JP2018520707A - 新規なトリプシンアイソフォームおよびそれらの使用 - Google Patents
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Abstract
Description
・複合的な基質プロファイリングは、切断部位を囲む基質における、異なるアミノ酸残基(C末端側での約4つのアミノ酸残基およびN末端側での約4つのアミノ酸残基)が、切断に大きな効果を有する。トリプシンZTアイソフォームは、トリプシンIにわたって切断部位を囲む所定のアミノ酸残基を優先する。
・アルギニンおよびリジンに富むアミノ酸配列は、感染に関連するウィルス配列、バクテリアの配列、および寄生生物配列で頻繁にみられる。
・標準得点(Zスコア)比率(複合的な基質プロファイリングデータ)に基づく数値は、トリプシンZTアイソフォームが、トリプシンIと比較して、いくつかの連続した塩基性アミノ酸残基(ArgおよびLys)を含むペプチドを切断するためによりよく適用されることを示す。データに基づき、トリプシンZTアイソフォームは、それらがリジンおよびアルギニンのようなクラスター化した塩基性アミノ酸残基で切断することができるため、ウイルスやバクテリアに対する抗菌材として作用し得る。
本発明は、トリプシンZTアイソフォームと呼ばれる、新規なトリプシンアイソフォームを提供する。このようなアイソフォームは、タイセイヨウダラのような魚から得ることができ、または、タンパク質発現システムを用いて組み換え形態で引き出すことができる。本発明は、疾患を治療または予防するためのこのようなトリプシンZTアイソフォームの使用、および化粧品の分野に関連する。特に、本発明は、医薬品、医療装置内、および化粧品として有用な、新規なタイセイヨウダラのトリプシンZTアイソフォームに関連する。
配列番号1
IX1GGX2X3CEPX4SRPFMASLNYGYHFCGGVLINDQWVLSVAHCWYNPYYMQVMLGEHDLRVFEGTEQLVKTNTIFWHEX5YDYQTLDYDMMMIKLYHPVEVTQSVAPISLPTGPPDGGMLCSVSGWGNMAMGEEVNLPTRLQCLDVPIVEX6VX7CX8AX9YPGMISPRMX10CX11GX12MDGGRDX13CNGDSGSPLVCEGVLTGLVSWGX14GCAX15PNX16PGVYVKVYEX17LSWIQTTLDANP
ここで、
X1は、IおよびVから選択され、
X2は、QおよびHから選択され、
X3は、DおよびEから選択され、
X4は、RおよびNから選択され、
X5は、Lであり、
X6は、TおよびPから選択され、
X7は、DおよびAから選択され、
X8は、EおよびQから選択され、
X9は、AおよびSから選択され、
X10は、VおよびMから選択され、
X11は、AおよびVから選択され、
X12は、YおよびFから選択され、
X13は、AおよびVから選択され、
X14は、QおよびRから選択され、
X15は、LおよびEから選択され、
X16は、YおよびSから選択され、並びに
X17は、YおよびFから選択される。
IVGGHECEPNSRPFMASLNYGYHFCGGVLINDQWVLSVAHCWYNPYYMQVMLGEHDLRVFEGTEQLVKTNTIFWHELYDYQTLDYDMMMIKLYHPVEVTQSVAPISLPTGPPDGGMLCSVSGWGNMAMGEEVNLPTRLQCLDVPIVEPVACQASYPGMISPRMMCVGFMDGGRDVCNGDSGSPLVCEGVLTGLVSWGRGCAEPNSPGVYVKVYEFLSWIQTTLDANP
IVGGHECEPNSRPFMASLNYGYHFCGGVLINDQWVLSVAHCWYNPYYMQVMLGEHDLRVFEGTEQLVKTNTIFWHELYDYQTLDYDMMMIKLYHPVEVTQSVAPISLPTGPPDGGMLCSVSGWGNMAMGEEVNLPTRLQCLDVPIVETVDCEAAYPGMISPRMVCAGYMDGGRDACNGDSGSPLVCEGVLTGLVSWGQGCALPNYPGVYVKVYEYLSWIQTTLDANP
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IIGGQDCEPRSRPFMASLNYGYHFCGGVLINDQWVLSVAHCWYNPYYMQVMLGEHDLRVFEGTEQLVKTNTIFWHELYDYQTLDYDMMMIKLYHPVEVTQSVAPISLPTGPPDGGMLCSVSGWGNMAMGEEVNLPTRLQCLDVPIVETVDCEAAYPGMISPRMVCAGYMDGGRDACNGDSGSPLVCEGVLTGLVSWGQGC ALPNYPGVYVKVYEYLSWIQTTLDANP
配列番号19 切断されていないタイセイヨウダラトリプシンZT−1アイソフォーム
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MIGLALLMLLGAAAAVPREDGRIIGGQDCEPRSRPFMASLNYGYHFCGGVLINDQWVLSVAHCWYNPYYMQVMLGEHDLRVFEGTEQLVKTNTIFWHELYDYQTLDYDMMMIKLYHPVEVTQSVAPISLPTGPPDGGMLCSVSGWGNMAMGEEVNLPTRLQCLDVPIVETVDCEAAYPGMISPRMVCAGYMDGGRDACNGDSGSPLVCEGVLTGLVSWGQGCALPNYPGVYVKVYEYLSWIQTTLDANP
本態様の一実施形態では、前記疾患は、ウイルス、細菌、真菌、寄生生物および原虫からなる群から選択される病原菌により引き起こされる。
(i)タラの内蔵のトリプシンZTを抽出することと、
(ii)p−アミノベンザミジンアフィニティーリガンドを用いるアフィニティークロマトグラフィーステップを含む、少なくとも1つのクロマトグラフィーステップに前記抽出物を供すること、および、
(iii)前記p−アミノベンザミジンアフィニティーリガンドに結合するタラのトリプシンZTアイソフォームを放出および溶出することとを含む、配列番号2から配列番号5のいずれか一つのアミノ酸配列を含む、タラのトリプシンZTアイソフォームを調製する方法が提供される。
例えば、上気道および下気道並びに肺で生じるウイルス、バクテリア、およびカビにより引き起こされる病原性の疾患を治療または予防すること、
例えば、ざ瘡、発疹、乾癬、または手、顔、頭、もしくは首を含む湿疹、痔核のような皮膚疾患を治療または予防的に防止することであって、投与されるトリプシンZTアイソフォームおよび他のトリプシンの量は、好ましくは、皮膚疾患の治療または予防に有効な量であり、
肺の疾患を治療することであって、他のトリプシンとともにまたは単独で、トリプシンZTアイソフォームは、例えば、治療に有効な投与量で、高効率な加圧式定量用量吸入器を使用し、
微生物感染の予防に有効な量の他のトリプシンとともにまたは単独で、トリプシンZTアイソフォームを傷に適用することにより、または、治療された傷が壊死組織の実質的な遊離である場合に、菌抑制に有効な量のトリプシンZTアイソフォームを、他のトリプシンとともにまたは単独で、投与することにより傷の治癒を促進することにより、創傷感染症および清拭した傷を治療または予防的に防止すること、
やけどを治療することであって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で投与されるトリプシンZTアイソフォームの量が、治療の促進に十分な量であり、
日焼けを治療することであって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で投与されるトリプシンZTアイソフォームの量が、治療の促進に十分な量であり、
放射線熱傷を治療することであって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で投与されるトリプシンZTアイソフォームの量が、治療の促進に十分な量であり、
肌の表面を改善するための、健康な皮膚からの垢の除去または皮膚のピーリングであって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で、トリプシンZTアイソフォームの量が、垢の除去に有効な量で投与され、
割れたかかとを治療することであって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で、トリプシンZTアイソフォームの量が、効果的な治療に十分な量で投与され、
ドライパッチ、かゆみ、赤みおよび傷のような刺激を受けた皮膚のマネージメント用であって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で、トリプシンZTアイソフォームの量が、効果的な治療に十分な量で投与され、
癌治療に有効な量のまたは腫瘍転移予防もしくは阻害する量のトリプシンZTアイソフォームを投与することにより、嚢胞性線維症、癌、アテローム性動脈硬化、喘息、敗血症性ショック、毒素ショック症候群、腱鞘炎などの組織癒着、腹腔後癒合または関節癒着、再灌流傷害、マラリア、自己免疫疾患のような免疫疾患、アポトーシス、大腸炎および腸炎、クローン病を治療または予防的に防止することであり、好ましくは、投与されるトリプシンZTアイソフォームおよび関連するペプチダーゼの量が有効であり、
微生物感染、例えば、ウイルスの感染、ライノウイルス(RV)、呼吸器合併症ウィルス(RSV)、インフルエンザ、ヘルペスウィルス感染(例えばHSV−1、HSV−2、ヘルペス疱疹または性器ヘルペス感染)、HIV、肝炎、コロナウイルス、サイトメガロウイルス、またはパピローマウイルス感染、潰瘍または下痢のような胃腸の疾患を引き起こす感染、真菌の爪の感染およびカンジダ感染を含む酵母の感染を含む、全身、皮膚、経口、膣または食道の真菌感染症、点眼により好ましくは治療される目の微生物感染、ヘリコバクター・ピロリ、ブドウ球菌属菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンザ、ストレプトコッカス・ミディス、ストレプトコッカス属、クレブシエラ属、シュードモナス属、淋菌、ヘモフィルス属種、クラミジア種、梅毒および大腸菌感染症、軟性下かんを引き起こすバクテリア感染、による感染を含む、バクテリア感染を治療または予防的に防止し、免疫不全患者における日和見性の微生物感染であって、好ましくはタラのトリプシンの投与される量は、微生物感染の治療または予防に有効な量である、または細胞〜細胞、細胞〜ウイルス接着に対する阻害活性を有し、
疼痛、炎症、急性または慢性炎症、関節炎、炎症を起こした関節、滑液包炎、変形性関節炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、化膿性関節炎、線維筋痛症、全身性エリテマトーデスおよび静脈炎からなる群から選択される兆候を治療または予防的に防止することであって、好ましくは、その量は、治療または予防に有効な量であり、
歯垢を除去することであって、好ましくは、他のトリプシンとともにまたは単独で、トリプシンZTアイソフォームの量は、歯垢の除去に有効な量で投与され、
血餅を溶かすことであって、好ましくは、トリプシンZTアイソフォームの量は、好ましくは、血餅を溶かすのに有効な量である。
タラ由来のプロテアーゼの混合物の調製
凍結したタイセイヨウダラ内蔵約100kgを解凍し、抽出タンク内の4倍量の冷たい水に加え、水酸化ナトリウム溶液でpHを約6に調整した。混合物を0〜5℃で約10時間攪拌した。短時間の粗沈降(約30分)後、残っている不溶性の内臓から水溶性の抽出物をポンプで流出させ、沈降槽に回収した。水溶性の抽出物を、冷却された沈降槽内で、室温で約40〜80時間沈殿させた。上清を上清タンクからポンプを用いて保持タンクにデカントした。限外ろ過により上清を10〜20倍に濃縮し、約2.5mS/cm以下の伝導度でイオン強度の許容レベルにダイアフィルトレーションした。限外ろ過およびダイアフィルトレーションされたタンパク質濃縮物約10〜15リットルが得られた。
濃縮されたタラの内臓抽出物由来のタラのトリプシンZTアイソフォームの精製
実施例1で得られた約12リットルの限外ろ過およびダイアフィルトレーションされた濃縮物を、約1リットルのパックドクロマトグラフカラムの連続した連続シリーズに適用し、第1のものはカルボキシメチル(CM)高速流動陽イオン交換樹脂(GEヘルスケア)を含有し、第2のものはセファロース樹脂(GEヘルスケア)に結合したp−アミノベンザミジンアフィニティリガンドを含む。CMおよびp−アミノベンザミジンカラムは、2.5mMの塩化カルシウム(緩衝液A)を含む25mMトリス緩衝液(pH7.8)の約10カラムボリュームで前平衡化された。濃縮物を約100ml/分の流速でCMおよびp−アミノベンザミジンカラムにポンピングした。カラムへの濃縮溶液の適用が完了したとき、残留物質を約8リットルの緩衝液Aで連続カラムシステムから洗い流した。この洗浄が完了した後、p−アミノベンザミジンアフィニティカラムをCMカラムから切り離し、0.5MNaClおよび2.5mM塩化カルシウムを含有する25mMトリス緩衝液pH7.5の高塩溶液の約5カラムボリュームで洗浄した。タラのトリプシンをアフィニティリガンドから取り出し、10mM塩化カルシウムおよび30%グリセロールを含む、pH3.2、25mM酢酸の酸溶液でカラムから溶出させた。
トリプシンZTアイソフォームでの複合的な基質プロファイリング
複合的な基質プロファイリングが酵素(プロテイナーゼ)の基質特異性を分析するために使用された(O'Donoghue, Eroy-Reveles et al., 2012, Nat Methods 9: 1095-1100)。プロテイナーゼは、基質特異性における相違を示すためにペプチド配列内で異なるアミノ酸残基で基質を切断することができる。トリプシンはアルギニンまたはリジン残基に対するC末端を切断することにおけるそれらの優先性により特定される。
タラのトリプシン・イソ酵素は、ベンスアミジン精製されたタラのトリプシンをMonoQ HR5/5イオン交換カラムに適用することによって分離された。トリプシンIの単離のために、カラムを20mMトリス、5mMエタノールアミン、10mM CaCl2、pH9.1を用いて平衡化し、80カラムボリュームでリニアな0〜200mM NaCl勾配、10カラムボリュームでリニアな200〜1000mM NaCl勾配、1mL/分の流速で、酵素を溶出した。サンプルpHは、適用前に1M NaOHを用いてpH9.1に調整した。
O'Donoghue, Eroy-Reveles et al.に記載されているように、精製されたトリプシンZTアイソフォームまたはトリプシンIを、広範囲な生理化学的な多様性を有するペプチドライブラリー(124個のペプチド、14−merの配列、合計1612個のペプチド結合)とともにインキュベートした(5、15および60分)(O'Donoghue, Eroy-Reveles et al., 2012, Nat Methods 9: 1095-1100)。インキュベーション後に、切断部位は、質量分析により特定された(O'Donoghue, Eroy-Reveles et al., 2012, Nat Methods 9: 1095-1100)。
複合的な基質プロファイル分析は予想外に、国際公開第2000078332号パンフレット(図4および表4)に開示されている、トリプシンIと比較して、トリプシンZTアイソフォームに特有の多くの切断部位があることを示した。また、トリプシンIと比較したトリプシンZTアイソフォームによる優先切断を示した切断部位が特定された(表4)。複合的基質プロファイル分析の結果に基づいて、基質中のP4−P4’位置における標準得点(Zスコア)に基づく数値を含む表を作成し、トリプシンZTの基質特異性をトリプシンIと比較した(表3)。正の数(Zスコア)は、トリプシンZTアイソフォームをトリプシンIと比較して特定のP位にあるアミノ酸残基の優先性を反映する。予期されないことに、トリプシンZTアイソフォームの複合的な基質プロファイリングは、基質中のアルギニンまたはリジンを取り囲むアミノ酸が、トリプシンIと比較してその切断に対して異なる効果を有することを明らかにした。
濃縮されたタラの内臓抽出物由来のタラのトリプシンZTアイソフォームの精製
実施例1で得られた約12リットルの限外ろ過およびダイアフィルトレーション濃縮物を、CM高速フロー陽イオン交換樹脂(GEヘルスケア)を含有する第1のもの、セファロース樹脂(GEヘルスケア)に結合するp-アミノベンザミジンアフィニティーリガンドを含有する第2のもの、DEAE高速フロー陰イオン交換樹脂(GEヘルスケア)を含有する第3のものという、約1リットルのパックドクロマトグラフィーカラムの連続接続シリーズに適用した。CMおよびp−アミノベンザミジンカラムは、2.5mM塩化カルシウムを含む25mMトリス緩衝液pH7.8の約10カラムボリュームで前平衡化した。濃縮物を約100ml/分の流速でCMおよびp−アミノベンザミジンカラムにポンピングした。カラムへの濃縮溶液の適用が完了したとき、残留物質を約8リットルの緩衝液Aで連続カラムシステムから洗い流した。この洗浄が完了した後、p−アミノベンザミジンアフィニティカラムをCMカラムから切り離し、0.5M NaClおよび2.5mM塩化カルシウムを含有する25mMトリス緩衝液pH7.5の高塩溶液の約5カラムボリュームで洗浄した。タラのトリプシンをアフィニティリガンドから取り出し、10mM塩化カルシウムおよび30%グリセロールを含む、pH3.2、25mM酢酸の酸溶液でカラムから溶出させた。タラのトリプシン画分を、30%グリセロールを含む、pH8.5の200mMトリス中和緩衝液に収集した。DEAE陰イオン交換カラムを、2.5mM塩化カルシウムを含む25mMトリス緩衝液(pH7.8)の約10カラムボリュームで前平衡化した。タラのトリプシン画分をDEAE陰イオン交換樹脂に適用し、約5カラムの平衡緩衝液で洗浄した。次いで、最大0.9M NaCl勾配塩溶液を使用して、カラムからトリプシンZTアイソフォームを放出させた。精製されたタラのトリプシンZTアイソフォーム調製物は、SDS PAGE電気泳動およびFPLC Mono Qクロロマトグラフィーにより均一であった。精製された調製物を0.22ミクロンのフィルターでろ過滅菌し、約−20℃で凍結保存した。
タラのトリプシンZTアイソフォームを含むタラのトリプシンのハイドロゲル調製物の調製
実施例2の精製されたタラのトリプシンZTアイソフォーム含有調製物を、0.8%w/vカルボマー940および40%グリセロールを含む水性ゲルを含む親水コロイドゲルと混合した。タラのトリプシン調製物は、ハイドロゲルと1:1の比で混合し、最終的なゲル−酵素混合物(酵素ハイドロゲル軟膏)のmg当たり4酵素単位(U/mg)の最終濃度を得た。酵素単位は、前述の基質としてのCbz-GPR-pNAを用いて決定される。従って、得られた酵素ハイドロゲル軟膏は、約0.01mg/ml、または1U/mlのタラのトリプシン酵素、0.4%のカルボマー940、20%のグリセロールおよび0.04%のパラオキシ安息香酸を含有した。
ライノウイルスについてのモデルとしてのエンテロウイルスに対するトリプシンZTアイソフォームの抗ウイルス活性
ピコルナウイルスは、脂質エンベロープを欠く小さな一本鎖ポジティブセンスRNAウイルスである。エンテロウイルスとライノウイルスはピコルナウイルス科の2属である。エンテロウイルスは、最初に口腔咽頭で複製し、胃の酸性環境で生存する。小腸は、エンテロウイルスの主要侵入部位である。ライノウイルスは鼻の通路では複製するが、胃の酸性環境では破壊される。ライノウイルスとエンテロウイルスは、同一の形態を有するが、臨床的、生物物理学的、および疫学的研究に基づいて区別することができる。ライノウイルスは細胞培養で扱うには問題がある(Racaniello, 2007, Fields virology, 5th ed: 795-838)。したがって、エンテロイルスは、トリプシンZTアイソフォームの抗ウイルス活性を分析するために、ライノウイルスのモデルとして使用された。
エンテロウイルスストックソリューション
エンテロウイルス(コクサッキーウイルスB2)は、アイスランド大学病院のウイルス科の患者から単離され、MA−104細胞(アフリカミドリザル腎臓細胞)またはベロ細胞(アフリカミドリザル腎臓細胞)で増殖した。コクサッキーウイルスB2は、Reed-Muenchにより滴定された(TCID50 = 8,23)(REED and MUENCH, 1938, American Journal of Epidemiology 27: 493-497)。
タラのトリプシン・イソ酵素は、ベンスアミジン精製されたタラのトリプシンをMonoQ HR 5/5イオン交換カラムに適用することによって分離された。トリプシンZTアイソフォームの単離では、カラムを25mM Tris、25mM CaCl2、pH7.5で平衡化し、5カラムボリュームでリニアな0〜400mM NaCl、20カラムボリュームでリニアな400〜1000mM NaClの勾配で、1mL/分の流速で、酵素を溶出させた。
MA−104細胞を96ウェルマイクロタイタープレート中で95%コンフルエンシーまで増殖させた。エンテロウイルスをストック溶液から最小必須培地(MEM)を用いて10−6に希釈し、1.5mLの希釈溶液を2つの異なるバイアルに入れた。バイアルを1.5mLのトリプシンZTアイソフォームおよび1.5mLのMEMで陽性対照として処理した。ネガティブ対照は、ウイルスなしのMEM(3mL)であった。すべてのバイアルを34℃および5%CO2で90分間インキュベートしてから、残留するトリプシンを除去するために100μLのベンズアミジンアガロース溶液を添加し、さらに30分間インキュベートした。この溶液を5500rpmで3分間遠心分離した後、2mLの上清をエッペンドルフバイアルに入れた。200μLの溶液を、マイクロタイタープレートの各ウェル、合計10ウェルに入れた。プレートを30分間インキュベートした。インキュベーション後、培地を捨て、すべてのウェルに1%新生児ウシ血清(NCS)を添加したMEMを加えた。
顕微鏡を用いて感染の存在をモニターした。
トリプシンZTアイソフォームは、ライノウイルスのモデルとして使われたエンテロウイルス(コクサッキーウイルスB2)に対する抗ウィルス剤として非常に有効であった。結果を図5に示す。
Claims (25)
- 配列番号1のアミノ酸配列またはそれと80%以上の配列相同性を有するアミノ酸配列を含む、単離されたタラのトリプシンZTアイソフォーム。
- 配列番号2のアミノ酸配列を含むタラのトリプシンZT−1、配列番号3のアミノ酸配列を含むタラのトリプシンZT−2、配列番号4のアミノ酸配列を含むタラのトリプシンZT−3、および配列番号5のアミノ酸配列を含むタラのトリプシンZT−4、またはそれらと80%以上の配列相同性を有するアミノ酸配列から選択される、請求項1の単離されたタラのトリプシンZTアイソフォーム。
- 適切な賦形剤および担体とともに、請求項1または2の少なくとも1つのタラのトリプシンZTアイソフォームを含む組成物。
- 前記タラのトリプシンZTアイソフォームは、他のタラのトリプシンとの混合状態で存在する、請求項3の組成物。
- 前記タラのトリプシンZTアイソフォームは、前記組成物におけるタラのトリプシンの全量の少なくとも5%(w/w)を含む、請求項4の組成物。
- 外用水薬、ハイドロゲル、マウススプレー、または点鼻薬として、局所的に投与される、請求項3から5のいずれか一つの組成物。
- グリセロールのような多価アルコールをさらに含む、請求項3から6のいずれかの組成物。
- 療法に使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- ウイルス、細菌、真菌、寄生生物および原虫からなる群から選択される病原菌により引き起こされる疾患の治療または予防において使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- ウイルス、バクテリアおよび真菌のような病原菌により引き起こされる上気道における疾患の治療または予防において使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- 疼痛、急性炎症、慢性炎症、関節炎、炎症を起こした関節、滑液包炎、変形性関節炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、化膿性関節炎、線維筋痛症、全身性エリテマトーデス、静脈炎、腱炎、発疹、乾癬、ざ瘡、湿疹、顔の脂漏湿疹、手、顔、もしくは首の湿疹、包皮感染症、水虫、フィステル感染症、感染した局所の潰瘍、新生児におけるへその感染症、しわ、瘢痕、ケロイド、おでき、いぼおよびアレルギー性かゆみ、痔核、真菌感染症、並びに自己免疫疾患を含む免疫不全症の治療または予防において使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- 創傷感染症および火傷による傷の治療において使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- 健康な皮膚からの垢の除去または皮膚のピーリングにおいて使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- 化粧品に使用するための、請求項3から7のいずれか一つの組成物。
- 前記組成物は、さらに追加の美容上活性のある配合物を含む、化粧品に使用するための、請求項14の組成物。
- 疾患を治療する方法であって、それを必要とする患者に、治療に有効な量の請求項3から7のいずれか一つの組成物を投与することを含む、疾患を治療する方法。
- 前記疾患は、ウイルス、細菌、真菌、寄生生物および原虫からなる群から選択される病原菌により引き起こされる、請求項16の方法。
- 前記疾患は、ウイルスおよびバクテリアのような病原菌により引き起こされる、上気道における疾患である、請求項16の方法。
- 前記疾患は、疼痛、急性炎症、慢性炎症、関節炎、炎症を起こした関節、滑液包炎、変形性関節炎、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、化膿性関節炎、線維筋痛症、全身性エリテマトーデス、静脈炎、腱炎、発疹、乾癬、ざ瘡、湿疹、顔の脂漏湿疹、手、顔、もしくは首の湿疹、包皮感染症、水虫、フィステル感染症、感染した局所の潰瘍、新生児におけるへその感染症、しわ、瘢痕、ケロイド、おでき、いぼおよびアレルギー性かゆみ、痔核、真菌感染症、並びに自己免疫疾患を含む免疫不全症から選択される、請求項16の方法。
- 前記疾患は、創傷感染症または火傷による傷である、請求項16の方法。
- (i)タラの内蔵の水性抽出物を調製することと、
(ii)p−アミノベンザミジンアフィニティーリガンドを用いるアフィニティークロマトグラフィーステップを含む、少なくとも1つのクロマトグラフィーステップに前記水性抽出物を供すること、および、
(iii)前記p−アミノベンザミジンアフィニティーリガンドに結合するタラのトリプシンZTアイソフォームを放出および溶出することとを含む、配列番号2から配列番号5のいずれか一つのアミノ酸配列を含む、タラのトリプシンZTアイソフォームを調製する方法。 - 前記アフィニティークロマトグラフィーステップ(ii)の後に、アニオン交換樹脂を用いて少なくとも1つのステップを行うことをさらに含む、請求項21の方法。
- 前記アフィニティークロマトグラフィーステップ(ii)の前に、カチオン交換樹脂用いて少なくとも1つのステップを行うことをさらに含む、請求項21の方法。
- 前記放出および溶出されたタラのトリプシンZTアイソフォームは、ポアサイズが0.45μm以下のフィルターを用いて無菌的にろ過される、請求項21から23のいずれか一つの方法。
- 前記タラのトリプシンZTアイソフォームは、配列番号2のアミノ酸配列を含むトリプシンZT−1、配列番号3のアミノ酸配列を含むトリプシンZT−2、配列番号4のアミノ酸配列を含むトリプシンZT−3、および配列番号5のアミノ酸配列を含むトリプシンZT−4、またはこれらの混合物から選択される、請求項21から24のいずれか一つの方法。
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003502071A (ja) * | 1999-06-18 | 2003-01-21 | ブジャーナソン・ヨーン・ブラーギ | 魚類セリンプロティナーゼ及びそれらの薬品及び化粧品への利用 |
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JP2003502071A (ja) * | 1999-06-18 | 2003-01-21 | ブジャーナソン・ヨーン・ブラーギ | 魚類セリンプロティナーゼ及びそれらの薬品及び化粧品への利用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
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SPILLIAERT R; A GUDMUNDSDOTTIR: "ATLANTIC COD TRYPSIN Y-MEMBER OF A NOVEL TRYPSIN GROUP", MARINE BIOTECHNOLOGY, vol. VOL:1, NR:6, JPN5018004177, 1999, US, pages 598 - 607, ISSN: 0004331974 * |
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