JP2019523022A5 - - Google Patents

Description

例示的なｏＨＳＶベクターの概略図である。 ウイルスｈＶＧ１６１について改変されたＩＣＰ３４．５領域（配列番号５７２）の概略図を示す。 ウイルスｈＶＧ１６１について改変されたＵＬ５４プロモーター領域（配列番号５７３）の概略図を示す。 ＰＤ−Ｌ１ブロッカーが挿入されたｈＶＧ１６１ウイルスゲノム（配列番号５７４）の概略図を示す。 ｈＶＧ１６１で改変したＴＲ領域（配列番号５７５）の概略図を示す。 細胞のｈＶＧ１６１感染後のＩＬ−１２発現についてのＥＬＩＳＡおよびウェスタンブロットのデータを示す。 細胞のｈＶＧ１６１感染後のＩＬ−１５発現についてのＥＬＩＳＡおよびウェスタンブロットのデータを示す。 細胞のｈＶＧ１６１感染後のＩｇＧ４発現についてのＥＬＩＳＡおよびウェスタンブロットのデータを示す。 （Ａ）二方向ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１５ＲαおよびＩＬ−１５のＳｕｓｈｉドメインの発現を駆動する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｃ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５５７）である。 （Ａ）二方向ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１５およびＩＬ−１５Ｒαバリアント４の発現を駆動する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｃ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５５８）である。 （Ａ）二方向ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１５−Ｋ５およびＩＬ−１５Ｒα Ｓｕｓｈｉドメイン−Ｅ５の発現を駆動する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｃ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５５９）である。 （Ａ）二方向ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１５−Ｋ５およびＩＬ−１５Ｒαバリアント４−Ｅ５の発現を駆動する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６０）である。 （Ａ）ＥＦ１αプロモーターがＩＬ−１５−ＩＲＥＳ−ＩＬ−１５Ｒα Ｓｕｓｈｉドメインの発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６１）である。 （Ａ）ＥＦ１αプロモーターがＩＬ−１５−ＩＲＥＳ−ＩＬ−１５Ｒαバリアント４の発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６２）である。 （Ａ）ＥＦ１αプロモーターがＩＬ−１５Ｋ５−ＩＲＥＳ−ＩＬ−１５Ｒα ＳｕｓｈｉドメインＥ５の発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６３）である。 （Ａ）ＥＦ１αプロモーターがＩＬ−１５Ｋ５−ＩＲＥＳ−ＩＬ−１５Ｒαバリアント４Ｅ５の発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６４）である。 （Ａ）ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１２−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５Ｒα Ｓｕｓｈｉドメインの発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｅ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６５）である。 （Ａ）ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１２−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５Ｒαバリアント１の発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｅ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６６）である。 （Ａ）ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１２−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５Ｋ５−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５Ｒα ＳｕｓｈｉドメインＥ５の発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６７）である。 （Ａ）ＣＭＶプロモーターがＩＬ−１２−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５Ｋ５−ｐ２Ａ−ＩＬ−１５Ｒαバリアント１−Ｅ５の発現を制御する例示的なコンストラクトの概略図、ならびに（Ｂ〜Ｄ）ＤＮＡ配列および概略図（配列番号５６８）である。 ブロッキングペプチドによるＰＤ−１に対するＰＤ−Ｌ１結合の阻害率を示すチャートである。 抗ＣＤ３で刺激したヒト末梢血単核細胞による標的細胞の細胞毒性に対するＰＤ−Ｌ１抑制ペプチドの効果を示す。 ヒト末梢血単核細胞におけるＩＦＮγおよびＴＮＦαの産生に対するＩＬ−１２単独、ＩＬ−１５Ｒα単独、ならびにＩＬ−１２および１Ｌ−１５Ｒαをまとめるという効果を示す。 末梢血単核細胞によるＵ８７およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍細胞の細胞毒性に対するＩＬ−１２およびＩＬ−１５Ｒαの効果を示す。 ＶＧ１６１−ＰＬＢｈおよびＶＧ１６１−１５ｈによる細胞感染の結果を示す。 種々のコンストラクトについてのインビトロアッセイの結果を示す。図２６Ａ〜２６Ｂは、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、およびＰＤ−Ｌ１ブロッカーを保有するＩＬ−ＴＦ−Ｆｃプラスミドを用いた細胞トランスフェクションの結果を示す。図２６Ｃ〜２６Ｄは、ｈＶＧ１６１を含む種々の変異ウイルスによる細胞感染の結果を示す。 ヒト腫瘍細胞株およびベロ細胞株に対するｈＶＧ１６１およびＨＳＶ−３４５についての細胞生存率アッセイの結果を示す。 種々のコンストラクトについてのインビトロアッセイの結果を示す。図２８Ａ〜２８Ｅは、マウス腫瘍細胞株およびベロ細胞株に対するｍＶＧ１６１およびＨＳＶ−３４５についての細胞生存率アッセイの結果を示し、図２８Ｆ〜２８Ｊは、ＣＴ２６マウス腫瘍細胞のｍＶＧ１６１またはＶＧ００１感染後の導入遺伝子発現の特徴づけを示す。 種々の細胞株のｈＶＧ１６１またはＶＧ００１感染後の導入遺伝子発現のインビトロでの特徴づけの結果を示す。 種々のヒト癌細胞をインビトロで殺滅するｈＶＧ１６１の能力を評価するアッセイの結果を示す。 ｍＶＧ１６１およびｈＶＧ１６１コンストラクトについてのインビボアッセイの結果を示す。 ３つの異なるヒト細胞株に対する異なるウイルスについての成長曲線を示す。 マウス腫瘍細胞株およびベロ細胞株に対するｍＶＧ１６１およびＨＳＶ−３４５の成長曲線を示す。 ヒト腫瘍細胞株およびベロ細胞株に対するｈＶＧ１６１およびＨＳＶ−３４５の成長曲線を示す。 ウイルス改変の効果を示す。 インビトロでの効能データを提供する。 インビボでのデータを提供する。 免疫応答におけるＶＧ１６１ｍの効果に関するデータを提供する。