JP2020035421A - 超解像顕微鏡のための画像処理装置及び画像処理方法 - Google Patents
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Abstract
Description
int(center pixel) > average int(inner ring) + BlobDifMinTop
average int(inner ring) > average int(outer ring) + BlobDifMinBottom
3 超解像顕微鏡1のレンズ
5 レーザー
7 レーザー光
9 ダイクロイックミラー
11 サンプル
12 蛍光発光体
13 蛍光
15 カメラ
16 カメラ15の対物レンズ
17 コンピューター
18 画像処理装置
19 カメラ15のセンサ
20 画素
21 読出電子機器
23 評価電子機器
25 マイクロコントローラ
26 半径方向対称集束光学素子
27 シリンドリカルレンズ
30 センサ19上の輝度分布
32 輝度値のマトリックス
34 関連画素
35 関連画素34の周辺領域
36 画素20の第1グループ
37 画素20の第2グループ
38 x方向の一連の画素
39 y方向の一連の画素
40 輝度分布
42 輝度値
45 蛍光現象の位置
47 サブピクセル
48 蛍光現象の位置45に関連するサブピクセル
50 カメラ15のハウジング
51 イメージインテンシファイア
52 時間測定装置
Claims (16)
- 超解像顕微鏡の画像データ用の画像処理装置(18)であって、
画素ピッチよりも高い精度で輝度分布画像データの最大値の座標を決定するように構成された画像データを処理する計算手段を有し、
前記計算手段は、隣接画素に対する画素の輝度値の増加に基づいて、前記画像データの最大輝度値を決定するように構成され、
前記画像処理装置は、隣接画素の輝度値の差分を求めることによって、最大輝度値の座標を決定し、これらの差を前記画素の空間シーケンスに従ってソートされた順序で連結するように構成され、
前記計算手段は、座標値を有するテーブルを保存するメモリをさらに備え、
前記計算手段は、連結された差分値によって決定されるアドレスに基づいて、前記テーブルから座標値を読み出すように構成されている、
ことを特徴とする画像処理装置(18)。 - 前記メモリは、2次元テーブルを含み、
前記画像処理装置は、2つの異なる方向に沿って輝度値の差分を形成し、前記差分を各方向用のアドレスに連結し、2つのアドレスによって決定される位置で、前記テーブルから空間方向の前記座標を読み出すように構成されている、ことを特徴とする請求項1に記載の画像処理装置。 - 前記画像処理装置は、隣接画素の輝度値の差分の計算を少なくとも実行するように構成された少なくとも1つのマイクロコントローラ(25)を備えた評価電子機器(23)を備えることを特徴とする請求項1又は2に記載の画像処理装置。
- 前記画像処理装置は、前記評価電子機器(23)に加えてコンピューター(17)を備え、
前記評価電子機器(23)は、カメラ(15)と一体化され、前記カメラは、前記評価電子機器(23)のデータを送信するためにコンピューター(17)に接続されていることを特徴とする請求項3に記載の画像処理装置。 - 前記マイクロコントローラ(25)は、FPGAを含むことを特徴とする請求項1から4のいずれか一に記載の画像処理装置。
- 前記画像処理装置は、1つの平滑化された輝度値が1つの画素(34)に対して得られるように、複数の隣接画素(20)の輝度値を計算するように構成されていることを特徴とする請求項1から5のいずれか一に記載の画像処理装置。
- 前記マイクロコントローラ(25)は、観察画素の輝度値を、前記観察画素の近傍の複数の画素の輝度値と比較することによって、蛍光現象用に前記画像データをチェックし、
次に、前記観察画素の輝度値が、前記観察画素の近傍の第1グループの画素の輝度値よりも第1所定量だけ高い場合、且つ、前記第1グループの画素の輝度値が第2グループの画素の輝度値よりも第2所定量だけ高い場合、蛍光発光体の位置を決定するように構成され、
前記画素は、前記第1グループの画素が、前記第2グループの画素よりも前記観察画素の近くに位置するように選択されることを特徴とする請求項1から6のいずれか一に記載の画像処理装置。 - 前記テーブルは、異なる差分値に対して同じ座標値を有する複数のテーブルエントリを有する請求項1から7のいずれか一に記載の画像処理装置。
- 超解像顕微鏡(1)であって、
前記顕微鏡(1)のレンズ(3)の前に配置されて、前記顕微鏡(1)で検査されるサンプル(11)中に蛍光を励起する励起源と、
前記サンプルからの蛍光励起によって射出された光の顕微鏡像を記録するオプトエレクトロニクスセンサ(19)を備えたカメラ(15)と、
前記センサに接続されて前記センサから読み出された画像データを処理し、最大輝度の座標を決定する請求項1から8のいずれか一に記載された画像処理装置と、
を備えたことを特徴とする超解像顕微鏡(1)。 - 前記顕微鏡(1)の光路内に配置されて、前記センサ(19)上の輝度分布を変形させる少なくとも1つの非点収差用光学素子を有し、
前記画像処理装置(18)は、複数の画素の輝度値を計算することによって、前記輝度分布の変形から、前記顕微鏡(1)の軸方向における蛍光発光体(12)の空間座標を決定するように構成されていることを特徴とする請求項9に記載の超解像顕微鏡(1)。 - 前記画像処理装置(18)は、時間測定装置(52)を有し、
前記時間測定装置は、前記顕微鏡(1)の前記カメラ(15)内のイメージインテンシファイア(51)の電子カスケードの信号と励起光源の光パルスの時間との時間差を取り込むように構成されていることを特徴とする請求項9又は10に記載の超解像顕微鏡。 - 特に、画像データが少なくとも1つのオプトエレクトロニクスセンサ(19)によって読み出されて、前記画像データの輝度分布の最大値の座標が、前記画像データを処理する計算手段によって決定される超解像顕微鏡の前記画像データのための画像処理方法であって、
前記計算手段は、隣接画素に対する画素の輝度値から前記画像データの最大輝度値を特定し、次に、隣接画素の輝度値の差分を求め、前記画素の空間シーケンスに従ってソートされた順序でこれらの差を連結することによって、最大輝度値の座標を決定し、
前記計算手段は、メモリにテーブルを座標値と共に記憶して、連結された差分値によって決定されるアドレスに基づいて前記テーブルから座標値を読み出すことを特徴とする画像処理方法。 - 前記画像処理装置は、前記センサ(19)の複数の画素の輝度値を計算することにより、画素(34)の輝度値の平滑化が行われることを特徴とする請求項12に記載の方法。
- 画素(34)の平滑化された輝度値の計算は、複数の画素(20)を有する領域(35)の画素(20)の輝度値の加算を含むことを特徴とする請求項13に記載の方法。
- 前記画像処理装置は、複数の画素の輝度値を加算するときに、少なくとも1つのビットシフト演算を行うことを特徴とする請求項14に記載の方法。
- 前記テーブルは、特性輝度分布を用いて作成され、
関連差分値は、異なる輝度分布オフセットに対する輝度分布に基づいて計算され、前記差分値によって決定されたアドレスでテーブルエントリとしてエンターされることを特徴とする請求項12から15のいずれか一に記載の方法。
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