JP2018509382A - 伴侶動物の下痢の治療方法 - Google Patents

Abstract

腸溶性または非腸溶性の形態のいずれかの、治療上有効な量のＣｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーを用いた、イヌ及びネコなどの若齢及び成体の非ヒト伴侶動物の下痢、特に分泌性下痢、水様性下痢及び化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の治療方法、及び該治療のための組成物が提供される。【選択図】図２

Description

本発明は、イヌ、ネコ及び他のペット動物などの伴侶動物の、種々の疾病、病理または治療に起因する水様性下痢などの様々な形態の下痢の治療に関する。この治療方法は、Ｃｒｏｔｏｎ属もしくはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属植物から単離されたプロアントシアニジン高分子組成物の、またはそれに由来するラテックス、抽出物、もしくは栄養補助食品を含む、腸溶性あるいは非腸溶性の製剤及び形態の使用を含む。より詳細には、上記組成物は、がん治療または療法によって起こる、すなわちこれらに続いて起こる分泌性下痢すなわち水様性下痢（化学療法誘発性下痢すなわちＣＩＤ）の治療に有効であり、それによって、伴侶動物、特にイヌの下痢の重篤度及び継続時間を低減するのみならず、該伴侶動物の治療に対する耐性及び治療からの回復を増進させる。

下痢は、イヌ及びネコなどの伴侶動物の獣医科診療所への来院の最も一般的な理由の一つであり、獣医科の救急処置室への来院の２番目に一般的な理由であるが、それにもかかわらず、イヌ科及びネコ科の伴侶動物の下痢の治療用のＦＤＡ認可の抗下痢または抗分泌製品はない。米国では毎年、獣医師が約６００万例のイヌの急性及び慢性の水様性下痢を取り扱い、その約３分の２が急性の水様性下痢であると推定されている。

また、２０１２年現在で、米国には約７，４００万頭の猫がいた。推定では、獣医師は年間約２９０万例のネコの急性及び慢性の水様性下痢を診ており、その約３分の２が急性の水様性下痢である。獣医師は一般に、ネコの水様性下痢を、犬に用いられるものと同様の治療法、すなわち抗生物質、腸内有益菌、食餌制限及びイモジウム及び他の腸運動抑制剤などのヒト用に認可され製剤化された製品、ならびにＫａｏｐｅｃｔａｔｅ及びＰｅｐｔｏ−Ｂｉｓｍｏｌなどの水を吸収する結合剤を用いて治療する。しかしながら、水様性下痢に伴う水分喪失に対処するものはないために、現在の治療法の選択肢はかなり限定されている。

分泌性下痢は水様性下痢とも呼ばれ、若齢及び成体の両方の非ヒト動物における病気及び死亡の主要な原因であり、腸管を通した水分及び電解質の両方の喪失を特徴とし、重篤な、しばしば生死にかかわる脱水症状を引き起こす。分泌性下痢は、様々な細菌性、ウイルス性及び原虫性の病原体によって起こり、また、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、環境及びストレス状況、消化管のがん及び腫瘍、ならびに罹患した動物に用いられる化学療法剤による治療などの他の非感染性の病因によっても起こる。全ての種類の下痢性疾患には分泌因子が存在し得る。

イヌなどの伴侶動物の水様性下痢に伴う水分喪失に直接対処する、現在ＦＤＡに認可されている抗分泌剤はない。現在の水様性下痢の治療方法としては、経口補水液、すなわちＯＲＳ、腸運動抑制剤、吸収剤及び抗生物質が挙げられる。しかし、これらの方法のそれぞれには限界があることがわかっている。ＯＲＳは下痢に伴う水分喪失を補充する一方で、しばしば、当該の動物の下痢の継続期間及び重篤度を拡大することがある。腸運動抑制剤は、一般的には、便秘の機序によって、すなわち正常な腸の収縮すなわち蠕動活動を一時的に麻痺させることによって効能を発揮し、慢性使用は禁忌であり、したがって、特定の慢性の下痢性疾病には不適当である。腸運動抑制剤はまた、痛み、けいれん、及び反跳性下痢を引き起こす場合もある。吸収剤は単に腸内の毒素を吸収しようとするだけであり、しばしば更なる痛み及びけいれんを引き起こし、水分喪失には直接対処しない。抗生物質は毒素を産生する感染因子を治療しようとするが、水分喪失には直接対処せず、腸内細菌叢を変化させる危険性を伴い、該変化自体が下痢を引き起こす場合がある。抗生物質の広範な使用はまた、抗生物質耐性に関連する問題の結果として、ＦＤＡによる一層の精査の対象にもなっている。

米国では、毎年２３万頭を超える、がんの化学療法を受けるイヌがおり、２５％以上が化学療法誘発性下痢すなわちＣＩＤに罹患していると推定される。重篤な下痢は、最も一般的に投与される化学療法薬の頻繁に起こる副作用である。イヌのＣＩＤは、治療を行わずに放置すると、ヒトに起こるものと同様の影響、例えば、水分及び電解質の喪失をもたらす可能性があり、この水分及び電解質の喪失は、脱水症状、電解質平衡異常及び腎不全；消化管の通過及び消化の変化による栄養失調；ならびに感染性合併症の危険性の増加を引き起こす可能性がある。ＣＩＤが重篤となったために化学療法剤の吸収、頻度及び／または投薬量を低減することが必要となる場合には、本質であるがん治療の有効性も危うくなる可能性がある。イヌの飼い主の視点からは、生活環境、ならびに日常的に犬及びその周囲を清浄にし、且つ面倒を見るために必要な費用、時間及び注意に影響を及ぼす可能性のある、イヌのＣＩＤのかなりの現実的な影響がある。獣医師は時に、イヌのＣＩＤを治療しようとして人間が使用する薬物を処方することがあるが、有効性または投薬に関して支援する臨床情報はない。また、潜在的に飲み難いヒト用の製剤をイヌに投与することは往々にして困難であり、イヌが実際に摂取した量に関わる更なる不確実性に繋がる可能性がある。

伴侶動物が罹患するいくつかの種類の下痢に利用可能であり、一般的に用いられる治療は、一般に、水分及び電解質の喪失を相殺するまたは止めるための、生命の維持に必要な水分補充及び電解質補充を含む。他の種類の治療としては、経口抗生物質及び非ステロイド性抗炎症薬の投与が挙げられる。下痢の原因（複数可）、時期、重篤度及び経過及び／またはそれに関連する疾患または疾病によって、様々な既知の治療法が有効である場合と有効でない場合とがあり、動物は十分にまたは適時に応答する場合としない場合とがあり、寿命を全うしないで死亡に至るケースも多い。

下痢及びそれに関連する疾病の、罹患した伴侶動物、該動物を扱う人及び介護者に及ぼす経済的ならびに人道的な影響は非常に大きいため、現状に代わる、安全な、且つ医学的に有効であるのみならず、費用効果の高い、特にイヌ及びネコなどの伴侶動物の下痢及びその関連する症状の治療法及び療法が強く求められている。本発明はかかるニーズに有利に対処する。

本発明は、非ヒト伴侶動物の、水様性下痢、一般的な急性水様性下痢、または化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）などの様々な形態の下痢の治療方法を提供する。実施形態において、上記伴侶動物はイヌ及びネコである。特定の実施形態において、本方法は、イヌの複数の形態の下痢、例えば水様性下痢、一般的な急性水様性下痢またはＣＩＤの治療に関する。本方法は、本方法を必要とする動物に、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の水溶性プロアントシアニジンを含む薬学的に許容される組成物を投与することを含み、該組成物は、上記動物の下痢を治療するために有効な量で製剤されている。ある態様において、本方法は、罹患した動物の下痢に伴う症状を効果的に治療し、該症状としては、脱水症状、体重減少及び電解質喪失が挙げられるが、これらに限定されない。これらの症状のいくつかは迅速に現れ、伴侶動物にとって長期的な健康への影響を有する場合があり、死に至ることさえある。ある実施形態において、上記下痢は突発性下痢である。ある実施形態において、上記下痢は急性下痢である。

ある態様において、本発明の方法は、該方法を必要とする伴侶動物の一般的な急性水様性下痢、ならびに化学療法剤による治療を受ける動物のかかる治療に起因する下痢を治療するために有用である。イヌは本明細書に記載の方法に特に適するが、ネコ、小型のげっ歯動物（頬袋を有するげっ歯動物（ｐｏｃｋｅｔ ｒｏｄｅｎｔｓ））などの他の伴侶動物、すなわちペットの様々な形態の下痢、例えば水様性下痢の治療へのかかる方法の使用が特に制限されることは意図しない。本方法は、その種々の態様において、伴侶動物、例えばイヌ及びネコ、ならびに下痢症に罹患する危険性のある動物の様々な形態の下痢を治療及び／または予防するために有用である。

ある態様において、本発明の方法は、種々の種類のがんの治療または療法を受けている伴侶動物、特にイヌの化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の治療に有用である。イヌのがんは、特に高齢のイヌにおいて、平均的にかなり一般的である。例えば、１０歳を超えるイヌの５０％が多くの場合、ある時期にがんを発症する。イヌの一般的ながんとしては、限定はされないが、悪性リンパ腫、例えばリンパ節中の悪性リンパ腫；肥満細胞腫などの皮膚がん及び腫瘍；乳腺腫瘍；軟組織肉腫；黒色腫、ならびに骨がん、例えば骨肉腫及び骨癌が挙げられる。より適切に伴侶動物及びペットの世話をすることにより、動物の寿命が延び、がんをより容易に見つけて治療することができる。本発明の組成物及び方法は、イヌなどの伴侶動物のがんの療法及び治療、例えば、がんの種類に応じた化学療法または放射線治療に伴う下痢の治療を提供する。

本発明の方法及び抗下痢製品は、概括的には腸管腔内のイオン及び水の流れを正常化することによって作用し、該流れの調節不全は水様性下痢の発現に共通する最後の段階である。結果として、かかる方法及び製品は、原因の如何にかかわらず、水様性下痢への対処に有効となり得る。また、ＣＦＴＲ及びＣａＣＣとして知られているチャネル（本明細書に記載の消化管用組成物及び製品の作用部位）を含む、イオン及び水の流れを調節するチャネルは、哺乳動物に全般的に存在する。したがって、本発明の組成物及び製品は、一般的な温血動物の、非ヒトペットなどの伴侶動物の水様性下痢の、衰弱性の及び破壊的な悪影響の防止に有効であることが期待される。

本発明の方法の実施形態において、本組成物、製剤、または製品は、腸溶性製剤すなわち腸溶性被覆製剤である、薬学的に許容されるＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジン組成物である。他の実施形態において、上記薬学的に許容されるＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジン組成物は非腸溶性製剤である。本方法の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、ＳＢ ３００、ＳＰ ３０３、またはクロフェレマーである。ある実施形態において、上記非ヒト動物は若齢または子供の伴侶動物である。ある実施形態において、上記非ヒト動物は成体の伴侶動物である。本発明の方法は、伴侶動物の種に関して特に限定されず、例えば、本明細書に記載のイヌ科、ネコ科及びげっ歯類の種を含むことができる。特定の実施形態において、上記伴侶動物は、イヌ、子犬、ネコ、または子猫である。本明細書中では、用語「組成物」と「製剤」とは同義で用いることができることが理解されよう。

上記方法の他の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーまたは上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含む組成物は、上記動物に、少なくとも１ｍｇ〜５００ｍｇの量で、または５ｍｇ〜２５０ｍｇの量で、または１０ｍｇ〜２００ｍｇの量で投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー、または上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含む組成物は、上記動物に、２０ｍｇ〜１００ｍｇの治療用量で投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーまたは上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含む組成物は、上記動物に、２０ｍｇ〜５０ｍｇ、例えば４０ｍｇの治療用量で投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーまたは上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含む組成物は、上記動物に、４０ｍｇの治療用量で動物に投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーまたは上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含む組成物は、上記動物に、６０ｍｇ〜１００ｍｇ、例えば８０ｍｇの治療用量で投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーまたは上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含む組成物は、上記動物に、８０ｍｇの治療用量で投与される。本方法の更に他の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、経口用電解液、ミルク、ミルク代替物、生理食塩水、または水から選択される液体で再構成された粉末として投与される。本方法の他の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、丸剤、錠剤またはカプセル剤などの巨丸剤として投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は経口投与される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、必要とする伴侶動物、特にイヌ及びネコに、経口投与される咀嚼可能な固体形態、例えば丸剤、錠剤、カプセル剤または他の固体形態である。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、必要とする伴侶動物、特にイヌ及びネコに経口投与される、本明細書において軟質の咀嚼可能な形態とも呼ばれる、軟質の咀嚼可能な製剤で提供される。上記咀嚼可能な固体形態または軟質の咀嚼可能な形態は、一般的には、例えば、当該形態を投与する動物の嗜好に適した、牛肉風味、鶏肉風味、または魚風味などに風味付けされる。上記咀嚼可能なまたは軟質の咀嚼可能な固体剤形は、上記伴侶動物への経口投与に好適かつ適切な形状、大きさ、及び／または外形または立体構造に成型することができる。また、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、動物の食物または飲料中に入れて投与してもよい。

本方法の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、イヌなどの治療を受ける動物に特に適した種々の形態であってよい。例えば、上記組成物は、ゲル、ペースト、またはゲルペーストの形態であってよく、該形態は、例えば当該動物の口蓋上に局所塗布することによって該動物に投与してもよい。いくつかの場合において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー含有組成物は、薬学的に許容される成分を含み、及び／または動物が咀嚼し、むしゃむしゃ食べ、またはかじることができる粘稠性または質感を有する製品を与える方法で製造される。特定の場合において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー含有組成物は、薬学的に許容される成分を含み、及び／または咀嚼可能な粘稠性または質感を有する製品、例えば軟質または半軟質の咀嚼可能な製剤を与える方法で製造または製剤化される。いくつかの場合において、上記組成物は、無針注射器などの注射器であってよい送達器具に収納されていてもよい。本方法のいくつかの実施形態において、様々な形態の組成物が、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を含有する高分子微粒子またはナノ粒子を含む。ある実施形態において、上記高分子微粒子またはナノ粒子はｐＨ感受性である。

特定の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、本明細書においてＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製剤または同製品とも呼ばれ、イヌの、ＣＩＤなどの下痢の治療のために経口投与される、咀嚼可能な、風味付けされた製剤である。特定の実施形態において、上記咀嚼可能な製剤は、限定はされないが、錠剤、丸剤、またはカプセル剤などの固体形態である。特定の実施形態において、上記咀嚼可能な製剤は軟質または半軟質の固体形態であり、動物が容易に咀嚼し且つ嚥下することができる。特定の実施形態において、上記咀嚼可能な固体形態は、該形態を経口投与する動物の嗜好により適するように、風味付け物質または風味付けされた物質を含有する。ある実施形態において、上記咀嚼可能な固体形態は、牛肉風味か、または鶏肉、魚、または野菜風味などの、治療を受ける特定の動物の味覚に対して風味付けされる。別の実施形態において、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製剤、例えばＳＰ ３０３またはＳＢ ３００を含む上記咀嚼可能な固体形態は、１日当たり１回または２回、０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの投与量で、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇの量で、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇの量で経口投与される。他のより詳細な用量範囲としては、０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、または０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．３ｍｇ／ｋｇ、または０．２ｍｇ／ｋｇ〜０．３ｍｇ／ｋｇ、または０．４ｍｇ／ｋｇ〜１．５ｍｇ／ｋｇ、または０．８ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇ〜４もしくは５ｍｇ／ｋｇであってよい。他の投薬量としては、当該伴侶動物の重量すなわち体重に依存して、約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇなどであってよい。特定の実施形態において、上記咀嚼可能な固体形態は、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の、牛肉風味であり軟質の咀嚼可能な形態であり、該形態は、イヌ科の動物などの動物に対して、２ｍｇ／ｋｇまたは４ｍｇ／ｋｇの投薬量で１日２回経口投与される。別の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は３日間投与される。別の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物はＳＰ ３０３である。

例として、イヌの体重は一般に２ｋｇ〜８０ｋｇであってよい。イヌの場合、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーまたはポリマー組成物、例えばＳＰ ３０３もしくはＳＢ ３００の用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇ、より詳細には２ｍｇ／ｋｇの範囲であってよく、当該動物の体重に応じて適宜調整してもよい。異なる重量及び体重の他の伴侶動物については、用量は体重に応じて調整することができる。

ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、腸内における活性医薬成分（ＡＰＩ）の標的化放出のために腸溶性被覆される。ある実施形態において、上記有効成分すなわちＡＰＩはクロフェレマー、例えばＳＰ ３０３である。ある実施形態において、上記有効成分は、１ｍｇ〜１００ｍｇの投薬量、または１０ｍｇ〜５０ｍｇ、または２０ｍｇ〜５０ｍｇの投薬量、あるいは、特に大型犬（２０ｋｇ超）の場合には、６０ｍｇ〜１００ｍｇの投薬量で存在する。特定の実施形態において、上記投薬量は４０ｍｇの有効成分であり、別の実施形態において、特に大型犬の場合には、上記投薬量は８０ｍｇの有効成分である。ある実施形態において、イヌなどの約２０ｋｇの伴侶動物に対して、上記用量は、１０ｍＬ中の４ｍｇ／ｍＬの量の、腸溶性被覆Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー微粒子（例えば、４０ｍｇの活性なＳＰ ３０３）を含有する再構成した懸濁液である。例えば、実施例１、２、３及び５を参照されたい。ある実施形態において、上記腸溶性被覆製品は、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物またはＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉの植物抽出物を含有する微粒子またはナノ粒子を含む。ある実施形態において、上記腸溶性被覆製品は、例えば、１日当たり２ｍｇ／ｍｌ（または投与当たり、１日当たり２回）の量での３日間の投与用に、有効成分として、ＳＰ ３０３である上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を含有する微粒子またはナノ粒子を含む。

ある実施形態において、本方法は、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーを、治療を受ける伴侶動物の下痢を制御または治療するために有効な量で与えることによって、罹患した伴侶動物の腸の健康を改善し、下痢を制御する。ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマーは、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の製剤、組成物、または抽出物である。ある実施形態において、上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーは、本明細書に記載のクロフェレマーまたはＳＢ ３００組成物などの、プロアントシアニジンポリマーまたはオリゴマーを含有するより高度に精製された組成物である。ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマーは、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の製剤、組成物、または植物抽出物である。ある実施形態において、上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の製剤、組成物、または植物抽出物は、ペーストまたはゲルの形態である。特定の実施形態において、上記組成物または製剤は、腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を含むビーズ（ナノ粒子または微粒子）を含み、必要とする動物に経口投与される。特定の実施形態において、上記組成物または製剤は咀嚼可能な製品であり、腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を含むビーズ（ナノ粒子または微粒子）を含む。特定の実施形態において、上記腸溶性被覆製品は、イヌまたは伴侶動物に１日１回または１日２回経口投与される。特定の実施形態において、上記腸溶性被覆製品は、イヌまたは伴侶動物に毎日２回、１日の間または複数の日、例えば２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０日の間、あるいは２週間経口投与される。いくつかの実施形態において、上記製品は、連続した少なくとも２日または３日日などの、複数の連続した日の間経口投与される。特定の実施形態において、クロフェレマー（例えば、ＳＰ ３０３）などのＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の腸溶性被覆微小顆粒が、下痢に罹患したイヌなどの伴侶動物に、１日当たり２ｍｇ／ｋｇの用量でもしくは１日当たり２回、または１日当たり４ｍｇ／ｋｇもしくは１日当たり２回で経口投与される。ある実施形態において、上記用量が３日間投与される。

ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、製剤または製品は、本明細書に記載の、伴侶動物、特にイヌの化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の治療方法において提供される。特定の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、腸溶性被覆され、ナノ粒子または微粒子を含み、咀嚼可能な固体経口剤形である。

実施例３に記載の治験において測定した毎日の糞便スコアの棒グラフを示す。日数をｘ軸に示し、毎日の糞便スコアをｙ軸に示す。グラフ中の日別の各組の棒において、３本の棒の最初の棒（左端の棒）は「腸溶性被覆」治療薬を示し、３本の棒の２番目の棒（中央の棒）は「非腸溶性被覆」治療薬を示し、３本の棒の３番目の棒（右端の棒）はプラセボによる治療を示す。 実施例５に記載の治験に係る、百分率表記のレスポンダー対治療日のグラフを示す。治療Ａは、クロフェレマーＳＰ ３０３製品の投与を受けた治療群を示し、治療Ｂは、該治験中にプラセボの投与を受けた治療群を示す。図２に示すように、ＳＰ ３０３治療群における応答は、全ての日において、プラセボ治療群の応答よりも少なくとも１０％大きかった。本治験に則れば、レスポンダーとは、形をなす便があり、その後毎日、形をなさない便がなかった被験犬であった。

下痢は、糞便の頻度、流動性または量の増加である。下痢は、イヌ及びネコのような伴侶動物に共通の問題であり、継続期間（急性対慢性）、解剖学的位置及び病態生理学的機序によって特徴付けられる。最も一般的な病態生理学的機序の一つは、腸上皮細胞における異常なイオン輸送によって引き起こされる分泌性下痢である。イヌ及びネコの分泌性下痢の最も一般的な原因は、細胞内環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）、環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）、カルシウム及び／またはプロテインキナーゼの変化をもたらす異常なメディエータであり、該メディエータは次に塩化物イオンの分泌の増加を引き起こす。かかるメディエータとしては、限定はされないが、内因性腸ホルモンまたは神経ペプチド、炎症細胞産生物、細菌性エンドトキシン、下剤、脂肪酸、胆汁酸及び様々な種類の薬物が挙げられる。

化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）は、様々な種類のがんの治療または療法を受けている伴侶動物、特にイヌに起こる場合がある。がんの治療に用いられる薬物、薬剤及び化合物は、がんまたは腫瘍の治療を受けているヒトにおける状況と同様に、副作用として下痢を招く場合がある。例示として、下痢は、イヌなどの伴侶動物のリンパ腫；悪性リンパ腫；皮膚がん及び腫瘍、例えば、肥満細胞腫瘍；乳腺腫瘍；軟組織肉腫；黒色腫；並びに骨がん、例えば、骨肉腫及び骨癌などのがんの化学療法または放射線治療に起因する場合がある。イヌなどの伴侶動物の特定の品種、特に遺伝的に同系交配の品種または特定の種の特定の品種は、特定のがんの発生率が通常の発生率よりも高い。したがって、本発明の治療方法及び組成物を必要とするがんは遺伝に基づく場合もあるが、１または複数の環境的または自然発生的な原因による場合もある。本発明の組成物及び方法は、化学療法または放射線治療を受けているイヌなどの伴侶動物に対するがん療法及び治療に伴う下痢の治療を提供する。

本明細書に記載の抗下痢治療方法及び組成物は、特定のがんの種類または原因に関係するＣＩＤに限定されず、様々な種類、形態及び組み合わせの化学療法及びがん治療に起因する下痢の治療または予防に有益であり得る。様々な化学療法薬がイヌなどの伴侶動物の様々な種類のがんの治療に利用可能である。これらの薬物は単独でまたは併用で用いることができ、２４時間以内に下痢、すなわち水様便の便通を招く場合がある。多くの同一の化学療法剤がヒトの患者のがんの治療に用いられ、この場合も下痢を引き起こす可能性がある。がんの治療を受けているイヌ種において下痢の発生を伴う場合がある化学療法薬の例としては、限定はされないが、アクチノマイシンＤ、Ｌ−アスパラギナーゼ、カルボプラチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、シタラビン、ドキソルビシン、ロムスチン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ビンブラスチン、ビンクリスチンが挙げられる。Ｌ−アスパラギナーゼ、カルボプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン及びビンクリスチンが最も一般的に使用される抗がん剤に含まれる。

イヌにおける化学療法剤による治療として、多剤プロトコルが多くの場合に用いられる。イヌにおけるがん治療に用いられているいくつかの薬剤の併用としては、例示として、ビンクリスチン／Ｌ−アスパラギナーゼ／シクロホスファミド／ドキソルビシン／メトトレキサート／プレドニゾロン、ビンクリスチン／／ドキソルビシン、ドキソルビシン／シクロホスファミド／ビンクリスチン／プレドニゾロン、ビンクリスチン／Ｌ−アスパラギナーゼ／シクロホスファミド／ドキソルビシン／プレドニゾロン、ビンクリスチン／シクロホスファミド／ドキソルビシン、ドキソルビシン／シクロホスファミド、シクロホスファミド／ビンクリスチン／プレドニゾロン／Ｌ−アスパラギナーゼ／ドキソルビシン、ドキソルビシン／カルボプラチン（骨肉腫）、プレドニゾロン／Ｌ−アスパラギナーゼ／ビンクリスチン／シクロホスファミド／ドキソルビシン／放射線（化学放射線療法）が挙げられる。

イヌにおいて特異的に使用することが認可されている２種の化学療法薬として、グレード２または３の肥満細胞腫瘍の治療に対して認可された、チロシンキナーゼ阻害剤であるリン酸トセラニブ（ＰＡＬＬＡＤＩＡ）、及び切除不能なイヌ肥満細胞腫瘍の治療に対して認可された、チロシンキナーゼ受容体阻害剤であるマスチニブ（ＫＩＮＡＶＥＴ−ＣＡ１（登録商標）またはＭＡＳＴＩＶＥＴ）が挙げられる。

理論によって限定されることを望むものではないが、イヌ科の動物において、消化（ＧＩ）管における分裂細胞に対する化学療法剤による治療に用いられる細胞傷害性薬物の直接的な作用が、治療の開始後通常１〜５日以内、時には最長で１０日以内に有害作用を引き起こす。一般的なパターンは、１日目に食欲不振を伴い、これに続いて２〜３日目に嘔吐及び／または下痢が起こる。下痢に伴う脱水作用を軽減するために対症療法が必要となる。かかる療法は一般に、静脈内輸液、電解質、制吐剤、腸管保護剤、酸性度調節剤及び／または抗生物質の投与を含む。胃腸毒性が上皮の損傷を招く場合には、腸の粘膜の細菌移行に対する障壁としての有効性が低下することから、敗血症及び好中球減少症の危険性がより高まる。

現在、イヌ及びネコなどの伴侶動物において、原因にかかわらず下痢を効果的に治療する抗分泌特性をもつ製品は市場に存在しない。現在、対症療法の主たる目的としては、水分及び電解質の平衡の回復及び維持、食餌の変更ならびに、妥当である場合には、罹患した動物に対する抗菌剤及び抗蠕虫剤の投与が挙げられる。化学療法薬の投与に付随する有害作用を考慮して、本発明の製剤及び方法は、下痢及び重篤な下痢に伴う電解質及び水分の喪失を低減する、必要であり、有益であり且つ効果的な薬物群を提供する。

本明細書では、本発明の方法による治療を受ける伴侶動物は、一般的に及び主として人の仲間、社会的または情緒的な楽しみ及び／または治療、あるいは防護のために飼われ、一般的に興行、生産、研究、または農業的価値のために飼われるものではない、ペットとしても知られる、飼いならされた非ヒト動物である。別段の注記がない限り、本明細書における用語「動物」の使用は、ヒトにとっての伴侶またはペットと見なされる多数の異なる種の非ヒト、温血哺乳動物を意味する。本発明の方法は、例示としてであって限定されないが、イヌ；ネコ；ウサギ（飼育されたウサギ）；フェレット；マウス、スナネズミ、ハムスター、チンチラ、非実験用ラット及びモルモットなどのげっ歯動物／頬袋を有するげっ歯動物などの伴侶動物の様々な形態の下痢の治療及び／または予防に有用である。一般的な指針としてであって限定されないが、いくつかの種類の伴侶動物の体重は、以下のおおよその範囲に入っていてもよい。すなわち、イヌ（２ｋｇ〜１００ｋｇ）；ネコ（２ｋｇ〜２０ｋｇ）；ウサギ（０．４ｋｇ〜５ｋｇ）；フェレット（０．５ｋｇ〜２ｋｇ）；スナネズミ（４０ｇ〜１３０ｇ）；ハムスター（５０ｇ〜１５０ｇ）；ラット（２００ｇ〜７００ｇ）；及びモルモット（１００ｇ〜１．２ｋｇ）である。好ましい実施形態において、本発明の方法及び製品を用いて下痢の治療を受ける伴侶動物はイヌである。別の好ましい実施形態において、本発明の方法及び製品を用いて下痢の治療を受ける伴侶動物はネコである。

ある実施形態において、イヌの様々な種類の水様性下痢の治療に用いるための、本発明によって提供される製剤及び製品は、原因にかかわらず、イヌの腸管腔内のイオン及び水の流れを正常化することによって、水様性下痢の発現における最後の生理学的段階において効果的に作用する。本発明によれば、水様性下痢に対する最適な治療は、便秘を引き起こすことなく、正常な蠕動運動に影響を及ぼすことなく、または他の薬物の正常な身体吸収もしくは腸の正常な生理学的機能を変化させることなく、水分喪失に直接対処することとなる。本発明の方法を通じて水様性下痢に伴う水分喪失に対処することによって、イヌの生活の質が改善され、それに伴う利益が当該のイヌの飼い主にもたらされる。本明細書に記載の、クロフェレマーまたはＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の植物抽出物、ならびにＳＢ ３００及びＳＰ ３０３組成物を含有するＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が、腸管腔内のイオン及び水の流れを正常化することによって作用する製品を提供し、該流れの調節不全が水様性下痢の発現に共通する最後の段階である。また、本発明の消化管用製品の作用部位である、ＣＦＴＲ及びＣａＣＣチャネルを含む、このイオン及び水の流れを調節するチャネルは広く哺乳動物に存在する。結果として、かかる製品は、原因にかかわらず、水様性下痢への対処に有効であることができ、伴侶動物の水様性下痢の衰弱性の及び破壊的な悪影響の防止に有効となり得る。

非ヒト動物の下痢の不快な及び衰弱性の影響を考慮して、本発明の方法は、罹患した伴侶動物の下痢を治療するための新規な手段を提供する。本発明の方法は、有効量の、Ｃｒｏｔｏｎ種もしくはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ種由来の高分子プロアントシアニジン組成物を用いた、またはこれに由来するラテックス、抽出物、もしくは栄養補助食品植物抽出物を用いた、例えば、イヌ及びネコの、多数の異なる発生源及び原因から生じる下痢の治療を提供する。Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー組成物を用いた、またはこれに由来するラテックス、抽出物、もしくは栄養補助食品植物抽出物を用いた上記有効な下痢の治療は、下痢及び関連する状態に罹患した家畜、伴侶動物に対するかかる治療法が存在しないことを考慮すると、有益である。

クロフェレマー、例えば、以下に説明するＳＰ ３０３は、強力な抗分泌特性及び独特の作用様式を有する１種または複数種の成分を含有する、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉなどのＣｒｏｔｏｎ種の精製された抽出物である。本発明によれば、クロフェレマー及びその形態は、イヌ及びネコ、ならびに他の伴侶動物種などの伴侶動物の下痢の治療に用いられる。より詳細には、高分子プロアントシアニジン組成物、またはクロフェレマーなどの精製された抽出物の作用機序は、嚢胞性線維症膜貫通調節因子タンパク質（ＣＦＴＲ）塩化物イオンチャネル及びカルシウム活性化塩化物イオンチャネル（ＣａＣＣ）の両方の阻害による。上記高分子プロアントシアニジン組成物は、塩化物イオンチャネル分泌及び付随する、下痢において生じる多量の水分喪失を遮断し、そのようにして消化（ＧＩ）管内の塩化物イオン及び水の流れを正常化することによって作用する。

本発明は、イヌなどの、若齢及び成体の非ヒト伴侶動物における、種々の原因による水様性下痢の衰弱性の問題の治療を対象とする方法を提供する。本方法は、該方法を必要とするかかる非ヒト動物の水様性下痢またはＣＩＤの低減及び／または緩和に有効である。特に、本方法は、伴侶動物における、下痢に繋がる任意の数の要因によって引き起こされる下痢、特に分泌性／水様性下痢の治療を対象とする。例として、動物は、成体及び若齢の伴侶動物における、細菌性感染症、ウイルス性感染症、寄生虫性／原生動物性感染症、（Ｇｉａｒｄｉａ）などの感染症、環境条件、膵炎、化学療法に誘発される治療、食あたり、土壌摂取及び健康に害のある汚染物などの、単独または他の感染因子、疾患もしくは環境条件との組み合わせによる、結果としての下痢に罹患する場合がある。本発明は、若齢及び成体のイヌの下痢の治療に非常に適した製剤及び組成物を更に提供する。限定することを望むものではないが、「若齢の」または「子供の」動物とは、一般的に、１才または１年齢未満であり、「新生児の」動物とは、一般的に２週齢以下である。

本発明は、特に、治療上有効な量の、Ｃｒｏｔｏｎ属、好ましくはＣｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ（Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ）から得られるプロアントシアニジンポリマーを含む抗下痢剤を含む、生理学的及び薬学的に許容される製剤ならびに組成物を用いた、イヌなどの成体のまたは若齢の伴侶動物の水様性下痢、急性水様性下痢、またはＣＩＤの治療に関する。上記プロアントシアニジンポリマー組成物はまた、Ｃａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属、特にはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ｉｎｏｐｈｙｌｕｍから得ることもできる。特定の実施形態において、上記薬学的に許容される組成物はＣｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーを含む。特定の実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマーは、ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を含む腸溶性ビーズを含む、腸溶性保護ビーズである。

イヌの化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の治療
特定の実施形態において、本方法及び製品は、イヌの化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の必要な治療を提供する。重篤な下痢は、最も一般的に投与される化学療法薬の頻発する副作用である。イヌのＣＩＤは、治療せずに放置した場合、ヒトにおいて生じるものと同様の影響、例えば、脱水症状を引き起こす場合がある水分及び電解質の喪失、電解質平衡異常及び腎不全；消化管の通過及び消化の変化による栄養障害；ならびに感染性合併症の危険性の増加を招く場合がある。ＣＩＤが重篤となったために化学療法剤の吸収、頻度及び／または投薬量を低減することが必要となる場合には、本質であるがん治療の有効性も脅かされる可能性がある。獣医師は時に、イヌのＣＩＤを治療しようとして人間が使用する薬物を処方することがあるが、有効性または投薬に関して支援する臨床情報はない。また、潜在的に飲み難いヒト用の製剤をイヌに投与することは往々にして困難であり、動物が実際に摂取した量に関わる更なる不確実性に繋がる可能性がある。化学療法薬及び薬物の併用の種類、並びにそれらの投与後の影響の例は、本明細書に上記している。

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法、組成物、及び製剤を、化学療法剤（放射線を含む）によるがんの治療を受ける動物に対して、付随する下痢の有害作用及び症状を低減する、抑止する、和らげる、または排除するために、該有害作用及び症状が現れる及び／または過度に重篤になる前に、予防的に与えてもよい。下痢は化学療法剤による治療後１〜５日以内、または２〜３日以内に起こる場合があるため、これに基づいたならびに獣医師の裁量による、下痢の発症の一般的な時間を念頭において、当該の動物が化学療法剤による治療を受ける前の所定の時間に、本発明の治療方法、組成物及び製剤を必要とする動物に投与してもよい。また、本明細書に記載の治療方法、組成物及び製剤を、化学療法剤による治療と同時に、または当該の動物が上記治療を受ける日に与えてもよい。また、当該の有害作用に対抗する、当該の動物による電解質及び水分の喪失を低減する、及び／または該動物における適正な電解質平衡、水分補給及び水分平衡を回復させるために、下痢の発症後に、例えば、症状が現れた後可及的速やかに、本治療方法、組成物及び製剤を施してもよい。必要とする動物は、本発明の組成物及び製剤を、その投与が１種または複数種の化学療法薬の投与の前、該投与と同時／該投与と同日、または該投与の後のいずれであっても、１日当たり１回または２回以上、例えば、２回、３回、４回、もしくはそれを越える回数摂取してもよいことが理解されよう。

イヌのＣＩＤを治療するために、特にイヌ用に設計されたＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、製剤または製品が本発明によって提供される。かかるイヌの嗜好に適した製品は、風味付けされた、例えば牛肉風味の、咀嚼可能な、好ましくは軟質の咀嚼可能な固体形態である、腸溶性被覆Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を構成し、該組成物はＣＩＤの治療のために必要とするイヌに経口投与される。ある実施形態において、上記製品は必要とする動物に毎日２回投与される。本明細書に記載されるように、上記の固体経口剤形の粘稠性及び／または風味付けは、限定的であることを意図するものではない。上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーの治療用製品は、実証された抗分泌作用機序を有し、該製品は腸内で局所的に作用し、全身的には最小限しか吸収されない。また、該製品は、消化管の運動性を変化させず、正常に機能する腸のイオンチャネル及び電解質または水分の輸送に有意な影響を及ぼさず、プラセボと異なる副作用はない。これらの特徴は、経口的にまたは他の投与経路によって同時投与される化学療法薬の吸収及び／または代謝に影響を及ぼさないことによって更に強化される。理論によって拘束されることを意図するものではないが、本発明の製品は、腸管腔内の過剰なイオン及び水の流れを正常化することによって作用する。腸管腔への過剰なイオン及び水の流れは、水様性下痢の発現に共通する最後の段階である。結果として上記製品は、ＣＩＤに伴う、またはその点に関する原因に拘わらず、水様性下痢の治療に有効であり得る。例として、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物（例えば、クロフェレマーまたはＳＰ ３０３）をＯＲＳと併用すると、２日または３日間の経口投与後に、水様性の便の便通の低減のみならず、下痢、切迫した状態及び脱水症状の継続期間の低減によって実証される、水様性下痢の有意な低減が生じ得る。

イヌのＣＩＤの治療に関係する特定の実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、イヌのＣＩＤなどの下痢の治療用の、牛肉風味の咀嚼可能な固体製品、好ましくは軟質の咀嚼可能な固体製品である。ある実施形態において、上記軟質の咀嚼可能な製品は、２ｍｇ／ｋｇの量で、より詳細には、１日当たり２回、経口投与される。上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含有する製品は、当該のイヌの腸内における標的化放出のための有効成分としての腸溶性被覆微粒子として製剤される。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー有効成分はクロフェレマーまたはＳＰ ３０３である。特定の実施形態において、上記有効成分は４０ｍｇの投薬量で存在する。ある実施形態において、上記腸溶性被覆製品は上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物またはＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉの植物抽出物を含有する微粒子またはナノ粒子を含む。

大まかに言えば、本発明の方法によって動物を「治療すること」とは、予防的、治療的、またはそれらの両方のいずれであっても、所望の生理学的及び／または薬理学的効果を達成するまたは得ることをいう。本明細書中では、「治療すること」または「治療」とは、疾患もしくは疾病の有害な影響、あるいは疾患もしくは疾病の進行または悪化の改善、予防、阻害、逆転、減弱、軽減、抑止、最小化、抑制、低減、低下、減少、安定化、根絶、治癒、または排除を指すことができる。例えば、治療の成功とは、疾患もしくは疾病の１または複数の症状、（但し、必ずしも当該疾患もしくは疾病の全ての症状である必要はない）の軽減、または当該疾患もしくは疾病の症状もしくは進行の減弱を含み得る。当該動物の疾患または疾病の治癒または排除は、本発明の方法の実施の最適な結果である。本発明の方法に係る伴侶動物の治療は治療的または予防的であってよい。

本発明によれば、治療を必要とする動物の治療は、一般的には、有効量または治療上有効な量の、腸溶性または非腸溶性のいずれかの、好ましくはＣｒｏｔｏｎ属、特にはＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーまたはプロアントシアニジンポリマー組成物の使用または投与を含む。有効量とは、当該の動物への投与または送達に際して、該動物対象において所望の反応を誘導する上記組成物等の分量（ｑｕａｎｔｉｔｙ）（量（ａｍｏｕｎｔ））をいう。最適の場合には、有効量は、当該の動物における有害作用もしく細胞毒性の存在なしで、または有害作用もしくは細胞毒性を殆どまたは実質的に伴わずに治療効果を生じる。あるいは、最適の場合には、得られる治療上の利益が有効量に伴ういずれの有害作用をも上回る。

本発明の治療方法は、若齢及び成体の伴侶動物の健康、成長及び生存可能性に悪影響を及ぼす下痢及び／またはその関連する症状の改善、予防、阻害、逆転、減弱、軽減、抑止、最小化、抑制、低減、低下、減少、安定化、根絶、治癒、または排除を対象とする。ある実施形態において、上記下痢は分泌性／水様性下痢である。かかる下痢は、動物における消化管（ＧＩ）疾患の臨床徴候である場合があり、かかる下痢はまた、大腸または小腸に影響を与える障害などの、消化器系の外側の原発性障害を反映する場合がある。本明細書に記載の方法はまた、合併性の疾病または障害であって、それらの病因に関与する種々の機序を介した下痢、例えば、浸透圧性下痢、分泌性下痢、突発性下痢、または炎症性及び感染性下痢を引き起こす上記疾病または障害を有する可能性のある伴侶動物における、細菌性感染症などの感染症に起因する下痢の治療にも好適である。ある実施形態において、上記若齢または成体の伴侶動物は、大腸炎または急性大腸炎などの結腸の内層の炎症に伴う下痢に罹患する場合があり、該炎症は腸の感染症または炎症によって起こる場合がある。

他の形態の下痢の治療
浸透圧性下痢は腸内の水の吸収と関連し、該水の吸収は溶質の十分な吸収に依存する。過剰な量の溶質が腸管腔内に保持されていると、水が吸収されないこととなり、結果として下痢が起こる。浸透圧性下痢は、一般的には、難吸収性基質、例えば炭水化物もしくは２価のイオンの摂取に起因するか、または特定の炭水化物の吸収不能などのいずれかの種類の吸収不全に起因する。腸の管腔内への水の分泌が吸収を超えた場合に分泌性下痢が起こる。正常な条件下では大量の水が小腸管腔内に分泌されるが、この水の大部分は大腸に到達する前に効率的に吸収される。

分泌性下痢は、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅのコレラ毒素及びＥ． ｃｏｌｉの易熱性毒素などの、特定の種類の細菌由来の毒素（腸毒素）に対する動物の暴露に起因し得る。かかる微生物により、該微生物の毒素が、陰窩エンテロサイト内の環状ＡＭＰの細胞内濃度の長期にわたる増加を引き起こすアデニル酸シクラーゼを強力に活性化する結果として、甚だしい下痢が誘発される。この増加は、今度は、陰窩からの水の分泌に寄与する塩化物チャネルの長期にわたる開口をもたらし、それによって制御されない水の分泌が起こる。これらの細菌毒素はまた腸神経系にも影響を与え、水分泌の独立した刺激に繋がり得る。

炎症性及び感染性下痢は、微生物性またはウイルス性病原体に起因する腸の上皮の破壊によって起こり得る。一般的には、消化管の上皮は、消化管障壁を構成する多数の機序により傷害から保護される。しかし、消化管障壁が破られ、下痢を起こす場合がある。上皮の破壊は、管腔内への血清及び血液の漏れだけでなく、多くの場合、吸着性上皮の著しい破壊を伴う。この吸着性上皮の破壊が起こると、水の吸収が非常に非効率的になって下痢を起こす。多くの場合に感染性下痢に関係する発症原因としては、Ｅ． ｃｏｌｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａなどの細菌；ロタウイルス、コロナウイルス、パルボウイルス及びノロウイルスなどのウイルス；コクシジウム種、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｕｍ及びＧｉａｒｄｉａなどの原虫が挙げられる。また、腸内の炎症性疾病に対する免疫系の応答は、下痢の発症に大きく寄与する。活性化された白血球は、分泌を刺激する炎症性メディエータ及びサイトカインを産生及び分泌するように刺激される。分泌因子はこのようにして炎症性下痢に賦課され、炎症性下痢を悪化させる。更に、白血球によって産生される活性酸素種は、腸上皮細胞を損傷または破壊する場合があり、該腸上皮細胞は、一般的に栄養素及び水の吸収に必要な刷子縁酵素及び輸送体が存在しない未成熟細胞によって置き換えられる。したがって、浸透圧性（吸収不良性）下痢の因子が、罹患した伴侶動物に対して更なる病理及び問題を与える。

いくつかの場合において、伴侶動物の下痢は、感染性細菌及び非感染性因子の侵入の組み合わせに起因する。多くの場合、若齢または成体の伴侶動物の下痢の非感染性の原因は、感染因子及び下痢の原因に対して感染しやすい素因となり得る、または感染因子及び下痢の原因に対する動物の感受性に寄与し得る因子であると考えられている。動物の下痢の原因が感染性であるか非感染性であるかにかかわらず、腸からの水分の吸収が変化し、生命を脅かす電解質の平衡異常が起こる可能性がある。罹患した動物は水分を喪失し、急速に脱水症状を起こし、電解質の喪失及びアシドーシスに見舞われる。感染因子は、初期には動物の腸に対する損傷を与える場合があるが、実際の動物の水様性下痢（重篤な下痢）による死は、通常、脱水症状、アシドーシス及び電解質の喪失の結果であり、電解質は十分な量及び時間で補充することが困難な場合がある。したがって、本発明の方法及び製剤は、下痢を低減及び／または排除し、より重篤な脱水症状または当該伴侶動物の死すらも防ぐ目的での、様々な形態の下痢、例えば、分泌性／水様性下痢及びＣＩＤ、ならびに脱水症状及び電解質喪失などの下痢の症状の治療に好適である。

植物抽出物から得られるプロアントシアニジン及びタンニン
プロアントシアニジンは、多くの植物中に存在し、加水分解性または縮合型として分類される種類の縮合型タンニンである。タンニン及び、特に、プロアントシアニジンは、下痢の治療法または予防法として伝統医学で用いられた多くの植物に含まれる（例えば、Ｙｏｓｈｉｄａ ｅｔ ａｌ．， １９９３， Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ３２：１０３３； Ｙｏｓｈｉｄａ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｃｈｅｍ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．， ４０：１９９７； Ｔａｍａｋａ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｃｈｅｍ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．， ４０：２０９２を参照のこと。）。

プロアントシアニジンは、同一または異なる単量体構造の単量体単位であってよい、少なくとも２以上の単量体単位から構成される。上記単量体単位（一般的に「ロイコアントシアニジン」と呼ばれる）は、一般に、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、ガロエピカテキン、フラバノール、フラボノール、フラバン−３，４−ジオール、ロイコシアニジン及びアントシアニジンを含む単量体フラボノイドである。当該ポリマー鎖はこのように異なる構造単位に基づいており、幅広い変化形の高分子プロアントシアニジン及び多数の可能な異性体を生み出す（Ｈｅｍｉｎｇｗａｙ ｅｔ ａｌ．， １９８２， Ｊ． Ｃ． Ｓ． Ｐｅｒｋｉｎ， １：１２１７）。殆どの植物において、フラボノイド３−オール単位のより大きなポリマーが支配的であり、該ポリマーは多くの場合、２，０００ダルトン（Ｄａ）を超える平均分子量を有し、６以上の単位を含む（Ｎｅｗｍａｎ ｅｔ ａｌ．， １９８７， Ｍａｇ． Ｒｅｓ． Ｃｈｅｍ．， ２５：１１８）。

プロアントシアニジンポリマー及びプロアントシアニジンは、多種多様な植物、特に木質の生育習性を有する植物（例えば、Ｃｒｏｔｏｎ属及びＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属）中に存在する。南米特産である、Ｃｒｏｔｏｎ ｓａｋｕｔａｒｉｓ、Ｃｒｏｔｏｎ ｇｏｓｓｙｐｉｆｏｌｉｕｓ、Ｃｒｏｔｏｎ ｐａｌａｎｏｓｔｉｍａ、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ、Ｃｒｏｔｏｎ ｅｒｙｔｈｒｏｃｈｉｌｕｓ及びＣｒｏｔｏｎ ｄｒａｃｏｎｏｉｄｅｓを含む多数の異なるＣｒｏｔｏｎ樹木種が、Ｓａｎｇｒｅ ｄｅ Ｄｒａｇｏすなわち「龍の血」（“Ｄｒａｇｏｎ’ｓ Ｂｌｏｏｄ”）と呼ばれる赤い粘性のあるラテックス樹液を産する。この赤い粘性ラテックスはその薬効によって知られている。例えば、米国特許第５，２１１，９４４号には、Ｃｒｏｔｏｎ属からの水溶性プロアントシアニジンポリマー組成物の単離が記載される（Ｕｂｉｌｌａｓ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ， １：７７も参照のこと。）。米国特許第５，２１１，９４４号中の、Ｃａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ｉｎｏｐｈｙｌｕｍからの水溶性プロアントシアニジンポリマー組成物の単離。

ある実施形態において、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー、またはその組成物はクロフェレマーである。クロフェレマー（ＣＡＳ １４８４６５−４５−６）は、Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ科の樹木、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉの龍の血に由来する、種々の連鎖長のオリゴマーのプロアントシアニジンであり、龍の血はアマゾンにおいて公正取引の作業管理の下で持続可能に収穫される。クロフェレマーは約１９００Ｄａ〜約２７００Ｄａの平均分子量を有する。クロフェレマーを構成する単量体は、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、及びエピガロカテキンを含む。クロフェレマーの鎖長は約３〜約３０単位の範囲であり、平均鎖長は約７または８単位である。クロフェレマーは化学式：（Ｃ_１５・ｎＨ_{１２・ｎ＋２}Ｏ_{６．５・ｎ}、但し、ｎ＝単位数）及び８６０〜９１００ｇ／ｍｏｌ（約２５００Ｄａ）の分子量を有する。クロフェレマーの抗分泌作用機序は、例えば、Ｔｒａｄｔｒａｎｔｉｐ， Ｌ． ｅｔ ａｌ．， ２０１０， “Ｃｒｏｆｅｌｅｍｅｒ， ａｎ Ａｎｔｉｓｅｃｒｅｔｏｒｙ Ａｎｔｉｄｉａｒｒｈｅａｌ Ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ Ｏｌｉｇｏｍｅｒ Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ， Ｔａｒｇｅｔｓ Ｔｗｏ Ｄｉｓｔｉｎｃｔ Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｃｈａｎｎｅｌｓ”， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ７７（１）：６９−７８）によって報告されているように、２種の別個の腸の塩化物チャネル、すなわち、ｃＡＭＰ刺激Ｃｌ⁻チャネルである嚢胞性線維症膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）チャネル及びカルシウム活性化塩化物イオンチャネル（ＣａＣＣ）の標的化及び阻害を含む。クロフェレマーの一般構造を以下に示す。この構造中、当該構造のＲの位置のＨはプロシアニジンを表し、当該構造のＲの位置のＯＨは、プロデルフィニジンを表す。

本発明のある実施形態によれば、本治療方法において、上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーとして、クロフェレマー、またはクロフェレマーを含む薬学的に許容される製剤または組成物が用いられる。

ある実施形態において、ＳＰ ３０３、上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のオリゴマーのプロアントシアニジン（クロフェレマーとしても知られる）、は、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー、または本発明の治療方法における使用に好適な、ＳＰ ３０３を含む薬学的に許容される製剤もしくは組成物である。ＳＰ−３０３（Ｒ． Ｕｂｉｌｌａｓ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ， １：７７−１０６）は、大部分が精製されたプロアントシアニジンオリゴマー （−）−エピガロカテキン、（＋）−ガロカテキン、（−）−エピカテキン及び（＋）−カテキンから構成され、本明細書に記載の治療方法において投与するための、腸溶性及び非腸溶性の製剤ならびに組成物における使用に好適である。

別の実施形態において、ＳＢ ３００、上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー抽出物は、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー、または本発明の治療方法における使用に好適な、ＳＰ３００を含む薬学的に許容される製剤もしくは組成物である。ＳＢ ３００は、例えば、Ｆｉｓｃｈｅｒ， Ｈ． ｅｔ ａｌ．， （２００４， Ｊ． Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ９３（２−３）：３５１−３５７）によって記載されるように、腸溶性及び非腸溶性の製剤及び組成物に特に適した天然物の抽出物を提供し、該ＳＢ ３００は、本明細書に記載の治療方法において高機能であり、費用効果がある。

Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーを含み、本発明の治療方法において用いられる薬学的に許容される組成物は、例えば、Ｓｈａｍａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社に対するＷＯ００／４７０６２（その内容が本明細書に援用される）に記載されるように、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉから得ることができ、補助食品もしくは栄養補助食品または機能性食品製剤として製剤される。

他の実施形態において、本発明の方法において有用な組成物は、Ｃｒｏｔｏｎ属またはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属から得られる生ラテックス、またはＣｒｏｔｏｎ属またはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属から得られる抽出物を含み、これらは詳細には高分子プロアントシアニジンポリマー組成物ではない。例示的な抽出物がＰｅｒｓｉｎｏｓ ｅｔ ａｌ．， １９７９， Ｊ． Ｐｈａｒｍａ． Ｓｃｉ．， ６８：１２４及びＳｅｔｈｉ， １９７７， Ｃａｎａｄｉａｎ Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．， １２：７に記載される。

ある実施形態において、上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーは、腸溶性剤皮または腸溶性マトリクスと共に、本技術分野で公知の様々な剤形に製剤される（例えば、ＷＯ００／４７０６２ならびに米国特許第７，４４１，７４４号及び第７，３２３，１９５号を参照されたく、これらの内容は本明細書に援用され、且つ後に概説する。別の実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマーは、腸溶性剤皮または腸溶性マトリクスを含まない製剤である。腸溶性及び非腸溶性の形態の上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー、例えば、ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３は、本発明の方法において用いることが意図される。

プロアントシアニジンポリマー組成物及び製剤の調製
本発明に係る分泌性下痢の治療に有効な上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、ロイコアントシアニジンの単量体単位から構成される。より詳細には、上記組成物は、２〜３０のフラボノイド単位、好ましくは２〜１５のフラボノイド単位、より好ましくは２〜１１のフラボノイド単位、最も好ましくは７〜８のフラボノイド単位の平均値で、約２５００Ｄａの数平均分子量のプロアントシアニジンポリマーから構成される。上記プロアントシアニジンポリマー組成物は水溶液に可溶であることが好ましい。Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーを本発明に係る方法で用いることが好ましく、かかるＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーは薬学的に許容される組成物の形態であってよい。

本発明において有用なプロアントシアニジン高分子組成物の例は、当技術分野で公知の任意の方法によって、好ましくは、Ｃｒｏｔｏｎ属、すなわち、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ、もしくはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属から単離または精製される。例えば、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、米国特許第５，２１１，９４４号またはＵｂｉｌｌａｓ ｅｔ ａｌ． （１９９４， Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ， １：７７−１０６、該文献中ではＳＰ ３０３と呼ばれる）に開示される方法によって、Ｃｒｏｔｏｎ属またはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属から単離することができ、該文献は共に参照により本明細書に援用される。他の単離方法が米国特許第７，５５６，８３１号及び第８，０６７，０４１号（実施例２）に記載され、これらの内容は本明細書に援用される。ＷＯ００／４７０６２として公開されたＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ００／０２６８７もまた、その内容が本明細書に援用され、Ｃｒｏｔｏｎ属またはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属から単離されたプロアントシアニジン高分子組成物の製造方法及びプロアントシアニジンポリマー栄養補助食品の腸溶性製剤、並びにそれらの製造方法を開示する。Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー（クロフェレマーなど）の単離の別の例示的な方法が、米国特許第７，３４１，７４４号及び第７，３２３，１９５号に記載され、それらの内容は明示的に本明細書に援用される。上述したように、ＳＰ ３０３及びＳＢ ３００の、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のオリゴマーのプロアントシアニジンポリマーの精製された形態は、本発明の治療方法における使用に好適である。

ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、一般に、米国特許第７，３４１，７４４号に提示されるものなどの以下の方法によって単離され、該特許文献は本明細書に援用される。Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ植物から採取されたラテックスを精製水と混合する（２部の精製水に対して１部のラテックスが好ましい）。上記ラテックス溶液中の任意の不溶性物質を、例えば、該混合物を４℃で終夜（１２時間）放置することによって沈降させる。上清を残渣から吸い出し、ｎ−ブタノールなどの短鎖アルコールで抽出する。抽出は、好ましくは複数回、例えば３回行われる。各抽出後にアルコール相を廃棄し、水相を残す。例えば、１ｋＤカットオフの膜を用いた限外ろ過装置を使用して水相を濃縮する。この膜は低タンパク質結合性セルロース膜であってよく、あるいは、ポリプロピレン、テフロンまたはナイロン膜を用いることができる。用いられる膜はアセトンに適合する必要がある。この限外ろ過の目的は上記物質から水を除去することにある。

次いでこの限外ろ過の濃縮液を、例えば箱型乾燥機を用いて約３７℃（±２℃）で濃縮乾固する。続いてこの乾燥した物質を水に溶解し、次いで陽イオン交換カラム（例えば、ＣＭ−セファロースカラム）及びサイズ排除カラム（例えば、ＬＨ−２０カラム）上でクロマトグラフィーにかける。上記好ましい２カラムシステムでは、物質はＣＭ−セファロースカラム上、その後ＬＨ−２０カラム上を逐次的に流れる。詳細には、上記溶解した物質を上記陽イオン交換カラム上にロードし、次いで精製水で洗浄する。プロアントシアニジンポリマー物質をアセトン水溶液（好ましくは３０％アセトン）で陽イオン交換カラムから溶離させ、それによって上記プロアントシアニジンポリマー物質を上記サイジングカラム上にロードする。サイジングカラムを陽イオン交換カラムから切り離し、次いで上記物質をアセトン水溶液（好ましくは４５％アセトン）でサイジングカラムから溶離させる。画分を採取し、ＵＶ検出器、例えば４６０ｎｍの波長でモニターする。プロアントシアニジンポリマー物質を含有する画分を一つにまとめ、例えば、（上記クロマトグラフィー工程の前の限外ろ過工程に関して上述したような）１ｋＤカットオフの膜を用いた限外ろ過によって濃縮する。次いでこの濃縮液を、約３７℃（±２℃）の温度でロータリーエバポレータなどの、但しこれには限定されない適宜の乾燥方法を用いて濃縮乾固してもよい。他の好適な乾燥方法としては、箱型乾燥による乾燥及び噴霧乾燥が挙げられるが、これらに限定されない。米国特許第７，３４１，７４４号の実施例１０は、本発明に従って用いることができるプロアントシアニジンポリマーを含む組成物を調製するための更なる、非限定的な方法を提示する。本発明の方法における使用に好適な濃縮されたプロアントシアニジンポリマー抽出物を単離するための詳細なプロトコルは、本明細書で上述したＷＯ００／４７０６２に記載されている。

治療方法及び使用の用途
本発明は、若齢及び成体の伴侶動物の下痢、特に様々な病原性及び非病原性の原因、例えば、病気または疾患、膵炎、環境条件、細菌性、寄生虫性、原虫性またはウイルス性感染症、蠕虫（ｈｅｌｍｉｎｔｈ）すなわち蠕虫（ｗｏｒｍ）による感染症、食あたり、ＣＩＤ等から起こる水様性下痢の治療方法を対象とする。上記方法は、かかる治療を必要とする伴侶動物に、当該の下痢を治療するために有効な量のＣｒｏｔｏｎ属またはＣａｌｏｐｈｙｌｌｕｍ属由来のプロアントシアニジンポリマーを含む薬学的に許容される組成物を投与することを含む。好ましい実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマーは、Ｃｒｏｔｏｎ属、すなわち、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来である。上記下痢の治療は当該の動物の下痢の重篤度及び継続時間の低減を含み得る。上記下痢の治療はまた、例えば、治療を受ける動物の脱水症状の低減または排除によって、当該の動物の生存率を高めることを含み得る。ある実施形態において、上記下痢は分泌性下痢すなわち水様性下痢である。上記Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーによる下痢に罹患した動物の治療は、当該の動物の健康全般を改善し、その結果、該動物の自然免疫系が健康全般の維持及び他の、または二次的な問題の回避に機能し、それによって罹患率及び死亡率を減少させることができる。

また、本発明の方法は、下痢を起こし得る条件または病原体に曝露されたもしくは曝露されたことが疑われる若齢または成体の伴侶動物の、下痢の発生率または重篤度の予防あるいは低減方法を更に含む。例えば、伴侶動物が、下痢または下痢を起こす病気もしくは感染症の別の動物またはペットと接触したことが判っているまたはそれが疑われる場合には、病気のもしくは感染した動物、またはその糞便もしくは体液と接触したまたは接触したかも知れない伴侶動物に、下痢性疾患を予防するため、あるいは少なくとも当該疾患もしくはその症状の発生率または重篤度を低減するために、本発明のＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を投与してもよい。

本発明のある実施形態において、本方法は、伴侶動物における下痢性疾病を起こす危険性を及ぼす１頭もしくは複数の他の動物と接触したまたはそれが疑われる、成体の動物あるいは若齢の動物を含む、水様性下痢またはＣＩＤの非ヒト伴侶動物の治療を対象とする。実施形態において、上記方法は、限定はされないが、体重が最大で４０ｋｇ、５０ｋｇ、もしくは６０ｋｇの、または体重が平均で２０ｋｇの、伴侶動物すなわちペットの治療を対象とする。

本発明の方法によれば、若齢及び成体の伴侶動物を、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー、例えばＳＢ ３００を用いて、クロフェレマー（例えば、ＳＰ ３０３）、またはＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の植物抽出物を用いて、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、または１０日といった期間治療してもよい。上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを、連続して毎日、または、１日おき、２日毎、３日毎、４日毎のように間を置いて、上記動物に投与してもよい。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーは、１日当たり１回または２回、連続した２日または３日間伴侶動物に投与される。本方法は、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマー、またはその組成物を用いた、下痢、特に水様性下痢であるか、またはその危険性のある伴侶動物の治療法であって、上記下痢及び／またはその症状を治療し、上記動物の上記下痢を最適に治癒するように、上記動物の腸に適正な量及び適切な分布のプロアントシアニジンポリマーを与える、上記治療法を提供する。

本発明の下痢の治療方法のある実施形態において、本明細書に記載のＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーの咀嚼可能な製剤、特に軟質で咀嚼可能な製剤を含む固体経口剤形が、それを必要とする伴侶動物に経口投与される。

本発明の下痢の治療方法のある実施形態において、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来のプロアントシアニジンポリマーの製剤の再構成された懸濁液が、若齢または成体の動物（または下痢を引き起こす条件もしくは因子に暴露された、あるいは暴露されていたことが疑われる動物）に、１〜５０ｍＬ、例えば１０ｍＬの容量で経口投与される。例として、４０ｍｇのＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含有する１０ｍＬ容量の経口懸濁液が、２０ｋｇのイヌに、２ｍｇ／ｋｇの用量、１日当たり２回で３日間（すなわち６回の治療用量）投与されてもよい。

特定の実施形態において、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の植物抽出物、ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を含む製剤または組成物は、若齢または成体の伴侶動物に毎日２回、３日間、好ましくは連続した３日間経口投与される、例えば、ゲル、ペーストもしくはゲルペーストの剤形、または咀嚼可能な、例えば、硬質もしくは軟質の咀嚼可能な固体の剤形、あるいは懸濁液の剤形で提供されてもよい。特定の実施形態において、上記製剤は腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を含むビーズ（ナノ粒子または微粒子）を含み、上記動物に経口投与される。特定の実施形態において、上記剤形は、２０〜５０ｍｇの有効成分、特には４０ｍｇを含有する。上記方法及び製剤は、治療を受けた下痢に罹患した伴侶動物における、短期間、例えば、１週間未満または２週間未満での糞便形成の正常化；体重減少の軽減、及び支持療法コストの低減、経口による水分補給などの水分補給療法に特に適する。

記載される方法によれば、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、腸上皮細胞を通る塩化物の流動を低減させ、且つ、分泌性下痢に伴う水分喪失及び脱水症状に繋がる腸管腔内への水分の移動を減少させる。したがって、本発明の薬学的に許容される製剤及び方法は、種々の原因による分泌性／水様性下痢の治療における予防上及び治療上の適用の両方、特に下痢、例えば、分泌性／水様性下痢に伴う脱水及び電解質喪失の症状の予防において有用である。

ある実施形態において、若齢及び成体の伴侶動物を、水様性下痢及びそれに伴う症状、例えば脱水症状及び体重減少の衰弱性の作用の危険性若しくは重篤度を予防または軽減するために、腸溶性または非腸溶性の形態のＳＢ ３００またはＳＰ ３０３などのＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物で予防的に治療してもよい。本治療方法によれば、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、一般的には感染症、疾患及び／または有害な環境条件によって引き起こされる下痢の発症から動物を保護するために適切な時期に、若齢及び成体の伴侶動物に投与される。また、本治療方法によれば、若齢及び成体の伴侶動物に対して、がん治療、例えば化学療法を受ける前の適切な時期に、一般的にかかるがん治療に伴う、または該がん治療の結果としての動物の下痢の発症から当該の動物を保護するために、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、例えば咀嚼可能な形態を始めとする固体経口剤形が予防的に投与される。Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の伴侶動物への投与はまた、疾患もしくは感染症の発症の前またはその最中、あるいはＣＩＤに屈する前に上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を与えられていない動物と比較して、当該の動物がより重症または重篤な形態の下痢に罹患する危険性を改善または低減する役割を果たすこともできる。実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、腸溶性または非腸性製剤として提供してもよく、例えば、ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３であってよい。

Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の投与の用量及びレジメンを決定するのは医師の技量の範囲内であり、治療すべき動物の環境条件及び健康状態に依存することとなる。当該の動物を、本発明に係るＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物によって、例であって限定されないが、症状または疾患の発症の前に１日〜７日間、１〜６日間、１〜４日間、１〜３日間、または１〜２日間、予防的に治療してもよい。治療レジメンは、必要もしくは希望に応じて変更または調整される、１日当たり１回または複数回、例えば、２回、３回、もしくは４回での、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日またはそれ以上の日数のＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の動物への投与を含んでもよい。当該の動物を定期的に観察し、健康の改善と体重増加を監視してもよい。

生理学的及び薬学的に許容される製剤
上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、生理学的に、薬学的にまたは治療上許容される任意の形態で提供することができる。上記薬学的に許容される組成物は、例であって、但し限定されない、粉末；結晶；顆粒；マイクロメーターのオーダーの大きさの粒子、例えばミクロスフェア及びマイクロカプセルを含む小粒子；ミリメートルのオーダーの大きさの粒子、ナノメートルのオーダーの大きさの粒子、例えば、ナノ粒子；ビーズ；ミクロビーズ；ペレット；丸剤；錠剤；ミクロ錠剤；圧縮成型錠剤または錠剤粉砕物；型成形錠剤または錠剤粉砕物；ならびに硬質または軟質のいずれかであり、上記組成物を粉末、粒子、ビーズ、溶液または懸濁液として含有するカプセル剤として、経口投与用に製剤することができる。上記のように、かかる錠剤、丸剤、カプセル剤、軟質の咀嚼可能な形態等は、必要とする動物への経口投与における嗜好性及び／または容易性のために、香味添加剤を含有してもよい。上記薬学的に許容される組成物はまた、水性液体中の溶液もしくは懸濁液として、ゲルカプセルに組み込まれた液体として、ゲルとして、ペーストもしくはゲルペーストとして、咀嚼可能な組成物、製剤もしくは製品として、または投与に便利な任意の他の製剤として、経口投与用に製剤することもできる。上記組成物は、風味付けされた、軟質の咀嚼可能な形態とすることができる。上記組成物は、坐剤、浣腸剤または他の便利な形態として、直腸投与用に製剤化することができる。上記プロアントシアニジン高分子組成物はまた、徐放システムとして提供することもできる（例えば、Ｌａｎｇｅｒ、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３を参照のこと。）。上記組成物は、例えばＷＯ００／４７０６２に記載されるような、本発明に係る、それを必要とする動物に投与するための、栄養補助食品（ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）または栄養補助食品（ｆｏｏｄ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）として製剤化することができる。

上記薬学的に許容される製剤はまた、任意の種類の薬学的に許容される賦形剤、添加剤、担体、またはビヒクルを含むこともできる。当業者は理解するであろうが、かかる薬学的に許容される原料成分、賦形剤、添加剤、担体、またはビヒクルを、結果として上述の投与可能な形態、すなわち剤形になるように組み合わせることができる。非限定的な例として、デキストレート、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、セルロース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、ソルビトール、スクロース、イノシトール、粉砂糖、ベントナイト、微結晶セルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの希釈剤または充填剤を上記プロアントシアニジンポリマー組成物に添加して、該組成物の嵩を増やすことができる。また、デンプン、ゼラチン、スクロース、グルコース、デキストロース、糖蜜、ラクトース、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、アイルランドコケ抽出物、パンワガム、ガティガム、ｉｓａｐｇｏｌ外皮の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、Ｖｅｅｇｕｍ及びｓｔａｒｃｈ ＡＲＡＢＯＧＡＬＡＣＴＡＮ、ポリエチレングリコール、エチルセルロース、及びワックスなどの、但しこれらに限定されない結合剤を上記製剤に添加して、その凝集性を増加させることができる。更に、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、水素化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、カルボワックス、ラウリル硫酸ナトリウム及びラウリル硫酸マグネシウムなどの、但しこれらに限定されない潤滑剤を上記製剤に添加することができる。また、コロイド状二酸化ケイ素またはタルクなどの、但しこれらに限定されない流動促進剤を添加して、粉末製剤の流動特性を改善することができる。デンプン、クレー、セルロース、アルギン、ガム、架橋ポリマー（例えば、クロスカルメロース、クロスポビドン、及びデンプングリコール酸ナトリウム）、Ｖｅｅｇｕｍ、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、セルロース及び木材製品、カイメン、カチオン交換樹脂、アルギン酸、グアーガム、柑橘ジュース粕、カルボキシメチルセルロース、またはデンプンを含むラウリル硫酸ナトリウムなどの、但しこれらに限定されない崩壊剤を添加して、腸内での当該製剤の崩壊を促進することもできる。

いくつかの実施形態において、上記薬学的に許容される製剤は、別の薬学的に許容されるビヒクルに加えて、腸溶性剤皮を有する上記プロアントシアニジンポリマー組成物を含有する。ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、錠剤または丸剤に直接圧縮成型してもよい。上記錠剤または丸剤は賦形剤を含まなくてもよく、薬学的に許容される硬度及び砕けやすさをもった錠剤または丸剤であることができ、任意選択で潤滑剤、例えば、限定はされないが、ステアリン酸マグネシウムを含んでもよく、且つ腸溶性被覆されていてもよい。別の実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物を含有する上記薬学的に許容される組成物は、代替的に、胃酸及び／または酵素を中和する、あるいは胃酸の分泌を防止する活性がある１種または複数種の物質を含む。これらの製剤は本技術分野で公知の方法により調製することができる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ “Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，” ２２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｅｄｉｔｏｒ−ｉｎ−Ｃｈｉｅｆ： Ｌｌｏｙｄ Ｖ． Ａｌｌｅｎ， Ｊｒ．， Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ Ｐｒｅｓｓ， Ｒｏｙａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ， Ｌｏｎｄｏｎ， ＵＫ， ２０１３；及び米国特許第７，３２３，１９５号に記載の方法を参照されたい。）。

ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、当該プロアントシアニジンポリマー及び／または当該ポリマー組成物を胃の環境から保護する物質と共に製剤される。かかる保護のためには、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は腸溶性被覆されていてもよい。腸溶性剤皮としては、胃の中では損なわれない状態を維持するが、小腸に達すると当該剤形の内容物を溶解させ放出する剤皮が挙げられる。多数の腸溶性剤皮が酸性基を有する成分によって調製され、その結果、胃の中に存在する非常に低いｐＨ、すなわちｐＨ１．５〜２．５において上記酸性基はイオン化されず、当該剤皮は解離しない不溶の形態を維持する。腸の環境などのより高いｐＨレベルにおいては、上記腸溶性剤皮はイオン化した形態に転化され、このイオン化した形態は溶解し、上記プロアントシアニジンポリマー組成物を放出することができる。他の腸溶性剤皮は、小腸内の酵素によって分解されるまで損なわれない状態を維持し、他の腸溶性剤皮は、規定された水分への曝露後に分解し、その結果当該剤皮は小腸への移動の後まで損なわれない状態を維持する。種々のポリマーが腸溶性剤皮の調製に有用であり、上記プロアントシアニジンポリマー組成物への腸溶性剤皮の塗工は、例えば、限定はされないが、参照により本明細書に援用される、米国特許第７，３２３，１９５号及び第７，３４１，７４４号で見ることができる、腸溶性剤皮を塗工するための本技術分野で公知の任意の方法によってなすことができる。

別の実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物の上記薬学的に許容される組成物は、硬質ゼラチンカプセル中、または小児への投与用の経口溶液中の懸濁液中で提供される腸溶性被覆顆粒または粉末（直径３００〜５００ミクロンのミクロスフェア）として製剤される。上記腸溶性被覆されたプロアントシアニジンポリマー組成物の粉末または顆粒を、特に若齢の動物または特に病気の動物へ投与するためには、食物または飲料と混合してもよい。かかる製剤は本技術分野で周知の技術を用いて調製することができる。また、上記プロアントシアニジンポリマー組成物の顆粒及び粉末は、結晶化、噴霧乾燥または、好ましくは、例であって限定はされないが、参照により本明細書に援用される米国特許第７，３２３，１９５号に記載の高速混合機／造粒機を用いる、任意の粉砕方法などの、但しこれらに限定されない、本技術分野で公知の任意の方法を用いて調製することができる。

他の実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、適宜の添加剤との混合物中の水性懸濁液の形態である。水性懸濁液の製造に好適な添加剤の非限定的な例としては、懸濁剤、例えば、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム及びアラビアゴム；天然起源のホスファチド、例えば、レシチン、またはアルキレンオキシドの脂肪酸との縮合生成物、例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン、またはエチレンオキシドの長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキサイドの脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、またはモノオレイン酸ポリエチレンソルビタンなどの、エチレンオキサイドの脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合生成物であってよい分散剤または湿潤剤が挙げられる。上記水性懸濁液はまた、１種または複数種の保存料、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルもしくはｎ−プロピル、１種または複数種の着色剤、１種または複数種の香味料、及び１種または複数種の甘味料、例えばスクロース、サッカリンまたはアスパルテームを含有してもよい。

水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性の粉末及び顆粒によって、分散剤または湿潤剤、懸濁剤及び１種または複数種の保存料との混合中の上記プロアントシアニジンポリマー組成物が提供される。好適な分散剤または湿潤剤及び懸濁剤としては上記のものが例示される。更なる添加剤、例えば、甘味料、香味料及び着色剤も、上記分散性の粉末中、顆粒中及び最終的な水性懸濁液中に存在してよい。

ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物はゲルまたはゲル製剤である。ある実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物はペースト製剤である。ある実施形態において、上記ペースト製剤はＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の精製された植物抽出物を含有する。別の実施形態において、上記ペースト製剤はＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を含む腸溶性被覆ビーズを含有する。ある実施形態において、上記ペースト製剤は腸溶性保護ＳＢ ３００ビーズを含有する。ある実施形態において、上記ゲルまたはペーストは、注射器、例えば無針注射器、もしくは他の形態のアプリケータまたは送達システムなどの、特に経口送達用の送達器具中に収納される、すなわち予め充填される。ゲルまたはペースト製剤は若齢の動物への投与に特に適するが、成体の動物、特に病状の重い動物にも適用できる。ある実施形態において、上記ゲルまたはペーストは送達器具中に収納されるのではなく、上記の動物、特に非常に活動が困難であるかまたは病状が重く、飲食ができない動物の口蓋に投与され、それによって経口投与または他の形態の投与が回避される。ある実施形態において、上記ゲルは、動物の体内の異なるｐＨ環境における、細胞中への上記活性化合物のｐＨ依存性の取込み及び／または該活性化合物のｐＨ依存性の放出を可能にするための、微粒子またはナノ粒子などの、ｐＨ感受性高分子粒子を含む。上記プロアントシアニジンポリマー組成物またはその圧縮成型性の形態を含む顆粒及び粒子を作製するためのプロセスは、本技術分野において公知または実施されるとおり、例えば、米国特許第７，３４１，７４４号に記載されるとおりであり、該特許文献の内容は参照により本明細書に援用される。ある実施形態において、ゲルは経口送達用に調製され、ポロキサマー及び異なる種類のプルロニック、例えばプリロニックＦなどの共重合体を含有する。

他の実施形態において、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、好ましくは経口投与用のペースト製剤、または好ましくは経口投与用の、軟質の咀嚼可能な固体剤形などの固体剤形である。例として、経口ペーストは、疎水性油性ビヒクル、塩基性化剤、香味料及び着色剤などの、但しこれらに限定されない、油性ビヒクルまたは添加剤を含む。実例としての且つ非限定的な疎水性油性ビヒクルの例としては、植物油、トリグリセリドまたはポリプロピレングリコール、ならびに増粘剤、例えばステアリン酸アルミニウムが挙げられる。香味料としては、例えば、果物味香味料、ミント味香味料、蜂蜜味香味料、牛肉味香味料、鶏肉味香味料、魚味香味料、野菜味香味料、及び当業者に公知の他の天然及び有機香味料を挙げることができる。着色剤としては、例えば、酸化鉄または二酸化チタンを挙げることができる。あるいは、上記油性ビヒクルは、流動パラフィンまたは増粘剤を含む他の適宜のワックスであってもよい。ある実施形態において、上記ペーストまたは固体製剤は、腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３を有するビーズを含有し、上記製剤は、例えばイヌまたはネコのなどの伴侶動物に、２ｍｇ／ｋｇの用量または４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。より詳細には、腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３微粒子またはビーズを含有するペーストまたは固形製剤は、２ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回、１日、２日、３日、またはそれ以上の日数の間、当該の動物に投与される。ある実施形態において、腸溶性保護ＳＢ ３０３微粒子を含有する上記ペーストまたは固体形態は、それを必要とする伴侶動物に１日２回投与される。ある実施形態において、有効成分としての、有効量の上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーは、錠剤、丸剤またはカプセル剤などの、伴侶動物に経口投与され、該動物に嗜好上受入れられるように風味付けされた咀嚼可能な形態に製剤化される。ある実施形態において、腸溶性被覆ＳＰ ３０３微粒子は、イヌなどの動物への経口投与用の、軟質の、咀嚼可能な、風味付けされた組成物または製品に製剤される。

別の実施形態において、油性懸濁液は、有効成分としての上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを、植物油、例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油もしくヤシ油、または流動パラフィンなどの鉱油中に懸濁させることによって調製することができる。上記油性懸濁液は、増粘剤、例えば蜜ロウ、硬質パラフィンまたはセチルアルコールを含有してもよい。経口製剤は、嗜好性を改善するために、上記の甘味料及び香味料を含むことができる。薬学的に許容される保存料、例えばアスコルビン酸などの抗酸化剤も、かかる組成物に添加することができる。

本発明の方法において用いられるＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー医薬組成物はまた、水中油型乳化液の形態であってもよい。油相は、オリーブ油または落花生油などの植物油、もしくは流動パラフィンなどの鉱油、またはこれらの油の混合物であってよい。乳化剤の例としては、天然起源のホスファチド、例えば、大豆、レシチン、及び脂肪酸及びヘキシトール無水物由来のエステルまたは部分エステル、例えば、モノオレイン酸ソルビタン、及び部分エステルのエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンが挙げられるが、これらに限定されない。上記乳化液は、甘味料、着色剤及び香味料を含んでいてもよい。

上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーを含有するシロップ剤及びエリキシル剤はまた、甘味料、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースと共に製剤されてもよい。かかる製剤はまた、粘滑剤、保存料ならびに香味料及び着色剤を含有してもよい。上記医薬組成物は、無菌の経口送達可能なもしくは経口投与可能な水性または油性懸濁液の形態であってもよい。この懸濁液は、適宜の分散剤または湿潤剤及び上述したような懸濁剤を用いて、本技術分野で公知の方法に従って処方されてもよい。上記無菌医薬製剤はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌溶液または懸濁液、例えば１，３−ブタンジオール溶液であってもよい。上記製剤に用いることができる例示的な許容されるビヒクル及び溶媒としては、水、リンゲル溶液及び等張性塩化ナトリウム溶液が挙げられる。共溶媒、例えば、エタノール、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールも包含することができる。また、無菌の不揮発性油、例えば、合成モノグリセリドまたはジグリセリドなどの任意の無刺激の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒体として従来から使用され、これを用いることができる。また、オレイン酸などの脂肪酸を注射用製剤に用いてもよい。

剤形及び投与
ある実施形態において、伴侶動物、例であって限定されないが、イヌ及びネコにおける、ＣＩＤを始めとする水様性下痢の治療用に、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は粉末の形態、例えば、再構成可能な粉末の形態である。別の実施形態において、伴侶動物、例であって限定されないが、イヌ及びネコにおける、ＣＩＤを始めとする水様性下痢の治療用に、上記プロアントシアニジンポリマー組成物は固体剤形、例えば咀嚼可能な固体剤形である。上記組成物は、腸溶性被覆されていても、腸溶性被覆されていなくてもよい。治療に用いられる上記プロアントシアニジンポリマー組成物の粉末形態は、経口用電解液、ミルクまたはミルク代替物、水、生理食塩水などの液体によって再構成され、すなわち該液体と混合されて、液体形態または懸濁液を生成する。ミルク代用物は一般には、母親のミルクを代替するために若齢の動物に与えられる、異なる起源由来（例えば、異なる種、大豆、または卵由来のミルク）のタンパク質源及びエネルギー源（ラクトース及び脂肪）である。上記咀嚼可能な固体剤形は、治療を受けている動物の嗜好に最適となるように、例えば、牛肉風味、鶏肉風味または魚風味に風味付けを行ってもよい。

ある実施形態において、上記粉末形態の上記プロアントシアニジンポリマー組成物は、小分けにした個々の一回分の形態、例えば包装された剤形で提供され、いくつかの数の個々の小分けが治療レジメンでの使用に提供される。特定の実施形態において、包装された剤形の総量は０．５ｍｇ〜１０００ｍｇの上記プロアントシアニジンポリマー組成物を含有する。他の実施形態において、上記包装された剤形の総量は、１ｍｇ〜１００ｍｇ、５ｍｇ〜５００ｍｇ、１０ｍｇ〜５０ｍｇ、５０ｍｇ〜２００ｍｇ、１００〜３００ｍｇ、１００〜２５０ｍｇ、または２５０ｍｇの上記プロアントシアニジンポリマー組成物を含有する。一緒に包装して提供することができる個々の一回分の数としては、限定することを意図しないが、使用、取扱いの効率及び商業的有効性の点から、例えば、１〜２０の包装された一回分、１〜１０の包装された一回分、２、４、６、８、１０、１２またはそれ以上の包装された一回分、ならびに上記の数の間の包装された一回分が挙げられる。当業者であれば、ＳＰ ３０３またはクロフェレマー及びＳＢ ３００などの組成物のより高い純度に起因して、同一量の上記プロアントシアニジンポリマー組成物の有効成分を得るためには、製剤にＳＰ ３０３よりもより大きな重量のＳＢ ３００を用いることが必要となることを理解しよう。ＳＢ ３００は一般に、約６７重量％の上記プロアントシアニジンポリマー組成物を有する一方、ＳＰ ３０３はより高い純度、例えば９９〜１００％を有する。

ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、咀嚼可能な固体剤形で上記化合物を提供することにより、下痢に罹患した及びそれを必要とする若齢もしくは成体の伴侶動物に投与または送達される。ある実施形態において、巨丸剤、すなわち、丸剤、カプセル剤、錠剤または固体の咀嚼可能な形態として製剤された上記プロアントシアニジンポリマー組成物が、下痢またはその症状に罹患した動物に、直接口から経口投与される。いくつかの実施形態において、上記治療レジメンは、当該の伴侶動物の体重を考慮して、０．０５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの用量、または０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの用量、または０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの用量、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量、または０．５ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇの用量、または１ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇの用量、または２ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの用量、または１ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの用量、ならびにそれらの間の用量のＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製品の投与を含む。特定の実施形態において、上記治療レジメンは、例えば、所定の期間、例えば、１日当たり１回、２回、または３回で、１日、２日、３日、またはそれ以上の日数の間の、必要とする動物当たりの１回の投与に含まれる用量として、２ｍｇ／ｋｇまたは４ｍｇ／ｋｇの用量の上記製品を投与することを含む。上記製品は、腸溶性被覆製剤または非腸溶性被覆製剤で当該の動物に与えることができる。上記製品は、それを必要とする動物に、用量の全体を何回かに分けて与えることができ、当該の分量は１日当たり１回または２回またはそれ以上の回数で投与される。あるいは、上記用量の全体が、それを必要とする動物に、１日当たり１回または２回またはそれ以上の回数で投与されてもよい。特定の実施形態において、上記治療は、体重約２０ｋｇの動物に１日２回与えられる（２０ｍｇ／投与）４０ｍｇの総用量を含む。より大きな動物、２０ｋｇを越え、好ましくは、４０ｋｇ未満の動物については、用量は１日当たり２回投与される８０ｍｇである。ある実施形態において、上記投与される製品は、約２ｍｇ／ｋｇの用量または約４ｍｇ／ｋｇの用量の、腸溶性または非腸溶性形態、例えば、再構成された粉末形態または、任意選択で治療を受ける動物の味の好み（複数可）に従って風味付けされた咀嚼可能な固体形態を始めとする固体剤形の、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、ＳＰ ３０３である。ある実施形態において、上記投与される製品は、腸溶性形態の上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３である。ある実施形態において、上記投与される製品は、非腸溶性形態の上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３である。

上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製品の罹患した動物への投与経路は、限定することを意図するものではない。例示的には、投与は、経口、頬側、歯科的、歯周、食物源（動物用飼料）を介した、栄養源を介した、または飲料源を介した、耳、吸入、子宮頸部、筋内、皮下、皮内、頭蓋内、リンパ内、眼内、腹腔内、胸膜内、髄腔内、気管内、子宮内、血管内、静脈内、膀胱内、鼻腔内、眼科的、胆道灌流、心臓灌流、脊髄、舌下、局所、経皮、膣内、直腸、尿管、または尿道を含む、任意の適した、都合のよいまたは好ましい投与経路を介することができる。特定の実施形態において、経口投与、頬側投与ならびに食物及び／または飲料補助剤が特に好適な経路である。特定の実施形態において、上記製品は水性製剤であり、最適な活性を目的として、当該の動物の腸（ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ）／腸（ｇｕｔ）により有効に到達するように、食道腔へ灌注としてまたはそのまま使用可能な（ＲＴＵ）ボトルから直接、当該の動物に与えられる。関連する実施形態において、投与はまた、動物または伴侶動物用の機能性食品中などの、動物の通常のまたは特製の食餌中に含ませることによることもできる。特定の実施形態において、上記製品は、錠剤、丸剤、カプセル剤、ペレット剤、または他の適宜の固体の経口投与可能な形態などの、咀嚼可能な風味付けされた固体形態である。

剤形としては、限定はされないが、経口剤、注射剤、経皮、計量エアロゾル剤を始めとするエアロゾル剤、咀嚼可能な製品またはペレット剤、カプセル剤、被覆粒子、ナノ粒子またはペレットを含有するカプセル剤、遅延放出粒子を含有するカプセル剤、持続放出粒子を含有するカプセル剤、濃縮製剤、クリーム及び強化（ａｕｇｍｅｎｔｅｄ）クリーム、坐剤クリーム、ディスク剤、包帯剤、エリキシル剤、乳剤、浣腸剤、持続放出フィルムまたは繊維剤、ガス剤、ゲル剤、計量ゲル、顆粒剤、遅延放出顆粒剤、発泡性顆粒剤、埋込剤、吸入剤、注射用脂質複合体、注射用リポソーム剤、インサートまたはデバイス、持続放出インサート、子宮内デバイス、ジェリー剤、液剤、持続放出液剤、ローション剤、強化（ａｕｇｍｅｎｔｅｄ）ローション剤、油剤、軟膏、強化（ａｕｇｍｅｎｔｅｄ）軟膏、ペースト剤、トローチ剤、ペレット剤、粉末剤、再構成された粉末剤、持続放出粉末剤、持続放出粉末剤、計量粉末剤、溶液剤、滴剤、濃縮溶液剤、ゲル形成溶液／滴剤、スポンジ剤、スプレー剤、計量スプレー剤、坐剤、懸濁剤、懸濁剤／滴剤、持続放出懸濁剤、シロップ、錠剤／丸剤、咀嚼可能錠剤／丸剤、被覆粒子（ナノ粒子もしくは微粒子）含有錠剤／丸剤、遅延放出錠剤／丸剤、分散性錠剤／丸剤、発泡性錠剤／丸剤、持続放出錠剤／丸剤、口腔内崩壊錠剤／丸剤、テープ剤、トローチ剤／ロゼンジ剤、または他の形態を挙げることができる。上記投薬量は、固体、液体または懸濁液の製剤、組成物、薬学的に許容される製剤及び組成物、生理学的に許容される製剤及び組成物として提供することができ、本技術分野において公知であり用いられる薬学的及び生理学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤、またはビヒクルを含むことができる。

経口投与用には、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製品またはその組成物は、好ましくは固体剤形に封入され、適宜の担体などと共に固体剤形に製剤される。好適な担体、賦形剤、希釈剤及びビヒクルの非限定的な例としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、ゼラチン、シロップ、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチル及びプロピル、タルク、マグネシウム、ステアリン酸塩、水、鉱油、食用油等が挙げられる。上記製剤はまた、潤滑剤、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、保存料、甘味料及び／または香味料を含んでいてもよい。上記組成物は、本技術分野において周知のプロトコル及び方法を用いることによって、動物への投与後に有効成分の迅速な放出、徐放、持続放出、または遅延放出を提供するように製剤化されてもよい。上記製剤はまた、タンパク質分解を低減させ、吸収を促進する化合物または物質、例えば、界面活性剤などを含んでいてもよい。

当業者には理解されるであろうが、比用量は、当該の動物の概略の体重（ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ）、体質量（ｂｏｄｙ ｍａｓｓ）、もしくは体表面積、または占有される身体空間もしくは身体塊の容積に基づいて計算することができる。上記用量はまた、獣医師によって選択される特定の投与経路にも依存する。治療のための適当な投薬量を決定するために必要な計算の更なる改良が、例えば、特定の化合物に関して報告されているもの（例えば、Ｈｏｗｉｔｚ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ， ４２５：１９１−１９６， ２００３）などの適当なアッセイ及び分析手法を用いて、当業者によって日常的に行われている。正確な投薬量は、標準的な用量反応の検討に基づいて決定することができる。罹患した動物の治療のための治療上有効な用量は、副作用を最小限に抑えつつ所望の治療効果に到達するように、当該の動物に与える活性製品の量を漸増させることによって決定することができる。

本発明の方法に従って、若齢及び成体の伴侶動物の水様性下痢またはＣＩＤ及びそれらの症状を治療するための使用には、治療上許容される形態の上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、１日当たり０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲の量で、毎日１回、２回またはそれ以上、特には経口的に投与される。他の実施形態において、上記量は、約０．１〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約０．１〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約０．１〜約５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約０．１〜約０．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約０．５〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上であってよい。他の実施形態において、上記用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇなど、ならびにそれらの間の用量であってよい。更に他の実施形態において、上記量は、約１〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約１〜約５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約１〜約４ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約０．１〜約４ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上；または約２ｍｇ／ｋｇ／〜約４ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、毎日１回、２回もしくはそれ以上であってよい。他の実施形態において、上記の量の上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物は、１日当たり１回よりもむしろ、例えば、毎日２回、毎日３回、毎日４回、または毎日５回以上投与される。

他の実施形態において、本治療方法に関して、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製品、または上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、例えばＳＰ ３０３もしくはＳＢ ３００の好適な用量は、約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれかであってよい。ある実施形態において、好適な用量は、約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ、または１ｍｇ〜約１０ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれかであってよい。ある実施形態において、好適な用量は、約１０ｍｇ〜約３５０ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれかであってよい。ある実施形態において、好適な用量は約２０ｍｇ〜約４００ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれかであってよい。ある実施形態において、好適な用量は約５０ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれか、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれかであってよい。ある実施形態において、好適な用量は約４０ｍｇ〜約３００ｍｇの範囲で、毎日または１日当たり複数回のいずれかであってよい。上記範囲は、明記した下限量及び上限量、ならびにそれらの間の量を包含することが理解されよう。いくつかの実施形態において、１日当たりに複数回投与される上記用量を、連続する複数の日の間、例えば、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、またはそれ以上の間与えてよい。１日当たり複数回投与される用量は、１日当たり２回、３回、４回、５回、６回、またはそれ以上の回数を含んでもよい。１日おき、または３日毎、４日毎などの他の投与スケジュールは本発明に包含される。また、当業者は、治療を受けている伴侶動物の体重の幅広い範囲、ならびに動物種の違いを考えると、当該の動物に投与される用量及び量は変化することができ、前述の代表的な範囲及び量よりも少なくてもまたは多くてもよいことを理解しよう。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーはＳＢ ３００またはＳＰ ３０３である。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーは腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３である。ある実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーは非腸溶性被覆ＳＢ ３００またはＳＰ ３０３である。

いくつかの実施形態において、上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー製品の、複数回での日用量、例えば、１日に２回または３回を含む日用量は、動物１頭当たり０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、２７５ｍｇ、３００ｍｇ、３２５ｍｇ、３５０ｍｇ、３７５ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ（またはそれらの間）であってよい。これらの用量の接近した近似値もまた、本発明の方法に包含される。本明細書に記載の下痢及びその症状を治療するための上記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーの治療上有効な濃度を得るように、投与スケジュールを変更してもよい。詳細な、但し非限定的な例として、本発明にかかる方法における使用に好適な投薬量は、毎日２回投与される２ｍｇ／ｋｇまたは毎日２回投与される４ｍｇ／ｋｇ／投与である。いくつかの実施形態において、上記化合物を、１日当たり１回、１日当たり２回、１日当たり３回、１日当たり４回、１日当たり５回、１日当たり７回または１日当たり１０回投与してもよい。多くの場合、上記投薬量は１日全体にわたって投与される部分に等分されるが、より重篤なまたは慢性化した症状の治療に関係するいくつかの実施形態においては、毎日の治療の大部分が１日の所定の時間、例えば、１日の前半に施されるように、投薬量投与スケジュールを調整することが有益である。例として、当該の動物に初回の投与を行い、次いで、例えば１〜３時間後、１〜６時間後、１〜１２時間後、またはそれらの間の時間後などの所定の時間後に、第２の（またはそれ以降）の投与（複数可）を行ってもよい。いくつかの実施形態において、上記投薬量の約５０％、６０％、７０％または８０％が１日の前半に投与される。他の実施形態において、上記投薬量の約５０％、６０％、７０％または８０％が１日の後半に投与されるように、上記投薬量の大部分を１日の後半に投与することがより適切な場合がある。

実際に投与される用量は、治療を受ける疾患、疾病、またはそれらの症状の重篤度、投与される製品の形態、治療を受ける個々の動物の年齢、体重、及び応答、ならびに選択された投与経路を含む関係する状況を考慮して、獣医師が決定することができることが理解されよう。

本発明の方法は、単独、あるいは水分補給剤、電解質（例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、塩化物及びそれらの製剤）、抗生物質、カオリン、ペクチン、もしくはビスマス液などの腸内壁保護剤、及びアタパルジャイトなどの水分吸着剤などの、分泌性下痢の症状の治療もしくは改善のための他の栄養補助剤または薬剤との併用のいずれかでの、本プロアントシアニジンポリマー組成物の薬学的に許容される製剤の投与を更に包含する。他の薬剤は腸運動抑制剤を含んでもよい。天然の生物学的産生物、例えば、ＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓもしくはＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、または腸内有益菌もまた、罹患した若齢または成体の伴侶動物における腸内細菌叢の自然平衡を回復させるための添加剤として用いることができる。

実施例１
イヌにおけるＣｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、クロフェレマー（ＳＰ ３０３）の経口投与の評価
この実施例においては、急性水様性下痢のイヌの多施設概念実証治験を説明する。本治験は、管理された環境を与えるために、動物病院において行われる。本治験は、下痢の原因に基づく５群の別個の治療群を、５群の関連するプラセボ群のそれぞれと比較する二重盲検のブロック無作為化法、ならびに大域的解析である。本治験は３日未満の一般的な急性水様性下痢を呈するイヌの登録を含む。各イヌの精密検査を行い、下痢の原因が化学療法、細菌性感染症、膵炎、食あたりまたはＧｉａｒｄｉａ感染症であるかどうかを判定する。これら５種の原因のそれぞれを下位群と見なし、下痢のその他の原因を有するイヌを本治験から除外する。

登録したイヌを診療所に４日間入院させ、当該動物の体重の区分に従って、２〜４ｍｇ／ｋｇのＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物（クロフェレマー）を含む腸溶性被覆微小顆粒（投薬量は犬種の大きさ及び重量の変動に応じた範囲となる）、または腸溶性被覆されたプラセボを用いて、１日に２回で３日間治療する。加えて、全ての登録したイヌを下痢に対する「標準治療」（ＳＯＣ）に従って治療し、該標準治療は、経口または静脈投与による水分補充のための液剤ならびに、Ｇｉａｒｄｉａ感染症に対するフェンベンダゾール、膵炎に対する疼痛管理及び嘔吐に対する制吐剤（クエン酸マロピタント）などの疾患特異的な薬剤を含む。実施する評価項目は、糞便の軟度、包括的胃腸スコア、下痢の継続期間、排便の頻度、食欲、態度及び体温である。イヌを１日２回、４日間検査し、２種の有効なスコアリングシステム、すなわち、ネスレ・ピュリナ糞便スコアリングシステム及びウォルサム糞便スコアリングシステムを用いて評価する。糞便試料を１日１回採取し、下痢の原因を確定または確認し、便の乾燥物含量を測定する。血液化学分析も検討する。治験設計は、関連する臨床評価項目の範囲にわたって、下位群による、及び全体としてのデータの評価を提供する。結果として、本治験は、これらの一般的な急性水様性下痢の下位群の全てまたは一部に対して臨床上有益であることの確認を可能にし得る。

本概念実証治験用に、ＳＰ ３０３を被験物質パック中に用意する。各被験物質パックに試験動物の番号及び本治験に登録された動物毎に割り付けられた１２のパックの順番、すなわち、イヌ１、パック１２の１等を標識する。各治験を受けるイヌは合計６回の治療を受けることから、各イヌは本治験の過程で１２パックの投与を受ける。各パックは２５０ｍｇの被験物質（ＳＰ ３０３）を含有し、１回の治療に対して２０ｋｇのイヌの治療を賄う。したがって、治療１回当たり最大で４０ｋｇのイヌの治療に合計２パックが必要となる。治療のための用量は、６回の治療（３日間）に対して、２ｍｇ／ｋｇ、１日２回である。２５０ｍｇの被験物質の各パックは４０ｍｇの有効成分またはプラセボ成分を含有し、これを１０ｍＬの水道水を加えることによって懸濁液に再構成し、４ｍｇ／ｍＬの有効成分の懸濁液をつくる。したがって、試験投与を受ける２０ｋｇのイヌに対して、（２０ｋｇ×２ｍｇ／ｋｇ×４ｍｇ／ｍＬ）、当該のイヌは１０ｍＬの上記懸濁液の投与を受ける。

実施例２
イヌの下痢の治療に対する、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物、クロフェレマー（ＳＰ ３０３）の経口投与の臨床上の有効性の評価
この実施例は、下痢の治療における、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物製品、すなわち、クロフェレマーＳＰ ３０３の経口投与の臨床上の有効性を評価するために、救済機関、保護施設及びクライアントである飼い主を通じて得たイヌ科の動物を用いて、獣医師によって実施される、盲検化され、無作為化され、管理された治験を対象とする。治験分担獣医師は、本治験の終了まで治療の割り付けに対して盲検化される。４ヶ月間にわたって、治験実施施設当たり少なくとも６０頭のイヌを、同一の地理的領域の様々な獣医診療所から募る。救済機関、保護施設及び飼い主は、所有する動物の本治験への登録に対する報奨金が提供される。動物を最大６日間治験実施施設に拘束することに対して同意を得る。当初の２４時間の拘束の間に、獣医師または助手による検査、観察及び飼い主の情報提供によって下痢の重篤度を評価する。上記当初の２４時間の拘束の最後に、当該の動物が６以上のベースラインの糞便スコアを有すると判定された場合、この動物を本治験に登録し、無作為化し、次の２４時間の拘束の開始時に始まる治療を伴う５日間の拘束を行う。

治験の目的は、経口投与したクロフェレマー製品ＳＰ ３０３の、イヌの下痢の臨床徴候を緩和する臨床上の有効性を確認することである。この治験はまた、化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の治療のみならず、イヌのより一般的な急性の下痢／水様性下痢の適応症においても、上記クロフェレマー製品の評価のための重要な有効性の検討を支持するためのデータを提供する。

本治験においては、ブロックサイズ６でのブロック無作為化法を利用する。実施する主要臨床評価項目としては、糞便の軟度及び下痢の持続時間が挙げられ、副次的評価項目としては、安全性、治療を受けたイヌの態度／活動性が挙げられる。本治験への全てのイヌの登録に関して書面による同意を得る。本治験に適したイヌとしては、４月齢と１２年齢との間であり、２ｋｇと５０ｋｇとの間の体重の、任意の種のオス及びメスが挙げられる。下痢を呈し、６以上の糞便スコア（すなわち、少量の粒子状物質を含む水様の液状便）のイヌのみが本治験への参加を認められる。本治験への参加を認められた全てのイヌはパルボウイルスの予防接種が有効であり、精密検査を受けて、最終的な組み入れの判定を行う。イヌが適格であるためには、下痢の期間が３日以内であることが必要である。

除外基準：他の疾病を有するまたは他の疾病の治療を受けているイヌ、並びに４以下の糞便スコアのイヌは本治験への参加が認められない。出血性下痢のある及びパルボウイルスの疑いのあるイヌは除外される。飼い主のインフォームドコンセントへの署名の７日以内に、いずれかの禁止される薬剤による治療を受けていたイヌは本治験に登録されない。

最終的な組み入れ：Ｇｉａｒｄｉａ、急性細菌性腸感染症、ＣＩＤ、膵炎及び食あたりと診断されたいイヌのみが本治験に留まり、治療を全うすることができる。それぞれのイヌは５群の下位群のいずれかに属する。全ての下位群を別個に解析し、全ての下位群を別個の解析に対して一つの群として一緒にプールする。禁止される薬剤としては、メトロニダゾール、アルベンダゾール、フォルティフローラ、Ｃｅｎｔｒｉｎｅ及びスルファジメトキシンが挙げられる。救急薬を用いた治療は治験責任獣医師（ＰＩ）の裁量に基づいて許可される。

被験物質及び投薬量：２種の被験物質を臨床獣医師／ＰＩに支給する。当該物質は本治験の各イヌ向けに個別に包装され、スポンサーによって提供されるコード番号のみがそれぞれの包装容器上に記載されている。一方の被験物質は２ｍｇ／ｋｇの投薬量のＳＰ ３０３（クロフェレマー）である。第２の被験物質はプラセボ、例えば、生理食塩水である。最終的な剤形は、少量の水中でイヌに投与するＳＰ ３０３の腸溶性被覆微小顆粒、すなわち、１ｍＬの水当たり２０ｍｇの有効成分（ＳＰ ３０３）であり、直接イヌの口の中に熟練した獣医学技能者によって投与される。上記有効成分の用量は動物の体重に基づく。各イヌを１日２回、３日間治療する、すなわち、合計６回の投与である。

評価：評価者（獣医師、助手、または技能者）は以下の評価を行う。すなわち、１）以下に示す糞便スコアリングシステムに従って、ベースライン時及び本治験の１日目、２日目、３日目、４日目、及び５日目に糞便スコアを判定する。

上記評価者はまた、以下に列挙するパラメータに従って、ベースライン時及び１日目〜５日目における全般的な態度／活動性、脱水症状の状況及び食欲のスコア付けも行う。

上記評価者はまた、各イヌの体温を測定し報告する。加えて、ベースライン時から治療期間を通して動物を観察することによって、１日当たりの排便の発生回数を記録する。

文書化：文書化に関しては、治験実施施設に適宜の原資料を提供し、該資料は各動物の医療ファイル中に保管し、本治験の進捗と共に全ての項目を記入していく。施設の職員は、電子データ収集（ＥＤＣ）ソフトウェアを用いて、本治験のベースライン時の原資料に記録されたデータを入力する。臨床試験の監督者が当該の施設を訪れて、ＥＤＣシステム中の全てのデータが、各動物に対して原資料と一致しているかを確認する。

手順：治験への登録の前の全てのイヌに対する診断上の評価としては以下が挙げられる。病歴、すなわち、継続期間及び臨床徴候；ワクチン接種歴；食餌の履歴；環境／履歴、すなわち、食あたりの可能性、すなわち、食品、異物、ゴミ、堆肥、肥料；ストレスのかかる出来事、すなわち、乗車、グルーミング、旅行、入院、家族の日常の変化、最近の転居など；最近の投薬；身体検査／臨床評価、すなわち、粘膜の色、水分補給、姿勢、活動性／態度、身体状態、腹部の触診、直腸検査、動物の排便の観察、すなわち、しぶり腹、痛みの兆候、糞便の特徴など；臨床検査：糞便は直腸検査中に収集する、である。寄生虫の存在または出現は、直接塗抹標本及び硫酸亜鉛浮遊法を始めとする浮遊法、卵、幼虫、Ｇｉａｒｄｉａ、運動性原虫によって判定する。抜き出される臨床検査：登録前及び治療期間の最後におけるＣＢＣ／ＳＭＡＣ及び下痢パネル。Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｃｏｌｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ、イヌジステンパーウイルス、イヌコロナウイルス、イヌパルボウイルス２、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓアルファ毒素、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ属、Ｇｉａｒｄｉａ及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ属をスクリーニングするための下痢パネル。獣医師によって必要または妥当と判断される場合には、他の試験を実施してもよい。

イヌが本治験への組み入れ基準を満たす場合には、評価者は１日目用のスコアシートの記入及び１回目の投与を進める。評価者はまた、彼／彼女の自身の裁量で、必要ないずれかの他の薬剤の投与及び処方を行い、且つ当該の治療を併用薬の症例報告書に記録する。評価者はまた、２日目、３日目及び５日目にイヌのスコア付けを行う。イヌに１日２回、３日間（計６回）治療を行い、５日間観察する。各イヌについて、本治験は結果の如何にかかわらず５日後に終了する。各動物に対して、適切な治験終了症例報告書を完成させる。

離脱：治療スケジュールに従わないいずれの動物も、本治験から離脱させる。治療の過程において、例えば傷害などの、無関係の問題に見舞われたいずれの動物も、本治験から離脱させる。本治験からの離脱までまたは本治験の完了の時点のいずれか短い方までに記録されたデータが、本治験に対するデータ解析に用いられる。

有害事象：全ての有害事象をデータ収集シートに報告する。治験分担獣医師は、当該有害事象と割り付けられた治療との関連性について初期の判断を行う。

統計的方法：本治験は、急性下痢のイヌにおける、プラセボと比較した、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー ＳＰ ３０３の無作為化、二重盲検、前向き比較治験である。統計解析の目的は、イヌの下痢の臨床徴候の緩和における、被験製品の有効性及び安全性の確証を行うことにある。治験センターとは、同一のＰＩの管理及び監督下にある治療を施す施設として定義される。データの解析は、５群の下位群のそれぞれに対して、及び治験における母集団全体に対して行われる。

無作為化法：本治験を無作為化するために、ＳＡＳ ＰＲＯＣ ＰＬＡＮを用いて単一無作為化リストを作成する。この無作為化リストは、治験実施施設における割り付けバイアスを最小限に抑えるために、２を超えるサイズの置換ブロックで作成する。上記リストは割り付けられた治療に対する治療コードのみを表示する。緊急時に動物の盲検化を解除するために、各動物に対するコードブレークエンベロープを治験実施施設に発行する。全ての統計解析のために、治験センターをプールする。

有効性変数：本治験の主要有効性変数は、ベースライン及び投薬の１〜５日目に記録される獣医師による糞便スコア（７点の尺度で記録され、７が最悪の下痢症状）である。主要有効性評価項目は、各投薬日（１〜５日目）におけるベースラインの糞便スコアからの変化である。上記ベースラインの糞便スコアからの変化は、ベースラインの糞便スコアから治療期間中の糞便スコアを減じた値として計算され、すなわち、ベースラインのスコアからの正の変化は下痢症状の改善を示す。

副次的有効性変数：各動物について測定する副次的有効性変数としては、態度／活動性、水分補給、体温、１日当たりの排便回数、便の軟度、及び食欲が挙げられる。動物の態度／活動性、水分補給、食欲及び便の軟度は０〜３の尺度で測定し、３が最も重度の評価である。評価はベースライン時及び治療期間の１〜５日目に各動物について行う。体温（℃）はベースライン時及び治療の１〜５日目に測定する。副次的有効性変数は、各治療日（１〜５日目）における各変数のベースライン値からの変化である。

安全性変数：主要安全性変数：主要安全変数は、治療期間中に各動物について観察される有害事象である。被験体数の根拠：本治験は、イヌの下痢の治療におけるＳＰ ３０３／クロフェレマー化合物の前期相治験であり、仮説検定のための統計的な被験体数で行うものではない。

解析対象母集団：治療意図（ＩＴＴ）母集団は、本治験に登録され、少なくとも１回の被験薬の投与を受けた全ての被験者からなる。主要及び副次的有効性評価項目の解析は上記ＩＴＴ母集団に対して行われる。全ての安全性解析は上記ＩＴＴ母集団に対して行われる。

ベースライン及び人口統計学的特性の解析：ベースライン及び人口統計学的特性は、安全性解析対象母集団における全ての動物について要約される。連続変数は治療群別の要約統計量（平均値、中央値、被験体数、標準偏差、最小値及び最大値）によって表示される。カテゴリー変数は治療群別のカウント及び百分率によって要約される。

主要変数の解析：各時点（治療１〜５日目）で主要変数に対してα＝０．０２５の片側有意水準で、以下の仮説：Ｈ_ａ０：μ_Ｔ≦μ_Ｐ対Ｈ_ａ１：μ_Ｔ≧μ_Ｐ（但し、μ_ＴはＳＰ ３０３治療群のベースライン時糞便尺度スコアからの平均の変化であり、μ_Ｐはプラセボ群のベースラインの糞便尺度スコアからの平均の変化である。）を検定する。上記仮説を、治療群に関する項及びベースラインの糞便スコアを含む線形モデルを用いたＡＮＯＶＡ解析由来の治療効果に対するＦ検定を用いて、各時点において検定する。要約統計量（平均値、中央値、被験体数、標準偏差、最小値及び最大値）を各時点（治療１〜５日目）で治療群別に計算する。また、ベースラインの平均糞便スコアからの治療群の補正した変化を、各時点でＡＮＯＶＡモデルから計算する。

副次的変数の解析：副次的変数のそれぞれについて、治療群の項及び上記パラメータのベースライン値を含む線形モデルを用いたＡＮＯＶＡ解析を各時点で行う。要約統計量を各時点で治療群別に計算する。ベースラインの平均値からの治療群の補正した変化を、各時点でＡＮＯＶＡモデルから計算する。

安全性変数の解析：安全性解析に関して要約統計量を計算する。それぞれの動物について、全ての有害事象（ＡＥ）を登録から治験終了まで観察する。治療下で発現した有害事象を治療群別に要約する。治療下で発現した有害事象とは、当該事象が始まった日が動物に対する治療の初日またはそれ以降である有害事象である。有害事象が始まった日が判らない場合には、当該事象は治療下で発現したと見なす。解析に先立って、獣医学医薬規制用語集（ＶＭｅｄＤＲＡ）を用いて全ての有害事象（ＡＥ）をコード化する。これらのコード化された用語に基づいて、器官別大分類及び優先使用語を用いてＡＥを要約する。全てのＡＥを一覧表にする。

欠損値：主要評価項目及び副次的評価項目に対して実施される全ての統計解析について、ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃａｓｅ解析を行う、すなわち、欠損値は入力しない。また、本治験に際しては正式な中間解析は行わない。

実施例３
Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物（ＳＢ ３００）によるイヌの下痢の治療
この実施例は、下痢であって、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物 ＳＢ ３００による治療を受けたイヌにおける小規模治験を説明する。コロンビア国ボゴタの３ヶ所の小動物獣医診療所において、盲検化され、管理された治験を実施した。この治験の目的は、経口投与したＳＢ ３００の、治療を受けたイヌの下痢の臨床徴候を緩和する臨床上の有効性を評価することであった。この治験では、３群にブロック無作為化した４８頭のイヌを評価した。一つの群を約４ｍｇ／ｋｇ／回の投薬量のＳＢ ３００の腸溶性被覆錠剤によって治療し、第２の群をプラセボで治療し、第３の群を約４ｍｇ／ｋｇ／回の投薬量の、粉末の非腸溶性形態のＳＢ ３００によって治療した。上記試験動物は、体重が少なくとも２０ｋｇのオス及びメスの両方のイヌを含んでいた。これらの動物に１日２回、３日間（６回）投与を行い、５日間観察した。

治験に用いた被験物質は以下のとおりであった。
被験物質１：Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉからのＳＢ ３００抽出精製物；最小用量約４ｍｇ／ｋｇ；剤形：腸溶性被覆錠剤；１錠を１日２回。
被験物質２：Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉからのＳＢ ３００抽出精製物；最小用量約４ｍｇ／ｋｇ；剤形：食物の上にかけるための非腸溶性粉末形態、１日２回。イヌが食べない場合には、代わりに、上記粉末を少量の水に溶解し、注射器を用いて経口投与した。
被験物質３：プラセボ（有効成分であるＳＢ ３００製品を含まない剤形）。本治験を確実に盲検化するために、上記プラセボの５０％を錠剤として製剤し、５０％を粉末として製剤し、１日２回投与した。

本治験に適した動物及び本治験の治療の結果を評価するために、以下に示す１〜９の糞便（ｆｅｃａｌ）／便（ｓｔｏｏｌ）スコアリングシステムを用いて糞便の軟度を測定した。

スコア５以上のイヌを本治験に登録した。糞便スコアを本治験の１日目、２日目、３日目、４日目及び５日目の合計５日間、獣医が１日１回測定した。全てのイヌにＳＢ ３００に加えて「標準治療」を行った。かかる標準治療は実施例１に説明がある。主要臨床評価項目としては、糞便の軟度及び下痢の継続時間を含み、副次的評価項目としては、試験動物の安全性、脱水状態、及び態度／活動性を含んでいた。

以下の表は上記イヌの治療試験の結果を示し、該結果は、腸溶性被覆ＳＢ ３００による治療を受けた治療群とプラセボの投与を受けた群との間で、有意な１日目〜５日目の糞便スコアの減少があったことを示した（Ｐ＝０．０４１３、ＡＮＯＶＡ Ｆ検定）。

この実施例で説明する治験は、１日目と５日目との間の糞便スコアの減少に有意差があり、したがってＳＢ ３００は下痢の治療に有効であることを示していることを実証した。図１を参照されたい。本治験の結果は更に、腸溶性剤皮が、試験動物の治療に用いられたＳＢ ３００ Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の活性と関連することを示した。本治験の結果は、他の種類の下痢と比較して、分泌性／水様性下痢（小腸下痢）の治療に対する有効性を支持した。本治験から得られたその他の結論は、自己解決性の疾患は、１日１回よりも高い頻度でイヌを観察し、群間の違いを特定することが必要であること、及びデータの収集を管理するために、イヌを保護施設及び／または救済センターへ入院させるまたは限局化することが必要であることであった。

実施例４
Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を含有する咀嚼可能な固体経口製剤
腸溶性被覆ＳＰ ３０３微粒子（ビーズ）を含む、代表的な咀嚼可能な固体経口製剤をこの実施例に示す。イヌなどの動物へ投与するために、且つ本明細書に上述したように、上記製剤は経口的に与えられ、治療を受ける動物によって咀嚼され嚥下される。腸溶性被覆ＳＰ ３０３ビーズを含有する上記軟質の咀嚼可能な固体製剤は以下の成分を含み、且つ限定することを意図するものではない。

例示として、上記軟質の咀嚼可能な製剤は２．５ｇのイヌ用の軟質の噛み物である。上記ｏｍａｌａｓｓ成分は甘味料として用いられる乾燥糖蜜である。

本治験においてプラセボとして投与された咀嚼可能な固体経口製剤は、ＳＰ ３０３腸溶性ビーズ（有効成分）が存在しなかったことを除いて、上記製剤について列挙したものと同一の成分の全てを含有し、ｏｍａｌａｓｓ成分を２７１．８ｇの量で用いた。

本明細書の実施例で説明する治験において用いるための、Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー／ポリマー組成物（例えばＳＢ ３００またはＳＰ ３０３）を含む微粒子（ビーズ）の代表的な腸溶性製剤を提示する。


当業者は理解するとおり、上記腸溶性剤皮の目的は、有効成分（ＡＰＩ）、例えばＳＰ ３０３を胃の低ｐＨで残存させ、上記腸溶性剤皮が溶解し、有効成分が放出される腸へと滞りなく通過させることである。上記腸溶性被覆された有効成分の調製は、一般的には、
ステップ１：微結晶セルロース（ＭＣＣ）粒子を有効成分で被覆する。好ましくは、最低５０％の被覆を得る。
ステップ２：下塗りを塗工する。この下塗りはビーズ全体に大きな重量を加えるものではなく、腸溶性剤皮に対するＭＣＣ粒子の準備をする役割を果たす。
ステップ３：腸溶性剤皮（表面被覆）を塗工する。この腸溶性剤皮は、一般的には、当該粒子の３０〜４５％の重量増加を占める。
を含む、３ステッププロセスを含む。
上記プロセスの結果得られる最終的な腸溶性製剤については、塗工された薬物層（ｃｅｌｌｅｔｓ上のｗｇ）は５２．６％であり、塗工された下塗り（ｗｇ）は２％であり、塗工された腸溶性表面被覆（ｗｇ）は４０％である。

最終的なビーズ（粒子）の重量は約１ｇであり、その中で、上記有効成分は上記重量の約２３％を構成する。２３％という値を用いて、所望の用量を得るために最終的な製剤に添加する必要があるビーズの数を決定することができる。軟質の咀嚼可能な形態中の％表示ＡＰＩの目標範囲は１５％〜７０％の範囲である。場合によっては、該製剤中の上記％表示ＡＰＩを５０％に増加させる。

実施例５
はじめに
この実施例は、イヌの分泌性下痢に伴う臨床徴候の緩和に対する化合物ＳＰ−３０３の臨床上の有効性を評価した、無作為化し、盲検化した、２群の、多施設治験（Ｃａｎａ００１）の結果をまとめたものである。本治験で使用したＣａｎａｌｅｖｉａ^（商標）製品は、持続可能に採取されたＣｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ樹木から単離及び精製した、有効医薬成分であるクロフェレマー、ＳＰ−３０３のイヌに特化した製剤である。被験製品は、イヌの腸の運動性に影響を与えることなく、イヌの分泌性下痢すなわち水様性下痢、及びその急性形態、ならびに化学療法誘発性下痢、すなわちＣＩＤを治療するために開発された、経口用の、腸溶性被覆された、１日２回用の、牛肉風味の、クロフェレマー、ＳＰ−３０３の咀嚼可能な製剤である。ＳＰ−３０３製品は全身的には吸収されず、消化管で局所的に作用する。Ｃａｎａｌｅｖｉａ^（商標）は、イヌモデルにおいて少なくとも用量の５０倍で評価して有意な障害がなかったことから、安全である。

治験の目標及び概観
本治験の目的は、ＳＰ−３０３またはプラセボのいずれかへの３日間の暴露の間の、水様性下痢のイヌにおけるベースラインの糞便の軟度及び頻度からの変化の、治療群の差異を調べることであった。これは、法的規制を受ける重要な、イヌに対するＣａｎａｌｅｖｉａ^（商標）の治験に関して、ＦＤＡに治験設計を通知する評価項目の評価及び統計解析を画定することを目的とする概念実証研究であった。獣医師または熟練した獣医学技能者は、救済機関、保護施設を通じて及びクライアントである飼い主から得た動物を用いて、この盲検化され、無作為化され、プラセボ対照の、概念実証治験を５ヶ月間にわたって実施した。本治験においては、後述の糞便スコアチャートに記載される６ポイントの糞便形成のスコアに基づいて、３９頭のイヌを評価した。イヌは、４または５のベースラインの糞便スコアを有すると判定された場合に、治験に登録した。出血性下痢（すなわち、糞便スコア６）である及び／またはパルボウイルスの疑いがあるイヌは除外した。登録後、各イヌを拘束し、スコア確認の開始時に治療を施した。

治験プロトコル及びデータ収集
本治験に登録するためには、イヌは以下の組み入れ基準を満たす必要があった。すなわち、４または５の糞便スコア（粒子状物質を殆どまたは全く含まない水様性すなわち液状の便）、オスまたはメス、不妊化していないまたは不妊化した、２月齢〜１２年齢の、２ｋｇ〜４０ｋｇの体重の、及び任意の犬種または雑種である。本治験に関する除外基準は以下の通りであった。すなわち、治験分担獣医師の意見により、本治験への登録を妨げる他の疾病のあるイヌ；糞便スコアが３以下；出血性下痢である及び／またはパルボウイルスの疑いがあるイヌ；ならびに登録から７日以内に禁止される薬剤による治療を受けたイヌである。

イヌを２群の治療群の１群に１：１の比率で無作為に割り当てた。治療は、約２ｍｇ／ｋｇ ＢＩＤで経口投与した（実際には、体重２〜２０ｋｇのイヌについては４０ｍｇパックで、体重２０〜４０ｋｇのイヌについては２つの４０ｍｇパックで投与）ＳＰ−３０３（クロフェレマー）、（治療Ａ）、及びプラセボ（治療Ｂ）であった。治療の実施は、当該のイヌが、以下に示す糞便スコア尺度に基づいて、４（水様性、液状便）または５（重度の水様性下痢）と同等の便形成スコアの登録基準を満たした後に開始した。

身体検査、病歴（利用可能であった場合）、血液学（ＣＢＣ）、化学及び糞便検査を含むベースライン評価を各イヌについて実施した。保護施設のイヌについては、３日の治療日と１日の追加の経過観察日のそれぞれについて、１日当たり６回の糞便スコアの評価を行うことを計画した。診療所で登録されたイヌについては、下痢が解消された場合、イヌを４回の治療後に開放する場合があったため、データ収集はより少ない場合があった。したがって、保護施設のイヌに対する治療期間は、初回の治療（Ｔ_０）の後に始まり１０〜１２時間毎に施される治療で構成され、合計６回の治療が施された後に終了した。クライアントが飼うイヌの治療期間は、下痢が解消した場合には、第２の治療ブロック（すなわち、４回の治療）の後に治療を終了してもよいことを除いて、上記と同じであった。イヌは、その治験の期間、治験実施施設で飼い、水を与え、当該治験実施施設で提供する標準的な食餌を与えた。必要に応じて標準治療を行った。

各イヌを隔離し、そのイヌに、３×２４時間の治療期間（ブロック）の過程にわたって１日２回、合計６回の投与を行った。本治験によれば、治療ブロックとは、２回の治療が施される２４時間の期間として定義される。第１の治療ブロックは初回の投与（Ｔ_０）の時点で始まる。投与は１０〜１２時間の間隔で行った。前に述べたように、本治験に登録されたイヌは、ＳＰ−３０３（クロフェレマー）（治療Ａ）またはプラセボ（治療Ｂ）のいずれかに無作為に割り付けられたが、解析の目的のために、治験評価者は、当該の割り付けられた治療がＳＰ−３０３による治療またはプラセボによる治療の何れであるかについて盲検化されていた。

アセスメント及び評価項目の定義
糞便スコアリング評価項目は上記のチャートを用いて定義した。本治験においては、糞便スコアリング尺度の最低スコアは１（良好な形状の水分を含んだ便）であり、最高スコアは６（血性下痢）であった。イヌが予定された時間に評価の対象の便を残さなかった場合には、評価は「便なし」として記録することもできた。薬物治療データを用いて、被験物質の初回投与を時間ゼロ（ベースライン）として識別し、表示した。時間ゼロに先立つ最後の糞便評価がベースラインの糞便スコアであり、プロトコルによって、このスコアは４または５のいずれかである必要があった。治療の実施及び糞便評価は共に、初回の投与を基準とした時間を指定することができるように、日付及び時刻によって記録した。初回投与後の最初の２４時間のスコアをブロック１（１日目）に、２５時間〜４８時間のスコアをブロック２（２日目）に、４９時間〜７２時間のスコアをブロック３（３日目）にグループ化した。観測はブロック４（４日目）の７２時間〜９６時間も継続した。

評価者（獣医師または助手）は以下の毎日の評価を行った。すなわち、糞便スコアを、ベースライン時、ならびに３ブロックの治療期間及び観察期間中、上記に示した糞便スコアリングチャートを用いて４時間毎に得た。しぶり腹または排便の有無を問わない急な便意の発現が観察された場合にはそれを記録した。イヌの全般的な態度、活動性、水分補給の状態、食欲及び腹部触診に対する応答、ならびに体温を、本技術分野で用いられる尺度に従ってスコア付けした。

記録された糞便スコアから、形をなさない便が継続する時間、ＴＬＵＳを計算した。ＴＬＵＳは、初回投与／時間ゼロと最後の形をなさない便との間の経過時間として定義した。形をなさない便は３種の異なる方法で定義した。すなわち、（１）２、３、４、５または６の糞便スコア、（２）３、４、５、または６の糞便スコア、及び（３）４、５、または６の糞便スコアであった。イヌがベースライン以後に形をなさない便である糞便スコアを示さなかった場合には、ＴＬＵＳをゼロと同等と位置付けた。本治験においては、上記ＴＬＵＳの定義は初回投与後の７２時間以内の糞便スコアに限定し、この７２時間は投与期間の完了時である。急性水様性下痢の徴候が緩和されたイヌの割合を解析した。下痢の解消とは、ベースライン以後の任意の時点における、１または２の糞便スコアとして定義した。１または２のスコアが記録されなかったイヌは、下痢が解消しなかったと見なした。

別の探索的レスポンダー解析も検討した。ベースライン以後のそれぞれの日に対して、各イヌの糞便スコアを時間順に表示した。以下の指針を確立した。すなわち、（ａ）３、４、５、または６のスコアを軟便であると見なした、及び（ｂ）１もしくは２のスコアまたは１８時間排便がないことを良好な形状の便と見なした。上記スコアをこの枠組みの下で臨床的に検定し、ベースライン以後のそれぞれの日に、各イヌをレスポンダーまたはノンレスポンダーとしてコード化した。

本治験において検討した探索的評価項目は以下の通りであった。すなわち、
下痢の解消：本治験期間中の任意の時点で形をなす便（すなわち、スコア１または２）を得ることと定義される。
レスポンダー解析：本治験期間中の任意の２４時間の治療ブロック中に形をなす便（すなわち、スコア１または２）を得ることと定義される。治療期間及び観察期間中に得られる測定値。
治療ブロック：治療ブロックは２４時間の期間であった。本治験には３の治療ブロックがあった。第１の治療ブロックはＴ_０からＴ_２４まで続き、但し、Ｔ_０は最初の投与の時間である。また、最後の投与の１２時間後に始まり、２４時間まで続く観察ブロックもあった。

被験物質及び投与
本治験では、２種の被験物質、すなわち、活性薬物（ＳＰ−３０３）及びプラセボを用いた。両方の物質を腸溶性被覆（ＥＣ）ビーズとして製剤し、治験用獣医製品（ＩＶＰ）またはプラセボのいずれかに相当する２５０ｍｇのＥＣビーズが入ったパックに包装した。２５０ｍｇのＥＣビーズが入ったＩＶＰパックには４０ｍｇの活性物質、クロフェレマー（ＳＰ−３０３）が入っていた。活性薬物及びプラセボの各パックには、治療に固有のコードを割り当てた。ＩＶＰパックとプラセボパックとの区別は盲検化された。各パックに無作為化の目的で番号を表示した。治験実施施設に対して、各施設における各イヌの登録順に基づいてパックをイヌに割り付けるように指示した。ＩＶＰの最終的な製剤は、動物への使用に対して安全と考えられる成分から構成した。プラセボは、被験物質と同一の製剤成分からＳＰ−３０３有効成分を除いたものを含んでいた。

各一回分を、当該のイヌの体重に基づいて約２〜４ｍｇ／ｋｇで、グリニーズ ピルポケット（登録商標）アレルギーフォーミュラなどの（限定はされない）イヌ用のおやつ中に入れて経口投与した。イヌの体重が２０ｋｇ未満の場合には、１回の治療当たり一つの（１）パック、合計で六つの（６）パックを与えた。イヌの体重が２０ｋｇを超え４０ｋｇ未満の場合には、１回の治療当たり二つの（２）パック、合計で十二の（１２）パックを与えた。

糞便スコア解析
本治験では最初に４８頭のイヌのデータを収集した。すなわち、治療Ａ（ＳＰ−３０３）に対して２４頭のイヌ、及び治療Ｂ（プラセボ）のに対して２４頭のイヌである。４８頭のイヌの治験が完了した後に、スポンサーが、データを評価する意図で治験の盲検化された部分を停止することを決定した。評価項目パラメータに関する解析対象母集団は評価可能母集団（プロトコルによる）であり、試験を完了し、治療相及び観察相において、評価項目解析を行うのに十分な糞便スコア評価を受けた全てのイヌとして定義された。合計２６の治験実施施設が本治験に参加し、その中の２１施設が合計４８頭のイヌを登録した。登録された４８頭のイヌの中の３９頭が上記評価可能母集団に含まれていた。０６７、１２８、１３０、１４５、１４６、１７５、１９９、２０５、２０７と指定した９頭のイヌを、データ収集及び観察記録の信頼性が低いことに起因して、解析から除外した。したがって、合計３９頭のイヌを解析し、治療Ａ（ＳＰ−３０３）に対して２３頭、治療Ｂ（プラセボ）に対して１６頭であった。この解析に含まれていたイヌ００１は、データベースにベースラインの糞便スコアが記録されていなかった。当該の治験実施施設の注記には、「当該のイヌの糞便スコアは、週末はずっと４と５との間で変化していた。」とあった。このイヌに対する初回の投与は月曜日に行われており、したがってこの観察は治療前のものであった。

両方の治療群における平均でのベースラインの糞便スコアは４．２であった。解析において１頭のイヌのみがプロトコルによる登録要件を下回っていた。イヌ０３８は、初回の治療の直前にスコア３が記録されたが、糞便スコア４でプロトコルによって登録されていた。したがって、このイヌはベースラインのスコアは３で記録した。急性の水様性下痢の徴候が軽減されたイヌの割合を解析した。下痢の解消は、ベースライン以後の任意の時点での１または２の糞便スコアとして定義した。１または２のスコアの記録がないイヌは、下痢が解消されなかったと見なした。

形をなさない便が継続する時間（ＴＬＵＳ）
治療Ａを受けたイヌは治療Ｂを受けたイヌよりも、３種の方法全てを用いたＴＬＵＳの中央値が短い。ログランク検定を用いてカプラン・マイヤープロットを比較したところ、統計学的有意性に近づいたが、上記方法の２種、方法１及び方法２については交差しなかった。形をなす便のより厳しい要件の下で、治療Ａがより良好に機能するように思われた。

下痢の解消
ベースライン以後の任意の時点での１または２の糞便スコアであるとの定義を用いたところ、ＳＰ−３０３（治療Ａ）を用いて治療した２３頭中２１頭（９１．３％）のイヌに応答があった。このことは、１６頭中８頭（５０．０％）が応答した、プラセボ（治療Ｂ）を用いて治療したイヌと対照をなす。これらの応答率は、プラセボ（治療Ｂ）と比較して、ＳＰ−３０３による治療（治療Ａ）を受けたより大きな割合のイヌに応答があったとの結論を支持する。フィッシャーの正確確率検定による両側ｐ値は０．００７３であった。

臨床レスポンダー評価
「評価項目の定義」の下での上記の枠組みの下で、それぞれの日に、各イヌをレスポンダーまたはノンレスポンダーとしてコード化した。イヌ２０２（治療Ｂ）は、データがまばらで判定を下すことができないことから、解析に含めなかった。同様の理由で、イヌ００１は２日目において評価に値しなかった。

図２及び後述の表に示すように、治療Ａ（ＳＰ−３０３）を受けたイヌに対する応答は、治療Ｂ（プラセボ）を受けたイヌに対する応答よりも、全ての治療ブロックの間において少なくとも１０％大きかった。レスポンダーとは、形をなす便があり、その後毎日、形をなさない便がなかったイヌである。フィッシャーの正確確率検定を用いたところ、第３の治療ブロックの後である観察期間（４日目）に有意差が生じた。経過観察を欠いたため、４日目の被験体数は他の日の約半分であった。

全てのイヌが治療期間中に６回の投与を受けた。しかし、全てのイヌがブロック３を超えて（すなわち、観察相の間に）評価を受けた訳ではない。糞便スコアがＴ_０から７２時間を超えて報告されたイヌのみを観察相（Ｔ_７３〜Ｔ_９６）の統計解析に含めたことに留意する必要がある。

日別に層別化したコクラン・マンテル・ヘンツェル検定によって、治療Ａを受けたイヌに対する臨床反応が治療Ｂを受けたイヌに対する臨床反応よりも大きかったという証拠が提示された（ｐ＝０．０１３）。フィッシャーの正確確率検定を用いたところ、治療期間後である４日目に有意差が生じた（ｐ＝０．０４６）。しかし、毎日の評価のそれぞれには同一のイヌが現れたため、これに代わるモデルも検討した。ロジスティック反復測定モデルが適合し、このことは各イヌの中での相関関係の説明となる。このモデルは０．０５９のｐ値によって、治療期間後にわたる有意性を示唆した。

実施した最後の観察を用いたところ、前進解析によって、治療Ａ及び治療Ｂについてそれぞれ、８３％及び５３％の応答が得られた。これにより、ｐ＝０．０７３のフィッシャーの正確確率検定による両側ｐ値が与えられた。しかし、オッズ比は４．２であり、これは０．７９のコーエンのｄ効果量に変換され、この値は大きいと見なされる。レスポンダー解析は、本治験の主要評価項目として機能することに成功した。

この解析は、曲線の分離の解析によって示されるとおり、イヌが下痢を起こさなかった日数よりも下痢が解消した日数の方が多いことによって、効果の持続性を実証している。フィッシャーの正確確率検定により、本治験の過程において、動物が水溶性下痢すなわち分泌性下痢の更なる原因に曝露される可能性があることが認知される。コクラン検定によって、治療ブロック１の間にレスポンダーであるいずれかのイヌは、治療ブロック２及びそれ以降の間にレスポンダーである可能性が高いことが認知される。

結論
本治験は、２群の治療群、ＳＰ−３０３及びプラセボに無作為に割り付けたイヌの、盲検法での有効性を評価した。任意の１または２と同等のベースライン以後の糞便スコアであるという下痢の解消の単純な定義によって、治療Ａ（ＳＰ−３０３による治療）が治療Ｂ（プラセボ）よりも優位にある（ｐ＝０．００７）との結論が支持される。７２時間以内で形をなさない便が継続する時間を比較することによって統計的有意性に近づいた。但し、形をなさない便とは糞便スコア３〜６として定義される。最後に、臨床上の判断ならびに１及び２の糞便スコア及び１８時間にわたって便がないことがレスポンダーであるとの判定基準を用いたところ、治療Ａは全ての日において優位性があり、４日目に有意性に近づいた。但し、４日目は終日全てのイヌに関して経過観察が利用不可であった。

また、臨床上の判断ならびに１及び２の糞便スコア及び１８時間にわたって便がないことをレスポンダーと見なすとの判定基準を用いたところ、治療Ａは全ての２４時間の治療期間において優位性があった。なお、観察相（治療後）全体を通じて全てのイヌに対して評価が利用できず、治験全体を通じたレスポンダーの割合の比較によって、治療Ａ、クロフェレマーが有意にあることが示された（ｐ＝０．０１３）。

本治験は、登録基準内で許容される全ての応募者及び水様性下痢の全ての原因を含んでいた。保護施設においては、観察時間をより長くし、総被験体数をより大きくできることが期待されることから、保護施設及び診療所の下位群を更に探すことが有益であろう。下痢の病因論、食餌、及び給餌パターンなどの他の下位群も同様に考慮してもよい。

本実施例に記載の治験から得られた結果は、ＳＰ−３０３による治療を受けたイヌでは９１％に本治験中に形をなす便があったのに対して、プラセボによる治療を受けたイヌでは５０％であり、ＳＰ−３０３による治療がプラセボよりも優位にあるとの結論を支持している。

本治験から得られた結果は、本明細書に上述したＳＰ−３０３の抗分泌特性及び作用機序を更に支持している。ＳＰ−３０３製品は腸内で局所的に作用し、全身的には最小限でしか吸収されない。ＳＰ−３０３製品は消化管の運動性を変化させることなく、正常に機能する腸のイオンチャネル及び電解質または液体輸送に有意な影響を及ぼさず、プラセボと異なる副作用がない。これらの特徴は、経口投与または他の投与経路により同時投与された化学療法薬の吸収及び／または代謝に対して影響を与えないことによってさらに強化される。ＳＰ−３０３は、腸管腔内の過剰なイオン及び水の流れを正常化することによって作用する。上記腸管腔への過剰なイオン及び水の流れは急性下痢の発現に共通する最後の段階であるため、ＳＰ−３０３（Ｃａｎａｌｅｖｉａ^（商標））は、ＣＩＤを始めとする原因の如何にかかわらず、イヌの急性下痢の効果的な治療を提供する。

本明細書において参照または引用した全ての特許、特許出願及び刊行物は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本明細書に援用される。

本明細書に記載の実施形態及び実施例は例証のためのものであり、それらに照らした種々の改変または変更が当業者に示唆されることとなり、本出願の趣旨及び範囲、ならびに添付の特許請求の範囲の範囲内に包含されることとなることが理解される。実施形態の実施のために好適な方法及び材料が本明細書に記載されてはいるが、本明細書に記載のものと同様のまたは等価な方法及び材料を、本発明及び記載された実施形態の実施または試験において用いることができることを理解されたい。

Claims (30)

1. 非ヒト伴侶動物の分泌性下痢すなわち水様性下痢の治療方法であって、該治療方法を必要とする前記動物に、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の水溶性プロアントシアニジンポリマーを含む腸溶性被覆または非腸溶性被覆組成物を、咀嚼可能であり風味付けされた固体剤形で、前記伴侶動物の前記下痢を治療するために有効な量で経口投与することを含む前記方法。
2. イヌ科の伴侶動物の化学療法誘発性下痢（ＣＩＤ）の治療方法であって、該治療方法を必要とする前記動物に、Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ由来の水溶性プロアントシアニジンポリマーを含む腸溶性被覆または非腸溶性被覆組成物を、咀嚼可能であり風味付けされた固体剤形中で、且つ前記伴侶動物の前記ＣＩＤを治療するために有効な量で経口投与することを含む前記方法。
3. 前記伴侶動物が子供または若齢の伴侶動物である、請求項１または２に記載の方法。
4. 前記伴侶動物が成体の伴侶動物である、請求項１または２に記載の方法。
5. 前記伴侶動物がイヌまたはネコである、請求項１、３、または４のいずれか１項に記載の方法。
6. 前記伴侶動物がイヌである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
7. 前記伴侶動物がネコである、請求項１、３、４または５のいずれか１項に記載の方法。
8. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が０．５ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇの量で投与される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
9. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が２ｍｇ／ｋｇ〜４ｍｇ／ｋｇの量で投与される、請求項８に記載の方法。
10. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が毎日２回、２ｍｇ／ｋｇの量で投与される、請求項９に記載の方法。
11. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が３日間投与される、請求項１０に記載の方法。
12. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が毎日２回、４ｍｇ／ｋｇの量で投与される、請求項９に記載の方法。
13. 前記伴侶動物が、分泌性／水様性下痢、急性下痢、突発性下痢、または化学療法誘発性下痢に罹患している、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
14. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の前記咀嚼可能な固体剤形が錠剤、丸剤またはカプセル剤である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
15. 前記咀嚼可能な固体剤形が軟質の咀嚼可能な固体形態である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
16. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物の前記咀嚼可能な固体剤形がビーフ風味である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
17. 前記咀嚼可能な固体剤形が、前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物を含有する高分子微粒子またはナノ粒子を含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
18. 前記高分子微粒子またはナノ粒子がｐＨ感受性である、請求項１７に記載の方法。
19. 有効成分としての前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーが、前記動物に、少なくとも２０ｍｇ〜５０ｍｇの総投薬量で投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
20. 有効成分としての前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマーが、前記動物に、４０ｍｇの総投薬量で投与される、請求項１９に記載の方法。
21. 前記伴侶動物の前記分泌性／水様性下痢もしくはＣＩＤに伴う症状または健康上の危険性が、脱水症状、電解質平衡異常、電解質喪失、腎不全、栄養失調、消化管の通過及び消化の変化、または感染症の危険性の増加の１あるいは複数を含む、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
22. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が、ＳＢ ３００、ＳＰ ３０３、クロフェレマー、及びＣ． ｌｅｃｈｌｅｒｉ植物抽出物からなる群より選択される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
23. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物がクロフェレマーである、請求項２２に記載の方法。
24. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物がＳＰ ３０３である、請求項２２に記載の方法。
25. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物がＳＢ ３００である、請求項２２に記載の方法。
26. 前記用量が４０ｍｇ、１日当たり２回である、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の方法。
27. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が腸溶性被覆組成物である、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の方法。
28. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が非腸溶性被覆組成物である、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の方法。
29. 前記Ｃ． ｌｅｃｈｌｅｒｉプロアントシアニジンポリマー組成物が、錠剤、丸剤、カプセル剤または粉末として製剤される、請求項２７または請求項２８に記載の方法。
30. 前記下痢が、細菌感染、寄生虫感染、原虫感染、細菌感染、病気、疾患、膵炎、蠕虫感染、または食あたりの１または複数によって引き起こされる、請求項１または請求項５〜７のいずれか１項に記載の方法。