JP2021534761A - 免疫原性タンパク質および組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
A-X-B
からなるか、またはそれを含むポリペプチドが提供されるが、ここでXは、配列番号2、3、4、15、16または17と同一性を有する配列からなるアミノ酸配列である;Aは場合によって存在してもよいN末端アミノ酸配列である;Bは場合によって存在してもよいC末端アミノ酸配列である。詳細には、配列同一性のレベルは、90%から100%である。より詳細には、配列同一性のレベルは、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、または少なくとも99%である。さらにより詳細には、配列番号2、3または4との配列同一性レベルは100%である。具体的には、AおよびBは、アデニル酸シクラーゼに由来しない場合によって存在してもよい配列であり、特に配列番号1のアデニル酸シクラーゼ、またはその3つ以上連続するアミノ酸断片、たとえば4、5、6、7、8、9、10個の連続するアミノ酸の断片に由来しない場合によって存在してもよい配列である。本明細書で使用される場合、本発明との関連において「由来しない」という表現は、場合によって存在してもよい配列Aおよび/またはBが、配列番号1として提供されるアデニル酸シクラーゼの天然に存在する配列と一致しないこと、その配列を起源としていないこと、または、そうでなくても、有意な配列同一性、たとえば、50%未満、45%未満、40%未満、35%未満、または30%未満の配列同一性を共有していないことを意味する。
本発明は、特に、抗原として使用するためのアデニル酸シクラーゼの断片に関する。アデニル酸シクラーゼは、1706アミノ酸長を有する多機能タンパク質である(Sebo et al, 2014)。これは、N末端の酵素的アデニル酸シクラーゼ(AC)ドメイン(残基1〜400)、疎水性ポア形成ドメイン(残基500〜700)、脂肪酸アシル修飾ドメイン(残基800〜1000)、カルシウム結合RTX(repeat-in-toxin)ドメイン(残基1000〜1600)、およびC末端、未切断分泌シグナルから構成される(図1)。C末端の1300残基は、溶血素(Hly)部分とも呼ばれる。Hly部分は、RTXドメイン内のインテグリン結合領域を介して宿主細胞上の補体受容体3に結合し、宿主細胞の細胞質内へのACドメインの移動を可能にし、その結果としてATPのcAMPへの無秩序な変換をもたらす。さらに、ポア形成ドメインは、オリゴマー化して、宿主細胞の膜に小さなカチオン選択的ポアを形成しうるため、結果として中程度の溶血が生じる。
A-X-B
を含むポリペプチドが提供されるが、式中、Xは配列番号2、3、4、15、16または17と少なくとも90%の同一性を有する配列からなるアミノ酸配列である;Aは、場合によって存在してもよいN末端アミノ酸配列である;Bは、場合によって存在してもよいC末端アミノ酸配列であるが、このAおよびBは、アデニル酸シクラーゼまたはその断片に由来しない。
本発明はまた、本発明のポリペプチドまたはハイブリッドポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。
本発明のポリペプチドは、免疫原性組成物中の活性成分として有用である。「免疫原性組成物」という用語は、概括的に言えば、組成物中に存在する抗原に対する免疫応答、たとえば抗体または細胞性免疫応答など、を引き起こすために投与することができる、任意の組成物を指す。したがって、本発明の組成物は免疫原性である。免疫原性組成物が、被験体から疾患を予防、改善、緩和、または除去する場合、そのような組成物は、ワクチンと称することができる。本発明によるワクチンは、予防的(すなわち、感染を予防する)であっても、治療的(すなわち、感染を治療する)であってもよいが、典型的には予防的である。本発明に関連して使用される「感染を予防する」という用語は、被験体の免疫系が(たとえば、ワクチン接種によって)プライミングを受けたことで、免疫応答が誘発され、感染が斥けられることを意味する。したがって、ワクチン接種を受けた被験体が感染する可能性はあるが、対照の被験体よりも感染を撃退する能力が高いことは、当業者には明白である。特定の実施形態において、免疫原性組成物はワクチンである。「抗原」という用語は、被験体に投与されると、その物質に対する免疫応答を引き起こす物質を指す。本発明の文脈において、本発明のポリペプチドは抗原である。好ましくは、抗原は、組換えDNA技術を用いて調製または製造された組換え抗原である。詳細には、免疫原性組成物は、被験体に投与されると、ボルデテラ属細菌、より詳細には配列番号1の断片、に対する免疫応答を引き起こす。特に、ボルデテラ属細菌に対する免疫応答は、防御的であり、すなわち、ボルデテラ属細菌、特に百日咳菌によって引き起こされる感染、疾患または定着を予防し、または減少させることができる。したがって、組成物は、薬剤として許容できるといえる。それらは通常、抗原のほかに成分を含むものであって、たとえば、それらは通常、1つもしくは複数の製薬基剤および/または添加剤を含む。組成物は、一般に、水性形態で哺乳動物に投与される。しかしながら、投与前には、組成物は非水性の形態であってもよい。たとえば、ワクチンの中には、水性形態で製造された後、充填して配布され、やはり水性の形で投与されるものもあるが、製造時に凍結乾燥され、使用時に水性形態に再構成されるワクチンもある。したがって、本発明の組成物は、凍結乾燥製剤のように、乾燥されていてもよい。
本発明はまた、上記のポリペプチド、核酸または免疫原性組成物の有効量を投与するステップを含む、哺乳動物において免疫応答を高めるための方法を提供する。免疫応答は、好ましくは防御的であり、好ましくは抗体および/または細胞性免疫を含む。この方法は、ブースター応答を上昇させることもできる。
本発明のポリペプチドは、他の抗原と組み合わせて使用することができる。したがって、本発明は、以下の組み合わせを含む免疫原性組成物を提供する:
(1)上記の本発明のポリペプチド;および
(2)ジフテリアトキソイド;破傷風トキソイド;1以上の百日咳抗原;B型肝炎ウイルス表面抗原;不活化ポリオウイルス抗原;インフルエンザ菌(Haemophilus influenzae)血清型B由来の莢膜糖抗原のコンジュゲート;1以上のRSV抗原、からなる群から選択される1以上の抗原。
本発明の実施形態において、アミノ酸配列:
A-X-B
を含むか、またはそれからなる、ポリペプチドが提供されるが、式中、Xは、配列番号15、16、または17との同一性を有する配列からなるアミノ酸配列であり;Aは場合によって存在してもよいN末端アミノ酸配列であり;Bは場合によって存在してもよいC末端アミノ酸配列である。詳細には、配列同一性のレベルは、90%から100%である。より詳細には、配列同一性のレベルは、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%または少なくとも99%である。さらにより詳細には、配列同一性レベルは100%である。詳細には、AおよびBは、アデニル酸シクラーゼ、特に配列番号1のアデニル酸シクラーゼ、またはその3つ以上連続するアミノ酸の断片に由来しない場合によって存在してもよい配列である。いくつかの実施形態において、新規断片は、配列番号15、16、17、18、19、20、21または22に対して配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
アミノ酸配列:
A-X-B
を含むポリペプチドであって、式中、Xは、配列番号15、16、または17と少なくとも99%の同一性を有する配列からなるアミノ酸配列であり;Aは場合によって存在してもよいN末端アミノ酸配列であり;Bは場合によって存在してもよいC末端アミノ酸配列である、ならびに式中AおよびBは、存在する場合、アデニル酸シクラーゼもしくはその断片に由来しない、前記ポリペプチド。
配列番号15、16、17、18、19または20と少なくとも99%の同一性を有する配列からなる、実施形態1のポリペプチド。
配列番号15、16、17、18、19または20と100%の同一性を有する配列からなる、実施形態2のポリペプチド。
Aおよび/またはBがヒスチジンタグである、実施形態1のポリペプチド。
配列番号21または22と少なくとも99%の同一性を有する配列からなる、実施形態4のポリペプチド。
配列番号21または22と100%の同一性を有する配列からなる、実施形態5のポリペプチド。
たとえば、アデニル酸シクラーゼ毒素中和アッセイによって、具体的には実施例に記載されるように測定される、配列番号1のアミノ酸配列を有するアデニル酸シクラーゼタンパク質に結合する抗体を含む、抗体応答を引き起こすことができる、実施形態1〜6のいずれか1つに記載のポリペプチド。
実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチドをコードする核酸。
実施形態8の核酸を含有する、および/または実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチドを発現する、細菌。
実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、または請求項8に記載の核酸を含有する、免疫原性組成物。
アジュバントを含有する、実施形態10に記載の免疫原性組成物。
治療に使用するための、実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、実施形態8に記載の核酸、または実施形態10〜13に記載の免疫原性組成物。
百日咳菌による疾患および/または感染の治療または予防に使用するための、実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、実施形態8に記載の核酸、または実施形態10〜13に記載の免疫原性組成物。
哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌によって引き起こされる疾患および/または感染を治療する方法であって、実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、実施形態8に記載の核酸、または実施形態10〜13に記載の免疫原性組成物の有効量を投与することを含む、方法。
哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌によって引き起こされる疾患および/または感染を予防する方法であって、実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、実施形態8に記載の核酸、または実施形態10〜13に記載の免疫原性組成物の有効量を投与することを含む、方法。
ポリペプチド、核酸または免疫原性組成物の有効量を投与することを含む、哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌による疾患および/または感染を治療または予防する方法に使用するための、実施形態1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、実施形態8に記載の核酸、または実施形態10〜13に記載の免疫原性組成物。
本発明のいくつかの実施形態において、アミノ酸配列:
A-X-B
からなるか、またはそれを含むポリペプチドが提供されるが、式中、Xは、配列番号2、3または4と同一性を有する配列からなるアミノ酸配列であり;Aは場合によって存在してもよいN末端アミノ酸配列であり;Bは場合によって存在してもよいC末端アミノ酸配列である。詳細には、配列同一性のレベルは、90%〜100%である。より詳細には、配列同一性のレベルは、少なくとも90%、少なくとも91%、少なくとも92%、少なくとも93%、少なくとも94%、少なくとも95%、少なくとも96%、少なくとも97%、少なくとも98%、または少なくとも99%である。 さらにより詳細には、配列同一性のレベルは100%である。具体的には、AおよびBは、アデニル酸シクラーゼ、特に配列番号1のアデニル酸シクラーゼ、またはその3つ以上連続するアミノ酸の断片に由来しない、場合によって存在してもよい配列である。
アミノ酸配列A-X-Bからなる単離されたポリペプチドであって、式中、AはN末端メチオニン残基であり、Xは配列番号2、3、および4からなる群から選択されるアミノ酸配列であり、Bは存在しない、前記の単離されたポリペプチド。
配列番号23と少なくとも95%の配列同一性を有する、単離されたポリペプチド。
配列番号23のアミノ酸配列からなる、単離されたポリペプチド。
配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7および配列番号8からなる群から選択されるアミノ酸配列からなる、単離されたポリペプチド。
(i) 実施形態17〜20のいずれか1つに記載の単離されたポリペプチド、(ii) ジフテリアトキソイド、(iii) 破傷風トキソイド、(iv) 無毒化百日咳毒素(百日咳トキソイド、または「PT」)、特に遺伝子的に無毒化された百日咳トキソイド(PTg)、(v) 繊維状赤血球凝集素(「FHA」)、および(vi) パータクチンを含む、免疫原性組成物。
(i) 実施形態17〜20のいずれか1つに記載の単離されたポリペプチド、(ii) ジフテリアトキソイド、(iii) 破傷風トキソイド、(iv) 無毒化百日咳毒素(百日咳トキソイド、または「PT」)、特に遺伝子的に無毒化された百日咳トキソイド(PTg)、(v) 繊維状赤血球凝集素(「FHA」)、(vi) パータクチン、および(vii) 不活化ポリオウイルス(「IPV」)を含む、免疫原性組成物。
(i) 実施形態17〜20のいずれか1つに記載の単離されたポリペプチド、(ii) ジフテリアトキソイド、(iii) 破傷風トキソイド、(iv) 無毒化百日咳毒素(百日咳トキソイド、または「PT」)、特に遺伝子的に無毒化された百日咳トキソイド(PTg)、(v) 繊維状赤血球凝集素(「FHA」)、(vi) パータクチン、(vii) 不活化ポリオウイルス(「IPV」)、および(viii) Hibコンジュゲートを含む、免疫原性組成物。
(i) 実施形態17〜20のいずれか1つに記載の単離されたポリペプチド、(ii) ジフテリアトキソイド、(iii) 破傷風トキソイド、(iv) 無毒化百日咳毒素(百日咳トキソイド、または「PT」)、特に遺伝子的に無毒化された百日咳トキソイド(PTg)、(v) 繊維状赤血球凝集素(「FHA」)、(vi) パータクチン、(vii) 不活化ポリオウイルス(「IPV」)、(viii) Hibコンジュゲート、および(ix) B型肝炎ウイルス表面抗原を含む、免疫原性組成物。
実施形態22〜25のいずれか1つに記載の免疫原性組成物であって、さらにアジュバント、たとえばAS01、アルミニウム塩アジュバント、および/またはTLRアゴニスト、たとえばTLR7アゴニスト、を追加して含む、前記免疫原性組成物。
アジュバントが、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、およびヒドロキシリン酸硫酸アルミニウムからなる群から選択される、アルミニウム塩アジュバントである、実施形態26に記載の免疫原性組成物。
単離されたポリペプチドが、配列番号23のアミノ酸配列からなる、実施形態22〜27のいずれか1つに記載の免疫原性組成物。
哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌によって引き起こされる疾患および/または感染を治療する方法であって、実施形態17〜20のいずれか1つに記載のポリペプチド、または実施形態22〜28のいずれか1つに記載の免疫原性組成物の、有効量を投与することを含む、前記方法。
哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌によって引き起こされる疾患および/または感染を予防する方法であって、実施形態17〜20のいずれか1つに記載のポリペプチド、または実施形態22〜28のいずれか1つに記載の免疫原性組成物の、有効量を投与することを含む、前記方法。
哺乳動物、たとえばヒトにおいて、百日咳菌によって引き起こされる疾患および/または感染を治療または予防する方法に使用するための、実施形態17〜20のいずれか1つに記載のポリペプチドであって、その方法が、有効量の前記ポリペプチド、または実施形態22〜28のいずれか1つに記載の免疫原性組成物を投与することを含む、前記ポリペプチド。
本発明の実施は、別段の指示がない限り、当分野の技術の範囲内で、化学、生化学、分子生物学、免疫学および薬学の従来の方法を採用する。そのような技術は、文献において十分に説明されている。たとえば、参考文献27-34などを参照されたい。
実施例1
ポリペプチドの調製
発現プラスミドおよび組換え株
目的とするタンパク質およびC末端のHisタグをコードする遺伝子を、標準的な手順によりNdeI/XhoI制限部位を用いてpET24b(+)発現ベクター(Novagen)にクローニングした。最終的な構築物は、大腸菌B834(DE3)株を、CaCl2処理細胞を用いた標準的な方法に従って適当な組換え発現ベクターで形質転換することにより作製した(Hanahan D. "Plasmid transformation by Simanis." Glover, D. M. (Ed), DNA cloning. IRL Press London. (1985): p. 109-135.).
B834(DE3):プロテアーゼ欠損およびメチオニン要求株。(DE3)という指示がある株は、IPTG誘導性T7 RNAポリメラーゼを含有するλプロファージに対して溶原性である。λDE3溶原菌は、pETベクターからタンパク質を発現させるように設計されている。また、この株はlonおよびompTプロテアーゼを欠損している。
遺伝子型:B834::DE3株、F- ompT hsdSB(rB - mB-) gal dcm met (DE3)
野生型アデニル酸シクラーゼの残基985から残基1681に対応する組換えRTX断片を下記のように調製した。このタンパク質は、ヒスチジンタグ(GGHHHHHH)が付けられており、分泌された。この配列は、NspA(髄膜炎菌(Neisseria meningitidis)の外膜タンパク質)に由来する異種シグナルペプチドを含有した。シグナルペプチド切断を最適化するために、このNspAに由来する2つの追加アミノ酸を含めた。
大腸菌形質転換体を寒天プレートから採取し、それを用いて、1%(w/v)グルコースおよびカナマイシン(50μg/mL)を添加したLBTブロスに、620 nmにおける光学密度(O.D620 nm)が0.1〜0.2の間となるように植菌した。培養物は37℃にて250rpmの攪拌速度で一晩インキュベートした。一晩培養した培養物を、カナマイシン(50μg/mL)含有LBT培地で1:20に希釈し、O.D.620nmが0.5〜0.8に達するまで、37℃、250rpmで増殖させた。
細菌ペレットを、プロテアーゼ阻害薬(Complete、EDTAなし)(Roche Applied Science, Indianapolis, IN)を添加した溶解バッファー(50mM Tris pH 8.3、300mM NaCl、10%グリセロール、2mM CaCl2、2mM Tris(2-カルボキシエチル)ホスフィン(TCEP))(Sigma, St. Louis, MO)に再懸濁した。細菌をフレンチプレス(3回)により1200 PSIで溶解し、4℃にて15 000gで60分間遠心分離することによりペレット化した。上清に硫酸アンモニウム(終濃度18%)を添加し、室温で20分間攪拌した。この溶液を室温にて15 000gで15分間遠心分離した。上清を、バッファーA(20mM HEPES pH 7.6、500mM NaCl、20mMイミダゾール、10%グリセロール、2mM CaCl2、2mM TCEP)であらかじめ平衡化した5mL His Trap HPl(GE Healthcare, Piscataway, NJ)上に、AKTA(商標)Avant精製システムを用いてロードした。その後、カラムを、5カラム容(CV)のバッファーAで洗浄し、次いで6CVのバッファーAで洗浄した。3CVのバッファーB(20mM HEPES pH 7.6、500mM NaCl、500mMイミダゾール、10%グリセロール、2mM CaCl2、2mM TCEP)を用いて、タンパク質を溶出した。目的とするタンパク質を含有する画分を合わせてプールし、SUPERDEX(商標)200 26/60(GE Healthcare, Piscataway, NJ)上にロードした。タンパク質を1.5CVのバッファーC B(20mM HEPES pH 7.6、150mM NaCl、500mMイミダゾール、5%グリセロール、2mM CaCl2、1mM TCEP)で溶出した。タンパク質の純度は、ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)により評価した。抗原を含む画分を選択し、SDS-PAGEによる純度に基づいて、合わせてプールした。最後に、タンパク質を無菌濾過し、-80℃で保存した。タンパク質濃度は、RC DC(商標)(還元剤および界面活性剤の共存可能な)タンパク質アッセイ(Biorad, Hercules, CA)を用いて測定した(図4)。
大腸菌形質転換体を寒天プレートから採取し、それを用いて、1%(w/v)グルコースおよびカナマイシン(50μg/mL)を添加したLBTブロスに、O.D.620nmが0.1〜0.2の間となるように植菌した。培養物を37℃にて一晩、250rpmの撹拌速度でインキュベートした。一晩培養した培養物を、カナマイシン(50μg/mL)を含有するLBT培地で1:20に希釈し、O.D.620nmが0.5〜0.8に達するまで37℃、250rpmで増殖させた。0.5〜0.8程度のO.D620nmにおいて、i)タンパク質の発現を1mMイソプロピルβ-D-1-チオガラクトピラノシドの添加によって誘導し、37℃、250rpmで3時間インキュベートした、ii) 1mMイソプロピルβ-D-1-チオガラクトピラノシドの添加によって組換えタンパク質の発現を誘導する前に、培養物を冷却し、16℃にて250rpmで一晩インキュベートした。3時間/一晩(約16時間)インキュベートした後、O.D620nmを評価し、培養物を14,000rpmで15分間遠心分離し、ペレットを別々に-20℃で凍結した。
細菌ペレットを、プロテアーゼ阻害薬(Complete、EDTAなし)(Roche Applied Science, Indianapolis, IN)および125ユニット/mLのBenzonase(Sigma, St. Louis, MO)を添加した溶解バッファー(20mM HEPES pH 7.6、500mM NaCl、10%グリセロール、20mMイミダゾール、5mM MgCl2(Sigma, St. Louis, MO)に再懸濁した。細菌をフレンチプレス(3回)により1200 PSIで溶解し、4℃にて15,000gで30分間遠心分離することによりペレット化した。上清は、バッファーA(20mM HEPES pH 7.6、500mM NaCl、20mM イミダゾール、10%グリセロール)であらかじめ平衡化した5mLのHis Trap HP(GE Healthcare, Piscataway, NJ)上にAKTA(商標)Avant精製システムを用いてロードした。次いで、カラムを10カラム容(CV)のバッファーAで洗浄した。3CVのバッファーB(20mM HEPES pH 7.6、500mM NaCl、500mMイミダゾール、10%グリセロール)を用いてタンパク質を溶出した。目的のタンパク質を含む画分を合わせてプールし、SUPERDEX(商標)75 26/60(GE Healthcare, Piscataway, NJ)上にロードした。タンパク質を1.5CVのバッファーC B(20mM HEPES pH 7.6、150mM NaCl、5%グリセロール)で溶出した。タンパク質の純度は、ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)により評価した。抗原を含む画分を選択し、SDS-PAGEによる純度に基づいて、合わせてプールした。最後に、タンパク質を無菌濾過し、-80℃で保存した。タンパク質濃度は、RC DC(商標)(還元剤および界面活性剤の共存可能な)タンパク質アッセイ(Biorad, Hercules, CA)を用いて測定した。配列番号21の精製結果を図11に示す。配列番号22の精製結果を図13に示す。
Al(OH)3またはAS01を含有するRTXポリペプチドの製剤
6つの製剤を調製した:
製剤1 RTX 500μg/mL+AS01E Ca 2mM(フォールドされたRTX)
製剤2 RTX 50μg/mL+AS01E Ca 2mM(フォールドされたRTX)
製剤3 RTX 500μg/mL+AS01E Ca 2mM+5mM EGTA(アンフォールドされたRTX)
製剤4 RTX 50μg/mL+AS01E Ca 2mM+5mM EGTA(アンフォールドされたRTX)
製剤5 RTX 500μg/mL+ Al(OH)3 Ca 2mM
製剤6 RTX 50μg/mL+ Al(OH)3 Ca 2mM
[注: RTXはRTXポリペプチド断片のことを指す]
各製剤は以下の成分を含有した:
Al(OH)3を含有する製剤の上清中にポリペプチド断片が存在しないことから、ポリペプチド断片がよく吸着していると考えられる(図2)。これらの結果は、NanoDSFおよびUPLC-SECで確認された。
AS01の粒径は維持され、すべての条件において溶血は見られなかった。
AS01またはAS01バッファーの存在下において、断片ピーク(NanoDSF)は維持される。このデータは、アデニル酸シクラーゼ断片の二次構造が維持されることを確認する(フォールドされた状態)。EGTAの存在下においては、AS01の存在下であっても断片ピークが消失し、典型的なTmが観察される。このデータは、断片の二次構造がCa++の存在なしには維持されないことを示している。Al(OH)3とともに製剤すると、ポリペプチド断片はその表面に吸着するため、断片ピークの消失が観察される。
結果を図3に示す。
RTX断片のフォールド/アンフォールド状態における免疫原性の評価
15匹の雌マウス(BALB/cOlaHsd、6週齢)の6群に、表1に示すように、1日目、14日目、および28日目に各ワクチン製剤50μLを用いて筋肉内に免疫接種した。28日目(14PII)に部分的な採血を行い、42日目(14PIII)に最終的な採血を行った。表1:
アデニル酸シクラーゼ毒素の細胞毒性中和アッセイは、ACTの濃度に若干の変更を加えたほかは、Ebyら(Clinical and Vaccine Immunology, January 2017 Volume 24 Issue 1、1-10ページ)に記載のように行った:
RTX断片とDTaPワクチンとの組み合わせ
本研究で評価されたすべての無細胞百日咳(PaもしくはaPと称される)ワクチンは、グラクソ・スミスクライン・バイオロジカルズ社(GSK, Rixensart, Belgium)製であった。4つのグループで使用された1回用量あたりの異なる百日咳菌抗原成分の量を以下の表3に示す:
すべての実験およびアッセイは、European Directive 2010/63/EUおよびグラクソ・スミスクライン・バイオロジカルズの動物のケア、福祉、および取り扱いに関する方針に従って、GSKの研究所(Rixensart, Belgium)で実施された。動物は、水および維持飼料を自由に利用することができた。AAALAC(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)のグローバルエンリッチメントプログラムに従って、環境は巣材を含み(Envirodry)、社会的居住が適用された。
百日咳トキソイド(PT)、繊維状赤血球凝集素(FHA)、パータクチン(PRN)およびアデニル酸シクラーゼ(ACT)
2回目の免疫接種から7日後(28日目-チャレンジ前日)に全マウスの血清を個別に採取し、以下のプロトコールに従って抗PT、抗FHA、および抗PRN IgG抗体の存在を検査した:
炭酸-重炭酸バッファー(50mM)中のFHA(2μg/mL)、PT(2μg/mL)またはPRN(3μg/mL)を用いて96ウェルプレートをコーティングし、4℃にて一晩インキュベートした。PBS-BSA 1%バッファーによる飽和ステップの後、マウス血清をPBS-BSA 0.2% Tween 0.05%で1/100に希釈し、プレートからウェル内で段階希釈した(12回希釈、1段階1/2)。ペルオキシダーゼと結合した抗マウスIgGを添加した(最終希釈率1/3000)。ペルオキシダーゼ基質(OPDA)を添加した後、呈色反応を観察し、1M塩酸により停止させた後、分光光度法により測定した(波長:490〜620nm)。各プレート上で検査された各血清および添加された標準物質について、OD値と希釈率との関係に4パラメータロジスティック曲線を当てはめた(Softmaxpro)。これにより、それぞれのサンプル力価の誘導をSTD力価で表すことができた。
炭酸-重炭酸バッファー(50mM)中のACT(0.3μg/mL)を用いて96ウェルプレートをコーティングし、4℃で一晩インキュベートした。バッファーTR020(飽和バッファーELISA - NBC Serum 4% V/V)による飽和ステップの後、マウス血清をTR020で1/100に希釈し、プレートからウェル内で段階希釈した(12回希釈、1段階1/2)。ペルオキシダーゼと結合した抗マウスIgGを添加した(最終希釈率1/1000)。ペルオキシダーゼ基質(OPDA)を添加した後、呈色反応を観察し、1M塩酸により停止させた後、分光光度法により測定した(波長:490〜620nm)。各プレート上で検査された各血清および添加された標準物質について、ODと希釈率との関係に4パラメータロジスティック曲線を当てはめた(Softmaxpro)。これにより、それぞれのサンプル力価の誘導をSTD力価で表すことができた。
毒素の中和アッセイは、J774.A1マクロファージ様細胞に対するACTの細胞毒性に基づく。D-MEM中のJ774.A1細胞(50μl中250,000細胞)を96ウェルプレートの各ウェルに播種し、37℃、5%CO2で一晩放置して付着させた。翌日、mAb 3D1(Kerafast)および採取した血清のプールをD-MEMで段階希釈し、細胞に移す前にACTと混合し、ACTの最終濃度を0.8または2または3μg/mLとした。37℃にて2時間インキュベートした後、Cell Counting Kit-8(CCK-8, Dojindo)を用いて、黄色のフォルマザン色素を生成する、生細胞内の脱水素酵素による水溶性テトラゾリウム塩(WST-8)の還元に基づく比色分析により、細胞生存率を測定した。各プレートで検査された各標準物質(mAb 3D1)およびプール血清について、ODと希釈率との関係に4パラメータロジスティック曲線を当てはめた(Softmaxpro)。力価は、各プレートの標準物質の「中央」から導き出される「中心点」によって表された。
コロニー形成単位(CFU)数の平均値の分布は対数正規分布であると仮定する。統計的手法は、異質分散モデルを用いた、2つの因子(群および日)を含むlog10値の分散分析(ANOVA)とし、すなわち、異なるレベルの要因の組み合わせについては、同一の分散を仮定しなかった。製剤と用量との間の相互作用は、モデルに含めなかった(仮定:有意でない相互作用)。探索的分析として、調整は行わない。このモデルは、幾何平均およびその95%CI、ならびに幾何平均比およびその95%CIの推定に用いられる。
Claims (17)
- アミノ酸配列:
A-X-B
を含むポリペプチドであって、
式中、Xは、配列番号2、3、または4と少なくとも99%の同一性を有する配列からなるアミノ酸配列であり;Aは場合によって存在してもよいN末端アミノ酸配列であり;Bは場合によって存在してもよいC末端アミノ酸配列であり、式中AおよびBは、アデニル酸シクラーゼもしくはその断片に由来しない、ポリペプチド。 - AがN末端メチオニン残基であり、Xが配列番号2、3および4からなる群から選択されるアミノ酸配列であり、Bが存在しない、請求項1に記載のポリペプチド。
- 配列番号23と99%の同一性を有する配列からなる、請求項1に記載のポリペプチド。
- Aおよび/またはBがヒスチジンタグである、請求項1に記載のポリペプチド。
- 配列番号5、6、7、または8と少なくとも99%の同一性を有する配列からなる、請求項4に記載のポリペプチド。
- 配列番号5、6、7、または8と100%の同一性を有する配列からなる、請求項5に記載のポリペプチド。
- たとえばアデニル酸シクラーゼ毒素中和アッセイによって測定される、配列番号1のアミノ酸配列を有するアデニル酸シクラーゼタンパク質に結合する抗体を含む、抗体応答を引き起こすことができる、請求項1〜6のいずれか1つに記載のポリペプチド。
- 請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチドをコードする核酸。
- 請求項8に記載の核酸を含有する、および/または、請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチドを発現する、細菌。
- 請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、または請求項8に記載の核酸を含有する、免疫原性組成物。
- アジュバントを含有する、請求項10に記載の免疫原性組成物。
- 2価金属塩を含有する、請求項10または11に記載の免疫原性組成物。
- 2価金属塩がカルシウム塩、たとえば塩化カルシウムである、請求項12に記載の免疫原性組成物。
- 治療に使用するための、請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、請求項8に記載の核酸、または請求項10〜13のいずれか1つに記載の免疫原性組成物。
- 百日咳菌(Bordetella pertussis)によって引き起こされる疾患および/または感染の、治療または予防に使用するための、請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、請求項8に記載の核酸、または請求項10〜13のいずれか1つに記載の免疫原性組成物。
- 有効な量の、請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、請求項8に記載の核酸、または請求項10〜13のいずれか1つに記載の免疫原性組成物を投与することを含む、哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌による疾患および/または感染を治療または予防する方法。
- 哺乳動物、たとえばヒトにおいて百日咳菌による疾患および/または感染を治療または予防する方法に使用するための、請求項1〜7のいずれか1つに記載のポリペプチド、請求項8に記載の核酸、または請求項10〜13のいずれか1つに記載の免疫原性組成物。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016094438A1 (en) * | 2014-12-08 | 2016-06-16 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Bordetella adenylate cyclase toxin vaccines and neutralizing antibodies |
JP2017507181A (ja) * | 2014-02-24 | 2017-03-16 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | Uspa2タンパク質構築物およびそれらの使用 |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE8205892D0 (sv) | 1982-10-18 | 1982-10-18 | Bror Morein | Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin |
US5916588A (en) | 1984-04-12 | 1999-06-29 | The Liposome Company, Inc. | Peptide-containing liposomes, immunogenic liposomes and methods of preparation and use |
US6090406A (en) | 1984-04-12 | 2000-07-18 | The Liposome Company, Inc. | Potentiation of immune responses with liposomal adjuvants |
US5057540A (en) | 1987-05-29 | 1991-10-15 | Cambridge Biotech Corporation | Saponin adjuvant |
AU627226B2 (en) | 1988-08-25 | 1992-08-20 | Liposome Company, Inc., The | Influenza vaccine and novel adjuvants |
HU212924B (en) | 1989-05-25 | 1996-12-30 | Chiron Corp | Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion |
EP0671948B1 (en) | 1992-06-25 | 1997-08-13 | SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS s.a. | Vaccine composition containing adjuvants |
ES2109685T5 (es) | 1993-03-23 | 2005-09-01 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Composiciones para vacunas que contienen monofosforil-lipido a 3-o-desacilado. |
GB9326253D0 (en) | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
AUPM873294A0 (en) | 1994-10-12 | 1994-11-03 | Csl Limited | Saponin preparations and use thereof in iscoms |
UA56132C2 (uk) | 1995-04-25 | 2003-05-15 | Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. | Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини |
GB9513261D0 (en) | 1995-06-29 | 1995-09-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
US5707829A (en) | 1995-08-11 | 1998-01-13 | Genetics Institute, Inc. | DNA sequences and secreted proteins encoded thereby |
GB9712347D0 (en) | 1997-06-14 | 1997-08-13 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
AU1145699A (en) | 1997-09-05 | 1999-03-22 | Smithkline Beecham Biologicals (Sa) | Oil in water emulsions containing saponins |
GB9817052D0 (en) | 1998-08-05 | 1998-09-30 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
FR2805544B1 (fr) * | 2000-02-28 | 2004-07-16 | Pasteur Institut | Adenylcyclase recombinante et procede de tri de molecules a activite proteolytique utilisant cette adenylcyclase |
GB0025171D0 (en) * | 2000-10-13 | 2000-11-29 | Smithkline Beecham Biolog | Novel compounds |
AU2004277342B2 (en) * | 2003-10-02 | 2010-12-16 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Pertussis antigens and use thereof in vaccination |
US7417133B2 (en) * | 2004-02-27 | 2008-08-26 | Institut Pasteur | Methods for obtaining thermostable enzymes, DNA polymerase I variants from Thermus aquaticus having new catalytic activities, methods for obtaining the same, and applications of the same |
US7786261B2 (en) * | 2004-09-02 | 2010-08-31 | National Research Council Of Canada | Coiled-coil fusion proteins comprising cell receptor domains |
DE202009005370U1 (de) * | 2009-04-09 | 2009-07-30 | Genzyme Virotech Gmbh | Bestätigungstest für den serologischen Bordetella pertussis-Nachweis mit 1. der zusätzlichen Möglichkeit einer Differenzierung zwischen Impfantikörpern und nativen Infektionen 2. zusätzlicher Nachweisfunktion zur Erkennung von Mycoplasma pneumoniae-Infektionen |
EP2689786A1 (en) * | 2012-07-23 | 2014-01-29 | Genticel | HPV/CYAA-based chimeric proteins and their uses in the induction of immune responses against HPV infection and HPV-induced disorders |
US11207378B2 (en) * | 2016-04-04 | 2021-12-28 | University Of Virginia Patent Foundation | Compositions for inhibiting formation of and/or disrupting bacterial biofilms and methods of use therefor |
GB201616904D0 (en) * | 2016-10-05 | 2016-11-16 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccine |
-
2019
- 2019-08-22 CA CA3109889A patent/CA3109889A1/en active Pending
- 2019-08-22 WO PCT/EP2019/072487 patent/WO2020039033A1/en unknown
- 2019-08-22 CN CN201980070363.3A patent/CN112912097A/zh active Pending
- 2019-08-22 US US17/270,328 patent/US20210220462A1/en not_active Abandoned
- 2019-08-22 JP JP2021509998A patent/JP2021534761A/ja active Pending
- 2019-08-22 EP EP19762331.7A patent/EP3840770A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017507181A (ja) * | 2014-02-24 | 2017-03-16 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | Uspa2タンパク質構築物およびそれらの使用 |
WO2016094438A1 (en) * | 2014-12-08 | 2016-06-16 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Bordetella adenylate cyclase toxin vaccines and neutralizing antibodies |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
MALIK, A.A., ET AL.: ""Structural Characterization of Humanized Nanobodies with Neutralizing Activity against the Bordetel", TOXINS, vol. 8, no. 4, JPN6023025869, 1 April 2016 (2016-04-01), pages 99 - 13, ISSN: 0005092462 * |
WANG, X., ET AL.: ""The Bordetella Adenylate Cyclase Repeat-in-Toxin (RTX) Domain Is Immunodominant and Elicits Neutral", J. BIOL. CHEM., vol. 290, no. 6, JPN6023025870, 6 February 2015 (2015-02-06), pages 3576 - 3591, XP055518735, ISSN: 0005092461, DOI: 10.1074/jbc.M114.585281 * |
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