JP2020506670A - 抗pcsk9抗体およびその使用 - Google Patents
抗pcsk9抗体およびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020506670A JP2020506670A JP2019534112A JP2019534112A JP2020506670A JP 2020506670 A JP2020506670 A JP 2020506670A JP 2019534112 A JP2019534112 A JP 2019534112A JP 2019534112 A JP2019534112 A JP 2019534112A JP 2020506670 A JP2020506670 A JP 2020506670A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- pcsk9
- antigen
- amino acid
- acid sequence
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 175
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 174
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 174
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 163
- 102100038955 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Human genes 0.000 claims abstract description 143
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 32
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 32
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 201
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 88
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 88
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 73
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 claims description 66
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 57
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 claims description 51
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 36
- 101001098868 Homo sapiens Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 claims description 28
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 28
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 26
- 102000053786 human PCSK9 Human genes 0.000 claims description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 23
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 claims description 22
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 claims description 20
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 19
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 18
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 claims description 14
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims description 10
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 claims description 9
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 4
- FJLGEFLZQAZZCD-MCBHFWOFSA-N (3R,5S)-fluvastatin Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 FJLGEFLZQAZZCD-MCBHFWOFSA-N 0.000 claims description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 claims description 3
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N Pravastatin Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N SJ000287055 Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 229960003765 fluvastatin Drugs 0.000 claims description 3
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 claims description 3
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 claims description 3
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229950009116 mevastatin Drugs 0.000 claims description 3
- AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N mevastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=CCC[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N 0.000 claims description 3
- BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N mevastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C21 BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002797 pitavastatin Drugs 0.000 claims description 3
- VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N pitavastatin Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)\C=C\C1=C(C2CC2)N=C2C=CC=CC2=C1C1=CC=C(F)C=C1 VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002965 pravastatin Drugs 0.000 claims description 3
- TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N pravastatin Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)[C@H]2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@H](O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N 0.000 claims description 3
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 claims description 3
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 claims description 3
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 claims description 3
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 claims 1
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 claims 1
- 101710180553 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 abstract description 139
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 34
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 10
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 3
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 63
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 33
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 28
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 23
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 23
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 19
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 17
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 16
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 15
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 15
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 14
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 14
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 14
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 3-(trimethylsilyl)propane-1-sulfonic acid Chemical compound C[Si](C)(C)CCCS(O)(=O)=O TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 12
- 229960002027 evolocumab Drugs 0.000 description 12
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 12
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 11
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 11
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 11
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 11
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 11
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 9
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 9
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 8
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 8
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 8
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 8
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 8
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 8
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 8
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 8
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 7
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 7
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 7
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 7
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 6
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 6
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 6
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 6
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 6
- 108090001109 Thermolysin Proteins 0.000 description 6
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 6
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 6
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 6
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 6
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 6
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 6
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 5
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 5
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N monopropylene glycol Natural products CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 4
- 208000000563 Hyperlipoproteinemia Type II Diseases 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 4
- 206010045261 Type IIa hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 4
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 4
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 4
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 4
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 4
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 3
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102100040705 Low-density lipoprotein receptor-related protein 8 Human genes 0.000 description 3
- 108020004485 Nonsense Codon Proteins 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100021669 Stromal cell-derived factor 1 Human genes 0.000 description 3
- 101710088580 Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 102100039066 Very low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 3
- 101710177612 Very low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 108010031117 low density lipoprotein receptor-related protein 8 Proteins 0.000 description 3
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000037434 nonsense mutation Effects 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- LUYQYZLEHLTPBH-UHFFFAOYSA-N perfluorobutanesulfonyl fluoride Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)S(F)(=O)=O LUYQYZLEHLTPBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 3
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- -1 Asp-N Proteins 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000030673 Homozygous familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 2
- 201000001386 familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000004777 loss-of-function mutation Effects 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 2
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 230000009862 primary prevention Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000009863 secondary prevention Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydrophthalazine-1,4-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NNC(=O)C2=C1 KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAHMGWYMQPWRSF-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxopyrrolidine-1-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)N1C(=O)CCC1=O CAHMGWYMQPWRSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZYPDJSJJXZWZJJ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-3-piperidin-4-yloxypyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C(=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2)OC1CCNCC1 ZYPDJSJJXZWZJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BUZOGVVQWCXXDP-VPENINKCSA-N 8-oxo-dGTP Chemical compound O=C1NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 BUZOGVVQWCXXDP-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 108090000363 Bacterial Luciferases Proteins 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000053028 CD36 Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 101710128063 Carbohydrate oxidase Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 description 1
- 102000005853 Clathrin Human genes 0.000 description 1
- 108010019874 Clathrin Proteins 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101000925662 Enterobacteria phage PRD1 Endolysin Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010059183 Familial hypertriglyceridaemia Diseases 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 206010056438 Growth hormone deficiency Diseases 0.000 description 1
- 102000019267 Hepatic lipases Human genes 0.000 description 1
- 108050006747 Hepatic lipases Proteins 0.000 description 1
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000040952 LDLR family Human genes 0.000 description 1
- 108091077228 LDLR family Proteins 0.000 description 1
- 102100038609 Lactoperoxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 1
- 101100135848 Mus musculus Pcsk9 gene Proteins 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 101150094724 PCSK9 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 102000012343 Proprotein Convertase 9 Human genes 0.000 description 1
- 108010022249 Proprotein Convertase 9 Proteins 0.000 description 1
- 102000006437 Proprotein Convertases Human genes 0.000 description 1
- 108010044159 Proprotein Convertases Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- YVPOVOVZCOOSBQ-AXHZAXLDSA-N [(1s,3r,7s,8s,8ar)-8-[2-[(2r,4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-3,7-dimethyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate;pyridine-3-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1.C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 YVPOVOVZCOOSBQ-AXHZAXLDSA-N 0.000 description 1
- WNWXXAPGHTVCDL-OKDJMAGBSA-N [(1s,3r,7s,8s,8ar)-8-[2-[(2r,4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-3,7-dimethyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl] 2,2-dimethylbutanoate;pyridine-3-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1.C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 WNWXXAPGHTVCDL-OKDJMAGBSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229940034653 advicor Drugs 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 239000001988 antibody-antigen conjugate Substances 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 208000035707 autosomal dominant type B hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- 230000007870 cholestasis Effects 0.000 description 1
- 231100000359 cholestasis Toxicity 0.000 description 1
- 230000031154 cholesterol homeostasis Effects 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229930193282 clathrin Natural products 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001295 dansyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=C2C([H])=C([H])C([H])=C(C2=C1[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000003194 forelimb Anatomy 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000010005 growth-factor like effect Effects 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000522 hyperlipoproteinemia type IV Diseases 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 description 1
- 208000003532 hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 230000002989 hypothyroidism Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 206010022498 insulinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012482 interaction analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000138 intercalating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005305 interferometry Methods 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000006662 intracellular pathway Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000001906 matrix-assisted laser desorption--ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 108010029942 microperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 239000006179 pH buffering agent Substances 0.000 description 1
- 208000021255 pancreatic insulinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 230000003234 polygenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229940028952 praluent Drugs 0.000 description 1
- 238000012910 preclinical development Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 201000009395 primary hyperaldosteronism Diseases 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002910 rare earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940017164 repatha Drugs 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 210000003935 rough endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940103449 simcor Drugs 0.000 description 1
- PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N sinapic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 1
- PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N sinapinic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC(OC)=C1O PCMORTLOPMLEFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M sodium octadecanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000003451 thiazide diuretic agent Substances 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 230000006107 tyrosine sulfation Effects 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009349 vytorin Drugs 0.000 description 1
- PNAMDJVUJCJOIX-XVZWKFLSSA-N vytorin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1.N1([C@@H]([C@H](C1=O)CC[C@@H](O)C=1C=CC(F)=CC=1)C=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(F)C=C1 PNAMDJVUJCJOIX-XVZWKFLSSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96402—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from non-mammals
- G01N2333/96405—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from non-mammals in general
- G01N2333/96408—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from non-mammals in general with EC number
- G01N2333/96411—Serine endopeptidases (3.4.21)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Obesity (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
Abstract
Description
本発明を以下に詳細に説明する前に、本発明は、本明細書に記載の特定の方法論、溶液および試薬に限定されず、これらは変更され得ることを理解されたい。本明細書において使用される用語は、特定の実施形態を説明することを目的とするものであり、添付の特許請求の範囲によって制限される本発明の範囲のみに限定することを意図していないことも理解される。本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、他に定義されない限り、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。
本発明の一つの態様において、抗PCSK9抗体およびその抗原結合フラグメントが本明細書において提供される。いくつかの実施形態において、抗PCSK9抗体は、PCSK9活性を阻害または遮断する。特定の実施形態において、本明細書において提供される抗体は、約1μM以下、約100nM以下、約10nM以下、約1nM以下、約0.1nM以下、約0.01nM以下または約0.001nM以下(例えば、10−8M以下、例えば、10−8M〜10−13M、例えば、10−9M〜10−13M)の平衡解離定数(KD)を有する。
一つの態様において、本発明によれば、上記の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかをコードする核酸が提供される。核酸は、抗体の軽鎖可変領域および/または重鎖可変領域を含むアミノ酸配列、または抗体の軽鎖および/または重鎖を含むアミノ酸配列をコードし得る。
本発明には、抗PCSK9抗体を含む組成物(医薬組成物または医薬製剤を含む)および抗PCSK9抗体をコードするポリヌクレオチドを含む組成物も包含される。特定の実施形態において、組成物は、PCSK9に結合する1つ以上の抗体、またはPCSK9に結合する1つ以上の抗体をコードする1つ以上のポリヌクレオチドを含む。これらの組成物はまた、緩衝剤を含む、当技術分野において公知の薬学的賦形剤等の適切な薬学的に許容可能な担体を含み得る。
一つの態様において、本発明は、対象におけるPCSK9とLDL受容体(LDLR)との結合を阻害する方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。別の態様において、本発明は、対象におけるコレステロールレベルを低下させる方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。一つの実施形態において、コレステロールはLDL−コレステロールである。別の態様において、本発明は、対象におけるLDL−コレステロールレベルを低下させる方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、本発明は、対象におけるLDL−コレステロールの血清レベルを低下させる方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。別の態様において、本発明は、対象におけるLDL−コレステロールレベルの上昇に関連する状態を治療する方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。一つの態様において、本発明は、コレステロール関連疾患を治療する方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、本発明は、高コレステロール血症および/または高脂血症を治療する方法に関し、該方法は、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかの有効量を対象に投与することを含む。一つの態様において、本発明は、PCSK9の活性を排除、阻害または低下させることによって改善、遅延、阻害または予防され得る任意の疾患または状態を治療する方法に関する。いくつかの実施形態において、スタチンによって治療または予防することができる疾患または状態もまた、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかで治療することができる。いくつかの実施形態において、コレステロール合成の阻害またはLDLR発現の増大によりもたらされ得る疾患または状態もまた、本明細書に記載の抗PCSK9抗体またはそのフラグメントのいずれかで治療することができる。好ましくは、前記対象はヒトである。
特定の実施形態において、本明細書において提供される任意の抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントは、生物学的試料中のPCSK9の存在の検出に使用することができる。本明細書において使用される用語「検出」には、定量的または定性的な検出が包含される。特定の実施形態において、生物学的試料は、血液、血清または生物由来の他の液体試料である。特定の実施形態において、生物学的試料は細胞または組織を含む。
抗原のビオチン標識
Pierce社から入手可能なスクシンイミジルスルホネートビオチン標識キットを、製造業者の指示に従って使用することによって、PCSK9抗原(配列番号53)をビオチンで標識した。FITC標識ヤギ抗ヒト免疫グロブリンF(ab’)κ鎖抗体(LC−FITC)をSouthern Biotech社から購入し、ポリエチレンアビジン(SA−PE)をSigma社から購入し、ストレプトアビジン−633(SA−633)をMolecular Probes社から購入した。ストレプトマイシンビーズおよび細胞性免疫磁気ビーズ分離カラムは、Miltenyi LS社から購入した。
8つの合成酵母ベースの抗体提示ライブラリー(Adimab社から入手可能)を、既存の方法(Xu et al., 2013;WO2009036379;WO2010105256;W02012009568)に従って増幅し、各ライブラリーの多様性(diversity)を最大1×109とした。つまり、最初の2回のスクリーニングをMiltenyi社製のMACSシステムを用いた磁気活性化細胞選別を使用することによって実施した。まず、各ライブラリーからの酵母細胞(〜1×1010細胞/ライブラリー)を、上記のように調製された100nMビオチン標識PCSK9抗原を含むFACS洗浄緩衝液(0.1%ウシ血清アルブミンを含有するリン酸緩衝液)中で、15分間室温でインキュベートした。予め冷却した50mlのFACS洗浄緩衝液で1回洗浄し、次いで、細胞を40mlの同じ洗浄緩衝液に再懸濁し、500μlのストレプトマイシンビーズを添加し、4℃で5分間インキュベートした。1000rpmで5分間遠心分離した後、上清を捨て、細胞を5mlのFACS洗浄緩衝液に再懸濁し、細胞溶液をMiltenyi LSカラムに充填した。充填が完了した後、FACS洗浄緩衝液でカラムを3回、1回につき3mlで洗浄した。Miltenyi LSカラムを磁場から外し、5mlの増殖培地で溶出し、溶出した酵母細胞を集めて37℃で一晩増殖させた。
スクリーニングにより得られた抗PCSK9抗体を発現する酵母細胞を振盪し、30℃で48時間誘導して抗PCSK9抗体を発現させた。誘導終了後、1300rpmで10分間遠心分離することにより酵母細胞を除去し、上清を回収した。上清中に存在する抗PCSK9抗体を、Protein Aを用いて精製し、酢酸溶液によりpH2.0で溶出し、抗PCSK9抗体を回収した。対応するFabフラグメントを得るために、抗体をパパインで消化し、KappaSelect(GE Life Medical Group社製)を用いて精製した。
既存の方法(Estep, P et al, High throughput solution Based measurement of antibody-antigen affinity and epitope binning. MAbs, 2013. 5(2): p. 270-8)に従って、ForteBio Affinity Assayを実施した。つまり、センサーをアッセイ緩衝液中で、30分間オフラインで平衡化し、次いで、60秒間オンラインで試験してベースラインを確立した。上記のようにして得られた精製抗体をAHQセンサーにオンラインで充填した。次いで、センサーを、100nMのPCSK9抗原に5分間入れた後、センサーをアッセイ緩衝液に移して5分間解離させた。動力学的分析を、1:1結合モデルを用いて行った。
平衡親和性の検出は、これまでに記載されている(Estep et al. 2013)。上記のようにして得られたビオチン標識PCSK9抗原(b−PCSK9)を、最終濃度10〜100pMの0.1%IgG不含BSAを含有するリン酸緩衝食塩水(PBSF)に添加した。上記で得られた抗PCSK9 FabまたはmAbを3〜5倍連続希釈し、5〜100nMの濃度のFabまたはmAb溶液を得た。抗体(20nMリン酸緩衝食塩水で希釈)をMSD−ECLプレート上に4℃で一晩または室温で30分間コーティングした。3%BSAを添加し、700rpmで30分間室温でブロックし、次いで洗浄緩衝液(PBSF+0.05%Tween20)で3回洗浄した。試料をプレートに添加し、振盪機に入れ、700rpmで150秒間室温でインキュベートした後、1回洗浄した。250ng/mlのスルホタグ標識ストレプトアビジン(PBSF中に希釈)を添加し、室温で3分間インキュベートした。緩衝液で3回洗浄した後、プレートに結合した抗原をMsd Sector Imager 2400 Reader Deviceを用いて測定した。未結合抗原のパーセンテージを、抗体滴定法により得た。抗原への抗PCSK9 FabまたはmAbの結合が薬物動態学の二次方程式に従うことが見出された。
結合エピトープの同定は、標準的なサンドイッチ型の相互作用的遮断アッセイを用いて行われた。標的特異的対照IgGをAHQセンサー上に固定化し、センサー上の利用可能なFc結合部位を、無関係のヒトIgG1抗体でブロックした。センサーを100nMの標的抗原PCSK9溶液に120秒間入れ、次いで、上記のように調製した第2の100nMの抗PCSK9抗体またはリガンド溶液に入れた。データは、ForteBio Data Analysis Software 7.0(ForteBio社製)によって読み取り、処理を行った。抗原が抗体に結合した後に二次抗体またはリガンドにも結合することができるならば、未結合エピトープ(非競合)の存在を意味し、そうでなければ、エピトープが遮断された(競合またはリガンド遮断)ことを意味する。
VHmutスクリーニング
この方法では、従来のミスマッチPCRによって、抗体の重鎖領域に突然変異を導入した。PCRプロセスの間、1μMの高度に変異した塩基アナログdPTPおよび8−オキソ−dGTPを使用することにより、塩基ミスマッチの可能性を約0.01bpに増大させた。
VHmut法により得られた後代抗体のCDRH3遺伝子を、1×108の多様性を有するCDRH1/CDRH2遺伝子ライブラリーに組み込み、3回のスクリーニングに供した。1回目ではMACS法が使用され、2回目および3回目ではFACS法が使用された。抗体−抗原コンジュゲートを親和性圧力にかけて、最も高い親和性を有する抗体を選択した。
実施例1に記載のPCSK9タンパク質をPBS溶液(リン酸緩衝溶液)で400nmol/Lに希釈し、作業溶液として使用した。実施例2で得られた抗PCSK9抗体(ADI−10085、ADI−10086、ADI−10087、ADI−10088、ADI−10089およびADI−10090)を、PBS溶液でそれぞれ1000nmol/L、100nmol/L、10nmol/L、1nmol/Lおよび0.1nmol/Lの濃度に希釈した。様々な濃度の対照抗体(アリロクマブ、エボロクマブ、ボコシズマブおよびロデルシズマブ)の溶液を同じ方法により調製した。PCSK9作業溶液を、等容量の各勾配希釈抗PCSK9抗体試料または対照試料と混合した。LDLを過剰発現しているCHO細胞(CHO−LDLR)をPBS溶液に再懸濁、計数し、細胞濃度をPBS溶液で4×106細胞/mlに調整し、96ウェルU字型細胞培養プレートに1ウェル当たり2.0×105細胞となるように播種し、50μlの細胞培養培地を各ウェルに添加し、PCSK9および抗PCSK9抗体の混合物50μlを添加し、200gで、5分間室温で遠心分離し、上清を捨てた。抗His−FITC(R&D Systems社製)をPBS溶液で終濃度2.5μg/mlに1:200の比率で希釈し、次いで96ウェルプレートに100μl/ウェルとなるように添加し、氷浴中で30分間インキュベートした。室温で5分間、200gで遠心分離し、上清を静かに捨て、各ウェルに150μlのPBS溶液を添加し、室温で5分間、200gで遠心分離し、上清を穏やかに捨て、この手順を3回繰り返した。80μl/ウェルのPBS溶液を各ウェルに添加し、細胞を数回ピペッティングすることにより再懸濁した。細胞の蛍光シグナル値をフローサイトメトリーにより測定した。
凍結保存したチューブ内のHepG2細胞を液体窒素貯蔵タンクから取り出し、37℃の水浴で急速に解凍した。細胞懸濁液を15mlの遠心分離チューブに移し、4mlの増殖培地(90%DMEM+10%FBS、DMEMおよびFBSの両方ともGibco社から購入)を室温でゆっくりと添加し、室温で5分間、1000r/分で遠心分離し、次いで、細胞ペレットを新鮮な増殖培地に再懸濁し、培養フラスコに移し、5%CO2下、37℃で培養した。対数増殖期のHepG2細胞をPBS溶液で2回洗浄し、1mlの0.25%トリプシン(Gibco社から購入)を添加し、3分間消化し、6mlの増殖培地を添加して細胞を再懸濁し、反応を終結させた。HepG2細胞を増殖培地で0.8×106細胞/mlに調整し、黒色の透明底部を有するポリ−D−リジン被覆96ウェル細胞培養プレート(Nunc社から購入)に、1ウェルあたり100μLとなるように播種し、37℃、5%CO2で6〜7時間インキュベートした。増殖培地を捨て、100μl/ウェルとなるようにアッセイ培地(DMEM+5%FBS)に交換し、インキュベーター中で、37℃、5%CO2で一晩インキュベートした。抗体試料(ADI−10085、ADI−10087、ADI−10088、ADI−10089)を、それぞれ66.7nmol/Lとなるようにアッセイ培地で希釈した。次いで、出発濃度が66.7nmol/Lの試料を使用して、4倍の勾配希釈を行った。陽性対照抗体(アリロクマブ、エボロクマブおよびロデルシズマブ)および陰性対照(LDL、PCSK9+LDLおよびIgG)を同じ操作に供した。得られた各濃度勾配の試料60μlを、等容量60μlの66.7nmol/LのPCSK9と別々に混合して、各混合物を得た。120μlのアッセイ培地をブランク対照として使用した。96ウェルプレート中の液体を吸引して捨て、50μlの上記混合物およびブランク対照試料を別々に各ウェルに添加し、インキュベーター中で、37℃、5%CO2で1時間インキュベートした。プレートを取り出し、アッセイ培地で希釈した6μg/mlのBODIPY(life technologies社から購入)で標識した50μlのLDL溶液を各ウェルに添加し、プレートを37℃、5%CO2で4時間インキュベートした。培地を捨て、プレートを1ウェル当たり100μlのPBS溶液で洗浄した。2回洗浄した後、PBS溶液を捨て、次いで、100μlのPBS溶液を各ウェルに再び添加した。Spectra Max I3プレートリーダーを用いて蛍光値を読み取った。
PCSK9は、LDLRに直接結合してLDLRの内在化を促進することができる。肝細胞に入った後、LDLRはリソソームに輸送されて分解され、それによって細胞表面に発現されるLDLRが減少し、LDL−cの血清レベルが増大する。抗PCSK9抗体は、PCSK9とLDLRとの結合を遮断し、それによってPCSK9がLDLRを消費する能力を低下させる。この実験において、CHO−LDLR細胞を抗PCSK9抗体およびPCSK9タンパク質溶液と共にインキュベートし、LDLRの蛍光値を上記のフローサイトメトリーによって検出した。抗PCSK9抗体の蛍光値を陽性対照抗体(エボロクマブ)の蛍光値と比較して、LDLRの細胞内在化に対する抗PCSK9抗体の生物学的活性を決定した。
特性解析を行う前に、本発明の抗PCSK抗体(この実施例ではADI−10087を使用した、以下、同じ抗体を使用した)の完全性、および抗原としてのヒトPCSK−9との凝集レベルを、CovalX HM4相互作用モジュール(CovalX AG製、スイス、チューリッヒ)を備えたUltrafelx III MALDI ToF ToF質量分析計(Bruker社製)を用いてそれぞれ検出した(実験方法および結果分析は、以下のセクションAに示される)。抗PCSK抗体とヒトPCSK9との間の非共有重合は検出されなかった。ヒトPCSK9(以下、PCSK9−WTと称する)は、59.983kDa(以下、PCSK9−WT還元(Reduced)と称する)および13.749kDaの2つのサブユニットの非共有結合によって形成される。
1.材料および方法
1.1 装置
複合体の特性解析を行うために、CovalX HM4相互作用モジュールを備えたUltraflex III MALDI ToF ToF質量分析計(Bruker社製)を用いて分子量を測定した。
対照実験
抗体/抗原複合体を以下の濃度で調製した:
対照実験用に調製した混合物(9μl左)を、CovalX社のK200 MALDI MS分析キットを用いて架橋に供した。9μlの抗体/抗原混合物と、1μlのK200 Sabilizer試薬(2mg/ml、CovalX AG製、チューリッヒ、スイス)と混合し、そして室温で180分間インキュベートした。その後、対照実験と同様に、試料をMALDI分析用に調製した。
標準的な窒素レーザーイオン源を備え、0〜2000kDaの異なる質量範囲に焦点を合わせることができるCovalX HM4相互作用モジュールを使用して、MALDI ToF質量分析を行った。
質量分析計:
リニアおよび陽イオンモード
イオン源1:20kV
イオン源2:17kV
レンズ:12kV
パルスイオン抽出:400ns
HM4:
ゲイン電圧:3.14kV
加速電圧:20kV
2.1 抗PCSK9抗体/PCSK9−WT
2.1.1 相互作用分析
対照実験
対照実験では、抗原PCSK9−WT還元および抗PCSK9抗体の両方が検出され、検出された分子量は、それぞれMH+=59.716kDaおよびMH+=146.769kDaであった(図6、対照)。
架橋実験では、抗体/抗原複合体を架橋剤K200と180分間インキュベートし、分子量をMALDI ToFで測定した。架橋後、対照実験で検出された2つのピークに加えて、4つのさらなるピークが検出された:MH+=214.902kDa、MH+=229.111kDa、MH+=276.105kDaおよびMH+=290.815kDa(図6、架橋)。
抗体/抗原複合体の特性解析により、抗原PCSK9−WT還元およびPCSK9−WTの両方が抗PCSK9抗体に結合できることが明らかになった。
抗PCSK9抗体と抗原PCSK9−WTとの間の結合エピトープの高分解能決定のために、抗体/抗原複合体を架橋剤DSS d0/d12とインキュベートし、続いてトリプシン、キモトリプシン、アスパラギン酸N−末端エンドヌクレアーゼ(Asp−N)、エラスターゼおよびサーモリシンをそれぞれ用いて酵素加水分解し、酵素加水分解後に得られた架橋ペプチドフラグメントを、高分解能質量分析(nLC-LTQ-Orbitrap MS/MS)と直列的に接続されたナノ液相クロマトグラフィーのオンラインシステムによって同定し、XQuestおよびStavroxソフトウェアを用いて分析した。
1.1 装置
Ultimate 3000(Dionex社製)ナノ液相クロマトグラフィーシステムは、LTQ-Orbitrap XL質量分析計(Thermo Scientific社製)と直列的に接続された。
抗体/抗原複合体
最終濃度0.5μM/4μMの抗体/抗原混合物を得るために、5μLの抗体(濃度1μM)と5μLの抗原試料(濃度8μM)とを混合した。混合物を37℃で180分間インキュベートした。
1mgのDSS(d0)架橋剤(Thermo Scientific社製)と1mgの重水素化DSS(d12)架橋剤(CovalX AG製)とを混合し、1mlのDMFを添加して、2mg/mlのDSS d0/d12溶液を得た。予め調製した抗体/抗原混合物10μlと、調製した架橋剤DSS d0/d12溶液(2mg/ml)1μlとを混合して、架橋のために室温で180分間インキュベートした。
予め調製した架橋抗体/抗原複合体10μlと、40μlの重炭酸アンモニウム(25mM、pH8.3)とを混合し、2μlのDTT(500mM)を添加し、55℃で1時間インキュベートした。インキュベーション後、2μlのヨードアセトアミド(1M)を添加して、暗所にて室温で1時間インキュベートした。インキュベーション後、120μlのタンパク質分解緩衝液(各エンドヌクレアーゼ産物から入手可能)を添加した。
145μlの還元/アルキル化架橋抗体/抗原複合体と0.70μlのトリプシン(Roche Diagnostic社製)とを100:1(タンパク質:酵素、w/w)の比で混合し、37℃で一晩インキュベートした。
145μlの還元/アルキル化架橋抗体/抗原複合体と0.35μlのキモトリプシン(Roche Diagnostic社製)とを200:1(タンパク質:酵素、w/w)の比で混合し、25℃で一晩インキュベートした。
145μlの還元/アルキル化架橋抗体/抗原複合体と0.35μlのAsp−N(Roche Diagnostic社製)とを200:1(タンパク質:酵素、w/w)の比で混合し、37℃で一晩インキュベートした。
145μlの還元/アルキル化架橋抗体/抗原複合体と0.70μlのエラスターゼ(Roche Diagnostic社製)とを100:1(タンパク質:酵素、w/w)の比で混合し、37℃で一晩インキュベートした。
145μlの還元/アルキル化架橋抗体/抗原複合体と1.40μlのサーモリシン(Roche Diagnostic社製)とを50:1(タンパク質:酵素、w/w)の比で混合し、70℃で一晩インキュベートした。
10μlのタンパク質分解ペプチド溶液を、TQ-Orbitrap XL(Thermo Scientific社製)と直列的にオンラインで接続されたナノ液相クロマトグラフィーシステム(Ultimate 3000、Dionex社製)に注入し、ペプチドフラグメントを同定した。液体クロマトグラフィーおよび質量分析のためのランニングパラメータは以下の通りとした。
架橋ペプチドフラグメントを、Xquestバージョン2.0およびStavrox 2.1ソフトウェアを使用することによって分析した。
2.1.1トリプシンタンパク質分解
抗PCSK9抗体と抗原PCSK9との間で架橋されたペプチドフラグメントは、DSS d0/d12によって架橋された抗体/抗原複合体をトリプシンでタンパク質分解した後、nLC−LTQ−Orbitrap MS/MS分析によって検出された。この架橋ペプチドフラグメントは、XquestまたはStavroxソフトウェアのいずれかを用いて検出可能であった。
抗PCSK9抗体と抗原PCSK9との間で架橋された6つのペプチドフラグメントは、キモトリプシンを用いたDSS d0/d12によって架橋された抗体/抗原複合体のタンパク質分解の後、nLC−LTQ−Orbitrap MS/MS分析によって検出された。これらの架橋ペプチドフラグメントは、XquestまたはStavroxソフトウェアのいずれかを用いて検出可能であった。
抗PCSK9抗体と抗原PCSK9との間で架橋されたペプチドフラグメントは、DSS d0/d12によって架橋した抗体/抗原複合体をAsp−Nでタンパク質分解した後、nLC−LTQ−Orbitrap MS/MS分析によって検出されなかった。
抗PCSK9抗体と抗原PCSK9との間で架橋されたペプチドフラグメントは、DSS d0/d12によって架橋された抗体/抗原複合体をエラスターゼでタンパク質分解した後、nLC−LTQ−Orbitrap MS/MS分析によって検出されなかった。
抗PCSK9抗体と抗原PCSK9との間に架橋されたペプチドフラグメントは、DSS d0/d12によって架橋された抗体/抗原複合体をサーモリシンでタンパク質分解した後、nLC−LTQ−Orbitrap MS/MS分析によって検出されなかった。
本発明者らは、化学架橋およびnLC−LTQ−Orbitrap MS/MS分析によって、抗PCSK9抗体と抗原PSCK9との間の相互作用界面を特徴付けることができた。
試験対象の抗体(抗PCSK9抗体 ADI−10087)を、当技術分野の通常の方法に従ってSPFグレードのSDラットに投与した。雌ラットは、体重が約254〜294gであり、約9〜12週齢であり、雄ラットは、体重が約369〜420gであり、約9〜12週齢であった。各群に単回投与で投与した。投与レジメンを表6に示す。
試験対象の抗体(抗PCSK9抗体 ADI−10087)を、当技術分野の通常の方法に従ってカニクイザルに投与した。雌動物は、体重が約2〜4kgであり、約3〜5歳であり、雄動物の体重は約3〜5kgで、約3〜5歳であった。投与レジメンを表7に示す。群1〜5には単回投与で投与され、群6には週1回投与され、全体で4回投与された。
Claims (21)
- 抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントであって、重鎖可変領域(HCVR)および軽鎖可変領域(LCVR)を含み、前記HCVRは相補性決定領域(CDR)HCDR1、HCDR2およびHCDR3を含み、前記LCVRはCDR LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含み、前記HCDR1は配列番号1、7、8、9、10、11、12、13および20からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、前記HCDR2は配列番号2、14、15、16、17および21からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、前記HCDR3は配列番号3、18、19および22からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性もしくは100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、前記LCDR1は配列番号4のアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、前記LCDR2は配列番号5のアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなり、LCDR3は配列番号6のアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、前記抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 前記重鎖可変領域HCVRが、配列番号23、25、26、27、28、29、30、31、32および33からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 前記軽鎖可変領域LCVRが、配列番号24のアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、請求項1または2に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 配列番号34、36、37、38、39、40、41、42、43および44から選択されるアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる重鎖を含む、請求項1に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 配列番号35のアミノ酸配列と少なくとも90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%もしくは99%の相同性または100%の相同性を有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる軽鎖を含む、請求項1または4に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 前記抗体がヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 前記抗原結合フラグメントが、Fab、Fab’−SH、Fv、scFvまたは(Fab’)2フラグメントから選択されるフラグメントである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- フレームワーク配列を含み、該フレームワーク配列の少なくとも一部がヒトコンセンサスフレームワーク配列である、請求項1〜8のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
- 請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントをコードする、単離された核酸。
- 請求項10に記載の核酸を含むベクターであって、好ましくは発現ベクターである、前記ベクター。
- 請求項11に記載のベクターを含む宿主細胞であって、好ましくは原核生物または真核生物であり、より好ましくは酵母細胞、哺乳動物細胞、または抗体もしくはその抗原結合フラグメントを調製するのに適した他の細胞から選択される、前記宿主細胞。
- 抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントを調製する方法であって、請求項1〜9のいずれか一項に記載された抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントをコードする核酸の発現に適した条件下で、請求項12に記載の宿主細胞を培養することを含み、任意に前記抗体またはその抗原結合フラグメントを単離することを含み、任意に宿主細胞から抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントを回収することをさらに含む、前記方法。
- 請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントを含み、任意に薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
- 対象におけるコレステロールレベルを低下させる方法であって、請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントの有効量を前記対象に投与することを含み、好ましくは前記コレステロールがLDL−コレステロールであり、より好ましくは血清LDLコレステロールである、前記方法。
- 対象におけるコレステロール関連疾患を治療する方法であって、請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントの有効量を前記対象に投与することを含み、好ましくは前記コレステロール関連疾患が高コレステロール血症および/または高脂血症である、前記方法。
- 第2の医薬の有効量を前記対象に投与することをさらに含み、前記抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントが第1の医薬であり、好ましくは前記第2の医薬がスタチンを含み、より好ましくは前記スタチンがアトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンおよびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項15または16に記載の方法。
- 対象におけるPCSK9とLDLRとの結合を阻害する方法であって、請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントの有効量を前記対象に投与することを含む、前記方法。
- 試料中のPCSK9タンパク質を検出する方法であって、
(a)試料と請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントとを接触させること、および
(b)前記抗体またはその抗原結合フラグメントとPCSK9タンパク質との複合体の形成を検出すること
を含む、前記方法。 - PCSK9のエピトープに結合する抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメントであって、配列番号53のヒトPCSK9のアミノ酸配列の残基Y78、T86、H87およびR104のうちの1つ以上を含む、前記抗体またはその抗体結合フラグメント。
- 請求項1〜9のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントと同じエピトープに結合する、抗PCSK9抗体またはその抗原結合フラグメント。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022164233A JP2023002635A (ja) | 2016-12-24 | 2022-10-12 | 抗pcsk9抗体およびその使用 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201611210645.3 | 2016-12-24 | ||
CN201611210645.3A CN108239150A (zh) | 2016-12-24 | 2016-12-24 | 抗pcsk9抗体及其用途 |
PCT/CN2017/118050 WO2018113781A1 (zh) | 2016-12-24 | 2017-12-22 | 抗pcsk9抗体及其用途 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022164233A Division JP2023002635A (ja) | 2016-12-24 | 2022-10-12 | 抗pcsk9抗体およびその使用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020506670A true JP2020506670A (ja) | 2020-03-05 |
JP2020506670A5 JP2020506670A5 (ja) | 2020-11-12 |
JP7167027B2 JP7167027B2 (ja) | 2022-11-08 |
Family
ID=62624551
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019534112A Active JP7167027B2 (ja) | 2016-12-24 | 2017-12-22 | 抗pcsk9抗体およびその使用 |
JP2022164233A Pending JP2023002635A (ja) | 2016-12-24 | 2022-10-12 | 抗pcsk9抗体およびその使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022164233A Pending JP2023002635A (ja) | 2016-12-24 | 2022-10-12 | 抗pcsk9抗体およびその使用 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11485795B2 (ja) |
EP (1) | EP3560961A4 (ja) |
JP (2) | JP7167027B2 (ja) |
KR (1) | KR102331021B1 (ja) |
CN (2) | CN108239150A (ja) |
AU (1) | AU2017379048B2 (ja) |
BR (1) | BR112019012648A2 (ja) |
CA (1) | CA3047049C (ja) |
WO (1) | WO2018113781A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021524839A (ja) * | 2018-05-11 | 2021-09-16 | イノベント バイオロジックス (スウツォウ) カンパニー,リミテッド | 抗pcsk9抗体を含む製剤およびその使用 |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108239150A (zh) * | 2016-12-24 | 2018-07-03 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 抗pcsk9抗体及其用途 |
CN114423866A (zh) * | 2019-09-19 | 2022-04-29 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 抗pcsk9抗体用于预防或治疗胆固醇相关疾病的方法 |
US20230312750A1 (en) * | 2019-11-18 | 2023-10-05 | Ad Pharmaceuticals Co., Ltd. | Anti-pcsk9 antibody and use thereof |
CN116983434B (zh) * | 2023-09-28 | 2024-03-15 | 康霖生物科技(杭州)有限公司 | 用于基因治疗的核酸构建体及其用途 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010536384A (ja) * | 2007-08-23 | 2010-12-02 | アムジエン・インコーポレーテツド | プロタンパク質コンベルターゼスブチリシンケクシン9型(pcsk9)に対する抗原結合タンパク質 |
JP2012504388A (ja) * | 2008-09-12 | 2012-02-23 | ライナット ニューロサイエンス コーポレイション | Pcsk9拮抗薬 |
JP2012511913A (ja) * | 2008-12-15 | 2012-05-31 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | Pcsk9に対する高親和性ヒト抗体 |
Family Cites Families (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
GB9114948D0 (en) | 1991-07-11 | 1991-08-28 | Pfizer Ltd | Process for preparing sertraline intermediates |
CA2116774C (en) | 1991-09-19 | 2003-11-11 | Paul J. Carter | Expression in e. coli antibody fragments having at least a cysteine present as a free thiol. use for the production of bifunctional f(ab') 2 antibodies |
US5789199A (en) | 1994-11-03 | 1998-08-04 | Genentech, Inc. | Process for bacterial production of polypeptides |
US5840523A (en) | 1995-03-01 | 1998-11-24 | Genetech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
US6267958B1 (en) | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
US6171586B1 (en) | 1997-06-13 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Antibody formulation |
WO2005103081A2 (en) | 2004-04-20 | 2005-11-03 | Genmab A/S | Human monoclonal antibodies against cd20 |
JO3000B1 (ar) | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
JP5537813B2 (ja) * | 2006-02-14 | 2014-07-02 | エクソンモービル・ケミカル・パテンツ・インク | Mcm−22型モレキュラーシーブの製造方法 |
US7572618B2 (en) | 2006-06-30 | 2009-08-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Polynucleotides encoding novel PCSK9 variants |
US8691730B2 (en) | 2007-09-14 | 2014-04-08 | Adimab, Llc | Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor |
US8877688B2 (en) | 2007-09-14 | 2014-11-04 | Adimab, Llc | Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor |
AR070316A1 (es) | 2008-02-07 | 2010-03-31 | Merck & Co Inc | Antagonistas de pcsk9 (proproteina subtilisina-kexina tipo 9) |
CN105734678B (zh) | 2010-07-16 | 2019-11-05 | 阿迪马布有限责任公司 | 合成多核苷酸文库 |
TWI603739B (zh) | 2010-11-11 | 2017-11-01 | 艾伯維生物技術有限責任公司 | 具有增進高濃度之抗-TNFα抗體之液體調配物 |
JOP20200043A1 (ar) | 2011-05-10 | 2017-06-16 | Amgen Inc | طرق معالجة أو منع الاضطرابات المختصة بالكوليسترول |
AR087305A1 (es) | 2011-07-28 | 2014-03-12 | Regeneron Pharma | Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit |
EA039663B1 (ru) | 2012-05-03 | 2022-02-24 | Амген Инк. | Применение антитела против pcsk9 для снижения сывороточного холестерина лпнп и лечения связанных с холестерином расстройств |
CN105001336A (zh) | 2014-04-18 | 2015-10-28 | 上海复旦张江生物医药股份有限公司 | Pcsk9拮抗剂 |
WO2015200438A1 (en) | 2014-06-24 | 2015-12-30 | Eleven Biotherapeutics, Inc. | High affinity antibodies against pcsk9 |
CN106084058B (zh) | 2015-07-15 | 2019-08-27 | 北京天广实生物技术股份有限公司 | 抗人pcsk9单克隆抗体 |
CN105348390B (zh) * | 2015-10-26 | 2018-08-28 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 抗人pcsk9单克隆抗体 |
CN105801701B (zh) | 2016-03-31 | 2019-03-29 | 河北仁博科技有限公司 | 一种pcsk9抗体的重链和轻链可变区及其应用 |
CN108239150A (zh) | 2016-12-24 | 2018-07-03 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 抗pcsk9抗体及其用途 |
JP7377596B2 (ja) | 2017-02-22 | 2023-11-10 | アムジエン・インコーポレーテツド | 低粘度、高濃度エボロクマブ製剤及びそれらの製造方法 |
CN110464842B (zh) | 2018-05-11 | 2022-10-14 | 信达生物制药(苏州)有限公司 | 包含抗pcsk9抗体的制剂及其用途 |
-
2016
- 2016-12-24 CN CN201611210645.3A patent/CN108239150A/zh active Pending
-
2017
- 2017-12-22 WO PCT/CN2017/118050 patent/WO2018113781A1/zh unknown
- 2017-12-22 BR BR112019012648A patent/BR112019012648A2/pt unknown
- 2017-12-22 CA CA3047049A patent/CA3047049C/en active Active
- 2017-12-22 KR KR1020197021287A patent/KR102331021B1/ko active IP Right Grant
- 2017-12-22 CN CN201780080278.6A patent/CN110177810B/zh active Active
- 2017-12-22 EP EP17883464.4A patent/EP3560961A4/en active Pending
- 2017-12-22 US US16/473,245 patent/US11485795B2/en active Active
- 2017-12-22 AU AU2017379048A patent/AU2017379048B2/en active Active
- 2017-12-22 JP JP2019534112A patent/JP7167027B2/ja active Active
-
2022
- 2022-10-12 JP JP2022164233A patent/JP2023002635A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010536384A (ja) * | 2007-08-23 | 2010-12-02 | アムジエン・インコーポレーテツド | プロタンパク質コンベルターゼスブチリシンケクシン9型(pcsk9)に対する抗原結合タンパク質 |
JP2012504388A (ja) * | 2008-09-12 | 2012-02-23 | ライナット ニューロサイエンス コーポレイション | Pcsk9拮抗薬 |
JP2012511913A (ja) * | 2008-12-15 | 2012-05-31 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | Pcsk9に対する高親和性ヒト抗体 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ALKINDI, M. ET AL.: "Monoclonal Antibodies for the Treatment of Hypercholesterolemia: Targeting PCSK9", CANADIAN JOURNAL OF CARDIOLOGY, vol. 32, no. 12, JPN6021042252, pages 552 - 1560, ISSN: 0004771184 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021524839A (ja) * | 2018-05-11 | 2021-09-16 | イノベント バイオロジックス (スウツォウ) カンパニー,リミテッド | 抗pcsk9抗体を含む製剤およびその使用 |
JP7419262B2 (ja) | 2018-05-11 | 2024-01-22 | イノベント バイオロジックス (スウツォウ) カンパニー,リミテッド | 抗pcsk9抗体を含む製剤およびその使用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN110177810B (zh) | 2022-10-18 |
JP2023002635A (ja) | 2023-01-10 |
CN110177810A (zh) | 2019-08-27 |
EP3560961A1 (en) | 2019-10-30 |
BR112019012648A2 (pt) | 2020-01-28 |
AU2017379048B2 (en) | 2020-08-27 |
WO2018113781A1 (zh) | 2018-06-28 |
CN108239150A (zh) | 2018-07-03 |
KR20190096411A (ko) | 2019-08-19 |
KR102331021B1 (ko) | 2021-11-26 |
JP7167027B2 (ja) | 2022-11-08 |
EP3560961A4 (en) | 2020-12-23 |
AU2017379048A1 (en) | 2019-07-25 |
US20200087416A1 (en) | 2020-03-19 |
CA3047049C (en) | 2023-10-24 |
US11485795B2 (en) | 2022-11-01 |
CA3047049A1 (en) | 2018-06-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7167027B2 (ja) | 抗pcsk9抗体およびその使用 | |
JP2020508645A (ja) | 抗cd47抗体およびその使用 | |
JP6856523B2 (ja) | Mmp9特異的な抗体 | |
KR20140006022A (ko) | Pcsk9 길항제 | |
CN106103479B (zh) | 识别其它ccr3-结合趋化因子的抗嗜酸粒细胞趋化因子-2抗体 | |
JP7419262B2 (ja) | 抗pcsk9抗体を含む製剤およびその使用 | |
US20220119522A1 (en) | Anti-trem2 antibodies and methods of use thereof | |
MX2011001363A (es) | Anticuerpos selectivos de anti-hepcidina-25 y usos de los mismos. | |
EP2463369A1 (en) | Humanized anti-amyloid-b oligomer antibody | |
AU2010279892A1 (en) | Humanized anti-amyloid-b oligomer antibody | |
KR20230043842A (ko) | 타우 결합 분자 | |
US8481033B2 (en) | Neutralizing antibodies and fragments thereof directed against platelet factor-4 variant 1 (PF4V1) | |
AU2018332491A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising antibody binding specifically to lysyl-tRNA synthetase N-terminus as effective ingredient for preventing or treating immune cell migration-related disease | |
WO2017118307A1 (zh) | Pcsk9抗体、其抗原结合片段及其医药用途 | |
US20210198352A1 (en) | Endogenous Labelling of Extracellular Vesicles | |
EP2811018B1 (en) | ANTI-sAPPß ANTIBODY |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200925 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200925 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20211026 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220125 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220513 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220802 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220930 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20221026 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7167027 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |