JP2019510034A - デングウイルス複製阻害剤としての置換インドリン誘導体 - Google Patents

Abstract

本発明は、置換インドリン誘導体、前記化合物を使用することによってデングウイルス感染を予防または治療する方法に関し、かつ薬剤として使用するための、より好ましくはデングウイルス感染を治療または予防する薬剤として使用するための前記化合物にも関する。本発明は、その化合物の医薬組成物または配合剤、薬剤として使用するための、より好ましくはデングウイルス感染を予防または治療するための組成物または配合剤にさらに関する。本発明は、その化合物を調製する方法にも関する。
【化１】

Description

本発明は、置換インドリン誘導体、前記化合物を使用することによってデングウイルス感染を予防または治療する方法に関し、かつ薬剤として使用するための、より好ましくはデングウイルス感染を治療または予防する薬剤として使用するための前記化合物にも関する。本発明は、その化合物の医薬組成物または配合剤、薬剤として使用するための、より好ましくはデングウイルス感染を予防または治療するための組成物または配合剤にさらに関する。本発明は、その化合物を調製する方法にも関する。

蚊またはダニによって伝染するフラビウイルスは、脳炎および出血熱などのヒトの生命を脅かす感染症を引き起こす。４種の異なるが近似している血清型のフラビウイルスデング、いわゆるＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−２、ＤＥＮＶ−３およびＤＥＮＶ−４が知られている。デング熱は、世界の大抵の熱帯および亜熱帯地域、主に都市部および準都市部に侵淫している。世界保健機関（ＷＨＯ）によれば、２５億人（そのうちの１０億人が小児である）がＤＥＮＶ感染の危険にさらされている（ＷＨＯ、２００２）。毎年、世界で推定５千万〜１億例のデング熱［ＤＦ］、５０万例の重症デング疾患（すなわち、デング出血熱［ＤＨＦ］およびデングショック症候群［ＤＳＳ］）、ならびに２０，０００人を超える死者が発生している。ＤＨＦは、侵淫地域における小児の入院および死亡の主因となっている。総じて、デング熱はアルボウイルス病の最大の原因である。最近、ラテンアメリカ、東南アジアおよび西太平洋にある国（ブラジル、プエルトリコ、ベネズエラ、カンボジア、インドネシア、ベトナム、タイなど）においてデング熱が大規模に発生したため、過去数年にわたり、その症例数は著しく増加している。デング熱は新しい地域に広がっているため、この疾患の症例数が増加しているだけでなく、その発生はより深刻化する傾向にある。

デング熱に対するワクチンの開発が進展し、Ｄｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）ワクチンが利用可能になっているが、多くの問題に遭遇している。その問題として、抗体依存性感染増強（ＡＤＥ）と呼ばれる現象の存在が挙げられる。１種の血清型による感染から回復すると、その血清型に対して生涯続く免疫が得られるが、他の３種の血清型の１種によるその後の感染に対し、部分的で一過性の保護のみが得られる。

他の血清型に感染すると、既に存在している異種抗体は、新たに感染したデングウイルスの血清型と複合体を形成するが、その病原体を中和することはない。むしろ、細胞へのウイルスの侵入が促進され、それによりウイルスの無制御な複製が生じ、ウイルス力価のピークがより高くなると考えられる。一次感染と二次感染との両方において、ウイルス力価が高くなると、より重症のデング疾患となる。移行抗体は授乳によって容易に乳児に移行することができるため、これは、小児の方が成人より重症デング疾患に冒されやすい理由の１つであり得る。

２種以上の血清型が同時に広まった地域は高侵淫地域とも呼ばれ、そこでは、より重症の二次感染に遭遇する危険性が高くなるため、重篤なデング疾患の危険性が著しく増大する。さらに、高侵淫状況では、より毒性の強い株が出現する可能性が高くなり、したがってデング出血熱（ＤＨＦ）またはデングショック症候群の可能性が増大する。

アエデス・アエギプチ（Ａｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉ）およびアエデス・アルボピクツス（Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）（ヒトスジシマカ）など、デング熱を運ぶ蚊は、地球上で北に移動している。米国（ＵＳ）疾病管理予防センター（ＣＤＣ）によれば、現在、それらの蚊の両方がテキサス州南部に遍在している。デング熱を運ぶ蚊の北への広がりは、米国に限らず、ヨーロッパでも観察されている。

Ｓａｎｏｆｉ Ｐａｓｔｅｕｒが製造したデング熱ワクチンであるＤｅｎｇｖａｘｉａ（登録商標）は、最初にメキシコで承認され、やがてより多くの国で承認された。しかしながら、特にＤＥＮＶ−１およびＤＥＮＶ−２に対して有効性が限られていること、フラビウイルス未感染対象における有効性が低いこと、および投薬スケジュールが長期にわたることから、このワクチンには改善の余地がかなり残されている。

これらの欠点はあるものの、このワクチンは、人口の大きい部分を保護するであろうため、侵淫状況下で大変革をもたらすものである。しかし、デング熱の負担が最も大きいきわめて年少の乳児に対する保護は可能性が低い。加えて、投薬スケジュールおよびフラビウイルス未感染対象において有効性がきわめて限られていることから、非侵淫地からデング熱の侵淫地へ移動する人々にとって、このワクチンは不適であり、価値がない／費用対効果が低いものとなる可能性がある。デング熱ワクチンの上記欠点は、曝露前予防性の抗デングウイルス薬が必要とされる理由である。

さらに、今日、デング熱ウイルス感染を治療または予防するための特定の抗ウイルス薬は入手不可能である。動物、より詳細にはヒトにおけるウイルス感染、特にフラビウイルス、より詳細にはデングウイルスにより引き起こされるウイルス感染を予防または治療する治療用物質に対する大きい未対処の医療ニーズが依然として存在することは明らかである。抗ウイルス力が良好であり、副作用がないかもしくは少なく、複数のデングウイルス血清型に対して広域抗活性を有し、低毒性であり、かつ／または薬物動態学的特性もしくは薬力学的特性が良好である化合物の必要性が高い。

国際公開第２０１０／０２１８７８号パンフレットは、２−フェニルピロリジンおよびインドリン誘導体を、炎症性および中枢性疾患の治療のための冷感メントール受容体拮抗剤として開示している。国際公開第２０１３／０４５５１６号パンフレットは、デングウイルス感染の治療に使用するためのインドール誘導体およびインドリン誘導体を開示している。

本発明は、ここで、デングウイルスの４種の血清型のすべてに対して非常に強力な活性を示す化合物、置換インドリン誘導体を提供する。

本発明は、本発明の化合物によって上記の問題の少なくとも１つを解決することができるという予想外の発見に基づいている。

本発明は、現在知られている４種の血清型のすべてに対して強力な抗ウイルス活性を有することが明らかになった化合物を提供する。本発明は、これらの化合物がデングウイルス（ＤＥＮＶ）の増殖を効果的に阻害することをさらに実証する。したがって、これらの化合物は、動物、哺乳動物およびヒトにおけるウイルス感染の治療および／または予防に、より詳細にはデングウイルス感染の治療および／または予防に使用することができる強力な化合物の有用な群である。

本発明は、薬剤としてのそのような化合物の使用、およびウイルス感染、特に動物または哺乳動物、より詳細にはヒトにおけるデングウイルスファミリーに属するウイルスによる感染を治療および／または予防する医薬を製造するためのそのような化合物の使用にさらに関する。本発明は、そのようなすべての化合物を調製する方法およびそれらを有効量で含む医薬組成物にも関する。

本発明は、１種以上のそのような化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を、任意選択により１種以上の他の薬剤（別の抗ウイルス剤など）と併用して、それを必要とする患者に投与することにより、ヒトのデングウイルス感染を治療または予防する方法にも関する。

本発明の一態様は、式（Ｉ）：

を有する化合物、その立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体であって、その化合物は、

を含む群から選択される、化合物、その立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体の提供である。

別の実施形態では、本発明は、式（Ｉ）

を有する化合物、その立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体に関し、式中、
Ｒ_１は、フルオロであり、Ｒ_２は、水素であり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、フルオロであり、Ｒ_２は、水素であり、Ｒ_３は、トリフルオロメトキシであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、水素であり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、水素であり、Ｒ_３は、トリフルオロメトキシであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、水素であり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、メトキシであり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、メトキシであり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、メトキシであり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、メトキシであり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、メトキシであり、Ｒ_３は、トリフルオロメトキシであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、フルオロであり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、フルオロであり、Ｒ_３は、トリフルオロメトキシであり、およびＲ_４は、水素であり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、フルオロであり、Ｒ_３は、トリフルオロメチルであり、およびＲ_４は、メトキシであり、または
Ｒ_１は、クロロであり、Ｒ_２は、水素であり、Ｒ_３は、トリフルオロメトキシであり、およびＲ_４は、メトキシである。

本発明の一部は、上記の化合物またはその立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体を、１種以上の薬学的に許容される添加剤、希釈剤または担体とともに含む医薬組成物でもある。

前記化合物の薬学的に許容される塩として、その酸付加塩および塩基塩が挙げられる。好適な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。好適な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。

本発明の化合物は、非溶媒和形態および溶媒和形態でも存在し得る。「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物と、１種以上の薬学的に許容される溶媒分子、例えばエタノールとを含む分子複合体を表すために本明細書で使用される。

「多形体」という用語は、本発明の化合物が２つ以上の形態または結晶構造で存在し得ることを指す。

本発明の化合物は、結晶質または非晶質製品として投与され得る。それらは、沈澱、結晶化、凍結乾燥、噴霧乾燥、または蒸発乾燥などの方法により、例えば、固体プラグ、粉末、またはフィルムとして得ることができる。それらは、単独で、または本発明の１種以上の他の化合物と組み合わせてもしくは１種以上の他の薬物と組み合わせて投与され得る。一般に、それらは、１種以上の薬学的に許容される添加剤を伴って製剤として投与される。本明細書では、「添加剤」という用語は、本発明の化合物以外の任意の成分を表すために使用される。添加剤の選択は、特定の投与形態、溶解性および安定性への添加剤の影響ならびに剤形の性質などの要因に大きく左右される。

本発明の化合物またはその任意のサブグループは、投与目的のために様々な医薬品形態へ製剤化され得る。適切な組成物として、全身投与薬物用に通常使用されるすべての組成物を挙げることができる。本発明の医薬組成物を調製するために、活性成分としての特定の化合物の有効量が、任意選択により付加塩形態において、薬学的に許容される担体と組み合わされて均質混合物にされ、この担体は、投与に所望される製剤の形態に応じて多種多様な形態をとり得る。これらの医薬組成物は、例えば、経口投与または経直腸投与に好適な単位剤形であることが望ましい。例えば、組成物を経口剤形に調製する際、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤および液剤などの経口液体製剤の場合、例えば、水、グリコール類、油、およびアルコールなどの通常の医薬媒体のいずれかを使用することができ、または散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合、デンプン、糖、カオリン、希釈剤、滑沢剤、結合剤、および崩壊剤などの固体担体を使用することができる。投与が容易であるため、錠剤およびカプセル剤は最も有利な経口単位剤形であり、その場合、固体医薬担体が当然使用される。また、使用直前に液体形態に変換することができる固体形態の製剤も含まれる。

投与を容易にし、投与量を均一にするために、前述の医薬組成物を単位剤形に製剤化することは特に有利である。本明細書で使用される単位剤形とは、単位投与量として好適である物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性成分を含有する。そのような単位剤形の例は、錠剤（分割錠剤またはコーティング錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、粉末パケット、ウエハー、坐剤、注射液または懸濁剤など、およびそれらの分離複合剤である。

感染症の治療の当業者は、以下に示される試験結果から有効量を決定することができるであろう。一般に、有効１日量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であろうと考えられる。必要な用量を２回、３回、４回またはそれより多回のサブ用量として、１日を通して適切な間隔をおいて投与することが適切な場合がある。前記サブ用量は、例えば、１単位剤形当たり１〜１０００ｍｇ、特に５〜２００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形として製剤化され得る。

正確な投与量および投与頻度は、当業者に周知のとおり、使用される本発明の特定の化合物、治療される特定の病態、治療される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重および全身的な身体状態、ならびに個体が摂取している可能性がある他の薬に依存する。さらに、有効量は、治療される対象の応答に応じて、および／または本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて低減または増加され得ることは明らかである。したがって、上記の有効量の範囲は指針であるに過ぎず、本発明の範囲または使用をいかなる程度であれ限定するものではない。

本開示は、本発明の化合物に存在する原子の任意の同位体も含むものとする。例えば、水素の同位体はトリチウムおよびジュウテリウムを含み、炭素の同位体はＣ−１３およびＣ−１４を含む。

本発明に使用される本化合物は、その立体化学的異性体型で存在することもでき、立体化学的異性体型は、同じ原子が同じ結合順序で結合して構成されるが、交換不可能な異なる三次元構造を有するすべての可能な化合物と定義される。別段の言及も指示もない限り、化合物の化学名は、前記化合物が所有し得るすべての可能な立体化学的異性体型の混合物を包含する。前記混合物は、前記化合物の基本分子構造のすべてのジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーを含有することができる。本発明において使用される化合物のすべての立体化学的異性体型は、純粋な形態または互いの混合物のいずれかにおいて、任意のラセミ混合物またはラセミ化合物を含めて本発明の範囲内に包含されるものとする。

本明細書に記載する化合物および中間体の純粋な立体異性体型は、前記化合物または中間体と基本分子構造が同じである他のエナンチオマーまたはジアステレオマーの形態を実質的に含まない異性体と定義される。特に、「立体異性として純粋な」という用語は、少なくとも８０％の立体異性体過剰率（すなわち、最低９０％の１種の異性体、および最高１０％の他の可能な異性体）から１００％の立体異性体過剰率（すなわち、１００％の１種の異性体、および他種の異性体はなし）までを有する化合物または中間体、より詳細には９０％〜最大１００％の立体異性体過剰率、さらにより詳細には９４％〜最大１００％の立体異性体過剰率、最も詳細には９７％〜最大１００％の立体異性体過剰率を有する化合物または中間体に関する。「エナンチオマーとして純粋な」および「ジアステレオマーとして純粋な」という用語も同様に理解されるべきであるが、その場合、それらは、それぞれ対象の混合物のエナンチオマー過剰率、ジアステレオマー過剰率に関するものである。

本発明において使用される化合物および中間体の純粋な立体異性体型は、当技術分野で既知の手順を適用することによって得ることができる。例えば、エナンチオマーは、光学活性な酸または塩基を用いてそれらのジアステレオマー塩を選択的に結晶化することによって互いに分離することができる。光学活性な酸の例としては、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸およびカンホスルホン酸（ｃａｍｐｈｏｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）がある。あるいは、エナンチオマーは、クロマトグラフ法により、キラル固定相を使用して分離することができる。前記純粋な立体化学的異性体型は、適切な出発原料の対応する純粋な立体化学的異性体型から誘導することもできるが、但し、反応は立体特異的に起こるものとする。特定の立体異性体が所望される場合、前記化合物は、立体特異的な調製方法により合成されるのが好ましいであろう。これらの方法は、エナンチオマーとして純粋な出発原料を使用するのが有利であろう。

本発明の式（Ｉ）の化合物はすべて、下図に＊の記号を付けた炭素原子で示すように、少なくとも１個のキラル炭素原子を有する。

前記キラル炭素原子が存在するため、「式（Ｉ）の化合物」は、（Ｒ）−エナンチオマー、（Ｓ）−エナンチオマー、ラセミ体、または２種の別個のエナンチオマーの任意の比での任意の可能な組合せであり得る。エナンチオマーの（Ｒ）−または（Ｓ）−の絶対配置が不明である場合、このエナンチオマーは、前記特定のエナンチオマーの比旋光度を測定した後、エナンチオマーが右旋性（＋）−であるか、または左旋性（−）−であるかを示すことによって同定することもできる。

ある態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物の比旋光度が（＋）である、式（Ｉ）の化合物の第１の群に関する。

別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物の比旋光度が（−）である、式（Ｉ）の化合物の第２の分野に関する。

ＬＣ／ＭＳ法
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定は、各方法に明記したＬＣポンプ、ダイオードアレイ（ＤＡＤ）検出器またはＵＶ検出器およびカラムを使用して行った。必要に応じて、追加の検出器を含めた（下の方法の表を参照されたい）。

カラムからの流れを、大気圧イオン源を装備した質量分析計（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために、調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ取込時間など）を設定することは当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。

化合物は、その実測保持時間（Ｒ_ｔ）およびイオンで表される。データの表に別に明記されていなければ、報告される分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］^＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ−Ｈ］⁻（脱プロトン化分子）に対応する。化合物が直接イオン化できなかった場合、付加体の種類を明記する（すなわち、［Ｍ＋ＮＨ_４］^＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］⁻など）。複数の同位体パターンを有する分子（Ｂｒ、Ｃｌ）について、報告される値は、最低同位体質量に関して得られた値とする。得られた結果は、すべて使用する方法に通常付随する実験上の不確実性を伴っていた。

以下では、「ＳＱＤ」はシングル四重極検出器を意味し、「ＭＳＤ」は質量選択検出器を意味し、「ＲＴ」は室温を意味し、「ＢＥＨ」は架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッドを意味し、「ＤＡＤ」はダイオードアレイ検出器を意味し、「ＨＳＳ」は高強度シリカを意味する。

ＳＦＣ／ＭＳ法
ＳＦＣ測定は、二酸化炭素（ＣＯ_２）およびモディファイアを供給するバイナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン、４００ｂａｒまで耐用する高圧フローセルを備えたダイオードアレイ検出器で構成される分析超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）システムを使用して行った。質量分析計（ＭＳ）が配置されている場合、カラムからの流れを（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために、調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ取込時間など）を設定することは当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。

融点
値は、ピーク値または融解範囲のいずれかであり、この分析方法に通常付随する実験上の不確実性を伴って得られる。

ＤＳＣ８２３ｅ（ＤＳＣと示す）
複数の化合物について、ＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）で融点を測定した。融点は、１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度は３００℃とした。

旋光度：
旋光度は、ナトリウムランプを備えたＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ ３４１旋光計で測定し、次のように報告した：［α］°（λ、ｃｇ／１００ｍｌ、溶媒、Ｔ℃）。
［α］_λ ^Ｔ＝（１００α）／（ｌ×ｃ）：式中、ｌは、経路長（単位：ｄｍ）であり、ｃは、温度Ｔ（℃）および波長λ（単位：ｎｍ）における試料の濃度（単位：ｇ／１００ｍｌ）である。使用した光の波長が５８９ｎｍ（ナトリウムＤ線）である場合、代わりに記号Ｄを使用することができる。旋光度の符号（＋または−）は常に付与されるべきである。この式を使用する場合、濃度および溶媒を旋光度の後の括弧内に常に記載する。旋光度は度を使用して報告し、濃度の単位は記載されない（ｇ／１００ｍＬであると想定する）。

実施例１：４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１）の合成、ならびにエナンチオマー１Ａおよび１Ｂへのキラル分離

中間体１ａの合成：
ｔｅｒｔ−ブチル４−ブロモブタノエート［ＣＡＳ １１０６６１−９１−１］（４２．３ｇ、０．１９ｍｏｌ）の、機械撹拌したＤＭＦ（６００ｍＬ）溶液に３−アミノ−５−メトキシフェノール［ＣＡＳ １６２１５５−２７−３］（２６．４ｇ、０．１９ｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（１２３．６ｇ、０．３７９ｍｏｌ）との固体混合物を小分けにして添加した。反応生成物を６０℃で６５時間撹拌し、室温に到達させた。この混合物をＨ_２Ｏ（２．５Ｌ）に注ぎ入れた。生成物をＥｔ_２Ｏで抽出した（２回）。まとめた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾別した。溶媒を減圧下で蒸発させ、次いでトルエンと共蒸発させた。残渣を順相ＨＰＬＣ（固定相：シリカゲル６０Ａ ２５〜４０μｍ（Ｍｅｒｃｋ）、移動相：２０％ＥｔＯＡｃ、８０％ヘプタンから６０％ＥｔＯＡｃ、４０％ヘプタンへの勾配）で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（２７ｇ）を得た。

中間体１ｂの合成：
メチル２−ブロモ−２−（４−フルオロフェニル）アセテート［ＣＡＳ ７１７８３−５４−５］（０．４００ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（０．５４７ｇ、１．９４ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．３３７ｍＬ、２．４３ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（４ｍＬ）中混合物をマイクロ波オーブン内で１００℃において２０分間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌで洗浄した。有機相をＨ_２Ｏおよびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、ヘプタン中ＥｔＯＡｃの勾配（２％から２０％へ）を使用して精製し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−メトキシ−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ｂ（０．５１１ｇ）を得た。

中間体１ｃの合成：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−メトキシ−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ｂ（０．５１０ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（３ｍＬ）と、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）と、Ｈ_２Ｏ（３ｍＬ）との溶媒混合物中溶液に水酸化リチウム（０．２３９ｇ、５．７０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で部分的に濃縮して、有機溶媒を除去した。残渣を１Ｎ ＨＣｌで酸性化し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、ＣＨ_２Ｃｌ_２（酢酸２％を含有）中ＭｅＯＨの勾配（０％から１０％へ）を使用して精製し、２−（（３−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−オキソブトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）−２−（４−フルオロフェニル）酢酸、１ｃ（０．３２６ｇ）を得た。

中間体１ｄの合成：
２−（（３−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−オキソブトキシ）−５−メトキシフェニル）アミノ）−２−（４−フルオロフェニル）酢酸、１ｃ（０．３２６ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）溶液にＨＡＴＵ（０．２８６ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．４１８ｍＬ、３．０１ｍｍｏｌ）および６−（トリフルオロメチル）インドリン［ＣＡＳ １８１５１３−２９−１］（０．１４１ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌで洗浄した。有機相をＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、ヘプタン中ＥｔＯＡｃの勾配（５％から５０％へ）を使用して精製し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ｄ（０．１３４ｇ）を得た。

化合物１の合成、ならびにエナンチオマー１Ａおよび１Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ｄ（０．１３４ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）溶液にジオキサン（３ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）中４Ｍ塩化水素を添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＥｔ_２Ｏ／ヘプタンの混合物と混和した。固体を濾別し、真空下で乾燥して、４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１、１０３ｍｇ）をラセミ混合物として得た。

化合物１（１．３ｇ）のエナンチオマーを分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）Ｄｉａｃｅｌ ＯＤ ２０×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ_２、エタノール）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマーをフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｇｒａｃｅ Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ（登録商標）シリカ４０ｇ、移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＨＯＡｃ １００／０／０／０から０／７５／２４．５／０．５への勾配）でさらに精製した。所望の画分をまとめ、減圧下で蒸発させ、ＥｔＯＡｃと共蒸発させ、次いでＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏと共蒸発させた。残渣をＨ_２Ｏ（１５ｍＬ）＋ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）に入れて４５分間かき混ぜ、濾別し、ＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（４／１）で洗浄し（４×）、真空下において４５℃で乾燥して、エナンチオマー１Ａ（４７５ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマーをフラッシュクロマトグラフィー（固定相：Ｇｒａｃｅ Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ（登録商標）シリカ４０ｇ、移動相：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＨＯＡｃ １００／０／０／０から０／７５／２４．５／０．５への勾配）でさらに精製した。所望の画分をまとめ、減圧下で蒸発させ、ＥｔＯＡｃと共蒸発させ、次いでＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏと共蒸発させた。残渣をＨ_２Ｏ（１５ｍＬ）＋ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）に入れて７５分間かき混ぜ、濾別し、ＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（４／１）で洗浄し（４×）、真空下において４５℃で乾燥して、エナンチオマー１Ｂ（４６１ｍｇ）を得た。

化合物１：
^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．８０−１．９４（ｍ，２Ｈ）２．２２−２．４８（ｍ，２Ｈ）３．０９−３．２７（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）３．９１−４．０６（ｍ，１Ｈ）４．４８−４．６１（ｍ，１Ｈ）５．５７（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．９４（ｓ，１Ｈ）５．９６（ｓ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）７．３５−７．４９（ｍ，２Ｈ）７．５８（ｄｄ，Ｊ＝８．１，５．８Ｈｚ，２Ｈ）８．３８（ｓ，１Ｈ）１２．１（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ１．９４分、ＭＨ^＋５４７

エナンチオマー１Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）３．１４−３．２９（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）４．００（ｔｄ，Ｊ＝１０．５，７．３Ｈｚ，１Ｈ）４．５４（ｔｄ，Ｊ＝１０．４，６．３Ｈｚ，１Ｈ）５．５６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄｔ，Ｊ＝９．１，１．８Ｈｚ，２Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．２０（ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ）７．３４−７．４１（ｍ，１Ｈ）７．４２−７．４９（ｍ，１Ｈ）７．５２−７．６２（ｍ，２Ｈ）８．３８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１２．１０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｄ）：Ｒ_ｔ０．９９分、ＭＨ^＋５４７
［α］_Ｄ ^２０：−４９．０°（ｃ０．４１，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｊ）：Ｒ_ｔ２．９２分、ＭＨ^＋５４７、キラル純度１００％。

エナンチオマー１Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１２−３．２９（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）４．００（ｔｄ，Ｊ＝１０．４，７．２Ｈｚ，１Ｈ）４．５４（ｔｄ，Ｊ＝１０．４，６．３Ｈｚ，１Ｈ）５．５６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）５．９５（ｄｔ，Ｊ＝９．１，２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．２０（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）７．３５−７．４１（ｍ，１Ｈ）７．４２−７．４８（ｍ，１Ｈ）７．５３−７．６２（ｍ，２Ｈ）８．３８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１２．１１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｄ）：Ｒ_ｔ１．００分、ＭＨ^＋５４７
［α］_Ｄ ^２０：＋４９．５°（ｃ０．５２５，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｊ）：Ｒ_ｔ２．８１分、ＭＨ^＋５４７、キラル純度１００％。

実施例２：４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物２）の合成、ならびにエナンチオマー２Ａおよび２Ｂへのキラル分離。

中間体２ａの合成：
６−（トリフルオロメトキシ）インドリン［ＣＡＳ ９５９２３５−９５−１］（２ｇ、９．８４ｍｍｏｌ）と、２−（４−フルオロフェニル）酢酸［ＣＡＳ ４０５−５０−５］（１．６７ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（５．６ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（４．９ｍＬ、２９．５ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（４０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＥｔＯＡｃで溶かした。この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９０／１０から６０／４０への勾配）で精製した。純粋な画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮して、２−（４−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、２ａ（２．５ｇ）を得た。

中間体２ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（９．８２ｍＬ、１４．７ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １．５Ｍを２−（４−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、２ａ（２．５ｇ、７．３７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中混合物に滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．４４ｇ、８．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和水溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させ、ＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから沈殿させた後、２−ブロモ−２−（４−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、２ｂ（３ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体２ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、２ｂ（１．１ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（０．７４ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．５４ｍＬ、３．１５ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（４０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。この混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。化合物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固した。残渣をジイソプロピルエーテル／石油エーテルから結晶化させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、２ｃ（１．２５ｇ）を得た。

化合物２の合成、ならびにエナンチオマー２Ａおよび２Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、２ｃ（１．５ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）をジオキサン（１５ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で３時間撹拌した。沈殿物を濾別し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸をＨＣｌ塩（化合物２、１．４ｇ、０．７６当量ＨＣｌ、０．１当量Ｈ_２Ｏ）として得た。キラル分離する前に、化合物２（ＨＣｌ塩）のＥｔＯＡｃまたはＣＨ_２Ｃｌ_２溶液を１Ｎ ＮａＯＨで処理し、有機層を減圧下で蒸発させることにより、化合物２（ＨＣｌ塩）を中和した。化合物２（１．３ｇ）のエナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ_２、５０％ＭｅＯＨ）により分離し、逆相クロマトグラフィー（固定相：ＹＭＣ−ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ−Ｃ１８ １０μｍ １５０×３０ｍｍ、移動相：ＨＣＯＯＮＨ_４ ０．６ｇ／Ｌ ｐＨ＝３．５が６０％、ＣＨ_３ＣＮが４０％からＨＣＯＯＮＨ_４ ０．６ｇ／Ｌ ｐＨ＝３．５が０％、ＣＨ_３ＣＮが１００％への勾配）でさらに精製した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（２０５ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー２Ａ（１６８ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（２５９ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー２Ｂ（１８０ｍｇ）を得た。

化合物２：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０５−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）４．０１（ｔｄ，Ｊ＝１０．３，７．４Ｈｚ，１Ｈ）４．５３（ｔｄ，Ｊ＝１０．２，６．６Ｈｚ，１Ｈ）５．５６（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．９６（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ）７．０１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）７．３３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．５７（ｄｄ，Ｊ＝８．５，５．７Ｈｚ，２Ｈ）８．０４（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．８０分、ＭＨ^＋５６３
融点：１３６℃

エナンチオマー２Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０５−３．２６（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８４（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）３．９６−４．０８（ｍ，１Ｈ）４．４６−４．６０（ｍ，１Ｈ）５．５５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ）６．４１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．２１（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）７．３３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．５７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，５．７Ｈｚ，２Ｈ）８．０４（ｓ，１Ｈ）１２．１９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８７分、ＭＨ^＋５６３
［α］_Ｄ ^２０：−４６．３°（ｃ０．２７，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｂ）：Ｒ_ｔ１．７５分、ＭＨ^＋５６３、キラル純度１００％。

エナンチオマー２Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０５−３．２６（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８４（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）４．０１（ｔｄ，Ｊ＝１０．３，７．４Ｈｚ，１Ｈ）４．５３（ｔｄ，Ｊ＝１０．２，６．０Ｈｚ，１Ｈ）５．５５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ）６．４１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．２０（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）７．３３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．５７（ｄｄ，Ｊ＝８．５，５．７Ｈｚ，２Ｈ）８．０４（ｓ，１Ｈ）１１．４９−１２．４９（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８７分、ＭＨ^＋５６３
［α］_Ｄ ^２０：＋４７．０°（ｃ０．２７，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｂ）：Ｒ_ｔ３．８３分、ＭＨ^＋５６３、キラル純度１００％。

実施例３：４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物３）の合成、ならびにエナンチオマー３Ａおよび３Ｂへのキラル分離。

中間体３ａの合成：
６−（トリフルオロメチル）インドリン［ＣＡＳ １８１５１３−２９−１］（３ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １８７８−６６−６］（３．５３ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（９．１ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（７．９５ｍＬ、４８．１ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（７５ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＥｔＯＡｃで溶かした。この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９０／１０から６０／４０への勾配）で精製した。純粋な画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮して、２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、３ａ（４．５ｇ）を得た。

中間体３ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１７．７ｍＬ、２６．５ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １．５Ｍを２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、３ａ（４．５ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６５ｍＬ）中混合物に滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２．６ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３５ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をジイソプロピルエーテルで溶かした。沈殿物を濾別し、廃棄した（残留スクシンイミド）。濾液を減圧下で濃縮して、２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、３ｂ（５ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体３ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、３ｂ（５ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（３．３ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（２．４７ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（１２０ｍＬ）中混合物を７０℃で６時間撹拌した。この混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。化合物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９０／１０から６０／４０への勾配）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、３ｃ（１．６ｇ）を得た。

化合物３の合成、ならびにエナンチオマー３Ａおよび３Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、３ｃ（１．６ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）をジオキサン（２２ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮した。残渣をＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルに溶かした。沈殿物を濾別し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸をＨＣｌ塩（１．１５ｇ、０．９５当量ＨＣｌ、０．０７当量Ｈ_２Ｏ）として得た。化合物３（ＨＣｌ塩）のＥｔＯＡｃまたはＣＨ_２Ｃｌ_２溶液を１Ｎ ＮａＯＨで処理し、有機層を減圧下で蒸発させることにより、化合物３（ＨＣｌ塩）の少量部分を中和して、化合物３を得た。化合物３（ＨＣｌ塩）の残量をキラル分離に使用した。すなわち、エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ_２、５０％ｉＰｒＯＨ）により分離した。第１の溶出エナンチオマー（４７０ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー３Ａ（４０４ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（４８０ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー３Ｂ（４３３ｍｇ）を得た。

化合物３：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．２７（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）３．９７−４．０９（ｍ，１Ｈ）４．４６−４．５９（ｍ，１Ｈ）５．５７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，２Ｈ）６．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３４−７．４９（ｍ，４Ｈ）７．５５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ）８．３８（ｓ，１Ｈ）１１．９０−１２．２５（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．８８分、ＭＨ^＋５６３
融点：１９２℃

エナンチオマー３Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）３．１５−３．３１（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）３．９７−４．０９（ｍ，１Ｈ）４．４８−４．６０（ｍ，１Ｈ）５．５９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，２Ｈ）６．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３６−７．５０（ｍ，４Ｈ）７．５６（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）８．３８（ｓ，１Ｈ）１２．１７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９３分、ＭＨ^＋５６３
［α］_Ｄ ^２０：−４２．４°（ｃ０．２５，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ２．１２分、ＭＨ^＋５６３、キラル純度１００％。

エナンチオマー３Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）３．１５−３．３１（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）３．９７−４．１０（ｍ，１Ｈ）４．４９−４．６１（ｍ，１Ｈ）５．５９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７７（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，２Ｈ）６．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３６−７．４９（ｍ，４Ｈ）７．５６（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）８．３８（ｓ，１Ｈ）１２．１７（ｂｒ ｓ，１Ｈ
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９３分、ＭＨ^＋５６３
［α］_Ｄ ^２０：＋５０．７°（ｃ０．２７，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ４．８７分、ＭＨ^＋５６３、キラル純度１００％。

実施例４：４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）−インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物４）の合成、ならびにエナンチオマー４Ａおよび４Ｂへのキラル分離。

中間体４ａの合成：
６−（トリフルオロメトキシ）インドリン［ＣＡＳ ９５９２３５−９５−１］（２ｇ、９．８４ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １８７８−６６−６］（１．８５ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（５．６ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（４．９ｍＬ、２９．５ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（４０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＥｔＯＡｃで溶かした。この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９０／１０から６０／４０への勾配）で精製した。純粋な画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮して、２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、４ａ（３ｇ）を得た。

中間体４ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１１．２ｍＬ、１６．９ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １．５Ｍを２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、４ａ（３ｇ、８．４３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中混合物に滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．６５ｇ、９．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、４ｂ（３．６ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体４ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、４ｂ（３．６ｇ、８．３ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（２．３ｇ、８．３ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．７ｍＬ、９．９４ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（８０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。化合物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、１２０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固し、ジイソプロピルエーテルから結晶化させた後、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、４ｃ（２．６ｇ）を得た。

化合物４の合成、ならびにエナンチオマー４Ａおよび４Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、４ｃ（２．４ｇ、３．８ｍｍｏｌ）をジオキサン（２４ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で３時間撹拌した。沈殿物を濾別し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸をＨＣｌ塩（化合物４、２ｇ、０．８当量ＨＣｌ、０．０７当量Ｈ_２Ｏ）として得た。キラル分離する前に、化合物４（ＨＣｌ塩）の酢酸エチル溶液を１Ｎ ＮａＯＨで処理し、有機層を減圧下で蒸発させることにより、化合物４（２ｇ、ＨＣｌ塩）を中和した。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ_２、５０％ｉＰｒＯＨ（＋０．３％ｉＰｒＮＨ_２））により分離し、分取アキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｙａｎｏ（登録商標）６μｍ １５０×２１．２ｍｍ、移動相：８０％ＣＯ_２、２０％ＭｅＯＨ（＋０．３％ｉＰｒＮＨ_２））でさらに精製した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。両方のエナンチオマーをＥｔＯＡｃで溶かし、１Ｎ ＨＣｌで洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマーをエーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー４Ａ（６１６ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマーをエーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー４Ｂ（７１５ｍｇ）を得た。

キラル分離については同じ条件を使用し、ラセミ化合物のＨＣｌ塩から出発して、エナンチオマーを分離することも可能である。

化合物４：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０７−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）４．０４（ｔｄ，Ｊ＝１０．５，７．１Ｈｚ，１Ｈ）４．５２（ｔｄ，Ｊ＝１０．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ）５．５７（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）５．９０−６．００（ｍ，２Ｈ）７．０１（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．４１−７．４８（ｍ，２Ｈ）７．５５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）８．０３（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ｂ）：Ｒｔ２．７０分、ＭＨ^＋５７９
融点：１５０℃

エナンチオマー４Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０８−３．２７（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ）３．９９−４．１１（ｍ，１Ｈ）４．４７−４．５７（ｍ，１Ｈ）５．５７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ）６．４５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）７．０１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）７．５５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）８．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１２．１２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９５分、ＭＨ^＋５７９
［α］_Ｄ ^２０：−４８．５°（ｃ０．２７，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ１．１３分、ＭＨ^＋５７９、キラル純度１００％。

エナンチオマー４Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０９−３．２７（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）３．９９−４．１０（ｍ，１Ｈ）４．４６−４．５９（ｍ，１Ｈ）５．５７（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ）６．４５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）７．０１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）７．５５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）８．０４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１２．１２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９４分、ＭＨ^＋５７９
［α］_Ｄ ^２０：＋４２．９°（ｃ０．２８，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．１３分、ＭＨ^＋５７９、キラル純度１００％。

実施例５：４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物５）の合成、ならびにエナンチオマー５Ａおよび５Ｂへのキラル分離。

中間体５ａの合成：
１−メトキシ−４−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ベンゼン［ＣＡＳ ６５４−７６−２］（２４．５ｇ、１１０．８ｍｍｏｌ）と４−クロロフェノキシアセトニトリル［ＣＡＳ ３５９８−１３−８］（２０．４ｇ、１２１．９ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（１００ｍＬ）中混合物をｔＢｕＯＫ（２７．３５ｇ、２４３．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）撹拌溶液に−１０℃で３０分かけて滴加した。添加後、紫色溶液を−１０℃で１時間維持した。５００ｍＬの氷水および５００ｍＬの６Ｎ ＨＣｌを添加し、沈殿物を濾別し、水で洗浄し、減圧下で乾燥して、４０．４ｇの２−（５−メトキシ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）アセトニトリル、５ａを得た（次の工程にそのまま使用した）。

中間体５ｂの合成：
２−（５−メトキシ−２−ニトロ−４−（トリフルオロメチル）フェニル）アセトニトリル、５ａ（２６ｇ、９９．９ｍｍｏｌ）の、エタノール／水（９／１）（５００ｍＬ）とＡｃＯＨ（５．２ｍＬ）との溶液を、触媒として１０％Ｐｄ／Ｃ（１５．３ｇ）を使用し、圧力３．５Ｂａｒにおいて１時間水素付加した。反応混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＨ_２Ｃｌ_２とＣＨ_３ＯＨとの溶媒混合物で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、シリカ６０〜２００μｍを充填したガラスフィルターを通して、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０を溶離液として使用して濾過した。目的化合物を含有する画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮して、５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−インドール、５ｂ（１５．６ｇ）を得た。

中間体５ｃの合成：
０℃において、ＢＨ_３−ピリジン（２３．５ｍＬ、２３２．４ｍｍｏｌ）を５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−インドール、５ｂ（１０ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６０ｍＬ）溶液に滴加した。温度を１０℃未満に維持しながら、６Ｎ ＨＣｌ（１４０ｍＬ）をゆっくりと添加した。この混合物を０℃で２時間撹拌した。水（２００ｍＬ）を添加し、この混合物をＮａＯＨの濃厚水溶液でｐＨ８〜９になるまで塩基性化した（反応温度を２０℃未満に保持した）。沈殿物を濾別し、水で洗浄し（２回）、減圧下でトルエンと共蒸発させて、５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン、５ｃ（９ｇ）を得た。

中間体５ｄの合成：
５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン、５ｃ（２ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １８７８−６６−６］（１．７３ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（５．２５ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（４．６ｍＬ、２７．６ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（４０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＥｔＯＡｃで溶かした。この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９０／１０から６０／４０への勾配）で精製した。純粋な画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮して、２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、５ｄ（３ｇ）を得た。

中間体５ｅの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１７．３ｍＬ、１７．３ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、５ｄ（３．２ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５ｍＬ）中混合物に滴加した。ＴＭＳＣｌ（１．３２ｍＬ、１０．４ｍｍｏｌ）を滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．８５ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、５ｅ（３．１ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体５ｆの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、５ｅ（３．５ｇ、７．８ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（２．２ｇ、７．８ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．６ｍＬ、９．４ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（８０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固し、ジイソプロピルエーテルから結晶化した後、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、５ｆ（２．１ｇ）を得た。

化合物５の合成、ならびにエナンチオマー５Ａおよび５Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、５ｆ（３．１ｇ、４．７７ｍｍｏｌ）をジオキサン（４２．２ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。沈殿物を濾別し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸をＨＣｌ塩（化合物５、２ｇ）として得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＡ ５μｍ ２５０×２０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ_２、５０％ｉＰｒＯＨ（＋０．３％ｉＰｒＮＨ_２＋１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２））により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。両方のエナンチオマーをＥｔＯＡｃで溶かし、１Ｎ ＨＣｌで洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（８４７ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー５Ａ（７７２ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（８４０ｍｇ）をエーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー５Ｂ（７２４ｍｇ）を得た。

化合物５：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１４−３．３５（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．８９（ｍ，５Ｈ）３．９４−４．０４（ｍ，１Ｈ）４．５１（ｔｄ，Ｊ＝１０．２，６．３Ｈｚ，１Ｈ）５．５５（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ）７．２３（ｓ，１Ｈ）７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）７．５５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）８．３４（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．８６分、ＭＨ^＋５９３
融点：１３０℃

エナンチオマー５Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１２−３．３１（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８１−３．８９（ｍ，５Ｈ）３．９４−４．０５（ｍ，１Ｈ）４．４５−４．５６（ｍ，１Ｈ）５．５５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ）６．４０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）７．２３（ｓ，１Ｈ）７．４４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）７．５６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）８．３４（ｓ，１Ｈ）１２．１４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８５分、ＭＨ^＋５９３
［α］_Ｄ ^２０：−４３．２°（ｃ０．２５，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｄ）：Ｒ_ｔ２．１６分、ＭＨ^＋５９３、キラル純度１００％。

エナンチオマー５Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１３−３．３３（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．７９−３．８８（ｍ，５Ｈ）３．９４−４．０３（ｍ，１Ｈ）４．５１（ｔｄ，Ｊ＝１０．３，６．１Ｈｚ，１Ｈ）５．５４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，２Ｈ）６．４０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）７．２３（ｓ，１Ｈ）７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）７．５５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）８．３４（ｓ，１Ｈ）１２．１４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８５分、ＭＨ^＋５９３
［α］_Ｄ ^２０：＋４１．４°（ｃ０．２８，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｄ）：Ｒ_ｔ３．７５分、ＭＨ^＋５９３、キラル純度９９．３７％。

実施例６：４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物６）の合成、ならびにエナンチオマー６Ａおよび６Ｂへのキラル分離。

中間体６ａの合成：
６−（トリフルオロメチル）インドリン［ＣＡＳ １８１５１３−２９−１］（２ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）酢酸［ＣＡＳ １７０７３７−９５−８］（２．３６ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（６．１ｇ、１６ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（５．３ｍＬ、３２ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（５０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＥｔＯＡｃで溶かした。この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９０／１０から６０／４０への勾配）で精製した。純粋な画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮して、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、６ａ（３．９ｇ）を得た。

中間体６ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１３．５ｍＬ、１３．５ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、６ａ（２．５ｇ、６．７６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中混合物に滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．３２ｇ、７．４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、６ｂ（３ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体６ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、６ｂ（３ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（１．８８ｇ、６．６９ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ、８ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）中混合物を７０℃で６時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。化合物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、６ｃ（１．６ｇ）を得た。

化合物６の合成、ならびにエナンチオマー６Ａおよび６Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、６ｃ（１．５３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）をジオキサン（２０ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮した。残渣をＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルに溶かした。沈殿物を濾別し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物６）をＨＣｌ塩（１．３５ｇ、０．６７当量ＨＣｌ、０．２８当量Ｈ_２Ｏ）として得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：６５％ＣＯ_２、３５％ＥｔＯＨ）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマーを逆相クロマトグラフィー（固定相：ＹＭＣ−ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ−Ｃ１８ １０μｍ １５０×３０ｍｍ、移動相：０．１％ギ酸が５５％、ＣＨ_３ＣＮが４５％から０．１％ギ酸が０％、ＣＨ_３ＣＮが１００％への勾配でさらに精製した。純粋な画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。残渣（４１７ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー６Ａ（３７０ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマーを逆相クロマトグラフィー（固定相：ＹＭＣ−ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ−Ｃ１８ １０μｍ １５０×３０ｍｍ、移動相：０．１％ギ酸が５５％、ＣＨ_３ＣＮが４５％から０．１％ギ酸が０％、ＣＨ_３ＣＮが１００％への勾配でさらに精製した。純粋な画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。次いで、残渣（４００ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー６Ｂ（３６３ｍｇ）を得た。

化合物６：
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．３２（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．８７（ｍ，２Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）３．９６−４．０７（ｍ，１Ｈ）４．３１−４．４５（ｍ，１Ｈ）５．６１（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）７．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｓ，１Ｈ）７．３２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）７．３５−７．４１（ｍ，１Ｈ）７．４３−７．５０（ｍ，１Ｈ）８．３７（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．９０分、ＭＨ^＋５９３
融点：１３０℃

エナンチオマー６Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．２４（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１８．６，１１．７Ｈｚ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．８７（ｍ，２Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）３．９７−４．０６（ｍ，１Ｈ）４．３３−４．４３（ｍ，１Ｈ）５．６１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ）６．４３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０３（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１５（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．３９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．４６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）８．３７（ｓ，１Ｈ）１２．１６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９９分、ＭＨ^＋５９３
［α］_Ｄ ^２０：−２８．６°（ｃ０．２９，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｅ）：Ｒ_ｔ２．１７分、ＭＨ^＋５９３、キラル純度１００％。
融点：１７８℃

エナンチオマー６Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．２４（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１８．８，１１．５Ｈｚ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８３（ｑ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）３．９６−４．０８（ｍ，１Ｈ）４．３２−４．４３（ｍ，１Ｈ）５．６１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ）６．４３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０３（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．１５（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．３９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）７．４６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）８．３７（ｓ，１Ｈ）１２．１６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ３．００分、ＭＨ^＋５９３
［α］_Ｄ ^２０：＋３２．１°（ｃ０．２８，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｅ）：Ｒ_ｔ４．０４分、ＭＨ^＋５９３、キラル純度１００％。

実施例７：４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物７）の合成、ならびにエナンチオマー７Ａおよび７Ｂへのキラル分離。

中間体７ａの合成：
５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン、５ｃ（１．５ｇ、６．９ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）酢酸［ＣＡＳ １７０７３７−９５−８］（１．４ｇ、６．９ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（３．９４ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（３．４ｍＬ、２０．７ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（４０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。氷／水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２で溶かした。この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をジイソプロピルエーテルから結晶化させて、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、７ａ（２．４８ｇ）を得た。

中間体７ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１６．５ｍＬ、１６．５ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、７ａ（３．３ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５ｍＬ）中混合物に滴加した。ＴＭＳＣｌ（１．２６ｍＬ、９．９１ｍｍｏｌ）を滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．７６ｇ、９．９１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、７ｂ（３．５ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体７ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、７ｂ（３．５ｇ、７．３１ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（２ｇ、７．３１ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（８０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。化合物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、７ｃ（２．２ｇ）を得た。

化合物７の合成、ならびにエナンチオマー７Ａおよび７Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、７ｃ（２．１ｇ、３．１ｍｍｏｌ）をジオキサン（２７．４ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮した。残渣をＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルに溶かした。沈殿物を濾別し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物７）をＨＣｌ塩（１．５ｇ、０．７４当量ＨＣｌ、０．２９当量Ｈ_２Ｏ）として得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：５５％ＣＯ_２、４５％ｉＰｒＯＨ）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（６７１ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー７Ａ（６０６ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（６４７ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー６Ｂ（５８０ｍｇ）を得た。

化合物７：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１７−３．３０（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．７９−３．８７（ｍ，５Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）３．９３−４．０２（ｍ，１Ｈ）４．２９−４．４０（ｍ，１Ｈ）５．５９（ｓ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，２Ｈ）７．０２（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ）７．２４（ｓ，１Ｈ）７．３２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）８．３２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．８９分、ＭＨ^＋６２３
融点：１６０℃

エナンチオマー７Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．７９−３．８７（ｍ，５Ｈ）３．９１（ｓ，３Ｈ）３．９４−４．０５（ｍ，１Ｈ）４．３１−４．４２（ｍ，１Ｈ）５．５９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ）６．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｓ，１Ｈ）７．２４（ｓ，１Ｈ）７．３３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．３３（ｓ，１Ｈ）１２．１８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８７分、ＭＨ^＋６２３
［α］_Ｄ ^２０：−２３．９°（ｃ０．２８，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ１．７６分、ＭＨ^＋６２３、キラル純度１００％。

エナンチオマー７Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．８７（ｍ，５Ｈ）３．９１（ｓ，３Ｈ）３．９４−４．０２（ｍ，１Ｈ）４．２８−４．４１（ｍ，１Ｈ）５．５９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）５．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ）６．４０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．０２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．１４（ｓ，１Ｈ）７．２４（ｓ，１Ｈ）７．３３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．３３（ｓ，１Ｈ）１２．１７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８７分、ＭＨ^＋６２３
［α］_Ｄ ^２０：＋２８．５°（ｃ０．２６，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ３．５２分、ＭＨ^＋６２３、キラル純度１００％。

実施例８：４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物８）の合成、ならびにエナンチオマー８Ａおよび８Ｂへのキラル分離。

中間体８ａの合成：
６−（トリフルオロメトキシ）インドリン［ＣＡＳ ９５９２３５−９５−１］（２．５ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）酢酸［ＣＡＳ １７０７３７−９５−８］（２．４７ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（７ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（６．１ｍＬ、３６．９ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（４０−ｍＬ）中混合物を室温で４時間撹拌した。水およびＥｔＯＡｃを添加した。有機層を分離し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８５／１５）で精製した。純粋な画分をまとめ、溶媒を減圧下で濃縮し、ＣＨ_３ＣＮ／ヘプタンから結晶化させた後、２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、８ａ（４．３ｇ）を得た。

中間体８ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１９．７ｍＬ、１９．７ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、８ａ（３．８ｇ、９．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中混合物に滴加した。ＴＭＳＣｌ（１．５ｍＬ、１１．８ｍｍｏｌ）を滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．９ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３５ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、８ｂ（４．５ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体８ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、８ｂ（４．５ｇ、９．６８ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（２．７ｇ、９．６８ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（２ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、１２０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固し、ＣＨ_３ＣＮから結晶化させた後、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、８ｃ（２．３ｇ）を得た。

化合物８の合成、ならびにエナンチオマー８Ａおよび８Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、８ｃ（２．３ｇ、３．４６ｍｍｏｌ）をジオキサン（３０ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で１２時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ジイソプロピルエーテルで洗浄し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロ−２−メトキシフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物８）をＨＣｌ塩（１．７９ｇ、０．８６当量ＨＣｌ、０．２２当量Ｈ_２Ｏ）として得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：６５％ＣＯ_２、３５％ｉＰｒＯＨ）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（７２６ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー８Ａ（６１２ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（７１２ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー８Ｂ（６４３ｍｇ）を得た。

化合物８：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０８−３．２６（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８３（ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）３．９８−４．０９（ｍ，１Ｈ）４．３１−４．４２（ｍ，１Ｈ）５．６０（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．８７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，２Ｈ）６．９８−７．０５（ｍ，２Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．０２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ３．０４分、ＭＨ^＋６０９
融点：１３９℃

エナンチオマー８Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）３．０９−３．２５（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．７８−３．８７（ｍ，２Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）３．９８−４．０７（ｍ，１Ｈ）４．３２−４．４２（ｍ，１Ｈ）５．５９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．８６（ｓ，１Ｈ）５．８８（ｓ，１Ｈ）６．４５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）６．９７−７．０６（ｍ，２Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ）７．３１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．０２（ｓ，１Ｈ）１２．１４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ３．０３分、ＭＨ^＋６０９
［α］_Ｄ ^２０：−３９．３°（ｃ０．２８，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｆ）：Ｒ_ｔ２．３２分、ＭＨ^＋６０９、キラル純度１００％。

エナンチオマー８Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０９−３．２５（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．７９−３．８８（ｍ，２Ｈ）３．９０（ｓ，３Ｈ）４．０２（ｔｄ，Ｊ＝１０．２，６．９Ｈｚ，１Ｈ）４．３３−４．４１（ｍ，１Ｈ）５．６０（ｓ，１Ｈ）５．７６（ｓ，１Ｈ）５．８６（ｓ，１Ｈ）５．８８（ｓ，１Ｈ）６．４５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）６．９９−７．０５（ｍ，２Ｈ）７．１４（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）８．０２（ｓ，１Ｈ）１２．１２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ３．０３分、ＭＨ^＋６０９
［α］_Ｄ ^２０：＋３４．５°（ｃ０．２９，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｆ）：Ｒ_ｔ３．５１分、ＭＨ^＋６０９、キラル純度１００％。

実施例９：４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物９）の合成、ならびにエナンチオマー９Ａおよび９Ｂへのキラル分離。

中間体９ａの合成：
２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １９４２４０−７５−０］（２．５２ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）と、６−（トリフルオロメチル）インドリン［ＣＡＳ １８１５１３−２９−１］（２．５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）と、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．７ｇ、２０．０４ｍｍｏｌ）と、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（３．８４ｇ、２０．０４ｍｍｏｌ）と、トリメチルアミン（３．７１ｍＬ、２６．７ｍｍｏｌ）とのＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。水を添加し、層を分離した。有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させ、ＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから結晶化させた後、２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、９ａ（３．９ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体９ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１３．９８ｍＬ、１３．９８ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、９ａ（２．５ｇ、６．９９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中混合物に滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．３７ｇ、７．６９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、９ｂ（２．８ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体９ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、９ｂ（２．８ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（１．８ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．３３ｍＬ、７．７ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（９０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固し、ＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから結晶化させた後、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、９ｃ（１．７５ｇ）を得た。

化合物９の合成、ならびにエナンチオマー９Ａおよび９Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、９ｃ（１．７５ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）をジオキサン（２４．３ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから結晶化させて、４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物９）をＨＣｌ塩（１．４ｇ、０．８当量ＨＣｌ、０．７８当量Ｈ_２Ｏ）として得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＡＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：７０％ＣＯ_２、３０％ｉＰｒＯＨ）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（６１８ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー９Ａ（５０５ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（５４８ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー９Ｂ（４９５ｍｇ）を得た。

化合物９：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．３４（ｍ，２Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．９０（ｍ，２Ｈ）４．０２−４．１４（ｍ，１Ｈ）４．４０−４．４９（ｍ，１Ｈ）５．７２（ｓ，１Ｈ）５．８０（ｓ，１Ｈ）５．９４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ）７．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３９−７．４３（ｍ，１Ｈ）７．４３−７．５０（ｍ，３Ｈ）８．３６（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．９９分、ＭＨ^＋５８１
融点：１１０℃

エナンチオマー９Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）３．２２−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．９０（ｍ，２Ｈ）４．０３−４．１３（ｍ，１Ｈ）４．３９−４．４８（ｍ，１Ｈ）５．７２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．８０（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，２Ｈ）６．６０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．３３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３９−７．４３（ｍ，１Ｈ）７．４３−７．５１（ｍ，３Ｈ）８．３６（ｓ，１Ｈ）１２．１９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９８分、ＭＨ^＋５８１
［α］_Ｄ ^２０：−３０．０°（ｃ０．２９，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒ_ｔ１．９７分、ＭＨ^＋５８１、キラル純度１００％。

エナンチオマー９Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．２１−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．９１（ｍ，２Ｈ）４．０２−４．１２（ｍ，１Ｈ）４．４０−４．４９（ｍ，１Ｈ）５．７２（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）５．８０（ｓ，１Ｈ）５．９４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ）６．６０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ）７．３８−７．４３（ｍ，１Ｈ）７．４３−７．５０（ｍ，３Ｈ）８．３６（ｓ，１Ｈ）１１．０４−１２．９３（ｍ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９８分、ＭＨ^＋５８１
［α］_Ｄ ^２０：＋２７．９°（ｃ０．２８，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｇ）：Ｒ_ｔ３．１９分、ＭＨ^＋５８１、キラル純度９９．３５％。

実施例１０：４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１０）の合成、ならびにエナンチオマー１０Ａおよび１０Ｂへのキラル分離。

中間体１０ａの合成：
ＨＡＴＵ（７．０２ｇ、１８．４６ｍｍｏｌ）を６−（トリフルオロメトキシ）インドリン［ＣＡＳ ９５９２３５−９５−１］（２．５ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １９４２４０−７５−０］（２．３２ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（６．１ｍＬ、３６．９ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（１００ｍＬ）中混合物に添加した。得られた混合物を室温で１２時間撹拌した。混合物を水で希釈し、沈殿物を濾別し、水で洗浄した。残渣をＥｔＯＡｃで溶かし、この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をジイソプロピルエーテルから結晶化させて、２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１０ａ（４ｇ）を得た。

中間体１０ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（２１．４ｍＬ、２１．４ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１０ａ（４ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中混合物に滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２．１ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１０ｂ（４．８ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体１０ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１０ｂ（３ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（１．８６ｇ、６．６３ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．３７ｍＬ、７．９５ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（６０ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌ １Ｎおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、１２０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１０ｃ（８３５ｍｇ）を得た。

化合物１０の合成、ならびにエナンチオマー１０Ａおよび１０Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１０ｃ（８３５ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）をジオキサン（１１．３ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮した。残渣をジイソプロピルエーテルから凝固させて、４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−オキソ−２−（６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１０）（６２０ｍｇ）を得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＩＣ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：７０％ＣＯ_２、３０％ｉＰｒＯＨ（＋０．３％ｉＰｒＮＨ_２）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（２４９ｍｇ）をＥｔＯＡｃで溶かし、１Ｎ ＨＣｌで洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー１０Ａ（１８３ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（２７４ｍｇ）をＥｔＯＡｃで溶かし、１Ｎ ＨＣｌで洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー１０Ｂ（１８６ｍｇ）を得た。

化合物１０：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０９−３．２４（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．８１−３．８９（ｍ，２Ｈ）４．０５−４．１３（ｍ，１Ｈ）４．３８−４．４７（ｍ，１Ｈ）５．７０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）５．７９（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）６．６２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．３１−７．３７（ｍ，２Ｈ）７．４１−７．５０（ｍ，２Ｈ）８．０２（ｓ，１Ｈ）１２．１５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ３．０７分、ＭＨ^＋５９７

エナンチオマー１０Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１２−３．２２（ｍ，２Ｈ）３．６２（ｓ，３Ｈ）３．７９−３．９０（ｍ，２Ｈ）４．０４−４．１３（ｍ，１Ｈ）４．３８−４．４８（ｍ，１Ｈ）５．７０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７９（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ）６．６２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ）７．３０−７．３８（ｍ，２Ｈ）７．４１−７．５１（ｍ，２Ｈ）８．０２（ｓ，１Ｈ）１２．１０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ３．０４分、ＭＨ^＋５９７
［α］_Ｄ ^２０：＋２３．１°（ｃ０．２６，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｈ）：Ｒ_ｔ３．２２分、ＭＨ^＋５９７、キラル純度１００％。

エナンチオマー１０Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１２−３．２５（ｍ，２Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．８０−３．９０（ｍ，２Ｈ）４．０５−４．１４（ｍ，１Ｈ）４．３８−４．４９（ｍ，１Ｈ）５．７１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）５．８０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．９４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，２Ｈ）６．６２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．０３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）７．３０−７．３８（ｍ，２Ｈ）７．４１−７．５２（ｍ，２Ｈ）８．０２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）１２．１２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ３．０４分、ＭＨ^＋５９７
［α］_Ｄ ^２０：−２３．０°（ｃ０．３，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｈ）：Ｒ_ｔ４．０５分、ＭＨ^＋５９７、キラル純度１００％。

実施例１１：４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１１）の合成、ならびにエナンチオマー１１Ａおよび１１Ｂへのキラル分離。

中間体１１ａの合成：
ＨＡＴＵ（５．２５ｇ、１３．８１ｍｍｏｌ）を５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン、５ｃ（２ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １９４２４０−７５−０］（１．７４ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（４．５７ｍＬ、２７．６ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（５０ｍＬ）中混合物に添加した。得られた混合物を室温で１２時間撹拌した。混合物を氷／水で希釈した。沈殿物を濾別し、水で洗浄した。残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２で溶かし、この有機溶液をＫ_２ＣＯ_３の１０％水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をジイソプロピルエーテルから結晶化させて、２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、１１ａ（３．４ｇ）を得た。

中間体１１ｂの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（１７．５ｍＬ、１７．５ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、１１ａ（３．４ｇ、８．７７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５ｍＬ）中混合物に滴加した。ＴＭＳＣｌ（１．３４ｍＬ、１０．５ｍｍｏｌ）を滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．８７ｇ、１０．５２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、１１ｂ（４ｇ）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体１１ｃの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）エタノン、１１ｂ（４ｇ、８．５７ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（２．４ｇ、８．５７ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（１．７７ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。化合物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。化合物をアキラルＳＦＣ（固定相：２−エチルピリジン ５μｍ １５０×３０ｍｍ、移動相：８５％ＣＯ_２、１５％ＭｅＯＨ）でさらに精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１１ｃ（２．６ｇ）を得た。

化合物１１の合成、ならびにエナンチオマー１１Ａおよび１１Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１１ｃ（２．２ｇ、３．３ｍｍｏｌ）をジオキサン（２９．２ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で８時間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮した。残渣をＣＨ_３ＣＮ／ジイソプロピルエーテルから結晶化させて、４−（３−（（１−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメチル）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１１）をＨＣｌ塩（８００ｍｇ、０．８５当量ＨＣｌ、０．３６当量Ｈ_２Ｏ）として得た。この画分を別のバッチと合わせて（総量：１．８ｇ）キラル分離を行った。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）ＯＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×３０ｍｍ、移動相：５５％ＣＯ_２、４５％ｉＰｒＯＨ）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（７８８ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー１１Ａ（６９３ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（７７１ｍｇ）を石油エーテル／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー１１Ｂ（６９５ｍｇ）を得た。

化合物１１：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．３１（ｍ，２Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｓ，５Ｈ）３．９８−４．０９（ｍ，１Ｈ）４．３７−４．４８（ｍ，１Ｈ）５．６９（ｓ，１Ｈ）５．７９（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ）７．２６（ｓ，１Ｈ）７．３２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）７．４４−７．５２（ｍ，２Ｈ）８．３２（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．９０分、ＭＨ^＋６１１
融点：１２１℃

エナンチオマー１１Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．２９（ｍ，２Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．８６（ｓ，５Ｈ）３．９９−４．０７（ｍ，１Ｈ）４．３８−４．４７（ｍ，１Ｈ）５．６９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．７９（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，２Ｈ）６．５５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）７．２５（ｓ，１Ｈ）７．３２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．３Ｈｚ，１Ｈ）７．４３−７．５１（ｍ，２Ｈ）８．３３（ｓ，１Ｈ）１２．１３（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９０分、ＭＨ^＋６１１
［α］_Ｄ ^２０：−２３．９°（ｃ０．２６，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ１．７０分、ＭＨ^＋６１１、キラル純度１００％。

エナンチオマー１１Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８８（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．１８−３．３１（ｍ，２Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｓ，５Ｈ）３．９９−４．０７（ｍ，１Ｈ）４．３７−４．４７（ｍ，１Ｈ）５．６９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）５．７９（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ）６．５６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）７．２５（ｓ，１Ｈ）７．３２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）７．４３−７．５０（ｍ，２Ｈ）８．３３（ｓ，１Ｈ）１２．１３（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．８９分、ＭＨ^＋６１１
［α］_Ｄ ^２０：＋２４．０°（ｃ０．２５，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｃ）：Ｒ_ｔ２．９６分、ＭＨ^＋６１１、キラル純度１００％。

実施例１２：４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１２）の合成、ならびにエナンチオマー１２Ａおよび１２Ｂへのキラル分離。

中間体１２ａの合成：
４−メトキシ−３−（トリフルオロメトキシ）アニリン［ＣＡＳ ６４７８５５−２１−８］（３．１ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍＬ）溶液を５℃においてＮ−ブロモスクシンイミド（２．８ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を５〜１０℃で２時間撹拌した。混合物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。まとめた抽出物をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で蒸発させた。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、２４ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ９５／５から９０／１０への勾配）により精製を行った。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、２−ブロモ−４−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）アニリン１２ａ（２．５ｇ）を得た。

中間体１２ｂの合成：
２−ブロモ−４−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）アニリン１２ａ（２．７２ｇ、９．５１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液をＮ_２で１５分間脱気した。ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６６７ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（３６２ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３．９６ｍＬ、２８．５ｍｍｏｌ）およびトリメチルシリルアセチレン（３．９５ｍＬ、２８．５３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物をＮ_２流下において７０℃で１２時間加熱した。室温まで冷却してから、反応混合物をＨ_２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をまとめ、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８５／１５）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、４−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）−２−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリン１２ｂ（１．４ｇ）を得た。

中間体１２ｃの合成：
４−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）−２−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリン１２ｂ（１．２ｇ、３．９６ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（１１ｍＬ）溶液に、ｔＢｕＯＫ（１．３３ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）をＮ_２流下において一度に添加した。反応混合物を８０℃に４時間加熱し、室温まで冷却してから、混合物を氷／水に注ぎ入れ、３Ｎ ＨＣｌでｐＨ４〜５になるまで酸性化した。反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をまとめ、Ｈ_２Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、４０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８５／１５）で精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−インドール、１２ｃ（４９０ｍｇ）を得た。

中間体１２ｄの合成：
０℃において、ＢＨ_３−ピリジン（１０．５ｍＬ、１０３．８ｍｍｏｌ）を５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−インドール、１２ｃ（８ｇ、３４．６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４５ｍＬ）溶液に滴加した。温度を１０℃未満に維持しながら、６Ｎ ＨＣｌ（６ｍＬ）をゆっくりと添加した。この混合物を０℃で３時間撹拌した。水（２１０ｍＬ）を添加し、この混合物をｐＨ８〜９になるまでＮａＯＨの濃厚水溶液で塩基性化した（添加中、反応温度を２０℃未満に保持した）。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。トルエンを添加し、溶液を減圧下で濃縮して、７．５ｇの５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン、１２ｄを得た。

中間体１２ｅの合成：
５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン、１２ｄ（１ｇ、４．２９ｍｍｏｌ）と、２−（４−クロロフェニル）酢酸［ＣＡＳ １８７８−６６−６］（８０５ｍｇ、４．７２ｍｍｏｌ）と、ＨＡＴＵ（２．４４ｇ、６．４３ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（２．１３ｍＬ、１２．８７ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（２０ｍＬ）中混合物を室温で１２時間撹拌した。氷／水を添加し、沈殿物を濾別した。残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２で溶かした。この有機溶液を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１２ｅ（１．６８ｇ）を得た。

中間体１２ｆの合成：
−７８℃、Ｎ_２流下において、ＴＨＦ（８．３ｍＬ、８．３ｍｍｏｌ）中ＬｉＨＭＤＳ １Ｍを２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１２ｅ（１．６ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）中混合物に滴加した。ＴＭＳＣｌ（０．６３ｍＬ、４．９８ｍｍｏｌ）を滴加した。この混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．８９ｇ、４．９８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を滴加した。−７８℃で２時間撹拌してから、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液で反応を停止した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１２ｆ（２．３ｇ、純度（ＬＣによる）：５０％）を得た。この化合物を次の工程にそのまま使用した。

中間体１２ｇの合成：
２−ブロモ−２−（４−クロロフェニル）−１−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）エタノン、１２ｆ（２．３ｇ、２．４８ｍｍｏｌ、純度（ＬＣによる）：５０％）と、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−アミノ−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１ａ（０．６９６ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．５１２ｍＬ、２．９７ｍｍｏｌ）とのＣＨ_３ＣＮ（２５ｍＬ）中混合物を７０℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび水で洗浄した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、８０ｇ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０）で精製した。生成物を含有する画分をまとめ、減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ、４０ｇ、ＣＨ_２Ｃｌ_２）で再度精製した。純粋な画分をまとめ、蒸発乾固して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１２ｇ（９２０ｍｇ）を得た。

化合物１２の合成、ならびにエナンチオマー１２Ａおよび１２Ｂへのキラル分離：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタノエート、１２ｇ（９２０ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）をジオキサン（１５ｍＬ）中４Ｍ ＨＣｌに溶かした溶液を５℃で３時間および室温で１２時間撹拌した。沈殿物を濾別し、ジイソプロピルエーテルで洗浄し、乾燥して、４−（３−（（１−（４−クロロフェニル）−２−（５−メトキシ−６−（トリフルオロメトキシ）インドリン−１−イル）−２−オキソエチル）アミノ）−５−メトキシフェノキシ）ブタン酸（化合物１２、８０２ｍｇ、０．２当量Ｈ_２Ｏ）を得た。エナンチオマーを分取キラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＡＤ−Ｈ ５μｍ ２５０×２０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ_２、５０％ｉＰｒＯＨ）により分離した。生成物画分をまとめ、減圧下で蒸発させた。第１の溶出エナンチオマー（２６０ｍｇ）をヘプタン／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー１２Ａ（１６５ｍｇ）を得た。第２の溶出エナンチオマー（２４１ｍｇ）をヘプタン／ジイソプロピルエーテルから凝固させて、エナンチオマー１２Ｂ（１８４ｍｇ）を得た。

化合物１２：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０８−３．２８（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８１（ｓ，３Ｈ）３．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）３．９７−４．０６（ｍ，１Ｈ）４．４８（ｔｄ，Ｊ＝１０．４，６．３Ｈｚ，１Ｈ）５．５３（ｓ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．９４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ）７．２０（ｓ，１Ｈ）７．４３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）７．５４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）８．０６（ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒｔ２．８９分、ＭＨ^＋６０９

エナンチオマー１２Ａ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０９−３．２６（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８１（ｓ，３Ｈ）３．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）４．０２（ｔｄ，Ｊ＝１０．３，７．１Ｈｚ，１Ｈ）４．４８（ｔｄ，Ｊ＝１０．４，６．３Ｈｚ，１Ｈ）５．５３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｓ，１Ｈ）６．４３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．２０（ｓ，１Ｈ）７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）７．５５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）８．０６（ｓ，１Ｈ）１２．１２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９２分、ＭＨ^＋６０９
［α］_Ｄ ^２０：−４４．２°（ｃ０．１９７，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｉ）：Ｒ_ｔ０．９９分、ＭＨ^＋６０９、キラル純度１００％。

エナンチオマー１２Ｂ：
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １．８６（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）２．３３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）３．０９−３．２７（ｍ，２Ｈ）３．６１（ｓ，３Ｈ）３．８１（ｓ，３Ｈ）３．８４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）３．９８−４．０６（ｍ，１Ｈ）４．４８（ｔｄ，Ｊ＝１０．５，６．１Ｈｚ，１Ｈ）５．５３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）５．７５（ｓ，１Ｈ）５．９３（ｓ，１Ｈ）５．９５（ｓ，１Ｈ）６．４３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）７．２０（ｓ，１Ｈ）７．４３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）７．５４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）８．０６（ｓ，１Ｈ）１２．１６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）
ＬＣ／ＭＳ（方法ＬＣ−Ａ）：Ｒ_ｔ２．９１分、ＭＨ^＋６０９
［α］_Ｄ ^２０：＋４０．７°（ｃ０．１８９，ＤＭＦ）
キラルＳＦＣ（方法ＳＦＣ−Ｉ）：Ｒ_ｔ１．４５分、ＭＨ^＋６０９、キラル純度９８．５３％。

本発明の化合物の抗ウイルス活性
ＤＥＮＶ−２抗ウイルスアッセイ
本発明のすべての化合物について、高感度緑色蛍光タンパク質（ｅＧＰＦ）で標識したＤＥＮＶ−２ １６６８１株に対する抗ウイルス活性を試験した。培養培地は、２％の熱失活ウシ胎仔血清、０．０４％のゲンタマイシン（５０ｍｇ／ｍＬ）および２ｍＭのＬ−グルタミンを添加した最小必須培地からなる。ＥＣＡＣＣから得たベロ細胞を培養培地に懸濁し、２５μＬを、既に抗ウイルス化合物を含有している３８４ウェルプレートに添加した（２５００細胞／ウェル）。通常、これらのプレートは、９回の希釈工程で５倍に段階希釈した、１００％ＤＭＳＯ中の最終濃度の２００倍の試験化合物を含有する（２００ｎＬ）。さらに、各化合物濃度について４回試験する（最終濃度範囲：最も活性な化合物について２５μＭ〜０．００００６４μＭまたは２．５μＭ〜０．０００００６４μＭ）。最終的に、各プレートは、ウイルス対照（細胞およびウイルスを含有、化合物を不含）、細胞対照（細胞を含有、ウイルスおよび化合物を不含）および培地対照（培地を含有、細胞、ウイルスおよび化合物を不含）として割り当てられたウェルを含有する。培地対照として割り当てられたウェルには、ベロ細胞ではなく培養培地２５μＬを添加した。細胞をプレートに添加してから、プレートを室温で３０分間インキュベートして、細胞をウェル内に均一に分布させた。次に、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ_２）内で翌日までインキュベートした。次いで、ｅＧＦＰで標識したＤＥＮＶ−２株１６６８１を感染多重度（ＭＯＩ）０．５で添加した。したがって、１５μＬのウイルス懸濁液を、試験化合物を含有するすべてのウェルと、ウイルス対照として割り当てられたウェルとに添加した。並行して、１５μＬの培養培地を培地対照および細胞対照に添加した。次に、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ_２）内で３日間インキュベートした。読み出し日に自動蛍光顕微鏡を４８８ｎｍ（青レーザー）で使用して、ｅＧＦＰ蛍光を測定した。社内ＬＩＭＳシステムを使用して、各化合物の阻害用量反応曲線を計算し、半数効果濃度（ＥＣ_５０）を決定した。したがって、試験濃度毎のパーセント阻害（Ｉ）を、以下の式を使用して計算する。Ｉ＝１００×（Ｓ_Ｔ−Ｓ_ＣＣ）／（Ｓ_ＶＣ−Ｓ_ＣＣ）；Ｓ_Ｔ、Ｓ_ＣＣおよびＳ_ＶＣは、それぞれ試験化合物、細胞対照およびウイルス対照の各ウェル中のｅＧＦＰシグナル量である。ＥＣ_５０は、ウイルスの複製が５０％阻害される化合物の濃度を表し、これは、ｅＧＦＰ蛍光強度がウイルス対照と比較して５０％低下したことによって測定される。ＥＣ_５０は、線形補間を使用して計算される（表１）。

並行して、化合物の毒性を同じ各プレートで評価した。ｅＧＦＰシグナルの読み出しが終わった時点で、生存細胞染色剤ＡＴＰｌｉｔｅ ４０μＬを３８４ウェルプレートの全ウェルに添加した。ＡＴＰは、代謝活性のあるすべての細胞に存在し、その濃度は、細胞がネクローシスまたはアポトーシスを起こしたときにきわめて急速に減少する。ＡＴＰＬｉｔｅアッセイシステムは、添加されたルシフェラーゼおよびＤ−ルシフェリンとＡＴＰとの反応に起因する光の発生に基づいている。プレートを室温で１０分間インキュベートした。次に、プレートをＶｉｅｗＬｕｘで測定した。半数細胞毒性濃度（ＣＣ_５０）も決定した。これは、蛍光シグナルを細胞対照ウェルと比較して５０％低下させるのに必要な濃度と定義される。最後に、化合物の選択指数（ＳＩ）を次のように計算して求めた：ＳＩ＝ＣＣ_５０／ＥＣ_５０。

四価逆転写酵素定量ＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）アッセイ
本発明の化合物について、ＤＥＮＶ−１株ＴＣ９７４♯６６６（ＮＣＰＶ）、ＤＥＮＶ−２株１６６８１、ＤＥＮＶ−３株Ｈ８７（ＮＣＰＶ）およびＤＥＮＶ−４株Ｈ２４１（ＮＣＰＶ）に対する抗ウイルス活性をＲＴ−ｑＰＣＲアッセイで試験した。したがって、試験化合物の存在下または非存在下でベロ細胞にＤＥＮＶ−１、ＤＥＮＶ−２、ＤＥＮＶ−３またはＤＥＮＶ−４を感染させた。感染３日後、細胞を溶解し、細胞溶解物をウイルスの標的（ＤＥＮＶの３’ＵＴＲ；表２）および細胞の参照遺伝子（β−アクチン、表２）の両方のｃＤＮＡの調製に使用した。その後、デュプレックスリアルタイムＰＣＲをＬｉｇｈｔｃｙｃｌｅｒ４８０インスツルメントで行った。生成されたＣｐ値は、これらの標的のＲＮＡ発現量に反比例する。試験化合物によりＤＥＮＶ複製が阻害されると、３’ＵＴＲ遺伝子のＣｐ値がシフトする。他方、試験化合物が細胞に毒性である場合、β−アクチン発現に同様の影響が観察されるであろう。比較ΔΔＣｐ法を使用してＥＣ_５０を計算し、これは、細胞のハウスキーピング遺伝子（β−アクチン）で正規化した標的遺伝子（３’ＵＴＲ）の相対的遺伝子発現に基づいている。さらに、ＣＣ_５０値を、ハウスキーピング遺伝子β−アクチンについて取得したＣ_ｐ値に基づいて決定する。

培養培地は、２％の熱失活ウシ胎仔血清、０．０４％のゲンタマイシン（５０ｍｇ／ｍＬ）および２ｍＭのＬ−グルタミンを添加した最小必須培地からなるものとした。ＥＣＡＣＣから得たベロ細胞を培養培地に懸濁し、７５μＬ／ウェルを、既に抗ウイルス化合物を含有している９６ウェルプレートに添加した（１００００細胞／ウェル）。通常、これらのプレートは、９回の希釈工程で５倍に段階希釈した、１００％ＤＭＳＯ中の最終濃度の２００倍の試験化合物を含有する（５００ｎＬ；最終濃度範囲：最も活性な化合物について２５μＭ〜０．００００６４μＭまたは２．５μＭ〜０．０００００６４μＭ）。さらに、各プレートは、ウイルス対照（細胞およびウイルスを含有、化合物を不含）および細胞対照（細胞を含有、ウイルスおよび化合物を不含）として割り当てられたウェルを含有する。細胞をプレートに添加してから、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ_２）内で翌日までインキュベートした。アッセイで約２２〜２４のＣｐ値を得るために、デングウイルス血清型の１型、２型、３型および４型を希釈した。したがって、２５μＬのウイルス懸濁液を、試験化合物を含有するすべてのウェルと、ウイルス対照として割り当てられたウェルとに添加した。並行して、２５μＬの培養培地を細胞対照に添加した。次に、プレートを、十分に加湿したインキュベータ（３７℃、５％ＣＯ_２）内で３日間インキュベートした。３日後、上清をウェルから除去し、細胞を氷冷ＰＢＳ（約１００μＬ）で２回洗浄した。９６ウェルプレート内の細胞ペレットを−８０℃で少なくとも１日保管した。次に、Ｃｅｌｌｓ−ｔｏ−ＣＴ（商標）溶解キットを使用して、製造会社のガイドライン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に従ってＲＮＡを抽出した。細胞溶解物は−８０℃で保管することも、逆転写工程に直ちに使用することもできる。

逆転写工程の準備として、ミックスＡ（表３Ａ）を調製し、９６ウェルプレートに７．５７μＬ／ウェルで分注した。細胞溶解物５μＬを添加した後、７５℃で５分間の変性工程を行った（表３Ｂ）。その後、ミックスＢを７．４３μＬ添加し（表３Ｃ）、逆転写工程を開始して（表３Ｄ）、ｃＤＮＡを生成した。

最後に、ＲＴ−ｑＰＣＲミックスであるミックスＣ（表４Ａ）を調製し、９６ウェルＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ｑＰＣＲプレートに２２．０２μＬ／ウェルで分注し、それに３μＬのｃＤＮＡを添加し、表４Ｂの条件に従ってＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ４８０でｑＰＣＲを行った。

ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒソフトウェアおよび社内ＬＩＭＳシステムを使用して、各化合物の用量反応曲線を計算し、半数効果濃度（ＥＣ_５０）および半数細胞毒性濃度（ＣＣ_５０）を決定した（表５〜８）。

従来技術の例
国際公開第２０１３／０４５５１６号パンフレットに開示されている化合物（５６）および（１７０）は、本発明の化合物と類似のＤＥＮＶ−２抗ウイルスアッセイで試験されており、報告されたそれらの活性を以下に示す。

Claims (14)

1. 式（Ｉ）
   

   

   
   を有する化合物、その立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体であって、前記化合物は、
   

   

   
   

   

   
   を含む群から選択される、化合物、その立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体。
2. 請求項１に記載の化合物またはその立体異性体型、その薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体を、１種以上の薬学的に許容される添加剤、希釈剤または担体とともに含む医薬組成物。
3. 医薬として使用するための、請求項１に記載の化合物またはその立体異性体型、その薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体あるいは請求項２に記載の医薬組成物。
4. デング熱の治療に使用するための、請求項１に記載の化合物またはその立体異性体型、その薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体あるいは請求項２に記載の医薬組成物。
5. 生体試料または患者におけるデングウイルスの複製を阻害するための、一置換または二置換インドール基を含む、請求項１に記載の構造式のいずれかによって表される化合物、その立体異性体型、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体の使用。
6. 追加の治療剤を併用投与する工程をさらに含む、請求項５に記載の化合物の使用。
7. 前記追加の治療剤は、抗ウイルス剤もしくはデング熱ワクチンまたはその両方から選択される、請求項６に記載の使用。
8. 

   
   である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体。
9. 請求項８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体を、１種以上の薬学的に許容される添加剤、希釈剤または担体とともに含む医薬組成物。
10. 医薬として使用するための、請求項８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体または請求項９に記載の医薬組成物。
11. デング熱の治療に使用するための、請求項８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体または請求項９に記載の医薬組成物。
12. 生体試料または患者におけるデングウイルスの複製を阻害するための、一置換または二置換インドール基を含む、請求項８に記載の構造式のいずれかによって表される化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体の使用。
13. 追加の治療剤を併用投与する工程をさらに含む、請求項１２に記載の使用。
14. 前記追加の治療剤は、抗ウイルス剤もしくはデング熱ワクチンまたはその両方から選択される、請求項１３に記載の使用。