JP2020531019A - 3次元細胞培養のための培養容器およびこれを利用した3次元細胞共培養方法 - Google Patents
3次元細胞培養のための培養容器およびこれを利用した3次元細胞共培養方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020531019A JP2020531019A JP2020511163A JP2020511163A JP2020531019A JP 2020531019 A JP2020531019 A JP 2020531019A JP 2020511163 A JP2020511163 A JP 2020511163A JP 2020511163 A JP2020511163 A JP 2020511163A JP 2020531019 A JP2020531019 A JP 2020531019A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- support portion
- culture vessel
- cells
- dimensional cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
- C12M1/26—Inoculator or sampler
- C12M1/32—Inoculator or sampler multiple field or continuous type
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/14—Scaffolds; Matrices
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/12—Well or multiwell plates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/08—Chemical, biochemical or biological means, e.g. plasma jet, co-culture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0667—Adipose-derived stem cells [ADSC]; Adipose stromal stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/11—Coculture with; Conditioned medium produced by blood or immune system cells
- C12N2502/1157—Monocytes, macrophages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/13—Coculture with; Conditioned medium produced by connective tissue cells; generic mesenchyme cells, e.g. so-called "embryonic fibroblasts"
- C12N2502/1352—Mesenchymal stem cells
- C12N2502/1382—Adipose-derived stem cells [ADSC], adipose stromal stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2513/00—3D culture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/30—Synthetic polymers
- C12N2533/40—Polyhydroxyacids, e.g. polymers of glycolic or lactic acid (PGA, PLA, PLGA); Bioresorbable polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2535/00—Supports or coatings for cell culture characterised by topography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0062—General methods for three-dimensional culture
Abstract
Description
本開発の実施例としてラピッドプロトタイピング(RP;rapid prototyping)装備を利用した任意形状製作(SFF;solid freeform fabrication)方式で1層、1層積層して形状を製作する3Dプリンティング技術を利用して培養容器を製作し、滅菌は、電子ビーム加速器を使用して行った。
本発明の3次元細胞培養のための培養容器を利用した3次元細胞培養の効果を測定するための実験として次のような条件で実験を実施した。
−培養期間:7日間培養
−細胞計数:0、3、7日目細胞計数
−アルギネート混合:1.3%濃度
第2細胞は、脂肪由来間葉系幹細胞(Adipose derived mesenchymal stem cell,ADMSC)であって、第2細胞が接種された3次元構造体をビーズ形態に製作した。
支持体は、ポリカプロラクトンを利用して製作した。まず、ポリカプロラクトンをチューブに投入して90℃下で650〜730kPaの圧力を加えた後には、エアコントローラーの吸入機能を利用して3次元支持体を製作し、電子ビーム加速度を利用して滅菌工程を処理した。
第2細胞が含まれた支持体を利用した3次元細胞培養は、第2細胞を25μlずつ4個のドロップ(drop)支持体上に接種した後、1時間の間培養し、1ml培地添加し、37℃、5%二酸化炭素の条件下で培養することによって、前記第2細胞が接種された支持体形態の3次元構造体を製造した。
Claims (11)
- 3次元細胞培養のための培養容器において、
前記培養容器の底面上に位置する柱によりウェル(well)が形成され、前記ウェルの内部には、前記柱から突出した少なくとも一つの支持部を含む3次元細胞培養のための培養容器。 - 前記支持部は、前記培養容器の底面から離隔して前記柱の20〜60%の高さに位置することを特徴とする請求項1に記載の3次元細胞培養のための培養容器。
- 前記支持部は、前記培養容器の底面に接する形態であって、前記柱の側面に沿って支持部が形成されることを特徴とする請求項1に記載の3次元細胞培養のための培養容器。
- 前記支持部の最上端は、前記培養容器の底面から前記柱の20〜60%の高さに位置することを特徴とする請求項3に記載の3次元細胞培養のための培養容器。
- 前記ウェルの断面部を基準として、前記柱から前記支持部の終端までの距離は、前記ウェルの直径対比15〜30%であることを特徴とする請求項1に記載の3次元細胞培養のための培養容器。
- 前記支持部と接する前記柱領域のうち少なくとも一部と前記柱領域に接する前記支持部領域のうち少なくとも一部が除去されたことを特徴とする請求項3に記載の3次元細胞培養のための培養容器。
- 3次元細胞培養のための培養容器において、
前記培養容器の底面上に位置する柱によりウェル(well)が形成され、前記ウェルの内部には、前記培養容器の底面から突出した少なくとも一つの支持部を含み、前記支持部の上端表面のうち少なくとも一部が凹状に掘られた形態で構成される3次元細胞培養のための培養容器。 - 前記支持部の上端表面は、端部領域と中央部領域に区分され、前記中央部領域は、凹状に掘られた形態であり、前記端部領域は、フラットにしたり突出方向に凸状に突出した形態であり、前記支持部の上端表面で、前記端部領域は、10〜30%、前記中央部領域は、70〜90%の面積を占めることを特徴とする請求項7に記載の3次元細胞培養のための培養容器。
- 前記支持部の上端は、曲面形態で構成され、
前記支持部の最上端は、前記柱の20〜60%の高さに位置することを特徴とする請求項7に記載の3次元細胞培養のための培養容器。 - 培養容器の底面上に位置する柱により形成されたウェル(well)の内部に前記柱または前記底面から突出した少なくとも一つの支持部を含む3次元細胞培養のための培養容器を準備する準備段階と、
第1細胞を前記ウェルの内部に接種する接種段階と、
前記第1細胞を培養した後、上澄み液を除去し、培養液を少なくとも一部交換する交換段階と、
第2細胞が接種された3次元構造体を前記支持部上に位置させて共培養する共培養段階と、を含み、
前記準備段階で、前記支持部の最上端は、前記柱または前記培養容器の底面から前記柱の20〜60%の高さに位置する3次元細胞共培養方法。 - 前記共培養段階の後に、1〜5日間隔で前記培養液を交替する交換段階;をさらに含むことを特徴とする請求項10に記載の3次元細胞共培養方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR10-2017-0106348 | 2017-08-22 | ||
KR20170106348 | 2017-08-22 | ||
KR1020180097285A KR102115878B1 (ko) | 2017-08-22 | 2018-08-21 | 3차원 세포배양을 위한 배양용기 및 이를 이용한 3차원 세포 공배양 방법 |
KR10-2018-0097285 | 2018-08-21 | ||
PCT/KR2018/009688 WO2019039875A2 (ko) | 2017-08-22 | 2018-08-22 | 3차원 세포배양을 위한 배양용기 및 이를 이용한 3차원 세포 공배양 방법 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020531019A true JP2020531019A (ja) | 2020-11-05 |
JP7046160B2 JP7046160B2 (ja) | 2022-04-01 |
Family
ID=65760424
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020511163A Active JP7046160B2 (ja) | 2017-08-22 | 2018-08-22 | 3次元細胞培養のための培養容器およびこれを利用した3次元細胞共培養方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11802263B2 (ja) |
JP (1) | JP7046160B2 (ja) |
KR (1) | KR102115878B1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102328931B1 (ko) * | 2019-11-26 | 2021-11-23 | 한국생산기술연구원 | 다층 3차원 기저막 구조의 인서트 웰 및 이의 제조방법 |
KR102379490B1 (ko) * | 2020-04-24 | 2022-03-28 | 재단법인대구경북과학기술원 | 세포 배양 장치 |
KR20230059725A (ko) | 2021-10-26 | 2023-05-03 | (의료)길의료재단 | 3차원 세포 배양을 위한 구형 구조체 및 구형 구조체의 제조 방법 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4632400B2 (ja) * | 2003-12-16 | 2011-02-16 | キヤノン株式会社 | 細胞培養用基板、その製造方法、それを用いた細胞スクリーニング法 |
JP2012509663A (ja) * | 2008-11-21 | 2012-04-26 | コーニング インコーポレイテッド | 細胞培養のための、突起間隔を開けた基板および装置 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0751215A3 (en) * | 1995-06-29 | 1997-03-05 | Becton Dickinson Co | Culture container for use with culture plates |
JP4665589B2 (ja) | 2005-04-01 | 2011-04-06 | ニプロ株式会社 | 細胞培養用容器 |
WO2007049576A1 (ja) * | 2005-10-28 | 2007-05-03 | Kuraray Co., Ltd. | 細胞培養容器及び細胞培養方法 |
JP2013215152A (ja) | 2012-04-11 | 2013-10-24 | Vessel Inc | 3次元細胞培養プレートとその製造方法 |
KR101703988B1 (ko) | 2014-04-11 | 2017-02-08 | 중앙대학교 산학협력단 | 폴리디메틸실록산 기반 3차원 세포 배양 장치 |
JP6421473B2 (ja) | 2014-06-25 | 2018-11-14 | 大日本印刷株式会社 | 細胞培養容器 |
-
2018
- 2018-08-21 KR KR1020180097285A patent/KR102115878B1/ko active IP Right Grant
- 2018-08-22 JP JP2020511163A patent/JP7046160B2/ja active Active
- 2018-08-22 US US16/640,849 patent/US11802263B2/en active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4632400B2 (ja) * | 2003-12-16 | 2011-02-16 | キヤノン株式会社 | 細胞培養用基板、その製造方法、それを用いた細胞スクリーニング法 |
JP2012509663A (ja) * | 2008-11-21 | 2012-04-26 | コーニング インコーポレイテッド | 細胞培養のための、突起間隔を開けた基板および装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20210040425A1 (en) | 2021-02-11 |
JP7046160B2 (ja) | 2022-04-01 |
US11802263B2 (en) | 2023-10-31 |
KR20190021179A (ko) | 2019-03-05 |
KR102115878B1 (ko) | 2020-05-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101678796B1 (ko) | 세포 배양 장치 및 방법 | |
JP7125717B2 (ja) | 培養方法 | |
JP6313043B2 (ja) | 接着性細胞の培養方法 | |
Kelm et al. | Microscale tissue engineering using gravity-enforced cell assembly | |
Vunjak-Novakovic et al. | Biomimetic platforms for human stem cell research | |
JP7046160B2 (ja) | 3次元細胞培養のための培養容器およびこれを利用した3次元細胞共培養方法 | |
Yuste et al. | Mimicking bone microenvironment: 2D and 3D in vitro models of human osteoblasts | |
JP5676265B2 (ja) | 細胞保存方法、及び細胞輸送方法 | |
EP3327115B1 (en) | Three-dimensional co-culture method for adipocytes and macrophages | |
CN106554937A (zh) | 一种肝细胞的体外三维培养方法 | |
US11634675B2 (en) | Insertable culture container and kit for three-dimensional cell culture, and three-dimensional cell co-culture method using same | |
KR101687291B1 (ko) | 3차원 세포배양 시스템 및 이를 이용한 세포 배양 방법 | |
Zarkesh et al. | Synthetic developmental biology: Engineering approaches to guide multicellular organization | |
Tafti et al. | Emerging tissue engineering strategies for the corneal regeneration | |
Dermenoudis et al. | Bioreactors in tissue engineering | |
JP2007306881A (ja) | 細胞培養基材 | |
Huang et al. | Current Advances in 3D Dynamic Cell Culture Systems. Gels 2022, 8, 829 | |
WO2019039875A2 (ko) | 3차원 세포배양을 위한 배양용기 및 이를 이용한 3차원 세포 공배양 방법 | |
Sun et al. | Three-Dimensional Culture for Expansion and Differentiation of Embryonic Stem Cells | |
Ardjmand | A Review on the Characteristics of Tissue Culture Bioreactors Used For the Development of Small Diameter Artificial Cardiovascular Grafts | |
Xu | Stem Cell Instruction via Appropriate Geometry and Local Curvature of Microstructured Polymeric Substrates | |
Farouz | Designing biomaterials for controlled cardiac stem cell differentiation and enhanced cell therapy in the treatment of congestive heart failure | |
Sengupta | Protein Engineered Biomaterials for Muscle Tissue Engineering Applications | |
JP2014200241A (ja) | 細胞培養リアクター | |
JP2011156329A (ja) | 骨軟骨様構造体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200221 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210309 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210527 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210914 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211207 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220308 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220322 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7046160 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |