JP2017520249A5 - - Google Patents

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Claims (21)

  1. 突然変異、非天然、または遺伝子組えの植物体細胞であって、
    (i)クロライドチャネルのCLCファミリーの一員をコードする配列を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、配列番号4に対して少なくとも60%の配列同一性を持つポリヌクレオチド、
    (ii)(i)に記載した前記ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド、 (iii)前記クロライドチャネルのCLCファミリーの一員をコードする配列を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、配列番号13に対して少なくとも60%の配列同一性を持つポリペプチド、または
    (iv)(i)に記載した前記単離ポリヌクレオチドを含む構築物、ベクターまたは発現ベクターを含み、
    前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドの前記発現または活性が対照植物体細胞を含む対照植物体と比較して調節され、記突然変異、非天然または遺伝子組えの植物体細胞が、突然変異の、非天然の、または遺伝子組換えの植物体細胞を含む前記突然変異の、非天然の、または遺伝子組換えの植物体中の前記バイオマスレベル、前記対照植物体細胞を含む前記対照植物体と比較して増大する一つ以上の突然変異を含み、また前記突然変異(複数可)が配列番号13の位置P184での欠失、挿入、置換、またはミスセンス突然変異を含む、植物体細胞。
  2. 前記突然変異が置換型突然変異である、請求項に記載の突然変異植物体細胞。
  3. 前記置換型突然変異が、配列番号15に示されるP184Sである、請求項に記載の突然変異植物体細胞。
  4. 前記突然変異が異型接合である、請求項1〜のいずれか一項に記載の突然変異植物体細胞。
  5. 前記突然変異が同型接合である、請求項1〜のいずれか一項に記載の突然変異植物体細胞。
  6. 請求項1〜のいずれか一項に記載の植物体細胞を含む、突然変異、非天然、もしくは 遺伝子組えの植物体またはその部分
  7. さらに前記硝酸塩含有量が調節される、請求項1〜のいずれか一項に記載の突然変異、非天然、もしくは遺伝子組えの植物体、植物体の部分、または植物体細胞。
  8. さらに、前記4−(メチルニトロソアミノ)−1−(3−ピリジル)−1−ブタノン(NNK)含有量が調節される、請求項1〜のいずれか一項に記載の突然変異、非天然、もしくは遺伝子組えの植物体、植物体の部分、または植物体細胞。
  9. 前記突然変異(複数可)が列番号13の位置P143での欠失、挿入、置換またはミスセンス突然変異をさらに含む、請求項またはに記載の突然変異、非天然、もしくは遺伝子組えの植物体、植物体の部分、または植物体細胞。
  10. 列番号13の位置P143での前記突然変異が置換型突然変異P143Lである、請求項に記載の突然変異、非天然、もしくは遺伝子組えの植物体、植物体の部分、または植物体細胞。
  11. 植物体またはその部分の少なくともバイオマスの含有量を調節するための方法であって、
    (a)以下の発現または活性を調節する工程、すなわち、
    (i)クロライドチャネルのCLCファミリーの一員をコードする配列を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、配列番号4に対して少なくとも60%の配列同一性を持つポリヌクレオチド、
    (ii)(i)に記載した前記ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド、または
    (iii)前記クロライドチャネルのCLCファミリーの一員をコードする配列を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、配列番号13に対して少なくとも60%の配列同一性を持つポリペプチド、の発現または活性を調節する工程であって
    前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドの前記発現または活性が、対照植物体細胞を含む対照植物体と比較して調節され、前記突然変異の、非天然の、または遺伝子組換えの植物体細胞が、前記突然変異の、非天然の、または遺伝子組換えの植物体細胞を含む、前記突然変異の、非天然の、または遺伝子組換えの植物体中の前記バイオマスのレベルを、前記対照植物体細胞を含む前記対照体植物と比較して増大する一つ以上の突然変異を含み、また前記突然変異(複数可)が配列番号13の位置P184での欠失、挿入、置換、またはミスセンス突然変異を含む工程と、
    (b)随意に、工程(a)で入手した前記突然変異、非天然、または遺伝子組えの植物体の少なくとも一部中の少なくとも前記硝酸塩の含有量を測定する工程と、
    (c)(a)に記載した前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドの発現または活性が調節されていない対照植物体と比較して、少なくとも前記バイオマスが変化した、突然変異、非天然または遺伝子組えの植物体を特定する工程とを含む、方法。
  12. さらに前記植物体中の酸塩含有量が調節される、請求項11に記載の方法。
  13. さらに前記4−(メチルニトロソアミノ)−1−(3−ピリジル)−1−ブタノン(NNK)含有量が前記植物体中で調節される、請求項11または12に記載の方法。
  14. さらに前記ニコチン含有量が前記植物体中で調節される、請求項1113のいずれか一項に記載の方法。
  15. 少なくとも前記N−ニトロソニコチン(NNN)含有量が前記対照植物体と実質的に同一である、請求項1114のいずれか一項に記載の方法。
  16. 前記植物体の部分が葉であり、適切には乾燥処理済みの葉である、請求項1115のいずれか一項に記載の方法。
  17. 請求項1116のいずれか一項に記載の方法によって入手されるかまたは入手可能な、植物体またはその部分
  18. 請求項または17のいずれか一項に記載の植物体に由来するバイオマス、種子、幹または葉を含む、植物材料。
  19. 請求項1に記載の植物体細胞、請求項もしくは17のいずれか一項に記載の植物体の少なくとも一部、または請求項18に記載の植物材料、または請求項18に記載の適切に処理された植物材料を含む、たばこ製品。
  20. 前記クロライドチャネルのCLCファミリーの一員配列を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、配列番号15に対して少なくとも60%の配列同一性を持つポリペプチド
  21. 配列番号15CLC遺伝子中に適切な同型接合突然変異を含む植物体またはその部分。
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