JP2022528448A - 粘土鉱物複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物、その製造方法及び放出性の制御方法 - Google Patents

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Abstract

本発明は、化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物、及びその製造方法に関する。【選択図】図９

Description

本発明は、粘土鉱物複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物、その製造方法及び放出性の制御方法に関する。
スメクタイトは、Ａｌ、Ｍｇ、Ｆｅで構成された八面体シートの２個が、Ｓｉ、Ａｌ、Ｆｅで構成された四面体シートを上下でサンドイッチ状に結合して、一つの単位層（２：１層）を構成している葉状ケイ酸塩ミネラルである。スメクタイト単位層は、負電荷を有しているが、これは、４価正電荷を有する四面体のＳｉが、３価正電荷を有するＡｌ又はＦｅと同型置換（ｉｓｏｍｏｐｈｉｃ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）されるか、３価正電荷を有する八面体のＡｌ又はＦｅ３＋が、２価正電荷を有するＭｇ又はＦｅ２＋に同型置換されることで発生する。単位層で発生した負電荷を介して単位層と単位層の間にカチオンが誘導されるが、これはスメクタイトが薬物担体（ｃａｒｒｉｅｒ）として使用され得ることを意味する。
下記の化１の化合物は、韓国登録特許１０－１５００６６５号に記載のＮ－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－６－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メチル）－２－フルオロアニリン（Ｎ－（（４－（［１，２，４］ｔｒｉａｚｏｌｏ［１，５－ａ］ｐｙｒｉｄｉｎｅ－６－ｙｌ）－５－（６－ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｉｄｉｎ－２－ｙｌ）－１Ｈ－ｉｍｉｄａｚｏｌ－２－ｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ）－２－ｆｌｕｏｒｏａｎｉｌｉｎｅ）であって、従来の抗癌剤活性が知られている。本発明者らは、前記化合物の薬理作用について研究するうちに、前記化合物の体内吸収が一定しない問題があることを見出した。このため、化１の化合物の体内作用を改善するために研究するうちに、特定の条件下で粘土鉱物と複合体を形成する際、大腸への薬物伝達を改善するだけでなく、大腸での薬物作用も改善することができるということを確認して、本発明を完成した。
Figure 2022528448000002
本発明の目的は、大腸への薬物伝達及び大腸での薬物作用が改善した組成物を提供することである。
上記の目的を達成するために本発明は、
化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物を提供する。
Figure 2022528448000003
また本発明は、
化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含む溶液、酸性である反応溶液及び粘土鉱物懸濁液を混合し、前記化合物を粘土鉱物に吸着させて複合体を製造するステップを含む、
化１の化合物及び粘土鉱物の複合体を含み、大腸における放出性が制御された経口投与用組成物の製造方法を提供する。
また本発明は、
化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む組成物を対象体に経口投与することを特徴とする放出性の制御方法を提供する。
Figure 2022528448000004
本発明の組成物は、化１で表される化合物の放出性が制御されて、大腸へ効率よく伝達するだけでなく、前記化合物が大腸において長期間にわたって徐々に作用することを可能にする。
バクトセルチブ（ｖａｃｔｏｓｅｒｔｉｂ）粉末の表面を白金コーティングしてＳＥＭ撮影した写真。 ベントナイト／バクトセルチブ複合体を白金コーティングして観察したＳＥＭ写真。 バクトセルチブ、ベントナイト、ベントナイト／バクトセルチブ複合体、それからバクトセルチブとベントナイトを前記複合体と同じ比率で単純混合した混合物を対象にＸ線回折分析（ＸＲＤ）を行って、ＸＲＤパターンを示したグラフ。 ０．１％Ｔｗｅｅｎ８０を含む０．１Ｎ ＨＣｌ溶液（ｐＨ１．２）を溶出液として設定して行ったバクトセルチブ粉末（●）及びベントナイト／バクトセルチブ複合体（□）の薬物放出パターンを示す図面。 ０．１％Ｔｗｅｅｎ８０を含む５０ｍＭ酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．５）を溶出液として設定して行ったバクトセルチブ粉末（●）及びベントナイト／バクトセルチブ複合体（□）の薬物放出パターンを示す図面。 ０．１％Ｔｗｅｅｎ８０を含む５０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を溶出液として設定して行ったバクトセルチブ粉末（●）及びベントナイト／バクトセルチブ複合体（□）の薬物放出パターンを示す図面。 バクトセルチブの量を基準に、１０Ｍｇ／ｋｇを投与用量に設定してバクトセルチブ粉末（●）、バクトセルチブ水溶液（△）及びベントナイト／バクトセルチブ複合体懸濁液（□）をラットに経口投与した後、時間別血中濃度曲線を示す図面。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎ラットモデルを利用した薬物投与計画を示す図面。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎ラットモデルにおける時間によるバクトセルチブの血中濃度変化を示す図面。曲線を連結する点は、各群に属した動物らの時間帯別血中濃度データの平均値を示す。○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎ラットモデルにおける試験物質を経口投与した後、バクトセルチブが最高血中濃度に到逹する時間（ｔｍａｘ）を示す図面。○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎ラットモデルにおける試験物質を経口投与した後、バクトセルチブの最高血中濃度（Ｃｍａｘ）を示す図面。○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎ラットモデルにおける試験物質を経口投与した後、バクトセルチブの血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を示す図面。○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎ラットモデルにおける試験物質を経口投与した後、バクトセルチブの体内薬物除去半減期（ｔ１／２）を示す図面。○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群。 動物実験を行うための潰瘍性大腸炎の誘導方法及び試験物質投与計画を示す図面。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルにおける組織病理学的に評価した炎症の深刻度。データは、中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示しており、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１に内蔵した非母数検定法であるＤｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して、陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）との間の統計的有意性を検定した。陽性対照群（Ｇ２群）よりもベントナイト投与群（Ｇ３群）とバクトセルチブ投与群（Ｇ４群）は、炎症指数中央値が若干低く、バクトセルチブ／ベントナイト複合体投与群（Ｇ５群）は、中央値がさらに低かったが、統計的有意性はなかった。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルにおける組織病理学的に評価した腺窩細胞の損傷の深刻度。データは、中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示しており、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１に内蔵した非母数検定法であるＤｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して、陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）との間の統計的有意性を検定した。陽性対照群（Ｇ２群）よりもベントナイト投与群（Ｇ３群）とバクトセルチブ投与群（Ｇ４群）は、腺窩細胞の損傷指数中央値が低かったが、統計的有意性はなく、バクトセルチブ／ベントナイト複合体投与群（Ｇ５群）は、中央値が統計的に有意に減少した。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルにおける組織病理学的に評価した潰瘍の深刻度。データは、中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示しており、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１に内蔵した非母数検定法であるＤｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して、陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）との間の統計的有意性を検定した。陽性対照群（Ｇ２群）よりもベントナイト投与群（Ｇ３群）とバクトセルチブ投与群（Ｇ４群）は、潰瘍指数中央値が低かったが、統計的有意性はなく、バクトセルチブ／ベントナイト複合体投与群（Ｇ５群）は、中央値が統計的に有意に減少した。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルにおける組織病理学的に評価した浮腫の深刻度。データは、中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示しており、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１に内蔵した非母数検定法であるＤｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して、陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）との間の統計的有意性を検定した。陽性対照群（Ｇ２群）と比較して、各試験物質投与群における有意な変化を観察することができなかった。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルにおける組織病理学的に評価した線維化の深刻度。データは、中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示しており、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１に内蔵した非母数検定法であるＤｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して、陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）との間の統計的有意性を検定した。陽性対照群（Ｇ２群）よりもベントナイト投与群（Ｇ３群）とバクトセルチブ投与群（Ｇ４群）は、線維化指数中央値が若干低く、バクトセルチブ／ベントナイト複合体投与群（Ｇ５群）は、中央値がさらに低かったが、統計的有意性はなかった。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルにおける組織病理学的に評価した炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍及び浮腫の深刻度点数をいずれも足して比較した図面（線維化点数は除く）。データは、中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示しており、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１に内蔵した非母数検定法であるＤｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して、陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）との間の統計的有意性を検定した。陽性対照群（Ｇ２群）よりもベントナイト投与群（Ｇ３群）とバクトセルチブ投与群（Ｇ４群）は、潰瘍指数中央値が低かったが、統計的有意性はなく、バクトセルチブ／ベントナイト複合体投与群（Ｇ５群）は、中央値が統計的に有意に減少した。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルの大腸における試験物質がインターロイキン６（ＩＬ－６）に及ぼす影響を示す免疫組織化学染色の結果。 ＤＳＳにより誘導した潰瘍性大腸炎マウスモデルの大腸におけるＩＬ－６染色の発色面積を測定した結果。
本発明は、
化１の化合物（以下、「バクトセルチブ」と言う。）又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物に関する。
Figure 2022528448000005
また本発明は、
化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含む溶液、酸性である反応溶液及び粘土鉱物懸濁液を混合し、前記化合物を粘土鉱物に吸着させて複合体を製造するステップを含む、
化１の化合物及び粘土鉱物の複合体を含み、放出性が制御された経口投与用組成物の製造方法に関する。
また本発明は、
化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む組成物を対象体に経口投与することを特徴とする放出性の制御方法に関する。
Figure 2022528448000006
以下、本発明を詳説する。
化１の化合物
本発明の化１の化合物は、公知の方法を利用して製造することができる。例えば、化１の化合物は、Ｎ－（（４－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－６－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メチル）－２－フルオロアニリン（Ｎ－（（４－（［１，２，４］ｔｒｉａｚｏｌｏ［１，５－ａ］ｐｙｒｉｄｉｎｅ－６－ｙｌ）－５－（６－ｍｅｔｈｙｌｐｙｒｉｄｉｎ－２－ｙｌ）－１Ｈ－ｉｍｉｄａｚｏｌ－２－ｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ）－２－ｆｌｕｏｒｏａｎｉｌｉｎｅ）である。前記化合物の分子式はＣ２２Ｈ１８ＦＮ７であり、２５±３℃における飽和水溶液のｐＨはｐＨ７．２で、溶解度（ａｑｕｅｏｕｓ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ）は＜０．０２Ｍｇ／ｍｌである。溶解度は、低いｐＨ範囲でさらに高く（つまり、ｐＨ２．８１における２５．０５ｍｇ／ｍｌ）、ｐＨ４．９以上、かつ溶解度は０．０２Ｍｇ／ｍｌ以下である。分配係数（オクタノール／水）Ｌｏｇ Ｄｏ／ｗは３．３１である。化１の化合物は、韓国特許公開公報１０－２０１３－００２８７４９号に開示の方法を利用して製造することができる。
Figure 2022528448000007
粘土鉱物
一般的に粘土鉱物は、ケイ酸板（ｓｉｌｉｃａ ｓｈｅｅｔ）とアルミナ板（ａｌｕｍｉｎａ ｓｈｅｅｔ）とが結合して形成された結晶単位が積層された層状構造、つまり板状構造を有するが、このような粘土鉱物のうち層間膨脹性を有する粘土鉱物では、結晶単位の間に水素結合が存在せず、結晶単位の間の結合力が弱いため、これら結晶単位の間に水分が吸入すると膨脹され得る。よって、層間膨脹性を有する粘土鉱物の結晶単位の間には、相対的に大きな大きさを有するイオンであっても容易に流入させることができる。一方、層間膨脹性を有する粘土鉱物においては、４価正電荷を有する四面体のＳｉが、３価正電荷を有するＡｌ又はＦｅと同型置換（ｉｓｏｍｏｒｐｈｉｃ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）されるか、３価正電荷を有する八面体のＡｌ又はＦｅ３＋が、２価正電荷を有するＭｇ又はＦｅ２＋に同型置換されることで、負の層電荷が発生するが、層と層との間又は表面にカルシウムイオン（Ｃａ２＋）、マグネシウムイオン（Ｍｇ２＋）、ナトリウムイオン（Ｎａ＋）、カリウムイオン（Ｋ＋）などのカチオンが結合して、全体的としては電気的中性を帯びるようになる。本発明の粘土鉱物は、カチオン性物質に対する吸着に優れ、このような吸着パターンは周辺のｐＨによって変わる。
本発明の粘土鉱物は、板状構造、具体的には層間膨脹性を有しており、内部に抗生物質を挿入して伝達体として使用され得る粘土鉱物である。本発明の粘土鉱物は、スメクタイト系鉱物であってもよく、例えば、モンモリロナイト（ｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅ）又はベントナイト（ｂｅｎｔｏｎｉｔｅ）、スメクタイト（ｓｍｅｃｔｉｔｅ）、バーミキュライト（ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅ）、バイデライト（ｂｅｉｄｅｌｌｉｔｅ）、ノントロナイト（ｎｏｎｔｒｏｎｉｔｅ）、サポナイト（ｓａｐｏｎｉｔｅ）、ヘクトライト（ｈｅｃｔｏｒｉｔｅ）などになり得る。例えば、本発明の粘土鉱物は、モンモリロナイトを５０％重量以上含むベントナイトになり得る。好ましくは、本発明の粘土鉱物は、ベントナイトである。
粘土鉱物／バクトセルチブ複合体
本発明の粘土鉱物／バクトセルチブ複合体において、粘土鉱物は、バクトセルチブを胃腸（ｐＨ１．５～２．０）と小腸（ｐＨ７．２～７．５）を経て大腸（ｐＨ７．９～８．５）まで伝達して、大腸で作用するようにする伝達体、つまり担体として用いられる。すなわち、本発明の粘土鉱物／バクトセルチブ複合体は、上部消化管でバクトセルチブが吸収されることを抑制して、大腸部位までバクトセルチブを伝達する。本発明の粘土鉱物は、層状粘土鉱物であって、層状表面は、負電荷を帯びて、バクトセルチブは、粘土鉱物に無定形状態で吸着する。前記複合体は、粘土鉱物及び化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を１：０．０２～０．２６の重量比で含んでいてもよい。
本発明の粘土鉱物は、好ましくはベントナイトである。ベントナイトは、低いｐＨ条件では、アミン基を有する弱塩基薬物分子が正電荷を帯びてベントナイトに結合されるが、高いｐＨでは、電荷を失ってベントナイトから放出され得る。体内上部消化管のｐＨが低く、下部消化管のｐＨが高いことを考慮したとき、本発明のベントナイト／バクトセルチブ複合体は、ｐＨ依存的な放出調節能を有する。
すなわち、本発明の複合体をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物粉末をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度よりも遅い（図４）。しかし、前記複合体をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物粉末をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度よりも速い（図６）。
バクトセルチブは、酸性では良く溶けるものの、ｐＨ７では、電荷中性を示し、中性での溶解度が低くて、上部消化管でのみ吸収が集中的に行われ、標的器官である下部消化管では、吸収が十分行われない吸水性の問題がある。すなわち、バクトセルチブを経口投与時、胃酸によって正電荷を帯びるようになり、溶解度が増加した後、小腸を通過しながらさらにｐＨが中性に変わることによって、中性分子の一部が小腸の上部で吸収される。よって、薬物動態学上、バクトセルチブの経口投与時、初期血液濃度が急増する問題がある。また、小腸におけるバクトセルチブが中性分子化しながら溶解度が急減し、析出するようになり、その後、小腸では吸収されない。よって、薬物動態学上の血中濃度が急減することになる。すなわち、バクトセルチブは、ｐＨによって電荷と溶解度が変わり、小腸で吸収され得る領域が非常に制限される短所が発生する。また、バクトセルチブの溶解と析出の際に胃液と腸液に深く影響を受けるようになるが、人によって胃液と腸液の分泌程度が異なるところ、患者らから一定した効果を期待しにくい。また、バクトセルチブは、分子が固まった非定型固形剤として摂取されるため、胃酸により個別分子に溶解する過程が必要である。また、バクトセルチブは、薬物自体の半減期が非常に短いため、上部消化管で薬物が速やかに吸収されても、薬理効果の長期間作用を期待しにくい。
しかし、粘土鉱物／バクトセルチブ複合体、好ましくは、ベントナイトとバクトセルチブが吸着したベントナイト／バクトセルチブ複合体の場合、バクトセルチブがカチオン状の分子でベントナイトの層間に挿入されるところ、胃酸で溶解される過程がない。また、ベントナイトは、塗布能があるため、小腸上皮細胞に付着した後、薬物であるバクトセルチブが脱着し、中性化して吸収されるため、小腸の全領域における吸収が可能である。さらに、大腸まで移動した粘土鉱物／バクトセルチブ複合体は、大腸の患部に付着して、バクトセルチブを直接放出することにによって、患部に薬物を二重伝達する効果がある。
粘土鉱物／バクトセルチブ複合体を含む組成物
本発明は、化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物に関する。
バクトセルチブは、酸性では良く溶けるものの、中性における溶解度が低くて、体内吸収が一定しない問題がある。すなわち、胃腸を含む上部消化管の場合、ｐＨが１～３程と非常に低いが、十二指膓から小腸を通過しながら、ｐＨが５～８水準に増加するようになる。よって、バクトセルチブは、上部消化管でのみ吸収が集中的に行われ、下部消化管では、吸収が十分に行われない場合が多い。また、薬物自体の半減期が非常に短いため、上部消化管における薬物が速やかに吸収されても、薬理効果の長期間作用を期待しにくい。他方、粘土鉱物／バクトセルチブ複合体を含む組成物の場合、バクトセルチブが酸性であるｐＨでイオン化され、これによって、低いｐＨで粘土鉱物に吸着し、高いｐＨで放出されるようになる。よって、ｐＨの高い下部消化管、例えば、大腸までバクトセルチブが粘土鉱物に吸着した状態で安定的に伝達されて、薬物放出が遅延するだけでなく、大腸におけるバクトセルチブが継続して作用するように助ける。
また、本発明の粘土鉱物／バクトセルチブ複合体は、酸性条件で、バクトセルチブと粘土鉱物の間の吸着が強く保持されるため、投与の直後、急激な薬物の吸収が防止される。また、それ自体として水に良く分散されるため、錠剤よりも吸収が容易であり、再現性ありに起こり得る。
また、本発明の粘土鉱物／バクトセルチブ複合体は、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、オイドラギットＬ及びＳ系高分子などのような既存の腸溶性高分子を用いる場合と違って、薬物が初期に放出されることを防止するためのコーティング工程も不要である。
前記組成物をラットに経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、３０～６０分であってもよく、人に経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、３～１０時間であってもよい。また、前記組成物の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）よりも長い。好ましくは、化１の化合物の投与量が同一であれば、前記組成物の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）よりも２～１０倍長く、さらに好ましくは２．３～８倍も長く、より一層好ましくは２．４～６倍も長く、一層さらに好ましくは２．６～５倍も長く、さらに好ましくは２．７～４倍も長い。
前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、０．７～１．９ｕｇ／ｍｌであってもよい。また、前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）よりも低い。好ましくは、化１の化合物の投与量が同一であれば、前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）の２０～８０％であり、より好ましくは２５～７０％で、さらに好ましくは３０～６０％で、より一層好ましくは３５～５０％で、一層さらに好ましくは３７～４５％である。
本発明の複合体をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物粉末をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度よりも遅い。しかし、前記複合体をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物粉末をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度よりも速い。また、前記組成物を経口投与時、化１の化合物の小腸での吸収率は、化１の化合物水溶液の経口投与時、小腸での吸収率よりも低い。前記吸収率は、単位時間当たり投与された化１の化合物量に対して吸収された化合物量を意味する。前記組成物を経口投与時、減少した化１の化合物の小腸での吸収量は、相対的に、大腸で作用する化１の化合物量が増加し得ることを意味する。また、本発明の組成物を経口投与時、化１の化合物の小腸での吸収速度（ｒａｔｅ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時、小腸での吸収速度よりも低い。このとき、小腸での吸収速度の変化は、最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）及び最高血中濃度（Ｃｍａｘ）を利用して分かる。例えば、最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）が増加して、最高血中濃度（Ｃｍａｘ）が低くなる場合、吸収速度が減少し、最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）が減少して、最高血中濃度（Ｃｍａｘ）が高くなる場合、吸収速度が増加することを意味する。よって、本発明の組成物は、大腸における化１の化合物を放出させるのに好適である。本発明の組成物を経口投与時、化１の化合物の大腸での炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化で構成される群から選択される症状に対する薬物の改善効果は、化１の化合物水溶液の経口投与時、大腸での炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化で構成される群から選択される症状に対する薬物の改善効果よりも高い。好ましくは、本発明の組成物を経口投与時、化１の化合物の大腸での表８に記載の炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化の組織病理総点で表される薬物の改善効果は、化１の化合物水溶液の経口投与時、大腸での表８に記載の炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化の組織病理総点で表される薬物の改善効果よりも高い。特に、本発明の組成物は、大腸を標的器官とする薬学的化合物を大腸に伝達して、大腸での薬物作用を増加させる薬学的組成物であってもよい。
本発明の組成物は、放出性が制御された組成物である。放出制御（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ－ｏｒ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ）とは、薬物の投与後、薬物の血中濃度が有効濃度にまで速やかに上昇し、所望の時間の間のみ薬物血中濃度が一定に維持され、一般的な他の製剤よりも投与頻度が低くて、生体反応が均一であり、副作用が少ないことを意味する。
本発明の組成物は、薬学的組成物であってもよい。本発明の薬学的組成物は、化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を０．０１～８０重量％含んでいてもよく、好ましくは０．０２～６５重量％含んでいてもよい。しかし、これは投薬者の必要に応じて増減し得、年齢、食生活、栄養状態、病の進行程度などの状況によって適宜増減することができる。本発明の薬学的組成物内の化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体の含量は、当業者が適宜決定することができる。
本発明の薬学的組成物は、経口投与が可能であり、一般的な医薬品製剤の形態で使用され得る。例えば、本発明の薬学的組成物は、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、懸濁剤などのような経口投与用製剤の形態に利用され得、これら製剤は、許容可能な通常の担体、例えば、経口投与用製剤の場合には賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、可溶化剤、着色剤、コーティング剤、懸濁化剤、保存剤又は増量剤などを用いて調剤することができる。これは、本発明の薬学的組成物の製造時に適用可能な製剤の形態及び添加剤の例示であり、本発明の薬学的組成物がこれに制限されるものではない。
本発明の薬学的組成物の投与用量は、患者の状態、年齢、性別及び余病など、様々な要因によって専門家が決定することができるが、通常は、成人１ｋｇ当たり０．１ｍｇ～１０ｇ、好ましくは１０Ｍｇ～５ｇの用量に投与され得る。また、単位剤形当たり前記薬学的組成物の１日用量又はこれの１／２、１／３又は１／４の用量が含有されるようにして、一日に１～６回投与され得るが、これに制限されるものではなく、担当医師は、これを適宜調節することができる。
本発明の組成物の製造方法
本発明は、化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含む溶液、酸性である反応溶液及び粘土鉱物懸濁液を混合し、前記化合物を粘土鉱物に吸着させて複合体を製造するステップを含む、化１の化合物及び粘土鉱物の複合体を含み、放出性が制御された経口投与用組成物の製造方法に関する。このとき、化１の化合物が層状粘土鉱物に無定形状態で吸着するためには、前記化合物と粘土鉱物を同じ水溶液に溶解、分散して混合する方法を用いることができる。このとき、粘土鉱物（例えば、ベントナイト）の層状表面は、負電荷を帯びるため、水溶液に溶解された薬物がカチオンを帯びる場合、吸着がより効果的に行われ得る。
バクトセルチブの場合、中性ｐＨにおける非常に低い溶解度を有しているため、該ｐＨ条件でイオン化されて、粘土鉱物に吸着しにくい。しかし、反応溶媒のｐＨが酸性である場合、バクトセルチブの溶解度が増加して、多量の薬物をベントナイトと反応させることができ、バクトセルチブの構造特性上、低いｐＨで正電荷を帯びるようになるため、より強いイオン結合反応を通じて高い吸着率で粘土鉱物に結合することになる。よって、前記反応溶液のｐＨは、ｐＨ０．５～ｐＨ３．５であるのが好ましい。このとき、反応溶液に酸性条件を付与するために塩酸、リン酸、硫酸、酢酸、ギ酸のうち一つを選択することができる。そして、バクトセルチブがｐＨ３における約１Ｍｇ／ｍＬの溶解度を有し、ｐＨがさらに低いほど溶解度も増加することを考慮したとき、反応ｐＨは、１～３範囲で選択されるのがさらに好ましい。
このとき、十分な吸着のために前記複合体は、化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物は、０．１～１．３：５の重量比で含むのが好ましい。粘土鉱物に過量の薬物（化１の化合物）を反応させる場合、粘土鉱物に吸着せずに損失となる薬物が多くなる。他方、薬物量に対し粘土鉱物の量を高くする場合、全体吸着率を上げることができるものの、結果的に得られる複合体のうち薬物含量が低くなり、服用量が増加して、投与において負担になり得る。
一定条件で本発明の複合体を形成した後、乾燥した形態の複合体を得るために様々な方法を用いることができる。また、バクトセルチブを粘土鉱物に吸着させた後、遠心分離、上層液除去などによって、結合していないバクトセルチブを除去することができる。また、沈殿物を凍結乾燥する場合、既存の粘土鉱物と性状が同じような粉末状複合体を得ることができる。一方、反応液と複合体を分離するために、フィルターを介して溶媒のみを通過させ、通過していない複合体沈殿物を蒸留水により繰り返して洗浄する過程が含まれ得るが、これによって、遠心分離することなく、吸着していない薬物と酸性溶液を除去することができる。または、吸着反応の終了後、溶液の強い酸性条件を緩和して凍結乾燥する方法も活用することができる。具体的に、薬物が効率よく吸着し得る低いｐＨで反応を行った後、反応溶液のｐＨを上げて凍結乾燥を行うことで、機械腐食可能性を減らし、凍結乾燥器を円滑に可動することができる。
本発明の組成物は、バクトセルチブが予防、改善又は治療効果を有すると知られた多様な疾患に適用可能である。例えば、本発明の組成物は、韓国登録特許１０－１５００６６５号に記載されたように、ＡＬＫ５及び／又はＡＬＫ４により媒介された様々な疾病状態、例えば、糸球体腎炎、糖尿性網膜病症、ループス腎炎、高血圧－誘発された腎臓病症、肝蛭性腎線維症、薬物露出の余病から発生する腎線維症、ＨＩＶに関連する腎臓病症、移植腎臓病症、諸病因に起因する肝線維症、感染による肝機能障害、アルコール－誘発された肝炎、胆道疾患、嚢腫線維症、肺線維症、肝蛭性肺疾病、急性肺損傷、成人呼吸困難症侯群、特発性肺線維症、慢性閉鎖性肺疾病、感染因子又は毒性因子に起因する肺疾病、硬塞後心臓線維症、鬱血性心不全、拡張性心筋病症、心筋炎、血管内膜が厚くなり、血管狭窄症、高血圧－誘発された血管再形成、肺動脈高血圧、冠状再狭窄症、末梢血管再狭窄症、頸動脈再狭窄症、ステント－誘発された再狭窄症、アテローム動脈硬化症、目の傷、角膜傷跡、増殖性硝子体網膜病症、緑内障、眼内圧、外傷又は手術の傷から生成された傷の治癒中に発生する肌のうち過度な又は肥厚性傷又はケロイド形成、腹膜及び皮下狭窄、強皮症、線維硬化症、進行性全身硬化症、肌筋炎、多発性筋炎、関節炎、骨粗鬆症、潰瘍、損傷した神経機能、男性勃起不全、ペイロニー病、デュピュイトラン拘縮、アルツハイマ病、レイノー症侯群、放射線－誘発された線維症、血栓症、腫瘍転移性成長、多発性骨髄腫、黒色腫、神経膠腫、膠芽腫、白血病、肉腫、平滑筋腫、中皮腫、及び肺、乳房、結腸、腎臓、卵巣、頸部、肝、胆道、胃腸管、膵膓、前立腺、頭頸部の癌腫に対して予防、治療又は改善効果を有し、さらに骨髄異形成症候群（ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）又はリンパ種（ｌｙｍｐｈｏｍａ）に対して予防、治療又は改善効果を有する。また、本発明の組成物は、下部消化管、例えば、大腸を標的器官とする薬学的組成物であってもよい。例えば、本発明の組成物は、炎症性腸疾患の予防、改善又は治療用組成物であってもよい。例えば、本発明の組成物は、クローン病（Ｃｒｏｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）又は潰瘍性大腸炎（ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ）の予防、改善又は治療用組成物であってもよい。
＜材料及び方法＞
化１の化合物（以下、「バクトセルチブ」と言う。）は、韓国株式会社メドペクトより提供された。ベントナイトは、韓国地質資源研究院より提供されて使用した。
＜実験例１＞
＜１－１＞
溶媒のｐＨによるバクトセルチブとベントナイトの吸着率を評価した。このとき、バクトセルチブが中性ではあまり溶けず、ｐＨ３から約１ｍｇ／ｍＬ程度に溶け始める点を勘案して、反応ｐＨをｐＨ１、ｐＨ２及びｐＨ３に選定して試験を行った。
先ず、バクトセルチブを１０ｍｇ／ｍＬで０．１Ｎ塩酸水溶液に溶かし、これを各ｐＨに相当する塩酸水溶液又はリン酸塩緩衝液（ｐＨ１：０．１Ｎ塩酸水溶液、ｐＨ２、ｐＨ３：リン酸塩緩衝液）に希釈して、濃度を１ｍｇ／ｍＬに合わせた。該薬物溶液１ｍＬと各ｐＨに相当する反応溶液（つまり、０．１Ｎ塩酸水溶液又はリン酸塩緩衝液）８ｍＬ、ベントナイトを蒸留水に懸濁した５Ｍｇ／ｍＬの懸濁液１ｍＬを混合し、３０分間放置して、薬物がベントナイトに吸着するようにした。その後、遠心分離して（３，０００ｒｐｍ、５分）得られた上層液の薬物濃度を分析した。これによって、全体適用された薬物（バクトセルチブ）のうち上層液に残っている薬物量を差し引くことによって、数１にように、ベントナイトに吸着した薬物量を間接に計算して吸着率を計算した。
Figure 2022528448000008
その結果、グループ間の差異が著しくはないものの、ｐＨが低くなるほど吸着率が僅かに増加したところ、ｐＨ１におけるバクトセルチブの吸着効率が最も高いと確認された（表１）。よって、以下の試験では、バクトセルチブ及びベントナイトの複合体を製造時、溶媒のｐＨをｐＨ１にして試験を行った。
Figure 2022528448000009
前記濃度は、最終濃度基準である。
＜１－２＞
バクトセルチブとベントナイトの比率による吸着率を評価した。これは、バクトセルチブの損失を最小化しつつ、ベントナイトに最大限に吸着させ得る組成を見つけるためである。
このために、実験例１と同じく試料を準備して製造するものの、ベントナイトの反応濃度と反応ｐＨをそれぞれ０．５ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ１と固定し、適用するバクトセルチブの濃度を０．０１Ｍｇ／ｍＬから０．５Ｍｇ／ｍＬと、互いに異にして複合体を製造した。そして、バクトセルチブの濃度による吸着率の差異を測定した。
その結果、バクトセルチブの濃度が低い場合、ほとんどの薬物がベントナイトに結合した状態を維持するが、バクトセルチブの濃度は、０．１Ｍｇ／ｍＬから吸着率が減少し始め、それ以上では、薬物吸着率が６０％以下と非常に低く表された（表２）。よって、十分高い吸着率を表し、かつ複合体のバクトセルチブの含量も高い組成、つまりベントナイト濃度０．５Ｍｇ／ｍｌに対して、バクトセルチブの濃度が０．０２５～０．１Ｍｇ／ｍｌである比率を最適のベントナイト／バクトセルチブの比率と選定した。
Figure 2022528448000010
＜１－３＞
反応ｐＨ及びベントナイト／バクトセルチブの比率が固定された状態で、使用されるバクトセルチブ及びベントナイトの絶対濃度による吸着率の変化を評価した。
このために、実験例１と同じく試料を準備して製造するものの、ｐＨ１の溶媒を用いてバクトセルチブ及びベントナイトの濃度比を１：５にし、絶対濃度（つまり、実際濃度）を異にして複合体を製造した。そして、絶対濃度による吸着率の差異を測定した。
その結果、複合体に用いられるバクトセルチブ及びベントナイトの絶対濃度が１０倍増加するにつれて、薬物吸着率が増加しており、それによって、薬物損失が減らせると確認された（表３）。
Figure 2022528448000011
＜実験例２＞
＜２－１＞
ｐＨ１の溶媒を用いて、バクトセルチブの濃度１ｍｇ／ｍｌ及びベントナイトの濃度５ｍｇ／ｍｌの条件で、実験例１の方法によりベントナイト／バクトセルチブ複合体を製造した。そして、これを凍結乾燥した後、実際のバクトセルチブの含量を測定するためにバクトセルチブの抽出及び分析を行った。
０．５％Ｔｗｅｅｎ８０が含まれたリン酸塩緩衝食塩水（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ、ｐＨ７．４）に前記凍結乾燥した複合体を分散してバクトセルチブを抽出した結果、ベントナイト／バクトセルチブ複合体の反応重量％は、既存のバクトセルチブ及びベントナイトの反応重量％と同じような数値の約１６．９±０．２％と計算された。反応重量％は、下記の数２のように計算した。
Figure 2022528448000012
＜２－２＞
前記 ＜２－１＞で製造したベントナイト／バクトセルチブ複合体の形態学的特性を評価した。このために、＜２－１＞で製造したベントナイト／バクトセルチブ複合体とバクトセルチブをそれぞれ銅テープに接着させた後、表面に白金コーティング処理して、走査電子顕微鏡（ｓｃａｎｎｉｎｇ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ、ＳＥＭ）撮影した。
その結果、バクトセルチブ粉末は、１ｕｍ以上の大きさを有する特有の結晶形が観察された（図１）。しかし、ベントナイト／バクトセルチブ複合体では、このような結晶形が表れず、ベントナイトの層状構造が不規則的に固まった形態を示した（図２）。
＜２－３＞
ＸＲＤによってベントナイト／バクトセルチブ複合体の結晶学的特性を分析した。バクトセルチブ、ベントナイト、バクトセルチブとベントナイトの物理的混合物、それからベントナイト／バクトセルチブ複合体のＸＲＤパターンを分析、比較することによって、薬物吸着現象による結晶構造変化を確認した。
その結果、バクトセルチブの場合、固有のＸＲＤピークパターンを有しており、これは、物理的混合物においても類似に示された。しかし、ベントナイト／バクトセルチブ複合体の場合、固有のピークが表れず、既存のベントナイトのパターンと非常に類似に示されることが確認された（図３）。
図３は、各物質のＸＲＤパターンをグラフで示したものである。バクトセルチブの場合、固有のＸＲＤピークパターンを有しており、これは、物理的混合物においても類似に示された。しかし、ベントナイト複合体の場合、固有のピークが表れず、既存のベントナイトのパターンと非常に類似に示されることを確認した。
＜実験例３＞
＜３－１＞
バクトセルチブがベントナイトに吸着した後に放出される変化を確認するために、バクトセルチブの溶出試験を行った。
このとき、上部消化管及び下部消化管での薬物放出を予測するために、互いに異なるｐＨ条件で溶出を行った。このために、溶出液として０．１Ｎ ＨＣｌ溶液（ｐＨ１．２）、５０ｍＭ酢酸塩緩衝液（ｐＨ４．５）、５０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）をそれぞれ溶出液として用いて試験を行った。このとき、諸溶出液にはバクトセルチブの溶出環境を十分に付与するために、Ｔｗｅｅｎ８０を０．１％濃度に溶解して使用した。
バクトセルチブ粉末及びベントナイト／バクトセルチブ複合体をバクトセルチブ濃度を基準に、１ｍｇ／ｍＬとなるように分散液を作り、このうち０．３ｍＬを半透科性膜に密封した後、各溶出液３０ｍＬに浸して溶出を行った。その後、定めた時間別に０．２ｍＬずつ溶出液を収集して、薬物濃度を分析することによって溶出速度を比較した。
その結果、バクトセルチブ粉末の場合、ｐＨ１．２で早く溶出され、さらに高いｐＨでは溶出速度が顕著に減ることを示した。一方、ベントナイト／バクトセルチブ複合体の場合、ｐＨ１．２及びｐＨ４．５では、既存のバクトセルチブ粉末よりも低い溶出速度を示したが、ｐＨ７．４では、さらに高い溶出速度を示した（図４：ｐＨ１．２、図５：ｐＨ４．５、図６：ｐＨ７．４）。よって、上部消化管で早く溶出され得るバクトセルチブをベントナイトに吸着させる場合、さらに高いｐＨを有する下部消化管におけるバクトセルチブが溶出及び吸収されるように、バクトセルチブの溶出及び吸収を延ばすことができることを確認した。
＜３－２＞
ベントナイト／バクトセルチブ複合体を実際に経口投与時、血中濃度変化を確認するために、約７週齢のＳＤラットを利用して薬物動態分析実験を行った。既存のバクトセルチブ粉末及びこれをｐＨ３緩衝液に溶解した水溶液、それからベントナイト／バクトセルチブ複合体を試料として用いて行っており、投与用量は、薬物（つまり、バクトセルチブ）量を基準に１０Ｍｇ／ｋｇと設定した。各試料をラットに経口投与した後、時間別に採血しており、これを前処理して血中薬物濃度を分析した。
その結果、既存のバクトセルチブ粉末よりもこれを、水溶液の形態に適用したとき、薬物であるバクトセルチブの吸収が高く行われており、１５分ぶりに最高血中濃度に到逹したと示された。一方、バクトセルチブをベントナイトに吸着させたベントナイト／バクトセルチブ複合体の場合、バクトセルチブ水溶液と比較したとき、最高血中濃度が有意に低い、かつさらに遅く到逹しており、後半部の薬物濃度は、水溶液よりもさらに高く示された。また、ベントナイト／バクトセルチブ複合体グループは、バクトセルチブ粉末グループと比較したとき、全体としてＡＵＣ（血中濃度曲線下面積）がさらに広く表された。これによって、ベントナイト／バクトセルチブ複合体が既存のバクトセルチブ粉末よりも優れた吸収を示し、急激に吸収されるバクトセルチブ水溶液の形態よりも薬物（つまり、バクトセルチブ）の吸収を延ばすことができることを確認した（図７）。
上記図７の結果に基づいて各グループの体内動態学的特性を分析した。その結果、バクトセルチブを粉末状に適用したグループは、他の両グループよりもＡＵＣ（血中濃度曲線下面積）が有意に低く表され、各パラメータの平均値に対し偏差値が他のグループよりも高く表された。バクトセルチブを水溶液状態で適用した場合、最も高いＣｍａｘ（最高血中濃度）と早いＴｍａｘ（最高血中濃度発生時間）を示したが、これは溶液状態で薬物の吸収が非常に早く行われたことを示す。一方、ベントナイト／バクトセルチブ複合体を適用した場合、バクトセルチブ水溶液よりもＣｍａｘが低いものの、Ｔｍａｘがさらに遅く表れれた。すなわち、ベントナイト／バクトセルチブ複合体を経口投与時の最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）は、４５±１８．３７分と、バクトセルチブ水溶液を経口投与時の最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）である１５±０分よりも約３倍長かった。また、ベントナイト／バクトセルチブ複合体を経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、１．１２±０．３７μｇ／ｍＬと、バクトセルチブ水溶液を経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）である２．７７±０．５５μｇ／ｍＬの約４０．４％に過ぎなかった。これによって、バクトセルチブをベントナイトに吸着することによって、バクトセルチブの吸収を後に延ばすことができることを確認した。バクトセルチブ粉末と比較したときも、ベントナイト／バクトセルチブ複合体は、薬物動態学的パラメータの偏差値が低かったところ、ベントナイト／バクトセルチブ複合体がバクトセルチブよりも吸収が均一に行われることが分かった（表４）。
Figure 2022528448000013
＜実験例４＞
バクトセルチブを１０Ｍｇ／ｍＬで０．１Ｎ塩酸水溶液に溶かし、これをｐＨ１の０．１Ｎ塩酸水溶液に希釈して、濃度を１ｍｇ／ｍＬに合わせた。該薬物（つまり、バクトセルチブ）溶液１ｍＬと、０．１Ｎ塩酸水溶液８ｍＬ、ベントナイトを蒸留水に懸濁した５ｍｇ／ｍＬの懸濁液１ｍＬを混合し、３０分間放置して、薬物がベントナイトに吸着するようにした。その後、遠心分離して（３，０００ｒｐｍ、５分）上層液を得て、これを凍結乾燥し、ベントナイト／バクトセルチブ複合体を製造した。
＜実験例５＞
＜５－１＞
ＤＳＳ（ｄｅｘｔｒａｎ ｓｕｌｆａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ）により誘導された潰瘍性大腸炎ラットモデルにおけるバクトセルチブの薬物動態を把握し、ベントナイトの結合有無によるバクトセルチブ剤形の生物薬剤学的差異を評価した。
先ず、バクトセルチブは、０．１Ｎ塩酸水溶液に１０Ｍｇ／ｍＬで先に溶かした後、ｐＨ３．０リン酸塩緩衝液で希釈して、１Ｍｇ／ｍＬ溶液を完成して使用した。バクトセルチブ－ベントナイト複合体は、前記複合体を５．９２ｍｇ／ｍＬで蒸留水に懸濁して、バクトセルチブ水溶液と同じ薬物濃度になるようにして使用した。諸製剤は、Ｂａｔｈ ｓｏｎｉｃａｔｏｒで超音波処理すればさらによく分散され、分散後は、容易に沈むため、投与の前に十分振ってから投与した。
製造されたベントナイト／バクトセルチブ複合体の吸着量、薬物放出など、Ｉｎ ｖｉｔｒｏ実験試料に対してはＨＰＬＣを利用して分析した。低濃度に相当する血漿分析など、生体試料の分析にはＬＣ／ＭＳ／ＭＳを利用した。各血漿サンプルは、アセトニトリルと一定比率で混合して除タンパクしており、遠心分離後、上層液のみを取って分析した。
試験動物としてはＳＤラットを使用した。前記ＳＤラットは、株式会社オリエントバイオ加平センター（京畿道加平郡北面沐洞里６９９－１３）より供給されており、入手時、約６週齢であった。入手後、約３日間検疫及び純化して、健康な動物のみ試験に使用した。試験物質の投与時、週齢は、約８週齢であったし、４０匹を使用した。試験動物は、仁荷大学校医科学研究所の生命科学研究室２階の清浄動物室で飼育しており、最低１０回／時間換気し、温図２２±４℃、相対湿度５０±２０％の条件及び１２時間点灯（照明：０８：００～２０：００）する照度１５０～３００Ｌｕｘの条件で飼育した。げっ歯類用の放射線照射固形飼料（ＰＭＩ ＬａｂＤｉｅｔ(Ｒ)５０５３，ＵＳＡ）を給餌機を利用して自由摂取させており、逆浸透処理後、紫外線流水殺菌機及び高圧蒸気で滅菌した上水道水をポリスルホネート材質の飲水瓶（５００ｍｌ）を利用して自由摂取させた。
潰瘍性大腸炎を誘導するために、５．５％ＤＳＳをラットの飲水に入れて６日間継続して供給した。試験物質は、Ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ（１２時間）禁食させた後、１回経口投与した。採血時間の間も節食させた。試験群は、下記の表５のとおりである。このとき、Ｇ１は、１日目から６日目まで一般飲用水を供給し、Ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ禁食後、７日目にバクトセルチブを単回経口投与した。Ｇ２は、１日目から６日目まで一般飲用水を供給し、Ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ禁食後、７日目にベントナイト／バクトセルチブ複合体を単回経口投与した。Ｇ３は、１日目から６日目まで５．５％ＤＳＳにより炎症を誘導し、Ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ禁食後、７日目にバクトセルチブを単回経口投与した。Ｇ４は、１日目から６日目まで５．５％ＤＳＳにより炎症を誘導し、Ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ禁食後、７日目にベントナイト／バクトセルチブ複合体を単回経口投与した。前記投与は、注射器に試験物質を入れて、ラット用ゾンデを連結し、注入して経口投与にて行った。そして、群別にバクトセルチブ又はベントナイト／バクトセルチブ複合体を１回投与した（図８）。
Figure 2022528448000014
（ ）最終評価可能な動物数
臨床症状の観察は、試験期間のうち１日１回一般症状（血便、下痢の有無など）及び斃死／瀕死の発生有無について個体別に観察して行った。このとき、特異症状を示す個体に限って記録を維持した（正常である場合、記録していない）。また、試験動物の入手時、群の分離時、試験物質を投与する直前に毎日個体別体重を測定した。
試験動物の入手時、群の分離時、試験物質を投与する前に測定した各群の平均体重を測定した結果、統計学的に有意な群間差異は観察されなかった。剖検日（７日目）に測定したＧ３群及びＧ４群（ＤＳＳ誘発群）の平均体重は、Ｇ１群及びＧ２群（蒸留水誘発群）に比べて、統計学的に有意に減少すると示された（ｐ＜０．０５、表６）。
Figure 2022528448000015
試験期間の間の体重値
データは、平均±標準偏差と示しており、統計分析は、ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃ １９（Ｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｎｅｙ ｔｅｓｔ）を利用して行った。
＊ｐ＜０．０５、Ｇ１群に比べて相当な差異
＃ｐ＜０．０５、Ｇ２群に比べて相当な差異
Ｇ１群：ｎ=１０、Ｇ２群：ｎ=９、Ｇ３群：ｎ=９、Ｇ４群：ｎ=１０
＜５－２＞
時間によるバクトセルチブの血中濃度変化を測定して、薬物体内動態を評価した。これは、図９のように、（○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群）薬物成分の体内吸収量指標である血中薬物濃度曲線下面積（ＡＵＣ、ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｔｉｍｅ ｃｕｒｖｅ）と、どれ程速やかに吸収されるかを示す指標である最高濃度に到逹した時間（ｔｍａｘ）、血中薬物の最高濃度（Ｃｍａｘ，ｍａｘｉｍｕｍ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）により評価した。
その結果、Ｇ３群に比べて、Ｇ４群におけるｔｍａｘ（最高血中濃度到達時間）は増加し、Ｃｍａｘ（最高血中濃度）が減少したことが確認された。また、Ｇ４群は、Ｇ３群よりもＣｍａｘ到達後の時間－濃度曲線の後半部における薬物（つまり、バクトセルチブ）の血中濃度が長期間さらに高く維持されることが確認された（図９）。
具体的に検討すれば、最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）の場合、ベントナイト／バクトセルチブ複合体を投与したほとんどの動物らにおけるｔｍａｘが２～４倍程延ばされた（図１０、○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群）。これは、胃腸管における薬物放出が徐々に行われながら薬物の吸収時間が延ばされるため、薬物の効果の作用する時間が増大するものである。
一方、最高血中濃度（Ｃｍａｘ）の場合、ベントナイト／バクトセルチブ複合体を投与した群におけるＣｍａｘが半分以下に低くなったことが確認された（図１１、○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群）。よって、バクトセルチブにベントナイトが結合されることによって、急激な血中濃度の増加を防止して、投与薬物による危害反応発生危険度が減少する。また、ベントナイト／バクトセルチブ複合体投与群における最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）が長くなり、血中濃度が緩やかに減少したところ、薬物投与頻度を減少させ得る利点が確認された。
血中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）の場合、バクトセルチブとベントナイトとの結合がバクトセルチブのＡＵＣに有意な影響を及ぼさなかった（図１２、○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群）。よって、ベントナイト結合は、血液内総薬物流入度（ｅｘｐｏｓｕｒｅ）は維持しつつ、薬効の作用時間を延ばすところ、バクトセルチブにベントナイトが結合されても、体内に流入するバクトセルチブの量には有意な差異がないことが確認された。
体内薬物除去半減期（ｔ１／２）の場合、バクトセルチブとベントナイトとの結合は、除去半減期に有意な影響を及ぼさなかった（図１３、○Ｇ１群、◇Ｇ２群、●Ｇ３群、◆Ｇ４群）。よって、薬物の吸収が徐々に行われることとは関係なく、体内薬物の消失速度は、同じように維持されると確認された。
＜実験例６＞
炎症性腸疾患の一つである潰瘍性大腸炎のマウスモデルを利用して、バクトセルチブ／ベントナイト複合体の抗炎症、抗腺窩細胞の損傷、抗潰瘍、抗浮腫、抗線維化の効果を確認する動物試験を行った。動物実験を行うための炎症誘導方法及び薬物投与計画は、図１４のとおりである。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを試験動物として選定し、潰瘍性大腸炎を誘導するために炎症誘導物質であるＤＳＳを飲水に入れて７日間供給した後、１４日間正常な飲水を供給するサイクルを繰り返した。かかる炎症誘導サイクルを３回繰り返して、大腸内慢性炎症、潰瘍及び線維化状態を誘導した。対照群を除く試験動物群らに最初の炎症誘導サイクルが過ぎた３週後からベントナイト、バクトセルチブ又はバクトセルチブ／ベントナイト複合体を１日２回（午前１０時、午後４時）、週５日、計６週間投与した。換算したマウス体重１ｋｇ当たりのベントナイトは１０６，８ｍｇ、バクトセルチブは２０．０ｍｇ、複合体は１２６．８Ｍｇを投与した。このとき、バクトセルチブ／ベントナイト複合体としては、実験例５で製造した複合体を使用した。潰瘍性大腸炎動物試験に使用された試験群別炎症誘導物質、試験物質、試験物質投与量及び試験動物数は、下記の表７のとおりである。
Figure 2022528448000016
（ ）最終評価可能な動物数
試験に使用したＣ５７ＢＬ／６マウスは、株式会社オリエントバイオ加平センター（京畿道加平郡北面沐洞里６９９－１３）より供給されており、入手時、約６週齢であった。入手後、約７日間検疫及び純化して、健康な動物のみ試験に使用した。誘導物質の投与時、試験動物は、約８週齢であったし、５２匹を使用した。試験動物は、仁荷大学校医科学研究所の生命科学研究室２階の清浄動物室で飼育しており、最低１０回／時間換気し、温図２２±４℃、相対湿度５０±２０％の条件及び１２時間点灯（照明：０８：００～２０：００）する照度１５０～３００Ｌｕｘの条件で飼育した。げっ歯類用の放射線照射固形飼料（ＦｅｅｄＬａｂ ＧＭＯ Ｆｒｅｅ Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ＧＦ２００５）を給餌機を利用して自由摂取させており、逆浸透処理後、紫外線流水殺菌機及び高圧蒸気で滅菌した上水道水をポリスルホネート材質の飲水瓶（３００ｍｌ）を利用して自由摂取させた。
臨床症状の観察は、試験期間のうち１日１回一般症状（血便、下痢の有無など）及び斃死／瀕死の発生有無について個体別に観察して行った。このとき、特異症状を示す個体に限って記録を維持した（正常である場合、記録していない）。また、試験動物の入手時、群の分離時、試験物質を投与する直前に毎日個体別に体重を測定した。
大腸組織の免疫組織化学的変化を観察するために、１０％中性緩衝ホルマリン溶液に固定された組織は、薄切片を製作して、Ｃｏａｔｉｎｇ ｓｌｉｄｅに付着、脱パラフィン後に染色して、各々のスライドに抗体ＩＬ－６（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６）、α－ＳＭＡ（α－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｃｔｉｎ）、ＴＧＦ－β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂｅｔａ）を反応させるＩＨＣは、外部機関（ノートス）に依頼して行った。個体別組織スライドは、一定した３区域を指定して、１００倍イメージ撮影しており、全体面積に対し染色した部分を測定して、平均値を計算した（Ｚｅｎ ２．３ ｂｌｕｅ ｅｄｔｉｏｎ，Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。
潰瘍性大腸炎を誘導するために、２％ＤＳＳをマウスの飲水に入れて、毎試験サイクル（３週）の最初７日間継続して供給した。試験物質は、二番目のＤＳＳ誘発と同時に１日２回、週５日、計６週、経口投与した（図１４）。試験物質投与量は、体重に基づいて個体別に換算して、体重ｋｇ当たり２０ｍＬの液量に投与した。前記投与は、注射器に試験物質を入れて、ラット用ゾンデを連結し、注入して経口投与を行った。
試験期間のうち、諸ＤＳＳ摂取群において、７日後、著しい体重の減少と下痢を特徴とする潰瘍性大腸炎ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ（ＤＡＩ）が確実に増加した。１４日の回復期後、次のＤＳＳ誘導サイクルが始まる前にＤＡＩは、正常に近く回復した。試験物質投与群間のＤＡＩ数値の有意な差異は観察されなかった。大腸の重さ、長さ及び大腸比率の変化では、諸ＤＳＳ摂取群における大腸の重さの増加、大腸の長さの短縮及び大腸比率の増加が観察された。試験物質投与群におけるＤＳＳに摂取によるかかる症状の有意な差異は観察されなかった。
潰瘍性大腸炎に対する試験物質の治療効果を評価するために、試験の終了後、動物は、痲酔のうえで開腹して放血した後、個体別に組織病理検査を行った。組織病理学的所見は、下記の表８のように炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化の深刻度変化に細分化して点数化した。また、線維化を除く前記４種の組織病理学的深刻度点数を足して、陽性対照群（Ｇ２）と試験物質投与群（Ｇ３、Ｇ４、Ｇ４）を比較した。
Figure 2022528448000017
統計的分析は、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０１を利用して行っており、有意性の最小単位はｐ＜０．０５にした。測定した諸組織病理指数は、非母数データであるため、グラフに中央値、２５－７５％値（ボックス内）、最小－最大値（両極端）で示した（図１５～図２０）。非母数検定法であるＫｒｕｓｃａｌ－Ｗａｌｌｉｓ ｔｅｓｔを利用してＡＮＯＶＡを行っており、Ｄｕｎｎ’ｓ ｔｅｓｔを利用して陽性対照群（▲Ｇ２群）と試験物質投与群（◇Ｇ３群、●Ｇ４群、◆Ｇ５群）の間の統計的有意性を検定した。また、その平均値を表９に示した。
Figure 2022528448000018
ＩＬ－６染色の発色面積を測定して平均及び標準誤差を算定した結果、Ｇ２群は、Ｇ１に比べて、１５．８倍増加した面積が観察されており、統計学的に有意に示された（ｐ＜０．０１）。試験物質投与群（Ｇ３群～Ｇ５群）では、Ｇ２群に比べて、それぞれ８．７％、２３．０％及び５６．３％の面積が減少したと示されており、特に、Ｇ５群において、Ｇ２群に比べて統計学的に有意に減少したと示された（表１０、図２１、図２２）。
Figure 2022528448000019

Claims (20)

  1. 化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む、放出性が制御された経口投与用組成物。
    Figure 2022528448000020
  2. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）よりも２～１０倍長いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  3. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）よりも長いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  4. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）の２０～８０％であることを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  5. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）よりも低いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  6. 前記組成物を経口投与時、化１の化合物の大腸での炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化で構成される群から選択される症状に対する薬物の改善効果が、化１の化合物水溶液の経口投与時、大腸での薬物の改善効果よりも高いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  7. 前記組成物を経口投与時、化１の化合物の小腸での吸収速度（ｒａｔｅ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時、小腸での吸収速度よりも低いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  8. 前記複合体をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度よりも遅いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  9. 前記複合体をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度よりも速いことを特徴とする、
    請求項１記載の組成物。
  10. 化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を含む溶液、酸性である反応溶液及び粘土鉱物懸濁液を混合し、前記化合物を粘土鉱物に吸着させて複合体を製造するステップを含む、
    化１の化合物及び粘土鉱物の複合体を含み、放出性が制御された経口投与用組成物の製造方法。
    Figure 2022528448000021
  11. 前記反応溶液のｐＨは、ｐＨ０．５～ｐＨ３．５のｐＨであることを特徴とする、
    請求項１０記載の組成物の製造方法。
  12. 化１の化合物又はその薬学的に許容可能な塩；及び粘土鉱物の複合体を含む組成物を対象体に経口投与することを特徴とする、放出性の制御方法。
    Figure 2022528448000022
  13. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）よりも２～１０倍長いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  14. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度到達時間（ｔｍａｘ）よりも長いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  15. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）の２０～８０％であることを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  16. 前記組成物の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時の最高血中濃度（Ｃｍａｘ）よりも低いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  17. 前記組成物を経口投与時、化１の化合物の大腸での炎症、腺窩細胞の損傷、潰瘍、浮腫及び線維化で構成される群から選択される症状に対する薬物の改善効果が、化１の化合物水溶液の経口投与時、大腸での薬物の改善効果よりも高いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  18. 前記組成物を経口投与時、化１の化合物の小腸での吸収速度（ｒａｔｅ）は、化１の化合物水溶液の経口投与時、小腸での吸収速度よりも低いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  19. 前記複合体をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物をｐＨ１．２の溶出液に添加時の溶出速度よりも遅いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
  20. 前記複合体をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度は、化１の化合物をｐＨ７．４の溶出液に添加時の溶出速度よりも速いことを特徴とする、
    請求項１２記載の放出性の制御方法。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102035481B1 (ko) * 2019-04-12 2019-10-23 한국지질자원연구원 점토광물 복합체를 포함하는 염증성 대장염의 예방, 개선 및 치료용 조성물

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004065237A (ja) * 2002-06-12 2004-03-04 Osaka Industrial Promotion Organization 遺伝子導入用担体、前記担体を用いた遺伝子導入剤、前記導入剤を用いた遺伝子導入方法、およびそれによって遺伝子を導入した細胞
JP2006249072A (ja) * 2005-02-09 2006-09-21 Osaka Univ タンパク質導入用担体、前記担体を用いたタンパク質導入剤、タンパク質導入方法、およびタンパク質導入細胞ならびにその製造方法
KR101922369B1 (ko) * 2018-01-12 2018-11-26 한국지질자원연구원 경구 생체이용률 개선을 위한 약물-층상형 실리케이트 복합체, 이를 포함하는 경구용 약학 조성물 및 상기 복합체의 제조 방법

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090107959A (ko) * 2008-04-10 2009-10-14 한올제약주식회사 약제학적 제제
US8080568B1 (en) 2010-06-29 2011-12-20 Ewha University - Industry Collaboration Foundation 2-pyridyl substituted imidazoles as therapeutic ALK5 and/or ALK4 inhibitors
WO2016163754A1 (en) * 2015-04-07 2016-10-13 Medpacto Inc. Pharmaceutical composition for preventing or treating cancer and method using thereof
JP2019506153A (ja) * 2016-01-08 2019-03-07 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 分化した腸内分泌細胞およびインスリン産生細胞の作製
US20190046512A1 (en) * 2016-02-26 2019-02-14 Agios Pharmaceuticals, Inc. Idh1 inhibitors for the treatment of haematological malgnancies and solid tumors
EP3490542A4 (en) * 2016-07-26 2020-07-08 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. NEUROMODULATING COMPOSITIONS AND RELATED THERAPEUTIC METHODS FOR TREATING CANCER BY MODULATING AN IMMUNE REACTION AGAINST CANCER
KR20180013571A (ko) * 2016-07-29 2018-02-07 한국식품연구원 벤토나이트를 유효성분으로 포함하는 항비만 조성물
KR101884520B1 (ko) * 2016-07-29 2018-08-02 한국식품연구원 벤토나이트를 유효성분으로 포함하는 염증성 장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
US10383881B2 (en) * 2016-12-30 2019-08-20 Frequency Therapeutics, Inc. 1,5-dihydro-2H-pyrrol-2-one compounds and methods of using same
KR102035481B1 (ko) * 2019-04-12 2019-10-23 한국지질자원연구원 점토광물 복합체를 포함하는 염증성 대장염의 예방, 개선 및 치료용 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004065237A (ja) * 2002-06-12 2004-03-04 Osaka Industrial Promotion Organization 遺伝子導入用担体、前記担体を用いた遺伝子導入剤、前記導入剤を用いた遺伝子導入方法、およびそれによって遺伝子を導入した細胞
JP2006249072A (ja) * 2005-02-09 2006-09-21 Osaka Univ タンパク質導入用担体、前記担体を用いたタンパク質導入剤、タンパク質導入方法、およびタンパク質導入細胞ならびにその製造方法
KR101922369B1 (ko) * 2018-01-12 2018-11-26 한국지질자원연구원 경구 생체이용률 개선을 위한 약물-층상형 실리케이트 복합체, 이를 포함하는 경구용 약학 조성물 및 상기 복합체의 제조 방법

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J CELL PHYSIOL., vol. Vol.234，pp.11654-11661, JPN6022047353, November 2018 (2018-11-01), ISSN: 0004916269 *

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