JP2020511417A - スルホニル尿素系薬の医薬組成物及びその調製方法 - Google Patents

Abstract

スルホニル尿素系薬、シクロデキストリン及び添加剤を含むスルホニル尿素系薬の注射用医薬組成物及びその調製方法。

Description

本発明は医薬の技術分野に関し、特にスルホニル尿素系薬の注射用医薬組成物及びその調製方法に関する。

スルホニル尿素系薬はインスリン分泌促進剤であり、II型糖尿病の臨床治療に幅広く適用されている。臨床治療に幅広く適用されているスルホニル尿素系薬類の血糖降下薬はグリベンクラミド（Ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ又はＧｌｉｂｕｒｉｄｅ）、グリクラジド（Ｇｌｉｃｌａｚｉｄｅ）、グリピジド（Ｇｌｉｐｉｚｉｄｅ）、グリキドン（Ｇｌｉｑｕｉｄｏｎｅ）、グリボルヌリド（Ｇｌｉｂｏｒｎｕｒｉｄｅ）、グリメピリド（Ｇｌｉｍｅｐｉｒｉｄｅ）などを含む。市販のスルホニル尿素系薬類の血糖降下薬はいずれも経口固形製剤である。

ここ数年の研究によると、グリベンクラミド（式１、別称：グリブリド、化学名：５−クロロ−Ｎ−（４−｛Ｎ−（シクロヘキシルホルムアミド）アミノスルホニル｝フェニルエチル）−２−メトキシベンズアミド）の静脈注射投与は脳卒中患者の脳水腫（Ｓｈｅｔｈら、Ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｇｌｙｂｕｒｉｄｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈａ ｌａｒｇｅ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｓｔｒｏｋｅ． Ｓｔｒｏｋｅ， ２０１４， ４５： ２８１−２８３）を予防できる。スルホニル尿素系薬はスルホニル尿素受容体（ＳＵＲｓ）に作用することで役割を果たすものである。スルホニル尿素系薬は弱酸性を呈し、水溶性が悪く、特に中性と酸性のｐＨ値の条件で溶解度が非常に低い。グリベンクラミドの水での溶解度は５μｇ／ｍｌより低い。Ｓｃｈｒａｇｅらは０．１Ｍ ＮａＯＨを用いてｌｍｇ／ｍｌグリベンクラミド注射液（Ｓｃｈｒａｇｅら、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＡＴＰ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌｓ，ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ，ａｎｄ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ ｏｎ ｈｙｐｅｒｅｍｉａ ｄｕｒｉｎｇ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｅｘｅｒｃｉｓｅ。Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ２００６， １００：１５０６−１５１２）を調製することを報道した。しかし、該溶液のｐＨ値が注射液のｐＨ値の正常範囲（ｐＨ４〜ｐＨ９）を超える１１と大きい。酸性ｐＨ調整剤を用いてｐＨ値を低下させる場合、薬物を析出させるおそれがある。且つＰＶＣ製輸液バッグは低濃度のグリベンクラミドに対して顕著な吸着性を有する。

本開示は添加剤、シクロデキストリンを含む新規スルホニル尿素系薬、特にグリベンクラミドの注射用組成物を提供する。発明者は、従来技術に比べて添加剤とシクロデキストリンとの併用がシクロデキストリン又は添加剤の単独使用の場合よりも水への不溶性スルホニル尿素系薬の溶解度及び安定性を大幅に向上させ、且つグリベンクラミドに対するＰＶＣ製輸液バッグの吸着性を顕著に抑制できることを予想以外に見出した。

本開示の一態様は、スルホニル尿素系薬、シクロデキストリン及び添加剤を含む医薬組成物を提供する。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：０．１〜４０００、例えば、１：１〜４００、１：１〜１００、１：１〜５０、１：５〜５０、１：５０〜４００、１：１〜１０、１：１〜８、１：１〜６、１：１〜４、１：６〜８である。

好ましくは、前記添加剤がメグルミンである場合、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：１〜４００である。

好ましくは、前記添加剤は炭酸ナトリウムである場合、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：５０〜４００である。

好ましくは、前記添加剤が水酸化ナトリウムである場合、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：５０〜４０００である。

好ましくは、前記添加剤が炭酸水素ナトリウムである場合、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：０．１〜１０である。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記スルホニル尿素系薬と添加剤の重量比は１：０．０１〜１００、例えば、１：０．０５〜１００、１：０．５〜１００、１：１〜５０、１：１〜１０である。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記スルホニル尿素系薬とシクロデキストリンの重量比は１：０．２〜１０００、例えば、１：２５〜２５０、１：０．５〜１００、１：１〜５０、１：１〜１０である。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記スルホニル尿素系薬、添加剤及びシクロデキストリンの重量比は１：０．０５〜１００：０．２〜１０００、例えば、１：０．５〜５０：２５〜２５０、１：０．１〜２０：１０〜１００である。

一実施形態において、スルホニル尿素系薬は細胞膜にあるスルホニル尿素受容体を経由して信号を伝達することによって膵臓β細胞のインスリン分泌を活性化させる化合物である。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記スルホニル尿素系薬はグリベンクラミド、グリクラジド、グリピジド、グリキドン、グリボルヌリド、グリメピリド、グリソキセピド、アセトヘキサミド、グリヘキサミド、グリサムリド、グリセンチド、グリソラミド、グリオクタミド、クロルプロパミド、トラザミド、トルブタミド、レパグリニド、ナテグリニドから選ばれる。

好ましくは、前記スルホニル尿素系薬はグリベンクラミドである。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記シクロデキストリンはα−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン及びその薬学的に許容されるシクロデキストリン誘導体から選ばれる。

好ましくは、前記薬学的に許容されるシクロデキストリン誘導体はジメチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリンから選ばれる。

好ましくは、前記シクロデキストリンはβ−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、トリメチル−β−シクロデキストリンから選ばれる。

さらに好ましくは、前記シクロデキストリンは２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン及び／又はスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンから選ばれる。

特に好ましくは、前記シクロデキストリンは２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである。

『中華人民共和国薬局方』によれば、特に断らない限り、本開示におけるヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとは２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを指す。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記添加剤は炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ホウ砂、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、クエン酸二水素ナトリウム、クエン酸一水素ナトリウム、クエン酸ナトリウム、メグルミン、トリスヒドロキシメチルアミノメタン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、リジン、アルギニン及びヒスチジンから選ばれる。

好ましくは、前記添加剤は水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ホウ砂及びメグルミンから選ばれる。

好ましくは、前記添加剤は炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム及び／又はメグルミンである。

好ましくは、前記添加剤は炭酸ナトリウムである。

好ましくは、前記添加剤は炭酸水素ナトリウムである。

好ましくは、前記添加剤は水酸化ナトリウムである。

好ましくは、前記添加剤はメグルミンである。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、グルコース、塩化ナトリウム、凍結乾燥添加剤（例えば、マンニトール、乳糖又はゼラチン）、ｐＨ調整剤（例えば塩酸）及び／又は水をさらに含む。

一実施形態において、凍結乾燥添加剤は、活性物質の冷凍又は貯蔵過程での損失又は変性を防止できる物質であり、例えば、活性物質が水蒸気とともに昇華逸散することを防止するとともに、活性物質の有効成分を成形させる物質である。

一実施形態において、ｐＨ調整剤は、溶液のｐＨ値を調整することによって最後に必要なｐＨ範囲にする物質を指し、例えば、無機酸、無機塩基、有機酸、有機塩基及びその緩衝塩類が挙げられる。一般的には、水酸化ナトリウム、塩酸、グリシン、フッ化水素酸、トリエチルアミン、酢酸、リン酸、リンゴ酸、クエン酸、酢酸緩衝塩、リン酸緩衝塩など、及びそれらの水溶液が使用される。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、注射剤であり、好ましくは溶液型注射剤（例えば、水溶液型注射剤）又は粉末注射剤である。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、溶液型注射剤（例えば、水溶液型注射剤）である。

好ましくは、前記医薬組成物における前記シクロデキストリンの濃度は０．５％〜４０％（ｗ／ｖ）、例えば、１％〜４０％（ｗ／ｖ）、２．５％〜４０％（ｗ／ｖ）、５％〜２０％（ｗ／ｖ）、１％〜５％（ｗ／ｖ）である。

好ましくは、前記添加剤の濃度は０．０１％〜２０％（ｗ／ｖ）、例えば、０．０１％〜１５％（ｗ／ｖ）、０．０１％〜１０％（ｗ／ｖ）、０．０１％〜５％（ｗ／ｖ）、０．１％〜５％（ｗ／ｖ）、０．０３％〜５％（ｗ／ｖ）、０．２％〜４％（ｗ／ｖ）、０．１％〜１％（ｗ／ｖ）である。

好ましくは、前記医薬組成物における前記シクロデキストリンの濃度は０．５％〜４０％（ｗ／ｖ）、例えば１％〜４０％（ｗ／ｖ）、２．５％〜４０％（ｗ／ｖ）、５％〜２０％（ｗ／ｖ）、１％〜５％（ｗ／ｖ）であり、その中でも、前記添加剤の濃度は０．０１％〜２０％（ｗ／ｖ）、例えば０．０１％〜１５％（ｗ／ｖ）、０．０１％〜１０％（ｗ／ｖ）、０．０１％〜５％（ｗ／ｖ）、０．１％〜５％（ｗ／ｖ）、０．２％〜４％（ｗ／ｖ）、０．１％〜１％（ｗ／ｖ）である。

さらに好ましくは、前記医薬組成物における前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度以下である。さらに、好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０１〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、０．０１〜１０ｍｇ／ｍｌ、０．０１〜５ｍｇ／ｍｌ、０．０１〜２．５ｍｇ／ｍｌ、０．０ｌ〜２ｍｇ／ｍｌである。

当業者であれば、必要に応じて、添加剤及びシクロデキストリンを含有する水溶液にスルホニル尿素系薬を溶解してもよく、スルホニル尿素系薬の濃度はその飽和濃度以下である。飽和濃度とは溶液でのスルホニル尿素系薬の飽和状態になるときの濃度（単位ｍｇ／ｍｌ）を指す。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、以下の一種又は複数種の特徴を有する。

ａ）前記添加剤の濃度は０．０１〜０．５％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は０．５〜１０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ、例えば、０．１〜３ｍｇ／ｍｌ、ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ）以下である。

ｂ）前記添加剤の濃度は０．１〜０．５％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は０．５〜１０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ、例えば０．１〜３ｍｇ／ｍｌ、ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ）以下である。

ｃ）前記添加剤の濃度は０．１〜０．３％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は１〜５％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０ｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌ、例えば０．１〜２．５ｍｇ／ｍｌ、ｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌ）以下である。

ｄ）前記添加剤の濃度は１〜１０％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は１〜３０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０１〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、０．１〜５０ｍｇ／ｍｌ、１０〜５０ｍｇ／ｍｌ）以下である。

ｅ）前記添加剤の濃度は４〜６％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は５〜２０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０１〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば０．１〜５０ｍｇ／ｍｌ、２５〜５０ｍｇ／ｍｌ）以下である。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の組成物であって、本開示のいずれか一項に記載の溶液型注射剤を乾燥（例えば、凍結乾燥）させて得る。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、そのｐＨ値は５〜１１、好ましくは６〜１０、さらに好ましくは７〜９、特に好ましくは７〜８である。

本開示の別の態様は、
添加剤及びシクロデキストリンを溶剤に溶解するステップａ）と、
ステップａ）の製品にスルホニル尿素系薬を加えて、撹拌して混合するステップｂ）と、
必要に応じて、ステップｂ）の製品に凍結乾燥添加剤を加えて、ｐＨ値を調整するステップｃ）と、
ステップｂ）又はｃ）の製品を殺菌するステップｄ）とを含み、
必要に応じて、ステップｄ）の製品を乾燥させて、所望組成物を得て、
好ましくは、前記乾燥は凍結乾燥であり、
好ましくは、前記溶剤は水、生理食塩水又はグルコース溶液である本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物の調製方法を提供する。

本開示の別の態様は、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物の、急性脳卒中、外傷性脳損傷、脳浮腫、脊髄損傷、心筋梗塞、ショック、臓器虚血、心室性不整脈、Ｉ型糖尿病又はＩＩ型糖尿病を予防及び／又は治療するための薬物の調製における用途を提供する。

本開示の別の態様は、急性脳卒中、神経障害、外傷性脳損傷、脳浮腫、脊髄損傷、心筋梗塞、ショック、臓器虚血、心室性不整脈、Ｉ型糖尿病又はＩＩ型糖尿病を予防及び／又は治療するための薬物における方法であって、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物をこれを必要とする被験者に治療及び／又は予防有効量で投与することを含む方法。

一実施形態において、これを必要とする被験者に医薬組成物を投与する方法は経口又は注射、例えば、注射を含む。

一実施形態において、用語「治療有効量」とは特定の疾患及びその併発症の臨床症状を治癒、軽減又は部分的に抑制する量を指す。該目的を達成できる量を「治療有効量」として定義する。各目的有効量は疾患又は損傷の重症度及び被験者の体重や一般的な健康状態によって決まる。なお、適切な用量の決定は一般的な試験を使用して数値のマトリクスを作成して該マトリクスの各点について試験を行うことによって行われてもよく、以上の内容はいずれもプロの医者又は獣医の通常の技術範囲に属する。

本開示の別の態様は、急性脳卒中、神経障害、外傷性脳損傷、脳浮腫、脊髄損傷、心筋梗塞、ショック、臓器虚血、心室性不整脈、Ｉ型糖尿病又はＩＩ型糖尿病を予防及び／又は治療するための本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物を提供する。

一実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物の調製方法は
添加剤とシクロデキストリンを水中に溶解し、均一に混合するステップａ）と、
ステップａ）の製品に活性成分であるスルホニル尿素系薬を加えて撹拌するステップｂ）と、
ステップｂ）で得られた製品のｐＨ値を調整するステップｃ）と、
ステップｃ）で得られた溶液に対して無菌濾過又はオートクレーブ殺菌を行うステップｄ）と、
ステップｄ）で得られた製品をそれぞれバイアル又はアンプル瓶に入れて、シール／カバーするステップｅ）とを含む。

別の実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物の調製方法は
添加剤とシクロデキストリンを水中に溶解し、均一に混合するステップａ）と、
ステップａ）の製品に活性成分であるスルホニル尿素系薬を加えて撹拌するステップｂ）と、
ステップｂ）で得られた製品に凍結乾燥剤を加えてｐＨ値を調整するステップｃ）と、
ステップｃ）で得られた製品をそれぞれペニシリン瓶又はアンプル瓶に入れるステップｄ）と、
ステップｄ）で得られた溶液を凍結乾燥させて水分を除去し、シール／カバーするステップｅ）とを含む。

一つの具体的な実施形態において、本開示のいずれか一項に記載の医薬組成物の調製方法は
添加剤（例えば、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ホウ砂、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、クエン酸二水素ナトリウム、クエン酸一水素ナトリウム、クエン酸ナトリウム、メグルミン、トリスヒドロキシメチルアミノメタン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジンのうち一種又は複数種から選ばれる）、シクロデキストリン（例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン及びその薬学的に許容されるシクロデキストリン誘導体のうち一種又は複数種から選ばれる）を撹拌しながら水に溶解するステップａ）と、
次に、活性成分であるスルホニル尿素系薬（例えば、グリベンクラミド、グリクラジド、グリピジド、グリキドン、グリボルヌリド、グリメピリド、グリソキセピド、アセトヘキサミド、グリヘキサミド、グリサムリド、グリセンチド、グリソラミド、グリオクタミド、クロルプロパミド、トラザミド、トルブタミド、レパグリニド、ナテグリニドの一種又は複数種から選ばれる）を加えて、撹拌して溶解すると、得られるステップｂ）とを含む。

一実施形態において、用語「添加剤」とは、活性成分とある相互作用を発生させることで、シクロデキストリンの包接効率を高め、さらに薬物溶解度を改善する物質を指す。

一実施形態において、添加剤はシクロデキストリンを含まない。

一実施形態において、用語「医薬組成物」又は「組成物」とは、一種又は複数種の活性成分、一種又は複数種の不活性成分、及びいかなる生成物を指し、いずれか二種又は複数種の成分の組合せ、錯化又は凝集、あるいは一種又は複数種の成分の解離、あるいは一種又は複数種の成分の他の反応又は相互作用のような方式によって直接又は間接的に生成される。従って、本開示の医薬組成物は、本開示の化合物及び薬学的に許容される補助材料を混合して調製したいかなる組成物を含む。

一実施形態において、組成物は、本技術分野における一般的な意味で使用する場合、２種以上の物質の混合物を指す。従って、組成物において、上記活性薬剤及び添加剤を除き、本発明の目的に合致する限り、本技術分野に一般的に使用された他の賦形剤、緩衝剤又はｐＨ調整剤、浸透圧調整剤、防腐剤、抗酸化剤などをさらに含んでもよい。

一実施形態において、前記医薬組成物は、薬学的に許容される補助材料と共に、例えば、経口剤又は注射剤などの任意の剤形に調製できる。経口剤は例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、内服液であってもよい。注射剤は例えば液体注射剤又は凍結乾燥粉末（注射）剤であってもよい。

一実施形態において、注射剤は患者体に注射可能な製剤であればよく、その投与経路、投与部位、投与方式などにより限定されないが、特に静脈内、動脈内、膀胱内に投与する製剤が好ましい。

一実施形態において、本発明の組成物を生理食塩水溶液に溶解して注射剤に調製してもよく、それを注射用水又はブドウ糖注射液に溶解して注射剤に調製してもよい。

一実施形態において、生理食塩水、注射用水、ブドウ糖注射液は『中華人民共和国薬局方』の規定に合致する。

本出願において別段の定めがない限り、または文脈によって明らかに否定されない限り、本開示において使用された用語「一つ」「一種」「該」及び類似の用語は単数及び複数を含むと理解されるところである。

本開示において、添加剤とシクロデキストリンの濃度「％」又は「％（ｗ／ｖ）」とは質量体積濃度を指し、１００ｍｌあたりの溶液に含有する溶質グラム数を示す。例えば、２０％（ｗ／ｖ）は１００ｍｌあたりの溶液に２０ｇの溶質を含有することを示す。

従来技術に比べ、本開示の医薬組成物は以下の一つ又は複数の有益な効果を有する。
１）スルホニル尿素系薬の水溶性、特に中性又は酸性水溶液での水溶性を顕著に向上させる。
２）医薬組成物の安定性を顕著に向上させ、薬物の析出、特に中性又は酸性水溶液での析出が少ない。
３）ＰＶＣ製輸液バッグでの薬物の吸着性を顕著に抑制する。
４）処方がシンプルであり、品質が安定している。
５）調製方法は再現性に優れ、操作しやすく、制御性が高い。
６）神経障害、例えば脳梗塞による神経行動学的障害を顕著に改善することができる。

図１〜図７は、２５℃、各種溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。
図１はメグルミンのみを含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。 図２は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンのみを含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。 図３は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとメグルミン（メグルミンの濃度が０．１％）を含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。 図４は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとメグルミン（メグルミンの濃度が５％）を含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。 図５は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと炭酸ナトリウム（炭酸ナトリウムの濃度が０．１％）を含有する溶液でのグリベンクラミドでの溶解度曲線である。 図６は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと炭酸水素ナトリウム（炭酸水素ナトリウムの濃度が４％）を含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。 図７は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと水酸化ナトリウム（水酸化ナトリウムの濃度が０．０１％）を含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線である。 図において、ＭＥＧとはメグルミンを指す。

以下、実施例を参照しながら本開示の実施形態を詳細に説明するが、以下の実施例及び実験例は本開示を説明するものに過ぎず、本開示の範囲を限定するものではないことは、当業者にとって理解されるべきである。実施例及び実験例において、特に説明しない限り、一般的な条件又は製造メーカーにより推薦された条件に応じて行われ、使用された試験薬又は器具には製造メーカーを明記しない限り、いずれも市販で購入できる通常の製品である。

以下の実施例において、添加剤は処方における前記メグルミン、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム又は炭酸水素ナトリウムである。

実施例１：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
調製方法：処方に基づき、添加剤とシクロデキストリンを５０〜７０ｍｌの水中に溶解し、次にグリベンクラミド粉末を加え、撹拌して溶解し、溶液を得た。０．１Ｍの塩酸を用いて上記溶液のｐＨ値を７．０に調整し、水を用いて１００ｍｌまでに定容し、グリベンクラミド注射用組成物を得た。

実施例２：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例２において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を８．０に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例３：グリベンクラミド注射用組成物の調製
実施例３において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を７．５に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例４：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例４において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を９．０に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例５：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例５において、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例６：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例６において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を６．５に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例７：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例７において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を６．０に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例８：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例８において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を７．５に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例９：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例９において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を７．５に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例１０：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
調製方法は以下のとおりであった。処方に基づき、添加剤とシクロデキストリンを体積５０〜７０ｍｌの水中に溶解し、次にグリベンクラミド粉末を加えて撹拌して溶解し、第一溶液を得た。第一溶液に凍結乾燥添加剤としてマンニトールを加えて撹拌して溶解し、第二溶液を得た。０．１Ｍの塩酸を用いて第二溶液のｐＨ値を７．５に調整し、１００ｍｌに定容し、第三溶液を得た。第三溶液をそれぞれペニシリン瓶に入れ、表１の凍結乾燥プロセスにしたがって凍結乾燥させて製品を得た。

実施例１１：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例１１において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を８．０に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例１２：グリベンクラミド注射用組成物の調製
処方：
実施例１２において、処方に基づいて調製された溶液のｐＨ値を８．０に調整する以外、組成物の調製方法は実施例１と類似した。

実施例１３：グリベンクラミド注射用組成物の調製（凍結乾燥粉末注射剤）
実施例１１において調製された溶液をそれぞれペニシリン瓶中に入れ、ペニシリン瓶あたり１ｍｌとし、実施例１０における表１の凍結乾燥プロセスにしたがってペニシリン瓶中の溶液に対して凍結乾燥を行い、凍結乾燥粉末注射剤を得た。

実施例１４：グリベンクラミド注射用組成物の調製（凍結乾燥粉末注射剤）
処方：
調製方法
まず水酸化ナトリウムとヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを体積８０ｍｌの水中に溶解し、次にグリベンクラミド粉末を加えて撹拌して溶解し、第一溶液を得た。第一溶液にグリシン溶液を加えて溶液のｐＨ値を８．８に調整し、ｌ００ｍｌに定容し、第二溶液を得た。第二溶液をそれぞれペニシリン瓶中に入れ、ペニシリン瓶あたり１ｍｌとし、ペニシリン瓶中の第二溶液に対して凍結乾燥を行い、凍結乾燥粉末注射剤を得た。凍結乾燥粉末注射剤は白色っぽい粗目状のかたまりであった。

実験例１：配合安定性試験
該試験はグリベンクラミド注射用組成物とブドウ糖注射液、生理食塩水との配合安定性を調べた。
試験方法：それぞれｌ００ｍｌのブドウ糖注射液と生理食塩水注射液に上記の実施例２において調製された組成物１ｍｌを加え、０ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈに注射液の外形を観察し、ｐＨ値と関連物質の変化を検査した。
試験結果：表２及び表３に示される。
表２及び表３において、^ａ注記：不純物Ｉ：４−［２−（５−クロロ−２−メトキシベンズアミド）−エチル］−ベンゼンスルホンアミド；不純物ＩＩ：４−［２−（５−クロロ−２−メトキシベンズアミド）−エチル］−ベンゼンスルホンアミド−ギ酸エチル
表２及び表３の結果によると、上記グリベンクラミド組成物はブドウ糖注射液及び生理食塩水との相溶性に優れた。

実験例２：希釈安定性試験
試験方法：１０本の試験管を取り、１〜１０の番号を付けた。１０本の試験管にそれぞれｐＨ７．４のリン酸緩衝液を１ｍｌ加えた。次に試験管１に実施例２において調製されたグリベンクラミド注射用組成物を１ｍｌ加えて、試験管を振盪させて溶液を均一に混合し、試験管１から１ｍｌの溶液を取って試験管２に入れた。試験管１０まで上記操作を繰り返し、１０本の試験管を静置して溶液の澄明度を観察した。
試験結果：１０本の試験管はいずれも９６ｈ以内に薬物が析出せず、該処方の組成物はｐＨ＝７．４のリン酸緩衝液との相溶性に優れたことを示した。

実験例３：溶解度試験
過量のグリベンクラミド粉末を各比率の添加剤（例えば、メグルミン、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム又は水酸化ナトリウム）とシクロデキストリン（ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）を含有する水溶液に加えて、懸濁液を形成した。懸濁液を恒温振盪培養器に投入して、２５±１℃で１ｈ振盪させた。０．４５μｍ水性濾過膜を用いて振盪後の懸濁液を濾過し、初期ろ液を捨て、後続ろ液を取った。ｐＨ７．４のＰＢＳ緩衝液を用いて後続ろ液を適切な倍数まで希釈した後、波長２２５ｎｍで希釈した後続ろ液の吸光度を測定し、且つ該吸光度に基づいて希釈した後続ろ液におけるグリベンクラミドの溶解度を計算した。グリベンクラミドの溶解度を縦座標、シクロデキストリン及び／又はメグルミンの濃度を横座標として、対応する溶解度曲線を描いた。試験結果：２５℃でグリベンクラミドの溶解度曲線は図１〜図７に示され、対応する溶解度データは表４〜表１０に示された。

図１はメグルミンのみを含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表４は対応する溶解度データであった。図１から分かるように、グリベンクラミドの水中溶解度はメグルミンの濃度の増加に伴って向上した。メグルミンの濃度が０．１％（ｗ／ｖ）〜１０％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの溶解度はそれぞれ０．９６ｍｇ／ｍｌ〜１９．０５ｍｇ／ｍｌであった。

図２は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンのみを含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表５は対応する溶解度データであった。図２から分かるように、グリベンクラミドの水中溶解度はシクロデキストリンの濃度の増加に伴って線形的に向上した。シクロデキストリンの濃度が０．５％（ｗ／ｖ）〜４０％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの溶解度はそれぞれ０．００１３ｍｇ／ｍｌ〜０．１２ｍｇ／ｍｌであった。

図３は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとメグルミン（メグルミンの濃度が０．１％に保持された）を同時に含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表６は対応する溶解度データであった。図３から分かるように、シクロデキストリンとメグルミンを併用すると、グリベンクラミドの水中溶解度を顕著に増加させた。メグルミンの濃度が０．１％（ｗ／ｖ）であり且つシクロデキストリンの濃度が０．５％（ｗ／ｖ）〜５％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの水中溶解度は１．２５ｍｇ／ｍｌ〜２．１７ｍｇ／ｍｌであった。シクロデキストリンの濃度が５％（ｗ／ｖ）から４０％（ｗ／ｖ）まで引き続き増加する場合、グリベンクラミドの溶解度は約２．１７ｍｇ／ｍｌの程度まで保持された。

図４は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンとメグルミン（メグルミンの濃度が５％に固定する）を同時に含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表７は対応する溶解度データであった。図４から分かるように、シクロデキストリンとメグルミンを併用すると、グリベンクラミドの水中溶解度を顕著に増加させた。メグルミンの濃度が５％（ｗ／ｖ）であり且つシクロデキストリンの濃度が５％（ｗ／ｖ）〜３０％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの水中溶解度は２５．２３ｍｇ／ｍｌ〜４９．３７ｍｇ／ｍｌであった。シクロデキストリンの濃度は３０％（ｗ／ｖ）から４０％（ｗ／ｖ）まで引き続き増加する場合、グリベンクラミドの溶解度は約４９．３７ｍｇ／ｍｌの程度まで保持された。

図１〜４及び表４〜７の結果によると、メグルミンとシクロデキストリンの両方はグリベンクラミドの溶解性に予期せぬ相乗効果を果たすことを示した。メグルミンの添加はシクロデキストリンがグリベンクラミドへの包接作用を促進する可能性があり、さらにグリベンクラミドの溶解度を増加させた。図３〜４の結果によると、メグルミンがグリベンクラミドへのシクロデキストリンの包接作用を促進するのはメグルミンの濃度に関連する可能性があることを示した。

図５は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと炭酸ナトリウム（炭酸ナトリウムの濃度が０．１％に固定する）を同時に含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表８は対応する溶解度データであった。図５から分かるように、シクロデキストリンと炭酸ナトリウムを併用すると、グリベンクラミドの水中溶解度を顕著に増加させた。炭酸ナトリウムの濃度が０．１％（ｗ／ｖ）であり且つシクロデキストリンの濃度は５％（ｗ／ｖ）〜２０％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの水中溶解度は２．３５ｍｇ／ｍｌ〜１０．６３ｍｇ／ｍｌであった。シクロデキストリンの濃度が２０％（ｗ／ｖ）から４０％（ｗ／ｖ）まで引き続き増加する場合、グリベンクラミドの溶解度は約１０．６３ｍｇ／ｍｌの程度まで保持された。

図６は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと炭酸水素ナトリウム（炭酸水素ナトリウムの濃度が４％に固定する）を同時に含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表９は対応する溶解度データであった。図６から分かるように、シクロデキストリンと炭酸水素ナトリウムを併用すると、グリベンクラミドの水中溶解度を顕著に増加させた。炭酸水素ナトリウムの濃度が４％（ｗ／ｖ）であり且つシクロデキストリンの濃度は０．５％（ｗ／ｖ）〜１０％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの水中溶解度は０．３２ｍｇ／ｍｌ〜１．６９ｍｇ／ｍｌであった。シクロデキストリン濃度が１０％（ｗ／ｖ）から４０％（ｗ／ｖ）まで引き続き増加場合、グリベンクラミドの溶解度は約１．６９ｍｇ／ｍｌの程度まで保持された。

図７は２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンと水酸化ナトリウム（水酸化ナトリウムの濃度が０．０１％に固定する）を同時に含有する溶液でのグリベンクラミドの溶解度曲線であった。表１０は対応する溶解度データであった。図７から分かるように、シクロデキストリンと水酸化ナトリウムを併用すると、グリベンクラミドの水中溶解度を顕著に増加させた。水酸化ナトリウムの濃度が０．０１％（ｗ／ｖ）であり且つシクロデキストリンの濃度は０．５％（ｗ／ｖ）〜１０％（ｗ／ｖ）範囲内にある場合、２５℃条件でのグリベンクラミドの水中溶解度はそれぞれ０．１４ｍｇ／ｍｌ〜１．２６ｍｇ／ｍｌであった。シクロデキストリン濃度が１０％（ｗ／ｖ）から４０％（ｗ／ｖ）まで引き続き増加する場合、グリベンクラミドの溶解度は約１．２６ｍｇ／ｍｌの程度まで保持された。

図１〜７及び表４〜１０の結果によると、添加剤（例えば、メグルミン、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム又は水酸化ナトリウム）とシクロデキストリンの両方はグリベンクラミドの溶解性に予期せぬ相乗効果を果たした。添加剤の添加はグリベンクラミドへのシクロデキストリンの包接作用を促進する可能性があり、さらにグリベンクラミドの溶解度を増加させた。図３〜７の結果によると、添加剤がグリベンクラミドへのシクロデキストリンの包接作用を促進するのは添加剤の濃度に関連する可能性があることを示した。

実験例４：ｐＨ調整試験
各グリベンクラミド医薬組成物の各ｐＨでの安定性を調べた。

実施例１の方法を参照して、表１１の処方に基づいて医薬組成物を調製した。ここで、グリベンクラミドの濃度は１ｍｇ／ｍｌに固定された。各処方に基づいて調製された溶液を三等分し、０．１Ｍの塩酸を用いて三つの溶液のｐＨ値をそれぞれ７．０、７．５及び８．０に調整して、各ｐＨ値のグリベンクラミド医薬組成物溶液を得た。上記各ｐＨ値のグリベンクラミド医薬組成物溶液を２５℃に投入して、溶液中の沈殿析出の状況を観察した。

表１１に示すように、試験結果として、０．１％（ｗ／ｖ）のメグルミンのみを含有する医薬組成物溶液では、０．１Ｍの塩酸を用いてｐＨ値を７．５まで調整すると、薬物沈殿が析出された。ｐＨ値を８．０まで調整した医薬組成物溶液を２４ｈ放置すると、白色沈殿が析出された。０．１％（ｗ／ｖ）のメグルミンと各濃度のシクロデキストリンを含有する組成物溶液では、ｐＨ値を８．０に調整し、９６ｈ放置した後、いずれも沈殿が析出されなかった。０．１％（ｗ／ｖ）のメグルミン＋１．２５％シクロデキストリンを含有する組成物溶液では、ｐＨ値を７．５まで調整し、９６ｈ放置した後、少量の薬物結晶が析出された。０．１％（ｗ／ｖ）のメグルミン＋２．５０％のシクロデキストリンを含有する組成物溶液では、ｐＨ値を７．０まで調整し、９６ｈ放置した後、極微量の薬物結晶が析出された。０．１％（ｗ／ｖ）のメグルミン＋５．０％のシクロデキストリンを含有する組成物溶液では、ｐＨ値を７．０まで調整し、９６ｈ放置した後、薬物結晶が析出されなかった。以上の結果からわかるように、組成物におけるシクロデキストリンはグリベンクラミドの析出を抑制し、医薬組成物溶液を安定させる作用を果たすことができた。

注記：ＧＢ：グリベンクラミド；−：沈殿が析出しなかった。＋〜＋＋＋＋：沈殿が析出された。＋が多ければ多いほど、沈殿が多くなる。

実験例５：輸液バッグの吸着性試験
５．１ シクロデキストリンと添加剤の併用の場合及び添加剤の単独使用の場合の比較
０．９％塩化ナトリウム溶液（生理食塩水）でそれぞれ実施例２、８及び９の組成物をグリベンクラミドの濃度５μｇ／ｍｌに希釈し、得られた溶液を５ａ、５ｂ、５ｃに番号付けた。同時に、表１２の処方に基づいて対応するヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含有しない注射用組成物を調製した。０．９％塩化ナトリウム溶液でグリベンクラミドの濃度５μｇ／ｍｌまで希釈し、５ａ’、５ｂ’、５ｃ’を番号付けた。希釈後の薬物溶液を二つの部分に分け、一部をＰＶＣ製輸液バッグに注入して２５℃で置き、ｌ００ｒｐｍで振盪させた。他の部分を計量フラスコに投入して、２５℃、ｌ００ｒｐｍで振盪させた（対照用）。９６ｈ後にサンプリングし、ＨＰＬＣ法（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ−Ｃ１８カラム（５μｍ、４．６ｘ２５０ｍｍ）；流動相メタノール；５０ｍＭリン酸二水素アンモニウム（体積比）＝７２．５：２７．５（２％のリン酸でｐＨ値を３．５±０．１に調整する）；検出波長３００ｎｍ；流動相流速１ｍｌ／ｍｉｎ；サンプル充填量２０μｌ）により主薬ピークの面積を測定した。計量フラスコにおける薬物溶液を対照として、薬物吸着率（薬物吸着率＝１００×（計量フラスコにおける主薬ピークの面積−ＰＶＣ製輸液バッグにおける主薬ピークの面積）／計量フラスコにおける主薬ピークの面積）を計算した。

試験結果は表１２に示された。ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含有しない３種類の低濃度薬物溶液（５ａ’、５ｂ’、５ｃ’）はいずれもＰＶＣ製輸液バッグにおいて顕著な薬物吸着作用を発生させ、吸着率がいずれも１０％より高く、薬物濃度が顕著に低下した。それに対して、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含有する低濃度薬物溶液（５ａ、５ｂ、５ｃ）はＰＶＣ製輸液バッグにおいて顕著な薬物吸着を発生させ、吸着率が０．１％より低かった。以上の結果によると、組成物におけるシクロデキストリンはＰＶＣ製輸液バッグが薬物への吸着性を顕著に抑制できたことを示した。

５．２ 各シクロデキストリンの薬物への吸着性の比較
表１３、１４の処方に基づいて、添加剤とシクロデキストリンを体積５０〜７０ｍｌの水中に溶解し、次にグリベンクラミドを加えて撹拌して溶解し、１００ｍｌ定容し、医薬組成物（群５ｄ〜５ｉ）を得た。

群５ｅ〜５ｆの組成物溶液のｐＨ値を８．０に調整して、医薬組成物（群５ｊ及び５ｋ）を得た。処方は表１５に示された。

５ｄ〜５ｋの各群の医薬組成物を０．９％の塩化ナトリウム溶液で５００倍希釈し、グリベンクラミドの濃度を２μｇ／ｍｌに調整した。希釈後の薬物溶液を二つの部分に分け、一部をＰＶＣ製輸液バッグ中に注入して２５℃で放置し、ｌ００ｒｐｍで振盪させ、他の部分を計量フラスコに投入して、２５℃、ｌ００ｒｐｍで振盪させた（対照用）。５．１の方法にしたがって薬物の吸着率を測定した。

表１３〜１５の結果によると、シクロデキストリンを含有しない医薬組成物に比べ、本開示に記載の添加剤とシクロデキストリンを含有する医薬組成物はＰＶＣ製輸液バッグが薬物への吸着性を顕著に抑制できたことを示した。且つヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの吸着性抑制効果はスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンよりも優れた。

実験例６：シクロデキストリンの薬物析出抑制への緩衝能力の比較
実験例５の方法にしたがって医薬組成物（群５ｇ、５ｈ及び５ｉ）を調製し、それぞれ０．１Ｍ塩酸を沈殿が析出されるまで滴下した。処方及び試験結果は表１６に示された。

結果によると、上記三種類の医薬組成物溶液の初期ｐＨ値が１０〜１１であり、グリベンクラミド沈殿が析出されたと観察されたとき、群５ｇ、５ｈ及び５ｉ溶液のｐＨ値はそれぞれ８．３３、７．２５及び６．２７であった。本開示に記載の医薬組成物はグリベンクラミドの析出を防止する緩衝能力を有し、且つヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンのグリベンクラミド析出防止のための緩衝能力はスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンより僅かに優れている。

実験例７：ラット大脳ＭＣＡＯモデルによる薬効研究
７．１ 実験規範：本試験におけるすべての動物実験の操作は、実験機関ＩＡＣＵＣ（実験動物使用管理委員会、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）の規定に従って行われ、且つＡＡＡＬＡＣ（国際実験動物管理公認協会、Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ａｎｄ Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ）原則に合致した。

７．２ 実験動物：Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）雄ラット、清潔級、体重２００〜２３０ｇ。動物飼育室の温度を２０〜２４℃、湿度を３０〜７０％に維持した。毎日、１２時間点灯／１２時間消灯（０６：００ＡＭ入、１８：００ＰＭ切）のモードを繰り返した。試験過程において、動物を単一ケージで独立して飼育し、動物に水を自由に飲ませて、自由に餌を食べさせた。

７．３ 試験薬
ＧＢ群の試験薬の調製方法は以下のとおりである。少量のＤＭＳＯ （ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）を用いてグリベンクラミドを溶解し、得られた溶液を生理食塩水でＤＭＳＯ濃度５ｖｏｌ％まで希釈し、ＮａＯＨを用いて溶液のｐＨ値を８〜８．５に調整した。上記方法を用いてグリベンクラミドの濃度２００μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌの溶液をそれぞれ調製した。

Ｈ−ＧＢ群の試験薬の調製方法は以下のとおりである。実施例１３の凍結乾燥製品を取り、適量の生理食塩水を加え、グリベンクラミドの濃度が２００μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌの溶液をそれぞれ調製した。

７．４ ＭＣＡＯモデル（ＭＣＡＯ ｍｏｄｅｌ，ｍｉｄｄｌｅ ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ）の確立
ラットを一週間ぐらい適応飼育した後に実験を始めた。実験当日に、手術器具に対してオートクレーブ殺菌を行った。ラットの腹腔内に抱水クロラール（３３０ｍｇ／ｋｇ）を注射して動物を麻酔した。ラットの総頚動脈と外頸動脈を分離して、殺菌したＭＣＡＯ専用栓糸を使用し、外頸動脈の開口部から内頸動脈に装入して、かつ栓糸の端部が大脳の動脈の開始部に至るまで挿入深さを約１８ｍｍ程度とし、その後、外頸動脈の開口部を閉塞させて、栓糸を固定した。１．５時間後、再灌流のステップを行い、外頸動脈と内頸動脈との交差点が一定の抵抗力に遭うまで栓糸を引き抜いた。手術前、手術後及び再灌流時は、レーザードップラー流速計（型番ｍｏｏｒＶＭＳ−ＬＤＦ２、製造メーカーｍｏｏｒ）を用いてそれぞれ脳部血流を監視し、手術後の血流と手術前の血流との比が３０％より小さいと合格すると見なされて、モデルを確立した。

術後ケア：術後、すぐにラットを保温ブランケットに置き、メロキシカム（２ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射して痛みを鎮め、腹腔にゲンタマイシン（６ｍｇ／ｋｇ）を注射した。

７．５ 動物の群分け及び投与
体重に基づいて動物２４匹を３群にランダムに分け、一群あたり８匹（ｎ＝８）とした。表１７に示された。

腹腔内注射投与（ｉｎｔｒａ−ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ、ｉｐ）：グリベンクラミド１０μｇ／ｋｇ（投与体積１ｍｌ／ｋｇ、薬物濃度１０μｇ／ｍｌ）。

持続皮下投与（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ，ｓｃ）：グリベンクラミド２００ｎｇ／ｈ（投与体積１μｌ／ｈ、１００μｌ／浸透圧ポンプ／匹、ポンプ内薬物濃度２００μｇ／ｍｌ）。前記浸透圧ポンプはＡＬＺＥＴ浸透圧ポンプ１００３Ｄであり、製造メーカーはＤＵＲＥＣＴ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎであった。
コントロール群において、生理食塩水を試験薬に代えた。腹腔内注射投与体積：１ｍｌ／ｋｇ、持続皮下投与体積：１μｌ／ｈ（１００μｌ／浸透圧ポンプ／匹）。

４ｈ虚血した時に腹腔内注射投与を行い、且つ浸透圧ポンプを動物皮下にインプラントし、持続皮下投与を４４ｈ行った。浸透圧ポンプのインプラント方法は、まず肩甲骨間の皮膚で小さな切り欠きを開いて、次に止血小鉗子で皮膚と皮下結締組織を分離して、小さなポケットを形成し、浸透圧ポンプを挿し入れ、流量調節器を裏にして、皮膚の開口部を縫合し又はクランプで挟んだ。

７．６ 神経学的スコア
２４ｈ、４８ｈ虚血した時に神経学的スコアを行った。Ｌｏｎｇａスコア法では、神経学検査は５つの等級に分けられた。０点：正常、神経障害なし。１点：左側前足は完全に伸展することができず、軽度神経障害が発生した。２点：歩く時、ラットは左側（麻痺側）にぐるりと回り、中程度の神経障害が発生した。３点：歩く時、ラット身体は左側（麻痺側）に傾いて倒れ、重度の神経障害が発生した。４点：自律的に歩くことができず、意識喪失がある。薬物によるＭＣＡＯラットの神経学的スコアへの影響は表１８に示された。

表１８の結果によると、コントロール群に比べ、ＧＢ群、Ｈ−ＧＢ群の２４ｈ、４８ｈ神経学的スコアはいずれも低下し、それはＧＢ群及びＨ−ＧＢ群のいずれもＭＣＡＯラットの神経障害を改善できることを示した。Ｈ−ＧＢ群のスコアは顕著に低下し、本開示の注射用医薬組成物は脳梗塞ラットの神経学的スコアを顕著に改善できることを示した。

７．７ 脳梗塞面積及び腫脹度
４８ｈ虚血した後、大脳を取って脳溝に入れて冠状脳切片（一枚２ｍｍ）を作成し、１％ＴＴＣを使用して日陰で１５ｍｉｎ３７℃で染色し、写真を取って梗塞面積を分析した。梗塞領域の面積／脳の総面積は梗塞面積の比率であり、腫脹度は梗塞側脳半球面積が未梗塞面積に対する比率であった。薬物のＭＣＡＯラット脳梗塞面積と脳の腫脹度への影響は表１９に示された。

結果からわかるように、ＧＢ群、Ｈ−ＧＢ群はコントロール群に比べ、脳梗塞面積が顕著に低下した。各群のラットの脳の腫脹度の比較は統計的に有意ではなかった。本実験例の結果によると、本開示の医薬組成物は、スルホニル尿素系薬のラットの大脳中の動脈急性虚血再灌流モデルでの薬効に対していかなる消極的な影響を与えず、且つスルホニル尿素系薬が血脳関門に対して消極的な影響を与えなかった。

実験例８：凍結乾燥製品の再溶解
実施例１４の一つのペニシリン瓶における凍結乾燥製品を１ｍｌ注射用水（中華人民共和国薬局方における注射用水項目の規定に一致させる水）を用いて溶解したところ、再溶解後の溶液のｐＨ値は８．８であった。

実験例８によると、凍結乾燥製品を再溶解して得られた溶液のｐＨ値は凍結乾燥前の溶液のｐＨ値と同じであった。実施例１４において、グリシンをｐＨ調整剤として用いて、得られた薬物注射液のｐＨ値はｐＨ値の正常範囲（４〜９）内にあった。

前記のとおり、本開示に提供されるスルホニル尿素系薬の注射用組成物では、シクロデキストリンと添加剤を併用する場合、シクロデキストリンを単独使用又は添加剤を単独使用する場合よりも、スルホニル尿素系薬の水中溶解度と安定性を大幅に向上させ、且つＰＶＣ製輸液バッグの薬物への吸着性を顕著に抑制することができた。該医薬組成物は、処方がシンプルであり、コストが低く、操作しやすく、品質が安定して制御可能であり、再現性に優れたという利点を有した。

Claims (21)

1. スルホニル尿素系薬、シクロデキストリン及び添加剤を含む医薬組成物。
2. 前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：０．１〜４０００、例えば、１：１〜４００、１：１〜１００、１：１〜５０、１：５〜５０、１：５０〜４００、１：１〜１０、１：１〜８、１：１〜６、１：１〜４、１：６〜８であり、
   好ましくは、前記添加剤はメグルミンであり、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：１〜４００であり、
   好ましくは、前記添加剤は炭酸ナトリウムであり、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：５０〜４００であり、
   好ましくは、前記添加剤は水酸化ナトリウムであり、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：５０〜４０００であり、
   好ましくは、前記添加剤は炭酸水素ナトリウムであり、前記添加剤とシクロデキストリンの重量比は１：０．１〜１０である請求項１に記載の医薬組成物。
3. 前記スルホニル尿素系薬と添加剤の重量比は１：０．０１〜１００、例えば、１：０．０５〜１００、１：０．５〜１００である請求項１に記載の医薬組成物。
4. 前記スルホニル尿素系薬とシクロデキストリンの重量比は１：０．２〜１０００、例えば、１：２５〜２５０、１：１〜５０である請求項１に記載の医薬組成物。
5. 前記スルホニル尿素系薬、添加剤及びシクロデキストリンの重量比は１：０．０５〜１００：０．２〜１０００、例えば、１：０．５〜５０：２５〜２５０である請求項１に記載の医薬組成物。
6. 前記スルホニル尿素系薬は、グリベンクラミド、グリクラジド、グリピジド、グリキドン、グリボルヌリド、グリメピリド、グリソキセピド、アセトヘキサミド、グリヘキサミド、グリサムリド、グリセンチド、グリソラミド、グリオクタミド、クロルプロパミド、トラザミド、トルブタミド、レパグリニド及びナテグリニドから選ばれ、
   好ましくは、前記スルホニル尿素系薬はグリベンクラミドである請求項１に記載の医薬組成物。
7. 前記シクロデキストリンはα−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン及びその薬学的に許容されるシクロデキストリン誘導体から選ばれ、
   好ましくは、前記薬学的に許容されるシクロデキストリン誘導体はジメチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン及びトリメチル−β−シクロデキストリンから選ばれ、
   好ましくは、前記シクロデキストリンはβ−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン及びトリメチル−β−シクロデキストリンから選ばれ、
   さらに好ましくは、前記シクロデキストリンは２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン及び／又はスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリンであり、
   特に好ましくは、前記シクロデキストリンは２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである請求項１に記載の医薬組成物。
8. 前記添加剤は炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ホウ砂、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、クエン酸二水素ナトリウム、クエン酸一水素ナトリウム、クエン酸ナトリウム、メグルミン、トリスヒドロキシメチルアミノメタン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、リジン、アルギニン及びヒスチジンから選ばれ、
   好ましくは、前記添加剤は水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ホウ砂及びメグルミンから選ばれ、
   好ましくは、前記添加剤は炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム及び／又はメグルミンであり、
   好ましくは、前記添加剤はメグルミンである請求項１に記載の医薬組成物。
9. さらにグルコース、塩化ナトリウム、凍結乾燥添加剤（例えば、マンニトール、乳糖又はゼラチン）、ｐＨ調整剤（例えば塩酸）及び／又は水を含む請求項１に記載の医薬組成物。
10. 注射剤であり、好ましくは溶液型注射剤（例えば、水溶液型注射剤）又は粉末注射剤である請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
11. 溶液型注射剤（例えば水溶液型注射剤）であり、
    好ましくは、前記医薬組成物における前記シクロデキストリンの濃度は０．５％〜４０％（ｗ／ｖ）、例えば、１％〜４０％（ｗ／ｖ）、２．５％〜４０％（ｗ／ｖ）、５％〜２０％（ｗ／ｖ）、１％〜５％（ｗ／ｖ）であり、前記添加剤の濃度は０．０１％〜２０％（ｗ／ｖ）、例えば、０．０１％〜１５％（ｗ／ｖ）、０．０１％〜１０％（ｗ／ｖ）、０．０１％〜５％（ｗ／ｖ）、０．１％〜５％（ｗ／ｖ）であり、
    さらに好ましくは、前記医薬組成物における前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度以下であり、特に好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０１〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、０．０１〜１０ｍｇ／ｍｌ、０．０１〜５ｍｇ／ｍｌ、０．０１〜２．５ｍｇ／ｍｌ、０．０ｌ〜２ｍｇ／ｍｌである請求項１０に記載の医薬組成物。
12. 以下の一つ又は複数の特徴を有し、
    ａ）前記添加剤の濃度は０．０１〜０．５％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は０．５〜１０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ、例えば、ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ）以下であり、
    ｂ）前記添加剤の濃度は０．１〜０．５％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は０．５〜１０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０ｌ〜３ｍｇ／ｍｌ、例えばｌ〜３ｍｇ／ｍｌ）以下であり、
    ｃ）前記添加剤の濃度は０．１〜０．３％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は１〜５％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０ｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌ、例えばｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌ）以下であり、
    ｄ）前記添加剤の濃度は１〜１０％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は１〜３０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０１〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、１０〜５０ｍｇ／ｍｌ）以下であり、
    ｅ）前記添加剤の濃度は４〜６％（ｗ／ｖ）であり、前記シクロデキストリンの濃度は５〜２０％（ｗ／ｖ）であり、前記スルホニル尿素系薬の濃度は前記溶液型注射剤での該スルホニル尿素系薬の飽和濃度（好ましくは、前記スルホニル尿素系薬の濃度は０．０１〜５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、２５〜５０ｍｇ／ｍｌ）以下である請求項１１に記載の医薬組成物。
13. ｐＨ値が５〜１１、好ましくは６〜１０、さらに好ましくは７〜９、特に好ましくは７〜８である請求項１０−１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
14. 添加剤及びシクロデキストリンを溶剤中に溶解するステップａ）と、
    ステップａ）の製品にスルホニル尿素系薬を加えて、撹拌して混合するステップｂ）と、
    必要に応じて、ステップｂ）の製品に凍結乾燥添加剤を加えて、ｐＨ値を調整するステップｃ）と、
    ステップｂ）又はｃ）の製品を殺菌するステップｄ）とを含み、
    必要に応じて、ステップｄ）の製品を乾燥させて、所望組成物を得て、
    好ましくは、前記乾燥は凍結乾燥であり、
    好ましくは、前記溶剤は水、生理食塩水又はグルコース溶液である請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物の調製方法。
15. 請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物の急性脳卒中、神経障害、外傷性脳損傷、脳浮腫、脊髄損傷、心筋梗塞、ショック、臓器虚血、心室性不整脈、Ｉ型糖尿病又はＩＩ型糖尿病を予防及び／又は治療するための薬物の調製における用途。
16. 急性脳卒中、神経障害、外傷性脳損傷、脳浮腫、脊髄損傷、心筋梗塞、ショック、臓器虚血、心室性不整脈、Ｉ型糖尿病又はＩＩ型糖尿病を予防及び／又は治療するための方法であって、請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物をこれを必要とする被験者に治療及び／又は予防有効量で投与することを含む方法。
17. 急性脳卒中、神経学的欠損、外傷性脳損傷、脳浮腫、脊髄損傷、心筋梗塞、ショック、臓器虚血、心室性不整脈、Ｉ型糖尿病又はＩＩ型糖尿病を予防及び／又は治療するための方法で、請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物をこれを必要とする被験者に治療及び／又は予防有効量で投与することを含む方法。
18. 添加剤はスルホニル尿素系薬と相互作用を発生させて、シクロデキストリンの包接効率を高め、さらに薬物溶解度を改善する物質である請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
19. 前記添加剤は炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム及び／又はメグルミンである請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
20. 前記添加剤は炭酸ナトリウムである請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
21. 前記添加剤はメグルミンである請求項１−１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。