で使用される場合、細胞に結合する際に細胞表面に留まる抗体または抗原結合性断片を指す。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣ中で使用される抗体または抗原結合性断片は、細胞表面抗原を標的とし、非内在化抗体または非内在化抗原結合性断片である（すなわち、ＡＤＣは、抗原結合後に細胞表面に留まり、細胞膜を通って移行しない）。一部の実施形態では、非内在化抗体または抗原結合性断片は、非内在化受容体または他の細胞表面抗原に結合する。代表的な非内在化細胞表面抗原には、限定されるものではないが、ＣＡ１２５およびＣＥＡが挙げられ、非内在化抗原標的に結合する抗体も当該技術分野において公知である（例えばBast et al. (1981) J Clin Invest. 68(5):1331-7；Scholler and Urban (2007) Biomark Med. 1(4):513-23；およびBoudousq et al. (2013) PLoS One 8(7):e69613を参照されたい）。
「Ｂ細胞成熟抗原」または「ＢＣＭＡ」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトＢＣＭＡの任意の天然型を指す（腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１７（ＴＮＦＲＳＦ１７）としても公知である）。この用語は、全長ヒトＢＣＭＡ（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ０２２２３；配列番号７２）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＢＣＭＡの任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、スプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびヒトＢＣＭＡの１つまたは複数の生物機能を保持するアイソフォームを含む、ヒトＢＣＭＡの機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＢＣＭＡは、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「抗ＢＣＭＡ抗体」または「ＢＣＭＡと結合する抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、ＢＣＭＡに結合する、例えば特異的に結合する、抗体またはその抗原結合性断片の任意の形態を指す。この用語は、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、およびＢＣＭＡに結合する、例えば特異的に結合する限り、生物学的に機能性の抗原結合性断片を包含する。国際公開第２０１２／１６３８０５号パンフレットは、代表的な抗ＢＣＭＡ抗体配列を含む代表的なＢＣＭＡ結合配列を提供し、それについて本明細書で参照により組み込まれる。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣ中で使用される抗ＢＣＭＡ抗体は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。Ｊ６Ｍ０（国際公開第２０１２／１６３８０５号パンフレット）は、代表的な抗ＢＣＭＡ抗体である。
「骨髄性細胞表面抗原ＣＤ３３」または「ＣＤ３３」という用語は、本明細書で使用される場合、任意の天然型のヒトＣＤ３３を指す（シアル酸結合Ｉｇ様レクチン３（ＳＩＧＬＥＣ３）としても公知である）。この用語は、全長ヒトＣＤ３３（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ２０１３８；配列番号７３）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＣＤ３３の任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＣＤ３３の１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＣＤ３３の機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＣＤ３３は、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「抗ＣＤ３３抗体」または「ＣＤ３３と結合する抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、ＣＤ３３に結合する、例えば特異的に結合する、抗体またはその抗原結合性断片の任意の形態を指す。この用語は、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、およびＣＤ３３に結合する、例えば特異的に結合する限り、生物学的に機能性の抗原結合性断片を包含する。米国特許出願公開第２０１３／００７８２４１号明細書は、代表的な抗ＣＤ３３抗体配列を含む代表的なＣＤ３３結合配列を提供し、それについて本明細書で参照により組み込まれる。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣ中で使用される抗ＣＤ３３抗体は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。ＭｕＭｙ９－６ｃｈ（米国特許出願公開第２０１３／００７８２４１号明細書）は、代表的な抗ＣＤ３３抗体である。
「Ｐ－カドヘリン」または「ＰＣＡＤ」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトＰＣＡＤの任意の天然型を指す（カドヘリン３、１型またはＣＤＨ３としても公知である）。この用語は、全長ヒトＰＣＡＤ（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ２２２２３；配列番号７４）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＰＣＡＤの任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＰＣＡＤの１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＰＣＡＤの機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＰＣＡＤは、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「抗ＰＣＡＤ抗体」または「ＰＣＡＤと結合する抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、ＰＣＡＤに結合する、例えば特異的に結合する、抗体またはその抗原結合性断片の任意の形態を指す。この用語は、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、およびＰＣＡＤに結合する、例えば特異的に結合する限り、生物学的に機能性の抗原結合性断片を包含する。国際公開第２０１６／２０３４３２号パンフレットは、代表的な抗ＰＣＡＤ抗体配列を含む代表的なＰＣＡＤ結合配列を提供し、それについて本明細書で参照により組み込まれる。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣ中で使用される抗ＰＣＡＤ抗体は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。ＮＯＶ１６９Ｎ３１Ｑ（国際公開第２０１６／２０３４３２号パンフレット）は、代表的な抗ＰＣＡＤ抗体である。
「ヒト上皮増殖因子受容体２」、「ＨＥＲ２」または「ＨＥＲ２／ＮＥＵ」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトＨＥＲ２の任意の天然型を指す。この用語は、全長ヒトＨＥＲ２（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ０４６２６；配列番号７５）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＨＥＲ２の任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＨＥＲ２の１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＨＥＲ２の機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＨＥＲ２は、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「抗ＨＥＲ２抗体」または「ＨＥＲ２と結合する抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、ＨＥＲ２に結合する、例えば特異的に結合する、抗体またはその抗原結合性断片の任意の形態を指す。この用語は、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、およびＨＥＲ２に結合する、例えば特異的に結合する限り、生物学的に機能性の抗原結合性断片を包含する。米国特許第５，８２１，３３７号明細書および第６，８７０，０３４号明細書は、代表的な抗ＨＥＲ２抗体配列を含む代表的なＨＥＲ２結合配列を提供し、それについて本明細書で参照により組み込まれる。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣ中で使用される抗ＨＥＲ２抗体は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。トラスツズマブ（米国特許第５，８２１，３３７号明細書および第６，８７０，０３４号明細書；Molina et al. (2001) Cancer Res. 61(12):4744-9も参照されたい）は、代表的な抗ＨＥＲ２抗体である。
「表面抗原分類３８」または「ＣＤ３８」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトＣＤ３８の任意の天然型を指す（ＡＤＰ－リボシルシクラーゼ／環状ＡＤＰ－リボースヒドロラーゼとしても公知である）。この用語は、全長ヒトＣＤ３８（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ２８９０７；配列番号７６）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＣＤ３８の任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＣＤ３８の１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＣＤ３８の機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＣＤ３８は、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「表面抗原分類４８」または「ＣＤ４８」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトＣＤ４８の任意の天然型を指す（Ｂリンパ球活性化マーカー（B-lymphocyte activation marker）（ＢＬＡＳＴ－１）またはシグナル伝達リンパ球活性化分子２（signaling lymphocytic activation molecule 2）（ＳＬＡＭＦ２）としても公知である）。この用語は、全長ヒトＣＤ４８（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ０９３２６；配列番号７７）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＣＤ４８の任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＣＤ４８の１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＣＤ４８の機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＣＤ４８は、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「表面抗原分類７９ｂ」または「ＣＤ７９ｂ」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトＣＤ７９ｂの任意の天然型を指す（Ｂ細胞抗原受容体複合体関連タンパク質ベータ鎖としても公知である）。この用語は、全長ヒトＣＤ７９ｂ（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｐ４０２５９；配列番号７８）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＣＤ７９ｂの任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＣＤ７９ｂの１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＣＤ７９ｂの機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。ＣＤ７９ｂは、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「結合特異性」という用語は、本明細書で使用される場合、個々の抗体または抗原結合断片が異なる抗原決定基にわたり１つの抗原決定基と優先的に反応する能力を指す。特異度は、抗体または断片が異なる抗原決定基にわたり１つの抗原決定基に優先的に結合する程度を示す。また、本明細書で使用される場合、「特異的」、「特異的に結合する（specifically binds）」および「特異的に結合する（binds specifically）」という用語は、タンパク質の異種集団および他の生物製剤中の、抗体または抗原結合性断片（例えば抗ＨＥＲ２抗体）と標的抗原（例えばＨＥＲ２）との間の結合反応を指す。抗体は、所与の状態のセット下で、適切な抗原への結合と無関係な抗原または抗原混合物への結合とを比較することにより、結合の特異性について試験することができる。抗体が、無関係な抗原または抗原混合物よりも少なくとも２倍、５倍、７倍、１０倍以上の親和性で適切な抗原に結合する場合、これは特異的であると考えられる。「特異的抗体」または「標的特異的抗体」は、標的抗原（例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、またはＨＥＲ２）にのみ結合するが、他の抗原には結合しない（または最小の結合を示す）ものである。一部の実施形態では、標的抗原（例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２）に特異的に結合する抗体または抗原結合性断片は、１ｘ１０－６Ｍ未満、１ｘ１０－７Ｍ未満、１ｘ１０－８Ｍ未満、１ｘ１０－９Ｍ未満、１ｘ１０－１０Ｍ未満、１ｘ１０－１１Ｍ未満、１ｘ１０－１２Ｍまたは１ｘ１０－１３Ｍ未満のＫＤを有する。一部の実施形態では、ＫＤは１ｐＭ～５００ｐＭである。一部の実施形態では、ＫＤは、５００ｐＭ～１μＭ、１μＭ～１００ｎＭまたは１００ｍＭ～１０ｎＭの間である。
「親和性」という用語は、本明細書で使用される場合、単一の抗原部位での抗体と抗原との間の相互作用の強さを指す。理論により拘束されるものではないが、各抗原結合部位中、抗体の可変領域「アーム」は、弱い非共有結合力を通して抗原と無数の部位で相互作用し、相互作用が多いほど、典型的に親和性はより強くなる。抗体の結合親和性は、抗原決定基と抗体の結合部位との間で働く誘引力と反発力との和である。
「ｋｏｎ」または「ｋａ」という用語は、抗体／抗原複合体を形成するための抗体の抗原への会合についての結合速度定数（on-rate constant）を指す。この速度は、標準アッセイ、例えば表面プラズモン共鳴、バイオレイヤー干渉法またはＥＬＩＳＡアッセイを使用して決定することができる。
「ｋｏｆｆ」または「ｋｄ」という用語は、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての解離速度定数（off-rate constant）を指す。この速度は、標準アッセイ、例えば表面プラズモン共鳴、バイオレイヤー干渉法またはＥＬＩＳＡアッセイを使用して決定することができる。
「ＫＤ」という用語は、特定の抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指す。ＫＤは、ｋａ／ｋｄにより算出される。この速度は、標準アッセイ、例えば表面プラズモン共鳴、バイオレイヤー干渉法またはＥＬＩＳＡアッセイを使用して決定することができる。
「エピトープ」という用語は、抗体（または抗原結合性断片）により認識され特異的に結合されることが可能な抗原の部分を指す。エピトープ決定基は、一般的に、アミノ酸または炭水化物または糖側鎖のような分子の化学的に活性な表面群からなり、特定の三次元構造特性および特定の電荷特性を有することができる。抗原がポリペプチドである場合、エピトープは連続的なアミノ酸またはポリペプチドの三次フォールディングにより並列した非連続的なアミノ酸から形成されることができる。エピトープは「線状」または「立体構造」であることができる。立体構造エピトープと線状エピトープとは、変性溶媒の存在下で前者への結合は失われるが、後者への結合は失われないという点で区別される。抗体（または抗原結合性断片）により結合されたエピトープは、抗原－抗体複合体の直接の可視化によるエピトープ同定のためのＸ線結晶構造解析、および抗体の抗原の断片もしくは突然変異した変形形態への結合のモニタリング、または抗体および抗原の異なる部分の溶媒接近性（solvent accessibility）のモニタリングを含む、当該技術分野において公知の任意のエピトープマッピング技術を使用して同定することができる。抗体エピトープをマッピングするための例示的なストラテジーには、限定されるものではないが、アレイベースのオリゴペプチドスキャン（array-based oligo-peptide scanning）、限定加水分解（limited proteolysis）、部位特異的突然変異誘発（site-directed mutagenesis）、ハイスループット変異導入マッピング（high-throughput mutagenesis mapping）、水素重水素交換（hydrogen-deuterium exchange）、および質量分析が挙げられる（例えば、Gershoni et al. (2007) BioDrugs 21:145-56；およびHager-Braun and Tomer (2005) Expert Rev Proteomics 2:745-56を参照されたい）。
競合結合およびエピトープビニングも、同一または重複するエピトープを共有する抗体を決定するために使用することができる。競合結合は、交差ブロッキングアッセイ、例えば“Antibodies, A Laboratory Manual,” Cold Spring Harbor Laboratory, Harlow and Lane(1st edition 1988, 2nd edition 2014)において記載されるアッセイを使用して評価することができる。一部の実施形態では、競合結合は、試験抗体または結合タンパク質が、標的抗原、例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２への参照抗体または結合タンパク質の結合（例えば、表３－５において特定されるものから選択されるＣＤＲおよび／または可変ドメインを含む結合タンパク質）を、交差ブロッキングアッセイにおいて少なくとも約５０％（例えば５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、９９．５％以上、またはその間の任意のパーセンテージ）低減させる場合に同定され、および／または逆も同様である。一部の実施形態では、競合結合は、共有されるまたは類似の（例えば特に重複する）エピトープによるか、または抗体もしくは結合タンパク質が近くのエピトープに結合する立体障害によるものであり得る（例えばTzartos, Methods in Molecular Biology (Morris, ed.(1998) vol. 66, pp. 55-66)を参照されたい）。一部の実施形態では、競合結合は、類似のエピトープを共有する結合タンパク質の群を選別するために使用することができる。例えば、結合について競合する結合タンパク質は、重複するまたは近くのエピトープを有する結合タンパク質の群として「ビニング」することができ、一方で競合しないものは、重複するまたは近くのエピトープを有しない結合タンパク質の別の群に入れられる。
本明細書で使用される場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語は互換的に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。この用語は、ペプチド結合により互いに接続されている２つ以上のアミノ酸を含むアミノ酸ポリマー、１つまたは複数のアミノ酸残基が対応する天然に生じるアミノ酸の人工的化学的模倣物であるアミノ酸ポリマー、ならびに天然に生じるアミノ酸ポリマーおよび天然に生じないアミノ酸ポリマーを包含する。この用語は、例えば、生物学的に活性な断片、実質的に相同なポリペプチド、オリゴペプチド、ホモ二量体、ヘテロ二量体、ポリペプチドのバリアント、修飾ポリペプチド、誘導体、アナログ、融合タンパク質を特に含む。この用語は、天然ペプチド、組換えペプチド、合成ペプチドまたはそれらの組合せも含む。特に断りのない限り、特定のポリペプチド配列は、保存的に修飾されたそのバリアントも暗に包含する。
「組換え」タンパク質は、組換え技術を使用して、例えば組換え核酸の発現を通して作製されたタンパク質（例えば抗体）を指す。
「単離された」タンパク質は、その天然状態で通常伴う物質の少なくとも一部を伴わないタンパク質を指す。例えば、生体中に存在する天然に生じるポリヌクレオチドまたはポリペプチドは単離されていないが、生体中の共存する物質の一部またはすべてから分離された同じポリヌクレオチドまたはポリペプチドは単離されている。この定義は、当該技術分野において公知の広範な生物および／または宿主細胞中の抗体の作製を含む。
「単離された抗体」は、本明細書で使用される場合、その供給源環境の構成成分（重量）の１つまたは複数（例えば多数）から、例えばハイブリドーマ細胞培養またはその作製のために使用される異なる細胞培養の構成成分から、同定および分離された抗体である。一部の実施形態では、分離は、そうでなければ所望の用途（例えば治療的使用）のための抗体の好適性を妨げ得る構成成分を十分に除去するように行われる。単離された抗体を調製するための方法は当該技術分野において公知であり、限定なしに、タンパク質Ａクロマトグラフィー、アニオン交換クロマトグラフィー、カチオン交換クロマトグラフィー、ウイルス保持濾過（virus retentive filtration）および限外濾過が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、参照核酸配列またはアミノ酸配列とそれぞれ異なるが、参照配列の１つまたは複数の生物特性を保持する核酸配列またはアミノ酸配列を指す。バリアントは、参照配列に対して、１つまたは複数のアミノ酸置換、欠失および／または挿入（または対応するコドンの置換、欠失および／または挿入）を含有することができる。核酸バリアント中の変化は、参照核酸配列によりコードされるペプチドのアミノ酸配列を変更しないことがあり、またはアミノ酸置換、付加、欠失、融合および／または短縮化を生じることがある。一部の実施形態では、本明細書で開示される核酸バリアントは、未修飾の核酸によりコードされるものと同一のアミノ酸配列をコードするか、または未修飾のアミノ酸配列の１つまたは複数の機能的特性を保持する修飾アミノ酸配列をコードする。ペプチドバリアントの配列中の変化は、典型的に限定的または保存的であり、そのため未修飾ペプチドおよびバリアントの配列は全体に密接に類似しており、多くの領域で同一である。一部の実施形態では、ペプチドバリアントは、未修飾のペプチド配列の１つまたは複数の機能的性質を保持する。バリアントと未修飾のペプチドとは、１つまたは複数の置換、付加、欠失の任意の組合せにより、アミノ酸配列が異なることがある。
核酸またはペプチドのバリアントは、天然に生じるバリアントまたは天然に生じることが知られていないバリアントであることができる。核酸およびペプチドのバリアントは、突然変異誘発技術により、直接合成により、または当該技術分野において公知の他の技術により、作製することができる。バリアントは、参照配列の物理的操作を必ずしも必要としない。配列が参照配列と比較して異なる核酸またはアミノ酸を含有する限り、これは、どれだけ合成されたかにかかわらず「バリアント」と考えられる。一部の実施形態では、バリアントは、参照配列と比較して高い配列同一性（すなわち、６０％またはそれより高い核酸またはアミノ酸配列の同一性）を有する。一部の実施形態では、ポリペプチドが参照配列または参照配列の対応するセグメント（例えば機能断片）、例えば参照配列の１つまたは複数の機能を同様に保持するバリアントと少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有する限り、ペプチドバリアントはアミノ酸置換、欠失および／または挿入を有するポリペプチドを包含する。一部の実施形態では、ポリヌクレオチドが参照配列または参照配列の対応するセグメント（例えば機能断片）と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％の核酸配列同一性を有する限り、核酸バリアントはアミノ酸置換、欠失および／または挿入を有するポリヌクレオチドを包含する。
「保存的に修飾されたバリアント」という用語は、アミノ酸および核酸配列の両方に適用する。核酸配列について、保存的に修飾されたバリアントは、同一のまたは本質的に同一のアミノ酸配列をコードする核酸を指す。遺伝コードの縮重のために、多数の機能的に同一な核酸は、任意の所与のタンパク質をコードする。例えば、コドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧおよびＧＣＵはすべて、アミノ酸アラニンをコードする。よって、アラニンがコドンにより指定されるあらゆる位置で、コドンは、コードされたポリペプチドを変更することなく、記載される対応するコドンのいずれかに変更されることができる。そのような核酸変形形態は「サイレント変形形態（silent variation）」であり、これは、保存的に修飾された変形形態の１種である。ポリペプチドをコードする本明細書におけるあらゆる核酸配列は、核酸のあらゆる考えられるサイレント変形形態も記載する。当業者は、核酸における各コドン（従来メチオニンの唯一のコドンであるＡＵＧ、および従来トリプトファンの唯一のコドンであるＴＧＧを除く）を修飾して機能的に同一の分子を得られることを認識するであろう。したがって、ポリペプチドをコードする核酸の各サイレント変形形態は、各記載される配列中に暗に示される。ポリペプチド配列については、保存的に修飾されたバリアントは、ポリペプチド配列に対する個々の置換、欠失または付加を含み、化学的に類似のアミノ酸でのアミノ酸の置換を生じる。機能的に類似のアミノ酸を提供する保存的置換は、当該技術分野において周知である。
「保存的配列修飾」という用語は、本明細書で使用される場合、例えばアミノ酸配列を含有する抗体または抗原結合性断片の結合特性に著しく影響も与えず変更もしない、アミノ酸修飾を指す。そのような保存的修飾には、アミノ酸置換、付加および欠失が挙げられる。修飾は、当該技術分野において公知の標準技術、例えば部位特異的突然変異誘発およびＰＣＲ媒介性突然変異誘発により、抗体または抗原結合性断片中に導入することができる。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基で代替されるものである。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えばアスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えばグリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えばアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、ベータ分岐側鎖（例えばトレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖（例えばチロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が挙げられる。よって、一部の実施形態では、抗体中の１つまたは複数のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーからの他のアミノ酸残基で代替されることができ、変更された抗体は、本明細書で記載される機能アッセイを使用して試験することができる。
「相同」または「同一性」という用語は、本明細書で使用される場合、２つのポリマー分子の間、例えば２つの核酸分子、例えば２つのＤＮＡ分子もしくは２つのＲＮＡ分子の間、または２つのポリペプチド分子の間の、サブユニットの配列同一性を指す。２つの分子の両方の中のサブユニットの位置は、同じモノマーサブユニットにより占められ、例えば２つのＤＮＡ分子中の各々の位置がアデニンにより占められる場合、これらはその位置で相同または同一である。２つの配列の間の相同性は、合致するまたは相同な位置の数の一次関数である。例えば、２つの配列中の位置の半分（例えば１０のサブユニットの長さのポリマー中、５つの位置）が合致するかまたは相同である場合、２つの配列は５０％相同であり、位置の９０％（例えば１０のうち９つ）が合致するかまたは相同な場合、２つの配列は９０％相同である。
「配列同一性」のパーセンテージは、比較窓にわたり２つの最適にアラインメントされた配列を比較することにより決定することができ、ここで、比較窓中のアミノ酸配列の断片は、２つの配列の最適な配列比較について、参照配列（付加も欠失も含まない）と比較して付加または欠失（例えばギャップまたはオーバーハング）を含むことができる。パーセンテージは、同一なアミノ酸残基が両方の配列中で生じる位置の数を決定して合致する位置の数を得ること、合致する位置の数を比較窓中の位置の合計数で割ること、および結果に１００を乗算し、配列同一性のパーセンテージを得ることにより、計算することができる。出力は、問い合わせ配列に対する対象配列のパーセント同一性である。２つの配列の間のパーセント同一性は、２つの配列の最適な配列比較のために導入される必要のあるギャップの数および各ギャップの長さを考慮した、配列により共有される同一な位置の数の関数である。一般的に、本明細書で開示されるタンパク質と、標的抗原（例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２）のバリアントおよび抗体可変ドメインのバリアント（個々のバリアントＣＤＲを含む）を含むそのバリアントとの間のアミノ酸同一性または相同性は、本明細書で示される配列の少なくとも８０％であり、例えば少なくとも８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、ほぼ１００％または１００％の同一性または相同性である。
配列の比較および２つの配列の間のパーセント同一性の決定は、数値計算用アルゴリズムを使用して達成することができる。一部の実施形態では、２つのアミノ酸配列の間のパーセント同一性は、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２行列またはＰＡＭ２５０行列のいずれか、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６または４のギャップ重みおよび１、２、３、４、５または６の長さ重みを使用する、ＧＣＧソフトウェアパッケージ中のＧＡＰプログラム中に組み込まれているNeedleman and Wunsch((1970) J Mol Biol. 48:444-53)アルゴリズムを使用して決定される。一部の実施形態では、２つのヌクレオチド配列の間のパーセント同一性は、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰ行列、ならびに４０、５０、６０、７０または８０のギャップ重みおよび１、２、３、４、５または６の長さ重みを使用する、ＧＣＧソフトウェアパッケージ中のＧＡＰプログラムを使用して決定される。パラメーターの代表的なセットは、１２のギャップペナルティ、４のギャップ伸長ペナルティ（gap extend penalty）および５のフレームシフトギャップペナルティを有するＢｌｏｓｓｕｍ ６２スコア行列である。２つのアミノ酸またはヌクレオチド配列の間のパーセント同一性は、ＰＡＭ１２０重み残基表（PAM120 weight residue table）、１２のギャップ長さペナルティおよび４のギャップペナルティを使用する、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）中に組み込まれているMeyers and Miller((1989) CABIOS 4:11-17)のアルゴリズムを使用しても決定することができる。
「薬剤」という用語は、化学化合物、化学化合物の混合物、生物学的巨大分子、生物学的材料から作製された抽出物、またはそれらの２つ以上の組合せを指すために、本明細書で使用される。「治療剤」または「薬物」という用語は、生物学的プロセスおよび／または生物活性を調節することが可能な薬剤を指す。本明細書で記載されるようなＭｃｌ－１阻害剤およびそれらを含むＡＤＣは、代表的な治療剤である。
「化学療法剤」または「抗がん剤」という用語は、（作用機序にかかわらず）がんを処置するのに有効なすべての薬剤を指すために、本明細書で使用される。転移または血管新生の阻害は、化学療法剤の性質であることが多い。化学療法剤には、抗体、生物学的分子および小分子が挙げられ、本明細書で記載されるようなＭｃｌ－１阻害剤およびそれらを含むＡＤＣを包含する。化学療法剤は、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤であってよい。「細胞分裂阻害剤」という用語は、細胞の成長および／または細胞の増殖を阻害または抑制する薬剤を指す。「細胞傷害剤」という用語は、主に細胞の発現活性および／または機能を妨害することにより細胞死を引き起こす物質を指す。
「骨髄性細胞白血病１」または「Ｍｃｌ－１」という用語は、本明細書で使用される場合、Ｂｃｌ－２タンパク質ファミリーの抗アポトーシスメンバーであるヒトＭｃｌ－１の任意の天然型を指す。この用語は、全長ヒトＭｃｌ－１（例えばＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ０７８２０；配列番号７１）、および細胞プロセシングから生じ得るヒトＭｃｌ－１の任意の形態を包含する。この用語は、限定されるものではないが、ヒトＭｃｌ－１の１つまたは複数の生物機能を保持するスプライスバリアント、対立遺伝子バリアントおよびアイソフォームを含む、ヒトＭｃｌ－１の機能的バリアントまたは断片も包含する（すなわち、この用語が野生型タンパク質のみを指すために使用されると文脈が示さない限り、バリアントおよび断片が包含される）。Ｍｃｌ－１は、ヒトから単離することができ、組換えでまたは合成方法により作製することができる。
「阻害する」または「阻害」または「阻害すること」という用語は、本明細書で使用される場合、生物活性またはプロセスを測定可能な量まで低減させることを意味するが、完全な予防または阻害を含み得るが、必要とはしない。一部の実施形態では、「阻害」は、Ｍｃｌ－１および／またはその１つもしくは複数の上流調節因子もしくは下流の標的の発現および／または活性を低減させることを意味する。
「Ｍｃｌ－１阻害剤」という用語は、本明細書で使用される場合、Ｍｃｌ－１および／またはその１つもしくは複数の上流調節因子もしくは下流の標的の発現および／または活性を低減させることが可能な薬剤を指す。代表的なＭｃｌ－１調節因子（Ｍｃｌ－１の代表的な阻害剤を含む）は、国際公開第２０１５／０９７１２３号パンフレット；国際公開第２０１６／２０７２１６号パンフレット；国際公開第２０１６／２０７２１７号パンフレット；国際公開第２０１６／２０７２２５号パンフレット；国際公開第２０１６／２０７２２６号パンフレット；国際公開第２０１７／１２５２２４号パンフレット；国際公開第２０１９／０３５８９９号パンフレット、国際公開第２０１９／０３５９１１号パンフレット、国際公開第２０１９／０３５９１４号パンフレット、国際公開第２０１９／０３５９２７号パンフレット、米国特許出願公開第２０１９／００５５２６４号明細書、国際公開第２０１６／０３３４８６号パンフレット、国際公開第２０１７／１４７４１０号パンフレット、国際公開第２０１８／１８３４１８号パンフレットおよび国際公開第２０１７／１８２６２５号パンフレットにおいて記載されており、その各々は、開示されるＡＤＣの薬物部分として含めることができる代表的なＭｃｌ－１阻害剤を含めて、代表的なＭｃｌ－１調節因子として本明細書で参照により組み込まれる。例えば、開示されるＡＤＣの薬物部分として含めることができる代表的なＭｃｌ－１阻害剤は、式：
Figure 2022532918000180
 （式中、各変数は国際公開第２０１９／０３５９１１号パンフレット；国際公開第２０１９／０３５８９９号パンフレット；国際公開第２０１９／０３５９１４号パンフレット；または国際公開第２０１９／０３５９２７号パンフレットにおけるように定義されている）
のものである。特定の例には、例えば
Figure 2022532918000181
 （式中、薬物ペイロードとしての各化合物は、化合物のピペラジニル官能基中のＮ－メチルの窒素原子を介して抗体またはリンカーにコンジュゲートすることができる）
が挙げられる。本明細書で使用される場合、「誘導体」および「アナログ」という用語は、Ｍｃｌ－１阻害剤等に対して言及される場合、元の化合物と比較して本質的に同じか、類似するか、または強化された生物機能または活性を保持するが、変更された化学的または生物学的構造を有する、任意のそのような化合物を意味する。
本明細書で使用される場合、「Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分」、「Ｍｃｌ－１阻害剤」等は、ＡＤＣの構成成分、またはＭｃｌ－１阻害剤化合物もしくは元の化合物と比較して本質的に同じか、類似するか、もしくは強化された生物機能または活性を保持する、ＡＤＣへの結合のために修飾された化合物の構造を提供する組成物を指す。一部の実施形態では、Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分は、式（１）のＡＤＣ中の構成成分（Ｄ）である。
「がん」という用語は、本明細書で使用される場合、がんを引き起こす細胞に典型的な特性、例えば無制限増殖、不死性、転移の潜在性、急速な成長および増殖速度ならびに／またはある特定の形態学的特性を有する細胞の存在を指す。多くの場合、がん細胞は腫瘍または塊の形態であり得るが、そのような細胞は対象中に単独で存在することがあり、または血流中に独立した細胞、例えば白血病またはリンパ腫細胞として循環することがある。「がん」という用語は、血液がん、固形腫瘍、肉腫、癌腫ならびに他の固形および非固形腫瘍がんを含む、すべての種類のがんおよびがん転移を含む。血液がんには、Ｂ細胞悪性腫瘍、血液のがん（白血病）、形質細胞のがん（骨髄腫、例えば多発性骨髄腫）またはリンパ節のがん（リンパ腫）を挙げることができる。代表的なＢ細胞悪性腫瘍には、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫およびびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫が挙げられる。白血病には、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、急性単球性白血病（ＡＭｏＬ）等を挙げることができる。リンパ腫には、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫等を挙げることができる。他の血液がんには、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を挙げることができる。固形腫瘍には、癌腫、例えば腺癌、例えば乳がん、膵臓がん、前立腺がん、結腸または結腸直腸がん、肺がん、胃がん、子宮頸がん、子宮内膜がん、卵巣がん、胆管細胞癌、神経膠腫、黒色腫等を挙げることができる。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、がんはリンパ腫または胃がんである。
本明細書で使用される場合、「腫瘍」という用語は、良性または悪性のいずれかで、前がん病変を含む、過剰な細胞増殖または増殖に起因する組織の任意の塊を指す。一部の実施形態では、腫瘍は、乳がん、胃がん、膀胱がん、脳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、黒色腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである。一部の実施形態では、腫瘍は胃がんである。
「腫瘍細胞」および「がん細胞」という用語は、本明細書で互換的に使用することができ、非腫瘍形成性細胞およびがん幹細胞の両方を含む、腫瘍またはがんに由来する個々の細胞または細胞の全集団を指す。「腫瘍細胞」および「がん細胞」という用語は、再生および分化する能力を喪失した細胞に対してのみ言及する場合、これらの細胞をがん幹細胞から区別するために、「非腫瘍形成性」という用語により修飾されることとなる。
「標的陰性」、「標的抗原陰性」または「抗原陰性」という用語は、本明細書で使用される場合、細胞または組織による標的抗原発現の不在を指す。「標的陽性」、「標的抗原陽性」または「抗原陽性」という用語は、標的抗原発現の存在を指す。例えば、標的抗原を発現していない細胞または細胞系は、標的陰性と記載することができ、一方で標的抗原を発現している細胞または細胞系は、標的陽性と記載することができる。
「対象」および「患者」という用語は、本明細書で互換的に使用され、処置を必要とする任意のヒトまたは非ヒト動物を指す。非ヒト動物には、すべての脊椎動物（例えば哺乳動物および非哺乳動物）、例えば任意の哺乳動物が挙げられる。哺乳動物の非限定的な例には、ヒト、チンパンジー、類人猿、サル、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、イヌ、ネコ、ラット、マウスおよびモルモットが挙げられる。非哺乳動物の非限定的な例には、鳥類および魚類が挙げられる。一部の実施形態では、対象はヒトである。
「処置を必要とする対象」という用語は、本明細書で使用される場合、処置（例えば、本明細書で記載される代表的なＡＤＣ化合物のいずれか１つまたは複数を用いる処置）から生物学的に、医学的にまたは生活の質において利益を受けるであろう対象を指す。
本明細書で使用される場合、「処置する」、「処置すること」または「処置」という用語は、疾患、障害または状態の任意の結果の任意の改善、例えば生存期間の延長、罹患率の低減、および／または代わりの治療法に起因する副作用の低減を指す。一部の実施形態では、処置は、疾患、障害または状態の遅延または好転（すなわち、疾患またはその臨床症状の少なくとも１つの発症を遅延または停止または低減すること）を含む。一部の実施形態では、処置は、患者により認識され得ないものを含む、疾患、障害または状態の身体的パラメーターの少なくとも１つを、遅延、緩和または好転することを含む。一部の実施形態では、処置は、疾患、障害または状態を、身体的に（例えば認識可能な症状の安定化）、生理学的に（例えば身体パラメーターの安定化）のいずれか、または両方で調節することを含む。一部の実施形態では、処置は、本明細書で列挙された処置の利益を得るための、記載されたＡＤＣ化合物または組成物の、対象、例えば患者への投与を含む。処置は、疾患、障害または状態（例えばがん）、疾患、障害または状態（例えばがん）の症状、または疾患、障害または状態（例えばがん）の傾向を、治癒する、回復する、緩和する、遅延する、予防する、軽減する、変更する、強制する、好転する、やわらげる、改善するまたは影響を与えるためのものであることができる。一部の実施形態では、疾患、障害または状態を有する対象を処置することに加えて、本明細書で開示される組成物は、その疾患、障害または状態を発症する可能性を予防または低減するために予防的に提供することもできる。
本明細書で使用される場合、疾患、障害または状態を「予防する」、「予防すること」または「予防」という用語は、疾患、障害もしくは状態の予防処置、または疾患、障害もしくは状態の開始もしくは進行を遅延することを指す。
本明細書で使用される場合、「医薬組成物」は、対象への投与に好適な少なくとも１つの他の（および任意選択で１つを超える他の）構成成分、例えば薬学的に許容される担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤および／または賦形剤に加えた、組成物、例えばＡＤＣ化合物または組成物の製剤を指す。本明細書で提供される医薬組成物は、投与を可能にし、続いて活性成分の意図された生物活性を提供し、および／または治療効果を達成するような形態である。本明細書で提供される医薬組成物は、好ましくは、製剤が投与されるであろう対象に対して許容できないほど毒性の追加の構成成分を含有しない。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」および「生理的に許容される担体」という用語は、互換的に使用することができ、対象に著しい刺激を引き起こさず、投与されるＡＤＣ化合物もしくは組成物および／または組成物中の任意の追加の治療剤の生物活性および性質を抑止しない担体または希釈剤を指す。薬学的に許容される担体は、組成物を強化または安定化することができるか、または組成物の調製を容易にするために使用することができる。薬学的に許容される担体には、当業者に公知であるような（例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329を参照されたい）、溶媒、分散媒、コーティング、界面活性剤、抗酸化剤、保存剤（例えば抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤（absorption delaying agent）、塩、保存剤、薬物安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、香料、染料等およびそれらの組合せを挙げることができる。任意の従来の担体が活性成分と不適合でない限り、治療または医薬組成物におけるその使用が企図される。担体は、対象における有害な副作用を最小化するように、および／または活性成分の劣化を最小化するように、選択することができる。アジュバントも、これらの製剤のいずれかに含めることができる。
本明細書で使用される場合、「賦形剤」という用語は、活性成分の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される、不活性な物質を指す。非経口投与のための製剤は、賦形剤、例えば、滅菌水または生理食塩水、ポリアルキレングリコール、例えばポリエチレングリコール、植物油または水素化ナフタレンを含有することができる。他の代表的な賦形剤には、限定されるものではないが、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖およびデンプンの種類、セルロース誘導体、ゼラチン、エチレン－酢酸ビニルコポリマー粒子、ならびに例えばポリソルベート２０を含む界面活性剤が挙げられる。
「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書で使用される場合、本発明の化合物の生物活性および性質を抑止せず、それが投与される対象に著しい刺激を引き起こさない塩を指す。そのような塩の例には、限定されるものではないが、：（ａ）無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸等を用いて形成された酸付加塩；および有機酸、例えば酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸等を用いて形成された塩；ならびに（ｂ）アニオン元素（elemental anion）、例えば塩素、臭素およびヨウ素から形成された塩が挙げられる。例えば、本明細書で参照により組み込まれる、Haynes et al., "Commentary: Occurrence of Pharmaceutically Acceptable Anions and Cations in the Cambridge Structural Database," J. Pharmaceutical Sciences, vol. 94, no. 10 (2005)、およびBerge et al., "Pharmaceutical Salts," J. Pharmaceutical Sciences, vol. 66, no. 1 (1977)を参照されたい。
一部の実施形態では、本明細書で記載される抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、リンカー、ペイロードおよびリンカー－ペイロードは、それらの電荷に応じて、一価のアニオン性対イオンＭ１ －を含有することができる。任意の好適なアニオン性対イオンを使用することができる。ある特定の実施形態では、一価のアニオン性対イオンは、薬学的に許容される一価のアニオン性対イオンである。ある特定の実施形態では、一価アニオン性対イオンＭ１ －は、ブロミド、クロリド、ヨージド、アセテート、トリフルオロアセテート、ベンゾエート、メシレート、トシレート、トリフレート、ホルメート等から選択することができる。一部の実施形態では、一価のアニオン性対イオンＭ１ －は、トリフルオロアセテートまたはホルメートである。
本明細書で使用される場合、「治療有効量」または「治療有効用量」という用語は、所望の治療結果（すなわち、酵素またはタンパク質活性の低減または阻害、症状の好転、症状または状態の緩和、疾患進行の遅延、腫瘍サイズの低減、腫瘍増殖の阻害、転移の予防）をもたらすための、本明細書で記載される化合物、例えば本明細書で記載されるＡＤＣ化合物または組成物の量を指す。一部の実施形態では、治療有効量は、所望されない副作用を誘導することも引き起こすこともない。一部の実施形態では、治療有効量は、副作用を、患者の状態に照らして治療を行う医師により許容されるもののみ誘導および引き起こす。一部の実施形態では、治療有効量は、がん細胞の増殖もしくは拡がり、腫瘍のサイズもしくは数、ならびに／またはがんの他のレベル、ステージ、進行および／もしくは重症度の尺度の、検出可能な死滅、低減および／または阻害に有効である。この用語は、標的細胞における特定の反応、例えば細胞増殖の低減、遅延または阻害を誘導することとなる用量にも適用する。治療有効量は、最初に低用量を投与し、次に所望の効果が達成されるまで用量を徐々に増大することにより、決定することができる。治療有効量は、意図されている用途（ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏ）または処置されている対象および疾患の状態、例えば対象の体重および年齢、疾患状態の重症度、投与方法等に応じて変動させることができ、これらは当業者により容易に決定することができる。特定の量は、例えば、特定の医薬組成物、対象および彼らの年齢および既存の健康状態または健康状態についてのリスク、従うこととなる投薬レジメン、疾患の重症度、他の薬剤と組み合わせて投与されるかどうか、投与のタイミング、それが投与される組織、ならびにそれが運ばれる物理的な送達システムに応じて変動させることができる。がんの場合、ＡＤＣの治療有効量は、がん細胞の数を低減させ、腫瘍サイズを低減し、腫瘍転移を阻害（例えば遅延または停止）し、腫瘍増殖を阻害（例えば遅延または停止）し、および／または１つもしくは複数の症状を軽減することができる。
本明細書で使用される場合、「予防有効量」または「予防有効用量」という用語は、必要な投薬量および期間で所望の予防結果を達成するのに有効な、本明細書で開示される化合物、例えば本明細書で記載されるＡＤＣ化合物または組成物の量を指す。典型的には、予防用量は疾患の前または早期の段階で対象に使用されるため、予防有効量は治療有効量未満となる。一部の実施形態では、予防有効量は、がんに伴う症状を含む疾患症状の開始を予防することができる。
「ｐ」または「薬物負荷」または「薬物：抗体比」または「薬物と抗体との比」または「ＤＡＲ」という用語は、抗体もしくは抗原結合性断片あたりの薬物部分の数、すなわち薬物負荷、または式（１）のＡＤＣ中の抗体もしくは抗原結合性断片（Ａｂ）あたりの－Ｌ－Ｄ部分の数を指す。Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分を含むＡＤＣでは、「ｐ」は、抗体または抗原結合性断片に連結したＭｃｌ－１阻害剤化合物の数を指す。例えば、２つのＭｃｌ－１阻害剤化合物が抗体または抗原結合性断片に連結する場合、ｐ＝２である。式（１）のＡＤＣの複数のコピーを含む組成物において、「平均ｐ」は、抗体または抗原結合性断片あたりの－Ｌ－Ｄ部分の平均の数を指し、「平均薬物負荷」とも称される。
抗体－薬物コンジュゲート
本開示の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）化合物は、抗がん活性を有するものを含む。特に、ＡＤＣ化合物は、薬物部分（例えばＭｃｌ－１阻害剤）にコンジュゲートした（すなわち、リンカーにより共有結合した）抗体または抗原結合性断片を含み、ここで薬物部分は、抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートしていない場合、細胞傷害または細胞分裂阻害効果を有する。一部の実施形態では、薬物部分は、抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートしていない場合、Ｍｃｌ－１および／またはその１つもしくは複数の上流調節因子もしくは下流の標的の発現および／または活性を低減させることが可能である。理論により拘束されるものではないが、Ｍｃｌ－１の発現および／または活性を標的とすることにより、一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣは、強力な抗がん剤を提供することができる。また、理論により拘束されるものではないが、薬物部分を腫瘍細胞またはがんの発現に関連する抗原に結合する抗体にコンジュゲートすることにより、ＡＤＣは、単独で投与される場合の薬物部分と比較して、改善された活性、より良好な細胞傷害特異性、および／または標的外の（off-target）死滅の低減をもたらすことができる。
一部の実施形態では、したがって、ＡＤＣの構成成分は、（ｉ）単離されている抗体および薬物部分により示される１つまたは複数の治療性質を保持する、（ｉｉ）抗体または抗原結合性断片の特定の結合性質を維持する；（ｉｉｉ）薬物負荷および薬物対抗体比を最適化する；（ｉｖ）抗体または抗原結合性断片への安定した結合を介した、薬物部分の送達、例えば細胞内送達を可能とする；（ｖ）標的部位への移行または送達まで、無傷のコンジュゲートとしてのＡＤＣの安定性を保持する（ｖｉ）投与前後のＡＤＣの凝集を最小化する；（ｖｉｉ）切断または細胞環境中の他の放出機構の後に、薬物部分の治療効果、例えば細胞傷害効果を可能とする；；（ｖｉｉｉ）単離されている抗体および薬物部分と同等かそれよりも優れた、ｉｎ ｖｉｖｏの抗がん処置の有効性を示す；（ｉｘ）薬物部分による標的外死滅を最小化する；ならびに／または（ｘ）所望の薬物動態学および薬力学性質、製剤化適性（formulatability）および毒性学／免疫学プロファイルを示すように選択される。これらの性質の各々は、治療的使用のための改善されたＡＤＣを提供することができる(Ab et al. (2015) Mol Cancer Ther. 14:1605-13)。
本開示のＡＤＣ化合物は、細胞傷害剤または細胞分裂阻害剤の有効量を、がん細胞または腫瘍組織へと選択的に送達することができる。一部の実施形態では、ＡＤＣの細胞傷害および／または細胞分裂阻害活性は、細胞中の標的抗原の発現に依存する。一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、標的外死滅を最小化する一方で、標的抗原を発現するがん細胞の死滅に特に有効である。一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、標的抗原を発現しないがん細胞に対する細胞傷害および／または細胞分裂阻害効果を示さない。
代表的なＢＣＭＡ発現がんには、限定されるものではないが、多発性骨髄腫が挙げられる(Cho et al. (2018) Front Immunol. 9:1821)。
代表的なＣＤ３３発現がんには、限定されるものではないが、結腸直腸がん、膵臓がん、リンパ腫および白血病（例えば急性骨髄性白血病）が挙げられる(Human Protein Atlas; Walter (2014) Expert Opin Ther Targets 18(7):715-8)。
代表的なＰＣＡＤ発現がんには、限定されるものではないが、乳がん、胃がん、子宮内膜がん、卵巣がん、膵臓がん、膀胱がん、前立腺がんおよび黒色腫が挙げられる(Vieira and Paredes (2015) Mol Cancer 14:178)。
代表的なＨＥＲ２発現がんには、限定されるものではないが、乳がん、胃がん、膀胱がん、尿路上皮細胞癌腫、食道がん、肺がん（例えば肺腺癌）、子宮がん（例えば子宮漿液性子宮内膜癌（uterine serous endometrial carcinoma）、唾液管癌、子宮頸がん、子宮内膜がんおよび卵巣がんが挙げられる(English et al. (2013) Mol Diagn Ther. 17:85-99)。
ある特定の態様では、抗体またはその抗原結合性断片（Ａｂ）、Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分（Ｄ）、およびＡｂをＤに共有結合するリンカー部分（Ｌ）を含むＡＤＣ化合物が、本明細書で提供される。一部の実施形態では、がん細胞を標的とする抗体またはその抗原結合性断片（Ａｂ）、Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分（Ｄ）、およびＡｂをＤに共有結合するリンカー部分（Ｌ）を含むＡＤＣ化合物が、本明細書で提供される。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、腫瘍関連抗原（例えばＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２）に、例えば高い特異性および高い親和性で結合することが可能である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、結合の際に、標的細胞中、例えば細胞中の分解性の区画中に内在化される。一部の実施形態では、ＡＤＣは、標的細胞に結合すると内在化し、分解を受け、Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分を放出してがん細胞を死滅させる。Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分は、酵素的作用、加水分解、酸化または任意の他の機構により、ＡＤＣの抗体および／またはリンカー部分から放出されることができる。
代表的なＡＤＣ は、式（１）：
Ａｂ－（Ｌ－Ｄ）ｐ （１）
（式中、Ａｂ＝抗体または抗原結合性断片、Ｌ＝リンカー部分、Ｄ＝Ｍｃｌ－１阻害剤薬物部分、およびｐ＝抗体または抗原結合性断片あたりのＭｃｌ－１阻害剤薬物部分の数である）
を有する。
抗体
式（１）の抗体または抗原結合性断片（Ａｂ）には、その範囲内で、細胞上の標的抗原に特異的に結合する任意の抗体または抗原結合性断片が挙げられる。一部の実施形態では、式（１）の抗体または抗原結合性断片（Ａｂ）には、その範囲内で、がん細胞上の標的抗原に特異的に結合する任意の抗体または抗原結合性断片が挙げられる。抗体または抗原結合性断片は、例えばＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）分析により測定される場合、≦１ｍＭ、≦１００ｎＭもしくは≦１０ｎＭ、またはその間の任意の量の解離定数（ＫＤ）で、標的抗原に結合することができる。一部の実施形態では、ＫＤは１ｐＭ～５００ｐＭである。一部の実施形態では、ＫＤは、５００ｐＭ～１μＭ、１μＭ～１００ｎＭまたは１００ｍＭ～１０ｎＭの間である。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、２本の重鎖および２本の軽鎖を有する、４本鎖の抗体である（免疫グロブリンまたは全長もしくは無傷抗体とも称される）。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、免疫グロブリンの抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、標的がん抗原に結合する能力を保持し、および／または免疫グロブリンの少なくとも１つの機能を提供する、免疫グロブリンの抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、内在化抗体またはその内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、内在化抗体またはその内在化抗原結合性断片は、細胞の表面上に発現する標的がん抗原に結合し、結合の際に細胞に進入する。一部の実施形態では、ＡＤＣのＭｃｌ－１阻害剤薬物部分は、ＡＤＣが、標的がん抗原を発現する細胞中に進入し存在した後に（すなわち、ＡＤＣが内在化した後に）、例えば切断により、抗体もしくは抗原結合性断片の分解により、または任意の他の好適な放出機構により、ＡＤＣの抗体または抗原結合性断片から放出される。
一部の実施形態では、抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の媒介を低減させるかまたはそれを全く媒介しない、突然変異を含む。一部の実施形態では、これらの突然変異は、Ｆｃサイレンシング、Ｆｃサイレント、またはＦｃサイレント突然変異として公知である。一部の実施形態では、ＩｇＧ１定常領域のアミノ酸残基Ｌ２３４およびＬ２３５は、Ａ２３４およびＡ２３５に置換される（「ＬＡＬＡ」としても公知）。一部の実施形態では、ＩｇＧ１定常領域のアミノ酸残基Ｎ２９７は、Ａ２９７に置換される（「Ｎ２９７Ａ」としても公知）。一部の実施形態では、ＩｇＧ１定常領域のアミノ酸残基Ｄ２６５およびＰ３２９は、Ａ２６５およびＡ３２９に置換される（「ＤＡＰＡ」としても公知）。他の抗体Ｆｃサイレンシング突然変異も使用することができる。一部の実施形態では、Ｆｃサイレンシング突然変異は、組合せで、例えばＤ２６５Ａ、Ｎ２９７ＡおよびＰ３２９Ａ（「ＤＡＮＡＰＡ」としても公知）において使用される。
代表的な抗原標的に加えて、本開示の代表的な抗体のアミノ酸配列を、表２～６に記載する。
Figure 2022532918000182
Figure 2022532918000183
Figure 2022532918000184
Figure 2022532918000185
Figure 2022532918000186
Figure 2022532918000187
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Figure 2022532918000189
Figure 2022532918000190
Figure 2022532918000191
Figure 2022532918000192
Figure 2022532918000193
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Figure 2022532918000195
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Figure 2022532918000197
Figure 2022532918000198
Figure 2022532918000199
一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣの抗体または抗原結合性断片は、上記の表に列挙される重鎖および軽鎖可変ドメインの任意のセット、または上記の表に列挙される重鎖および軽鎖可変ドメインの任意のセットからの６つのＣＤＲのセットを含むことができる。一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣの抗体または抗原結合性断片は、ＡＤＣがその標的がん抗原に（例えば、１ｘ１０－８Ｍ未満のＫＤで）結合する能力を保持し、本明細書で開示されるＡＤＣの１つまたは複数の機能的性質（例えば、内在化する、抗原標的、例えば腫瘍または他のがん細胞等に発現する抗原へ結合する能力）を保持する限り、保存的に修飾された、および／または上記の表に列挙される配列と相同なアミノ酸配列を含むことができる。
一部の実施形態では、本明細書で開示されるＡＤＣの抗体または抗原結合性断片は、ヒト重鎖および軽鎖定常ドメインまたはその断片をさらに含む。例えば、開示されるＡＤＣの抗体または抗原結合性断片は、ヒトＩｇＧ重鎖定常ドメイン（例えばＩｇＧ１）およびヒトカッパまたはラムダ軽鎖定常ドメインを含むことができる。一部の実施形態では、開示されるＡＤＣの抗体または抗原結合性断片は、ヒト免疫グロブリンＧサブタイプ１（ＩｇＧ１）重鎖定常ドメインを、ヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインとともに含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＢＣＭＡである。
一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号１５からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号１６からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号１７からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号１８からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号１９からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号２０からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号２の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号２と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５６および３７９に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体は、ヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインまたは修飾Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体は、配列番号５７の重鎖アミノ酸配列または配列番号５７と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号５８の軽鎖アミノ酸配列または配列番号５８と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体は、配列番号５７の重鎖アミノ酸配列、および配列番号５８の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体は、配列番号５７と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号５８と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体は、Ｊ６Ｍ０（国際公開第２０１２／１６３８０５号パンフレット）またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片は、Ｊ６Ｍ０の３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号１５）、ＨＣＤＲ２（配列番号１６）、ＨＣＤＲ３（配列番号１７）；ＬＣＤＲ１（配列番号１８）、ＬＣＤＲ２（配列番号１９）およびＬＣＤＲ３（配列番号２０）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＣＤ３３である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２１からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号２３からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号２４からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号２６からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号３の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号４の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号３と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号４と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の２９７に対応するアミノ酸位置にグルタミン残基（Ｑ）を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、ヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインまたは修飾Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号５９の重鎖アミノ酸配列または配列番号５９と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号６０の軽鎖アミノ酸配列または配列番号６０と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号５９の重鎖アミノ酸配列、および配列番号６０の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号５９と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号６０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、ＭｕＭｙ９－６ｃｈ（米国特許出願公開第２０１３／００７８２４１号明細書）またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、ＭｕＭｙ９－６ｃｈの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号２１）、ＨＣＤＲ２（配列番号２２）、ＨＣＤＲ３（配列番号２３）；ＬＣＤＲ１（配列番号２４）、ＬＣＤＲ２（配列番号２５）およびＬＣＤＲ３（配列番号２６）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号２７からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２８からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号２９からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号３０からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号３１からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号３２からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号５の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号６の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号５と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号６と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号６１の重鎖アミノ酸配列または配列番号６１と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号６２の軽鎖アミノ酸配列または配列番号６２と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号６１の重鎖アミノ酸配列、および配列番号６２の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号６１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号６２と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、ゲムツズマブまたはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体またはその抗原結合性断片は、ゲムツズマブの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号２７）、ＨＣＤＲ２（配列番号２８）、ＨＣＤＲ３（配列番号２９）；ＬＣＤＲ１（配列番号３０）、ＬＣＤＲ２（配列番号３１）およびＬＣＤＲ３（配列番号３２）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＰＣＡＤである。
一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号３３からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３４からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号３５からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号３６からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号３７からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号３８からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号７の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号８の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号７と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号８と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体は、配列番号６３の重鎖アミノ酸配列または配列番号６３と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号６４の軽鎖アミノ酸配列または配列番号６４と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体は、配列番号６３の重鎖アミノ酸配列、および配列番号６４の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体は、配列番号６３と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号６４と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体は、ＮＯＶ１６９Ｎ３１Ｑ（国際公開第２０１６／２０３４３２号パンフレット）またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＰＣＡＤ抗体またはその抗原結合性断片は、ＮＯＶ１６９Ｎ３１Ｑの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号３３）、ＨＣＤＲ２（配列番号３４）、ＨＣＤＲ３（配列番号３５）；ＬＣＤＲ１（配列番号３６）、ＬＣＤＲ２（配列番号３７）およびＬＣＤＲ３（配列番号３８）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＨＥＲ２である。
一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号３９からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号４０からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号４１からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号４２からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号４３からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号４４からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号１０の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号１０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の２９７に対応するアミノ酸位置にグルタミン残基（Ｑ）を含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の２９７に対応するアミノ酸位置にセリン残基（Ｓ）を含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、ヒトＩｇカッパ軽鎖定常ドメインまたは修飾Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む。
一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号６５の重鎖アミノ酸配列または配列番号６５と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号６６の軽鎖アミノ酸配列または配列番号６６と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号６５の重鎖アミノ酸配列、および配列番号６６の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号６５と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号６６と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は，トラスツズマブ（米国特許第５，８２１，３３７号明細書および第６，８７０，０３４号明細書；Molina et al. (2001) Cancer Res. 61(12):4744-9も参照されたい）またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合性断片は、トラスツズマブの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号３９）、ＨＣＤＲ２（配列番号４０）、ＨＣＤＲ３（配列番号４１）；ＬＣＤＲ１（配列番号４２）、ＬＣＤＲ２（配列番号４３）およびＬＣＤＲ３（配列番号４４）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＣＤ３８である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号４５からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号４６からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号４７からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号４８からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号４９からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号５０からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１１の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号１２の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号１２と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体は、配列番号６７の重鎖アミノ酸配列または配列番号６７と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号６８の軽鎖アミノ酸配列または配列番号６８と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号６７の重鎖アミノ酸配列、および配列番号６８の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体は、配列番号６７と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号６８と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体は、ダラツムマブまたはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ３８抗体またはその抗原結合性断片は、ゲムツズマブの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号４５）、ＨＣＤＲ２（配列番号４６）、ＨＣＤＲ３（配列番号４７）；ＬＣＤＲ１（配列番号４８）、ＬＣＤＲ２（配列番号４９）およびＬＣＤＲ３（配列番号５０）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＣＤ４６である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４６抗体または抗原結合性断片は、本明細書で参照により組み込まれる国際公開第２０１８／０８９８０７号パンフレットに記載されるものである。一部の実施形態では、抗ＣＤ４６抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ４６抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９０の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号９１の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ４６抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号９０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号９１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＣＤ４８である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号５１からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号５２からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号５３からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号５４からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号５５からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号５６からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１３の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号１４の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号１３と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号１４と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体は、配列番号６９の重鎖アミノ酸配列または配列番号６９と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号７０の軽鎖アミノ酸配列または配列番号７０と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体は、配列番号６９の重鎖アミノ酸配列、および配列番号７０の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体は、配列番号６９と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号７０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体は、ＳＧＮ－４８Ａまたはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、ゲムツズマブの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号５１）、ＨＣＤＲ２（配列番号５２）、ＨＣＤＲ３（配列番号５３）；ＬＣＤＲ１（配列番号５４）、ＬＣＤＲ２（配列番号５５）およびＬＣＤＲ３（配列番号５６）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
一部の実施形態では、ＡＤＣについての標的がん抗原はＣＤ７９Ｂである。
一部の実施形態では、抗ＣＤ４８抗体またはその抗原結合性断片は、以下のような３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲ：配列番号８２からなる重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号８３からなる重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号８４からなる重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；配列番号８５からなる軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号８６からなる軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）および配列番号８７からなる軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号８０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号８１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号８０の重鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号８１の軽鎖可変領域アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体またはその抗原結合性断片は、配列番号８０と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である重鎖可変領域アミノ酸配列、および／または配列番号８１と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％もしくは少なくとも９９％同一である軽鎖可変領域アミノ酸配列を有する。
一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体またはその抗原結合性断片は、内在化抗体または内在化抗原結合性断片である。一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされた野生型（非修飾）ＩｇＧ１重鎖定常ドメイン中の１５２および３７５に対応するアミノ酸位置にシステイン残基（Ｃ）を含む。
一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体は、配列番号８８の重鎖アミノ酸配列または配列番号８８と少なくとも９５％同一である配列、および配列番号８９の軽鎖アミノ酸配列または配列番号８９と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、配列番号８８の重鎖アミノ酸配列、および配列番号８９の軽鎖アミノ酸配列、または開示される配列と少なくとも９５％同一である配列を含む。一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体は、配列番号８８と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である重鎖アミノ酸配列、および配列番号８９と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一である軽鎖アミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体は、ポラチズマブまたはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、抗ＣＤ７９Ｂ抗体またはその抗原結合性断片は、ゲムツズマブの３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＨＣＤＲ１（配列番号８２）、ＨＣＤＲ２（配列番号８３）、ＨＣＤＲ３（配列番号８４）；ＬＣＤＲ１（配列番号８５）、ＬＣＤＲ２（配列番号８６）およびＬＣＤＲ３（配列番号８７）の１、２、３、４、５または６つ以下のアミノ酸付加、欠失または置換を含む。
２つ以上のポリペプチド中の残基は、残基がポリペプチド構造中の類似の位置を占める場合、「対応する」と言われる。２つ以上のポリペプチド中の類似の位置は、ポリペプチド配列をアミノ酸配列または構造の類似性に基づいて配列比較することにより決定することができる。当業者は、良好な配列比較を生成するために、いずれかの配列にギャップを導入することが必要となり得ることを理解する。
一部の実施形態では、アミノ酸置換は単一の残基でのものである。挿入は、通常約１～約２０程度のアミノ酸残基で起こるが、生物機能（例えば標的抗原への結合）が保持される限り、著しく大きな挿入も許容されることがある。欠失は、通常約１～約２０のアミノ酸残基の範囲にわたるが、一部の場合では欠失ははるかにより大きいことがある。置換、欠失、挿入またはそれらの任意の組合せは、最終の誘導体またはバリアントに到達するために使用することができる。一般的に、これらの変化は、分子、特に抗原結合タンパク質の免疫原性および特異性の変更を最小化するために、少数のアミノ酸上で行われる。しかし、より大きな変化は、ある特定の状況において許容されることがある。保存的置換は、表７のように示された以下のチャートに従って行うことができる。
Figure 2022532918000200
バリアント抗体配列がＡＤＣ中で使用される一部の実施形態では、バリアントは典型的に同じ質の生物活性を示し、同じ免疫反応を誘発するが、バリアントは、必要に応じて抗原結合タンパク質の特性を修飾するように選択することもできる。あるいは、バリアントは、抗原結合タンパク質の生物活性が変更されるように設計することができる。例えば、グリコシル化部位は、変更または除去することができる。
様々な抗体を、がん細胞を標的とするために、本明細書で使用されるＡＤＣで使用することができる。下記に示すように、本明細書で開示されるＡＤＣ中のリンカー－ペイロードは、異なる腫瘍抗原標的抗体を用いると非常に有効である。がん細胞で発現するが健康な細胞では発現しない、またはがん細胞で健康な細胞よりも高いレベルで発現する好適な抗原は、抗体がそれらを対象とするため、当該技術分野において公知である。これらの抗原標的に対するさらなる抗体は、当業者により調製することができる。これらの抗体は、本明細書で開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードとともに使用することができる。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＢＣＭＡを標的とし、ＢＣＭＡ標的抗体または抗原結合性断片はＪ６Ｍ０である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＣＤ３３を標的とし、一部の実施形態では、ＣＤ３３標的抗体または抗原結合性断片はＭｕＭｙ９－６ｃｈである。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＰＣＡＤを標的とし、一部の実施形態では、ＰＣＡＤ標的抗体または抗原結合性断片はＮＯＶ１６９Ｎ３１Ｑである。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＨＥＲ２を標的とし、一部の実施形態では、ＨＥＲ２標的抗体または抗原結合性断片はトラスツズマブである。一部の実施形態では、開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードは、いくつかの異なる腫瘍標的抗体を用いると非常に有効である一方、ＢＣＭＡ標的抗体、例えばＪ６Ｍ０、ＣＤ３３標的抗体、例えばＭｕＭｙ９－６ｃｈ、ＰＣＡＤ標的抗体、例えばＮＯＶ１６９Ｎ３１ＱおよびＨＥＲ２標的抗体、例えばトラスツズマブは、特に改善された薬物：抗体比、凝集レベル、安定性（すなわち、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの安定性）、腫瘍標的化（すなわち、細胞傷害性、効力）、最小化された標的外死滅および／または処置有効性を提供した。改善された処置有効性はｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで測定することができ、低減した腫瘍成長速度および／または低減した腫瘍体積を挙げることができる。
一部の実施形態では、同じ標的に対する代わりの抗体または異なる抗原標的に対する抗体が使用され、上記に記載した好都合な機能的性質（例えば、改善された安定性、改善された腫瘍標的化、改善された処置有効性等）の少なくともいくつかを提供する。一部の実施形態では、これらの好都合な機能的性質の一部またはすべては、開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードが代わりのＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４６、ＣＤ４８、ＰＣＡＤまたはＨＥＲ２標的抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートする場合に、観察される。一部の他の実施形態では、これらの好都合な機能的性質の一部またはすべては、開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードがＢＣＭＡ標的抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートする場合に、観察される。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＢＣＭＡを標的とする。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的抗体または抗原結合性断片は、Ｊ６Ｍ０である。他の実施形態では、これらの好都合な機能的性質の一部またはすべては、開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードがＣＤ３３標的抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートする場合に、観察される。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＣＤ３３を標的とする。一部の実施形態では、ＣＤ３３標的抗体または抗原結合性断片は、ＭｕＭｙ９－６ｃｈである。他の実施形態では、これらの好都合な機能的性質の一部またはすべては、開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードがＰＣＡＤ標的抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートする場合に、観察される。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＰＣＡＤを標的とする。一部の実施形態では、ＰＣＡＤ標的抗体または抗原結合性断片は、ＮＯＶ１６９Ｎ３１Ｑである。他の実施形態では、これらの好都合な機能的性質の一部またはすべては、開示されるリンカーおよびＭｃｌ－１阻害剤ペイロードがＨＥＲ２標的抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートする場合に、観察される。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片はＨＥＲ２を標的とする。一部の実施形態では、ＨＥＲ２標的抗体または抗原結合性断片は、トラスツズマブである。
リンカー
一部の実施形態では、ＡＤＣにおけるリンカーは、治療上有効であるように十分に細胞外で安定している。一部の実施形態では、リンカーが細胞外で安定しているため、ＡＤＣは細胞外条件で存在する場合（例えば、細胞への輸送または送達前）には無傷のままである。ＡＤＣの文脈で使用される「無傷」という用語は、抗体または抗原結合性断片が薬物部分（例えば、Ｍｃｌ－１阻害剤）に結合したままであることを意味する。
本明細書で使用される場合、リンカー、またはリンカーを含むＡＤＣの文脈での「安定な」は、ＡＤＣが細胞外条件で存在する場合に、ＡＤＣの試料中のリンカーの２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約３％以下、または約１％以下（またはそれらの間の任意のパーセンテージ）が切断されている（または全ＡＤＣが別段無傷ではない場合である）ことを意味する。一部の実施形態では、本明細書に開示されるリンカーおよび／またはＡＤＣは、代替的なリンカー、ならびに／または代替的なリンカーおよび／もしくはＭｃｌ－１阻害剤ペイロードを有するＡＤＣと比較して安定である。一部の実施形態では、本明細書に開示されるＡＤＣは、約４８時間超、６０時間超、約７２時間超、約８４時間超、または約９６時間超、無傷のままであり得る。
リンカーが細胞外で安定であるかどうかは、例えば、ＡＤＣを血漿中に所定の時間期間（例えば、２、４、６、８、１６、２４、４８、または７２時間）含ませ、次いで血漿中に存在する遊離薬物部分の量を定量することにより決定することができる。安定性により、標的がん細胞に局在化するための、かつ正常組織およびがん組織の両方を無差別に損傷することによりＡＤＣの治療指数を低下させる可能性がある薬物部分の時期尚早な放出を防止するためのＡＤＣ時間が許容され得る。一部の実施形態では、リンカーが標的細胞の外側で安定しており、その細胞の内側に入るとＡＤＣから薬物部分を放出するため、薬物はその標的に結合することができる。したがって、有効なリンカーは：（ｉ）抗体または抗原結合性断片の特異的結合特性を維持し；（ｉｉ）抗体または抗原結合性断片への安定な結合を介して薬物部分の送達、例えば細胞内送達を可能にし；（ｉｉｉ）ＡＤＣがその標的部位に輸送または送達されるまで、安定かつ無傷のままであり；かつ（ｉｖ）切断または代替的な放出機構後の薬物部分の治療効果、例えば細胞傷害効果を可能にする。
リンカーは、ＡＤＣの物理化学的特性に影響を及ぼすことがある。多くの細胞傷害剤が性質上疎水性であるため、それらと、追加の疎水性部分を有する抗体とを連結することにより、凝集が生じる場合がある。ＡＤＣ凝集物は不溶性であり、抗体上への達成可能な薬物装填量を制限することが多く、このことはＡＤＣの効力に負の影響を及ぼす可能性がある。生物製剤のタンパク質凝集は一般に、免疫原性の増加にも関連付けられている。以下に示す通り、本明細書に開示されるリンカーは、低い凝集レベルおよび望ましいレベルの薬物装填量を有するＡＤＣをもたらす。
リンカーは「切断可能」であっても「非切断可能」であってよい（Ducry and Stump (2010) Bioconjugate Chem. 21:5-13）。切断可能なリンカーは、ある特定の環境因子に供される場合、例えば、標的細胞内に内在化される場合に、薬物部分（例えば、Ｍｃｌ－１阻害剤）を放出するように設計されるのに対し、非切断可能なリンカーは一般に、抗体または抗原結合性断片自体の分解に依存する。
「アルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、不飽和を含まない、直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカルを指す。「Ｃ１～Ｃ６アルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、不飽和を含まず、１～６個の炭素原子を有し、単結合により分子の残部に結合されている、直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカルを指す。「Ｃ１～Ｃ６アルキル」基の非限定的な例としては、メチル（Ｃ１アルキル）、エチル（Ｃ２アルキル）、１－メチルエチル（Ｃ３アルキル）、ｎ－プロピル（Ｃ３アルキル）、イソプロピル（Ｃ３アルキル）、ｎ－ブチル（Ｃ４アルキル）、イソブチル（Ｃ４アルキル）、ｓｅｃ－ブチル（Ｃ４アルキル）、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｃ４アルキル）、ｎ－ペンチル（Ｃ５アルキル）、イソペンチル（Ｃ５アルキル）、ネオペンチル（Ｃ５アルキル）およびヘキシル（Ｃ６アルキル）が挙げられる。
「アルケニル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含む、直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカル基を指す。「Ｃ２～Ｃ６アルケニル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２～６個の炭素原子を有し、単結合により分子の残部に結合されている、直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカル基を指す。「Ｃ２～Ｃ６アルケニル」基の非限定的な例としては、エテニル（Ｃ２アルケニル）、プロパ－１－エニル（Ｃ３アルケニル）、ブタ－１－エニル（Ｃ４アルケニル）、ペンタ－１－エニル（Ｃ５アルケニル）、ペンタ－４－エニル（Ｃ５アルケニル）、ペンタ－１，４－ジエニル（Ｃ５アルケニル）、ヘキサ－１－エニル（Ｃ６アルケニル）、ヘキサ－２－エニル（Ｃ６アルケニル）、ヘキサ－３－エニル（Ｃ６アルケニル）、ヘキサ－１－，４－ジエニル（Ｃ６アルケニル）、ヘキサ－１－，５－ジエニル（Ｃ６アルケニル）およびヘキサ－２－，４－ジエニル（Ｃ６アルケニル）が挙げられる。「Ｃ２～Ｃ３アルケニル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２～３個の炭素原子を有し、単結合により分子の残部に結合されている、直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカル基を指す。「Ｃ２～Ｃ３アルケニル」基の非限定的な例としては、エテニル（Ｃ２アルケニル）およびプロパ－１－エニル（Ｃ３アルケニル）が挙げられる。
「アルキレン」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、不飽和を含まない、二価の直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカルを指す。「Ｃ１～Ｃ６アルキレン」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、不飽和を含まず、１～６個の炭素原子を有する、二価の直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカルを指す。「Ｃ１～Ｃ６アルキレン」基の非限定的な例としては、メチレン（Ｃ１アルキレン）、エチレン（Ｃ２アルキレン）、１－メチルエチレン（Ｃ３アルキレン）、ｎ－プロピレン（Ｃ３アルキレン）、イソプロピレン（Ｃ３アルキレン）、ｎ－ブチレン（Ｃ４アルキレン）、イソブチレン（Ｃ４アルキレン）、ｓｅｃ－ブチレン（Ｃ４アルキレン）、ｔｅｒｔ－ブチレン（Ｃ４アルキレン）、ｎ－ペンチレン（Ｃ５アルキレン）、イソペンチレン（Ｃ５アルキレン）、ネオペンチレン（Ｃ５アルキレン）、およびヘキシレン（Ｃ６アルキレン）が挙げられる。
「アルケニレン」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含む、二価の直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカルを指す。「Ｃ２～Ｃ６アルケニレン」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２～６個の炭素原子を有する、二価の直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカル基を指す。「Ｃ２～Ｃ６アルケニレン」基の非限定的な例としては、エテニレン（Ｃ２アルケニレン）、プロパ－１－エニレン（Ｃ３アルケニレン）、ブタ－１－エニレン（Ｃ４アルケニレン）、ペンタ－１－エニレン（Ｃ５アルケニレン）、ペンタ－４－エニレン（Ｃ５アルケニレン）、ペンタ－１，４－ジエニレン（Ｃ５アルケニレン）、ヘキサ－１－エニレン（Ｃ６アルケニレン）、ヘキサ－２－エニレン（Ｃ６アルケニレン）、ヘキサ－３－エニレン（Ｃ６アルケニレン）、ヘキサ－１－，４－ジエニレン（Ｃ６アルケニレン）、ヘキサ－１－，５－ジエニレン（Ｃ６アルケニレン）およびヘキサ－２－，４－ジエニレン（Ｃ６アルケニレン）が挙げられる。「Ｃ２～Ｃ６アルケニレン」という用語は、本明細書で使用される場合、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２～３個の炭素原子を有する、二価の直鎖状または分枝状炭化水素鎖ラジカル基を指す。「Ｃ２～Ｃ３アルケニレン」基の非限定的な例としては、エテニレン（Ｃ２アルケニレン）およびプロパ－１－エニレン（Ｃ３アルケニレン）が挙げられる。
「シクロアルキル」または「Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、飽和の、単環式、縮合二環式、縮合三環式または橋架多環式環系を指す。縮合二環式または橋架多環式環系の非限定的な例としては、ビシクロ［１．１．１］ペンタン、ビシクロ［２．１．１］ヘキサン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［３．１．１］ヘプタン、ビシクロ［３．２．１］オクタン、ビシクロ［２．２．２］オクタンおよびアダマンタニルが挙げられる。単環式Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル基の非限定的な例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチル基が挙げられる。
「ハロアルキル」という用語は、本明細書で使用される場合、炭化水素鎖に沿った水素の代わりに１個または複数のハロゲン基で置換された線状または分枝状アルキル鎖を指す。ハロアルキル基における置換に適したハロゲン基の例としては、フッ素、臭素、塩素、およびヨウ素が挙げられる。ハロアルキル基は、アルキル鎖における水素の代わりに複数のハロゲン基による置換を含んでよく、ここで、前記ハロゲン基は、アルキル鎖における同じ炭素または別の炭素に結合することができる。
本明細書で使用される場合、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキル基は、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、必要に応じて置換された（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｓ－、ヒドロキシ、オキソ（もしくは適切な場合、Ｎ－オキシド）、ニトロ、シアノ、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０’、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０’、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０’Ｒ０’’、－ＮＲ０’Ｒ０’’、－（Ｃ＝ＮＲ０’）－ＯＲ０’’、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、トリフルオロメトキシ、またはハロゲンから選択される１～４個の基で必要に応じて置換されてよく、ここで、Ｒ０’およびＲ０’’は、それぞれ独立して、水素原子または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、ここで、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個もしくは複数は、必要に応じて重水素化されている。
「ポリオキシエチレン」、「ポリエチレングリコール」または「ＰＥＧ」という用語は、本明細書で使用される場合、（ＯＣＨ２ＣＨ２）基から構成される直鎖、分枝鎖または星形の構成物を指す。ある特定の実施形態では、ポリエチレンまたはＰＥＧ基は、－（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｔ ＊－（式中、ｔは、１～４０または４～４０であり、ここで、「－」は、自壊性スペーサーに向けられた末端を示し、「＊－」は、末端基Ｒ’との結合点を示し、ここで、Ｒ’は、ＯＨ、ＯＣＨ３またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）である。他の実施形態では、ポリエチレンまたはＰＥＧ基は、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔ ＊－（式中、ｔは、１～４０または４～４０であり、ここで、「－」は、自壊性スペーサーに向けられた末端を示し、「＊－」は、末端基Ｒ’’との結合点を示し、ここで、Ｒ’’は、Ｈ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）である。例えば、「ＰＥＧ１２」という用語は、本明細書で使用される場合、ｔが１２であることを意味する。
「ポリアルキレングリコール」という用語は、本明細書で使用される場合、（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｎ基から構成される直鎖、分枝鎖または星形の構成物を指す。ある特定の実施形態では、ポリエチレンまたはＰＥＧ基は、－（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ ＊－（式中、ｍは、１～１０であり、ｔは、１～４０または４～４０であり、ここで、「－」は、自壊性スペーサーに向けられた末端を示し、「＊－」は、末端基Ｒ’との結合点を示し、ここで、Ｒ’は、ＯＨ、ＯＣＨ３またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）である。他の実施形態では、ポリエチレンまたはＰＥＧ基は、－（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ ＊－（式中、ｍは、１～１０であり、ｔは、１～４０または４～４０であり、ここで、「－」は、自壊性スペーサーに向けられた末端を示し、「＊－」は、末端基Ｒ’’との結合点を示し、ここで、Ｒ’’は、Ｈ、ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）である。
「反応性基」という用語は、本明細書で使用される場合、抗体、抗体断片、または抗体もしくは抗体断片に結合されている別の反応性基の官能基と共有結合を形成することができる官能基である。そのような官能基の非限定的な例としては、本明細書において提供される表８の反応性基が挙げられる。
「結合基（attachment group）」または「連結基（coupling group）」という用語は、本明細書で使用される場合、架橋スペーサーと抗体またはその断片とを連結する二価部分を指す。結合または連結基は、反応基と抗体またはその断片上の官能基との間の反応により形成される二価部分である。そのような二価部分の非限定的な例としては、本明細書において提供される表８および表９に示す二価化学部分が挙げられる。
「架橋スペーサー」という用語は、本明細書で使用される場合、１つまたは複数のリンカー成分であって、一緒に共有結合されて二価部分を形成し、これが、二価ペプチドスペーサーと反応性基とを連結し、二価ペプチドスペーサーと連結基とを連結し、または結合基と少なくとも１つの切断可能な基とを連結する、リンカー成分を指す。ある特定の実施形態では、「架橋スペーサー」は、アミド結合を介して二価ペプチドスペーサーのＮ－末端に結合されているカルボキシル基を含む。
「スペーサー部分」という用語は、本明細書で使用される場合、一緒に共有結合されて、自壊性スペーサーと親水性部分とを連結する部分を形成する、１つまたは複数のリンカー成分を指す。
「二価ペプチドスペーサー」という用語は、本明細書で使用される場合、一緒に共有結合されて、架橋スペーサーと自壊性スペーサーとを連結する部分を形成する、１個または複数のアミノ酸残基を含む、二価リンカーを指す。１個または複数のアミノ酸残基は、アラニン（Ａｌａ）、システイン（Ｃｙｓ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、リシン（Ｌｙｓ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、プロリン（Ｐｒｏ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アルギニン（Ａｒｇ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、バリン（Ｖａｌ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、ノルロイシン（norleucune）（Ｎｌｅ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、ピロリシン（Ｐｙｌ）、ホモセリン、ホモシステイン、およびデスメチルピロリシンから選択されるアミノ酸の残基であり得る。
ある特定の実施形態では、「二価ペプチドスペーサー」は、各残基が、アラニン（Ａｌａ）、システイン（Ｃｙｓ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、リシン（Ｌｙｓ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、プロリン（Ｐｒｏ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アルギニン（Ａｒｇ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、バリン（Ｖａｌ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、ピロリシン（Ｐｙｌ）、ホモセリン、ホモシステイン、およびデスメチルピロリシンから選択されるアミノ酸の残基から独立して選択される、２～４個のアミノ酸残基の組合せ、例えば、－ＶａｌＣｉｔ＊；－ＣｉｔＶａｌ＊；－ＡｌａＡｌａ＊；－ＡｌａＣｉｔ＊；－ＣｉｔＡｌａ＊；－ＡｓｎＣｉｔ＊；－ＣｉｔＡｓｎ＊；－ＣｉｔＣｉｔ＊；－ＶａｌＧｌｕ＊；－ＧｌｕＶａｌ＊；－ＳｅｒＣｉｔ＊；－ＣｉｔＳｅｒ＊；－ＬｙｓＣｉｔ＊；－ＣｉｔＬｙｓ＊；－ＡｓｐＣｉｔ＊；－ＣｉｔＡｓｐ＊；－ＡｌａＶａｌ＊；－ＶａｌＡｌａ＊；－ＰｈｅＡｌａ＊；－ＡｌａＰｈｅ＊；－ＰｈｅＬｙｓ＊；－ＬｙｓＰｈｅ＊；－ＶａｌＬｙｓ＊；－ＬｙｓＶａｌ＊；－ＡｌａＬｙｓ＊；－ＬｙｓＡｌａ＊；－ＰｈｅＣｉｔ＊；－ＣｉｔＰｈｅ＊；－ＬｅｕＣｉｔ＊；－ＣｉｔＬｅｕ＊；－ＩｌｅＣｉｔ＊；－ＣｉｔＩｌｅ＊；－ＰｈｅＡｒｇ＊；－ＡｒｇＰｈｅ＊；－ＣｉｔＴｒｐ＊；－ＴｒｐＣｉｔ＊；－ＰｈｅＰｈｅＬｙｓ＊；－ＬｙｓＰｈｅＰｈｅ＊；－ＤＰｈｅＰｈｅＬｙｓ＊；－ＤＬｙｓＰｈｅＰｈｅ＊；－ＧｌｙＰｈｅＬｙｓ＊；－ＬｙｓＰｈｅＧｌｙ＊；－ＧｌｙＰｈｅＬｅｕＧｌｙ－［配列番号１６０］；－ＧｌｙＬｅｕＰｈｅＧｌｙ－［配列番号１６１］；－ＡｌａＬｅｕＡｌａＬｅｕ－［配列番号１６２］、－ＧｌｙＧｌｙＧｌｙ＊；－ＧｌｙＧｌｙＧｌｙＧｌｙ－［配列番号１６３］；－ＧｌｙＰｈｅＶａｌＧｌｙ－［配列番号１６４］；および－ＧｌｙＶａｌＰｈｅＧｌｙ－［配列番号１６５］であり、ここで、「－」は、架橋スペーサーとの結合点を示し、「＊」は、自壊性スペーサーとの結合点を示す。
「リンカー成分」という用語は、本明細書で使用される場合、リンカーの一部である化学部分を指す。リンカー成分の例としては、以下が挙げられる：アルキレン基：線状または分枝状のいずれかであり得る－（ＣＨ２）ｎ－（この場合、ｎは、１～１８である）；アルケニレン基；アルキニレン基；アルケニル基；アルキニル基；エチレングリコールユニット：－ＯＣＨ２ＣＨ２－または－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－；ポリエチレングリコールユニット：（－ＣＨ２ＣＨ２Ｏ－）ｘ（式中、この場合のｘは、２～２０である）；－Ｏ－；－Ｓ－；カルボニル：－Ｃ（＝Ｏ）；エステル：Ｃ（＝Ｏ）－ＯまたはＯ－Ｃ（＝Ｏ）；炭酸塩：－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－；アミン：－ＮＨ－；第三級アミン；アミド：－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ－、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１～６アルキル）；カルバメート：－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－または－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ；尿素：－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ；スルホンアミド：－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－または－ＮＨＳ（Ｏ）２；エーテル：－ＣＨ２Ｏ－または－ＯＣＨ２－；カルボキシ、スルホン酸、ヒドロキシル、アミン、アミノ酸、糖類、リン酸およびホスホン酸から独立して選択される１個または複数の基で置換されたアルキレン）；カルボキシ、スルホン酸、ヒドロキシル、アミン、アミノ酸、糖類、リン酸およびホスホン酸から独立して選択される１個または複数の基で置換されたアルケニレン）；カルボキシ、スルホン酸、ヒドロキシル、アミン、アミノ酸、糖類、リン酸およびホスホン酸から独立して選択される１個または複数の基で置換されたアルキニレン）；１個または複数のメチレン基が１つまたは複数の－Ｓ－、－ＮＨ－または－Ｏ－部分で置き換えられたＣ１～Ｃ１０アルキレン；２つの利用可能な結合点を有する環系、例えば、フェニル（１，２－ １，３－および１，４－ジ置換フェニルを含む）、Ｃ５～Ｃ６ヘテロアリール、Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル（１，１－ジ置換シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル、および１，４－ジ置換シクロヘキシルを含む）、およびＣ４～Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択される二価の環；アラニン（Ａｌａ）、システイン（Ｃｙｓ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、リシン（Ｌｙｓ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、プロリン（Ｐｒｏ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アルギニン（Ａｒｇ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、バリン（Ｖａｌ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、ピロリジン（Ｐｙｌ）、ホモセリン、ホモシステイン、およびデスメチルピロリジンから選択されるアミノ酸の残基；各残基が、アラニン（Ａｌａ）、システイン（Ｃｙｓ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、リシン（Ｌｙｓ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、プロリン（Ｐｒｏ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アルギニン（Ａｒｇ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、バリン（Ｖａｌ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、ノルロイシン（Ｎｌｅ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、ピロリシン（Ｐｙｌ）、ホモセリン、ホモシステイン、およびデスメチルピロリシンから選択されるアミノ酸の残基から独立して選択される、２個以上のアミノ酸残基の組合せ、例えば、Ｖａｌ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ｖａｌ；Ａｌａ－Ａｌａ；Ａｌａ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ａｌａ；Ａｓｎ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ａｓｎ；Ｃｉｔ－Ｃｉｔ；Ｖａｌ－Ｇｌｕ；Ｇｌｕ－Ｖａｌ；Ｓｅｒ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ｓｅｒ；Ｌｙｓ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ｌｙｓ；Ａｓｐ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ａｓｐ；Ａｌａ－Ｖａｌ；Ｖａｌ－Ａｌａ；Ｐｈｅ－Ｌｙｓ；Ｌｙｓ－Ｐｈｅ；Ｖａｌ－Ｌｙｓ；Ｌｙｓ－Ｖａｌ；Ａｌａ－Ｌｙｓ；Ｌｙｓ－Ａｌａ；Ｐｈｅ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ｐｈｅ；Ｌｅｕ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ｌｅｕ；Ｉｌｅ－Ｃｉｔ；Ｃｉｔ－Ｉｌｅ；Ｐｈｅ－Ａｒｇ；Ａｒｇ－Ｐｈｅ；Ｃｉｔ－Ｔｒｐ；およびＴｒｐ－Ｃｉｔ；ならびに自壊性スペーサーであって、酸誘発性切断、ぺプチダーゼ誘発性切断、エステラーゼ誘発性切断、グリコシダーゼ誘発性切断、ホスホジエステラーゼ誘発性切断、ホスファターゼ誘発性切断、プロテアーゼ誘発性切断、リパーゼ誘発性切断またはジスルフィド結合切断に対して感受性である１つまたは複数の保護（トリガー）基を含む、自壊性スペーサー。
そのような自壊性スペーサーの非限定的な例としては、
Figure 2022532918000201
 （式中、
ＰＧは、保護（トリガー）基であり、
Ｘａは、Ｏ、ＮＨまたはＳであり、
Ｘｂは、Ｏ、ＮＨ、ＮＣＨ３またはＳであり、
Ｘｃは、ＯまたはＮＨであり、
Ｙａは、ＣＨ２、ＣＨ２ＯまたはＣＨ２ＮＨであり、
Ｙｂは、ＣＨ２、ＯまたはＮＨであり、
Ｙｃは、結合、ＣＨ２、ＯまたはＮＨであり、
ＬＧは、本発明のリンカー－薬物基の薬物部分（Ｄ）などの脱離基である）
が挙げられる。
そのような自壊性スペーサーの追加の非限定的な例は、Angew. Chem. Int. Ed. 2015, 54, 7492 - 7509に記載されている。
加えて、リンカー成分は、２つの反応性基間の反応により容易に形成される化学部分であり得る。そのような化学部分の非限定的な例を表８に示す。
Figure 2022532918000202
Figure 2022532918000203
Figure 2022532918000204
Figure 2022532918000205
Figure 2022532918000206
Figure 2022532918000207
 ここで、表８中のＲ３２は、Ｈ、Ｃ１～４アルキル、フェニル、ピリミジンまたはピリジンであり、表８中のＲ３５は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フェニル、または１～３個の－ＯＨ基で置換されたＣ１～４アルキルであり、表８中の各Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシ、および－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択され、表８中のＲ３７は、Ｈ、フェニルおよびピリジンから独立して選択され、表８中のｑは、０、１、２または３であり、表８中のＲ８およびＲ１３は、Ｈまたはメチルであり、表８中のＲ９およびＲ１４は、Ｈ、－ＣＨ３またはフェニルであり、表８中のＲは、Ｈまたは任意の好適な置換基であり、表８中のＲ５０は、Ｈである。
加えて、リンカー成分は、以下の表９に列挙した基であり得る。
Figure 2022532918000208
Figure 2022532918000209
Figure 2022532918000210
Figure 2022532918000211
本明細書で使用される場合、化合物の部分構造が例示される場合には、波線（
Figure 2022532918000212
 ）は、部分構造と分子の残部との結合点を示す。
「自壊性スペーサー」および「自壊性基」という用語は、本明細書で使用される場合、酸誘発性切断、ぺプチダーゼ誘発性切断、エステラーゼ誘発性切断、グリコシダーゼ誘発性切断、ホスホジエステラーゼ誘発性切断、ホスファターゼ誘発性切断、プロテアーゼ誘発性切断、リパーゼ誘発性切断またはジスルフィド結合切断により活性化される１つまたは複数のトリガー基（ＴＧ）を含む部分を指し、活性化後、保護基は除去され、これにより、脱離基の時間的連続放出につながる分解反応のカスケードが生じる。反応のそのようなカスケードは、限定するものではないが、１，４－、１，６－または１，８－脱離反応であり得る。
自壊性のスペーサーまたは基の非限定的な例としては、
Figure 2022532918000213
 （ここで、このような基は、必要に応じて置換されてよく、
式中、
ＴＧは、トリガー基であり、
Ｘａは、Ｏ、ＮＨまたはＳであり、
Ｘｂは、Ｏ、ＮＨ、ＮＣＨ３またはＳであり、
Ｘｃは、ＯまたはＮＨであり、
Ｙａは、ＣＨ２、ＣＨ２ＯまたはＣＨ２ＮＨであり、
Ｙｂは、ＣＨ２、ＯまたはＮＨであり、
Ｙｃは、結合、ＣＨ２、ＯまたはＮＨであり、
ＬＧは、本発明のリンカー－薬物基の薬物部分（Ｄ）などの脱離基である）
が挙げられる。
自壊性スペーサーの追加の非限定的な例は、Angew. Chem. Int. Ed. 2015, 54, 7492 - 7509に記載されている。
ある特定の実施形態では、自壊性スペーサーは、構造
Figure 2022532918000214
 （式中、Ｌｐは、酵素切断可能な二価ペプチドスペーサーであり、Ａ、Ｄ、Ｌ３およびＲ２は、本明細書で定義した通りである）
を有する部分である。
好ましい実施形態では、自壊性スペーサーは、構造
Figure 2022532918000215
 （式中、Ｌｐは、酵素切断可能な二価ペプチドスペーサーであり、Ｄ、Ｌ３およびＲ２は、本明細書で定義した通りである）
を有する部分である。一部の実施形態では、Ｄは、ＭＣｌ１阻害剤を含有する四級化された第三級アミンである。
他の好ましい実施形態では、自壊性スペーサーは、構造
Figure 2022532918000216
 （式中、Ｌｐは、酵素切断可能な二価ペプチドスペーサーであり、Ｄ、Ｌ３およびＲ２は、本明細書で定義した通りである）
を有する部分である。
「親水性部分」という用語は、本明細書で使用される場合、薬物部分（Ｄ）が本発明のリンカー基に結合されている場合に薬物部分（Ｄ）の水溶性が増加する親水性特性を有する部分を指す。そのような親水性基の例としては、限定するものではないが、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖類、オリゴ糖類、ポリペプチド、１～３個の
Figure 2022532918000217
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルが挙げられる。
薬物部分
一部の実施形態では、リンカー部分の前駆体である中間体を、適切な条件下で薬物部分（例えば、Ｍｃｌ－１阻害剤）と反応させる。一部の実施形態では、反応性基を薬物および／または中間体もしくはリンカー上で使用する。薬物と中間体との間の反応の生成物、または誘導体化薬物（薬物プラスリンカー）を、その後、薬物および中間体または誘導体化薬物と抗体または抗原結合性断片とのコンジュゲーションを容易にする条件下で、抗体または抗原結合性断片と反応させる。代替的に、中間体またはリンカーを、最初に抗体もしくは抗原結合性断片、または誘導体化抗体もしくは抗原結合性断片と反応させ、次いで薬物または誘導体化薬物と反応させてよい。
いくつかの異なる反応が、薬物部分および／またはリンカー部分と抗体または抗原結合性断片との共有結合に利用可能である。これは多くの場合、リシンのアミン基、グルタミン酸およびアスパラギン酸の遊離カルボン酸基、システインのスルフヒドリル基、ならびに芳香族アミノ酸の様々な部分を含む、抗体または抗原結合性断片の１個または複数のアミノ酸残基の反応により達成される。例えば、非特異的共有結合は、薬物部分上のカルボキシ（またはアミノ）基と抗体または抗原結合性断片上のアミノ（またはカルボキシ）基とを連結するカルボジイミド反応を使用して行われ得る。加えて、ジアルデヒドまたはイミドエステルなどの二官能性剤も、薬物部分上のアミノ基と抗体または抗原結合性断片上のアミノ基とを連結するために使用してよい。薬物（例えば、Ｍｃｌ－１阻害剤）と結合剤との結合には、シッフ塩基反応も利用可能である。この方法は、グリコールまたはヒドロキシ基を含有する薬物の過ヨウ素酸酸化と、これによりアルデヒドを形成し、次いでこれを結合剤と反応させることとを伴う。結合は、結合剤のアミノ基とのシッフ塩基の形成を介して生じる。イソチオシアネートも、薬物を結合剤に共有結合させるためのカップリング剤として使用することができる。他の技術は当業者に公知であり、本開示の範囲内である。当技術分野で公知の様々な化学を使用して、生成し、抗体または抗原結合性断片と連結することができる薬物部分の例としては、Ｍｃｌ－１阻害剤、例えば、本明細書に記載および例示されるＭｃｌ－１阻害剤が挙げられる。
好適な薬物部分は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）の化合物、もしくはその鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または薬学的に許容される酸もしくは塩基との付加塩を含み得る。加えて、薬物部分は、本明細書に記載されるＭｃｌ－１阻害剤（Ｄ）の任意の化合物を含み得る。
本明細書で使用される場合、「アトロプ異性体」は、立体ひずみまたは他の寄与因子に起因するエネルギー差が、個々の配座異性体の単離を可能にするほど十分に高い、回転に対する障壁を生み出す場合における、単結合の周りの束縛回転を理由に生じる立体異性体である（Bringmann et al. Angew. Chem. Int. Ed. 2005, 44, 5384-5427）。例えば、本発明による式（ＩＩ）の化合物について、アトロプ異性体は、以下の通りであり得る：
Figure 2022532918000218
例えば、好ましいアトロプ異性体は、（５ａＳ）とも称される（５Ｓａ）であり得る。
本開示の薬物部分は、国際特許出願公開第ＷＯ２０１５／０９７１２３号；第ＷＯ２０１６／２０７２１６号；第ＷＯ２０１６／２０７２１７号；第ＷＯ２０１６／２０７２２５号；第ＷＯ２０１６／２０７２２６号；第ＷＯ２０１７／１２５２２４号；第ＷＯ２０１９／０３５８９９号；第ＷＯ２０１９／０３５９１１号；第ＷＯ２０１９／０３５９１４号；第ＷＯ２０１９／０３５９２７号；第ＷＯ２０１６／０３３４８６号；第ＷＯ２０１７／１４７４１０号；第ＷＯ２０１８／１８３４１８号；および第ＷＯ２０１７／１８２６２５号、ならびに米国特許出願公開第２０１９／００５５２６４号（これらのそれぞれはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている化合物のうちのいずれか１つであってよい。
一部の実施形態では、本開示の薬物部分は、式（Ｉ）：
Figure 2022532918000219
 （式中、
環Ｄ０は、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、
環Ｅ０は、フリル、チエニルまたはピロリル環であり、
Ｘ０１、Ｘ０３、Ｘ０４およびＸ０５は互いに独立して、炭素原子または窒素原子であり、
Ｘ０２は、Ｃ－Ｒ０２６基または窒素原子であり、
Figure 2022532918000220
 は、環が芳香族であることを意味し、
Ｙ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０３基であり、
Ｚ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０４基であり、
Ｒ０１は、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－Ｃｙ０８、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
Ｒ０２、Ｒ０３、Ｒ０４およびＲ０５は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、
－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０３１、
－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または
－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０１、Ｒ０２）、（Ｒ０２、Ｒ０３）、（Ｒ０３、Ｒ０４）または（Ｒ０４、Ｒ０５）は、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、ハロゲン、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１またはオキソから選択される１個もしくは２個の基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０６およびＲ０７は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、
－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、
－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、
－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０６、Ｒ０７）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１またはオキソで必要に応じて置換されており、
Ｗ０は、－ＣＨ２－基、－ＮＨ－基または酸素原子であり、
Ｒ０８は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、－ＣＨＲ０ａＲ０ｂ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０９は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、－Ｃｙ０２、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－Ｃｙ０３、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｏ－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０３、ハロゲン原子、シアノ基、－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１４または－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１４Ｒ０１４’であり、
Ｒ０１０は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、アリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、（Ｃ１～Ｃ６）シクロアルキルアルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキルまたは－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｏ－Ｃｙ０４であり、
あるいは対（Ｒ０９、Ｒ０１０）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、
Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、Ｎ原子は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基から選択される１個または２個の基で置換されてよく、ここで、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されており、
Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－Ｃｙ０６－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０７、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ０１１、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＯＲ０１１、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＯＲ０１１、－ＳＯ２－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１であり、
Ｒ０１３、Ｒ０１３’、Ｒ０１４およびＲ０１４’は互いに独立して、水素原子、または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０ａは、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０ｂは、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－Ｒ０ｃ基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０ｃＲ０ｃ’基または－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０ｃ）２基であり、
Ｒ０ｃおよびＲ０ｃ’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、シクロアルキル基、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシカルボニル（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０ｃ、Ｒ０ｃ’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員から構成される非芳香族環を形成し、これは、窒素原子に加えて、酸素および窒素から選択される１～３個のヘテロ原子を含んでよく、ここで、窒素は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０は互いに独立して、必要に応じて置換されたシクロアルキル基、必要に応じて置換されたヘテロシクロアルキル基、必要に応じて置換されたアリール基または必要に応じて置換されたヘテロアリール基であり、
Ｃｙ０９は
Figure 2022532918000221
 であり、
またはＣｙ０９は、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル；および－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’から選択される基で置換されているヘテロアリール基であり、
Ｒ０１５は、水素原子；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基；または－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基であり、
Ｒ０１６は、水素原子；ヒドロキシ基；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基；（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－Ｖ０－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２基；－Ｏ－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ０２０基；－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ０２０基；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０２２Ｒ０２３基；または－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基であり、
Ｒ０１７は、水素原子；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；－ＣＨ２－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２基；ヒドロキシ基；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基；－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基；またはアルドン酸であり、
Ｍ＋は、薬学的に許容される一価カチオンであり、
Ｕ０は、結合または酸素原子であり、
Ｖ０は、－（ＣＨ２）ｓ０－基または－Ｃ（Ｏ）－基であり、
Ｒ０１８は、水素原子または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０１９は、水素原子またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２０は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２１およびＲ０２１’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０２１、Ｒ０２１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０２２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－（ＣＨ２）ｐ０－ＮＲ０２４Ｒ０２４’基または－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基であり、
Ｒ０２３は、水素原子または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０２２、Ｒ０２３）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～１８個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～５個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロシクロアルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０２４およびＲ０２４’は互いに独立して、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
あるいは対（Ｒ０２４、Ｒ０２４’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員から構成される芳香族または非芳香族環を形成し、これは、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含んでよく、ここで、得られた環は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０２５は、水素原子、ヒドロキシ基またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２６は、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、またはシアノ基であり、
Ｒ０２７は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０２８は、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）（Ｏ－）基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）（ＯＲ０３０）基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０３０）（ＯＲ０３０’）基、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－基、－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－Ｏ－基、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０基、－Ｃｙ０１０、－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０２９基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０２９基または－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０２９Ｒ０２９’基であり、
Ｒ０２９およびＲ０２９’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基または線状もしくは分枝状アミノ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０３０およびＲ０３０’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０３１は
Figure 2022532918000222
 であり、ここで、アンモニウムイオンは必要に応じて、双性イオン型として存在するか、または一価のアニオン性対イオンを有し、
ｎ０は、０または１に等しい整数であり、
ｐ０は、０、１、２または３に等しい整数であり、
ｑ０は、１、２、３または４に等しい整数であり、
ｒ０およびｓ０は、独立して０または１に等しい整数であり、
ここで、最大で、Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、リンカーに共有結合されており、
ここで、原子の価数を、それに結合された１個または複数の置換基が超えない）
の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含み得る。
一部の実施形態では、本開示の薬物部分は、式（ＩＩ）：
Figure 2022532918000223
 （式中、
Ｚ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０４基であり、
Ｒ０１は、ハロゲン原子、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル基、ヒドロキシ基、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、－Ｃｙ０８、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’であり、
Ｒ０２、Ｒ０３およびＲ０４は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、
－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０３１、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または
－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０２、Ｒ０３）または（Ｒ０３、Ｒ０４）は、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、環は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１およびオキソから選択される基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０６およびＲ０７は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、
－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
あるいは対（Ｒ０６、Ｒ０７）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、得られた環は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１およびオキソから選択される基で必要に応じて置換されており、
Ｒ０８は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリール－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０９は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、－Ｃｙ０２、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－Ｃｙ０３、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｏ－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０３、ハロゲン原子、シアノ基、－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１４、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１４Ｒ０１４’であり、
Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、Ｎ原子は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、ここで、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されており、
Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－Ｃｙ０６－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０７、
－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＯＲ０１１、
－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＯＲ０１１、－ＳＯ２－Ｒ０１１、または－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１であり、
Ｒ０１３、Ｒ０１３’、Ｒ０１４およびＲ０１４’は互いに独立して、水素原子、または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７およびＣｙ０８は互いに独立して、必要に応じて置換されたシクロアルキル基、必要に応じて置換されたヘテロシクロアルキル基、必要に応じて置換されたアリール基または必要に応じて置換されたヘテロアリール基であり、
Ｃｙ０９は
Figure 2022532918000224
 であり、
ここで、Ｒ０１５、Ｒ０１６およびＲ０１７は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
Ｒ０３１は
Figure 2022532918000225
 であり、ここで、Ｒ０２７およびＲ０２８は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
ここで、最大で、Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、リンカーに共有結合されている）
の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含み得る。
一部の実施形態では、本開示の薬物部分は、式（ＩＩＩ）：
Figure 2022532918000226
 （式中、
Ｒ０１は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
Ｒ０３は、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’または
Figure 2022532918000227
 であり、
ここで、Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、Ｎ原子は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基から選択される１個または２個の基で置換されてよく、
ここで、Ｒ０２７は水素原子であり、Ｒ０２８は、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－基または－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基であり、
Ｒ０９は、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基または－Ｃｙ０２であり、
Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６または－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９であり、
Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０５およびＣｙ０６は互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
Ｃｙ０９は、
Figure 2022532918000228
 であり、
ｐ０、Ｒ０１５、Ｒ０１６およびＲ０１７は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
ここで、最大で、Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、リンカーに共有結合されている）
の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含み得る。
一部の実施形態では、Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０は互いに独立して、必要に応じて置換されたシクロアルキル基、必要に応じて置換されたヘテロシクロアルキル基、必要に応じて置換されたアリール基または必要に応じて置換されたヘテロアリール基であり、ここで、必要に応じた置換基は、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、必要に応じて置換された（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｓ－、ヒドロキシ、オキソ（もしくは適切な場合、Ｎ－オキシド）、ニトロ、シアノ、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０’、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０’、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０’Ｒ０’’、－ＮＲ０’Ｒ０’’、－（Ｃ＝ＮＲ０’）－ＯＲ０’’、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、トリフルオロメトキシ、またはハロゲンから選択され、ここで、Ｒ０’およびＲ０’’は、それぞれ独立して、水素原子または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、ここで、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個もしくは複数は、必要に応じて重水素化されている。
一部の実施形態では、薬物部分（Ｄ）は、
Figure 2022532918000229
Figure 2022532918000230
 もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む。
加えて、本開示の薬物部分は、以下：
Figure 2022532918000231
Figure 2022532918000232
 のうちのいずれか１つを含み得る。
一部の実施形態では、リンカー－薬物（または「リンカー－ペイロード」）部分 －（Ｌ－Ｄ）は、表Ａにおける化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含み得る。
薬物ロード
薬物ロードはｐで表され、本明細書において薬物対抗体比率（ＤＡＲ）とも称される。薬物ロードは、薬物部分抗体または抗原結合性断片あたり１から１６の範囲であってもよい。一部の実施形態では、ｐは１から１６の整数である。一部の実施形態では、ｐは、１から１６、１から１５、１から１４、１から１３、１から１２、１から１１、１から１０、１から９、１から８、１から７、１から６、１から５、１から４、１から３、または１から２の整数である。一部の実施形態では、ｐは、２から１０、２から９、２から８、２から７、２から６、２から５、２から４、または２から３の整数である。一部の実施形態では、ｐは１から１６の整数である。一部の実施形態では、ｐは１から８の整数である。一部の実施形態では、ｐは１から５の整数である。一部の実施形態では、ｐは２から４の整数である。一部の実施形態では、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、または８である。一部の実施形態では、ｐは２である。一部の実施形態では、ｐは４である。
薬物ロードは、抗体または抗原結合性断片における結合部位の数によって制限される場合がある。一部の実施形態では、ＡＤＣのリンカー部分（Ｌ）は、抗体または抗原結合性断片における１つまたは複数のアミノ酸残基の化学的活性基を介して抗体または抗原結合性断片に結合する。例えば、リンカーは、遊離アミノ、イミノ、ヒドロキシル、チオール、またはカルボキシル基を介して抗体または抗原結合性断片に（例えば、Ｎ－またはＣ－末端に、１つまたは複数のリシン残基のイプシロンアミノ基に、１つまたは複数のグルタミン酸またはアスパラギン酸残基の遊離カルボン酸基に、または１つまたは複数のシステイン残基のスルフヒドリル基に）結合してもよい。リンカーが結合する部位は、抗体または抗原結合性断片のアミノ酸配列における天然の残基であっても、例えば、ＤＮＡ組換え技術によって（例えば、システイン残基をアミノ酸配列に導入することによって）またはタンパク質生化学によって（例えば、還元、ｐＨ調整、または加水分解することによって）、抗体または抗原結合性断片に導入してもよい。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片にコンジュゲートすることができる薬物部分の数は、遊離システイン残基の数によって限定される。例えば、結合がシステインチオール基である場合、抗体は、たった１つまたはいくつかのシステインチオール基を有していても、リンカーが結合し得るたった１つまたはいくつかの十分な反応性のチオール基を有していてもよい。一般的に、抗体は、薬物部分に連結し得る多くの遊離および反応性システインチオール基を含有しない。実際に、抗体における大部分のシステインチオール残基は、鎖間または鎖内ジスルフィド結合のいずれかに関与する。その結果、一部の実施形態では、システインへのコンジュゲーションは、抗体の少なくとも部分的な還元を必要とする場合がある。リンカー－毒素が抗体に過剰に結合すると、ジスルフィド結合を形成するのに利用可能なシステイン残基が減少することによって抗体の安定性が損なわれる場合がある。その結果、最適な薬物：抗体比率は、ＡＤＣの効力を増加させ（１抗体あたりの結合された薬物部分の数を増加させることによって）、抗体または抗原結合性断片の安定性を損なわないはずである。一部の実施形態では、最適な比率は、２、４、６、または８であってもよい。一部の実施形態では、最適な比率は、２または４であってもよい。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、１つまたは複数の遊離システイン残基を生成するために、コンジュゲーションの前に還元条件に曝露されている。抗体は、一部の実施形態では、還元剤、例えば、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）またはトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）を用いて部分的または全体的な還元条件下で還元して、反応性システインチオール基を生成してもよい。不対のシステインは、限定されたモル当量のＴＣＥＰを用いて部分的な還元を介して生成してもよく、これは、軽鎖および重鎖（Ｈ－Ｌ対あたり１対）ならびにヒンジ領域における２つの重鎖（ヒトＩｇＧ１の場合Ｈ－Ｈ対あたり２対）を連結させる鎖間ジスルフィド結合を還元し、同時に鎖内ジスルフィド結合は完全なままにすることができる（Stefano et al. (2013) Methods Mol Biol. 1045:145-71）。実施形態では、抗体内のジスルフィド結合は、例えば還元および酸化電圧を交互に印加する作用電極を用いることによって電気化学的に還元される。このアプローチは、ジスルフィド結合還元の、分析デバイス（例えば、電気化学的検出デバイス、ＮＭＲ分光計、または質量分析計）または化学的分離デバイス（例えば、液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＰＬＣ）または電気泳動デバイス（例えば、米国特許出願公開第２０１４／００６９８２２号明細書を参照のこと））へのオンラインカップリングを可能にすることができる。一部の実施形態では、抗体は変性条件を受けて、アミノ酸残基、例えばシステインの反応性求核基を示す。
ＡＤＣの薬物ロードは、異なる方法で、例えば：（ｉ）抗体に対するモル過剰の薬物－リンカー中間体またはリンカー試薬を限定すること；（ｉｉ）コンジュゲーション反応時間または温度を限定すること；（ｉｉｉ）システインチオール改変に関する還元条件を部分的にするかまたは限定すること；および／または（ｉｖ）システイン残基の数および位置を改変して、リンカー－薬物結合の数および／または位置が制御されるように、抗体のアミノ酸配列を組換え技術によって遺伝子操作することによって制御してもよい。
一部の実施形態では、遊離システイン残基は、抗体または抗原結合性断片のアミノ酸配列に導入される。例えば、親抗体の１つまたは複数のアミノ酸がシステインアミノ酸で置き換えられたシステイン操作抗体を調製してもよい。いずれの形態の抗体も、そのように操作しても、すなわち突然変異させてもよい。例えば、親Ｆａｂ抗体断片を操作して、「ＴｈｉｏＦａｂ」と称されるシステイン操作Ｆａｂを形成してもよい。同様に、親モノクローナル抗体を操作して、「ＴｈｉｏＭａｂ」を形成してもよい。単一の部位を突然変異させると、ＴｈｉｏＦａｂにおいて単一の操作されたシステイン残基が得られ、一方単一の部位を突然変異させると、ＩｇＧ抗体の二量体特性に起因するＴｈｉｏＭａｂにおいて２つの操作されたシステイン残基が得られる。親ポリペプチドのアミノ酸配列バリアントをコードするＤＮＡは、当技術分野において既知のさまざまな方法によって調製することができる（例えば、国際公開第２００６／０３４４８８号パンフレットに記載の方法を参照のこと）。それらの方法としては、これらに限定されるものではないが、ポリペプチドをコードする初期に調製されたＤＮＡに部位特異的（またはオリゴヌクレオチド介在性）突然変異誘発、ＰＣＲ突然変異誘発、およびカセット突然変異誘発を行うことによる調製がある。組換え抗体のバリアントも、合成オリゴヌクレオチドを用いた制限断片操作によってまたはオーバーラップ伸長ＰＣＲによって構築してもよい。式（１）のＡＤＣとしては、これらに限定されるものではないが、１、２、３、または４個の操作されたシステインアミノ酸を有する抗体がある、（Lyon et al. (2012) Methods Enzymol. 502:123-38）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遊離システイン残基が、操作を使用していない抗体または抗原結合性断片においてすでに存在し、その場合、現存する遊離システイン残基を使用して、抗体または抗原結合性断片を薬物部分にコンジュゲートしてもよい。
抗体または抗原結合性断片の複数のコピーとリンカー部分とを含む反応混合物において、１つを超える求核基が、薬物－リンカー中間体とまたはリンカー部分試薬、続いて薬物部分試薬と反応する場合、その後得られた製品は、混合物において抗体または抗原結合性断片の各コピーに結合された１つまたは複数の薬物部分の分布を伴うＡＤＣ化合物の混合物であり得る。一部の実施形態では、コンジュゲーション反応から得られるＡＤＣの混合物中の薬物ロードは、抗体または抗原結合性断片あたり１から１６の結合薬物部分の範囲である。抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数（すなわち、平均薬物ロード、または平均ｐ）は、当技術分野において既知の任意の従来の方法によって、例えば、質量分析法（例えば、液体クロマトグラフィー－質量分析法（ＬＣ－ＭＳ））および／または高性能液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）によって計算してもよい。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は、液体クロマトグラフィー－質量分析法（ＬＣ－ＭＳ）によって判定される。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は、約１．５から約３．５、約２．５から約４．５、約３．５から約５．５、約４．５から約６．５、約５．５から約７．５、約６．５から約８．５、または約７．５から約９．５である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は、約２から約４、約３から約５、約４から約６、約５から約７、約６から約８、約７から約９、約２から約８、または約４から約８である。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は約２である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は、約１．５、約１．６、約１．７、約１．８、約１．９、約２、約２．１、約２．２、約２．３、約２．４、または約２．５である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は２である。
一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は約４である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は、約３．５、約３．６、約３．７、約３．８、約３．９、約４、約４．１、約４．２、約４．３、約４．４、または約４．５である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数は４である。
一部の実施形態では、「約」という用語は、抗体または抗原結合性断片あたりの平均薬物部分の数に関して使用される場合、プラスまたはマイナス２０％、１５％、１０％、５％、または１％を意味する。一実施形態では、「約」という用語は、特定の値よりも１０％多いかまたは少ない値の範囲を指す。別の実施形態では、「約」という用語は、特定の値よりも５％多いかまたは少ない値の範囲を指す。別の実施形態では、「約」という用語は、特定の値よりも１％多いかまたは少ない値の範囲を指す。
個々のＡＤＣ化合物または「種」は、質量分光法によって混合物中で同定し、例えば、ＵＰＬＣまたはＨＰＬＣ、例えば疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）によって分離してもよい。一部の実施形態では、単一のロード値を有する均質なまたはほぼ均質なＡＤＣ製品は、例えば、電気泳動またはクロマトグラフィーによってコンジュゲーション混合物から単離してもよい。
一部の実施形態では、高薬物ロード（例えば、ｐ＞１６）は、ある特定の抗体－薬物コンジュゲートの凝集、不溶性、毒性、または細胞透過性の損失をもたらす場合がある。高薬物ロードは、ある特定のＡＤＣの薬物動態（例えば、クリアランス）にも負の影響を与える場合がある。一部の実施形態では、低薬物ロード（例えば、ｐ＜２）は、標的発現細胞に対するある特定のＡＤＣの効力を低下させる場合がある。一部の実施形態では、本開示のＡＤＣに関する薬物ロードは、約２から約１６、約２から約１０、約２から約８；約２から約６；約２から約５；約３から約５；約２から約４；または約４から約８の範囲である。
一部の実施形態では、約２の薬物ロードおよび／または平均薬物ロードは、例えば、抗体または抗原結合性断片の鎖内ジスルフィドの部分的な還元を使用して達成され、有益な特性を提供する。一部の実施形態では、約４または約６または約８の薬物ロードおよび／または平均薬物ロードは、例えば、抗体または抗原結合性断片の鎖内ジスルフィドの部分的な還元を使用して達成され、有益な特性を提供する。一部の実施形態では、約２未満の薬物ロードおよび／または平均薬物ロードは、許容されない高レベルの非コンジュゲート抗体種をもたらし、これは標的抗原への結合に関してＡＤＣと競合する場合があり、および／または処置の有効性を低下させる場合がある。一部の実施形態では、約１６を超える薬物ロードおよび／または平均薬物ロードは、許容されない高レベルの製品不均質性および／またはＡＤＣ凝集をもたらす場合がある。約１６を超える薬物ロードおよび／または平均薬物ロードは、ＡＤＣの安定性に影響を与える場合もあり、これは、抗体または抗原結合性断片を安定化させるために必要とされる１つまたは複数の化学的結合の損失に起因する。
本開示は、記載されるＡＤＣを産生する方法を含む。簡潔には、ＡＤＣは、抗体または抗原結合性断片のままの抗体または抗原結合性断片と、薬物部分（例えば、Ｍｃｌ－１阻害剤）と、薬物部分および抗体または抗原結合性断片を連結するリンカーとを含む。一部の実施形態では、ＡＤＣは、薬物部分と抗体または抗原結合性断片とに共有結合するための反応性官能基を有するリンカーを使用して調製してもよい。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、リンカーまたは薬物－リンカー中間体と反応性である官能基を調製するために官能化される。例えば、一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片のシステインチオールは、リンカーまたは薬物－リンカー中間体の反応性官能基との結合を形成してＡＤＣを作製することができる。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、細菌トランスグルタミナーゼ（ＢＴＧ）を用いて調製され、これはシクロオクチンＢＣＮ（Ｎ－［（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノナ－４－イン－９－イルメチルオキシカルボニル］－１，８－ジアミノ－３，６－ジオキサオクタン）部分を含有するアミンを用いて特に官能化された反応性グルタミンである。一部の実施形態では、リンカーまたは薬物－リンカー中間体の、抗体または抗原結合性断片のＢＣＮ部分への部位特異的コンジュゲーションは、例えば、本明細書において記載され、例示されるように行われる。ＡＤＣの生成は、当業者に既知の技術によって達成することができる。
一部の実施形態では、ＡＤＣは、抗体または抗原結合性断片とリンカーおよび薬物部分（例えば、Ｍｃｌ－１阻害剤）とを連続的な様式で接触させ、その結果、最初に抗体または抗原結合性断片がリンカーに共有結合で連結され、次いで予め形成された抗体－リンカー中間体と薬物部分とが反応することによって産生される。抗体－リンカー中間体は、精製ステップを受けてから薬物部分を接触させてもさせなくてもよい。他の実施形態では、ＡＤＣは、抗体または抗原結合性断片と、リンカーと薬物部分とを反応させることによって予め形成されたリンカー－薬物化合物とを接触させることによって産生される。予め形成されたリンカー－薬物化合物は、精製ステップを受けてから抗体または抗原結合性断片と接触させてもさせなくてもよい。他の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、１つの反応混合物中でリンカーおよび薬物部分と接触させ、抗体または抗原結合性断片とリンカーとの間、およびリンカーと薬物部分との間の共有結合の同時形成を可能にする。ＡＤＣを産生するこの方法は、抗体または抗原結合性断片を抗体または抗原結合性断片と接触させてから、リンカーを反応混合物に添加する反応を含んでいてもよく、逆もまた同様である。一部の実施形態では、ＡＤＣは、抗体または抗原結合性断片と薬物部分、例えばＭｃｌ－１阻害剤に連結したリンカーとを、コンジュゲーションを可能にする条件下で反応させることによって産生される。
上述の方法に従って調製されたＡＤＣは、精製ステップを受けてもよい。精製ステップは、タンパク質を精製するための当技術分野において既知の任意の生化学的方法、またはこれらの方法の任意の組合せを伴っていてもよい。それらとしては、これらに限定されるものではないが、タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、任意の電荷または等電点ベースのクロマトグラフィー、混合様式のクロマトグラフィー、例えば、ＣＨＴ（セラミックヒドロキシアパタイト）、疎水性相互作用クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、透析、濾過、選択的沈殿、またはこれらの任意の組合せがある。
治療的使用および組成物
本明細書における開示は、障害、例えばがんに関する対象の処置において、本明細書において記載される組成物、例えば開示されるＡＤＣ化合物および組成物を使用する方法である。組成物、例えばＡＤＣは、単独で、または少なくとも１つの追加の不活性薬剤および／もしくは活性薬剤、例えば少なくとも１つの追加の治療剤と組み合わせて投与してもよく、任意の薬学的に許容される製剤、投薬量、および投薬レジメンにおいて投与してもよい。処置の有効性は、毒性ならびに有効性の指標に関して評価してもよく、それに従って調整される。有効性の測定としては、これらに限定されるものではないが、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで観察された細胞分裂停止および／もしくは細胞毒性効果、腫瘍体積の減少、腫瘍成長阻害、ならびに／または生存の延長がある。
ＡＤＣが細胞に対して細胞分裂停止および／または細胞毒性効果を与えるかどうかを判定する方法は既知である。例えば、ＡＤＣの細胞毒性または細胞分裂停止活性は、例えば、ＡＤＣの標的抗原を発現する哺乳動物細胞を細胞培養培地中で曝露させ；細胞を約６時間から約６日間の期間培養し；細胞生存率を測定すること（例えば、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）またはＭＴＴ細胞生存率アッセイを使用して）によって測定してもよい。細胞ベースのｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを使用して、生存率（増殖）、細胞毒性、およびＡＤＣのアポトーシスの誘導（カスパーゼ活性化）も測定してもよい。
細胞毒性を判定するために、壊死またはアポトーシス（プログラムされた細胞死）を測定してもよい。壊死は、形質膜の透過性の増加、細胞の膨潤、および形質膜の破裂を典型的には伴う。アポトーシスは、例えばＤＮＡ断片化を測定することによって定量化することができる。ＤＮＡ断片化を定量的にｉｎ ｖｉｔｒｏで判定するための市販の測光的方法が利用可能である。そのようなアッセイの例としては、ＴＵＮＥＬ（断片化されたＤＮＡにおける標識されたヌクレオチドの取り込みを検出する）およびＥＬＩＳＡベースのアッセイがあり、Biochemica (1999) 2:34-7 (Roche Molecular Biochemicals)において記載されている。
アポトーシスはまた、細胞における形態学的変化を測定することによって判定してもよい。例えば、壊死と同様に、形質膜の完全性の損失は、ある特定の染料（例えば、蛍光性染料、例えば、アクリジンオレンジまたは臭化エチジウム）の取込みを測定することによって判定してもよい。アポトーシス細胞の数を測定するための方法は、ＤｕｋｅおよびＣｏｈｅｎによって、Current Protocols in Immunology (Coligan et al., eds. (1992) pp. 3.17.1-3.17.16)において記載されている。細胞はまた、ＤＮＡ染料（例えば、アクリジンオレンジ、臭化エチジウム、またはヨウ化プロピジウム）で標識してもよく、クロマチン濃縮および核膜の内側に沿った辺縁趨向に関して観察された。アポトーシスはまた、一部の実施形態では、カスパーゼ活性に関するスクリーニングによって判定してもよい。一部の実施形態では、Ｃａｓｐａｓｅ－Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを使用して、カスパーゼ－３およびカスパーゼ－７の活性を測定してもよい。一部の実施形態では、アッセイは、カスパーゼ活性、ルシフェラーゼ活性、および細胞溶解に最適化された試薬において発光性カスパーゼ－３／７基質を提供する。一部の実施形態では、「添加－混合－測定」形式でＣａｓｐａｓｅ－Ｇｌｏ（登録商標）３／７試薬を添加すると、細胞溶解、続いて基質のカスパーゼ開裂およびルシフェラーゼによって生成される「グロータイプ」発光シグナルの生成が生じる場合がある。一部の実施形態では、発光は、存在するカスパーゼ活性の量に比例する場合があり、アポトーシスの指標としての役割を果たすことができる。アポトーシスを判定するために測定され得る他の形態学的変化としては、例えば、細胞質の濃縮、膜小疱形成の増加、および細胞の収縮がある。がん細胞に対するこれらの効果のいずれかを判定することで、ＡＤＣが癌の処置において有用であることが示される。
細胞生存率は、例えば染料、例えばニュートラルレッド、トリパンブルー、クリスタルバイオレット、またはＡＬＡＭＡＲ（商標）ブルーの細胞における取込みを判定することによって測定してもよい（例えば、Page et al. (1993) Intl J Oncology 3:473-6を参照のこと）。そのようなアッセイでは、細胞は、染料を含有する媒体中でインキュベートされ、洗浄され、染料の細胞取込みを反映する残存する染料が分光光度法で測定される。
細胞生存率はまた、例えば、代謝的に活性を示す細胞の指標であるＡＴＰを定量化することによって測定してもよい。一部の実施形態では、調製されたＡＤＣまたはＭｃｌ－１阻害剤化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ効力および／または細胞生存率は、本明細書において提供される例において記載されているように、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）細胞生存率アッセイを使用して評価してもよい。このアッセイでは、一部の実施形態では、単一の試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）試薬）を血清添加培地中で培養された細胞に直接添加される。試薬を添加すると、細胞溶解、および存在するＡＴＰの量に比例した発光シグナルの生成が生じる。ＡＴＰの量は、培養物中に存在する細胞の数に直接比例する。
細胞生存率はまた、例えば、テトラゾリウム塩の還元を測定することによって測定してもよい。一部の実施形態では、調製されたＡＤＣまたはＭｃｌ－１阻害剤化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ効力および／または細胞生存率は、本明細書において提供される例において記載されているように、ＭＴＴ細胞生存率アッセイを使用して評価してもよい。このアッセイでは、一部の実施形態では、黄色テトラゾリウムＭＴＴ（３－（４、５－ジメチルチアゾリル－２）－２，５－ジフェニルテトラゾリウム臭化物）は、代謝的に活性を示す細胞によって、一部はデヒドロゲナーゼ酵素の作用によって還元されて、還元等価物、例えばＮＡＤＨおよびＮＡＤＰＨを生成する。次いで、得られた細胞内パープルホルマザンを可溶化し、分光学的手段によって定量化してもよい。
ある特定の態様では、本開示は、Ｍｃｌ－１および／または１つまたは複数の上流のモジュレーターまたは下流のこれらの標的の発現および／または活性を攪乱することによって、がん細胞または組織を殺傷し、それらの成長を阻害またはモジュレートする方法を特徴付ける。方法は、Ｍｃｌ－１発現および／または活性の撹乱が治療上の利益を提供する任意の対象に使用してもよい。Ｍｃｌ－１の発現および／または活性を攪乱することから利益を得る場合がある対象としては、これらに限定されるものではないが、がん、例えば腫瘍または血液がんを有するかまたは有するリスクがあるものがある。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がん、または脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。
一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、ＢＣＭＡを発現する任意の細胞または組織、例えばＢＣＭＡ発現がん細胞または組織において投与してもよい。例示的な実施形態は、ＢＣＭＡ発現がん細胞または組織を殺傷する方法を含む。方法は、ＢＣＭＡを発現する任意の細胞または組織、例えば癌性細胞または転移性病変部で使用してもよい。ＢＣＭＡ発現がんの非限定的な例としては、多発性骨髄腫がある（Cho et al. (2018) Front Immunol. 9:1821）。ＢＣＭＡ発現細胞の非限定的な例としては、ＮＣＩ－Ｈ９２９多発性骨髄腫細胞、およびＢＣＭＡをコードする組換え核酸またはその一部を含む細胞がある。
一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、ＣＤ３３を発現する任意の細胞または組織、例えばＣＤ３３発現がん細胞または組織において投与してもよい。例示的な実施形態は、ＣＤ３３発現がん細胞または組織を殺傷する方法を含む。方法は、ＣＤ３３を発現する任意の細胞または組織、例えば癌性細胞または転移性病変部に使用してもよい。ＣＤ３３発現癌の非限定的な例としては、結腸直腸がん、膵臓がん、リンパ腫、および白血病（例えば、急性骨髄性白血病）がある（Human Protein Atlas; Walter (2014) Expert Opin Ther Targets 18(7):715-8）。ＣＤ３３発現細胞の非限定的な例としては、ＭＯＬＭ－１３白血病細胞、およびＣＤ３３をコードする組換え核酸またはその一部を含む細胞がある。
一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、ＰＣＡＤを発現する任意の細胞または組織、例えばＰＣＡＤ発現がん細胞または組織において投与してもよい。例示的な実施形態は、ＰＣＡＤ発現がん細胞または組織を殺傷する方法を含む。方法は、ＰＣＡＤを発現する任意の細胞または組織、例えば癌性細胞または転移性病変部で使用してもよい。ＰＣＡＤ発現癌の非限定的な例としては、乳がん、胃がん、子宮内膜がん、卵巣がん、膵臓がん、膀胱がん、前立腺がん、および黒色腫がある（Vieira and Paredes (2015) Mol Cancer 14:178）。
一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、ＨＥＲ２を発現する任意の細胞または組織、例えばＨＥＲ２発現がん細胞または組織において投与してもよい。例示的な実施形態は、ＨＥＲ２発現がん細胞または組織を殺傷する方法を含む。方法は、ＨＥＲ２を発現する任意の細胞または組織、例えば癌性細胞または転移性病変部で使用してもよい。ＨＥＲ２発現癌の非限定的な例としては、乳がん、胃がん、膀胱がん、尿路上皮細胞癌、食道がん、肺がん（例えば、肺腺癌）、子宮がん（例えば、子宮漿液性子宮内膜癌）、唾液管癌、子宮頸がん、子宮内膜がん、および卵巣がんがある（English et al. (2013) Mol Diagn Ther. 17:85-99）。ＨＥＲ２発現細胞の非限定的な例としては、ＨＣＣ１９５４およびＨＣＣ２２１８乳がん細胞、およびＨＥＲ２をコードする組換え核酸またはその一部を含む細胞がある。
例示的な方法は、本明細書において記載されるように、細胞とＡＤＣとを、有効量、すなわち細胞を殺傷するのに十分な量で接触させるステップを含む。方法は、培養物中の細胞に、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｓｉｔｕで使用してもよい。例えば、ＨＥＲ２を発現する細胞（例えば、腫瘍または転移性病変部の生検によって収集された細胞；確立されたがん細胞系からの細胞；または組換え細胞）は、培養培地中でｉｎ ｖｉｔｒｏで培養してもよく、接触させるステップは、ＡＤＣを培養培地に添加することにより影響を受け得る。方法は、特にＨＥＲ２を発現するがん細胞を含むＨＥＲ２を発現する細胞の殺傷をもたらすことになる。あるいは、ＡＤＣは、ｉｎ ｖｉｖｏで効果を有するように、任意の好適な投与経路（例えば、静脈内、皮下、または腫瘍組織と直接接触させること）によって対象に投与してもよい。このアプローチは、他の細胞表面抗原（例えば、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ）を標的とする抗体に関して使用してもよい。
開示されるＡＤＣ治療用組成物のｉｎ ｖｉｖｏ効果は、好適な動物モデルにおいて評価してもよい。例えば、異種がんモデルを使用してもよく、がん外植片または継代異種移植組織は、免疫不全動物、例えばヌードまたはＳＣＩＤマウスに導入される（Klein et al. (1997) Nature Med. 3:402-8）。有効性は、腫瘍形成、腫瘍の縮小または転移の阻害などを測定するアッセイを使用して予測してもよい。
メカニズムによる腫瘍死滅の促進、例えばアポトーシスを評価するｉｎ ｖｉｖｏアッセイも使用してもよい。一部の実施形態では、治療用組成物を用いて処置された担腫瘍マウスからの異種移植片を、アポトーシス病巣の存在に関して調べ、未処置の対照異種移植片担持マウスと比較してもよい。処置されたマウスの腫瘍において認められるアポトーシス病巣の程度によって、組成物の治療的有効性の適応が提供される。
障害、例えばがんを処置する方法が本明細書においてさらに提供される。本明細書において記載される組成物、例えば本明細書において開示されるＡＤＣは、治療目的のために非ヒト哺乳動物またはヒト対象に投与してもよい。治療的方法は、Ｍｃｌ－１阻害剤、例えばＡＤＣを含む治療有効量の組成物を、がんを有するかまたは有することが疑われる対象に投与することを含み、阻害剤は、抗原に結合するターゲッティング抗体に連結されており、その抗原は、（１）がん細胞上に発現されている、（２）結合にアクセス可能であり、および／または（３）非がん細胞と比較してがん細胞表面上に局在化されているかまたは主に発現されている。
例示的な実施形態は、がんを有するかまたは有することが疑われる対象を処置する方法であって、対象に本明細書において開示される治療有効量の組成物、例えば、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）を投与することを含む方法である。一部の実施形態では、がんは標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６、またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣体）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ－細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ－関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、フリズルド受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転移関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰＩ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰＩ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰＩ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２、またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８、またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤ、またはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がんは、腫瘍または血液がんである。一部の実施形態では、がんは、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がん、または脾臓がんである。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫または胃がんである。
別の例示的な実施形態は、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＢＣＭＡを発現する細胞に送達する方法であって、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＢＣＭＡエピトープに免疫特異的に結合する抗体にコンジュゲートし、細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応されるＢＣＭＡを発現する例示的ながん細胞としては、多発性骨髄腫細胞がある。
別の例示的な実施形態は、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＣＤ３３を発現する細胞に送達する方法であって、Ｍｃｌ－１阻害剤を、Ｄ３３エピトープに免疫特異的に結合する抗体にコンジュゲートし、細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応されるＣＤ３３を発現する例示的ながん細胞としては、白血病細胞がある。
別の例示的な実施形態は、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＰＣＡＤを発現する細胞に送達する方法であって、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＰＣＡＤエピトープに免疫特異的に結合する抗体にコンジュゲートし、細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応されるＰＣＡＤを発現する例示的ながん細胞としては、乳がんおよび胃がん細胞がある。
別の例示的な実施形態は、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＨＥＲ２を発現する細胞に送達する方法であって、Ｍｃｌ－１阻害剤を、ＨＥＲ２エピトープに免疫特異的に結合する抗体にコンジュゲートし、細胞をＡＤＣに曝露することを含む方法である。本開示のＡＤＣが適応されるＨＥＲ２を発現する例示的ながん細胞としては、乳がん細胞がある。
ある特定の態様では、本開示は、腫瘍（例えば、ＢＣＭＡ発現腫瘍、ＣＤ３３発現腫瘍、ＰＣＡＤ発現腫瘍、ＨＥＲ２発現腫瘍）の成長を減少させるかまたは阻害する方法であって、治療有効量のＡＤＣまたはＡＤＣを含む組成物を投与することを含む方法をさらに提供する。一部の実施形態では、処置は、患者の腫瘍の成長を減少させるかもしくは阻害し、転移性病変の数もしくはサイズを減少させ、腫瘍ロードを減少させ、原発性腫瘍ロードを減少させ、侵襲性を減少させ、生存期間を延長し、および／または生活の質を維持するかもしくは改善するのに十分である。一部の実施形態では、腫瘍は、単独で投与された場合のＡＤＣの抗体もしくは抗原結合性断片（例えば、抗ＢＣＭＡ抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＰＣＡＤ抗体、抗ＨＥＲ２抗体）での処置に対して耐性もしくは難治性であり、および／または腫瘍は、単独で投与された場合のＭｃｌ－１阻害剤薬物部分での処置に対して耐性もしくは難治性である。
例示的な実施形態は、対象における腫瘍の成長を減少させるかまたは阻害する方法であって、治療有効量のＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）を対象に投与することを含む方法である。一部の実施形態では、腫瘍は標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６、またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣体）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ－細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ－関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、フリズルド受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転移関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰＩ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２、またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８、またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤ、またはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、腫瘍は、乳がん、胃がん、膀胱がん、脳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、黒色腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がん、または脾臓がんである。一部の実施形態では、腫瘍は胃がんである。一部の実施形態では、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物の投与は、腫瘍の成長を、処置非存在下での成長と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％減少させるかまたは阻害する。
別の例示的な実施形態は、対象における腫瘍の成長を遅延または減速する方法であって、治療有効量のＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）を対象に投与することを含む方法である。一部の実施形態では、腫瘍は標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６、またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣体）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ－細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ－関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、フリズルド受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転移関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰＩ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２、またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８、またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤ、またはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、腫瘍は、乳がん、胃がん、膀胱がん、脳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、黒色腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がん、または脾臓がんである。一部の実施形態では、腫瘍は胃がんである。一部の実施形態では、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物の投与は、腫瘍の成長を、処置非存在下での成長と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％遅延または減速する。
ある特定の態様では、本開示は、がん細胞集団（例えば、ＢＣＭＡ発現がん細胞集団、ＣＤ３３発現がん細胞集団、ＰＣＡＤ発現がん細胞集団、ＨＥＲ２発現がん細胞集団）の拡大を低減または減速する方法であって、治療有効量のＡＤＣまたはＡＤＣを含む組成物を投与することを含む方法をさらに提供する。
例示的な実施形態は、対象におけるがん細胞集団の拡大を低減または減速する方法であって、治療有効量のＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）を対象に投与することを含む方法である。一部の実施形態では、がん細胞集団は標的抗原を発現する。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６、またはＧＰＮＭＢである。一部の実施形態では、標的抗原は、４－１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、アルファ－フェトプロテイン、アンジオポエチン２、ＡＳＬＧ６５９、ＴＣＬＩ、ＢＭＰＲＩＢ、ブレビカンＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ－１２５、ＣＡ－１２５（模倣体）、ＣＡ－ＩＸ（炭酸脱水酵素９）、ＣＣＲ４、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１５２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２１（Ｃ３ＤＲ）Ｉ）、ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム）、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ｇＥ受容体）、ＣＤ２８、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３７、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ７０、ＣＤ７２（Ｌｙｂ－２、Ｂ－細胞分化抗原ＣＤ７２）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ－関連抗原、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲＩ、ＣＲＧＦ、ＴＤＧＦ１）、ＣＴＬＡ－４、ＣＸＣＲ５、ＤＬＬ４、ＤＲ５、Ｅ１６（ＬＡＴＩ、ＳＬＣ７Ａ５）、ＥＧＦＬ７、ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５）、エピシアリン、ＥＲＢＢ３、ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体）、ＦＣＲＨＩ（Ｆｃ受容体様タンパク質Ｉ）、ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰＩ、ＳＰＡＰ ＩＢ、ＳＰＡＰ ＩＣ）、フィブロネクチンエクストラドメイン－Ｂ、フリズルド受容体、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＥＤＡ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＬＡ－ＤＯＢ、ＨＬＡ－ＤＲ、ヒト散乱因子受容体キナーゼ、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＩＬ－１３、ＩＬ２０Ｒ（ＺＣＹＴＯＲ７）、ＩＬ－６、ＩＬＧＦ２、ＩＬＦＲＩＲ、インテグリンｕ、ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転移関連２）、ルイス－Ｙ抗原、ＬＹ６４（ＲＰ１０５）、ＭＣＰ－Ｉ、ＭＤＰ（ＤＰＥＰＩ）、ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、メソテリン、巨核球、ＰＤ－Ｉ、ＰＤＣＤＩ、ＰＤＧＦ－Ｒ ｕ、前立腺特異的膜抗原、ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体）、ＰＳＣＡ ｈｌｇ、ＲＡＮＫＬ、ＲＯＮ、ＳＤＣＩ、Ｓｅｍａ Ｓｂ、ＳＴＥＡＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＰＣＡＮＡＰ Ｉ、ＳＴＡＭＰ Ｉ、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺がん関連遺伝子Ｉ、ＴＡＧ－７２、ＴＥＭＩ、テネイシンＣ、ＴＥＮＢ２、（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰＩ、ＴＲ）、ＴＧＦ－ＩＪ、ＴＲＡＩＬ－Ｅ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒｌ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ２、Ｔ１７Ｍ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＭ、メンバー４）、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＹＲＰＩ（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ－Ａ、ＥＧＦＲ－Ｉ、ＶＥＧＦＲ－２、またはビメンチンである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８、またはＣＤ７９ｂである。一部の実施形態では、標的抗原は、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤ、またはＨＥＲ２である。一部の実施形態では、標的抗原は、ＣＤ３８またはＣＤ４８である。一部の実施形態では、がん細胞集団は、腫瘍または血液がんに由来する。一部の実施形態では、がん細胞集団は、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がん、または脾臓がんに由来する。一部の実施形態では、がん細胞集団は、リンパ腫または胃がんに由来する。一部の実施形態では、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物の投与は、処置非存在下での集団と比較して、がん細胞集団を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％減少させる。一部の実施形態では、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物の投与は、処置非存在下での拡大と比較して、がん細胞集団の拡大を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％減速する。
がんを有するかまたは有することが疑われる対象が、開示されるＡＤＣおよび組成物での処置に対して応答することになるかどうか判定する方法も本明細書において提供される。例示的な実施形態は、がんを有するかまたは有することが疑われる対象が、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）での処置に対して応答することになるかどうかを、対象からの生物学的試料を用意すること；試料とＡＤＣとを接触させること；およびＡＤＣの試料中のがん細胞への結合を検出することによって判定する方法である。一部の実施形態では、試料は、組織生検試料、血液試料、または骨髄試料である。一部の実施形態では、方法は、対象からの生物学的試料を提供すること；試料とＡＤＣとを接触させること；および試料中のがん細胞死の１つまたは複数のマーカー（例えば、１つまたは複数のアポトーシスマーカーの発現の増加、培養物中のがん細胞集団の拡大の減少など）を検出することを含む。
開示されるＡＤＣおよび組成物の治療的使用が本明細書においてさらに提供される。例示的な実施形態は、がん（例えば、ＢＣＭＡ発現がん、ＣＤ３３発現がん、ＰＣＡＤ発現がん、ＨＥＲ２発現がん）を有するかまたは有することが疑われる対象の処置において使用するための、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）である。別の例示的な実施形態は、がん（例えば、ＢＣＭＡ発現がん、ＣＤ３３発現がん、ＰＣＡＤ発現がん、ＨＥＲ２発現がん）を有するかまたは有することが疑われる対象の処置における、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）の使用である。別の例示的な実施形態は、がん（例えば、ＢＣＭＡ発現がん、ＣＤ３３発現がん、ＰＣＡＤ発現がん、ＨＥＲ２発現がん）を有するかまたは有することが疑われる対象を処置するための医薬の製造方法における、ＡＤＣ、組成物、または医薬組成物（例えば、本明細書において開示される例示的なＡＤＣ、組成物、または医薬組成物のいずれか）の使用である。標的抗原（例えば、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２）を発現する癌を有する対象を同定するための方法は、当技術分野において既知であり、開示されるＡＤＣ化合物または組成物での処置に好適な患者を同定するために使用してもよい。
さらに、本開示のＡＤＣは、ＡＤＣが獣医用目的でまたはヒト疾患の動物モデルとして結合することができる抗原を発現する非ヒト哺乳動物に投与してもよい。後者に関して、そのような動物モデルは、開示されるＡＤＣの治療的有効性を評価する（例えば、投薬量および投与の時間経過を試験する）のに有用であり得る。
前述の方法の実施において使用される治療用組成物は、所望の送達方法に好適な薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に製剤化してもよい。例示的な実施形態は、本開示のＡＤＣと、薬学的に許容される担体、例えば選択される投与手段、例えば、静脈内投与に好適なものとを含む医薬組成物である。医薬組成物はまた、例えば、がんを処置または阻止するのに好適な１つまたは複数の追加の不活性薬剤および／または治療剤（例えば、標準ケア用薬剤など）を含んでいてもよい。医薬組成物は、１つまたは複数の担体、賦形剤、および／または安定化剤構成成分なども含んでいてもよい。そのような医薬組成物を製剤化する方法および好適な製剤は当技術分野において既知である（例えば、"Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Easton, PAを参照のこと）。
好適な担体としては、治療用組成物と組み合わせた場合、治療用組成物の抗腫瘍機能を保持し、患者の免疫系と一般的に非反応性である任意の材料がある。薬学的に許容される担体としては、生理学的に適合する任意のおよび全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌および抗真菌剤、等張化および吸収遅延剤などがある。薬学的に許容される担体の例としては、水、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール、メシル酸塩などのうちの１つまたは複数、ならびにこれらの組合せがある。多くの場合、等張化剤、例えば、糖、多価アルコール、例えばマンニトール、ソルビトール、または塩化ナトリウムが組成物中に含まれる。薬学的に許容される担体は、ＡＤＣの貯蔵期間または有効性を高める少量の補助物質、例えば、湿潤または乳化剤、防腐剤または緩衝液をさらに含んでいてもよい。
本開示の医薬組成物は、当技術分野において既知のさまざまな方法によって投与してもよい。投与経路および／または様式は、所望の結果に応じて変更してもよい。一部の実施形態では、治療用製剤は可溶化され、治療用組成物をがん部位に送達することができる任意の経路を介して投与される。潜在的に有効な投与経路としては、これらに限定されるものではないが、非経口（例えば、静脈内、皮下）、腹腔内、筋肉内、腫瘍内、皮内、器官内、同所（Orthotopic）などがある。一部の実施形態では、投与は、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内である。薬学的に許容される担体は、投与経路、例えば、静脈内または皮下投与（例えば、注射または注入による）に好適であるべきである。投与経路に応じて、活性化合物、すなわちＡＤＣおよび／または任意の追加の治療剤は、材料で被覆して、化合物を不活性化する場合がある酸および他の自然の条件の作用から化合物を保護してもよい。投与は全身性であっても局所であってもよい。
本明細書において開示される治療用組成物は、製造および貯蔵の条件下で無菌および安定であり得、さまざまな形態であってもよい。これらとしては、例えば、液体、半固体、および固体投薬形態、例えば液体溶液（例えば、注射可能なおよび注入可能な溶液）、分散液または懸濁液、錠剤、ピル剤、散剤、リポソーム剤、および坐剤がある。形態は、意図される投与様式および治療的適用に依存する。一部の実施形態では、開示されるＡＤＣは、非経口投与に好適な医薬組成物に取り込まれてもよい。注射用溶液は、フリントまたはアンバーバイアル、アンプル、もしくは予め充填されたシリンジ、または他の既知の送達または貯蔵デバイス中の、液体または凍結乾燥された投薬形態のいずれかから構成されていてもよい。一部の実施形態では、ＡＤＣまたは医薬組成物のうちの１つまたは複数は、密閉された容器中の乾燥無菌凍結乾燥粉末または水不含濃縮物として供給され、対象に投与するために適切な濃度に復元することができる（例えば、水または生理食塩水を用いて）。
典型的には、治療有効量または有効量の開示される組成物、例えば、開示されるＡＤＣが本開示の医薬組成物において用いられる。組成物、例えば、ＡＤＣを含むものは、当技術分野において既知の従来の方法によって薬学的に許容される投薬形態に製剤化してもよい。前述の方法を使用して癌を処置するための投薬量および投与プロトコールは、方法および標的のがんに伴って変化することになり、当技術分野において認められた多数の他の因子に一般的に依存することになる。
本明細書において開示される組成物に関する投薬レジメン、例えば、ＡＤＣを単独でまたは少なくとも１つの追加の不活性および／または活性治療剤と組み合わせて含むものが、最適な所望の応答（例えば、治療的応答）を提供するために調整されていてもよい。例えば、一方または両方の薬剤の単回ボーラスを一度に投与しても、いくつかの分割用量を所定の期間にわたって投与してもよいか、または一方または両方の薬剤の用量を、治療的状況の緊急性によって示されるにつれて比例的に増加させても減少させてもよい。一部の実施形態では、処置は、許容される投与経路を介したＡＤＣ調製物の単回ボーラスまたは繰り返し投与を伴う。一部の実施形態では、ＡＤＣは、毎日、毎週、毎月、またはこれらの間の任意の期間患者に投与される。任意の特定の対象に関しては、特定の投薬レジメンを、個体のニーズ、および処置を行う臨床医の専門的な判断に従って経時的に調整してもよい。非経口組成物は、投与を容易にし、投薬量を均一にするために投薬単位形態で製剤化してもよい。投薬単位形態は、本明細書で使用される場合、処置されることになる対象のための単位投薬量として適した物理的に個別の単位を指し；各単位は、必要とされる医薬担体と関連して所望の治療効果を生成するように計算された所定の量の活性化合物を含有する。
ＡＤＣおよび／または任意の追加の治療剤を含む組成物に関する投薬量値は、活性化合物の特有の特徴、および達成されることになる特定の治療効果に基づいて選択してもよい。医師または獣医師は、医薬組成物中に用いられるＡＤＣの投薬を、所望の治療効果を達成するのに必要とされるものよりも低いレベルで開始し、所望の効果が達成されるまで投薬量を次第に増加させてもよい。一般的に、本開示の組成物の有効用量は、がんの処置に関しては、投与手段、標的部位、患者の生理学的状況、患者がヒトであるか動物であるか、投与される他の医薬品、および処置が予防的であるか治療的であるかを含む多くの異なる因子に応じて変更してもよい。選択される投薬量レベルは、用いられる本開示の特定の組成物、またはそのエステル、塩、もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、用いられる特定の化合物の排泄速度、処置期間、用いられる特定の組成物との組合せにおいて使用される他の薬物、化合物および／または材料、処置される患者の年齢、性別、体重、状態、一般的な健康および過去の既往歴、ならびに類似の因子を含むさまざまな薬物動態因子にも依存する場合がある。処置投薬量は、安全性および有効性を最適化するために漸増させてもよい。
本明細書において提供される化合物の毒性および治療的有効性は、細胞培養物または動物モデルにおける標準的な医薬手順によって判定してもよい。例えば、ＬＤ５０、ＥＤ５０、ＥＣ５０、およびＩＣ５０を判定してもよく、毒性と治療効果との間の用量比率（ＬＤ５０／ＥＤ５０）を治療インデックスとして計算してもよい。ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏアッセイから得られたデータを、ヒトにおいて使用するための投薬量の範囲の推定または定式化において使用してもよい。例えば、本明細書において開示される組成物および方法は、異種がんモデル（例えば、ＮＣＩ－Ｈ９２９多発性骨髄腫マウスモデル）において最初に評価してもよい。
一部の実施形態では、ＡＤＣまたはＡＤＣを含む組成物は単一の機会で投与される。他の実施形態では、ＡＤＣまたはＡＤＣを含む組成物は複数の機会で投与される。単一の投薬間の間隔は、例えば、毎日、毎週、毎月、または毎年であってもよい。間隔は、薬剤の比較的一貫した血漿濃度を維持するために、患者において投与された薬剤（例えば、ＡＤＣ）の血液レベルの測定に基づいて不規則であってもよい。ＡＤＣまたはＡＤＣを含む組成物の投薬量および投与頻度も、処置が予防的か治療的かによって変化する場合がある。予防的適用では、比較的低投薬量を、長期間にわたって比較的低頻度の間隔で投与してもよい。一部の患者は、一生処置を受け続ける。治療的適用では、比較的短い間隔での比較的高い投薬量が、疾患の進行が低下または終了するまで、好ましくは患者が疾患の１つまたは複数の症状の部分的または完全な改善を示すまでときとして必要とされる。その後、患者は低い、例えば予防的レジメンを投与してもよい。
上記の治療的アプローチは、さまざまな追加の外科的、化学療法、または放射線治療法レジメンのうちのいずれか１つと組み合わせてもよい。一部の実施形態では、本明細書において開示されるＡＤＣまたは組成物は、１つまたは複数の追加の治療剤、例えば、１つまたは複数の化学療法剤、処置される特定の状態のための１つまたは複数の標準ケア薬剤と同時製剤化および／または同時投与される。
本明細書において記載される治療的および／または診断的適用における使用のためのキットも提供される。そのようなキットは、担体、パッケージ、または容器を含んでいてもよく、これらは、１つまたは複数の容器、例えば、バイアル、チューブなどを収容するために区画化されており、各容器は、本明細書において開示される方法において使用されることになる個別の要素のうちの１つを含んでいる。ラベルは、キット内のＡＤＣまたは組成物が、特定の治療法または非治療的適用、例えば、予後的、予防的、診断的、または実験室的な適用のために使用されることを示すために容器上にまたはそれと一緒に存在していてもよい。ラベルは、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏでの使用のいずれか、例えば、本明細書において記載されるものに対する指示も示す場合がある。指示およびまたは他の情報は、キットとともにまたはその上に含まれる挿入物またはラベルにも含まれていてもよい。ラベルは、容器上にあってもそれに付随していてもよい。ラベルは、ラベルを形成する文字、数、または他の文字が容器自体に成形またはエッチングされている場合、容器上にあってもよい。ラベルは、容器を同様に保持する貯蔵容器（receptacle）または輸送容器（carrier）内に存在する場合、例えば添付文書として容器に付随されていてもよい。ラベルは、キット内のＡＤＣまたは組成物が、本明細書において記載される状態、例えばがんを診断または処置するために使用されることを示していてもよい。
一部の実施形態では、キットは、ＡＤＣまたはＡＤＣを含む組成物を含む。一部の実施形態では、キットは、これらに限定されないが：使用のための取扱説明書；他の試薬、例えば、治療剤（例えば、標準ケア用薬剤）；投与のためのＡＤＣを調製するためのデバイス、容器、または他の材料；薬学的に許容される担体；およびＡＤＣを対象に投与するためのデバイス、容器、または他の材料を含む、１つまたは複数の追加の構成成分をさらに含む。使用のための取扱説明書は、例えば、がんを有するかまたは有することが疑われる患者において推奨される投薬量および／または投与様式を含む治療的適用のためのガイダンスを含んでいてもよい。一部の実施形態では、キットは、ＡＤＣと、がんの処置、阻止、および／または診断におけるＡＤＣの使用のための取扱説明書とを含む。
組合せ療法
一部の実施形態では、本開示は、処置する方法であって、本明細書において開示される抗体－薬物コンジュゲートを１つまたは複数追加の治療剤と組み合わせて投与する方法を提供する。例示的な組合せパートナーは本明細書において開示される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、ＰＤ－１阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ＭＥＤＩ０６８０（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、ＴＳＲ－０４２（Ｔｅｓａｒｏ）、ＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＢＧＢ－Ａ３１７（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＢＧＢ－１０８（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＩＮＣＳＨＲ１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）、またはＡＭＰ－２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）から選択される。一部の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤はＰＤＲ００１である。ＰＤＲ００１はスパルタリズマブとしても既知である。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＬＡＧ－３阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＬＡＧ－３阻害剤は、ＬＡＧ５２５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＭＳ－９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、またはＴＳＲ－０３３（Ｔｅｓａｒｏ）から選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、ＴＩＭ－３阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＴＩＭ－３阻害剤は、ＭＢＧ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＴＳＲ－０２２（Ｔｅｓａｒｏ）、ＬＹ－３３２１３６７（Ｅｌｉ Ｌｉｌｙ）、Ｓｙｍ２３（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）、ＢＧＢ－Ａ４２５（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＩＮＣＡＧＮ－２３９０（Ａｇｅｎｕｓ）、ＢＭＳ－９８６２５８（ＢＭＳ）、ＲＯ－７１２１６６１（Ｒｏｃｈｅ）、またはＬＹ－３４１５２４４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）である。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＰＤＬ１阻害剤を含む。一実施形態では、ＰＤＬ１阻害剤は、ＦＡＺ０５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、アテゾリズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、デュルバルマブ（Ａｓｔｒａ Ｚｅｎｅｃａ）、またはアベルマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）から選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＧＩＴＲアゴニストを含む。一部の実施形態では、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＷＮ３２３（ＮＶＳ）、ＢＭＳ－９８６１５６、ＭＫ－４１６６またはＭＫ－１２４８（Ｍｅｒｃｋ）、ＴＲＸ５１８（Ｌｅａｐ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＩＮＣＡＧＮ１８７６（Ｉｎｃｙｔｅ／Ａｇｅｎｕｓ）、ＡＭＧ ２２８（Ａｍｇｅｎ）またはＩＮＢＲＸ－１１０（Ｉｎｈｉｂｒｘ）から選択される。
一部の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＩＡＰ阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＩＡＰ阻害剤は、ＬＣＬ１６１または国際出願ＰＣＴ２００８／０１６８９３号明細書で開示される化合物を含む。
実施形態では、組合せは、ｍＴＯＲ阻害剤、例えばＲＡＤ００１（エベロリムスとしても既知である）を含む。
実施形態では、組合せは、ＨＤＡＣ阻害剤、例えばＬＢＨ５８９を含む。ＬＢＨ５８９はパノビノスタットとしても既知である。
実施形態では、組合せは、ＩＬ－１７阻害剤、例えばＣＪＭ１１２を含む。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはエストロゲン受容体（ＥＲ）アンタゴニストを含む。一部の実施形態では、エストロゲン受容体アンタゴニストはＰＤ－１阻害剤、ＣＤＫ４／６阻害剤、またはその両方と組み合わせて使用される。一部の実施形態では、組合せは、ＥＲ陽性（ＥＲ＋）がんまたは乳がん（例えば、ＥＲ＋乳がん）を処置するために使用される。
一部の実施形態では、エストロゲン受容体アンタゴニストは選択的エストロゲン受容体分解誘導薬（degrader）（ＳＥＲＤ）である。ＳＥＲＤはエストロゲン受容体アンタゴニストであり、これは受容体に結合し、例えば、受容体の分解または下方調節をもたらす（Boer K. et al., (2017) Therapeutic Advances in Medical Oncology 9(7): 465-479）。ＥＲは、例えば、ヒト生殖系の成長、発生および生理機能に重要なホルモン活性化転写因子である。ＥＲは、例えば、エストロゲンホルモン（１７ベータエストラジオール）によって活性化される。ＥＲの発現およびシグナル伝達は、癌（例えば乳がん）、例えば、ＥＲ陽性（ＥＲ＋）乳がんに関与する。一部の実施形態では、ＳＥＲＤは、ＬＳＺ１０２、フルベストラント、ブリラネストラント、またはエラセストラントから選択される。
一部の実施形態では、ＳＥＲＤは国際出願ＰＣＴ２０１４／１３０３１０号明細書で開示される化合物を含み、これはその全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。
一部の実施形態では、ＳＥＲＤはＬＳＺ１０２を含む。ＬＳＺ１０２は、化学名：（Ｅ）－３－（４－（（２－（２－（１，１－ジフルオロエチル）－４－フルオロフェニル）－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）オキシ）フェニル）アクリル酸を有する。一部の実施形態では、ＳＥＲＤは、フルベストラント（ＣＡＳ登録番号：１２９４５３－６１－８）、または国際出願ＰＣＴ２００１／０５１０５６号明細書で開示される化合物を含み、これはその全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。一部の実施形態では、ＳＥＲＤは、エラセストラント（ＣＡＳ登録番号：７２２５３３－５６－４）、または米国特許第７，６１２，１１４号明細書で開示される化合物を含み、それは、その全体が参照により組み込まれるものとする。エラセストラントは、ＲＡＤ１９０１、ＥＲ－３０６３２３または（６Ｒ）－６－｛２－［エチル（｛４－［２－（エチルアミノ）エチル］フェニル｝メチル）アミノ］－４－メトキシフェニル｝－５，６，７，８－テトラヒドロナフタレン－２－オールとしても既知である。エラセストラントは、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）およびＳＥＲＤの経口で生物学的に利用可能な非ステロイド性の組合せである。エラセストラントはまた、例えば、Garner F et al., (2015) Anticancer Drugs 26(9):948-56で開示されている。一部の実施形態では、ＳＥＲＤは、ブリラネストラント（ＣＡＳ登録番号：１３６５８８８－０６－７）、または国際出願ＰＣＴ２０１５／１３６０１７号明細書で開示される化合物であり、それはその全体が参照により組み込まれるものとする。
一部の実施形態では、ＳＥＲＤは、例えば、McDonell et al. (2015) Journal of Medicinal Chemistry 58(12) 4883-4887で開示されるような、ＲＵ ５８６６８、ＧＷ７６０４、ＡＺＤ９４９６、バゼドキシフェン、ピペンドキシフェン、アルゾキシフェン、ＯＰ－１０７４、またはアコルビフェンから選択される。
他の例示的なエストロゲン受容体アンタゴニストは、例えば、国際公開第２０１１／１５６５１８号パンフレット、国際公開第２０１１／１５９７６９号パンフレット、国際公開第２０１２／０３７４１０号パンフレット、国際公開第２０１２／０３７４１１号パンフレット、および米国特許第２０１２／００７１５３５号明細書で開示され、これら全てはその全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、サイクリン依存性キナーゼ４または６（ＣＤＫ４／６）阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、ＰＤ－１阻害剤、エストロゲン受容体（ＥＲ）アンタゴニスト、またはその両方と組み合わせて使用される。一部の実施形態では、組合せは、ＥＲ陽性（ＥＲ＋）がんまたは乳がん（例えば、ＥＲ＋乳がん）を処置するために使用される。一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、リボシクリブ、アベマシクリブ（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、またはパルボシクリブから選択される。
一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、リボシクリブ（ＣＡＳ登録番号：１２１１４４１－９８－３）、または米国特許第８，４１５，３５５号明細書および同第８，６８５，９８０号明細書で開示される化合物を含み、これらはその全体が参照により組み込まれるものとする。
一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、国際出願ＰＣＴ２０１０／０２０６７５号明細書および米国特許第８，４１５，３５５号明細書および同第８，６８５，９８０号明細書で開示される化合物を含み、これらはその全体が参照により組み込まれるものとする。
一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤はリボシクリブ（ＣＡＳ登録番号：１２１１４４１－９８－３）を含む。リボシクリブはＬＥＥ０１１、ＫＩＳＱＡＬＩ（登録商標）、または７－シクロペンチル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－２－（（５－（ピペラジン－１－イル）ピリジン－２－イル）アミノ）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－６－カルボキサミドとしても既知である。
一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤はアベマシクリブ（ＣＡＳ登録番号：１２３１９２９－９７－７）を含む。アベマシクリブは、ＬＹ８３５２１９またはＮ－［５－［（４－エチル－１－ピペラジニル）メチル］－２－ピリジニル］－５－フルオロ－４－［４－フルオロ－２－メチル－１－（１－メチルエチル）－１Ｈ－ベンズイミダゾール－６－イル］－２－ピリミジナミンとしても既知である。アベマシクリブは、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６に対する選択的なＣＤＫ阻害剤であり、例えば、Torres-Guzman R et al. (2017) Oncotarget 10.18632/oncotarget.17778で開示されている。
一部の実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤はパルボシクリブ（ＣＡＳ登録番号：５７１１９０－３０－２）を含む。パルボシクリブは、ＰＤ－０３３２９９１、ＩＢＲＡＮＣＥ（登録商標）または６－アセチル－８－シクロペンチル－５－メチル－２－｛［５－（１－ピペラジニル）－２－ピリジニル］アミノ｝ピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－７（８Ｈ）－オンとしても既知である。パルボシクリブはＣＤＫ４を１１ｎＭのＩＣ５０で阻害し、ＣＤＫ６を１６ｎＭのＩＣ５０で阻害し、例えば、Finn et al. (2009) Breast Cancer Research 11(5):R77で開示されている。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、ケモカイン（Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフ）受容体２（ＣＸＣＲ２）阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、６－クロロ－３－（（３，４－ジオキソ－２－（ペンタン－３－イルアミノ）シクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）－２－ヒドロキシ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンゼンスルホンアミド、ダニリキシン、レパリキシン、またはナバリキシンから選択される。
一部の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）阻害剤、例えば、モノクローナル抗体またはＭ－ＣＳＦに対するＦａｂ（例えばＭＣＳ１１０）、ＣＳＦ－１Ｒチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、４－（（２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イル）オキシ）－Ｎ－メチルピコリンアミドまたはＢＬＺ９４５）、受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＲＴＫ）（例えばペキシダルチニブ）、またはＣＳＦ－１Ｒターゲッティング抗体（例えば、エマクツズマブまたはＦＰＡ００８）から選択される。一部の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ阻害剤はＢＬＺ９４５である。一部の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤はＭＣＳ１１０である。他の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤はペキシダルチニブである。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはｃ－ＭＥＴ阻害剤を含む。ｃ－ＭＥＴは、多くの腫瘍細胞型において過剰発現するかまたは突然変異した受容体チロシンキナーゼであり、腫瘍細胞の増殖、生存、浸潤、転移、および腫瘍血管新生において鍵となる役割を果たす。ｃ－ＭＥＴの阻害は、ｃ－ＭＥＴタンパク質を過剰発現するかまたは構造的に活性化されたｃ－ＭＥＴタンパク質を発現する腫瘍細胞における細胞死を誘導する場合がある。一部の実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤は、カプマチニブ（ＩＮＣ２８０）、ＪＮＪ－３８８７６０５、ＡＭＧ３３７、ＬＹ２８０１６５３、ＭＳＣ２１５６１１９Ｊ、クリゾチニブ、チバンチニブ、またはゴルバチニブから選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ－β ＴＧＦβ、ＴＧＦｂ、またはＴＧＦ－ベータとしても既知であり、本明細書において区別せずに使用される）阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＴＧＦ－β阻害剤は、フレソリムマブまたはＸＯＭＡ０８９から選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、アデノシンＡ２ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト（例えば、Ａ２ａＲ経路阻害剤、例えば、アデノシン阻害剤、例えば、Ａ２ａＲまたはＣＤ－７３阻害剤）を含む。一部の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＰＤ－１阻害剤と、ＣＸＣＲ２阻害剤、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＧＩＴＲアゴニスト、ｃ－ＭＥＴ阻害剤、またはＩＤＯ阻害剤のうちの１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または全て）とを組み合わせて使用される。一部の実施形態では、組合せは、膵臓がん、結腸直腸がん、胃がん、または黒色腫（例えば難治性黒色腫）を処置するために使用される。一部の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＰＢＦ５０９（ＮＩＲ１７８）（Ｐａｌｏｂｉｏｆａｒｍａ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＣＰＩ４４４／Ｖ８１４４４（Ｃｏｒｖｕｓ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＡＺＤ４６３５／ＨＴＬ－１０７１（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／Ｈｅｐｔａｒｅｓ）、ビパデナント（Ｒｅｄｏｘ／Ｊｕｎｏ）、ＧＢＶ－２０３４（Ｇｌｏｂａｖｉｒ）、ＡＢ９２８（Ａｒｃｕｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、テオフィリン、イストラデフィリン（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ）、トザデナント／ＳＹＮ－１１５（Ａｃｏｒｄａ）、ＫＷ－６３５６（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ）、ＳＴ－４２０６（Ｌｅａｄｉａｎｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、またはプレラデナント／ＳＣＨ ４２０８１４（Ｍｅｒｃｋ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）から選択される。理論に束縛されることを望むものではないが、一部の実施形態では、Ａ２ａＲの阻害はＩＬ－１ｂの上方調節につながると考えられる。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）および／またはトリプトファン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＴＤＯ）の阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＩＤＯ阻害剤は、ＰＤ－１阻害剤および、ＴＧＦ－β阻害剤、Ａ２ａＲアンタゴニスト、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤、ｃ－ＭＥＴ阻害剤、またはＧＩＴＲアゴニストのうちの１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、または全て）と組み合わせて使用される。一部の実施形態では、組合せは、膵臓がん、結腸直腸がん、胃がん、または黒色腫（例えば難治性黒色腫）を処置するために使用される。一部の実施形態では、ＩＤＯ阻害剤は、（４Ｅ）－４－［（３－クロロ－４－フルオロアニリノ）－ニトロソメチリデン］－１，２，５－オキサジアゾール－３－アミン（エパカドスタットまたはＩＮＣＢ２４３６０としても既知である）、インドキシモド（ＮＬＧ８１８９）、（１－メチル－Ｄ－トリプトファン）、α－シクロヘキシル－５Ｈ－イミダゾ［５，１－ａ］イソインドール－５－エタノール（ＮＬＧ９１９としても既知である）、インドキシモド、ＢＭＳ－９８６２０５（以前のＦ００１２８７）から選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、ガレクチン、例えば、ガレクチン－１またはガレクチン－３の阻害剤を含む。一部の実施形態では、組合せは、ガレクチン－１阻害剤およびガレクチン－３阻害剤を含む。一部の実施形態では、組合せは、ガレクチン－１とガレクチン－３の両方を標的とする二重特異性阻害剤（例えば二特異性抗体分子）を含む。一部の実施形態では、ガレクチン阻害剤は、本明細書において記載される１つまたは複数の治療剤と組み合わせて使用される。一部の実施形態では、ガレクチン阻害剤は、抗ガレクチン抗体分子、ＧＲ－ＭＤ－０２（Ｇａｌｅｃｔｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ガレクチン－３Ｃ（Ｍａｎｄａｌ Ｍｅｄ）、Ａｎｇｉｎｅｘ、またはＯＴＸ－００８（ＯｎｃｏＥｔｈｉｘ、Ｍｅｒｃｋ）から選択される。
一部の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＭＥＫ阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、トラメチニブ、セルメチニブ、ＡＳ７０３０２６、ＢＩＸ０２１８９、ＢＩＸ０２１８８、ＣＩ－１０４０、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ９８０５９、Ｕ０１２６、ＸＬ－５１８、Ｇ－３８９６３、またはＧ０２４４３７１４から選択される。一部の実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はトラメチニブである。
一実施形態では、本明細書において記載される組合せはインターロイキン－１ベータ（ＩＬ－１β）阻害剤を含む。一部の実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤は、カナキヌマブ、ゲボキズマブ、Ａｎａｋｉｎｒａ、またはＲｉｌｏｎａｃｅｐｔから選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体を含む。一部の実施形態では、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体は、ＮＩＺ９８５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＴＬ－８０３（Ａｌｔｏｒ）またはＣＹＰ０１５０（Ｃｙｔｕｎｅ）から選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、マウスダブルミニッツ２相同体（ＭＤＭ２）阻害剤を含む。ＭＤＭ２のヒト相同体はＨＤＭ２としても既知である。一部の実施形態では、本明細書において記載されるＭＤＭ２阻害剤はＨＤＭ２阻害剤としても既知である。一部の実施形態では、ＭＤＭ２阻害剤は、ＨＤＭ２０１またはＣＧＭ０９７から選択される。
実施形態では、ＭＤＭ２阻害剤は、障害、例えば、本明細書において記載される障害を処置するための、（Ｓ）－１－（４－クロロフェニル）－７－イソプロポキシ－６－メトキシ－２－（４－（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）－４－（４－メチル－３－オキソピペラジン－１－イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）－１，２－ジヒドロイソキノリン－３（４Ｈ）－オン（ＣＧＭ０９７としても既知である）または国際公開第２０１１／０７６７８６号パンフレットで開示される化合物を含む。一実施形態では、本明細書において開示される治療剤はＣＧＭ０９７と組み合わせて使用される。
一部の実施形態では、本明細書において記載される組合せはメチル化阻害剤（ＨＭＡ）を含む。一部の実施形態では、ＨＭＡは、デシタビンまたはアザシチジンから選択される。
ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せは、Ｂｃｌ２ファミリーの生存促進タンパク質のいずれにも作用する阻害剤を含む。ある特定の実施形態では、本明細書において記載される組合せはＢｃｌ－２阻害剤を含む。一部の実施形態では、Ｂｃｌ－２阻害剤はベネトクラックス
Figure 2022532918000233
 である。
一実施形態では、Ｂｃｌ－２阻害剤は、国際公開第２０１３／１１０８９０号パンフレットおよび国際公開第２０１５／０１１４００号パンフレットに記載されている化合物から選択される。一部の実施形態では、Ｂｃｌ－２阻害剤は、ナビトクラックス（ＡＢＴ－２６３）、ＡＢＴ－７３７、ＢＰ１００２、ＳＰＣ２９９６、ＡＰＧ－１２５２、メシル酸オバトクラクス（ＧＸ１５－０７０ＭＳ）、ＰＮＴ２２５８、Ｚｎ－ｄ５、ＢＧＢ－１１４１７、またはオブリメルセン（Ｇ３１３９）を含む。一部の実施形態では、Ｂｃｌ－２阻害剤は、Ｎ－（４－ヒドロキシフェニル）－３－［６－［（３Ｓ）－３－（モルホリノメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－イソキノリン－２－カルボニル］－１，３－ベンゾジオキソール－５－イル］－Ｎ－フェニル－５，６，７，８－テトラヒドロインドリジン－１－カルボキサミド、化合物Ａ１：
Figure 2022532918000234
 である。
一部の実施形態では、Ｂｃｌ－２阻害剤は、（Ｓ）－５－（５－クロロ－２－（３－（モルホリノメチル）－１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－２－カルボニル）フェニル）－Ｎ－（５－シアノ－１，２－ジメチル－１Ｈ－ピロール－３－イル）－Ｎ－（４－ヒドロキシフェニル）－１，２－ジメチル－１Ｈ－ピロール－３－カルボキサミド）、化合物Ａ２：
Figure 2022532918000235
 である。
一実施形態では、本明細書において開示される抗体－薬物コンジュゲートまたは組合せは、ｉｎ ｖｉｖｏでのがんの処置に好適である。例えば、組合せは、癌性腫瘍の成長を阻害するために使用してもよい。組合せはまた、標準的なケアと処置（例えば、癌または感染性障害のための）、ワクチン（例えば、治療的がんワクチン）、細胞療法、放射線療法、外科手術、または本明細書における障害を処置するための任意の他の治療剤またはモダリティのうちの１つまたは複数と組み合わせて使用してもよい。例えば、免疫の抗原特異的強化を達成するために、組合せを、目的の抗原とともに投与してもよい。本明細書において開示される組合せは、順番または同時のいずれかで投与してもよい。
追加の実施形態
本開示は、リンカー－薬物基、抗体－薬物コンジュゲート、リンカー基、およびコンジュゲーションの方法に対する以下の追加の実施形態を提供する。
リンカー－薬物基
一部の実施形態では、本発明のリンカー－薬物基は、式（Ａ’）：
Figure 2022532918000236
 （式中、
Ｒ１は反応基であり、
Ｌ１は架橋スペーサーであり、
Ｌｐは二価ペプチドスペーサーであり、
Ｇ－Ｌ２－Ａは自壊性スペーサーであり、
Ｒ２は親水性部分であり、
Ｌ２は、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000237
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３はスペーサー部分であり、
Ｄは、例えば本明細書に開示される抗体薬物コンジュゲートまたはイムノコンジュゲートから放出される場合のＭＣｌ－１タンパク質の活性を阻害することが可能である薬物部分である）
の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩であり得る。
本発明のリンカー－薬物基のある特定の態様および例は、以下の列挙された実施形態のリストにおいて示される。各実施形態で特定される特徴が、本発明のさらなる実施形態を提供する他の特異的な特徴と組み合わせることができることは認識されよう。
実施形態１．
Ｒ１が反応基であり、
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ｇ－Ｌ２－Ａが自壊性スペーサーであり、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ｌ２が、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000238
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分であり、
Ｄが、本明細書に定義される薬物部分、例えばＭＣｌ－１阻害剤である、
式（Ａ’）の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２．
Ｒ１が反応基であり、
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Figure 2022532918000239
 基が、
Figure 2022532918000240
 から選択され、ここで、
Figure 2022532918000241
 の＊は、Ｄとの（例えば薬物部分のＮまたはＯとの）結合点を示し、
Figure 2022532918000242
 の＊＊＊は、Ｌｐとの結合点を示し、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ｌ２が、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000243
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分であり、
Ｄが、本明細書に定義される薬物部分、例えばＭＣｌ－１阻害剤である、
式（Ａ’）の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態３．式（Ｂ’）：
Figure 2022532918000244
 （式中、
Ｒ１は反応基であり、
Ｌ１は架橋スペーサーであり、
Ｌｐは２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ｒ２は親水性部分であり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000245
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３はスペーサー部分であり、
Ｄは、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続している）
の構造を有する、式（Ａ’）の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態４．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000246
 、－ＯＮＨ２、－ＮＨ２、
Figure 2022532918000247
 、－Ｎ３、
Figure 2022532918000248
 、－ＳＨ、－ＳＲ３、－ＳＳＲ４、－Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｉ、
Figure 2022532918000249
 、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、
Figure 2022532918000250
Figure 2022532918000251
 であり、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊；または
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、
Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000252
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
各Ｒ３が、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
Ｒ４が、２－ピリジルまたは４－ピリジルであり、
各Ｒ５が、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌ、および－ＯＨから独立して選択され、
各Ｒ６が、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌ、－ＮＨ２、－ＯＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）２、－ＣＮ、－ＮＯ２、および－ＯＨから独立して選択され、
各Ｒ７が、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシ、および－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択され、
Ｘ１が、
Figure 2022532918000253
 であり、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、グリシン、バリン、シトルリン、リシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000254
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000255
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、
－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続している、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態５．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000256
 、－ＯＮＨ２、
Figure 2022532918000257
 であり、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000258
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000259
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000260
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000261
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続している、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態６．
Ｒ１が
Figure 2022532918000262
 であり、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000263
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000264
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000265
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000266
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続している、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から５のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態７．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000267
 であり、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000268
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000269
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗが、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000270
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続している、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態８．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000271
 であり、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000272
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000273
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000274
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続している、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態９．Ｒ１が、表８から選択される反応基である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１０．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000275
 、－ＯＮＨ２、－ＮＨ２、
Figure 2022532918000276
 、－Ｎ３、
Figure 2022532918000277
 、－ＳＨ、－ＳＲ３、－ＳＳＲ４、－Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｉ、
Figure 2022532918000278
 、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、
Figure 2022532918000279
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１１．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000280
 、－ＯＮＨ２、－ＮＨ２、
Figure 2022532918000281
 、－Ｎ３、
Figure 2022532918000282
 、－ＳＨ、－ＳＲ３、－ＳＳＲ４、－Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｉ、
Figure 2022532918000283
 、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、
Figure 2022532918000284
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１２．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000285
 、－ＯＮＨ２、
Figure 2022532918000286
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１３．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000287
 、－ＯＮＨ２、
Figure 2022532918000288
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１４．Ｒ１が、
Figure 2022532918000289
 である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１５．Ｒ１が、－ＯＮＨ２である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１６．Ｒ１が、
Figure 2022532918000290
 である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１７．
Ｒ１が、
Figure 2022532918000291
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１８．構造：
Figure 2022532918000292
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態１９．構造：
Figure 2022532918000293
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２０．構造：
Figure 2022532918000294
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２１．構造：
Figure 2022532918000295
 （式中、各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択される）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２２．構造：
Figure 2022532918000296
 （式中、各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択される）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２３．構造：
Figure 2022532918000297
 （式中、Ｘａは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－、または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは、独立して、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２４．構造：
Figure 2022532918000298
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２５．構造：
Figure 2022532918000299
 （式中、Ｘｂは－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－、または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは、独立して、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２６．構造：
Figure 2022532918000300
 を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２７．構造：
Figure 2022532918000301
 を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２８．構造：
Figure 2022532918000302
 を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態２９．構造：
Figure 2022532918000303
 を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態３０．構造：
Figure 2022532918000304
 を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態３１．表Ａにおける化合物の構造を有する、式（Ａ’）もしくは実施形態１から９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
実施形態３２．式（Ｃ’）
Figure 2022532918000305
 （式中、
Ｌ１は架橋スペーサーであり、
Ｌｐは二価ペプチドスペーサーであり、
Ｇ－Ｌ２－Ａは自壊性スペーサーであり、
Ｒ２は親水性部分であり、
Ｌ２は、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000306
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３はスペーサー部分である）
の構造を有する、式（Ａ’）のリンカー－薬物基のリンカー。
実施形態３３．
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ｇ－Ｌ２－Ａが自壊性スペーサーであり、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ｌ２が、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000307
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分である、
実施形態３２に記載のリンカー。
実施形態３４．
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Figure 2022532918000308
 基が、
Figure 2022532918000309
 から選択され、ここで、
Figure 2022532918000310
 の＊は、Ｄとの（例えば薬物部分のＮまたはＯとの）結合点を示し、
Figure 2022532918000311
 の＊＊＊は、Ｌｐとの結合点を示し、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ｌ２が、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000312
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分である、
実施形態３２または３３に記載のリンカー。
実施形態３５．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000313
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
各Ｒ３が、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
Ｘ１が、
Figure 2022532918000314
 であり、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、グリシン、バリン、シトルリン、リシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000315
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000316
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示す、
実施形態３２から３４のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態３６．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000317
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000318
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000319
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000320
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示す、
実施形態３２から３５のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態３７．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000321
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000322
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000323
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000324
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示す、
実施形態３２から３６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態３８．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000325
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000326
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000327
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示す、
実施形態３２から３７のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態３９．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000328
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000329
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000330
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示す、
実施形態３２から３８のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４０．式（Ｄ’）
Figure 2022532918000331
 （式中、
Ｌ１は架橋スペーサーであり、
Ｌｐは二価ペプチドスペーサーであり、
Ｒ２は親水性部分であり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000332
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３はスペーサー部分である）
の構造を有する構造を有する式（Ｃ’）のリンカー。
実施形態４１．
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000333
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分である、
実施形態４０に記載のリンカー。
実施形態４２．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000334
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
各Ｒ３が、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
Ｘ１が、
Figure 2022532918000335
 であり、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、グリシン、バリン、シトルリン、リシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000336
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000337
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示す、
実施形態４０または４１に記載のリンカー。
実施形態４３．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000338
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000339
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000340
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000341
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示す、
実施形態４０から４２のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４４．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000342
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000343
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000344
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000345
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示す、
実施形態４０から４３のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４５．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000346
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000347
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000348
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示す、
実施形態４０から４４のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４６．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000349
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000350
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000351
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示す、
実施形態４０から４５のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４７．構造：
Figure 2022532918000352
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４８．構造：
Figure 2022532918000353
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態４９．構造：
Figure 2022532918000354
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５０．構造：
Figure 2022532918000355
 （式中、各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択される）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５１．構造：
Figure 2022532918000356
 （式中、各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択される）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５２．構造：
Figure 2022532918000357
 （式中、Ｘａは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－、または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは、独立して、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５３．構造：
Figure 2022532918000358
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５４．構造：
Figure 2022532918000359
 （式中、Ｘｂは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－、または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは、独立して、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）
を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５５．構造：
Figure 2022532918000360
 を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５６．構造：
Figure 2022532918000361
 を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５７．構造：
Figure 2022532918000362
 を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５８．構造：
Figure 2022532918000363
 を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
実施形態５９．構造：
Figure 2022532918000364
 を有する、実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー。
例示目的のために、本明細書に示された一般的な反応スキームは、本発明の化合物ならびに重要な中間体を合成するための潜在的な経路をもたらす。個々の反応ステップのより詳細な記載については、以下の実施例の項を参照のこと。特異的な出発材料および試薬をスキームに示し、以下に考察するが、他の出発材料および試薬は、容易に置換されて、様々な誘導体および／または反応条件をもたらすことができる。加えて、以下に記載の方法により調製された化合物の多くは、当業者に周知の従来の化学反応を使用する本開示を考慮してさらに改変され得る。
例として、式（Ｂ’）の化合物の一般的な合成は、以下のスキーム１に示す。
Figure 2022532918000365
本発明の抗体薬物コンジュゲート
本発明は、本明細書でイムノコンジュゲートとも呼ばれる抗体薬物コンジュゲートをもたらすが、これは、１つまたは複数の親水性部分を含むリンカーを含む。
本発明の抗体薬物コンジュゲートは、式（Ｅ’）：
Figure 2022532918000366
 （式中、
Ａｂは抗体またはその断片であり、
Ｒ１００は連結基であり、
Ｌ１は架橋スペーサーであり、
Ｌｐは二価ペプチドスペーサーであり、
Ｇ－Ｌ２－Ａは自壊性スペーサーであり、
Ｒ２は親水性部分であり、
Ｌ２は、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000367
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊が、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３はスペーサー部分であり、
Ｄは、本明細書に定義される薬物部分、例えばＭＣｌ－１阻害剤であり、ＮまたはＯを含み得、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに結合することができ、
ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）。
の構造を有する。
本発明の抗体薬物コンジュゲートのある特定の態様および例は、以下のリストの列挙された実施形態のリストにおいて示される。各実施形態で特定される特徴が、本発明のさらなる実施形態を提供する他の特異的な特徴と組み合わせることができることは認識されよう。
実施形態６０．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が連結基であり、
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ｇ－Ｌ２－Ａが自壊性スペーサーであり、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ｌ２が、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000368
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分であり、
Ｄが、本明細書に定義される薬物部分であり、ここで、Ｄは、ＡからＤ（例えば薬物部分のＮまたはＯ）との直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｅ’）のイムノコンジュゲート。
実施形態６１．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が連結基であり、
Ｌ１が架橋スペーサーであり、
Ｌｐが２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Figure 2022532918000369
 基が、
Figure 2022532918000370
 から選択され、ここで、
Figure 2022532918000371
 の＊は、Ｄとの（例えば薬物部分のＮまたはＯとの）結合点を示し、
Figure 2022532918000372
 の＊＊＊は、Ｌｐとの結合点を示し、
Ｒ２が親水性部分であり、
Ｌ２が、結合、メチレン、ネオペンチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000373
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３がスペーサー部分であり、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｅ’）または実施形態６０のイムノコンジュゲート。
実施形態６２．式（Ｆ’）
Figure 2022532918000374
 （式中、
Ａｂは抗体またはその断片であり、
Ｒ１００は連結基であり、
Ｌ１は架橋スペーサーであり、
Ｌｐは２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ｒ２は親水性部分であり、
Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000375
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３はスペーサー部分であり、
Ｄは、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
の構造を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０もしくは６１に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６３．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000376
 、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＯＮ＝＊＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２－＊＊＊、－Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＮＨＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、
Figure 2022532918000377
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示し、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１００との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000378
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
各Ｒ３が、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
Ｒ４が、２－ピリジルまたは４－ピリジルであり、
各Ｒ５が、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌ、および－ＯＨから独立して選択され、
各Ｒ６が、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌ、－ＮＨ２、－ＯＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）２、－ＣＮ、－ＮＯ２、および－ＯＨから独立して選択され、
各Ｒ７が、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシ、および－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択され、
Ｘ１が、
Figure 2022532918000379
 であり、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、バリン、シトルリン、リシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーであり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000380
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000381
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｄ’）または実施形態６０から６２のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６４．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000382
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示し、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１００との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000383
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000384
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、
－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または
－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000385
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000386
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｄ’）または実施形態６０から６３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６５．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000387
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示し、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１００との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000388
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000389
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
Figure 2022532918000390
 、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊、もしくは－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊である、１～３個のＡで置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、およびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｅ’）または実施形態６０から６４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６６．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000391
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示し、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１００との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000392
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000393
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、
－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000394
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｅ’）または実施形態６０から６５のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６７．
Ａｂが抗体またはその断片であり、
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000395
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示し、
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、Ｒ１００との結合点を示し、
各ｍが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｎが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、および１０から独立して選択され、
各ｔが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択され、
Ｌｐが、
Figure 2022532918000396
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、Ｇの－ＮＨ－基との結合点を示し、
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000397
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、または－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000398
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分であり、
Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）＊であり、＊が、Ｄとの結合点を示し、
Ｄが、本明細書に定義され、ＮまたはＯを含む薬物部分であり、ここで、Ｄは、薬物部分のＡからＮまたはＯとの直接結合を介してＡに接続しており、
ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である、
式（Ｅ’）または実施形態６０から６６のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６８．
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000399
 －Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＯＮ＝＊＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２－＊＊＊、－Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、－ＮＨＣＨ２ＣＨ２－＊＊＊、
Figure 2022532918000400
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示す、
式（Ｅ’）または実施形態６０から６３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態６９．
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000401
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示す、
式（Ｅ’）または実施形態６０から６３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７０．
Ｒ１００が、
Figure 2022532918000402
 であり、Ｒ１００の＊＊＊が、Ａｂとの結合点を示す、
式（Ｅ’）または実施形態６０から６３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７１．構造：
Figure 2022532918000403
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７２．構造：
Figure 2022532918000404
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７３．構造：
Figure 2022532918000405
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７４．構造：
Figure 2022532918000406
 （式中、各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択され、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７５．構造：
Figure 2022532918000407
 （式中、各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択され、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７６．構造：
Figure 2022532918000408
 （式中、Ｘａは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－、または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは、独立して、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７７．構造：
Figure 2022532918000409
 （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７８．構造：
Figure 2022532918000410
 （式中、Ｘｂは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－、または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは、独立して、Ｈ、－ＣＨ３、または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態７９．構造：
Figure 2022532918000411
 （式中、ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８０．構造：
Figure 2022532918000412
 （式中、ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８１．構造：
Figure 2022532918000413
 （式中、ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８２．構造：
Figure 2022532918000414
 （式中、ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８３．構造：
Figure 2022532918000415
 （式中、ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、または１６である）
を有する、式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
本発明のリンカー－薬物基、リンカー、および抗体薬物コンジュゲートのある特定の態様および例は、以下の追加の列挙された実施形態のリストにおいて示される。各実施形態で特定される特徴が、本発明のさらなる実施形態を提供する他の特異的な特徴と組み合わせることができることは認識されよう。
実施形態８４．
Ｇが、
Figure 2022532918000416
 であり、Ｇの＊が、Ｌ２との結合点を示し、Ｇの＊＊が、Ｌ３との結合点を示し、Ｇの＊＊＊が、Ｌｐとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１もしくは２に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から３９のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０もしくは６１に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８５．
Ｇが、
Figure 2022532918000417
 であり、Ｇの＊が、Ｌ２との結合点を示し、Ｇの＊＊が、Ｌ３との結合点を示し、Ｇの＊＊＊が、Ｌｐとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１もしくは２に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から３９のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０もしくは６１に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８６．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８７．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８８．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態８９．
Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊、または＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態９０．Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態９１．Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態９２．Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態９３．Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊であり、Ｌ１の＊が、Ｌｐとの結合点を示し、Ｌ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１との結合点を示す、またはＬ１の＊＊が、存在する場合、Ｒ１００との結合点を示す、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）または実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）または実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態９４．Ｌｐが、酵素により切断可能な二価ペプチドスペーサーである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９３のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態９５．Ｌｐが、グリシン、バリン、シトルリン、リシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから選択されるアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９４のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態９６．Ｌｐが、２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態９７．Ｌｐが、各々がグリシン、バリン、シトルリン、リシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、アラニン、ロイシン、トリプトファン、およびチロシンから独立して選択される２～４個のアミノ酸残基を含む二価ペプチドスペーサーである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９６のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態９８．
Ｌｐが、
Figure 2022532918000418
 から選択される二価ペプチドスペーサーであり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、式（Ｂ’）の－ＮＨ－基との結合点を示す、またはＬｐの＊＊が、式（Ａ’）のＧとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態９９．
Ｌｐが、
Figure 2022532918000419
 であり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、式（Ｂ’）の－ＮＨ－基との結合点を示す、またはＬｐの＊＊が、式（Ａ’）のＧとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９８のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１００．
Ｌｐが、
Figure 2022532918000420
 であり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、式（Ｂ’）の－ＮＨ－基との結合点を示す、またはＬｐの＊＊が、式（Ａ’）のＧとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９８のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０１．
Ｌｐが、
Figure 2022532918000421
 であり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、式（Ｂ’）の－ＮＨ－基との結合点を示す、またはＬｐの＊＊が、式（Ａ’）のＧとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９８のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０２．
Ｌｐが、
Figure 2022532918000422
 であり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、式（Ｂ’）の－ＮＨ－基との結合点を示す、またはＬｐの＊＊が、式（Ａ’）のＧとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９８のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０３．
Ｌｐが、
Figure 2022532918000423
 であり、Ｌｐの＊が、Ｌ１との結合点を示し、Ｌｐの＊＊が、式（Ｂ’）の－ＮＨ－基との結合点を示す、またはＬｐの＊＊が、式（Ａ’）のＧとの結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から９８のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０４．Ｌ２が、結合、メチレン、またはＣ２～Ｃ３アルケニレンである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０３のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０５．Ｌ２が、結合、またはメチレンである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０４のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０６．Ｌ２が、結合である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０７．Ｌ２が、メチレンである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０８．
Ａが、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から８３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１０９．Ａが、結合または－ＯＣ（＝Ｏ）である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から８３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１０．Ａが、結合である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から８３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０９のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１１．Ａが、－ＯＣ（＝Ｏ）である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から８３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０９のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１２．
Ａが、
Figure 2022532918000424
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から８３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１３．
Ａが、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－、または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－であり、ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から８３のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１０７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１４．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000425
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、
－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１３のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１５．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000426
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、
－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合であり、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１４のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１６．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000427
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、トリアゾリルであり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１７．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000428
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、
－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－＊＊、
－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－＊＊、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－＊＊、－ＮＨＳ（Ｏ）２－＊＊、
－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１８．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000429
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合、トリアゾリル、または＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１１９．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000430
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、結合であり、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２０．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000431
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、トリアゾリルであり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２１．
Ｌ３が、構造
Figure 2022532918000432
 を有するスペーサー部分であり、
ここで、
Ｗは、－ＣＨ２Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－＊＊、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－＊＊であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、またはＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、ここで、Ｗの＊＊は、Ｘとの結合点を示し、
Ｘは、＊＊＊－ＣＨ２－トリアゾリル－＊であり、ここで、Ｘの＊＊＊は、Ｗとの結合点を示し、Ｘの＊は、Ｒ２との結合点を示し、
Ｌ３の＊が、Ｒ２との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１１５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２２．Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
Figure 2022532918000433
 基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルから選択される親水性部分である、化合物またはその薬学式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２１のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２３．Ｒ２が、糖である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２４．Ｒ２が、オリゴ糖である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２５．Ｒ２が、ポリペプチドである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２６．Ｒ２が、ポリアルキレングリコールである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２７．Ｒ２が、構造－（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔＲ’を有するポリアルキレングリコールであり、Ｒ’が、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｍが、１～１０であり、ｔが、４～４０である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２８．Ｒ２が、構造－（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔＲ’’－を有するポリアルキレングリコールであり、Ｒ’’が、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｍが、１～１０であり、ｔが、４～４０である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１２９．Ｒ２が、ポリエチレングリコールである、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３０．Ｒ２が、構造－（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｔＲ’を有するポリエチレングリコールであり、Ｒ’が、ＯＨ、ＯＣＨ３、またはＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｔが、４～４０である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３１．Ｒ２が、構造－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｔＲ’’－を有するポリエチレングリコールであり、Ｒ’’が、Ｈ、ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、ｔが、４～４０である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３２．
Ｒ２が、
Figure 2022532918000434
 であり、Ｒ２の＊が、ＸまたはＬ３との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３３．
Ｒ２が、
Figure 2022532918000435
 であり、Ｒ２の＊が、ＸまたはＬ３との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３４．
Ｒ２が、
Figure 2022532918000436
 であり、Ｒ２の＊が、ＸまたはＬ３との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３５．
Ｒ２が、
Figure 2022532918000437
 であり、Ｒ２の＊が、ＸまたはＬ３との結合点を示す、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１２２のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３６．
Ｘ１が、
Figure 2022532918000438
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１３５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３７．
Ｘ１が、
Figure 2022532918000439
 である、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１３５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３８．
各ｍが、１、２、３、４、および５から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１３７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１３９．
各ｍが、１、２、および３から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１３７のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１４０．
各ｎが、１、２、３、４、および５から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１３９のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１４１．
各ｎが、１、２、３、４、および５から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１３９のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１４２．
各ｔが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、および３０から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１４１のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１４３．
各ｔが、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１４１のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１４４．
各ｔが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、および１８から独立して選択される、
式（Ａ’）もしくは実施形態１から１７のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｃ’）もしくは実施形態３２から４６のいずれか一項に記載のリンカー、および式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１４１のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、リンカー、およびイムノコンジュゲート。
実施形態１４５．ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、または１４である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１４６．ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１４７．ｙが、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１４８．ｙが、１、２、３、４、５、６、７、または８である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１４９．ｙが、１、２、３、４、５、または６である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５０．ｙが、１、２、３、または４である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５１．ｙが、１または２である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５２．ｙが、２である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５３．ｙが、４である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５４．ｙが、６である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５５．ｙが、８である、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項、または実施形態８４から１４４のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート。
実施形態１５６．Ｄが、イムノコンジュゲートから放出される場合、ＭＣｌ－１阻害剤である、式（Ａ’）もしくは実施形態１から３０のいずれか一項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、式（Ｅ’）もしくは実施形態６０から７０のいずれか一項に記載のイムノコンジュゲート、または実施形態８４から１５５のいずれか一項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩、およびイムノコンジュゲート。
他のリンカー基
本明細書に開示のＭＣｌ－１阻害剤のＡＤＣまたはイムノコンジュゲートの調製に適しているリンカー基の他の例には、そのそれぞれの内容全体が参照により組み込まれる国際公開第２０１８２００８１２号パンフレット、国際公開第２０１７２１４４５６号パンフレット、国際公開第２０１７２１４４５８号パンフレット、国際公開第２０１７２１４４６２号パンフレット、国際公開第２０１７２１４２３３号パンフレット、国際公開第２０１７２１４２８２号パンフレット、国際公開第２０１７２１４３０１号パンフレット、国際公開第２０１７２１４３２２号パンフレット、国際公開第２０１７２１４３３５号パンフレット、国際公開第２０１７２１４３３９号パンフレット、国際公開第２０１６０９４５０９号パンフレット、国際公開第２０１６０９４５１７号パンフレットおよび国際公開第２０１６０９４５０５号パンフレットなどの国際出願公開に開示されているものが含まれる。
例えば、本明細書に開示のＭＣｌ－１阻害剤のイムノコンジュゲートは、
Figure 2022532918000440
 （式中、
Ｌｃはリンカー成分であり、各Ｌｃは、本明細書に開示されるようなリンカー成分から独立して選択され、
ｘは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９および２０から選択される整数であり、
ｙは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９および２０から選択される整数であり、
ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から選択される整数であり、
Ｄは、本明細書に開示のＭＣｌ－１阻害剤であり、
各切断要素（ＣＥ）は、自壊性スペーサー、および酸誘導切断、ペプチダーゼ誘導切断、エステラーゼ誘導切断、グリコシダーゼ誘導切断、ホスホジエステラーゼ誘導切断、ホスファターゼ誘導切断、プロテアーゼ誘導切断、リパーゼ誘導切断またはジスルフィド結合切断から選択される切断を受けやすい基から独立して選択される）
から選択されるリンカー－ペイロード（「－Ｌ－Ｄ」）構造を有することができる。
一部の実施形態では、Ｌは、以下から選択される構造を有し、またはＬは、以下から選択される構造成分を含む。
Figure 2022532918000441
Figure 2022532918000442
Figure 2022532918000443
一部の実施形態では、Ｌｃはリンカー成分であり、各Ｌｃは、
Figure 2022532918000444
 から独立して選択される。
一部の実施形態では、リンカーＬは、－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ４Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｘ４Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）Ｘ４Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｘ４Ｃ（＝Ｏ）Ｘ６（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ６Ｃ（＝Ｏ）Ｘ１ａＸ２ａＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ））Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（ＣＨ２）ｍＮＲ１１（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＲ１１（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）Ｘ５（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）Ｘ２ａＸ１ａＣ（＝Ｏ）－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎＸ３（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＸ３（ＣＨ２）ｍ－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｎ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ１１（ＣＨ２）ｍ－；－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ１２）２－；
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２）ｍＣ（Ｒ１２）２ＳＳ（ＣＨ２）ｍＮＲ１１Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－、および
－＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ１１（ＣＨ２）ｍ－から選択されるリンカー成分を含み、ここで、＊＊は、薬物部分（Ｄ）との結合点を示し、他の末端は、Ｒ１００、すなわち、本明細書に記載されるようなカップリング基に結合され得、
ここで、
Ｘ１ａは
Figure 2022532918000445
 であり、ここで、＊は、Ｘ２ａとの結合点を示し、
Ｘ２ａは、
Figure 2022532918000446
 から選択され、ここで、＊は、Ｘ１ａとの結合点を示し、
Ｘ３は
Figure 2022532918000447
 であり、
Ｘ４は、－Ｏ（ＣＨ２）ｎＳＳＣ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｎ－または－（ＣＨ２）ｎＣ（Ｒ１２）２ＳＳ（ＣＨ２）ｎＯ－であり、
Ｘ５は
Figure 2022532918000448
 であり、ここで、＊＊は、薬物部分に対する向きを示し、
Ｘ６は
Figure 2022532918000449
 であり、ここで、＊＊は、薬物部分に対する向きを示し、
各Ｒ１１は、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
各Ｒ１２は、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
各ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から独立して選択され、
各ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７および１８から独立して選択される。
コンジュゲーションの方法
本発明は、１つまたは複数の親水性部分を有するリンカーを含む抗体薬物コンジュゲートを作製するために本発明のリンカー－薬物基を抗体または抗体断片にコンジュゲートする様々な方法を提供する。
式（Ｅ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のための一般的な反応スキームが以下のスキーム２に示される：
Figure 2022532918000450
 （式中、ＲＧ２は、適合性のＲ１基と反応して対応するＲ１００基を形成する反応性基である（そのような基は、表８および表９に示されている））。Ｄ、Ｒ１、Ｌ１、Ｌｐ、Ａｂ、ｙおよびＲ１００は、本明細書に定義される通りである。
スキーム３はさらに、式（Ｅ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの一般的な手法を示し、ここで、抗体は、Ｒ１基（本明細書に定義される通り）と反応してＲ１００基（本明細書に定義される通り）を介してリンカー－薬物基を抗体に共有結合する反応性基（ＲＧ２）を含む。例示のみを目的として、スキーム３は、４個のＲＧ２基を有する抗体を示す。
Figure 2022532918000451
１つの態様では、リンカー－薬物基は、抗体内の修飾システイン残基を介して抗体にコンジュゲートされている（例えば国際公開第２０１４／１２４３１６号パンフレット参照）。スキーム４は、式（Ｅ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの手法を示し、ここで、抗体内の改変されたシステイン残基から生成された遊離チオール基が、Ｒ１基（式中、Ｒ１はマレイミドである）と反応して、Ｒ１００基（式中、Ｒ１００はスクシンイミド環である）を介してリンカー－薬物基を抗体に共有結合する。例示のみを目的として、スキーム４は、４個の遊離チオール基を有する抗体を示す。
Figure 2022532918000452
別の態様では、リンカー－薬物基は、抗体内のリシン残基を介して抗体にコンジュゲートされている。スキーム５は、式（Ｅ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの手法を示し、ここで、抗体内のリシン残基からの遊離アミン基が、Ｒ１基（式中、Ｒ１は、ＮＨＳエステル、ペンタフルオロフェニルまたはテトラフルオロフェニルである）と反応して、Ｒ１００基（式中、Ｒ１００はアミドである）を介してリンカー－薬物基を抗体に共有結合する。例示のみを目的として、スキーム５は、４個のアミン基を有する抗体を示す。
Figure 2022532918000453
別の態様では、リンカー－薬物基は、抗体の天然に存在するジスルフィド架橋におけるオキシム架橋の形成を介して抗体にコンジュゲートされている。オキシム架橋は、抗体の鎖間ジスルフィド架橋の還元によりケトン架橋を初めに形成し、１，３－ジハロアセトン（例えば、１，３－ジクロロアセトン）を使用して再架橋することにより形成される。ヒドロキシルアミンを含むリンカー－薬物基とのその後の反応はそれによって、リンカー－薬物基を抗体に結合するオキシム結合（オキシム架橋）を形成する（例えば国際公開第２０１４／０８３５０５号パンフレット参照）。スキーム６は、式（Ｅ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの手法を示す。
Figure 2022532918000454
式（Ｆ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のための一般的な反応スキームが以下のスキーム７に示される：
Figure 2022532918000455
 （式中、ＲＧ２は、適合性のＲ１基と反応して対応するＲ１００基を形成する反応性基である（そのような基は、表８および表９に示されている））。Ｄ、Ｒ１、Ｌ１、Ｌｐ、Ａｂ、ｙおよびＲ１００は、本明細書に定義される通りである。
スキーム８はさらに、式（Ｆ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの一般的な手法を示し、ここで、抗体は、Ｒ１基（本明細書に定義される通り）と反応してＲ１００基（本明細書に定義される通り）を介してリンカー－薬物基を抗体に共有結合する反応性基（ＲＧ２）を含む。例示のみを目的として、スキーム８は、４個のＲＧ２基を有する抗体を示す。
Figure 2022532918000456
１つの態様では、リンカー－薬物基は、抗体内の修飾システイン残基を介して抗体にコンジュゲートされている（例えば国際公開第２０１４／１２４３１６号パンフレット参照）。スキーム９は、式（Ｆ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの手法を示し、ここで、抗体内の改変されたシステイン残基から生成された遊離チオール基が、Ｒ１基（式中、Ｒ１はマレイミドである）と反応して、Ｒ１００基（式中、Ｒ１００はスクシンイミド環である）を介してリンカー－薬物基を抗体に共有結合する。例示のみを目的として、スキーム９は、４個の遊離チオール基を有する抗体を示す。
Figure 2022532918000457
別の態様では、リンカー－薬物基は、抗体内のリシン残基を介して抗体にコンジュゲートされている。スキーム１０は、式（Ｆ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの手法を示し、ここで、抗体内のリシン残基からの遊離アミン基が、Ｒ１基（式中、Ｒ１は、ＮＨＳエステル、ペンタフルオロフェニルまたはテトラフルオロフェニルである）と反応して、Ｒ１００基（式中、Ｒ１００はアミドである）を介してリンカー－薬物基を抗体に共有結合する。例示のみを目的として、スキーム１０は、４個のアミン基を有する抗体を示す。
Figure 2022532918000458
別の態様では、リンカー－薬物基は、抗体の天然に存在するジスルフィド架橋におけるオキシム架橋の形成を介して抗体にコンジュゲートされている。オキシム架橋は、抗体の鎖間ジスルフィド架橋の還元によりケトン架橋を初めに形成し、１，３－ジハロアセトン（例えば、１，３－ジクロロアセトン）を使用して再架橋することにより形成される。ヒドロキシルアミンを含むリンカー－薬物基とのその後の反応はそれによって、リンカー－薬物基を抗体に結合するオキシム結合（オキシム架橋）を形成する（例えば国際公開第２０１４／０８３５０５号パンフレット参照）。スキーム１１は、式（Ｆ’）の抗体薬物コンジュゲートの生成のためのこの手法を示す。
Figure 2022532918000459
提供されるのはまた、本発明の抗体コンジュゲートを評価するための分析方法論のいくつかの態様のためのプロトコールである。そのような分析方法論および結果は、コンジュゲートが有利な特性、例えば、その製造をより容易に、患者へのその投与をより容易に、それをより効果的に、かつ／または潜在的に患者にとってより安全にするであろう特性を有することを示すことができる。一例は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）による分子サイズの決定であり、ここで、試料中の所望の抗体種の量が、試料中に存在する高分子量夾雑物（例えば、ダイマー、マルチマーまたは凝集抗体）または低分子量夾雑物（例えば、抗体断片、分解産物または個々の抗体鎖）の量に対して決定される。一般に、例えば、これらに限定されないがクリアランス速度、免疫原性および毒性などの抗体試料の他の特性に対する凝集体の影響のために、より多量のモノマーおよびより少量の、例えば凝集抗体を有することが望ましい。さらなる例は、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）による疎水性の決定であり、ここで、試料の疎水性が、既知の特性の１組の標準抗体に対して評価される。一般に、これらに限定されないが凝集、経時的な凝集、表面への付着、肝毒性、クリアランス速度および薬物動態学的曝露などの抗体試料の他の特性に対する疎水性の影響のために、低い疎水性を有することが望ましい。Damle, N.K., Nat Biotechnol. 2008; 26(8):884-885；Singh, S.K., Pharm Res. 2015; 32(11):3541-71を参照されたい。疎水性相互作用クロマトグラフィーにより測定されたとき、より高い疎水性指標スコア（すなわち、ＨＩＣカラムからのより速い溶出）は、コンジュゲートのより低い疎水性を反映する。以下の実施例に示されるように、試験された抗体コンジュゲートの大部分が０．８超の疎水性指標を示した。一部の実施形態では、提供されるのは、疎水性相互作用クロマトグラフィーにより決定される０．８以上の疎水性指標を有する抗体コンジュゲートである。
以下の実施例は、本開示の例示的な実施形態を提供する。当業者は、本開示の精神または範囲を変更することなく行うことができる多くの改変および変形形態を認識するであろう。そのような改変および変形形態は、本開示の範囲内に包含される。提供される実施例は、本開示を何ら限定するものではない。
[実施例１]
リンカー、リンカー－ペイロード、およびそれらの前駆体の合成および特徴付け。
例示的なリンカー、リンカー－ペイロード、およびそれらの前駆体は、この実施例に記載した例示的な方法を使用して合成した。
略語：
ＣｕＩ ヨウ化銅（Ｉ）
ＤＣＣ ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＥＡ Ｎ－エチルエタンアミン
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＥＤＱ エチル２－エトキシ－２Ｈ－キノリン－１－カルボキシレート
Ｆｍｏｃ－Ｃｉｔ－ＯＨ （２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタン酸
ＨＢＴＵ：（２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｔ：１－ヒドロキシ－７－アザベンゾトリアゾール
ＭｇＳＯ４ 硫酸マグネシウム
ＮＨ４Ｃｌ 塩化アンモニウム
ＮＭＰ Ｎ－メチルピロリドン
Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２ ジクロロ－トリ（トリフェニルホスフィン）パラジウム
ＰＢｒ３ トリブロモホスファン
Ｐｔ／Ｃ １０％ 炭素上白金 １０％
ＳＯＣｌ２ 塩化チオニル
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴＢＡＩ テトラブチルアンモニウム、ヨウ化物
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
材料、方法および一般手順：
商業的供給源から入手したすべての試薬は、さらに精製することなく使用した。無水溶媒は商業的供給源から入手し、さらに乾燥させることなく使用した。フラッシュクロマトグラフィーは、予め充填されたシリカゲルカートリッジ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ－Ｎａｇｅｌ Ｃｈｒｏｍａｂｏｎｄ Ｆｌａｓｈ）を備えるＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ(登録商標） Ｒｆ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ ＩＳＣＯ）で行った。薄層クロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ Ｔｙｐｅ ６０ Ｆ２５４シリカゲルでコーティングした５×１０ｃｍのプレートを用いて行った。マイクロ波加熱は、ＣＥＭ Ｄｉｓｃｏｖｅｒ（登録商標）機器で行った。
１Ｈ－ＮＭＲ測定は、ＤＭＳＯ－ｄ６またはＣＤＣｌ３を溶媒として使用して、４００ＭＨｚ Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅまたは５００ＭＨｚ Ａｖａｎｃｅ Ｎｅｏ分光計で行った。１Ｈ ＮＭＲデータは、溶媒の残留ピーク（ＤＭＳＯ－ｄ６について２．５０ｐｐｍ、およびＣＤＣｌ３について７．２６ｐｐｍ）を内部標準として使用して、百万分率（ｐｐｍ）で与えられる、化学シフト値の形式である。分裂パターンは、ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）、ｑｕｉｎｔ（五重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ ｓ（幅広一重線）、ｂｒ ｔ（幅広三重線）ｄｄ（二重線の二重線）、ｔｄ（二重線の三重線）、ｄｔ（三重線の二重線）、ｄｄｄ（二重線の二重線の二重線）として示される。ＩＲ測定は、ＡＴＲ Ｇｏｌｄｅｎ Ｇａｔｅデバイス（ＳＰＥＣＡＣ）を備え付けたＢｒｕｋｅｒ Ｔｅｎｓｏｒ ２７で行った。ＨＲＭＳ測定は、ＬＴＱ ＯｒｂｉＴｒａｐ Ｖｅｌｏｓ Ｐｒｏ質量分析計（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で行った。試料は、およそ０．０１～０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度範囲でＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（２／１：ｖ／ｖ）に溶解し、０．１ｍＬ／分の流速で２μＬの注入によりソースに導入した。ＥＳＩイオン化パラメーターは以下の通りとした：３．５ｋＶおよび３５０℃移動イオンキャピラリー。すべてのスペクトルは、ロックマスを使用して３０，０００または６０，０００の分解能で陽イオンモードにて取得した。
ＨＲＭＳ測定は、ＬＴＱ ＯｒｂｉＴｒａｐ Ｖｅｌｏｓ Ｐｒｏ質量分析計（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＧｍｂＨ，Ｂｒｅｍｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で行った。試料は、およそ０．０１～０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度範囲でＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（２／１：ｖ／ｖ）に溶解し、０．１ｍＬ／分の流速で２μＬの注入によりソースに導入した。ＥＳＩイオン化パラメーターは以下の通りとした：３．５ｋＶおよび３５０℃移動イオンキャピラリー。すべてのスペクトルは、ロックマスを使用して３００００または６００００の分解能で陽イオンモードにて取得した。
ＵＰＬＣ（登録商標）－ＭＳ：
ＵＰＬＣ（登録商標）－ＭＳデータは、以下のパラメーター（表１０）で機器を使用して取得した：
Figure 2022532918000460
分取ＨＰＬＣ：
分取ＨＰＬＣ（「Ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ」）データは、以下のパラメーター（表１１）で機器を使用して取得した：
Figure 2022532918000461
３つの分取ＨＰＬＣ方法を使用した：
ａ．ＴＦＡ法：溶媒：Ａ 水＋０．０５％ＴＦＡ、Ｂ アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡ、１５～３０ＣＶで５～１００％Ｂの勾配
ｂ．ＮＨ４ＨＣＯ３法：溶媒：Ａ 水＋０．０２Ｍ ＮＨ４ＨＣＯ３、Ｂ アセトニトリル／水 ８０／２０＋０．０２Ｍ ＮＨ４ＨＣＯ３、１５～３０ＣＶで５～１００％Ｂの勾配
ｃ．中性法：溶媒：Ａ 水、Ｂ アセトニトリル、１５～３０ＣＶで５～１００％Ｂの勾配
純粋な化合物を含有するすべての画分を合わせ、直接凍結乾燥して、化合物を非晶質粉末として得た。
分取ＳＦＣ精製：
分取キラルＳＦＣは、ＰＩＣ ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｐｒｅｐ２００システムで行った。試料は、１５０ｍｇ／ｍＬの濃度でエタノールに溶解した。移動相は、４０％エタノール／ＣＯ２に定組成で保持した。機器にはＣｈｉｒａｌｐａｋ ＩＡカラムおよび３ｍＬのループを取り付けた。ＡＢＰＲ（自動背圧調節器）は１００ｂａｒにセットした。
Ｌ２３－Ｐ３の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000462
ステップ１：（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］酢酸（Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍから購入、１．４ｇ、６ｍｍｏｌ）の溶液に、１－ヒドロキシピロリジン－２，５－ジオン（６９０ｍｇ、６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．２ｇ、６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。沈殿物を濾別し、濾液を濃縮して、（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート（１．９ｇ、６ｍｍｏｌ）を得、さらに精製することなく直ちに使用した。
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート（１．６ｇ；４．８５ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１．９６ｇ；５．１７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、濃縮した。残留物を水（２０ｍＬ）およびアセトニトリル（５ｍＬ）に希釈し、室温で終夜撹拌した。混合物を、中性法を使用する逆相Ｃ１８クロマトグラフィーにより精製して、（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１．０７ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.95 (s, 1H), 8.3 (d, 1H), 7.55 (d, 2H), 7.46 (d, 1H), 7.22 (d, 2H), 5.98 (t, 1H), 5.4 (s, 1H), 5.08 (t, 1H), 4.43 (d, 2H), 4.4 (q, 1H), 4.33 (dd, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.6 (m, 10H), 3.38 (t, 2H), 3 (m, 2H), 2 (m, 1H), 1.7/1.6 (2m, 2H), 1.5-1.3 (m, 2H), 0.89/0.82 (2d, 6H).
ステップ２：［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１００ｍｇ、０．１６８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（３２μＬ、０．１７９ｍｍｏｌ）およびビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（１００ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で４時間撹拌し、濃縮乾固した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（６５ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.95 (s, 1H), 8.3 (d, 1H), 7.55 (d, 2H), 7.46 (d, 1H), 7.22 (d, 2H), 5.98 (t, 1H), 5.4 (s, 1H), 5.08 (t, 1H), 4.43 (d, 2H), 4.4 (q, 1H), 4.33 (dd, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.6 (m, 10H), 3.38 (t, 2H), 3 (m, 2H), 3.02-2.95 (m, 2H), 2 (m, 1H), 1.7 (m, 1H), 1.6 (m, 1H), 0.89 (d, 3H), 0.82 (d, 3H).
ステップ３：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｌ２３－Ｐ３
ＤＭＦ（１６ｍＬ）中の（（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｐ３（１４７ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（８５μＬ、０．５１ｍｍｏｌ）、４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（１３６ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）、２，６－ルチジン（９９μＬ、０．８５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（７ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２３－Ｐ３（１１０ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.05 (s, 1H), 8.87 (d, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.52 (dd, 1H), 7.45 (td, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.36 (dl, 1H), 7.29 (m, 2H), 7.27 (d, 2H), 7.2 (t, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.13 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.71 (t, 1H), 6.24 (dl, 1H), 5.99 (t, 1H), 5.48 (dd, 1H), 5.41 (br s, 1H), 5.23 (m, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.32 (dd, 1H), 4.21 (m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.65-3.50 (m, 10H), 3.34 (m, 2H), 3.02/2.95 (m, 2H), 2.73 (t, 2H), 2.49/2.3 (m,2H), 2.45 (m, 4H), 2.3 (m, 4H), 2 (m, 1H), 1.82 (s, 3H), 1.7/1.59 (m, 2H), 1.44/1.37 (m, 2H), 0.87 (d, 3H), 0.82 (d, 3H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158.3, 152.9, 131.6, 131.6, 131.3, 131.3, 131, 129, 128.8, 121, 120.8, 119.5, 116.4, 116.1, 112.8, 112.4, 111.2, 74.5, 70.1, 69.3, 67.7, 66.4, 57, 56.7, 56.2, 53.7, 53.2, 50.4, 43.6, 39, 32.8, 31.6, 29.6, 27.3, 19.3, 17.7.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３５００～２５００、２１０６、１６５６。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４７９．５４２２／１４７９．５４０５（測定値／理論値）。
Ｌ２４－Ｐ１の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000463
ステップ１：（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（３３０ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ；Ｌ２３－Ｐ３の合成のステップ１に従って得た）の溶液に、ジクロロメタン中三臭化リン１Ｍの溶液（１ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を０℃で滴下添加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、微粉ＮａＨＣＯ３（１００ｍｇ）を添加した。１０分間撹拌した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、濾過した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残留物である（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（２８３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）をさらに精製することなく使用した。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝＝５９５．３２００／５９５．３１９８（測定値／理論値）。
ステップ２：（（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸 Ｌ２４－Ｐ１
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のエチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート二塩酸塩（Ｐ１）（３４５ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（２３３ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５０μＬ、０．３０４ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。混合物を室温で終夜撹拌した。水（０．５ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（１５ｍｇ、３．５５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、ＸＢｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２４－Ｐ１（８０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 13.2 (m, 1H), 10.25 (m, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.6 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.43 (m, 2H), 7.37 (d, 1H), 7.3 (dd, 2H), 7.21 (t, 2H), 7.2 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.15 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 7 (t, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.22 (d, 1H), 6 (t, 1H), 5.52 (m, 2H), 5.49 (dd, 1 H), 5.25 (dd, 2H), 4.5 (br s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 3.95 (br s, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.4/3.24 (m, 4H), 3.35 (m, 2H), 3.28/2.51 (m, 2H), 3.04/2.83 (m, 4H), 3.02/2.96 (m, 2H), 2.92 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 1.99 (m,1 H), 1.83 (s, 3H), 1.69/1.61 (m, 2H), 1.46/1.38 (m, 2H), 0.88/0.82 (m, 6H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 134.2, 131.4, 131.3, 131.3, 131.2, 130.7, 128.7, 120.9, 120.5, 119.2, 116.3, 115.8, 112.7, 112.3, 111, 74, 70.2, 69.6, 67.8, 58.9, 56.9, 56.1, 55.4, 54, 50.5, 46.6, 44.9, 39, 32.7, 31.6, 29.8, 27.5, 19.7/18.4, 18.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３７００～２２００、３０００～２０００、２１０９、１６６２、１２５０～１０５０。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１４７３．５６５６／１４７３．５６２８（測定値／理論値）。
Ｌ１３－Ｃ４の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［４－（ホスホノメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000464
ステップ１：（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミドの合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミド（０．９ｇ、３．０７ｍｍｏｌ；Ｌ１８－Ｃ３の合成のステップ３に従って得た）および３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパン酸（Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍから購入、２ｇ、３．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１ｍＬ、６．１３ｍｍｏｌ）、３－（エチルイミノメチレンアミノ）プロピル－ジメチル－アンモニウム；クロリド（ＥＤＣ）（０．６５ｇ、３．３７ｍｍｏｌ）および［ジメチルアミノ（トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イルオキシ）メチレン］－ジメチル－アンモニウム；ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）（１．２８ｇ、３．３７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミド（１．６４ｇ、１．８１ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.82 (m, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.54 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 5.08 (t, 1H), 4.43 (d, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.2 (m, 1H), 3.65-3.44 (m, 48H), 3.39 (t, 2H), 2.50-2.30 (m, 2H), 1.97 (m, 1H), 1.31 (d, 3H), 0.87/0.84 (m, 6 H). IR波長 (cm-1): 3600-3200, 3287, 2106, 1668, 1630, 1100.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝９１９．５２６５／９１９．５２３４（測定値／理論値）。
ステップ２：［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート
ＴＨＦおよびジクロロメタンの混合物（それぞれ５および２．５ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミド（２１０ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（３０μＬ、０．４７９ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸４－ニトロフェニル（９７ｍｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応物を室温で３時間撹拌し、さらにクロロギ酸４－ニトロフェニル（４０ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）およびピリジン（３０μＬ、０．４７９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で５５時間撹拌し、蒸発乾固させた。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中ＭｅＯＨの勾配）により精製して、［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（１１８ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.00 (s, 1H), 8.31 (d, 2H), 8.19 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.41 (d, 2H), 5.25 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 3.63-3.47 (m, 48H), 3.39 (t, 2H), 2.50-2.35 (m, 2H), 1.98 (m, 1H), 1.31 (d, 3H), 0.89/0.85 (m, 6H).
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３２７８、２１０８、１７６３、１６３３、１５２６、１５２５、１３５０、１２１５、１１１０。
ステップ３：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［４－（ホスホノメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（Ｌ１３－Ｃ４）
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（５２ｍｇ、４７．６μｍｏｌ）の溶液に、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［４－（ホスホノメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｃ４（３６．７ｍｇ、３９．７μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２６μＬ、１０８μｍｏｌ）を連続的に添加した。反応物を室温で１時間撹拌し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１３－Ｃ４（３６ｍｇ、１９μｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.1 (br s, 1H), 8.81 (br s, 1 H), 8.55 (m, 1 H), 8.32 (br s, 1H), 8.19 (d, 2H), 8.02 (br s, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.37 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.28 (d, 2H), 7.25 (d, 2H), 7.19 (t, 2H), 7.17 (d, 1H), 7.08 (t, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.68 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 5.5 (m, 1H), 5.22 (m, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.4 (m, 1H), 4.2 (dd, 1H), 4.18 (m, 2H), 3.62/3.41 (m, 24H), 3.5 (m, 4H), 3.38 (m, 2H), 3.28 (m, 4H), 2.87 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 2.48/2.36 (m, 2H), 2.41 (m, 4H), 1.99 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 1.3 (d, 3H), 0.87/0.83 (m, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 130.7, 130.7, 130.6, 130.3, 129, 128.4, 127.4, 121, 119.6, 116.3, 116.1, 112.1, 70.2/67.3, 69.5, 67.5, 66.4, 58.2, 56.4, 53.2, 50.3, 49.6, 43.8, 36.3, 31, 19, 18.5, 17.8. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ -112.4. 31P NMR (200 MHz, dmso-d6): δ 17.8.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３２９０、２１０２、１６９８、１６５１、１２３７、１０９４、８３３、７５６。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１８６７．７１２９／１８６７．７１５４（測定値／理論値）。
Ｌ１９－Ｃ３の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000465
ステップ１：［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート
ＴＨＦ／ジクロロメタン混合物（それぞれ１００および３０ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（１ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ピリジン（２６９μＬ、３．３２ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸４－ニトロフェニル（６７０ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応物を室温で終夜撹拌し、さらにクロロギ酸４－ニトロフェニルを添加した（３３５ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）。反応物を室温で３時間撹拌し、濃縮し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン中酢酸エチルの勾配）により精製して、［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（６５８ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.07 (m, 1H), 8.31 (d, 2H), 8.19 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.74 (t, 2H), 7.64 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.41 (d, 2H), 7.4 (m, 1H), 7.32 (t, 2H), 5.24 (s, 2H), 4.43 (m, 1H), 4.36-4.19 (m, 3H), 3.92 (dd, 1H), 2 (m, 1H), 1.32 (d, 3H), 0.9/0.87 (m, 6 H).
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３３５０～３２００、１７６０、１６９０、１６７０、１６３０、１５２３、１２９０。
ステップ２：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｃ３（１００ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）の溶液に、［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（８７ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３８μＬ、０．２３２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、濃縮した。残留物を水に溶かし、濾過して、（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１１０ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）を得、さらに精製することなく次のステップで使用した。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.05 (br s, 1 H), 8.88 (d, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.23 (d, 1H), 7.88 (d, 2H), 7.75 (m, 1H), 7.74 (2d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.53 (dd, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.4 (m, 2H), 7.31 (m, 2H), 7.29 (m, 2H), 7.26 (d, 2H), 7.2 (t, 2H), 7.18 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.69 (t, 1H), 6.2 (d, 1H), 5.46 (d, 1H), 5.22 (m, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.42 (t, 1H), 4.26 (m, 2H), 4.21 (m, 1H), 4.2 (m, 2H), 3.91 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.35/2.45 (m, 2H), 3.29 (m, 4H), 2.73 (t, 2H), 2.44 (m, 4H), 1.99 (m, 1H), 1.8 (s, 3H), 1.29 (d, 3H), 0.88/0.85 (m, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158.3, 152.7, 131.6, 131.4, 131.3, 131.1, 131.1, 128.9, 128.5, 128, 127.6, 125.8, 120.9, 120.5, 120.5, 119.4, 116.4, 116, 112.7, 112.2, 111.1, 69.4, 67.8, 66.5, 66.1, 60.7, 56.8, 56.1, 53.2, 49.6, 47.1, 43.8, 33.3, 30.9, 19.7, 18.9, 18.1.
ステップ３：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１７６ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でピペリジン（３００μＬ、１．２５ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、濃縮した。残留物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１３０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.2 (s, 1H), 8.9 (d, 1H), 8.6 (dl, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.6 (d, 2H), 7.55 (dd, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.25 (d, 2H), 7.25 (m, 4H), 7.2 (m, 3H), 7.15 (d, 1H), 7.1 (t, 1H), 7.05 (t, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.65 (t, 1H), 6.15 (d, 1H), 5.4 (dd, 1H), 5.2 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.45 (m, 1H), 4.2 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.4/2.35 (m, 2H), 3.3 (m, 5H), 2.6 (t, 2H), 2.4 (m, 4H), 2 (m, 3H), 1.8 (s, 3H), 1.3 (d, 3H), 0.9/0.85 (m, 6H).
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３６００～２５００、１６７８。
ステップ４：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｌ１９－Ｃ３
ＤＭＦ（０．３ｍＬ）中の２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（５０ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４μＬ、０．０８５ｍｍｏｌ）、［ジメチルアミノ－（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）オキシ－メチレン］－ジメチル－アンモニウム；テトラフルオロボレート（１４ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］酢酸（２８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液を連続的に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１９－Ｃ３（２２ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.02 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.4 (d, 1H), 7.72 (br s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.53 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.27 (d, 2H), 7.2 (t, 2H), 7.18 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.11 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.7 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 5.46 (dd, 1H), 5.23 (m, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.4 (m, 1H), 4.29 (dd, 1H), 4.22 (m, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.65-3.53 (m, 10H), 3.35 (m, 2H), 3.3 (m, 4H), 3.3/2.5 (m, 2H), 2.73 (t, 2H), 2.44 (m, 4H), 2 (m, 1H), 1.81 (s, 3H), 1.3 (d, 3H), 0.88/0.82 (m, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158, 152.7, 131.4, 131.4, 131.3, 131.1, 131.1, 128.9, 128.6, 120.9, 120.7, 119.5, 116.2, 112.5, 112.1, 111.1, 70.4, 70.4, 69.7, 67.5, 66.2, 56.8, 56.7, 56.1, 53.3, 50.4, 49.5, 43.8, 31.7, 19.5, 0.82, 18.3, 18.2. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ -112.3.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３２９４、２１０４、１６９７、１６６３、１２８８、１２３８、１１２０、１０７６、１０５１、１０２０、８３３、７５５。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３９５．５０８３／１３９５．５０７０（測定値／理論値）。
Ｌ１５－Ｃ５の調製：
（２Ｒ）－３－［２－［［２－［３－［［［２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］エトキシ－ヒドロキシ－ホスホリル］オキシ－ヒドロキシ－ホスホリル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパン酸
Figure 2022532918000466
ステップ１：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［３－（ホスホノオキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；ビス２，２，２－トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ（０．５ｍＬ）中のエチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［３－（ヒドロキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（１１０ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ；国際公開第２０１６／２０７２１６号に従って調製した）の溶液に、アルゴン下、－４０℃でジホスホリルクロリド（５１μＬ、０．３６８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を－４０℃で３０分間撹拌した。さらにジホスホリルクロリド（１０μＬ、０．０７４ｍｍｏｌ）を－４０℃で添加し、反応物を－４０℃で２０分間撹拌し、炭酸カリウムの飽和水溶液（０．１ｍＬ）の添加によりクエンチし、室温に加温した。ｐＨを炭酸カリウム（粉末）の添加により１０に調整し、反応物を室温で２０分間撹拌した。反応混合物を、０℃で２Ｍ ＨＣｌ水溶液をゆっくりと添加することによりｐＨ２に酸性化し、ジクロロメタン（４回）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、ジオキサン（３ｍＬ）で希釈し、水（０．３ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（１７ｍｇ、０．４０３ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で４日間撹拌し、４Ｍ ＨＣｌ水溶液（０．４ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）により中和し、蒸発させた。残留物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［３－（ホスホノオキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロ酢酸を２ＴＦＡ塩（４１ｍｇ、４３μｍｏｌ）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋２Ｈ］／２＋＝４８７．５。
ステップ２：２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］エチルジヒドロゲンホスフェート
ジクロロメタン（２ｍＬ）中の３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパン酸（２００ｍｇ、０．３１１ｍｍｏｌ）の溶液に、１－ヒドロキシピロリジン－２，５－ジオン（７９ｍｇ、０．６８４ｍｍｏｌ）、３－（エチルイミノメチレンアミノ）プロピル－ジメチル－アンモニウム；クロリド（１０７ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、ジクロロメタンで希釈し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で分配し、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、およそ１ｍＬにまで濃縮した。残留物をＤＭＦ（１ｍＬ）で希釈し、リン酸二水素２－アミノエチル（３０ｍｇ、０．２１４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８０℃で終夜撹拌し、ジクロロメタンで希釈し、水で洗浄した。水層を分離し、凍結乾燥して、２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］エチルジヒドロゲンホスフェート（１６５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 3.45-3.65 (m, 53H), 3.26-3.39 (m, 2H), 3.12 (m, 2H), 2.27 (t, 2H).
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝７６７．３６９７／７６７．３６８６（測定値／理論値）。
ステップ３：（２Ｒ）－３－［２－［［２－［３－［［［２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］エトキシ－ヒドロキシ－ホスホリル］オキシ－ヒドロキシ－ホスホリル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパン酸（Ｌ１５－Ｃ５）
ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中の２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパノイルアミノ］エチルジヒドロゲンホスフェート（４９ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）の溶液に、ジ（イミダゾール－１－イル）メタノン（１１ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１７μＬ、０．０６６ｍｍｏｌ）および４Å分子篩（５０ｍｇ）を連続的に添加した。反応物を室温で２時間撹拌した。固体を濾過により除去し、濾液を塩化亜鉛（２３ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）および（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［３－（ホスホノオキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；ビス２，２，２－トリフルオロ酢酸（４１ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を５０℃に終夜加熱した。反応混合物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１５－Ｃ５（１１ｍｇ、６μｍｏｌ）を得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１７０３．５９６２／１７０３．５９５９（測定値／理論値）。
Ｌ１７－Ｃ３の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）－６－アジド－２，３，４，５－テトラヒドロキシ－ヘキシル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000467
 １％のＤＩＰＥＡを含有するＤＭＳＯ／水 ８０／２０の混合物（２０ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（２３０ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ；Ｌ１９－Ｃ３の調製のステップ５に従って得た）および６－デオキシ－６－アジド－Ｄ－ガラクトース（１２０ｍｇ、０．５８４ｍｍｏｌ；Ekholm et al., ChemMedChem 2016, 11, 2501-2505に従って得た）の溶液に、室温でシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２４ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６５℃で４８時間加熱した。次いで、さらにシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２４ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）および６－デオキシ－６－アジド－Ｄ－ガラクトース（１２０ｍｇ、０．５８４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を６５℃でさらに４８時間加熱し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１７－Ｃ３（３８ｍｇ、２８μｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 13.2 (br s, 1H), 10.2 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.85 (d, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.53 (br s, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.33 (dd, 2H), 7.33 (d, 2H), 7.27 (d, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.21 (t, 2H), 7.15 (t, 1H), 7.04 (t, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.73 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 5.51 (d, 1H), 5.28/5.22 (m, 2H), 5.04 (br s, 2H), 4.52 (m, 1H), 4.49 (m, 2H), 4.12 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.78 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.63 (m, 6H), 3.42/3.21 (m, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.37 (m, 1H), 3.28/2.52 (m, 2H), 3.22 (m, 4H), 2.96 (m, 2H), 2.21 (m, 1H), 1.86 (s, 3H), 1.36 (d, 3H), 1.03/0.94 (m, 6H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 157.8, 152.5, 131.4, 131.3, 131.3, 130.6, 129.1, 129, 128.8, 120.8, 120.6, 119.4, 116.2, 116.1, 112.3, 111.3, 111.3, 74.2, 71.3, 70.4, 69.5, 69.2, 67.1, 65.6, 64.5, 64.5, 56.2, 54.8, 54.2, 51.9, 50.3, 49.9, 32.7, 29.4, 19.3, 18.9, 18. 19F NMR (470 MHz, dmso-d6): δ -74.4, -112.1.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：２２００～３５００、２１０４、１６６９、１１８１、１１３２、７９８、７５８、７２０。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３６９．４９１８／１３６９．４９１３（測定値／理論値）。
Ｌ２４－Ｐ７の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－エチル－フェニル］－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000468
 ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（７２ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－エチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｐ７（３０ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９μＬ、０．１０８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２４－Ｐ７（２５ｍｇ、１８μｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.25 (s, 1H), 8.85 (d, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.6 (d, 1H), 7.5 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.4 (d, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.17 (m, 1H), 7.15 (m, 1H), 7.13 (d, 1H), 7.02 (t, 1H), 7 (d, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.3 (d, 1H), 5.98 (br s, 1H), 5.5 (dd, 1H), 5.4 (br s, 1H), 5.28/5.2 (m, 2H), 4.5 (br s, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.3 (dd, 1H), 4.25 (m, 2H), 3.94 (br s, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.70/3.50 (m, 10H), 3.50 (m, 8 H), 3.35 (t, 2H), 3.22/2.5 (m, 2 H), 3.0 (m, 2H), 2.95 (t, 2H), 2.9 (br s, 3H), 2.55/2.4 (m, 2H), 2.0 (s, 3H), 1.98 (m, 1H), 1.70/1.30 (m, 4H), 0.88/0.82 (m, 6H), 0.72 (t, 3H).
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３３２１、２１１１、１６６０、１１８８、１１２４、７９８，７５６，７１９。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ－ＣＦ３ＣＯＯＨ］＋＝１４０９．５９０７７／１４０９．５９０３（測定値／理論値）。
Ｌ２４－Ｐ６の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［２－（ヒドロキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000469
 ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（５５．３ｍｇ、８４μｍｏｌ）の溶液に、エチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［２－（ヒドロキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（５３．２ｍｇ、５９μｍｏｌ；欧州特許第２８８６５４５号に従って合成した）およびＤＩＰＥＡ（４４μＬ、０．２５２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物をジオキサン（１ｍＬ）で希釈し、水（０．３ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（１４ｍｇ、０．０３３４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液（０．３３ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）の添加により中和し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２４－Ｐ６（４７ｍｇ、３２μｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.27 (s, 1H), 8.94 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.68 (t, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.5 (t, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.37 (m, 1H), 7.3 (dd, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.2 (t, 2H), 7.16 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 6.01 (m, 1H), 5.5 (d, 1H), 5.4 (m, 1H), 5.3 (m, 2H), 4.8 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.32 (dd, 1H), 4.25 (m, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.57 (m, 16H), 3.42/3.26 (m, 2 H), 3.36 (m, 2H), 3.29/2.51 (m, 2H), 3.11/2.92 (m, 8H), 2.98 (m, 2H), 2.97 (m, 2H), 1.99 (m, 1H), 1.83 (s, 3H), 1.68/1.62 (m, 2H), 1.45/1.39 (m, 2H), 0.88/0.82 (m, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158.2, 152.1, 134.2, 131.4, 131.3, 130.9, 130.8, 130.2, 128.7, 128.1, 127, 120.8, 119.3, 116.3, 115.7, 112.2, 111, 74, 70.5, 70.1, 69.5, 67.7, 62.3, 58.8, 57.2, 55.5, 54.1, 50.5, 46.6, 38.9, 32.5, 31.5, 29.6, 27.6, 19.6, 18.6, 18.3. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ -74.6, -112.5.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３３０３、２１０４、１７３０、１６６２、１１８２、１１２４、８３３，７９６，７６１。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋２Ｈ］／２＋＝７２６．２９５７／７２６．２９４１（測定値／理論値）。
Ｌ２０－Ｃ６の調製：
（２Ｒ）－３－［２－［［２－［２－［［２－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル－メチル－アミノ］エチル－メチル－カルバモイル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパン酸
Figure 2022532918000470
ステップ１：エチル（２Ｒ）－３－［２－［［２－［２－［［２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ］エチル－メチル－カルバモイル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパノエート
ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の（エチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［２－（ヒドロキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（５０ｍｇ、５５μｍｏｌ；欧州特許第２８８６５４５号に従って合成した）の溶液に、クロロギ酸４－ニトロフェニル（１９ｍｇ、９４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６９μＬ、０．５ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－メチル－Ｎ－［２－（メチルアミノ）エチル］カルバメート（５４ｍｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、エチル（２Ｒ）－３－［２－［［２－［２－［［２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ］エチル－メチル－カルバモイル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパノエート（３０ｍｇ、２７μｍｏｌ）を得た。1H NMR (500 MHz, dmso-d6): δ 9.00 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.98 (m, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.51 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.31 (dd, 2H), 7.31 (d, 1H), 7.22 (t, 2H), 7.18 (t, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.76 (t, 1H), 6.32 (d, 1H), 5.52 (dd, 1H), 5.47 (br s, 2H), 5.26 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.07 (m, 2H), 3.24/3.17 (2m, 4H), 3.17/2.6 (2m, 2H), 2.77/2.64 (m, 6H), 2.7 (m, 2H), 2.49/2.28 (m, 8H), 2.12 (br s, 3H), 1.87 (s, 3H), 1.3 (3s, 9H), 1.07 (t, 3H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 158.2, 152.4, 131, 130.1, 130.1, 129, 128.3, 128.2, 121.5, 121.4, 120.9, 116.3, 115.8, 112, 111.1, 74.1, 69.2, 68.1, 65.6, 61.2, 56.8, 55.2, 53.1, 46.5, 45.9, 34.5, 32.4, 28.3, 17.4, 14.9.19F NMR (470 MHz, dmso-d6): δ -112.2.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：１７５０、１６９３、１２２１／１１６０／１１２０、８３４／７５６。
ステップ２：２Ｒ）－３－［２－［［２－［２－［［２－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル－メチル－アミノ］エチル－メチル－カルバモイル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパン酸 Ｌ２０－Ｃ６
ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中のエチル（２Ｒ）－３－［２－［［２－［２－［［２－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（メチル）アミノ］エチル－メチル－カルバモイル］オキシメチル］フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－プロパノエート（２５ｍｇ、２２μｍｏｌ）の溶液に、０℃でトリフルオロ酢酸（３５μＬ、４４７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で６時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物をＤＭＦ（０．５ｍＬ）で希釈し、［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（２０ｍｇ、２２μｍｏｌ；Ｌ２３－Ｐ３の調製のステップ３に従って得た）およびＤＩＰＥＡ（７８μＬ、０．４４７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、減圧下で濃縮し、ジオキサン（０．５ｍＬ）で希釈し、水（０．３ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（３．７ｍｇ、８９μｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液の滴下添加により０℃でｐＨ７まで中和し、減圧下で濃縮した。
粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２０－Ｃ６（１３ｍｇ、８μｍｏｌ）を得た。1H NMR (500 MHz, dmso-d6): δ 8.88 (m, 1H), 8.54 (s, 1 H), 7.97 (d, 1H), 7.77 (m, 1H), 7.6 (d, 2H), 7.5 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.21 (t, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.18 (m, 2H), 7.12 (t, 1H), 6.97 (d, 1H), 6.7 (t, 1H), 6.19 (d, 1H), 5.49 (d, 1H), 5.45 (m, 4H), 5.23 (m, 2H), 4.89 (m, 2H), 4.4 (m, 1H), 4.32 (dd, 1H), 4.22 (m, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.56 (m, 10H), 3.39/2.44 (m, 2H), 3.34 (t, 2H), 3.28 (m, 4H), 2.99 (m, 2H), 2.75/2.7 (m, 6H), 2.73 (m, 2H), 2.5/2.37 (m, 8H), 2.18 (s, 3H), 2.04 (m, 1H), 1.81 (s, 3H), 1.74/1.62 (m, 2H), 1.46/1.38 (m, 2H), 0.86/0.8 (m, 6H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 158.3, 152.9, 131.5, 131.4, 131.3, 131, 130, 128.3, 128.3, 128, 127.7, 120.8, 119.3, 116.2, 115.6, 112.1, 111.1, 75.3, 70.5, 70.2, 69.2, 67.6, 66.6, 65.4, 57.2, 56.7, 55.1/52.9, 54, 50.5, 46.5, 45.1, 39.1, 34.4, 31.5, 29.6, 27.4, 19.9, 18.2, 18. 19F NMR (470 MHz, dmso-d6): δ -112.5.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３３２３、２１０６、１６９１、１６６０、１２２０、１１２０、１０５１、７５９。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１６０９．６５１７／１６０９．６５００（測定値／理論値）。
Ｌ２２－Ｃ１の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000471
ステップ１：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；ビス－２，２，２－トリフルオロ酢酸
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（２００ｍｇ、０．３８８ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフェニルホスフィン（１５２ｍｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）およびＮ－ブロモスクシンイミド（１０３ｍｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｃ１（３０２ｍｇ、３４５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２０μＬ、０．６９１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２時間撹拌し、ジエチルアミン（４９μＬ、４８６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２４時間撹拌し、減圧下で濃縮し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；ビス－２，２，２－トリフルオロ酢酸（２５３ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.4 (s, 1H), 8.89 (d, 1H), 8.75 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.08 (大きい, 3H), 7.72 (d, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.45 (d, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.31 (dd, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.21 (t, 2H), 7.15 (d, 1H), 7.15 (t, 1H), 7.04 (t, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.22 (d, 1H), 5.5 (dd, 1H), 5.25 (m, 2H), 4.53 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 4.28 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.62 (m, 1H), 3.43/3.29 (m, 4H), 3.28/2.5 (m, 2H), 3.13/2.94 (m, 4H), 3.01 (m, 2H), 2.9 (br s, 3H), 2.07 (m, 1H), 1.84 (d, 3H), 1.36 (d, 3H), 0.95 (d, 6H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 253, 158.2, 134.3, 131.5, 131.4, 131.4, 131.3, 131, 128.9, 121.1, 120.6, 119.5, 116.3, 115.9, 113, 112.3, 111.1, 74.1, 69.8, 67.5, 58.7, 57.9, 56.5, 55.4, 49.8, 46.5, 45.2, 32.9, 30.4, 18.6, 18.4, 18.3. 19F NMR (470 MHz, dmso-d6): δ -74, -112.6.
ステップ２：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；ビス－２，２，２－トリフルオロ酢酸 Ｌ２２－Ｃ１
ＤＭＦ（０．４ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；ビス－２，２，２－トリフルオロ酢酸（１５０ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）の溶液に、（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノエート（６０ｍｇ、１９４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、減圧下で濃縮し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２２－Ｃ１（６７ｍｇ、３７μｍｏｌ）を得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.14 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.22 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.45 (td, 1H), 7.44 (d, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.31 (dd, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.21 (t, 2H), 7.15 (t, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.02 (t, 1H), 7.01 (d, 1H), 7 (s, 2H), 6.71 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 5.5 (dd, 1H), 5.25 (m, 2H), 4.53 (br s, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 4.19 (dd, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.54 (t, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.43/3.3 (m, 4H), 3.28/2.51 (m, 2H), 3.16/2.98 (m, 4H), 3.04 (m, 2H), 2.91 (br s, 3H), 2.43/2.33 (m, 2H), 1.93 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.31 (d, 3H), 0.87/0.82 (m, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158, 152.8, 135.2, 134, 131.4, 131.3, 131.3, 131.2, 131, 128.9, 120.8, 120.6, 119.3, 116.3, 115.8, 112.4, 112.3, 111.1, 74.2, 69.6, 67.4, 67.4, 67.1, 67, 58.4, 57.9, 56.2, 55.2, 49.7, 46.5, 45.1, 37.1, 36.3, 32.7, 30.9, 19.6, 18.5, 18.2, 18.2. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ -74.6, -112.2.
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：２０００～３５００、１７６０／１７０５、１７３３、１６６８、１１８０／１１２８、８２９／７９８／７５８／７２０／６９６。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３４５．４９４４／１３４５．４９５４（測定値／理論値）
Ｌ９－Ｃ９の調製：
３－［４－［［２－［（２Ｒ）－２－カルボキシ－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－エチル］フェノキシ］メチル］ピリミジン－２－イル］ベンゼンスルホネート；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000472
ステップ１：（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド
ＴＨＦ（４２ｍＬ）中の３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパン酸（８５５ｍｇ、４．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルメタンジイミン（１．０５ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）および１－ヒドロキシピロリジン－２，５－ジオン（５１０ｍｇ、４．４３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２０時間撹拌した。沈殿物を濾過により除去し、濾液をＤＭＦ（４２ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１．２７ｇ、３．３５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を室温で２０時間撹拌し、ジエチルエーテル（２５０ｍＬ）で希釈した。固体を濾過により回収して、（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１．８１ｇ；３．１５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.87 (s, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.53 (d, 2H), 7.21 (d, 2H), 7.00 (s, 2H), 5.95 (t, 1H), 5.39 (s, 2H), 5.07 (t, 1H), 4.41 (d, 2H), 4.34-4.40 (m, 1H), 4.18-4.22 (m, 1H), 3.42-3.65 (m, 4H), 2.88-3.02 (m, 2H), 2.73 (s, 2H), 2.28-2.45 (m, 2H), 1.91-1.99 (m, 1H), 1.53-1.75 (m, 2H), 1.30-1.147 (m, 2H), 0.85 (d, 3H), 0.81 (d, 3H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 171.05, 170.83, 170.32, 170.09, 158.82, 137.49, 137.37, 134.50, 126.88, 118.81, 66.66, 66.53, 62.57, 57.49, 53.06, 36.74, 35.76, 30.51, 29.31, 26.79, 25.20, 19.16, 18.07.
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５７５．２。
ステップ２：（２Ｓ）－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミド
ＴＨＦ（１ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－Ｎ－［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（３７．２ｍｇ、６５μｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、０℃で三臭化リン（４５μＬ、９７ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応物を０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した：アリコートを大過剰のアセトニトリル中モルホリンにより処理し、続いて、対応するモルホリン付加物の形成が生じた。反応物をＴＨＦ（３ｍＬ）で希釈し、２滴のＮａＨＣＯ３の飽和溶液の添加によりクエンチし、室温で５分間撹拌し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した。粗製の（２Ｓ）－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミドを含有する残留物（４５ｍｇ、理論上６５μｍｏｌ）を、次のステップで直ちに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６６２．６２（モルホリン付加物）
ステップ３：３－［４－［［２－［（２Ｒ）－２－カルボキシ－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－エチル］フェノキシ］メチル］ピリミジン－２－イル］ベンゼンスルホネート Ｌ９－Ｃ９
ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（３－スルホフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸 Ｃ９（１５ｍｇ、１６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（１ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（１４μＬ、８１μｍｏｌ）中の（２Ｓ）－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミド（ステップ２からの４５ｍｇの粗製物、理論上６５μｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を室温で撹拌し、５０℃で２時間加熱した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ９－Ｃ９（５．２ｍｇ、３．５μｍｏｌ）を得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４８１．４９１７／１４８１．４８９６（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ１３の調製：
（２Ｒ）－２－［６－（３－アミノ－４，５－ジフルオロ－フェニル）－（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000473
 手順は、Ｌ９－Ｃ９の合成のプロセスの通りであり、ステップ３で使用するＣ９を（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－６－（３－アミノ－４，５－ジフルオロフェニル）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸 Ｃ１３により置き換え、精製にＴＦＡ法を使用する。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.2 (s), 8.9 (d, 1H), 8.6 (s, 1H), 8.12 (d), 7.8 (d), 7.7 (d, 2H), 7.6 (d, 1H), 7.5 (d, 1H), 7.45 (d, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.2 (d, 1H), 7.18 (m, 1H), 7.18 (m, 1H), 7.02 (d, 1H), 7 (s, 2H), 7 (m, 1H), 6.75 (t, 1H), 6.65 (d, 1H), 6.25 (d, 1H), 6.15 (dd, 1H), 5.98 (m, 1H), 5.48 (dd, 1H), 5.4 (br s, 1H), 5.24 (dd, 2H), 4.51 (br s, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.28 (m, 2H), 4.22 (m, 1H), 3.80-3.40 (m, 8H), 3.75 (s, 3H), 3.26 (m, 4H), 3.1 (m, 2H), 2.98 (m, 4H), 2.9 (br s, 3H), 2.9/2.5 (2m, 2H), 2.43/2.3 (2m, 2H), 1.92 (m, 1H), 1.88 (s, 3H), 1.70-1.30 (m, 4H), 0.82 (2d, 6H). 19F NMR (470 MHz, dmso-d6): δ -74.3, -139.3, -160.4.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４６４．５４８２／１４６４．５４４９（測定値／理論値）。
Ｌ１４－Ｃ３の調製：
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－［２－［（５Ｓａ）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］ピペラジン－１－カルボニル］オキシメチル］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸
Figure 2022532918000474
ステップ１：２－ヨード－４－ニトロ－安息香酸
アセトニトリル（２８０ｍＬ）中の２－アミノ－４－ニトロ－安息香酸（１０．０ｇ、５４．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（３２．０ｇ、１６８．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで、水（１４０ｍＬ）に溶解した亜硝酸ナトリウム（８．００ｇ、１１５．９ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（２４．０ｇ、１４４．６ｍｍｏｌ）の溶液を１５分間で滴下添加した。反応混合物を１９時間撹拌した。反応の完了後、混合物をチオ硫酸ナトリウム（１３．０２ｇ、８２．３６ｍｍｏｌ）でクエンチし、塩化水素３Ｍの水溶液（２５ｍＬ）で酸性化した。水層を酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を塩化水素１Ｍの水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。得られた残留物をジクロロメタン（１Ｌ）に溶かし、ＨＣｌ １Ｍの水溶液（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、２－ヨード－４－ニトロ－安息香酸（１５．０ｇ、５１．２ｍｍｏｌ）を橙色粉末として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 13.8 (br s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 7.86 (d, 1H).
ステップ２：（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メタノール
ＴＨＦ（７０ｍＬ）中の２－ヨード－４－ニトロ－安息香酸（５．０ｇ、１７．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中ボラン１Ｍの溶液（８５ｍＬ、８５．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６５℃で４時間撹拌した。反応の完了後、反応混合物を室温に冷却し、メタノール（２００ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メタノール（３．３８ｇ、１２．１１ｍｍｏｌ）を黄色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 8.54 (d, 1H), 8.29 (dd, 1H), 7.70 (d, 1H), 5.82 (t, 1H), 4.47 (d, 2H).
ステップ３：（４－アミノ－２－ヨード－フェニル）メタノール
エタノール（１００ｍＬ）および水（２５ｍＬ）中の（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メタノール（３．７０ｇ、１３．２６ｍｍｏｌ）の溶液に、鉄（３．７０ｇ、６６．２５ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム（８００ｍｇ、１４．９６ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を８０℃で３時間撹拌した。反応の完了後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、エタノールで洗浄し、濃縮乾固した。得られた残留物を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶かし、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、（４－アミノ－２－ヨード－フェニル）メタノール（２．４８ｇ、９．９５ｍｍｏｌ）を黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.02-7.10 (m, 2H), 6.57 (d, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.97 (t, 1H), 4.28 (d, 2H).
ステップ４：４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリン
ジクロロメタン（１５０ｍＬ）中の（４－アミノ－２－ヨード－フェニル）メタノール（３．５１ｇ、１３．３７ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（０．９５ｇ、１３．９５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、次いでジクロロメタン（１５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル－クロロ－ジメチル－シラン（２．４０ｍＬ、１３．８５ｍｍｏｌ）の溶液を１５分間かけて滴下添加した。氷浴を取り外し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応の完了後、反応混合物をメタノール（２０ｍＬ）でクエンチし、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリン（３．６４ｇ；１０．０３ｍｍｏｌ；７５％）を黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.05 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.55 (d, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.06 (s, 6H).
ステップ５：（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパン酸
水（９０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－アミノプロパン酸（３．２２ｇ、３６．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸ナトリウム（７．２９ｇ、６８．７４ｍｍｏｌ）、およびジメトキシエタン（９０ｍＬ）中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノエート（１５．０ｇ、３４．３７ｍｍｏｌ）の溶液を連続的に添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応の完了後、混合物を塩化水素１Ｍの水溶液でｐＨ＝１まで酸性化し、次いで水層を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、粗混合物を得、これをジエチルエーテル（５０ｍＬ）で摩砕して、（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパン酸（１１．２５ｇ、２７．４１ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ 12.48 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.72-7.79 (m, 2H), 7.28-7.46 (m, 5H), 4.15-4.32 (m, 4H), 3.90 (t, 1H), 1.90-2.02 (m, 1H), 1.28 (d, 3H), 0.86-0.90 (m, 6H).
ステップ６：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ジクロロメタン（１８ｍＬ）およびメタノール（１８ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパン酸（１．５０ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリン（１．３３ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）およびエチル２－エトキシ－２Ｈ－キノリン－１－カルボキシレート（１．３６ｇ、５．４８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。無色懸濁液を室温で１６時間撹拌した。濃縮乾固した後、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により、次いでＣ１８クロマトグラフィー（水中メタノールの勾配）により精製して、９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（１．１８ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.05 (s, 1H). 8.16-8.24 (m, 2H), 7.88 (d, 2H), 7.71-7.77 (m, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.37-7.48 (m, 3H), 7.27-7.37 (m, 3H), 4.56 (s, 2H), 4.38 (t, 1H), 4.18-4.33 (m, 3H), 3.91 (t, 1H), 2.08-2.20 (m, 1H), 1.30 (d, 3H), 0.83-0.95 (m, 15H), 0.06 (s, 6H).
ステップ７：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－オン
ＤＭＳＯ（１２０ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－オール（３０．０ｇ、５５．４９ｍｍｏｌ）の懸濁液を室温で３０分間撹拌し（完全な可溶化まで）、次いで無水酢酸（９０ｍＬ）を室温で１５分間かけて滴下添加した。ベージュ色溶液を１６時間撹拌し、次いで０℃に冷却し、塩化水素１Ｍの水溶液（１００ｍＬ）をゆっくりと添加した。反応混合物を室温で２０分間撹拌し、次いで酢酸を蒸発させた。得られた残留物を水（２００ｍＬ）および酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。水層を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水（２×５００ｍＬ）、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液（２×５００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、粗混合物を得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－オン（２５．０５ｇ、４６．５１ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.19-7.39 (m, 20H), 4.85 (d, 1H), 4.57-4.72 (m, 5H), 4.46-4.56 (m, 3H), 4.36 (d, 1H), 3.98-4.05 (m, 1H), 3.84-3.92 (m, 1H), 3.65-3.76 (m, 2H).
ステップ８：（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）－２－（２－トリメチルシリルエチニル）テトラヒドロピラン－２－オール
ＴＨＦ（３２５ｍＬ）中のトリメチルシリルアセチレン（２４ｍＬ、１６８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、－７８℃にて２０分間でヘキサン中ブチルリチウム２．５Ｍの溶液（５９．４１ｍＬ、１４８．５ｍｍｏｌ）を添加した。無色溶液を－７８℃で４５分間、次いで０℃で４５分間撹拌した。反応混合物を－７８℃に冷却し、ＴＨＦ（３２５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－オン（２５．０ｇ、４６．４１ｍｍｏｌ）の溶液を４５分間かけて滴下添加した。反応混合物をこの温度で４時間撹拌し、次いで水（２００ｍＬ）でクエンチした。水層を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）－２－（２－トリメチルシリルエチニル）テトラヒドロピラン－２－オール（２９．５６ｇ、４６．４１ｍｍｏｌ）を、２つのジアステレオ異性体を４／６の比で含有するベージュ色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.13-7.43 (m, 20H), 4.87-4.99 (m, 1H), 4.65-4.83 (m, 4H), 3.43-3.57 (m, 3H), 3.70-3.85 (m, 2H), 3.55-3.68 (m, 3H), 3.43-3.53 (m, 2H), 0.11-0.22 (m, 9H).
ステップ９：トリメチル－［２－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－イル］エチニル］シラン
アセトニトリル（８３ｍＬ）およびジクロロメタン（１９３ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）－２－（２－トリメチルシリルエチニル）テトラヒドロピラン－２－オール（２９．５６ｇ、４６．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、アセトニトリル／ジクロロメタンの混合物（３７ｍＬ／１８ｍＬ）中のトリエチルシラン（４４．９８ｍＬ、２７８．５ｍｍｏｌ）の溶液を－１５℃にて２０分間で、続いてアセトニトリル（３７ｍＬ）中の三フッ化ホウ素ジエチルエーテレート（２３．５３ｍＬ、１８５．７ｍｍｏｌ）の溶液を－１５℃で３０分間かけて添加した。無色溶液を同じ温度で５時間撹拌し、次いで水（５００ｍＬ）で希釈した。水層を酢酸エチル（２×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、トリメチル－［２－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－イル］エチニル］シラン（２８．８２ｇ、４６．４１ｍｍｏｌ）を褐色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.10-7.44 (m, 20H), 4.93 (d, 1H), 4.67-4.86 (m, 4H), 4.43-4.57 (m, 3H), 4.16-4.28 (m, 1H), 3.42-3.68 (m, 6H), 0.15 (s, 9H).
ステップ１０：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－２－（ベンジルオキシメチル）－６－エチニル－テトラヒドロピラン
メタノール（１．１２Ｌ）およびジクロロメタン（２４０ｍＬ）中のトリメチル－［２－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－６－（ベンジルオキシメチル）テトラヒドロピラン－２－イル］エチニル］シラン（２８．８０ｇ、４６．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化ナトリウム１Ｍの水溶液（８０ｍＬ）を添加した。ベージュ色溶液を室温で１時間撹拌し、次いで塩化水素１Ｍの水溶液でｐＨ＝１まで酸性化し、水（５００ｍＬ）で希釈した。メタノールを蒸発させ、次いで水層を酢酸エチル（２×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－２－（ベンジルオキシメチル）－６－エチニル－テトラヒドロピラン（２０．００ｇ、３６．４５ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 3.42-3.67 (m, 7H), 4.17 (d, 1H), 4.44-4.56 (m, 3H), 4.67-4.86 (m, 4H), 4.90 (d, 1H), 7.15-7.40 (m, 20H).
ステップ１１：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－２－エチニル－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン－３，４，５－トリオール
エタンチオール（４００ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリベンジルオキシ－２－（ベンジルオキシメチル）－６－エチニル－テトラヒドロピラン（２０．００ｇ、３６．４５ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で５分間かけて三フッ化ホウ素ジエチルエーテレート（１４７．８ｍＬ、１１６６ｍｍｏｌ）を滴下添加した。ベージュ色溶液を室温で１６時間撹拌し、次いで０℃に冷却し、次亜塩素酸ナトリウムの飽和水溶液を含有するガストラップを備え付けた。炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（５００ｍＬ）を０℃にて１時間で滴下添加した（二酸化炭素の形成）。濃縮乾固した後、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－２－エチニル－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン－３，４，５－トリオール（４．０５ｇ、２１．５２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 5.28 (d, 1H), 4.99 (d, 1H), 4.91 (d, 1H), 4.52 (t, 1H), 3.77 (d, 1H), 3.60-3.69 (m, 1H), 3.35-3.43 (m, 1H), 3.32 (s, 1H), 2.97-3.13 (m, 4H).
ステップ１２：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－エチニル－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（８１ｍＬ）およびＴＨＦ（８１ｍＬ）中の（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－２－エチニル－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロピラン－３，４，５－トリオール（４．０５ｇ、２１．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、（２，２，６，６－テトラメチルピペリジン－１－イル）オキシル（１６８ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を添加した。黄色懸濁液を０℃に冷却し、１，３－ジブロモ－５，５－ジメチル－イミダゾリジン－２，４－ジオン（１２．３１ｇ、４３．０４ｍｍｏｌ）を少量ずつ３０分間で添加した。反応混合物を０℃で４時間撹拌し、次いでメタノール（４０ｍＬ）の添加によりクエンチした。この温度で３０分間撹拌した後、炭酸カリウムの飽和水溶液（１０ｍＬ）およびジクロロメタン（１００ｍＬ）を添加した。有機層を水（２×２００ｍＬ）で抽出し、次いで、合わせた水層を塩化水素３Ｍの水溶液でｐＨ＝１まで酸性化し、濃縮乾固した。得られた残留物をメタノール（１００ｍＬ）および塩化水素３Ｍの水溶液（２０ｍＬ）に溶かした。混合物を濃縮乾固し、メタノール（４×１００ｍＬ）と数回共蒸発させた。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン セリウムディベロッパー（Cerium developer）中メタノールの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－エチニル－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（３．００ｇ、１３．８８ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 5.46 (d, 1H), 5.32 (d, 1H), 5.18 (d, 1H), 3.93-4.00 (m, 1H), 3.75 (dd, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.40-3.44 (m, 1H), 3.31 (s, 1H), 3.09-3.19 (m, 2H).
ステップ１３：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－エチニル－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＤＭＦ（３７．５ｍＬ）およびピリジン（１２．５ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－エチニル－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（３．００ｇ、１３．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルピリジン－４－アミン（８４．８ｍｇ、０．６９３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、次いで無水酢酸（２０．０ｍＬ、２１３ｍｍｏｌ）を５分間で滴下添加した。無色溶液を室温で３時間撹拌し、次いで塩化水素１Ｍの水溶液（２００ｍＬ）で希釈した。水層を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を塩化水素１Ｍの水溶液（２×２００ｍＬ）、続いて炭酸カリウムの飽和水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、粗混合物を得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン セリウムディベロッパー中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－エチニル－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（４．６０ｇ、１３．４４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 5.33 (t, 1H), 4.93-5.01 (m, 2H), 4.70 (d, 1H), 4.44 (d, 1H), 3.67 (s, 1H), 3.64 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.94-2.01 (m, 6H).
ステップ１４：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＤＭＦ（７．３ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－エチニル－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（４９６ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）の溶液に、９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（７３０ｍｇ、０．９６６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７３８μＬ、４．４７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１８．４ｍｇ、９６．６ｍｍｏｌ）およびジクロロ－ビス－（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（６７．８ｍｇ、９６．６ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。黄色溶液をアルゴンでフラッシュし、次いで室温で１６時間撹拌した。水（１００ｍＬ）で希釈した後、水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×２００ｍＬ）、および塩化アンモニウムの飽和水溶液（２×２００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（７８２ｍｇ、０．８０６ｍｍｏｌ）を黄色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.09 (s, 1H). 8.20 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.70-7.78 (m, 3H), 7.55 (d, 1H), 7.32-7.46 (m, 4H), 7.27-7.32 (m, 2H), 5.41 (t, 1H), 4.96-5.14 (m, 3H), 4.67 (s, 2H), 4.51 (d, 1H), 4.36-4.44 (m, 1H), 4.16-4.32 (m, 3H), 3.88-3.95 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 1.94-2.07 (m, 10H), 1.30 (d, 3H), 0.84-0.93 (m, 15H), 0.08 (s, 6H).
ステップ１５：メチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（７５０ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴンでフラッシュした。炭素上乾燥白金５％（７５ｍｇ、５０％ｗ／ｗ）を添加した。反応混合物をアルゴン、Ｈ２で連続的にフラッシュし、Ｈ２雰囲気（Ｐ ａｔｍ）下、室温で１６時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドに通して濾過し、ＴＨＦで洗浄し、次いで濃縮乾固した。完全なシーケンス（炭素上乾燥白金５％（７５ｍｇ、５０％ｗ／ｗ）の添加、Ｈ２雰囲気（１ｂａｒ）下、室温で１６時間の撹拌、およびＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドに通して濾過）を、さらに４回行った。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（４７０ｍｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.90 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.70-7.78 (m, 2H), 7.37-7.49 (m, 4H), 7.27-7.32 (m, 3H), 7.23 (d, 1H), 5.29 (t, 1H), 4.95 (t, 1H), 4.78 (t, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.34-4.44 (m, 2H), 4.16-4.32 (m, 3H), 3.88-3.95 (m, 1H), 3.72-3.79 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 2.69-2.78 (m, 1H), 2.50-2.60 (m, 1H), 1.92-2.03 (m, 10H), 1.55-1.75 (m, 2H), 1.30 (d, 3H), 0.84-0.93 (m, 15H), 0.05 (s, 6H).
ステップ１６：メチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＴＨＦ（５４０μＬ）および水（５４０μＬ）中のメチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（４７０ｍｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（１．６ｍＬ、２８．２８ｍｍｏｌ）を添加した。無色溶液を室温で１６時間撹拌し、次いで水（１００ｍＬ）で希釈した。水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×２００ｍＬ）、および炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（３５４ｍｇ、０．４１２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.87 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.70-7.78 (m, 2H), 7.37-7.50 (m, 4H), 7.27-7.37 (m, 3H), 7.25 (d, 1H), 5.29 (t, 1H), 4.91-4.98 (m, 2H), 4.78 (t, 1H), 4.34-4.44 (m, 4H), 4.16-4.32 (m, 3H), 3.88-3.95 (m, 1H), 3.72-3.79 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 2.64-2.73 (m, 1H), 2.50-2.60 (m, 1H), 1.92-2.03 (m, 10H), 1.69-1.79 (m, 1H), 1.52-1.65 (m, 1H), 1.30 (d, 3H), 0.84-0.93 (m, 6H).
ステップ１７：メチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＴＨＦ（７．７５ｍＬ）中のメチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（３１０ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（１４６μＬ、１．８０ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸４－ニトロフェニル（１８２ｍｇ、０．９０１ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。白色懸濁液を室温で１６時間撹拌し、次いで濃縮乾固して、粗混合物を得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（２５７ｍｇ、０．２５１ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.04 (s, 1H), 8.31 (d, 2H), 8.20 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.66-7.78 (m, 2H), 7.56 (d, 2H), 7.28-7.52 (m, 8H), 5.31 (t, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.96 (t, 1H), 4.79 (t, 1H), 4.40 (d, 2H), 4.16-4.32 (m, 3H), 3.88-3.95 (m, 1H), 3.74-3.83 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.74-2.84 (m, 1H), 2.60-2.71 (m, 1H), 1.90-2.03 (m, 10H), 1.72-1.83 (m, 1H), 1.58-1.71 (m, 1H), 1.30 (d, 3H), 0.82-0.94 (m, 6H).
ＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１０４７．６。
ステップ１８：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［２－［（２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＳＲ，６ＳＲ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ジメチルホルムアミド（３．０ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（Ｃ３）（１１８ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）の溶液に、ジメチルホルムアミド（３．０ｍＬ）中のメチル（３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（１３０ｍｇ、０．１２７ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（６０μＬ、０．３６３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［２－［（２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＳＲ，６ＳＲ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸をジメチルホルムアミド中溶液として得、このまま次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１７４５．６＋１７４７．６。
ステップ１９：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［２－［（２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＳＲ，６ＳＲ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ステップ１８からのＤＭＦ（３．０ｍＬ）中の２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＲＳ，６ＳＲ）－６－［２－［（５Ｓａ）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］ピペラジン－１－カルボニル］オキシメチル］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸（０．１２１ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール（２ｍＬ）、および水（２ｍｌ）に溶解した水酸化リチウム一水和物（６４．０ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［２－［（２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＳＲ，６ＳＲ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１２４ｍｇ、０．０８９５ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３８４．３＋１３８６．３。
ステップ２０：（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］酢酸
ＴＨＦ（５００μＬ）に溶解した２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］酢酸（７５ｍｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（５００μＬ）中の２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェノール（７５．５ｍｇ、０．４１０ｍｍｏｌ）の溶液、およびＴＨＦ（５００μＬ）中のＮ，Ｎ’－ジシクロヘキシルメタンジイミン（８４．７ｍｇ、０．４１０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。小さい使い捨てのフリット上での懸濁液の簡単な濾過により、（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテートをＴＨＦ溶液として得た。この溶液をさらに精製することなく次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ－Ｎ２＋Ｈ］＋＝３７２．３。
ステップ２１：（２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＲＳ，６ＳＲ）－６－［２－［（５Ｓａ）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］ピペラジン－１－カルボニル］オキシメチル］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸 Ｌ１４－Ｃ３
ＤＭＦ（５００μＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［２－［（２ＳＲ，３ＳＲ，４ＲＳ，５ＳＲ，６ＳＲ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１１８ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）の溶液に、ステップ２０からのＴＨＦ中の（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート（０．３４２ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（４２．２μＬ、０．２５６ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１４－Ｃ３を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５９９．０＋１６０１．２。ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３２６３、２１０５、１６５２、１６００、１２８４／１２４０／１０８９、７５６。1H NMR(400 MHz, dmso-d6): δ 9.98 (s), 8.85 (d, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.5 (t, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.3 (dd, 2H), 7.22 (d, 1H), 7.2 (t, 2H), 7.19 (t, 1H), 7.13 (d, 1H), 7.08 (t, 1H), 7.02 (t, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.65 (t, 1H), 6.11 (d, 1H), 5.43 (d, 1H), 5.27/5.2 (m, 2H), 4.93 (br s, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.35/4.2 (2m, 2H), 4.3 (m, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.58 (m, 10H), 3.57 (m, 1H), 3.51/2.29 (2dd, 2H), 3.35 (m, 2H), 3.25 (m, 4H), 3.2 (m, 1H), 3.2 (m, 1H), 3.06 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.72/2.5 (m, 2H), 2.41 (m, 4 H), 2 (m, 1H), 1.99/1.6 (m, 2H), 1.8 (s, 3H), 1.3 (d, 3H), 0.88/0.82 (2d, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158.2, 152.7, 131.9, 131.4, 131.4, 131.3, 131.1, 131, 127.8, 120.6, 120.5, 120.1, 116.8, 116.3, 116, 112.6, 112, 111.6, 79.6, 79.6, 78.5, 76.8, 74.2, 73.1, 70.3, 70.3, 69.3, 66.3, 65.1, 56.8, 56.3, 56.1, 52.6, 50.3, 49.4, 43.8, 34.2, 33.5, 31.7, 28, 19.6/18.4, 18.2, 18. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ -112.5.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５９９．５７２４（１５９９．５７０４）（測定値／理論値）
Ｌ１８－Ｃ３の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｒ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－スルホ－プロパノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000475
ステップ１：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ジクロロメタン（７０ｍＬ）およびメタノール（３０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパン酸（６．０ｇ、１４．６ｍｍｏｌ；Ｌ１４－Ｃ３の調製のステップ５に従って得た）の溶液に、（４－アミノフェニル）メタノール（２．１６ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）およびエチル２－エトキシ－２Ｈ－キノリン－１－カルボキシレート（５．４２ｇ、２１．９３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。赤色溶液を室温で１６時間撹拌した（数分後に沈殿）。反応の完了後、反応混合物をジエチルエーテル（７０ｍＬ）で希釈した。得られた沈殿物を濾別し、乾燥させて、９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（５．１６ｇ、１０．０１ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.91 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.70-7.78 (m, 2H), 7.53 (d, 2H), 7.38-7.46 (m, 3H), 7.29-7.35 (m, 2H), 7.23 (d, 2H), 5.08 (t, 1H), 4.37-4.50 (m, 3H), 4.16-4.34 (m, 3H), 3.91 (t, 1H), 1.92-2.02 (m, 1H), 1.30 (d, 3H), 0.83-0.91 (m, 6H).
ステップ２：（２Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミド
ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（５．１６ｇ、１０．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（５２ｍＬ、５２５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いでピペリジンを蒸発させ、得られた溶液を水（５００ｍＬ）で希釈した。得られた固体を濾別し、濾液をジエチルエーテル（２×５００ｍＬ）で２回洗浄した。水層を濃縮乾固して、粗反応混合物を得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノール（７Ｍアンモニアを含有）の勾配）により精製して、（２Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミド（２．０２ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.0 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.53 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 5.12 (t, 1H), 4.39-4.52 (m, 3H), 2.96-3.02 (m, 1H), 1.86-1.97 (m, 1H), 1.70 (br s, 2H), 1.29 (d, 3H), 0.88 (d, 3H), 0.78 (d, 3H).
ステップ３：［（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－オキソ－３－ソジオオキシ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム
水（１２７ｍＬ）中の［（２Ｒ）－２－アミノ－３－オキソ－３－ソジオオキシ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム一水和物（３．００ｇ、１２．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸ナトリウム（４．１３ｇ、３８．９４ｍｍｏｌ）を添加した。ジオキサン（１２７ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルカルボノクロリデート（３．６９ｇ、１４．２８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温にて１５分間で滴下添加した。混合物をこの温度で４時間撹拌した。反応の完了後、混合物をＨＣｌ １Ｍの水溶液でｐＨ＝７に中和し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（５０ｍＬ）で希釈し、濃縮乾固した。粗生成物を、中性法を使用するＣ１８逆相クロマトグラフィーにより精製して、［（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－オキソ－３－ソジオオキシ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム（４．４ｇ、１０．１１ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.88 (d, 2H). 7.70 (d, 2H), 7.39-7.44 (m, 2H), 7.29-7.36 (m, 2H), 6.71 (s, 1H), 3.84-4.25 (m, 4H), 2.73-2.91 (m, 2H).
ステップ４：［（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－［［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］アミノ］－３－オキソ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム
ＤＭＦ（３９５ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］－３－メチル－ブタンアミド（１．１９ｇ、４．０４ｍｍｏｌ）の溶液に、［（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－オキソ－３－ソジオオキシ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム（４．４０ｇ、１０．１１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６．０１ｍＬ、３６．３８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（３．８３ｇ、１０．１１ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。白色懸濁液を室温で２２時間撹拌し、次いで０℃に冷却した。水（１．５Ｌ）、炭酸ナトリウムの飽和溶液（２０ｍＬ）および固体塩化ナトリウムで希釈して、白色エマルションを得、これを濾過し、濾液を濃縮乾固して、粗混合物を得た。粗生成物を逆相Ｃ１８クロマトグラフィー（水中メタノールの勾配）により精製して、［（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－［［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］アミノ］－３－オキソ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム（９３６ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.39 (s, 1H). 8.25-8.31 (m, 1H), 8.11-8.17 (m, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 7.50-7.55 (m, 1H), 7.38-7.46 (m, 2H), 7.29-7.35 (m, 2H), 7.20 (d, 2H), 5.07 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.19-4.33 (m, 4H), 4.01 (s, 1H), 2.90-3.10 (m, 2H), 2.08-2.20 (m, 1H), 1.31 (d, 3H), 0.8-0.93 (m, 6H).
ステップ５：（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－［［（１Ｓ）－２－メチル－１－［［（１Ｓ）－１－メチル－２－［４－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］アニリノ］－２－オキソ－エチル］カルバモイル］プロピル］アミノ］－３－オキソ－プロパン－１－スルホネート
ＴＨＦ（２４ｍＬ）中の［（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－［［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（ヒドロキシメチル）アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］アミノ］－３－オキソ－プロピル］スルホニルオキシナトリウム（６００ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（４３２μＬ、２．６１ｍｍｏｌ）、続いてクロロギ酸４－ニトロフェニル（４３９ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で４時間撹拌した。追加のクロロギ酸４－ニトロフェニル（４３９ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温でさらに１６時間撹拌した。追加のクロロギ酸４－ニトロフェニル（４３９ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を添加した。室温で５時間撹拌した後、混合物を濃縮乾固し、シリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により、次いで中性法を使用する逆相Ｃ１８クロマトグラフィーにより精製して、（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－［［（１Ｓ）－２－メチル－１－［［（１Ｓ）－１－メチル－２－［４－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］アニリノ］－２－オキソ－エチル］カルバモイル］プロピル］アミノ］－３－オキソ－プロパン－１－スルホネート（３０３ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.52 (s, 1H), 8.25-8.37 (m, 3H), 8.06-8.24 (m, 4H), 7.89 (d, 2H), 7.76 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 7.49-7.61 (m, 3H), 7.35-7.45 (m, 4H), 7.26-7.35 (m, 2H), 5.23 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 4.20-4.33 (m, 4H), 4.01 (s, 1H), 3.57-3.66 (m, 2H), 3.10-3.18 (m, 2H), 2.90-3.10 (m, 2H), 2.08-2.20 (m, 1H), 1.33 (d, 3H), 1.21-1.26 (m, 15H), 0.86-0.92 (m, 6H).
ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ－Ｈ］－：８３０．５。
ステップ６：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）ブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロ酢酸（Ｃ３）（１２８ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－［［（１Ｓ）－２－メチル－１－［［（１Ｓ）－１－メチル－２－［４－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］アニリノ］－２－オキソ－エチル］カルバモイル］プロピル］アミノ］－３－オキソ－プロパン－１－スルホネート（１５０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（７７μｌ、０．４６８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）ブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸をジメチルホルムアミド中溶液として得、これをこのまま次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５５３．２＋１５５５．３。
ステップ７：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
前のステップで得たジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）ブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（０．１５６ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（３０．６μＬ、０．３１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１４８ｍｇ＝０．１１１ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３３１．４＋１３３３．５。
ステップ８：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］ブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロ酢酸 Ｌ１８－Ｃ３
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノブタノイル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１４８ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（１ｍＬ）中の（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート（０．５９６ｍｍｏｌ；Ｌ１４－Ｃ３の調製のステップ２０に従って得た）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（７４μＬ、０．４４７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１８－Ｃ３（６０ｍｇ、０．０３８９ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３２８８、２１０１、１６５９、１２３７，１０３９、８３３、７５５。1H NMR(400 MHz, dmso-d6): δ (m, 10H), 9.42 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.7 (d, 2H), 7.54 (dd, 1H), 7.46 (td, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.25 (d, 2H), 7.21 (t, 2H), 7.18 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.13 (t, 1H), 7.04 (t, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.71 (t, 1H), 6.22 (d, 1H), 5.47 (m, 1H), 5.23 (AB, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.71 (q, 1H), 4.3 (m, 1H), 4.24/4.19 (2m, 2H), 3.97 (dd, 1H), 3.92 (m, 2H), 3.76 (s, 3 H), 3.37 (t, 2H), 3.31 (m, 4H), 3.12/2.97 (2dd, 2H), 2.74 (t, 2H), 2.45 (m, 4H), 2.15 (m, 1H), 1.81 (s, 3H), 1.33 (d, 3H), 0.91 (2d, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 157.9, 152.3, 131.3, 131.2, 131.1, 131, 130.7, 128.9, 128.6, 120.7, 120.4, 119.6, 116.4, 112.7, 112, 111.3, 70.6, 70.3, 69.4, 67.5, 66.3, 59.7, 56.7, 56.1, 53.4, 52.5, 50.8, 50.4, 49.9, 44, 29.9, 19.6, 17.8, 17.6. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ ppm 112.3.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５４６．５０３（１５４６．５００９）（測定値／理論値）。
Ｌ１６－Ｃ３の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－６－アミノ－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000476
ステップ１：（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサン酸
水（３０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－アミノ－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサン酸（２．９６ｇ、１２ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（１．０１ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジメトキシエタン（３０ｍＬ）中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノエート（５．０ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、ＴＨＦ（１５ｍＬ）を、溶解性を向上させるために添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。塩酸１Ｍの水溶液（１５ｍＬ）を添加し、水層を酢酸エチル（３×７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固して、粗化合物を得た。超音波処理しながらジクロロメタン／ペンタン中で摩砕して、（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサン酸（４．９ｇ、８．６３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 12.48 (s, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.74 (t, 2H), 7.28-7.44 (m, 6H), 6.73 (s, 1H), 4.10-4.33 (m, 5H), 3.9 (t, 1H), 2.82-2.90 (m, 2H), 1.52-1.73 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.22-1.31 (m, 4H), 0.83-0.91 (m, 6H).
ステップ２：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［１－［［（１Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］カルバモイル］ペンチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ジクロロメタン（１９ｍＬ）およびメタノール（９．５ｍＬ）中の（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサン酸（１．５ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール（１．５ｍＬ）中の（４－アミノフェニル）メタノール（６５１．０ｍｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、エチル２－エトキシ－２Ｈ－キノリン－１－カルボキシレート（１．３１ｇ、５．２８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［１－［［（１Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］カルバモイル］ペンチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（５４４ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を淡赤色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.93 (s, 1H). 8.01 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.74 (t, 2H), 7.52 (d, 2H), 7.37-7.45 (m, 3H), 7.32 (t, 2H), 7.22 (d, 2H), 6.71 (s, 1H), 5.08 (br s, 1H), 4.43 (d, 2H), 4.21-4.40 (m, 4H), 3.92 (t, 1H), 2.83-2.91 (m, 2H), 1.94-2.01 (m, 1H), 1.55-1.74 (m, 2H), 1.21-1.42 (m, 4H), 1.33 (s, 9H), 0.87 (t, 6H).
ステップ３：［４－［［（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート
ＴＨＦ（１９ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［１－［［（１Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）フェニル］カルバモイル］ペンチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（６００．０ｍｇ、０．８９２ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（３６１μＬ、４．４６ｍｍｏｌ）、次いでクロロギ酸４－ニトロフェニル（４４８ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、［４－［［（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（５２４ｍｇ；０．６２ｍｍｏｌ；７０％）を淡桃色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.13 (s, 1H), 8.31 (d, 2H), 8.1 (d, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.74 (t, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.28-7.45 (m, 7H), 6.72 (s, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.35-4.42 (m, 1H), 4.27-4.33 (m, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.92 (t, 1H), 2.83-2.91 (m, 2H), 1.96-2.00 (m, 1H), 1.58-1.73 (m, 2H), 1.20-1.30 (m, 4H), 1.33 (s, 9H), 0.86 (t, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ171.22, 170.67, 156.1, 155.5, 155.27, 151.92, 145.15, 143.87, 143.75, 140.68, 139.34, 129.43, 129.31, 127.6, 127.03, 125.38, 125.32, 122.58, 120.07, 119.11, 77.28, 70.23, 65.67, 60.11, 54.89, 53.43, 46.67, 31.69, 30.39, 29.22, 28.23, 22.74, 19.19, 18.26.
ＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝８３７．４。
ステップ４：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｃ３（１６６．３ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の［４－［［（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メチル（４－ニトロフェニル）カーボネート（１５０ｍｇ、０．１７９ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（８５μｌ、０．５１０ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１３４ｍｇ、０．０８５９ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５５９．１＋１５６１．３、［Ｍ＋Ｎａ］＋：１５８１．０＋１５８３．２。ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３３０９、１６９８、１２３８、１１６２、７５７、７４４。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.05 (s, 1H), 8.87 (d, 1H), 8.6 (m, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.88 (d, 2H), 7.74 (2d, 2H), 7.64 (m, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.52 (dd, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.4 (t, 2H), 7.35 (d, 1H), 7.3 (t, 2H), 7.3 (dd, 2H), 7.26 (d, 2H), 7.2 (t, 2H), 7.18 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.12 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.71 (m, 1H), 6.24 (d, 1H), 5.49 (dd, 1H), 5.23 (m, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.29/4.23 (m, 2H), 4.22 (m, 1H), 4.2 (m, 2H), 3.92 (dd, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.29 (m, 4H), 3.29/2.5 (2dd, 2H), 2.87 (m, 2H), 2.74 (t, 2H), 2.45 (m, 4H), 1.99 (m, 1H), 1.82 (s, 3 H), 1.68/1.6 (2m, 2H), 1.36/1.28 (2m, 4H), 1.32 (s, 9H), 0.86 (2d, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 158, 131.4, 131.2, 131.2, 131, 130.8, 128.9, 128.5, 127.9, 127.5, 125.6, 120.8, 120.5, 120.4, 119.3, 116, 115.9, 112.4, 112.2, 111.2, 74.1, 69.2, 67.9, 66.7, 66.2, 60.6, 56.6, 56.2, 53.8, 53, 47.1, 43.7, 40, 32.6, 32.2, 30.6, 29.8/23.2, 28.5, 18.8, 18.1. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ -112.
ステップ５：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１３４ｍｇ、０．０８５９ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（１７μＬ、０．１７２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（８８ｍｇ、０．０６５８ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３３７．４＋１３３９．４、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１３５９．４＋１３６１．４。ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３３０７、１６８３、１２９０、１２３８、１１６２、８３５、７５４。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 10.23 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.53 (m, 1H), 8.47 (br, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.27 (dd, 2H), 7.25 (d, 2H), 7.19 (t, 2H), 7.18 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.08 (t, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.96 (t, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.67 (t, 1H), 6.14 (d, 1H), 5.42 (d, 1H), 5.21 (m, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.4 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.42/2.35 (m, 2H), 3.29 (m, 4H), 3.24 (m, 1H), 2.87 (q, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.43 (m, 4H), 1.99 (m, 1H), 1.78 (s, 3H), 1.7/1.61 (2m, 2H), 1.36 (m, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.26 (m, 2H), 0.89/0.82 (2d, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ ppm 158.4, 131.3, 131.2, 131.1, 131, 128.4, 128, 120.8, 120.6, 120.4, 119.7, 116.1, 115.9, 112.7, 111.7, 111.2, 76.2, 69.2, 67.4, 66.3, 59.2, 56.6, 56.3, 53.6, 53.1, 43.8, 40.1, 33.2, 32.4, 31.3, 29.3, 28.8, 22.9, 19.7/17.5, 17.9. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ ppm -112.4.
ステップ６：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（５００μＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（８２ｍｇ、０．０６１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中の（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート（０．２４５ｍｍｏｌ；Ｌ１４－Ｃ３の調製のステップ２０に従って得た）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（３０．４μＬ、０．１８４ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（６０ｍｇ、０．０３８６ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５５２．２＋１５５４．２、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１５７４．１＋１５７６．３。
ステップ７：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－６－アミノ－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｌ１６－Ｃ３
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノイル］アミノ］フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（２３ｍｇ、０．０１４８ｍｍｏｌ）の溶液に、２，２，２－トリフルオロ酢酸（４００μｌ、４．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ１６－Ｃ３（５ｍｇ、０．００３４４ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５５２．４＋１５５４．５、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１５７４．４＋１５７６．４。ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３２５０、２２５０～３５００、２１０２、１６６０、１２８８、１２３８、１１２１、８３３、７５５。1H NMR(400 MHz, dmso-d6): δ ppm 10.24 (s, 1H), 8.85 (d, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.49 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.6 (d, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.5 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.26 (d, 2H), 7.25 (dd, 2H), 7.18 (t, 2H), 7.17 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.05 (t, 1H), 7.02 (t, 1H), 6.89 (d, 1H), 6.6 (t, 1H), 6.05 (d, 1H), 5.32 (d, 1H), 5.21/5.15 (m, 2H), 5.02/4.96 (m, 2H), 4.36 (q, 1H), 4.31 (dd, 1H), 4.2 (m, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.77 (s, 3 H), 3.58 (m, 10 H), 3.46/2.28 (d+t, 2H), 3.34 (t, 2H), 3.29 (m, 4 H), 2.8 (m, 2H), 2.67 (t, 2H), 2.43 (m, 4 H), 2.01 (m, 1H), 1.75 (s, 3 H), 1.69/1.6 (2m, 2H), 1.51 (m, 2H), 1.31 (m, 2H), 0.86/0.8 (2d, 6 H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ ppm 157.9, 153.7, 131.4, 131.4, 131.3, 131.1, 130.9, 129.3, 127.6, 120.9, 120.4, 119.8, 116.2, 116.1, 112.6, 111.8, 111.8, 78.1, 70.5, 70.4, 69.3, 66.6, 66.6, 56.9, 56.5, 56.3, 54, 52.3, 50.4, 44, 39, 33.8, 32.2, 31.8, 28.2, 23.1, 19.7/18.1, 18.3. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6): δ ppm -112.6.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４５２．５６６１（１４５２．５６４８）（測定値／理論値）。
Ｌ２１－Ｃ１の調製：
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－［２－［２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000477
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル－［（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メトキシ］－ジメチル－シラン
ジクロロメタン（３００ｍＬ）中の（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メタノール（１７２ｇ、６１．６４ｍｍｏｌ；Ｌ１４－Ｃ３の調製のステップ２に従って得た）の溶液に、イミダゾール（５．０４ｇ、７３．９７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、次いでジクロロメタン（３００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル－クロロ－ジメチル－シラン（１１．１５ｇ、７３．９７ｍｍｏｌ）の溶液を１５分間で滴下添加した。氷浴を取り外し、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応の完了後、反応混合物をメタノール（２０ｍＬ）でクエンチし、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、ｔｅｒｔ－ブチル－［（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メトキシ］－ジメチル－シラン（１９．６５ｇ、４９．９６ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 8.57 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 4.67 (s, 2H), 0.92 (s, 9H), 0.14 (s, 6H).
ステップ２：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－ニトロ－フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＤＭＦ（５５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル－［（２－ヨード－４－ニトロ－フェニル）メトキシ］－ジメチル－シラン化合物（３．０ｇ、７．６３ｍｍｏｌ）の溶液に、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－エチニル－テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（３．３９ｇ、９．９２ｍｍｏｌ；Ｌ１４－Ｃ３の調製のステップ１３に従って得た）、ＤＩＰＥＡ（５．８０ｍＬ、３５．０９ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１４５ｍｇ、０．７６３ｍｍｏｌ）およびジクロロ－ビス－（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（５３５ｍｇ、０．７６３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。黄色溶液をアルゴンでフラッシュし、室温で１６時間撹拌した。水（３００ｍＬ）で希釈した後、水層を酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×３００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－ニトロ－フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（４．０１ｇ、６．６０ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 8.32 (dd, 1H), 8.19 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 5.45 (t, 1H), 5.16 (t, 1H), 5.02-5.07 (m, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.55 (d, 1H), 3.65 (s, 3H), 1.98-2.07 (m, 9H), 0.92 (m,9H), 0.14 (s, 6H).
ステップ３：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－（ヒドロキシメチル）－５－ニトロ－フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＴＨＦ（４８ｍＬ）および水（４８ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－５－ニトロ－フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（４．０１ｇ、６．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（１９３ｍＬ、３．３６ｍｏｌ）を添加した。無色溶液を室温で２日間撹拌し、次いで水（３００ｍＬ）で希釈した。水層をジクロロメタン（２×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（２×３００ｍＬ）、および炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（４００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－（ヒドロキシメチル）－５－ニトロ－フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（２．６７ｇ、５．４１ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 8.29 (dd, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 5.68 (t, 1H), 5.45 (t, 1H), 5.16 (t, 1H), 5.02-5.07 (m, 2H), 4.62 (d, 2H), 4.55 (d, 1H), 3.65 (s, 3H), 1.98-2.07 (m, 9H).
ステップ４：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＴＨＦ（５９ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－（ヒドロキシメチル）－５－ニトロ－フェニル］エチニル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（２．６７ｇ、５．４１ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴンでフラッシュした。炭素上白金５％乾燥（１．３４ｇ、５０％ｗ／ｗ）を添加した。反応混合物をアルゴン、Ｈ２で連続的にフラッシュし、Ｈ２雰囲気（Ｐ ａｔｍ）下、室温で２日間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドに通して濾過し、酢酸エチル／メタノール ９／１の溶液（５００ｍＬ）で洗浄し、次いで濃縮乾固した。すべてのシーケンス（炭素上白金５％乾燥（１．３４ｇ、５０％ｗ／ｗ）の添加、Ｈ２（Ｐ ａｔｍ）下、室温で１６時間の撹拌、およびＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドに通して濾過）を繰り返して、完全に変換させた。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン中酢酸エチルの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（１．１２ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 6.93 (d, 1H). 6.67-6.33 (m, 2H), 5.30 (t, 1H), 4.96 (t, 1H), 4.88 (s, 2H), 4.81 (t, 1H), 4.61 (t, 1H), 4.39 (d, 1H), 4.29-4.24 (m, 2H), 3.78-3.72 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.65-2.54 (m, 2H), 2.07-1.98 (m, 9H), 1.79-1.68 (m, 1H), 1.63-1.52 (m, 1H).
ステップ５：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＤＭＦ（２１ｍＬ）中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（１．００ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタン酸（５８９ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７０７μｌ、４．２８ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１．２２ｇ、３．２１ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で７２時間撹拌した。反応の完了後、混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（１．０５ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）をベージュ色固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.82 (s, 1H), 7.35-7.42 (m, 2H), 7.24 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 5.94 (t, 1H), 5.37 (s, 2H), 5.30 (t, 1H), 4.91-4.99 (m, 2H), 4.79 (t, 1H), 4.36-4.42 (m, 3H), 4.01-4.08 (m, 1H), 3.76 (t, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.95-3.04 (m, 2H), 2.54-2.65 (m, 2H), 1.98-2.07 (m, 9H), 1.68-1.79 (m, 1H), 1.49-1.63 (m, 3H), 1.30-1.42 (m, 11H).
ステップ６：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ジクロロメタン（７．５ｍＬ）中の化合物メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（９５０ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でトリフルオロ酢酸（１．９ｍＬ、２５．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応の完了後、反応混合物を濃縮乾固し、トルエン（２×５０ｍＬ）と共蒸発させて、粗化合物を得た。
ＤＭＦ（１３ｍＬ）に溶解したこの粗製物に、（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタン酸（４６７ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８６７μｌ、５．２４ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（８４５ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応の完了後、炭酸水素塩の飽和水溶液（２０ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌し、水（１００ｍＬ）で希釈し、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により、次いで中性法を使用する逆相Ｃ１８クロマトグラフィーにより精製して、メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（６８０ｍｇ、０．７２０ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝９４６．３。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 9.90 (s, 1H). 8.07 (d, 2H), 7.89 (d, 2H), 7.74 (t, 2H), 7.44-7.38 (m, 3H), 7.36-7.28 (m, 3H), 7.24 (d, 1H), 5.94 (t, 1H), 5.37 (s, 2H), 5.30 (t, 1H), 4.99-4.92 (m, 2H), 4.79 (t, 1H), 4.42-4.36 (m, 4H), 4.32-4.19 (m, 3H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.76 (t, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.99-2.94 (m, 2H), 2.65-2.54 (m, 2H), 2.07-1.98 (m, 10H), 1.70-1.55 (m, 4H), 1.46-1.36 (m, 2H), 0.89-0.84 (m, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ 171.19, 170.33, 169.58, 169.45, 169.27, 167.77, 158.81, 156.12, 143.89, 143.76, 140.69, 139.48, 137.54, 134.88, 128.44, 127.62, 127.06, 125.35, 120.08, 119.42, 116.65, 75.78, 74.61, 72.65, 71.20, 69.49, 65.68, 60.49, 60.10, 53.14, 52.40, 46.68, 32.32, 30.43, 29.54, 27.19, 26.77, 20.39, 20.34, 20.24, 19.22, 18.25.
ステップ７：メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－（ブロモメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート
ＴＨＦ（８．２ｍＬ）中の化合物メチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（１５４ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフェニルホスフィン（８５．４ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）および１－ブロモピロリジン－２，５－ジオン（５８．０ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した：アリコートを大過剰のＭｅＯＨにより処理し、続いて、対応するメチルエーテルの形成が生じた。予期された臭化物誘導体はＵＰＬＣ－ＭＳ条件で安定していた。５時間後、トリフェニルホスフィン（８５．４ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）および１－ブロモピロリジン－２，５－ジオン（５８．０ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１５時間撹拌した。得られた粗製のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－（ブロモメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレートを、このまま次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋ＯＭｅ－Ｂｒ＋Ｈ］＋＝９６０．７。
ステップ８：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［２－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
前のステップ（ステップ７）からのＤＭＦ中のメチル（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－［２－［２－（ブロモメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］エチル］テトラヒドロピラン－２－カルボキシレート（０．１６７ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（Ｃ１）（１４３ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１１４μＬ、０．６５２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した（アリコートを大過剰のＭｅＯＨにより処理した）。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［２－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（２１．３ｍｇ、０．０１１１ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１８０２．９＋１８０４．９。ＩＲ波長（ｃｍ－１）：１７５５、１６７２、１２２６、１２０１、１１３０。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 13.3 (br s, 1H), 10.2 (s, 1H), 8.88 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.88 (d, 2H), 7.73 (dd, 2H), 7.65 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.54 (br s, 1H), 7.51 (dd, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.4 (t, 2H), 7.38 (m, 1H), 7.32 (t, 2H), 7.3 (dd, 2H), 7.2 (d, 1H), 7.2 (t, 2H), 7.15 (t, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.01 (dd, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.22 (d, 1H), 6 (br s, 1H), 5.51 (dd, 1H), 5.34 (t, 1H), 5.3 (br s, 2H), 5.27/5.21 (m, 2H), 4.98 (t, 1H), 4.85 (t, 1H), 4.57/4.49 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.27 (m, 2H), 4.26 (m, 2H), 4.23 (m, 1H), 3.93 (t, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.71 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.4 (m, 4H), 3.29/2.51 (2dd, 2H), 3.13/2.94 (2m, 4H), 3 (m, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.93 (br s, 3 H), 2.81 (m, 2H), 1.99/1.95 (3s, 9H), 1.98 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.77/1.59 (2m, 2H), 1.64 (2m, 2H), 1.41 (2m, 2H), 0.88/0.85 (2d, 6H). 13C NMR (100 MHz, dmso-d6): δ ppm 158.1, 152.9, 135.6, 131.5, 131.4, 131.3, 131.2, 131, 128.9, 128.1, 127.5, 125.7, 120.9, 120.6, 120.4, 120.3, 117, 116, 116, 112.8, 112.2, 111.2, 75.6, 74.9, 73.8, 72.9, 71.4, 69.6, 69.4, 67.5, 66.1, 60.4, 58.3, 56, 55.4, 53.9, 52.8, 47.2, 46.2, 44.3, 39, 32.8, 32.8, 31, 29.6, 27.4, 27.2, 21.1, 19.5/18.7, 18.1. 19F NMR (376 MHz, dmso-d6) δ ppm -74, -112.
ステップ９：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－［２－［（５Ｓａ）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸
メタノール（６．０ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［２－［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－メトキシカルボニル－テトラヒドロピラン－２－イル］エチル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（２１．３ｍｇ、０．０１１１ｍｍｏｌ）の溶液に、水（４ｍｌ）中の水酸化リチウム一水和物（４．６６ｍｇ μＬ、０．１１１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で６０時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－［２－［（５Ｓａ）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸（４７．８ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４４０．６＋１４４２．６。
ステップ１０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－［２－［２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート Ｌ２１－Ｃ１
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）－６－［２－［（５Ｓａ）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］フェニル］エチル］－３，４，５－トリヒドロキシ－テトラヒドロピラン－２－カルボン酸（４７．１ｍｇ、０．０２８２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（５００μＬ）中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノエート（Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍから購入、１３．１ｍｇ、０．０４２３ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（１７．２μＬ、０．０９８８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。
反応混合物を室温で１時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２１－Ｃ１（６５ｍｇ、０．０３１０ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１６３５．６０９３（１６３５．６０６８）（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ１の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000478
ステップ１：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ＴＨＦ（３．８ｍｌ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（１５０ｍｇ、０．２４９ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却した。０℃でトリブロモホスファン（ジクロロメタン中１Ｍ）（３７４μＬ、０．２４９ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応物を０℃で５分間、室温で１時間撹拌した。反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した（アリコートを大過剰のＭｅＯＨにより処理した）。反応混合物を酢酸エチル（３ｍｌ）で希釈し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（１×６ｍｌ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した。ＤＭＦ（１０ｍｌ）を添加し、酢酸エチルおよびＴＨＦを蒸発させる。９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメートの得られた溶液を、そのまま次のステップで使用する。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝６８６．５＋６８８．６。
ステップ２：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
前のステップ（ステップ１）からのＤＭＦ中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（０．２４９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（１０ｍｌ）、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（Ｃ１）（２１８ｍｇ、０．２４９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１３０μＬ、０．７４８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した（アリコートを大過剰のＭｅＯＨにより処理した）。ＤＭＦ中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸の得られた溶液を、そのまま次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１４５８．７＋１４６０．７。
ステップ３：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；ビス２，２，２－トリフルオロ酢酸
前のステップ（ステップ２）で得たジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（０．２４９ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（４９．３μＬ、０．４９９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；ビス２，２，２－トリフルオロ酢酸（３１．２ｍｇ＝０．０２１３ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１２３６．７＋１２３８．７。
ステップ４：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸 Ｌ９－Ｃ１
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（３１．２ｍｇ、０．０２１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（５００μＬ）中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノエート（２３．８ｍｇ、０．０７６８ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（３１．２μＬ、０．１７９ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ９－Ｃ１（６ｍｇ、０．００３０３ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ］＋＝１４３１．５４３７（１４３１．５４３３）（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ８の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000479
ステップ１：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（０．０２３０ｍｍｏｌ；Ｌ９－Ｃ１の調製のステップ１に従って得た）の溶液に、ＤＭＦ（５ｍｌ）、アンモニウム；［３－［４－［［２－［（２Ｒ）－２－カルボキシ－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－エチル］フェノキシ］メチル］ピリミジン－２－イル］フェニル］サルフェート（Ｃ８）（２２ｍｇ、０．０２３０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２μＬ、０．０６９ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した（アリコートを大過剰のＭｅＯＨにより処理した）。ＤＭＦ中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸の得られた溶液を、次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ－ＳＯ３Ｈ］＋＝１４４４．８＋１４４６．７。
ステップ２：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；ビス２，２，２－トリフルオロ酢酸
前のステップ（ステップ１）で得たジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（０．０２３０ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（９μＬ、０．０９２０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、［３－［４－［［２－［（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－２－カルボキシ－エチル］フェノキシ］メチル］ピリミジン－２－イル］フェニル］サルフェート；ビス２，２，２－トリフルオロ酢酸（１０．０ｍｇ＝０．００６３３ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ－ＳＯ３］＋＝１２２４．１２。
ステップ３：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１０ｍｇ、０．００６５３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（５００μＬ）中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノエート（３．１ｍｇ、０．００９８０ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（４μＬ、０．０２２９ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳにより追跡した。粗生成物を、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ９－Ｃ８（６ｍｇ、０．００４０１ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１５１９．５＋１５２１．２、［Ｍ＋Ｈ－ＳＯ３］＋１４１７．７＋１４１９．６。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４９７．４８６（１４９７．４８４５）（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ１０の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－［４－フルオロ－３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）フェニル］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000480
 手順は、Ｌ９－Ｃ９の合成のプロセスの通りであり、ステップ３で使用するＣ９を（２Ｒ）－２－［（（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－［４－フルオロ－３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）フェニル］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ］－３－（２－｛［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸 Ｃ１０により置き換え、精製にＴＦＡ法を使用する。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５２９．５４３／１５２９．５４１３（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ１１の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（４－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸。
Figure 2022532918000481
 手順は、Ｌ９－Ｃ９の合成のプロセスの通りであり、ステップ３で使用するＣ９を（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（４－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸 Ｃ１１により置き換え、精製にＴＦＡ法を使用する。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４３１．５４４２／１４．３１．５４３３（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ１２の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２，２，２－トリフルオロエチル）ピラゾール－３－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000482
 手順は、Ｌ９－Ｃ９の合成のプロセスの通りであり、ステップ３で使用するＣ９を（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［１－（２，２，２－トリフルオロエチル）－１Ｈ－ピラゾール－５－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸 Ｃ１２により置き換え、精製にＴＦＡ法を使用する。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１３９５．５０４８／１３９５；５０４５（測定値／理論値）。
Ｌ９－Ｃ１４の調製：
（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－ヒドロキシ－２－メトキシ－フェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000483
ステップ１：（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシ－３－スルホオキシ－フェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
５００ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．６０ｍｍｏｌ、国際公開２０１６／２０７２１６号調製１）および２０２ｍｇの（３－ヒドロキシ－２－メトキシ－フェニル）ボロン酸（１．２０ｍｍｏｌ）を、９ｍＬの１，４－ジオキサンに溶解し、次いで４２ｍｇのＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．０６ｍｍｏｌ）、５８８ｍｇのＣｓ２ＣＯ３（１．８０ｍｍｏｌ）および９ｍＬの水を添加し、混合物を完全な変換までＮ２雰囲気下、７０℃で撹拌した。次いで、これを水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗エステルを、溶離液としてヘプタン、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨ中０．７Ｍ ＮＨ３溶液を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、ジアステレオ異性体の混合物を得た。次いで、これを２３．６ｍＬのピリジンに溶解し、０．９７ｍＬのＳＯ３×ピリミジン（５．９８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を完全な変換まで７０℃で撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮し、２ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで２００ｍｇのＫＯＨ（３．５７ｍｍｏｌ）および１ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで室温で撹拌した。次いで、これを２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、溶離液として２５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取ＲＰ－ＨＰＬＣ上に直接注入した。後に溶出するジアステレオ異性体を表題の生成物として収集した。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.92 (d, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.30 (dd, 2H), 7.29 (d, 1H), 7.20 (t, 2H), 7.16 (t, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.10 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.73 (t, 1H), 6.38 (d, 1H), 5.50 (dd, 1H), 5.29/5.23 (d+d, 2H), 4.21/4.16 (m+m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.25/2.55 (dd+dd, 2H), 3.18-2.75 (m, 10H), 2.65 (brs, 3H), 1.82 (s, 3H).
Ｃ４７Ｈ４４Ｎ６Ｏ１０Ｓ２ＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：９７０．２２３３；実測値９７１．２２９７（Ｍ＋Ｈ）。
ステップ２：（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－ヒドロキシ－２－メトキシ－フェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート Ｌ９－Ｃ１４
ＤＭＦ（３０９μＬ）中の（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシ－３－スルホオキシ－フェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（２０．０ｍｇ；０．０２０６ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－Ｎ－［４－（クロロメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１７．５ｍｇＬ；０．０２０６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１０．８μＬ；０．０６１８ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＩ（１ｍｇ；０．００２７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を７０℃で１８時間撹拌した。粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ９－Ｃ１４（１０．５ｍｇ；０．００７２５ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４４８．５４３７／１４４８．５４６６［測定値／理論値］。
Ｌ９－Ｐ１５の調製：
（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－２０－［［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］メチル］－３－（４－フルオロフェニル）－１４－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］－２４，２５－ジメチル－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２４），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２，２５－デカエン－１１－カルボン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000484
 ＤＭＦ（６３０μＬ）中の（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－３－（４－フルオロフェニル）－１４－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］－２４，２５－ジメチル－２０－［（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル］－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２５），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２（２６），２３－デカエン－１１－カルボン酸 Ｐ１５（国際公開第２０１９／０３５９１４号に従って得た；１０．０ｍｇ；０．０１０５ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１０．０ｍｇ；０．０１５８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５．５μＬ；０．０３１５ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＩ（０．５ｍｇ、０．００１０ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で０．５時間撹拌した。粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ９－Ｐ１５（１１．９ｍｇ、０．００７３３ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ－ＣＦ３ＣＯ２］＋＝１５０７．５１８３／１５０７．５１５５
Ｌ９－Ｐ１６の調製：
（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－１４－［［２－［４－［［（２Ｓ）－１，４－ジオキサン－２－イル］メトキシメチル］－４－フルオロ－シクロヘキシル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］－２０－［［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］メチル］－３－（４－フルオロフェニル）－２４，２５－ジメチル－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２５），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２（２６），２３－デカエン－１１－カルボン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000485
 ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－１４－［［２－［４－［［（２Ｓ）－１，４－ジオキサン－２－イル］メトキシメチル］－４－フルオロ－シクロヘキシル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］－３－（４－フルオロフェニル）－２４，２５－ジメチル－２０－［（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル］－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２４），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２，２５－デカエン－１１－カルボン酸 Ｐ１６（国際公開第２０１９／０３５９１１号に従って得た；１４．７ｍｇ；０．０１３７ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１３．１ｍｇ；０．０２０５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７．１μＬ；０．０４１０ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。粗生成物を、ＴＦＡ法を使用してＸ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、Ｌ９－Ｐ１６（７．９ｍｇ；０．００４２０ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３３２７、１７６８／１７０６、１６６６、１１９９／１１１８、８３１／７９８。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ－ＣＦ３ＣＯ２］＋＝１６３１．６０７１／１６３１．６０５４［測定値／理論値］
Ｌ９－Ｐ１７の調製：
（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－１４－［［２－［４－［［（２Ｓ）－１，４－ジオキサン－２－イル］メトキシ］シクロヘキシル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］－２０－［［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］メチル］－３－（４－フルオロフェニル）－２４，２５－ジメチル－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２４），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２，２５－デカエン－１１－カルボン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000486
 ＤＭＦ（１ｍＬ）中の（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－１４－［［２－［４－［［（２Ｓ）－１，４－ジオキサン－２－イル］メトキシ］シクロヘキシル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］－３－（４－フルオロフェニル）－２４，２５－ジメチル－２０－［（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル］－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２４），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２，２５－デカエン－１１－カルボン酸 Ｐ１７（国際公開第２０１９／０３５９１１号に従って得た；１４．５ｍｇ；０．０１３９ｍｍｏｌ）の溶液に、（２Ｓ）－Ｎ－［４－（ブロモメチル）フェニル］－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタンアミド（１３．３ｍｇ；０．０２０８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７．３μＬ；０．０４１７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で８時間撹拌した。粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により、かつＴＦＡ法を使用して精製して、Ｌ９－Ｐ１７（７．０ｍｇ、０．００４３７ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３７００～２４００、１７７１／１７３８／１７０５、１６６５、１１９４／１１２８。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ－ＣＦ３ＣＯ２］＋＝１５９９．６０１３／１５９９．５９９２。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ－ＣＦ３ＣＯ２＋Ｈ］２＋＝８００．３０４９／８００．３０３５［測定値／理論値］
Ｌ２５－Ｐ１の調製：
２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボニル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
Figure 2022532918000487
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボキシレート
ＤＣＭ（５．８５ｍｌ）中の１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルシクロブタンカルボン酸（５８．６ｍｇ；０．２９３ｍｍｏｌ）の溶液に、１－［２－（２－アミノエトキシ）エチル］ピロール－２，５－ジオン（５３．９ｍｇ；０．２９３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（８４．２ｍｇ；０．４３９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５９．３ｍｇ；０．４３９ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（２０４μＬ；１．１７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。反応混合物を濃縮乾固し、ＤＭＦ（１ｍｌ）に可溶化し、溶液を、カラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＸ－ＢｒｉｄｇｅカラムＣ１８により精製して、表題化合物（５７．３ｍｇ；０．１５６ｍｍｏｌ）を得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３３９０、１６９７／１６６６。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 7.5 (t, 1H), 7.02 (s, 2H), 3.55/3.5 (2t, 4H), 3.38 (t, 2H), 3.17 (q, 2H), 2.33 (m, 4H), 1.77 (m, 2H), 1.38 (s, 9H).
ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝３８９．２６［Ｍ＋Ｈ－ｔＢｕ］＋＝３１１．２２
ステップ２：１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボン酸
ＤＣＭ（０．１７５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボキシレート（７ｍｇ；０．０１９１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（５１．２μＬ；０．６６８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３．５時間撹拌し、次いで濃縮乾固して、表題化合物（５．８ｍｇ；０．０１８７ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。粗生成物を次のステップで使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝３１１．３５、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝３３３．３７
ステップ３：（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボキシレート
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボン酸（１８．２ｍｇ；０．０５８７ｍｍｏｌ）の溶液に、２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェノール（１３．０ｍｇ；０．０７０４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１４．５ｍｇ；０．０７０４ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。反応混合物は懸濁液であった。沈殿物を濾別し、ＴＨＦ（１ｍｌ）で洗浄して、ＴＨＦ中の（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボキシレートの溶液を得る。粗生成物溶液をステップ９で使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７７．２８、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝４９９．２３
ステップ４：メチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート
ＤＣＭ（２５ｍＬ）およびメタノール（２５ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｐ１（５．０ｇ；５．７１２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジアゾメチル（トリメチル）シランの溶液（Ｅｔ２Ｏ中２Ｍ）（５．７１２ｍＬ；１１．４２ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。完了後、反応物を、黄色が赤色になるまで酢酸をゆっくりと添加することによりクエンチし、濃縮乾固して、粗混合物を得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中メタノールの勾配）により精製して、表題化合物（４．５２ｇ；５．０８２ｍｍｏｌ）を得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝８８９．２７＋８９１．６、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝９１１．３１、［Ｍ＋２Ｈ］２＋＝４４５．５９。ＩＲ（ｃｍ－１）：１７５３、１２３８／１０５３。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 8.6 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 7.6 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.45 (td, 1H), 7.3 (m, 3H), 7.25-7.1 (m, 5H), 7.02 (t+d, 2H), 6.78 (t, 1H), 6.31 (dd, 1H), 5.52 (dd, 1H), 5.25 (AB, 2H), 4.2 (m, 2H), 3.78/3.65 (2s, 6H), 3.2/2.58 (2dd, 2H), 2.71 (t, 2H), 2.5/2.3 (2ml, 8H), 2.12 (s, 3H), 1.88 (s, 3H).
ステップ５：５－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホン酸
ＤＣＭ（２２．２ｍＬ）およびメタノール（２２．２ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ｃｉｔ－ＯＨ（２．２２４ｇ；５．５９６ｍｍｏｌ）の溶液に、ナトリウム５－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート（１．８９ｍｇ；８．３９５ｍｍｏｌ）およびＥＥＤＱ（２．７６８ｇ；１１．１９ｍｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２５時間撹拌し、次いで濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中メタノールの勾配）により精製して、表題化合物（２．８１ｇ；４．８２３ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３７００～３０００、１６６０（大きい）、１１８０。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 10.02 (s, 1H), 7.88 (m, 3H), 7.76 (2t, 2H), 7.7 (dd, 1H), 7.61 (d, 1H), 5.99 (t, 1H), 5.38 (m, 2H), 5.03 (t, 1H), 4.72 (d, 2H), 4.3-4.2 (m, 3H), 4.15 (m, 1H), 3.06-2.90 (m, 2H), 1.75-1.30 (m, 4H).
ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５８３．４２、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝５６５．３１。
ステップ６：２－（クロロメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホン酸
ＮＭＰ（５ｍＬ）中の５－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホン酸（５４３．６ｍｇ；０．９３３ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＮＭＰ（２００μＬ）中のＳＯＣｌ２（６８．１μＬ；０．９３３ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で１５分間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。完全な変換を達成するためには、ＳＯＣｌ２添加（６８μＬ）をさらに７回行わなければならない。過剰のＳＯＣｌ２を真空下で蒸発させ、残留物を、ＴＦＡ法を使用してＯａｓｉｓカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、表題化合物（３６２ｍｇ；０．５１２ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６０１．１９＋６０３．２３［Ｍ＋Ｎａ］＋＝６２２．９３
ステップ７：２－［［４－［２－［２－クロロ－４－［６－（４－フルオロフェニル）－４－［（１Ｒ）－２－メトキシ－１－［［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］メチル］－２－オキソ－エトキシ］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］－５－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネート
ＮＭＰ（１０ｍＬ）に溶解したステップ６からの２－（クロロメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホン酸（１９５．６ｍｇ；０．２７７ｍｍｏｌ）の溶液に、ステップ４からのメチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（１２３ｍｇ；０．１３８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３８５μＬ、２．２１３ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＩ（１０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を７０℃で１２時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。ＮＭＰに溶解した粗生成物を次のステップで直接使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１２３１．１２＋１２３３．４５、［Ｍ＋２Ｈ］２＋＝６１６．３４＋６１７．３７
ステップ８：５－［［（２Ｓ）－２－アミノ－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］ベンゼンスルホネート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
ＮＭＰ中の２－［［４－［２－［２－クロロ－４－［６－（４－フルオロフェニル）－４－［（１Ｒ）－２－メトキシ－１－［［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］メチル］－２－オキソ－エトキシ］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］－５－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネートの前の溶液に、水（４ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（８２．２ｍｇ；１．１０６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を室温で１．５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。粗生成物溶液を、ＴＦＡ法を使用してＸ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、表題化合物（４５．６ｍｇ；０．０３７４ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１２１７．４６、［Ｍ＋Ｎａ］＋＝１２４１．１６、［Ｍ＋２Ｈ］２＋＝６０９．６１
ステップ９：２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］－５－［［（２Ｓ）－２－［［１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボニル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネート Ｌ２５－Ｐ１
ＤＭＦ（１．４ｍＬ）中の５－［［（２Ｓ）－２－アミノ－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［４－［４－［（１Ｒ）－１－カルボキシ－２－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］エトキシ］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］ベンゼンスルホネート（２２．６ｍｇ；０．０１８６ｍｍｏｌ）の溶液に、（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）１－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］シクロブタンカルボキシレート（ステップ３から）（２６．８ｍｇ；０．０５６２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液、およびＤＩＰＥＡ（１２．９μＬ；０．０７４２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。粗生成物溶液を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により、かつＴＦＡ法を使用して精製して、Ｌ２５－Ｐ１（７．５ｍｇ；０．００５０ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３３２１、１７０５／１６２４、１６６６、１５８１、１１８０／１１２４、８３３／７９８／７５６／７１９／６９６。1H NMR (400/500 MHz, dmso-d6) δ ppm 10.4 (s), 8.88 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.13 (df, 1H), 7.92 (dd, 1H), 7.78 (d), 7.74 (t), 7.63 (d, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.3 (dd, 2H), 7.23 (d, 1H), 7.21 (t, 2H), 7.16 (t, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.03 (t, 1H), 7.01 (d, 1H), 7 (s, 2H), 6.73 (t, 1H), 6.22 (d, 1H), 5.99 (m), 5.55 (sl), 5.5 (dd, 1H), 5.25 (AB, 2H), 5.1 (sl, 2H), 4.37 (m, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.7 (m, 10H), 3.55 (m, 2H), 3.5 (m, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.28/2.52 (2dd, 2H), 3.21 (m, 2H), 3.04 (sl, 3H), 2.97 (m, 2H), 2.4 (m, 4H), 1.85 (w, 3H), 1.74/1.62 (2m, 2H), 1.73 (m, 2H), 1.43/1.35 (2m, 2H). 13C NMR (400/500 MHz, dmso-d6) δ ppm 157.5, 152.8, 135.4, 134.9, 131.5, 131.4, 131.4, 131.2, 131.1, 128.7, 121, 120.6, 119.2, 119.2, 116.3, 116, 112.8, 112.2, 111, 74, 69.5, 68.9, 67.4, 66.6, 56.2, 55.3/46.5, 54.1, 45.7, 39.4, 39.2, 37.2, 32.9, 29.7, 29.7, 27.3, 18, 16. 19F NMR (400/500 MHz, dmso-d6) δ ppm -74.6, -112.2.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５０９．４８６７／１５０９．４８５１［測定値／理論値］
Ｌ２６－Ｐ１の調製：
（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000488
ステップ１：３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパ－１－イン
ＴＨＦ（２５．０ｍＬ）中の２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エタノール（１．９５ｇ；６．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で水素化ナトリウム（２６０．０ｍｇ；６．５７ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、トルエン中３－ブロモプロパ－１－インの溶液（１．４２ｍＬ；１３．１４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃で１時間、室温で２日間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。次いで、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮乾固し、シリカゲルクロマトグラフィー（勾配 メタノール中ＤＣＭ）により精製して、表題化合物（１．７４ｇ；４．１２ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (CDCl3): 2.43 (t, 1H, J = 2.4 Hz), 3.37 (s, 3H), 3.53-3.55 (m, 2H), 3.64-3.70 (m, 30H), 4.20 (d, 2H, J = 2.4 Hz).
ステップ２：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバメート
メタノール（７０ｍＬ）およびＤＣＭ（１４０ｍＬ）中の［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－アニリン（１０．０ｇ；２７．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｆｍｏｃ－Ｃｉｔ－ＯＨ（１２．０ｇ；３０．２８ｍｍｏｌ）およびＥＥＤＱ（８．１７ｇ；３３．０３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１４時間撹拌した。反応の完了後、得られた残留物を、溶離液としてＤＣＭ／メタノール（１００／０～８８／１２）を使用するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（１７．０９ｇ；２１．９７ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.09 (s, 6H), 0.91 (s, 9H), 1.38-1.48 (m, 2H), 1.59-1.68 (m, 2H), 2.93-3.05 (m, 2H), 4.06-4.15 (m, 2H), 4.20-4.29 (m, 3H), 4.56 (s, 2H), 5.41 (s, 2H), 5.98 (t, 1H, J = 5.5 Hz), 7.30-7.43 (m, 5H), 7.55 (dd, 1H, J = 8.8, 2.1 Hz), 7.69 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 7.74 (dd, 1H, J = 7.2, 3.4 Hz), 7.89 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 8.25 (d, 1H, J = 1.5 Hz), 10.12 (s, 1H).
ステップ３：（２Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド
ＴＨＦ（１２０ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバメート（１７．０８ｇ；２３．００ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中ジメチルアミン２Ｍ（４４．５ｍＬ；８９．００ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌した。濃縮乾固した後、得られた残留物を、溶離液として水／アセトニトリル（９８／０２～０／１００）を使用するＣ１８上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物表題化合物（５．４７ｇ；１０．５０ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.0 (s, 6H), 0.81 (s, 9H), 1.27-1.38 (m, 3H), 1.47-1.53 (m, 1H), 2.83-2.89 (m, 2H), 3.16-3.19 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 5.26 (s, 2H), 5.82 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.24 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 7.50 (dd, 1H, J = 8.3, 2.0 Hz), 8.17 (d, 1H, J = 2.0 Hz).
ステップ４：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
２－メチルテトラヒドロフラン（２４０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－フェニル］－５－ウレイド－ペンタンアミド（３．００ｇ；５．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＳｕ（８．６５ｇ；８．６５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．９０ｍＬ；１１．５３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌した。反応混合物を焼結漏斗に通して濾過し、回収した固体を２－メチルテトラヒドロフラン（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、次いで高真空下で乾燥させて、表題化合物（３．５７ｇ；４．２４ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.10 (s, 6H), 0.83-0.95 (m, 15H), 1.27-1.52 (m, 2H), 1.52-1.75 (m, 2H), 1.93-2.07 (m, 1H), 2.88-3.09 (m, 2H), 3.93 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 4.17-4.49 (m, 4H), 4.56 (s, 2H), 5.40 (s, 2H), 5.96 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.27-7.37 (m, 3H), 7.37-7.48 (m, 3H), 7.54 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.74 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 7.88 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 8.13 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 8.22 (s, 1H), 10.11 (s, 1H).
ステップ５：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパ－１－イニル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ジメチルホルムアミド（１５．４０ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－ヨード－フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（１．２３ｇ；１．４６ｍｍｏｌ）の溶液に、３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパ－１－イン（９３０．０ｍｇ；２．２０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．４７ｍＬ；１４．９２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。アルゴンで３回パージした後、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（２２０ｍｇ；０．３０７ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（６８．０ｍｇ；０．３６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をアルゴンで３回パージした。反応混合物を室温で３時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。混合物を酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）で希釈し、ブライン（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾固した。粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつ中性法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（７９０．０ｍｇ；０．７０ｍｍｏｌ）を淡黄色ガム状物として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.08 (s, 6H), 0.85-0.90 (m, 15H), 1.36-1.45 (m, 2H), 1.58-1.71 (m, 2H), 1.97-2.00 (m, 1H), 2.93-3.03 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.49-3.52 (m, 25H), 3.56-3.58 (m, 2H), 3.63-3.66 (m, 2H), 3.93 (dd, 1H, J = 8.9, 6.9 Hz), 4.23-4.32 (m, 3H), 4.37-4.43 (m, 3H), 4.75 (s, 2H), 5.39 (s, 2H), 5.97 (t, 1H, J = 6.1 Hz), 7.30-7.43 (m, 6H), 7.51-7.54 (m, 1H), 7.72-7.78 (m, 3H), 7.88 (d, 2H J = 7.5 Hz), 8.12 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 10.10 (s, 1H).
ステップ６：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパ－１－イニル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
テトラヒドロフラン（０．６０ｍＬ）および水（０．９０ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシメチル］－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパ－１－イニル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（４５２ｍｇ；０．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（４．１７ｍＬ；７２．７８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２２時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。濃縮乾固した後、粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつ中性法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（３２７ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を白色ガム状物として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.87 (dd, 6H, J = 11.7, 6.8 Hz), 1.36-1.45 (m, 2H), 1.58-1.71 (m, 2H), 1.97-2.00 (m, 1H), 2.93-3.02 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.31 (s, 5H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.48-3.53 (m, 21H), 3.54-3.64 (m, 6H), 3.91-3.95 (m, 1H), 4.23-4.42 (m, 4H), 4.56 (d, 2H, J = 5.5 Hz), 5.19 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 5.39 (s, 2H), 5.96 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.39-7.43 (m, 4H), 7.50-7.52 (m, 1H), 7.72-7.76 (s, 3H), 7.88 (d, 1H J = 7.5 Hz), 8.12 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 10.06 (s, 1H).
ステップ７：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ＴＨＦ（３．７ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロパ－１－イニル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（３２７．０ｍｇ；０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（０．３７ｍＬ）を添加した。アルゴンで３回パージした後、Ｐｔ／Ｃ５％（１９５ｍｇ）を添加し、アルゴンでさらに３回パージした後、反応混合物を水素雰囲気下に置き、室温で１８時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。混合物をＰＴＦＥに通して濾過し、濾液を濃縮乾固し、次いでジクロロメタン／ペンタン（１／４混合物、５０ｍＬ）中で摩砕した。沈殿物を濾過により回収して、乾燥後に表題化合物（１３０ｍｇ；０．１３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.85-0.89 (m, 6H), 1.23-1.46 (m, 2H), 1.56-1.76 (m, 4H), 1.97-2.02 (m, 1H), 2.56-2.60 (m, 2H), 2.91-3.04 (m, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.38-3.43 (m, 4H), 3.48-3.54 (m, 30H), 3.93 (dd, 1H, J = 8.9, 6.9 Hz), 4.21-4.31 (m, 3H), 4.38-4.41 (m, 1H), 4.45 (d, 2H, J = 5.3 Hz), 4.94 (t, 1H, J = 5.3 Hz), 5.37 (s, 2H), 5.95 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 7.25 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.39-7.43 (s, 5H), 7.72-7.76 (m, 2H), 7.88 (d, 1H J = 7.5 Hz), 8.06 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 9.88 (s, 1H).
ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１０２６．５２
ステップ８：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ＴＨＦ（６．６ｍＬ）中の９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ヒドロキシメチル）－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（６０ｍｇ；０．０５８４ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＰＢｒ３（ＴＨＦ中１Ｍ溶液）（０．０８７７ｍＬ；０．０８７７ｍｍｏｌ）を滴下添加した。次いで、溶液を室温で３時間撹拌した。ブロモ予期化合物を反応させるためにアリコートモルホリンを添加して入れた後、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（５０μＬ）で後処理した。５分後、混合物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、ＴＨＦ（２ｍｌ）で洗浄して、ブロモ表題化合物をＴＨＦ溶液として得、粗製のまま次のステップで使用した。
ステップ９：（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
前のステップからの９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－１－［［４－（ブロモメチル）－３－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］カルバモイル］－４－ウレイド－ブチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（０．０５８４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）、（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｐ１（４６．１ｍｇ；０．０５２７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１７３ｍＬ；０．９９５ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で２０時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。予期表題化合物およびＦｍｏｃ脱保護化合物（ステップ１０で予期される）を含有する粗混合物を、次の脱保護ステップで使用する。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ－Ｆｍｏｃ＋Ｈ＋Ｈ］＋＝１６６０．９９
ステップ１０：（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸
ＤＭＦ中の前のステップで得た粗混合物に、ピペリジン（１１．６μＬ；０．１１７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。反応の完了後、粗生成物を、ＴＦＡ法を使用する、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積によるＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（２９．２ｍｇ；０．０１５５ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ：３６００～２３００、１６７２、１６０２、１５４１＋１５１６。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ－ＣＦ３ＣＯＯ］＋＝１６６０．７５７４（理論値１６６０．７５７５）
ステップ１１：（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート；２，２，２－トリフルオロアセテート Ｌ２６－Ｐ１
ＤＭＦ（１．２８ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［３－［２－［２－［２－［２－［２－［２－［２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］エトキシ］プロピル］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート；２，２，２－トリフルオロ酢酸（４２．５ｍｇ；０．０２２５ｍｍｏｌ）の溶液に、（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノエート（Ｂｒｏｄｐｈａｒｍ ２１８５４）（７．７１ｍｇ；０．０２４７ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（１９．６μＬ；０．１１２ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、反応の進行をＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｌ２６－Ｐ１（２８ｍｇ；０．０１５１ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ－ＣＦ３ＣＯＯ］＋＝１８５５．８１０５（理論値１８５５．８１０６）
Ｌ２７－Ｐ１の調製：
（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－３－メチル－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000489
ステップ１：２－（クロロメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネート
５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホン酸（３００ｍｇ；０．４２６３ｍｍｏｌ）を、室温で無水ＮＭＰ（６ｍＬ）に溶解した。並行して、ＮＭＰ（６ｍＬ）中のＳＯＣｌ２（２０６μＬ）の溶液を調製した。反応物に、ＳＯＣｌ２溶液の溶液９００μＬを７５分間にわたって６回添加した。最後の添加後、反応混合物を室温で１５分間撹拌した。粗生成物を、ＴＦＡ法を使用してＯａｓｉｓカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、表題化合物（１３８ｍｇ；０．１９７１ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 10.15+8.1+7.42+6.0 (s+2d+m, 4H), 7.9 (m,HH), 7.75 (m, 3H), 7.42+7.31 (2m, 5H), 5.23 (s, 2H), 4.4 (m, 1H), 4.3-4.2 (m, 3H), 3.95 (dd, 1H), 3.0 (m, 2H), 2.0 (m, 1H), 1.7 + 1.6 (2m, 2H), 1.48 + 1.37 (2m, 2H), 0.88 (2d, 6H).
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝７００．２１９９／７００．２２０２［測定値／理論値］
ステップ２：５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［２－クロロ－４－［６－（４－フルオロフェニル）－４－［（１Ｒ）－２－メトキシ－１－［［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］メチル］－２－オキソ－エトキシ］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］ベンゼンスルホン酸
無水ＮＭＰ（２．５ｍＬ）中の２－（クロロメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネート（８２．４ｍｇ；０．１１７７ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＤＩＥＡ（９４μＬ；０．５４０ｍｍｏｌ）、続いてメチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（６０ｍｇ；０．０６７ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＩ（１２．４ｍｇ；０．０３４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を８０℃で４時間、室温で終夜撹拌した。次いで、２－（クロロメチル）－５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］ベンゼンスルホネートを再度添加し（１４ｍｇ；０，０１７ｍｍｏｌ）、続いてＴＢＡＩ（１７μＬ；０．０３３７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８０℃で４時間、次いで室温で終夜撹拌した。Ｆｍｏｃ脱保護ステップを、ＤＥＡ（５３μＬ；０．５１５ｍｍｏｌ）を反応物に添加し、室温で終夜撹拌することで実現した。精製を、溶液Ａ：Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ／ＮＨ４ＨＣＯ３（１９６０ｍｌ／４０／３．１６ｇ）から溶液Ｂ：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＨＣＯ３（１６００ｍｌ／４００ｍｌ／３．１６ｇ）の勾配で溶出するＯａｓｉｓ上への混合物の直接注入により実現して、表題化合物（１７ｍｇ；０．００９ｍｍｏｌ）を得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ］＋＝１３２９
ステップ３：（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ジオキサン／水（１ｍＬ／１ｍＬ）中の５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－［［４－［２－［２－クロロ－４－［６－（４－フルオロフェニル）－４－［（１Ｒ）－２－メトキシ－１－［［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］メチル］－２－オキソ－エトキシ］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチル－フェノキシ］エチル］－１－メチル－ピペラジン－１－イウム－１－イル］メチル］ベンゼンスルホン酸（１８ｍｇ；０．０１４ｍｍｏｌ）の混合物に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２．３ｍｇ；０．０５４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で４時間撹拌した。溶液をＨＣｌ １Ｎの添加によりｐＨ６～７に調整し、ジオキサンを減圧下で蒸発させた。精製を、溶液Ａ：Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ／ＮＨ４ＨＣＯ３（１９６０ｍｌ／４０／３．１６ｇ）から溶液Ｂ：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＨＣＯ３（１６００ｍｌ／４００ｍｌ／３．１６ｇ）の勾配で溶出するＯａｓｉｓ上への混合物の直接注入により実現して、表題化合物化合物（１１ｍｇ；０．００８ｍｍｏｌ）を得た。
ステップ４：（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－３－メチル－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｌ２７－Ｐ１
ＤＭＦ（０．４ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１０．５ｍｇ；０．００７ｍｍｏｌ）の溶液に、（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノエート（５．７ｍｇ；０．０１８ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を室温で４時間撹拌した。溶液を、カラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＸ－ＢｒｉｄｇｅカラムＣ１８により精製して、Ｌ２７－Ｐ１（１０ｍｇ；０．００６ｍｍｏｌ）を得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：［Ｍ＋Ｈ］＋１５１１．５０１８／１５１１．５００２［測定値／理論値］
Ｌ２８－Ｐ１の調製：
（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
Figure 2022532918000490
ステップ１：９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（クロロメチル）－３－メチル－アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート
ＮＭＰ（５ｍＬ）中の５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート（５０４．１ｍｇ；０．８１６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＭＰ（５００μＬ）中のＳＯＣｌ２（６０μＬ；０．８１６ｍｍｏｌ）の溶液を７５分間にわたって６回添加した。反応混合物を室温で１５分間撹拌した。粗生成物を、ＴＦＡ法を使用してＯａｓｉｓカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、７０％表題化合物（３８４ｍｍｏｌ）および３０％の出発材料（１７０ｍｍｏｌ）の混合物としての（３３７ｍｇ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３６００～２４００、１６８８＋１６４８、１５９９、１５１８、１０２２。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６１４．１７＋６１６．１８（Ｃｌ）
ステップ２：（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－メチル－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート
ＮＭＰ（４．５ｍｌ）中のメチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（１５２ｍｇ；０．１７１ｍｍｏｌ）の溶液に、９Ｈ－フルオレン－９－イルメチルＮ－［（１Ｓ）－１－［［（１Ｓ）－２－［４－（クロロメチル）－３－メチル－アニリノ］－１－メチル－２－オキソ－エチル］カルバモイル］－２－メチル－プロピル］カルバメート（１５０ｍｇ；０．１７１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２３８μＬ；１．３７ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＩ（７６ｍｇ；０．２０５ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を８０℃で２８時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却する。次いで、水（５００μＬ）中のＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（１３．７ｍｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）の溶液を添加する。反応混合物を室温で４８時間撹拌した。粗生成物を、Ｘ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＴＦＡ法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物（４０ｍｇ；０．０３２５ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ］＋＝１２３０．６１＋１２３２．６１（Ｃｌ）
ステップ３：（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート Ｌ２８－Ｐ１
ＤＭＦ（１８０μＬ）に溶解した（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－メチル－フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロアセテート（６．０ｍｇ；０．００４９ｍｍｏｌ）の溶液に、（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）３－［２－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］エチルカルバモイル］オキセタン－３－カルボキシレート（２．３ｍｇ；０．００７３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３．０μＬ；０．０１７ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１．５時間撹拌し、ＵＰＬＣ－ＭＳによりモニタリングした。粗生成物を、ＴＦＡ法を使用してＸ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、Ｌ２８－Ｐ１（２．９ｍｇ；０．００２０ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４２５．４５３４／１４２５．４５２７［測定値／理論値］
Ｌ２９－Ｃ３の調製：
（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000491
ステップ１：ナトリウム；５－［［（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート
ＤＭＦ（３８．６ｍＬ）中のＢｏｃ－Ｌ－Ａｌａ－ＯＨ（５８８ｍｇ；３．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（１．７７ｇ；４．６７ｍｍｏｌ）、ナトリウム５－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート（７７１ｍｇ；３．４２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．２９ｍＬ；７．７８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで濃縮乾固し、水と共蒸発させて、粗反応混合物を得た。得られた残留物を、溶離液として酢酸エチル／メタノール ９５：５～８０：２０を使用するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（１．１７ｇ；２．９５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 1.24 (s, 9H), 1.38 (m, 3H), 4.05-1.44 (m, 1H), 4.73 (d, 2H, J = 4.8 Hz), 5.04 (t, 1H, J = 5.6 Hz); 6.97-7.02 (m, 1H), 7.33 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.65-7.70 (m, 1H), 7.83 (s, 1H), 9.91 (s, 1H).
ステップ２：５－［［（２Ｓ）－２－アミノプロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート、塩酸塩
ナトリウム５－［［（２Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート（１．１７ｇ；２．９５ｍｍｏｌ；１当量）をジオキサン中ＨＣｌ ４Ｎの溶液（１０ｍＬ）中に懸濁させた。混合物を室温で２時間撹拌し、次いで濃縮乾固して、粗混合物（９８２ｍｇ；２．９５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 1.45 (d, 3H, J = 5.6 Hz), 3.91-4.0 (m, 1H), 4.76 (s, 2H), 7.41 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.66 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.85 (s, 1H), 8.17 (s, 2H), 10.44 (s, 1H).
ステップ３：５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート
ＤＭＦ（３４．５ｍＬ）中の５－［［（２Ｓ）－２－アミノプロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート、塩酸塩（９８１ｍｇ；２．９５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｆｍｏｃ－Ｌ－Ｖａｌ－ＯＳｕ（１．２９ｇ；２．９５ｍｍｏｌ；１当量）およびＤＩＰＥＡ（９７５μＬ；５．９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌し、次いで濃縮乾固し、水と共蒸発させて、粗混合物を得た。得られた残留物を、溶離液として酢酸エチル／メタノール ９５：５～８０：２０を使用するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（１．２８ｇ；２．０７２ｍｍｏｌ）を無色油状物として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.80-0.92 (m, 6H), 1.30 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 2.02-2.10 (m, 1H), 4.17-4.31 (m, 3H), 4.37-4.44 (m, 1H), 4.73 (d, 2H, J = 5.6 Hz), 5.04 (t, 1H, J = 6.4 Hz), 7.28-7.36 (m, 3H), 7.37-7.47 (m, 3H), 7.66 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.71-7.77 (m, 2H), 7.83-7.85 (m, 1H), 7.88 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 8.14 (d, 1H, J = 6.4 Hz), 9.99 (s, 1H).
ステップ４：５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］ベンゼンスルホン酸
ＴＨＦ（６５ｍＬ）中の５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－（ヒドロキシメチル）ベンゼンスルホネート（１．２８ｇ；２．０７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ピリジン（８７５μＬ；１０．８ｍｍｏｌ）、続いてクロロギ酸４－ニトロフェニル（１．０９ｇ；５．４１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、追加のクロロギ酸４－ニトロフェニル（１．０９ｇ；５．４１ｍｍｏｌ；２．５当量）を添加した。室温で５時間撹拌した後、混合物を濃縮乾固し、次いで、３０分で溶離液として水／アセトニトリル ９０／１０～０／１００を使用するＣ１８上でのカラムクロマトグラフィーにより精製した。合わせた管のアセトニトリルを除去し、残りを凍結乾燥して、表題化合物（６５０ｍｇ；０．８３ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。1H NMR (DMSO): δ 0.88 (m, 6H), 1.31 (d, 3H, J = 4.8 Hz), 1.97-2.03 (m, 1H), 3.92 (t, 1H, J = 6.8 Hz), 4.23 (s, 2H), 4.24-4.34 (m, 1H), 4.42 (t, 1H J = 5.6 Hz), 5.69 (s, 2H), 7.30-7.48 (m, 6H), 7.62 (d, 2H, J = 8 Hz), 7.72-7.76 (m, 3H), 7.89 (d, 2H, J = 6.4 Hz), 7.94 (s, 1H), 8.18 (d, 1H, J = 5.6 Hz), 8.33 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 10.11 (s, 1H). 13C NMR (DMSO): δ 18.01, 18.26, 19.21, 30.4, 46.66, 49.05, 59.91, 65.67, 67.82, 117.7, 119.1, 120.06, 122.66, 125.37, 126.33, 127.05, 127.62, 128.0, 138.06, 140.67, 143.77, 143.86, 145.1, 146.23, 151.96, 155.47, 156.12, 171.0, 171.15.
ＬＣＭＳ（２～１００ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ）：９０．４１％ Ｔｒ＝１２．７分。ポジティブモード５７８．４１検出。ネガティブモード７５９．１７検出
ステップ５：（２Ｓ）－２－［［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］メチル］－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］メチル］－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸；２，２，２－トリフルオロ酢酸（１７８．４ｍｇ；０．１８３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、５－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－［（４－ニトロフェノキシ）カルボニルオキシメチル］ベンゼンスルホン酸（１５０ｍｇ；０．１９２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９１μＬ；０．５４９ｍｍｏｌ）を連続的に添加し、混合物を室温で終夜１５分間撹拌した。粗生成物を、ＮＨ４ＨＣＯ３法を使用してＸ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、表題化合物（１７６ｍｇ、０．１１８ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４８２．１５＋１４８４．５６（Ｃｌ）
ステップ６：（２Ｓ）－２－［［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］メチル］－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中の（２Ｓ）－２－［［５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－（９Ｈ－フルオレン－９－イルメトキシカルボニルアミノ）－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］メチル］－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１７６ｍｇ；０．１１８ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（２４．１７μＬ；０．２３７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。粗生成物を、ＮＨ４ＨＣＯ３法を使用してＸ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、表題化合物（１０２ｍｇ；０．０８０９ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３６２０～２６８０、１６８３、１２３５。ＵＰＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１２６０．３７＋１２６２．３７（Ｃｌ）。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 10.20 (m, NH), 8.90 (m, 2H), 8.90 (m, 1H), 8.60 (m, NH), 8.60 (s, 1H), 7.90 (m, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.3/7.2 (m, 4H), 7.20 (m, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.15 (t, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (t, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.7 (t, 1H), 6.2 (d, 1H), 5.48 (s, 2H), 5.50 (m, 1H), 5.23 (s, 2H), 4.50 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.4 (m, 4H), 3.40 (m, 1H), 3.35 (m, 1H) 2.80 (m, 2H), 2.5 (m, 4H), 2.50 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.30 (d, 3H), 0.90 (dd, 6H)
ステップ７：（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテート
ＴＨＦ（５００μＬ）中の２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］酢酸（７４ｍｇ；０．３１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（５００μＬ）に溶解した２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェノール（７０ｍｇ；０．３８０ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ（５００μＬ）に溶解したＤＣＣ（７８．５ｍｇ；０．３８０ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。粗懸濁液をパスツールピペット中で綿パッドに通して濾過し、溶液をさらに後処理することなくステップ８で使用する。
ステップ８：（２Ｒ）－２－［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［［２－（２－アジドエトキシ）アセチル］アミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸 Ｌ２９－Ｃ３
ＤＭＦ（５００μＬ）中の（２Ｓ）－２－［［５－［４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチル－ブタノイル］アミノ］プロパノイル］アミノ］－２－スルホ－フェニル］メトキシカルボニル］ピペラジン－１－イル］エトキシ］－３－クロロ－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］メチル］－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１００ｍｇ；０．０７９３ｍｍｏｌ）の溶液に、ステップ７からのＴＨＦ中の（２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル）２－［２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ］アセテートの溶液（０．３１７ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（３９．３μＬ；０．２３８ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応混合物を室温で１５分間撹拌した。粗生成物を、ＮＨ４ＨＣＯ３法を使用してＸ－Ｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積により精製して、Ｌ２９－Ｃ３（４３ｍｇ、０．０２９１ｍｍｏｌ）を白色粉末として得た。ＩＲ（ｃｍ－１）：３２５７、２１０２、１６６３、１２３６／１０８２、８３４／７５６。1H NMR (400 MHz, dmso-d6) δ ppm 10.03 (s, NH), 8.87 (d, 1H), 8.59 (sNC, 1H), 8.35 (d, NH), 7.89 (df, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.20 (t, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.13 (m, 1H), 7.09 (m, NH), 7.03 (t, 1H), 7.00 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.24 (d, 1H), 5.48 (dNC, 1H), 5.44 (s, 2H), 5.23(AB, 2H), 4.40 ( t, 1H), 4.30 (dd, 1H), 4.24 (m, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.58 (m, 10H), 3.38 (m, 4H), 3.36 (t, 2H), 3.30 (NC, 1H), 2.75 (t, 2H), 2.50 (m, 4H), 2.50 (m, 1H), 2.00 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.30 (d, 3H), 0.88/0.82 (2d, 6H). 13C NMR (100/126 MHz, dmso-d6) δppm 158.2, 131.6, 131.1, 130.9, 130.9, 130.9, 130.9, 128.3, 126.7, 120.7, 120.4, 119.3, 117.9, 116.2, 112.5, 112.1, 110.8, 70.2, 70.2; 69.6, 67.7, 64.0, 56.7, 56.5, 55.8, 53.2, 50.4, 49.2, 43.8, 31.7, 19.7, 18.7, 18.4, 17.8. 19F NMR (376/470 MHz, dmso-d6) δ ppm -112.0.
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝１４７５．４６４３／１４７５．４６３８；［２Ｍ＋Ｈ＋Ｃａ］３＋＝９９６．６２８９／９９６．６２７３；［Ｍ＋２Ｈ］２＋＝７３８．２３７８／７３８．２３５５；［Ｍ＋Ｈ＋Ｎａ］２＋＝７４９．２２５５／７４９．２２６５。
[実施例２]
追加のリンカー、リンカー－ペイロード、およびそれらの前駆体の合成および特徴付け。
例示的なリンカー、リンカー－ペイロード、およびそれらの前駆体は、この実施例に記載した例示的な方法を使用して合成した。
２－（ブロモメチル）－４－ニトロ安息香酸の合成
Figure 2022532918000492
 ＣＣｌ４（３０００ｍＬ）中の２－メチル－４－ニトロ安息香酸（３００ｇ、１．５３７１ｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＮＢＳ（３００．９３ｇ、１．６９０８ｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（３７．８６ｇ、０．２３０５ｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を８０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をＴＬＣ分析によりモニタリングした。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２Ｌ）で希釈し、酢酸エチル（２×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗化合物を、溶離液として石油エーテル中２～３％の酢酸エチルを使用するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、２－（ブロモメチル）－４－ニトロ安息香酸を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.35 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.20 (q, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.00 (s, 3H).
４－ニトロ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）安息香酸の合成
Figure 2022532918000493
 ＡＣＮ（５０００ｍＬ）中の２－（ブロモメチル）－４－ニトロ安息香酸（２５０ｇ、０．９１２２ｍｏｌ）の混合物に、プロパ－２－イン－１－オール（２５５．６８ｇ、２６５．５０ｍＬ、４．５６０９ｍｏｌ、ｄ＝０．９６３ｇ／ｍＬ）およびＣｓ２ＣＯ３（７４３．０３ｇ、２．２８０５ｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を８０℃に１６時間加熱した。反応混合物をｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過し、酢酸エチル（２Ｌ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。得られた粗化合物に、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１Ｌ）を添加し、水層を、２Ｎ ＨＣｌ（２Ｌ）を使用することによりＰＨ２に酸性化した。濾過、真空乾燥後、４－ニトロ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）安息香酸を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 13.61 (brs, 1H), 8.37 (d, J=2.4 Hz, 1H), 8.23 (dd, J=2.4, 8.4 Hz, 1H), 8.10 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.37 (d, J=2.4 Hz, 2H), 3.52 (t, J=2.4 Hz, 1H)
メチル４－ニトロ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンゾエートの合成
Figure 2022532918000494
 ＭｅＯＨ（１３００ｍＬ）中の４－ニトロ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）安息香酸（１３０ｇ、０．５５２７ｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＳＯＣｌ２（５２６．０８ｇ、３２０．７８ｍＬ、４．４２１９ｍｏｌ、ｄ＝１．６４ｇ／ｍＬ）を０℃でゆっくりと添加した。反応物を７０℃で４時間撹拌した。反応溶媒を減圧下で蒸発させた。得られた残留物を酢酸エチル（１０００ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（６００ｍＬ）、水（５００ｍＬ）およびブライン溶液（５００ｍＬ）で洗浄した。分離した有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、メチル４－ニトロ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンゾエートを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.56 (t, J=0.8 Hz, 1H), 8.18 - 8.09 (m, 2H), 5.03 (s, 2H), 4.35 (d, J=2.4 Hz, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.49 (t, J=2.4 Hz, 1H).
メチル４－アミノ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンゾエートの合成
Figure 2022532918000495
 ＥｔＯＨ（１１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５５０ｍＬ）の混合物中のメチル４－ニトロ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンゾエート（１１０ｇ、０．４４１４ｍｏｌ）の溶液に、Ｆｅ粉末（１９７．２１ｇ、３．５３１０ｍｏｌ）およびＮＨ４Ｃｌ（１８８．８８ｇ、３．５３１０ｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を８０℃で１６時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通して濾過し、酢酸エチル（２Ｌ）で洗浄した。濾液を半分の体積まで減圧下で濃縮した。残留物に、酢酸エチル（１．５Ｌ）を添加し、２層を分離し、水層を酢酸エチル（２Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗生成物を得た。ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（石油エーテル中１５～２０％の酢酸エチル）により精製して、メチル４－アミノ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンゾエートを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.67 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.78 (t, J=1.6 Hz, 1H), 6.48 (q, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.25 (d, J=2.4 Hz, 2H), 3.70 (d, J=4.0 Hz, 3H), 3.42 (t, J=2.4 Hz, 1H).
（４－アミノ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）メタノールの合成
Figure 2022532918000496
 ＴＨＦ（１０００ｍＬ）の撹拌溶液に、ＬｉＡｌＨ４（ＴＨＦ中１Ｍ）（２１．２３ｇ、７９８．２ｍｍｏｌ、７９８．２ｍＬ）を０℃でゆっくりと添加した。ＴＨＦ（８００ｍＬ）中のメチル４－アミノ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンゾエート（７０ｇ、３１９．３ｍｍｏｌ）の溶液を０℃でゆっくりと添加した。反応物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、次いで水（２２ｍＬ）を非常にゆっくりと添加し、続いて２０％ＮａＯＨ（２２ｍＬ）および水（６６ｍＬ）を添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した。無水硫酸ナトリウムを添加して、過剰の水を吸収させた。混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）に通して濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（１０００ｍＬ）および１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（５００ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。得られた粗化合物をＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（溶離液として石油エーテル中３５～４０％の酢酸エチル）により精製して、（４－アミノ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）メタノールを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.98 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.56 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.43 (dd, J=2.4, 8.0 Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.64 (t, J=5.2 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.34 (d, J=5.6 Hz, 2H), 4.15 (d, J=2.4 Hz, 2H), 3.46 (t, J=2.4 Hz, 1H).
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｓ）－（１－（（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000497
 ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（４－アミノ－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）メタノール（１．９２ｇ、１０．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｓ）－（１－アミノ－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）カルバメート（３．９９ｇ、１０．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）、および（１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（４．２０ｇ、１１．０４ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２．６２ｍＬ、１５．０６ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。周囲温度で１時間撹拌した後、混合物を水（２００ｍＬ）に注ぎ入れた。得られた固体を濾過し、水ですすぎ、真空下で乾燥させて、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｓ）－（１－（（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝５７１．５；Ｒｔ＝０．９３分（２分酸性法）。
（Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）－５－ウレイドペンタンアミドの合成
Figure 2022532918000498
 （９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（Ｓ）－（１－（（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）カルバメート（６．０８ｇ、１０．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ジメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、２１．３１ｍＬ、４２．６２ｍｍｏｌ、４当量）を添加した。周囲温度で１．５時間撹拌した後、形成されたガム状残留物から、上澄み溶液をデカントした。残留物をエーテル（３×５０ｍＬ）で摩砕し、得られた固体を濾過し、エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させた。（Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）－５－ウレイドペンタンアミドを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋ ３４９．３；Ｒｔ＝０．４２分（２分酸性法）。
ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000499
 ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（Ｓ）－２－アミノ－Ｎ－（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）－５－ウレイドペンタンアミド（３．５０ｇ、１０．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）、（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－バリン（２．６２ｇ、１２．０５ｍｍｏｌ、１．２当量）、および（１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（４．５８ｇ、１２．０５ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．５０ｍＬ、２０．０８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。周囲温度で２時間撹拌した後、混合物を水（２００ｍＬ）に注ぎ入れ、得られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～２０％メタノール／ジクロロメタン）による精製後、ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメートを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (s, 1H), 7.96 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.55 (dq, J = 4.9, 2.2 Hz, 2H, アリール), 7.32 (d, J = 8.9 Hz, 1H, アリール), 6.76 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.95 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.38 (s, 2H), 5.01 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.45 (dd, J = 25.2, 5.3 Hz, 3H), 4.20 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.83 (dd, J = 8.9, 6.7 Hz, 1H), 3.49 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.97 (dh, J = 26.0, 6.5 Hz, 2H), 1.96 (h, J = 6.6 Hz, 1H), 1.74 - 1.50 (m, 2H), 1.39 (m, 11H), 0.84 (dd, J = 16.2, 6.7 Hz, 6H).
ＬＣＭＳ：ＭＮａ＋ ５７０．５；Ｒｔ＝０．７９分（２分酸性法）。
ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（クロロメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000500
 ０℃のアセトニトリル（１３．３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（ヒドロキシメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメート（２．００グラム、３．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、塩化チオニル（０．５３ｍＬ、７．３０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。氷浴中で１時間撹拌した後、溶液を水（４０ｍＬ）で希釈し、得られた白色沈殿物を濾過により収集し、空気乾燥し、高真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（クロロメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＮａ＋ ５８８．５；Ｒｔ＝２．１７分（５分酸性法）。
２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロ安息香酸の合成
Figure 2022532918000501
 ＭｅＯＨ（１０００ｍＬ）中の６－ニトロイソベンゾフラン－１（３Ｈ）－オン（９０ｇ、５０２．４３ｍｍｏｌ、１．００当量）の溶液に、Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）中のＫＯＨ（２８．１９ｇ、５０２．４３ｍｍｏｌ、１．００当量）を添加した。褐色混合物を２５℃で１．５時間撹拌した。褐色混合物を減圧下で濃縮して、残留物を得、ＤＣＭ（２０００ｍＬ）に溶解した。混合物に、ＴＢＤＰＳＣｌ（２９６．９１ｇ、１．０８ｍｏｌ、２７７．４９ｍＬ、２．１５当量）およびイミダゾール（１７１．０３ｇ、２．５１ｍｏｌ、５．００当量）を添加し、２５℃で１２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１／０、１／１）により精製して、２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロ安息香酸を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 1.13 (s, 9 H) 5.26 (s, 2 H) 7.34 - 7.48 (m, 6 H) 7.68 (br d, J=8 Hz, 4 H) 8.24 (br d, J=8 Hz, 1 H) 8.46 (br d, J=8 Hz, 1 H) 8.74 (s, 1 H).
（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロフェニル）メタノールの合成
Figure 2022532918000502
 ＴＨＦ（２０５ｍＬ）中の２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロ安息香酸（４１ｇ、９４．１４ｍｍｏｌ、１当量）の混合物に、ＢＨ３．ＴＨＦ（１Ｍ、４７０．６８ｍＬ、５当量）を添加した。黄色混合物を６０℃で２時間撹拌した。混合物にＭｅＯＨ（４００ｍＬ）を添加し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。次いで、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）およびＤＣＭ（３００ｍＬ）を添加し、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出し、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１／０、１／１）により精製した。（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロフェニル）メタノールを白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ ppm 1.10 (s, 9 H) 4.58 (s, 2 H) 4.89 (s, 2 H) 7.32 - 7.51 (m, 6 H) 7.68 (dd, J=8, 1.38 Hz, 4 H) 7.76 (d, J=8 Hz, 1 H) 8.15 (dd, J=8 2.26 Hz, 1 H) 8.30 (d, J=2 Hz, 1 H).
２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンズアルデヒドの合成
Figure 2022532918000503
 ＤＣＭ（４５０ｍＬ）中の（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロフェニル）メタノール（３４ｇ、８０．６５ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＭｎＯ２（５６．０９ｇ、６４５．２２ｍｍｏｌ、８当量）を添加した。黒色混合物を２５℃で３６時間撹拌した。混合物にＭｅＯＨ（４００ｍＬ）を添加し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。次いで、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）およびＤＣＭ（３００ｍＬ）を添加し、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出し、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２＝１００％）により精製した。２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンズアルデヒドを白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.14 (s, 9 H) 5.26 (s, 2 H) 7.34 - 7.53 (m, 6 H) 7.60 - 7.73 (m, 4 H) 8.13 (d, J=8Hz, 1 H) 8.48 (dd, J=8, 2.51 Hz, 1 H) 8.67 (d, J=2 Hz, 1 H) 10.16 (s, 1 H).
Ｎ－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）プロパ－２－イン－１－アミンの合成
Figure 2022532918000504
 ＤＣＭ（１３０ｍＬ）中の２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンズアルデヒド（１２．６ｇ、３０．０３ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、プロパ－２－イン－１－アミン（４．１４ｇ、７５．０８ｍｍｏｌ、４．８１ｍＬ、２．５当量）およびＭｇＳＯ４（３６．１５ｇ、３００．３３ｍｍｏｌ、１０当量）を添加し、次いで懸濁液混合物を２５℃で２４時間撹拌した。少量の反応溶液を取り、ＮａＢＨ４で処理し、ＴＬＣは、１つの新しいポイントが形成されたことを示した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。（Ｅ）－Ｎ－［［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］－５－ニトロ－フェニル］メチル］プロパ－２－イン－１－イミンを黄色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.11 (s, 9 H) 2.48 (t, J=2.38 Hz, 1 H) 4.52 (t, J=2.13 Hz, 2 H) 5.09 (s, 2 H) 7.35 - 7.49 (m, 6 H) 7.63 - 7.72 (m, 4 H) 7.79 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 8.25 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1 H) 8.68 (d, J=2.26 Hz, 1 H) 8.84 (t, J=1.88 Hz, 1 H).
（Ｅ）－Ｎ－［［２－［［ｔｅｒｔ－ブチル（ジフェニル）シリル］オキシメチル］－５－ニトロ－フェニル］メチル］プロパ－２－イン－１－イミン（１２ｇ、２６．２８ｍｍｏｌ、１当量）をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、次いでＮａＢＨ４（１．４９ｇ、３９．４２ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、黄色混合物を－２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳは、所望の化合物が検出されたことを示した。反応混合物を－２０℃でＭｅＯＨ（２００ｍＬ）の添加によりクエンチし、次いで減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で溶解し、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配の溶離液）により精製した。Ｎ－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）プロパ－２－イン－１－アミンを淡黄色油状物として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.12 (s, 9 H) 2.13 (t, J=2.38 Hz, 1 H) 3.33 (d, J=2.51 Hz, 2 H) 3.80 (s, 2 H) 4.93 (s, 2 H) 7.36 - 7.49 (m, 6 H) 7.69 (dd, J=7.91, 1.38 Hz, 4 H) 7.77 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 8.16 (dd, J=8.41, 2.38 Hz, 1 H) 8.24 (d, J=2.26 Hz, 1 H).
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000505
 ジオキサン（９０ｍＬ）中のＮ－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）プロパ－２－イン－１－アミン（９ｇ、１９．６２ｍｍｏｌ、１当量）およびＦＭＯＣ－ＯＳＵ（７．２８ｇ、２１．５９ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液に、飽和ＮａＨＣＯ３（９０ｍＬ）を添加し、白色懸濁液を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得た。残留物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～３０％酢酸エチル／石油エーテルの溶離液）により精製した。（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（７．７ｇ、１１．０８ｍｍｏｌ、収率５６．４８％、純度９８％）を白色固体として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.12 (s, 9 H) 2.17 (br d, J=14.31 Hz, 1 H) 3.87 - 4.97 (m, 9 H) 6.98 - 8.28 (m, 21 H).
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－アミノ－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000506
 １０％ＡｃＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中の（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（５．０ｇ、７．３４ｍｍｏｌ、１．０当量）の氷浴冷却溶液に、Ｚｎ（７．２０ｇ、１１０ｍｍｏｌ、１５当量）を添加した。氷浴を取り外し、得られた混合物を２時間撹拌し、その時点で、これをｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドに通して濾過した。揮発物を真空中で除去し、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３（飽和）、ＮａＣｌ（飽和）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～７５％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）の後、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－アミノ－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝６５１．６；Ｒｔ＝３．７７分（５分酸性法）。
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000507
 ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中の（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－アミノ－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（２．９９ｇ、４．５９ｍｍｏｌ、１．０当量）および（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタン酸（１．７２ｇ、４．５９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、エチル２－エトキシキノリン－１（２Ｈ）－カルボキシレート（２．２７ｇ、９．１８ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。１０分間撹拌した後、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加し、溶液は均一になった。反応物を１６時間撹拌し、揮発物を真空中で除去し、ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）による精製後、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝１００８．８；Ｒｔ＝３．７７分（５分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000508
 （９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（１．６０ｇ、１．５８８ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ＭｅＯＨ中２Ｍジメチルアミン（３０ｍＬ、６０ｍｍｏｌ、３７当量）およびＴＨＦ（１０ｍＬ）を添加した。３時間静置した後、揮発物を真空中で除去し、残留物をＥｔ２Ｏで摩砕して、ＦＭＯＣ脱保護副産物を除去した。得られた固体に、ＣＨ２Ｃｌ２（１６ｍＬ）およびピリジン（４ｍＬ）を添加し、不均一溶液に、プロパルギルクロロホルメート（１５５ｕＬ、１．５８８ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。３０分間撹拌した後、追加のプロパルギルクロロホルメート（１５５ｕＬ、１．５８８ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。さらに２０分間撹拌した後、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加して、残ったクロロホルメートをクエンチし、揮発物を真空中で除去した。ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝８６７．８；Ｒｔ＝３．４０分（５分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000509
 ＴＨＦ（７．５ｍＬ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（９８４ｍｇ、１．１３５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＨＦ中１．０Ｍフッ化テトラブチルアンモニウム（２．２７ｍＬ、２．２７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。６時間静置した後、揮発物を真空中で除去し、残留物をＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～４０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝６２９．６；Ｒｔ＝１．７４分（５分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000510
 ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（２０５ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ピリジン（１５８ｕＬ、１．９６ｍｍｏｌ、５当量）を添加した。不均一な混合物を０℃の氷浴中で冷却し、塩化チオニル（７１ｕＬ、０．９８ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。氷浴中で３時間撹拌した後、反応物をＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～３０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により直接精製して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝６４７．６；Ｒｔ＝２．５４分（５分酸性法）。
２－（ヒドロキシメチル）－Ｎ－メチル－５－ニトロベンズアミドの合成
Figure 2022532918000511
 ＭｅＯＨ（１５００ｍＬ）中の６－ニトロイソベンゾフラン－１（３Ｈ）－オン（５００ｇ、２．７９ｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、ＭｅＮＨ２（３．００ｋｇ、２９．９４ｍｏｌ、６００ｍＬ、純度３１．０％）を２５℃で添加し、１時間撹拌した。固体を濾過し、水で２回（６００ｍＬ）洗浄し、高真空下で乾燥させて、残留物を得た。生成物である２－（ヒドロキシメチル）－Ｎ－メチル－５－ニトロベンズアミドを白色固体として得た。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．５３７分、ＭＳｍ／ｚ＝１９３．２。1H NMR: 400 MHz DMSO δ 8.57 (br d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.31 (dd, J = 2.4, 8.6 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.54 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.78 (d, J = 4.4 Hz, 3H).
（２－（（メチルアミノ）メチル）－４－ニトロフェニル）メタノールの合成
Figure 2022532918000512
 ＴＨＦ（５０００ｍＬ）中の２－（ヒドロキシメチル）－Ｎ－メチル－５－ニトロベンズアミド（５６０ｇ、２．６６ｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、次いでＢＨ３－Ｍｅ２Ｓ（５０６ｇ、６．６６ｍｏｌ）（ＴＨＦ中２．０Ｍ）を６０分間滴下添加し、７０℃に５時間加熱した。ＬＣＭＳは、出発材料が消費されたことを示した。完了後、メタノール中４Ｍ ＨＣｌ（１２００ｍＬ）を０℃で反応混合物に添加し、６５℃で８時間加熱した。反応混合物を０℃に冷却し、固体を濾過し、減圧中で濃縮した。生成物である（２－（（メチルアミノ）メチル）－４－ニトロフェニル）メタノール（５２０ｇ）を白色固体として得た。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．７４２分、ＭＳｍ／ｚ＝１９７．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H NMR: 400 MHz DMSO δ 9.25 (br s, 2H), 8.37 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.14 (dd, J = 2.4, 8.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.72 (br s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.15 (br s, 2H), 2.55 - 2.45 (m, 3H)
１－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロフェニル）－Ｎ－メチルメタンアミンの合成
Figure 2022532918000513
 ＤＣＭ（２６００ｍＬ）中の（２－（（メチルアミノ）メチル）－４－ニトロフェニル）メタノール（５２０ｇ、２．６５ｍｏｌ）およびイミダゾール（７２１ｇ、１０．６ｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、ＴＢＤＰＳ－ＣＬ（１．０９ｋｇ、３．９８ｍｏｌ、１．０２Ｌ）を滴下添加し、２時間撹拌した。混合物を氷冷水（１０００ｍＬ）に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させて、粗生成物を得た。粗生成物を、酢酸エチル：石油エーテル（１０／１～１）で溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して、残留物を得た。生成物である１－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロフェニル）－Ｎ－メチルメタンアミンを黄色液体として得た。ＬＣＭＳ：生成物：Ｒｔ＝０．９１０分、ＭＳｍ／ｚ＝４３５．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H NMR: 400 MHz CDCl3 δ 8.23 (d, J=2.4 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.71 - 7.66 (m, 4H), 7.50 - 7.37 (m, 6H), 4.88 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.12 (s, 9H)
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000514
 ＴＨＦ（４０００ｍＬ）中の１－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロフェニル）－Ｎ－メチルメタンアミン（４００ｇ、９２０．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＦＭＯＣ－ＯＳＵ（３４１．５ｇ、１．０１ｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１８６．２ｇ、１．８４ｍｏｌ、２５６．２ｍＬ）を添加し、混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を水（１６００ｍＬ）に注ぎ入れ、酢酸エチル（１０００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させて、粗生成物を得た。粗生成物を、石油エーテル：酢酸エチル（１／０～１／１）で溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）（メチル）カルバメートを白色固体として得た。ＬＣＭＳ：Ｒｔ＝０．９３１分、ＭＳｍ／ｚ＝６５７．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H NMR: EW16000-26-P1A, 400 MHz CDCl3 δ 8.21 - 7.96 (m, 1H), 7.87 - 7.68 (m, 3H), 7.68 - 7.62 (m, 4H), 7.62 - 7.47 (m, 2H), 7.47 - 7.28 (m, 9H), 7.26 - 7.05 (m, 2H), 4.81 (br s, 1H), 4.62 - 4.37 (m, 4H), 4.31 - 4.19 (m, 1H), 4.08 - 3.95 (m, 1H), 2.87 (br d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.12 (s, 9H).
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－アミノ－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000515
 ＭｅＯＨ（９０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）中の（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）－５－ニトロベンジル）（メチル）カルバメート（３．０ｇ、４．５７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を脱気し、三方活栓を介してＮ２バルーンにパージした。脱気／Ｎ２パージを２回繰り返した後、１０％Ｐｄ／Ｃ ｄｅＧｕｓｓａ型（０．４８６ｇ、０．４５７ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。得られた混合物を脱気し、三方活栓を介して２Ｈ２バルーンにパージした。脱気／Ｈ２パージを２回繰り返した後、反応物をＨ２バルーン圧下で４時間撹拌した。反応物を脱気し、Ｎ２にパージし、ｃｅｌｉｔｅのパッドに通して濾過し、ＭｅＯＨでさらに溶出した。揮発物を真空中で除去し、高真空でポンピングした後、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－アミノ－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝６２７．７；Ｒｔ＝１．５９分（２分酸性法）。
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000516
 ２：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中の（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－アミノ－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（２．８６ｇ、４．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）および（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタン酸（１．７１ｇ、４．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）に、エチル２－エトキシキノリン－１（２Ｈ）－カルボキシレート（２．２５６ｇ、９．１２ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。均一な溶液を１６時間撹拌し、その時点で、追加の（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタン酸（０．３４０ｇ、０．２当量）およびエチル２－エトキシキノリン－１（２Ｈ）－カルボキシレート（０．４５２ｇ、０．４当量）を添加して、反応を完了させた。さらに５時間撹拌した後、揮発物を真空中で除去し、ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）による精製後、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝９８４．１；Ｒｔ＝１．５４分（２分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000517
 ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（２．０５ｇ、２．０８５ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ＭｅＯＨ中２．０Ｍジメチルアミン（１０．４２ｍＬ、２０．８５ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。１６時間撹拌した後、揮発物を真空中で除去した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（０．５３３ｍＬ、４．１７ｍｍｏｌ、２当量）およびプロパルギルクロロホルメート（０．２６４ｍＬ、２．７１ｍｍｏｌ、１．３当量）を添加した。室温で１６時間撹拌した後、反応物をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３（飽和）、ＮａＣｌ（飽和）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝８４３．８；Ｒｔ＝１．３５分（２分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000518
 ＴＨＦ（１０．０ｍＬ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（１．６ｇ、１．９０ｍｍｏｌ、１．０当量）の０℃溶液に、ＴＨＦ中１．０Ｍフッ化テトラブチルアンモニウム（３．８０ｍＬ、３．８０ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。室温に加温し、１６時間撹拌した後、揮発物を真空中で除去し、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨＣＯ３（飽和）、ＮａＣｌ（飽和）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、残留物をＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～３０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝６０５．７；Ｒｔ＝０．８１分（２分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000519
 ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（３５０ｍｇ、０．５７９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ピリジン（０．２７８ｍＬ、３．４７ｍｍｏｌ、６当量）を添加した。不均一な混合物を０℃の氷浴中で冷却し、塩化チオニル（０．１２６ｍＬ、１．７３ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。氷浴中で３時間撹拌した後、反応物をＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～３０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝６２３．７；Ｒｔ＝２．１９分（５分酸性法）。
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000520
 ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（２．６ｇ、２．６４ｍｍｏｌ、１．０当量）に、酢酸（０．７５７ｍＬ、１３．２２ｍｍｏｌ、５．０当量）およびＴＨＦ中１．０Ｍ ＴＢＡＦ（２．９１ｍＬ、２．９１ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。溶液を７２時間撹拌し、その時点で、揮発物を真空中で除去した。ＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～３０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）による精製後、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝７４５．５；Ｒｔ＝１．０７分（２分酸性法）。
（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000521
 ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（２００ｍｇ、０．２６９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ピリジン（０．１３０ｍＬ、１．６１ｍｍｏｌ、６当量）を添加した。不均一な混合物を０℃の氷浴中で冷却し、塩化チオニル（０．０５９ｍＬ、０．８０６ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。氷浴中で短時間撹拌した後、反応物を室温まで加温しながら２時間撹拌した。反応物をＩＳＣＯ ＳｉＯ２クロマトグラフィー（０～３０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝７６３．２；Ｒｔ＝１．１８分（２分酸性法）。
一般手順１
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000522
 ＤＭＦ（０．５ｍＬ）に溶解した（Ｒ）－２－（（５－（３－クロロ－２－メチル－４－（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）プロパン酸塩酸塩（７３．８ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ、１．０当量）およびプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（プロパ－２－イン－１－イル）カルバメート（７８ｍｇ、０．１２２ｍｍｏｌ、１．５当量）に、ＤＩＥＡ（７０ｕＬ、０．４０５ｍｍｏｌ、５．０当量）、続いてヨウ化テトラブチルアンモニウム（２５．４ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ、０．８５当量）を添加した。５時間撹拌した後、反応物をＤＭＳＯ（３ｍＬ）で希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＬＣＭＳ：Ｍ＋＝１４８６．３；Ｒｔ＝２．７０分（５分塩基性法）。
一般手順２
１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000523
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２４ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、１．０当量）および２５－アジド－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン（２６．５ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ、４当量）に、ｔ－ＢｕＯＨ（１ｍＬ）を添加した。混合物をハウス真空により脱気し、三方活栓を介してＮ２バルーンにパージした。脱気／パージを３回繰り返した。アスコルビン酸ナトリウムの１６ｍｇ／ｍＬ水溶液（２９７ｕＬ、０．０２４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、溶液を脱気し、Ｎ２に３回パージした。硫酸銅の４ｍｇ／ｍＬ水溶液（２９８ｕＬ、０．００４８ｍｍｏｌ、０．３当量）を添加し、溶液を脱気し、Ｎ２に３回パージした。Ｎ２下で３時間撹拌した後、反応物をＤＭＳＯ（３ｍＬ）で希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋＝２３０７．０７３０、Ｒｔ＝２．６９分（５分酸性法）。
一般手順３
１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000524
 １－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１９ｍｇ、０．００８２ｍｍｏｌ、１．０当量）に、２５％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）を添加した。４５分間静置した後、揮発物を真空中で除去し、ＣＨ２Ｃｌ２を添加し、揮発物を真空中で除去し、ポンプオンした。残留物をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（２２ｕＬ、０．１２４ｍｍｏｌ、１５当量）および２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパノエート（５．１ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。１８時間静置した後、溶液をＤＭＳＯ（３ｍＬ）で希釈し、ＲＰ－ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィーにより精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２３９９．０７９７、Ｒｔ＝２．４３分（５分酸性での実行）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.83 (dd, J=13.82, 6.72 Hz, 6 H) 1.30 - 1.52 (m, 2 H) 1.55 - 1.76 (m, 2 H) 1.83 (s, 3 H) 1.88 - 2.08 (m, 1 H) 2.28 - 2.46 (m, 7 H) 2.73 - 2.84 (m, 4 H) 2.84 - 3.08 (m, 8 H) 3.15 - 3.27 (m, 3 H) 3.43 - 3.66 (m, 68 H) 3.73 - 3.83 (m, 7 H) 4.16 - 4.30 (m, 3 H) 4.32 - 4.43 (m, 2 H) 4.47 (br s, 6 H) 4.60 (br s, 3 H) 5.16 - 5.30 (m, 3 H) 5.40 (br s, 2 H) 5.44 - 5.52 (m, 1 H) 5.99 (br t, J=5.07 Hz, 1 H) 6.21 (d, J=6.48 Hz, 1 H) 6.71 (t, J=7.40 Hz, 1 H) 6.97 - 7.04 (m, 2 H), 7.00 (s, 2H) 7.12 - 7.23 (m, 5 H) 7.27 - 7.54 (m, 8 H) 7.63 (d, J=5.14 Hz, 1 H) 7.78 - 7.94 (m, 3 H) 7.99 (br s, 1 H) 8.05 - 8.23 (m, 2 H) 8.60 (s, 1 H) 8.88 (d, J=5.13 Hz, 1 H) 10.24 (br s, 1 H).
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000525
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ、１．０当量）および１－アジド－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘプタコサン－２７－酸（２８．３ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ、３当量）を用いて一般手順２に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２４２０．０８６７、Ｒｔ＝２．５７分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１０－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000526
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１０－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２５１５．０８７９、Ｒｔ＝２．４３分（５分酸性法）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.83 (dd, J=13.82, 6.72 Hz, 6 H) 1.30 - 1.52 (m, 2 H) 1.55 - 1.76 (m, 2 H) 1.83 (s, 3 H) 1.88 - 2.08 (m, 1 H) 2.28 - 2.46 (m, 7 H) 2.73 - 2.84 (m, 4 H) 2.84 - 3.08 (m, 8 H) 3.15 - 3.27 (m, 3 H) 3.43 - 3.66 (m, 68 H) 3.73 - 3.83 (m, 7 H) 4.16 - 4.30 (m, 3 H) 4.32 - 4.43 (m, 2 H) 4.47 (br s, 6 H) 4.60 (br s, 3 H) 5.16 - 5.30 (m, 3 H) 5.40 (br s, 2 H) 5.44 - 5.52 (m, 1 H) 5.99 (br t, J=5.07 Hz, 1 H) 6.21 (d, J=6.48 Hz, 1 H) 6.71 (t, J=7.40 Hz, 1 H) 6.97 - 7.04 (m, 2 H), 7.00 (s, 2H) 7.12 - 7.23 (m, 5 H) 7.27 - 7.54 (m, 8 H) 7.63 (d, J=5.14 Hz, 1 H) 7.78 - 7.94 (m, 3 H) 7.99 (br s, 1 H) 8.05 - 8.23 (m, 2 H) 8.60 (s, 1 H) 8.88 (d, J=5.13 Hz, 1 H) 10.24 (br s, 1 H).
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000527
 （Ｒ）－２－（（５－（３－クロロ－２－メチル－４－（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）プロパン酸塩酸塩（３００ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ、１．０当量）およびプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（２４６ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ、１．２当量）を用いて一般手順１に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４６１．５８００、Ｒｔ＝２．５３分（５分酸性法）。
１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000528
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）および２５－アジド－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン（１６．８ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ、３．０当量）を用いて一般手順２に従って、１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８７２．８３５９、Ｒｔ＝２．５６分（５分酸性法）。
１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000529
 １－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１６．９ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１９６７．８３７５、Ｒｔ＝２．４６分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000530
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１２ｍｇ、０．００８２ｍｍｏｌ、１．０当量）および１－アジド－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘプタコサン－２７－酸（１１．５ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ、３．０当量）を用いて一般手順２に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１９２８．８４５９、Ｒｔ＝２．５２分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000531
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１２ｍｇ、０．００６ｍｍｏｌ、１．００当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２０２４．８５１６、Ｒｔ＝２．４２分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000532
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した４－メトキシベンジル（Ｒ）－２－（（５－（３－クロロ－２－メチル－４－（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）プロパノエート（１６０ｍｇ、０．１６１ｍｍｏｌ、１．０当量）および（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（１５３ｍｇ、０．２０１ｍｍｏｌ、１．２５当量）に、ＤＩＥＡ（０．０５６ｍＬ、０．３２１ｍｍｏｌ、２．０当量）、続いてヨウ化テトラブチルアンモニウム（６５．３ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。１６時間静置した後、ＴＨＦ中２．０ジメチルアミン（０．８０４ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。２時間静置した後、揮発物を真空中で除去し、ＤＭＳＯ（６ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４９９．３７００；Ｒｔ＝２．５９分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３－オキソ－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８－ノナオキサ－２－アザノナコシル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000533
 ＤＭＦ（１．５ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ、１．０当量）および２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）カーボネート（３０．８ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ、２．２当量）に、ＤＩＥＡ（０．００９ｍＬ、０．０５３ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。１時間静置した後、ＤＭＳＯ（３ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３－オキソ－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８－ノナオキサ－２－アザノナコシル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１９０９．３８００；Ｒｔ＝２．９２分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３－オキソ－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８－ノナオキサ－２－アザノナコシル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ２－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000534
 １－（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３－オキソ－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８－ノナオキサ－２－アザノナコシル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２５．３ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３－オキソ－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８－ノナオキサ－２－アザノナコシル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ２－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８８４．７９００、Ｒｔ＝２．５０分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（８０－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ペンタコサオキサ－２－アザオクタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000535
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１５０ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ、１．０当量）および７９－（（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）オキシ）－７９－オキソ－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－ペンタコサオキサノナヘプタコンタン酸（１３４ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ、１．１当量）に、ＤＩＥＡ（０．０８１ｍＬ、０．４６４ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。１８時間静置した後、ＤＭＳＯ（６ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（８０－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ペンタコサオキサ－２－アザオクタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２７００．８７０１；Ｒｔ＝２．８３分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（８０－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ペンタコサオキサ－２－アザオクタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１１－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000536
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（８０－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ペンタコサオキサ－２－アザオクタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（８０－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ペンタコサオキサ－２－アザオクタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１１－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２６７４．８２０１、Ｒｔ＝２．４４分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000537
 （Ｒ）－２－（（５－（３－クロロ－２－メチル－４－（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）プロパン酸（５０ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（クロロメチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメート（３４．１ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ、１．２当量）を用いて一般手順１に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＬＣＭＳ：Ｍ＋＝１３３７．２、Ｒｔ＝１．１１分（２分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムまたは（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－４－［２－［４－［［４－［［（２Ｓ）－２－［［（２Ｓ）－２－［３－［２－（２，５－ジオキソピロール－１－イル）エトキシ］プロパノイルアミノ］－３－メチル－ブタノイル］アミノ］－５－ウレイド－ペンタノイル］アミノ］フェニル］メチル］－４－メチル－ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］－２－メチル－フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（Ｌ９－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000538
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（５５ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ９－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４３１．５４００、Ｒｔ＝２．５０分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000539
 ４－メトキシベンジル（Ｒ）－２－（（５－（３－クロロ－２－メチル－４－（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）プロパノエート（８５ｍｇ、０．０８５ｍｍｏｌ、１．０当量）およびｔｅｒｔ－ブチル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（クロロメチル）－３－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメート（５８ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ、１．２当量）を用いて一般手順１に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１５２４．６２００、Ｒｔ＝２．９５分（５分酸性法）。
１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000540
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ、１．０当量）および２５－アジド－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン（５．８ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順２に従って、１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＬＣＭＳ：［（Ｍ＋）＋Ｈ＋］＋２／２＝９０８．５、Ｒｔ＝１．１５分（２分酸性法）。
１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ８－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000541
 １－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ８－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１９０８．８０９７、Ｒｔ＝２．３７分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000542
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１２３．１ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４９９．５６０１、Ｒｔ＝２．５０分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000543
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ、１．０当量）および１－アジド－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘプタコサン－２７－酸（３７．４ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ、３．０当量）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（２６－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４－オクタオキサヘキサコシル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１９６５．５６０１、Ｒｔ＝２．３５分（５分酸性法）。
１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサトリヘプタコンタン－７３－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ５－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000544
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０．４ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ、１．０当量）および７３－アジド－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサトリヘプタコンタン（２８．１ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ、１．５当量）を用いて一般手順２に従って、１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサトリヘプタコンタン－７３－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ５－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２６１３．２１００、Ｒｔ＝２．４４分（５分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000545
 ＤＭＦ（２ｍＬ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（ヒドロキシメチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（２４９ｍｇ、０．４１２ｍｍｏｌ）および４－ニトロフェニル（４－ニトロソフェニル）カーボネート（３５６ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液を、均一になるまで撹拌し、１６時間静置した。溶液をＤＭＳＯ（６ｍＬ）で希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、修飾剤なし）により精製した。凍結乾燥して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣ／ＭＳ ＭＨ＋＝７７０．７、Ｒｔ＝２．４５分（５分酸性法）。
プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（メチル（２－（メチルアミノ）エチル）カルバモイル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000546
 ＤＭＦ（１ｍｌ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（１００ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ’－ジメチル－エチレンジアミン（２２．９０ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＤＩＰＥＡ（０．１１３ｍｌ、０．６５０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。得られた溶液を室温で終夜撹拌した。反応物をＤＭＳＯで希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＮＨ４ＯＨ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、プロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（メチル（２－（メチルアミノ）エチル）カルバモイル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメートを得た。ＬＣＭＳ：ＭＨ＋＝７１９．９、Ｒｔ＝０．７３分（２分酸性法）。
（Ｒ）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシフェニル）－４－（（１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000547
 ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中の（Ｒ）－４－（２－（４－（４－（１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムまたは（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－［４－メチル－４－（３－スルホプロピル）ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（１００ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）の溶液に、数滴のＨ２ＳＯ４（濃）を添加した。終夜撹拌した後、ＭｅＯＨを真空中で除去し、残留物をＤＭＳＯに溶解し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、（Ｒ）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシフェニル）－４－（（１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋＝１０２７．２９００、Ｒｔ＝２．３１分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000548
 ０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中の（Ｒ）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシフェニル）－４－（（１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（５０ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＴＥＡ（３４ｕＬ、０．２４３ｍｍｏｌ、５．０当量）、続いてクロロギ酸４－ニトロフェニル（１０．８ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。１５分間撹拌した後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（メチル（２－（メチルアミノ）エチル）カルバモイル）オキシ）メチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（６６．３ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液、続いてＤＩＥＡ（４０ｕＬ、０．２３１ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。２時間撹拌した後、揮発物を真空中で除去し、溶液をＤＭＳＯ（３ｍｌ）で希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋＝１７７１．６７００、Ｒｔ＝２．５７分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000549
 ＴＨＦ（１ｍＬ）中の４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（２３ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、２Ｎ ＬｉＯＨ（０．０３２ｍＬ、０．０６５ｍｍｏｌ、５当量）を添加した。２時間撹拌した後、溶液をＡｃＯＨで中和し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋＝１７５７．６２００、Ｒｔ＝２．４６分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000550
 ４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（１７ｍｇ、０．００９７ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８５２．５２００、Ｒｔ＝２．２９分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（Ｌ１２－Ｐ２）の合成
Figure 2022532918000551
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（３－（（（２－（（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（１０ｍｇ、０．００５４ｍｍｏｌ、１．０当量）および２５－アジド－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン（４．４ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ、２当量）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（６－（３－（（（２－（（（（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）カルバモイル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（Ｌ１２－Ｐ２）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２２６１．８６０１、Ｒｔ＝２．２４分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（６－（３－（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000552
 （Ｒ）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシフェニル）－４－（（１－メトキシ－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（４０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ、１．０当量）およびプロパ－２－イン－１－イル（５－（（Ｒ）－２－（（Ｒ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（クロロメチル）ベンジル）（メチル）カルバメート（３６．４ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して一般手順１に従ったが、アルキル化が完了した後、２Ｎ ＬｉＯＨ（０．０９７ｍＬ、０．１９５ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加し、２時間撹拌した後、中和し、ＲＰ－ＨＰＬＣにより精製するように改変した。凍結乾燥して、４－（２－（４－（６－（３－（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１５９９．５８５６、Ｒｔ＝１．３４分（２分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（３－（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000553
 ４－（２－（４－（６－（３－（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（４６ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（３－（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６９４．５６９９、Ｒｔ＝２．５５分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（６－（３－（（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（Ｌ４－Ｐ２）の合成
Figure 2022532918000554
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（３－（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチル（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）カルボニル）アミノ）メチル）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（４４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、１．０当量）および２５－アジド－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン（２１．２ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ、２当量）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（６－（３－（（２－（（（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）オキシ）－４－フルオロフェニル）－４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチル－１－（３－スルホプロピル）ピペラジン－１－イウム（Ｌ４－Ｐ２）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２１０３．８０００、Ｒｔ＝２．４７分（５分酸性法）。
一般手順４：
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（３９－メチル－３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラコンタン－４０－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000555
 ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（６０ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ、１．０当量）および２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサオクタトリアコンタン－３８－オエート（３５．７ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ、１．３当量）に、ＤＩＰＥＡ（０．０３５ｍＬ、０．２００ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。１８時間静置した後、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（３９－メチル－３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラコンタン－４０－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋＝２０９２．９３９９；Ｒｔ＝２．８８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（３９－メチル－３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラコンタン－４０－イル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３２－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000556
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（３９－メチル－３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラコンタン－４０－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４３．４ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（３９－メチル－３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラコンタン－４０－イル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋＝２０６６．８７９９；Ｒｔ＝２．４４分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（５１－メチル－５０－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサ－５１－アザドペンタコンタン－５２－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000557
 ２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサペンタコンタン－５０－オエート（４４．８ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順４に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（５１－メチル－５０－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサ－５１－アザドペンタコンタン－５２－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２２４６．０４００；Ｒｔ＝２．８８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（５１－メチル－５０－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサ－５１－アザドペンタコンタン－５２－イル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３１－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000558
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（５１－メチル－５０－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサ－５１－アザドペンタコンタン－５２－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４７．５ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（５１－メチル－５０－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサ－５１－アザドペンタコンタン－５２－イル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２２２１．００００；Ｒｔ＝２．４５分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７５－メチル－７４－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサ－７５－アザヘキサヘプタコンタン－７６－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000559
 ２，５－ジオキソピロリジン－１－イル２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサテトラヘプタコンタン－７４－オエート（５２．６ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ、１．３当量）を用いて一般手順４に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７５－メチル－７４－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサ－７５－アザヘキサヘプタコンタン－７６－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２５９８．２５００；Ｒｔ＝２．８８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７５－メチル－７４－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサ－７５－アザヘキサヘプタコンタン－７６－イル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３０－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000560
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７５－メチル－７４－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサ－７５－アザヘキサヘプタコンタン－７６－イル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３８．８ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７５－メチル－７４－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサ－７５－アザヘキサヘプタコンタン－７６－イル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２５７３．２０００；Ｒｔ＝２．４７分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000561
 ５－（ｔｅｒｔ－ブチル）１－（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル）（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｌ－グルタメート（３９．０ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ、１．１当量）を用いて一般手順４に従って、１－（２－（（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１９０６．８１０１；Ｒｔ＝３．０３分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｓ）－２－アミノ－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000562
 ＤＭＳＯ（２ｍＬ）に溶解した１１－（２－（（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３８．８ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ジメチルアミン（０．１９２ｍＬ、０．３８４ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。４時間静置した後、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（Ｓ）－２－アミノ－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６８４．４０００；Ｒｔ＝２．６４分（５分酸性法）。
一般手順５
１－（２－（（（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000563
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）（スルホ）－Ｄ－アラニン（５５．２ｍｇ、０．１４１ｍｍｏｌ、１．３当量）および２－（３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル）－１，１，３，３－テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（４１．３ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ＤＩＰＥＡ（０．０２４ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ、８．０当量）を添加した。１０分間静置した後、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２００ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。２．５時間静置した後、ＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８７２．７０００；Ｒｔ＝３．０９分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｒ）－２－アミノ－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000564
 ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解した１－（２－（（（Ｒ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１７３ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ジメチルアミン（０．８７０ｍＬ、１．７４０ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。５時間静置した後、すべての揮発物を真空中で除去した。固体をジエチルエーテルで摩砕した。ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（Ｒ）－２－アミノ－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６５０．５８００；Ｒｔ＝２．７１分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｒ）－２－アミノ－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７０－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000565
 １－（２－（（（Ｓ）－２－アミノ－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１４５ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（（（Ｒ）－２－アミノ－Ｎ－メチル－３－スルホプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６２５．５６０１；Ｒｔ＝２．３２分（５分酸性法）。
一般手順６
１－（２－（（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソ－２－（２－スルホアセトアミド）ペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000566
 ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した２－スルホ酢酸（４．８３ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ、２．０当量）および２－（３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル）－１，１，３，３－テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（９．８５ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、１．５当量）に、ＤＩＰＥＡ（０．０２４ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ、８．０当量）を添加した。１０分間静置した後、１－（２－（（（Ｓ）－２－アミノ－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２９．１ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ、１．０）を添加した。４５分間静置した後、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソ－２－（２－スルホアセトアミド）ペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８０６．７０００；Ｒｔ＝３．１０分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－４－カルボキシ－Ｎ－メチル－２－（２－スルホアセトアミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７１－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000567
 １－（２－（（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソ－２－（２－スルホアセトアミド）ペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２３．７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－４－カルボキシ－Ｎ－メチル－２－（２－スルホアセトアミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７２５．５９００；Ｒｔ＝２．３９分（５分酸性法）。
１－（２－（（Ｓ）－４０－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）－４２－メチル－３８，４１－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９，４２－ジアザトリテトラコンタン－４３－イル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000568
 １－（２－（（（Ｓ）－２－アミノ－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－５－オキソペンタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＭａｌ－ＰＥＧ１２－ＮＨＳエステル（１８．３１ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ、１．５当量）を用いて一般手順４に従って、１－（２－（（Ｓ）－４０－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）－４２－メチル－３８，４１－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９，４２－ジアザトリテトラコンタン－４３－イル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２２５５．０４００；Ｒｔ＝２．９７分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（Ｓ）－４０－（２－カルボキシエチル）－４２－メチル－３８，４１－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９，４２－ジアザトリテトラコンタン－４３－イル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７２－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000569
 １－（２－（（Ｓ）－４０－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）－４２－メチル－３８，４１－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９，４２－ジアザトリテトラコンタン－４３－イル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０．１ｍｇ、８．９１μｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（Ｓ）－４０－（２－カルボキシエチル）－４２－メチル－３８，４１－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９，４２－ジアザトリテトラコンタン－４３－イル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ］＋＝２１７３．９１９９；Ｒｔ＝２．４０分（５分酸性法）。
１－（２－（（２－（ビス（２－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－オキソエチル）アミノ）－Ｎ－メチルアセトアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000570
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１７．０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ、１．０当量）およびビス（２－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－オキソエチル）グリシン（１０．９７ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ、１．５当量）を用いて一般手順５に従って、１－（２－（（２－（ビス（２－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－オキソエチル）アミノ）－Ｎ－メチルアセトアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７８４．８０００；Ｒｔ＝３．３１分（５分酸性法）。
１－（２－（（２－（ビス（カルボキシメチル）アミノ）－Ｎ－メチルアセトアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ６７－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000571
 １－（２－（（２－（ビス（２－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－オキソエチル）アミノ）－Ｎ－メチルアセトアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（９．２ｍｇ、５．１２μｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（（２－（ビス（カルボキシメチル）アミノ）－Ｎ－メチルアセトアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６４７．６１００；Ｒｔ＝２．２８分（５分酸性法）。
一般手順７
１－（２－（（（Ｓ）－３－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000572
 試薬は、ＤＭＦストック溶液として使用した。（Ｓ）－３－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソブタン酸（８．０４ｍｇ、１６１μＬ、０．０２０ｍｍｏｌ、１．２当量）および２－（３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル）－１，１，３，３－テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（６．８１ｍｇ、６８１μＬ、０．０１８ｍｍｏｌ、１．１当量）に、ＤＩＰＥＡ（２２．６８μＬ、０．１３０ｍｍｏｌ、８．０当量）を添加した。１０分間静置した後、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、３５３μＬ、０．０１６ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。４５分間静置した後、ジメチルアミン（１６３μｌ、０．３２６ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間静置した後、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（Ｓ）－３－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６７０．２３００；Ｒｔ＝２．６９分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（２－スルホアセトアミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000573
 １－（２－（（（Ｓ）－３－アミノ－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０．６ｍｇ、１０．２３μｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順６に従って、１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（２－スルホアセトアミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７９２．６８９９；Ｒｔ＝３．１７分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（２－スルホアセトアミド）プロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７９－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000574
 １－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（２－スルホアセトアミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２５．３ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（２－スルホアセトアミド）プロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７１１．５６９９；Ｒｔ＝２．４８分（５分酸性法）。
４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテートの合成
Figure 2022532918000575
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解したｔｅｒｔ－ブチル３－ヒドロキシプロパノエート（１１１ｍｇ、０．７６０ｍｍｏｌ、１当量）およびビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（２８９ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ、１．２当量）に、ＤＩＰＥＡ（０．２２１ｍＬ、１．２６７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。１時間静置した後、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）Ｌ－アスパルテート（２００ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ）を添加した。１６時間静置した後、ＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテートを得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５２．４；Ｒｔ＝２．６８分（５分酸性法）。
（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）アミノ）－４－オキソブタン酸の合成
Figure 2022532918000576
 ＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解した４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテート（５２．７ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）に、水酸化パラジウム（８．２０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応雰囲気を水素に切り替えた。１６時間撹拌した後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過した。濾液を真空中で除去して、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテートを得た。
１－（２－（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２，１３，１３－トリメチル－３，７，１１－トリオキソ－８，１２－ジオキサ－２，６－ジアザテトラデシル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000577
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、２３５μＬ、０．０１１ｍｍｏｌ、１当量）および４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテート（７．８４ｍｇ、２０４μＬ、０．０２２ｍｍｏｌ、２当量）を用いて一般手順７に従って、１－（２－（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２，１３，１３－トリメチル－３，７，１１－トリオキソ－８，１２－ジオキサ－２，６－ジアザテトラデシル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８４２．８０００；Ｒｔ＝３．２３分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（２－カルボキシエトキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１０２－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000578
 １－（２－（（Ｓ）－５－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２，１３，１３－トリメチル－３，７，１１－トリオキソ－８，１２－ジオキサ－２，６－ジアザテトラデシル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１７．６ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（２－カルボキシエトキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７０５．６２００；Ｒｔ＝２．４１分（５分酸性法）。
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｏ－（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）－Ｌ－セリネートの合成
Figure 2022532918000579
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解したｔｅｒｔ－ブチル（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｌ－セリネート（３００ｍｇ、０．７８２ｍｍｏｌ、１当量）およびビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（３５７ｍｇ、１．１７４ｍｍｏｌ、１．５当量）に、ＤＩＰＥＡ（０．１３６ｍＬ、０．７８２ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。１６時間静置した後、ＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｏ－（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）－Ｌ－セリネートを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝５６６．４；Ｒｔ＝３．０１分（５分酸性法）。
１－（２－（（（（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000580
 ｔｅｒｔ－ブチルＮ－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｏ－（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）－Ｌ－セリネート（７．１４ｍｇ、１４３μＬ、０．０１３ｍｍｏｌ、１．２当量）および１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、２３５μＬ、０．０１１ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ＤＩＰＥＡ（１５．１μＬ、０．０８７ｍｍｏｌ、８．０当量）を添加した。１６時間静置した後、ジメチルアミン（１０９μｌ、０．２１７ｍｍｏｌ、２０当量）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌した。ＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（（（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６８６．７２００；Ｒｔ＝２．７１分（５分酸性法）。
１－（２－（（（（（Ｓ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソ－２－（２－スルホアセトアミド）プロポキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000581
 １－（２－（（（（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２２．９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順６に従って、１－（２－（（（（（Ｓ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソ－２－（２－スルホアセトアミド）プロポキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８０８．６８９９；Ｒｔ＝３．１８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（（（Ｓ）－２－カルボキシ－２－（２－スルホアセトアミド）エトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７７－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000582
 １－（２－（（（（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１５．３ｍｇ、７．１１μｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（（（Ｓ）－２－カルボキシ－２－（２－スルホアセトアミド）エトキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７２７．５８００；Ｒｔ＝２．４７分（５分酸性法）。
４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（４－（ジエトキシホスホリル）ブタノイル）－Ｌ－アスパルテートの合成
Figure 2022532918000583
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）Ｌ－アスパルテート（２００ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ、１．０当量）および４－（ジエトキシホスホリル）ブタン酸（２１３ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ、１．５当量）に、ジシクロヘキシルメタンジイミン（１５７ｍｇ、０．７６０ｍｍｏｌ、１．２当量）、１Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－１－オール水和物（１４６ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＤＩＰＥＡ（０．１１０ｍＬ、０．６３３ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。１６時間静置した後、ＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（４－（ジエトキシホスホリル）ブタノイル）－Ｌ－アスパルテートを得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８６．４；Ｒｔ＝２．１５分（５分酸性法）。
（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－４－オキソブタン酸の合成
Figure 2022532918000584
 ＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解した４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（４－（ジエトキシホスホリル）ブタノイル）－Ｌ－アスパルテート（ＹＵＢＩ５－０４０－ＥＸＰ０８２－００１）（１００ｍｇ、０．２０６ｍｍｏｌ、１．０当量）に、水酸化パラジウム（１４．４６ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応雰囲気を水素に切り替えた。１６時間撹拌した後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過した。濾液を真空中で除去して、（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－４－オキソブタン酸を得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９６．３；Ｒｔ＝１．３５分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－Ｎ－メチル－４－オキソブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000585
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、３５３μＬ、０．０１６ｍｍｏｌ、１当量）および（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－４－オキソブタン酸（１２．８７ｍｇ、１６１μｌ、０．０３３ｍｍｏｌ、２当量）を用いて一般手順７に従って、１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－Ｎ－メチル－４－オキソブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＭＳ：Ｍ／２＋＝９４０．３；Ｒｔ＝２．６０分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１０３－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000586
 １－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－Ｎ－メチル－４－オキソブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－３－（４－（ジエトキシホスホリル）ブタンアミド）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７９５．６７００；Ｒｔ＝２．４４分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－２，６－ジアミノ－Ｎ－メチルヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000587
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ、１当量）および（Ｓ）－２，５－ビス（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）ペンタン酸（７．５１ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ、１．２当量）を用いて一般手順７に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－２，６－ジアミノ－Ｎ－メチルヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６２７．４０００；Ｒｔ＝２．４８分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－Ｎ－メチル－２，６－ビス（２－スルホアセトアミド）ヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000588
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－２，６－ジアミノ－Ｎ－メチルヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（９．７ｍｇ、０．００４９ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順６に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－Ｎ－メチル－２，６－ビス（２－スルホアセトアミド）ヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８７１．６７００；Ｒｔ＝３．０２分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－Ｎ－メチル－２，６－ビス（２－スルホアセトアミド）ヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ７８－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000589
 －（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－Ｎ－メチル－２，６－ビス（２－スルホアセトアミド）ヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１５ｍｇ、７．５５μｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－Ｎ－メチル－２，６－ビス（２－スルホアセトアミド）ヘキサンアミド）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８４６．６０００；Ｒｔ＝２．４９分（５分酸性法）。
４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボニル）－Ｌ－アスパルテートの合成
Figure 2022532918000590
 ＤＭＦ（３．２ｍＬ）に溶解した（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（３４４ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ）および４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）Ｌ－アスパルテート（３００ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ）に、ＤＩＰＥＡ（０．１６５ｍＬ、０．９５０ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加し、１Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－１－オール水和物（１５４ｍｇ、０．９９７ｍｍｏｌ、１．０５当量）および３－（（（エチルイミノ）メチレン）アミノ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－１－アミン塩酸塩（１９１ｍｇ、０．９９７ｍｍｏｌ、１．０５当量）を添加した。１６時間静置した後、ＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボニル）－Ｌ－アスパルテートを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝６４１．５；Ｒｔ＝２．５５分（５分酸性法）。
（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソ－３－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）ブタン酸の合成
Figure 2022532918000591
 ＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解した４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボニル）－Ｌ－アスパルテート（１００ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ、１．０当量）に、水酸化パラジウム（１１．２６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応雰囲気を水素に切り替えた。１６時間撹拌した後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過した。濾液を真空中で除去して、（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソ－３－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）ブタン酸を得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ－Ｈ］－＝５３２．３、Ｒｔ＝１．７１分（５分酸性法）。
１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000592
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、１．０当量）および（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソ－３－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）ブタン酸（１２．２ｍｇ、９６８μＬ、０．０２３ｍｍｏｌ、１．４当量）を用いて一般手順７に従って、１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２０１４．７８００；Ｒｔ＝３．２１分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000593
 ＤＣＭ（３２ｍＬ）に溶解した１－（２－（（（Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２２．７ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、ＴＦＡ（０．６７ｍＬ）を添加した。４５分間撹拌した後、溶媒を真空中で除去して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７３８．６２００；Ｒｔ＝２．３０分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000594
 ＴＨＦ（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５，６－テトラアセトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２２．７ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ、１．０当量）に、水酸化リチウム（５．０４ｍｇ、０．１２０ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。２時間撹拌した後、溶媒を真空中で除去した。水（１ｍＬ）、ＴＦＡ（０．２ｍＬ）、ＭｅＣＮ（１ｍＬ）およびＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１５７０．５９００；Ｒｔ＝２．０２分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ６８－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000595
 ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１０．８ｍｇ、０．００５６ｍｍｏｌ、１．０当量）および２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパノエート（５．２５ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ、３．５当量）に、ＤＩＰＥＡ（７．８６μＬ、０．０４５ｍｍｏｌ、８当量）を添加した。１．５時間静置した後、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５，６－テトラヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボキサミド）プロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７６５．６５００；Ｒｔ＝２．３１分（５分酸性法）。
４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテートの合成
Figure 2022532918000596
 ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－ヒドロキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２５４ｍｇ、０．７６０ｍｍｏｌ、１．２当量）およびビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（２８９ｍｇ、０．９５０ｍｍｏｌ、１．５当量）に、ＤＩＰＥＡ（０．２２１ｍＬ、１．２６７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。１時間静置した後、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）Ｌ－アスパルテート（２００ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。１６時間静置した後、ＤＭＳＯ（６ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテートを得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ－Ｈ］－＝６３８．４；Ｒｔ＝２．６１分（５分酸性法）。
（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）ブタン酸の合成
Figure 2022532918000597
 ＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解した４－ベンジル１－（ｔｅｒｔ－ブチル）（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）－Ｌ－アスパルテート（５０ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ、１．０当量）に、水酸化パラジウム（５．４９ｍｇ、７．８２μｍｏｌ、０．１当量）を添加した。反応雰囲気を水素に切り替えた。１６時間撹拌した後、反応混合物をｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過した。濾液を真空中で除去して、（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）ブタン酸を得た。ＨＲＭＳ：［Ｍ－Ｈ］－：５４８．４、Ｒｔ＝１．７９分（５分酸性法）。
１－（２－（（（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000598
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、１．０当量）および（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）ブタン酸（１２．５ｍｇ、０．２５０ｍＬ、０．０２３ｍｍｏｌ、１．４当量）を用いて一般手順７に従って、１－（２－（（（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２０３０．７９００；Ｒｔ＝３．１９分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000599
 ＤＣＭ（２ｍＬ）に溶解した１－（２－（（（３Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－Ｎ－メチル－４－オキソ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）ブタンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２５．８ｍｇ、１０．８６μｍｏｌ、１．０当量）に、ＴＦＡ（０．６７ｍＬ）を添加した。２時間撹拌した後、溶媒を真空中で除去して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７５４．６２００；Ｒｔ＝２．３１分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－６－カルボキシ－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000600
 ＴＨＦ（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－Ｎ－メチル－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２６ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ、１．０当量）に、水酸化リチウム（５．２０ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。２時間撹拌した後、溶媒を真空中で除去した。水（１ｍＬ）、ＴＦＡ（０．２ｍＬ）、ＭｅＣＮ（１ｍＬ）およびＤＭＳＯ（４ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－６－カルボキシ－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６１４．５８００；Ｒｔ＝２．０４分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－６－カルボキシ－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ６９－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000601
 ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－６－カルボキシ－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１０ｍｇ、５．１１μｍｏｌ、１．０当量）および２，５－ジオキソピロリジン－１－イル３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパノエート（４．７５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ、３．５当量）に、ＤＩＰＥＡ（７．１２μｌ、０．０４１ｍｍｏｌ、８当量）を添加した。１．５時間静置した後、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）を添加し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～７０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（３Ｓ）－３－カルボキシ－３－（（（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－６－カルボキシ－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）カルボニル）アミノ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８０９．６３００；Ｒｔ＝２．３２分（５分酸性法）。
１－（２－（（３－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000602
 ＤＭＦ（１ｍＬ）中の１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４５ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）、１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカン－１３－酸（１２ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１２ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．０２３ｍＬ、０．１３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で３０分間撹拌した。Ｍｅ２ＮＨ（ＴＨＦ中２Ｍ、０．０６５ｍＬ、０．１３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。追加量のＭｅ２ＮＨ（ＴＨＦ中２Ｍ、０．１ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌し続け、ＤＭＳＯ（３ｍＬ）で希釈し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（２－（（３－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６５８．７２００、Ｒｔ＝２．５７分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３，１３－ジオキソ－１５－ホスホノ－６，９－ジオキサ－２，１２－ジアザペンタデシル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000603
 ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の３－ホスホプロピオン酸（１１ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２７ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．０６０ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１０分間撹拌した。この混合物を、ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の１－（２－（（３－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）－Ｎ－メチルプロパンアミド）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４０ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０１０ｍＬ、０．０５７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２日間撹拌した。混合物をＤＭＳＯ（３ｍＬ）で希釈し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３，１３－ジオキソ－１５－ホスホノ－６，９－ジオキサ－２，１２－ジアザペンタデシル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７９４．７１００、Ｒｔ＝２．７８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３，１３－ジオキソ－１５－ホスホノ－６，９－ジオキサ－２，１２－ジアザペンタデシル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４１－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000604
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３，１３－ジオキソ－１５－ホスホノ－６，９－ジオキサ－２，１２－ジアザペンタデシル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを用いて一般手順３に従って（ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２による第１のステップ後の生成物を、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー［ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＮＨ４ＯＨ修飾剤］により精製したことを除く）、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２－メチル－３，１３－ジオキソ－１５－ホスホノ－６，９－ジオキサ－２，１２－ジアザペンタデシル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１７６９．４５００、Ｒｔ＝２．３３分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４４，４４－ペンタデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２－テトラデカオキソ－４３－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカアザペンタテトラコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000605
 ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）中の１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４３．６ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ、１．０当量）、３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，４２，４２－テトラデカメチル－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０－トリデカオキソ－４１－オキサ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６－ドデカアザトリテトラコンタン酸（２５．９ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ、１．０当量）、およびＨＡＴＵ（１０．５ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ、１．１当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（２２μＬ、０．１２６ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。得られた溶液を周囲温度で１時間撹拌した。反応物を１ｍＬのＤＭＳＯで希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４４，４４－ペンタデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２－テトラデカオキソ－４３－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカアザペンタテトラコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋ ２５０８．１４９９ Ｒｔ＝２．７８分（５分酸性法）。
１－（２－（４１－カルボキシ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９－トリデカオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカアザヘンテトラコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３５－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000606
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４４，４４－ペンタデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２－テトラデカオキソ－４３－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカアザペンタテトラコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（５０．４ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（４１－カルボキシ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９－トリデカオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８－トリデカアザヘンテトラコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋ ２４２７．０４００、ｒｔ＝２．３０分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，６２，６２－ヘンイコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０－イコサオキソ－６１－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカアザトリヘキサコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000607
 ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）中の１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３１．９ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、１．０当量）、３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，６０，６０－イコサメチル－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８－ノナデカオキソ－５９－オキサ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４－オクタデカアザヘンヘキサコンタン酸（２６．８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、１．０当量）、およびＨＡＴＵ（７．７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ、１．１当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（１６μＬ、０．０９２ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。得られた溶液を周囲温度で１時間撹拌した。反応物を１ｍＬのＤＭＳＯで希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，６２，６２－ヘンイコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０－イコサオキソ－６１－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカアザトリヘキサコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋ ２９３４．３６０１ Ｒｔ＝２．７３分（５分酸性法）。
１－（２－（５９－カルボキシ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７－ノナデカオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカアザノナペンタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３６－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000608
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，６２，６２－ヘンイコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０－イコサオキソ－６１－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカアザトリヘキサコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４５．５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（５９－カルボキシ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７－ノナデカオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６－ノナデカアザノナペンタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋ ２８５３．２７６６、ｒｔ＝２．２０分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，８０，８０－ヘプタコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ヘキサコサオキソ－７９－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサアザヘンオクタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000609
 ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）中の１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２７．８ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、１．０当量）、３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７８，７８－ヘキサコサメチル－４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－ペンタコサオキソ－７７－オキサ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２－テトラコサアザノナヘプタコンタン酸（３０．２ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ、１．０当量）、およびＨＡＴＵ（６．７ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ、１．１当量）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（１４μＬ、０．０８０ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加した。得られた溶液を周囲温度で１時間撹拌した。反応物を１ｍＬのＤＭＳＯで希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，８０，８０－ヘプタコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ヘキサコサオキソ－７９－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサアザヘンオクタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ Ｍ＋ ３３６０．５７９８ Ｒｔ＝２．６８分（５分酸性法）。
１－（２－（７７－カルボキシ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５－ペンタコサオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサアザヘプタヘプタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３７－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000610
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，８０，８０－ヘプタコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５，７８－ヘキサコサオキソ－７９－オキサ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサアザヘンオクタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４１．３ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（７７－カルボキシ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサメチル－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５－ペンタコサオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４－ペンタコサアザヘプタヘプタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋ ３２７９．４６７８、ｒｔ＝２．２１分（５分酸性法）。
ｔｅｒｔ－ブチル１－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－オエートの合成
Figure 2022532918000611
 ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍｌ）中の２－アジドエタン－１－オール（１０５ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）に、硫黄イソシアナチジン酸クロリド（０．１０５ｍｌ、１．２１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌した。次いで、ＴＥＡ（０．３３６ｍｌ、２．４１ｍｍｏｌ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－オエート（５１８ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で１時間、室温で２時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ４Ｃｌ、および１Ｎ ＨＣｌ（２．４ｍＬ）でクエンチした。水性物をＣＨ２Ｃｌ２（５×）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回転蒸発により濃縮して、透明油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０～１５％ＭｅＯＨ、ＥＬＳＤ検出）により精製して、ｔｅｒｔ－ブチル１－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－オエートを透明油状物（４７４ｍｇ、０．７８８ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：Ｍ＋ＮＨ４＋＝６１９．５、Ｒｔ＝０．９４分（酸性、２分）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.33 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 4.28 - 4.20 (m, 2H), 3.60 (td, J = 5.6, 5.0, 2.9 Hz, 4H), 3.55 - 3.45 (m, 22H), 3.16 - 3.04 (m, 2H), 2.46 - 2.38 (m, 2H), 1.41 (s, 9H).
１－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－酸の合成
Figure 2022532918000612
 ０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－オエート（１４５ｍｇ、０．２４１ｍｍｏｌ）に、ＴＦＡ（１ｍＬ、１２．９８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１．４５時間撹拌し、次いで２５℃の水浴にて回転蒸発により濃縮し、高真空中で３０分間乾燥させた。残留物を無水トルエン（３×２ｍＬ）と共沸乾燥させ、真空中で終夜乾燥させて、１－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－酸を透明油状物（１４７ｍｇ、理論収率に基づいて８９重量％）として得た：ＬＣＭＳ：Ｍ＋＝５４６．３、０．６５分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.30 (s, 1H), 7.77 - 7.71 (m, 1H), 4.25 - 4.19 (m, 2H), 3.63 - 3.55 (m, 4H), 3.54 - 3.45 (m, 22H), 3.07 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.47 - 2.40 (m, 2H).
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートの合成
Figure 2022532918000613
 ０℃の１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（３２１ｍｇ、０．２１０ｍｍｏｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２中２５％ＴＦＡ（１２．３ｍＬ、４０．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温に上昇させ、１時間撹拌し、次いで高真空下、室温の水浴にて濃縮した。粗製物をＤＭＳＯ（３ｍＬ）で希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１５０ｇ、１０～８０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末（２２４ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）として得た：ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１３０４．５１００、Ｒｔ＝２．１５分（５分酸性）
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートの合成
Figure 2022532918000614
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（１６４ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）およびＭａｌ－Ｐｅｇ１－ＮＨＳエステル（７２ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末（１７０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）として得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４９９．５６９９、Ｒｔ＝２．４５分（５分酸性）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (s, 1H), 8.81 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.07 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.42 - 7.29 (m, 3H), 7.24 (dd, J = 8.9, 5.4 Hz, 2H), 7.18 - 7.05 (m, 5H), 6.99 - 6.91 (m, 4H), 6.65 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.43 (dd, J = 9.8, 3.5 Hz, 1H), 5.23 - 5.12 (m, 2H), 4.54 (d, J = 11.2 Hz, 4H), 4.33 - 4.09 (m, 7H), 3.69 (s, 3H), 3.42 - 2.78 (m, 32H, DMSOと重複), 2.39 - 2.20 (m, 2H), 1.91 - 1.81 (m, 1H), 1.77 (s, 3H), 1.46 (dd, J = 93.8, 31.3 Hz, 3H), 0.76 (dd, J = 13.8, 6.7 Hz, 6H); 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6): -112.18 ppm
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２０－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサイコシル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（Ｌ５９－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000615
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（３２ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）および１－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサヘンイコサン－２１－酸（２６．２ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２０－カルボキシ－３，６，９，１２，１５，１８－ヘキサオキサイコシル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末として得た：ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２０４４．７７００、Ｒｔ＝２．３６分（５分酸性）。
３－（２－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパン酸の合成
Figure 2022532918000616
 ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍｌ）中の２－アジドエタン－１－オール（１０５ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）に、硫黄イソシアナチジン酸クロリド（０．１０５ｍｌ、１．２１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌した。０℃で、ＴＥＡ（０．３３６ｍｌ、２．４１ｍｍｏｌ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパノエート（４０１ｍｇ、技術純度＞８０％、１．４４７ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間、次いで室温で１時間撹拌した後、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ、および１Ｎ ＨＣｌ（２．４ｍＬ）でクエンチした。水性物をＣＨ２Ｃｌ２（５×）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回転蒸発により濃縮して、透明油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０～１５％ＭｅＯＨ、ＥＬＳＤ検出）による精製に続いて、ｔｅｒｔ－ブチル３－（２－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパノエートを濃厚な透明油状物（３５６ｍｇ、０．９１０ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋ＮＨ４＋＝４８７．４、Ｒｔ＝０．９０分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.31 (s, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 2H), 3.58 (td, J = 5.6, 5.0, 3.7 Hz, 4H), 3.53 - 3.39 (m, 10H), 3.10 - 3.03 (m, 2H), 2.44 - 2.39 (m, 2H), 1.40 (s, 9H).
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－（２－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパノエート（１６２ｍｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）に、ＴＦＡ（１ｍＬ、１３．０ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間撹拌した後、混合物を２５℃の水浴で回転蒸発により濃縮した。残留物を、無水トルエン（３×２ｍＬ）を用いる共沸蒸留により高真空中で３０分間、真空中で終夜乾燥させて、３－（２－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパン酸を濃厚な油状物（１３９ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋ＮＨ４＋＝４３１．４、Ｒｔ＝０．６２分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 7.78 - 7.69 (m, 1H), 4.27 - 4.15 (m, 2H), 3.67 - 3.54 (m, 8H), 3.49 - 3.42 (m, 4H), 3.07 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.47 - 2.39 (m, 4H).
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２－（２－（２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（Ｌ６０－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000617
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（１５ｍｇ、１０μｍｏｌ）および３－（２－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）プロパン酸（１２ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２－（２－（２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末として得た：ＨＲＭＳ：ＭＳ＋＝１９１２．７０００、Ｒｔ＝２．３８分（５分酸性）。
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートの合成
Figure 2022532918000618
 ＣＨ２Ｃｌ２（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメート（１５３５ｍｇ、７．４８ｍｍｏｌ）、Ａｇ２ＣＯ３（８２４８ｍｇ、１４．９６ｍｍｏｌ）および一片の結晶ヨウ素の混合物を、粉末化４Ａ分子篩（１４００ｍｇ）とともに１５分間撹拌した。混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２（６．００ｍｌ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－ブロモテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２０５０ｍｇ、４．９９ｍｍｏｌ）を添加し、また、添加前に１５分間、粉末化４Ａ分子篩（１４００ｍｇ）とともに撹拌した。得られた混合物をアルミニウム箔で覆い、室温で６０時間撹拌し、次いでｃｅｌｉｔｅに通して濾過し、ＥｔＯＡｃ洗浄した。濾液を濃縮して、透明油状物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０～１０％ＭｅＯＨ、ＥＬＳＤ検出）により精製して、適切な画分の濃縮後に、濃厚な油状物（６４０ｍｇ）を、所望の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートおよび（２Ｓ，３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＲ）－５－（アセトキシメチル）－２－（２－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）－２－メチルテトラヒドロ－５Ｈ－［１，３］ジオキソロ［４，５－ｂ］ピラン－６，７－ジイルジアセテートの４７／５３％混合物として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝５３６．４、Ｒｔ＝０．９６分（２分、酸、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.77 (s, 2H), 5.78 (s, 2H), 5.76 (s, 1H), 5.28 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 5.04 (t, J = 3.1 Hz, 1H), 4.91 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 4.87 - 4.74 (m, 3H), 4.38 (ddd, J = 5.2, 3.1, 0.9 Hz, 1H), 4.24 - 4.10 (m, 3H), 4.07 - 3.96 (m, 2H), 3.92 (dt, J = 8.8, 4.1 Hz, 1H), 3.80 (dt, J = 11.2, 4.4 Hz, 1H), 3.68 - 3.60 (m, 1H), 3.57 - 3.45 (m, 7H), 3.38 (td, J = 6.2, 1.5 Hz, 7H), 3.07 (dt, J = 6.1, 3.0 Hz, 4H), 2.08 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.04 (s, 6H), 2.01 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.65 (s, 3H), 1.39 (s, 19H).
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートの合成
Figure 2022532918000619
 ０℃のＣＨ２Ｃｌ２（１６ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートおよび（２Ｓ，３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＲ）－５－（アセトキシメチル）－２－（２－（２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）－２－メチルテトラヒドロ－５Ｈ－［１，３］ジオキソロ［４，５－ｂ］ピラン－６，７－ジイルジアセテートの４７／５３％混合物（６２２ｍｇ、１．１６１ｍｍｏｌ）に、ＴＦＡ（４．０ｍＬ、５２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温に上昇させ、１時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を真空下で６０分間乾燥させて、薄黄色油状物を得た。粗生成物をＤＭＳＯ（４ｍＬ）で希釈し、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（５～６０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤、ＥＬＳＤ検出）により精製した。適切な画分を凍結乾燥して、ＴＦＡ塩としての（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートを白色粉末（１９５ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝４３６．４、Ｒｔ＝０．５８分（酸性、２分）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 3H), 5.27 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.92 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.86 - 4.75 (m, 2H), 4.22 - 4.15 (m, 1H), 4.07 - 3.94 (m, 3H), 3.89 - 3.53 (m, 14H, DMSOと混合), 3.03 - 2.91 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (s, 3H).
２－アジドエチル（Ｎ－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000620
 ＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍｌ）中の２－アジドエタン－１－オール（１６ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）に、硫黄イソシアナチジン酸クロリド（０．０１６ｍｌ、０．１８４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で１時間撹拌し、次いでＴＥＡ（０．１２８ｍｌ、０．９１９ｍｍｏｌ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１．５ｍＬ）中のＴＦＡ塩としての（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１１６ｍｇ、０．２１１ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間、次いで室温で１時間撹拌した後、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ、および１Ｎ ＨＣｌ（０．９１９ｍＬ、０．９１９ｍｍｏｌ）でクエンチした。水性物をＣＨ２Ｃｌ２（５×）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回転蒸発により濃縮して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートを透明油状物（１２１ｍｇ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝６２８、Ｒｔ＝０．８５分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (s, 1H), 7.79 - 7.71 (m, 1H), 5.26 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 4.85 - 4.73 (m, 2H), 4.25 - 4.14 (m, 3H), 4.06 - 3.94 (m, 2H), 3.79 (ddd, J = 11.3, 5.3, 3.8 Hz, 1H), 3.68 - 3.40 (m, 8H), 3.16 - 3.00 (m, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.94 (s, 3H).
上記の生成物をジオキサン（３ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却した。ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（水中０．５Ｍ、２．９４ｍｌ、１．４７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた透明溶液を室温で１時間撹拌し、次いで０℃にてＨＣｌ（５Ｎ、０．１４７ｍＬ、０．７３５ｍｍｏｌ）でクエンチした。混合物を２０℃の水浴にて回転蒸発により濃縮して、ジオキサンの大部分を除去した。残留溶液（約３ｍＬ）を分取ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ ５μｍ ３０×５０ｍｍカラム、水中２～１２％のアセトニトリル ０．１％ＦＡ含有、流速：７５ｍＬ／分、ＭＳ ４５９．３、４７６．３検出）により精製して、凍結乾燥により適切な画分の溶媒を除去した後に、２－アジドエチル（Ｎ－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバメートを半固体（６４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：Ｍ＋ＮＨ４＋＝４７７．３、ＭＳ－＝４５８（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 4.96 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.89 (dd, J = 13.7, 4.8 Hz, 2H), 4.47 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.22 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.15 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 3.67 (ddd, J = 12.0, 5.7, 2.0 Hz, 1H), 3.62 - 3.39 (m, 8H), 3.19 - 2.90 (m, 6H).
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（Ｌ６３－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000621
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（３６ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）および２－アジドエチル（Ｎ－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバメート（２２ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末として得た：ＨＲＭＳ：ＭＳ＋＝１９５８．６８９９、Ｒｔ＝２．３１分（５分酸性）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.17 (s, 1H), 10.16 (s, 1H), 8.81 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.07 (d, J = 13.5 Hz, 2H), 7.74 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.68 (q, J = 4.3, 2.7 Hz, 3H), 7.56 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.42 - 7.28 (m, 3H), 7.23 (ddd, J = 8.5, 5.4, 2.6 Hz, 2H), 7.17 - 7.04 (m, 5H), 6.99 - 6.91 (m, 4H), 6.65 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.43 (dd, J = 9.8, 3.6 Hz, 1H), 5.23 - 5.11 (m, 2H), 4.59 (dd, J = 11.3, 7.4 Hz, 8H), 4.42 - 4.06 (m, 12H), 3.53 - 3.17 (m, 27H, DMSOと重複), 3.09 - 2.80 (m, 17H, DMSOと重複), 2.39 - 2.20 (m, 3H), 1.86 (h, J = 6.9 Hz, 1H), 1.77 (s, 3H), 1.68 - 1.21 (m, 5H), 0.76 (dd, J = 13.8, 6.8 Hz, 6H); 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6): -112.18 ppm.
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（（２，２－ジメチル－４－オキソ－３，８，１１－トリオキサ－５－アザトリデカン－１３－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートの合成
Figure 2022532918000622
 ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート（１０４６ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ）、Ａｇ２ＣＯ３（４６２７ｍｇ、８．３９ｍｍｏｌ）および一片の結晶ヨウ素の混合物を、粉末化４Ａ分子篩（７００ｍｇ）とともに１５分間撹拌した。混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２（３．００ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－ブロモテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１１５０ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）を添加した（また、粉末化４Ａ分子篩（７００ｍｇ）とともに１５分間撹拌した）。得られた混合物をアルミニウム箔で覆い、室温で６０時間撹拌し、次いでｃｅｌｉｔｅに通して濾過し、ＥｔＯＡｃ洗浄した。濾液を濃縮して、透明油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン中２０～１００％ＥｔＯＡｃ、ＥＬＳＤ検出）により精製して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（（２，２－ジメチル－４－オキソ－３，８，１１－トリオキサ－５－アザトリデカン－１３－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートおよび（２Ｓ，３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＲ）－５－（アセトキシメチル）－２－（（２，２－ジメチル－４－オキソ－３，８，１１－トリオキサ－５－アザトリデカン－１３－イル）オキシ）－２－メチルテトラヒドロ－５Ｈ－［１，３］ジオキソロ［４，５－ｂ］ピラン－６，７－ジイルジアセテートの２８／７２％混合物を濃厚な透明油状物（３０７ｍｇ、０．５２９ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝５８０．４、Ｒｔ＝０．９６分（酸、２分、ＥＬＳＤのみ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.74 (s, 3H), 5.76 (s, 8H), 5.26 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 5.02 (t, J = 3.1 Hz, 3H), 4.90 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 4.84 - 4.72 (m, 5H), 4.37 (ddd, J = 5.2, 3.1, 0.9 Hz, 3H), 4.18 (dd, J = 12.2, 5.0 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 4.5 Hz, 5H), 4.08 - 3.94 (m, 4H), 3.91 (dt, J = 8.6, 4.1 Hz, 3H), 3.85 - 3.75 (m, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.58 - 3.51 (m, 7H), 3.42 - 3.31 (m, 14H), 3.06 (q, J = 5.9 Hz, 8H), 2.07 (s, 7H), 2.05 (s, 7H), 2.02 (s, 10H), 1.99 (d, J = 1.0 Hz, 6H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.63 (s, 7H), 1.38 (s, 36H), 1.18 (t, J = 7.1 Hz, 4H).
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートの合成
Figure 2022532918000623
 ０℃のＣＨ２Ｃｌ２（８ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（（２，２－ジメチル－４－オキソ－３，８，１１－トリオキサ－５－アザトリデカン－１３－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートおよび（２Ｓ，３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｓ，７ａＲ）－５－（アセトキシメチル）－２－（（２，２－ジメチル－４－オキソ－３，８，１１－トリオキサ－５－アザトリデカン－１３－イル）オキシ）－２－メチルテトラヒドロ－５Ｈ－［１，３］ジオキソロ［４，５－ｂ］ピラン－６，７－ジイルジアセテートの混合物（３２３ｍｇ、０．５５７ｍｍｏｌ）に、ＴＦＡ（１．９ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で４５分間撹拌した後、混合物を濃縮し、残留物を真空下で６０分間乾燥させて、薄黄色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０～２０％ＭｅＯＨ、ＭｅＯＨ中０．２％ＮＨ４ＯＨ修飾剤含有、ＥＬＳＤ検出）により精製して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートを透明油状物（８２ｍｇ、０．１７１ｍｍｏｌ）として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝４８０．４、Ｒｔ＝０．６１分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 2H), 5.28 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.93 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 4.86 - 4.75 (m, 2H), 4.20 (dd, J = 12.2, 5.0 Hz, 1H), 4.08 - 3.95 (m, 2H), 3.88 - 3.79 (m, 1H), 3.67 - 3.53 (m, 11H, DMSOと重複), 3.00 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 2.04 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.96 (s, 3H).
２－アジドエチル（Ｎ－（２－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバメートの合成
Figure 2022532918000624
 ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の２－アジドエタン－１－オール（１２．５ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）に、硫黄イソシアナチジン酸クロリド（０．０１２ｍｌ、０．１４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で４５分間撹拌し、次いでＴＥＡ（０．０４０ｍｌ、０．２９ｍｍｏｌ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（７７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間、次いで室温で１時間撹拌した後、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ、および１Ｎ ＨＣｌ（０．２９ｍＬ）でクエンチした。水性物をＣＨ２Ｃｌ２（５×）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回転蒸発により濃縮して、（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（アセトキシメチル）－６－（２－（２－（２－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテートを透明油状物（７５ｍｇ）として得た：ＬＣＭＳ：０．９７分、ＭＳ＋＝６７２．４、９６、Ｒｔ－０．８７分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）。
０℃のジオキサン（４ｍＬ）中の上記の生成物に、ＬｉＯＨ．Ｈ２Ｏ（水中０．５Ｍ、３．４５ｍｌ、１．７２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた透明溶液を室温で１時間撹拌し、次いで２０℃の水浴で回転蒸発により濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ ５μｍ ３０×５０ｍｍカラム、水中２～１２％のアセトニトリル ０．１％ＦＡ含有、流速：７５ｍＬ／分、ＭＳ ５０３．５、５２０．３検出）により精製して、凍結乾燥後、２－アジドエチル（Ｎ－（２－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバメートを透明な薄い膜（２２ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝５０４．３、Ｒｔ＝０．５２分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.31 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 4.96 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.89 (dd, J = 12.5, 4.8 Hz, 2H), 4.47 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.22 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.15 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 1H), 3.67 (dd, J = 11.2, 5.8 Hz, 1H), 3.62 - 3.40 (m, 12H), 3.17 - 2.90 (m, 6H).
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（Ｌ６２－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000625
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（３２ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）および２－アジドエチル（Ｎ－（２－（２－（２－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２＝イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバメート（２１ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を用いて一般手順２に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（２－（２－（２－（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末として得た：ＨＲＭＳ：ＭＳ＋＝２００２．７１００、Ｒｔ＝２．３７分（５分酸性）。
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネートの合成
Figure 2022532918000626
 ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中のジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－アザンジイルジプロピオネート（４０３ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）、３－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸（５０５ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．３０９ｍＬ、１．７７ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ－（ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチル－カルボジイミド塩酸塩．ＨＣｌ（３６７ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間撹拌した後、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（３×）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン中０～５０％ＥｔＯＡｃ）により精製して、ジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネートを白色泡状物（２９０ｍｇ、０．５１１ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝５６７．５、Ｒｔ＝１．３２分（酸、２分）；ＰＭＲ：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.94 - 7.88 (m, 2H), 7.70 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.47 - 7.40 (m, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 2H), 7.22 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.26 - 4.18 (m, 1H), 3.56 - 3.03 (m, 8H), 2.50 - 2.38 (m, 4H), 1.41 (s, 9H), 1.40 (s, 9H).
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－アミノプロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネート、１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルメタンアミンの合成
Figure 2022532918000627
 ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中のジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネート（２８８ｍｇ、０．５０８ｍｍｏｌ）に、ジメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｎ、１ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。さらにジメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｎ、１ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を添加した。さらに４時間撹拌した後、混合物を濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０～２５％ＭｅＯＨ、３７分、０．２％ＮＨ４ＯＨ修飾剤がＭｅＯＨ中にあった、ＥＬＳＤ検出）により精製して、ジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－アミノプロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネート、１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルメタンアミンを薄褐色油状物（６２ｍｇ、０．４７２ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ：ＭＳ＋＝３４５．４、Ｒｔ＝０．７６分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.05 (s, 2H), 3.51 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.43 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.31 (s, 2H), 2.79 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.55 - 2.45 (m,17H, DMSOと重複), 2.41 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.40 (s, 9H).
３，３’－（（３－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオン酸の合成
Figure 2022532918000628
 ＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍｌ）中の２－アジドエタン－１－オール（１６ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）に、硫黄イソシアナチジン酸クロリド（０．０１６ｍｌ、０．１８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いでＴＥＡ（０．０５１ｍｌ、０．３７ｍｍｏｌ）、およびＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－アミノプロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネート（７３ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加した。０℃で１時間、次いで室温で１時間撹拌した後、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ、および１Ｎ ＨＣｌ（０．３７ｍＬ）でクエンチした。水性物をＣＨ２Ｃｌ２（５×）で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、回転蒸発により濃縮した。得られた残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中０～１０％ＭｅＯＨ、ＥＬＳＤおよびＵＶ２１４検出）により精製して、ジ－ｔｅｒｔ－ブチル３，３’－（（３－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオネートを濃厚な透明油状物（７０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）として得た：ＬＣＭＳ ＭＳ＋＝５３７．４、Ｒｔ＝１．０８分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.39 (s, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H), 4.28 - 4.23 (m, 2H), 3.63 - 3.59 (m, 2H), 3.54 - 3.47 (m, 2H), 3.47 - 3.38 (m, 2H), 3.18 - 3.09 (m, 2H), 2.61 - 2.54 (m, 4H), 2.43 (dd, J = 8.5, 6.0 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.42 (s, 9H).
０℃のＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）中の上記の生成物に、ＴＦＡ（２ｍｌ）を添加した。室温で１．５時間撹拌した後、混合物を２５℃の水浴にて回転蒸発により濃縮した。残留物を高真空中で３０分間乾燥させ、次いで無水トルエン（３×３ｍＬ）を用いる共沸蒸留により乾燥させ、高真空中で終夜さらに乾燥させて、３，３’－（（３－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオン酸を白色固体（７２ｍｇ、理論収率に基づいて７７重量％。これを次のステップで直接使用した）として得た：ＬＣＭＳ ＭＳ＋＝４２５．３、Ｒｔ＝０．５２分（酸性、２分、ＥＬＳＤ）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.28 (s, 1H), 11.35 (s, 1H), 7.58 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.26 - 4.20 (m, 2H), 3.61 - 3.55 (m, 2H), 3.50 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.42 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.12 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 2.56 (dd, J = 15.1, 7.4 Hz, 4H), 2.43 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.08 (s, 1H).
１－（２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（３－（ビス（２－カルボキシエチル）アミノ）－３－オキソプロピル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（Ｌ６１－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000629
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテート（２０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）および３，３’－（（３－（（Ｎ－（（２－アジドエトキシ）カルボニル）スルファモイル）アミノ）プロパノイル）アザンジイル）ジプロピオン酸（１５ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）を用いて一般手順２に従って、１－（２－（（（１－（２－（（（Ｎ－（３－（ビス（２－カルボキシエチル）アミノ）－３－オキソプロピル）スルファモイル）カルバモイル）オキシ）エチル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムトリフルオロアセテートを白色粉末として得た：ＨＲＭＳ：ＭＳ＋＝１９２３．６５００ Ｒｔ＝２．３４分（５分酸性）；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.21 (s, 1H), 10.16 (s, 1H), 8.81 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.08 (d, J = 13.7 Hz, 2H), 7.77 - 7.50 (m, 5H), 7.47 - 7.20 (m, 6H), 7.18 - 7.04 (m, 5H), 6.99 - 6.90 (m, 4H), 6.65 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 7.6, 1.7 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.43 (dd, J = 9.8, 3.5 Hz, 1H), 5.24 - 5.11 (m, 3H), 4.65 - 4.51 (m, 9H), 4.45 - 3.81 (m, 52H, DMSOと重複), 3.68 (s, 3H), 3.54 - 2.77 (m, 31H), 2.39 - 2.20 (m, 5H), 1.86 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 1.77 (s, 3H), 1.69 - 1.00 (m, 6H), 0.76 (dd, J = 13.9, 6.8 Hz, 6H); 19F NMR (376 MHz, DMSO-d6): -112.16 ppm.
１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000630
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（８７．５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ、１．０当量）およびｍＰＥＧ１２－アジド（７３．３ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ、２当量）を用いて一般手順２に従って、１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８８９．８５４４、Ｒｔ＝２．１９分（５分酸性法）。
１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ１０４－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000631
 １－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２２ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２０８４．９０９９、Ｒｔ＝２．４５分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000632
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１５５ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４９９．５６９９、Ｒｔ＝２．３９分（５分酸性法）。
１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサノナテトラコンタン－４９－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ３４－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000633
 ４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（５０ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ、１．０当量）およびｍ－ＰＥＧ１６－アジド（Ｂｒｏａｄｐｈａｒｍ ＢＰ－２３５５８から）（５０．８ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ、２当量）を用いて一般手順２に従って、１－（２－（（（１－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７－ヘキサデカオキサノナテトラコンタン－４９－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２２６１．０１９６、Ｒｔ＝２．２８分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000634
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（８７．５ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ、１．０当量）および１－アジド－１－デオキシ－ベータ－Ｄ－ラクトピラノシド（２２．９９ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ、１当量）を用いて一般手順２に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１６７１．６４００、Ｒｔ＝１．９５分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４６－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000635
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（３５ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１８６６．６８９９、Ｒｔ＝２．２８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ）－９－イソプロピル－２，２－ジメチル－４，７，１０－トリオキソ－６－（プロパ－２－イン－１－イル）－１２－（３－ウレイドプロピル）－３－オキサ－５，８，１１－トリアザトリデカン－１３－アミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000636
 ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中のＢｏｃ－プロパルギル－Ｇｌｙ－ＯＨ（４０ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ、１当量）およびＨＡＴＵ（７１．３ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ、１当量）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（６５．５μｌ、０．３７５ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、ＤＭＦ（１ｍｌ）中の１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（２４５ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、反応混合物中に添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。粗混合物をＣ１８カラム（１００カートリッジ、ＭｅＣＮ／水 ０．１％ギ酸含有、１５ＣＶにわたって０～１００％）で分離して、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ）－９－イソプロピル－２，２－ジメチル－４，７，１０－トリオキソ－６－（プロパ－２－イン－１－イル）－１２－（３－ウレイドプロピル）－３－オキサ－５，８，１１－トリアザトリデカン－１３－アミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１４９９．６０００、Ｒｔ＝２．９１分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノペンタ－４－インアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000637
 ０℃の氷水浴で、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（４－（（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ）－９－イソプロピル－２，２－ジメチル－４，７，１０－トリオキソ－６－（プロパ－２－イン－１－イル）－１２－（３－ウレイドプロピル）－３－オキサ－５，８，１１－トリアザトリデカン－１３－アミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（５６ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）に、ＴＦＡ（ＤＣＭ中２５％）２ｍＬを添加し、次いで、反応混合物を室温に上昇させ、１時間撹拌した。粗混合物を高真空下で濃縮した。次いで、混合物をＭｅＯＨに溶解し、Ｃ－１８カラム（５０ｇカートリッジ、ＭｅＣＮ／水 ０．１％ギ酸含有 １６ＣＶにわたって０～１００％）により精製して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノペンタ－４－インアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝１３９９．５４００、Ｒｔ＝２．１７分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムの合成
Figure 2022532918000638
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノペンタ－４－インアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（プロパ－２－イン－１－イルオキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（４４ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ、１．０当量）および１－アジド－１－デオキシ－ベータ－Ｄ－ラクトピラノシド（６９．２ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ、６当量）を用いて一般手順２に従って、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２１３３．７８００、Ｒｔ＝１．９５分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ）－８－（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）－１５－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－５－イソプロピル－４，７，１０－トリオキソ－２－（３－ウレイドプロピル）－１３－オキサ－３，６，９－トリアザペンタデカンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４７－Ｐ１）の合成
Figure 2022532918000639
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（（１－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）ベンジル）－４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（１９ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ、１．０当量）を用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（（（１－（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メトキシ）メチル）－４－（（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ）－８－（（１－（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）－３，４－ジヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）－５－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－（ヒドロキシメチル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）－１５－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－５－イソプロピル－４，７，１０－トリオキソ－２－（３－ウレイドプロピル）－１３－オキサ－３，６，９－トリアザペンタデカンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２３２８．８３０１、Ｒｔ＝２．１５分（５分酸性法）。
１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７８－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－テトラコサオキサ－２，４－ジアザオクタヘプタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム
Figure 2022532918000640
 ＴＨＦ（２ｍＬ）中の１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２－テトラコサオキサペンタヘプタコンタン－７５－酸（５０ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）、ビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（１３ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（２０μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で２時間撹拌した。混合物を、窒素ガスを吹きつけることにより濃縮した。得られた固体残留物をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶かした。１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（（メチルアミノ）メチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（５０ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１００μＬ、０．５７３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で５分間撹拌した。混合物をＤＭＳＯ（２ｍＬ）で希釈し、溶液をＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、１－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７８－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－テトラコサオキサ－２，４－ジアザオクタヘプタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２６７１．２７００、Ｒｔ＝２．８８分（５分酸性法）。
４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（７８－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－テトラコサオキサ－２，４－ジアザオクタヘプタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４２－Ｐ１）
Figure 2022532918000641
 １－（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）－２－（７８－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－テトラコサオキサ－２，４－ジアザオクタヘプタコンチル）ベンジル）－４－（２－（２－クロロ－４－（６－（４－フルオロフェニル）－４－（（（Ｒ）－１－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－３－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）－１－オキソプロパン－２－イル）オキシ）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－メチルピペラジン－１－イウムを用いて一般手順３に従って、４－（２－（４－（４－（（Ｒ）－１－カルボキシ－２－（２－（（２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル）メトキシ）フェニル）エトキシ）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル）－２－クロロ－３－メチルフェノキシ）エチル）－１－（２－（７８－カルボキシ－２－メチル－３－オキソ－７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３，７６－テトラコサオキサ－２，４－ジアザオクタヘプタコンチル）－４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（３－（２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）エトキシ）プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル）－１－メチルピペラジン－１－イウム（Ｌ４２－Ｐ１）を得た。ＨＲＭＳ：Ｍ＋＝２６４６．７７００、Ｒｔ＝２．３８分（５分酸性法）。
以下の化合物は、上記の手順と同様の手順を使用して調製した。
Figure 2022532918000642
Figure 2022532918000643
Figure 2022532918000644
Figure 2022532918000645
Figure 2022532918000646
Ｌ４３－Ｐ１、Ｌ４４－Ｐ１およびＬ４５－Ｐ１におけるポリエチレングリコールを調製するための合成方法を以下に記載する。
２－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５－テトラコサオキサ－３－アザオクタヘプタコンタン－７８－酸の合成
Figure 2022532918000647
 ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２－テトラコサオキサペンタヘプタコンタン－７５－酸（１００ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（２４．８ｍｇ、３４μＬ、０．１９２ｍｍｏｌ、２．２当量）の撹拌溶液に、無水酢酸（８．９ｍｇ、８．２５μＬ、１．０当量）を添加した。得られた混合物を周囲温度で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。得られた残留物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶かし、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、２－オキソ－６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２，７５－テトラコサオキサ－３－アザオクタヘプタコンタン－７８－酸（６２．３ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ、収率６０％）を得た。ＬＣ／ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ １１８７．３ Ｒｔ＝０．７５分（２分酸性法）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.86 (s, 1H), 3.60 (t, J = 6.4 Hz, 3H), 3.50 (d, J = 4.9 Hz, 91H), 3.40 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.18 (q, J = 5.8 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.80 (s, 3H).
４－オキソ－３，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７－ペンタコサオキサ－５－アザオクタコンタン－８０－酸の合成
Figure 2022532918000648
 ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２－テトラコサオキサペンタヘプタコンタン－７５－酸（１００ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（２４．８ｍｇ、３４μＬ、０．１９２ｍｍｏｌ、２．２当量）の撹拌溶液に、クロロギ酸エチル（９．５ｍｇ、８．３４μＬ、１．０当量）を添加した。得られた混合物を周囲温度で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。得られた残留物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶かし、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－オキソ－３，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７－ペンタコサオキサ－５－アザオクタコンタン－８０－酸（７５ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ、収率７１％）を得た。ＬＣ／ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ １２１７．３ Ｒｔ＝０．８１分（２分酸性法）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.03 (s, 1H), 3.97 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.60 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.50 (d, J = 5.0 Hz, 92H), 3.40 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.11 (q, J = 5.9 Hz, 2H), 2.45 (q, J = 6.5 Hz, 2H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H,).
４－オキソ－２，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７－ペンタコサオキサ－５－アザオクタコンタン－８０－酸の合成
Figure 2022532918000649
 ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の１－アミノ－３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３，３６，３９，４２，４５，４８，５１，５４，５７，６０，６３，６６，６９，７２－テトラコサオキサペンタヘプタコンタン－７５－酸（１００ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（２４．８ｍｇ、３４μＬ、０．１９２ｍｍｏｌ、２．２当量）の撹拌溶液に、メトキシアセチルクロリド（１１．３６ｍｇ、９．５７μＬ、１．２当量）を添加した。得られた混合物を周囲温度で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。得られた残留物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶かし、ＲＰ－ＨＰＬＣ ＩＳＣＯ ｇｏｌｄクロマトグラフィー（１０～１００％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡ修飾剤）により精製した。凍結乾燥して、４－オキソ－２，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７－ペンタコサオキサ－５－アザオクタコンタン－８０－酸（６９ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ、収率６５％）を得た。ＬＣ／ＭＳ ［Ｍ－Ｈ］－ １２１７．４ Ｒｔ＝０．７５分（２分酸性法）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 (s, 1H), 3.79 (s, 2H), 3.60 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.51 (s, 92H), 3.43 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.26 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 6.4 Hz, 2H).
[実施例３]
Ｍｃｌ－１ペイロードの合成および特徴付け
例示的なペイロードは、この実施例に記載した例示的な方法を使用して合成した。
Ｃ１の調製：
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000650
 Ｃ１は、国際公開第２０１５／０９７１２３号における実施例３０に従って調製した。
Ｃ２の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－［４－メチル－４－（３－スルホプロピル）ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000651
ステップＡ：５－ブロモ－４－クロロ－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン
４．４９ｇの５－ブロモ－４－クロロ－６－ヨード－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン（１１．９６ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製１ａに従って得た）および４．３１ｇの（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）ボロン酸（１７．９４ｍｍｏｌ）を、６０ｍＬのＴＨＦに溶解し、次いで１３４ｍｇのＰｄ（ＯＡｃ）２（０．６０ｍｍｏｌ）、５０８ｍｇのｔＢｕＸＰｈｏｓ（１．２０ｍｍｏｌ）、１１．６９ｇのＣｓ２ＣＯ３（３５．８８ｍｍｏｌ）および６０ｍＬの水を添加し、混合物を、さらなる変換が観察されなくなるまでＮ２雰囲気下、７０℃で撹拌した。次いで、これを水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物生成物を、溶離液としてヘプタンおよびＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、５－ブロモ－４－クロロ－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジンを得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.02 (s, 1H), 7.64 (dd, J = 7.9, 2.1 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 11.0, 8.5 Hz, 1H), 7.36 (m, 1H), 5.63 (m, 1H), 3.81 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 1.94-1.78 (m, 3H), 1.69-1.50 (m, 3H). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ: 166.6, 153.9, 153.1, 152.7, 144.3, 139.2, 127.7, 126.6, 124.2, 119.9, 117.1, 100.7, 97.2, 61.6, 29.5, 24.5, 18.2.
Ｃ１７Ｈ１３Ｎ２Ｏ２ＳＢｒＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：４４１．９５５４；実測値４４２．９６２４（Ｍ＋Ｈ）。
ステップＢ：エチル（２Ｒ）－２－［５－ブロモ－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート
３．０９ｇの５－ブロモ－４－クロロ－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン（６．９７ｍｍｏｌ）、３．２８ｇのエチル（２Ｒ）－２－ヒドロキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（８．０２ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製３ｂｓに従って得た）を、７０ｍＬのｔｅｒｔ－ブタノールに溶解し、次いで６．８２ｇのＣｓ２ＣＯ３（２０．９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を、さらなる変換が観察されなくなるまでＮ２雰囲気下、７０℃で撹拌した。次いで、これを水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、溶離液としてヘプタンおよびＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、エチル（２Ｒ）－２－［５－ブロモ－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエートをジアステレオ異性体の混合物として得た。Ｃ４０Ｈ３６Ｎ４Ｏ７ＳＢｒＦのＨＲＭＳ計算値：８１４．１４７２；実測値８１５．１５３９（Ｍ＋Ｈ）。
ステップＣ：エチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート
３．６５ｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－ブロモ－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（４．４７ｍｍｏｌ）および２．１２ｇの１－［２－［２－クロロ－３－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノキシ］エチル］－４－メチル－ピペラジン（５．３６ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製５ｂに従って得た）を、２２ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで３１５ｍｇのＰｄＣｌ２×ＡｔａＰｈｏｓ（０．４５ｍｍｏｌ）、４．３７ｇのＣｓ２ＣＯ３（１３．４１ｍｍｏｌ）および２２ｍＬの水を添加し、混合物を完全な変換までＮ２雰囲気下、７０℃で撹拌した。次いで、これを水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物生成物を、溶離液としてＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨ、次いでＤＣＭおよびＭｅＯＨを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、エチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエートを２つのジアステレオ異性体対の混合物として得た。Ｃ５４Ｈ５６Ｎ６Ｏ８ＳＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：１００２．３５５３；実測値１００３．３６１４および１００３．３６２２（Ｍ＋Ｈ）。
ステップＤ：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
３．４７ｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（３．４６ｍｍｏｌ）を、３５ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで１．４５ｇのＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（３４．６ｍｍｏｌ）および３５ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで室温で撹拌した。次いで、これを水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液でｐＨ４に酸性化し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。アトロプ異性体を、溶離液として２５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製および分離した。後に溶出するアトロプ異性体対を（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸として単離した。Ｃ５２Ｈ５２Ｎ６Ｏ８ＳＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：９７４．３２４０；実測値９７５．３３０３（Ｍ＋Ｈ）。
ステップＥ：（４－メトキシフェニル）メチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート
２．３９ｇの（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（２．４５ｍｍｏｌ）、１．１３ｇのＤＴＢＡＤ（４．９１ｍｍｏｌ）および１．２９ｇのＰＰｈ３（４．９１ｍｍｏｌ）を、４９ｍＬのトルエンに溶解し、次いで０．６１ｍＬのＰＭＢ－ＯＨ（４．９１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を完全な変換まで５０℃で撹拌した。次いで、混合物をＤＣＭで希釈し、次いで減圧下で濃縮し、次いで溶離液としてヘプタンおよびＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、（４－メトキシフェニル）メチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエートをジアステレオ異性体の混合物として得た。Ｃ６０Ｈ６０Ｎ６Ｏ９ＳＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：１０９４．３８１５；実測値１０９５．３８８０（Ｍ＋Ｈ）。
ステップＦ：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－［４－メチル－４－（３－スルホプロピル）ピペラジン－４－イウム－１－イル］エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－ヒドロキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸（Ｃ２）
６００ｍｇの（４－メトキシフェニル）メチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロ－３－テトラヒドロピラン－２－イルオキシ－フェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．５４８ｍｍｏｌ）を、１１ｍＬのＭｅＣＮに溶解し、次いで０．４８ｍＬのオキサチオラン２，２－ジオキシド（５．４８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を完全な変換までＮ２雰囲気下、６０℃で撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮し、８ｍＬのＤＣＭに溶解し、次いで２．２ｍＬのＴＦＡを添加し、混合物をＴＨＰおよびＰＭＢの完全な切断まで室温で撹拌した。次いで、これを濃縮した（加熱浴を取り外した）。これを１０ｍＬのＴＨＦに溶解し、減圧下、３０℃の浴中で再度濃縮した。粗生成物を、溶離液として５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製して、Ｃ２を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 13.19 (br s, 1H), 10.16 (br s, 1H), 8.89 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.52 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.33 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.22-7.09 (m, 4H), 7.06-7.00 (m, 2H), 6.86 (dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 1H), 6.74 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.66 (m, 1H), 6.23 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.46 (dd, J = 9.8, 3.3 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 5.22 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 4.23 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.46 (m, 2H), 3.41-3.23 (m, 5H), 2.97 (s, 3H), 2.94-2.77 (m, 6H), 2.48 (m, 1H), 2.45 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.86 (s, 3H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 170.8, 166.2, 165.9, 164.7, 157.7, 157.2, 155.4, 153.6, 152.7, 152.3, 149.9, 145.1, 137.0, 135.9, 131.0, 130.8, 130.3, 129.2, 128.34, 128.32, 128.2, 128.0, 122.0, 120.5, 120.1, 118.8, 118.2, 116.6, 115.6, 112.2, 111.9, 110.6, 73.3, 69.0, 67.3, 59.2, 59.1, 55.71, 55.68, 47.6, 46.1, 31.8, 18.1, 17.6.
Ｃ５０Ｈ５０Ｎ６Ｏ１０Ｓ２ＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：１０１２．２７０３；実測値１０１３．２７７５（Ｍ＋Ｈ）。
Ｃ３の調製：
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（ピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000652
 Ｃ３は、国際公開第２０１５／０９７１２３号における実施例７４４に従って調製した。
Ｃ４の調製：
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（ピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000653
ステップ１：エチル（２Ｒ）－２－［５－ブロモ－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエート
ＴＨＦ（３８ｍＬ）中のエチル（２Ｒ）－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］－２－ヒドロキシ－プロパノエート（２５ｇ、７４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、５－ブロモ－６－（４－フルオロフェニル）－４－ヨード－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン（２３ｇ、６７．５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（６７ｇ、２０３ｍｍｏｌ）を連続的に添加した。反応物を終夜加熱還流し、揮発物を蒸発させた。残留物を酢酸エチルおよび水（それぞれ５００および４００ｍＬ）で希釈した。溶液を濾過する。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル中酢酸エチルの勾配）により精製して、エチル（２Ｒ）－２－［５－ブロモ－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエートをわずかに橙色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 8.83 (d, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.75 (m, 2H), 7.71 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.25 (t, 1H), 7.06 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 5.75 (dd, 1H), 5.28 (2＊d, 2H), 4.18 (q, 2H), 3.6/3.3 (2＊dd, 2H), 1.12 (t, 3H).
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：１７４９。
ステップ２：（４－ブロモ－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ）－トリイソプロピル－シラン
ジクロロメタン（１．５Ｌ）中の４－ブロモ－２－クロロ－３－メチル－フェノール（１００ｇ、４８２ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（８２ｇ、１．２ｍｏｌ）を添加し、クロロ（トリイソプロピル）シラン（１０２ｍＬ、４８２ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴下添加した。反応物を室温で１時間撹拌し、水を添加した（５００ｍＬ）。有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮した。残留物をさらに精製することなく使用した。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.48 (s, 1H), 7.2 (dd, 1H), 6.7 (d, 1H), 1.3 (m, 3H), 1.1 (2s, 18H).
ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル－［２－クロロ－３－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノキシ］－ジメチル－シラン
アルゴン下、－７８℃のＴＨＦ（３５０ｍＬ）中の（４－ブロモ－２－クロロ－３－メチル－フェノキシ）－トリイソプロピル－シラン（２７．２ｇ、７１．９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中ｎ－ブチルリチウム１．６Ｍの溶液（４９．５ｍＬ、７９．９ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴下添加した。反応物を－７８℃で２時間撹拌し、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の２－イソプロポキシ－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（１６．１ｇ、８６．４ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間かけて滴下添加した。－７８℃で２時間撹拌した後、反応混合物を、水（２０ｍＬ）をゆっくりと添加することによりクエンチし、室温に加温し、水（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をさらに精製することなく使用した。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 7.5 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 2.52 (s, 3H), 1.32 (m, 3H), 1.3 (s, 12H), 1.08 (s, 18H).
ステップ４：２－クロロ－３－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノール
ＴＨＦ（７５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル－［２－クロロ－３－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノキシ］－ジメチル－シラン（２５．４ｇ、５９．８ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＴＨＦ中フッ化テトラブチルアンモニウム１Ｍの溶液（９０ｍＬ、９０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を２時間撹拌し、濃縮し、酢酸エチルで希釈し、水で分配し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中エタノールの勾配）により精製して、２－クロロ－３－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノールを得た。1H NMR (400 MHz, dmso-d6): δ 10.4 (m, 1H), 7.4 (d, 1H), 6.8 (d, 1H), 2.5 (s, 3H), 1.3 (s, 12H).
ＩＲ波長（ｃｍ－１）：３５８０～３１８５、１５９１、８５７、８２７。
ステップ５：エチル（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－（３－クロロ－４－ヒドロキシ－２－メチルフェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－｛２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝プロパノエート
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ １／１の混合物（８００ｍＬ）中のエチル（２Ｒ）－２－［５－ブロモ－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエート（４３．８ｇ、６１．２ｍｍｏｌ）および２－クロロ－３－メチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノール（１９．７ｇ、７３．５ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸セシウム（４０ｇ、１２２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、溶液にアルゴンを２０分間バブリングすることにより脱気し、ビス（ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（４－ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）ジクロロパラジウム（ＩＩ）（４．３５ｇ、６．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物をアルゴン下、８０℃で終夜加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで分配し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、エチル（２Ｒ）－２－［５－（３－クロロ－４－ヒドロキシ－２－メチル－フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエートをジアステレオ異性体 ８５／１５（ａＳ／ａＲまたはＳａ／Ｒａ）の混合物として得た。光学的に純粋なａＳ（またはＳａ）を分取ＳＦＣ精製により得た。
ステップ６：ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－｛２－クロロ－４－［４－｛［（２Ｒ）－３－｛２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝－１－エトキシ－１－オキソプロパン－２－イル］オキシ｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチルフェノキシ｝エチル）ピペラジン－１－カルボキシレート
ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（２．６６ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、室温でアゾジカルボン酸ジイソプロピル（２．３３ｇ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。１５分間撹拌した後、ＴＨＦ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２．３３ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を室温で１時間撹拌し、次いでＴＨＦ（８ｍＬ）中の（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－（３－クロロ－４－ヒドロキシ－２－メチル－フェニル）－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパン酸（３．５７ｇ、５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加した。反応物を室温で９６時間撹拌し、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノール（７Ｍアンモニアを含有）の勾配）により精製して、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－｛２－クロロ－４－［４－｛［（２Ｒ）－３－｛２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝－１－エトキシ－１－オキソプロパン－２－イル］オキシ｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチルフェノキシ｝エチル）ピペラジン－１－カルボキシレートを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.95 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.32 (d, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.41 (dd, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.22 (t, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.19 (t, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.75 (t, 1H), 6.31 (dd, 1H), 5.53 (dd, 1H), 5.29 (dd, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.05 (q, 2H), 3.97 (m, 4H), 3.3 (m, 2H), 3.2 (t, 4H), 3.19/2.59 (m, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.4 (t, 4H), 1.87 (s, 3H), 1.37 (s, 9H), 1.18 (t, 6H), 1.05 (t, 3H). 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ 158, 152, 131, 131, 130, 130, 128, 127, 120.5, 116, 116, 112, 110, 73, 68.5, 67, 62, 61, 56, 52, 43, 32, 32, 28, 17, 16, 14.
ステップ７：ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－｛２－クロロ－４－［４－｛［（２Ｒ）－３－｛２－［（２－｛４－［（ジエトキシホスホリル）メチル］フェニル｝ピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝－１－エトキシ－１－オキソプロパン－２－イル］オキシ｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチルフェノキシ｝エチル）ピペラジン－１－カルボキシレート
ジオキサン（２．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－｛２－クロロ－４－［４－｛［（２Ｒ）－３－｛２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝－１－エトキシ－１－オキソプロパン－２－イル］オキシ｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチルフェノキシ｝エチル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３３７ｍｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）および［４－（ジエトキシホスホリルメチル）フェニル］ボロン酸（２００ｍｇ、０．７３５ｍｍｏｌ）の溶液に、水（２．５ｍＬ）および炭酸セシウム（２４１ｍｇ、０．７３５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、溶液にアルゴンを３０分間バブリングすることにより脱気し、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（２．５ｍｇ、３．６μｍｏｌ）を添加し、反応混合物を密封容器内でマイクロ波照射により９０℃で３時間加熱した。反応物を酢酸エチルおよび水で希釈した。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノールの勾配）により精製して、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－｛２－クロロ－４－［４－｛［（２Ｒ）－３－｛２－［（２－｛４－［（ジエトキシホスホリル）メチル］フェニル｝ピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝－１－エトキシ－１－オキソプロパン－２－イル］オキシ｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチルフェノキシ｝エチル）ピペラジン－１－カルボキシレートを得た。1H NMR (500 MHz, dmso-d6): δ 8.95 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.32 (d, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.41 (dd, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.29 (dd, 2H), 7.22 (t, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.19 (t, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.75 (t, 1H), 6.31 (dd, 1H), 5.53 (dd, 1H), 5.29 (2＊d, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.05 (q, 2H), 3.97 (m, 4H), 3.3 (m, 2H), 3.2 (t, 4H), 3.19/2.59 (2＊dd, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.4 (t, 4H), 1.87 (s, 3H), 1.37 (s, 9H), 1.18 (t, 6H), 1.05 (t, 3H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6) δ 158, 152, 131, 131, 130, 130, 128, 127, 120.5, 116, 116, 112, 110, 73, 68.5, 67, 62, 61, 56, 52, 43, 32, 32, 28, 17, 16, 14
ステップ８：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－（２－ピペラジン－１－イルエトキシ）フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－［４－（ホスホノメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸の合成
ジクロロメタン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－｛２－クロロ－４－［４－｛［（２Ｒ）－３－｛２－［（２－｛４－［（ジエトキシホスホリル）メチル］フェニル｝ピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル｝－１－エトキシ－１－オキソプロパン－２－イル］オキシ｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－イル］－３－メチルフェノキシ｝エチル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５４０ｍｇ、０．４８６ｍｍｏｌ）の溶液に、ブロモトリメチルシラン（１８６μＬ、１．４６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を終夜加熱還流した。さらにブロモトリメチルシランを室温で添加し（１８６μＬ、１．４６ｍｍｏｌ）、反応物を２０時間加熱還流し、濃縮乾固した。残留物をメタノールに溶かし、室温で３時間撹拌し、濃縮して、褐色粘性油状物を得、これをジオキサン（４ｍＬ）および水（４ｍＬ）で希釈した。水酸化リチウム一水和物（１００ｍｇ、２４ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌し、４５℃で３時間加熱し、濃縮した。残留物を水（５ｍＬ）で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液の滴下添加によりｐＨ２に酸性化した。沈殿物を濾過し、ＴＨＦで洗浄し、Ｘｂｒｉｄｇｅカラム上への反応混合物の直接堆積による、かつＮＨ４ＨＣＯ３法を使用するＣ１８逆相分取ＨＰＬＣにより精製して、Ｃ４を得た。1H NMR (500 MHz, dmso-d6): δ 8.88 (br d, 1 H), 8.25 (d, 2 H), 7.75 (t, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.52 (d, 1 H), 7.35 (d, 2 H), 7.23 (dd, 2 H), 7.18 (d, 1 H), 7.15 (t, 2 H), 7.11 (t, 1 H), 7.02 (d, 1 H), 6.82 (d, 1 H), 6.64 (m, 1 H), 5.51 (d, 1 H), 5.28/5.07 (m, 2 H), 3.82/3.55 (2m, 2 H), 3.35/2.55 (br s, 2 H), 2.81 (d, 2 H), 2.55 (m, 4 H), 2.4/2.27 (2m, 2 H), 2.21 (m, 4 H), 1.65 (br s, 3 H). 13C NMR (125 MHz, dmso-d6): δ 131.5, 130.2, 129.7, 127.4, 127.2, 120.3, 115.9, 115.3, 111.9, 110.3, 75.1, 69.2, 67.3, 56.4, 49.9, 42.4, 40, 38.9, 18.1. 31P NMR (200 MHz, dmso-d6): δ 15
ＨＲ－ＥＳＩ＋：ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝９２５．２３５６／９２５．２３４６（測定値／理論値）
Ｃ５の調製：
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（４－ヒドロキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000654
 Ｃ５は、国際公開第２０１６／２０７２１６号における実施例３に従って調製した。
Ｃ６の調製：
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－［２－（｛２－［２－（ヒドロキシメチル）フェニル］ピリミジン－４－イル｝メトキシ）フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000655
 Ｃ６は、国際公開第２０１５／０９７１２３号における実施例７２８に従って調製した。
Ｃ７の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－エチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000656
ステップＡ：エチル（２Ｒ）－２－（５－ヨード－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート
５．０ｇの４－クロロ－５－ヨード－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン（１５．０ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製２ｆに従って得た）および６．１０ｇのエチル（２Ｒ）－２－ヒドロキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（１５．０ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製３ｂｓに従って得た）を、１５０ｍＬのｔｅｒｔ－ブタノールに溶解し、次いで１４．７ｇのＣｓ２ＣＯ３（４５．０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を、さらなる変換が観察されなくなるまでＮ２雰囲気下、５０℃で撹拌した。次いで、水およびブラインを添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、溶離液としてヘプタンおよびＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、エチル（２Ｒ）－２－（５－ヨード－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエートを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.89 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.62 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.11 (m, 2H), 7.02 (td, J = 7.5, 0.9 Hz, 1H), 6.94 (td, J = 7.4, 0.8 Hz, 1H), 5.79 (dd, J = 9.1, 4.6 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 4.13 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.60 (dd, J = 13.8, 4.5 Hz, 1H), 3.33 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.10 (t, J = 7.1 Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 169.4, 166.5, 165.7, 164.8, 161.3, 157.7, 155.8, 153.6, 132.2, 131.0, 130.8, 128.3, 124.0, 120.9, 120.1, 115.5, 112.2, 112.0, 110.5, 98.9, 79.5, 74.4, 74.3, 69.1, 61.1, 55.7, 13.9, 4.6.
ステップＢ：２－クロロ－３－エチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノール
３３．７ｇの［２－クロロ－３－エチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノキシ］－トリイソプロピル－シラン（７６．９ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製５ｅに従って得た）を、６００ｍＬのＴＨＦに溶解し、０℃に冷却し、次いで９２．３ｍＬのＴＢＡＦ（９２．３ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ溶液）を滴下添加し、混合物を完全な変換まで撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、クエン酸で酸性化し、次いでＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、溶離液としてヘプタンおよびＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、２－クロロ－３－エチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノールを得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.63 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 3.09 (q, J = 7.44 Hz, 2H), 1.33(s, 12H), 1.15 (t, J = 7.44 Hz, 3H).
ステップＣ：エチル（２Ｒ）－２－［５－（３－クロロ－２－エチル－４－ヒドロキシ－フェニル）－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート
３５３ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－（５－ヨード－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル）オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．５０ｍｍｏｌ）および２８２ｍｇの２－クロロ－３－エチル－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェノール（０．５５ｍｍｏｌ）を、２ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで３５ｍｇのＰｄＣｌ２×ＡｔａＰｈｏｓ（０．０５ｍｍｏｌ）、３２６ｍｇのＣｓ２ＣＯ３（１．００ｍｍｏｌ）および１ｍＬの水を添加し、混合物をＮ２雰囲気下、マイクロ波反応器内にて１００℃で２０分間撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液でｐＨ５に酸性化し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、溶離液としてヘプタンおよびＥｔＯＡｃを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。次いで、これを、溶離液として５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーによりさらに精製して、エチル（２Ｒ）－２－［５－（３－クロロ－２－エチル－４－ヒドロキシ－フェニル）－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエートをアトロプ異性体の２：１混合物として得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.35/10.29 (s, 1H), 8.93 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.59/8.57 (s, 1H), 7.63/7.60 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.54-6.93 (m, 8 H), 6.84/6.74 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.43/6.18 (dd, J = 7.5, 1.4 Hz, 1H), 5.51/5.40 (m, 1H), 5.30-5.16 (m, 2H), 4.17-3.99 (m, 2H), 3.76/3.75 (s, 3H), 3.34-3.14 (m, 1H), 2.93-2.35 (m, 3H), 2.02/1.98 (s, 3H), 1.08/1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 0.94/0.76 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
ステップＤ：（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－エチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸、Ｃ７
３２２ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－（３－クロロ－２－エチル－４－ヒドロキシ－フェニル）－６－プロパ－１－イニル－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．４４ｍｍｏｌ）、１９０ｍｇの２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エタノール（１．３２ｍｍｏｌ）および３４６ｍｇのＰＰｈ３（１．３２ｍｍｏｌ）を、１０ｍＬの乾燥トルエンに溶解し、次いで３０４ｍｇのＤＴＢＡＤ（１．３２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を、さらなる変換が観察されなくなるまでＮ２雰囲気下、５０℃で撹拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、残留物を、溶離液としてヘプタン、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、次いで溶離液として５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーによりさらに精製して、エステル中間体を得た。これを２ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで８４ｍｇのＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（２．００ｍｍｏｌ）および１ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで５０℃で撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。アトロポ異性体を、溶離液として５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製および分離した。後に溶出するアトロポ異性体をＣ７として単離した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.88 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.76 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.26 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20-7.13 (m, 3H), 7.04 (td, J = 7.5, 0.9 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.32 (dd, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 5.48 (dd, J = 9.7, 2.9 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.23 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.31 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.47 (m, 1H), 2.64-2.36 (m, 10H), 2.22 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 0.74 (t, J = 7.5 Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 165.95, 165.89, 164.7, 157.8, 157.2, 155.3, 154.0, 141.6, 135.6, 131.0, 130.8, 130.1, 128.4, 128.0, 127.2, 121.4, 120.1, 117.8, 112.2, 111.7, 97.2, 74.9, 68.9, 67.1, 56.1, 55.7, 54.0, 32.7, 24.4, 13.1, 4.4.
Ｃ４５Ｈ４５Ｎ６Ｏ６ＳＣｌのＨＲＭＳ計算値：８３２．２８１０；実測値８３３．２８７８（Ｍ＋Ｈ）。
Ｃ８の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－スルホオキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000657
 ２１０ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（３－ヒドロキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．２４ｍｍｏｌ；国際公開第２０１６／２０７２１６号、調製２に従って得た）を、９．３ｍＬのピリジンに溶解し、次いで０．３８ｍＬのＳＯ３×ピリジン（２．３６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を完全な変換まで７０℃で撹拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、残留物を２ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで２００ｍｇのＫＯＨ（３．５６ｍｍｏｌ）および１ｍＬの水を添加した。混合物をＥｔエステルの完全な加水分解まで７０℃で撹拌した。次いで、これを５Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、溶離液として２５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィー（直接注入）により精製して、Ｃ８を得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.93 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.27 (m, 1H), 8.13 (m, 1H), 7.61 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.32-7.27 (m, 3H), 7.23-7.13 (m, 4H), 7.05 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.73 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.31 (dd, J = 7.5, 1.3 Hz, 1H), 5.51 (dd, J = 9.8, 3.5 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 4.24-4.08 (m, 2H), 3.26 (dd, J = 14.3, 3.4 Hz, 1H), 3.10-2.52 (m, 14H), 1.82 (s, 3H). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ: 170.8, 166.5, 166.4, 162.8, 162.7, 158.3, 155.3, 154.0, 153.6, 152.9, 137.8, 136.8, 135.9, 131.12, 131.05, 130.4, 130.3, 129.1, 128.5, 128.2, 127.8, 124.4, 123.5, 122.7, 121.9, 120.5, 120.2, 118.8, 116.0, 115.9, 112.0, 110.5, 73.5, 69.1, 67.2, 55.4, 43.1, 31.8, 17.5.
Ｃ４６Ｈ４２Ｎ６Ｏ９Ｓ２ＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：９４０．２１２７；実測値９４１．２１９１（Ｍ＋Ｈ）。
Ｃ９の調製：
２Ｒ）－２－｛［５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（３－スルホフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000658
 ７５０ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－メチルスルファニルピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．８９ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製１０ａに従って得た）を、９ｍＬのＴＨＦに溶解し、次いで７２６ｍｇの［３－（２，２－ジメチルプロポキシスルホニル）フェニル］ボロン酸（２．６７ｍｍｏｌ）、６２ｍｇのＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５ｍｍｏｌ）および５０９ｍｇのチオフェン－２－カルボニルオキシ銅（２．６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を完全な変換まで７５℃で撹拌した。次いで、これを減圧下で濃縮し、溶離液としてヘプタン、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨ中０．７Ｍ ＮＨ３溶液を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。次いで、これを２０ｍＬの１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロプロパン－２－オールに溶解し、４．５ｍＬのＴＦＡを添加し、混合物をスルホン酸エステルの完全な加水分解まで８０℃で撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、次いで５ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで２１０ｍｇのＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（５．００ｍｍｏｌ）および２ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで室温で撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。形成されたアトロプ異性体を、溶離液として２５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製および分離し、次いで溶離液として０．１％ＴＦＡ水溶液およびＭｅＣＮを使用してさらに精製して、Ｃ９を得た。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 13.19 (br s, 1H), 9.48 (br s, 1H), 8.94 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.74 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.37 (dt, J = 7.8, 2.9 Hz, 1H), 7.78 (dt, J = 7.6, 1.5 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.29 (m, 3H), 7.22-7.14 (m, 3H), 7.13-7.05 (m, 2H), 6.74 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.53 (dd, J = 9.6, 3.6 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 4.2 (m, 2H), 3.50-2.88 (m, 11H), 2.76 (s, 3H), 2.61 (dd, J = 14.2, 9.7 Hz, 1H), 1.79 (s, 3H). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ: 170.8, 166.5, 163.0, 162.7, 161.1, 158.4, 155.4, 153.3, 152.9, 148.6, 136.6, 136.0, 131.1, 130.1, 129.0, 128.5, 128.3, 128.1, 127.9, 125.3, 124.4, 121.9, 120.5, 118.8, 116.2, 116.0, 115.9, 112.1, 110.5, 73.2, 69.1, 66.5, 55.0, 51.7, 49.7, 42.1, 31.5, 17.5.
Ｃ４６Ｈ４２Ｎ６Ｏ８Ｓ２ＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：９２４．２１７８；実測値９２５．２２７４（Ｍ＋Ｈ）。
Ｃ１０の調製：
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－［４－フルオロ－３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）フェニル］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000659
 ２５０ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－ヨード－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．２７ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製３０に従って得た）および７９ｍｇの［４－フルオロ－３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）フェニル］ボロン酸（０．４０ｍｍｏｌ）を、１ｍＬのＴＨＦに溶解し、次いで３．０ｍｇのＰｄＯＡｃ２（０．０１３ｍｍｏｌ）、５．７ｍｇのｔＢｕＸＰｈｏｓ（０．０１３ｍｍｏｌ）、１７４ｍｇのＣｓ２ＣＯ３（０．５３ｍｍｏｌ）および０．２７ｍＬの水を添加し、混合物をＮ２雰囲気下、７０℃で２時間撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、２－ＭｅＴＨＦで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗エステル生成物を、溶離液としてヘプタン、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨ中０．７Ｍ ＮＨ３溶液を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。次いで、これを５．３ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで６４ｍｇのＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（１．５２ｍｍｏｌ）および１．３ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで室温で撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。アトロプ異性体を、溶離液として２５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製および分離した。後に溶出するアトロプ異性体をＣ１０として単離した。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.91 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.82 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 7.5, 1.7 Hz, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.27 (dd, J = 11.0, 8.6 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.16-7.09 (m, 3H), 7.03 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.92 (m, 1H), 6.69 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.47 (dd, J = 10.3, 2.6 Hz, 1H), 5.25 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 4.75-4.53 (m, 2H), 4.21 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.41 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.77-2.30 (m, 12H), 2.24 (s, 3H), 1.81 (s, 3H). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ: 171.3, 166.2, 166.0, 164.6, 163.5, 157.9, 157.2, 155.3, 153.7, 153.1, 152.1, 150.5, 144.6, 135.8, 131.0, .130.8, 130.7, 129.6, 129.1, 128.4, 128.1, 127.8, 125.4, 123.7, 122.0, 120.4, 120.1, 118.8, 117.0, 116.7, 115.6, 112.2, 111.7, 110.5, 74.8, 68.9, 67.2, 65.6, 56.0, 55.7, 53.8, 52.0, 44.6, 32.7, 17.5.
Ｃ４９Ｈ４５Ｎ６Ｏ７ＳＣｌＦ４のＨＲＭＳ計算値：９７２．２６９５；実測値９７３．２７６１（Ｍ＋Ｈ）。
Ｃ１１の調製：
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（４－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000660
 Ｃ１１は、国際公開第２０１５／０９７１２３号における実施例１０７に従って調製した。
Ｃ１２の調製
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［１－（２，２，２－トリフルオロエチル）－１Ｈ－ピラゾール－５－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000661
 Ｃ１２は、国際公開第２０１５／０９７１２３号における実施例７７に従って調製した。
Ｃ１３の調製
（２Ｒ）－２－［（５Ｓａ）－６－（３－アミノ－４，５－ジフルオロ－フェニル）－５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパン酸
Figure 2022532918000662
 ２５０ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－ヨード－チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．２７ｍｍｏｌ；国際公開第２０１５／０９７１２３号、調製３０に従って得た）および１０２ｍｇの２，３－ジフルオロ－５－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）アニリン（０．４１ｍｍｏｌ）を、１ｍＬのＴＨＦに溶解し、次いで３．０ｍｇのＰｄＯＡｃ２（０．０１３ｍｍｏｌ）、５．７ｍｇのｔＢｕＸＰｈｏｓ（０．０１３ｍｍｏｌ）、１７４ｍｇのＣｓ２ＣＯ３（０．５３ｍｍｏｌ）および０．２７ｍＬの水を添加し、混合物をＮ２雰囲気下、７０℃で２時間撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、２－ＭｅＴＨＦで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗エステル生成物を、溶離液としてヘプタン、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨ中０．７Ｍ ＮＨ３溶液を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。次いで、これを０．７ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで６０ｍｇのＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（１．４３ｍｍｏｌ）および０．１８ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで室温で撹拌した。次いで、これをブラインで希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。アトロポ異性体を、溶離液として２５ｍＭ ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取逆相クロマトグラフィーにより精製および分離した。後に溶出するアトロプ異性体をＣ１３として単離した。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.89 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.76 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.36 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.13 (m, 2H), 7.03 (td, J = 7.5, 1.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.71 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.62 (m, 1H), 6.21 (d, J = 7.5, 1.3 Hz, 1H), 6.12 (m, 1H), 5.73 (s, 2H), 5.46 (dd, J = 10.1, 3.1 Hz, 1H), 5.25 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 4.22 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.35 (m, 1H), 2.73 (m, 2H), 2.65-2.35 (m, 9H), 2.22 (s, 3H), 1.85 (s, 3H). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ: 171.1, 166.0, 165.3, 163.3, 157.8, 157.2, 155.3, 153.7, 152.9, 149.0, 138.9, 137.1, 135.8, 131.0, 130.8, 130.4, 128.7, 128.4, 128.1, 127.8, 125.2, 122.0, 120.4, 120.1, 118.9, 115.6, 112.2, 111.9, 110.6, 103.2, 74.5, 68.9, 67.1, 56.0, 55.7, 53.9, 52.1, 44.7, 32.6, 17.6.
Ｃ４７Ｈ４４Ｎ７Ｏ６ＳＣｌＦ２のＨＲＭＳ計算値：９０７．２７３０；実測値９０８．２８０３（Ｍ＋Ｈ）。
Ｃ１４の調製
（２Ｒ）－２－｛［（５Ｓａ）－５－｛３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル｝－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ｝－３－（２－｛［２－（３－ヒドロキシ－２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ｝フェニル）プロパン酸
Figure 2022532918000663
 ２１０ｍｇのエチル（２Ｒ）－２－［５－［３－クロロ－２－メチル－４－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ］フェニル］－６－（４－フルオロフェニル）チエノ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－イル］オキシ－３－［２－［（２－クロロピリミジン－４－イル）メトキシ］フェニル］プロパノエート（０．２５ｍｍｏｌ、国際公開第２０１６／２０７２１６号調製１）および８４ｍｇの（３－ヒドロキシ－２－メトキシ－フェニル）ボロン酸（０．５０ｍｍｏｌ）を、３．８ｍＬの１，４－ジオキサンに溶解し、次いで１８ｍｇのＰｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（０．０２５ｍｍｏｌ）、２４０ｍｇのＣｓ２ＣＯ３（０．７５ｍｍｏｌ）および３．８ｍＬの水を添加し、混合物を完全な変換までＮ２雰囲気下、７０℃で撹拌した。次いで、これを水で希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。粗エステルを、溶離液としてヘプタン、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨ中０．７Ｍ ＮＨ３溶液を使用するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、ジアステレオ異性体の混合物を得た。これを２ｍＬのジオキサンに溶解し、次いで２４５ｍｇのＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（５．８５ｍｍｏｌ）および１ｍＬの水を添加した。混合物を完全な加水分解まで室温で撹拌した。次いで、これを２Ｍ ＨＣｌ水溶液で中和し、溶離液として０．１％ＴＦＡ水溶液およびＭｅＣＮを使用する分取ＲＰ－ＨＰＬＣ上に直接注入した。後に溶出するジアステレオ異性体をＣ１４として収集した。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.53 (brs, 1H), 8.91 (d, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.26 (m, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.18 (m, 2H), 7.12 (t, 1H), 7.06 (dd, 1H), 6.98 (m, 1H), 6.98 (m, 1H), 6.97 (d, 1H), 6.68 (t, 1H), 6.16 (d, 1H), 5.47 (m, 1H), 5.27/5.20 (d+d, 2H), 4.26/4.19 (m+m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.38/2.42 (dd+dd, 2H), 2.74 (m, 2H), 2.55 (br., 4H), 2.47 (br., 4H), 2.25 (s, 3H), 1.80 (s,3 H).
Ｃ４７Ｈ４４Ｎ６Ｏ７ＳＣｌＦのＨＲＭＳ計算値：８９０．２６６５；実測値８９１．２７２１（Ｍ＋Ｈ）。
Ｐ１５の調製
（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－３－（４－フルオロフェニル）－１４－［［２－（２－メトキシフェニル）ピリミジン－４－イル］メトキシ］－２４，２５－ジメチル－２０－［（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル］－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２５），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２（２６），２３－デカエン－１１－カルボン酸
Figure 2022532918000664
 Ｐ１５は、国際公開第２０１９／０３５９１４号における実施例１１６に従って調製した。
Ｐ１６の調製
（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－１４－［［２－［４－［［（２Ｓ）－１，４－ジオキサン－２－イル］メトキシメチル］－４－フルオロ－シクロヘキシル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］－３－（４－フルオロフェニル）－２４，２５－ジメチル－２０－［（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル］－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２４），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２，２５－デカエン－１１－カルボン酸
Figure 2022532918000665
 Ｐ１６は、国際公開第２０１９／０３５９１１号における実施例２８に従って調製した。
Ｐ１７の調製
（１１Ｒ，２０Ｒ）－２３，２６－ジクロロ－１４－［［２－［４－［［（２Ｓ）－１，４－ジオキサン－２－イル］メトキシ］シクロヘキシル］ピリミジン－４－イル］メトキシ］－３－（４－フルオロフェニル）－２４，２５－ジメチル－２０－［（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル］－１０，１８，２１－トリオキサ－４－チア－６，８－ジアザペンタシクロ［２０．２．２．１２，５．１１３，１７．０９，２８］オクタコサ－１（２４），２，５（２８），６，８，１３，１５，１７（２７），２２，２５－デカエン－１１－カルボン酸
Figure 2022532918000666
 Ｐ１７は、国際公開第２０１９／０３５９１１号における実施例４４に従って調製した。
[実施例４]
Ｍｃｌ－１阻害剤ＡＤＣの合成および特徴付け
例示的な抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、この実施例に記載した例示的な方法を使用して合成した。例示的なＡＤＣの調製に使用する抗体を表１２に記載する。「ＣｙｓｍＡｂ」という用語は、マレイミド基を介してリンカー－ペイロードを抗体にコンジュゲートするために使用される、抗体の重鎖におけるシステイン突然変異を指す。一部の実施形態では、Ｅ１５２ＣおよびＳ３７５Ｃ（ＥＵシステムに従って番号付けされる）を含むＣｙｓｍＡｂ突然変異である。突然変異は、Ｅ１５６ＣおよびＳ３７９Ｃとしても番号付けされることがあり、これらはＥ１５２ＣおよびＳ３７５Ｃ ＥＵ突然変異に対応する。
Figure 2022532918000667
ＢＴＧ：抗体（Ａｂ ＧおよびＡｂ Ｔ）に、細菌性トランスグルタミナーゼ（ＢＴＧ） － シクロオクチンＢＣＮ（Ｎ－［（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノナ－４－イン－９－イルメチルオキシカルボニル］－１，８－ジアミノ－３，６－ジオキサオクタン、ＢＣＮ－ＰＯＥ３－ＮＨ２としても公知、ＣＡＳ番号：１２６３１６６－９３－３）を含有するアミンで特異的に官能化された反応性グルタミンを付与した。細菌性トランスグルタミナーゼを使用するＢＣＮ部分への部位特異的抗体コンジュゲーションは、Ｉｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ ２０１３（ＡＤＣ Ｓｕｍｍｉｔ，Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，２０１３年１０月１５日におけるプレゼンテーション）、国際公開第２０１７／０５９１６０号、および国際公開第２０１６／１４４６０８号に記載されている方法（これらのすべてはそのような方法について参照により本明細書に組み込まれる）を使用して行った。これらの改変は、以下に記載した通りの方法Ａおよび方法Ｂを使用する、記載されたアジド含有前駆体のコンジュゲーションを可能にする。図１も参照されたい。
Ｒｅｄｏｘ：抗体（抗ＣＤ３３、抗ＢＣＭＡ、抗ＰＣＡＤ）を、適切なサイズの使い捨てカラム内で混合しながら、ＰＢＳ中、１ｍｌの樹脂に対して１０ｍｇのＡｂの比率で、ＲＭＰ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ樹脂（ＧＥ）とともに１５分間インキュベートした。システインＨＣｌを２０ｍＭの最終濃度まで添加し、室温で３０分間撹拌しながらインキュベートして、反応性システインを脱ブロック化した。樹脂を、真空マニホールド上にて５０カラム体積のＰＢＳで迅速に洗浄した。次いで、樹脂を、２５０ｎＭ ＣｕＣｌ２を含有する等体積のＰＢＳ中に再懸濁させた。抗体鎖間ジスルフィドの再形成を、時点を取ることによりモニタリングした。各時点で、２５μｌの樹脂スラリーを取り出し、１μｌの２０ｍＭ ＭＣ－ｖａｌｃｉｔ－ＭＭＡＥを添加し、管を数回撹拌した。樹脂を遠心分離し、上清を取り出し、次いで５０μｌの抗体溶出緩衝剤（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で溶出した。樹脂をペレット化し、上清を、Ａｇｉｌｅｎｔ ＰＬＲＰ－Ｓ ４０００Ａ ５ｕｍ、４．６×５０ｍｍカラムを使用する逆相クロマトグラフィー（緩衝剤Ａは水、０．１％ＴＦＡ、緩衝剤Ｂはアセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、カラムを８０℃で保持、流速１．５ｍｌ／分）により分析した。
抗体がその鎖間ジスルフィド結合を再形成したことが決定されたら、樹脂を１０カラム体積のＰＢＳで洗浄し、樹脂を等体積のＰＢＳ中に再懸濁させ、水切りして、樹脂を緩やかに沈降させた。再酸化した抗体を抗体溶出緩衝剤でｐｒｏｔｅｉｎ Ａ樹脂から溶出し、１／１０体積の１Ｍ Ｔｒｉｓ ｐＨ９．０で中和した。次いで、抗体を、ＰＤ－１０カラムを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。タンパク質濃度を５ｍｇ／ｍｌに調整し、単回使用コンジュゲーションのためにアリコートした（以下の方法Ｃ１～Ｃ１８を参照されたい）。
方法Ａ（ＤＡＲ２）：プロピレングリコール（ＰＧ、１．５ｍｌ、２０％のカップリング体積）を抗体（Ａｂ）溶液（３ｍｇ／ｍｌ、３．３ｍｌ）に添加した。混合物をボルテックス中で３０秒間撹拌し、続いて４倍モル過剰のリンカー－弾頭ペイロード（５ｍＭ、ＰＧ／ＤＭＡ中５３３．８μｌ）を添加した。反応物を６４ｒｐｍにて室温で終夜撹拌した。溶液を２０分間遠心分離（４℃で１４０００Ｇ）し、次いでＨｉＬｏａｄ ２６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９８９３３６）ＳＥＣクロマトグラフィーカラム上に装填した。ＡＤＣをＰＢＳ中２０％ＰＧ（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）で溶出し、続いてＰＢＳ １× ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）中で２サイクルの透析（１６および４時間）を行った。ＡＤＣを、Ｖｉｖａｓｐｉｎ ２０、５０ＫＤ、ＰＥＳ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ、ＶＳ２０３１）を使用して濃縮し、０．２μｍ滅菌ＰＥＳフィルター、２５ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎｎ、Ｇ８９６－２５０２）に通して滅菌濾過し、４℃で貯蔵した。
代替的に、プロピレングリコール（ＰＧ、６７３μｌ、２０％のカップリング体積）を抗体（Ａｂ）溶液（１．８ｍｇ／ｍｌ、２．８ｍｌ、５ｍｇ）に添加した。混合物をボルテックス中で３０秒間撹拌し、続いて４倍モル過剰のリンカー－弾頭ペイロード（５ｍＭ、ＰＧ／ＤＭＡ中２７μｌ）を添加した。反応物を６４ｒｐｍにて室温で終夜撹拌した。溶液を２０分間遠心分離（４℃で１４０００Ｇ）し、次いでＨｉＬｏａｄ ２６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９８９３３６）ＳＥＣクロマトグラフィーカラム上に装填した。ＡＤＣをＰＢＳ中２０％ＰＧ（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）で溶出し、続いてＰＢＳ １× ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）中で２サイクルの透析（１６および４時間）を行った。ＡＤＣを、Ｖｉｖａｓｐｉｎ ２０、５０ＫＤ、ＰＥＳ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ、ＶＳ２０３１）を使用して濃縮し、０．２μｍ滅菌ＰＥＳフィルター、２５ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎｎ、Ｇ８９６－２５０２）に通して滅菌濾過し、４℃で貯蔵した。
方法Ｂ（ＤＡＲ４）：プロピレングリコール（ＰＧ、１．５ｍｌ、２０％のカップリング体積）をＡｂ溶液（３ｍｇ／ｍｌ、３．３ｍｌ）に添加した。混合物をボルテックス中で３０秒間撹拌し、続いて１０倍モル過剰のリンカー－弾頭ペイロード（５ｍＭ、ＰＧ／ＤＭＡ中５３３．８μｌ）を添加した。反応物を６４ｒｐｍにて室温で終夜撹拌した。次いで、溶液を、１０倍モル過剰のＤＢＣＯ含有Ｔｅｎｔａｇｅｌ樹脂（０．１～０．２ｍｍｏｌ／ｇ、Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、ＣＳ－０４７７．０５００）とともに６時間インキュベートした。次に、溶液を２０分間遠心分離（４℃で１４０００Ｇ）し、次いでＨｉＬｏａｄ ２６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９８９３３６）ＳＥＣクロマトグラフィーカラム上に装填した。ＡＤＣをＰＢＳ中２０％ＰＧ（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）で溶出し、続いてＰＢＳ １× ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）中で２サイクルの透析（１６および４時間）を行った。ＡＤＣを、Ｖｉｖａｓｐｉｎ ２０、５０ＫＤ、ＰＥＳ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ、ＶＳ２０３１）を使用して濃縮し、０．２μｍ滅菌ＰＥＳフィルター、２５ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎｎ、Ｇ８９６－２５０２）に通して滅菌濾過し、４℃で貯蔵した。
代替的に、プロピレングリコール（ＰＧ、２６６μｌ、２０％のカップリング体積）をＡｂ溶液（４．５ｍｇ／ｍｌ、１．４ｍｌ、６．３ｍｇ）に添加した。混合物をボルテックス中で３０秒間撹拌し、続いて１０倍モル過剰のリンカー－弾頭ペイロード（５ｍＭ、ＰＧ／ＤＭＡ中８４μｌ）を添加した。反応物を６４ｒｐｍにて室温で終夜撹拌した。この溶液を、１０倍モル過剰のＤＢＣＯ含有Ｔｅｎｔａｇｅｌ樹脂（０．１～０．２ｍｍｏｌ／ｇ、Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、ＣＳ－０４７７．０５００）とともに６時間インキュベートした。次いで、溶液を２０分間遠心分離（４℃で１４０００Ｇ）し、これをＨｉＬｏａｄ ２６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９８９３３６）ＳＥＣクロマトグラフィーカラム上に装填した。ＡＤＣをＰＢＳ中２０％ＰＧ（Ｓｉｇｍａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）で溶出し、続いてＰＢＳ １× ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）中で２サイクルの透析（１６および４時間）を行った。コンジュゲートを、Ｖｉｖａｓｐｉｎ ２０、５０ＫＤ、ＰＥＳ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ、ＶＳ２０３１）を使用して濃縮し、０．２μｍ滅菌ＰＥＳフィルター、２５ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎｎ、Ｇ８９６－２５０２）に通して滅菌濾過し、４℃で貯蔵した。
方法Ｃ：抗体を、Ｂｉｏｒａｄサイズの使い捨てカラム内で混合することにより、ＰＢＳ中、１ｍｌの樹脂に対して１０ｍｇのＡｂの比率で、ｒｍｐ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）上に３０分間結合させた。反応性システインを脱ブロック化するために、システイン塩酸塩一水和物を２０ｍＭの最終濃度まで添加した。混合物を室温で３０分間撹拌し、続いて、樹脂を真空マニホールド上にて５０カラム体積のＰＢＳで５回洗浄した。次いで、樹脂を、２５０ｎＭ ＣｕＣｌ２を含有する等体積のＰＢＳ中に再懸濁させ、１時間３０分インキュベートした。再酸化した抗体を真空マニホールド上にて５０カラム体積のＰＢＳで５回洗浄し、等体積のＰＢＳ中に再懸濁させた。混合物に、１０倍モル過剰の２０ｍＭリンカー－ペイロード溶液および等体積のＤＭＳＯを添加した。反応物を室温で２時間インキュベートした。コンジュゲーションをモニタリングするために、２０μｌの樹脂スラリーを取り出し、遠心分離し、上清を取り出し、次いで４０μｌの抗体溶出緩衝剤（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で溶出した。上清を、Ａｇｉｌｅｎｔ ＰＬＲＰ－Ｓ ４０００Ａ ５ｕｍ、４．６×５０ｍｍカラムを使用する逆相クロマトグラフィー（緩衝剤Ａは水、０．１％ＴＦＡ、緩衝剤Ｂはアセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、カラムを８０℃で保持、流速１．５ｍｌ／分）により分析した。樹脂を真空マニホールド上にて５０カラム体積のＰＢＳで５回洗浄することにより、過剰のリンカー－ペイロードを除去した後、ＡＤＣを抗体溶出緩衝剤でｐｒｏｔｅｉｎ Ａから溶出し、１／１０体積の１Ｍ Ｔｒｉｓ ｐＨ９．０で中和した。すべての例示されたＡＤＣ（Ａｂ Ｃ － Ｌ９－Ｃ１、Ａｂ Ｂ － Ｌ９－Ｐ１５、Ａｂ Ｂ － Ｌ２６－Ｐ１、Ａｂ Ｂ － Ｌ９－Ｐ１６、Ａｂ Ｂ － Ｌ９－Ｐ１７を除く）をＨｉＬｏａｄ ２６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９８９３３６）ＳＥＣクロマトグラフィーカラム上で精製し、ＰＢＳ中２０％ＰＧ（Ｓｉｇｍａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）で溶出した。ＡＤＣをＰＢＳ １× ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）中での透析により緩衝液交換し、Ｖｉｖａｓｐｉｎ ２０、５０ＫＤ、ＰＥＳ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ、ＶＳ２０３１）を使用して濃縮し、０．２μｍ滅菌ＰＥＳフィルター、２５ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎｎ、Ｇ８９６－２５０２）に通して滅菌濾過し、４℃で貯蔵した。Ａｂ Ｃ － Ｌ９－Ｃ１、Ａｂ Ｂ － Ｌ９－Ｐ１５、Ａｂ Ｂ － Ｌ２６－Ｐ１、Ａｂ Ｂ － Ｌ９－Ｐ１６およびＡｂ Ｂ － Ｌ９－Ｐ１７のＡＤＣについては、それらをＰＢＳ １× ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）中での透析により緩衝液交換し、Ｖｉｖａｓｐｉｎ ２０、５０ＫＤ、ＰＥＳ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ、ＶＳ２０３１）を使用して濃縮し、０．２μｍ滅菌ＰＥＳフィルター、２５ｍｍ（Ｗｈａｔｍａｎｎ、Ｇ８９６－２５０２）に通して滅菌濾過し、４℃で貯蔵しただけであった。
代替的に、抗体を、適切なサイズの使い捨てカラム内で混合しながら、ＰＢＳ中、１ｍｌの樹脂に対して１０ｍｇのＡｂの比率で、ＲＭＰ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ樹脂（ＧＥ）とともに１５分間インキュベートした。システインＨＣｌを２０ｍＭの最終濃度まで添加し、室温で３０分間撹拌しながらインキュベートして、反応性システインを脱ブロック化した。樹脂を、真空マニホールド上にて５０カラム体積のＰＢＳで迅速に洗浄した。次いで、樹脂を、２５０ｎＭ ＣｕＣｌ２を含有する等体積のＰＢＳ中に再懸濁させた。抗体鎖間ジスルフィドの再形成を、時点を取ることによりモニタリングした。各時点で、２５μＬの樹脂スラリーを取り出し、１μＬの２０ｍＭ ＭＣ－ｖａｌｃｉｔ－ＭＭＡＥを添加し、管を数回振った。樹脂を遠心沈殿し、上清を取り出し、次いで５０μＬの抗体溶出緩衝剤（Ｔｈｅｒｍｏ）で溶出した。樹脂をペレット化し、上清を、Ａｇｉｌｅｎｔ ＰＬＲＰ－Ｓ ４０００Ａ ５ｕｍ、４．６×５０ｍｍカラムを使用する逆相クロマトグラフィー（緩衝剤Ａは水、０．１％ＴＦＡ、緩衝剤Ｂはアセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、カラムを８０℃で保持、流速１．５ｍｌ／分）により分析した。抗体がその鎖間ジスルフィド結合を再形成したことが決定されたら、樹脂を１０カラム体積のＰＢＳで洗浄し、樹脂を等体積のＰＢＳ中に再懸濁させ、ＤＭＳＯ中８～１２当量のリンカー－ペイロードを添加し、反応物中１０％ＤＭＳＯの最終濃度とし、次いで室温で３時間インキュベートした。次いで、樹脂を５０カラム体積のＰＢＳで洗浄した。ＡＤＣを抗体溶出緩衝剤でｐｒｏｔｅｉｎ Ａ樹脂から溶出した。次いで、ＡＤＣをＰＢＳまたは他の好適な緩衝剤に緩衝液交換し、凝集物を除去する必要がある場合には、凝集物を除去するための分取サイズ排除クロマトグラフィーを行った（Ｓ２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ；ＧＥ）。以下の分析－パーセントモノマーを決定するための分析ＳＥＣ、ＤＡＲを決定するための質量分析、内毒素負荷を決定するためのＬＡＬ試験を行い、タンパク質濃度は、抗体の消衰係数および分子量を利用するＡ２８０により決定した。
方法Ｃ１－（ＣＤ３３－Ｌ１－Ｐ１）：ＣＤ３３抗体の溶液（１．０ｍｇ、１×ＰＢＳ緩衝液中６．５ｍｇ／ｍｌ溶液１５４μｌ、０．００６７μｍｏｌ、１．０当量）に、Ｌ１－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液２．５３μｌ、０．０５１μｍｏｌ、７．５当量）を添加した。得られた混合物を周囲温度にて４００ｒｐｍで１時間振盪し、その時点で、混合物を超遠心分離により精製した（４ｍｌのＡｍｉｃｏｎ １０ｋＤカットオフ膜フィルター、試料をＰＢＳ緩衝剤で４ｍｌの総体積に希釈し、続いて７５００×ｇで１０分間遠心分離し、６回繰り返した）。５．０ｍｇ／ｍｌに希釈した後、ＣＤ３３－Ｌ１－Ｐ１を得た（０．８４２ｍｇ、０．００５３μｍｏｌ、７９％）。以下の分析：パーセントモノマーを決定するための分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、ＤＡＲを決定するための質量分析（ＭＳ）を行い、タンパク質濃度は、抗体の消衰係数および分子量を利用するＡ２８０により決定した。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、ＤＡＲ３およびＤＡＲ４種についてピークのＭＳ強度を比較することにより計算される３．９のＤＡＲとともに、１５７８８４の質量を示した。ＳＥＣは、２１０および２８０ｎｍにおける高分子量ピーク吸光度の面積とモノマーＡＤＣについてのピーク吸光度の面積との比較により決定した、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ２－（ＰＣＡＤ－Ｌ１－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（２．０ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液３５７μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ１－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液５．０４μｌ、０．１０１μｍｏｌ、７．５当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ１－Ｐ１を得た（１．７３ｍｇ、０．０１０９μｍｏｌ、８１％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５８２６８の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ３－（ＰＣＡＤ－Ｌ１０－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（２．０ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液３５７μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ１０－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液５．０４μｌ、０．１０１μｍｏｌ、７．５当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ１０－Ｐ１を得た（１．９７ｍｇ、０．０１２μｍｏｌ、９２％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５８７３１の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ４－（ＣＤ３３－Ｌ１０－Ｐ１）：ＣＤ３３抗体（１．１ｍｇ、６．５ｍｇ／ｍｌ溶液１６９μｌ、０．００７４μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ１０－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液２．５３μｌ、０．０５１μｍｏｌ、６．８当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ１０－Ｐ１を得た（１．０８ｍｇ、０．００６８μｍｏｌ、９２％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５８３４６の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ５－（ＰＣＡＤ－Ｌ４－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（２．０ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液３５７μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ４－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液５．３８μｌ、０．１０８μｍｏｌ、８．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ４－Ｐ１を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、４．２のＤＡＲとともに、１５６５３３の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ６－（ＰＣＡＤ－Ｌ３－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（１．０ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液１７９μｌ、０．００６７μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ３－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液２．６９μｌ、０．０５４μｍｏｌ、８．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ３－Ｐ１を得た（１．０５ｍｇ、０．００６７μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５６７６３の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ７－（ＣＤ３３－Ｌ２－Ｐ１）：ＣＤ３３抗体（２．０ｍｇ、５．７ｍｇ／ｍｌ溶液３５１μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ２－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液５．４μｌ、０．１０８μｍｏｌ、８．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ２－Ｐ１を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５５８２１の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ８－（ＰＣＡＤ－Ｌ９－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（２．０ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液３５７μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ９－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液６．７３μｌ、０．１３μｍｏｌ、１０．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ９－Ｐ１を得た（１．９０ｍｇ、０．０１２μｍｏｌ、９１％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５４３９２の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ９－（ＣＤ３３－Ｌ９－Ｐ１）：ＣＤ３３抗体（１．０ｍｇ、６．５ｍｇ／ｍｌ溶液１５４μｌ、０．００６７μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ９－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液３．３７μｌ、０．０６７μｍｏｌ、１０．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ９－Ｐ１を得た（０．８４ｍｇ、０．００５５μｍｏｌ、８１％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５４００９の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１０－（ＣＤ３３－Ｌ８－Ｐ１）：ＣＤ３３抗体（１．０ｍｇ、６．５ｍｇ／ｍｌ溶液１５４μｌ、０．００６７μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ８－Ｐ１（ＤＭＳＯ中３０ｍｇ／ｍｌ溶液３．４３μｌ、０．０５４μｍｏｌ、８．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ８－Ｐ１を得た（０．９１ｍｇ、０．００５８μｍｏｌ、８７％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５５５９２１の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１１－（ＰＣＡＤ－Ｌ８－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（２．５ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液４７２μｌ、０．０１７μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ８－Ｐ１（ＤＭＳＯ中３０ｍｇ／ｍｌ溶液１０．７μｌ、０．１７μｍｏｌ、１０．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ８－Ｐ１を得た（１．５７ｍｇ、０．０１０μｍｏｌ、６０％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５６３０７の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ１２－（ＣＤ３３－Ｌ７－Ｐ１）：ＣＤ３３抗体（１．０ｍｇ、６．５ｍｇ／ｍｌ溶液１５４μｌ、０．００６７μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ７－Ｐ１（ＤＭＳＯ中３０ｍｇ／ｍｌ溶液３．５４μｌ、０．０５４μｍｏｌ、８．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ７－Ｐ１を得た（０．５６ｍｇ、０．００３６μｍｏｌ、５３％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５６１５１の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１３－（ＰＣＡＤ－Ｌ７－Ｐ１）：ＰＣＡＤ抗体（２．５ｍｇ、５．６ｍｇ／ｍｌ溶液４７２μｌ、０．０１７μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ７－Ｐ１（ＤＭＳＯ中３０ｍｇ／ｍｌ溶液１１．０３μｌ、０．１７μｍｏｌ、１０．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＰＣＡＤ－Ｌ７－Ｐ１を得た（２．６０ｍｇ、０．０１７μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５６５３９の質量を示した。ＳＥＣは、＜／＝１％凝集を示した。
方法Ｃ１４－（ＢＣＭＡ－Ｌ５－Ｐ１）：ＢＣＭＡ抗体（２．０ｍｇ、８．０ｍｇ／ｍｌ溶液２５０μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ５－Ｐ１（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液５．３８μｌ、０．１０８μｍｏｌ、８当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＢＣＭＡ－Ｌ５－Ｐ１を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに１５９１９７の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１５－（ＣＤ３３－Ｌ１２－Ｐ２）：ＣＤ３３抗体（２．０ｍｇ、５．８ｍｇ／ｍｌ溶液３４５μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ１２－Ｐ２（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液４．０５μｌ、０．０８１μｍｏｌ、６．０当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ１２－Ｐ２を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５７３３１の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１６－（ＢＣＭＡ－Ｌ１２－Ｐ２）：ＢＣＭＡ抗体（２．０ｍｇ、８．０ｍｇ／ｍｌ溶液２５０μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ１２－Ｐ２（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液３．０３μｌ、０．０６１μｍｏｌ、４．５当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＢＣＭＡ－Ｌ１２－Ｐ２を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．８のＤＡＲとともに、１５７７９２の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１７－（ＣＤ３３－Ｌ４－Ｐ２）：ＣＤ３３抗体（２．０ｍｇ、５．８ｍｇ／ｍｌ溶液３４５μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ４－Ｐ２（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液３．０３μｌ、０．０６１μｍｏｌ、４．５当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＣＤ３３－Ｌ４－Ｐ２を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５６７００の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
方法Ｃ１８－（ＢＣＭＡ－Ｌ４－Ｐ２）：ＢＣＭＡ抗体（２．０ｍｇ、８．０ｍｇ／ｍｌ溶液２５０μｌ、０．０１３μｍｏｌ、１．０当量）およびＬ４－Ｐ２（ＤＭＳＯ中２０ｍＭ溶液３．０３μｌ、０．０６１μｍｏｌ、４．５当量）を用いて方法Ｃ１に従って、ＢＣＭＡ－Ｌ４－Ｐ２を得た（２．１ｍｇ、０．０１３μｍｏｌ、９９％）。ＨＲＭＳデータ（タンパク質法）は、３．９のＤＡＲとともに、１５７１６４の質量を示した。ＳＥＣは、１％凝集を示した。
実施例に記載した他のＡＤＣ、例えばＣＤ３８ Ｍｃｌ１－阻害剤ＡＤＣ、ＣＤ４８ Ｍｃｌ１－阻害剤ＡＤＣ、およびＣＤ７９ｂ Ｍｃｌ１－阻害剤ＡＤＣ（例えば、表２４～２６に記載したもの）は、上記の方法と同様の方法により合成した。
分析方法
液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ／ＭＳ）Ｉ
一般的な方法論：例示的なＡＤＣの薬物対抗体比（ＤＡＲ）は、以下の方法（すなわち、ＬＣ－Ｉ、ＬＣＩＩおよびＬＣ－ＩＩＩ）のうちのいずれか１つによる液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ／ＭＳ）により決定した。すべてのＬＣ方法について、移動相Ａは、精製されたＭＳグレードの水（Ｂｉｏｓｏｌｖｅ，Ｄｉｅｕｚｅ，Ｆｒａｎｃｅ、００２３２１４１Ｂ１ＢＳ）であり、移動相Ｂは、ＭＳグレードのアセトニトリル（Ｂｉｏｓｏｌｖｅ，Ｄｉｅｕｚｅ，Ｆｒａｎｃｅ、０００１２０４１０１ＢＳ）であり、移動相Ｄは、１％のギ酸（ＦＡ）が補充された精製されたＭＳグレードの水（Ｈｏｎｅｙｗｅｌｌ／Ｆｌｕｋａ，Ｂｕｃｈａｒｅｓｔ，Ｒｏｍａｎｉａ、５６３０２）であった。移動相Ｄは、０．１％ＦＡ移動相組成を維持するために１０％に固定し、カラム温度は８０℃にセットした。一般的なＭＳ方法は、平均ＤＡＲを決定するためにネイティブＭＳを使用した１つのＡＤＣを除いて、すべての合成されたＡＤＣに対して最適化した（以下のＭＳ－Ｉおよび表２２を参照されたい）。
ＬＣ－Ｉ：ＡＤＣをＭａｓｓＰＲＥＰ Ｍｉｃｒｏ脱塩カラム（２．１×５．０ｍｍ、Ｗａｔｅｒｓ，Ｓａｉｎｔ－Ｑｕｅｎｔｉｎ－ｅｎ－Ｙｖｅｌｉｎｅｓ，Ｆｒａｎｃｅ、１８６００４０３２）上に装填した。無傷の質量分析のために、脱塩ステップを０．５ｍｌ／分の流速で５％移動相Ｂにて０．５分間行った。溶出ステップを、０．２ｍｌ／分の流速で、５％Ｂで０．５１分～９０％Ｂで２．０分の勾配を用いて行った。２回の洗浄ステップを、０．５ｍｌ／分の流速で５％Ｂ～９０％Ｂにて２．１分～２．７分および２．８分～３．４分にセットした。最後に、コンディショニングステップを、３．５分に５％Ｂ（０．５ｍｌ／分）で０．５分間使用した。
還元状態におけるＡＤＣ分析のために、脱塩ステップを０．２ｍｌ／分の流速で５％Ｂにて０．５分間行った。次いで、溶出ステップを、０．２ｍｌ／分の流速で、１０％Ｂで０．５１分～８０％Ｂで７．６１分の勾配を用いて開始した。２回の洗浄ステップを、５％Ｂ～９０％Ｂ（０．５ｍｌ／分）で８．１分～８．６分および８．７分～９．２分にセットした。最後に、コンディショニングステップを、９．３分に０．５ｍｌ／分の流速で５％Ｂにて０．５分間行った。
ＬＣ－ＩＩ：ＡＤＣをＭａｂＰａｃ ＲＰカラム（２．１×１００ｍｍ、４μｍ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ、０８８６４７）上に装填した。無傷の状態および還元状態の両方における分析のために、脱塩ステップを０．４ｍＬ／分の流速で２０％のＢにて１．４分間行った。次いで、溶出ステップを、０．３ｍｌ／分の流速で、２０％Ｂで１．５分～７０％Ｂで１１．５分の勾配を用いて行った。洗浄ステップを、０．５ｍｌ／分の流速で、９０％Ｂにて１１．７５分～１３．７５分にセットした。最後に、コンディショニングステップを、１４．０分に０．４ｍｌ／分の流速で２０％Ｂにて１．０分間使用した。
ＬＣ－ＩＩＩ：ＡＤＣをＢｉｏｒｅｓｏｌｖｅ ＲＰ ｍＡｂポリフェニル、４５０Ａ、２．７μｍ、２．１×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ，Ｓａｉｎｔ－Ｑｕｅｎｔｉｎ－ｅｎ－Ｙｖｅｌｉｎｅｓ，Ｆｒａｎｃｅ、１８６００８９４６）上に装填した。無傷の状態および還元状態の両方における分析のために、脱塩ステップを０．４ｍｌ／分の流速で２０％のＢにて１．４分間行った。溶出ステップを、０．３ｍｌ／分の流速で、２０％Ｂで１．５分～７０％Ｂで１１．５分の勾配を用いて行った。洗浄ステップを、０．５ｍｌ／分の流速で９０％Ｂにて１１．７５分～１３．７５分にセットした。最後に、コンディショニングステップを、１４．０分に０．４ｍｌ／分の流速で２０％Ｂにて１．０分間使用した。
ＭＳ－Ｉ：ＡＤＣをＭＳ適合性の緩衝剤と緩衝液交換し、陽イオンモードで動作する自動化チップベースのナノＥＳＩ源（Ｔｒｉｖｅｒｓａ Ｎａｎｏｍａｔｅ、Ａｄｖｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｔｈａｃａ，ＮＹ，ＵＳＡ）を備え付けたハイブリッドＱ－ＴＯＦ ＭＳ機器（Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２－Ｓ ＨＤＭＳ、Ｗａｔｅｒｓ，Ｍａｎｃｈｅｓｔｅｒ，ＵＫ）に直接注入した。機器のＭＳパラメーターは、気相におけるネイティブ３Ｄ構造を保存し、効率的なイオン脱溶媒和および透過を確実にするために調製された。
ＬＣ－ＭＳ分析を、Ｘｅｖｏ Ｇ２ ＸＳ Ｑ－ＴＯＦ ＥＳＩ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ，Ｍａｎｃｈｅｓｔｅｒ，ＵＫ）と組み合わせたＷａｔｅｒｓ ＵＰＬＣ Ｈ－Ｃｌａｓｓ Ｂｉｏクロマトグラフィーシステムを使用して行った。ＡＤＣは、無傷の状態（前処置なし）で、または５ｍＭ（最終濃度）のジチオトレイトールＤＴＴ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ、２０２９１）による還元に続いて分析した。その後、処置したＡＤＣを、前述のＬＣ－Ｉ、ＬＣ－ＩＩ、またはＬＣ－ＩＩＩ（表２２）のいずれかを使用して分析した。分析物のエレクトロスプレーイオン化飛行時間型質量スペクトルを、ＭａｓｓＬｙｎｘ（商標）取得ソフトウェア（Ｗａｔｅｒｓ，Ｍａｎｃｈｅｓｔｅｒ，ＵＫ）を使用して取得した。行われた単一のネイティブＭＳ実験に関して、ＡＤＣを、平均ＤＡＲを決定するためにＭＳ－Ｉ方法論を使用して分析した。次いで、抽出した強度対ｍ／ｚスペクトルを、使用した処置に応じて各無傷抗体種または各還元抗体断片の質量を決定するために、ＭａｓｓＬｙｎｘ（商標）ソフトウェアの最大エントロピー（ＭａｘＥｎｔ）法を使用して逆重畳積分した。最後に、ＤＡＲは、結合した薬物の数を各面積に乗算することにより重み付けした、コンジュゲートしていないおよびコンジュゲートした所定の種（ｍＡｂまたは関連断片）の積分したＭＳ（全イオン電流）またはＵＶ（２８０ｎｍ）ピーク面積を合計することにより、逆重畳積分したスペクトルまたはＵＶクロマトグラムから決定した。合計し、重み付けした面積を総面積の合計で除算し、その結果が全ＡＤＣについての最終平均ＤＡＲ値を生成する。
液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ／ＭＳ）ＩＩ
ＬＣ／ＭＳデータを、以下のパラメーター（表１３）で機器を使用して取得した：
Figure 2022532918000668
ＬＣ／ＭＳデータを生成するために使用した方法は、以下の通りであった（表１４～１６）：
Figure 2022532918000669
Figure 2022532918000670
Figure 2022532918000671
高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）
ＨＲＭＳデータを、以下のパラメーター（表１７）で機器を使用して取得した：
Figure 2022532918000672
リンカー／ペイロードおよび合成中間体についてのＨＲＭＳデータを生成するために使用した方法は、以下の通りであった（表１８および１９）：
Figure 2022532918000673
Figure 2022532918000674
ＡＤＣについてのＨＲＭＳデータを生成するために使用した方法は、以下の通りであった（表２０）：
Figure 2022532918000675
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）Ｉ
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を、精製後のＡＤＣの質および凝集パーセンテージ（％）を決定するために行った。分析は、定組成条件 １００％ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｓｉｇｍａ、Ｐ３８１３、１０ＰＡＫ）、流速０．４５ｍｌ／分 １２分間で、分析カラムＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ ５／１５０ ＧＬ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９９０９４５）上で行った。ＡＤＣ試料の％凝集画分を、２８０ｎｍにおけるピーク面積吸光度に基づいて定量した。計算は、２８０ｎｍにおける高分子量溶離液を高分子量の同じ波長におけるピーク面積吸光度の合計で除算したものと、モノマー溶離液との間の比を、１００％で乗算したものに基づいていた。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）ＩＩ
ＳＥＣデータを、以下のパラメーター（表２１）および１２分の実行時間長で機器を使用して取得した：
Figure 2022532918000676
結果
コンジュゲーションの一部は、２～２０ｍｇの間の抗体範囲で行った。すべての例示されたＡＤＣを、モノマーパーセンテージを決定するための分析サイズ排除クロマトグラフィーＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ ５／１５０ ＧＬ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、２８９９０９４５）およびＤＡＲ決定のためのＬＣ－ＭＳにより特徴付けした。例示的なＡＤＣの特徴付けを表２２に要約する（カップリングおよびＬＣ／ＭＳ方法、凝集状態、およびＤＡＲ）。平均ＤＡＲ値を、上記のＬＣ／ＭＳ方法（ＬＣ／ＭＳ Ｉ）を使用して決定し、パーセンテージ凝集を、上記のＳＥＣ方法（ＳＥＣ Ｉ）を使用して決定した。
Figure 2022532918000677
[実施例５]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価Ｉ
蛍光偏光（ＦＰ）によるＭｃｌ－１の阻害
各化合物の相対的結合能を、蛍光偏光（ＦＰ）を介して決定した。方法は、Ｍｃｌ－１タンパク質（ＵｎｉＰｒｏｔ参照配列：Ｑ０７８２０；配列番号７１）に結合するフルオレセイン標識リガンド（フルオレセイン－βＡｌａ－Ａｈｘ－Ａ－ＲＥＩＧＡＱＬＲＲＭＡＤＤＬＮＡＱＹ－ＯＨ；ＭＷ ２，７６５）を利用し、リーダーを使用して蛍光偏光度（ｍＰ）単位において測定された高い異方性をもたらした。リガンドと同じ部位に競争的に結合する化合物の添加により、ｍＰ単位での低下が示す通り、系において未結合リガンドの割合が高くなる。
各化合物の１１点連続希釈をＤＭＳＯで調製し、２μｌを平底の結合性の低い３８４ウェルプレートに移した（最終ＤＭＳＯ濃度５％）。次いで、フルオレセイン標識リガンド（最終濃度１ｎＭ）およびＭｃｌ－１タンパク質（最終濃度５ｎＭ）を含有する、３８μｌの緩衝剤（１０ｍＭ ４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸［ＨＥＰＥＳ］、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、ｐＨ７．４）を加えた。
アッセイプレートを室温で約２時間インキュベートした後、Ｂｉｏｍｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙ２リーダー（励起５２８ｎｍ、発光６４０ｎｍ、カットオフ５１０ｎｍ）でＦＰを測定し、ｍＰ単位を計算した。増加する用量の試験化合物の結合を、「５％ＤＭＳＯのみ」と「１００％阻害」との対照間で確立されたウィンドウと比較したｍＰでの減少パーセンテージとして表した。１１点用量応答曲線を、４パラメーターロジスティックモデル（シグモイド用量応答モデル）を使用してＸＬ－Ｆｉｔソフトウェアでプロットし、ｍＰで５０％減少させる阻害濃度（ＩＣ５０）を決定した。結果を以下の表２３に提示する。結果は、試験した化合物がＭｃｌ－１タンパク質とフルオレセイン標識ペプチドとの間の相互作用を阻害することを示唆する。
ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性
細胞毒性試験を、ＮＣＩ－Ｈ９２９多発性骨髄腫の細胞系で実施した。細胞をマイクロプレートに分注し、試験化合物に４８時間曝露した。次いで、比色アッセイ、Ｍｉｃｒｏｃｕｌｔｕｒｅ Ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ Ａｓｓａｙ（Carmichael et al. (1987) Cancer Res. 47:936-42）により、細胞生存率を定量化した。
結果をＩＣ５０（細胞生存率を５０％阻害する化合物の濃度）で表し、そして、以下の表２３に提示する。結果は、試験した化合物が、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞において細胞毒性であることを示す。
Figure 2022532918000678
[実施例６]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価ＩＩ
Ｍｃｌ－１ ＡＤＣを、９個の内因性がん細胞系および目的の標的を過剰発現するように操作された１個の同質遺伝子細胞系で試験した。６個の標的を評価した：ＨＥＲ２、ＢＣＭＡ、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、およびＣＤ３３。
細胞系
ＨＥＲ２：ＨＣＣ１９５４（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－２３３８）およびＨＣＣ２２１８（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－２３４３）。
ＢＣＭＡ：ＮＣＩ－Ｈ９２９（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳ＋０．０５ｍＭ ２－メルカプトエタノールで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－９０６８）。
ＣＤ３８：Ａ４－Ｆｕｋ（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ００９７）およびＫＭＳ－２１ＢＭ（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１８５）。
ＣＤ４８：ＮＣＩ－Ｈ９２９（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳ＋０．０５ｍＭ ２－メルカプトエタノールで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－９０６８）、ＯＰＭ－２（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＤＳＭＺ番号ＡＣＣ－５０）、およびＡＭＯ１（ＲＰＭＩ－１６４０＋２０％のＦＢＳで培養されたＤＳＭＺ番号ＡＣＣ－５３８）。
ＣＤ７９ｂ：ＲＳ４；１１（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１８７３）。
ＣＤ３３：ＭＯＬＭ－１３（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＤＳＭＺ番号ＡＣＣ－５５４）および同質遺伝子細胞系、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２。ＡＭＯ１細胞系をトランスフェクトして、目的の外因性タンパク質、ＣＤ３３、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２（ＲＰＭＩ－１６４０＋２０％のＦＢＳで培養）を発現する安定なＡＭＯ１細胞系を生成する。
細胞増殖および生存の阻害
Ｍｃｌ－１ ＡＤＣの細胞増殖および生存を阻害する能力を、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）増殖アッセイを使用して評価した。細胞系を、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃でそれらの成長に最適な培地で培養した。増殖アッセイのために播種する前に、細胞を、アッセイの少なくとも２日前に分けて、最適な成長密度を確実にした。播種の日に、付着細胞を、０．２５％のトリプシンを使用して組織培養フラスコから外した。細胞生存率および細胞密度を、細胞計数器（Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ生死細胞アナライザー、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して決定した。８５％超の生存率の細胞を、白色の透明底の３８４ウェルＴＣ処置プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３７６５）に播種した。細胞を、４５μｌの標準的な成長培地において１ウェル当たり１，０００個の細胞の密度で播種した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃で終夜インキュベートした。次の日、遊離Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）、標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣを、標準的な成長培地において１０倍で調製した。次いで、調製した薬物処置を細胞に加え、１ウェル当たり０．０００５～５００ｎＭの最終濃度および５０μｌの最終体積とした。各薬物濃度を４回試験した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃で５日間インキュベートした後、細胞生存率を、２５μｌのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７３）、細胞を溶解しアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の総含有量を測定する試薬の添加によって評価した。プレートを、室温で１０分間インキュベートして発光シグナルを安定化した後、ルミネセンスリーダー（ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルプレートリーダー、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して読み取った。薬物処置の効果を評価するために、未処置細胞（１００％の生存率）を含有するウェル由来の発光計数を使用して、処置した試料を正規化した。様々な勾配モデルを適用して、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭバージョン７．０２のソフトウェアにおいて、データに対して非線形回帰曲線を適合した。ＩＣ５０およびＡｍａｘ値を、得られた曲線から外挿した。
目的の６つの標的を発現する代表的ながん細胞系の用量応答曲線は、図２Ａ～図７に示す。細胞成長または生存を５０％阻害するのに必要な処置の濃度（ＩＣ５０）を、試験した細胞系の代表的なＩＣ５０値で計算し、表２４～２９に概説する。
代表的ながん細胞系は、１０～６０ｎＭの範囲であるＩＣ５０値でのＨＥＲ２陽性がん細胞系を除いて、０．０３８～５．６ｎＭの活性の範囲であるＩＣ５０値でＭｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）に感度を有することが示された。Ａ４－ＦｕｋおよびＫＭＳ－２１ＢＭ細胞で試験したＣＤ３８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ ＣＤ３８－Ｌ７－Ｐ１は、アイソタイプが一致した非標的化対照ＡＤＣ、ＩｇＧ－Ｌ７－Ｐ１に対して、高いｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性を示した。しかし、細胞成長の最大阻害は、５０％に達した（図２Ａおよび図２Ｂ）。Ｍｃｌ－１ペイロード、Ｐ１への感度にかかわらず、ＣＤ４８標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、ＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１は、細胞増殖の阻害を誘発せず、本実験におけるアイソタイプが一致した非標的化対照ＡＤＣ、ＩｇＧ－Ｌ７－Ｐ１に類似した（図３Ａ～図３Ｃ）。類似の傾向は、ＣＤ７９ｂ標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、ＣＤ７９ｂ－Ｌ７－Ｐ１に対して観察された（図４）。ＨＥＲ２標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、Ｈｅｒ２－Ｌ９－Ｐ１は、Ｍｃｌ－１ペイロード（Ｐ１）のものと類似のＨＣＣ２２１８細胞での細胞傷害活性を示したが、ＨＣＣ１９５４細胞では不活性であった（図５Ａおよび図５Ｂ）。同質遺伝子細胞系ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２の細胞増殖は、０．０８９～０．４７６ｎＭの範囲であるＩＣ５０で、ＣＤ３３－Ｌ２－Ｐ１、ＣＤ３３－Ｌ３－Ｐ１およびＣＤ３３－Ｌ７－Ｐ１により阻害された。一致した非標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、ＩｇＧ－Ｌ７－Ｐ１では、活性はほとんど観察されなかった。ＣＤ３３－Ｌ１２－Ｐ２およびＣＤ３３－Ｌ４－Ｐ２は、同質遺伝子細胞系ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２では不活性であった。ＣＤ３３－Ｌ７－Ｐ１ ＡＤＣのみをＭＯＬＭ－１３細胞で試験し、一致した非標的化Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ、ＩｇＧ－Ｌ７－Ｐ１によるバックグラウンド活性をほとんど有していなかったにもかかわらず、その活性は適度であった（図６Ａおよび図６Ｂ）。様々なリンカー（Ｌ１、Ｌ３～Ｌ５、Ｌ７～Ｌ１０）を使用するＢＣＭＡ標的化ＡＤＣは、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞の細胞増殖を阻害する類似の細胞傷害活性を示した。アイソタイプが一致した非標的化対照、ＩｇＧ－Ｌ７－Ｐ１は、最も高い試験濃度５００ｎＭで、細胞系で同じ活性を示した。ＢＣＭＡ－Ｌ１２－Ｐ２およびＢＣＭＡ－Ｌ４－Ｐ２ ＡＤＣは、ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞系では不活性であった（図７）。
本試験では、Ｍｃｌ－１ ＡＤＣが、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、およびより少ない程度でＣＤ３８を発現する様々ながん細胞系で細胞増殖を阻害することが可能であることが示される。Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、ＣＤ３８、ＣＤ７９ｂ、およびＨＥＲ２を発現するがん細胞系でのアイソタイプが一致した非標的化対照に対して、ほとんど細胞傷害活性を示さなかった。
Figure 2022532918000679
Figure 2022532918000680
Figure 2022532918000681
Figure 2022532918000682
Figure 2022532918000683
Figure 2022532918000684
[実施例７]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － 抗ＣＤ３３ ＡＤＣ（Ｇｌｎ部位特異的コンジュゲーション）
ＡＭＯ１－ＣＤ３３操作された細胞系の生成（クローンＤ２）
ＡＭＯ１は、ＣＤ３３を発現しない多発性骨髄腫のヒト細胞系である。ｈＣＤ３３を発現するＡＭＯ１クローンを生成するために、ＡＭＯ１細胞を、８μｇ／ｍｌのポリブレンの存在下、感染多重度（ＭＯＩ）８でｈＣＤ３３（クローンＩＤ：ＰＬＯＨＳ １００００４３５６）をコードするレンチウイルス粒子（ＧＥヘルスケア－Ｄｈａｒｍａｃｏｎ）で形質導入した。細胞をＧＦＰレポーター遺伝子発現に基づいて分類し、細胞表面のｈＣＤ３３の存在をフローサイトメトリーで評価した。その後、ＡＭＯ１－ＣＤ３３細胞を、異なるレベルのｈＣＤ３３の発現でクローンを分離するために単一細胞として分類した。ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２を、フローサイトメトリーにより測定される通り、ｈＣＤ３３の高いその発現に基づいて選択した。
ＭＴＴアッセイを使用する細胞生存率
ＭＴＴ比色アッセイは、生細胞によるテトラゾリウム塩のミトコンドリア還元に基づく。生存細胞数はホルマザン塩の作製に比例し、これは、５４０ｎｍで分光光度法により読み取ることができる。
ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞を、２０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩ １６４０で培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレート（１ウェル当たり１５０μｌ）に播種し、ＡＤＣに４８時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々８個の濃度、３回）。インキュベーション時間の終了時に、１５μｌのＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）をウェルごとに加え、細胞をさらに４時間インキュベートした。次いで、１００μｌの１０％の硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）／ＨＣｌ １０ｍＭをウェルごとに加え、プレートを終夜インキュベートした後、５４０ｎｍで光学密度を測定した。ＩＣ５０値を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。本アッセイに対して、ＩＣ５０は、ＭＴＴシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。
結果：図８Ａおよび８Ｂに示す通り、全ての試験した抗ＣＤ３３ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＭＴＴアッセイにおいてＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。
[実施例８]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － 抗ＨＥＲ２ ＡＤＣ（Ｇｌｎ部位特異的コンジュゲーション）
ＣＴＧアッセイを使用する細胞生存率
ＨＣＣ１９５４細胞を、１０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩで培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレートに播種し、ＡＤＣに１２０時間曝露した（５倍連続希釈；各々９個の濃度、３回）。細胞生存率でのＡＤＣの効果を、７５μｌの試薬／ウェルでＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（登録商標）試薬を使用する細胞のＡＴＰレベルの定量化により、３７℃／５％のＣＯ２でのインキュベーションの５日後に評価した。全ての状態を３回試験した。ルミネセンスを多目的プレートリーダーで定量化した。ＩＣ５０値を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。本アッセイに対して、ＩＣ５０は、ＣＴＧシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。
結果：図９Ａおよび９Ｂに示す通り、全ての試験した抗ＨＥＲ２ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＣＴＧアッセイにおいてＨＣＣ１９５４細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。
[実施例９]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － ＭＴＴアッセイを使用するＮＣＩ－Ｈ９２９（多発性骨髄腫）細胞生存率の抗ＢＣＭＡ ＡＤＣ（Ｃｙｓ部位特異的コンジュゲーション）の効果
ＭＴＴ比色アッセイは、生細胞によるテトラゾリウム塩のミトコンドリア還元に基づく。生存細胞数はホルマザン塩の作製に比例し、これは、５４０ｎｍで分光光度法により読み取ることができる。
ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞を、１０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩ １６４０で培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレート（１ウェル当たり１５０μｌ）に播種し、ＡＤＣに４８時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々８個の濃度、３回）。インキュベーション時間の終了時に、１５μｌのＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）をウェルごとに加え、細胞をさらに４時間インキュベートした。次いで、１００μｌの１０％の硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）／ＨＣｌ １０ｍＭをウェルごとに加え、プレートを終夜インキュベートした後、５４０ｎｍで光学密度を測定した。ＩＣ５０値を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。本アッセイに対して、ＩＣ５０は、ＭＴＴシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。
結果：図１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ、および１０Ｄに示す通り、全ての試験した抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ１ｉ ＡＤＣおよび対応するペイロードは、ＭＴＴアッセイにおいてＮＣＩ－Ｈ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。
[実施例１０]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － 抗ＣＤ４８ ＡＤＣ
ＮＣＩ－Ｈ９２９、ＫＨＭ１Ｂ、およびＫＭＳ２１ＢＭ細胞を、１０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩで培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレートに播種し、ＡＤＣに７２時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々８個の濃度、３回）。細胞生存率でのＡＤＣの効果を、７５μｌの試薬／ウェルでＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ（登録商標）試薬を使用する細胞のＡＴＰレベルの定量化により、３７℃／５％のＣＯ２でのインキュベーションの３日後に評価した。全ての状態を３回試験した。ルミネセンスを多目的プレートリーダーで定量化した。ＩＣ５０値を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。本アッセイに
対して、ＩＣ５０は、ＣＴＧシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。
結果：ＣＴＧアッセイにおける細胞の生存率での試験した抗ＣＤ４８ ＡＤＣの効果は、図１３Ａ（ＮＣＩ－Ｈ９２９）、図１３Ｂ（ＫＨＭ１Ｂ）、および図１３Ｃ（ＫＭＳ２１ＢＭ）に示す。試験した抗ＣＤ４８ ＡＤＣが、ＣＴＧアッセイにおいてＮＣＩ－Ｈ９２９、ＫＨＭ１Ｂ、およびＫＭＳ２１ＢＭ細胞の生存率での明らかな減少を誘発したことを示した。
[実施例１１]
ｉｎ ｖｉｖｏ評価Ｉ
リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）において製剤化される例示的なＢＣＭＡ標的化ＡＤＣを、静脈内（ＩＶ）投与後のＮＣＩ－Ｈ９２９多発性骨髄腫マウスモデルにおいてｉｎ ｖｉｖｏでの治療有効性に対して評価した。
材料および方法
以下の化合物を本実施例において使用した（ＡＤＣは、実施例４に記載の方法を介して合成した）：ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ ＦｃサイレントＡｂ、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ７－Ｐ１。
ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－９０６８）を、１０％のＦＢＳを補充したＲＰＭＩで培養した。細胞を１００％のマトリゲル（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）内で再懸濁し、５×１０６個の細胞を含有する０．１ｍｌのマトリゲルを、雌のＳＣＩＤマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）の右側腹へ皮下接種した。腫瘍が適切な体積に達した場合、マウスをＥａｓｙ ｓｔａｔソフトウェアを使用して、１群当たり６匹の動物に無作為化した。ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、および抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ７－Ｐ１（１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇ）を、ＰＢＳにおいて１回ＩＶ注射した。体重を１週間に３回モニタリングし、腫瘍サイズを電子ノギスを使用して測定した。腫瘍体積を式：（最小直径）２（最大直径）／２を使用して最小および最大の腫瘍直径を測定することにより推定した。対照動物の少なくとも半数が試験に依然として存在する最終日（ｄ１７）、腫瘍成長阻害を式：
Figure 2022532918000685
 を使用して計算した。ＤｘでのＤＴＶ（デルタ腫瘍体積）を、ＤｘでのＴＶ－無作為化でのＴＶで計算した。奏功を以下の通り評価した：少なくとも３回の測定に対して腫瘍サイズが２５ｍｍ３以下であった場合、ＣＲ（完全奏効）、少なくとも３回の測定に対して腫瘍サイズが２５ｍｍ３と１１４ｍｍ３（開始サイズの半分）との間であった場合、ＰＲ（部分奏効）。マウスを、腫瘍体積が２０００ｍｍ３を超えた最初の測定、または動物の健康悪化の最初の兆候で殺処分した。全ての実験を、２０１８年における現行のフランスの規制にしたがって実行した。ＳＣＩＤマウスを施設でのガイドラインによって飼育した。
結果
ＮＣＩ－Ｈ９２９異種移植片での抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ７－Ｐ１の有効性は、図１１に示す。処置は、腫瘍細胞接種の１１日後に開始した（平均サイズ：２２９．２ｍｍ３）。ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント（非標的化ＡＤＣ ＦＳ）、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント（裸の抗体ＦＳ）、および抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ７－Ｐ１（ＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳ）を、１０および／または３０ｍｇ／ｋｇで、ＩＶで１回投与した。１７日目に、３０ｍｇ／ｋｇでＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳにより誘発された腫瘍成長阻害（％ＴＧＩ）は、図１１および表３０に示す通り、裸の抗体ＦＳ（それぞれＴＧＩ＝９９．２％対３４．７％、ｐ＜０．０００１）、および対応する非標的化ＡＤＣ ＦＳ（ＴＧＩ＝３７．７％、ｐ＜０．０００１）より大きい。１０ｍｇ／ｋｇで、裸の抗体ＦＳは、抗腫瘍活性を示さなかった一方、ＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳは、７５．６％のＴＧＩ（ｐ＝０．００３８）を誘発した。完全退縮（ＣＲ）は、ＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳで処置された動物で排他的に達成された。処置による臨床関連の体重減少または他の臨床兆候は観察されなかった（図１２）。
Figure 2022532918000686
[実施例１２]
ｉｎ ｖｉｖｏ評価ＩＩ
３個のＢＣＭＡ標的化ＡＤＣのｉｎ ｖｉｖｏでの治療効果を、静脈内（ＩＶ）投与後のＨ９２９多発性骨髄腫モデルにおいて決定した。
材料および方法
以下の化合物を本実施例において使用した（ＡＤＣは、実施例４に記載の方法を介して合成した）：抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ１１－Ｐ１、Ａｂ Ｂ Ｆｃサイレント－Ｌ２７－Ｐ１、および抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１。
Ｈ９２９細胞は、ＡＴＣＣから得られるが、１０％のＦＢＳを補充したＲＰＭＩで培養した。細胞を１００％のマトリゲル（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）内で再懸濁し、５×１０６個の細胞を含有する０．１ｍｌを、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒより供給される雌のＳＣＩＤマウスの右側腹へ皮下接種した。腫瘍が適切な体積に達した場合、マウスをＥａｓｙ ｓｔａｔソフトウェアを使用して、１群当たり６匹の動物に無作為化した。抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ１１－Ｐ１／Ｌ５－Ｐ１、Ａｂ Ｂ Ｆｃサイレント－Ｌ２７－Ｐ１（２０ｍｇ／ｋｇ）を、２０ｍＭのヒスチジン／ＮａＣｌで、ＩＶで１回注射した。マウスの体重を１週間に３回モニタリングし、腫瘍サイズを電子ノギスを使用して測定した。腫瘍体積を式：（最小直径）２（最大直径）／２を使用して最小および最大の腫瘍直径を測定することにより推定した。対照動物の少なくとも半数が試験に依然として存在する最終日（ｄ１４）、腫瘍成長阻害を式：
Figure 2022532918000687
 を使用して計算し、ＤｘでのＤＴＶ（デルタ腫瘍体積）を、ＤｘでのＴＶ－無作為化でのＴＶで計算した。
奏功を以下の通り評価した：少なくとも３回の測定に対して腫瘍サイズが２５ｍｍ３以下であった場合、ＣＲ（完全奏効）、少なくとも３回の測定に対して腫瘍サイズが２５ｍｍ３と９０．６ｍｍ３（開始サイズの半分）との間に含まれた場合、ＰＲ（部分奏効）。
マウスを、腫瘍体積が２０００ｍｍ３を超えた最初の測定、または動物の健康悪化の最初の兆候で殺処分した。全ての実験を、Ｓｅｒｖｉｅｒ研究所（ＩｄＲＳ）倫理委員会の承認後の２０１８年における現行のフランスの規制にしたがって実行した。ＳＣＩＤマウスを施設でのガイドラインによって飼育した。
結果
Ｈ９２９異種移植片での異なるリンカーを含有する抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ ＦｃサイレントＡＤＣの有効性は、図１４に示す。処置は、腫瘍細胞接種の１１日後に開始した（平均サイズ：１８１．３ｍｍ３）。抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント（裸の抗体ＦＳ）および異なる抗ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ ＦｃサイレントＡＤＣ（ＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳ）を、２０ｍｇ／ｋｇで、ＩＶで１回投与した。１４日目に、３つのＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳ（Ｌ５－Ｐ１、Ｌ２７－Ｐ１およびＬ１１－Ｐ１）が、図１４および表３１に示す通り、裸の抗体ＦＳと比較して強力な腫瘍成長阻害（％ＴＧＩ）（それぞれＴＧＩ＝８４．３％、９６．５％、１０８．６％対－１．７％、ｐ＜０．０１）を誘発したことを見出した。完全退縮（ＣＲ）は、ＢＣＭＡ標的化ＡＤＣ ＦＳで処置された動物で排他的に達成された（表３１）。処置による臨床関連の体重減少または他の臨床兆候は観察されなかった（図１５）。
Figure 2022532918000688
[実施例１３]
ｉｎ ｖｉｖｏ評価ＩＩＩ
リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）において製剤化されるＣＤ４８標的化ＡＤＣのｉｎ ｖｉｖｏでの治療効果を、静脈内（ＩＶ）投与後のＨ９２９多発性骨髄腫モデルにおいて決定した。
材料および方法
以下の化合物を本実施例において使用した：ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１。本明細書の実施例で使用される抗ＣＤ４８抗体は、米国特許公開第２０１８００９２９８４号明細書に記載のヒト化ＭＥＭ１０２（ｈＭＥＭ１０２）であり、これを、ＣｙｓｍＡｂ突然変異で操作してリンカー－ペイロードとのコンジュゲーションを促進した。ＡＤＣは、実施例４に記載の方法を介して合成した。
Ｈ９２９細胞は、ＡＴＣＣから得られるが、１０％のＦＢＳを補充したＲＰＭＩで培養した。細胞を１００％のマトリゲル（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）内で再懸濁し、５×１０６個の細胞を含有する０．１ｍｌを、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒより供給される雌のＳＣＩＤマウスの右側腹へ皮下接種した。腫瘍が適切な体積に達した場合、マウスをＥａｓｙ ｓｔａｔソフトウェアを使用して、１群当たり８匹の動物に無作為化した。ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント、抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント、および抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１（３０ｍｇ／ｋｇ）を、ＰＢＳにおいて１回ＩＶ注射した。マウスの体重を１週間に３回モニタリングし、腫瘍サイズを電子ノギスを使用して測定した。腫瘍体積を式：（最小直径）２（最大直径）／２を使用して最小および最大の腫瘍直径を測定することにより推定した。対照動物の少なくとも半数が試験に依然として存在する最終日（ｄ１６）、腫瘍成長阻害を式：
Figure 2022532918000689
 を使用して計算し、ＤｘでのＤＴＶ（デルタ腫瘍体積）を、ＤｘでのＴＶ－無作為化でのＴＶで計算した。
マウスを、腫瘍体積が２０００ｍｍ３を超えた最初の測定、または動物の健康悪化の最初の兆候で殺処分した。全ての実験を、Ｓｅｒｖｉｅｒ研究所（ＩｄＲＳ）倫理委員会の承認後の２０１８年における現行のフランスの規制にしたがって実行した。ＳＣＩＤマウスを施設でのガイドラインによって飼育した。
結果
Ｈ９２９異種移植片での抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１の有効性は、図１６に示す。処置は、腫瘍細胞接種の１０日後に開始した（平均サイズ：１３３．１ｍｍ３）。ＩｇＧ１－リンカー－ペイロードＦｃサイレント（非標的化ＡＤＣ ＦＳ）、抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント（裸の抗体ＦＳ）、および抗ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ Ｆｃサイレント＿Ｌ５－Ｐ１（ＣＤ４８標的化ＡＤＣ ＦＳ）を、３０ｍｇ／ｋｇで、ＩＶで１回投与した。１６日目に、３０ｍｇ／ｋｇでＣＤ４８標的化ＡＤＣ ＦＳにより誘発された腫瘍成長阻害（％ＴＧＩ）は、図１６および表３２に示す通り、裸の抗体ＦＳ（それぞれＴＧＩ＝９８．８％対－２２．９％、ｐ＜０．００１）、および対応する非標的化ＡＤＣ ＦＳ（ＴＧＩ＝－５０．４％）より大きい。処置による臨床関連の体重減少または他の臨床兆候は観察されなかった（図１７）。
Figure 2022532918000690
[実施例１４]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － ＣＴＧアッセイを使用するＫＭＳ２１ＢＭ（多発性骨髄腫）細胞生存率の抗ＣＤ４６－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ（Ａｂ Ｃ－Ｌ９－Ｃ１）および対応するペイロードの効果
ＫＭＳ２１ＢＭ細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で、１０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩ １６４０で培養した。ＫＭＳ２１ＢＭ細胞を９６マイクロウェルプレートに播種し、ＡＤＣに７２時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々９個の濃度、３回）。細胞生存率のＡＤＣ、裸の抗体、または対応するペイロードＣ１の効果を、７５μＬの試薬／ウェルでＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏを使用する細胞のＡＴＰレベルの定量化により、３７℃／５％のＣＯ２でのインキュベーションの３日後に評価した。全ての状態を３回試験した。ルミネセンスを多目的プレートリーダーで定量化した。ＩＣ５０（表３３）を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。ＩＣ５０は、ＣＴＧシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。図１８に示す通り、抗ＣＤ４６－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣ（Ａｂ Ｃ－Ｌ９－Ｃ１）および対応するペイロードＣ１は、ＣＴＧアッセイにおいてＫＭＳ２１ＢＭ細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した一方、対応する裸の抗体では著しい効果は観察されなかった。
Figure 2022532918000691
[実施例１５]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － ＭＴＴアッセイを使用するＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞生存率においてＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた抗ＣＤ３３－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣの効果
ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞を、２０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩ １６４０で培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレート（１ウェル当たり１５０μＬ）に播種し、１μＭのＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１の非存在下または存在下で、ＡＤＣ、裸の抗体、または対応するペイロードに４８時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々８個の濃度、３回）。インキュベーション時間の終了時に、１５μＬのＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）をウェルごとに加え、細胞をさらに４時間インキュベートした。次いで、１００μＬの１０％の硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）／ＨＣｌ １０ｍＭをウェルごとに加え、プレートを終夜インキュベートした後、５４０ｎｍで光学密度を測定した。ＩＣ５０を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。ＩＣ５０は、ＭＴＴシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。
図１９Ａおよび１９Ｂに示す通り、全てのＡＤＣは、ＡＭＯ１－ＣＤ３３クローンＤ２細胞の生存率において単剤での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善される一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。
[実施例１６]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － ＭＴＴアッセイを使用するＡＭＯ１細胞生存率の、単剤での、およびＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣの効果
ＭＴＴ比色アッセイは、生細胞によるテトラゾリウム塩のミトコンドリア還元に基づく。生存細胞数はホルマザン塩の作製に比例し、これは、５４０ｎｍで分光光度法により読み取ることができる。
ＡＭＯ１細胞を、２０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩ １６４０で培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレート（１ウェル当たり１５０μＬ）に播種し、１μＭの化合物Ａ１化合物の非存在下または存在下で、ＡＤＣまたは対応するペイロードに４８時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々８個の濃度、３回）。インキュベーション時間の終了時に、１５μＬのＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）をウェルごとに加え、細胞をさらに４時間インキュベートした。次いで、１００μＬの１０％の硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）／ＨＣｌ １０ｍＭをウェルごとに加え、プレートを終夜インキュベートした後、５４０ｎｍで光学密度を測定した。Ｃ５０を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。ＩＣ５０は、ＭＴＴシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。図２０Ａおよび２０Ｂに示す通り、全ての抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、ＭＴＴアッセイにおいてＡＭＯ１細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善された一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。
[実施例１７]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － ＭＴＴアッセイを使用するＮＣＩ－Ｈ９２９細胞生存率のＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣの効果
ＭＴＴ比色アッセイは、生細胞によるテトラゾリウム塩のミトコンドリア還元に基づく。生存細胞数はホルマザン塩の作製に比例し、これは、５４０ｎｍで分光光度法により読み取ることができる。
ＮＣＩ－Ｈ９２９細胞を、１０％の熱不活性化ウシ胎児血清、ペニシリン（１００ＩＵ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、およびＬ－グルタミン（２ｍＭ）を補充したＲＰＭＩで培養した。細胞を、５％のＣＯ２を含有する湿潤雰囲気下、３７℃で培養した。細胞を９６マイクロウェルプレート（１ウェル当たり１５０μＬ）に播種し、１μＭの化合物Ａ１の非存在下または存在下で、ＡＤＣまたは対応するペイロードに４８時間曝露した（３．１６倍連続希釈；各々８個の濃度、３回）。インキュベーション時間の終了時に、１５μＬのＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）をウェルごとに加え、細胞をさらに４時間インキュベートした。次いで、１００μＬの１０％の硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）／ＨＣｌ １０ｍＭをウェルごとに加え、プレートを終夜インキュベートした後、５４０ｎｍで光学密度を測定した。ＩＣ５０を、標準的な４パラメーター曲線フィッティングを使用して計算した。ＩＣ５０は、ＭＴＴシグナルが対照に対して測定されたものの５０％まで低下する場合の化合物濃度として定義した。各実験を少なくとも２回実施し、結果は再現性を有した。図２１Ａおよび２１Ｂに示す通り、全ての抗ＢＣＭＡ－Ｍｃｌ－１ ＡＤＣは、ＭＴＴアッセイにおいてＨ９２９細胞の生存率での用量依存的減少を誘発した。興味深いことに、ＡＤＣの活性は、ＢＣＬ２阻害剤化合物Ａ１と組み合わせた場合に著しく改善される一方、これらの細胞を、対応する裸の抗体を単剤で、または１μＭの化合物Ａ１と組み合わせて処置した後では著しい効果は観察されなかった。
[実施例１８]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － 抗ＣＤ４８ ＡＤＣ
細胞系
ＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１、アイソタイプＩｇＧ１－Ｌ７－Ｐ１ ＡＤＣ、およびＭＣＬ－１遊離ペイロードＰ１を、４個の内因性がん細胞系に対して試験した。ＫＭＳ－２１ＢＭ（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１８５）、ＫＭＳ－２０（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１９６）、ＫＭＳ－２７（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１８８）、およびＮＣＩ－Ｈ９２９（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳ＋０．０５ｍＭ ２－メルカプトエタノールで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－９０６８）。
細胞増殖および生存の阻害
ＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１、アイソタイプＩｇＧ１－Ｌ７－Ｐ１ ＡＤＣ、およびＭＣＬ－１遊離ペイロードＰ１の細胞増殖および生存を阻害する能力を、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）増殖アッセイを使用して評価した。
細胞系を、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃でそれらの成長に最適な培地で培養した。増殖アッセイのために播種する前に、細胞を、アッセイの少なくとも２日前に分けて、最適な成長密度を確実にした。播種の日に、懸濁細胞を回収した。細胞生存率および細胞密度を、細胞計数器（Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ生死細胞アナライザー、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して決定した。８５％超の生存率の細胞を、白色の透明底の３８４ウェルＴＣ処置プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３７６５）に播種した。細胞を、４５μＬの標準的な成長培地において１ウェル当たり１，０００個の細胞の密度で播種した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃で終夜インキュベートした。次の日、遊離ＭＣＬ－１ペイロード（Ｐ１）、標的化ＭＣＬ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣを、標準的な成長培地において１０倍で調製した。次いで、調製した薬物処置を細胞に加え、１ウェル当たり０．０００５～５００ｎＭの最終濃度および５０μＬの最終体積とした。各薬物濃度を４回試験した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃で５日間インキュベートした後、細胞生存率を、２５μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７３）、細胞を溶解しアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の総含有量を測定する試薬の添加によって評価した。プレートを、室温で１０分間インキュベートして発光シグナルを安定化した後、ルミネセンスリーダー（ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルプレートリーダー、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して読み取った。薬物処置の効果を評価するために、未処置細胞（１００％の生存率）を含有するウェル由来の発光計数を使用して、処置した試料を正規化した。様々な勾配モデルを適用して、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭバージョン７．０２のソフトウェアにおいて、データに対して非線形回帰曲線を適合した。ＩＣ５０およびＡｍａｘ値を、得られた曲線から外挿した。
結果
目的のＣＤ４８標的を発現する代表的ながん細胞系の用量応答曲線は、図２２に示す（四角＝ＣＤ４８－Ｌ７－Ｐ１、丸＝ＩｇＧ－Ｌ７－Ｐ１、三角＝遊離ＭＣＬ１ペイロードＰ１）。細胞成長または生存を５０％阻害するのに必要な処置の濃度（ＩＣ５０）を、表３４に概説する試験した細胞系の代表的なＩＣ５０値で計算した。
Figure 2022532918000692
[実施例１９]
ｉｎ ｖｉｔｒｏ評価 － 様々ながん細胞系の細胞生存率の、単剤での、およびベネトクラクスと組み合わせた抗ＣＤ４８ ＡＤＣの効果
細胞系
ＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートを、４個の内因性がん細胞系に対して試験した。ＫＭＳ－２１ＢＭ（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１８５）、ＫＭＳ－２０（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１９６）、ＫＭＳ－２７（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳで培養されたＪＣＲＢ番号ＪＣＲＢ１１８８）、およびＮＣＩ－Ｈ９２９（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％のＦＢＳ＋０．０５ｍＭ ２－メルカプトエタノールで培養されたＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－９０６８）。
細胞増殖および生存の阻害
ＣＤ４８ ＭＣＬ－１抗体薬物コンジュゲートの細胞増殖および生存を阻害する能力を、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）増殖アッセイを使用して評価した。細胞系を、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃でそれらの成長に最適な培地で培養した。増殖アッセイのために播種する前に、細胞を、アッセイの少なくとも２日前に分けて、最適な成長密度を確実にした。播種の日に、懸濁細胞を回収した。細胞生存率および細胞密度を、細胞計数器（Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ生死細胞アナライザー、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して決定した。８５％超の生存率の細胞を、白色の透明底の３８４ウェルＴＣ処置プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３７６５）に播種した。細胞を、４５μＬの標準的な成長培地において１ウェル当たり１，０００個の細胞の密度で播種した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃で終夜インキュベートした。次の日、遊離ＭＣＬ－１ペイロード（Ｐ１）、標的化ＭＣＬ－１ ＡＤＣ、および非標的化アイソタイプＡＤＣを、標準的な成長培地において１０倍で調製した。次いで、調製した薬物処置を細胞に加え、１ウェル当たり０．０００５～３００ｎＭの最終濃度および５０μＬの最終体積とした。各薬物濃度を４回試験した。２つの状態を各化合物に対して評価した。化合物を、単剤で、およびベネトクラクスと組み合わせて評価した。ベネトクラクスを、５ｎＭまたは５０ｎＭのいずれかの最終濃度で投与した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃で５日間インキュベートした後、細胞生存率を、２５μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７３）、細胞を溶解しアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の総含有量を測定する試薬の添加によって評価した。プレートを、室温で１０分間インキュベートして発光シグナルを安定化した後、ルミネセンスリーダー（ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルプレートリーダー、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用して読み取った。薬物処置の効果を評価するために、未処置細胞（１００％の生存率）を含有するウェル由来の発光計数を使用して、処置した試料を正規化した。様々な勾配モデルを適用して、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭバージョン７．０２のソフトウェアにおいて、データに対して非線形回帰曲線を適合した。ＩＣ５０およびＡｍａｘ値を、得られた曲線から外挿した。
結果
目的のＣＤ４８標的を発現する代表的ながん細胞系の用量応答曲線は、図２３Ａおよび２３Ｂに示す。細胞成長または生存を５０％阻害するのに必要な処置の濃度（ＩＣ５０）を、表３５～３７に概説する試験した細胞系の代表的なＩＣ５０値で計算した。
Figure 2022532918000693
Figure 2022532918000694
Figure 2022532918000695
[実施例２０]
がん細胞系のパネルでのｉｎ ｖｉｔｒｏでのＡＤＣ活性の評価
以下の化合物を本実施例において使用した：ＣＤ３３＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＣＬＬ１＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＦＬＴ３＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ｃＫＩＴ＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＣＤ１２３＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＢＣＭＡ＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＣＤ１３８＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＣＤ３８＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＣＤ４８＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、ＳＬＡＭＦ７＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、アイソタイプＩｇＧ１＿ＣｙｓｍＡｂ－Ｌ７－Ｐ１、および遊離ペイロードＰ１。本実施例で使用される抗ＣＤ３３抗体は、ゲムツズマブである。本実施例で使用される抗ＣＬＬ１抗体は、国際公開第２０１６／２０５２００号パンフレットに記載のｍ６Ｅ７である。本実施例で使用される抗ｃＫＩＴ抗体は、国際公開第２０１４／１５０９３７号パンフレットに記載される。本実施例で使用されるＣＤ１２３抗体は、タラコツズマブとしても公知のＣＳＬ３６２である。本実施例で使用される抗ＢＣＭＡ抗体は、ベランタマブとしても公知のＪ６Ｍ０である。本実施例で使用される抗ＣＤ１３８抗体は、インダツキシマブ（indatuximab）である。本実施例で使用される抗ＣＤ３８抗体は、ダラツムマブである。本実施例で使用される抗ＣＤ４８抗体は、米国特許公開第２０１８００９２９８４号明細書に記載のヒト化ＭＥＭ１０２（ｈＭＥＭ１０２）である。本実施例で使用される抗ＳＬＡＭＦ７抗体は、アジンツキシズマブ（azintuxizumab）である。これらの抗体の各々を、ＣｙｓｍＡｂ突然変異で操作して、上記で示したリンカー－ペイロードとのコンジュゲーションを促進した。ＡＤＣは、実施例４に記載の方法を介して合成した。
抗体薬物コンジュゲートを、ＡＴＣＣ（アメリカンタイプカルチャーコレクション）から得られるがん細胞系、または親異種移植片モデル由来の細胞系に対して試験した。細胞を、組織培養インキュベーターにおいて５％のＣＯ２、３７℃でそれらの成長に最適な培地で培養した。増殖アッセイのために播種する前に、細胞を、アッセイの少なくとも２日前に分けて、最適な成長密度を確実にした。播種の日に、細胞を、０．２５％のトリプシンを使用して組織培養フラスコから外した。細胞生存率および細胞密度を、細胞計数器（Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ生死細胞アナライザー、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して決定した。８５％超の生存率の細胞を、白色の透明底の３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、カタログ番号７８１０９８）に、５０μＬの標準的な成長培地において１ウェル当たり１，０００個の細胞の密度で播種した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて３７℃で終夜インキュベートした。
ＡＤＣを、所望の濃度まで標準的なリン酸塩緩衝液で調製した。一連の１０希釈を、各ＡＤＣに対して行った。次いで、調製した薬物処置を細胞に加え、０．０００００５～３００ｎＭの最終濃度とした。音響移動デバイス（Ｅｃｈｏ５５５、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して、細胞にＡＤＣを加えた。各処置を、三重アッセイプレートで試験した。プレートを、組織培養インキュベーターにおいて３７℃で終夜または５日間インキュベートした。ＡＤＣの細胞増殖および生存を阻害する能力を、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）増殖アッセイを使用して評価した。プレートを、室温で２０分間インキュベートして発光シグナルを安定化した後、マルチモードプレートリーダー（Ｐｈｅｒａｓｔａｒ、ＢＭＧ）を使用して読み取った。未処置細胞の発光計数を、播種の後の日（０日目の読取り）および処置の５日後（５日目の読取り）に行った。未処置細胞の５日目の読取りを、０日目の読取りと比較した。インキュベーション期間に少なくとも１つの細胞倍増でのアッセイは、有効だと考えられた。薬物処置の効果を評価するために、未処置細胞（１００％の生存率）を含有するウェル由来の発光計数を使用して、処置した試料を正規化した。細胞成長または生存を５０％阻害するのに必要な処置の濃度（ＧＩ５０）を、４パラメーターロジスティック回帰方程式を使用して計算した（表３８および３９）。
Figure 2022532918000696
Figure 2022532918000697
Figure 2022532918000698

Claims (91)

  1. 式（１）：
    Ａｂ－（Ｌ－Ｄ）ｐ（１）
    （式中、Ａｂは、抗体またはその抗原結合性断片であり、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤であり、
    Ｌは、ＡｂをＤに共有結合するリンカーであり、
    ｐは、１～１６の整数である）
    の抗体－薬物コンジュゲート。
  2. ｐが、１～６もしくは２～４の整数であり、またはｐが、２もしくは４であり、あるいはｐが、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により決定される、請求項１に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  3. Ｌが、
    結合基と、
    少なくとも１つの架橋スペーサー基と、
    少なくとも１つの切断可能な基、必要に応じてピロリン酸基および／または自壊性基を含む少なくとも１つの切断可能な基と
    を含む、請求項１または２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  4. －（Ｌ－Ｄ）が、式（Ａ）：
    Figure 2022532918000699
     （式中、
    Ｒ１は結合基であり、
    Ｌ１は架橋スペーサー基であり、
    Ｅは切断可能な基である）
    のものである、請求項３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  5. 前記切断可能な基がピロリン酸基を含み、または前記切断可能な基が
    Figure 2022532918000700
     を含む、請求項３または４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  6. 前記架橋スペーサー基が、
    （ｉ）ポリオキシエチレン（ＰＥＧ）基；
    （ｉｉ）ＰＥＧ１、ＰＥＧ２、ＰＥＧ３、ＰＥＧ４、ＰＥＧ５、ＰＥＧ６、ＰＥＧ７、ＰＥＧ８、ＰＥＧ９、ＰＥＧ１０、ＰＥＧ１１、ＰＥＧ１２、ＰＥＧ１３、ＰＥＧ１４およびＰＥＧ１５から選択されるＰＥＧ基；
    （ｉｉｉ）－ＣＯ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２－基；
    （ｉｖ）ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ヘプタノイルもしくはオクタノイル基；または
    （ｖ）ヘキサノイル基
    を含む、請求項３または４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  7. （ｉ）前記結合基が、マレイミド基、チオール基、シクロオクチン基およびアジド基から選択される少なくとも１つの反応性基から形成されており、必要に応じて、ここで、
    ａ）前記マレイミド基は構造：
    Figure 2022532918000701
     を有し、
    ｂ）前記アジド基は構造：－Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ－を有し、
    ｃ）前記シクロオクチン基は構造：
    Figure 2022532918000702
     を有し、ここで、
    Figure 2022532918000703
     は、前記抗体との結合であり、または
    ｄ）前記シクロオクチン基は構造：
    Figure 2022532918000704
     を有し、
    ここで、
    Figure 2022532918000705
     は、前記抗体との結合であり、または
    （ｉｉ）前記結合基は、
    Figure 2022532918000706
     を含む式を有し、
    ここで、
    Figure 2022532918000707
     は、前記抗体との結合である、請求項６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  8. 前記抗体が、
    Figure 2022532918000708
     から選択される結合基により前記リンカー（Ｌ）に連結されており、
    ここで、
    Figure 2022532918000709
     は、前記抗体との結合であり、ここで、
    Figure 2022532918000710
     は、前記架橋スペーサー基との結合である、請求項７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  9. 前記架橋スペーサー基が－ＣＯ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２－である、請求項８に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  10. 前記架橋スペーサー基が、切断可能な基に連結されており、必要に応じて前記切断可能な基は－ピロリン酸－ＣＨ２－ＣＨ２－ＮＨ２－である、請求項８または９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  11. 前記切断可能な基が、前記Ｍｃｌ－１阻害剤（Ｄ）に連結されており、または前記切断可能な基が、フェニル－ピリミジニル基を介して前記Ｍｃｌ－１阻害剤（Ｄ）に連結されている、請求項８から１０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  12. 前記リンカーが、
    結合基と、
    少なくとも１つの架橋スペーサー基と、
    ペプチド基と、
    少なくとも１つの切断可能な基と
    を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  13. －（Ｌ－Ｄ）が、式（Ｂ）：
    Figure 2022532918000711
     （式中、
    Ｒ１は結合基であり、
    Ｌ１は架橋スペーサーであり、
    Ｌｐは、１～６個のアミノ酸残基を含むペプチド基であり、またはＬｐは、
    Figure 2022532918000712
     基を含み、
    Ｅは切断可能な基であり、
    Ｌ２は架橋スペーサーであり、
    ｍは、０または１であり、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    のものである、請求項１２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  14. （ｉ）前記結合基が、マレイミド基、チオール基、シクロオクチン基および／またはアジド基を含む少なくとも１つの反応性基から形成されており、必要に応じて、ここで、
    ａ）前記マレイミド基は構造：
    Figure 2022532918000713
     を有し、
    ｂ）前記アジド基は構造：－Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ－を有し、
    ｃ）前記シクロオクチン基は構造：
    Figure 2022532918000714
     を有し、ここで、
    Figure 2022532918000715
     は、前記抗体との結合であり、または
    ｄ）前記シクロオクチン基は構造：
    Figure 2022532918000716
     を有し、
    ここで、
    Figure 2022532918000717
     は、前記抗体との結合であり、または
    （ｉｉ）前記結合基は、
    Figure 2022532918000718
     を含む式を有し、
    ここで、
    Figure 2022532918000719
     は、前記抗体との結合である、請求項１２または１３に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  15. （ｉ）少なくとも１つの架橋スペーサーがＰＥＧ基を含み、必要に応じて前記ＰＥＧ基は、ＰＥＧ１、ＰＥＧ２、ＰＥＧ３、ＰＥＧ４、ＰＥＧ５、ＰＥＧ６、ＰＥＧ７、ＰＥＧ８、ＰＥＧ９、ＰＥＧ１０、ＰＥＧ１１、ＰＥＧ１２、ＰＥＧ１３、ＰＥＧ１４およびＰＥＧ１５から選択され、または
    （ｉｉ）少なくとも１つの架橋スペーサーが、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＰＥＧ３－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２＊＊、＊－ＮＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊、ポリヒドロキシアルキル基および＊－Ｃ（Ｏ）－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｎ（ＣＨ３）－Ｃ（Ｏ）－＊＊（式中、＊＊は、前記結合基との前記少なくとも１つの架橋スペーサーの直接結合点または間接結合点を示し、＊は、前記ペプチド基との前記少なくとも１つの架橋スペーサーの直接結合点または間接結合点を示す）
    から選択される、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  16. Ｌ１が、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＰＥＧ３－＊＊、＊－Ｃ（Ｏ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１２＊＊、＊－ＮＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＰＥＧ１－＊＊およびポリヒドロキシアルキル基（式中、＊＊は、Ｒ１とのＬ１の直接結合点または間接結合点を示し、＊は、ＬｐとのＬ１の直接結合点または間接結合点を示す）から選択される、請求項１２から１５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  17. ｍが１であり、Ｌ２が－Ｃ（Ｏ）－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ２－ＣＨ２－Ｎ（ＣＨ３）－Ｃ（Ｏ）－である、請求項１２から１６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  18. （ｉ）前記ペプチド基が、１～６個、１～４個、１～３個または１～２個のアミノ酸残基を含み、必要に応じて前記アミノ酸残基は、Ｌ－グリシン（Ｇｌｙ）、Ｌ－バリン（Ｖａｌ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－システイン酸（スルホ－Ａｌａ）、Ｌ－リシン（Ｌｙｓ）、Ｌ－イソロイシン（Ｉｌｅ）、Ｌ－フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、Ｌ－メチオニン（Ｍｅｔ）、Ｌ－アスパラギン（Ａｓｎ）、Ｌ－プロリン（Ｐｒｏ）、Ｌ－アラニン（Ａｌａ）、Ｌ－ロイシン（Ｌｅｕ）、Ｌ－トリプトファン（Ｔｒｐ）およびＬ－チロシン（Ｔｙｒ）から選択され、
    （ｉｉ）前記ペプチド基が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｌｙｓおよび／またはスルホ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａを含み、
    （ｉｉｉ）前記ペプチド基が、
    Figure 2022532918000720
     から選択される、請求項１２から１７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  19. （ｉ）前記切断可能な基が、ピロリン酸基および／もしくは自壊性基を含み、（ｉｉ）前記切断可能な基が自壊性基を含み、または（ｉｉｉ）前記切断可能な基が、パラ－アミノベンジル－カルバメート、パラ－アミノベンジル－アンモニウム、パラ－アミノ－（スルホ）ベンジル－アンモニウム、パラ－アミノ－（スルホ）ベンジル－カルバメート、パラ－アミノ－（アルコキシ－ＰＥＧ－アルキル）ベンジル－カルバメート、パラ－アミノ－（ポリヒドロキシカルボキシテトラヒドロピラニル）アルキル－ベンジル－カルバメートもしくはパラ－アミノ－（ポリヒドロキシカルボキシテトラヒドロピラニル）アルキル－ベンジル－アンモニウムを含む自壊性基を含む、請求項１２から１８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  20. ｍが、０または１であり、またはｍが１であり、前記架橋スペーサーが、
    Figure 2022532918000721
     を含む、請求項１３から１９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  21. －（Ｌ－Ｄ）が、
    Figure 2022532918000722
    Figure 2022532918000723
    Figure 2022532918000724
    Figure 2022532918000725
     から選択される化合物から形成されている、請求項１３から２０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  22. －（Ｌ－Ｄ）が、
    Figure 2022532918000726
    Figure 2022532918000727
    Figure 2022532918000728
    Figure 2022532918000729
    Figure 2022532918000730
     から選択される式を含み、
    ここで、
    Figure 2022532918000731
     は、前記抗体との結合である、請求項１３から２１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  23. －（Ｌ－Ｄ）が、式（Ｃ）：
    Figure 2022532918000732
     （式中、
    Ｒ１は結合基であり、
    Ｌ１は架橋スペーサーであり、
    Ｌｐは、１～６個のアミノ酸を含むペプチド基であり、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤であり、
    Ｇ１－Ｌ２－Ａは自壊性スペーサーであり、
    Ｌ２は、結合、メチレン、ネオペンチレンまたはＣ２～Ｃ３アルケニレンであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000733
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    Ｌ３はスペーサー部分であり、
    Ｒ２は親水性部分である）
    のものである、請求項１または２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  24. －（Ｌ－Ｄ）が、式（Ｄ）：
    Figure 2022532918000734
     （式中、
    Ｒ１は結合基であり、
    Ｌ１は架橋スペーサーであり、
    Ｌｐは、１～６個のアミノ酸を含むペプチド基であり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000735
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    Ｌ３はスペーサー部分であり、
    Ｒ２は親水性部分である）
    のものである、請求項２３に記載の抗体－薬物コンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩。
  25. （１）Ｌ１が、
    Figure 2022532918000736
     または＊－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）－＊＊を含み、
    ここで、各ｎは、１～１２の整数であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示し、
    （２）Ｌ１が、
    Figure 2022532918000737
     であり、ｎが、１～１２の整数であり、またはｎが１であり、またはｎが１２であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示し、
    （３）Ｌ１が、
    Figure 2022532918000738
     であり、ｎが、１～１２の整数であり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示し、
    （４）Ｌ１が、
    Figure 2022532918000739
     を含み、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示し、
    （５）Ｌ１が、＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＯ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＳＳＣ（Ｒ３）２（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＲ３（ＣＨ２）ｍＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＸ１（ＣＨ２）ｍ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｎＸ１（ＣＨ２）ｎ－＊＊；
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（（ＣＨ２）ｍＯ）ｔ（ＣＨ２）ｎＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊；＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（Ｒ３）２－＊＊または
    ＊－Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）ｍ－＊＊を含む架橋スペーサーであり、ここで、Ｌ１の＊は、Ｌｐとの直接結合点または間接結合点を示し、Ｌ１の＊＊は、Ｒ１との直接結合点または間接結合点を示し、
    Ｘ１は、
    Figure 2022532918000740
     であり、
    各ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から独立して選択され、
    各ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０から独立して選択され、
    各ｔは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９および３０から独立して選択され、
    各Ｒ３は、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択される、請求項２３または２４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  26. Ｒ２が、ポリエチレングリコール、ポリアルキレングリコール、ポリオール、ポリサルコシン、糖、オリゴ糖、ポリペプチド、または１～３個の
    Figure 2022532918000741
     基で置換されたＣ２～Ｃ６アルキルを含む親水性部分である、請求項２３から２５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  27. Ｒ２が、
    Figure 2022532918000742
     （式中、ｎは、１～６の間の整数である）、
    Figure 2022532918000743
     である、請求項２３から２６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  28. 前記親水性部分が、
    （ｉ）ポリサルコシン、例えば、以下の部分：
    Figure 2022532918000744
     （式中、ｎは、３～２５の間の整数であり、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである）を含むポリサルコシン、または
    （ｉｉ）式：
    Figure 2022532918000745
     のポリエチレングリコール、または以下の式：
    （式中、Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲａ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒａまたは－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａであり、Ｒ’は、ＯＨ、－ＯＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲａ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒａまたは－ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲａであり、ここで、Ｒａは、ＨまたはＯＨもしくはＣ１～４アルコキシルのいずれかで必要に応じて置換されたＣ１～４アルキルであり、ｍおよびｎのそれぞれは、独立して２～２５の間の整数である）により表される部分
    を含む、請求項２３または２４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  29. 前記親水性部分が、
    Figure 2022532918000746
     を含む、請求項２３から２７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  30. （ｉ）Ｌ３が、構造
    Figure 2022532918000747
     （式中、
    Ｗは、－ＣＨ２－、－ＣＨ２Ｏ－、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、
    －ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
    －Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、－ＮＨＳ（Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、
    Ｘは、結合、トリアゾリルまたは－ＣＨ２－トリアゾリル－である）
    を有するスペーサー部分であり、または
    （ｉｉ）Ｌ３が、構造
    Figure 2022532918000748
     （式中、
    Ｗは、－ＣＨ２－、－ＣＨ２Ｏ－、－ＣＨ２Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、
    －ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｃ（Ｒｂ）２ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｘ－Ｒ２）－、
    －ＣＨ２Ｎ（Ｘ－Ｒ２）Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）－、－ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
    －ＣＨ２ＮＲｂＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、
    －Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、－ＮＨＳ（Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－または－ＮＨ－であり、ここで、各Ｒｂは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、
    Ｘは、－ＣＨ２－トリアゾリル－Ｃ１～４アルキレン－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－、－Ｃ４～６シクロアルキレン－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－、－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－または－ＣＨ２－トリアゾリル－Ｃ１～４アルキレン－ＯＣ（Ｏ）ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－であり、ここで、各ｎは独立して、１、２または３である）
    を有するスペーサー部分である、請求項２３から２９のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  31. 前記結合基が、少なくとも１つの反応性基を含む反応により形成される、請求項３から３０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  32. 前記結合基が、
    前記リンカーに結合されている第１の反応性基と、
    前記抗体に結合されているか、または前記抗体のアミノ酸残基である第２の反応性基と
    を反応させることにより形成され、ここで、必要に応じて、
    （ｉ）前記反応性基のうちの少なくとも１つは、
    チオール、
    マレイミド、
    ハロアセトアミド、
    アジド、
    アルキン、
    シクロオクテン、
    トリアリールホスフィン、
    オキサノルボルナジエン、
    シクロオクチン、
    ジアリールテトラジン、
    モノアリールテトラジン、
    ノルボルネン、
    アルデヒド、
    ヒドロキシルアミン、
    ヒドラジン、
    ＮＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、
    ケトン、
    ビニルスルホン、
    アジリジン、
    アミノ酸残基、
    Figure 2022532918000749
     、－ＯＮＨ２、－ＮＨ２、
    Figure 2022532918000750
     、－Ｎ３、
    Figure 2022532918000751
     、－ＳＨ、－ＳＲ３、－ＳＳＲ４、－Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－（ＣＨ２）２Ｓ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＳ（＝Ｏ）２（ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｉ、
    Figure 2022532918000752
     、－Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、
    Figure 2022532918000753
    Figure 2022532918000754
     を含み、
    ここで、
    各Ｒ３は、ＨおよびＣ１～Ｃ６アルキルから独立して選択され、
    各Ｒ４は、２－ピリジルまたは４－ピリジルであり、
    各Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌおよび－ＯＨから独立して選択され、
    各Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｆ、Ｃｌ、－ＮＨ２、－ＯＣＨ３、－ＯＣＨ２ＣＨ３、－Ｎ（ＣＨ３）２、－ＣＮ、－ＮＯ２および－ＯＨから独立して選択され、
    各Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシおよび－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択され、かつ／または
    （ｉｉ）前記第１の反応性基および第２の反応性基は、
    チオールおよびマレイミド、
    チオールおよびハロアセトアミド、
    チオールおよびビニルスルホン、
    チオールおよびアジリジン、
    アジドおよびアルキン、
    アジドおよびシクロオクチン、
    アジドおよびシクロオクテン、
    アジドおよびトリアリールホスフィン、
    アジドおよびオキサノルボルナジエン、
    ジアリールテトラジンおよびシクロオクテン、
    モノアリールテトラジンおよびノルボルネン、
    アルデヒドおよびヒドロキシルアミン、
    アルデヒドおよびヒドラジン、
    アルデヒドおよびＮＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、
    ケトンおよびヒドロキシルアミン、
    ケトンおよびヒドラジン、
    ケトンおよびＮＨ２－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、
    ヒドロキシルアミンおよび
    Figure 2022532918000755
     、
    アミンおよび
    Figure 2022532918000756
     、または
    ＣｏＡもしくはＣｏＡ類似体およびセリン残基
    を含む、請求項３から３１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  33. 前記結合基が、
    Figure 2022532918000757
    Figure 2022532918000758
    Figure 2022532918000759
    Figure 2022532918000760
     から選択される基を含み、
    ここで、
    Ｒ３２は、Ｈ、Ｃ１～４アルキル、フェニル、ピリミジンまたはピリジンであり、
    Ｒ３５は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フェニル、または１～３個の－ＯＨ基で置換されたＣ１～４アルキルであり、
    各Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１～６アルキル、フルオロ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジルオキシ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたベンジル、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルコキシおよび－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されたＣ１～４アルキルから独立して選択され、
    Ｒ３７は、Ｈ、フェニルおよびピリジンから独立して選択され、
    ｑは、０、１、２または３であり、
    Ｒ８は、Ｈまたはメチルであり、
    Ｒ９は、Ｈ、－ＣＨ３またはフェニルである、請求項３から３２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  34. 前記ペプチド基が、１～４個または１～３個または１個もしくは２個のアミノ酸残基を含み、必要に応じて前記アミノ酸残基は、Ｌ－グリシン（Ｇｌｙ）、Ｌ－バリン（Ｖａｌ）、Ｌ－シトルリン（Ｃｉｔ）、Ｌ－システイン酸（スルホ－Ａｌａ）、Ｌ－リシン（Ｌｙｓ）、Ｌ－イソロイシン（Ｉｌｅ）、Ｌ－フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、Ｌ－メチオニン（Ｍｅｔ）、Ｌ－アスパラギン（Ａｓｎ）、Ｌ－プロリン（Ｐｒｏ）、Ｌ－アラニン（Ａｌａ）、Ｌ－ロイシン（Ｌｅｕ）、Ｌ－トリプトファン（Ｔｒｐ）およびＬ－チロシン（Ｔｙｒ）から選択される、請求項２３から３３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  35. 前記ペプチド基が、Ｖａｌ－Ｃｉｔ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓ、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｖａｌ－Ｌｙｓ、Ｌｅｕ－Ｃｉｔ、スルホ－Ａｌａ－Ｖａｌおよび／またはスルホ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ａｌａを含む、請求項２３から３３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  36. Ｌｐが、
    Figure 2022532918000761
     から選択される、請求項２３から３５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  37. －（Ｌ－Ｄ）が、式：
    （１）
    Figure 2022532918000762
     （式中、
    Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000763
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （２）
    Figure 2022532918000764
     （式中、
    Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000765
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （３）
    Figure 2022532918000766
     （式中、
    Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000767
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （４）
    Figure 2022532918000768
     （式中、
    各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３および－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択され、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000769
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （５）
    Figure 2022532918000770
     （式中、
    各Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３および－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨから独立して選択され、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000771
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （６）
    Figure 2022532918000772
     （式中、
    Ｘａは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは独立して、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000773
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （７）
    Figure 2022532918000774
     （式中、
    Ｒは、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000775
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （８）
    Figure 2022532918000776
     （式中、
    Ｘｂは、－ＣＨ２－、－ＯＣＨ２－、－ＮＨＣＨ２－または－ＮＲＣＨ２－であり、各Ｒは独立して、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000777
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （９）
    Figure 2022532918000778
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000779
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （１０）
    Figure 2022532918000780
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000781
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （１１）
    Figure 2022532918000782
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000783
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （１２）
    Figure 2022532918000784
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000785
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （１３）
    Figure 2022532918000786
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000787
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （１４）
    Figure 2022532918000788
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000789
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    （１５）
    Figure 2022532918000790
     （式中、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000791
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）、または
    （１６）
    Figure 2022532918000792
     （式中、
    各Ｒは独立して、Ｈ、－ＣＨ３または－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＨであり、
    Ａは、結合、－ＯＣ（＝Ｏ）－＊、
    Figure 2022532918000793
     、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊または－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（Ｒａ）２Ｃ（Ｒａ）２Ｎ（ＣＨ３）Ｃ（＝Ｏ）－＊であり、
    ここで、各Ｒａは、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルおよびＣ３～Ｃ８シクロアルキルから独立して選択され、Ａの＊は、Ｄとの結合点を示し、
    ＤはＭｃｌ－１阻害剤である）
    の化合物を含むか、またはそれから形成されている、請求項２３から３６のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  38. Ａが結合であり、かつ／またはＲが－ＣＨ３である、請求項２３から３７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  39. Ｄが、式（Ｉ）：
    Figure 2022532918000794
     （式中、
    環Ｄ０は、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、
    環Ｅ０は、フリル、チエニルまたはピロリル環であり、
    Ｘ０１、Ｘ０３、Ｘ０４およびＸ０５は互いに独立して、炭素原子または窒素原子であり、
    Ｘ０２は、Ｃ－Ｒ０２６基または窒素原子であり、
    Figure 2022532918000795
     は、前記環が芳香族であることを意味し、
    Ｙ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０３基であり、
    Ｚ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０４基であり、
    Ｒ０１は、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル基、ヒドロキシ基、ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－Ｃｙ０８、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
    Ｒ０２、Ｒ０３、Ｒ０４およびＲ０５は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、
    －（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
    －Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０３１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
    あるいは対（Ｒ０１、Ｒ０２）、（Ｒ０２、Ｒ０３）、（Ｒ０３、Ｒ０４）または（Ｒ０４、Ｒ０５）は、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記得られた環は、ハロゲン、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１またはオキソから選択される１個もしくは２個の基で必要に応じて置換されており、
    Ｒ０６およびＲ０７は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
    －Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、
    －（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、
    －Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、
    －（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
    あるいは対（Ｒ０６、Ｒ０７）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記得られた環は、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１またはオキソで必要に応じて置換されており、
    Ｗ０は、－ＣＨ２－基、－ＮＨ－基または酸素原子であり、
    Ｒ０８は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、－ＣＨＲ０ａＲ０ｂ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０９は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、－Ｃｙ０２、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－Ｃｙ０３、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｏ－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０３、ハロゲン原子、シアノ基、－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１４または－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１４Ｒ０１４’であり、
    Ｒ０１０は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、アリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、（Ｃ１～Ｃ６）シクロアルキルアルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキルまたは－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｏ－Ｃｙ０４であり、
    あるいは対（Ｒ０９、Ｒ０１０）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、
    Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
    あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、前記窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記Ｎ原子は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基から選択される１個または２個の基で置換されてよく、ここで、前記線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されており、
    Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－Ｃｙ０６－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０７、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、
    －ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ０１１、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＯＲ０１１、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＯＲ０１１、－ＳＯ２－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１であり、
    Ｒ０１３、Ｒ０１３’、Ｒ０１４およびＲ０１４’は互いに独立して、水素原子、または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０ａは、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０ｂは、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－Ｒ０ｃ基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０ｃＲ０ｃ’基または－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０ｃ）２基であり、
    Ｒ０ｃおよびＲ０ｃ’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、シクロアルキル基、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシカルボニル（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    あるいは対（Ｒ０ｃ、Ｒ０ｃ’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員から構成される非芳香族環を形成し、これは、前記窒素原子に加えて、酸素および窒素から選択される１～３個のヘテロ原子を含んでよく、ここで、前記窒素は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
    Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０は互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
    Ｃｙ０９は
    Figure 2022532918000796
     であり、
    またはＣｙ０９は、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル；および－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’から選択される基で置換されているヘテロアリール基であり、
    Ｒ０１５は、水素原子；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基；または－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基であり、
    Ｒ０１６は、水素原子；ヒドロキシ基；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基；（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－Ｖ０－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２基；－Ｏ－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ０２０基；－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ０２０基；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０２２Ｒ０２３基；または－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基であり、
    Ｒ０１７は、水素原子；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０基；－ＣＨ２－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２基；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２基；ヒドロキシ基；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル基；－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’基；またはアルドン酸であり、
    Ｍ＋は、薬学的に許容される一価カチオンであり、
    Ｕ０は、結合または酸素原子であり、
    Ｖ０は、－（ＣＨ２）ｓ０－基または－Ｃ（Ｏ）－基であり、
    Ｒ０１８は、水素原子または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０１９は、水素原子またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０２０は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０２１およびＲ０２１’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    あるいは対（Ｒ０２１、Ｒ０２１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、前記窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記得られた環は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
    Ｒ０２２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－（ＣＨ２）ｐ０－ＮＲ０２４Ｒ０２４’基または－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ２０基であり、
    Ｒ０２３は、水素原子または（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    あるいは対（Ｒ０２２、Ｒ０２３）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～１８個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、前記窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～５個のヘテロ原子を含み、ここで、前記得られた環は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロシクロアルキル基で必要に応じて置換されており、
    Ｒ０２４およびＲ０２４’は互いに独立して、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    あるいは対（Ｒ０２４、Ｒ０２４’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員から構成される芳香族または非芳香族環を形成し、これは、前記窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含んでよく、ここで、前記得られた環は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、
    Ｒ０２５は、水素原子、ヒドロキシ基またはヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０２６は、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、またはシアノ基であり、
    Ｒ０２７は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０２８は、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）（Ｏ－）基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）（ＯＲ０３０）基、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０３０）（ＯＲ０３０’）基、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－基、－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－Ｏ－基、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０基、－Ｃｙ０１０、－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０２９基、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０２９基または－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０２９Ｒ０２９’基であり、
    Ｒ０２９およびＲ０２９’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基または線状もしくは分枝状アミノ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０３０およびＲ０３０’は互いに独立して、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０３１は
    Figure 2022532918000797
     であり、ここで、前記アンモニウムは必要に応じて、双性イオン型として存在するか、または一価のアニオン性対イオンを有し、
    ｎ０は、０または１に等しい整数であり、
    ｐ０は、０、１、２または３に等しい整数であり、
    ｑ０は、１、２、３または４に等しい整数であり、
    ｒ０およびｓ０は、独立して０または１に等しい整数であり、
    ここで、最大で、前記Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、前記リンカーに共有結合されており、
    ここで、原子の価数を、それに結合された１個または複数の置換基が超えない）
    の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、請求項１から３８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  40. Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０４、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７、Ｃｙ０８およびＣｙ０１０が、互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、ハロ；－（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ；－（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル；－（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ；－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－ＯＲ０３０；－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｏ－Ｍ＋）２；－ＣＨ２－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ０２０）２；
    －（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－（ＣＨＲ０１８－ＣＨＲ０１９－Ｏ）ｑ０－Ｒ０２０；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル；－（ＣＨ２）ｒ０－Ｕ０－（ＣＨ２）ｓ０－ヘテロシクロアルキル；または－Ｕ０－（ＣＨ２）ｑ０－ＮＲ０２１Ｒ０２１’から選択される１個または複数の基で必要に応じて置換されている、請求項３９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  41. Ｄが、式（ＩＩ）：
    Figure 2022532918000798
     （式中、
    Ｚ０は、窒素原子またはＣ－Ｒ０４基であり、
    Ｒ０１は、ハロゲン原子、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル基、ヒドロキシ基、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、－Ｃｙ０８、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’であり、
    Ｒ０２、Ｒ０３およびＲ０４は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０３１、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または－ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
    あるいは対（Ｒ０２、Ｒ０３）または（Ｒ０３、Ｒ０４）は、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記環は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１およびオキソから選択される基で必要に応じて置換されており、
    Ｒ０６およびＲ０７は互いに独立して、水素原子、ハロゲン原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ヒドロキシ基、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ基、－Ｓ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、シアノ基、ニトロ基、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、
    －Ｏ－Ｃｙ０１、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０１、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０１、
    －Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｒ０１２、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１’、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－ＳＯ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、または
    －ＳＯ２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり、
    あるいは対（Ｒ０６、Ｒ０７）は、２個の隣接する炭素原子と縮合されたとき、それらが結合している炭素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記得られた環は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、－ＮＲ０１３Ｒ０１３’、－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１およびオキソから選択される基で必要に応じて置換されており、
    Ｒ０８は、水素原子、線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ８）アルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリール－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基またはヘテロアリール（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０９は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル基、線状または分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基、－Ｃｙ０２、－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル－Ｃｙ０２、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－Ｃｙ０３、－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル－Ｏ－Ｃｙ０２、－Ｃｙ０２－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０３、ハロゲン原子、シアノ基、－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１４、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１４Ｒ０１４’であり、
    Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
    あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、前記窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記Ｎ原子は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基で必要に応じて置換されており、ここで、前記線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の炭素原子のうちの１個または複数は、必要に応じて重水素化されており、
    Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６、－Ｃｙ０５－Ｃｙ０６－Ｏ－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０７、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９、－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－Ｒ０１１、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＮＲ０１１Ｒ０１１’、－ＯＲ０１１、－ＮＲ０１１－Ｃ（Ｏ）－Ｒ０１１’、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＯＲ０１１、－ＳＯ２－Ｒ０１１、または－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ０１１であり、
    Ｒ０１３、Ｒ０１３’、Ｒ０１４およびＲ０１４’は互いに独立して、水素原子、または必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０３、Ｃｙ０５、Ｃｙ０６、Ｃｙ０７およびＣｙ０８は互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
    Ｃｙ０９は
    Figure 2022532918000799
     であり、
    ここで、Ｒ０１５、Ｒ０１６およびＲ０１７は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
    Ｒ０３１は
    Figure 2022532918000800
     であり、ここで、Ｒ０２７およびＲ０２８は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
    ここで、最大で、前記Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、前記リンカーに共有結合されている）
    の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、請求項１から４０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  42. Ｄが、式（ＩＩＩ）：
    Figure 2022532918000801
     （式中、
    Ｒ０１は、線状または分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基であり、
    Ｒ０３は、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル－ＮＲ０１１Ｒ０１１’または
    Figure 2022532918000802
     であり、
    ここで、Ｒ０１１およびＲ０１１’は互いに独立して、水素原子、必要に応じて置換された線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基、または－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０１であり、
    あるいは対（Ｒ０１１、Ｒ０１１’）は、それらが結合している窒素原子と一緒に、５～７個の環員を含む芳香族または非芳香族環を形成し、これは必要に応じて、前記窒素原子に加えて、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、ここで、前記Ｎ原子は、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基から選択される１個または２個の基で置換されてよく、
    ここで、Ｒ０２７は水素原子であり、Ｒ０２８は、－（ＣＨ２）ｐ０－Ｏ－ＳＯ２－Ｏ－基または－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基であり、
    Ｒ０９は、線状もしくは分枝状（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル基または－Ｃｙ０２であり、
    Ｒ０１２は、－Ｃｙ０５、－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０６または－Ｃｙ０５－（Ｃ０～Ｃ６）アルキル－Ｃｙ０９であり、
    Ｃｙ０１、Ｃｙ０２、Ｃｙ０５およびＣｙ０６は互いに独立して、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、アリール基またはヘテロアリール基であり、それらのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
    Ｃｙ０９は
    Figure 2022532918000803
     であり、
    Ｒ０１５、Ｒ０１６およびＲ０１７は、式（Ｉ）のために定義した通りであり、
    ここで、最大で、前記Ｒ０３基、Ｒ０９基またはＲ０１２基のうちの１つは、存在する場合、前記リンカーに共有結合されている）
    の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、請求項１から４１のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  43. Ｒ０１が、メチルまたはエチルである、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  44. Ｒ０３が－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＮＲ０１１Ｒ０１１’（式中、Ｒ０１１およびＲ０１１’は、それらを保持している窒素原子と一緒に、水素原子または線状もしくは分枝状（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基）である基で置換されてよいピペラジニル基を形成する）である、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  45. Ｒ０３が、式：
    Figure 2022532918000804
     （式中、Ｒ０２７は水素原子であり、Ｒ０２８は－（ＣＨ２）ｐ０－ＳＯ２－ＯＲ０３０基である）
    を含む、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  46. Ｒ０３が、式：
    Figure 2022532918000805
     （式中、
    Figure 2022532918000806
     は、前記リンカーとの結合である）
    を含む、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  47. Ｒ０９がＣｙ０２である、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  48. Ｃｙ０２が、必要に応じて置換されたアリール基である、請求項４７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  49. Ｃｙ０５が、ピラゾリル基およびピリミジニル基から選択されるヘテロアリール基を含む、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  50. Ｃｙ０５がピリミジニル基である、請求項４２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  51. 前記Ｌが、Ｌから式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のＲ０３までの共有結合によりＤに結合されており、かつ／または前記Ｌが、Ｌから式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のＲ０９までの共有結合によりＤに結合されている、請求項１から５０のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  52. （１）Ｄが、
    Figure 2022532918000807
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （２）Ｄが、
    Figure 2022532918000808
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （３）Ｄが、
    Figure 2022532918000809
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （４）Ｄが、
    Figure 2022532918000810
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （５）Ｄが、
    Figure 2022532918000811
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （６）Ｄが、
    Figure 2022532918000812
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （７）Ｄが、
    Figure 2022532918000813
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （８）Ｄが、
    Figure 2022532918000814
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （９）Ｄが、
    Figure 2022532918000815
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１０）Ｄが、
    Figure 2022532918000816
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１１）Ｄが、
    Figure 2022532918000817
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１２）Ｄが、
    Figure 2022532918000818
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１３）Ｄが、
    Figure 2022532918000819
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１４）Ｄが、
    Figure 2022532918000820
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１５）Ｄが、
    Figure 2022532918000821
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、
    （１６）Ｄが、
    Figure 2022532918000822
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、あるいは
    （１７）Ｄが、
    Figure 2022532918000823
     もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩を含む、請求項１から４２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  53. －（Ｌ－Ｄ）が、表Ａ中の化合物もしくは鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体、重水素化誘導体、および／または前述のいずれかの薬学的に許容される塩から形成されている、請求項１から４２のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  54. 前記抗体または抗原結合性断片が、がん細胞上の標的抗原に結合する、請求項１から５３のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  55. （ｉ）前記標的抗原が、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６もしくはＧＰＮＭＢである；
    （ｉｉ）前記標的抗原が、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８もしくはＣＤ７９ｂである；または
    （ｉｉｉ）前記標的抗原が、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤもしくはＨＥＲ２である、請求項５４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  56. 前記抗体または抗原結合性断片が、抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合性断片である、請求項１から５５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  57. 前記抗体または抗原結合性断片が、
    （ａ）配列番号１５（ＨＣＤＲ１）、配列番号１６（ＨＣＤＲ２）および配列番号１７（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、
    配列番号１８（ＬＣＤＲ１）、配列番号１９（ＬＣＤＲ２）および配列番号２０（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含む、または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、
    請求項５６に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  58. （ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含み、必要に応じて前記ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、１５２位および３７５位にシステイン残基（Ｃ）を含み、もしくは前記ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、１５６位および３７９位にシステイン残基（Ｃ）を含み、かつ／または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む、
    請求項５６または５７に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  59. 前記抗体または抗原結合性断片が、抗ＣＤ３３抗体または抗原結合性断片である、請求項１から５８のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  60. （ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号２１（ＨＣＤＲ１）、配列番号２２（ＨＣＤＲ２）および配列番号２３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号２４（ＬＣＤＲ１）、配列番号２５（ＬＣＤＲ２）および配列番号２６（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含み、かつ／または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、
    請求項５９に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  61. （ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含み、必要に応じて前記ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、２９７位にグルタミン（Ｑ）を含み、かつ／または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む、
    請求項５９または６０に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  62. 前記抗体または抗原結合性断片が、抗ＰＣＡＤ抗体または抗原結合性断片である、請求項１から５５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  63. （ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号３３（ＨＣＤＲ１）、配列番号３４（ＨＣＤＲ２）および配列番号３５（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号３６（ＬＣＤＲ１）、配列番号３７（ＬＣＤＲ２）および配列番号３８（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含み、かつ／または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、
    請求項６２に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  64. 前記抗体または抗原結合性断片が、抗ＨＥＲ２抗体または抗原結合性断片である、請求項１から５５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  65. （ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号３９（ＨＣＤＲ１）、配列番号４０（ＨＣＤＲ２）および配列番号４１（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）と、配列番号４２（ＬＣＤＲ１）、配列番号４３（ＬＣＤＲ２）および配列番号４４（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含み、かつ／または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、
    請求項６４に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  66. （ａ）前記抗体または抗原結合性断片が、ＩｇＧ１重鎖定常ドメインまたは修飾ＩｇＧ１重鎖定常ドメインを含み、必要に応じて前記ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、２９７位にグルタミン（Ｑ）を含み、もしくは前記ＩｇＧ１重鎖定常ドメインは、２９７位にセリン（Ｓ）を含み、かつ／または
    （ｂ）前記抗体または抗原結合性断片が、Ｉｇカッパ軽鎖定常ドメインを含む、
    請求項６４または６５に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  67. 前記抗体または抗原結合性断片が、抗ＣＤ３８抗体もしくは抗原結合性断片；抗ＣＤ４６抗体もしくは抗原結合性断片；抗ＣＤ４８抗体もしくは抗原結合性断片；または抗ＣＤ７９ｂ抗体もしくは抗原結合性断片である、請求項１から５５のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート。
  68. 請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲートの複数コピーを含む組成物であって、前記組成物中の前記抗体－薬物コンジュゲートの平均ｐが、約２～約１６、例えば、約２～約８、例えば、約２～約４である、組成物。
  69. 請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲートまたは請求項６８に記載の組成物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
  70. がんを有するか、または有することが疑われる対象を治療する方法であって、前記対象に治療有効量の請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項６８に記載の組成物、または請求項６９に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
  71. 前記がんが標的抗原を発現する、請求項７０に記載の方法。
  72. 前記がんが、腫瘍または血液がんであり、必要に応じて、前記がんが、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである、請求項７０または７１に記載の方法。
  73. 対象における腫瘍の増殖を低減または阻害する方法であって、前記対象に治療有効量の請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項６８に記載の組成物、または請求項６９に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
  74. 前記腫瘍が標的抗原を発現する、請求項７３に記載の方法。
  75. 前記腫瘍が、乳がん、胃がん、膀胱がん、脳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、黒色腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである、請求項７３または７４に記載の方法。
  76. 前記抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物の投与が、前記腫瘍の前記増殖を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％または少なくとも約９９％低減または阻害する、請求項７３から７５のいずれか一項に記載の方法。
  77. 対象におけるがん細胞集団の拡大を低減または減速する方法であって、前記対象に治療有効量の請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項６８に記載の組成物、または請求項６９に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
  78. 前記がん細胞集団が標的抗原を発現する、請求項７７に記載の方法。
  79. 前記がん細胞集団が、腫瘍または血液がんに由来し、必要に応じて前記がん細胞集団が、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんに由来する、請求項７７または７８に記載の方法。
  80. 前記抗体－薬物コンジュゲート、組成物または医薬組成物の投与が、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％または少なくとも約９９％前記がん細胞集団を低減するか、または前記がん細胞集団の前記拡大を減速する、請求項７７から７９のいずれか一項に記載の方法。
  81. がんを有するか、または有することが疑われる対象が請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲート、請求項６８に記載の組成物、または請求項６９に記載の医薬組成物での治療に応答するかどうか判定する方法であって、前記対象からの生物学的試料を用意すること；前記試料を前記抗体－薬物コンジュゲートと接触させること；および前記試料中のがん細胞との前記抗体－薬物コンジュゲートの結合を検出することを含む方法。
  82. 前記試料中の前記がん細胞が標的抗原を発現する、請求項８１に記載の方法。
  83. 前記がんが標的抗原を発現する、請求項８１または請求項８２に記載の方法。
  84. 前記がんが、腫瘍または血液がんであり、必要に応じて前記がんが、乳がん、多発性骨髄腫、形質細胞性骨髄腫、白血病、リンパ腫、胃がん、急性骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、骨髄がん、子宮頸がん、慢性リンパ性白血病、結腸直腸がん、食道がん、肝細胞がん、リンパ芽球性白血病、濾胞性リンパ腫、Ｔ細胞もしくはＢ細胞由来のリンパ性悪性腫瘍、黒色腫、骨髄性白血病、骨髄腫、口腔がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、慢性リンパ性白血病、前立腺がん、小細胞肺がんまたは脾臓がんである、請求項８１から８３のいずれか一項に記載の方法。
  85. 前記試料が、組織生検試料、血液試料または骨髄試料である、請求項８２から８４のいずれか一項に記載の方法。
  86. （ｉ）前記標的抗原が、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４８、ＣＤ７９ｂ、ＰＣＡＤ、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ１２３、ＣＬＬ１、ＦＬＴ３、ＣＤ７、ＣＫＩＴ、ＣＤ５６、ＤＬＬ３、ＤＬＫ１、Ｂ７－Ｈ３、ＥＧＦＲ、ＣＤ７１、ＥＰＣＡＭ、ＦＯＬＲ１、ＥＮＰＰ３、ＭＥＴ、ＡＸＬ、ＳＬＣ３４Ａ２、ネクチン４、ＴＲＯＰ２、ＬＩＶ１、ＣＤ４６もしくはＧＰＮＭＢである；（ｉｉ）前記標的抗原が、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＰＣＡＤ、ＨＥＲ２、ＣＤ３８、ＣＤ４６、ＣＤ４８もしくはＣＤ７９ｂである；または（ｉｉｉ）ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＤ４８、ＰＣＡＤもしくはＨＥＲ２、請求項７０から８５のいずれか一項に記載の方法。
  87. 請求項１から６７のいずれか一項に記載の抗体－薬物コンジュゲートを作製する方法であって、コンジュゲーションを可能にする条件下、ＭＣＬ１阻害剤に連結された切断可能なリンカーと抗体または抗原結合性断片を反応させることを含む方法。
  88. それを必要とする前記対象に少なくとも１種の追加の治療剤を投与することをさらに含み、好ましくは前記１種の追加の治療剤はＢｃｌ－２阻害剤であり、より好ましくは前記１種の追加の治療剤は、ベネトクラクス、化合物Ａ１または化合物Ａ２である、請求項７０から８６のいずれか一項に記載の方法。
  89. 以下の構造：
    Figure 2022532918000824
    Figure 2022532918000825
    Figure 2022532918000826
     のうちの１つを有する化合物またはその塩（例えば、その薬学的に許容される塩）。
  90. 請求項１に記載の式（１）の抗体－薬物コンジュゲートの調製のために合成中間体として使用される請求項８９に記載の化合物。
  91. プロアポトーシス剤としての使用のための請求項８９に記載の化合物または薬学的に許容される酸もしくは塩基とのその付加塩。
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