JP2020508079A - 抗pd−l1抗体及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明のもう一つにおいて、本発明にかかるCDR、軽鎖可変領域又は重鎖可変領域をコードする核酸分子及びその相補配列、並びにそれらの核酸分子又はその相補配列を含む発現ベクター及び宿主細胞を提供し、ただし、前記核酸分子は、配列番号1〜40、42、44、46及び48に示すアミノ酸配列をコードする核酸分子を含むが、それらに限定されるものではない。
[汎用技術]
特に断らない限り、本発明の実施において、分子生物学(組換え技術も含む)、微生物学、細胞生物学、生物化学及び免疫学の通常技術を採用するが、それらはいずれも本分野の技術の範囲内に入る。それらの技術は、例えばMolecular Cloning :A Laboratory Manual(モレキュラー クローニング:ア ラボラトリー マニュアル)、第二版(Sambrookら,1989);Oligonucleotide Synthesis(オリゴヌクレオチド合成)(M.J.Gait編集,1984);Animal Cell Culture(動物細胞培養)(R.I.Freshney編集,1987);Methods in Enzymology(酵素学における方法)(Academic Press,Inc.);Current Protocols in Molecular Biology(分子生物学カレント・プロトコル)(F.M.Ausubelら編集,1987,及び定期的に更新する);PCR :The Polymerase Chain Reaction(PCR :ポリメラーゼ連鎖反応),(Mullisら編集,1994);A Practical Guide to Molecular Cloning(モレキュラー クローニングの実用的ガイド)(Perbal Bernard V.,1988);Phage Display :A Laboratory Manual(ファージディスプレイ:ア ラボラトリー マニュアル)(Barbasら,2001)などの文献において十分に解釈されてある。
(1.1.リンパ球の発育と活性化)
ヒトのリンパ球の2種類の主要なタイプはT(胸腺由来)とB(骨髄由来)である。それらの細胞は、既にリンパ球系発育経路に付された骨髄及び胎児肝臓(fetal liver)中の造血幹細胞から由来する。それらの幹細胞の子孫は、枝分かれした経路をたどってB又はTリンパ球に成熟する。ヒトBリンパ球の発育は完全に骨髄内で生じる。他方で、T細胞は骨髄を出て血流を通って胸腺に移動した未熟な前駆細胞から発育するものであり、それらは胸腺で増殖し且つ成熟なTリンパ球に分化する。
Tリンパ球は免疫グロブリンを発現しないが、その代わりに、T細胞受容体(TCR)と称される表面タンパク質を経由して外来物質の存在を検出する。それらの受容体は、直接な接触によって、又は他の免疫細胞の活性に対して影響を与えることによって、抗原を認識する。T細胞はマクロファージと共に、細胞仲介免疫に関与する主要な細胞タイプである。
他の生体防御から区別される哺乳動物の免疫系の三つの一次機能特性は、(1)特異性―大多数の標的分子の間で個別に認識する、並びに応答する若しくは応答しない能力と、(2)認識―非自己のものから自己のものを特定することで、数え切れないあらゆるタンパク質や他の有機分子と穏やかに共存できるが、依然として生体に導入される外来物質に対して強烈に反応できる能力と、並びに(3)記憶―経験に沿ってモデルを構築することで、特定の外来病原体との次の遭遇が、最初の遭遇で生じたものよりも迅速で活発な応答を惹起する能力と、を含む。それらの機能の中の一つ又は複数が障害されると、生理的病症がもたらされてしまう。
T細胞の活性化を制御する重要な負の共刺激シグナルは、プログラム細胞死−1受容体(PD−1)(CD279)並びにそのリガンド結合パートナーのPD−L1(B7−H1、CD274)及びPD−L2(B7−DC、CD273)によって提供される。PD−1の負の制御作用は、自己免疫に陥りやすいPD−1ノックアウト(Pdcd1−/−)によって示される。Nishimuraら,Immunity(免疫)11:141-51(1999);Nishimuraら,Science(サイエンス)291 :319-22(2001)。PD−1はCD28及びCTLA−4に関連するが、ホモダイマー形成を可能にする膜基部システインを欠いている。PD−1の細胞質側ドメインは、免疫受容体チロシン依存性抑制モチーフ(ITIM、V/IxYxxL/V)を含む。PD−1はPD−L1及びPD−L2にのみ結合する。Freemanら,J.Exp.Med.(実験医学雑誌)192:1-9(2000);Dongら,Nature Med.(ネイチャー メディシン)5 :1365-1369(1999);Latchmanら,Nature Immunol.(ネイチャー イミュノロジー)2:261-268(2001);Tsengら,J.Exp.Med.(実験医学雑誌)193:839-846(2001)。
本文で用いられる全ての科学技術用語は、当業者の理解と同様な意味を有する。本分野の定義及び用語について、当業者は具体的に分子生物学カレント・プロトコル(Current Protocols in Molecular Biology(Ausubel))に参考できる。アミノ酸残基の略語は、本分野で用いられる、20つの通常L−アミノ酸のうちの1つを表記するための3文字及び/又は1文字の標準コードである。
「ヒト抗体」とは、ヒトから作製された抗体のアミノ酸性配列に相応するアミノ酸配列を有し、及び/又は、本文で開示されるヒト抗体を産生するためのいずれかの技術を用いて産生される抗体を指す。ヒト抗体のこのような定義では、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体が明確に除外される。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む本分野で公知の種々の技術を使用して産生することができる。HoogenboomとWinter,分子生物学雑誌(J.Mol.Biol.)227:381(1991);Marksら,分子生物学雑誌(J.Mol.Biol.)222:581(1991)。ヒトモノクローナル抗体の調製のために利用可能な方法は、Coleら, モノクローナル抗体と癌療法(Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy), Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boernerら, J. Immunol., 147(1): 86-95 (1991)に記載される。さらに、van Dijkとvan de Winkel,カレント・オピニオン・イン・ファーマコロジー(Curr.Opin.Pharmacol.),5:368-74(2001)を参照する。ヒト抗体は、抗原攻撃に応答してそのような抗体を産生するように修飾されているが、その内因性遺伝子座が無能になっているトランスジェニック動物(例えば免疫化ゼノマウス)に対して、抗原を投与することにより調製することができる(例えばゼノマウスTM技術に関する米国特許第6,075,181号及び第6,150,584号を参照する)。さらに、ヒトB細胞ハイブリドーマ技術を介して産生されるヒト抗体に関しては、例えばLiら, 米国科学アカデミー紀要(Proc. Natl. Acad. Sci. USA), 103: 3557-3562 (2006)を参照する。
本発明は、PD−L1に結合できる抗PD−L1抗体及びその機能性断片を提供する。本発明にかかる抗体又はその機能性断片は、以下の特性の少なくとも1種を有する:高親和性でPD−L1とPD−1の相互作用を遮断できること;PD−L1に高特異性で結合できること。
一つの関連する点で、本発明は、抗PD−L1抗体と第2の治療剤の組み合わせである医薬組成物を提供する。一つの実施形態において、前記第2の治療剤は、抗PD−L1抗体と有利に組み合わせる任意の試薬である。抗PD−L1抗体と有利に組み合わせる例示的な試薬は、PD−L1活性を抑制する他の試薬(他の抗体又はその抗原結合断片、ペプチド阻害剤、小分子拮抗剤等を含む)及び/又はPD−L1上流又は下流のシグナル伝達を阻害する試薬を含むが、それらに限定されるものではない。
もう一つの好ましい実施形態において、前記重鎖可変領域は配列番号33又はその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号32又はその変異体である。
さらに一つの好ましい実施形態において、前記重鎖可変領域は配列番号37又はその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号36又はその変異体である。
さらに一つの好ましい実施形態において、前記重鎖可変領域は配列番号40又はその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号39又はその変異体である。
本発明にかかる抗体又はその機能性断片はヒト化のものであってもよい。ヒト化抗体を調製する方法は当業者によく知られる。例えば、本発明のCDR配列をヒト抗体可変領域に転移することにより、本発明のヒト化抗PD−L1抗体を調製することができる。前記ヒト化抗体は、抗抗体反応(AAR)及びヒト抗マウス抗体反応(HAMA)を発生せず、抗抗体に中和されて早速に排除されるものではなく、且つ免疫エフェクター機能を有する。
本発明は、前記抗体又はその機能性断片の産生が可能である条件下で本発明にかかる前記宿主細胞を培養すること、並びにそれによって産生した前記抗体又はその機能性断片を回収することを含む、抗PD−L1抗体又はその機能性断片を産生する方法を提供する。
本発明のもう一つにおいて、その必要のある対象に、治療有効量の本発明にかかる抗体又はその機能性断片、核酸、発現ベクター、宿主細胞、免疫抱合体又は医薬組成物を投与することを含む、PD−L1活性を消失、抑制又は低下させることで疾患又は病症を予防又は治療する方法を提供する。
義翹神州からヒトPD−L1遺伝子cDNA配列を含有するプラスミドHG10084−Mを購入し、フォワードプライマー5’−GTACGCTAGCCACCATGAGGATATTTGCTGTC−3’(配列番号50)とリバースプライマー5’−GATCCTCGAGCGTGAGTCCTTTCATTTGG−3’(配列番号51)を利用して、ヒトPD−L1細胞外断片(ヌクレオチド配列は配列番号41に示す)をPCR増幅した。増幅した断片をNheIとXhoIで二重酵素切断した後、自力で構築した真核発現プラスミド系(pSec CAGA2 ECD、pCDNA3.1プラスミドを基に改造して得られたもの、図1Aに示す)にクローニングし、該プラスミドでPEIによって293 E細胞をトランスフェクションし、6日後、培地上澄を収集し、アフィニティークロマトグラフィーで精製し、ヒトPD−L1細胞外領域タンパク質を得た。結果は図1Bに示すように、ヒトPD−L1細胞外領域タンパク質は、SDS−PAGEをクマシーブリリアントブルーで染色すると、75Kダルトン程度の大きさを示した。
(2.1 ビオチン標識ヒトPD−L1組換えタンパク質)
ヒトPD−L1組換えタンパク質(即ち実施例1で得られたヒトPD−L1細胞外領域タンパク質)と、DMSOに溶解されたビオチン−NHSとを1:10のモル比の割合で混合し、摂氏4度で2時間放置し、反応混合物を10kDの限外濾過カラムに通過させることで、ビオチン標識ヒトPD−L1と遊離のビオチンを分離した。
ヒトPD−L1とPD−1の結合能を検討するために、96ウェルマイクロプレートにおいて、2μg/mlのPD−1を被覆緩衝液中に展開させ、4℃で一晩経過した。翌日、ウェル内の溶液を捨て、洗浄緩衝液で3回洗浄した。その後、2%牛乳含有PBS溶液を加え、60分間ブロッキングした。洗浄緩衝液で3回洗浄してから、異なる濃度のビオチン標識ヒトPD−L1を100μl加え、室温で1時間インキュベートした後、洗浄緩衝液で3回リンスし、洗浄緩衝液で1:10000倍でHRP−ストレプトアビジンを希釈し、室温で1時間インキュベートし、洗浄緩衝液で3回リンスしてから、TMB基質溶液を50μl加えて発色し、室温で8分間反応させた後、2Mの塩酸溶液100μlで反応を中止させ、450nmで吸光度を読み取った。
(3.1 293FヒトPD−1安定発現細胞株の樹立)
構築されたピューロマイシンスクリーニング系付きPD−1完全長配列真核発現ベクターを293F接着細胞にPEIトランスフェクションした。トランスフェクションの24h後、ピューロマイシン(2μg/ml)によって、293F PD−1安定発現細胞が形成するまでスクリーニングした。同時に、限界希釈法により、1ウェルあたり0.8個の細胞を96ウェルプレートに播き、15日後、293F PD−1モノクローンを選別して継代し、293F PD−1安定発現細胞株を形成した。
異なる濃度のビオチン標識ヒトPD−L1組換えタンパク質(即ち実施例1で得られたヒトPD−L1細胞外領域タンパク質)を293F PD−1安定発現細胞懸濁液と混合し、摂氏37度で30分間インキュベートした。FACS緩衝液(20mM Tris、100mM NaCl、2mM Ca2+、1% FBS、pH 7.4)で3回洗浄した後、ストレプトアビジン−アロフィコシアニン(SA−APC,2μg/ml)を加え、室温で30分間インキュベートした。FACS緩衝液で3回洗浄した後、フローサイトメーターで検出した。
(4.1 動物の免疫)
実施例1で得られたヒトPD−L1組換えタンパク質を抗原として等量の免疫アジュバント(フロインドアジュバント)と混合し、5匹の6週齢メスFVBマウスにて皮下免疫を行った。初回免疫の後、週に1回追加免疫し、合計で4回の免疫を行った。
最終の追加免疫の後、マウスの脚の付け根のリンパ節を取り、生理食塩水中で磨砕した後、リンパ球リッチ懸濁液を取り、通常のエレクトロポレーション方法(BTX社のエレクトロポレーターハンドブックを参照する)でそれをSP2/0細胞と融合させた。融合細胞をHAT含有RPMI−1640完全培地(Sigma)中において、5% CO2、37℃の条件下で培養した。
12000株の異なるモノクローナルハイブリドーマ細胞から、酵素(Elisa)反応により、分泌される抗体がヒトPD−L1タンパク質に結合できるクローンを950株スクリーニングした。それらの950株のクローンの中で、139株は293F細胞に発現されるPD−L1に結合できた。それらの139株のクローンの中で、23株はビオチン標識ヒトPD−L1と293におけるPD−1の結合を阻害する能力を備えた。我々はこの23株のクローンをめぐって次の実験を行った。
PD−L1を発現するCHO細胞を96ウェルプレートに播き、1ウェルあたりの細胞量を5×104にし、37℃、7% CO2で一晩培養し、細胞上澄を取り除き、各ウェルに抗体希釈液(初期濃度が60μg/mlで、3倍の濃度勾配で希釈した)を40μl加え、PD−1及びNFAT−ルシフェラーゼレポーター遺伝子を持続発現できるJurkatレポーター細胞(Promega社から購入した)を40μl加え、総細胞数を1×105細胞にし、37℃、7% CO2で6時間培養し、ルシフェラーゼ試薬を加え、マイクロプレートリーダーで発光値を検出した。
表9に示すように、ForteBio装置により、異なるマウス化抗体とヒトPD−L1の間の結合定数を測定した。結果から明らかなように、実施例5で調製したマウス化抗体4、6、16、17、18及び21はいずれもヒトPD−L1に特異的に結合できる。
ハイブリドーマ細胞に発現される抗体の発現量、活性、タイプ等を考慮して、クローン6、16、18、21を選択して、引き続き実験を行った。候補ハイブリドーマ細胞を培養し、1000rpm遠心で細胞を収集し、Trizolで全RNAを抽出した。それを鋳型として第一鎖cDNAを合成してから、該第一鎖cDNAを次の鋳型として、ハイブリドーマ細胞に相応する可変領域DNA配列を増幅した。増幅反応に用いられたプライマー配列は、抗体可変領域の第一フレームワーク領域及び定常領域と相補していた(Larrick,J.W.ら,1990,Scand.J.Immunol.,32,121-128及びColoma,J.J.ら,(1991)BioTechniques,11,152-156)。50μlの反応系において、それぞれcDNAを1μl、10×PCR緩衝液を5μl、上流及び下流プライマーをそれぞれ1μl(25 pmol)、dNTPを1μl、25 mmolPL MgCl2を1μl、H2Oを39μl加え、95℃で10 min初期変性し、Taq酵素を1μl加え、温度のサイクルに入ってPCR増幅を行った。反応条件は、94℃で1 minの変性、58℃で1 minのアニーリング、72℃で15sの伸長というサイクルを、合計で32回行い、そして72℃で10 min保温した。
増幅産物のシーケンシングをすると、得られた候補ハイブリドーマの重鎖と軽鎖の可変領域配列は:
クローン6:
軽鎖:配列番号31;
LCDR1:配列番号1;
LCDR2:配列番号2;
LCDR3:配列番号3;
軽鎖変異体:配列番号32;
LCDR1:配列番号4;
LCDR2:配列番号5;
LCDR3:配列番号6;
重鎖:配列番号33;
HCDR1:配列番号7;
HCDR2:配列番号8;
HCDR3:配列番号9。
軽鎖:配列番号34;
LCDR1:配列番号10;
LCDR2:配列番号11;
LCDR3:配列番号12;
重鎖:配列番号35;
HCDR1:配列番号13;
HCDR2:配列番号14;
HCDR3:配列番号15。
軽鎖:配列番号36;
LCDR1:配列番号16;
LCDR2:配列番号17;
LCDR3:配列番号18;
重鎖:配列番号37;
HCDR1:配列番号19;
HCDR2:配列番号20;
HCDR3:配列番号21;
重鎖変異体:配列番号38;
HCDR1:配列番号22;
HCDR2:配列番号23;
HCDR3:配列番号24。
軽鎖:配列番号39;
LCDR1:配列番号25;
LCDR2:配列番号26;
LCDR3:配列番号27;
重鎖:配列番号40;
HCDR1:配列番号28;
HCDR2:配列番号29;
HCDR3:配列番号30であった。
ヒト血細胞(北京血液研究所)から重鎖定常領域Fc断片及び軽鎖k定常領域をクローニングし、pCDNA3.1プラスミドに組み込んで(Walls MA,Hsiao HとHarris LJ(1993),Nucleic Acids Research,Vol.21,No.122921-2929を参照する)改造を行った。実施例8に記載のクローン6、16、18、21の重鎖と軽鎖の可変領域配列断片をGenscript社に合成してもらい、重鎖をBspq Iで切断し、軽鎖をBspq Iで切断した後、相応に改造されたpCDNA3.1プラスミドに組み込み、且つシーケンシングによって正確なクローンを決定した。次の実験材料はいずれも、該シリーズのプラスミドで細胞をトランスフェクションしてから抽出して得られるものであった。
96ウェルマイクロプレートを0.5μg/mlのヒトPD−L1で被覆し、摂氏37度で60分間恒温インキュベートした。その後、ウェル内の溶液を捨て、洗浄緩衝液で3回洗浄し、2% BSA含有PBS溶液を加えて60分間ブロッキングした。洗浄緩衝液で3回洗浄してから、勾配希釈した抗体を加え、摂氏37度で60分間インキュベートした後、洗浄緩衝液で3回リンスし、次に1:10000倍で希釈したビオチン−抗IgG4抗体を加え、摂氏37度で1時間インキュベートし、洗浄緩衝液で3回リンスしてから、洗浄緩衝液で1:10000倍で希釈したHPR−ストレプトアビジンを加え、室温で1時間インキュベートし、洗浄緩衝液で3回リンスしてから、TMB基質溶液を100μl加えて発色し、室温で30分間反応させた後、2Mの塩酸溶液100μlで反応を中止させ、450nmで吸光度を読み取った。
PD−L1を発現する293F細胞を消化してから、遠心でFACS緩衝液中に再懸濁させ、細胞量が〜2.5×104で体積が50μlになるように1.5ml EPチューブに入れ、異なる濃度のキメラ抗体希釈液を50μl加えて均一に混合し、室温で30minインキュベートした。FACS緩衝液で細胞を2回洗浄してから、ヒツジ抗ヒトIgG−PE抗体を100μl加え、遮光で30minインキュベートした。FACS緩衝液で2回洗浄してから、FACS検出を行った。
組換え発現のキメラ抗体を取り(10μg/ml)、ビオチン標識ヒトPD−L1(即ち実施例1で得られたヒトPD−L1細胞外領域タンパク質、1μg/ml)と混合し、室温で30分間インキュベートした。その後、混合物と293F PD−1安定発現細胞株(1.5×105細胞)懸濁液を摂氏37度で15分間インキュベートし、PBSで3回洗浄した後、5μg/mlのSA−APCを加え、室温で30分間インキュベートした。PBSで3回洗浄した後、フローサイトメーター検出により、キメラ抗体がヒトPD−L1と293F細胞表面におけるPD−1の結合を阻害できるか否かを検討した。
PD−L1を発現するCHO細胞を96ウェルプレートに播き、1ウェルあたりの細胞量を5×104にし、37℃、7% CO2で一晩培養し、細胞上澄を取り除き、各ウェルに抗体希釈液(初期濃度が60μg/mlで、3倍の濃度勾配で希釈した)を40μl加え、PD−1及びNFAT−ルシフェラーゼレポーター遺伝子を持続発現できるJurkatレポーター細胞を40μl加え、総細胞数を1×105細胞にし、37℃、7% CO2で6時間培養し、ルシフェラーゼ試薬を加え、マイクロプレートリーダーで発光値を検出した。
以上で得られたハイブリドーマ細胞が分泌した抗体の可変領域配列に応じて、ヒト化修飾を行った。簡単に言えば、ヒト化修飾過程は以下の工程に関する:A、各ハイブリドーマ細胞が分泌した抗体の遺伝子配列をヒト胎児性抗体遺伝子配列とアラインメントし、相同性の高い配列を見出す;B、HLA−DRの親和性を解析・調査し、親和性の低いヒト胎児性フレームワーク配列を選別する;C、コンピューターシミュレーション技術を利用し、分子ドッキングを用いて、可変領域及びその周辺のフレームワークのアミノ酸配列を解析し、その三次元的な結合形態を調査した。静電力、ファン・デル・ワールス力、親疎水性及びエントロピーを計算することにより、各ハイブリドーマ細胞が分泌した抗体の遺伝子配列の中で、PD−1と作用でき且つ三次元的フレームワークを維持できる肝心なアミノ酸個体を解析し、それを選択されたヒト胎児性遺伝子フレームワークにグラフトした上で、保留の必要があるフレームワーク領域のアミノ酸部位を標示し、ヒト化抗体を合成した(Pini, A.ら, (1998). Design and Use of a Phage Display Library: HUMAN ANTIBODIES WITH 10 SUBNANOMOLAR AFFINITY AGAINST A MARKER OF ANGIOGENESIS ELUTED FROM A TWO-DIMENSIONAL GEL.,Journal of Biological Chemistry, 273(34): 21769-21776)。それに基づき、以下の2つのヒト化抗体30及び38が得られた:
ヒト化抗体30軽鎖:
配列番号42、軽鎖アミノ酸配列;
配列番号43、軽鎖ヌクレオチド配列;
ヒト化抗体30重鎖:
配列番号44、重鎖アミノ酸配列;
配列番号45、重鎖ヌクレオチド配列。
配列番号46、軽鎖アミノ酸配列;
配列番号47、軽鎖ヌクレオチド配列;
ヒト化抗体38重鎖:
配列番号48、重鎖アミノ酸配列;
配列番号49、重鎖ヌクレオチド配列。
96ウェルマイクロプレートに播き、PD−L1で被覆し、摂氏37度で60分間恒温インキュベートした。その後、ウェル内の溶液を捨て、洗浄緩衝液で3回洗浄し、2% BSA含有PBS溶液を加えて60分間ブロッキングした。洗浄緩衝液で3回洗浄してから、1ウェルあたりにビオチン標識IgG4抗体を100μl加え、摂氏37度で30分間インキュベートした後、洗浄緩衝液で3回リンスし、次に異なる倍数で希釈したヒト化抗体を加え、摂氏37度で1時間インキュベートし、洗浄緩衝液で3回リンスしてから、洗浄緩衝液で1:10000倍で希釈したHPR標識マウス抗ヒトIgG(H+L)を加え、室温で1時間インキュベートし、洗浄緩衝液で3回リンスしてから、TMB基質溶液を100μl加えて発色し、室温で30分間反応させた後、2Mの塩酸溶液100μlで反応を中止させ、450nmで吸光度を読み取った。
PD−L1を発現する293F細胞を消化してから、遠心でFACS緩衝液中に再懸濁させ、細胞量が〜2.5×104で体積が50μlになるように1.5ml EPチューブに入れ、異なる濃度の抗体(人化抗体30、38)を50μl加えて均一に混合し、室温で30minインキュベートした;FACS緩衝液で細胞を2回洗浄してから、ヒツジ抗ヒトIgG−PE抗体を100μl加え、遮光で30minインキュベートした;FACS緩衝液で2回洗浄してから、FACS検出を行った。
組換え発現のヒト化抗体を取り(10μg/ml)、ビオチン標識ヒトPD−L1(即ち実施例1で得られたヒトPD−L1細胞外領域タンパク質、1μg/ml)と混合し、室温で30分間インキュベートした。その後、混合物と293F PD−1安定発現細胞株(1.5×105細胞)を摂氏37度で15分間インキュベートし、PBSで3回洗浄した後、5μg/mlのSA−APCを加え、摂氏4度で15分間インキュベートした。PBSで3回洗浄した後、フローサイトメーター検出により、ヒト化抗体がヒトPD−L1と293F細胞表面におけるPD−1の結合を阻害できるか否かを検討した。
PD−L1を発現するCHO細胞を96ウェルプレートに播き、1ウェルあたりの細胞量を5×104にし、37℃、7% CO2で一晩培養し、細胞上澄を取り除き、各ウェルに抗体希釈液(初期濃度が60μg/mlで、3倍の濃度勾配で希釈した)を40μl加え、PD−1及びNFAT−ルシフェラーゼレポーター遺伝子を持続発現できるJurkatレポーター細胞を40μl加え、総細胞数を1×105細胞にし、37℃、7% CO2で6時間培養し、ルシフェラーゼ試薬を加え、マイクロプレートリーダーで発光値を検出した。
96ウェルマイクロプレートに播き、hPD−L1−hisで被覆し、摂氏37度で90分間恒温インキュベートした。室温で平衡状態を約5分間取り、マイクロプレートウォッシャーでマイクロプレートを300μL/ウェル×6回で洗浄し、2% BSA含有PBS溶液を加えて37度で90分間ブロッキングした。マイクロプレートウォッシャーでマイクロプレートを300μL/ウェル×6回で洗浄し、1ウェルあたりに試料溶液を100μl加え、摂氏37度で60分間インキュベートした後、マイクロプレートウォッシャーでマイクロプレートを300μL/ウェル×6回で洗浄し、希釈液で1:5000倍でHPR標識抗人IgG(FC特異性)−ペルオキシダーゼ抗体を希釈し、摂氏37度で1時間インキュベートし、マイクロプレートウォッシャーでマイクロプレートを300μL/ウェル×6回で洗浄し、TMB基質溶液を100μl加えて発色し、摂氏37度で30分間反応させた後、2Mの塩酸溶液100μlで反応を中止させ、450nmで吸光度を読み取った。
6〜8週齢メスC57BL/6Jマウスを15匹取り、右腋下から1×106個の(50μLの)MC38−B7H1結腸癌細胞を注射し、5〜7日目で腫瘍の形成が触れるようになった後,マウスの腫瘍の体積を計測した。1群あたりに5匹で、3群に分けた。群1は、各匹にKLHを100μL腹腔内注射した。群2は、抗体30を150μg/100μL腹腔内注射した。群3は抗体38を150μg/100μL腹腔内注射した。週に2回注射し、継続的に3週間注射した。週に3回計測した。横×縦2/2で腫瘍体積を計算した。
Claims (12)
- ヒトPD−L1に特異的に結合し、且つアミノ酸配列番号7、8、9、13、14、15、19、20、21、22、23、24、28、29、30若しくは前記配列のいずれかの変異体からなる群から選ばれる重鎖CDR、及び/又はアミノ酸配列番号1、2、3、4、5、6、10、11、12、16、17、18、25、26、27若しくは前記配列のいずれかの変異体からなる群から選ばれる軽鎖CDRを含む抗体又はその機能性断片。
- 前記重鎖CDRのCDR1、CDR2とCDR3のアミノ酸配列は、以下の各アミノ酸配列若しくはその変異体の組み合わせからなる群から選ばれる1種の組み合わせである:
- その重鎖CDR1、CDR2とCDR3及び軽鎖CDR1、CDR2とCDR3のアミノ酸配列は、以下の各アミノ酸配列若しくはその変異体の組み合わせからなる群から選ばれる1種の組み合わせであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の抗体又はその機能性断片。
- アミノ酸配列番号33、35、37、38、40若しくは前記配列のいずれかの変異体からなる群から選ばれる重鎖可変領域、及び/又はアミノ酸配列番号31、32、34、36、39若しくは前記配列のいずれかの変異体からなる群から選ばれる軽鎖可変領域を含むことを特徴とする、請求項1〜3のいずれか一項に記載の抗体又はその機能性断片。
- 前記重鎖可変領域は配列番号33若しくはその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号31若しくはその変異体であり、又は前記重鎖可変領域は配列番号33若しくはその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号32若しくはその変異体であり、又は前記重鎖可変領域は配列番号35若しくはその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号34若しくはその変異体であり、又は前記重鎖可変領域は配列番号37若しくはその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号36若しくはその変異体であり、又は前記重鎖可変領域は配列番号38若しくはその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号36若しくはその変異体であり、又は前記重鎖可変領域は配列番号40若しくはその変異体であり、且つ前記軽鎖可変領域は配列番号39若しくはその変異体であることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか一項に記載の抗体又はその機能性断片。
- キメラ抗体、ヒト化抗体又は完全ヒト抗体であることを特徴とする、請求項1〜5のいずれか一項に記載の抗体又はその機能性断片。
- アミノ酸配列番号44、配列番号48若しくは前記配列のいずれかの変異体からなる群から選ばれる重鎖、及び/又はアミノ酸配列番号42、配列番号46若しくは前記配列のいずれかの変異体からなる群から選ばれる軽鎖を含む抗体又はその機能性断片。
- 請求項1〜7のいずれか一項に記載の抗体又はその機能性断片をコードする分離された核酸分子及びその相補配列、並びに前記核酸分子又はその相補配列を含む発現ベクター又は宿主細胞。
- 配列番号1〜40、42、44、46及び48に示すアミノ酸配列をコードする分離された核酸分子及びその相補配列、並びに前記核酸分子又はその相補配列を含む発現ベクター又は宿主細胞。
- 請求項1〜7のいずれか一項に記載の抗体又はその機能性断片、或いは請求項8に記載の核酸分子、発現ベクター又は宿主細胞、或いはそれらの任意の組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
- 請求項1〜7に記載の抗体又はその機能性断片、或いは請求項8に記載の核酸分子、発現ベクター又は宿主細胞の、T細胞機能不全疾患を治療する薬物の製造における使用、並びにT細胞の機能を増強して細胞仲介免疫応答を向上させる薬物の製造における使用;前記疾患は、癌又は炎症性疾患であることが好ましい。
- 治療剤とカップリングした請求項1〜7のいずれか一項に記載の抗体又はその機能性断片を含む免疫抱合体;前記治療剤は、毒素、放射性同位体、薬物又は細胞毒剤であることが好ましい。
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008544755A (ja) * | 2005-07-01 | 2008-12-11 | メダレックス インコーポレーティッド | プログラム死リガンド1(pd−l1)に対するヒトモノクローナル抗体 |
JP2013511959A (ja) * | 2009-11-24 | 2013-04-11 | メディミューン リミテッド | B7−h1に対する標的結合剤 |
JP2014532687A (ja) * | 2011-11-03 | 2014-12-08 | ピエール、ファーブル、メディカマン | 抗原結合タンパク質および癌の治療のためのアドレッシング産物としてのその使用 |
JP2015500207A (ja) * | 2011-11-28 | 2015-01-05 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテ | 抗pd−l1抗体及びその使用 |
WO2016022630A1 (en) * | 2014-08-05 | 2016-02-11 | Jiping Zha | Anti-pd-l1 antibodies |
WO2016061142A1 (en) * | 2014-10-14 | 2016-04-21 | Novartis Ag | Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof |
JP2016513644A (ja) * | 2013-03-13 | 2016-05-16 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | 抗il−33抗体及びその使用 |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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Patent Citations (7)
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JP2014532687A (ja) * | 2011-11-03 | 2014-12-08 | ピエール、ファーブル、メディカマン | 抗原結合タンパク質および癌の治療のためのアドレッシング産物としてのその使用 |
JP2015500207A (ja) * | 2011-11-28 | 2015-01-05 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテ | 抗pd−l1抗体及びその使用 |
JP2016513644A (ja) * | 2013-03-13 | 2016-05-16 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | 抗il−33抗体及びその使用 |
WO2016022630A1 (en) * | 2014-08-05 | 2016-02-11 | Jiping Zha | Anti-pd-l1 antibodies |
WO2016061142A1 (en) * | 2014-10-14 | 2016-04-21 | Novartis Ag | Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof |
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