JP2018530307A

JP2018530307A - 植物性乳酸菌増殖剤、該増殖剤を添加した発酵製品及び調製方法

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Publication number: JP2018530307A
Application number: JP2017541112A
Authority: JP
Inventors: 紅発張; 春苹游; 振民劉
Original assignee: 光明乳業股▲ふん▼有限公司
Priority date: 2016-09-14
Filing date: 2017-06-08
Publication date: 2018-10-18
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Abstract

【課題】植物性乳酸菌増殖剤、該増殖剤を添加した発酵製品及び調製方法を提供することを課題とする。
【解決手段】本発明は、植物性乳酸菌増殖剤を開示し、該増殖剤がプロテアーゼ或いはプロテアーゼを含む物質を通じた植物性タンパク質分解反応後の酵素分解混合であり、プロテアーゼが植物プロテアーゼ、動物プロテアーゼ又は微生物プロテアーゼのうちの一種或いはそれらの混合物で、分解に用いられる植物性タンパク質が大豆タンパク、緑豆タンパク、ヒヨコマメタンパク、そら豆タンパク、えんどう豆タンパク、インゲン豆タンパク、小麦タンパクのうちの一種或いはそれらの混合物である。本発明は、該増殖剤を添加した発酵製品及びその調製方法を更に開示し、本発明に係る植物性乳酸菌増殖剤で製造した発酵製品を通じて植物性乳酸菌の生菌を１．０×１０^９ｃｆｕ／ｇに増殖させることができる。本発明の植物性乳酸菌増殖剤及びその発酵製品は、下記の利点を有する。（１）天然で食用可能な混合物に属するため、人体に対し副作用が起きず；（２）増殖剤を使用すると発酵時間が短くなるため、有害な雑菌による汚染を防止でき；（３）生菌数が他の増殖剤で生成される生菌数をはるかに上回り；（４）使用コストが低い。
【選択図】なし

Description

本発明は、微生物の発酵及び食品加工技術分野に属し、特に、発酵類の食品において、植物性乳酸菌生菌数に対し重要な役割を果たす植物性乳酸菌増殖剤、及び該増殖剤を利用して製造された発酵製品及びその調製方法に関する。

プロバイオティクスは、宿主に有益な効果を与える生きた微生物であり、ヒトの腸内や生殖器系内に定住し、確実な健康効果が生まれることで宿主の微生物のバランスを改善することにより、宿主に有益な作用をもたらす生きた微生物の総称である。現在世界の研究により機能が最も強大な製品は、主に各種微生物から成る複合活性プロバイオティクスであり、生体工学、工業や農業、食品の安全及び生命・健康分野において幅広く応用され、そのプロバイオティックス機能は益々幅広い消費者の納得及び受け入れられてきた。植物性乳酸菌は、プロバイオティクスのうちの一種に属し、ヒトの消化器系に十分耐えられ、腸内フローラのバランス調整、人体の消化吸収促進、コレステロールの調整、血中脂質の調整、人体の免疫力強化及びガン予防と腫瘍生長の抑制等といった保健機能を持つ。よって、高生菌数の純植物性乳酸菌製品の開発は、消費者の健康向上にとって積極的な意義を持つ。現在市場上のプロバイオティクス製品は、主にストレプトコッカスサーモフィルス及びラクトバチスル・デルブルエッキ亜種ブルガリカスを主な発酵剤とし、同時に機能を有する他のプロバイオティクスを添加したものであり、純粋なプロバイオティクス発酵製品は非常に少なく、且つ全ての生菌製品について雑菌検査が行われていない。

植物性乳酸菌は、牛乳中での成長が遅く、乳酸産生能力も悪く、凝乳し難くなっている。国内外の多くの研究ではこの課題の解決に取り組んでいるが、若干の欠陥が存在し、実際の生産が困難である。非特許文献１及び非特許文献２では、フィッシュペプトン内の異なるタンパク成分等の植物性乳酸菌の乳中発酵に対する促進作用を研究したが、使用したフィッシュペプトンは、試薬グレードであり；同時に発酵時間が比較的長く（２４ｈ）、コストも高く、実際の製品の生産要求を満たすことが難しくなっていた。特許文献１では、活性型植物性乳酸菌増殖剤の調合が開示され、植物性乳酸菌の生菌含有量が高くなった。ただし使用した試薬組成が複雑で、発酵時間も比較的長い（２４〜７２ｈ）。特許文献２では、植物性乳酸菌の発酵乳及びその調製方法が開示され、主に適量なアミノ酸、ヌクレオチドが添加されることで、植物性乳酸菌の乳中での成長繁殖の限定要因を解除した。ただし添加剤組成が複雑で、コストも高く；且つ純植物性乳酸菌が発酵した時の発酵時間が比較的長い（１５ｈ）。非特許文献３では、大豆ペプチドの植物性乳酸菌に対する増殖作用が研究され、生菌数が比較的高かったが、発酵時間が比較的長い（４８ｈ）。

外国における植物性乳酸菌の増殖研究が比較的少なく、ある日本の企業が穀物かすエキスを利用して植物性乳酸菌を増殖させたが、一部の植物性乳酸菌に対してのみ増殖作用があり、且つ発酵時間が比較的長（１６ｈを超える）く、特に、ある植物性乳酸菌（例えば植物性乳酸菌ＳＴ−III）に対する増殖効果は理想的なものではない。これは主に植物性乳酸菌の遺伝子差異が比較的大きく、異なる菌株の栄養ニーズが違うためである。

以上の国内外の研究は、植物性乳酸菌の純発酵製品内の雑菌汚染検査が全て無視されている。研究した増殖方法は、発酵時間が短く、生菌数が高いという利点を持っているとしても雑菌の検査がない場合、全て意味を持たない。乳及びよく見られる食品内に常に耐熱のバチルス菌汚染が含有し、死滅させることも難しいことについて世間一般に知れ渡っているが知られ、植物性乳酸菌が急速に成長することで、雑菌の成長を抑制できない場合、発酵乳内の雑菌が大幅に基準を超え；特に、若干の悪玉菌、例えばセレウス菌、葡萄球菌等は、ヒトの健康に著しく危害を及ぼす。よって、研究された植物性乳酸菌の増殖方法は、増菌効果が良好なだけでなく、生菌数が高く；且つ成長が急速になることで、雑菌の成長を抑制するよう求められる。

植物性乳酸菌の乳中での成長と乳酸産生時間を短縮するため、発酵の過程中において増殖剤を添加することは、実現可能な解決策である。増殖剤の成分を探索すると、植物性乳酸菌の活性（生菌数量の増加）を高め、発酵時間を短縮して、有害な雑菌の制御を実現する鍵となる。植物性乳酸菌増殖剤で製造した発酵製品は、まず製品の生菌数上において比較的高く要求されるもので、同時にその発酵時間を短くし、他の有害な雑菌の含有量をできる限り減らすよう求め；また、貯蔵時間内の生菌数が比較的高く、その製品の長期間における有効性を保証する。食品工業分野において、高効率の乳酸桿菌の増殖剤に対する研究は、該技術分野のバイオテクノロジー研究の重点と最前線となっている。

中国特許番号ＣＮ１０２７１５２３５Ａ：２０１２−１０−１０《生きた植物性乳酸菌の飲物及びその調製方法》中国特許番号ＣＮ１０３００４９８４Ａ：２０１３−０４−０３《植物性乳酸菌の発酵乳及びその調製方法》

論文《植物性乳酸菌ＳＴ−IIIの脱脂乳体系における成長限定要因の研究》［陳帥ら、食品及び発酵工業、２００８，３４（１０）：５３〜５７］《有効な外来添加物フィッシュペプトン成分の区分・分離研究》［陳帥ら、乳業科学及び技術、２０１０，４：２０１〜２０４〕論文《植物性乳酸菌ＳＴ−III脱脂乳の発酵工程の最適化》［華宝珍等、農業工学学報、２０１４，３０（２３７１１）：２７６−２８４］

本発明の技術的解決策が解決しようとする技術的課題は、既存の植物性乳酸菌増殖剤が一部の特定植物性乳酸菌に対し増殖作用を有し、且つ発酵時間が比較的長く、増殖効果も顕著しないという欠陥について、新型の増殖剤を提供することである。該増殖剤の添加を通じることで植物性乳酸菌の含有量を明らかに高めることができ、発酵時間も比較的短く、口当たりも良好で、雑菌による汚染も軽減できるため、発酵生菌製品の技術的な難題を解決する。同時に該増殖剤で多種類の発酵食品についても改善し、高い植物性乳酸菌の含有量を有する発酵食品及びその調製方法を更に提供する。

上記発明目的を達成するため、植物性乳酸菌増殖剤技術的解決策としては、植物性乳酸菌増殖剤であって、該植物性乳酸菌増殖剤はプロテアーゼ或いはプロテアーゼを含む物質を通じた植物性タンパク質分解反応後の酵素分解混合物である。上記プロテアーゼは、植物プロテアーゼ、動物プロテアーゼ又は微生物プロテアーゼのうちの一種或いはそれらの混合物であり；プロテアーゼを含む物質は、植物プロテアーゼを含む物質、動物プロテアーゼを含む物質或いは微生物プロテアーゼを含む物質のうちの一種若しくは混合物である。

上記発明目的を達成するため、植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品の技術的解決策としては、植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品であって、該植物性乳酸菌増殖剤がプロテアーゼ又はプロテアーゼを含む物質を通じた植物性タンパク質分解反応後の酵素分解混合物であり、該発酵製品内に植物性乳酸菌増殖剤を含有する重量パーセントが０．１〜２０％とする。上記植物性乳酸菌増殖剤内のプロテアーゼは、植物プロテアーゼ、動物プロテアーゼ又は微生物プロテアーゼのうちの一種或いはそれらの混合物であり；プロテアーゼを含む物質は、植物プロテアーゼを含む物質、動物プロテアーゼを含む物質或いは微生物プロテアーゼを含む物質のうちの一種若しくはそれらの混合物である。該発酵製品は、発酵乳又は生菌飲料水或いは生菌化粧品である。

植物性タンパク質は、大豆タンパク、緑豆タンパク、ヒヨコマメタンパク、えんどう豆タンパク、そら豆タンパク、インゲン豆タンパク、小麦タンパク或いはそれらタンパク混合物から選択できる。上記植物プロテアーゼは、通常果物のプロテアーゼ、野菜のプロテアーゼ、薬用植物のプロテアーゼ（例えば羅漢果のプロテアーゼ、長芋のプロテアーゼ）或いはそれらの混合物から選択される。これら植物プロテアーゼを含む物質は、果物、野菜或いは薬用植物である。動物プロテアーゼを選択する場合、具体的に膵プロテアーゼ、胃プロテアーゼ、キモトリプシン或いはそれらの混合物とすることができる。

微生物プロテアーゼを選択する場合、具体的にリケニホルミス菌のプロテアーゼ、黒麹菌のプロテアーゼ、バチルス・アミロリケファシエンスのプロテアーゼ、枯草菌のプロテアーゼ、リゾムコル・ミエヘイのプロテアーゼ、米麹菌のプロテアーゼ、乳糖発酵性酵母のプロテアーゼ、ムコール・プシルスのプロテアーゼ、アスペルギルスメレウスのプロテアーゼ、クリフォネクトリア・パラシチカ（栗胴枯病菌）のプロテアーゼのうちの一種或いはそれらの混合物とすることができる。

本発明は、該植物性乳酸菌増殖剤が植物性乳酸菌の生菌増加面において１．０×１０^９ｃｆｕ／ｇに達することができことを更に提供する。

上記発酵製品の発酵乳製造方法は、牛乳と植物性乳酸菌増殖剤を重量比１００：０．１〜２０によって混合する工程（１）と、滅菌し、３７℃まで冷却する工程（２）と、植物性乳酸菌の終濃度が１．０×１０^５−１．０×１０^８ｃｆｕ／ｇに達するまで接種する工程（３）と、凝乳するまで発酵させ、発酵時間が１２ｈを超えない工程（４）と、を含む。

上記生菌飲料水の製造方法は、純水と植物性乳酸菌増殖剤を重量比１００：０．１〜２０によって混合する工程（１）と、上記工程(１)の混合液を予熱して６５℃まで昇温し、２０ＭＰａ下で均質化を実現し、滅菌し、３７℃まで冷却する工程（２）と、接種して１６ｈ発酵させて、植物性乳酸菌の終濃度を２．０×１０^９ｃｆｕ／ｇに達せさせる工程(３)と、工程（３）の生成物の中において２００ｍｇ／１００ｍｌの割合でビタミンＣを添加し、また純水で植物性乳酸菌の終濃度が２．０×１０^８ｃｆｕ／ｇになるまで希釈する工程(４)と、を含む。

上記生菌化粧品の製造方法は、化粧品と植物性乳酸菌増殖剤を重量比１００：０．１〜２０によって混合する工程（１）と、滅菌する工程（２）と、接種して発酵させる工程（３）と、を含む。

本発明の技術的解決策が提供する植物性乳酸菌増殖剤及びその発酵製品は、下記の利点を有する。（１）該増殖剤は、天然で食用可能な混合物に属するため、人体に対し副作用が起きず；（２）該増殖剤を使用すると発酵時間が短くなるため、有害な雑菌による汚染を防止でき；（３）該増殖剤により植物性乳酸菌の増殖を実現する時の生菌数が１．０×１０^９ｃｆｕ／ｇに達するため、生菌数が他の増殖剤で生成される生菌数をはるかに上回り；（４）該増殖剤の使用コストが低いため、植物性乳酸菌製品の製造コストも削減できる。

本発明の技術的解決策をより明確に説明するため、次に実験やテスト結果を組み合わせ本技術的解決策について具体的に紹介していく。植物性乳酸菌増殖剤は、プロテアーゼを通じた植物性タンパク質分解反応後の酵素分解混合物であり；植物性タンパク質は、大豆タンパク又は緑豆タンパク、ヒヨコマメタンパク、えんどう豆タンパク、そら豆タンパク、インゲン豆タンパク、小麦タンパク或いはそれらタンパク混合物から選択できる。上記植物プロテアーゼは、通常果物のプロテアーゼ、野菜のプロテアーゼ、薬用植物のプロテアーゼ（例えば羅漢果のプロテアーゼ、長芋のプロテアーゼ）或いはそれらの混合物から選択される。これら植物プロテアーゼを含む物質は、果物、野菜或いは薬用植物である。動物プロテアーゼを選択する場合、具体的に膵プロテアーゼ、胃プロテアーゼ、キモトリプシンとすることができる。

上記植物性乳酸菌増殖剤の製造方法は、植物性タンパク質と植物プロテアーゼを水溶液の中において２５℃〜８０℃下で０．５〜８ｈ酵素分解反応を行う。
（実施例１）

該増殖剤の作用を確定するため、上記調製された植物性乳酸菌増殖剤０．５〜１０％を牛乳中に添加し、９５℃で１０ｍｉｎ滅菌し、接種して終濃度が１．０×１０^５−１．０×１０^８ｃｆｕ／ｇの植物性乳酸菌ＳＴ−ＩＩＩを得、凝乳（１２ｈを超えない）するまで発酵させ、ＬＢ平板を通じて好気性菌総コロニー数をカウントして汚染状況を検査し、またＭＲＳ平板を通じて植物性乳酸菌の生菌数をカウントする。この方法で得られた凝乳テスト結果を表１にまとめた。

植物性乳酸菌の純発酵乳実験結果

表１の実験結果によれば、該増殖剤は植物性乳酸菌ＳＴ−IIIが牛乳中で迅速に成長して凝乳することを促進させることができ、３０日の品質保持期限内の生菌数の変化が大きくなく、雑菌による汚染がなく；且つ植物性乳酸菌の生菌カウントが比較的高いことを証明した。
（実施例２）

大豆タンパクとイチジクプロテアーゼで酵素分解反応を行って増殖剤を生成し、該増殖剤を生乳と混合して接種、発酵させて凝乳状況を観察し、試料を段階希釈してカウントし、上記試料を３０日冷蔵してからカウントし；増殖剤の効果を比較するため、大豆ペプトン、カゼインペプトンを増殖剤として比較試験を行い、その結果を表２にまとめた。

大豆ペプトン、カゼインペプトンを増殖剤として比較試験を行った結果

表２から分かるように、本発明の技術的解決策に係る増菌剤の増菌効果は、大豆ペプトン、カゼインペプトンの効果をはるかに上回った。
（実施例３）

上記実施例に類似する方法により、大豆タンパク及びパイナップルのプロテアーゼで酵素分解反応を行って増殖剤を生成し、該増殖剤を生乳と混合して発酵、接種させ、凝乳状況を観察し、その結果を表３にまとめた。

大豆タンパク及びパイナップルのプロテアーゼで酵素分解反応を行って増殖剤を生成した実験効果

（実施例４）

上記大豆タンパク及びパイナップル１００％ジュースで酵素分解反応を行って増殖剤を生成し、該増殖剤を生乳と混合して発酵、接種させ、凝乳状況を観察し、その結果を表４にまとめた。

大豆タンパクとパイナップル１００％ジュースで酵素分解反応を行って増殖剤を生成した実験効果

（実施例５）

大豆タンパク及び下記幾つかの植物プロテアーゼで酵素分解反応を各々行って製造した増殖剤のテスト結果を表５にまとめた。

異なる植物プロテアーゼの抽出物効果

（実施例６）

上記大豆タンパクの代わりに他の植物性タンパク質を使用でき、他の植物性タンパク質をパイナップルジュースと酵素分解反応を行って増殖剤を製造し、またそのテスト結果を下表６にまとめた。

異なる植物性タンパク質をパイナップルジュースと酵素分解反応を行った増殖剤の増菌実験効果

（実施例７）

上記植物プロテアーゼの代わりに、動物プロテアーゼを使用することもでき、動物プロテアーゼを大豆タンパクと酵素分解反応を行って増殖剤を製造し、そのテスト結果を下表７にまとめた。

異なる動物プロテアーゼによる増菌実験効果

（実施例８）

上記植物プロテアーゼの代わりに、微生物プロテアーゼを使用することもでき、微生物プロテアーゼを大豆タンパクと酵素分解反応を行って増殖剤を製造し、そのテスト結果を下表８にまとめた。

異なる微生物プロテアーゼによる増菌実験

（実施例９）

植物性乳酸菌増殖剤を大豆＋パイナップル１００％ジュースとする。
植物性乳酸菌ＳＴ−ＩＩＩの代わりに、他の植物性乳酸菌の菌株を使用することもできる。

異なる植物性乳酸菌による増殖試験

上記植物性乳酸菌増殖剤を利用すると、高い生菌数を有する複数種類の発酵製品を製造でき、下記実施例１０〜実施例１８では多種類の発酵製品の製造過程が挙られている。
（実施例１０：植物性乳酸菌の発酵乳）

植物性乳酸菌の発酵乳調合：生乳８０％、増殖剤２％（固形物含有量）、適量の増粘剤、ショ糖７％、オレンジジュース５％。

調製方法：上記混合液を予熱して昇温し、６５℃、２０ＭＰａの下で均質化した後、９５℃で１０ｍｉｎ保温殺菌してから３７℃まで冷却する。接種（ＳＴ−III接種量の終濃度１．０×１０^６ｃｆｕ／ｇ）し、凝乳するまで発酵させる。その結果としては、植物性乳酸菌の生菌数が１．０×１０^９ｃｆｕ／ｇとなり、２１日間の品質保持期限内の生菌数が３．０×１０^８ｃｆｕ／ｇを上回り、酸っぱくて、甘くて美味しい。現在国内外の市場において純植物性乳酸菌の発酵乳製品がまだ見られていない。
（実施例１１：植物性乳酸菌の速溶発酵乳粉末）

先に実施例１０で得られた植物性乳酸菌の発酵乳を含水量が約２０％粉末状物になるまで噴霧乾燥する。噴霧乾燥の吸込み温度を１１０℃とし、前記噴霧乾燥の吹出温度を３７℃とし、前記粉体の出口温度を３５℃とし；その後低温５０℃の流動床内で流動化乾燥を行い、前記粉体内の含水量＜５％にさせる。発酵乳粉末の発酵ヨーグルトの使用方法は、上記で得られた発酵乳粉末と温水（５０℃）を１：４の重量比で混合してから、３０分間保温すると、速溶発酵乳を製造できる工程を含む。植物性乳酸菌の生菌数は、３．０×１０^８ｃｆｕ／ｇとなる。現在国内外の市場において植物性乳酸菌の速溶発酵乳製品がまだ見られていない。
（実施例１２：植物性乳酸菌のヨーグルトソフトクリーム）

原料：生乳４０％、増殖剤６％（固形物含有量）、白砂糖１０％、脱脂粉乳１０％、シングルクリーム２０％、安定剤４％（主要成分は、カルボキシメチルセルロース、澱粉）とし、全ての原料を均一に混合し、６５℃、２００ｂａｒの圧力下で均質化を行い、９９℃で１０ｍｉｎ殺菌し；３７℃まで冷却して接種（ＳＴ−III接種量の終濃度が１．０×１０^７ｃｆｕ／ｇ）し、１２ｈ発酵させる。発酵生成物を４５℃で１５０回転／ｍｉｎの回転速度で２０ｍｉｎ撹拌してエマルジョンブレークし、１５℃まで降温して静置して１６ｈ後熟する。０℃で静置して１２ｈエイジングし、そして０℃で４０ｂａｒの圧力下で均質化を行う。最後にソフトクリーム機に入れ−３０℃でヨーグルトソフトクリームを製造する。得られた製品は酸っぱくて、甘くて美味しく、且つプロバイオティックス機能の植物性乳酸菌の生菌（３ヶ月内の生菌数＞４．０×１０^８ｃｆｕ／ｇ）が含まれる。現在国内外の市場において植物性乳酸菌のヨーグルトソフトクリーム製品がまだ見られていない。
（実施例１３：植物性乳酸菌の生菌飲料）

（１）発酵乳基材の調合：脱脂粉乳１５％、増殖剤４％（固形物含有量）、適量の増粘剤、ショ糖７％、果汁１０％とする。発酵乳基材の調製方法：液体材料を予熱して昇温し、均質化した後で、１０５℃で１０ｍｉｎ保持して殺菌し、３７℃まで冷却する。接種（ＳＴ−III接種量の終濃度が１．０×１０^６ｃｆｕ／ｇ）して凝乳するまで発酵させる。

（２）生菌タイプ飲むヨーグルトの製造
材料準備：白砂糖１０％、水４５％、安定剤（ペクチン）０．５％とし、上記割合による安定剤と適量の白砂糖と水を撹拌して溶かし、高圧にして均質化した後殺菌して冷却する。発酵乳基材約４０％を加え、均一に攪拌して酸度をｐＨ４．４に調整して香りを調整する。２０ＭＰａ下で無菌均質化して、植物性乳酸菌の生菌飲料を得る。４℃で１ヵ月間冷蔵すると、植物性乳酸菌の生菌数＞１．０×１０^８ｃｆｕ／ｇとなる。現在市場上の植物性乳酸菌の生菌飲料は、比較的少なく、一般的に直接投入式菌粉末を使用するため、コストが高く、生菌数が少なく、２．０×１０^７ｃｆｕ／ｇのみであった。
（実施例１４：植物性乳酸菌の生菌水）

植物性乳酸菌の高密度発酵乳の調合：脱脂粉乳１０％、増殖剤５％（固形物含有量）。

調製方法：液体材料を予熱して昇温し、６５℃、２０ＭＰａ下で均質化を行った後、１１５℃で１０ｍｉｎ保持して殺菌し、３７℃まで冷却する。接種（ＳＴ−III接種量の終濃度が５．０×１０^６ｃｆｕ／ｇ）して１６ｈ発酵させると、植物性乳酸菌の生菌数が２．０×１０^９ｃｆｕ／ｇとなる。ビタミンＣ２００ｍｇ／１００ｍｌ及びペクチン０．２％を含有する安定定剤を希釈する純水内に添加して、終濃度が２．０×１０^８ｃｆｕ／ｇの生菌水を製造する。現在国内外の市場において植物性乳酸菌の生菌水製品がまだ見られていない。
（実施例１５：植物性乳酸菌のプロバイオティクス製剤）

植物性乳酸菌の高密度発酵乳の調合：脱脂粉乳１２％、増殖剤５％（固形物含量）。

調製方法：液体材料を予熱して昇温し、６５℃、２０ＭＰａ下で均質化を行った後、１１５℃で１０ｍｉｎ保持して殺菌し、３７℃まで冷却する。接種（ＳＴ−III接種量の終濃度が２．０×１０^７ｃｆｕ／ｇ）して１２ｈ発酵させると、植物性乳酸菌の生菌数が１．５×１０^９ｃｆｕ／ｇとなる。発酵液を遠心して菌泥内にショ糖５％、Ｌ−システイン０．０１％を加え、真空乾燥或いは冷凍乾燥して植物性乳酸菌粉末を得る。真空乾燥で得られた植物性乳酸菌粉末を微粉末化してから乳糖と混合して配合し、フレーク若しくは菌粉末カプセルとして製造する。生菌数が１．０×１０^１０ｃｆｕ／ｇとなり、常温で１年間乾燥保存してから残存率が４０％を上回った。現在市場上の植物性乳酸菌プロバイオティクス製剤で用いる培地は、食用にできず、菌体を分離する必要があるため、製造コストが高い。
（実施例１６：植物性乳酸菌の混合発酵乳）

植物性乳酸菌発酵乳の調合：生乳８０％、増殖剤２％（固形物含有量）、適量の増粘剤、ショ糖７％。

調製方法：液体材料を予熱して昇温し、６５℃、２０ＭＰａ下で均質化を行った後、９０℃で８ｍｉｎ保持して殺菌し、３７℃まで冷却する。接種（ＳＴ−III接種量の終濃度が２．０×１０^６ｃｆｕ／ｇ、ラクトバチスル・デルブルエッキ亜種ブルガリカス粉０．０２ｇ／ｋｇ、ストレプトコッカスサーモフィルス粉末０．０３ｇ／ｋｇ）して凝乳するまで発酵させ、イチゴ、キウイ等の果物を添加又は添加しない。その結果としては、植物性乳酸菌の生菌数が４．０×１０^８ｃｆｕ／ｇとなり、２１日間の品質保持期限内の生菌数が２．０×１０^８ｃｆｕ／ｇを上回り、酸っぱくて、甘くて美味しい。現在市場上のある発酵乳内に植物性乳酸菌が含まれているが、一般的に菌粉末を直接投入したもので、コストが高く、生菌数も低い（１．０×１０^７ｃｆｕ／ｇ近い。）。
（実施例１７：植物性乳酸菌を含む乳酸菌飲料）

発酵乳基材：実施例１０で製造された発酵乳を発酵乳基材とする。

材料準備：白砂糖１０％、水４５％、安定剤（ペクチン）０．５％とし、上記割合による安定剤と適量の白砂糖と水を撹拌して溶かし、高圧にして均質化した後殺菌して冷却する。発酵乳基材(４０％)を加え、均一に攪拌して酸度をｐＨ４．４に調整して香りを調整する。２０ＭＰａ下で無菌均質化して、植物性乳酸菌の生菌飲料を得る。４℃で１ヵ月間冷蔵すると、植物性乳酸菌の生菌数＞１．０×１０^８ｃｆｕ／ｇとなる。植物性乳酸菌は牛乳中で増殖させるのが難しく、現在市場上の植物性乳酸菌の生菌飲料は、菌粉末の直接投入を用いるため、コストが高く、生菌数が少なく、１．０×１０^７ｃｆｕ／ｇを下回る。
（実施例１８：植物性乳酸菌を含む生菌化粧品）

調合１：ヴァセリン保湿クリームを基質とし、実施例１で製造した植物性乳酸菌の生菌と１００：１〜２０によって混合して得られた。肌の表面に塗ると、雑菌の成長を抑制し、抗ニキビ作用の美容効果を有する。

調合２：パック製造材料を基質（例えばミツロウ、ヒアルロン酸ナトリウム、コラーゲン）とし、実施例１で製造した植物性乳酸菌の生菌と１００：１〜２０の割合により混合して得られた。肌の表面に塗ると、雑菌の成長を抑制し、抗ニキビ作用の美容効果を有する。

本発明では、好ましい実施例を前述の通り開示したが、これらは決して本発明に限定するものではなく、本発明の実質的内容上で行う様々な修正、均等置換及び簡単な改良等は、均しく本発明の保護範囲内に含めるものであるのが勿論である。

Claims

植物性乳酸菌増殖剤であって、前記植物性乳酸菌増殖剤はプロテアーゼ或いはプロテアーゼを含む物質を通じた植物性タンパク質分解反応後の酵素分解混合物であることを特徴とする植物性乳酸菌増殖剤。
前記プロテアーゼは、植物プロテアーゼ、動物プロテアーゼ又は微生物プロテアーゼのうちの一種或いはそれらの混合物であることを特徴とする請求項１に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
前記プロテアーゼを含む物質は、植物プロテアーゼを含む物質、動物プロテアーゼを含む物質或いは微生物プロテアーゼを含む物質のうちの一種若しくはそれらの混合物であることを特徴とする請求項１に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
分解に用いられる植物性タンパク質は、大豆タンパク、緑豆タンパク、ヒヨコマメタンパク、そら豆タンパク、えんどう豆タンパク、インゲン豆タンパク、小麦タンパク中の一種或いはそれらの混合物であることを特徴とする請求項１に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
前記プロテアーゼ又はプロテアーゼを含む物質による植物性タンパク質分解反応は、重量比１：１〜５０で混合することを特徴とする請求項１に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
前記植物プロテアーゼは、果物のプロテアーゼ、野菜のプロテアーゼ、羅漢果のプロテアーゼ、長芋のプロテアーゼ或いはそれらの混合物であることを特徴とする請求項２に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
前記動物プロテアーゼは、膵プロテアーゼ、胃プロテアーゼ、キモトリプシンのうちの一種或いはそれらの混合物であることを特徴とする請求項２に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
前記微生物プロテアーゼは、リケニホルミス菌のプロテアーゼ、黒麹菌のプロテアーゼ、バチルス・アミロリケファシエンスのプロテアーゼ、枯草菌のプロテアーゼ、リゾムコル・ミエヘイのプロテアーゼ、米麹菌のプロテアーゼ、乳糖発酵性酵母のプロテアーゼ、ムコール・プシルスのプロテアーゼ、アスペルギルスメレウスのプロテアーゼ、クリフォネクトリア・パラシチカ（栗胴枯病菌）のプロテアーゼのうちの一種或いはそれらの混合物であることを特徴とする請求項２に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
前記植物プロテアーゼを含む物質は、果物、野菜、薬用植物のうちの一種或いはそれらの混合物であることを特徴とする請求項３に記載の植物性乳酸菌増殖剤。
請求項１〜９のいずれか一項に記載の植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品であって、前記発酵製品内の植物性乳酸菌の生菌が１．０×１０^９ｃｆｕ／ｇに達することを特徴とする植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品。
用いる植物性乳酸菌増殖剤は、プロテアーゼ或いはプロテアーゼを含む物質を通じた植物性タンパク質分解反応後の酵素分解混合物であり、前記発酵製品内に植物性乳酸菌増殖剤を含有する重量パーセントが０．１〜２０％とし、前記発酵製品が発酵乳又は生菌飲料水或いは生菌化粧品であることを特徴とする請求項１０に記載の植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品。
前記発酵製品は、発酵乳の場合、その中に重量パーセントが０．１〜２０％の植物性乳酸菌増殖剤を含有することを特徴とする請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品。
前記発酵製品は、発酵乳飲料の場合、その中に重量パーセントが０．１〜２０％の植物性乳酸菌増殖剤を含有することを特徴とする請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品。
前記発酵製品は、生菌飲料水の場合、その中に重量パーセントが０．１〜２０％の植物性乳酸菌増殖剤を含有することを特徴とする請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品。
該発酵製品は、生菌化粧品の場合、その中に重量パーセントが０．１〜２０％の植物性乳酸菌増殖剤を含有することを特徴とする請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤を添加した発酵製品。
請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤の発酵製品製造方法であって、前記発酵乳の調製方法は、牛乳と植物性乳酸菌増殖剤を重量比１００：０．１〜２０によって混合する工程（１）と、滅菌する工程（２）と、植物性乳酸菌の終濃度が１．０×１０^５−１．０×１０^８ｃｆｕ／ｇに達するまで接種する工程（３）と、凝乳するまで発酵させ、発酵時間が１２ｈを超えない工程（４）と、を含むことを特徴とする植物性乳酸菌増殖剤の発酵製品製造方法。
請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤の発酵製品製造方法であって、前記生菌飲料水の調製方法は、水と植物性乳酸菌増殖剤を重量比１００：０．１〜２０によって混合する工程（１）と、前記工程(１)の混合液を予熱して６５℃まで昇温し、２０ＭＰａ下で均質化を実現し、滅菌し、３７℃まで冷却する工程（２）と、接種して１６ｈ発酵させて、植物性乳酸菌の終濃度を２．０×１０^９ｃｆｕ／ｇに達せさせる工程(３)と、工程（３）の生成物の中において２００ｍｇ／１００ｍｌの割合でビタミンＣを添加し、また純水で植物性乳酸菌の終濃度が２．０×１０^８ｃｆｕ／ｇになるまで希釈する工程(４)と、を含むことを特徴とする植物性乳酸菌増殖剤の発酵製品製造方法。
請求項１１に記載の植物性乳酸菌増殖剤の発酵製品製造方法であって、前記生菌化粧品の調製方法は、化粧品と植物性乳酸菌増殖剤を重量比１００：０．１〜２０によって混合する工程（１）と、滅菌し、３７℃まで冷却する工程（２）と、接種して発酵させる工程(３)と、を含むことを特徴とする植物性乳酸菌増殖剤の発酵製品製造方法。