JP2018537956A - 抗trem2抗体及びその使用方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2015年10月6日出願の米国特許仮出願第62/238,044号及び2016年8月1日出願の米国特許仮出願第62/369,666号の利益を主張し、そのそれぞれは、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
ASCIIテキストファイルでの次の提出物の内容は、その全体で参照によって本明細書に組み込まれる:配列表のコンピュータ可読形式(CRF)(ファイル名:735022000940SEQLISTING.TXT、記録日:2016年10月6日、サイズ:651KB)。
本開示は、抗TREM2抗体及びそのような抗体の治療的使用に関する。
カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、及びグリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含むリピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAからなる群から選択される)、(ee)アポトーシスニューロン、神経組織デブリ、非神経組織デブリ、細菌、他の異物、病原体、腫瘍細胞、またはそれらの任意の組合せの1つまたは複数の食作用の誘導(任意選択で、病原体は、アミロイドベータまたはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、及びグリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含むリピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAからなる群から選択される)、(ff)CD83、CD86 MHCクラスII、CD40、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の刺激分子の発現の調節(任意選択で、CD40は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの上に発現され、任意選択で、樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含む)、(gg)IFN−β、IL−1α、IL−1β、CD86、TNF−α、IL−6、IL−8、CRP、MCP−1/CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCR2、CXCL−10、Gata3、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、CSF−1、OPN、CD11c、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、及びIL−23からなる群から選択される1つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの分泌の調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(hh)IL−4、IL−10、TGF−β、IL−13、IL−35、IL−16、IFN−アルファ、IL−1Ra、VEGF、G−CSF、YM、AXL、FLT1、及びTNFまたはIL−6のための可溶性受容体からなる群から選択される1つまたは複数の抗炎症性メディエーターの分泌の調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(ii)C1qa、C1qB、C1qC、C1s、C1R、C4、C2、C3、ITGB2、HMOX1、LAT2.CASP1、CSTA、VSIG4、MS4A4A、C3AR1、GPX1、TyroBP、ALOX5AP、ITGAM、SLC7A7、CD4、ITGAX、PYCARD、及びVEGFからなる群から選択される1つまたは複数のタンパク質の発現の調節、(jj)記憶の増大、ならびに(kk)認知障害の減少。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、1つまたは複数のTREM2活性は、下記からなる群から選択される:(a)DAP12へのTREM2結合、(b)DAP12リン酸化、(c)Sykキナーゼの活性化、(d)IFN−β、IL−1α、IL−1β、TNF−α、IL−6、IL−8、CRP、CD86、MCP−1/CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCR2、CXCL−10、Gata3、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、CSF−1、OPN、CD11c、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、及びIL−23からなる群から選択される1つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(e)DAP12/TREM2複合体へのSykの動員、(f)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の増加(任意選択で、1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、(g)樹状細胞、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの生存の増加、(h)CD83、CD86 MHCクラスII、CD40、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の刺激分子の発現の調節(任意選択で、CD40は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの上に発現され、任意選択で、樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含む)、(i)記憶の増大、ならびに(j)認知障害の減少。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgGクラス、IgMクラス、またはIgAクラスのものである。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgGクラスのものであり、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4アイソタイプを有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgG2アイソタイプを有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒトIgG2定常領域を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、ヒトIgG2定常領域は、Fc領域を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、Fc受容体への結合とは無関係に、1つまたは複数のTREM2活性を増強する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、阻害性Fc受容体と結合する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、阻害性Fc受容体は、阻害性Fc−ガンマ受容体IIB(FcγIIB)である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、(a)単離抗体は、ヒトまたはマウスIgG1アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、N297A、D265A、D270A、L234A、L235A、G237A、C226S、C229S、E233P、L234V、L234F、L235E、P331S、S267E、L328F、A330L、M252Y、S254T、T256E、L328E、P238D、S267E、L328F、E233D、G237D、H268D、P271G、A330R、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、またはアミノ酸欠失をFc領域に、グリシン236に対応する位置で含む、(b)単離抗体は、IgG1アイソタイプを有し、IgG2アイソタイプ重鎖定常ドメイン1(CH1)及びヒンジ領域を含み、任意選択で、IgG2アイソタイプCH1及びヒンジ領域は、ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSVVT VPSSNFGTQT YTCNVDHKPS NTKVDKTVERKCCVECPPCP(配列番号886)のアミノ酸配列を含み、任意選択で、抗体Fc領域は、
S267Eアミノ酸置換、L328Fアミノ酸置換、もしくはその両方、及び/またはN297AもしくはN297Qアミノ酸置換を含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、(c)単離抗体は、IgG2アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、P238S、V234A、G237A、H268A、H268Q、V309L、A330S、P331S、C214S、C232S、C233S、S267E、L328F、M252Y、S254T、T256E、H268E、N297A、N297Q、A330L、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、(d)単離抗体は、ヒトまたはマウスIgG4アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、L235A、G237A、S228P、L236E、S267E、E318A、L328F、M252Y、S254T、T256E、E233P、F234V、L234A/F234A、S228P、S241P、L248E、T394D、N297A、N297Q、L235E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または(e)単離抗体は、ハイブリッドIgG2/4アイソタイプを有し、任意選択で、抗体は、ヒトIgG2のアミノ酸118〜260及びヒトIgG4のアミノ酸261〜447を含むアミノ酸配列を含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgG4アイソタイプを有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、残基位置228でS228Pアミノ酸置換、残基位置234でF234Aアミノ酸置換、及び残基位置235でL235Aアミノ酸置換を含む(残基位置のナンバリングは、EUナンバリングによる)。
かつ重鎖可変ドメインは、配列番号409のアミノ酸配列を含む、(r)軽鎖可変ドメインは、配列番号252のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号419のアミノ酸配列を含む、(s)軽鎖可変ドメインは、配列番号241のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号429のアミノ酸配列を含む、(t)軽鎖可変ドメインは、配列番号849のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号429のアミノ酸配列を含む、(u)軽鎖可変ドメインは、配列番号263のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号439のアミノ酸配列を含む、(v)軽鎖可変ドメインは、配列番号274のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号449のアミノ酸配列を含む、(w)軽鎖可変ドメインは、配列番号285のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号459のアミノ酸配列を含む、(x)軽鎖可変ドメインは、配列番号286のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号460のアミノ酸配列を含む、(y)軽鎖可変ドメインは、配列番号287のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号461のアミノ酸配列を含む、(z)軽鎖可変ドメインは、配列番号298のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号429のアミノ酸配列を含む、(aa)軽鎖可変ドメインは、配列番号299のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号471のアミノ酸配列を含む、(bb)軽鎖可変ドメインは、配列番号310のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号461のアミノ酸配列を含む、(cc)軽鎖可変ドメインは、配列番号679のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号481のアミノ酸配列を含む、(dd)軽鎖可変ドメインは、配列番号311のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号491のアミノ酸配列を含む、(ee)軽鎖可変ドメインは、配列番号322のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号511のアミノ酸配列を含む、(ff)軽鎖可変ドメインは、配列番号344のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号531のアミノ酸配列を含む、(gg)軽鎖可変ドメインは、配列番号355のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号635のアミノ酸配列を含む、(hh)軽鎖可変ドメインは、配列番号365のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号541のアミノ酸配列を含む、(ii)軽鎖可変ドメインは、配列番号376のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号551のアミノ酸配列を含む、(jj)軽鎖可変ドメインは、配列番号387のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号561のアミノ酸配列を含む、(kk)軽鎖可変ドメインは、配列番号398のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号571のアミノ酸配列を含む、(ll)軽鎖可変ドメインは、配列番号724のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(mm)軽鎖可変ドメインは、配列番号809のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(nn)軽鎖可変ドメインは、配列番号725のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号732のアミノ酸配列を含む、(oo)軽鎖可変ドメインは、配列番号726のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(pp)軽鎖可変ドメインは、配列番号726のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号817のアミノ酸配列を含む、(qq)軽鎖可変ドメインは、配列番号727のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(rr)軽鎖可変ドメインは、配列番号728のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号733のアミノ酸配列を含む、(ss)軽鎖可変ドメインは、配列番号810のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号818のアミノ酸配列を含む、(tt)軽鎖可変ドメインは、配列番号811のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号733のアミノ酸配列を含む、(uu)軽鎖可変ドメインは、配列番号729のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(vv)軽鎖可変ドメインは、配列番号812のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号819のアミノ酸配列を含む、(ww)軽鎖可変ドメインは、配列番号729のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号820のアミノ酸配列を含む、(xx)軽鎖可変ドメインは、配列番号730のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(yy)軽鎖可変ドメインは、配列番号813のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(zz)軽鎖可変ドメインは、配列番号814のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号822のアミノ酸配列を含む、(aaa)軽鎖可変ドメインは、配列番号815のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号824のアミノ酸配列を含む、または(bbb)軽鎖可変ドメインは、配列番号816のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号825のアミノ酸配列を含む。
先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、3B10、7B3、8F8、9F5、9G1、9G3、11A8、12F9、7E9、7F6、8C3、2C5、3C5、4C12、7D9、2F6、3A7、7E5、11H5、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2からなる群から選択される抗体の軽鎖可変ドメイン、ならびに/または3B10、7B3、8F8、9F5、9G1、9G3、11A8、12F9、7E9、7F6、8C3、2C5、3C5、4C12、7D9、2F6、3A7、77E5、11H5、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2からなる群から選択される抗体の重鎖可変ドメインを含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、軽鎖可変ドメインは、HVR−L1、HVR−L2、HVR−L3を含み、重鎖可変ドメインは、HVR−H1、HVR−H2、及びHVR−H3を含み、HVR−H3は、配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含む。
HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号47のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号64のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号83のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号101のアミノ酸配列を含む、(x)HVR−L1は、配列番号16のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号65のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号84のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号102のアミノ酸配列を含む、(y)HVR−L1は、配列番号581のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号582のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号56のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号585のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号588のアミノ酸配列を含む、(z)HVR−L1は、配列番号10のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号49のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号586のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号86のアミノ酸配列を含む、または(aa)HVR−L1は、配列番号14のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号583のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号584のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号587のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号589のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、(a)配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L1、(b)配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L2、ならびに(c)配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L3を含み、重鎖可変ドメインは、(a)配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H1、(b)配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H2、ならびに(c)配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H3を含む。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、軽鎖可変ドメインは、HVR−L1、HVR−L2、HVR−L3を含み、重鎖可変ドメインは、HVR−H1、HVR−H2、及びHVR−H3を含み、HVR−H3は、配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号219〜398、602〜634、679〜689、724〜730、809〜816、821、843、844、849、及び850からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、ならびに/または配列番号399〜580、635〜678、731〜733、817〜820、822〜825、及び845〜847からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。一部の実施形態では、抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、(a)軽鎖可変ドメインは、配列番号333のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号521のアミノ酸配列を含む、(b)軽鎖可変ドメインは、配列番号850のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号521のアミノ酸配列を含む、(c)軽鎖可変ドメインは、配列番号334のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号522のアミノ酸配列を含む、(d)軽鎖可変ドメインは、配列番号335のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号523のアミノ酸配列を含む、(e)軽鎖可変ドメインは、配列番号336のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号524のアミノ酸配列を含む、(f)軽鎖可変ドメインは、配列番号337のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号525のアミノ酸配列を含む、(g)軽鎖可変ドメインは、配列番号338のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号526のアミノ酸配列を含む、(h)軽鎖可変ドメインは、配列番号339のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号526のアミノ酸配列を含む、(i)軽鎖可変ドメインは、配列番号340のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号527のアミノ酸配列を含む、(j)軽鎖可変ドメインは、配列番号341のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号528のアミノ酸配列を含む、(k)軽鎖可変ドメインは、配列番号342のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号529のアミノ酸配列を含む、(l)軽鎖可変ドメインは、配列番号343のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号530のアミノ酸配列を含む、(m)軽鎖可変ドメインは、配列番号843のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号845のアミノ酸配列を含む、(n)軽鎖可変ドメインは、配列番号844のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号846のアミノ酸配列を含む、(o)軽鎖可変ドメインは、配列番号844のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号847のアミノ酸配列を含む、(p)軽鎖可変ドメインは、配列番号219のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号399のアミノ酸配列を含む、(q)軽鎖可変ドメインは、配列番号230のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号409のアミノ酸配列を含む、(r)軽鎖可変ドメインは、配列番号252のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号419のアミノ酸配列を含む、(s)軽鎖可変ドメインは、配列番号241のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号429のアミノ酸配列を含む、(t)軽鎖可変ドメインは、配列番号849のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号429のアミノ酸配列を含む、(u)軽鎖可変ドメインは、配列番号263のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号439のアミノ酸配列を含む、(v)軽鎖可変ドメインは、配列番号274のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号449のアミノ酸配列を含む、(w)軽鎖可変ドメインは、配列番号285のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号459のアミノ酸配列を含む、(x)軽鎖可変ドメインは、配列番号286のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号460のアミノ酸配列を含む、(y)軽鎖可変ドメインは、配列番号287のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号461のアミノ酸配列を含む、(z)軽鎖可変ドメインは、配列番号298のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号429のアミノ酸配列を含む、(aa)軽鎖可変ドメインは、配列番号299のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号471のアミノ酸配列を含む、(bb)軽鎖可変ドメインは、配列番号310のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号461のアミノ酸配列を含む、(cc)軽鎖可変ドメインは、配列番号679のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号481のアミノ酸配列を含む、(dd)軽鎖可変ドメインは、配列番号311のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号491のアミノ酸配列を含む、(ee)軽鎖可変ドメインは、配列番号322のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号511のアミノ酸配列を含む、(ff)軽鎖可変ドメインは、配列番号344のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号531のアミノ酸配列を含む、(gg)軽鎖可変ドメインは、配列番号355のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号635のアミノ酸配列を含む、(hh)軽鎖可変ドメインは、配列番号365のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号541のアミノ酸配列を含む、(ii)軽鎖可変ドメインは、配列番号376のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号551のアミノ酸配列を含む、(jj)軽鎖可変ドメインは、配列番号387のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号561のアミノ酸配列を含む、(kk)軽鎖可変ドメインは、配列番号398のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号571のアミノ酸配列を含む、(ll)軽鎖可変ドメインは、配列番号724のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(mm)軽鎖可変ドメインは、配列番号809のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(nn)軽鎖可変ドメインは、配列番号725のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号732のアミノ酸配列を含む、(oo)軽鎖可変ドメインは、配列番号726のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(pp)軽鎖可変ドメインは、配列番号726のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号817のアミノ酸配列を含む、(qq)軽鎖可変ドメインは、配列番号727のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(rr)軽鎖可変ドメインは、配列番号728のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号733のアミノ酸配列を含む、(ss)軽鎖可変ドメインは、配列番号810のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号818のアミノ酸配列を含む、(tt)軽鎖可変ドメインは、配列番号811のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号733のアミノ酸配列を含む、(uu)軽鎖可変ドメインは、
配列番号729のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(vv)軽鎖可変ドメインは、配列番号812のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号819のアミノ酸配列を含む、(ww)軽鎖可変ドメインは、配列番号729のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号820のアミノ酸配列を含む、(xx)軽鎖可変ドメインは、配列番号730のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(yy)軽鎖可変ドメインは、配列番号813のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号731のアミノ酸配列を含む、(zz)軽鎖可変ドメインは、配列番号814のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号822のアミノ酸配列を含む、(aaa)軽鎖可変ドメインは、配列番号815のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号824のアミノ酸配列を含む、または(bbb)軽鎖可変ドメインは、配列番号816のアミノ酸配列を含み、かつ重鎖可変ドメインは、配列番号825のアミノ酸配列を含む。
(n)IL−4、IL−10、TGF−β、IL−13、IL−35、IL−16、IFN−α、IL−1Rα、VEGF、G−CSF、YM、AXL、FLT1、及びTNFまたはIL−6のための可溶性受容体からなる群から選択される1つまたは複数の抗炎症性メディエーターの調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(o)発現が、炎症の誘導で増加する1つまたは複数の遺伝子の調節(任意選択で、1つまたは複数の遺伝子は、Fabp3、Fabp5、及びLDRからなる群から選択される)、(p)細胞外シグナル調節キナーゼ(ERK)のリン酸化、(q)マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞におけるC−Cケモカイン受容体7(CCR7)の発現の調節、(r)CCL19及びCCL21発現細胞へのミクログリア細胞走化性の誘導、(s)かく乱されたTREM2/DAP12依存性遺伝子発現の正常化、(t)DAP12/TREM2複合体へのSyk、ZAP70、またはその両方の動員、(u)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の上昇(任意選択で、1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、(v)樹状細胞、単球、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの成熟の増加、(w)T細胞の機能を刺激または調節する樹状細胞、単球、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの能力の増加(任意選択で、T細胞は、CD8+T細胞、CD4+T細胞、調節性T細胞、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞である)、(x)抗原特異的T細胞の機能を刺激または調節する骨髄由来樹状細胞の能力の増強、その能力の正常化、またはその両方(任意選択で、抗原特異的T細胞は、CD8+T細胞、CD4+T細胞、調節性T細胞、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞である)、(y)破骨細胞産生の誘導、破骨細胞形成の速度の上昇、またはその両方、(z)樹状細胞、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの生存の増加、(aa)樹状細胞、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの機能の増加、(bb)樹状細胞、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、単球、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、またはそれらの任意の組合せによる食作用の増加、(cc)アポトーシスニューロンのクリアランス、神経組織デブリのクリアランス、非神経組織デブリのクリアランス、細菌または他の異物のクリアランス、
病原体のクリアランス、腫瘍細胞のクリアランス、またはそれらの任意の組合せからなる群から選択されるクリアランスのうちの1つまたは複数の種類の誘導(任意選択で、病原体は、アミロイドベータまたはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、及びグリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含むリピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAからなる群から選択される)、(dd)アポトーシスニューロン、神経組織デブリ、非神経組織デブリ、細菌、他の異物、病原体、腫瘍細胞、またはそれらの任意の組合せの1つまたは複数の食作用の誘導(任意選択で、病原体は、アミロイドベータまたはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、及びグリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含むリピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAからなる群から選択される)、(ee)CD83、CD86 MHCクラスII、CD40、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の刺激分子の発現の増加(任意選択で、CD40は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの上に発現され、任意選択で、樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含む)、(ff)IFN−β、IL−1α、IL−1β、CD86、TNF−α、IL−6、IL−8、CRP、MCP−1/CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCR2、CXCL−10、Gata3、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、CSF−1、OPN、CD11c、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、及びIL−23からなる群から選択される1つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの分泌の調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(gg)IL−4、IL−10、TGF−β、IL−13、IL−35、IL−16、IFN−アルファ、IL−1Ra、VEGF、G−CSF、YM、AXL、FLT1、及びTNFまたはIL−6のための可溶性受容体からなる群から選択される1つまたは複数の抗炎症性メディエーターの分泌の調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(hh)C1qa、C1qB、C1qC、C1s、C1R、C4、C2、C3、ITGB2、HMOX1、LAT2.CASP1、CSTA、VSIG4、MS4A4A、C3AR1、GPX1、TyroBP、ALOX5AP、ITGAM、SLC7A7、CD4、ITGAX、PYCARD、及びVEGFからなる群から選択される1つまたは複数のタンパク質の発現の調節、(ii)記憶の増大、ならびに(jj)認知障害の減少。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、1つまたは複数のTREM2活性は、下記からなる群から選択される:(a)DAP12へのTREM2結合、(b)DAP12リン酸化、(c)Sykキナーゼの活性化、(d)IFN−β、IL−1α、IL−1β、TNF−α、IL−6、IL−8、CRP、CD86、MCP−1/CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCR2、CXCL−10、Gata3、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、CSF−1、OPN、CD11c、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、及びIL−23からなる群から選択される1つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(e)DAP12/TREM2複合体へのSykの動員、(f)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の増加(任意選択で、1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、(g)樹状細胞、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの生存の増加、(h)CD83、CD86 MHCクラスII、CD40、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の刺激分子の発現の調節(任意選択で、CD40は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの上に発現され、任意選択で、樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含む)、(i)記憶の増加、及び(j)認知障害の減少。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgGクラス、IgMクラス、またはIgAクラスのものである。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgGクラスのものであり、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4アイソタイプを有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgG2アイソタイプを有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒトIgG2定常領域を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、ヒトIgG2定常領域は、Fc領域を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、Fc受容体への結合とは無関係に、1つまたは複数のTREM2活性を増強する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、阻害性Fc受容体に結合する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、阻害性Fc受容体は、阻害性Fc−ガンマ受容体IIB(FcγIIB)である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、(a)単離抗体は、ヒトまたはマウスIgG1アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、N297A、D265A、D270A、L234A、L235A、G237A、C226S、C229S、E233P、L234V、L234F、L235E、P331S、S267E、L328F、A330L、M252Y、S254T、T256E、L328E、P238D、S267E、L328F、E233D、G237D、H268D、P271G、A330R、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含むか(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、またはアミノ酸欠失をFc領域に、グリシン236に対応する位置で含む、(b)単離抗体は、IgG1アイソタイプを有し、IgG2アイソタイプ重鎖定常ドメイン1(CH1)及びヒンジ領域を含み、任意選択で、IgG2アイソタイプCH1及びヒンジ領域は、ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSVVT VPSSNFGTQT YTCNVDHKPS NTKVDKTVERKCCVECPPCP(配列番号886)のアミノ酸配列を含み、任意選択で、抗体Fc領域は、S267Eアミノ酸置換、L328Fアミノ酸置換、もしくはその両方、及び/またはN297AもしくはN297Qアミノ酸置換を含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、(c)単離抗体は、IgG2アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、P238S、V234A、G237A、H268A、H268Q、V309L、A330S、P331S、C214S、C232S、C233S、S267E、L328F、M252Y、S254T、T256E、H268E、N297A、N297Q、A330L、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、(d)単離抗体は、ヒトまたはマウスIgG4アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、L235A、G237A、S228P、L236E、S267E、E318A、L328F、M252Y、S254T、T256E、E233P、F234V、L234A/F234A、S228P、S241P、L248E、T394D、N297A、N297Q、L235E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または(e)単離抗体は、ハイブリッドIgG2/4アイソタイプを有し、任意選択で、抗体は、ヒトIgG2のアミノ酸118〜260及びヒトIgG4のアミノ酸261〜447を含むアミノ酸配列を含む(残基のナンバリングは、EU、またはKabatナンバリングによる)。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、TREM2タンパク質に結合する不活性抗体である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、TREM2タンパク質に結合するアンタゴニスト抗体である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、TREM2タンパク質は、哺乳動物タンパク質またはヒトタンパク質である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、TREM2タンパク質は、野生型タンパク質である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、TREM2タンパク質は、天然に存在するバリアントである。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、TREM2タンパク質は、疾患バリアントである。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、1つまたは複数のTREM2活性を阻害する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、1つまたは複数のTREM2活性は、下記からなる群から選択される:(a)DAP12へのTREM2結合、(b)TREM2リン酸化、(c)DAP12リン酸化、(d)1つまたは複数のチロシンキナーゼの活性化(任意選択で、1つまたは複数のチロシンキナーゼは、Sy
kキナーゼ、ZAP70キナーゼ、またはその両方を含む)、(e)ホスファチジルイノシトール3−キナーゼ(PI3K)の活性化、(f)プロテインキナーゼB(Akt)の活性化、(g)細胞形質膜へのホスホリパーゼC−ガンマ(PLC−ガンマ)の動員、PLC−ガンマの活性化、またはその両方、(h)細胞形質膜へのTEC−ファミリーキナーゼdVavの動員、(i)核因子−rB(NF−rB)の活性化、(j)MAPKシグナル伝達の阻害、(k)T細胞を活性化するためのリンカー(LAT)、B細胞を活性化するためのリンカー(LAB)、またはその両方のリン酸化、(l)IL−2誘導性チロシンキナーゼ(Itk)の活性化、(m)IFN−β、IL−1α、IL−1β、TNF−α、IL−6、IL−8、CRP、CD86、MCP−1/CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCR2、CXCL−10、Gata3、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、CSF−1、OPN、CD11c、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、及びIL−23からなる群から選択される1つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、
M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(n)IL−4、IL−10TGF−β、IL−13、IL−35、IL−16、IFN−アルファ、IL−1Ra、VEGF、G−CSF、YM、AXL、FLT1及びTNFまたはIL−6のための可溶性受容体からなる群から選択される1つまたは複数の抗炎症性メディエーターの調節(任意選択で、調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、(o)発現が、炎症の誘導で増加する1つまたは複数の遺伝子の調節(任意選択で、1つまたは複数の遺伝子は、Fabp3、Fabp5、及びLDRからなる群から選択される)、(p)細胞外シグナル調節キナーゼ(ERK)のリン酸化、(q)マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞におけるC−Cケモカイン受容体7(CCR7)の発現の増加、(r)CCL19及びCCL21発現細胞へのミクログリア細胞走化性の誘導、(s)かく乱されたTREM2/DAP12依存性遺伝子発現の正常化、(t)DAP12/TREM2複合体へのSyk、ZAP70、またはその両方の動員、(u)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の上昇(任意選択で、1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、(v)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、免疫抑制好中球、免疫抑制NK細胞、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、腫瘍関連サプレッサー好中球、腫瘍関連サプレッサーNK細胞、調節性T細胞、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞の増殖、成熟、遊走、分化、または機能性の促進、(w)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、免疫抑制好中球、免疫抑制NK細胞、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、腫瘍関連サプレッサー好中球、腫瘍関連サプレッサーNK細胞、調節性T細胞、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞の腫瘍への浸潤の増強、(x)腫瘍、末梢血、リンパ臓器、またはそれらの任意の組合せにおける腫瘍促進性骨髄免疫抑制または腫瘍促進性顆粒球免疫抑制細胞の数の増大、(y)骨髄由来サプレッサー細胞(MDSC)の腫瘍促進活性の増強、(z)腫瘍または末梢血における腫瘍促進性サイトカインの発現の増加(任意選択で、腫瘍促進性サイトカインは、TGF−ベータ、IL−10、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される)、(aa)腫瘍促進性FoxP3+調節性Tリンパ球の腫瘍浸潤の増加、(bb)腫瘍死滅能を有する腫瘍特異的Tリンパ球の活性化の減少、(cc)腫瘍死滅能を有する腫瘍特異的Tリンパ球、腫瘍死滅能を有する腫瘍特異的NK細胞、免疫応答を増強する能力を有する腫瘍特異的Bリンパ球、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の細胞の浸潤の減少、(dd)腫瘍体積の増加、(ee)腫瘍成長速度の上昇、(ff)転移の増加、(gg)腫瘍再発率の上昇、(hh)抗腫瘍T細胞応答を調節する1つまたは複数の免疫療法の有効性の低下(任意選択で、1つまたは複数の免疫療法は、PD1/PDL1遮断、CTLA−4遮断、及びがんワクチンからなる群から選択される)、(ii)PLCγ/PKC/カルシウム可動化の阻害、ならびに(jj)PI3K/Akt、Ras/MAPKシグナル伝達の阻害。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、1つまたは複数のTREM2活性は、下記からなる群から選択される:(a)DAP12へのTREM2結合、(b)DAP12リン酸化、(c)Sykキナーゼの活性化、(d)DAP12/TREM2複合体へのSykの動員、(e)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の増加(任意選択で、1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、(f)腫瘍体積の増加、及び(g)腫瘍成長速度の上昇。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、TREM2と1つまたは複数のTREM2リガンドとの間の相互作用を阻害する、TREM2シグナル伝達を阻害する、またはその両方である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、Fc−ガンマ受容体(FcγR)に結合し得る。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4アイソタイプを有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、(a)抗体は、ヒトまたはマウスIgG1アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、N297A、N297Q、D270A、D265A、L234A、L235A、C226S、C229S、P238S、E233P、L234V、P238A、A327Q、A327G、P329A、K322A、L234F、L235E、P331S、T394D、A330L、M252Y、S254T、T256E、L328E、P238D、S267E、L328F、E233D、G237D、H268D、P271G、A330R、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含むか(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、またはアミノ酸欠失をFc領域に、グリシン236に対応する位置で含む、(b)抗体は、IgG2アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、P238S、V234A、G237A、H268A、H268Q、H268E、V309L、N297A、N297Q、A330S、P331S、C232S、C233S、M252Y、S254T、T256E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または(c)抗体は、IgG4アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、E233P、F234V、L234A/F234A、L235A、G237A、E318A、S228P、L236E、S241P、L248E、T394D、M252Y、S254T、T256E、N297A、N297Q、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、(a)Fc領域はさらに、1つまたは複数の追加のアミノ酸置換をA330L、L234F、L235E、P331S、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される位置に含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、(b)Fc領域はさらに、1つまたは複数の追加のアミノ酸置換をM252Y、S254T,T256E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される位置に含む(残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または(c)Fc領域はさらに、EUナンバリングによるとS228Pアミノ酸置換を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒトTREM2、ヒトTREM2の天然に存在するバリアント、及びヒトTREM2の疾患バリアントからなる群から選択される1つまたは複数のヒトタンパク質に結合する抗体フラグメントであり、任意選択で、抗体フラグメントは、ヒトTREM2、ヒトTREM2の天然に存在するバリアント、及びヒトTREM2の疾患バリアントからなる群から選択される1つまたは複数のヒトタンパク質に結合する第2の抗体フラグメントに架橋されている。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、フラグメントは、Fab、Fab’、Fab’−SH、F(ab’)2、FvまたはscFvフラグメントである。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、1つまたは複数のTREM2リガンドは、E.coli細胞、アポトーシス細胞、核酸、
陰イオン性脂質、陰イオン性脂質、APOE、APOE2、APOE3、APOE4、陰イオン性APOE、陰イオン性APOE2、陰イオン性APOE3、陰イオン性APOE4、脂質化APOE、脂質化APOE2、脂質化APOE3、脂質化APOE4、双性イオン性脂質、負の電荷をもつリン脂質、ホスファチジルセリン、スルファチド、ホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、膜リン脂質、脂質化タンパク質、プロテオ脂質、脂質化ペプチド、脂質化アミロイドベータペプチド、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、マウス抗体である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒト化抗体、二重特異性抗体、多価抗体、コンジュゲート抗体、またはキメラ抗体である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、第1の抗原及び第2の抗原を認識する二重特異性抗体である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、第1の抗原は、ヒトTREM2またはその天然に存在するバリアントであり、第2の抗原は、(a)血液脳関門を通過する輸送を促進する抗原、(b)トランスフェリン受容体(TR)、インスリン受容体(HIR)、インスリン様成長因子受容体(IGFR)、低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質1及び2(LPR−1及び2)、ジフテリア毒素受容体、CRM197、ラマ単一ドメイン抗体、TMEM 30(A)、タンパク質形質導入ドメイン、TAT、Syn−B、ペネトラチン、ポリアルギニンペプチド、アンジオペプチド(angiopeptide)、ならびにANG1005からなる群から選択される血液脳関門を通過する輸送を促進する抗原、(c)病原ペプチドもしくはタンパク質、または病原核酸からなる群から選択される病原体(病原核酸は、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAであり、病原タンパク質は、アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、c9RANタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチドからなる群から選択される)、(d)免疫細胞上に発現されるリガンド及び/またはタンパク質(リガンド及び/またはタンパク質は、CD40、OX40、ICOS、CD28、CD137/4−1BB、CD27、GITR、PD−L1、CTLA−4、PD−L2、PD−1、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、及びホスファチジルセリンからなる群から選択される)、ならびに(e)1つまたは複数の腫瘍細胞上に発現されるタンパク質、脂質、多糖、または糖脂質。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、病原ペプチド、病原タンパク質、アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチド、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される病原体と特異的に結合する1つまたは複数の抗体と、またはCD40、OX40、ICOS、CD28、CD137/4−1BB、CD27、GITR、PD−L1、CTLA−4、PD−L2、PD−1、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、TREM1、TREM2、CD33、Siglec−5、Siglec−9、Siglec−11、ホスファチジルセリン、病原核酸、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNA、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫調節タンパク質と結合する1つまたは複数の抗体と組み合わせて使用される。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、個体に投与した場合、記憶を増加させる、認知障害を減少させる、またはその両方である。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒトTREM2及びマウスTREM2の両方に特異的に結合する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒトTREM2及びマウスTREM2について、約12.8nM〜約1.2nMの範囲である、または1.2nM未満である解離定数(KD)を有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、ヒトTREM2について、約12.8nM〜約2.9nMの範囲である、または2.9nM未満である解離定数(KD)を有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、マウスTREM2について、約10.4nM〜約1.2nMの範囲である、または1.2nMである解離定数(KD)を有する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、KDは、約4℃の温度で決定される。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、先天免疫細胞の増殖を阻害しない。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、1nM未満のKDで初代免疫細胞に結合する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、1%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、2%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、3%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する。先行実施形態のいずれかと組み合わせてもよい一部の実施形態では、抗体は、4%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する。
抗A2AR抗体、抗LAG−3抗体、抗ホスファチジルセリン抗体、抗CD27抗体、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、標準または調査的抗がん療法は、放射線療法、細胞傷害性化学療法、標的療法、ホルモン療法、イマチニブ(Gleevec(登録商標))、トラスツズマブ(Herceptin(登録商標))、ベバシズマブ(Avastin(登録商標))、オファツムマブ(Arzerra(登録商標))、リツキシマブ(Rituxan(登録商標)、MabThera(登録商標)、Zytux(登録商標))、冷凍療法、アブレーション、高周波アブレーション、養子細胞移入(ACT)、キメラ抗原受容体T細胞移入(CAR−T)、ワクチン療法、及びサイトカイン療法からなる群から選択される1つまたは複数の療法である。一部の実施形態では、方法はさらに、個体に、阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも1つの抗体を投与することを含む。一部の実施形態では、阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも1つの抗体を、単離抗体と組み合わせて投与する。一部の実施形態では、阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも1つの抗体は、抗CCL2抗体、抗CSF−1抗体、抗IL−2抗体、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、方法はさらに、個体に、刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも1つのアゴニスト抗体を投与することを含む。一部の実施形態では、刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも1つのアゴニスト抗体を、単離抗体と組み合わせて投与する。一部の実施形態では、刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも1つのアゴニスト抗体は、アゴニスト抗CD40抗体、アゴニスト抗OX40抗体、アゴニスト抗ICOS抗体、アゴニスト抗CD28抗体、アゴニスト抗CD137/4−1BB抗体、アゴニスト抗CD27抗体、アゴニスト抗グルココルチコイド誘導性TNFR関連タンパク質GITR抗体、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、方法はさらに、個体に、少なくとも1つの刺激性サイトカインを投与することを含む。一部の実施形態では、少なくとも1つの刺激性サイトカインを、単離抗体と組み合わせて投与する。一部の実施形態では、少なくとも1つの刺激性サイトカインは、TNF−α、IL−10、IL−6、IL−8、CRP、ケモカインタンパク質ファミリーのTGF−ベータメンバー、IL20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、OSM、CNTF、TGF−ベータ、IL−11、IL−12、IL−17、IL−8、IL−23、IFN−α、IFN−β、IL−2、IL−18、GM−CSF、G−CSF、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される。
当業者らによる従来の方法論、例えば、Sambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual 3d edition(2001) Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.;Current Protocols in Molecular Biology(F.M.Ausubel,et al.eds.,(2003));the series Methods in Enzymology(Academic Press,Inc.):PCR 2:A Practical Approach(M.J.MacPherson,B.D.Hames and G.R.Taylor eds.(1995)),Harlow and Lane,eds.(1988) Antibodies,A Laboratory Manual,and Animal Cell Culture(R.I.Freshney,ed.(1987));Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait,ed.,1984);Methods in Molecular Biology,Humana Press;Cell Biology:A Laboratory Notebook(J.E.Cellis,ed.,1998) Academic Press;Animal Cell Culture(R.I.Freshney),ed.,1987);Introduction to Cell and Tissue Culture(J.P.Mather and P.E.Roberts,1998) Plenum Press;Cell and Tissue Culture:Laboratory Procedures(A.Doyle,J.B.Griffiths,and D.G.Newell,eds.,1993−8) J.Wiley and Sons;Handbook of Experimental Immunology(D.M.Weir and C.C.Blackwell,eds.);Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells(J.M.Miller and M.P.Calos,eds.,1987);PCR:The Polymerase Chain Reaction,(Mullis et al.,eds.,1994);Current Protocols in Immunology(J.E.Coligan et al.,eds.,1991);Short Protocols in Molecular Biology(Wiley and Sons,1999);Immunobiology(C.A.Janeway and P.Travers,1997);Antibodies(P.Finch,1997);Antibodies:A Practical Approach(D.Catty.,ed.,IRL Press,1988−1989);Monoclonal Antibodies:A Practical Approach(P.Shepherd and C.Dean,eds.,Oxford University Press,2000);Using Antibodies:A Laboratory Manual(E.Harlow and D.Lane(Cold Spring Harbor Laboratory Press,1999);The Antibodies(M.Zanetti and J.D.Capra,eds.,Harwood Academic Publishers,1995);及びCancer:Principles and Practice of Oncology(V.T.DeVita et al.,eds.,J.B.Lippincott Company,1993)に記載されている、広く利用されている方法論などを使用する、本明細書に記載または参照される技術及び手順は、一般によく理解されており、一般的に用いられる。
本明細書で使用される場合、用語「予防する」は、個体における特定の疾患、障害、または状態の発生または再発に関する予防法の提供を含む。個体は、特定の疾患、障害、もしくは状態に罹患しやすい、かかりやすい、またはそのような疾患、障害、もしくは状態を発症するリスクがあり得るが、まだ疾患、障害、もしくは状態と診断されていない。
本開示は、1つまたは複数のアゴニストまたはアンタゴニスト活性を有する抗TREM2抗体(例えば、モノクローナル抗体)、そのような抗体の製造及び使用方法、そような抗体を含有する医薬組成物、そのような抗体をコードする核酸、ならびにそのような抗体をコードする核酸を含有する宿主細胞に関する。
一態様では、本開示は、本開示のTREM2タンパク質に結合し、細胞で発現されたTREM2タンパク質に結合した後に、1つまたは複数のTREM2活性を誘導する、及び/または1つまたは複数のTREM2活性を増強する抗体を提供する。
一態様では、本開示は、本開示のDAP12タンパク質にさらに結合し、細胞で発現されたDAP12に結合した後に、1つまたは複数のDAP12活性を調節し得る抗体を提供する。
本開示のある特定の態様は、TREM2に特異的に結合する抗体(例えば、モノクローナル抗体)に関する。一部の実施形態では、本開示の抗体は、成熟TREM2タンパク質と結合する。一部の実施形態では、本開示の抗体は、成熟TREM2タンパク質と結合し、成熟TREM2タンパク質は、細胞上に発現される。一部の実施形態では、本開示の抗体は、ヒト樹状細胞、ヒトマクロファージ、ヒト単球、ヒト破骨細胞、ヒト皮膚ランゲルハンス細胞、ヒトクッパー細胞、ヒトミクログリア、及びそれらの任意の組合せから選択される1つまたは複数のヒト細胞上に発現されるTREM2タンパク質と結合する。一部の実施形態では、本開示の抗体は、アゴニスト抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、不活性抗体である。一部の実施形態では、本開示の抗体は、アンタゴニスト抗体である。
本開示の抗TREM2抗体は一般に、細胞上に発現される1つまたは複数のTREM2タンパク質に結合する。抗体の1つのクラスは、アゴニスト抗体である。例えば、TREM2受容体は、シグナルを伝達するために、細胞表面上でクラスター化することを必要とすると考えられる。したがって、アゴニスト抗体は、例えば、TREM2受容体を刺激する独特の特徴を有し得る。例えば、それらは、受容体活性化に適合する適切なエピトープ特異性、ならびに細胞表面上で受容体クラスター化を誘導または保持する能力を有し得る。加えて、本開示のアゴニスト抗TREM2抗体は、1つまたは複数のTREM2リガンドの同時結合を遮断することなく、TREM2と結合する能力を示し得る。本開示の抗TREM2抗体はさらに、1つまたは複数のTREM2リガンドとの相加的及び/または相乗的機能的相互作用を示し得る。したがって、一部の実施形態では、本開示の1つまたは複数のTREM2リガンドと組み合わせて本開示の抗TREM2抗体に結合した場合のTREM2の最大活性は、飽和濃度のリガンドに単独で、または飽和濃度の抗体に単独で曝露した場合のTREM2の最大活性よりも高くなり得る(例えば、増強され得る)。加えて、所与の濃度のTREM2リガンドでのTREM2の活性は、抗体の存在下で高くなり得る(例えば、増強され得る)。したがって、一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、1つまたは複数のTREM2リガンドとの相加作用を有し、TREM2タンパク質に結合した場合に、1つまたは複数のTREM2活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、1つまたは複数のTREM2リガンドと相乗作用して、1つまたは複数のTREM2活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、抗体の非存在下で1つまたは複数のTREM2活性を誘導するための1つまたは複数のTREM2リガンドの効力と比較して、1つまたは複数のTREM2活性を誘導するための1つまたは複数のTREM2リガンドの効力を増加させる。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、TREM2の細胞表面クラスター化の非存在下で1つまたは複数のTREM2活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、TREM2の細胞表面クラスター化を誘導または保持することによって、1つまたは複数のTREM2活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、限定ではないが、B細胞及びミクログリア細胞を含む1つまたは複数の免疫細胞上に発現される1つまたは複数のFc−ガンマ受容体によってクラスター化される。一部の実施形態では、TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性の増強は、限定ではないが、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、単球、ミクログリア、マクロファージ、好中球、NK細胞、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、及びクッパー細胞を包含する初代細胞で、または細胞系で測定され、TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性の増強は、例えば、インビトロ細胞アッセイを利用して測定される。
骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の抗腫瘍細胞増殖活性の活性化 、(v)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の抗腫瘍細胞転移活性の活性化 、(w)1つまたは複数のITAMモチーフ含有受容体の活性化(任意選択で、1つまたは複数のITAMモチーフ含有受容体は、TREM1、TREM2、FcgR、DAP10、及びDAP12から選択される) 、(x)1つまたは複数のパターン認識受容体(PRR)によるシグナル伝達の活性化(任意選択で、1つまたは複数のPRRは、病原体関連分子パターン(PAMP)を識別する受容体、損傷関連分子パターン(DAMP)を識別する受容体、及びそれらの任意の組合せから選択される) 、(y)モチーフD/Ex0−2YxxL/IX6−8YxxL/I(配列番号883)を含む1つまたは複数の受容体の活性化 、(z)1つまたは複数のToll様受容体によるシグナル伝達の活性化 、(aa)JAK−STATシグナル伝達経路の活性化 、(bb)活性化B細胞の核因子カッパ軽鎖エンハンサー(NFκB)の活性化 、(cc)ITAMモチーフ含有受容体のリン酸化 、(dd)1つまたは複数の炎症性受容体の発現の調節(任意選択で、1つまたは複数の炎症性受容体は、CD86を含み、1つまたは複数の炎症性受容体は、ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の上に発現される) 、(ee)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の発現の増加 、(gg)かく乱されたTREM2/DAP12依存性遺伝子発現の正常化 、(ff)1つまたは複数のITAM依存性遺伝子の発現の増加(任意選択で、1つまたは複数のITAM依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子によって活性化される) 、(gg)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の分化の阻害 、(hh)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の機能性の阻害 、(ii)腫瘍への免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の浸潤の減少 、(jj)腫瘍、末梢血、または他のリンパ臓器における腫瘍促進性骨髄系/顆粒球系免疫抑制細胞の数の減少 、(kk)骨髄由来サプレッサー細胞の腫瘍促進活性の阻害 、(ll)腫瘍または末梢血における腫瘍促進性サイトカインの発現の減少(任意選択で、腫瘍促進性サイトカインは、TGF−ベータまたはIL−10である) 、(mm)腫瘍促進性FoxP3+調節性Tリンパ球の腫瘍浸潤の減少 、(nn)腫瘍死滅能を有する腫瘍特異的Tリンパ球の活性化の増加 、(oo)腫瘍体積の減少 、(pp)腫瘍成長速度の低下 、(qq)抗腫瘍T細胞応答を調節する1つまたは複数の免疫療法の有効性の増加(任意選択で、1つまたは複数の免疫療法は、PD1/PDL1遮断、CTLA−4遮断、及びがんワクチンから選択される) 、(rr)PLCγ/PKC/カルシウム可動化の阻害 、ならびに(uu)PI3K/Akt、Ras/MAPKシグナル伝達の阻害 、(ss)樹状細胞、マクロファージ、単球、及び/またはミクログリアによる食作用の増加 、(tt)細胞表面上でのTREM2クラスター化の誘導または保持 、(xx)DAP12へのTREM2結合 、(uu)TREM2リン酸化 、(vv)DAP12リン酸化 、(ww)TREM2リン酸化 、(xx)Sykキナーゼを包含する1つまたは複数のSRCファミリーチロシンキナーゼの活性化 、(yy)記憶の増加 、ならびに(zz)認知障害の減少が含まれ得る。
血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチドから選択され、腫瘍細胞は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、子宮内膜癌、腎臓癌、腎臓細胞癌、腎盂癌、白血病、肺癌、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、膵臓癌、前立腺癌、卵巣癌、線維肉腫、及び甲状腺癌から選択されるがんからのものである) 、(u)アポトーシスニューロン、神経組織デブリ、非神経組織デブリ、細菌、他の異物、病原タンパク質、病原ペプチド、病原核酸、または腫瘍の細胞のうちの1つまたは複数の食作用の活性化 、(任意選択で、病原核酸は、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAであり、病原タンパク質は、アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、c9RANタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチドから選択され、腫瘍細胞は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、子宮内膜癌、腎臓癌、腎臓細胞癌、腎盂癌、白血病、肺癌、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、膵臓癌、前立腺癌、卵巣癌、線維肉腫、及び甲状腺癌から選択されるがんからのものである) 、(p)腫瘍細胞上のTREM2リガンドへの結合 、(q)好中球、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、単球、ミクログリア、及びマクロファージから選択される細胞上のTREM2リガンドへの結合 、(r)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数による腫瘍細胞死滅の活性化 、(s)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の抗腫瘍細胞増殖活性の活性化 、(t)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の抗腫瘍細胞転移活性の活性化 、(y)1つまたは複数のITAMモチーフ含有受容体の活性化(任意選択で、1つまたは複数のITAMモチーフ含有受容体は、TREM1、TREM2、FcgR、DAP10、及びDAP12から選択される) 、(z)1つまたは複数のパターン認識受容体(PRR)によるシグナル伝達の活性化(任意選択で、1つまたは複数のPRRは、病原体関連分子パターン(PAMP)を識別する受容体、損傷関連分子パターン(DAMP)を識別する受容体、及びそれらの任意の組合せから選択される) 、(aa)モチーフD/Ex0−2YxxL/IX6−8YxxL/I(配列番号883)を含む1つまたは複数の受容体の活性化 、(bb)1つまたは複数のToll様受容体によるシグナル伝達の活性化 、(cc)JAK−STATシグナル伝達経路の活性化 、(dd)活性化B細胞の核因子カッパ軽鎖エンハンサー(NFκB)の活性化 、(dd)ITAMモチーフ含有受容体のリン酸化 、(ee)1つまたは複数の炎症性受容体の発現の調節(任意選択で、1つまたは複数の炎症性受容体は、CD86を含み、1つまたは複数の炎症性受容体は、ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の上に発現される) 、(ff)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の発現の増加 、(gg)かく乱されたTREM2/DAP12依存性遺伝子発現の正常化 、(hh)1つまたは複数のITAM依存性遺伝子の発現の増加(任意選択で、1つまたは複数のITAM依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子によって活性化される) 、(ii)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の分化の阻害 、(jj)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の機能性の阻害 、(nn)腫瘍への免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の浸潤の減少 、(kk)腫瘍、末梢血、または他のリンパ臓器における腫瘍促進性骨髄系/顆粒球系免疫抑制細胞の数の減少 、(ll)骨髄由来サプレッサー細胞の腫瘍促進活性の阻害 、(mm)腫瘍または末梢血における腫瘍促進性サイトカインの発現の減少(任意選択で、腫瘍促進性サイトカインは、TGF−ベータまたはIL−10である) 、(nn)腫瘍促進性FoxP3+調節性Tリンパ球の腫瘍浸潤の減少 、(oo)腫瘍死滅能を有する腫瘍特異的Tリンパ球の活性化の増加 、(pp)腫瘍体積の減少 、(qq)腫瘍成長速度の低下 、(rr)抗腫瘍T細胞応答を調節する1つまたは複数の免疫療法の有効性の増加(任意選択で、1つまたは複数の免疫療法は、PD1/PDL1遮断、CTLA−4遮断、及びがんワクチンから選択される) 、(ww)PLCγ/PKC/カルシウム可動化の阻害 、ならびに(xx)PI3K/Akt、Ras/MAPKシグナル伝達の阻害 、(xx)樹状細胞、マクロファージ、単球、及び/またはミクログリアによる食作用の増加 、(yy)細胞表面上でのTREM2クラスター化の誘導または保持 、(zz)DAP12へのTREM2結合 、(aaa)TREM2リン酸化 、(bbb)DAP12リン酸化 、(ccc)TREM2自己リン酸化 、(ddd)Sykキナーゼを包含する1つまたは複数のSRCファミリーチロシンキナーゼの活性化 、(eee)C1qa、C1qB、C1qC、C1s、C1R、C4、C2、C3、ITGB2、HMOX1、LAT2.CASP1、CSTA、VSIG4、MS4A4A、C3AR1、GPX1、TyroBP、ALOX5AP、ITGAM、SLC7A7、CD4、ITGAX、PYCARD、及びVEGFからなる群から選択される1つまたは複数のタンパク質の発現の調節 、(fff)記憶の増加 、ならびに(ggg)認知障害の減少。有用なアッセイには、ウエスタンブロット(例えば、チロシン−リン酸化DAP12もしくはトレオニン/セリン−リン酸化PI3Kキナーゼ基質について)、ELISA(例えば、分泌されたインターロイキンもしくはサイトカイン分泌について)、FACS(例えば、TREM2に結合する抗TREM2について)、免疫細胞化学(例えば、チロシン−リン酸化DAP12もしくはトレオニン/セリン−リン酸化PI3Kキナーゼ基質について)、レポーター遺伝子アッセイ(例えば、TLR活性化について)、樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び/もしくはミクログリアの生存及び/もしくは機能の増加、マクロファージ、樹状細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、単球、破骨細胞、及び/もしくはミクログリア細胞による、アポトーシスニューロン、損傷シナプス、アミロイドベータもしくはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスサイレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルゾリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチド、神経組織デブリ、非神経組織デブリ、細菌、他の異物、病原タンパク質、病原ペプチド、病原核酸、または腫瘍細胞の食作用の増加、細胞骨格再構成の増加、ならびにミクログリア炎症誘発性応答の減少、または当技術分野で公知の他のアッセイが含まれ得る。
表A:Fcガンマ受容体に結合することができる例示的な抗TREM2抗体Fcアイソタイプ
本開示の抗体の別のクラスは、不活性抗体を含む。本明細書で使用される場合、「不活性」抗体は、標的抗原に特異的に結合するが、抗原機能を調節(例えば、低減/阻害または活性化/誘導)しない抗体を指す。例えば、TREM2の場合、不活性抗体は、リガンド結合及び/またはTREM2活性を調節しない。理論に束縛されることは望まないが、細胞表面上でTREM2をクラスター化する能力を有しない抗体は、受容体活性化と適合するエピトープ特異性を有する場合でさえ、不活性抗体であり得ると考えられている。
本開示の抗体の第3のクラスは、アンタゴニスト抗体を含む。一部の実施形態では、TREM2タンパク質と結合する抗体は、TREM2と結合し、TREM2と1つまたは複数のリガンド(複数可)との間の相互作用を防止すること、またはリガンドの存在下で、TREM2の細胞外ドメインから細胞質へのシグナルの伝達を防止することのいずれかによって、1つまたは複数のTREM2活性を阻害するアンタゴニスト抗体を含んでもよい。一部の実施形態では、本開示のアンタゴニスト抗体は、本開示のアゴニスト抗体のエピトープ特異性を有するが、Fcg受容体に結合することができず、したがって、例えば、TREM2受容体をクラスター化することが不可能なFcドメインを有し得る。
一部の実施形態では、不活性及び/またはアンタゴニスト抗TREM抗体は、以下の表Bに列挙されているFcアイソタイプを有する。
表B:Fcガンマ受容体への結合が減少した例示的な抗TREM2抗体Fcアイソタイプ
一部の実施形態では、本明細書に記載のIgG1バリアントのうちの1つまたは複数は、補体活性化を排除するために、A330L変異(Lazar et al.,(2006) Proc Natl Acad Sci USA,103:4005−4010)、またはL234F、L235E、及び/またはP331S変異(Sazinsky et al.,(2008) Proc Natl Acad Sci USA,105:20167−20172)のうちの1つまたは複数と組み合わされてもよい(アミノ酸位置は、EUまたはKabatナンバリング規則による)。一部の実施形態では、本明細書に記載のIgGバリアントは、ヒト血清中での抗体半減期を増加させるために、1つまたは複数の変異と組み合わされてもよい(例えば、EUまたはKabatナンバリング規則によるM252Y、S254T、256E変異)(Dall’Acqua et al.,(2006) J Biol Chem,281:23514−23524;及びStrohl e al.,(2009) Current Opinion in Biotechnology,20:685−691)。
一部の実施形態では、本開示の単離抗TREM2抗体は、単離抗体の非存在下でTREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性と比較して、TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合と競合することなく、または別段に遮断することなく、1つまたは複数のTREM2活性を増強する。一部の実施形態では、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、多価抗体、またはキメラ抗体である。そのような抗体の例示的な記載は、本開示を通じて見出される。一部の実施形態では、抗体は、第1の抗原及び第2の抗原を認識する二重特異性抗体である。
腫瘍細胞は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、子宮内膜癌、腎臓癌、腎臓細胞癌、腎盂癌、白血病、肺癌、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、膵臓癌、前立腺癌、卵巣癌、線維肉腫、及び甲状腺癌から選択されるがんからのものである)、(u)アポトーシスニューロン、神経組織デブリ、非神経組織デブリ、細菌、他の異物、病原タンパク質、病原ペプチド、病原核酸、または腫瘍細胞のうちの1つまたは複数の食作用の活性化、(任意選択で、病原核酸は、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAであり、病原タンパク質は、アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、c9RANタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチドから選択され、腫瘍細胞は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、子宮内膜癌、腎臓癌、腎臓細胞癌、腎盂癌、白血病、肺癌、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、膵臓癌、前立腺癌、卵巣癌、線維肉腫、及び甲状腺癌から選択されるがんからのものである)、(p)腫瘍細胞上のTREM2リガンドへの結合、(q)好中球、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、単球、ミクログリア、及びマクロファージから選択される細胞の上のTREM2リガンドへの結合、(r)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数による腫瘍細胞死滅の活性化、(s)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の抗腫瘍細胞増殖活性の活性化、(t)ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の抗腫瘍細胞転移活性の活性化、(y)1つまたは複数のITAMモチーフ含有受容体の活性化(任意選択で、1つまたは複数のITAMモチーフ含有受容体は、TREM1、TREM2、FcgR、DAP10、及びDAP12から選択される)、(z)1つまたは複数のパターン認識受容体(PRR)によるシグナル伝達の活性化(任意選択で、1つまたは複数のPRRは、1つまたは複数のPRRは、病原体関連分子パターン(PAMP)を識別する受容体、損傷関連分子パターン(DAMP)を識別する受容体、及びそれらの任意の組合せから選択される)、(aa)モチーフD/Ex0−2YxxL/IX6−8YxxL/I(配列番号883)を含む1つまたは複数の受容体の活性化、(bb)1つまたは複数のToll様受容体によるシグナル伝達の活性化、(cc)JAK−STATシグナル伝達経路の活性化、(dd)活性化B細胞の核因子カッパ軽鎖エンハンサー(NFκB)の活性化、(dd)ITAMモチーフ含有受容体のリン酸化、(ee)1つまたは複数の炎症性受容体の発現の調節(任意選択で、1つまたは複数の炎症性受容体は、CD86を含み、1つまたは複数の炎症性受容体は、ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、好中球、T細胞、Tヘルパー細胞、または細胞傷害性T細胞のうちの1つまたは複数の上に発現される)、(ff)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の発現の増加、(gg)かく乱されたTREM2依存性遺伝子発現の正常化、(hh)1つまたは複数のITAM依存性遺伝子の発現の増加(任意選択で、1つまたは複数のITAM依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子によって活性化される)、(ii)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の分化の阻害、(jj)免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の機能性の阻害、(kk)腫瘍への免疫抑制樹状細胞、免疫抑制マクロファージ、骨髄由来サプレッサー細胞、腫瘍関連マクロファージ、免疫抑制好中球、及び調節性T細胞のうちの1つまたは複数の浸潤の減少、(ll)腫瘍、末梢血、または他のリンパ臓器における腫瘍促進性骨髄系/顆粒球系免疫抑制細胞の数の減少、(mm)骨髄由来サプレッサー細胞の腫瘍促進活性の阻害、(nn)腫瘍または末梢血における腫瘍促進性サイトカインの発現の減少(任意選択で、腫瘍促進性サイトカインは、TGF−ベータまたはIL−10である)、(oo)腫瘍促進性FoxP3+調節性Tリンパ球の腫瘍浸潤の減少、(pp)腫瘍死滅能を有する腫瘍特異的Tリンパ球の活性化の増加、(qq)腫瘍体積の減少、(rr)腫瘍成長速度の低下、(ss)抗腫瘍T細胞応答を調節する1つまたは複数の免疫療法の有効性の増加(任意選択で、1つまたは複数の免疫療法は、PD1/PDL1遮断、CTLA−4遮断、及びがんワクチンから選択される)、(tt)PLCγ/PKC/カルシウム可動化の阻害、ならびに(uu)PI3K/Akt、Ras/MAPKシグナル伝達の阻害、(vv)樹状細胞、マクロファージ、単球、及び/またはミクログリアによる食作用の増加、(ww)細胞表面上でのTREM2クラスター化の誘導または保持、(xx)DAP12へのTREM2結合、(yy)TREM2リン酸化、(zz)DAP12リン酸化、(aaa)Sykキナーゼを包含する1つまたは複数のSRCファミリーチロシンキナーゼの活性化、(bbb)DAP12/TREM2複合体へのSyk、ZAP70、またはその両方の動員、(ccc)C1qa、C1qB、C1qC、C1s、C1R、C4、C2、C3、ITGB2、HMOX1、LAT2.CASP1、CSTA、VSIG4、MS4A4A、C3AR1、GPX1、TyroBP、ALOX5AP、ITGAM、SLC7A7、CD4、ITGAX、PYCARD、及びVEGFから選択される1つまたは複数のタンパク質の発現の調節、(ddd)記憶の増加、ならびに(eee)認知障害の減少が含まれる。
本開示のある特定の態様は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基19〜174;29〜112;113〜174;35〜49、35〜49及び140〜150;39〜49、39〜49及び63〜77;51〜61;55〜62;55〜62、104〜109、及び148〜158;55〜62、104〜109、及び160〜166;55〜65、55〜65及び124〜134;63〜73;63〜77;104〜109;117〜133;124〜134;137〜146;139〜147;139〜149;140〜150;140〜146;140〜143;142〜152;146〜154;148〜158;149〜157;149及び150;151〜155;154〜161;156〜170;160〜166;もしくは162〜165内、または配列番号1のアミノ酸残基19〜174;29〜112;113〜174;35〜49、35〜49及び140〜150;39〜49、39〜49及び63〜77;51〜61;55〜62;55〜62、104〜109、及び148〜158;55〜62、104〜109、及び160〜166;55〜65、55〜65及び124〜134;63〜73;63〜77;104〜109;117〜133;124〜134;137〜146;139〜147;139〜149;140〜150;140〜146;140〜143;142〜152;146〜154;148〜158;149〜157;149及び150;151〜155;154〜161;156〜170;160〜166;または162〜165に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する抗TREM2抗体を提供する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基35〜49内、または配列番号1のアミノ酸残基35〜49に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基35〜49及び140〜150内、または配列番号1のアミノ酸残基35〜49及び140〜150に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基39〜49内、または配列番号1のアミノ酸残基39〜49に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基39〜49及び63〜77内、または配列番号1のアミノ酸残基39〜49及び63〜77に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基51〜61内、または配列番号1のアミノ酸残基51〜61に対応するTREM2ホモログまたはオルソログ上のアミノ酸残基内1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基55〜62内、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び148〜158内、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び148〜158に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び160〜166内、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び160〜166に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基55〜65内、または配列番号1のアミノ酸残基55〜65に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基55〜65及び124〜134内、または配列番号1のアミノ酸残基55〜65及び124〜134に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基63〜73内、または配列番号1のアミノ酸残基63〜73に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基63〜77内、または配列番号1のアミノ酸残基63〜77に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基104〜109内、または配列番号1のアミノ酸残基104〜109に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基117〜133内、または配列番号1のアミノ酸残基117〜133に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基124〜134内、または配列番号1のアミノ酸残基124〜134に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基137〜146内、または配列番号1のアミノ酸残基137〜146に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基139〜147内、または配列番号1のアミノ酸残基139〜147に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基139〜149内、または配列番号1のアミノ酸残基139〜149に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基140〜150内、または配列番号1のアミノ酸残基140〜150に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基140〜146内、または配列番号1のアミノ酸残基140〜146に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基140〜143内、または配列番号1のアミノ酸残基140〜143に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基142〜152内、または配列番号1のアミノ酸残基142〜152に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基146〜154内、または配列番号1のアミノ酸残基146〜154に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基148〜158内、または配列番号1のアミノ酸残基148〜158に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基149〜157内、または配列番号1のアミノ酸残基149〜157に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基149及び150内、または配列番号1のアミノ酸残基149及び150に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基154〜161内、または配列番号1のアミノ酸残基154〜161に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基156〜170内、または配列番号1のアミノ酸残基156〜170に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基160〜166内、または配列番号1のアミノ酸残基160〜166に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗TREM2抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)のアミノ酸残基162〜165内、または配列番号1のアミノ酸残基162〜165に対応するTREM2ホモログもしくはオルソログ上のアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、(a)表2A、2B、3A、3B、4A、4B、7A、及び7Bに列挙されている、または1A7、3A2、3B10、6G12、6H6、7A9、7B3、8A1、8E10、8F11、8F8、9F5、9G1、9G3、10A9、10C1、11A8、12E2、12F9、12G6、2C7、2F5、3C1、4D7、4D11、6C11、6G12、7A3、7C5、7E9、7F6、7G1、7H1、8C3、8F10、12A1、1E9、2C5、3C5、4C12、4F2、5A2、6B3、7D1、7D9、11D8、8A12、10E7、10B11、10D2、7D5、2A7、3G12、6H9、8G9、9B4、10A1、11A8、12F3、2F8、10E3、1H7、2F6、2H8、3A7、7E5、7F8、11H5、7C5、4F11、12D9、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2、ならびにそれらの任意の組合せから選択される抗体のいずれか1つのHVR−L1、HVR−L2、及びHVR−L3から選択される少なくとも1つ、2つ、または3つのHVRを含む軽鎖可変領域;及び/または(b)表2A、2B、3A、3B、4A、4B、7A、及び7Bに列挙されている、または1A7、3A2、3B10、6G12、6H6、7A9、7B3、8A1、8E10、8F11、8F8、9F5、9G1、9G3、10A9、10C1、11A8、12E2、12F9、12G6、2C7、2F5、3C1、4D7、4D11、6C11、6G12、7A3、7C5、7E9、7F6、7G1、7H1、8C3、8F10、12A1、1E9、2C5、3C5、4C12、4F2、5A2、6B3、7D1、7D9、11D8、8A12、10E7、10B11、10D2、7D5、2A7、3G12、6H9、8G9、9B4、10A1、11A8、12F3、2F8、10E3、1H7、2F6、2H8、3A7、7E5、7F8、11H5、7C5、4F11、12D9、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2、ならびにそれらの任意の組合せから選択される抗体のいずれか1つのHVR−H1、HVR−H2、及びHVR−H3から選択される少なくとも1つ、2つ、または3つのHVRを含む重鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、HVR−L1、HVR−L2、HVR−L3、HVR−H1、HVR−H2、及びHVR−H3は、表2A、2B、3A、3B、4A、4B、7A、及び7Bで示されているとおりの、または1A7、3A2、3B10、6G12、6H6、7A9、7B3、8A1、8E10、8F11、8F8、9F5、9G1、9G3、10A9、10C1、11A8、12E2、12F9、12G6、2C7、2F5、3C1、4D7、4D11、6C11、6G12、7A3、7C5、7E9、7F6、7G1、7H1、8C3、8F10、12A1、1E9、2C5、3C5、4C12、4F2、5A2、6B3、7D1、7D9、11D8、8A12、10E7、10B11、10D2、7D5、2A7、3G12、6H9、8G9、9B4、10A1、11A8、12F3、2F8、10E3、1H7、2F6、2H8、3A7、7E5、7F8、11H5、7C5、4F11、12D9、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2、ならびにそれらの任意の組合せから選択される抗体に由来するEUもしくはKabat HVR、Chothia HVR、または接触HVR配列を含む。
配列番号85のアミノ酸配列を含む、(b)HVR−L1は、配列番号9のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号24のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号34のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号48のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号66のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号85のアミノ酸配列を含む、(c)HVR−L1は、配列番号10のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号25のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号49のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号67のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号86のアミノ酸配列を含む、(d)HVR−L1は、配列番号12のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号26のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号37のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号50のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号68のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号87のアミノ酸配列を含む、(e)HVR−L1は、配列番号11のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号26のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号36のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号51のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号69のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号88のアミノ酸配列を含む、(f)HVR−L1は、配列番号13のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号27のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号38のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号52のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号70のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号89のアミノ酸配列を含む、(g)HVR−L1は、配列番号14のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号39のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号53のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号71のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号90のアミノ酸配列を含む、(h)HVR−L1は、配列番号13のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号27のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号38のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号52のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号70のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号89のアミノ酸配列を含む、(i)HVR−L1は、配列番号13のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号27のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号38のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号52のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号70のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号89のアミノ酸配列を含む、(j)HVR−L1は、配列番号15のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号40のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号54のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号72のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号91のアミノ酸配列を含む、(k)HVR−L1は、配列番号11のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号26のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号36のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号51のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号69のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号88のアミノ酸配列を含む、(l)HVR−L1は、配列番号16のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号55のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号73のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号92のアミノ酸配列を含む、(m)HVR−L1は、配列番号15のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号40のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号54のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号72のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号91のアミノ酸配列を含む、(n)HVR−L1は、配列番号581のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号582のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号56のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号74のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号93のアミノ酸配列を含む、(o)HVR−L1は、配列番号17のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号30のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号41のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号57のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号75のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号94のアミノ酸配列を含む、(p)HVR−H1は、配列番号58のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号76のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号95のアミノ酸配列を含む、(q)HVR−L1は、配列番号18のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号31のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号42のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号59のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号77のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号96のアミノ酸配列を含む、(r)HVR−L1は、配列番号19のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号43のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号60のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号78のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号97のアミノ酸配列を含む、(s)HVR−L1は、配列番号20のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号44のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号61のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号79のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号98のアミノ酸配列を含む、(t)HVR−L1は、配列番号21のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号32のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号45のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号62のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号80のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号99のアミノ酸配列を含む、(u)HVR−L1は、配列番号15のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号33のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号40のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号54のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号81のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号91のアミノ酸配列を含む、(v)HVR−L1は、配列番号22のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号46のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号63のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号82のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号100のアミノ酸配列を含む、(w)HVR−L1は、配列番号23のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号47のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号64のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号83のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号101のアミノ酸配列を含む、(x)HVR−L1は、配列番号16のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号65のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号84のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号102のアミノ酸配列を含む、(y)HVR−L1は、配列番号581のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号582のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号56のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号585のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号588のアミノ酸配列を含む、(z)HVR−L1は、配列番号10のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号29のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号49のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号586のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号86のアミノ酸配列を含む、または(aa)HVR−L1は、配列番号14のアミノ酸配列を含み、HVR−L2は、配列番号28のアミノ酸配列を含み、HVR−L3は、配列番号583のアミノ酸配列を含み、HVR−H1は、配列番号584のアミノ酸配列を含み、HVR−H2は、配列番号587のアミノ酸配列を含み、かつHVR−H3は、配列番号589のアミノ酸配列を含む。
ヒトTREM2及びマウスTREM2についての抗TREM2抗体の解離定数(KD)は、15nM未満、14.5nM未満、14nM未満、13.5nM未満、13nM未満、12.9nM未満、12.8nM未満、12.7nM未満、12.6nM未満、12.5nM未満、12.4nM未満、12.3nM未満、12.2nM未満、12.1nM未満、12nM未満、11.5nM未満、11nM未満、10.9nM未満、10.8nM未満、10.7nM未満、10.6nM未満、10.5nM未満、10.4nM未満、10.3nM未満、10.2nM未満、10.1nM未満、10nM未満、9.5nM未満、9nM未満、8.5nM未満、8nM未満、7.5nM未満、7nM未満、6.9nM未満、6.8nM未満、6.7nM未満、6.6nM未満、6.5nM未満、6.4nM未満、6.3nM未満、6.2nM未満、6.1nM未満、6nM未満、5.5nM未満、5nM未満、4.5nM未満、4nM未満、3.5nM未満、3.4nM未満、3.3nM未満、3.2nM未満、3.1nM未満、3nM未満、2.9nM未満、2.8nM未満、2.7nM未満、2.6nM未満,2.5nM未満、2.4nM未満、2.3nM未満、2.2nM未満、2.1nM未満,2nM未満、1.9nM未満、1.8nM未満、1.7nM未満、1.6nM未満、1.5nM未満、1.4nM未満、1.3nM未満、1.2nM未満、1.1nM未満、1nM未満、0.95nM未満、または0.9nM未満であり得る。一部の実施形態では、解離定数は、約12.8nM〜約1.2nM、または1.2nM未満の範囲である。一部の実施形態では、ヒトTREM2についての抗TREM2抗体の解離定数は、約12.8nM〜約2.9nM、または2.9nM未満の範囲である。一部の実施形態では、マウスTREM2についての抗TREM2抗体の解離定数は、約10.4nM〜約1.2nM、または1.2nM未満の範囲である。
本開示の特定の態様は、本開示のTREM2タンパク質及び第2の抗原に結合する二重特異性抗体に関する。二重特異性抗体を生成する方法は、当技術分野で周知であり、本明細書に記載されている。一部の実施形態では、本開示の二重特異性抗体は、ヒトTREM2(配列番号1)の1つもしくは複数のアミノ酸残基、または配列番号1のアミノ酸残基に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基に結合する。他の実施形態では、本開示の二重特異性抗体はまた、ヒトDAP12(配列番号887)の1つもしくは複数のアミノ酸残基、または配列番号887のアミノ酸残基に対応するDAP12タンパク質上のアミノ酸残基に結合する。
本開示のある特定の態様は、ヒトTREM2、ヒトTREM2の天然に存在するバリアント、及びヒトTREM2の疾患バリアントのうちの1つまたは複数に結合する抗体フラグメントに関する。一部の実施形態では、抗体フラグメントは、Fab、Fab’、Fab’−SH、F(ab’)2、FvまたはscFvフラグメントである。一部の実施形態では、抗体フラグメントを、a)血液脳関門を越える輸送を促進する抗原、(b)トランスフェリン受容体(TR)、インスリン受容体(HIR)、インスリン様成長因子受容体(IGFR)、低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質1及び2(LPR−1及び2)、ジフテリア毒素受容体、CRM197、ラマ単一ドメイン抗体、TMEM30(A)、タンパク質形質導入ドメイン、TAT、Syn−B、ペネトラチン、ポリ−アルギニンペプチド、アンジオペプペプチド、及びANG1005から選択される、血液脳関門を越える輸送を促進する抗原、(c)アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、c9RANタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチドから選択される病原タンパク質、ならびに(d)免疫細胞上に発現されるリガンド及び/またはタンパク質(CD40、OX40、ICOS、CD28、CD137/4−1BB、CD27、GITR、PD−L1、CTLA−4、PD−L2、PD−1、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、及びホスファチジルセリンから選択されるリガンド及び/またはタンパク質)、ならびに(e)1つまたは複数の腫瘍細胞上に発現されるタンパク質、脂質、多糖、または糖脂質及びそれらの任意の組合せから選択される病原タンパク質に特異的に結合する1つまたは複数の抗体と組み合わせて使用する。
本明細書に記載の抗体のいずれかはさらに、フレームワークを含む。一部の実施形態では、フレームワークは、ヒト免疫グロブリンフレームワークである。例えば、一部の実施形態では、抗体(例えば、抗TREM2抗体)は、上記実施形態のいずれかのようなHVRを含み、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークをさらに含む。ヒト免疫グロブリンフレームワークは、ヒト抗体の一部であってもよい、または非ヒト抗体は、1つまたは複数の内因性のフレームワークを、ヒトフレームワーク領域(複数可)と置き換えることによってヒト化されていてもよい。ヒト化のために使用され得るヒトフレームワーク領域には、限定されないが、「ベストフィット」法を使用して選択されるフレームワーク領域(例えば、Sims et al.J.Immunol.151:2296(1993)を参照されたい)、軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域(例えば、Carter et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA,89:4285(1992)及びPresta et al.J.Immunol.,151:2623(1993)を参照されたい)、ヒト成熟(体細胞成熟)フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系フレームワーク領域(例えば、Almagro and Fransson,Front.Biosci.13:1619−1633(2008)を参照されたい)、ならびにスクリーニングFRライブラリに由来するフレームワーク領域(例えば、Baca et al.,J.Biol.Chem.272:10678−10684(1997)及びRosok et al.,J.Biol.Chem.271:22611−22618(1996)を参照されたい)が含まれる。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されたTREM2タンパク質に結合した後に、PI3K活性化を誘導し得る。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞表面上に発現されたTREM2に結合した後に、脳において抗炎症性メディエーターを調節する(例えば、増加または減少させる)。本開示の抗TREM2抗体は、細胞表面でTREM2タンパク質に結合した後に、サイトカイン(例えば、抗炎症性メディエーター)の発現を調節する、及び/または炎症誘発性メディエーターの発現を調節する。細胞がTREM2シグナル伝達の不全によって死滅すると、それらは、炎症誘発性応答を誘導する。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞表面上に発現されたTREM2に結合した後に、炎症誘発性メディエーターを調節し得る(例えば、増加または減少させ得る)。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されたTREM2に結合した後に、細胞外シグナル調節キナーゼ(ERK)リン酸化を誘導し得る。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、脾臓チロシンキナーゼ(Syk)リン酸化を誘導し得る。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、TREM2自己リン酸化を誘導し得る。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、DAP12へのTREM2の結合を誘導し得る。他の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞上に発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、DAP12リン酸化を誘導し得る。他の実施形態では、TREM2媒介性DAP12リン酸化は、1つまたは複数のSRCファミリーチロシンキナーゼによって誘導される。Srcファミリーチロシンキナーゼの例には、限定ではないが、Src、Syk、Yes、Fyn、Fgr、Lck、Hck、Blk、Lyn、及びFrkが含まれる。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されたTREM2に結合した後に、C−Cケモカイン受容体7(CCR7)の発現を調節し得る(例えば、増加させ得る、または減少させ得る)。発現の調節には、限定ではないが、遺伝子発現の調節、転写発現の調節、またはタンパク質発現の調節が含まれ得る。遺伝子、転写物(例えば、mRNA)、及び/またはタンパク質発現を決定するための当技術分野で公知の任意の方法を使用してよい。例えば、ノーザンブロット分析を、抗炎症性メディエーター遺伝子発現レベルを決定するために使用してよく、RT−PCRを、抗炎症性メディエーター転写のレベルを決定するために使用してよく、ウエスタンブロット分析を、抗炎症性メディエータータンパク質レベルを決定するために使用してよい。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、その発現が炎症の誘導で増加する1つまたは複数の遺伝子の発現を調節し得る(例えば、増加または減少させ得る)。そのような遺伝子の例には、限定ではないが、Fabp3、Fabp5、及びLDRが含まれる。発現の調節には、限定ではないが、遺伝子発現の調節、転写発現の調節、またはタンパク質発現の調節が含まれ得る。遺伝子、転写物(例えば、mRNA)、及び/またはタンパク質発現を決定するための当技術分野で公知の任意の方法を使用してよい。例えば、ノーザンブロット分析を、抗炎症性メディエーター遺伝子発現レベルを決定するために使用してよく、RT−PCRを、抗炎症性メディエーター転写のレベルを決定するために使用してよく、ウエスタンブロット分析を、抗炎症性メディエータータンパク質レベルを決定するために使用してよい。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、CD8+T細胞、CD4+T細胞、及び/または調節性T細胞を含む、抗原特異的T細胞の機能を刺激または調節する骨髄由来樹状細胞の能力を増強する、及び/または正常化し得る。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されたTREM2に結合した後に、破骨細胞産生を誘導する、及び/または破骨細胞形成速度を上昇させ得る。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞(ミクログリア)の増殖、生存、及び/または機能を増加させ得る。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、1つまたは複数の先天免疫細胞の成長(例えば、増殖及び/または生存)を阻害しない。
一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体は、細胞で発現されるTREM2タンパク質に結合した後に、アポトーシスニューロン、神経系の神経組織デブリ、神経系の非神経組織デブリ、細菌、他の異物、病原タンパク質、病原ペプチド、病原核酸、または腫瘍細胞のうちの1つまたは複数のクリアランス及び/または食作用を誘導し得る。ある特定の実施形態では、病原タンパク質には、限定ではないが、アミロイドベータまたはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、及びグリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含むリピート関連非ATG(RAN)翻訳産物が含まれる。ある特定の実施形態では、病原核酸には、限定ではないが、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAが含まれる。
一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗TREM2抗体は、転写因子の活性化T細胞核内因子(NFAT)ファミリーの1つまたは複数の転写因子などのTREM2依存性遺伝子の活性及び/または発現を増加させ得る。別法では、本開示のアンタゴニスト抗TREM2抗体は、転写因子のNFATファミリーの1つまたは複数の転写因子などのTREM2依存性遺伝子の活性及び/または発現を阻害し得る。
本開示の抗TREM2抗体には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化及びキメラ抗体、ヒト抗体、抗体フラグメント(例えば、Fab、Fab’−SH、Fv、scFv及びF(ab’)2)、二重特異性及び多特異性抗体、多価抗体、ライブラリ由来抗体、修飾されたエフェクター機能を有する抗体、抗体部分を含有する融合タンパク質、ならびに抗体のグリコシル化バリアント、抗体のアミノ酸配列バリアント、及び共有結合的に修飾された抗体を含む、本開示のTREM2のアミノ酸残基を有するエピトープなどの抗原認識部位を含む、他の任意の修飾された立体配置の免疫グロブリン分子が包含され得る。抗TREM2抗体は、ヒト、マウス、ラット、または(キメラもしくはヒト化抗体を含む)他の任意の起源のものであってもよい。
抗TREM2ポリクローナル抗体などのポリクローナル抗体は一般に、関連抗原及びアジュバントの複数の皮下(sc)または腹腔内(ip)注射によって、動物中で生じる。二官能性または誘導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル(システイン残基を介したコンジュゲーション)、N−ヒドロキシスクシンイミド(リシン残基を介する)、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、SOCl2、またはR1N=C=NR(R及びR1は独立に、低級アルキル基である)を使用して、免疫されるべき種に免疫原性があるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、血清アルブミン、ウシサイロログロブリン、またはダイズトリプシン阻害薬に、関連抗原(例えば、本開示の精製または組換えTREM2タンパク質)をコンジュゲートすることは有用であり得る。使用され得るアジュバントの例には、フロイント完全アジュバント及びMPL−TDMアジュバント(モノホスホリル脂質A、合成トレハロースジコリノミコレート(dicorynomycolate))が含まれる。免疫化プロトコルは、過度な実験をすることなく、当業者によって選択され得る。
モノクローナル抗体、例えば、抗TREM2モノクローナル抗体は、実質的に均質な抗体の集団、すなわち、その集団を構成する個々の抗体が、少量で存在する場合がある、起こり得る自然に生じる突然変異及び/または翻訳後修飾(例えば、異性化、アミド化)を除いて同じである集団から得られる。したがって、修飾語「モノクローナル」は、個別の抗体の混合物ではない抗体の特徴を示す。
本開示の抗TREM2抗体またはその抗体フラグメントには、さらにヒト化もしくはヒト抗体が含まれ得る。非ヒト(例えば、マウス)抗体のヒト化形態は、最小限の非ヒト免疫グロブリン由来の配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそのフラグメント(例えば、Fab、Fab’−SH、Fv、scFv、F(ab’)2、または抗体の他の抗原結合サブ配列)である。ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン(レシピエント抗体)を含み、この中で、そのレシピエントの相補性決定領域(CDR)由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種(ドナー抗体)のCDR由来の残基で置換されている。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのFvフレームワーク残基が、対応する非ヒト残基で置換される。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体にも、取り込まれたCDRやフレームワーク配列にも見られない残基を含んでもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも1つ、通常は2つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、この中で、CDR領域のすべてまたは実質的にすべてが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、FR領域のすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体は、最適には、免疫グロブリン定常領域(Fc)、通常はヒト免疫グロブリンのものの少なくとも一部もまた含む。Jones et al.,Nature 321:522−525(1986)、Riechmann et al.,Nature 332:323−329(1988)及びPresta,Curr.Opin.Struct.Biol.2:593−596(1992)。
別法では、ヒト抗TREM2抗体を生成することができる。例えば、免疫化の際に、内因性の免疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の全レパートリーを産生することが可能なトランスジェニック動物(例えば、マウス)を生産することが可能になった。キメラ及び生殖細胞系列変異マウスにおける抗体の重鎖結合域(JH)遺伝子のホモ接合型欠損は、内因性抗体産生の完全な阻害をもたらす。そのような生殖細胞系列変異マウスにおけるヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子配列の転移は、抗原投与の際にヒト抗体の産生をもたらす。例えば、Jakobovits et al.,Proc.Nat’l Acad.Sci.USA,90:2551(1993);Jakobovits et al.,Nature,362:255−258(1993);Bruggermann et al.,Year in Immunol.,7:33(1993);米国特許第5,591,669号及びWO 97/17852を参照されたい。
ある特定の実施形態では、抗TREM2抗体全体ではなく、抗TREM2抗体フラグメントを用いることに利点がある。一部の実施形態では、フラグメントサイズが小さいほど、急速なクリアランス及びより良好な脳透過性が可能になる。
二重特異性抗体(BsAb)は、同一または別のタンパク質(例えば、本開示の1つまたは複数のTREM2タンパク質)上のものを含め、少なくとも2つの異なるエピトープに対して結合特異性を有する抗体である。別法では、BsAbの1つの部分は、標的TREM2抗原に結合するアームとすることができ、もう一方は、第二のタンパク質に結合するアームと組み合わせることができる。そのような抗体は、全長抗体または抗体フラグメント(例えば、F(ab’)2二重特異性抗体)に由来し得る。
多価抗体は、その抗体が結合する抗原を発現する細胞によって、二価抗体よりも速く内部移行(及び/または異化)され得る。本開示の抗TREM2抗体またはその抗体フラグメントは、3つ以上の抗原結合部位の多価抗体(IgMクラス以外)(例えば、4価抗体)であり得、これは、その抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組み換え発現によって容易に生産することができる。多価抗体は、ダイマー化ドメイン及び3つ以上の抗原結合部位を含むことができる。好ましいダイマー化ドメインは、Fc領域またはヒンジ領域を含む。このシナリオでは、抗体は、Fc領域及び3つ以上の抗原結合部位をFc領域に対してアミノ末端に有するであろう。本明細書の好ましい多価抗体は、3つから約8つ、好ましくは4つの抗原結合部位を含有する。多価抗体は、少なくとも1つのポリペプチド鎖(好ましくは、2つのポリペプチド鎖)を含有し、ポリペプチド鎖(複数可)は、2つ以上の可変ドメインを含む。例えば、ポリペプチド鎖(複数可)は、VD1−(X1)n−VD2−(X2)n−Fcを含んでもよく、ここで、VD1は、第1の可変ドメインであり、VD2は、第2の可変ドメインであり、Fcは、Fc領域の1つのポリペプチド鎖であり、X1及びX2は、アミノ酸またはポリペプチドを表し、nは、0または1である。同様に、ポリペプチド鎖(複数可)は、VH−CH1−柔軟なリンカー−VH−CH1−Fc領域鎖;またはVH−CH1−VH−CH1−Fc領域鎖を含んでもよい。本明細書の多価抗体は好ましくは、少なくとも2つの(好ましくは、4つの)軽鎖可変ドメインポリペプチドをさらに含む。本明細書の多価抗体は、例えば、約2つから約8つの軽鎖可変ドメインポリペプチドを含んでもよい。本明細書で検討される軽鎖可変ドメインポリペプチドは、軽鎖可変ドメインを含み、任意選択で、CLドメインをさらに含む。多価抗体は、TREM2抗原、さらには限定ではないが、追加の抗原であるAベータペプチド抗原;またはアルファシヌクレインタンパク質抗原;またはTauタンパク質抗原;またはTDP−43タンパク質抗原;またはプリオンタンパク質抗原;またはハンチンチンタンパク質抗原;またはRAN;グリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、もしくはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピートを含む翻訳産物抗原(DPRペプチド);インスリン受容体;インスリン様成長因子受容体を認識し得る。血液脳関門を越える抗体移動を促進する、トランスフェリン受容体または他の任意の抗原。
エフェクター機能を修飾する、及び/または抗体の血清半減期を増加させるために、本開示の抗TREM2抗体を修飾することがさらに望ましいことがある。例えば、定常領域上のFc受容体結合部位は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害を低減させるために、FcγRI、FcγRII、及び/またはFcγRIIIなどの特定のFc受容体に対する結合親和性を除去する、または低減させるように修飾され、または変異してもよい。一部の実施形態では、エフェクター機能は、抗体の(例えば、IgGのCH2ドメインの)Fc領域のN−グリコシル化を除去することによって損なわれる。一部の実施形態では、エフェクター機能は、PCT WO99/58572及びArmour et al.,Molecular Immunology 40:585−593(2003);Reddy et al.,J.Immunology 164:1925−1933(2000)に記載されているとおり、ヒトIgGの233〜236、297、及び/または327〜331などの領域を修飾することによって損なわれる。他の実施形態では、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害及び抗体依存性細胞貪食を含む体液性応答を活性化することなく、隣接細胞上のTREM2抗体のクラスター化を増加させるための、ITIM含有FcgRIIb(CD32b)に対する選択性を増加させるために、エフェクター機能を修飾するように本開示の抗TREM2抗体を修飾することが望ましくあり得る。
本開示の抗TREM2抗体またはそれらの抗体フラグメントのアミノ酸配列修飾も企図される。例えば、抗体または抗体フラグメントの結合親和性及び/または他の生物学的特性を改善することは、望ましいことがある。抗体または抗体フラグメントのアミノ酸配列バリアントは、抗体または抗体フラグメントをコードする核酸に、適切なヌクレオチド変化を導入することによって、またはペプチド合成によって調製される。そのような修飾は、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び/またはそれらの挿入、及び/またはそれらの置換を含む。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせが、最終構築物に到達するために行われる。ただし、最終構築物は、所望の特徴(すなわち、本開示のTREM2タンパク質に結合する能力またはこれと物理的に相互作用する能力)を有する。アミノ酸変化は、グリコシル化部位の数または位置を変化させることなどの抗体の翻訳後プロセスを改変し得る。
表C:アミノ酸置換
(1)疎水性:ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile;
(2)中性親水性:cys、ser、thr;
(3)酸性:asp、glu;
(4)塩基性:asn、gln、his、lys、arg;
(5)鎖の配向に影響を与える残基:gly、pro;及び
(6)芳香族:trp、tyr、phe。
本開示の抗TREM2抗体、またはその抗体フラグメントは、当技術分野で公知であり、容易に入手可能である、追加の非タンパク質性部分を含有するように、または当技術分野で公知であり、容易に入手可能である異なる種類の薬物コンジュゲートを含有するように、さらに修飾することができる。好ましくは、抗体の誘導体化に適した部分は、水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非限定例には、限定されないが、ポリエチレングリコール(PEG)、エチレングリコール/プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−1,3−ジオキソラン、ポリ−1,3,6−トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸(ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか)、及びデキストランまたはポリ(n−ビニルピロリドン)ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド/エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール(例えば、グリセロール)、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が含まれる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性によって、製造において利点を有することがある。ポリマーは、任意の分子量のものであってよく、分枝状または非分枝状であってもよい。抗体に付着するポリマーの数は、変化してもよく、複数のポリマーが付着する場合、それらは、同一、または異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び/または種類は、限定されないが、改善されるべき抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が、規定された条件下での治療に使用されるかどうかなどを含む考察に基づき決定することができる。そのような技術及び他の適切な製剤は、Remington:The Science and Practice of Pharmacy,20th Ed.,Alfonso Gennaro,Ed.,Philadelphia College of Pharmacy and Science(2000)に開示されている。
本開示の抗TREM2抗体は、例えば、ELISA、ウエスタンブロットなどの公知の方法によって、抗原結合活性について試験され得る。
本開示の抗TREM2抗体は、例えば、米国特許第4,816,567号に記載されているとおりの組換え方法及び組成物を使用して生産され得る。一部の実施形態では、本開示の抗TREM2抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離核酸が提供される。そのような核酸は、抗TREM2抗体のVLを含有するアミノ酸配列及び/またはVHを含有するアミノ酸配列(例えば、抗体の軽鎖及び/または重鎖)をコードしてもよい。一部の実施形態では、そのような核酸を含有する1つまたは複数のベクター(例えば、発現ベクター)が提供される。一部の実施形態では、そのような核酸を含有する宿主細胞も提供される。一部の実施形態では、宿主細胞は、(1)抗体のVLを含有するアミノ酸配列及び抗体のVHを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または(2)抗体のVLを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第1のベクター及び抗体のVHを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第2のベクターを含有する(例えば、これらを形質導入されている)。一部の実施形態では、宿主細胞は、真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞またはリンパ細胞(例えば、Y0、NS0、Sp20細胞)である。本開示の宿主細胞にはまた、限定ではないが、単離細胞、インビトロ培養細胞、及びエクスビボ培養細胞が含まれる。
本開示の抗TREM2抗体は、抗体を適切な薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることによって、治療的投与のための様々な製剤に組み込むことができ、固体、半固体、液体または気体の形態の製剤に製剤化され得る。このような製剤の例には、限定ではないが、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、軟膏、液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル剤、マイクロスフェア、及びエアゾール剤が含まれる。医薬組成物は、所望の製剤に応じて、動物またはヒト投与のための医薬組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルである、薬学的に許容される非毒性担体または希釈剤を含むことができる。希釈剤は、組み合わせの生物活性に影響を与えないように選択される。そのような希釈剤の例には、限定ではないが、蒸留水、緩衝水、生理食塩水、PBS、リンゲル液、デキストロース溶液、及びハンクス液が含まれる。本開示の医薬組成物または製剤は、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療的、非免疫原性安定剤、賦形剤などをさらに含むことができる。組成物はまた、pH調整剤及び緩衝剤、毒性調整剤、湿潤剤、ならびに界面活性剤など、生理学的条件に近づける追加の物質を含むことができる。
本開示の抗TREM2抗体を含有する本開示の医薬組成物は、ボーラスとしての、または一定期間にわたる連続注入による静脈内投与、筋肉内、腹腔内、大脳脊髄内(intracerobrospinal)、頭蓋内、脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、経口、局所、または吸入経路によるものなどの公知の方法に従い、抗TREM2抗体での処置を必要とする個体、好ましくは、ヒトに投与されてもよい。
本開示のさらなる態様は、個体において1つまたは複数のTREM2活性を調節する(例えば、誘導する、または阻害する)ために、個体に本開示の抗TREM2抗体の治療有効量を投与することによって、TREM2を調節する(例えば、活性化する、または阻害する)、DAP12を調節する(例えば、活性化する、または阻害する)、PI3Kを調節する(例えば、活性化する、または阻害する)、1つまたは複数の炎症誘発性及び抗炎症性メディエーター(例えば、IFN−a4、IFN−b、IL−1β、TNF−α、IL−10、IL−6、IL−8、IL−23、ケモカインタンパク質ファミリーのTGF−ベータメンバー、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、TGF−ベータ、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、IL−23、CCL4、MCP−1、VEGF、CXCL10及びCRP)の発現を調節する(例えば、増加させる、または減少させる)、あるいは1つまたは複数のTREM2発現細胞の生存を調節する(例えば、増加させる、または減少させる)、あるいは1つまたは複数のTREM2発現細胞の機能を調節する(例えば、増加させる、または減少させる)、あるいは1つまたは複数のTREM2発現細胞の増殖を調節する(例えば、増加させる、または減少させる)、あるいは1つまたは複数のTREM2発現細胞の遊走を調節する(例えば、増加させる、または減少させる)、あるいは1つまたは複数のTREM2発現細胞の他の細胞との相互作用を調節する(例えば、増加させる、または減少させる)ことを、それを必要とする個体において行う方法を提供する。
認知症は、正常な老化から予測され得るものを超えて、予め損なわれていないヒトの全体的な認知能力の重大な喪失として現れる非特異的な症候群(すなわち、徴候及び症状のセット)である。独特の全体的な脳損傷の結果として、認知症は、変化しないことがある。別法では、認知症は、進行性であり、身体の損傷または疾患に起因する長期的な衰退をもたらすことがある。認知症は、高齢者集団においてはるかに一般的であるが、65歳前に発症する可能性もある。認知症の影響を受ける認知領域には、限定ではないが、記憶、注意持続、言語、及び問題解決が含まれる。一般に、症状は、個体が認知症と診断される前に、少なくとも6ヶ月間存在しなければならない。
前頭側頭型認知症(FTD)は、脳の前頭葉の進行性の変性から生じる状態である。経時的に、変性は、側頭葉に進むことがある。有病率ではアルツハイマー病(AD)に次いで2番目であるが、FTDは初老期認知症症例の20%を占める。FTDの臨床特徴には、記憶欠損、行動異常、人格変化、及び言語障害が含まれる(Cruts,M.& Van Broeckhoven,C.,Trends Genet.24:186−194(2008);Neary,D.,et al.,Neurology 51:1546−1554(1998);Ratnavalli,E.,Brayne,C.,Dawson,K.& Hodges,J.R.,Neurology 58:1615−1621(2002))。
アルツハイマー病(AD)は、認知症の最も一般的な形態である。この疾患に対する治療法はなく、この疾患は、進行するにつれて悪化し、最終的に死をもたらす。ほとんどの場合、ADは、65歳超の人々において診断される。しかしながら、あまり一般的ではない早発性アルツハイマー病は、かなり早い時期に発症し得る。
別段に硬化性白質脳症を伴う脂肪膜性多発嚢胞性骨異形成症(PLOSL)と称されることがある那須−ハコラ病(NHD)は、下肢及び上肢の多嚢胞性骨嚢胞に起因する再発性骨折を伴う進行性初老認知症によって特徴づけられる稀な遺伝性白質ジストロフィーである。NHD疾患の経過は一般に、4期、すなわち潜伏期、骨症状期、初期神経症状期、及び後期神経症状期に分けられる。幼児期(潜伏期)の正常な発達の後に、NHDは、手、手首、足首、及び足に痛みを伴って青年期または若年成人期(典型的な発症年齢20〜30歳)に現れ始める。その後、患者は、四肢の骨の多嚢胞性骨病変及び骨粗鬆症病変(骨症状期)に起因する再発性骨折に罹患し始める。人生の30年目または40年目(初期神経症状期)において、患者は、前頭葉症候群に特徴的な顕著な人格変化(例えば、多幸感、集中力の欠如、判断の喪失、及び社会的抑制)を呈する。患者はまた典型的に、進行性の記憶障害にも罹患する。てんかん発作も頻繁に観察される。最終的に(後期神経症状期)、患者は、深刻な認知症に進行し、話すこと及び動くことができず、通常50歳までに死亡する。
特発性もしくは原発性パーキンソン症候群、低運動性硬直症候群(HRS)、または振戦麻痺と称されることもあるパーキンソン病は、運動系制御に影響を与える神経変性脳障害である。脳におけるドーパミン産生細胞の漸進的死によって、パーキンソン病の主要な症状がもたらされる。多くの場合、パーキンソン病は、50歳以上の人々において診断される。パーキンソン病は、ほとんどの人々において特発性(公知の原因を有さない)である。しかしながら、遺伝的要因も、この疾患においては役割を果たす。
本明細書で使用される場合、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、または運動ニューロン疾患、またはルーゲーリック病は、互換的に使用され、急速な進行性衰弱、筋萎縮及び線維束攣縮、筋痙縮、発話困難(構音障害)、嚥下困難(嚥下障害)、ならびに呼吸困難(呼吸困難症)によって特徴づけられる様々な病因を有する消耗性疾患を指す。
ハンチントン病(HD)は、ハンチントン遺伝子(HTT)の常染色体優性変異に起因する遺伝性の神経変性疾患である。ハンチンチン遺伝子内のサイトカイン−アデニン−グアニン(CAG)トリプレットリピートの伸長は、その遺伝子によってコードされる変異型のハンチンチンタンパク質(Htt)の産生をもたらす。この変異体ハンチントンタンパク質(mHtt)は、毒性があり、ニューロン死の原因となる。ハンチントン病の症状は、任意の年齢で現れ得るが、35歳及び44歳の間で最も一般的に現れる。
タウオパチー病またはタウ異常症は、脳内の微小管関連タンパク質Tauの凝集に起因する一群の神経変性疾患である。アルツハイマー病(AD)は、最もよく知られているタウオパチー病であり、不溶性形態での、ニューロン内のTauタンパク質の蓄積を不溶性神経原線維濃縮体(NFT)の形態で含む。他のタウオパチー病及び障害には、進行性核上性麻痺、ボクサー認知症(慢性外傷性脳症)、前頭側頭型認知症、及び17番染色体に関連するパーキンソン症候群、リティコ−ボディグ病(グアムのパーキンソン認知症複合)、神経原線維変化型老年期認知症、神経節膠腫及び神経節細胞腫、髄膜血管腫症、亜急性硬化性全脳炎、鉛脳症、結節性脳硬化症、ハレルフォルデン・スパッツ病、リポフスチン沈着症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒病(AGD)、ハンチントン病、前頭側頭型認知症、ならびに前頭側頭葉変性症が含まれる。
多発性硬化症(MS)は、散在性硬化症または散在性脳脊髄炎とも称され得る。MSは、脳及び脊髄の軸索周囲の脂肪ミエリン鞘が損傷し、脱髄及び瘢痕化ならびに広範囲の徴候及び症状をもたらす炎症性疾患である。MSは、相互に効果的に伝達する脳及び脊髄内の神経細胞の能力に影響を及ぼす。神経細胞は、ミエリンと呼ばれる絶縁物質内に含有される軸索と呼ばれる長い繊維の下に活動電位と呼ばれる電気信号を送ることによって伝達する。MSでは、自分の身体の免疫系が、ミエリンを攻撃して損傷する。ミエリンが失われると、軸索は、もはや効果的にシグナルを伝導することができない。MS発症は通常、若年成人で生じ、女性においてより一般的である。
本開示のまたさらなる態様は、個体に、本開示の単離抗TREM2抗体の治療有効量を投与することを含む、がんを予防する、そのリスクを減少させる、またはそれを有する個体を治療するための方法を提供する。本開示の単離抗体のいずれかは、これらの方法において使用され得る。一部の実施形態では、単離抗体は、本開示のアゴニスト抗体である。他の実施形態では、単離抗体は、本開示のアンタゴニスト抗体である。
本開示はまた、本開示の単離抗体(例えば、本明細書に記載の抗TREM2もしくは抗DAP12抗体)またはその機能的フラグメントを含有するキットを提供する。本開示のキットは、本開示の精製された抗体を含む1つまたは複数の容器を含んでもよい。一部の実施形態では、キットは、本開示の方法に従って使用するための取扱説明書をさらに含む。一部の実施形態では、これらの取扱説明書は、本開示の任意の方法に従って、認知症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー病、那須−ハコラ病、多発性硬化症、及びがんから選択される疾患、障害、または損傷を予防する、そのリスクを低減させる、またはそれを有する個体を治療するための、本開示の単離抗体(例えば、本明細書に記載の抗TREM2または抗DAP12抗体)の投与の記載を含む。
本開示の単離抗体(例えば、本明細書に記載の抗TREM2または抗DAP12抗体)は、診断実用性も有する。したがって、本開示は、個体または個体に由来する組織サンプルでのTREM2及び/またはDAP12の検出などの診断目的のために、本開示の抗体またはそれらの機能的フラグメントを使用する方法を提供する。
序文
ヒトTREM2プレタンパク質のアミノ酸配列を、以下で配列番号1に示す。ヒトTREM2は、配列番号1のアミノ残基1〜18に位置するシグナルペプチドを含有する。ヒトTREM2は、配列番号1のアミノ残基29〜112に位置する細胞外免疫グロブリン様可変型(IgV)ドメイン、配列番号1のアミノ残基113〜174に位置する追加の細胞外配列、配列番号1のアミノ残基175〜195に位置する膜貫通ドメイン、及び配列番号1のアミノ残基196〜230に位置する細胞内ドメインを含有する。
抗TREM2抗体の生産
免疫化手順
迅速プライム法:4頭の50日齢の雌のBALB/cマウスを、次の手順を使用して免疫化した。ヒトTREM2抗原は含有するが、アジュバントは含有しない一連の皮下水性注射剤を19日間にわたって与えた。マウスを、Lab Products製の排気口付きラックシステム内で飼育した。4頭すべてのマウスを、19日目に安楽死させ、リンパ球をハイブリドーマ細胞系生成のために採取した。
10頭の雌のTrem2tm1(KOMP)Vlcgマウスを、Bates et al.、Biotechniques 2006、40(2):199−208及びHazen et al.、Landes Bioscience 2014、6:1、95−107に従って、次の手順を使用して免疫化した。マウスをLab Products製の排気口付きラックシステム内で飼育した。内毒素非含有組換えDNA構築物は、BlueSky Technologiesによって生産された。ヒトTrem2−Dap12融合タンパク質はpCAGGS−Kanプラスミド内にサブクローニングし、pUNO−mGMCSF及びpUNO−mFlt3LaプラスミドはKerafastから購入した。PBS中のプラスミドDNAを温リンゲル液中で、マウス体重の10%まで希釈し、29G針を備えた3mlシリンジに移した。水圧尾静脈注射(hydrodynamic tail vein injection;HTV)では、ヒートパッド上で、マウスに、イソフルランで軽く麻酔をかけ、DNAを、6〜10秒間かけて外側尾静脈にボーラス注射した。マウスをヒートパッド上で2分間にわたって回復させ、注射の後に10分間にわたって、いずれかの急性作用について観察した。マウスを5回まで毎週、追加免疫した。Trem2抗原で間接ELISAを使用して、4回目の追加免疫から5日後に、マウスから試験採血することによって、免疫応答を評価した。最良のIgG力価を示したマウスをハイブリドーマ発生のために使用することとする。
リンパ球を単離し、標準Rocheプロトコルに従って、ポリ−エチレングリコール(PEG1500)の存在下でマウスSP2/0骨髄腫細胞と融合した。単一ステップクローニング法(HAT選択)を使用して、融合した細胞を培養した。この方法は、ハイブリドーマ選択及びクローニングを組み合わせて1ステップにするために、半固体メチルセルロースベースのHAT選択培地を使用する。単細胞由来ハイブリドーマは増殖して、半固体培地上でモノクローナルコロニーを形成する。融合事象から10日後に、948の得られたハイブリドーマクローンを96ウェル組織培養プレートに移し、中央対数増殖が達成されるまで(5日間)、HT培地内で増殖させた。
948のハイブリドーマからの組織培養上清を、スクリーニング抗原(Primary Screening)で間接ELISAによって試験し、ヤギ抗IgG/IgM(H&L)−HRP二次を使用して、IgG及びIgM抗体の両方について調べ、TMB基質で展開した。このアッセイにおいて0.2OD超のクローンを、試験の次のラウンドに入れた。陽性培養を、分泌を確認するためにスクリーニング抗原で、及び非特異的または「粘着性」mAbを除去するために無関連抗原(ヒトトランスフェリン)で再試験し、偽陽性を排除する。抗体捕捉ELISAによって、目的のすべてのクローンをアイソタイプ判別して(isotyped)、それらが、IgGまたはIgMアイソタイプであるかを決定した。
目的のハイブリドーマ細胞系を、96ウェルプレートに移した後に、32日間にわたって24ウェル培養プレート内で培養で維持した。これは、安定期間と称され、クローンが安定及び分泌を維持しているかを試験する。この安定期間中に、−80℃貯蔵(6カ月生存可能)のために、一時的に凍結させる細胞系バックアップを目的のすべてのクローンから作製した。この期間中に、ハイブリドーマを、分泌及び特異性について定期的に試験した。
上位のハイブリドーマ細胞系(クローン)をサブクローニングして、モノクローン性を保証した。シングルステップクローニングシステムを再び使用して親クローンをプレーティングすることによって、サブクローニングを行った。24〜90のサブクローンを96ウェル培養プレートに移した。間接ELISA及び抗体捕捉ELISAによって、サブクローンをスクリーニングした。培養で拡大するために、各親で上位のサブクローンを採取した。<50%クローナルであった任意の親クローンで、サブクローニングの第2のラウンドを行った。
表1:抗TREM2抗体
標準的な技術を使用して、生成した抗体の軽鎖可変及び重鎖可変ドメインをコードするアミノ酸配列を決定した。抗体のEUまたはKabat軽鎖HVR配列を表2Aに記載する。抗体のEUまたはKabat軽鎖HVRコンセンサス配列を表2Bに記載する。抗体のEUまたはKabat重鎖HVR配列を表3Aに記載する。抗体のEUまたはKabat重鎖HVRコンセンサス配列を表3Bに記載する。抗体のEUまたはKabat軽鎖フレームワーク(FR)配列を表4Aに記載する。抗体のEUまたはKabat重鎖フレームワーク(FR)配列を表4Bに記載する。EUまたはKabat重鎖HVR
表2A:EUまたはKabat軽鎖HVR配列
表2B:EUまたはKabat軽鎖HVRコンセンサス配列
表3A:EUまたはKabat重鎖HVR配列
表3B:EUまたはKabat重鎖HVRコンセンサス配列
表4A:EUまたはKabat軽鎖フレームワーク配列
表4B:EUまたはKabat重鎖フレームワーク配列
TREM2抗体の最初の特徴づけは、マクロファージ及び他の初代ヒトまたはマウス免疫細胞上に発現されるTREM2と結合する能力を決定することを含んだ。細胞を採取し、96ウェルプレートに105/mlでプレーティングし、洗浄し、氷中で1時間にわたって、10〜50ug/mlのMab及びFcブロッキング試薬を含有するPBS100ul中でインキュベートした。次いで、細胞を2回洗浄し、氷中で30分間にわたって、5ug/mlのPEコンジュゲート二次抗体を含有するPBS100ul中でインキュベートした。細胞を冷PBS中で2回洗浄し、BD FACS Cantoで得た。平均蛍光強度(MFI)値または陽性細胞%のデータ分析及び計算を、FlowJo(TreeStar)ソフトウェアバージョン10.0.7で実施した。
表5:マウス細胞への抗TREM2抗体の結合
ヒト投与における免疫原性を防ぐために、抗体のヒト化を使用して、異なる種で産生された抗体を配列及び構造的関係の点でヒト抗体に最も似るように変更する。異なる種に由来する抗体は、非ヒト抗体の特異性決定領域(SDR)をヒト抗体フレームワーク上にグラフト化することを可能にする、特徴的な配列及び構造的特徴を共有する。これにより、非ヒト抗体の特異性が保持される。ヒト化プロセスは、フレームワーク領域及びSDRを含む、非ヒト抗体の配列及び特徴の特定を伴う。抗体のヒト化には、以下の基準が使用される。1)非ヒト抗体と既知のヒト抗体との間のフレームワーク領域の類似性パーセント、2)非ヒト抗体と既知のヒト抗体との間のSDRの長さ類似性、3)ヒト抗体のフレームワーク領域を生成するために使用される遺伝子、及び4)ヒト抗体フレームワークのヒト化及び治療としての以前の使用。フレームワーク領域及びSDR長さの類似性は、その差が抗体の特異性を変更し得る抗体の構造的差異をもたらす場合があるので、重要である。ヒト抗体のフレームワークを生成するために使用される特定の遺伝子は、抗体の安定性または特異性にとって有益または不利になることが知られており、したがって、選択的に使用される、または回避される。最後に、ヒト治療で使用されているものを含む、これまでに成功している望ましい半減期を有する忍容性の良好なヒト化フレームワークが、将来性のあるヒト化候補である可能性が高い。
表7A:ヒト化軽鎖可変領域配列
表7B:ヒト化重鎖可変領域の配列
マウス抗TREM2抗体9F5(T2−9F5.1)の重鎖可変領域(VH)及び軽鎖可変領域(VL)配列を、NCBIウェブサイト上のIgBLASTプログラムへの入力データとして使用した(Ye、J.et al.Nucleic Acids Research 41:W34−W40(2013))。IgBLASTはマウスVHまたはVL配列を利用して、それを公知のヒト生殖細胞系配列のライブラリと比較する。使用されたデータベースは、IMGTヒトVH遺伝子(F+ORF、273生殖細胞系配列)及びIMGTヒトVLカッパ遺伝子(F+ORF、74生殖細胞系配列)であった。2F5抗体VLでは、ヒト生殖細胞系IGKV2−29(対立遺伝子2)を良好なアクセプター配列として選択し、ヒト軽鎖IGKJ2(対立遺伝子1)連結領域(J遺伝子)を、IMGT(登録商標) the international ImMunoGeneTics information system(登録商標)にまとめられたヒト連結領域配列から選択した(図4C)。2F5抗体VHでは、ヒト生殖細胞系IGHV1−46(対立遺伝子1)を良好なアクセプター配列として選択し、ヒト重鎖IGHJ4(対立遺伝子1)連結領域(J遺伝子)を、IMGT(登録商標) the international ImMunoGeneTics information system(登録商標)にまとめられたヒト連結領域配列から選択した(図4D)。抗体VL及びVHの相補性決定領域(CDR)を、AbM定義(AbM抗体モデリングソフトウェア)に従って定義した。
TREM2抗体を、ヒトTREM2(配列番号1)及びマウスTREM2(配列番号2)全体に及ぶ15マーまたは25マーペプチドに結合する能力について試験した。加えて、抗TREM2抗体9F5(MAb)、T21−9(Fab)、T22(Fab)、及びT45−10(Fab)のエピトープを、ショットガン変異誘発によってマッピングした。
直鎖15マーペプチドを、14残基の重複を有するヒトTREM2(配列番号1)の配列に基づき合成した。加えて、直鎖25マーペプチドを、1残基転移を有するヒトTREM2(配列番号1)またはマウスTREM2(配列番号2)の配列に基づき合成した。合成されたペプチドのそれぞれへのTREM2抗体の結合を、ELISAをベースとする方法で試験した。このアッセイでは、ペプチドアレイを、(4℃で終夜)一次抗体溶液とインキュベートした。洗浄後に、ペプチドアレイを、25℃で1時間にわたって、抗体ペルオキシダーゼコンジュゲート(SBA、cat.nr.2010−05)の1/1000希釈物と共にインキュベートした。洗浄後に、ペルオキシダーゼ基質2,2’−アジノ−ジ−3−エチルベンズチアゾリンスルホナート(ABTS)及び2μl/mlの3%のH2O2を添加した。1時間後に、発色を測定した。発色を、電荷結合素子(CCD)カメラ及び画像処理システムで定量化した。
26の抗TREM2抗体について、TREM2結合領域を決定した。ヒト及び/またはマウスTREM2内の結合領域を表8A及び8Bに列挙する。
表8A:ヒトTREM2へのTREM2抗体の結合領域
表8B:マウスTREM2へのTREM2抗体結合領域
抗TREM2抗体(9F5(MAb)、T21−9(Fab)、T22(Fab)、及びT45−10(Fab))のショットガン変異誘発エピトープマッピングを、TREM2タンパク質のアラニンスキャニングライブラリを使用して行った。全長hTREM2−Dap12キメラをコードするTREM2−Dap12発現構築物を高速アラニンスキャニング変異誘発に供して、包括的な変異体ライブラリを作製した(Davidson and Doranz,(2014)Immunology 143:13−20に概説)。TREM2細胞外ドメインであるTREM2の残基19〜174のそれぞれを、ほぼアラニンに変異させた一方で、アラニンコドンはセリンに変異させた。合計で、154のTREM2変異発現構築物を作製し、配列を確認し、384ウェルプレートに1ウェルあたり1変異体で配置した。
表8C:抗TREM2抗体MAb及びFab結合に関与する残基
脾臓チロシンキナーゼ(Syk)は、いくつかの基質をリン酸化し、それによって細胞活性化及び炎症プロセスをもたらすシグナル伝達複合体の形成を促進することによって、TREM2の下流で機能する細胞内シグナル伝達分子である。マウスマクロファージを培養し、細胞抽出物中のSykタンパク質のリン酸化状態を測定することによって、Syk活性化を誘導するアゴニストTREM2抗体の能力を決定した。
脾臓チロシンキナーゼ(Syk)の活性化は、抗体で2つ以上のTREM2受容体が架橋され、それによって、細胞活性化及び炎症プロセスをもたらすシグナル伝達複合体の形成が促進されることによって促進される。インビボ架橋は、高親和性のFc受容体(FcR)を発現する隣接細胞、例えば、B細胞及び他の白血球によって媒介される(White AL Cancer Immunol Immunother(2013)62:941−948;Wilson NS 2011、Cancer Cell 19、101−113;Bartholomaeus P J Immunol 2014;192:2091−2098)。
マウスマクロファージにおけるDAP12リン酸化
TREM2は、DAP12を介してシグナル伝達し、下流でPI3K及び他の細胞内シグナルの活性化をもたらす。マウスマクロファージを培養し、細胞抽出物中のDAP12タンパク質のリン酸化状態を測定することによって、DAP12活性化を誘導するTREM2抗体の能力を決定した。抗体で刺激する前に、マウス野生型(WT)骨髄由来マクロファージ(BMDM)及びTREM2ノックアウト(KO)BMDMを、1%血清RPMI中で4時間にわたって飢餓状態にした。15×106の細胞を、全長TREM2抗体または対照抗体と共に、15分間にわたって氷中でインキュベートした。細胞を洗浄し、ヤギ抗ヒトIgGの存在下で、示された期間にわたって37℃でインキュベートした。刺激後に、溶解緩衝液(1%v/vのn−ドデシル−β−D−マルトシド、50MmのTris−HCl(pH8.0)、150mMのNaCl、1mMのEDTA、1.5mMのMgCl2、10%グリセロール、+プロテアーゼ及びホスファターゼ阻害剤)で、細胞を溶解させ、続いて、4℃で10分間にわたって、16,000gで遠心して、不溶性物質を除去した。細胞溶解物を、第2のTREM2抗体(R&D Systems)で免疫沈降させた。沈殿したタンパク質を、SDS−PAGEによって分画し、PVDF膜に移し、抗ホスホチロシン抗体(4G10、Millipore)でプローブした。膜を剥がし、抗DAP12抗体(Cells Signaling、D7G1X)で再プローブした。TREM2免疫沈降に使用された各細胞溶解物は、対照抗体(抗アクチン、Santa Cruz)によって示されるとおり、同量のタンパク質を含有した。
DAP12活性化を誘導するTREM2抗体の能力をインビボで、Brewer’s Thioglycollate誘導腹膜マクロファージ、及び細胞抽出物におけるDAP12タンパク質のリン酸化状態の測定で決定した。C57Bl6マウスに、3%Brewer’s Thioglycollate3mlを0日目に腹腔内(i.p.)注射した。3日目に、マウスに、アイソタイプ対照抗体(CTR抗体)mIgG1(クローンMOPC−21、Bioxcell)を、または抗TREM2抗体7E5を15分間にわたって(図7C及び7D)、または24時間にわたって(図7E及び7F)腹腔内(i.p.)注射した。腹腔(PEC)細胞を、生理食塩水4mLを使用する腹膜潅注によって採取し、PBSで洗浄した。次いで、細胞を、溶解緩衝液(1%v/vのn−ドデシル−β−D−マルトシド)、50Mmのトリス−HCl(pH8.0)、150mMのNaCl、1mMのEDTA、1.5mMのMgCl2、10%グリセロール、+プロテアーゼ及びホスファターゼ阻害剤)で溶解させ、続いて、16,000gで10分間にわたって4℃で遠心して、不溶性物質を除去した。各マウスサンプルから回収された溶解産物を分割し、第2のTREM2抗体(R&D Systems)と、またはビーズと直接コンジュゲートしたアイソタイプ対照Rat IgG2b抗体と共に免疫沈降させた。沈降したタンパク質をSDS−PAGEによって分画し、PVDF膜に移し、抗ホスホチロシンAb(4G10、Millipore)でプローブした。膜を剥がし、抗DAP12抗体(Cells Signaling、D7G1X)で再プローブした。TREM2免疫沈降のために使用された各細胞溶解産物も、対照抗体(抗Actin、Santa Cruz)でプローブした。腹膜液は、高レベルのTREM2を発現する細胞、さらには、他の細胞種(例えば、好酸球)を含み、採取される細胞の数は様々であり得る。したがって、免疫沈降の後に回収される一部の溶解産物をゲルに負荷し、抗アクチンでブロットした。
マウスまたはヒトTREM2依存性遺伝子を活性化するプレート結合全長抗TREM2抗体の能力を、NFAT(活性化T細胞核内因子)プロモーターの制御下で、ルシフェラーゼレポーター遺伝子を使用して評価した。マウス胸腺リンパ腫Tリンパ球に由来する細胞系BW5147.G.1.4(ATCC(登録商標)TIB48(商標))を、マウスTREM2及びDAP12ならびにCignal Lenti NFAT−ルシフェラーゼウイルス(Qiagen)に感染させた。別法では、BW5147.G.1.4細胞系を、ヒトTREM2/DAP12融合タンパク質、及びCignal Lenti NFAT−ルシフェラーゼウイルス(Qiagen)に感染させた。シグナル伝達のための陽性対照として、PMA(0.05ug/ml)及びイオノマイシン(0.25uM)を一緒に添加した。抗TREM2及びアイソタイプ対照抗体をPBSに溶解させ、10ug/mlの濃度で、組織培養プレート上にプレーティングし、終夜、4℃でインキュベートして、抗体をプレートに吸収させた。プレートを洗浄した後に、細胞をプレート結合抗体上にプレーティングし、6時間にわたってインキュベートした。OneGlo Reagent(Promega)を各ウェルに添加し、プレートシェーカー上、室温で3分インキュベートすることによって、ルシフェラーゼ活性を測定した。BioTekプレートリーダーを使用して、ルシフェラーゼシグナルを測定した。細胞は、内在性リガンドの存在、または自発的受容体凝集のいずれかによって、持続性のTREM2依存性シグナル伝達を示し、このことが、追加の刺激の非存在下で、TREM2シグナル伝達をもたらす。
マウスまたはヒトTREM2依存性遺伝子を活性化する天然TREM2リガンドの能力を、実施例6に記載の細胞ベースのルシフェラーゼレポーターシステムを使用して評価した。プレートを、漸増濃度のホスファチジルセリン(PS)、スフィンゴミエリン(SM)、ならびにヒトAPOEバリアントAPOE2、APOE3、及びAPOE4で終夜コーティングした。プレートを洗浄した後に、細胞をプレーティングし、6時間にわたって37℃でインキュベートした。次いで、実施例6において記載したとおり、ルシフェラーゼ活性を、OneGlo試薬(Promega)を添加することによって測定した。すでに記載されたとおり、PS、SM、及びAPOEバリアントは、TREM2依存性シグナル伝達の活性化をもたらす。
マウスまたはヒトTREM2依存性遺伝子を活性化する可溶性全長抗TREM2抗体の能力を、NFAT(活性化T細胞核内因子)プロモーターの制御下で、ルシフェラーゼレポーター遺伝子を使用して評価した。マウス胸腺リンパ腫Tリンパ球由来の細胞系BW5147.G.1.4(ATCC(登録商標)TIB48(商標))を、マウスTREM2及びDAP12ならびにCignal Lenti NFAT−ルシフェラーゼウイルス(Qiagen)に感染させた。別法では、BW5147.G.1.4細胞系を、ヒトTREM2/DAP12融合タンパク質、及びCignal Lenti NFAT−ルシフェラーゼウイルス(Qiagen)に感染させた。シグナル伝達のための陽性対照として、PMA(0.05ug/ml)及びイオノマイシン(0.25uM)を一緒に添加した。細胞を可溶性抗TREM2及びアイソタイプ対照抗体と一緒に、6時間にわたってインキュベートし、OneGlo Reagent(Promega)を各ウェルに添加し、プレートシェーカー上、室温で3分インキュベートすることによって、ルシフェラーゼ活性を測定した。BioTekプレートリーダーを使用して、ルシフェラーゼシグナルを測定した。細胞は、内在性リガンドの存在、または自発的受容体凝集のいずれかによって、持続性のTREM2依存性シグナル伝達を示し、このことが、TREM2シグナル伝達をもたらす。
マウスTREM2またはヒトTREM2の天然リガンドの活性を増強する可溶性全長抗TREM2抗体の能力を、遺伝子発現の活性化を測定するためにNFAT(活性化T細胞核内因子)プロモーターの制御下でルシフェラーゼレポーター遺伝子を使用して評価した。マウス胸腺リンパ腫Tリンパ球に由来する細胞系BW5147.G.1.4(ATCC(登録商標)TIB48(商標))を、マウスTREM2及びDAP12、ならびにCignal Lenti NFAT−ルシフェラーゼウイルス(Qiagen)に感染させた。別法では、BW5147.G.1.4細胞系を、ヒトTREM2/DAP12融合タンパク質、及びCignal Lenti NFAT−ルシフェラーゼウイルス(Qiagen)に感染させた。細胞を6時間にわたって、可溶性抗TREM2及びアイソタイプ対照抗体と一緒に、漸増濃度のホスファチジルセリン(PS)またはスフィンゴミエリン(SM)で予めコーティングされたプレート上でインキュベートした。OneGlo Reagent(Promega)を各ウェルに添加し、プレートシェーカー上、室温で3分インキュベートすることによって、ルシフェラーゼ活性を測定した。BioTekプレートリーダーを使用して、ルシフェラーゼシグナルを測定した。
可溶性非架橋抗TREM2抗体のアンタゴニスト機能を、先天免疫細胞(例えば、骨髄由来マクロファージ)において評価した。
インビトロ細胞生存
インビトロで細胞生存を増強する抗TREM2抗体の能力を評価するために、FcgRI、FcgRIII、及びFceRI受容体のガンマ鎖サブユニットを欠損したマクロファージ(Fcgr1KO mice,REF:Takai T,Li M,Sylvestre D,Clynes R,Ravetch J.(1994).Cell、76:519−529)を、プレート結合抗TREM2抗体の存在下で培養し、最適以下の成長条件において培養した場合の細胞生存率を決定した。
インビボで免疫細胞の数を増加させる抗TREM2抗体の能力を評価するために、C57Bl6マウスに、抗TREM2抗体7E5またはマウスIgG1アイソタイプ対照抗体を腹腔内(IP)注射し、次いで、脳内の免疫細胞の数をFACSによって定量化した。
表9A及び9Bに、上記実施例3〜11に記載の機能性研究の結果をまとめる。ルシフェラーゼレポーター遺伝子によって、またはTREM2への結合の強度の調節によって測定したところ、抗TREM2抗体は、溶解状態で、または抗体クラスター化の後に(すなわち、プレート結合によって)、ヒトTREM2(表9A)またはマウスTREM2(表9B)を発現する細胞におけるTREM2依存性遺伝子発現の調節で、アゴニストまたはアンタゴニスト活性を実証した。表9A及び9Bに示されているとおり、TREM2抗体のサブセットは、プレート結合されている場合に、アゴニスト活性を示す。TREM2抗体の別のサブセットは、溶解状態の場合に、アゴニスト活性を示す。TREM2抗体の第3のサブセットは、可溶性非架橋抗体のアンタゴニスト作用を示す。特定の抗TREM2抗体は、リガンド(例えば、APOE3)への組換えTREM2タンパク質の結合を増加させる一方で、他の抗TREM2抗体は、リガンド(例えば、APOE3)への組換えTREM2タンパク質の結合を減少させた。
表9A:ヒトTREM2でのTREM2抗体機能性試験
表9B:マウスTREM2でのTREM2抗体機能性研究
免疫細胞の動員
抗体を単独で、またはLPSと組み合わせて腹腔内(IP)投与した後のC57Bl6マウスの腹腔(PEC)における炎症細胞(好中球、顆粒球、単球、及びマクロファージ)の動員を調節するTREM2抗体の能力を評価した。1群当たり4頭のマウスを図13Aにおいて記載するとおりに処置した。簡単に述べると、マウスは初めに、40mg/kgの抗TREM2抗体7E5、抗体8F8、またはアイソタイプ対照抗体mIgG1(クローンMOPC−21、Bioxcell)のIP注射を与えられる。14時間後に、マウスは、4mg/kgのLPS、または対照としてPBSのIP注射を与えられた。LPSまたはPBS注射から6時間後に、細胞を、記載されているとおりにPECから採取し(例えば、Gawish R et al,2014 FASEB Jを参照されたい)、FACSによって分析した。FACS分析のために、PEC細胞を、抗CD11b−Pacific Blue、抗CD11c PeCy7、抗MCH−II−APCCy7、抗Gr1−FITC、抗Ly6G−PE及び生存度色素(Life Technologies、Cat# L34957)と共に1時間にわたって氷上でインキュベートし、次いで、冷FACS緩衝液で2回洗浄した。次いで、4%PFA固定サンプルを取得した。データを、BD FACS CANTO II血球計算器(Becton Dickinson)で取得し、FlowJoソフトウェアで分析した。
抗体を単独で、またはLPSと組み合わせて腹腔内(IP)投与された後のC57Bl6マウスの腹腔(PEC)における炎症誘発性サイトカイン(CCL4、IL−1β、及びMCP−1)の産生を調節するTREM2抗体の能力を評価した。マウスを、図13Nにおいて記載されるとおりに処置した。簡単に述べると、マウスは、0日目に、40mg/kgの抗TREM2抗体7E5、抗体8F8、またはアイソタイプ対照抗体mIgG1(クローンMOPC−21、Bioxcell)のIP注射を与えられた。1日目に、マウスは、4mg/kgのLPS、または対照としてのPBSのIP注射を与えられた。LPSまたはPBS注射後1.5時間目に、マウスからの血清サンプル中のCCL4、IL−1β、及びMCP−1(CCL2)の濃度をサイトメトリービーズアッセイ(cytometric bead assay;CBA)によって測定した。
TREM2の細胞外部分は、可溶性形態(sTREM2)にシェディングされ得て、したがって、血漿及び脳脊髄液(CSF)において検出され得ると考えられる。アルツハイマー病または前頭側頭型認知症を有する個体では、CSF中のsTREM2の量が、健康な対照抗体と比較して減少しているとも考えられている。
免疫細胞の表面上に発現されるある特定のITIM/ITAM受容体を標的とする抗体は、単球、マクロファージ、樹状細胞、及び/またはミクログリア上の受容体の表面レベルを減少させ得ると考えられる。
アルツハイマー病のマウスモデル
APP/PS1マウスは、APP及びPSEN1の両方のためのヒト導入遺伝子を含有する。APPヒト導入遺伝子は、スウェーデン型変異(K670N、M671L)を含有し、PSEN1ヒト導入遺伝子は、L166P変異を含有する。両方の導入遺伝子は、Thy1プロモーターの制御下にある。
APP/PS1マウス及び5XFADマウスの脳の種々の領域において炎症性遺伝子の発現を調節する抗TREM2抗体の能力を、抗TREM2抗体の頭蓋内(IC)投与の後に評価した。
上記のとおり、脳の種々の領域においてアミロイドベータ(Aベータ)ペプチドの量を減少させる抗TREM2抗体の能力を、APP/PS1マウスに抗TREM2抗体を頭蓋内(IC)投与した後か、または5xFADマウスに抗TREM2抗体7E5を腹腔内投与した後に評価した。Aベータペプチドを定量化するために、パラホルムアルデヒド固定された左脳半球を、低温保護として一連の10、20、及び30%スクロース溶液に通し、25μm凍結水平断面を、スライディングミクロトームを使用して収集し、アジ化ナトリウムを含有するPBSに浮かべて4℃で貯蔵した。推定される注射部位をまたぐ300μm間隔の切片を初めにマウントし、クレシルバイオレットによって染色して、注射部位を同定した。その後のすべての組織学及び免疫組織化学では、注射部位をまたぐ100μm間隔の6つの切片を選択し、分析した。Aベータ(ウサギポリクローナル抗体Aβ1−16;Invitrogen)についてのフリーフローティング免疫組織化学を行った。陽性染色液によって占められた面積のパーセントを、Nikon elements BRソフトウェアを使用して計算した。
抗TREM2抗体を頭蓋内注射されたAPP/PS1マウス、または抗TREM2抗体7E5を3カ月にわたって週1回末梢注射された5xFADマウスにおいて、脳の種々の領域におけるミクログリアの数、形態、及び活性化状態を調節する抗TREM2抗体の能力を、抗TREM2抗体で処置した後に評価した。マウスを上記のとおり処置し、潅流し、脳サンプルを組織診のために処理した。注射部位をまたぐ100μm間隔の6つの切片を選択し、分析した。切片を、DPBS中4%ヤギ血清中の一次抗CD11b抗体、1:3,000(ラットモノクローナル、AbD Serotec、Raleigh、NC)中で室温のままで、次いで、終夜、4℃でインキュベートした。次いで、切片を、ビオチン化二次抗体中で2時間にわたってインキュベートした。GFAPではヤギ抗ウサギIgGを、かつCD11bではヤギ抗ラットを、両方とも1:3,000で使用した(Vector Laboratories、Burlingame、CA)。二次抗体シグナルの増幅を、アビジン−ビオチン複合体(ABC)(Vector Laboratories、Burlingame、CA)中で1時間にわたってインキュベートすることによって達成した。発色のために、製造者指示に従って、ベクタージアミノベンジジン(DAB)ペルオキシダーゼキット(Vector Laboratories、Burlingame、CA)を使用した。切片をスライドにマウントし、終夜放置して風乾し、エタノール勾配中で脱水し、続いて、キシレンでインキュベートし、DPX mountant(Electron Microscopy Sciences、Hatfield、PA)を使用してカバーガラスを載せた。陽性染色液によって占められた面積パーセントを、Nikon elements BRソフトウェアを使用して計算した。
アルツハイマー病(AD)の認知障害を遅延させる、予防する、または逆転させる抗TREM2抗体の能力を評価するために、5X FADマウスを使用した。5X FADマウスを、50mg/kgの抗TREM2抗体7E5またはアイソタイプ対照抗体mIgG1(クローンMOPC−21、Bioxcell)で12週間にわたって週1回処置した。処理の終了時に、マウスを、放射状アーム水迷路及び新規物体認識試験を使用して認知障害の減少について試験した。
放射状アーム水迷路は、Wilcock et al.,(2006)The Journal of Neuroscience、26:5340において記載されているとおりの空間学習及び記憶課題である。簡単に述べると、抗体処置から12週間後に、5X FADマウスを、2日間の放射状アーム水迷路パラダイムに、続いて、1日のオープンプール可視プラットフォームタスク(open−pool visible platform task)に供した。装置は、Gordon et al.,(2001).Neurobiol Aging 22:377において以前に記載されたとおりの6アーム迷路であった。放射状アーム水迷路課題を、Wilcock et al.,(2004).J Neuroinflammation 1:24において以前に記載されたとおりに実行した。1日目に、15回の試験を、5回からなる3つのブロックで実行した。マウスをさらに、4頭のマウスからなるコホートで走らせて、各トライアル間の短時間の静止を可能にし(他の3頭のマウスを走らせるので)、4頭のマウスからなる別のコホートを走らせる場合には、ブロック間により長い休憩を可能にした。これによって、疲労させることなく、高齢マウスを迅速に試験することができた。さらに、試験の分散練習は、10〜14日にわたる毎日の集中試験(daily massed trials)と比較して、習得速度を増強すると考えられる。出発アームを各トライアルで変え、目標アームは、両方の日で変えないままにした。最初の11回の試験では、プラットフォームは交互に、見える、次いで、見えなくなり、最後の4回のトライアルでは見えないままであった。2日目に、マウスを、プラットフォームがすべてのトライアルで見えないことを除いて、1日目と全く同じ手法で走らせた。各トライアルで、1分の時間枠で、エラー(間違ったアームへの侵入)の数を測定した。不活発なマウスに起因する混乱を回避するために、1つのエラーを、20秒ごとに、アームの選択に失敗したマウスに割り当てる。3回の連続試験での各マウスのエラーを平均して、毎日、試験から5つのブロックを生じさせた。試験ブロックを、StatView(SAS Institute、Cary、NC)を使用してANOVAによって統計的に分析した。放射状アーム水迷路の2日後に、マウスを、可視プラットフォームを備えたオープンプールタスクで15回試験して、放射状アーム迷路における不十分なスコアが記憶障害ではなく感覚または動作障害に起因し得るかどうかを特定した。現行の試験では、すべてのマウスが、迷路の可視プラットフォームバージョンで十分に動作し、感覚または動作障害によって排除されたマウスはいなかった。
新規物体認識試験(NORT)は、アルツハイマー病のマウスモデルにおいて認知異常を測定するための高感度で再現可能な試験である。5X FADマウスを遮音室内で、それぞれ一度、開放式ガラス製水槽様の透明箱に、1時間の順応期間にわたって入れた。翌日、それらを、箱の2つの異なる角に置かれた2つの同一の清浄な石膏製の物体と共に、そのボックスに5分間にわたって再導入して、基線活性を測定した。4時間後に、物体の1つを、同じサイズ及びテクスチャの新しいものと置き換えて、マウスをさらに5分間にわたって同じケージに再導入して、新規物体認識について試験した。物体探査にマウスが費やした時間を、異なる処理に対して盲検化されたオペレーターが手入力で記録した。物体のそれぞれで費やされた累積時間を記録した。物体の探査は、2cmの距離で物体に鼻を向けること、及び/または鼻でそれに触れることと定義された。合計探査時間のうち、新たな物体を探査するために動物が費やした合計時間のパーセンテージが、認識記憶の測定値であった。基線では、マウスは、2つの物体のそれぞれでほぼ同じ時間を費やしたが、それというのも、両方とも、マウスにとって新規であるためである。試験では、認知的に健康なマウスは、新たな物体を「新しい」と特定し、元のものを覚えており、したがって、新たな物体を探査するためにより多くの時間(その時間のうちの約70〜75%)を費やす。
アルツハイマー病(AD)の発症を遅延させる、予防する、または逆転させる抗TREM2抗体の能力を評価するために、Tg2576マウスを使用する。Tg2576マウスは、スウェーデン型変異(KM670/671NL)を有するAPPの変異体型(アイソフォーム695)を過剰発現する。マウスを、98〜99週齢から始めて、50mg/Kgの抗TREM2抗体7E5で、またはアイソタイプ対照抗体mIgG1(クローンMOPC−21、Bioxcell)で週1回処置する。マウスを、免疫組織化学で、かつ組織抽出物のELISAによって、Aベータプラーク負荷について試験する。マウスを、脳内のミクログリアの数について、及びMorris水迷路、空間学習及び記憶課題、放射状アーム水迷路、空間学習及び記憶課題、Y型迷路(空間認知の測定値として自発的変更を定量化する)、オープンフィールドにおける新規選好、学習及び記憶を評価するためのオペラント学習、ならびに恐怖条件付けを使用して認知障害の減少についてさらに試験する(mousebiology.org website;Wang et al.,(2015)Cell.pii:S0092−8674(15)00127−0)。
3頭のC57Bl6またはBALB/cマウス(雌、8週齢)からなる群を、PBS100ulに懸濁させた1×106のMC38またはCT26結腸癌細胞、またはEMT−6マウス乳癌細胞で皮下攻撃した。動物に、移植の前に、イソフルランで麻酔をかける。腫瘍が700〜1000mm3のサイズに達したときに、腫瘍を外植して、FACSによって腫瘍微細環境におけるTREM2発現を分析した。比較として、腫瘍を有するマウスの脾臓またはナイーブマウスの対照脾臓も分析した。FACSによる発現分析のために、腫瘍及び脾臓を、1mg/mlのコラゲナーゼを含有するPBS中でインキュベートし、次いで、細胞ストレーナーによって処理して、単細胞懸濁液を得た。次いで、細胞を抗CD45−PerCp−Cy7、抗CD11b−PerCP−Cy5.5、抗 CD3−PC、抗Gr1−FITC、抗NK1.1−PE、抗TREM2−APC抗体及び生存度色素(Life Technologies、Cat# L34957)と共に30分間にわたって氷上でインキュベートし、次いで、冷FACS緩衝液で2回洗浄した。次いで、4%PFA固定サンプルを取得した。データをBD FACS CANTO II血球計算器(Becton Dickinson)で取得し、FlowJoソフトウェアで分析した。
TREM2野生型(WT、n=11)及びTREM2ノックアウト(KO、n=14)マウス(性別及び年齢適合同腹子、10+/−2週齢)からなる群を、PBS100ul中に懸濁させた1×106のMC38結腸癌腫瘍細胞で皮下攻撃した。マウスに、移植の前にイソフルランで麻酔をかけた。5日目から始めて、腫瘍成長を、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視した。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。経時的な腫瘍サイズ(体積、mm3で表される)が評価項目である。
8週(+/−2週)齢の10頭のBALB/cマウスからなる群を、PBS100ul中に懸濁させた5×106のEMT−6腫瘍細胞で皮下攻撃する。移植の前に、動物に、イソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスの群に、1、4、8、15、及び22日目に、40mg/kgの抗TREM2抗体をIP注射する。腫瘍成長を、4日目から始めて、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視する。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存%が評価項目である。腫瘍生着及び成長速度の減少、腫瘍浸潤性免疫抑制マクロファージの数の減少、ならびに腫瘍へのエフェクターT細胞流入の増加は、遮断抗TREM2抗体の抗がん作用を示している。
8週(+/−2週)齢の10頭のBALB/cマウスからなる群を、PBS100ul中に懸濁させた5×106のEMT−6腫瘍細胞で皮下攻撃する。移植の前に、動物に、イソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスの群に、1、4、8、15、及び22日目に、40mg/kgの抗TREM2抗体を単独で、または8及び11日目のチェックポイントタンパク質に対する抗体(例えば、抗PDL1 mAbクローン10F.9G2及び/または抗CTLA−4 mAbクローン9H10)と組み合わせてIP注射する。処置群には、抗TREM2、抗CTLA−4、抗TREM2+抗CTLA−4及びアイソタイプ対照が含まれる。腫瘍成長を、4日目から始めて、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視する。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存%が評価項目である。組合せ療法に伴う腫瘍成長の減少、生存率の上昇は、抗TREM2抗体が、抗チェックポイント抗体と相加的または相乗的治療効果を有することを示している。チェックポイント分子に対するアンタゴニスト抗体には、PDL1、PDL2、PD1、CTLA−4、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、及びホスファチジルセリン(PS)に対する抗体が含まれる。阻害性サイトカインに対するアンタゴニスト抗体には、CCL2、CSF−1、及びIL−2に対する抗体が含まれる。
実施例19に記載のとおり、8週(+/−2週)齢の15頭のC57Bl6/NTacマウスからなる群を、腫瘍細胞で皮下攻撃する。移植の前に、動物に、イソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスに、3日ごとに4用量で、抗TREM2抗体200ugを単独で、または3、6、及び9日目の刺激性チェックポイントタンパク質を活性化するアゴニスト抗体(例えば、OX40またはICOS mAb)と組み合わせて腹腔内注射する。腫瘍成長を、4日目から始めて、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視する。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存パーセントが評価項目である。併用療法に伴う腫瘍成長の減少及び生存パーセントの上昇は、抗TREM2抗体が刺激性チェックポイント抗体と共に相加的または相乗的治療効果を有することを示している。刺激性チェックポイント抗体には、CD28、ICOS、CD137、CD27、CD40、及びGITRに対するアゴニスト/刺激性抗体が含まれる。
実施例19に記載のとおり、8週(+/−2週)齢の15頭のC57Bl6/NTacマウスからなる群を、腫瘍細胞で皮下攻撃する。移植の前に、動物に、イソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスに、3日ごとに4用量で、抗TREM2抗体200ugを単独で、または刺激性サイトカイン(例えば、IL−12、IFN−a)と組み合わせて腹腔内注射する。腫瘍成長を、4日目から始めて、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視する。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存パーセントが評価項目である。併用療法に伴う腫瘍成長の減少及び生存パーセントの上昇は、抗TREM2抗体が免疫刺激性サイトカインと共に相加的または相乗的治療効果を有することを示している。刺激性サイトカインには、IFN−a/b、IL−2、IL−12、IL−18、GM−CSF、及びG−CSFが含まれる。
アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体の治療有用性を、炎症性疾患のモデルにおいて試験する。例えば、関節リウマチまたは別の炎症性疾患の確立されたモデルである(Mizoguchi(2012)Prog Mol Biol Transl Sci.,105:263−320;及びAsquith et al.,(2009)Eur J Immunol.39:2040−4)。
成体7〜9週齢の雌のC57BL/6マウス(Charles River Laboratoriesから入手)に、尾基部で両側性に、不完全フロイントアジュバント(Difco)中にミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質ペプチド35〜55(アミノ酸MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK(配列番号885);Seqlab)100μg及びマイコバクテリウム結核H37 Ra(Difco)1mgを含有する接種源200μlを注射する。百日咳毒素(200ng;List Bio−logical Laboratories)を、免疫化後0日目、及び2日目に注射する。臨床的徴候を次のとおりにスコアリングする。0:臨床徴候なし、1:完全に引きずられた尾、2:完全に引きずられた尾及び異常な歩行、3:後肢1本の不全対麻痺、4:完全な後肢不全対麻痺、及び5:前肢及び後肢の麻痺または停滞。14日目に疾患の発症(1以上の臨床スコア)を有するマウスのみを実験に使用する。アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体を、最初の臨床症状の日に、または任意の他の所望の時点で、EAE罹患マウスに腹腔内または静脈内注射する(PLoS Med(2007)4(4):e124)。
アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体の治療有用性を、外傷性脳損傷の確立された動物モデルにおいて試験する(Tanaka,Y et al.(2013)Neuroscience 231 49−60)。例えば、ミクログリア及び星状細胞の活性化を誘導する外傷性脳損傷のモデルを使用する。8週または9週齢の雄のC57BL/6J WTマウスまたはプログラニュリンヘテロ接合型マウスを使用する(Charles River LaboratoriesまたはJackson Laboratoriesから購入)。マウスに、滅菌生理食塩水に溶解させた塩酸キシラジン(8mg/kg)及び抱水クロラール(300mg/kg)を腹腔内投与することによって麻酔をかけ、その後、脳定位固定装置に置く(Narishige、Tokyo、Japan)。切開を頭皮で行って、頭蓋を露出させる。頭蓋から骨膜を除去し、穴を右大脳半球上に歯科用ドリルで開け、硬膜をニードルチップで除去する。外径0.5mmを有するステンレス鋼製カニューレを使用して、矢状刺創を右半球に作製する。カニューレを、正中線に対して1.3mm側方、及びブレグマに対して1mm後方に位置させ、チップが深さ2mmに達するまで脳に導入する。次いで、カニューレを尾側に2mm移動させ(ブレグマから3mm)、次いで、頭側に2mm移動させて、その最初の位置に戻す。最後に、カニューレを脳から取り出し、頭皮創傷を縫合する。
アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体の治療有用性を、毒素誘発損傷後の神経炎症及びニューロン損失のモデルにおいて試験する(Martens、LH et al.,(2012)The Journal of Clinical Investigation、122、3955)。3カ月齢のマウスを、2日間にわたる1日当たりMPTP(1−メチル−4−フェニル−1,2,3,6−テトラヒドロピリジン)(4μg/体重g)(Sigma−Aldrich)の4回の腹腔内注射またはPBSで処置する。マウスを標準プロトコルに従ってアゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体で処置し、次いで、立体解析学的計数を使用して分析して、記載されているとおり、黒質緻密部(SNpc)中のドーパミンニューロン及びミクログリアを定量化する。
アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体は、マーカーCD83及びCD86を発現し、次いで、抗原特異的T細胞増殖を誘導する骨髄由来樹状細胞(BMDC)の能力を増加させ得ると考えられる。TREM2抗体が樹状細胞上で細胞表面マーカーCD83及びCD86の発現を誘導するかどうかを決定するために、抗体を、終夜、4℃で、12ウェルプレート内に、PBS中に2または5μg/mlでプレーティングする。翌日、ウェルをPBSで3回洗浄し、5日目に、未熟ヒトDCを採取し、1ウェル当たり100万細胞でプレーティングし、37℃、5%CO2で、サイトカインの非存在下でインキュベートする。CD86、CD83及びCD11c(BD Biosciences)のFACS分析を48時間後に、BD FACS Canto 48で行う。データ分析を、FlowJo(TreeStar)ソフトウェアバージョン10.0.7で行う。別法では、5日目に、未熟ヒト樹状細胞を、1ウェル当たり100,000細胞で、U底非TC処理96ウェルプレート内で、サイトカインを含まない培地中にプレーティングする。抗体を5μg/mlで、20μg/mlのLPS除去された抗ヒト二次抗体(Jackson ImmunoResearch)を伴って、または伴わずに添加する。CD86、CD83、及びCD11c(BD Biosciences)についてのFACS分析を、以前に記載されたとおり、抗体添加から48時間後に行う。BMDCによって誘導されるオボアルブミン(OVA)特異的T細胞応答は、CFSE希釈によって決定され得る。BMDCを、培養から6日後にMACSによって単離し、丸底96ウェルプレート1ウェル当たり1×104の細胞で、OVA(2または0.5mg/mL)及びCpG DNA(100または25nM)と共に、GM−CSF(10ng/mL)の存在下で、4時間にわたってプレーティングする。OT−IIトランスジェニックマウスの脾臓及びリンパ節からのCD4 T細胞を、Dynal Mouse CD4 Negative Isolation Kit(Invitrogen)を使用することによって単離し、CFSE(最終0.8mM)で染色する。4時間のDC培養の後に、1×105のCFSE標識CD4 OT−IIT細胞を各ウェルに添加し、72時間にわたってインキュベートする。培養後に、細胞を抗CD4モノクローナル抗体で染色し、フローサイトメトリーを行って、ゲートされたCD4 OT−IIT細胞のCFSE希釈を決定する。分裂のパーセンテージ及び分裂指数を計算するデータ分析を、Flowjoソフトウェア(Treestar)によって行う(Eur.J.Immunol.2012.42:176−185)。
CD83及びCD86の発現を改変する抗TREM2抗体の能力を評価するために、プレート結合抗体及び可溶性抗体の両方を、樹状細胞(DC)と共にインキュベートし、CD83、CD86、CCR7、及びリン酸化ERKの発現を測定した。T細胞増殖を調節する抗TREM2抗体の能力を評価するために、DCを、T細胞及び抗TREM2抗体と共にインキュベートし、T細胞増殖のレベルを測定する。抗体を終夜、4℃で、12ウェルプレート内で、PBS中2または5ug/mlでプレーティングする。翌日、ウェルをPBSで3回洗浄する。5日目に、未熟ヒトDCを採取し、1ウェル当たり100万細胞でプレーティングし、37℃、5%CO2で、サイトカインの非存在下でインキュベートする。CD86、CD83、CD11c、HLA−DR、及びLIN(BD Biosciences)のFACS分析を48時間後に、BD FACS Canto 48で行う。データ分析を、FlowJo(TreeStar)ソフトウェアバージョン10.0.7で行う。CD83、CD86、及びCCR7のレベルを、CD11c+HLA−DR+LIN−細胞集団について評価する。細胞内ERKリン酸化のために、細胞を、1%ホルムアルデヒドで固定し、cytofix/cytoperm kit(BD)で透過化し、PE−ERK抗体(BD)で染色した後に、細胞内Erkリン酸化をフローサイトメトリーで決定する。
TLR応答を改変する抗TREM2抗体の能力を評価するために、骨髄由来マクロファージ(BMDM)または初代腹膜マクロファージ応答を、TREM2の欠損によるTLRシグナル伝達に変更する(Turnbull、IR et al.、J Immunol 2006;177:3520−3524)。アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体は、マクロファージにおけるTLR応答を増加または正常化し得ると考えられる。初代マクロファージを誘発するために、マウスを、腹腔内注射によって2%チオグリコール酸培地1.5mlで処置し、次いで、細胞を腹膜潅注によって単離する。BMDMを生成するために、全骨髄を、10%子ウシ血清、5%ウマ血清、及び6ng/mlの組換えヒトCSF−1(R&D Systems)を補充されたDMEM中で培養する。細胞を5〜6日間にわたって培養し、接着細胞を、PBS中の1mのMEDTAで剥離する。細胞を、市販の抗体、すなわち抗CD11b、抗CD40、抗GR1(BD Pharmingen)、及びF4/80(Caltag Laboratories)で染色する。BMDMを再プレーティングし、4時間にわたって37℃で接着させ、次いで、TLRアゴニスト、例えば、LPS(Salmonella abortus equi)、チモサン(Saccharomyces cerevisiae)、及びCpG 1826 DNA(例えば、Sigma−Aldrichから購入)を添加する。細胞培養上清を刺激から24時間後に収集し、培養上清中のIFN−a4、IFN−b、IL−6、IL−12 p70、及びTNFサイトカイン濃度のレベルを、製造者プロトコルに従ってマウスIFN−a4、IFN−b、IL−6、IL−12 p70、TNF、及びIL−10 ELISAキット(eBioscience)及びVeriKine Mouse IFN−b ELISA kit(PBL interferon source)を使用して決定する。別法では、ヒトまたはマウスサイトカイン用のCytometric Bead Array(BD Biosciences)、またはV−PLEX HumanまたはマウスサイトカインシステムをMeso scale discovery Systemと共に使用することができる。別法では、サイトカイン分泌を分析するために、指示されている遺伝子型のBM由来マクロファージを5日目に採取し、96ウェルプレート上に、105細胞/ウェルでプレーティングする。次いで、細胞を、指示されている濃度のLPSまたはチモサンで刺激する。24時間後に、細胞培養上清を採取し、Cytometric Bead Array kit(BD、製造者指示に従う)を使用して、炎症性サイトカイン(IL−12、IL−10、IFN−γ、TNFa、IL−6、MCP−1)の存在についてFACSによって分析する。生存度(DAPI)及び表面マーカー(CD11b、CD86)の発現を評価するために、細胞をまた、FACSによって分析する。
TREM2が欠損した場合、骨髄由来マクロファージ(BMDM)または初代腹膜マクロファージ応答には、TLRシグナル伝達の改変がある(Turnbull,IR et al.,J Immunol 2006;177:3520−3524)。TREM2抗体が炎症性サイトカイン産生の変化を誘導するかどうかを決定するために、マウス野生型(WT)及びTREM2ノックアウトマウス(KO)またはTREM2ヘテロ接合型マウス(HETS)を抗体のみと共に、または非飽和レベルのTLR刺激物質と組み合わせた抗体と共に培養し、サイトカインのレベルを24〜48時間後に測定する。BMDMを生成するために、野生型(WT)に由来する全骨髄を、10%子ウシ血清、5%ウマ血清、及び50ng/mlの組換えマウスCSF−1(R&D Systems)を補充されたRPMI中で培養した。細胞を5日間にわたって培養し、接着細胞をPBS中の1mM EDTAで剥離する。BMDMを96ウェルプレートで105細胞/ウェルでプレーティングし、4時間にわたって37℃で接着させる。次いで、細胞を抗体のみに曝露し、0.01〜100ng/ml(LPS)または0.01〜100μg/ml(チモサン)の濃度のTLRアゴニストLPS(Salmonella abortus equi)またはチモサン(Saccharomyces cerevisiae)のみで刺激するか、またはTrem2抗体と組み合わせたLPSまたはチモサンで刺激する。別法では、WT及びKOマウスから単離されたマクロファージを10ng/mlのサイトカインIL−4または50ng/mlのIFN−ガンマの存在下で、Trem2抗体を伴って、または伴わずに培養する。細胞培養上清を刺激から24または48時間後に収集し、TNFa、IL−6、IL−10、及びMCP−1サイトカインのレベルを、製造者プロトコルに従ってCytometric Bead Array Mouse Inflammation Kit(BD)を使用することによって測定した。
マウスマクロファージを、インビボで直接、Brewer’s Thioglycollate誘発腹膜マクロファージで刺激し、次いで、腹腔中のサイトカインの濃度を測定した。TREM2抗体が炎症性サイトカイン産生の変化を誘導するかどうかを決定するために、野生型(WT)マウス及びTREM2ノックアウトマウス(KO)に、3%Brewer’s Thioglycollate3mlを0日目に腹腔内注射した。3日目に、マウスに、抗TREM2抗体7E5またはアイソタイプ対照抗体(mIgG1)を15分間または24時間にわたって腹腔内注射した。次いで、腹膜細胞を、生理食塩水4mlを使用して腹膜潅注することによって採取し、PBSで洗浄した。TNFa及びMCP−1/CCL2サイトカインのレベルを、製造者プロトコルに従ってCytometric Bead Array Mouse Inflammation Kit(BD)を使用することによって測定した。
骨髄由来骨髄系前駆細胞は、アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体での処理、ならびにアポトーシス細胞との同時培養によるか、もしくは同様の刺激による100ng/ml LPS(Sigma)での刺激の後に、抗炎症性サイトカインIL−10の減少を示し得ると考えられる。骨髄由来骨髄系前駆細胞の単離を次のとおりに行う。骨髄細胞を成体6〜8週齢の雌のC57BL/6マウス(Charles River、Sulzfeld、Germany)から、及びTREM2欠損マウス(KOMP repository)から、後肢の脛骨及び大腿骨の髄腔から単離する。赤血球の除去を、低張性溶液での溶解によって行う。細胞を、10%ウシ胎児血清(Pan Biotech)及び10ng/mlのGM−CSF(R&D Systems)を含有するDMEM培地(Invitrogen)中で、75cm2培養フラスコ(Greiner Bio−One)内で培養する。24時間後に、非接着細胞を収集し、新たな75cm2培養フラスコに再播種する。培地を5日後に変え、細胞をさらに10〜11日間にわたって培養する。細胞をTrem2抗体の存在または非存在下で培養し、上清を24時間後に収集し、細胞から放出されたIL−10のレベルを、製造者指示に従ってIL−10 ELISA(QuantikineM mouse IL−10、R&D Systems)によって決定する(JEM(2005)、201;647−657;及びPLoS Medicine(2004)、4 | Issue 4 | e124)。
アゴニスト抗TREM2及び/またはTREM2二重特異性抗体は、骨髄細胞系列、例えば、単球、樹状細胞マクロファージ及びミクログリアからの細胞において、アポトーシスニューロン、神経組織デブリ、非神経組織デブリ、細菌、他の異物、及び病原タンパク質、任意選択で例えば、Aベータペプチド、アルファシヌクレインタンパク質、Tauタンパク質、TDP−43タンパク質、プリオンタンパク質、ハンチンチンタンパク質、RAN、グリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含むリピート関連非ATG(RAN)翻訳産物抗原の食作用を誘導し得ると考えられる。二重特異性抗体は、TREM2抗原、及び限定ではないが、Aベータペプチド抗原、またはアルファシヌクレインタンパク質抗原、またはTauタンパク質抗原、またはTDP−43タンパク質抗原、またはプリオンタンパク質抗原、またはハンチンチンタンパク質抗原、またはRAN、グリシン−アラニン(GA)、グリシン−プロリン(GP)、グリシン−アルギニン(GR)、プロリン−アラニン(PA)、またはプロリン−アルギニン(PR)から構成されるジペプチドリピート(DPRペプチド)を含む翻訳産物抗原を含む第2の抗原を認識する抗体であってよい。単球を、成体C57BL/6マウスから収集される末梢血から単離する。低張性溶解緩衝液は、赤血球を除去する。細胞を、培養皿上に、10%ウシ胎児血清(Pan Biotech)を含有するRPMI培地(Invitrogen)中でプレーティングする。細胞を、数時間にわたって、37℃で、10%CO2中で培養する。トリプシン処理の後に、接着細胞を収集し、食作用実験のために使用する。
抗TREM2、及び/またはTREM2/二重特異性抗体は、ミクログリア細胞、マクロファージ、及び樹状細胞においてCCR7、ならびにCCL19及びCCL21への遊走を誘導し得ると考えられる。ミクログリアl、マクロファージまたは樹状細胞を、アゴニスト抗TREM2及び/またはTREM2/DAP12二重特異性抗体と共に、または対照抗体と共に培養する。細胞を72時間後に収集し、CCR7特異的抗体で免疫標識し、フローサイトメトリーによって分析する。CCR7発現の増加の任意の機能的結果を決定するために、走化性アッセイを行う。ミクログリア、マクロファージまたは樹状細胞を、アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2/DAP12二重特異性抗体で、TREM2を介して刺激し、2チャンバーシステム内に入れる。ケモカインリガンドCCL19及びCCL21に向かって遊走するミクログリア細胞の数を定量化する(JEM(2005)、201、647−657)。走化性アッセイでは、ミクログリアl、マクロファージまたは樹状細胞を、アゴニスト抗TREM2またはTREM2/二重特異性抗体に曝露し、1μg/mlのLPSで処理する。ミクログリア、マクロファージまたは樹状細胞を、下部チャンバー内に100ng/mlのCCL19またはCCL21(両方ともPeproTech製)を含む培地450μlを含有する、トランスウェルシステム(3μm空孔フィルター;Millipore)の上部チャンバーに移す。1時間のインキュベーション期間の後に、下部チャンバーに移動したミクログリアマクロファージまたは樹状細胞の数を、顕微鏡法によって3つの独立した領域において計数する(JEM(2005)、201、647−657)。
アゴニスト抗TREM2、またはTREM2二重特異性抗体は、ミクログリア細胞、マクロファージ、及び樹状細胞においてF−アクチンを誘導し得ると考えられる。ミクログリア、マクロファージまたは樹状細胞、及びTREM2を形質導入されているか、またはTREM2を発現する目的の他の細胞を培養プレートに添加し、次いで、アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体、または対照抗体に曝露する。細胞を固定し、遮断し、次いで、1時間後に、Alexa Fluor 546コンジュゲートしたファロイジン(Molecular Probes)で染色し、F−アクチンを、蛍光色素で標識する。画像を40倍対物レンズ(Leica)を備えた共焦点レーザー走査型顕微鏡法によって収集する(JEM(2005)、201、647−657)。
アゴニスト抗TREM2及び/またはTREM2二重特異性抗体は、破骨細胞形成を誘導し、破骨細胞形成の速度を上昇させ得ると考えられる。破骨細胞または骨髄由来単球/マクロファージ(BMM)前駆細胞を産生するRAW264.7細胞を、10%FBS(Atlantic Biologics、Atlanta、GA、USA)及びペニシリン−ストレプトマイシン−グルタミン(Mediatech)を補充されたRPMI−1640培地(Mediatech)、または別の適切な培地中で維持する。FLAGエピトープがN末端に付加されたTREM2B cDNAを、IRESの上流のレトロウイルスベクターpMXpieに挿入し、続いて、eGFP cDNA配列を挿入する。製造者プロトコルに従って、Fugene 6(Roche)を使用して、細胞にpMXpie−FLAG TREM2Bを遺伝子導入する。細胞を、2μg/mlのピューロマイシン(Sigma)で選択する。フローサイトメトリーを使用することによって、安定なピューロマイシン耐性クローンを、抗FLAG M2モノクローナル抗体(Sigma)についてスクリーニングし、次いで、サブクローニングし、ピューロマイシン選択培地で維持する。
以前に記載されたとおり(例えば、Beattie,MS et al.,(2002) Neuron 36,375−386;Volosin,M et al.,(2006) J.Neurosci.26,7756−7766;Nykjaer,A et al.,(2005) Curr.Opin.Neurobiol.15,49−57;Jansen,P et al.,(2007) Nat.Neurosci.10,1449−1457;Volosin,M et al.,(2008) J.Neurosci.28,9870−9879;Fahnestock,M et al.,(2001) Mol.Cell Neurosci.18,210−220;Nakamura,K et al.,(2007) Cell Death.Differ.14,1552−1554;Yune,T et al.,(2007) Brain Res.1183,32−42;Wei,Y et al.,(2007) Neurosci.Lett.429,169−174;Provenzano,MJ et al.,(2008) Laryngoscope 118,87−93;Nykjaer,A et al.,(2004) Nature 427,843−848;Harrington,AW et al.,(2004) Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.101,6226−6230;Teng,HK et al.,(2005) J.Neurosci.25,5455−5463;Jansen,P et al.,(2007) Nat.Neurosci.10,1449−1457;Volosin,M et al.,(2008) J.Neurosci.28,9870−9879;Fan,YJ et al.,(2008) Eur.J.Neurosci.27,2380−2390;Al−Shawi,R et al.,(2008) Eur.J.Neurosci. 27,2103−2114;and Yano,H et al.,(2009) J.Neurosci.29,14790−14802)、アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体の治療有用性を、加齢、発作、脊髄損傷、網膜ジストロフィ、前頭側頭型認知症、ハンチントン病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症及びアルツハイマー病のための動物モデルにおいて試験する。
以前に記載されたとおりに(例えば、Lance,A et al.,(2011) Diabetes,60,2285;及びKjolby,M et al.,(2012) Cell Metabolism 12,213−223)、アゴニスト抗TREM2及び/またはTREM2二重特異性抗体の治療有用性を、アテローム硬化症のモデルにおいて試験する。
アゴニスト抗TREM2及び/またはTREM2二重特異性抗体の治療有用性を、感染のモデルにおいて試験する。以前に記載されたとおりに(例えば、Yin,F et al.,(2009) J.Exp.Med,207,117−128)、例えば、正常なマウスにおけるListeria monocytogenesまたは他の感染を使用することができる。
細胞(J774、RAW 264.7、BMM細胞、または破骨細胞)を、PBS−EDTAで組織培養皿から除去し、PBSで洗浄し、計数する。J774(40×106)またはRAW 264.7細胞(10×106BMMまたは破骨細胞)を、1μg/106細胞の抗TREM2及び/もしくはTREM2二重特異性抗体、またはアイソタイプ適合対照抗体と共に20分間にわたって、氷上で、または他の条件下でインキュベートする。細胞を氷冷放射免疫沈降アッセイ(RIPA)緩衝液に20分間にわたって溶解させ、続いて、16,000gで10分間にわたって4℃で遠心して、不溶性物質を除去する。得られた上清を、指示抗体(DAP12、ERK、またはAKT)及びプロテインA−またはプロテインG−アガロース(Sigma)との免疫沈降反応に掛ける。ビーズをRIPA緩衝液で充分に洗浄し、タンパク質をSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)によって分離する。次いで、タンパク質を、ウエスタンブロット法によってニトロセルロース膜に移し、適切な抗体(DAP12、ERK、またはAKTのリン酸化形態を特異的に認識する抗体)と共にインキュベートし、記載されているとおりに(例えば、Peng et al.,(2010)Sci Signalル.,3(122):ra38)、増強化学発光(ECL)システム(Pierce)で可視化する。
BMM細胞を、HEPES含有緩衝液[20mMのHEPES(pH7.3)、120mMのNaCl、1mMのCaCl、1mMのMgCl、5mMのKCl、グルコース(1mg/ml)、ウシ血清アルブミン(1mg/ml)]で2回洗浄し、続いて、0.05%Pluronic F−127(Invitrogen)及び1μMのIndo−1 AM(Invitrogen)中で20分間にわたって37℃でインキュベートする。細胞をHEPES緩衝液で2回洗浄し、次いで、抗TREM2及び/またはTREM2二重特異性抗体(16μg/ml)で、または対照抗体(16μg/ml)で刺激し、分光光度計(PTL Photon Technology International)によって監視する。Indo−1蛍光放出を、製造者指示に従ってカルシウム(Ca2+)に変換する(例えば、Peng et al.,(2010)Sci シグナル.,3(122):ra38)。
マウス骨髄前駆体を、脛骨及び大腿骨髄細胞を冷PBSでフラッシュすることによって得る。PBSで1回洗浄した後に、赤血球を、ACK Lysing Buffer(Lonza)を使用して溶解させ、PBSで2回洗浄し、0.5×106細胞/mlで完全RPMI培地(10%FCS、Pen/Strep、Gln、neAA)中に、マクロファージを作製するためには指示量の50ng/mlのM−CSF、または10ng/mlのGM−CSFと共に懸濁させる。M2型マクロファージでは、10ng/ml IL−4を、培養細胞に添加する。M1型マクロファージでは、50ng/mlのIFN−γを添加する。一部の実験では、LPSまたはチモサンを、5日目に、1μg/ml〜0.01ng/mlの濃度で細胞培養に添加する。組換えサイトカインをPeprotechで購入した。BM由来マクロファージの生存度を分析するために、指示遺伝子型の細胞を上記のとおりに調製し、漸変濃度のMCSF中で培養する。細胞を、非組織培養処理されたプレート内で、105/200μlで96ウェルプレートに(ルシフェラーゼベースのアッセイを使用する生存度分析で)、または0.5×106/1mlで6ウェルプレートに(トリパンブルー排除細胞計数で)プレーティングする。新鮮なM−CSFを含有する培地を3日目に添加する。示される時点で、細胞をプレートから、3mMのEDTAで穏やかに剥離し、Burkerチャンバーを使用して計数する。一部の実験では、細胞をまた、CD11b抗体及びDAPIを使用するFACS分析のために染色する。別法では、細胞をそのまま、ToxGlo試薬(Promega)と共にインキュベートし、ルシフェラーゼ活性を決定する。一部の実験では、MCSFを培養培地から5日目に取り出すか、取り出さずに、細胞生存度を36時間後に、FACSによって分析する。成熟破骨細胞細胞培養物を、RANKL及びM−CSFで、24ウェル皿において分化させる。4日後に、完全培地を血清非含有培地に換えて、アポトーシスを誘導する。細胞を、終夜血清飢餓の間にRANKL、PBS、ならびに抗TREM2及び/もしくはTREM2二重特異性抗体、またはアイソタイプ適合対照抗体で処理する。細胞を1%パラホルムアルデヒド中で固定し、製造者指示に従ってTUNELベースのキット(Millipore Corporation)で染色する。アポトーシス核を、倍率20倍のNikon TE2000−E顕微鏡で計数する。結果を、記載されたとおり(例えば、Peng et al.,(2010)Sci Signal.,3(122):ra38)、2つのウェルの6つの無作為に選択された領域における細胞の合計数に対する、アポトーシス細胞のパーセンテージとして表す。同様のアッセイを初代ミクログリア細胞で行う。
細胞生存におけるTREM2の役割を評価するために、野生型(WT)、TREM2ノックアウト(KO)、及びTREM2ヘテロ接合型(Het)マクロファージ及び樹状細胞を、Trem2抗体またはそのフラグメントの存在下で培養し、細胞生存度を決定する。
マウス胚幹細胞に由来するミクログリア細胞を、細胞内免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ(ITAM)モチーフの両方を欠損しているTyrobpの全長または短縮化バージョンを過剰発現するように、レンチウイルスベクターによって遺伝的に修飾する。ミクログリア細胞はまた、TREM2についてヘテロ接合型であるマウス胚幹細胞に由来する。TyrobpまたはTREM2の混乱に応じた全ゲノムでの遺伝子発現変化を評価するために、遺伝子発現データを、(1)ビヒクル、(2)全長Tyrobp、もしくは(3)ドミナントネガティブ型短縮化Tyrobpを過剰発現する、または(4)TREM2のためのノックダウン構築物、例えば、SiRNAを過剰発現するマウスミクログリアマクロファージまたは樹状細胞、及びTREM2についてヘテロ接合型である細胞のRNA配列決定から、さらには、TREM2欠損マウスに由来する細胞から得る。全長Tyrobp及び短縮化Tyrobの過剰発現のための約2,638及び3,415の発現変動遺伝子(differentially expressed genes)が、それぞれ同定されている(Zhang et al.,(2013)Cell 153、707−720)。インタクトなTyrobpを過剰発現するミクログリアからの発現変動遺伝子のうちの約99%は、対照ビヒクルと比較して下方制御される。例えば、液胞/自食作用に関する658の遺伝子、さらには、RNA代謝及び細胞周期有糸分裂に関係する遺伝子は、活性なTyrobpによって下方制御されるが、ドミナントネガティブ型短縮化Tyrobpを発現する細胞では上方制御される。逆に、液胞/自食作用経路のための、及びミトコンドリアのためのほぼ2,856の遺伝子は、ドミナントネガティブ型短縮化Tyrobpを発現するミクログリアにおいては選択的に上方制御される。アゴニスト抗TREM2、及び/またはTREM2二重特異性抗体を、正常なミクログリア細胞において、及びインタクトなTyrobpを過剰発現するミクログリア細胞において、ドミナントネガティブ短縮化Tyrobpを発現する細胞において(Zhang et al.,(2013)Cell 153、707−720)、TREM2のためのノックダウン構築物を発現する細胞において、またはTREM2についてヘテロ接合型である細胞において観察されるのと同様の遺伝子発現プロファイルを誘発するそれらの能力についてスクリーニングする。遺伝子発現ネットワークを変化させることができる抗体を選択する。
8週(+/−2週)齢目の10頭のC57Bl6/NTacマウスからなる群を、PBS100ul中に懸濁させた腫瘍細胞(例えば、1×105〜1×106MC38、Lewis肺、またはB16細胞)で皮下攻撃する。動物に、移植の前にイソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスの群に、3日ごとに4回の用量で、アンタゴニスト抗TREM2抗体、例えば、実施例38及び40において記載したものをそれぞれ200ug、腹腔内注射する。4日目から始めて、腫瘍成長を、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視する。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存率が評価項目である。腫瘍生着及び成長速度の減少、腫瘍浸潤性免疫抑制マクロファージの数の減少、ならびに腫瘍へのエフェクターT細胞流入の増加は、遮断抗TREM2抗体の抗がん作用を示している。
8週(+/−2週)齢目の15頭のC57Bl6/NTacマウスからなる群を、腫瘍細胞で皮下攻撃する。動物に、移植の前にイソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスに、3日ごとに4回の用量で、抗TREM2抗体200ugを単独で、または3、6、及び9日目のチェックポイントタンパク質に対する抗体(例えば、抗PDL1 mAbクローン10F.9G2及び/または抗CTLA−4 mAbクローンUC10−4F10−11)と組み合わせて腹腔内注射する。処理群には、抗TREM2;抗CTLA−4;抗PDL1;抗TREM2+抗CTLA−4;抗TREM2+抗PDL1;及びアイソタイプ対照が含まれる。4日目から始めて、腫瘍成長を、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視した。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存%が評価項目である。併用療法での腫瘍成長の減少及び生存%の上昇は、抗TREM2抗体が、抗チェックポイント抗体と共に相加的または相乗的治療効果を有することを示す。チェックポイント分子に対するアンタゴニスト抗体には、PDL1、PDL2、PD1、CTLA−4、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、及びホスファチジルセリン(PS)に対する抗体が含まれる。阻害性サイトカインに対するアンタゴニスト抗体には、CCL2、CSF−1、及びIL−2に対する抗体が含まれる。
8週(+/−2週)齢目の15頭のC57Bl6/NTacマウスからなる群を、腫瘍細胞で皮下攻撃する。動物に、移植の前にイソフルランで麻酔をかける。2日目から始めて、マウスに、3日ごとに4回の用量で、抗TREM2抗体200ugを単独で、または3、6、及び9日目の刺激性チェックポイントタンパク質を活性化するアゴニスト抗体(例えば、OX40またはICOS mAb)と組み合わせて腹腔内注射する。4日目から始めて、腫瘍成長を、腫瘍成長を測定するために週2回、キャリパーで監視した。実験の終点は、2000mm3の腫瘍体積または60日間である。腫瘍成長及び生存%が評価項目である。併用療法での腫瘍成長の減少及び生存%の上昇は、抗TREM2抗体が、刺激性チェックポイント抗体と共に相加的または相乗的治療効果を有することを示す。刺激性チェックポイント抗体には、CD28、ICOS、CD137、CD27、CD40、及びGITRに対するアゴニスト/刺激性抗体が含まれる。
ヒト卒中に酷似するモデルである中大脳動脈(MCAO)の一過性閉塞を使用して、マウスにおいて脳梗塞を誘導する。モノフィラメント(70SPRe、Doccol Corp、USA)を、右共通頸動脈の切開部を介して内頸動脈に導入する。中大脳動脈を、30分間にわたって、再灌流時間(6時間、12時間、24時間、2日間、7日間及び28日間)の範囲で閉塞させる。外科手術の作用を、12時間目及び7日目の偽動物を使用して対照する。偽動物には、中大脳動脈の閉塞を伴わずに、同じ外科手術を施す。アゴニスト抗TREM2抗体または対照抗体で処理されたMCAO動物を、梗塞容積測定、急性炎症応答(12時間再灌流)、炎症誘発性サイトカインTNFa、IL−1a、及びIL−1bの転写、ミクログリア活性(CD68、Iba1)、ケモカインCCL2(MCP1)、CCL3(MIP1a及びケモカイン受容体CX3CR1)の転写、及びCD3陽性T細胞の侵襲について試験する(Sieber et al.(2013)PLoS ONE 8(1):e52982.doi:10.1371/journal.pone.0052982.)。
アルツハイマー病(AD)の発生を遅延させる、予防する、または逆転させる抗TREM2抗体の能力を評価するために、5X FADマウスを使用する。5X FADマウスは、2つのFAD変異、すなわちM146L及びL286Vを有するヒトPS1と共に、スウェーデン型(K670N、M671L)、フロリダ型(I716V)、及びロンドン型(V717I)家族性アルツハイマー病(FAD)変異を有する変異型ヒトAPP(695)を過剰発現する。両方の導入遺伝子は、脳における過剰発現を駆動し、かつADの主要な特徴を再現するためのマウスThy1プロモーターによって調節される。アゴニスト抗TREM2抗体または対照抗体で処理されたマウスを、免疫組織化学で、かつ組織抽出物のELISAによって、Aベータプラーク負荷について試験する。マウスをさらに、脳内のミクログリアの数について、かつMorris水迷路、空間学習及び記憶課題、放射状アーム水迷路、空間学習及び記憶課題、Y型迷路(空間認知の測定値として自発的変更を定量する)、オープンフィールドにおける新規選好、学習及び記憶を評価するためのオペラント学習、ならびに恐怖条件付けを使用して認知障害の減少について試験する(mousebiology.org website;Wang et al.,(2015)Cell.pii:S0092−8674(15)00127−0)。
細菌性呼吸器感染症を遅延させる、予防する、または治療するためのTREM2抗体の能力を評価するために、Streptococcus pneumoniaeでC57Bl6マウスを攻撃することを含む前臨床マウスモデルを使用する。このモデルは、記載されているとおり、105CFUのS.pneumoniae血清型3(ATCC 6303)の鼻腔内(i.n.)投与を含む(例えば、Sharif O et al,2014 PLoS Pathog.2014 Jun;10(6):e1004167、及びSchabbauer G et al,2010 J Immunol 185:468−476を参照されたい)。このモデルでは、約90%のWT C57Bl6マウスが、感染後6日以内に、感染で死亡する。10〜15頭のマウス/群を、S.pneumoniaeで攻撃し、付随して、0日目から始めて、1日おきにアンタゴニスト抗TREM2抗体で処置する。抗TREM2抗体の最初の用量を、S.pneumoniaで攻撃する3時間前に投与する。死亡事象をチェックするために、マウスを、毎日15日間にわたって監視する。細菌攻撃を生き延びたマウスの%を決定する。別の実験では、血液及び肺における細菌量及びサイトカイン発現の数も決定する。感染から24または48時間後に、血液をEDTA含有チューブに収集し、寒天プレート上にプレーティングして、血漿中の細菌性CFUを計数する。血漿を、ELISAによるサイトカイン分析のために−20℃で保存する。細菌CFUを計数するために、肺を採取し、均質化し、寒天プレート上にプレーティングする、または溶解緩衝液中で30分間にわたってインキュベートし、上清をサイトカイン測定のために分析する。別の実験では、肺を、細菌感染から40時間後に収集し、10%ホルマリン中で固定し、H&E病理分析のためにパラフィンに包埋する。
敗血症を遅延させる、予防する、または治療するTREM2抗体の能力を評価するために、LPSでのC57Bl6マウスの全身攻撃を含む前臨床マウスモデルを使用する。このモデルは、記載されているとおり、37mg/mlのLPSの腹腔内(i.p.)投与を含む(例えば、Gawish R et al,2014 FASEB Jを参照されたい)。このモデルでは、95%超のWT C57Bl6マウスは、LPS感染後40時間以内に、感染で死亡する。マウスのコホートをLPSで攻撃し、付随して、0日目から始めて毎日、アンタゴニスト抗TREM2抗体で処置する。抗TREM2抗体の最初の用量を、LPSで攻撃する3時間前に投与する。死亡事象を確認するために、マウスを日中に約4時間ごとに監視する。LPS攻撃を生き延びたマウスのパーセンテージを決定する。
大腸炎を遅延させる、予防する、または治療する抗TREM2抗体の能力を評価するために、急性または慢性大腸炎の前臨床マウスモデルを使用する。DSS誘発性大腸炎では、マウスは、8日間にわたって自由に飲料水中の3%DSSを与えられる。TNBS誘発性大腸炎では、マウスに麻酔をかけ、20%エタノール(vol/vol)中のTNBS3mgまたは対照としてのビヒクル単独の直腸内注射で処理する。慢性大腸炎モデルでは、全てのマウスを、5日間にわたる2%DSS、続く、10日間の回復期間からなる3サイクルで処理する。全てのモデルで、体重減少、便の硬さ、及び便潜血の存在を毎日監視し、記載されているとおり、疾患活動指数を計算するために使用する(例えば、Correale C,2013,Gastroenterology,February 2013,pp.346−356.e3を参照されたい)。マウスのコホートを、0日目から始めて毎日、アンタゴニスト抗TREM2抗体で処置し、DSSまたはTNBS投与を受けさせる。マウスを、体重減少、便の硬さ、及び便潜血の存在をチェックするために毎日監視し、記載されているとおり、疾患活動指数を計算するために使用した(例えば、S.Vetrano,Gastroenterology,135(2008),pp.173−184を参照されたい)。別の実験では、炎症性細胞浸潤及び粘膜損傷を評価するために、粘膜損傷の内視鏡画像及び組織学的画像を収集する。クローン病、炎症性腸疾患、及び潰瘍性大腸炎を含む自己免疫の他のモデルにおけるTREM2抗体の有益性を試験するために、同様の試験を行うことができる(例えば、Low et al.,(2013) Drug Des Devel Ther.;7:1341−1357、及びSollid et al.,(2008) PLoS Med 5(9):e198を参照されたい)。
損傷後の結腸の創傷修復を増加させる抗TREM2抗体の能力を評価するために、結腸における生検損傷のマウスモデルを使用する。このモデルでは、外側の手術シースを有する内視鏡を、下行結腸の中央に挿入し、粘膜を肛門直腸接合部まで調査する。次いで、粘膜及び粘膜下組織全体の単一の全層領域を、3フレンチの直径を有する柔軟な生検鉗子で除去し、筋固有層の貫入を回避する。各マウスを、結腸の背側に沿って3〜5箇所で生検損傷させる(例えば、Seno H,2008,Proc Natl Acad Sci U S A.2009 Jan 6;106(1):256−261を参照されたい)。生検損傷から2または3日後に、マウスのコホートを、アゴニスト抗TREM2抗体で処置する。体重減少及び創傷治癒をチェックするために、病変の表面積を測定することによって、マウスを、15日間にわたって毎日監視する。
AMDは、網膜外縁部の変性疾患である。炎症、特に、炎症性サイトカイン及びマクロファージが、AMD疾患進行の原因となると考えられている。ドルーゼン、ブルッフ膜、脈絡膜、及び網膜におけるAMD病変の近傍に、マクロファージの存在が記録されている。マクロファージは組織因子(TF)及び血管内皮成長因子(VEGF)を放出し、これが、脈絡膜血管新生を示す患者において、新しい血管形成の拡大を引き起こす。黄斑のある脈絡膜に存在するマクロファージの種類は、年齢と共に変化し、若年の眼と比較して、老年の眼においてM2マクロファージのレベルの上昇を示す。しかしながら、進行したAMDの黄斑は、ほぼ同年齢の正常な剖検された眼と比較して、M1とM2の比がより高かった。(例えば、Cao X et al,(2011),Pathol Int 61(9):pp528−35を参照されたい)。これは、晩発性AMD進行における眼の典型的なM1マクロファージ活性化の間の関連を示唆する。網膜ミクログリア細胞は、通常は内網膜にも存在する組織常在マクロファージである。損傷の場合、ミクログリアが活性化し、炎症のメディエーターとして作用し得る。活性化ミクログリアは、AMD組織サンプルにおいて検出されており、AMD病因をもたらす炎症プロセスの1つの潜在的な要因として提案されている(Gupta et al.,(2003) Exp Eye Res.,76(4):463−71.)。AMDを予防する、遅延させる、または逆転させるアンタゴニストTREM2抗体の能力を、1つまたは複数のAMDモデルで試験する(例えば、Pennesi et al.,(2012) Mol Aspects Med.;33(4):487−509を参照されたい)。全体的な炎症性マクロファージ(M1及び/または活性化ミクログリアのいずれか)は、AMD疾患の進行と相関し、したがって、アンタゴニストTREM2抗体の治療標的であることが記録されている。緑内障及び網膜色素変性症などの遺伝型または網膜変性において、同様の治療効果を達成することができる。
脂質生成及び肥満におけるTREM2抗体の作用を試験するために、高脂肪食(HFD)のマウスモデルを使用する(例えば、Park et al.,(2015) Diabetes.64(1):117−27を参照されたい)。
非実質性肝細胞におけるTREM2発現は、マラリア原虫Plasmodium bergheiでの肝細胞期感染に対する耐性と密接に相関する(Goncalves et al.,(2013) Proc Natl Acad Sci 26;110(48):19531−6)。理論に拘束されることは望まないが、TREM2抗体は、P.bergheiによる肝細胞期感染に対する耐性を増加させると考えられている。マラリア感染に対する耐性を増加させるTREM2抗体の能力を、Goncalves et al.,(2013) Proc Natl Acad Sci 26;110(48):19531−6に記載されているとおりに試験する。簡単に述べると、GFPを発現するP.berghei ANKAスポロゾイトを、Anopheles stephensi蚊由来の感染した唾液腺を切開することによって得る。RPMI培地中のスポロゾイト懸濁液を、1マウス当たり104のスポロゾイトを含有する接種源100μLで、静脈内注射する。肝臓を、注射または生存の40時間後に収集し、寄生虫血症を、28日間にわたって追跡する。実験的な脳マラリアスコアリングのために、注射後5日目から、神経学的症状を監視する。
骨は、カルシウムホメオスタシス及び構造的必要性を支援するために絶えずリモデリングを行う動的な器官である。破骨細胞は、骨の有機及び無機の両成分を取り除く役割を担う細胞である。破骨細胞は、マクロファージ系統の造血前駆細胞に由来し、腫瘍壊死因子ファミリーサイトカインNFκB活性化受容体リガンドに応答して分化する。破骨細胞は、唯一の骨吸収細胞であり、骨粗鬆症及び大理石骨病の病因として重要である(Novack et al.,(2008)Annual Rev Pathol.,3:457−84)。骨粗鬆症は、骨量及び骨密度の減少によって特徴づけられる進行性骨疾患であり、骨折のリスクを増大させ得る。多くの場合、骨代謝回転が加速され、破骨細胞と骨芽細胞の両方の活性が増大する閉経後1年に顕在化する。しかしながら、吸収と合成のプロセスにおける不均衡によって、正味効果は骨損失であり、主に骨梁で減少する。したがって、骨粗鬆症における骨折の最も一般的な部位は、骨全体の強度にとって骨梁構造が重要である手首、大腿骨頸部及び椎体である。骨粗鬆症をもたらす破骨細胞分化の亢進及び骨吸収能力の増加は、TREM2の発現を欠く動物モデルで説明されている(Otero et al(2012) J.Immunol.188,2612−2621)。破骨細胞の機能の低下は、DAP12 ITAMシグナル伝達アダプターを欠損している動物モデルにおいて観察されたように、骨量の増加及び骨髄空間の消失を伴う大理石骨病の原因になり、破骨細胞様細胞の分化に著しい欠如が生じる(Koga,et al.,(2004)Nature 428:758−763)。理論に束縛されることは望まないが、本開示の抗TREM2抗体の投与は、骨粗鬆症を予防する、そのリスクを減少させる、及び/または治療することができると考えられている。一部の実施形態では、アゴニスト抗TREM2抗体を投与することは、大理石骨病(例えば、DAP12リン酸化、Syk活性化、及び破骨細胞への分化の亢進)を有する個体において1つまたは複数のTREM2活性を誘導することがある(Peng et al(2010).Sci Signal.2010 18;3 122、及びHumphrey et al.,(2006) J Bone Miner Res.,21(2):237−45)。
合計20頭のC57/BL6マウスを、それぞれ10頭のマウスからなる2つの群で使用した。脊髄損傷(SCI)を、Han et al.,Brain 2010、133:1026−42に従って誘導した。簡単に述べると、マウスに麻酔をかけ、それらの背部を剃毛し、Betadine(Purdue Products LP)で清浄にした。正中線切開及びT9椎骨の椎弓切除の後に、50キロダインに力が設定されたInfinite Horizon Impactor(PSI、Lexington、KY)を使用して、脊髄挫傷を誘導した。脊柱を、横突起下に挿入された硬質の鋼製クランプを備えたフレーム内で安定化させた。400〜800μmの損傷転位を有するマウスのみを含めた。損傷後に、筋肉を層状に閉じ、皮膚切開を閉じ、バシトラシン亜鉛抗生物質(Altana、Melville、NY)を切開領域に塗布した。
製造者マニュアルに従ってRosetteSep(商標)ヒト単球濃縮抗体カクテル(StemCell Technologies)を使用して、末梢血単核細胞から単球を単離した。単球を、1×106細胞/mlで、完全RPMI培地(10%FCS、Pen/Strep、L−グルタミン、MEM非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、1mM HEPES)中で、100ng/mlのhGM−CSF及び100ng/mlのhIL−4の存在下で、7日間にわたって培養した。ヒト樹状細胞を、1ウェル当たり25,000の細胞で、96ウェル非組織培養処理プレート内にプレーティングした。様々な濃度の抗TREM2抗体9F5または10μg/mlの抗TREM2抗体10A9を、20ng/mlのhGM−CSF及び20ng/mlのhIL−4の存在下で添加した。マウスIgG1アイソタイプ対照抗体及び培地のみ(添加なし)を、対照として使用した。3日後に、細胞生存度を、製造者プロトコルに従ってCellTiter−Glo(登録商標)(Promega)を使用して分析した。
野生型(WT)または5XFADマウスからなる群を、抗TREM2抗体または対照抗体で4〜12週間にわたって、週1回の腹腔内注射によって長期処置する。血漿を週1回収集する。試験の終了時に、無意識及び引込め反射に対する不応答まで、マウスに3〜5%イソフルラン/酸素混合物で麻酔をかける。ノーズコーンを介して送達することによる手順を通じて、イソフルラン/酸素混合物を維持する。マウスを仰向けに置き、切開を腹部及び横隔膜を通して行い、心臓を露出させる。右心房を切開して、血液を漏出させ、滅菌生理食塩水20〜30mlをシリンジ及び25ゲージ針によって、左心室に注射する。血液が全部除去され、肝臓が白くなるまで、生理食塩水をゆっくりとした一定のペースで送達する。次いで、脳を頭蓋から除去し、解剖顕微鏡下の滅菌ペトリ皿に入れる。小脳、中脳、及び後脳を除去し、脳を、正中線で切断することによって2つの半球に分ける。両方の海馬及び前頭皮質を収集し、スナップ凍結する。脳溶解産物を、製造者指示に従ってプロテアーゼ阻害剤を含む氷冷N−Per(Thermo Fisher)を使用して調製する。溶解産物中のタンパク質濃度を、BCAアッセイ(Thermo Fisher)を使用して測定する。血漿及び脳溶解産物中の抗体レベルを、カスタムIgG Meso Scale Discoveryアッセイを使用して測定し、IgG濃度を使用して、抗体の脳濃度パーセントを測定する。
材料及び方法
7週齢の雌のC57BL/6マウスを、次のデキストラン硫酸ナトリウム(DSS)プロトコルに供した。実験者を盲検化し、抗TREM抗体7E5または対照抗体MOPC−21の抗体溶液をマウスに、第1のDSSサイクルの3日前に、次いで、全実験にわたって週2回、40mg/kgの濃度で腹腔内(IP)注射した。3日後に、マウスを、それぞれ通常水のサイクル(7日間)が続く1.5%DSS(分子質量40kDa、MP Biomedicals、cat n 160110、Lot n Q1408)の3回の経口サイクル(7日間)に供した。急性及び慢性大腸炎の重症度を、体重、下痢及び糞便中の血液の存在の評価に基づく疾患活性指数(DAI)スコアを使用して週2回スコアリングした。DAIを、体重減少(0=なし、1=1〜5%、2=5〜10%、3=10〜20%、4=20%以上)、便の硬さ(0=正常、2=軟便、4=下痢)、及び直腸出血(0=正常、2=潜血、4=著しい出血)の変化をスコアリングすることによって決定して、5つのグレード(0〜4)のDAIを得た。
デキストラン硫酸ナトリウム(DSS)実験モデルは、大腸炎の最も広く使用されているマウスモデルである。DSSは、5〜1400kDaの範囲の極めて多様な分子量を有する負の電荷をもつ水溶性の硫酸化多糖である。DSSが腸管炎症を誘導する機構は、下にある組織への炎症誘発性腸管内容物(例えば、細菌及びそれらの産物)の伝播を可能にする、大腸を覆う上皮単層に対する損傷の結果であると考えられている。この実験プロトコル後に、遠位及び直腸部分が、結腸の最も影響を受けるセグメントである。
材料及び方法
骨髄細胞系列においてヒトTREM2を発現するマウスを得るために、TREM2を他のTREMファミリーメンバー及び十分なフランキング配列(各末端に少なくとも10kb)と共に細菌人工染色体(BAC)クローンを特定した。TREM遺伝子遺伝子座を有するBACクローンを、UCSCゲノムブラウザ及びNCBIのClone DBを使用して特定した。判定基準は、適切な遺伝子発現の可能性を最大化するために、目的の遺伝子に加えて、最低10KBのフランキング5’及び3’配列を有するクローンを特定することであった。
図25Aは、チオグリコール酸誘導マクロファージ上で、ヒト特異的抗TREM2抗体9F5及び10A9の両方による陽性のTREM2結合が存在するが、これらの抗体は、マウスTREM2のみを発現するWTマクロファージへの結合は示さないので、ヒトTREM2 BACトランスジェニックマウスがヒトTREM2を発現することを示している。
物質及び方法
骨髄細胞系列においてヒトTREM2を発現するトランスジェニックBACマウスを、実施例62に記載したとおりに作製した。
ELISAアッセイからの結果は、T21−9 TREM2抗体の注射は、血漿中の可溶性ヒトTREM2のレベルの高度に有意な上昇をもたらす一方で、抗体9F5の注射は、血漿中の可溶性ヒトTREM2のレベルを上昇させないことを示している(図26A)。ELISAは、ヒトTREM2を発現しないWTマウスでは、いずれの可溶性TREM2も検出し得ず、このELISAがヒトTREM2に特異的であり、マウスTREM2を認識しないことが確認された。これらの結果は、抗体T21−9と対照的に、抗体9F5が、インビボで可溶性TREM2のレベルを上昇させることができないことを示している。
Claims (146)
- TREM2タンパク質に結合する単離抗体であって、1つまたは複数のTREM2活性を誘導する、及び前記TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強する、前記単離抗体。
- 前記単離抗体の非存在下で前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性と比較して、前記抗体TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項1に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合を遮断することなく、前記1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項1または請求項2に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質への結合について、前記1つまたは複数のTREM2リガンドと競合しない、請求項1または請求項2に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合を増強する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2タンパク質に結合する単離抗体であって、前記TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合を遮断することなく、1つまたは複数のTREM2活性を誘導する、前記単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合を増強する、請求項6に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項6〜7のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記単離抗体の非存在下で前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性と比較して、前記TREM2タンパク質への前記1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項8に記載の単離抗体。
- 前記1つまたは複数のTREM2リガンドと相乗作用して、前記1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項1〜9のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2の細胞表面クラスター化の非存在下で前記1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項1〜10のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2の細胞表面クラスター化を誘導または保持することによって、前記1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項1〜11のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 1つまたは複数の免疫細胞上に発現されるFc−ガンマ受容体によってクラスター化される、請求項12に記載の単離抗体。
- 前記1つまたは複数の免疫細胞がB細胞またはミクログリア細胞である、請求項13に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性の前記増強が、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、単球、ミクログリア、マクロファージ、好中球、NK細胞、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、及びクッパー細胞からなる群から選択される初代細胞で、または細胞系で測定され、前記TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性の前記増強が、インビトロ細胞アッセイを利用して測定される、請求項1〜14のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 可溶性TREM2のレベルを上昇させる、可溶性TREM2の半減期を増加させる、またはその両方である、請求項1〜15のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 可溶性TREM2の前記レベルが、TREM2の血清レベル、TREM2の脳脊髄液(CSF)レベル、TREM2の組織レベル、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項16に記載の単離抗体。
- 可溶性TREM2に結合しない、請求項1〜15のいずれか1項に記載の単離抗体。
- インビボで可溶性TREM2に結合しない、請求項18に記載の単離抗体。
- 1つまたは複数の細胞において、TREM2のレベルを低下させる、請求項1〜15のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2の細胞表面レベルを低下させる、TREM2の細胞内レベルを低下させる、TREM2の総レベルを低下させる、またはそれらの任意の組合せである、20に記載の単離抗体。
- TREM2分解、TREM2切断、TREM2内部移行、TREM2シェディング、TREM2発現の下方制御、またはそれらの任意の組合せを誘導する、20または請求項21に記載の単離抗体。
- 前記1つまたは複数の細胞におけるTREM2のレベルが、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、単球、ミクログリア、マクロファージ、好中球、NK細胞、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、及びクッパー細胞からなる群から選択される初代細胞で、または細胞系で測定され、前記TREM2の前記細胞レベルが、インビトロ細胞アッセイを利用して測定される、請求項20〜22のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が、哺乳動物タンパク質またはヒトタンパク質である、請求項1〜23のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が野生型タンパク質である、請求項24に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が天然に存在するバリアントである、請求項24に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が、ヒト樹状細胞、ヒトマクロファージ、ヒト単球、ヒト破骨細胞、ヒト皮膚ランゲルハンス細胞、ヒトクッパー細胞、ヒトミクログリア、またはそれらの任意の組合せの上に発現される、請求項1〜26のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記1つまたは複数のTREM2活性が、以下からなる群から選択される、請求項1〜27のいずれか1項に記載の単離抗体:
(a)DAP12へのTREM2結合、
(b)DAP12リン酸化、
(c)Sykキナーゼの活性化、
(d)IFN−β、IL−1α、IL−1β、TNF−α、IL−6、IL−8、CRP、CD86、MCP−1/CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCR2、CXCL−10、Gata3、IL−20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、IFN−ガンマ、OSM、CNTF、CSF−1、OPN、CD11c、GM−CSF、IL−11、IL−12、IL−17、IL−18、及びIL−23からなる群から選択される1つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの調節(任意選択で、前記調節は、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞からなる群から選択される1つまたは複数の細胞で生じる)、
(e)DAP12/TREM2複合体へのSykの動員、
(f)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の上昇(任意選択で、前記1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、
(g)樹状細胞、マクロファージ、M1マクロファージ、活性化M1マクロファージ、M2マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、M1ミクログリア、活性化M1ミクログリア、及びM2ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの生存の増加、
(h)CD83、CD86 MHCクラスII、CD40、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の刺激分子の発現の調節(任意選択で、前記CD40は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの上に発現され、任意選択で、前記樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含む)、
(i)記憶の増大、ならびに
(j)認知障害の減少。 - IgGクラス、IgMクラス、またはIgAクラスのものである、請求項1〜28のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記IgGクラスのものであり、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4アイソタイプを有する、請求項29に記載の単離抗体。
- IgG2アイソタイプを有する、請求項30に記載の単離抗体。
- ヒトIgG2定常領域を含む、請求項30または請求項31に記載の単離抗体。
- 前記ヒトIgG2定常領域がFc領域を含む、請求項32に記載の単離抗体。
- Fc受容体への結合とは無関係に、前記1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項29〜33のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 阻害性Fc受容体と結合する、請求項30〜34のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記阻害性Fc受容体が、阻害性Fc−ガンマ受容体IIB(FcγIIB)である、請求項35に記載の単離抗体。
- (a)前記単離抗体が、ヒトまたはマウスIgG1アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、N297A、D265A、D270A、L234A、L235A、G237A、C226S、C229S、E233P、L234V、L234F、L235E、P331S、S267E、L328F、A330L、M252Y、S254T、T256E、L328E、P238D、S267E、L328F、E233D、G237D、H268D、P271G、A330R、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、またはアミノ酸欠失をFc領域に、グリシン236に対応する位置で含む、
(b)前記単離抗体が、IgG1アイソタイプを有し、IgG2アイソタイプ重鎖定常ドメイン1(CH1)及びヒンジ領域を含み、任意選択で、前記IgG2アイソタイプCH1及びヒンジ領域が、ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSVVT VPSSNFGTQT YTCNVDHKPS NTKVDKTVERKCCVECPPCP(配列番号886)のアミノ酸配列を含み、任意選択で、前記抗体Fc領域が、S267Eアミノ酸置換、L328Fアミノ酸置換、もしくはその両方、及び/またはN297AもしくはN297Qアミノ酸置換を含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、
(c)前記単離抗体が、IgG2アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、P238S、V234A、G237A、H268A、H268Q、V309L、A330S、P331S、C214S、C232S、C233S、S267E、L328F、M252Y、S254T、T256E、H268E、N297A、N297Q、A330L、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、
(d)前記単離抗体が、ヒトまたはマウスIgG4アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、L235A、G237A、S228P、L236E、S267E、E318A、L328F、M252Y、S254T、T256E、E233P、F234V、L234A/F234A、S228P、S241P、L248E、T394D、N297A、N297Q、L235E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または
(e)前記単離抗体が、ハイブリッドIgG2/4アイソタイプを有し、任意選択で、前記抗体が、ヒトIgG2のアミノ酸118〜260及びヒトIgG4のアミノ酸261〜447を含むアミノ酸配列を含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、請求項36に記載の単離抗体。 - IgG4アイソタイプを有する、請求項1〜28のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 残基位置228でS228Pアミノ酸置換、残基位置234でF234Aアミノ酸置換、及び残基位置235でL235Aアミノ酸置換を含む(前記残基位置のナンバリングは、EUナンバリングによる)、請求項38に記載の単離抗体。
- 以下からなる群から選択されるアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する、請求項1〜39のいずれか1項に記載の単離抗体
i.配列番号1のアミノ酸残基19〜174、または配列番号1のアミノ酸残基19〜174に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
ii.配列番号1のアミノ酸残基29〜112、または配列番号1のアミノ酸残基29〜112に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
iii.配列番号1のアミノ酸残基113〜174、または配列番号1のアミノ酸残基113〜174に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
iv.配列番号1のアミノ酸残基35〜49、または配列番号1のアミノ酸残基35〜49に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
v.配列番号1のアミノ酸残基35〜49及び140〜150、または配列番号1のアミノ酸残基35〜49及び140〜150に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
vi.配列番号1のアミノ酸残基39〜49、または配列番号1のアミノ酸残基39〜49に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
vii.配列番号1のアミノ酸残基39〜49及び63〜77、または配列番号1のアミノ酸残基39〜49及び63〜77に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
viii.配列番号1のアミノ酸残基51〜61、または配列番号1のアミノ酸残基51〜61に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
ix.配列番号1のアミノ酸残基55〜62、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
x.配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び148〜158、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び148〜158に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xi.配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び160〜166、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び160〜166に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xii.配列番号1のアミノ酸残基55〜65、または配列番号1のアミノ酸残基55〜65に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xiii.配列番号1のアミノ酸残基55〜65及び124〜134、または配列番号1のアミノ酸残基55〜65及び124〜134に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xiv.配列番号1のアミノ酸残基63〜73、または配列番号1のアミノ酸残基63〜73に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xv.配列番号1のアミノ酸残基63〜77、または配列番号1のアミノ酸残基63〜77に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xvi.配列番号1のアミノ酸残基104〜109、または配列番号1のアミノ酸残基104〜109に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xvii.配列番号1のアミノ酸残基117〜133、または配列番号1のアミノ酸残基117〜133に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xviii.配列番号1のアミノ酸残基124〜134、または配列番号1のアミノ酸残基124〜134に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xix.配列番号1のアミノ酸残基137〜146、または配列番号1のアミノ酸残基137〜146に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xx.配列番号1のアミノ酸残基139〜147、または配列番号1のアミノ酸残基139〜147に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxi.配列番号1のアミノ酸残基139〜149、または配列番号1のアミノ酸残基139〜149に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxii.配列番号1のアミノ酸残基140〜150、または配列番号1のアミノ酸残基140〜150に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxiii.配列番号1のアミノ酸残基140〜146、または配列番号1のアミノ酸残基140〜146に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxiv.配列番号1のアミノ酸残基140〜143、または配列番号1のアミノ酸残基140〜143に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxv.配列番号1のアミノ酸残基142〜152、または配列番号1のアミノ酸残基142〜152に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxvi.配列番号1のアミノ酸残基146〜154、または配列番号1のアミノ酸残基146〜154に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxvii.配列番号1のアミノ酸残基148〜158、または配列番号1のアミノ酸残基148〜158に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxviii.配列番号1のアミノ酸残基149〜157、または配列番号1のアミノ酸残基149〜157に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxix.配列番号1のアミノ酸残基149及び150、または配列番号1のアミノ酸残基149及び150に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxx.配列番号1のアミノ酸残基151〜155、または配列番号1のアミノ酸残基151〜155に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxxi.配列番号1のアミノ酸残基154〜161、または配列番号1のアミノ酸残基154〜161に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxxii.配列番号1のアミノ酸残基156〜170、または配列番号1のアミノ酸残基156〜170に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxxiii.配列番号1のアミノ酸残基160〜166、または配列番号1のアミノ酸残基160〜166に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、ならびに
xxxiv.配列番号1のアミノ酸残基162〜165、または配列番号1のアミノ酸残基162〜165に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基。 - 配列番号1のK42、H43、W44、G45、H67、R77、T88、H114、E117、E151、D152、H154、及びE156からなる群から選択される1つもしくは複数のアミノ酸残基、または配列番号1のK42、H43、W44、G45、H67、R77、T88、H114、E117、E151、D152、H154、及びE156からなる群から選択されるアミノ酸残基に対応する哺乳動物TREM2タンパク質上の1つもしくは複数のアミノ酸残基に結合する、請求項1〜39のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2への結合について、3B10、7B3、8F8、9F5、9G1、9G3、11A8、12F9、7E9、7F6、8C3、2C5、3C5、4C12、7D9、2F6、3A7、7E5、11H5、1B4、6H2、7B11、18D8、18E4、29F6、40D5、43B9、44A8、44B4、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の抗体と競合する、請求項1〜41のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、前記軽鎖可変ドメイン、または前記重鎖可変ドメイン、またはその両方が、4D11、7C5、6G12、8F11、8E10、7E5、7F8、8F8、1H7、2H8、3A2、3A7、3B10、4F11、6H6、7A9、7B3、8A1、9F5、9G1、9G3、10A9、11A8、12D9、12F9、10C1、7E9、7F6、8C3、2C5、3C5、4C12、7D9、2F6、11H5、B4、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2からなる群から選択される抗体のHVR−L1、HVR−L2、HVR−L3、HVR−H1、HVR−H2、及びHVR−H3から選択される少なくとも1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、または6つのHVRを含む、請求項1〜41のいずれか1項に記載の単離抗体。
- (a)前記HVR−L1が、配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(b)前記HVR−L2が、配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(c)前記HVR−L3が、配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(d)前記HVR−H1が、配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(e)前記HVR−H2が、配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、または
(f)前記HVR−H3が、配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項43に記載の単離抗体。 - (a)前記HVR−L1が、配列番号11のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号26のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号36のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号51のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号69のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号88のアミノ酸配列を含む、
(b)前記HVR−L1が、配列番号14のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号39のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号53のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号71のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号90のアミノ酸配列を含む、
(c)前記HVR−L1が、配列番号16のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号35のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号55のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号73のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号92のアミノ酸配列を含む、
(d)前記HVR−H1が、配列番号58のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号76のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号95のアミノ酸配列を含む、
(e)前記HVR−L1が、配列番号19のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号43のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号60のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号78のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号97のアミノ酸配列を含む、
(f)前記HVR−L1が、配列番号19のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号43のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号60のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号888のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号97のアミノ酸配列を含む、
(g)前記HVR−L1が、配列番号20のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号44のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号61のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号79のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号98のアミノ酸配列を含む、
(h)前記HVR−L1が、配列番号21のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号32のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号45のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号62のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号80のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号99のアミノ酸配列を含む、
(i)前記HVR−L1が、配列番号22のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号46のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号63のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号82のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号100のアミノ酸配列を含む、または
(j)前記HVR−L1が、配列番号16のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号35のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号65のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号84のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号102のアミノ酸配列を含む、請求項43に記載の単離抗体。 - 軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、前記軽鎖可変ドメインが、
(a)配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L1、
(b)配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L2、ならびに
(c)配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L3を含み、かつ
前記重鎖可変ドメインが、
(a)配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H1、
(b)配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888と少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むHVR−H2、ならびに
(c)配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H3を含む、請求項1〜41のいずれか1項に記載の単離抗体。 - 配列番号219〜398、602〜634、679〜689、724〜730、809〜816、821、843、844、849、及び850からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、ならびに/または配列番号399〜580、635〜678、731〜733、817〜820、822〜825、及び845〜847からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む、請求項1〜41のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 以下からなる群から選択されるアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する、TREM2タンパク質に結合する単離抗体:
i.配列番号1のアミノ酸残基19〜174、または配列番号1のアミノ酸残基19〜174に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
ii.配列番号1のアミノ酸残基29〜112、または配列番号1のアミノ酸残基29〜112に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
iii.配列番号1のアミノ酸残基113〜174、または配列番号1のアミノ酸残基113〜174に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
iv.配列番号1のアミノ酸残基35〜49、または配列番号1のアミノ酸残基35〜49に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
v.配列番号1のアミノ酸残基35〜49及び140〜150、または配列番号1のアミノ酸残基35〜49及び140〜150に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
vi.配列番号1のアミノ酸残基39〜49、または配列番号1のアミノ酸残基39〜49に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
vii.配列番号1のアミノ酸残基39〜49及び63〜77、または配列番号1のアミノ酸残基39〜49及び63〜77に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
viii.配列番号1のアミノ酸残基51〜61、または配列番号1のアミノ酸残基51〜61に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
ix.配列番号1のアミノ酸残基55〜62、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
x.配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び148〜158、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び148〜158に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xi.配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び160〜166、または配列番号1のアミノ酸残基55〜62、104〜109、及び160〜166に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xii.配列番号1のアミノ酸残基55〜65、または配列番号1のアミノ酸残基55〜65に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xiii.配列番号1のアミノ酸残基55〜65及び124〜134、または配列番号1のアミノ酸残基55〜65及び124〜134に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xiv.配列番号1のアミノ酸残基63〜73、または配列番号1のアミノ酸残基63〜73に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xv.配列番号1のアミノ酸残基63〜77、または配列番号1のアミノ酸残基63〜77に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xvi.配列番号1のアミノ酸残基104〜109、または配列番号1のアミノ酸残基104〜109に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xvii.配列番号1のアミノ酸残基117〜133、または配列番号1のアミノ酸残基117〜133に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xviii.配列番号1のアミノ酸残基124〜134、または配列番号1のアミノ酸残基124〜134に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xix.配列番号1のアミノ酸残基137〜146、または配列番号1のアミノ酸残基137〜146に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xx.配列番号1のアミノ酸残基139〜147、または配列番号1のアミノ酸残基139〜147に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxi.配列番号1のアミノ酸残基139〜149、または配列番号1のアミノ酸残基139〜149に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxii.配列番号1のアミノ酸残基140〜150、または配列番号1のアミノ酸残基140〜150に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxiii.配列番号1のアミノ酸残基140〜146、または配列番号1のアミノ酸残基140〜146に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxiv.配列番号1のアミノ酸残基140〜143、または配列番号1のアミノ酸残基140〜143に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxv.配列番号1のアミノ酸残基142〜152、または配列番号1のアミノ酸残基142〜152に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxvi.配列番号1のアミノ酸残基146〜154、または配列番号1のアミノ酸残基146〜154に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxvii.配列番号1のアミノ酸残基148〜158、または配列番号1のアミノ酸残基148〜158に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxviii.配列番号1のアミノ酸残基149〜157、または配列番号1のアミノ酸残基149〜157に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxix.配列番号1のアミノ酸残基149及び150、または配列番号1のアミノ酸残基149及び150に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxx.配列番号1のアミノ酸残基151〜155、または配列番号1のアミノ酸残基151〜155に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxxi.配列番号1のアミノ酸残基154〜161、または配列番号1のアミノ酸残基154〜161に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxxii.配列番号1のアミノ酸残基156〜170、または配列番号1のアミノ酸残基156〜170に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、
xxxiii.配列番号1のアミノ酸残基160〜166、または配列番号1のアミノ酸残基160〜166に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基、ならびに
xxxiv.配列番号1のアミノ酸残基162〜165、または配列番号1のアミノ酸残基162〜165に対応するTREM2タンパク質上のアミノ酸残基
からなる群から選択されるアミノ酸残基内の1つまたは複数のアミノ酸に結合する、前記単離抗体。 - 1つまたは複数のTREM2活性を誘導する、及び前記TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強する、請求項48に記載の単離抗体。
- 以下からなる群から選択される1つまたは複数のアミノ酸残基にさらに結合する、請求項48または請求項49に記載の単離抗体:
i.配列番号1のアミノ酸残基Arg47またはAsp87、
ii.配列番号1のアミノ酸残基40〜44、
iii.配列番号1のアミノ酸残基67〜76、及び
iv.配列番号1のアミノ酸残基114〜118。 - TREM2タンパク質に結合する単離抗体であって、配列番号1のK42、H43、W44、G45、H67、R77、T88、H114、E117、E151、D152、H154、及びE156からなる群から選択される1つもしくは複数のアミノ酸残基、または配列番号1のK42、H43、W44、G45、H67、R77、T88、H114、E117、E151、D152、H154、及びE156からなる群から選択されるアミノ酸残基に対応する哺乳動物TREM2タンパク質上の1つもしくは複数のアミノ酸残基に結合する、前記単離抗体。
- TREM2タンパク質に結合する単離抗体であって、TREM2への結合について、1A7、3A2、3B10、6G12、6H6、7A9、7B3、8A1、8E10、8F11、8F8、9F5、9G1、9G3、10A9、10C1、11A8、12E2、12F9、12G6、2C7、2F5、3C1、4D7、4D11、6C11、6G12、7A3、7C5、7E9、7F6、7G1、7H1、8C3、8F10、12A1、1E9、2C5、3C5、4C12、4F2、5A2、6B3、7D1、7D9、11D8、8A12、10E7、10B11、10D2、7D5、2A7、3G12、6H9、8G9、9B4、10A1、11A8、12F3、2F8、10E3、1H7、2F6、2H8、3A7、7E5、7F8、11H5、7C5、4F11、12D9、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、44B4v2、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される1つまたは複数の抗体と競合する、前記単離抗体。
- TREM2タンパク質に結合する単離抗体であって、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、前記軽鎖可変ドメイン、または前記重鎖可変ドメイン、またはその両方が、1A7、3A2、3B10、6G12、6H6、7A9、7B3、8A1、8E10、8F11、8F8、9F5、9G1、9G3、10A9、10C1、11A8、12E2、12F9、12G6、2C7、2F5、3C1、4D7、4D11、6C11、6G12、7A3、7C5、7E9、7F6、7G1、7H1、8C3、8F10、12A1、1E9、2C5、3C5、4C12、4F2、5A2、6B3、7D1、7D9、11D8、8A12、10E7、10B11、10D2、7D5、2A7、3G12、6H9、8G9、9B4、10A1、11A8、12F3、2F8、10E3、1H7、2F6、2H8、3A7、7E5、7F8、11H5、7C5、4F11、12D9、1B4v1、1B4v2、6H2、7B11v1、7B11v2、18D8、18E4v1、18E4v2、29F6v1、29F6v2、40D5v1、40D5v2、43B9、44A8v1、44A8v2、44B4v1、及び44B4v2からなる群から選択される抗体のHVR−L1、HVR−L2、HVR−L3、HVR−H1、HVR−H2、及びHVR−H3から選択される少なくとも1つ、2つ、3つ、4つ、5つ、または6つのHVRを含む、前記単離抗体。
- (a)前記HVR−L1が、配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(b)前記HVR−L2が、配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(c)前記HVR−L3が、配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(d)前記HVR−H1が、配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
(e)前記HVR−H2が、配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、または
(f)前記HVR−H3が、配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項53に記載の単離抗体。 - (a)前記HVR−L1が、配列番号9のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号24のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号34のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号48のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号66のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号85のアミノ酸配列を含む、
(b)前記HVR−L1が、配列番号10のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号25のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号35のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号49のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号67のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号86のアミノ酸配列を含む、
(c)前記HVR−L1が、配列番号12のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号26のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号37のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号50のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号68のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号87のアミノ酸配列を含む、
(d)前記HVR−L1が、配列番号11のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号26のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号36のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号51のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号69のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号88のアミノ酸配列を含む、
(e)前記HVR−L1が、配列番号13のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号27のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号38のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号52のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号70のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号89のアミノ酸配列を含む、
(f)前記HVR−L1が、配列番号14のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号39のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号53のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号71のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号90のアミノ酸配列を含む、
(g)前記HVR−L1が、配列番号15のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号40のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号54のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号72のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号91のアミノ酸配列を含む、
(h)前記HVR−L1が、配列番号16のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号35のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号55のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号73のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号92のアミノ酸配列を含む、
(i)前記HVR−L1が、配列番号581のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号582のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号56のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号74のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号93のアミノ酸配列を含む、
(j)前記HVR−L1が、配列番号17のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号30のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号41のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号57のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号75のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号94のアミノ酸配列を含む、
(k)前記HVR−H1が、配列番号58のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号76のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号95のアミノ酸配列を含む、
(l)前記HVR−L1が、配列番号18のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号31のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号42のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号59のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号77のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号96のアミノ酸配列を含む、
(m)前記HVR−L1が、配列番号19のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号43のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号60のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号78のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号97のアミノ酸配列を含む、
(n)前記HVR−L1が、配列番号19のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号43のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号60のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号888のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号97のアミノ酸配列を含む、
(o)前記HVR−L1が、配列番号20のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号44のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号61のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号79のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号98のアミノ酸配列を含む、
(p)前記HVR−L1が、配列番号21のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号32のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号45のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号62のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号80のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号99のアミノ酸配列を含む、
(q)前記HVR−L1が、配列番号15のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号33のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号40のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号54のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号81のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号91のアミノ酸配列を含む、
(r)前記HVR−L1が、配列番号22のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号46のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号63のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号82のアミノ酸配列を含み、及び前記HVR−H3が、配列番号100のアミノ酸配列を含む、
(s)前記HVR−L1が、配列番号23のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号47のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号64のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号83のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H3が、配列番号101のアミノ酸配列を含む、
(t)前記HVR−L1が、配列番号16のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号35のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号65のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号84のアミノ酸配列を含み、及び前記HVR−H3が、配列番号102のアミノ酸配列を含む、
(u)前記HVR−L1が、配列番号581のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号582のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号56のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号585のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号588のアミノ酸配列を含む、
(v)前記HVR−L1が、配列番号10のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号29のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号35のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号49のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号586のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号86のアミノ酸配列を含む、または
(w)前記HVR−L1が、配列番号14のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L2が、配列番号28のアミノ酸配列を含み、前記HVR−L3が、配列番号583のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H1が、配列番号584のアミノ酸配列を含み、前記HVR−H2が、配列番号587のアミノ酸配列を含み、かつ前記HVR−H3が、配列番号589のアミノ酸配列を含む、請求項53または請求項54に記載の単離抗体。 - 前記軽鎖可変ドメインが、
(a)配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号9〜23、581、690〜694、734〜738、及び826〜828からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L1、
(b)配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号24〜33、695〜697、及び739〜743からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L2、ならびに
(c)配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号34〜47、582、583、698〜702、及び744〜746からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−L3を含み、かつ
前記重鎖可変ドメインが、
(a)配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号48〜65、584、703〜705、747〜754、及び829〜835からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H1、
(b)配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号66〜84、585〜587、706〜708、755〜762、836〜842、及び888からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H2、ならびに
(c)配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号85〜102、588、589、709、710、及び763〜770からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも約90%の相同性を有するアミノ酸配列を含むHVR−H3を含む、請求項53に記載の単離抗体。 - 配列番号219〜398、602〜634、679〜689、724〜730、809〜816、821、843、844、849、及び850からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、ならびに/または配列番号399〜580、635〜678、731〜733、817〜820、822〜825、及び845〜847からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む、請求項53〜56のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2タンパク質への結合について、1つまたは複数のTREM2リガンドと競合する、請求項48〜57のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2タンパク質に結合する不活性抗体である、請求項48〜58のいずれか1項に記載の単離抗体。
- TREM2タンパク質に結合するアンタゴニスト抗体である、請求項48〜58のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が、哺乳動物タンパク質またはヒトタンパク質である、請求項59または請求項60に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が、野生型タンパク質である、請求項61に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が、天然に存在するバリアントである、請求項61に記載の単離抗体。
- 前記TREM2タンパク質が、疾患バリアントである、請求項61に記載の単離抗体。
- 1つまたは複数のTREM2活性を阻害する、請求項60〜64のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記1つまたは複数のTREM2活性が、以下からなる群から選択される、請求項65に記載の単離抗体:
(a)DAP12へのTREM2結合、
(b)DAP12リン酸化、
(c)Sykキナーゼの活性化、
(d)DAP12/TREM2複合体へのSykの動員、
(e)1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子の活性の増加(任意選択で、前記1つまたは複数のTREM2依存性遺伝子は、活性化T細胞核内因子(NFAT)転写因子を含む)、
(f)腫瘍体積の増加、及び
(g)腫瘍増殖速度の上昇。 - TREM2と1つまたは複数のTREM2リガンドとの間の相互作用を阻害する、TREM2シグナル伝達を阻害する、またはその両方である、請求項60〜66のいずれか1項に記載の単離抗体。
- Fc−ガンマ受容体(FcγR)と結合できない、請求項60〜67のいずれか1項に記載の単離抗体。
- IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4アイソタイプを有する、請求項59〜68のいずれか1項に記載の単離抗体。
- (a)前記抗体が、ヒトまたはマウスIgG1アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、N297A、N297Q、D270A、D265A、L234A、L235A、C226S、C229S、P238S、E233P、L234V、P238A、A327Q、A327G、P329A、K322A、L234F、L235E、P331S、T394D、A330L、M252Y、S254T、T256E、L328E、P238D、S267E、L328F、E233D、G237D、H268D、P271G、A330R、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含むか(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、またはアミノ酸欠失をFc領域に、グリシン236に対応する位置で含む、
(b)前記抗体が、IgG2アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、P238S、V234A、G237A、H268A、H268Q、H268E、V309L、N297A、N297Q、A330S、P331S、C232S、C233S、M252Y、S254T、T256E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または
(c)前記抗体が、IgG4アイソタイプを有し、1つまたは複数のアミノ酸置換をFc領域に、E233P、F234V、L234A/F234A、L235A、G237A、E318A、S228P、L236E、S241P、L248E、T394D、M252Y、S254T、T256E、N297A、N297Q、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される残基位置で含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、請求項69に記載の単離抗体。 - (a)前記Fc領域がさらに、1つまたは複数の追加のアミノ酸置換をA330L、L234F、L235E、P331S、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される位置に含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、
(b)前記Fc領域がさらに、1つまたは複数の追加のアミノ酸置換をM252Y、S254T、T256E、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される位置に含む(前記残基のナンバリングは、EUナンバリングによる)、または
(c)前記Fc領域がさらに、EUナンバリングによるとS228Pアミノ酸置換を含む、請求項70に記載の単離抗体。 - ヒトTREM2、ヒトTREM2の天然に存在するバリアント、及びヒトTREM2の疾患バリアントからなる群から選択される1つまたは複数のヒトタンパク質に結合する抗体フラグメントであり、任意選択で、前記抗体フラグメントが、ヒトTREM2、ヒトTREM2の天然に存在するバリアント、及びヒトTREM2の疾患バリアントからなる群から選択される1つまたは複数のヒトタンパク質に結合する第2の抗体フラグメントに架橋されている、請求項1〜71のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記フラグメントが、Fab、Fab’、Fab’−SH、F(ab’)2、FvまたはscFvフラグメントである、請求項72に記載の単離抗体。
- 前記1つまたは複数のTREM2リガンドが、E.coli細胞、アポトーシス細胞、核酸、陰イオン性脂質、陰イオン性脂質、APOE、APOE2、APOE3、APOE4、陰イオン性APOE、陰イオン性APOE2、陰イオン性APOE3、陰イオン性APOE4、脂質化APOE、脂質化APOE2、脂質化APOE3、脂質化APOE4、双性イオン性脂質、負の電荷をもつリン脂質、ホスファチジルセリン、スルファチド、ホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、膜リン脂質、脂質化タンパク質、プロテオ脂質、脂質化ペプチド、脂質化アミロイドベータペプチド、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項1〜73のいずれか1項に記載の単離抗体。
- マウス抗体である、請求項1〜74のいずれか1項に記載の単離抗体。
- ヒト化抗体、二重特異性抗体、多価抗体、コンジュゲート抗体、またはキメラ抗体である、請求項1〜74のいずれか1項に記載の単離抗体。
- モノクローナル抗体である、請求項1〜76のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 第1の抗原及び第2の抗原を認識する二重特異性抗体である、請求項1〜77のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 前記第1の抗原が、ヒトTREM2またはその天然に存在するバリアントであり、前記第2の抗原が以下である、請求項78に記載の単離抗体:
(a)血液脳関門を通過する輸送を促進する抗原、
(b)トランスフェリン受容体(TR)、インスリン受容体(HIR)、インスリン様成長因子受容体(IGFR)、低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質1及び2(LPR−1及び2)、ジフテリア毒素受容体、CRM197、ラマ単一ドメイン抗体、TMEM 30(A)、タンパク質形質導入ドメイン、TAT、Syn−B、ペネトラチン、ポリアルギニンペプチド、アンギオペプチド、ならびにANG1005からなる群から選択される、血液脳関門を通過する輸送を促進する抗原、
(c)病原ペプチドもしくはタンパク質、または病原核酸からなる群から選択される病原体(前記病原核酸は、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNAであり、前記病原タンパク質は、アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、c9RANタンパク質、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、及びプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチドからなる群から選択される)、
(d)免疫細胞上に発現されるリガンド及び/またはタンパク質(前記リガンド及び/またはタンパク質は、CD40、OX40、ICOS、CD28、CD137/4−1BB、CD27、GITR、PD−L1、CTLA−4、PD−L2、PD−1、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、及びホスファチジルセリンからなる群から選択される)、ならびに
(e)1つまたは複数の腫瘍細胞上に発現されるタンパク質、脂質、多糖、または糖脂質。 - 病原ペプチド、病原タンパク質、アミロイドベータ、オリゴマーアミロイドベータ、アミロイドベータ斑、アミロイド前駆体タンパク質またはそのフラグメント、Tau、IAPP、アルファ−シヌクレイン、TDP−43、FUSタンパク質、C9orf72(染色体9オープンリーディングフレーム72)、プリオンタンパク質、PrPSc、ハンチンチン、カルシトニン、スーパーオキシドジスムターゼ、アタキシン、アタキシン1、アタキシン2、アタキシン3、アタキシン7、アタキシン8、アタキシン10、レビー小体、心房性ナトリウム利尿因子、膵島アミロイドポリペプチド、インスリン、アポリポタンパク質AI、血清アミロイドA、メディン、プロラクチン、トランスチレチン、リゾチーム、ベータ2ミクログロブリン、ゲルソリン、ケラトエピセリン、シスタチン、免疫グロブリン軽鎖AL、S−IBMタンパク質、リピート関連非ATG(RAN)翻訳産物、ジペプチドリピート(DPR)ペプチド、グリシン−アラニン(GA)リピートペプチド、グリシン−プロリン(GP)リピートペプチド、グリシン−アルギニン(GR)リピートペプチド、プロリン−アラニン(PA)リピートペプチド、ユビキチン、ならびにプロリン−アルギニン(PR)リピートペプチド、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される病原体に特異的に結合する1つまたは複数の抗体と、またはCD40、OX40、ICOS、CD28、CD137/4−1BB、CD27、GITR、PD−L1、CTLA−4、PD−L2、PD−1、B7−H3、B7−H4、HVEM、BTLA、KIR、GAL9、TIM3、A2AR、LAG−3、TREM1、TREM2、CD33、Siglec−5、Siglec−9、Siglec−11、ホスファチジルセリン、病原核酸、アンチセンスGGCCCC(G2C4)リピート伸長RNA、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫調節タンパク質に結合する1つまたは複数の抗体と組み合わせて使用される、請求項1〜79のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 個体に投与した場合に、記憶を増加させる、認知障害を減少させる、またはその両方である、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- ヒトTREM2及びマウスTREM2の両方に特異的に結合する、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- ヒトTREM2及びマウスTREM2について、約12.8nM〜約1.2nMの範囲である、または1.2nM未満である解離定数(KD)を有し、前記KDが約4℃の温度で決定される、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- ヒトTREM2について、約12.8nM〜約2.9nMの範囲である、または2.9nM未満である解離定数(KD)を有し、前記KDが約4℃の温度で決定される、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- マウスTREM2について、約10.4nM〜約1.2nMの範囲である、または1.2nM未満である解離定数(KD)を有し、前記KDが約4℃の温度で決定される、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 先天免疫細胞の増殖を阻害しない、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 1nM未満のKDで初代免疫細胞に結合し、前記KDが約4℃の温度で決定される、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 1%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 2%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 3%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 4%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の単離抗体。
- 先行請求項のいずれか1項に記載の抗体をコードする核酸配列を含む、単離核酸。
- 請求項92に記載の核酸を含む、ベクター。
- 請求項93に記載のベクターを含む、単離宿主細胞。
- TREM2に結合する抗体を生産する方法であって、前記抗体が産生されるように請求項94に記載の細胞を培養することを含む、前記方法。
- 前記細胞によって産生される抗体を回収することをさらに含む、請求項95に記載の方法。
- 請求項95または請求項96に記載の方法によって生産される、TREM2に結合する、単離抗体。
- 請求項1〜91のいずれか1項に記載の抗体及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
- 認知症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー病、那須−ハコラ病、認知障害、記憶喪失、脊髄損傷、外傷性脳損傷、多発性硬化症、慢性大腸炎、潰瘍性大腸炎、及びがんからなる群から選択される疾患、障害、または損傷を予防する、そのリスクを減少させる、またはそれを有する個体を治療する方法であって、それを必要とする個体に、TREM2タンパク質に結合する単離抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 前記単離抗体が、
(a)アゴニスト抗体、
(b)不活性抗体、または
(c)アンタゴニスト抗体
である、請求項99に記載の方法。 - 前記単離抗体が、請求項1〜91のいずれか1項に記載の抗体である、請求項99または請求項100に記載の方法。
- 前記疾患、障害、または損傷がアルツハイマー病である、請求項99〜101のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、1つまたは複数の炎症性メディエーターの発現を増加させ、前記1つまたは複数の炎症性メディエーターが、IL−1β、TNF−α、YM−1、CD86、CCL2、CCL3、CCL5、CCR2、CXCL10、Gata3、Rorc、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項99〜102のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、1つまたは複数の炎症性メディエーターの発現を減少させ、前記1つまたは複数の炎症性メディエーターが、FLT1、OPN、CSF−1、CD11c、AXL、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項99〜102のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、前記個体においてAベータペプチドのレベルを低下させる、請求項99〜104のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、前記個体の脳において、CD11b+ミクログリア細胞の数を増加させる、請求項99〜105のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、前記個体の記憶を増加させる、請求項99〜106のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、前記個体において認知障害を減少させる、請求項99〜107のいずれか1項に記載の方法。
- 前記TREM2タンパク質に結合する単離抗体が、前記個体において運動協調性を増加させる、請求項99〜108のいずれか1項に記載の方法。
- 前記個体に、阻害チェックポイント分子に特異的に結合する少なくとも1つの抗体、及び/または別の標準もしくは調査的抗がん療法を投与することをさらに含む、請求項99〜109のいずれか1項に記載の方法。
- 前記阻害チェックポイント分子に特異的に結合する少なくとも1つの抗体を、前記単離抗体と組み合わせて投与する、請求項110に記載の方法。
- 前記阻害チェックポイント分子に特異的に結合する少なくとも1つの抗体が、抗PD−L1抗体、抗CTLA−4抗体、抗PD−L2抗体、抗PD−1抗体、抗B7−H3抗体、抗B7−H4抗体、ならびに抗HVEM抗体、抗Bリンパ球及びTリンパ球アテニュエーター(BTLA)抗体、抗キラー阻害性受容体(KIR)抗体、抗GAL9抗体、抗TIM3抗体、抗A2AR抗体、抗LAG−3抗体、抗ホスファチジルセリン抗体、抗CD27抗体、ならびにそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項110または請求項111に記載の方法。
- 前記標準または調査的抗がん療法が、放射線療法、細胞傷害性化学療法、標的療法、ホルモン療法、イマチニブ(Gleevec(登録商標))、トラスツズマブ(Herceptin(登録商標))、ベバシズマブ(Avastin(登録商標))、オファツムマブ(Arzerra(登録商標))、リツキシマブ(Rituxan(登録商標)、MabThera(登録商標)、Zytux(登録商標))、冷凍療法、アブレーション、高周波アブレーション、養子細胞移入(ACT)、キメラ抗原受容体T細胞移入(CAR−T)、ワクチン療法、及びサイトカイン療法からなる群から選択される1つまたは複数の療法である、請求項110に記載の方法。
- 前記個体に、阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも1つの抗体を投与することをさらに含む、請求項99〜113のいずれか1項に記載の方法。
- 前記阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも1つの抗体を、前記単離抗体と組み合わせて投与する、請求項114に記載の方法。
- 前記阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも1つの抗体が、抗CCL2抗体、抗CSF−1抗体、抗IL−2抗体、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項114または請求項115に記載の方法。
- 前記個体に、刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも1つのアゴニスト抗体を投与することをさらに含む、請求項99〜116のいずれか1項に記載の方法。
- 前記刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも1つのアゴニスト抗体を、前記単離抗体と組み合わせて投与する、請求項117に記載の方法。
- 前記刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも1つのアゴニスト抗体が、アゴニスト抗CD40抗体、アゴニスト抗OX40抗体、アゴニスト抗ICOS抗体、アゴニスト抗CD28抗体、アゴニスト抗CD137/4−1BB抗体、アゴニスト抗CD27抗体、アゴニスト抗グルココルチコイド誘導性TNFR関連タンパク質GITR抗体、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項117または請求項118に記載の方法。
- 前記個体に、少なくとも1つの刺激性サイトカインを投与することをさらに含む、請求項99〜119のいずれか1項に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの刺激性サイトカインを、前記単離抗体と組み合わせて投与する、請求項120に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの刺激性サイトカインが、TNF−α、IL−10、IL−6、IL−8、CRP、ケモカインタンパク質ファミリーのTGF−ベータメンバー、IL20ファミリーメンバー、IL−33、LIF、OSM、CNTF、TGF−ベータ、IL−11、IL−12、IL−17、IL−8、IL−23、IFN−α、IFN−β、IL−2、IL−18、GM−CSF、G−CSF、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項120または請求項121に記載の方法。
- TREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 1つまたは複数のTREM2活性を誘導することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 1つまたは複数のTREM2活性を誘導すること、及びTREM2タンパク質への1つまたは複数のTREM2リガンドの結合によって誘導される1つまたは複数のTREM2活性を増強することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 1つまたは複数の細胞でのTREM2の細胞レベルを低下させることを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 前記単離抗体が、請求項1〜91のいずれか1項に記載の単離抗体である、請求項123〜126のいずれか1項に記載の方法。
- 前記個体が、TREM2のヘテロ接合型バリアントを有し、前記バリアントが、以下からなる群から選択される1つまたは複数の置換を含む、請求項99〜127のいずれか1項に記載の方法:
i.配列番号1のアミノ酸残基Glu14をコードする核酸配列におけるグルタミン酸から終止コドンへの置換、
ii.配列番号1のアミノ酸残基Gln33をコードする核酸配列におけるグルタミンから終止コドンへの置換、
iii.配列番号1のアミノ酸残基Trp44をコードする核酸配列におけるトリプトファンから終止コドンへの置換、
iv.配列番号1のアミノ酸残基Arg47に対応するアミノ酸でのアルギニンからヒスチジンへのアミノ酸置換、
v.配列番号1のアミノ酸残基Trp78をコードする核酸配列におけるトリプトファンから終止コドンへの置換、
vi.配列番号1のアミノ酸残基Val126に対応するアミノ酸でのバリンからグリシンへのアミノ酸置換、
vii.配列番号1のアミノ酸残基Asp134に対応するアミノ酸でのアスパラギン酸からグリシンへのアミノ酸置換、及び
viii.配列番号1のアミノ酸残基Lys186に対応するアミノ酸でのリシンからアスパラギンへのアミノ酸置換。 - 前記個体が、TREM2のヘテロ接合型バリアントを有し、前記バリアントが、配列番号1をコードする核酸配列のヌクレオチド残基G313に対応するヌクレオチドでのグアニンヌクレオチド欠失、配列番号1をコードする核酸配列のヌクレオチド残基G267に対応するヌクレオチドでのグアニンヌクレオチド欠失、またはその両方を含む、請求項99〜128のいずれか1項に記載の方法。
- 前記個体が、DAP12のヘテロ接合型バリアントを有し、前記バリアントが、以下からなる群から選択される1つまたは複数のバリアントを含む、請求項99〜129のいずれか1項に記載の方法:
i.配列番号2のアミノ酸残基Met1に対応するアミノ酸でのメチオニンからトレオニンへの置換、
ii.配列番号2のアミノ酸残基Gly49に対応するアミノ酸でのグリシンからアルギニンへのアミノ酸置換、
iii.配列番号2をコードする核酸配列のエクソン1〜4内での欠失、
iv.配列番号2をコードする核酸配列のエクソン3での14アミノ酸残基の挿入、及び
v.配列番号2をコードする核酸配列のヌクレオチド残基G141に対応するヌクレオチドでのグアニンヌクレオチド欠失。 - 先天免疫細胞の生存または創傷治癒を誘導または促進することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 前記単離抗体が、請求項1〜58及び72〜91のいずれか1項に記載の抗体である、請求項131に記載の方法。
- 記憶を増加させること、認知障害を減少させること、またはその両方を、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 運動協調性を増加させることを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- Aベータペプチドレベルを低下させることを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- CD11b+ミクログリア細胞の数を増加させることを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法
- FLT1、OPNCSF1、CD11c、及びAXLのうちの1つまたは複数のレベルを上昇させることを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 脊髄損傷を治療することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 慢性大腸炎または潰瘍性大腸炎を治療することを、それを必要とする個体において行う方法であって、前記個体に、TREM2タンパク質に結合する単離アゴニスト抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
- 前記単離抗体が、請求項1〜91のいずれか1項に記載の抗体である、請求項133〜139のいずれか1項に記載の請求項の方法。
- 前記抗体が、先天免疫細胞の増殖を阻害しない、先行請求項のいずれか1項に記載の請求項の方法。
- 前記抗体が、1nM未満のKDで初代免疫細胞に結合し、前記KDが、約4℃の温度で決定される、先行請求項のいずれか1項に記載の請求項の方法。
- 前記抗体が、1%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の請求項の方法。
- 前記抗体が、2%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の請求項の方法。
- 前記抗体が、3%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の請求項の方法。
- 前記抗体が、4%以上の血中抗体濃度である程度まで、脳、もしくは脳脊髄液(CSF)、またはその両方に蓄積する、先行請求項のいずれか1項に記載の請求項の方法。
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Cited By (1)
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Families Citing this family (61)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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EP2970453B1 (en) | 2013-03-13 | 2019-12-04 | Prothena Biosciences Limited | Tau immunotherapy |
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WO2018152359A1 (en) | 2017-02-17 | 2018-08-23 | Denali Therapeutics Inc. | Anti-tau antibodies and methods of use thereof |
WO2018191548A2 (en) * | 2017-04-14 | 2018-10-18 | Kodiak Sciences Inc. | Complement factor d antagonist antibodies and conjugates thereof |
JOP20190248A1 (ar) | 2017-04-21 | 2019-10-20 | Amgen Inc | بروتينات ربط مولد ضد trem2 واستخداماته |
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WO2018236870A2 (en) * | 2017-06-21 | 2018-12-27 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | METHODS AND COMPOSITIONS FOR TARGETING CANCER CELLS WITH A CHIMERIC ANTIGENIC RECEPTOR |
AU2018304711A1 (en) * | 2017-07-20 | 2020-01-16 | Cytomx Therapeutics, Inc. | Methods of qualitatively and/or quantitatively analyzing properties of activatable antibodies and uses thereof |
MY201526A (en) * | 2017-08-03 | 2024-02-27 | Alector Llc | Anti-trem2 antibodies and methods of use thereof |
WO2019055841A1 (en) * | 2017-09-14 | 2019-03-21 | Denali Therapeutics Inc. | ANTI-TREM2 ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
TWI809562B (zh) * | 2017-10-16 | 2023-07-21 | 日商衛材R&D企管股份有限公司 | 抗tau抗體及其用途 |
CR20200303A (es) * | 2017-12-12 | 2020-12-23 | Pionyr Immunotherapeutics Inc | Anticuerpos anti-trem2 y métodos relacionados |
SG11202011355QA (en) * | 2018-05-18 | 2020-12-30 | Macrogenics Inc | Optimized gp41-binding molecules and uses thereof |
CN110790837A (zh) * | 2018-08-02 | 2020-02-14 | 上海君实生物医药科技股份有限公司 | 抗btla抗体 |
CA3111569A1 (en) * | 2018-09-11 | 2020-03-19 | Washington University | Anti-trem-2 agonist antibodies |
US20210341492A1 (en) * | 2018-10-05 | 2021-11-04 | Seattle Children's Hospital D/B/A Seattle Children's Research Institute | Newborn screening for primary immunodeficiencies, cystinosis, and wilson disease |
UY38407A (es) * | 2018-10-15 | 2020-05-29 | Novartis Ag | Anticuerpos estabilizadores de trem2 |
JP2022512629A (ja) * | 2018-10-23 | 2022-02-07 | マジェンタ セラピューティクス インコーポレイテッド | Fcサイレンス化抗体薬物コンジュゲート(ADC)及びその使用 |
KR102156165B1 (ko) * | 2018-10-29 | 2020-09-15 | 재단법인대구경북과학기술원 | 인간 trem2 세포막 단백질에 대한 단일클론항체, 이를 생산하는 하이브리도마 세포주 및 이의 용도 |
CN113302206A (zh) * | 2018-11-26 | 2021-08-24 | 戴纳立制药公司 | 治疗脂质代谢失调的方法 |
CA3122725A1 (en) * | 2018-12-10 | 2020-06-18 | Mor Research Applications | Trem2 antibodies and uses thereof |
CA3120875A1 (en) * | 2018-12-11 | 2020-06-18 | Pionyr Immunotherapeutics, Inc. | Methods of using anti-trem2 antibodies |
MX2021009440A (es) * | 2019-02-08 | 2021-09-10 | Prothena Biosciences Ltd | Anticuerpos que reconocen tau. |
MX2021009722A (es) * | 2019-02-20 | 2021-09-14 | Denali Therapeutics Inc | Anticuerpos anti-trem2 y metodos para utilizarlos. |
JP2022523773A (ja) * | 2019-02-28 | 2022-04-26 | ザ ロックフェラー ユニバーシティー | がんの予後及び治療におけるapoe遺伝子型決定 |
SG11202108414UA (en) | 2019-03-03 | 2021-08-30 | Prothena Biosciences Ltd | Antibodies recognizing tau |
CN110320368A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-10-11 | 广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心) | 基于trem2的诊断试剂盒及其在帕金森病诊断产品上的应用 |
EP4041312A4 (en) | 2019-10-10 | 2023-12-20 | Kodiak Sciences Inc. | METHOD FOR TREATING AN EYE DISORDER |
AU2020397888A1 (en) | 2019-12-05 | 2022-06-09 | Alector Llc | Methods of use of anti-TREM2 antibodies |
JP2023509845A (ja) | 2019-12-13 | 2023-03-10 | インスピルナ,インコーポレーテッド | 金属塩及びその使用 |
AU2021208482A1 (en) | 2020-01-13 | 2022-07-21 | Denali Therapeutics Inc. | Anti-TREM2 antibodies and methods of use thereof |
WO2021146256A1 (en) * | 2020-01-13 | 2021-07-22 | Denali Therapeutics Inc. | Anti-trem2 antibodies and methods of use thereof |
US20230159637A1 (en) | 2020-02-24 | 2023-05-25 | Alector Llc | Methods of use of anti-trem2 antibodies |
US11940448B2 (en) | 2020-03-31 | 2024-03-26 | Seattle Children's Hospital | Proteomic screening for lysosomal storage diseases |
US20230183341A1 (en) | 2020-04-03 | 2023-06-15 | Alector Llc | Methods of use of anti-trem2 antibodies |
IL297432A (en) * | 2020-04-22 | 2022-12-01 | Akeso Biopharma Inc | Anti-cd73-anti-pd-1 bispecific antibody used |
US11339212B2 (en) * | 2020-06-26 | 2022-05-24 | Bioarctic Ab | α-synuclein protofibril-binding antibodies |
CN111944050B (zh) * | 2020-08-19 | 2022-05-13 | 苏州普乐康医药科技有限公司 | 一种抗b7-h3抗体及其应用 |
US20240003918A1 (en) | 2020-11-30 | 2024-01-04 | Enigma Biointelligence, Inc. | Non-invasive assessment of alzheimer's disease |
CN117015400A (zh) * | 2020-12-04 | 2023-11-07 | 维吉尔神经科学股份有限公司 | 使用trem2激动剂治疗与atp结合盒转运体1功能障碍有关的疾病 |
US20220259319A1 (en) * | 2021-01-21 | 2022-08-18 | Twist Bioscience Corporation | Methods and compositions relating to adenosine receptors |
CN112979795B (zh) * | 2021-02-26 | 2022-07-08 | 深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司 | 抗体组合产品及其在新冠肺炎检测中应用 |
WO2022195287A1 (en) * | 2021-03-19 | 2022-09-22 | Bicycletx Limited | Bicyclic peptide ligands specific for trem2 |
CA3219425A1 (en) | 2021-05-14 | 2022-11-17 | Genentech, Inc. | Agonists of trem2 |
WO2022245553A2 (en) * | 2021-05-19 | 2022-11-24 | Signablk, Inc. | Trem-2/dap-12 inhibitors for treating lung disease and injury and combinations thereof |
AU2021460932A1 (en) * | 2021-08-20 | 2024-03-07 | Tasrif Pharmaceutical, LLC | Antibodies and antigen binding fragments against cd155 methods of use thereof |
WO2023039450A2 (en) * | 2021-09-07 | 2023-03-16 | Duke University | Compositions and methods for treatment of retinal degeneration |
WO2023114499A1 (en) | 2021-12-17 | 2023-06-22 | Denali Therapeutics Inc. | Polypeptide engineering, libraries, and engineered cd98 heavy chain and transferrin receptor binding polypeptides |
WO2023137466A2 (en) * | 2022-01-14 | 2023-07-20 | Qilu Puget Sound Biotherapeutics Corporation | Anti-ccr8 antibodies |
WO2023164516A1 (en) | 2022-02-23 | 2023-08-31 | Alector Llc | Methods of use of anti-trem2 antibodies |
WO2023192282A1 (en) | 2022-03-28 | 2023-10-05 | Denali Therapeutics Inc. | Methods for treating brain glucose hypometabolism |
WO2023192288A1 (en) | 2022-03-28 | 2023-10-05 | Denali Therapeutics Inc. | Monovalent anti-trem2 binding molecules and methods of use thereof |
WO2023212707A2 (en) * | 2022-04-29 | 2023-11-02 | The Children's Medical Center Corporation | Therapeutic modulation of genes in myeloid lineage cells and uses thereof in ophthalmology |
WO2024052343A1 (en) | 2022-09-06 | 2024-03-14 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | Trem-2 agonists for the treatment of marfan syndrome |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030165875A1 (en) * | 2001-03-20 | 2003-09-04 | Marco Colonna | Novel receptor TREM (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof |
JP2004073182A (ja) * | 2002-05-24 | 2004-03-11 | Takeda Chem Ind Ltd | インスリン抵抗性改善剤 |
JP2010540660A (ja) * | 2007-10-05 | 2010-12-24 | ユニバーシティ オブ メリーランド,ボルチモア | 哺乳類内の赤血球生成を刺激する新規の組成物および方法 |
JP2011246494A (ja) * | 2002-12-23 | 2011-12-08 | Schering Corp | 哺乳動物サイトカインの用途;関連試薬 |
JP2017523814A (ja) * | 2014-08-08 | 2017-08-24 | アレクトル エルエルシー | 抗trem2抗体及びその使用方法 |
Family Cites Families (55)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4657760A (en) | 1979-03-20 | 1987-04-14 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Methods and compositions using monoclonal antibody to human T cells |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US5206344A (en) | 1985-06-26 | 1993-04-27 | Cetus Oncology Corporation | Interleukin-2 muteins and polymer conjugation thereof |
GB8601597D0 (en) | 1986-01-23 | 1986-02-26 | Wilson R H | Nucleotide sequences |
US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
US5567610A (en) | 1986-09-04 | 1996-10-22 | Bioinvent International Ab | Method of producing human monoclonal antibodies and kit therefor |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5175384A (en) | 1988-12-05 | 1992-12-29 | Genpharm International | Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
US5225212A (en) | 1989-10-20 | 1993-07-06 | Liposome Technology, Inc. | Microreservoir liposome composition and method |
US5959177A (en) | 1989-10-27 | 1999-09-28 | The Scripps Research Institute | Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies |
SG48759A1 (en) | 1990-01-12 | 2002-07-23 | Abgenix Inc | Generation of xenogenic antibodies |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5229275A (en) | 1990-04-26 | 1993-07-20 | Akzo N.V. | In-vitro method for producing antigen-specific human monoclonal antibodies |
EP0546073B1 (en) | 1990-08-29 | 1997-09-10 | GenPharm International, Inc. | production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5571894A (en) | 1991-02-05 | 1996-11-05 | Ciba-Geigy Corporation | Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor |
WO1993006217A1 (en) | 1991-09-19 | 1993-04-01 | Genentech, Inc. | EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES |
US5565332A (en) | 1991-09-23 | 1996-10-15 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
US5587458A (en) | 1991-10-07 | 1996-12-24 | Aronex Pharmaceuticals, Inc. | Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
AU3178993A (en) | 1991-11-25 | 1993-06-28 | Enzon, Inc. | Multivalent antigen-binding proteins |
DE69333807T2 (de) | 1992-02-06 | 2006-02-02 | Chiron Corp., Emeryville | Marker für krebs und biosynthetisches bindeprotein dafür |
US5573905A (en) | 1992-03-30 | 1996-11-12 | The Scripps Research Institute | Encoded combinatorial chemical libraries |
CA2140280A1 (en) | 1992-08-17 | 1994-03-03 | Avi J. Ashkenazi | Bispecific immunoadhesins |
US5789199A (en) | 1994-11-03 | 1998-08-04 | Genentech, Inc. | Process for bacterial production of polypeptides |
US5840523A (en) | 1995-03-01 | 1998-11-24 | Genetech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
US5641870A (en) | 1995-04-20 | 1997-06-24 | Genentech, Inc. | Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification |
US5739277A (en) | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
US5869046A (en) | 1995-04-14 | 1999-02-09 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
EP1978033A3 (en) | 1995-04-27 | 2008-12-24 | Amgen Fremont Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
CA2219486A1 (en) | 1995-04-28 | 1996-10-31 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
WO1997011971A1 (en) | 1995-09-28 | 1997-04-03 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Porcine cell interaction proteins |
DE19544393A1 (de) | 1995-11-15 | 1997-05-22 | Hoechst Schering Agrevo Gmbh | Synergistische herbizide Mischungen |
ES2301183T3 (es) | 1996-12-03 | 2008-06-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpo completamente humano que se une al receptor del egfr. |
US6040498A (en) | 1998-08-11 | 2000-03-21 | North Caroline State University | Genetically engineered duckweed |
IL136544A0 (en) | 1997-12-05 | 2001-06-14 | Scripps Research Inst | Humanization of murine antibody |
GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
US7125978B1 (en) | 1999-10-04 | 2006-10-24 | Medicago Inc. | Promoter for regulating expression of foreign genes |
AU782626B2 (en) | 1999-10-04 | 2005-08-18 | Medicago Inc. | Method for regulating transcription of foreign genes |
AU2003301882A1 (en) | 2002-11-01 | 2004-06-07 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Quantitative analysis of protein isoforms using matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry |
JP2008526205A (ja) | 2004-12-31 | 2008-07-24 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | Br3に結合するポリペプチド及びその使用 |
US7700099B2 (en) | 2005-02-14 | 2010-04-20 | Merck & Co., Inc. | Non-immunostimulatory antibody and compositions containing the same |
SI2359834T1 (sl) | 2006-03-15 | 2017-02-28 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Zdravljenje pacientov,ki imajo paroksizmalno nočno hemoglobinurijo, z zaviralcem komplementa |
UY30776A1 (es) | 2006-12-21 | 2008-07-03 | Medarex Inc | Anticuerpos cd44 |
US8877688B2 (en) | 2007-09-14 | 2014-11-04 | Adimab, Llc | Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor |
CA3187687A1 (en) | 2007-09-14 | 2009-03-19 | Adimab, Llc | Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor |
FR2945538B1 (fr) | 2009-05-12 | 2014-12-26 | Sanofi Aventis | Anticorps humanises specifiques de la forme protofibrillaire du peptide beta-amyloide. |
KR20120123299A (ko) * | 2009-12-04 | 2012-11-08 | 제넨테크, 인크. | 다중특이적 항체, 항체 유사체, 조성물 및 방법 |
DK2593594T3 (en) | 2010-07-16 | 2017-12-11 | Adimab Llc | ANTIBODY LIBRARIES |
-
2016
- 2016-10-06 WO PCT/US2016/055828 patent/WO2017062672A2/en active Application Filing
- 2016-10-06 CA CA2997960A patent/CA2997960A1/en active Pending
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- 2016-10-06 AU AU2016334051A patent/AU2016334051B2/en active Active
- 2016-10-06 EP EP16784666.6A patent/EP3359569A2/en active Pending
- 2016-10-06 US US15/766,363 patent/US20190330335A1/en not_active Abandoned
- 2016-10-06 CN CN201680070761.1A patent/CN108738323B/zh active Active
-
2023
- 2023-02-17 US US18/171,291 patent/US20230295297A1/en active Pending
- 2023-04-04 JP JP2023060952A patent/JP2023093528A/ja active Pending
-
2024
- 2024-01-24 AU AU2024200443A patent/AU2024200443A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030165875A1 (en) * | 2001-03-20 | 2003-09-04 | Marco Colonna | Novel receptor TREM (triggering receptor expressed on myeloid cells) and uses thereof |
JP2004073182A (ja) * | 2002-05-24 | 2004-03-11 | Takeda Chem Ind Ltd | インスリン抵抗性改善剤 |
JP2011246494A (ja) * | 2002-12-23 | 2011-12-08 | Schering Corp | 哺乳動物サイトカインの用途;関連試薬 |
JP2010540660A (ja) * | 2007-10-05 | 2010-12-24 | ユニバーシティ オブ メリーランド,ボルチモア | 哺乳類内の赤血球生成を刺激する新規の組成物および方法 |
JP2017523814A (ja) * | 2014-08-08 | 2017-08-24 | アレクトル エルエルシー | 抗trem2抗体及びその使用方法 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
HUMPHREY MARY BETH; DAWS MICHAEL R; SPUSTA STEVE C; ET AL: "TREM2, A DAP12-ASSOCIATED RECEPTOR, REGULATES OSTEOCLAST DIFFERENTIATION AND FUNCTION", JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH, vol. VOL:21, NR:2, JPN5018008153, February 2006 (2006-02-01), US, pages 237 - 245, ISSN: 0004588752 * |
INVEST.OPHTHALMOL.VIS.SCI.,2013,54(5),P.3451-3462, JPN6022022656, ISSN: 0004792268 * |
MOL.NEUROBIOL.,2013,48(1),P.180-185, JPN6022022655, ISSN: 0004792269 * |
N.N.: "DATASHEET: ANTI-TREM-2 MONOCLONAL ANTIBODY CLONE 78", ONLINE CATALOGUE MERCK, JPN5018008152, 2016, pages 1 - 3, XP055338642, ISSN: 0004588749 * |
Q. PENG; ET AL: "TREM2- AND DAP12-DEPENDENT ACTIVATION OF PI3K REQUIRES DAP10 AND IS INHIBITED BY SHIP1", SCIENCE SIGNALING, vol. 3, no. 122, JPN5018008151, 18 May 2010 (2010-05-18), pages 38 - 1, XP055338013, ISSN: 0004588751, DOI: 10.1126/scisignal.2000500 * |
SATOH, JUN-ICHI ET AL., ALZHEIMER'S RESEARCH & THERAPY, vol. Vol. 5, 30, JPN6020040176, 8 July 2013 (2013-07-08), pages 1 - 3, ISSN: 0004588750 * |
SESSA, GIUSEPPINA ET AL., EUROPEAN JOURNAL OF NEUROSCIENCE, vol. 20, JPN6020040179, 2004, pages 2617 - 2628, ISSN: 0004588753 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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