JP2019030222A - 培養容器 - Google Patents

Abstract

【課題】培養容器において、機械的な作用による培養面の破損等の発生を抑制すること。
【解決手段】容器本体３は主面３ａ１と溝３ａ２と凸部３ｃ１と凸部３ｃ２とを備え、溝３ａ２は主面３ａ１に設けられ、凸部３ｃ１は、溝３ａ２に設けられ、主面３ａ１の上に突出し、主面３ａ１における溝３ａ２の開口３ａ２１の縁３ａ２２に設けられ、縁３ａ２２に沿って延びており、主面３ａ１の上から見て開口３ａ２１を囲んでおり、凸部３ｃ２は、主面３ａ１に設けられ、主面３ａ１の縁３ａ１１と開口３ａ２１との間に配置され、フィルム５は、主面３ａ１の上に配置され、開口３ａ２１と凸部３ｃ２とを覆い、凸部３ｃ１の端面３ｃ１１と凸部３ｃ２の端面３ｃ２１とに接合され、開口３ａ２１は、主面３ａ１の上の空間に対し凸部３ｃ１とフィルム５との接合によって気密に封止されている。
【選択図】図１

Description

本発明の実施形態は、細胞を培養するために用いる培養容器に関するものである。

近年、再生医療に対する研究開発が進められている。再生医療では、組織や臓器が細胞培養によって人工的に造られる。細胞の培養には、細胞培養施設が用いられる。この細胞培養施設は、例えばGMP（Good Manufacturing Practice）等の予め設定された基準を充足する。そして、人工多能性幹細胞（iPS細胞）や胚性幹細胞（ES細胞）等を培養する場合、ディッシュ、フラスコ等の開放系の培養容器が用いられ、人の手を介して行われるピペッティングによって当該培養容器内に細胞懸濁液や培地等の液体が導入され、このピペッティングによって当該培養容器内から液体や細胞が回収される。このような開放系の培養容器では、開蓋時に培養容器内の空間が外気と通じるので、細菌・ウィルス等の外界からのコンタミネーションの問題がある。開放系の培養容器についての上記問題点を補うものとして、閉鎖系の培養容器が知られている（例えば特許文献１）。

特許文献１に開示された培養容器は、単一の培養容器のみでリンパ球の活性化および増殖を効率的に行うことを目的としたものとなっている。この培養容器は、リンパ球を培養するための培養容器であり、例えば１００［μｍ］程度の厚みのポリエチレンのガス透過性フィルムからなり、対向する培養容器内面の片方の面のみに抗体が固相化されて固相化面と非固相化面とが備えられ、固相化面において、抗体が固相化されている。この培養容器にリンパ球および培養液を封入し、培養容器における固相化面が底面になるように培養容器を配置してリンパ球を活性化させ、次いで培養容器を反転し、培養容器における非固相化面が底面になるように培養容器を配置してリンパ球を増幅させる。

特開２０１５−１１６１５２号公報

特許文献１で用いられる培養容器は、ポリエチレンから成り１００［μｍ］程度の厚みのフィルムによって構成されている。細胞は、当該培養容器内に封入され、当該培養容器の内面（培養面）で培養される。当該培養容器を用いた細胞の培養中には、当該培養容器自体が載置台の表面に直接に接触する。しかし、当該培養容器の厚みが比較的に薄いので、このような場合に当該培養容器には、この載置台との接触等の機械的な作用によって、破損等が容易に生じる可能性がある。したがって、培養容器において、機械的な作用による培養面の破損等の発生を抑制することが必要となっている。

一態様においては培養容器が提供される。
この培養容器は、容器本体とフィルムとを備える。容器本体は、主面と溝と第１の凸部と第２の凸部とを備える。主面は、平坦である。溝は、主面に設けられている。第１の凸部は、主面に設けられており、主面の上に突出しており、主面における溝の開口の第１の縁に設けられており、第１の縁に沿って延びており、主面の上から見て開口を囲んでいる。第２の凸部は、主面に設けられており、主面の第２の縁と開口との間に配置されている。フィルムは、主面の上に配置されており、開口と第２の凸部とを覆い、第１の凸部の第１の端面と第２の凸部の第２の端面とに接合されている。開口は、主面の上の空間に対し第１の凸部とフィルムとの接合によって気密に封止されている。従って、フィルムが容器本体から剥がされる向きに機械的な作用がフィルムに加えられる場合であっても、当該作用がフィルムと溝の開口の第１の縁に設けられた第１の凸部の第１の端面との接合に加えられる前に、フィルムと第２の凸部の第２の端面との接合に加えられることとなるので、フィルムと溝の開口の第１の縁に設けられた第１の凸部の第１の端面との接合が、フィルムと第２の凸部の第２の端面との接合によって保護される。

一実施形態において、容器本体は、第３の凸部を更に備え、第３の凸部は、主面に設けられており、主面の上から見て第２の縁からフィルムの第３の縁までの間に配置されており、主面に対する第３の凸部の高さは、フィルムの厚みと主面に対する第１の凸部の高さとの合計よりも高く、且つ、フィルムの厚みと主面に対する第２の凸部の高さとの合計よりも高い。従って、主面を鉛直方向の下側に向け且つ主面と反対側の面を鉛直方向の上側に向けて培養容器を所定の台上に載置した場合に、当該台の表面には、第３の凸部の端面が接触し、当該台とフィルムとの接触は回避されるので、フィルムは、第３の凸部によって保護される。

一実施形態において、容器本体は、底壁と側壁と第４の凸部とを更に備え、底壁は、裏面と主面とを備え、裏面は、主面の反対側にあり、側壁は、裏面の第４の縁に設けられており、第４の縁に沿って延びており、裏面の上に延びており、裏面の上から見て裏面を囲んでおり、裏面の上に向けてテーパ状に拡がっており、第４の凸部は、側壁の第３の端面に設けられており、裏面の上から見て第３の凸部の外表面に接している。従って、二つの培養容器を互いの主面が重なるように積み重ねた場合に、一方の培養容器の第４の凸部と他方の培養容器の第３の凸部とが互いに接触することとなるので、当該他方の培養容器が当該一方の培養容器に対し主面に平行な方向に移動する（二つの培養容器が主面に平行な方向に互いにずれる）、という事態を回避できる。従って、第４の凸部によって、上記のように積み重ねられた二つの培養容器を主面に平行な方向において安定して重ね置くことができ、さらに、一方の培養容器の側壁（特に、側壁の内側面や、側壁の第３の端面の縁など）がもう一方の培養容器のフィルムの第３の縁に接触することを回避できる。

一実施形態において、第１の凸部は、溝の内面と段差無く接続される内側面を備える。従って、溝と溝の開口の第１の縁に設けられた第１の凸部との接続箇所において段差（凹凸）が形成されていないので、当該接続箇所に細胞等の物質が堆積する事態を回避できる。

以上説明したように、培養容器において、機械的な作用による培養面の破損等の発生を抑制することができる。

図１は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の主面側から培養容器を斜視的に見た図である。 図２は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって図１に示す培養容器の主面側の構成の一部を分解して見た図である。 図３は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の裏面側から培養容器を斜視的に見た図である。 図４は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の主面の上から培養容器を見た図である。 図５は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって図４に示すＡ−Ａ線に沿った面から培養容器を断面的に見た図である。 図６は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって図４に示すＢ−Ｂ線に沿った面から培養容器を断面的に見た図である。 図７は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の側面から培養容器を見た図である。

図１〜図７を参照して、一実施形態に係る培養容器１の構成を説明する。同一要素又は同一機能を有する要素には、同一符号を用いることとし、重複する説明を省略する。図１は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の主面側から培養容器を斜視的に見た図であり、図２は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって図１に示す培養容器の主面側の構成の一部を分解して見た図であり、図３は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の裏面側から培養容器を斜視的に見た図であり、図４は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の主面の上から培養容器を見た図である。また、図５は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって図４に示すＡ−Ａ線に沿った面から培養容器を断面的に見た図であり、図６は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって図４に示すＢ−Ｂ線に沿った面から培養容器を断面的に見た図であり図７は、一実施形態に係る培養容器の構成を示す図であって培養容器の側面から培養容器を見た図である。

培養容器１は、例えばiPS細胞、ES細胞等の多能性幹細胞、骨髄間質細胞（MSC：Marrow Stromal Cell）等の軟骨細胞、樹状細胞等の様々な接着性（付着性）細胞を培養する用途に用いることができる。培養容器１は、容器本体３とフィルム５とを備える。容器本体３は、溝部３１と、底壁３ａと、主面３ａ１と、縁３ａ２２（第１の縁）と、縁３ａ１１（第２の縁）と、縁３ａ３１（第４の縁）と、溝３ａ２と、開口３ａ２１と、内面３ａ２３と、裏面３ａ３と、側壁３ｂと、端面３ｃ１１（第１の端面）と、端面３ｃ２１（第２の端面）と、端面３ｂ１（第３の端面）と、端面３ｃ３１と、端面３ｂ３１と、端面３ｃ４１と、入出部３ｂ２と、開口３ｂ２１と、スペーサ３ｂ３と、内側面３ｃ１２と、外表面３ｃ３２と、内表面３ｃ４２と、凸部３ｃ１（第１の凸部）と、凸部３ｃ２（第２の凸部）と、凸部３ｃ３（第３の凸部）と、凸部３ｃ４（第４の凸部）と、凹部３ｄとを備える。フィルム５は、縁５ａ（第３の縁）と表面５ｂとを備える。

底壁３ａは、板状の形状を有する。底壁３ａの主面３ａ１は、板状の底壁３ａの二つの表面のうち一方の表面である。底壁３ａの裏面３ａ３は、主面３ａ１の反対側にあり、板状の底壁３ａの二つの表面のうち主面３ａ１以外の他の表面である。主面３ａ１および裏面３ａ３は、平坦である。主面３ａ１と裏面３ａ３とは互いに平行である。

側壁３ｂは、裏面３ａ３の縁３ａ３１に設けられている。側壁３ｂは、縁３ａ３１に沿って延びている。側壁３ｂは、裏面３ａ３の上に延びている。側壁３ｂは、裏面３ａ３の上から見て裏面３ａ３を囲んでいる。側壁３ｂは、裏面３ａ３の上に向けてテーパ状に拡がっている。底壁３ａと側壁３ｂとは、容器本体３において凹部３ｄを画成している。

溝３ａ２は、主面３ａ１に設けられている。溝３ａ２は、主面３ａ１の上から見て、主面３ａ１において、蛇行した形状を有する。溝３ａ２の開口３ａ２１は、主面３ａ１の上から見て、主面３ａ１において、蛇行している。溝３ａ２は、内面３ａ２３を備える。溝３ａ２は、内面３ａ２３によって画成される。溝３ａ２の深さは、底壁３ａの厚みよりも深く、側壁３ｂの裏面３ａ３からの高さよりも浅い。溝３ａ２は、主面３ａ１の上から見て、二つの端部を備える。溝３ａ２の二つの端部のそれぞれには、入出部３ｂ２が接続されている。入出部３ｂ２は、開口３ｂ２１を備える。開口３ｂ２１は、側壁３ｂに設けられた側壁３ｂの貫通孔に含まれる。当該貫通孔は、入出部３ｂ２に含まれる。溝３ａ２は、入出部３ｂ２を介して、開口３ｂ２１から外部の空間（具体的には側壁３ｂ上の空間）と連通する。溝部３１は、溝３ａ２を備える。溝部３１は、裏面３ａ３に設けられている。溝部３１は、凹部３ｄに設けられている。溝部３１は、裏面３ａ３から裏面３ａ３の上に突出している。入出部３ｂ２と溝部３１（溝３ａ２）との接続部分は、凹部３ｄに設けられている。

スペーサ３ｂ３は、裏面３ａ３に設けられている。スペーサ３ｂ３は、凹部３ｄに設けられている。スペーサ３ｂ３は、裏面３ａ３から裏面３ａ３の上に突出している。スペーサ３ｂ３は、端面３ｂ３１を備える。スペーサ３ｂ３は、主面３ａ１の上から見て、凸部３ｃ３の端面３ｃ３１と重なる位置に設けられている。すなわち、凸部３ｃ３の端面３ｃ３１と、スペーサ３ｂ３の端面３ｂ３１とは、主面３ａ１の上から見て、互いに重なる。

凸部３ｃ１は、主面３ａ１に設けられている。凸部３ｃ１は、主面３ａ１の上に突出している。凸部３ｃ１は、主面３ａ１における溝３ａ２の開口３ａ２１の縁３ａ２２に設けられている。凸部３ｃ１は、縁３ａ２２に沿って延びている。凸部３ｃ１は、主面３ａ１の上から見て、開口３ａ２１を囲んでいる。凸部３ｃ１は、溝３ａ２の内面３ａ２３と段差無く接続される内側面３ｃ１２を備える。内面３ａ２３と内側面３ｃ１２とは滑らかに接続される。内面３ａ２３と内側面３ｃ１２とは、一体に設けられており、滑らかに接続されており、互いに同質の面である。

凸部３ｃ２は、主面３ａ１に設けられている。凸部３ｃ２は、主面３ａ１の縁３ａ１１と開口３ａ２１との間に配置されている。

凸部３ｃ３は、主面３ａ１に設けられている。凸部３ｃ３は、主面３ａ１の上から見て、主面３ａ１の縁３ａ１１からフィルム５の縁５ａまでの間に配置される。凸部３ｃ３は、例えば、主面３ａ１の上から見て、主面３ａ１の縁３ａ１１に沿って設けられ得る。

凸部３ｃ４は、側壁３ｂの端面３ｂ１に設けられている。凸部３ｃ４は、内表面３ｃ４２を備える。内表面３ｃ４２は、凹部３ｄの側（培養容器１の内側）に面している。凸部３ｃ４の内表面３ｃ４２は、裏面３ａ３の上から見て、培養容器１の外側に面している凸部３ｃ３の外表面３ｃ３２に接している。

フィルム５は、主面３ａ１の上に配置されている。フィルム５の表面５ｂは、フィルム５の二つの表面の一方であり、溝３ａ２の凸部３ｃ１の端面３ｃ１１に接合しているフィルム５の他方の表面の反対側にある。フィルム５は、開口３ａ２１と凸部３ｃ２とを覆う。フィルム５は、凸部３ｃ１の端面３ｃ１１と凸部３ｃ２の端面３ｃ２１とに接合されている。主面３ａ１に対する凸部３ｃ３の高さは、フィルム５の厚みと主面３ａ１に対する凸部３ｃ１の高さとの合計よりも高く、且つ、フィルム５の厚みと主面３ａ１に対する凸部３ｃ２の高さとの合計よりも高い。フィルム５と溝３ａ２の凸部３ｃ１の端面３ｃ１１との接合によって、溝３ａ２の内側は、主面３ａ１の上側の空間に対し気密に封止される。溝３ａ２の開口３ａ２１の全体は、主面３ａ１の上の空間に対し凸部３ｃ１とフィルム５とによって気密に封止される。また、開口３ｂ２１に例えば医療用の開閉弁等を取り付けてルアーロック等のように開口３ｂ２１を気密に閉じた場合、フィルム５と溝３ａ２とによって画成される空間（第１の空間）、および、当該空間に連通する入出部３ｂ２の内部の空間（第２の空間）は、何れも、培養容器１の外部に対し気密に閉じられており、よって、上記の第１および第２の空間内に細胞懸濁液が予め収容されている場合には、この細胞懸濁液が上記の第１および第２の空間の外部に漏れ出ることはない。なお、フィルム５と凸部３ｃ１および凸部３ｃ２との接合は、接着剤を使用せずに、例えば、超音波融着、熱融着等によって成されたものである。

以下、一実施形態に係る培養容器１の主要な構成の一例をより具体的に説明する。一実施形態においては、容器本体３およびフィルム５の材質は、高光透過性を有する樹脂、例えばポリスチレン等を含み得る。容器本体３およびフィルム５が光透過性を有する場合、培養容器１の溝３ａ２内において培養中の細胞を、培養容器１の外部から光学的に観察することが容易となる。容器本体３は、例えば射出成形により一体に形成され得る。

容器本体３の底壁３ａは、板状の形状を有し得る。底壁３ａは、主面３ａ１の上から見て略長方形の形状を有し得る。側壁３ｂは、底壁３ａの裏面３ａ３から一定の高さを有し得る。側壁３ｂは、裏面３ａ３の上から見て、裏面３ａ３の縁３ａ３１の延びている方向において、閉じた形状を有し得る。側壁３ｂは、裏面３ａ３の上から見て、裏面３ａ３を囲んでいる。

フィルム５は、主面３ａ１の上から見て、略長方形の形状を有し得る。フィルム５は、適度なガス透過性を有し得る。フィルム５の厚みは、例えば３０〜３００［μｍ］の程度であり得る。これにより、培養中の細胞に酸素ガス等のガスを供給することが容易となる。なお、培養容器１において嫌気性の細胞を培養する場合には、フィルム５は、ガス不透過性を有し、この場合、フィルム５の厚みは、例えば２０００〜３０００［μｍ］の程度であり得る。

凸部３ｃ２は、フィルム５の縁５ａに沿って（例えば、フィルム５の縁５ａに沿い、且つ、主面３ａ１の上から見て略長方形の形状を有しているフィルム５の各頂点の箇所に）、配置され得る。凸部３ｃ３は、主面３ａ１の縁３ａ１１に沿って（例えば、主面３ａ１の縁３ａ１１に沿い、且つ、主面３ａ１の中心に対し点対称に）配置され得る。従って、底壁３ａを鉛直方向の下側に向け、且つ、凹部３ｄを鉛直方向の上側に向けて、培養容器１を所定の台上に載置した場合に、培養容器１は、当該台上において凸部３ｃ３によって安定に支えられる。

更に、図５〜図７に示す基準面ＳＨ１〜ＳＨ５、および、基準面ＳＯ１を用いて、一実施形態における培養容器１の構成を説明する。基準面ＳＨ１〜ＳＨ５，ＳＯ１は、培養容器１の構成の説明のために培養容器１に対して便宜上設けた仮想的な平面である。基準面ＳＨ１〜ＳＨ５は互いに平行であり、基準面ＳＯ１は基準面ＳＨ１〜ＳＨ５に直交する。裏面３ａ３の側から主面３ａ１の側に向かう方向において、基準面ＳＨ５の上に基準面ＳＨ４が配置され、基準面ＳＨ４の上に基準面ＳＨ３が配置され、基準面ＳＨ３の上に基準面ＳＨ２が配置され、基準面ＳＨ２の上に基準面ＳＨ１が配置されている。底壁３ａの主面３ａ１は、基準面ＳＨ３にある。凸部３ｃ３の端面３ｃ３１は、基準面ＳＨ１にある。フィルム５の表面５ｂは、基準面ＳＨ２にある。側壁３ｂの端面３ｂ１は、基準面ＳＨ４にある。スペーサ３ｂ３の端面３ｂ３１は、基準面ＳＨ４にある。凸部３ｃ４の端面３ｃ４１は、基準面ＳＨ５にある。培養容器１の外側に面している凸部３ｃ３の外表面３ｃ３２は、基準面ＳＯ１にある。培養容器１の内側（凹部３ｄの側）に面している凸部３ｃ４の内表面３ｃ４２は、基準面ＳＯ１にある。

主面３ａ１（基準面ＳＨ３）の上に向かって、基準面ＳＨ２、基準面ＳＨ１は、この順に配置される。基準面ＳＨ３と基準面ＳＨ１との間の距離は、基準面ＳＨ３と基準面ＳＨ２との間の距離よりも長い。基準面ＳＨ３には主面３ａ１が重なり、基準面ＳＨ１には凸部３ｃ３の端面３ｃ３１が重なり、基準面ＳＨ２にはフィルム５の表面５ｂが重なる。従って、主面３ａ１に対する凸部３ｃ３の高さ（基準面ＳＨ３と基準面ＳＨ１との間の距離）は、フィルム５の厚みと主面３ａ１に対する凸部３ｃ１の高さとの合計よりも高く、且つ、フィルム５の厚みと主面３ａ１に対する凸部３ｃ２の高さとの合計よりも高い（基準面ＳＨ３と基準面ＳＨ２との間の距離よりも高い）。

二つの培養容器（第１の培養容器１および第２の培養容器１）を互いの主面３ａ１が重なるように積み重ねる場合であって、第１の培養容器１の凹部３ｄの側から、第１の培養容器１の上に、第２の培養容器１を、第１の培養容器１と同じ向きに重ねて配置する場合に、第１の培養容器１の基準面ＳＨ４が、第２の培養容器１の基準面ＳＨ１と重なる。この場合、第２の培養容器１の凸部３ｃ３の端面３ｃ３１は、第１の培養容器１のスペーサ３ｂ３の端面３ｂ３１に接触する。第１の培養容器１の基準面ＳＯ１は、第２の培養容器１の基準面ＳＯ１と重なり、第１の培養容器１の基準面ＳＯ１にある第１の培養容器１の凸部３ｃ４の内表面３ｃ４２は、第２の培養容器１の基準面ＳＯ１にある第２の培養容器１の凸部３ｃ３の外表面３ｃ３２と接触する。第２の培養容器１のフィルム５は、第１の培養容器１の何れに対しても接触しない。

以上説明した一実施形態に係る培養容器１では、フィルム５が容器本体３から剥がされる向きに機械的な作用がフィルム５に加えられる場合であっても、当該作用がフィルム５と溝３ａ２の開口３ａ２１の縁３ａ２２に設けられた凸部３ｃ１の端面３ｃ１１との接合に加えられる前に、フィルム５と凸部３ｃ２の端面３ｃ２１との接合に加えられることとなるので、フィルム５と溝３ａ２の開口３ａ２１の縁３ａ２２に設けられた凸部３ｃ１の端面３ｃ１１との接合が、フィルム５と凸部３ｃ２の端面３ｃ２１との接合によって保護される。

また、主面３ａ１を鉛直方向の下側に向け且つ主面３ａ１と反対側の裏面３ａ３を鉛直方向の上側に向けて培養容器１を所定の台上に載置した場合に、当該台の表面には、凸部３ｃ３の端面３ｃ３１が接触し、当該台とフィルム５との接触は回避されるので、フィルム５は、凸部３ｃ３によって保護される。

また、二つの培養容器（上記した第１の培養容器１および第２の培養容器１という。）を互いの主面３ａ１が重なるように積み重ねた場合、より具体的には、第２の培養容器１が第１の培養容器１の凹部３ｄの側において第１の培養容器１に互いの主面３ａ１が重なるように積み重ねて配置されている場合には、第１の培養容器１の凸部３ｃ４と第２の培養容器１の凸部３ｃ３とが互いに接触することとなるので、第２の培養容器１が第１の培養容器１に対して主面３ａ１に平行な方向に移動する（第１の培養容器１および第２の培養容器１が主面３ａ１に平行な方向に互いにずれる）、という事態を回避できる。従って、凸部３ｃ４によって、上記のように積み重ねられた二つの培養容器１を主面３ａ１に平行な方向において安定して重ね置くことができ、さらに、第１の培養容器１の側壁３ｂ（特に、側壁３ｂの内側面や、側壁３ｂの端面３ｂ１の縁など）が第２の培養容器１のフィルム５の縁５ａに接触することが回避できる。

また、凸部３ｃ１の内側面３ｃ１２は、溝３ａ２の内面３ａ２３に段差無く接続されるので、溝３ａ２と溝３ａ２の開口３ａ２１の縁３ａ２２に設けられた凸部３ｃ１との接続箇所において段差（凹凸）が形成されていないので、当該接続箇所に細胞等の物質が堆積する事態を回避できる。

上記構成の培養容器１の用法の一例の概略を以下に示す。溝３ａ２内には、入出部３ｂ２の開口３ｂ２１を介して、液体（細胞が分散された液体、培養液、剥離剤、リン酸緩衝生理食塩水（PBS：Phosphate Buffered Saline）等）が流入され、開口３ｂ２１が気密に閉じられた状態で、当該液体が外部に漏れ出ることなく溝３ａ２内に良好に収容される。培養容器１は、細胞の培養中には、凹部３ｄが鉛直方向の上側に開口され、フィルム５が鉛直方向の下側に向くように、配置される。この場合、溝３ａ２の内側に面したフィルム５の表面に細胞が播種されると共に培養される。溝３ａ２内に細胞懸濁液（例えば、iPS細胞が分散された細胞懸濁液等）が流入される前において、溝３ａ２の内面３ａ２３および凸部３ｃ１の内側面３ｃ１２には、細胞非接着コーティングが施され、溝３ａ２の内側に面するフィルム５の表面（表面５ｂの反対側にある表面）には、細胞外マトリックス（ECM：Extra Cellular Matrix）が塗布される。

以上、好適な実施の形態において本発明の原理を図示し説明してきたが、本発明は、そのような原理から逸脱することなく配置および詳細において変更され得ることは、当業者によって認識される。本発明は、本実施の形態に開示された特定の構成に限定されるものではない。したがって、特許請求の範囲およびその精神の範囲から来る全ての修正および変更に権利を請求する。

例えば、主面３ａ１の上から見た底壁３ａおよびフィルム５（フィルム５の表面５ｂ）の形状は、略長方形（四角形）に限らず、三角形や、五角形以上の他の任意の多角形であり得る。また、スペーサ３ｂ３の形状および配置は、上記説明したものに限らず、上記説明した機能と同様の機能を奏するものであれば、他の形状および他の配置であり得る。

また、凸部３ｃ２，３ｃ３，３ｃ４のそれぞれは、何れも、図１〜図７に示すように複数の部分（複数体）から成るものとしたが、これに限らず、一体として設けられたものであり得る。凸部３ｃ２は、主面３ａ１の上から見て、例えば、溝３ａ２の開口３ａ２１の全体を囲むように主面３ａ１に延在する一体形状であり得る。凸部３ｃ３は、主面３ａ１の上から見て、主面３ａ１を囲むように、主面３ａ１の縁３ａ１１に沿って延在する一体形状であり得る。この場合、主面３ａ１の上から見て、凸部３ｃ３によって囲まれる領域には、溝３ａ２、開口３ａ２１、凸部３ｃ１、凸部３ｃ２が全て含まれる。凸部３ｃ４は、例えば、裏面３ａ３の上から見て、裏面３ａ３を囲むように側壁３ｂの端面３ｂ１に沿って延在する一体形状であり得る。この場合、裏面３ａ３の上から見て、凸部３ｃ４によって囲まれる領域には、溝部３１が含まれる。

１…培養容器、３…容器本体、３１…溝部、３ａ…底壁、３ａ１…主面、３ａ１１…縁（第２の縁）、３ａ２…溝、３ａ２１…開口、３ａ２２…縁（第１の縁）、３ａ２３…内面、３ａ３…裏面、３ａ３１…縁（第４の縁）、３ｂ…側壁、３ｂ１…端面（第３の端面）、３ｂ２…入出部、３ｂ２１…開口、３ｂ３…スペーサ、３ｂ３１…端面、３ｃ１…凸部（第１の凸部）、３ｃ１１…端面（第１の端面）、３ｃ１２…内側面、３ｃ２…凸部（第２の凸部）、３ｃ２１…端面（第２の端面）、３ｃ３…凸部（第３の凸部）、３ｃ３１…端面、３ｃ３２…外表面、３ｃ４…凸部（第４の凸部）、３ｃ４１…端面、３ｃ４２…内表面、３ｄ…凹部、５…フィルム、５ａ…縁（第３の縁）、５ｂ…表面、ＳＨ１…基準面、ＳＨ２…基準面、ＳＨ３…基準面、ＳＨ４…基準面、ＳＨ５…基準面、ＳＯ１…基準面。

Claims (4)

1. 容器本体とフィルムとを備え、
   前記容器本体は、主面と溝と第１の凸部と第２の凸部とを備え、
   前記主面は、平坦であり、
   前記溝は、前記主面に設けられており、
   前記第１の凸部は、前記主面に設けられており、該主面の上に突出しており、該主面における前記溝の開口の第１の縁に設けられており、該第１の縁に沿って延びており、該主面の上から見て該開口を囲んでおり、
   前記第２の凸部は、前記主面に設けられており、該主面の第２の縁と前記開口との間に配置されており、
   前記フィルムは、前記主面の上に配置されており、前記開口と前記第２の凸部とを覆い、前記第１の凸部の第１の端面と該第２の凸部の第２の端面とに接合されており、
   前記開口は、前記主面の上の空間に対し前記第１の凸部と前記フィルムとの接合によって気密に封止されている、
   培養容器。
2. 前記容器本体は、第３の凸部を更に備え、
   前記第３の凸部は、前記主面に設けられており、該主面の上から見て前記第２の縁から前記フィルムの第３の縁までの間に配置されており、
   前記主面に対する前記第３の凸部の高さは、前記フィルムの厚みと該主面に対する前記第１の凸部の高さとの合計よりも高く、且つ、該フィルムの厚みと該主面に対する前記第２の凸部の高さとの合計よりも高い、
   請求項１に記載の培養容器。
3. 前記容器本体は、底壁と側壁と第４の凸部とを更に備え、
   前記底壁は、裏面と前記主面とを備え、
   前記裏面は、前記主面の反対側にあり、
   前記側壁は、前記裏面の第４の縁に設けられており、前記第４の縁に沿って延びており、該裏面の上に延びており、該裏面の上から見て該裏面を囲んでおり、該裏面の上に向けてテーパ状に拡がっており、
   前記第４の凸部は、前記側壁の第３の端面に設けられており、前記裏面の上から見て前記第３の凸部の外表面に接している、
   請求項２に記載の培養容器。
4. 前記第１の凸部は、前記溝の内面と段差無く接続される内側面を備える、
   請求項１〜請求項３の何れか一項に記載の培養容器。

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