JP2019081718A - ヒアルロン酸合成酵素発現促進剤 - Google Patents
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Abstract
Description
皮膚ヒアルロン酸の半減期は0.5〜1.5日と短く、ヒアルロン酸合成酵素であるHAS(Hyaluronan Synthase)と分解酵素(ヒアルロニダーゼ)により、ホメオスタシスが維持されている。このヒアルロン酸合成酵素(HAS)には、3種のアイソザイム(HAS1、HAS2、HAS3)の存在が知られているが表皮組織においてはHAS3が高く寄与していることが報告されており、表皮をターゲットとしたヒアルロン酸の産生促進にはHAS3の発現上昇が重要である。
本発明は、油溶性アスコルビン酸誘導体を有効成分として含有するヒアルロン酸合成酵素(HAS3)発現促進剤である。
本発明のアスコルビン酸誘導体としては、ジパルミチン酸アスコルビル、トリパルミチン酸アスコルビル、テトラヘキシルデカン酸アスコルビル等が挙げられる。このうち、特に好ましくは、テトラヘキシルデカン酸アスコルビルである。市販品としては、NIKKOL CP(ジパルミチン酸アスコルビル、日光ケミカルズ社製)やNIKKOL VC−IP(テトラヘキシルデカン酸アスコルビル、日光ケミカルズ社製)等があり、これを用いることもできるし、特開平6−247956号公報に記載の方法等で合成した物を用いることもできる。また、本発明の油溶性アスコルビン酸誘導体は、1種又は2種以上を組み合わせて使用することができる。
これらの油溶性アスコルビン酸誘導体は、アスコルビン酸及び水溶性のアスコルビン酸誘導体に比べ、優れたヒアルロン酸合成酵素(HAS3)のmRNA発現促進作用を有し、これにより表皮ヒアルロン酸の合成を促進し、皮膚の保湿機能の改善やしわの改善に対して有用である。
1、試験の概要
アスコルビン酸およびその誘導体の表皮ヒアルロン酸合成酵素であるHAS3のmRNA発現に対する作用を確認した。
正常ヒト表皮細胞におけるmRNAの発現量変化をRealtime RT‐PCR法によって評価した。コントロールのハウスキーピング遺伝子としてTaqMan(r) Endogeneous Controls(Applied Biosystems)のCyclophillin A(PPIA)を用いた。
正常ヒト表皮細胞は、HuMedia KG2(Kurabo)を用いて96穴プレートに15,000cellsの細胞密度にて播種した。播種24時間後、所定の濃度の試料を含有したHuMedia KB2(Kurabo)と交換し、6時間培養した。細胞はPBS(−)にて洗浄したのち、TaqMan(r) Gene Expression Cells‐to‐CTTM Kit(Ambion)のプロトコールに従いcDNAを作成した。このcDNAを鋳型として、TaqMan(r) Fast Univ. Gene Expression Master Mix(Applied Biosystems)およびTaqMan(r) Gene Expression Assays(プライマー、Applied Biosystems)を用いてRealtime RT‐PCRを実施した。Realtime RT−PCRは、StepOnePlusTM Real Time PCR System(Applied Biosystems)を用いた。
解析は、ΔΔCT法を用いて実施し、試料無添加条件での補正値を1とした発現比で表した。それぞれの遺伝子発現量はStudent t検定を用いて有意差検定を行い、コントロールとの差を評価した。
比較品1:アスコルビン酸ナトリウム(L(+)‐アスコルビン酸ナトリウム、和光純薬工業社製)
比較品2:アスコルビン酸グルコシド(AA2G、林原社製)
比較品3:アスコルビン酸リン酸マグネシウム(NIKKOL VCPMg、日光ケミカルズ社製)
発明品1:テトラヘキシルデカン酸アスコルビル(NIKKOL VC‐IP、日光ケミカルズ社製)
結果を表1に示した。試料無添加時と比較して、いずれのアスコルビン酸およびその誘導体にも、表皮ヒアルロン酸合成酵素(HAS3)のmRNA発現の増加が認められたが、アスコルビン酸およびその誘導体のなかでも、特に油溶性のテトラヘキシルデカン酸アスコルビルに同モル濃度の他の試験試料と比較して、非常に優れたHAS3発現促進作用が確認された。
Claims (2)
- 油溶性アスコルビン酸誘導体を有効成分とするヒアルロン酸合成酵素(HAS3)発現促進剤。
- 油溶性アスコルビン酸誘導体が、ジパルミチン酸アスコルビル、トリパルミチン酸アスコルビル、テトラヘキシルデカン酸アスコルビルから選ばれる1種または2種以上であることを特徴とする請求項1に記載のヒアルロン酸合成酵素(HAS3)発現促進剤。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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