JP2021121604A - 生分解性化合物および活性剤を含む脂質粒子を用いた、活性剤送達方法 - Google Patents
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Abstract
Description
P−[X−R−Y−R’−Q]2 (1)
(式中、
Pは、1つ以上のエーテル結合を主鎖に含むアルキレンオキシであり、
Xは、それぞれ独立に、三級アミン構造を含む2価連結基であり、
Rは、それぞれ独立にC1〜C6アルキレンであり、
Yは、それぞれ独立に、単結合、エーテル結合、カルボン酸エステル結合、チオカルボン酸エステル結合、チオエステル結合、アミド結合、カルバメート結合、および尿素結合からなる群から選ばれる2価連結基であり、
R’は、それぞれ独立に単結合またはC1〜C6アルキレンであり、
Qは、それぞれ独立に、脂溶性ビタミン残基、ステロール残基、またはC12〜C22脂肪族炭化水素基である)
で表され、
構造中に、カルボン酸エステル結合、チオカルボン酸エステル結合、ジチオカルボン酸結合、アミド結合、カルバメート結合、カルボキシジオキシ結合、および尿素結合からなる群から選ばれる生分解性基を少なくとも一つ含むことを特徴とするものである。
本実施形態において、〜を用いて数値範囲を示した場合、特に限定されない限り、これらは両方の端点を含み、単位は共通である。例えば、10〜25モル%は、10モル%以上25モル%以下を意味する。
実施形態による化合物は、リポソームを構成する脂質として適切な化合物である。そして、その疎水部に生分解性基を有しており、生分解性脂質化合物として機能するものである。そして、生体に適用した場合には細胞内でのタンパク質の結合が抑制され、毒性が低いという特徴を有している。また、リポソームがこの脂質化合物によって構成されると、リポソームの表面が非カチオン性となるため、細胞への障害性が低くなり、核酸等の活性剤の導入率が高くなる。
P−[X−R−Y−R’−Q]2 (1)
(式中、
Pは、1つ以上のエーテル結合を主鎖に含むアルキレンオキシであり、
Xは、それぞれ独立にメチルイミノ、1,2−ピロリジンジイル、および1,3−ピロリジンジイルからなる群から選ばれる2価連結基であり、
Rは、それぞれ独立にC1〜C6アルキレンであり、
Yは、それぞれ独立に、単結合、エーテル結合、カルボン酸エステル結合、チオカルボン酸エステル結合、チオエステル結合、アミド結合、カルバメート結合、および尿素結合からなる群から選ばれる2価連結基であり、
R’は、それぞれ独立に単結合またはC1〜C6アルキレンであり、
Qは、それぞれ独立に、脂溶性ビタミン残基、ステロール残基、またはC12〜C22脂肪族炭化水素基である)
−(CH2)2−O−(CH2)2−
−(CH2)2−O−(CH2)2−O−(CH2)2−
−(CH2)2−O−O−(CH2)2−
−(CH2)3−O−(CH2)2−O−(CH2)3−
−(CH2)2−O−CH2−O−(CH2)2−
このような構造を有することによって。立体構造の自由度が高くなる。この化合物をリポソームの構成に用いた場合、エーテル結合に含まれる酸素が、組み合わされる核酸等と水素結合を形成するため、核酸等の内包量が多くなる。
実施形態に寄れば脂質粒子が提供される。この脂質粒子の代表例はリポソームであるが、それに限定されず、核酸等と複合したリポプレックスなども包含される。またリポソームは、一枚膜リポソーム、多重層膜リポソームのいずれであってもよい。
1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)、
1,2−ステアロイル−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DSPE)、
1,2−ジパルミトイル−sn−グリセロ−3−ホスファチジルコリン(DPPC)、
1−パルミトイル−2−オレオイル−sn−グリセロ−3−ホスファチジルコリン(POPC)、
1,2−ジ−O−オクタデシル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)、
1,2−ジオレオイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(DODAP)、
1,2−ジミリストイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(14:0 DAP)、
1,2−ジパルミトイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(16:0 DAP)、
1,2−ジステアロイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(18:0 DAP)、
N−(4−カルボキシベンジル)−N,N−ジメチル−2,3−ビス(オレオイロキシ)プロパン(DOBAQ)、
1,2−ジオレオイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTAP)、
1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホクロリン(DOPC)、
1,2−ジリノレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホクロリン(DLPC)、
1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホ−L−セリン(DOPS)、および
コレステロール
などを好ましいものとして挙げることができる。これらは、リポソーム等の膜を形成する機能に加えて、膜の融合効果も発揮することができる。
式(1)で表される脂質化合物を10〜75モル%、
膜を形成する脂質を25〜80モル%、
凝集を低減できる脂質を、1〜10モル%
で配合されるのが一般的であり、好ましくは
式(1)で表される脂質化合物を10〜50モル%、
膜を形成する脂質を47.5〜80モル%、
凝集を低減できる脂質を、1〜10モル%、例えば2.5モル%
である。ここで、式(1)の化合物と、膜を形成する脂質とのバランスが重要であり、一方だけが存在しても活性剤の導入率が十分高くならない。このため、式(1)の化合物と、膜を形成する脂質との配合比は、モル数基準で1:0.5〜1:9であることが好ましく、1:1〜1:2であることがより好ましい。
実施形態による脂質粒子は、従来知られている任意の方法で製造することができる。脂質粒子やリポソームを製造する方法としては、バンガム法、有機溶媒抽出法、界面活性剤除去法、凍結融解法などが知られており、それらを採用することもできる。また、例えば、式(1)で表される化合物、さらには膜を形成する脂質と、凝集を低減できる脂質とを、アルコールなどの有機溶媒に導入し、水性緩衝液を添加することで自然発生的に脂質粒子を形成させることもできる。この水性緩衝液に活性剤を組み合わせておくことで、脂質粒子に活性剤を導入することが可能である。
[組成物]
本実施形態による脂質粒子は、組成物として用いることができる。例えば、本実施形態の脂質粒子と担体とを含む組成物が提供される。このような組成物は医薬用途にも適用できるものである。
該キットには、核酸導入の際に使用する試薬を組み合わせることができる。
実施形態による脂質粒子を医薬用途に用いた場合、組成物は、ヒトまたは動物の各種疾病の治療に用いることができる。脂質粒子と組み合わせる活性剤として治療剤を適用することで治療剤を目的細胞に送達することで治療が可能となる。
前記した製造プロセスに従って、化合物(1−01)の合成を行った。具体的には、下記の通りの操作を行った。
ベクターDNA溶液とDNA凝縮ペプチドを用いて、ベクターDNA−DNA凝縮ペプチドからなるコア複合体を調整した。ベクターDNAは、サイトメガロウイルス初期プロモーター/エンハンサー、ナノルック遺伝子、転写終結シグナルを組込んだプラスミドを使用した。DNA凝縮ペプチドは、ヒト・プロタミン由来のオリゴペプチドを使用した。マイクロチューブ(プロテオセーブSS 1.5ml、住友ベークライト)に、DNA凝縮ペプチド溶液(0.24 mg/ml、10mM HEPES、pH5.4)100 μlを分注した。分注したペプチド溶液をボルテックスミキサー(1,500rpm)(MSV−3500、BIOSAN)で撹拌しながら、ベクターDNA溶液(0.15 mg/ml、10mM HEPES、pH5.4)を200 μLを滴下して混合した。
実施例1に対して、脂質溶液を、化合物1−01:PDME:コレステロール:DMG−PEG=5:3:1:0.3molに変更したほかは同様にして、実施例2のリポソームを調製した。
実施例1に対して、脂質溶液を、化合物R−01:PDME:コレステロール:DMG−PEG=5:3:1:0.3molに変更したほかは同様にして、比較例1のリポソームを調製した。
リポソームDNA内包量の測定は、Quant−iT PicoGreen dsDNA Assay Kit(Thermo Fisher Scientific)でおこなった。0.1% Triton−X100 を含むTris−EDTA緩衝液 95μLに、実施例1のリポソーム溶液5.0μLを加えて穏やかに縣濁した。室温に30分間静置した後、溶液にTris−EDTA緩衝液で200倍希釈したPicoGreen溶液100μLを加えてよく混合した。室温に5分間静置した後、溶液の蛍光強度(励起波長:485nm、蛍光波長:530nm)をマイクロタイタープレートリーダー:Mithras LB−940(Berthold)で測定した。DNA濃度は、既知濃度のλDNAで作成した検量線を用いて定量した。得られた数値から、リポソーム内包DNA量を、溶液1mLあたりのDNA量(μgDNA/mL)として算出した。得られた結果は表1に示した通りであった。化合物1−01を含むリポソームは、化合物R−01を含むリポソームより、内包DNA量が高いことが明らかとなった。
リポソームによる細胞へのベクターDNAの導入(内包量)は、ベクターDNA上のNluc遺伝子の発現により定量化した。NLucの発現は、その発光量をマイクロタイタープレートリーダー:Mithras LB−940(Berthold)で測定することで評価した。細胞は、ヒトT細胞性白血病細胞:Jurkat (ATCCより購入)を使用した。96穴培養プレートに、1×106細胞/mLの細胞縣濁液を100μL播種した後、実施例1で調整したリポソーム溶液を5μL 添加した。添加後、細胞を37℃、5%CO2雰囲気のインキュベータ内で48時間培養した後、NLucの酵素活性を測定した。NLucの酵素活性は、NanoGlo Luciferase Assay System(Promega)を用いて、キット添付のマニュアルに従い、ルミノメーターで測定した。表1に示したように、リポソームにより細胞内に取り込まれたNluc遺伝子発現効率は、化合物R−01を含むリポソームよりも、化合物1−01を含むリポソームが高いことが明らかとなった。
Claims (12)
- 下記式(1):
P−[X−R−Y−R’−Q]2 (1)
(式中、
Pは、
−(CH2)2−O−(CH2)2−、 −(CH2)2−O−(CH2)2−O−(CH2)2−、 −(CH2)2−O−O−(CH2)2−、 −(CH2)3−O−(CH2)2−O−(CH2)3−、および −(CH2)2−O−CH2−O−(CH2)2−からなる群から選択されるアルキレンオキシであり、
Xは、それぞれ独立に、メチルイミノ、1,2−ピロリジンジイル、および1,3−ピロリジンジイルからなる群から選択される2価連結基であり、
Rは、それぞれ独立にC1〜C6アルキレンであり、
Yは、それぞれ独立に、単結合、エーテル結合、カルボン酸エステル結合、チオカルボン酸エステル結合、チオエステル結合、アミド結合、カルバメート結合、および尿素結合からなる群から選ばれる2価連結基であり、
R’は、それぞれ独立に単結合またはC1〜C6アルキレンであり、Qは、それぞれ独立に、脂溶性ビタミン残基である)
で表され、
構造中に、カルボン酸エステル結合、チオカルボン酸エステル結合、ジチオカルボン酸結合、アミド結合、カルバメート結合、カルボキシジオキシ結合、および尿素結合からなる群から選ばれる生分解性基を少なくとも一つ含む化合物、および
活性剤、
を含む脂質粒子を細胞に接触させて前記活性剤を前記細胞に送達する活性剤送達方法であって、
前記細胞は、ヒトを除く動物の細胞であるか、又は生体外に取り出された細胞である、
活性剤送達方法。 - 前記活性剤が、プラスミド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、siRNA、マイクロRNA、DNA、mRNA、アプタマー、およびリボザイムからなる群から選択された核酸である、請求項1に記載の活性剤送達方法。
- 前記核酸と結合する化合物をさらに含む、請求項2に記載の活性剤送達方法。
- 前記核酸と結合する化合物が、塩基性タンパク質、または塩基性ペプチドである、請求項3に記載の活性剤送達方法。
- 前記核酸と結合する化合物が、プロタミンまたはヒストンである、請求項3または4に記載の活性剤送達方法。
- 細胞内での核酸の発現を調節する化合物をさらに含む、請求項3〜5のいずれか1項に記載の活性剤送達方法。
- 前記脂溶性ビタミン残基が、レチノール、レチナール、エルゴステロール、7−デヒドロコレステロール、カルシフェロール、コルカルシフェロール、ジヒドロエルゴカルシフェロール、ジヒドロタキステロール、トコフェロール、およびトコトリエノール、ならびにそれらのヒドロキシがチオヒドロキシ、カルボキシ、チオカルボキシ、またはジチオカルボキシに置換された化合物からなる群から選ばれる脂溶性ビタミンに由来する基である、請求項1〜6のいずれか1項に記載の活性剤送達方法。
- 前記Qが、シクロヘキセン構造を含む、請求項7に記載の活性剤送達方法。
- 前記脂質粒子が、膜を形成する脂質と、凝集を低減できる脂質とをさらに含む請求項1〜9のいずれか一項に記載の活性剤送達方法。
- 前記の膜を形成する脂質が、
1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DOPE)、
1,2−ステアロイル−sn−グリセロ−3−ホスホエタノールアミン(DSPE)、
1,2−ジパルミトイル−sn−グリセロ−3−ホスファチジルコリン(DPPC)、
1−パルミトイル−2−オレオイル−sn−グリセロ−3−ホスファチジルコリン(POPC)、
1,2−ジ−O−オクタデシル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA)、
1,2−ジオレオイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(DODAP)、
1,2−ジミリストイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(14:0 DAP)、
1,2−ジパルミトイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(16:0 DAP)、
1,2−ジステアロイル−3−ジメチルアンモニウムプロパン(18:0 DAP)、
N−(4−カルボキシベンジル)−N,N−ジメチル−2,3−ビス(オレオイロキシ)プロパン(DOBAQ)、
1,2−ジオレオイル−3−トリメチルアンモニウムプロパン(DOTAP)、
1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホクロリン(DOPC)、
1,2−ジリノレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホクロリン(DLPC)、
1,2−ジオレオイル−sn−グリセロ−3−ホスホ−L−セリン(DOPS)、および
コレステロール、
からなる群から選択され、
前記凝集を低減できる脂質がポリエチレングリコール(PEG)修飾脂質である、請求項10に記載の活性剤送達方法。 - 請求項1〜11のいずれか一項に記載の活性剤送達方法を実行すること、
得られた前記細胞を培養すること、
を含む細胞を作製する方法。
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2021081143A JP7153109B2 (ja) | 2018-03-16 | 2021-05-12 | 生分解性化合物および活性剤を含む脂質粒子を用いた、活性剤送達方法 |
Applications Claiming Priority (3)
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Citations (3)
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ZHOU, KEJIN ET AL.: "Modular degradable dendrimers enable small RNAs to extend survival in an aggressive liver cancer mod", PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, vol. 113(3), JPN6018021706, 2016, pages 520 - 525, ISSN: 0004774460 * |
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