JP2019503187A5 - - Google Patents

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好適には、突然変異体である植物体またはその一部は、(ii)または(iii)に記載されたポリヌクレオチド配列の各々の制御領域において、またはコード配列において、少なくとも一つの遺伝子改変を含み、好適には、突然変異にはミスセンス突然変異またはナンセンス突然変異が備わる。好適には、突然変異体である植物体またはその一部は、以下の突然変異:配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置251〜296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置251または293または296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置223〜265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異であり、好適には、そこで、該植物体は、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置223または234または235または265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含み;配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドの第三ループP/Nドメインのアミノ酸位置402〜464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異である。該突然変異体である植物体またはその一部が、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドの第三ループP/Nドメインのアミノ酸位置402または464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含み;配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置438に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置265での少なくとも一つの突然変異;配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインの第三細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインの第三細胞質ループのアミノ酸位置464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列のAドメインの第二細胞質ループのアミノ酸位置296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号3に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループのアミノ酸位置402に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号3に記載された非突然変異配列のAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列のAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置251に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号3に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのP/Nドメイン第二細胞質ループの第三細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号3に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループのアミノ酸位置438に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置251〜296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置251または293または296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変;異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置223〜265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異であり、好適には、そこで、該植物体は、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのアミノ酸位置223または234または235または265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含み;配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドの第三ループP/Nドメインのアミノ酸位置402〜464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列に
よってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドの第三ループP/Nドメインのアミノ酸位置402または464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、;および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置438に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループにおけるアミノ酸位置265に対応する少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインの第三細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインの第三細胞質ループのアミノ酸位置464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列のAドメインの第二細胞質ループのアミノ酸位置296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループのアミノ酸位置402に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;配列番号4に記載された非突然変異配列のAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列のAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置251に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;ならびに、配列番号4に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループの第二細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループのP/Nドメイン第二細胞質ループの第三細胞質ループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異;好適には、配列番号4に記載された非突然変異配列のP/Nドメインの第三細胞質ループのアミノ酸位置438に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3に記載された非突然変異配列によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインループの第二細胞質ループのアミノ酸位置265、223、234、または235に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、のうちの一つ以上を含む。
好適には、突然変異体である植物体またはその一部は、以下の突然変異のうちの一つ以上を含む:配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびL223Fであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびD234Nであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびG235Eであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびW265**であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびL223Fであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびD234Nであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびG235Eであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびL223Fであり;配列番号1のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびD234Nであり、*は終止コドンを表し;または、配列番号1のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびG235Eであり;配列番号1のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびL223Fであり;配列番号1のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびD234Nであり;配列番号1のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびG235Eであり;配列番号1のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;または、配列番号1のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびL223Fであり;配列番号1のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびD234Nであり;配列番号1のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびG235Eであり;配列番号1のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびL223Fであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびD234Nであり、*は終止コドンを表し;配列番号1のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびG235Eであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびL223F であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびD234Nであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびG235Eであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびW265**であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびL223Fであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびD234Nであり、*は
終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびG235Eであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびL223Fであり;配列番号2のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびD234Nであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびG235Eであり;配列番号2のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびL223Fであり;配列番号2のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびD234Nであり;配列番号2のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびG235Eであり;配列番号2のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびW265*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびL223Fであり;配列番号2のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびD234Nであり;配列番号2のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびG235Eであり;配列番号2のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびL223Fであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびD234Nであり、*は終止コドンを表し;配列番号2のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号1のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびG235Eであり、*は終止コドンである。
さらなる態様では、本明細書に記載されるように、突然変異体である植物体またはその一部由来の植物材料が開示されており、好適には、該植物材料は乾燥処理(キュアリング処理)された植物材料または乾燥済み植物材料であり、好適には、収穫時の該突然変異体である植物体またはその一部の表現型が、同一収穫時の対照植物体と同じであり、好適には、該突然変異体である植物体またはその一部が、収穫時に、同一収穫時の対照植物体に比べてバイオマス(例えば、葉重量)の減少を示さない。
好適には、HMA4ポリペプチド変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含みうる。
好適には、HMA4ポリペプチド変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含みうる。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置251〜296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置251〜296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置251または293または296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置251または293または296に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、植物体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、植物体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置223〜265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置223〜265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドAドメインのNドメインのアミノ酸位置223、または234、または235、または265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインのアミノ酸位置293に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドAドメインのNドメインのアミノ酸位置223、または234、または235、または265に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置402〜464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループのアミノ酸位置402〜464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドの第三ループPドメインのアミノ酸位置402または464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドの第三ループPドメインのアミノ酸位置402または464に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインのアミノ酸位置561に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのP/Nドメインループにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置に対応する位置での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号3によってコードされるP/Nドメインループのアミノ酸位置438に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号4によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置265での少なくとも一つの突然変異を含む。
さらに好適には、変異体は、配列番号4によってコードされるP/Nドメインループのアミノ酸位置438に対応する位置での少なくとも一つの突然変異、および配列番号3によってコードされるHMAポリペプチドのAドメインにおけるアミノ酸位置265での少なくとも一つの突然変異を含む。
好適には、変異体は、以下からなる群から選択される突然変異のうちの一つ以上を含む:(i)配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびQ561*であり、*は終止コドンを表し;(ii)配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびW265*であり、*は終止コドンを表し;(iii)配列番号1のアミノ酸位置296に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はE296KおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;(iv)配列番号1のアミノ酸位置402に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はT402IおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;(v)配列番号1のアミノ酸位置251に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はG251DおよびQ561*であり、*は終止コドンを表し;(vi)配列番号1のアミノ酸位置464に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2のアミノ酸位置561に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ464*およびQ561*であり、*は終止コドンを表し;(vii)配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置223に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびL223Fであり、*は終止コドンを表し;(viii)配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置234に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびD234Nであり、*は終止コドンを表し;(ix)配列番号1のアミノ酸位置293に対応する位置でのナンセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置235に対応する位置でのミスセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はQ293*およびG235Eであり、*は終止コドンを表し;または、(x)配列番号1のアミノ酸位置438に対応する位置でのミスセンス突然変異、および配列番号2に記載された非突然変異配列のアミノ酸位置265に対応する位置でのナンセンス突然変異、好適には、そこで、該突然変異はH438YおよびW265*であり、*は終止コドンを表す。
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