JP2019513023A - 新型天然タンパク質及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、システイン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、チロシンは、疎水性アミノ酸である。
スレオニン、グリシン、セリン、ヒスチジン、グルタミンは、中性アミノ酸である。
グルタミン酸、アスパラギン酸、プロリン、アスパラギンは、酸性アミノ酸である。
アルギニン、リシンは、塩基性アミノ酸である。
X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18X19X20X21X22X23X24X25X26X27X28X29X30X31
2)ヒト天然タンパク質内のポリペプチド配列のN末端58位のアミノ酸によって構成された配列、若しくは、40%以上の類似配列に基づいてC末端又はN末端で他のアミノ酸配列を融合させる。融合に用いられるアミノ酸配列は、ヒト天然タンパク質内のC末端31位のアミノ酸配列と同一又は類似性質を実現し、且つ同一又は類似機能を発揮することができる。修飾後のタンパク質は、ヒト天然タンパク質sDSS1と同一又は類似機能を発揮することができるタンパク質である。或いは、
3)上記の解決手段に記載の新型天然タンパク質sDSS1内のC末端ポリペプチド配列を用いて、他の天然又は非天然ポリペプチド配列を融合させて得られたタンパク質である。
MSEKKQPVDLGLLEEDDEFEEFPAEDWAGLDEDEDAHVWEDNWDDDNVEDDFSNQLRATVLLMILVCETPYGCYVLHQKGRMCSAFLCC(SEQ ID NO:1参照)である。バイオインフォマティクス解析により、当該タンパク質は、類人猿亜科動物が有する天然タンパク質であることが判明された。
TVLLMILVCETPYGCYVLHQKGRMCSAFLCC(SEQ ID NO:2参照)である。
sDSS1タンパク質は、サル目が有する分泌型タンパク質である。
国立生物工学情報センター(National Center of Biotechnology Information,NCBI)ゲノムデータベース、Nucleotide blast tool(NCBI)、Align sequences nucleotide blast tool(NCBI)、Translate tool (SIB Bioinformatics Resource Portal)、Clustal X2.1:Multiple Sequence Alignment (EMBL-EBI)、SecretomeP 2.0(CBS prediction service)、WoLF PSORT II。
1、細胞培養:293T細胞をアメリカ培養細胞系統保存機関(American type culture collection,ATCC)から購入し、細胞を、90%の基本培地(Dulbecco’s modified eagle medium,DMEM)(Life technology公司 C#12500062)及び10%のウシ胎児血清(Fetal bovine serum,FBS)(Gibco 公司C#10100−147)を含む細胞培養培地において、細胞培養インキュベータ(温度37℃、湿度95%、CO2濃度5%)で培養した。2日間ごとに1回継代した。
我々は、ヒトゲノム内のshfm1遺伝子のバイオインフォマティクスを解析した際に、この遺伝子が複数の転写産物を有することを見出した(NCBIデータベースにおけるshfm1遺伝子情報を参照、http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/7979)。DSS1タンパク質配列を共通にコードする1本のmRNA配列(NM_006304.1,509bp)のほか、より長い1本のmRNA配列(AK309241.1,1195bp)も存在する。短いmRNA配列及び長いmRNA配列は、わずか256bpの反復配列を有する(図1A)。核酸配列解析を経て、翻訳ツール(Translate tool)を使用することで、反復配列がDSS1タンパク質N末端の58位のアミノ酸配列をコードできることが明らかになった。長いmRNA配列は、89位のアミノ酸ポリペプチド配列をコードする。ポリペプチド配列の比較から、長いmRNAによってコードされたポリペプチド配列及びDSS1ポリペプチド配列は、N末端の58位のアミノ酸の重複領域を有するほか、31位のアミノ酸変異領域を有することがわかる。我々は、この新しいポリペプチドを分泌型DSS1タンパク質(secretory DSS1、sDSS1)と命名した。ポリペプチド配列は以下の通りである。
MSEKKQPVDLGLLEEDDEFEEFPAEDWAGLDEDEDAHVWEDNWDDDNVEDDFSNQLRAELEKHGYKMETS(SEQ ID NO:4参照)
MSEKKQPVDLGLLEEDDEFEEFPAEDWAGLDEDEDAHVWEDNWDDDNVEDDFSNQLRATVLLMILVCETPYGCYVLHQKGRMCSAFLCC(SEQ ID NO:1参照)
sDSS1タンパク質は、1種の天然タンパク質
sDSS1特異的抗体を用いて、ヒト脳脊髄液又は血清内においてsDSS1タンパク質のシグナルを検出することができる。異なる個体からの血清サンプルは、異なるシグナルパターンを示し、運動後の個々の血清内のsDSS1シグナルは、静止状態より明らかに高い(図3A)。U87−MG細胞において、sDSS1遺伝子のmRNAシグナルを検出することができる。PCR増幅産物の遺伝子シーケンシング結果は、データベースにおける配列と完全一致する(図3B)。これらの結果は、sDSS1タンパク質が、ヒト脳脊髄液及び血清内に存在する1種の天然タンパク質であることを示している。
sDSS1タンパク質の少量調製
1、sDSS1蛋白調製:ヒトsDSS1タンパク質をコードするヌクレオチド断片の全遺伝子合成(SEQ ID NO:17を参照)をpET151D内のHisx6−V5タグの後ろに挿入した。次に、プラスミドを発現菌株BL21(DE3)内に移した。大腸菌においてHisx6−V5−sDSS1タンパク質を融合発現し、ニッケル−NTAゲルカラムを用いて予備精製し、次に、SDS−PAGEを用いてゲル精製した。His−V5−sDSS1タンパク質を含む、切り出されたゲルバンドを、転写バッファを含む透析バッグに入れ、電界駆動によって、タンパク質をゲルから転写させ、透析バッグに回収する。タンパク質を約500マイクロリットルまで濃縮し、4度のPBS溶液において4回(毎回200ミリリットル)透析した。
大腸菌株の陽性クローンを選択し、拡大培養し、細菌増殖の対数期においてIPTGを用いて目的タンパク質を発現するように細菌細胞を刺激した。細胞を溶解し、目的タンパク質の発現レベルを検出した結果、IPTG刺激後、細菌細胞によって発現されるsDSS1タンパク質のレベルが顕著に向上し、タンパク質ストリップがゲルマップ上にはっきり見られたことが示された(図4A)。細菌溶解液をニッケル−NTAゲルカラムで予備精製した後、濃縮液内の目的タンパク質が大きく濃縮され(bチャネル)、雑多なタンパク質の含有量が減少した。精製し続けると、純度が極めて高く、その後の生物学的実験に用いられ得るsDSS1タンパク質(aチャネル)を得ることができた(図4B)。精製後のsDSS1タンパク質をBCAタンパク質により定量し、最終濃度が0.72mg/mlであり、予備として4度で保存した。
sDSS1タンパク質と酸化タンパク質との反応、及び酸化タンパク質の細胞毒性のブロック
1、酸化された血清とsDSS1タンパク質との反応 新鮮なヒト血液を3500gで30分間遠心分離し、その後の実験のために上層の血清を採取した。実験において、10μLのsDSS1タンパク質溶液(0.72mg/mL)を、10、20、50、100マイクロリットルの酸化血清とそれぞれ混合した。sDSS1と血清タンパク質との質量比は約1:100、1:200、1:500、1:1000であった。また、20μM Fenton試薬(FeSO4及びH2O2を1:1の質量比で混合)を添加して、均等に混合した後暗所の4℃で一晩インキュベートした。翌日、各反応におけるHis−V5−sDSS1を、10マイクロリットルのNi−NTA磁気ビーズで単離した。反応液と磁気ビーズとを4度で2時間混合し、磁気ビーズを磁気ラックでチューブの壁面に吸着させた後、液体を吸引し、1mlのPBSTを添加し、チューブを磁気ラックから取り外し、振動及び洗浄を繰り返した後、磁気ラックで磁気ビーズを吸着させ、PBSTを吸引した。このように4回繰り返し、最後に、50mM EDTAを含む50マイクロリットルのTBSでタンパク質を溶離した。溶離液を等容量の2x SDS溶液に加え、100℃で10分間処理し、12000gで10分間遠心分離し、検出のための上清を採取した。上清液と5Xローディングバッファーとを混合し、100℃で10分間加熱処理し、調製した試料をタンパク質のイムノブロッティング実験に使用した。
血清内には、主に血清アルブミンである大量のタンパク質が含まれている。フェントン(Fenton)試薬の作用下で、血清内のタンパク質が酸化され、酸化生成物は、sDSS1と反応して複合体を形成することができる。対照群では、明らかなタンパク質凝集を伴わないsDSS1タンパク質モノマーが見られた。実実験群では、血清との共同インキュベーションにより多数の高分子量タンパク質複合体が形成され、これらの複合体は、SDS−PAGEによって分離することができない(図5A)。結果により、sDSS1タンパク質が血清内の酸化タンパク質と結合できることが示された。細胞毒性実験では、対照血清と比較すれば、10%の酸化タンパク質の添加により、細胞増殖及び細胞生存率が明らかに抑制された。培地内に20μg/mLのsDSS1タンパク質が含まれれば、酸化タンパク質の細胞毒性を回復することができる(図5B)。
sDSS1タンパク質による、Aβオリゴマーの形成の低減、及び、Aβオリゴマーの細胞毒性の低減
1、細胞株培養 ヒト神経芽腫細胞(SH−SY5Y)を、10%ウシ胎児血清を補充した基本培地基DMEMで増殖させた。細胞を2日間ごとに1回継代した。
結果の分析
sDSS1タンパク質による、アミリンオリゴマーの細胞毒性の低減
1、細胞株培養 ヒト神経芽腫細胞(SH−SY5Y)を、10%ウシ胎児血清を補充した基本培地基DMEMで増殖させた。細胞を2日間ごとに1回継代した。
細胞培養液にインキュベートされた10μMのアミリンタンパク質を添加することにより、顕著な細胞毒性をもたらすことができ、さらに、sDSS1タンパク質を添加することにより、アミリンオリゴマーによる細胞毒性をブロックすることができ、ひいては細胞生存率が対照群よりも高い(図7)。これは、sDSS1タンパク質がアミリンタンパク質の細胞毒性を効果的にブロックできることを示している。
sDSS1タンパク質による、グリコシル化タンパク質の細胞毒性の低減
1、細胞株培養 ヒト神経芽腫細胞(SH−SY5Y)を、10%ウシ胎児血清を補充した基本培地基DMEMで増殖させた。細胞を2日間ごとに1回継代した。
細胞培養液に400μg/mLのグリコシル化タンパク質を添加することにより、顕著な細胞毒性をもたらすことができ、さらに、sDSS1タンパク質を添加することにより、グリコシル化タンパク質による細胞毒性をブロックすることができる。ひいてはsDSS1タンパク質の濃度が増加するにつれて、細胞生存率が対照群よりも高く(図8)、これは、sDSS1タンパク質がグリコシル化タンパク質の細胞毒性を効果的にブロックできることを示している。
sDSS1タンパク質による、早期老化型マウスのSAMP術後の生存期間の延長
1.動物飼育 早期老化型SAMP8マウス(5ヵ月齢、雄)を、北京維通利華実験動物技術有限公司から購入した。動物を、南方モデル動物センターの清潔な実験動物飼育センターに飼育している。動物に十分な無菌水及び標準マウスの繁殖飼料を提供し、明暗の交互の光照射を12h/12hで与え、毎月敷材及びリスケージを定期的に交換し、毎日動物の生存状況を確認した。
概略図には、マウス側脳室のウイルス注射部位の基本操作及びアデノウイルスの注射部位が示されている(図9A)。ここで、sDSS1発現アデノウイルスの注射を受けたマウスは、2つのバッチで合計10匹であった。GFP発現アデノウイルスマウスの注射を受けたマウスは、2つのバッチで合計14匹であった。アデノウイルスの注射後1ヶ月以内に、対照群の3匹のマウスが死亡し、実験群の1匹のマウスが死亡した。8ヵ月以内に、対照群のマウスが次々と死亡したが、実験群においては1匹の死亡のみが死亡した(図9B)。上記の結果をまとめると、sDSS1タンパク質を発現するアデノウイルスSAMP8を注射したマウスの術後生存期間は、対照ウイルスのみを注射したマウスより遥かに長く、ANOVA分析により、両者には大きな差(P−value< 0.01)が示された。
Claims (31)
- 新型天然タンパク質sDSS1であって、ヒトを含む類人猿亜目の動物に存在し、ヒト天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSSEQ ID NO:1で示されることを特徴とする新型天然タンパク質sDSS1。
- 前記類人猿亜目の動物は、チンパンジー、ボノボ、ゴリラ、オランウータン、キタホオジロテナガザル、ゴールデンモンキー、アカゲザル、ヒヒ、アンゴラコロブス、スーティーマンガベイ、ドリル、及びブタオザルをさらに含み、チンパンジーの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:5で示され、ボノボの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:6で示され、ゴリラの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:7で示され、オランウータンの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:8で示され、キタホオジロテナガザルの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:9で示され、ゴールデンモンキーの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:10で示され、アカゲザルの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:11で示され、ヒヒの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:12で示され、アンゴラコロブスの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:13で示され、スーティーマンガベイの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:14で示され、ドリルの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:15で示され、ブタオザルの天然タンパク質sDSS1のアミノ酸配列がSEQ ID NO:16で示されることを特徴とする請求項1に記載の新型天然タンパク質sDSS1。
- 前記天然タンパク質sDSS1は、N末端58位のアミノ酸配列及びC末端31位のアミノ酸配列に分けられ、ヒトsDSS1タンパク質のN末端58位のアミノ酸配列がSEQ ID NO:3で示され、ヒトsDSS1タンパク質のC末端31位のアミノ酸配列がSEQ ID NO:2で示され、2つの配列の特徴として、N末端58位のアミノ酸配列は、3つ以上の連続的に配列された酸性アミノ酸配列を含み、連続的に配列された各酸性アミノ酸配列断片が含有する酸性アミノ酸の数は、10個以下であり、連続的に配列された異なる酸性アミノ酸配列間の間隔の長さは、4個のアミノ酸を超えず、このような各間隔には、少なくとも1つの疎水性アミノ酸が存在し、pH値が4.5以下であり、N末端58位のアミノ酸からなる配列中の酸性アミノ酸の数は10個以上であり、N末端58位のアミノ酸配列に基づいた58番目のアミノ酸以降のC末端アミノ酸配列は、全体的に疎水性傾向を有し、C末端31位のアミノ酸からなるアミノ酸配列中の疎水性アミノ酸の数は10以上であり、
アミノ酸の分類は以下のように定義されており、
アラニン、イソロイシン、ロイシン、バリン、システイン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、チロシンは、疎水性アミノ酸であり、
スレオニン、グリシン、セリン、ヒスチジン、グルタミンは、中性アミノ酸であり、
グルタミン酸、アスパラギン酸、プロリン、アスパラギンは、酸性アミノ酸であり、
アルギニン、リシンは、塩基性アミノ酸であることを特徴とする請求項2に記載の新型天然タンパク質sDSS1。 - 類人猿亜目の動物のsDSS1タンパク質に含まれているC末端アミノ酸の式は、
X1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18X19X20X21X22X23X24X25X26X27X28X29X30X31
X1は中性アミノ酸、X2は疎水性アミノ酸、X3及びX4のそれぞれは疎水性アミノ酸、X5は疎水性アミノ酸、X6は疎水性アミノ酸、X7は疎水性アミノ酸、X8は疎水性アミノ酸、X9は疎水性アミノ酸、X10は酸性アミノ酸、X11は中性アミノ酸、 X12は疎水性アミノ酸、X13は疎水性アミノ酸、X14は中性アミノ酸、X15は疎水性アミノ酸、X16は疎水性アミノ酸、X17は疎水性アミノ酸、X18は疎水性アミノ酸、X19は塩基性アミノ酸、X20は酸性アミノ酸、X21は塩基性アミノ酸、X22は中性アミノ酸、X23は塩基性アミノ酸、X24は疎水性アミノ酸、X25は疎水性アミノ酸、X26は中性アミノ酸、X27は疎水性アミノ酸、X28は疎水性アミノ酸、X29は疎水性アミノ酸、X30は疎水性アミノ酸、X31は疎水性アミノ酸であり、
C末端31位のアミノ酸配列には、40%以上の相同アミノ酸配列が存在し、当該配列は、ポリペプチド内のヒトsDSS1蛋白質のC末端アミノ酸配列との性質及び発揮する機能が同一又は類似であることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の新型天然タンパク質sDSS1。 - 請求項1〜4のいずれか1項に記載の新型天然タンパク質sDSS1のN末端58位のアミノ酸配列及びC末端31位のアミノ酸配列に基づいて構築された1種類のポリペプチド配列であって、
1)当該ポリペプチド配列は、N末端58位のアミノ酸によって構成された配列が40%以上の類似性を有し、C末端アミノ酸配列が40%以上類似するタンパク質を有し、当該タンパク質は、ヒト天然タンパク質との性質及び機能が同一又は類似であり、或いは、
2)ヒト天然タンパク質内のポリペプチド配列のN末端58位のアミノ酸によって構成された配列、若しくは、40%以上の類似配列に基づいてC末端又はN末端で他のアミノ酸配列を融合させ、融合に用いられるアミノ酸配列は、ヒト天然タンパク質内のC末端31位のアミノ酸配列と同一又は類似性質を実現し、且つ同一又は類似機能を発揮することができ、修飾後のタンパク質は、ヒト天然タンパク質sDSS1と同一又は類似機能を発揮することができるタンパク質であり、或いは、
3)請求項4に記載の新型天然タンパク質sDSS1内のC末端ポリペプチド配列を用いて、他の天然又は非天然ポリペプチド配列を融合させて得られたタンパク質であることを特徴とするポリペプチド配列。 - 請求項1〜4のいずれか1項に記載の新型天然タンパク質sDSS1の完全配列又は部分配列と請求項5に記載のポリペプチド配列とを含むことを特徴とする融合タンパク質。
- 当該タンパク質自体、担体タンパク質、抗体又は他の任意のアミノ酸配列と結合することによって形成されたタンパク質複合体であることを特徴とする請求項6に記載の融合タンパク質。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載の新型天然タンパク質sDSS1の完全配列又は部分配列と、請求項5に記載のポリペプチド配列と、請求項6及び7のいずれか1項に記載の融合タンパク質との一部又は全部の複合を含むことを特徴とする複合体。
- ポリペプチド/タンパク質と薬学的に適用可能な薬物担体との結合によって形成された複合体であることを特徴とする請求項8に記載の複合体。
- 前記担体は、マイクロスフェア/マイクロカプセル、リポソーム、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、磁性粒子、及びゲルのうちの1つ又は複数を含むことを特徴とする請求項9に記載の複合体。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列をコードすることができることを特徴とするヌクレオチド配列。
- DNA配列及びRNA配列を含むことを特徴とする請求項11に記載のヌクレオチド配列。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列を発現することを特徴とする細胞。
- 任意の哺乳動物の幹細胞、前駆細胞又は成体細胞であることを特徴とする請求項13に記載の細胞。
- 前記哺乳動物は、ヒト、オランウータン、サル、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ロバ、イヌ、ウサギ、ネコ、ラット又はマウスであることを特徴とする請求項14に記載の細胞。
- 胚性幹細胞、人工多能性幹細胞、又は、初代培養由来の幹細胞、母細胞から分化して得られた多能性若しくは単能性幹細胞を含むことを特徴とする請求項13に記載の細胞。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列をコードしたヌクレオチド配列を生物体に導入し、請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列を発現することを特徴とする発現系。
- 真核生物発現プラスミドベクタ、アデノウイルス、レンチウイルス、レトロウイルス科、CRISPR/Cas技術、及び他の実行可能な遺伝子編集技術を含むことを特徴とする請求項17に記載の発現系。
- 前記生物体は、ヒト、オランウータン、サル、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ロバ、イヌ、ウサギ、ネコ、ラット、マウス、ニワトリ、アヒル又はガチョウであることを特徴とする請求項17に記載の発現系。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列を主な標的とし、投与後、有機体内の請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列の発現レベルに影響することができることを特徴とする薬物。
- 化学小分子薬物、タンパク質/ポリペプチド薬物、又は、核酸薬物、ナノ薬物であることを特徴とする請求項20に記載の薬物。
- 前記核酸薬物は、siRNA、マイクロRNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、三本鎖DNA及びリボザイムの1つ又は複数を含むことを特徴とする請求項21に記載の薬物。
- S1、請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質若しくは請求項5に記載のポリペプチド配列をコードしたヌクレオチド配列をプラスミドに挿入し、且つ細菌又は酵母細胞に導入する、又は、請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質若しくは請求項5に記載のポリペプチド配列をコード可能なヌクレオチド配列を昆虫細胞、哺乳動物細胞のゲノム内に挿入する発現ベクタの構築ステップと、
S2、S1に記載の形質転換細菌、酵母菌、昆虫細胞又は哺乳動物の細胞に対して拡大培養を行い、請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質若しくは請求項5に記載のポリペプチド配列を含む培養液又は細胞溶解物を回収するタンパク質発現ステップと、
S3、S2で得られた培養液又は細胞溶解物を、粗ろ過及び精製を経てタンパク質を得るというタンパク質精製ステップとを含むことを特徴とするタンパク質の生産方法。 - 化学合成技術を用いて請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列を生産することを特徴とするタンパク質の生産方法。
- インビトロリボソーム発現系を用いて請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質又は請求項5に記載のポリペプチド配列を生産することを特徴とするタンパク質の生産方法。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質、請求項5に記載のポリペプチド配列、請求項6又は7に記載の融合タンパク質、請求項8〜10のいずれか1項に記載の複合体、請求項11又は12に記載のヌクレオチド配列、請求項13〜16のいずれか1項に記載の細胞、請求項17〜19のいずれか1項に記載の発現系、及び請求項20〜22のいずれか1項に記載の薬物の疾患診断、予防及び治療における使用。
- 前記疾患は、病原性タンパク質/ポリペプチドの過度な産生又は蓄積によって引き起こされた疾患であることを特徴とする請求項26に記載の使用。
- 前記病原性タンパク質/ポリペプチドは、酸化、グリコシル化されたタンパク質産物、アミロイド前駆体タンパク質及びその切断産物、膵島アミロイドポリペプチド及びその切断産物、並びに、酸化タンパク質、グリコシル化タンパク質、アミロイド、膵島アミロイドポリペプチドに類似する特徴を具備する他の病原性タンパク質/ポリペプチドであることを特徴とする請求項27に記載の使用。
- 前記疾患診断は、請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質の全部又は一部のアミノ酸配列の発現レベル、mRNAレベル、及び遺伝子コピー数の1つ又は複数を測定することを含むことを特徴とする請求項26に記載の使用。
- 前記予防は、遺伝子改変、核酸導入、薬物注入/投与、細胞移植、及び組織移植のうちの1つ又は複数を含むことを特徴とする請求項26に記載の使用。
- 前記治療は、遺伝子改変、核酸導入、薬物注入/投与、細胞移植、及び組織移植のうちの1つ又は複数を含むことを特徴とする請求項26に記載の使用。
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