JP2021504407A

JP2021504407A - 脱毛の予防または治療用組成物

Info

Publication number: JP2021504407A
Application number: JP2020529401A
Authority: JP
Inventors: ソクキム、ポム; ホキム、チョン
Original assignee: グッドティーセルズ、インコーポレイテッド
Priority date: 2017-12-01
Filing date: 2018-12-03
Publication date: 2021-02-15
Also published as: WO2019108047A2; WO2019108047A3; US20200352839A1; US11890364B2; KR20220099934A; KR20200131792A; KR102416354B1; CN111465611B; KR20190065178A; EP3719032A2; CN111465611A; EP3719032A4

Abstract

本発明は、脱毛の予防または治療用組成物に関し、標的部位である脱毛部位の毛乳頭細胞内に効果的に伝達されて、前記脱毛部位で高く発現するサイトカインまたは酵素によって前記組成物内に含まれた化合物から薬物が分離されて効果的に活性を示すことにより、最終的には育毛および／または発毛を促進することができる。【選択図】図４

Description

本発明は、脱毛の予防または治療用組成物に関する。

脱毛は遺伝的要因が最も主な原因として作用するが、最近、社会的ストレスの増加に伴い、環境汚染およびインスタント食品などの西欧化された食習慣、頻繁なパーマと染色、間違った頭皮管理によって脱毛人口が次第に増えつつある。

毛髪は、成長期（Ａｎａｇｅｎ）、退化期（Ｃａｔａｇｅｎ）、休止期（Ｔｅｌｏｇｅｎ）の周期を回って発毛と脱毛を繰り返しながら維持されている。詳細には、毛髪を成長させる成長期（ａｎａｇｅｎ）、成長を終えて毛球部が縮小する時期である退化期（ｃａｔａｇｅｎ）、毛乳頭が活動を止めて毛髪を頭皮に留まらせる時期である休止期（ｔａｌｏｇｅｎ）、毛乳頭が活動を始めるか、または新しい毛髪を発生させて古い毛髪を脱毛させる時期である発生期に分けられる。

毛髪の成長期は男性３〜５年、女性が４〜６年程度であり、その後、退化期３０〜４５日程度、休止期３〜４ヶ月程度が経過して自然と脱毛する。そして、休止期の終わりになると、新しい毛髪が生成される発生期が始まる。

脱毛は正常な現象であるが、正常な人に成長期状態の毛髪が多いのに対し、通常脱毛症（Ａｌｏｐｅｃｉａ）の人には休止期状態の毛髪が多くて目に見える脱毛現象が現れる。

脱毛症を示す人たちの特徴は毛髪の小型化にある。脱毛が進むほど成長期の期間が短くなり、これによって毛髪はますます小型化する。したがって、脱毛の治療のためには、休止期状態の毛包を成長期に早く進入できるようにし、短くなった成長期を増やすことが重要である。

男性型脱毛症は、男性の性徴を現し、思春期に筋肉の発達、男性器官の発達などに作用するホルモンであるテストステロン（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）という男性ホルモンによって現れる現象で、このテストステロンが５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅ）という酵素によってより強いホルモンであるジヒドロテストステロン（Ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ：ＤＨＴ）に変わると、このホルモンが毛包に作用して毛包を成長期段階から退化期段階に誘導して脱毛が起こるようにする。したがって、このような原因による脱毛症を治療するために、５−アルファ還元酵素によるＤＨＴの生成を抑制する方法が主に使用される。

円形脱毛症は、自己免疫疾患や精神的ストレス、遺伝的素因によって発生する。円形または卵円形の脱毛が起こり、頭部白癬や抜毛癖が生じる特徴がある。このような円形脱毛症は、アンドロゲン性脱毛症とは根本的に原因が異なり、治療法も異なっていて、副腎皮質ホルモン剤を処理する方法を使用する。

このように多様で複雑な脱毛の原因について、現在まで知られた脱毛防止製品には、有効成分として血液循環促進、男性ホルモン作用抑制、毛根機能強化などを目的とする成分などが市中で製品として販売されているが、効果の面で目立った効果を有するものは未だにない状態であり、ほとんど副作用の問題が提起されたりする。

本発明の目的は、脱毛の予防または治療用の多様な用途の組成物を提供しようとする。

本発明の他の目的は、脱毛を予防または治療する方法を提供しようとする。

本発明の他の目的および利点は、下記の発明の詳細な説明、請求の範囲および図面によってより明確になる。

本発明の一実施形態によれば、下記化学式１で表される化合物に関する：
前記化学式１において、
Ｐは、タンパク質運搬ドメイン（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ；ＰＴＤ）であり、
Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸を含み、
Ｌ_１は、リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）であり、
Ｍは、直接結合であるか、下記化学式２で表されるリンカーであり、
Ａは、脱毛の予防または治療用薬物であり、
前記化学式２において、
＊は、結合がなされる部分であり、
Ｘは、切断部位（ｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅ）であり、
Ｌ_２は、リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）である。

本発明において、前記「タンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）」は、７〜５０個のアミノ酸からなる、疎水性が強く短いペプチドであり、１２０ｋＤａ以上の分子量のタンパク質のみならず、ＤＮＡまたはＲＮＡを細胞内に伝達できるドメインを意味する。

本発明において、前記タンパク質運搬ドメインは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択され、あるいはＰＣＴ公開特許ＷＯ２０１６／０２８０３６Ａ１または米国公開特許第２０１４−０１８６３７９号に開示された巨大分子運搬ドメイン（ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ）を使用することができるが、これに限定されるものではなく、当該技術分野で一般的に使用されるか、市中で販売されるタンパク質運搬ドメインであれば制限なく使用可能である。好ましくは、配列番号１で表されるＣＴＰ、配列番号２で表されるＨｐｈ−１、または配列番号３で表されるＴａｔであってもよい。

本明細書の用語「１１Ｒ」および「７Ｒ」は、アルギニン（ａｒｇｉｎｉｎｅ）がそれぞれ１１個および７個から構成されたペプチドを意味する。

本発明において、前記Ａは、脱毛の予防または治療用薬物としては、例えば、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択されるが、好ましくは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であってもよい。

本発明において、前記Ｌ_１は、前記Ｐのタンパク質運搬ドメインと前記Ａの薬物（Ｍが直接結合の場合）、あるいは前記Ｘの切断部位（Ｍが化学式２で表されるリンカーの場合）を連結する役割を果たす。本発明において、前記Ｌ_１の構造は、下記化学式３または４で表されてもよい：
前記化学式３および４において、＊は、結合がなされる部分である。

本発明において、前記Ｌ_１のリンカーは、前記タンパク質運搬ドメインのＣ−ターミナル（Ｃ−ｔｅｒｍｉｎａｌ）アミノ酸の残基と連結されてもよい。

また、本発明において、前記Ｌ_１のリンカーが前記薬物に連結される場合、前記Ｌ_１のリンカーのカルボニル基は、前記脱毛の予防または治療用薬物のアミン基（−ＮＨ_２）、ヒドロキシ基（−ＯＨ）またはシアノ基（−ＣＮ）に連結されてもよく、好ましくは、図１に示すように、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）またはミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）のアミン基（−ＮＨ_２）に連結されるか、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）またはアルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）のヒドロキシ基（−ＯＨ）に連結されるか、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）またはルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）のシアノ基（−ＣＮ）に連結されてもよい。

さらに、本発明において、前記Ｌ_１のリンカーは、Ｘの切断部位（ｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅ）に連結されてもよい。この時、前記Ｘは、生体内または標的部位、例えば、脱毛部位の毛乳頭細胞で切断されるペプチド部位を意味するもので、サイトカイン、プロテアーゼまたはペプチダーゼの認識部位であってもよい。例えば、前記切断部位は、生体内、特に毛乳頭細胞に存在する切断サイトカインであるインターロイキン−１ｂ（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ｂｅｔａ）のプロフォーム（ｐｒｏｆｏｒｍ）、カスパーゼ（ｃａｓｐａｓｅ；例えば、ｃａｓｐａｓｅ−１、ｃａｓｐａｓｅ−４、ｃａｓｐａｓｅ−５）または基質タンパク質分解酵素（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ、ＭＭＰｓ；例えば、ＭＭＰ１、ＭＭＰ２、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１０、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＭＭＰ１５、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１８、ＭＭＰ１９、ＭＭ２０、ＰＭＭ２１、ＰＭＭ２３Ａ、ＰＭＭ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８など）の認識または切断部位であってもよく、好ましくは、脱毛部位で高く発現するカスパーゼ−１またはインターロイキン−１ｂの認識部位であってもよいし、より好ましくは、配列番号４で表されるペプチド（ＹＶＡＤ）であってもよい。

本発明において、前記Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸を含むことができる。すなわち、本発明において、前記Ｐのタンパク質運搬ドメインと前記Ｌ_１のリンカーは、直接連結されてもよく、あるいは前記Ｐのタンパク質運搬ドメインと前記Ｌ_１のリンカーは、その間に含まれる１つ以上のアミノ酸を介して連結されてもよい。ここで、前記アミノ酸は、２１種のアミノ酸の中から選択されるが、好ましくは、少なくとも１つのシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）を含むことができる。

本発明の一例として、前記Ｐのタンパク質運搬ドメインと前記Ｌ_１のリンカーとの間に含まれる１つ以上のシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）を含む場合、前記システインのチオール基（−ＳＨ）は、前記Ｌ_１リンカーに連結されてもよい。

本発明において、前記Ｍは、直接結合であるか、前記化学式２で表されるリンカーであってもよい。すなわち、本発明において、前記Ｌ_１のリンカーは、前記Ａの薬物に直接連結されてもよく、あるいは前記Ｌ_１のリンカーと前記Ａの薬物は、前記化学式２で表されるリンカーによって連結されてもよい。

本発明において、前記Ｍが前記化学式２で表されるリンカーの場合、本発明において、前記Ｌ_２のリンカーは、前記Ｘの切断部位と前記Ａの薬物を連結する役割を果たす。本発明において、前記Ｌ_２の構造は、下記化学式５で表されてもよい：
前記化学式５において、＊は、結合がなされる部分である。

本発明において、前記Ｌ_２のリンカーは、前記脱毛の予防または治療用薬物のアミン基（−ＮＨ_２）、ヒドロキシ基（−ＯＨ）またはシアノ基（−ＣＮ）に連結されてもよく、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）またはミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）のアミン基（−ＮＨ_２）に連結されるか、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）またはアルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）のヒドロキシ基（−ＯＨ）に連結されるか、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）またはルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）のアミン基（−ＮＨ_２）に連結されてもよい。

本発明において、前記化学式１で表される化合物は、下記化学式６または７で表される化合物であってもよい：
前記化学式６および７において、
前記Ｐは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されるタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）であり、好ましくは、ＣＴＰ（配列番号１）、Ｈｐｈ−１（配列番号２）またはＴａｔ（配列番号３）であり、
前記Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸であり、好ましくは、１つ以上のシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）であり、
前記Ａは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択されるが、好ましくは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であってもよい。

本発明において、前記化学式１で表される化合物は、下記化学式８〜１１のうちのいずれか１つで表される化合物であってもよい：
前記化学式８〜１１において、
前記Ｐは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されるタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）であり、好ましくは、ＣＴＰ（配列番号１）、Ｈｐｈ−１（配列番号２）またはＴａｔ（配列番号３）であり、
前記Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸であり、好ましくは、１つ以上のシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）である。

本発明において、前記化学式１で表される化合物は、下記化学式１２〜１５のうちのいずれか１つで表される化合物であってもよい：
前記化学式１２〜１５において、
前記Ｐは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されるタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）であり、好ましくは、ＣＴＰ（配列番号１）、Ｈｐｈ−１（配列番号２）またはＴａｔ（配列番号３）であり、
前記Ｃｙｓは、システイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）である。

本発明の他の実施形態によれば、前記化学式１で表される化合物の製造方法に関し、
脱毛の予防または治療用薬物、下記化学式１６で表される６−マレイミドカプロン酸（６−Ｍａｌｅｉｍｉｄｏｃａｐｒｏｎｉｃａｃｉｄ）およびタンパク質運搬ドメインを反応させるステップを含むことができる。

本発明において、前記脱毛の予防または治療用薬物は、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択されるが、好ましくは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であってもよい。

本発明において、前記タンパク質運搬ドメインを反応させる前に、前記タンパク質運搬ドメインのＣ−ターミナルに１つ以上のアミノ酸を追加的に延長させるステップを行うことができる。ここで、前記アミノ酸は、２１種のアミノ酸の中から選択されるが、好ましくは、少なくとも１つのシステインを追加的に延長させることができる。

本発明において、前記脱毛の予防または治療用薬物、前記化学式１６で表される６−マレイミドカプロン酸（６−Ｍａｌｅｉｍｉｄｏｃａｐｒｏｎｉｃａｃｉｄ）および前記タンパク質運搬ドメインを反応させる順序は特に限定せず、前記薬物と前記６−マレイミドカプロン酸とを先に反応させた後に前記タンパク質運搬ドメインを反応させるか、あるいは前記タンパク質運搬ドメインと前記６−マレイミドカプロン酸とを反応させた後に前記薬物を反応させることができる。

また、本発明では、下記化学式１７で表される化合物、配列番号５で表されるペプチド（ＹＶＡ）を追加的に添加して反応させることができる：

前記化学式１７において、
前記Ｒ_１は、ヒドロキシ基またはハロゲンである。ここで、前記ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素であってもよく、好ましくは、塩素であってもよい。

また、本発明では、前記化学式１７で表される化合物を反応させる前に、前記化学式１７で表される化合物と、下記化学式１８で表される化合物とを反応させるステップを先に行うことができる：
前記化学式１８において、
前記Ｒ_２は、水素またはカルボキシ保護基であってもよく、ここで、前記カルボキシ保護基は、ＤＭＢ、Ｂｎ、アリル、ＰｆＰ、Ｍｅ、ＰＭＢ、ＭＥＭまたはｔ−Ｂｕであってもよいが、これに限定されるものではない。

本発明において、前記脱毛の予防または治療用薬物、前記化学式１６で表される化合物、配列番号５（ＹＶＡ）で表されるペプチド、前記化学式１７で表される化合物、前記化学式１８で表される化合物およびタンパク質運搬ドメインを反応させる順序は特に限定しない。

本発明の製造方法の一例は、
（１）前記化学式１７で表される化合物と、前記化学式１８で表される化合物とを反応させるステップと、
（２）脱毛の予防または治療用薬物と、前記（１）ステップで得られた化合物とを反応させるステップと、
（３）前記配列番号５で表されるペプチド（ＹＶＡ）と、前記化学式１６で表される化合物とを反応させるステップと、
（４）前記（２）ステップで得られた化合物と、前記（３）ステップで得られた化合物とを反応させるステップと、
（５）前記（４）ステップで得られた化合物と、タンパク質運搬ドメインとを反応させるステップとを含むことができる。

本発明において、前記（２）および（３）ステップの順序は特に限定せず、（２）ステップの実行後に（３）ステップを行うことができ、（３）ステップの実行後に（２）ステップを行ってもよいし、あるいは（２）ステップと（３）ステップを同時に行ってもよい。

本発明の前記（１）ステップでは、前記化学式１７で表される化合物と、前記化学式１８で表される化合物とを反応させて、下記化学式１９で表される化合物を製造することができる：
前記化学式１９において、
前記Ｒ_１は、ヒドロキシ基またはハロゲンであり、前記ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素であり、好ましくは、塩素であり、
前記Ｒ_２は、水素またはカルボキシ保護基であり、ここで、前記カルボキシ保護基は、ＤＭＢ、Ｂｎ、アリル、ＰｆＰ、Ｍｅ、ＰＭＢ、ＭＥＭまたはｔ−Ｂｕであってもよいが、これに限定されるものではない。

本発明の前記（２）ステップにおいて、前記脱毛の予防または治療用薬物は、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であることが好ましい。

本発明において、前記（２）ステップの際に、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）のアミン基と、前記ステップ（１）で製造された前記化学式１９で表される化合物のカルボキシ基とが反応して、アミド結合を形成することができる。

本発明において、前記（３）ステップの際に、前記配列番号５で表されるペプチド（ＹＶＡ）のＮ−ターミナルのアミン基（−ＮＨ_２）と、前記化学式１６で表される化合物のカルボキシ基（−ＣＯＯＨ）とが反応して、アミド結合を形成することができる。

本発明において、前記（４）ステップは、溶媒の存在下で行われ、この時、前記溶媒としては、ヘキサフルオロホスフェートベンゾトリアゾールテトラメチルウロニウム（ＨｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅＢｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅＴｅｔｒａｍｅｔｈｙｌＵｒｏｎｉｕｍ；ＨＢＴＵ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（Ｎ，Ｎ−Ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ；ＤＩＥＡ）およびジメチルホルムアミド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ；ＤＭＦ）からなる群より選択された１種以上を使用することができるが、これに限定されるものではない。

本発明において、前記（４）ステップの際に、前記（２）ステップで得られた化合物のアミン基（−ＮＨ_２）と、前記（３）ステップで得られた化合物のカルボキシ基（−ＣＯＯＨ）とが反応して、アミド結合を形成することができる。

本発明において、前記化学式１８のＲ_２がカルボキシ保護基の場合、前記（３）ステップの後、選択的にカルボキシ保護基を除去するステップを追加的に行うことができる。ここで、前記カルボキシ保護基を除去するためにはトリフルオロ酢酸（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃａｃｉｄ；ＴＦＡ）を使用することができるが、当該技術分野でカルボキシ保護基を除去するために使用される方法であれば制限なく使用可能である。

本発明において、前記（５）ステップを行う前に、前記タンパク質運搬ドメインのＣ−ターミナルに１つ以上のアミノ酸を追加的に延長させることができる。ここで、前記アミノ酸は、２１種のアミノ酸の中から選択されるが、好ましくは、少なくとも１つのシステインを追加的に延長させることができる。

本発明の前記（５）ステップにおいて、前記タンパク質運搬ドメインは、ＣＴＰ（配列番号１）、Ｈｐｈ−１（配列番号２）またはＴａｔ（配列番号３）であることが好ましい。

本発明において、前記（５）ステップの際に、前記タンパク質運搬ドメインは、前記（４）ステップで得られた化合物に対して０．５〜５のモル比率、好ましくは１〜３のモル比率で追加される。

また、本発明において、前記（５）ステップは、溶媒の存在下で行われ、この時、前記溶媒としては、ジメチルスルホキシド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ；ＤＭＳＯ）およびＮ−メチルモルホリン（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｍｏｒｐｈｏｌｉｎｅ；ＮＭＭ）のうちの少なくとも１つを使用することができるが、これに限定されるものではない。

さらに、本発明において、前記（５）ステップは、２０〜２５℃の常温で６時間〜４８時間、好ましくは、１２時間〜２４時間反応させることができる。

しかし、本発明の製造方法は、前記（１）〜（５）ステップに限定されるものではなく、他の例としては、前記薬物と前記化学式１９で表される化合物とを反応させた後、前記配列番号５（ＹＶＡ）で表されるポリペプチドを反応させ、次いで、前記化学式１６で表される化合物を反応させた後、前記タンパク質運搬ドメインを反応させることができる。さらに他の例としては、前記タンパク質運搬ドメインを前記化学式１６で表される化合物と反応させた後、前記配列番号５で表されるペプチド（ＹＶＡ）を反応させ、次いで、前記化学式１９で表される化合物を反応させた後、前記薬物と反応させることができる。

本発明のさらに他の実施形態によれば、本発明の化学式１で表される化合物を有効成分として含む脱毛の予防、改善または治療用組成物に関する。

一般的に、薬物をタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）と接合させる場合、構造的変更などの理由で活性に影響を受ける。したがって、接合される物質と、接合される物質において特定の接合される部位が非常に重要である。ところで、本発明で提供する化合物は、特定の脱毛の予防または治療用薬物とタンパク質運搬ドメインがリンカーで連結されることにより、前記薬物とタンパク質運搬ドメインの構造的変形を最小化し、これによって、活性のある薬物が標的部位に伝達できるようにする。さらに、本発明では、前記タンパク質運搬ドメインと前記薬物との間に前記切断部位をさらに含むことにより、前記タンパク質運搬ドメインによって標的脱毛部位の毛乳頭細胞に移動した前記薬物が、前記脱毛部位で過活性化されたカスパーゼ−１（ｃａｓｐａｓｅ−１）またはインターロイキン−１ｂ（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ｂｅｔａ）プロフォームによって薬物伝達体から切断されて活性を示すことができるだけではなく、その過程で前記カスパーゼ−１はプロインターロイキン−１ｂがＩＬ−１ｂに変換させることを間接的に阻害することにより、炎症反応を追加的に抑制することができる。

本発明の組成物は、脱毛の予防、改善または治療効果を高めるために、前記化学式１で表される化合物のほかにも、脱毛の予防または治療用薬物を追加的にさらに含んでもよい。ここで、前記脱毛の予防または治療用薬物としては、例えば、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択される１種以上であってもよいが、その他、公知の脱毛の予防または治療用薬物であれば制限なく含まれる。

本発明の組成物は、脱毛の予防、改善または治療効果を高めるために、前記化学式１で表される化合物のほかにも、公知の抗炎症剤を追加的にさらに含んでもよい。ここで、前記抗炎症剤としては、プレドニゾロンなどのステロイド性製剤または非ステロイド性製剤などがあり、これらの薬学的有効量は当業界で公知であり、症状の程度、クロロゲン酸との併用投与などの諸条件を考慮して処置医がその量を調節することができる。このように公知の抗炎症剤を併用投与することにより、クロロゲン酸またはその誘導体によって公知の抗炎症剤の副作用などを軽減させることができるだけでなく、相乗的な治療効果も期待することができる。これらの公知の抗炎症剤は、場合によって、複合製剤または同時投与されるか、または本発明のクロロゲン酸と時間の間隔をおいて投与される。

本発明の前記組成物は、薬学的組成物、化粧料組成物または食品組成物として使用できる。

本発明のさらに他の実施形態によれば、目的の個体に本発明の組成物を有効量で投与するステップを含む、脱毛の予防、改善または治療方法に関する。

本発明において、前記「目的の個体」とは、脱毛が発病したか、発病の可能性が高い個体を意味する。

本発明において、「予防」は、本発明の組成物を用いて脱毛の症状を遮断するか、脱毛症状の進行を抑制または遅延させるすべての行為であれば制限なく含むことができる。

本発明において、「治療」および「改善」は、本発明の組成物を用いて脱毛症状が好転するか有利になるすべての行為であれば制限なく含むことができる。

本発明において、前記薬学的組成物は、カプセル、錠剤、顆粒、注射剤、軟膏剤、粉末または飲料形態であることを特徴とし、前記薬学的組成物は、ヒトを対象とすることを特徴とすることができる。

本発明の薬学的組成物はこれらに限定されるものではないが、それぞれ通常の方法によって、散剤、顆粒剤、カプセル、錠剤、水性懸濁液などの経口型剤形、外用剤、坐剤および滅菌注射溶液の形態に剤形化して使用できる。本発明の薬学的組成物は、薬剤的に許容可能な担体を含むことができる。薬剤学的に許容される担体は、経口投与時には、結合剤、潤沢剤、崩壊剤、賦形剤、可溶化剤、分散剤、安定化剤、懸濁化剤、色素、香料などを使用することができ、注射剤の場合には、緩衝剤、保存剤、無痛化剤、可溶化剤、等張剤、安定化剤などを混合して使用することができ、局所投与用の場合には、基剤、賦形剤、潤滑剤、保存剤などを使用することができる。本発明の薬学的組成物の剤形は、前述のような薬剤学的に許容される担体と混合して多様に製造できる。例えば、経口投与時には、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル（ｅｌｉｘｉｒ）、サスペンション、シロップ、ウエハなどの形態に製造することができ、注射剤の場合には、単位投薬アンプルまたは複数回投薬の形態で製造することができる。その他、溶液、懸濁液、錠剤、カプセル、徐放型製剤などに剤形化することができる。

一方、製剤化に適した担体、賦形剤および希釈剤の例としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アカシアガム、アルギネート、ゼラチン、カルシウムホスフェート、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレートまたは鉱物油などが使用できる。また、充填剤、抗凝集剤、潤滑剤、湿潤剤、香料、乳化剤、防腐剤などを追加的に含むことができる。

本発明に係る薬学的組成物の投与経路はこれらに限定されるものではないが、口腔、静脈内、筋肉内、動脈内、骨髓内、硬膜内、心臓内、経皮、皮下、腹腔内、鼻腔内、腸管、局所、舌下または直腸が含まれる。経口または非経口投下が好ましい。

本発明において、「非経口」は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、硬膜内、病巣内および頭蓋骨内注射または注入技術を含む。本発明の薬学的組成物はさらに、直腸投与のための坐剤の形態で投与される。

本発明の薬学的組成物は、使用された特定化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康、性別、定式、投与時間、投与経路、排出率、薬物配合および予防または治療される特定疾患の重度を含む様々な要因によって多様に変化可能であり、前記薬学的組成物の投与量は、患者の状態、体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路および期間によって異なるが、当業者によって適宜選択可能であり、１日０．０００１〜５０ｍｇ／ｋｇまたは０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇで投与することができる。投与は、１日に１回投与してもよく、数回分けて投与してもよい。前記投与量は、いかなる面でも本発明の範囲を限定するものではない。本発明に係る医薬組成物は、丸剤、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁剤に剤形化される。

本発明において、化粧料組成物は、化粧水、栄養ローション、栄養エッセンス、マッサージクリーム、美容入浴添加剤、ボディローション、ボディミルク、バスオイル、ベビーオイル、ベビーパウダー、シャワージェル、シャワークリーム、サンスクリーンローション、サンスクリーンクリーム、日焼けクリーム、スキンローション、スキンクリーム、紫外線遮断用化粧品、クレンジングミルク、脱毛剤｛化粧用｝、フェイスおよびボディローション、フェイスおよびボディクリーム、皮膚美白クリーム、ハンドローション、ヘアローション、化粧用クリーム、ジャスミンオイル、入浴石けん、水石けん、美容石けん、シャンプー、手洗浄剤（ハンドクリーナー）、薬用石けん｛非医療用｝、クリーム石けん、フェイシャルウォッシュ、全身洗浄剤、頭皮洗浄剤、ヘアリンス、化粧石けん、歯美白用ゲル、歯磨き粉などの形態に製造できる。このために、本発明の組成物は、化粧料組成物の製造に通常使用する溶媒や、適切な担体、賦形剤または希釈剤をさらに含んでもよい。

本発明の化粧料組成物内にさらに追加される溶媒の種類は特に限定しないが、例えば、水、食塩水、ＤＭＳＯまたはこれらの組み合わせを使用することができ、担体、賦形剤または希釈剤としては、精製水、オイル、ワックス、脂肪酸、脂肪酸アルコール、脂肪酸エステル、界面活性剤、吸湿剤（ｈｕｍｅｃｔａｎｔ）、増粘剤、抗酸化剤、粘度安定化剤、キレート剤、緩衝剤、低級アルコールなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。また、必要に応じて、美白剤、保湿剤、ビタミン、紫外線遮断剤、香水、染料，抗生剤、抗バクテリア剤、抗真菌剤を含むことができる。

前記オイルとしては、水素化植物性油、ヒマシ油、綿実油、オリーブ油、パーム核油、ホホバ油、アボカド油が用いられ、ワックスとしては、密蝋、鯨蝋、カルナウバ、カンデリラ、モンテイン、セレシン、液体パラフィン、ラノリンが用いられる。

脂肪酸としては、ステアリン酸、リノール酸、リノレン酸、オレイン酸が用いられ、脂肪酸アルコールとしては、セチルアルコール、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、パンテノール、ラノリンアルコール、ステアリルアルコール、ヘキサデカノールが用いられ、脂肪酸エステルとしては、イソプロピルミリステート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレートが用いられる。界面活性剤としては、当業界で知られた陽イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤および非イオン性界面活性剤が使用可能であり、できる限り天産物由来の界面活性剤が好ましい。

その他にも、化粧品分野で広く知られた吸湿剤、増粘剤、抗酸化剤などを含むことができ、これらの種類と量は、当業界で公知のものによる。

本発明の食品組成物は、各種食品類、例えば、飲料、ガム、お茶、ビタミン複合剤、粉末、顆粒、錠剤、カプセル、お菓子、餅、パンなどの形態に製造できる。本発明の食品組成物は、毒性および副作用がほとんどない植物抽出物から構成されたものであるので、予防の目的で長期間服用時にも安心して使用することができる。

本発明のｍｉＲＮＡ、発現ベクターまたは形質転換体が食品組成物に含まれる時、その量は全重量の０．１〜５０％の比率で添加することができる。

ここで、前記食品組成物が飲料形態に製造される場合、指示された比率で前記食品組成物を含有するほかに特別な限定はなく、通常の飲料と同じく様々な香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含有することができる。すなわち、天然炭水化物としてブドウ糖などのモノサッカライド、果糖などのジサッカライド、スクロースなどの、およびポリサッカライド、デキストリン、シクロデキストリンなどのような通常の糖およびキシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールなどを含むことができる。前記香味剤としては、天然香味剤（ソーマチン、ステビア抽出物（例えば、レバウディオサイドＡ、グリチルリチンなど）および合成香味剤（サッカリン、アスパルテームなど）などが挙げられる。

その他、本発明の食品組成物は、様々な営養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤および天然風味剤などの風味剤、着色剤、ペクチン酸およびその塩、アルギン酸およびその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などを含有することができる。

このような成分は、独立してまたは組み合わせて使用可能である。このような添加剤の比率はそれほど重要ではないが、本発明の組成物１００重量部あたり０．１〜約５０重量部の範囲で選択されることが一般的である。

本発明で提供する化合物は、皮膚に伝達されるもので、特に、標的部位である脱毛部位の毛乳頭細胞内に効果的に伝達されて、前記脱毛部位で高く発現するサイトカインまたは酵素によって、前記組成物内に含まれた化合物から薬物が分離されて効果的に活性を示すことにより、最終的には育毛および／または発毛を促進することができる。

本発明の化合物に使用できる脱毛の予防または治療用薬物の例示構造であって、リンカー（Ｌ_１またはＬ_２）と連結できる官能基を示すものである。実験例１において、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）と、実施例７で得られたＥ７化合物（ＣＴＰ−Ｃａｓ１−ＦＩＮＡ）に対してカスパーゼ−１（ｃａｓｐａｓｅ−１）を処理した後、ＨＰＬＣを分析した結果を示すものである。実験例１において、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）と、実施例１で得られたＥ１化合物（ＣＴＰ−ＦＩＮＡ）に対してカスパーゼ−１を処理した後、ＨＰＬＣを分析した結果を示すものである。実験例２において、実施例１、２、７および８によって製造された化合物の５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅｅｎｚｙｍｅ）の阻害能を確認した結果を示すものである。実験例２において、実施例３、４、９および１０によって製造された化合物の５−アルファ還元酵素の阻害能を確認した結果を示すものである。実験例２において、実施例５、６、１１および１２によって製造された化合物の５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅｅｎｚｙｍｅ）の阻害能を確認した結果を示すものである。

本発明は、下記化学式６または７で表される化合物を有効成分として含む脱毛の予防または治療用薬学的組成物に関する：

前記化学式６および７において、
前記Ｐは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されるタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）であり、好ましくは、ＣＴＰ（配列番号１）、Ｈｐｈ−１（配列番号２）またはＴａｔ（配列番号３）であり、
前記Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸であり、好ましくは、１つ以上のシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）であり、
前記Ａは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択されるが、好ましくは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であってもよい。

以下、実施例を通じて本発明をさらに詳細に説明しようとする。これらの実施例は単に本発明をより具体的に説明するためのものであって、本発明の要旨によって本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されないことは当業界における通常の知識を有する者にとって自明であろう。

実施例
［準備例１］
タンパク質運搬ドメインとして配列番号１で表されるＣＴＰ、配列番号２で表されるＨｐｈ−１、配列番号３で表されるＴａｔを用意した後、それぞれのＣ−ターミナルにシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）アミノ酸を追加的に延長して、それぞれ配列番号６、７、８で表されるペプチドを製造した。

［実施例１］ＣＴＰ−ｆｉｎａの製造
フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）を含む下記化学式Ａ１で表される化合物を、ＤＭＳＯおよびＮＭＭの存在下、前記準備例１で製造した配列番号６で表されるペプチド（ＣＴＰ＋システイン）と１：１のモル比率で混合した後、常温で１２時間反応させて、化学式Ｅ１で表される最終化合物を製造した。下記化学式Ｅ１において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

＜反応式１＞

［実施例２］ＣＴＰ−ｄｕｔａの製造
デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）を含む下記化学式Ａ２で表される化合物を、ＤＭＳＯおよびＮＭＭの存在下、前記準備例１で製造した配列番号６で表されるペプチド（ＣＴＰ＋システイン）と１：１のモル比率で混合した後、常温で１２時間反応させて、化学式Ｅ２で表される最終化合物を製造した。下記化学式Ｅ２において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

＜反応式２＞

［実施例３］ｈｐｈ−１−ｆｉｎａの製造
前記実施例１において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号７で表されるペプチド（Ｈｐｈ−１＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例１と同様の方法によって下記化学式Ｅ３で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ３において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例４］ｈｐｈ−１−ｄｕｔａの製造
前記実施例２において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号７で表されるペプチド（Ｈｐｈ−１＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例１と同様の方法によって下記化学式Ｅ４で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ４において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例５］Ｔａｔ−ｆｉｎａの製造
前記実施例２において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号８で表されるペプチド（Ｔａｔ＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例１と同様の方法によって下記化学式Ｅ５で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ５において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例６］Ｔａｔ−ｄｕｔａの製造
前記実施例２において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号８で表されるペプチド（Ｔａｔ＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例１と同様の方法によって下記化学式Ｅ６で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ６において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［準備例２］
下記化学式Ｘ１で表される（Ｓ）−２−アミノ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−オキソブタン酸（（Ｓ）−２−ａｍｉｎｏ−４−（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙ）−４−ｏｘｏｂｕｔａｎｏｉｃａｃｉｄ）と、下記化学式Ｘ２で表される４−アミノベンジルカルボノクロリデート（４−ａｍｉｎｏｂｅｎｚｙｌｃａｒｂｏｎｏｃｈｌｏｒｉｄａｔｅ）とを反応させて、下記化学式Ｂ１で表される化合物を製造した。
＜反応式３＞

［準備例３］
下記化学式Ｂ１で表される化合物と、下記化学式Ｘ３で表されるフィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）とを、ＮａＨの存在下で反応させて、下記化学式Ｍ１で表される中間体化合物を製造した。

＜反応式４＞

［準備例４］
下記化学式Ｘ４で表される６−マレイミドカプロン酸（６−Ｍａｌｅｉｍｉｄｏｃａｐｒｏｎｉｃａｃｉｄ）と、下記化学式Ｘ５で表される化合物（配列番号５で表されるペプチド）とを反応させて、下記化学式Ｍ２で表される中間体化合物を製造した。

＜反応式５＞

［実施例７］ＣＴＰ−ｃａｓ１−ｆｉｎａの製造
１．ステップ１
下記反応式６のように、ＨＢＴＵ、ＤＩＥＡおよびＤＭＦの存在下、化学式Ｍ１で表される中間体化合物と、化学式Ｍ２で表される中間体化合物とを反応させて、下記化学式Ａ３の化合物を製造した。

＜反応式６＞

２．ステップ２
前記ステップ１で得られた化学式Ａ３で表される化合物を、３０％ＴＦＡ下で反応させて、カルボキシ保護基であるｔｅｒｔ−ブチル基を除去して、化学式Ａ４で表される化合物を製造した。

＜反応式７＞

３．ステップ３
下記反応式８のように、ＤＭＳＯおよびＮＭＭの存在下、前記ステップ２で得られた化学式Ａ４で表される化合物と、前記準備例１で得られた配列番号６で表されるペプチドとを１：１のモル比率で混合した後、常温で１２時間反応させて、化学式Ｅ７で表される最終化合物を製造した。下記化学式Ｅ７において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

＜反応式８＞

［準備例５］
下記化学式Ｂ１で表される化合物と、下記化学式Ｘ４で表されるデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）とを、ＮａＨの存在下で反応させて、下記化学式Ｍ３で表される中間体化合物を製造した。

＜反応式９＞

［実施例８］ＣＴＰ−ｃａｓ１−ｄｕｔａの製造
前記実施例７において、化学式Ｍ１で表される化合物の代わりに、前記準備例５で得られた化学式Ｍ３で表される化合物を用いたことを除けば、前記実施例７と同様の方法で進行させて、下記化学式Ｅ８で表される最終化合物を製造した。下記化学式Ｅ８において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例９］ｈｐｈ−１−ｃａｓ１−ｆｉｎａの製造
前記実施例７のステップ３において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号７で表されるペプチド（Ｈｐｈ−１＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例７と同様の方法によって下記化学式Ｅ９で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ９において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例１０］ｈｐｈ−１−ｃａｓ１−ｄｕｔａの製造
前記実施例８において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号７で表されるペプチド（Ｈｐｈ−１＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例８と同様の方法によって下記化学式Ｅ１０で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ１０において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例１１］Ｔａｔ−ｃａｓ１−ｆｉｎａの製造
前記実施例７のステップ３において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号８で表されるペプチド（Ｔａｔ＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例７と同様の方法によって下記化学式Ｅ１１で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ１１において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実施例１２］Ｔａｔ−ｃａｓ１−ｄｕｔａの製造
前記実施例８において、タンパク質運搬ドメインとして用いられた配列番号６で表されるペプチドの代わりに、配列番号８で表されるペプチド（Ｔａｔ＋システイン）を用いたことを除けば、前記実施例８と同様の方法によって下記化学式Ｅ１２で表される化合物を製造した。下記化学式Ｅ１２において、「−Ｃｙｓ−Ｓ−」は、システイン（Ｃｙｓ）内に含まれたチオール基がピロリジン−２，５−ジオン（ｐｙｒｒｏｌｉｄｉｎｅ−２，５−ｄｉｏｎｅ）に連結された構造を意味する。

［実験例１］ＨＰＬＣ確認
前記実施例１で得られたＥ１化合物、前記実施例７で得られたＥ７化合物およびフィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）を用意した後、カスパーゼ−１（ｃａｓｐａｓｅ−１）を処理した場合において高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で分析し、その結果は図２および３に示した。

図２および３に示すように、ＨＰＬＣ分析の結果、本発明の化合物を確認することができ、特に、図２に示すように、切断部位を含む前記Ｅ７化合物にカスパーゼ−１を処理すると、フィナステリドとタンパク質運搬ドメインの２つの部分に切断されたことを確認することができた。

［実験例２］脱毛治療効果の確認
本発明に係る化合物の脱毛治療効果を実験するために、脱毛を誘発すると知られた５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅｅｎｚｙｍｅ）の阻害能を確認した。

具体的には、培養されたＬＮＣａＰｃｅｌｌ（ａｎｄｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅ）をトリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ）処理し、１５００ｒｐｍで２分間遠心分離して細胞を回収した。ＰＢＳで３回洗浄（ｗａｓｈｉｎｇ）した後、ピペットで細胞を均一に混ぜた後、４℃（ｉｃｅ）で超音波処理（ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ）を３回行った。この後、４℃で３０００ｒｐｍで１５分間遠心分離して細胞残骸（ｃｅｌｌｄｅｂｒｉｓ）を除去した。上澄液（ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ）を５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅｅｎｚｙｍｅ）として用いた。各試料を５０ｕＬずつ、ＥＬＩＳＡキット用９６ウェルに入れて、前記実施例１〜１２で製造された化合物を入れて、室温で３０分間培養した。Ｃｕｓａｂｉｏの５−アルファ還元酵素ＥＬＩＳＡキットで提供する１００ｕＬのコンジュゲート（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）または２ｎＭのテストステロン（ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）を処理した後、３７℃で１時間培養した。洗浄溶液で計５回洗浄し、前記ＥＬＩＳＡキットで提供する基質Ａ（ｓｕｂｓｔｒａｔｅＡ）５０ｕＬ、基質Ｂ（ｓｕｂｓｔｒａｔｅＢ）５０ｕＬを添加した。この後、ホイルで包んで常温で１５分間培養した後、５０ｕＬの停止溶液（ｓｔｏｐｓｏｌｕｔｉｏｎ）を添加してから混合した。この後、マイクロプレートリーダー（ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅｒｅａｄｅｒ）で４５０ｎｍ波長における吸光度（ＯｐｔｉｃａｌＤｅｎｓｉｔｉｙ；Ｏ．Ｄ．）を測定して、その結果を図４〜６に示した。図４は、タンパク質運搬ドメインとしてＣＴＰを用いて得られた化合物（実施例１、２、７および８）の結果であり、図５は、タンパク質運搬ドメインとしてＨｐｈ−１を用いて得られた化合物（実施例３、４、９および１０）の結果であり、図６は、タンパク質運搬ドメインとしてＴａｔを用いて得られた化合物（実施例５、６、１１および１２）の結果である。

図４〜６に示すように、本発明に係る化合物を処理した場合、脱毛を誘発すると知られた５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅｅｎｚｙｍｅ）の活性が効果的に阻害されることを確認することができた。特に、タンパク質運搬ドメインと薬物との間に切断部位を含む化合物が、これを含まない化合物に比べて５−アルファ還元酵素（５−ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｔａｓｅｅｎｚｙｍｅ）の阻害能にさらに優れていることを確認することができた。

本発明で合成された化合物は、タンパク質運搬ドメインによって脱毛治療用薬物を投与した場合、より皮膚および細胞透過性に優れて真皮層細胞まで薬物が効果的に伝達される。さらに、標的組織に伝達された化合物は、脱毛部位で多く発現するインターロイキン−１ｂまたはカスパーゼ酵素などによって切断部位が切断されて薬物が効果的に活性を示すことができる。

以上、本発明の特定の部分を詳細に記述したが、当業界における通常の知識を有する者にとってこのような具体的な記述は単に好ましい実施形態に過ぎず、よって、本発明の範囲が制限されるわけではない点は明らかである。したがって、本発明の実質的な範囲は、添付した請求項とその等価物によって定義される。

本発明は、脱毛を効果的に予防または治療する方法に関する。

配列リストフリーテキスト

配列番号1:CTP配列
YGRRARRRRRR
配列番号2:Hph-1配列
YARVRRRGPRR
配列番号3:Tat配列
YGRKKRRQRRR
配列番号4:切断部位
YVAD
配列番号5:
YVA
配列番号6:CTP配列+システイン延長
YGRRARRRRRRC
配列番号7:Hph-1配列+システイン延長
YARVRRRGPRRC
配列番号8:Tat配列+システイン延長
YGRKKRRQRRRC

Claims

下記化学式１で表される化合物を有効成分として含む脱毛の予防または治療用薬学的組成物：
前記化学式１において、
Ｐは、タンパク質運搬ドメイン（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ；ＰＴＤ）であり、
Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸を含み、
Ｌ_１は、リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）であり、
Ｍは、直接結合であるか、下記化学式２で表されるリンカーであり、
Ａは、脱毛の予防または治療用薬物であり、
前記化学式２において、
＊は、結合がなされる部分であり、
Ｘは、切断部位（ｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅ）であり、
Ｌ_２は、リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）である。
前記タンパク質運搬ドメインは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されたものである、請求項１に記載の薬学的組成物。
前記Ａは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択されるものである、請求項１に記載の薬学的組成物。
前記Ｍは、１つ以上のシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）である、請求項１に記載の薬学的組成物。
前記Ｌ_１は、下記化学式３または４で表される、請求項１に記載の薬学的組成物：
前記化学式３および４において、＊は、結合がなされる部分である。
前記Ｌ_１のリンカーは、前記脱毛の予防または治療用薬物のアミン基（−ＮＨ_２）、ヒドロキシ基（−ＯＨ）またはシアノ基（−ＣＮ）に連結されるものである、請求項３に記載の薬学的組成物。
前記脱毛の予防または治療用薬物は、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であり、前記Ｌ_１のリンカーは、前記フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）のアミン基（−ＮＨ_２）に連結されるものである、請求項６に記載の薬学的組成物。
前記Ｘの切断部位（ｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅ）は、インターロイキン−１ｂ（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ｂｅｔａ）のプロフォーム（ｐｒｏｆｏｒｍ）、カスパーゼ（ｃａｓｐａｓｅ）または基質タンパク質分解酵素（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ、ＭＭＰｓ）によって認識または切断される部位である、請求項１に記載の薬学的組成物。
前記Ｘの切断部位（ｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅ）は、配列番号４で表されるペプチドである、請求項１に記載の薬学的組成物。
前記Ｌ_２は、下記化学式５で表される、請求項１に記載の薬学的組成物：
前記化学式５において、＊は、結合がなされる部分である。
前記Ｌ_２のリンカーは、前記脱毛の予防または治療用薬物のアミン基（−ＮＨ_２）、ヒドロキシ基（−ＯＨ）またはシアノ基（−ＣＮ）に連結されるものである、請求項３に記載の薬学的組成物。
前記脱毛の予防または治療用薬物は、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）であり、前記Ｌ_２のリンカーは、前記フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）のアミン基（−ＮＨ_２）に連結されるものである、請求項１１に記載の薬学的組成物。
前記化学式１で表される化合物は、下記化学式６または７で表されるものである、請求項１に記載の薬学的組成物：
前記化学式６および７において、
Ｐは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されるタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）であり、
前記Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸であり、
前記Ａは、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）またはデュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）である。
前記化学式１で表される化合物は、下記化学式８〜１１のうちのいずれか１つで表される、請求項１に記載の薬学的組成物：
前記化学式８〜１１において、
Ｐは、Ｈｐｈ−１、Ｍｐｈ−１、Ｓｉｍ−２、Ｔａｔ、ＶＰ２２、Ａｎｔｐ（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）、Ｐｅｐ−１（ｐｅｐｔｉｄｅ−１）、ＰＴＤ−５（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ−５）、１１Ｒ、７ＲおよびＣＴＰ（ｃｙｔｏｐｌａｍｉｃｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐｅｐｔｉｄｅ）から構成された群より選択されるタンパク質運搬ドメイン（ＰＴＤ）であり、
前記Ｗは、１つ以上のシステイン（ｃｙｓｔｅｉｎｅ）である。
前記薬学的組成物は、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、デュタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）、ミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、エピステリド（ｅｐｉｓｔｅｒｉｄｅ）、アルファトラジオール（ａｌｆａｔｒａｄｉｏｌ）、トファシチニブ（ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ）およびルキソリチニブ（ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ）からなる群より選択される１種以上をさらに含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
前記薬学的組成物は、抗炎症剤をさらに含む、請求項１に記載の薬学的組成物。
目的の個体に下記化学式１で表される化合物を有効量で投与するステップを含む、脱毛の予防または治療方法：
前記化学式１において、
Ｐは、タンパク質運搬ドメイン（ｐｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｄｏｍａｉｎ；ＰＴＤ）であり、
Ｗは、直接結合であるか、１つ以上のアミノ酸を含み、
Ｌ_１は、リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）であり、
Ｍは、直接結合であるか、下記化学式２で表されるリンカーであり、
Ａは、脱毛の予防または治療用薬物であり、
前記化学式２において、
＊は、結合がなされる部分であり、
Ｘは、切断部位（ｃｌｅａｖａｇｅｓｉｔｅ）であり、
Ｌ_２は、リンカー（ｌｉｎｋｅｒ）である。