CN107106536A

CN107106536A - 治疗伴侣动物的腹泻的方法

Info

Publication number: CN107106536A
Application number: CN201680005408.5A
Authority: CN
Inventors: S·马尔蒂诺德
Original assignee: Jaguar Animal Health Inc
Current assignee: Jaguar Health Inc
Priority date: 2015-01-09
Filing date: 2016-01-08
Publication date: 2017-08-29
Also published as: US20180264061A1; AU2016205145A1; JP2018509382A; EP3242557A4; CA2972996A1; BR112017014750A2; CL2017001790A1; CO2017007823A2; EP3242557A1; MX2017009011A; RU2017127686A; KR20170103834A; WO2016112312A1

Abstract

本发明提供了利用治疗有效量的呈肠溶或非肠溶形式的来自秘鲁巴豆(Croton lechleri)的原花色素聚合物治疗年幼和成年非人伴侣动物诸如狗和猫的腹泻，特别是分泌性腹泻、水泻和化学疗法诱导的腹泻(CID)的方法和组合物。

Description

治疗伴侣动物的腹泻的方法

发明领域

本发明涉及，例如在伴侣动物诸如狗、猫和其它动物宠物中的各种形式的腹泻(诸如由不同病状、病理学或疗法引起的水泻)的治疗。治疗方法包括使用从植物巴豆属某些种(Croton spp.)或红厚壳属某些种(Calophyllum spp.)分离的原花色素(proanthocyandin)聚合物组合物的肠溶或非肠溶制剂和形式，或来源于其的胶乳、提取物或食品补充剂。更具体地，所述组合物在治疗由癌症治疗或疗法(化学疗法诱导的腹泻或CID)引起的或继发于所述癌症治疗或疗法的分泌性腹泻或水泻中是有效的，从而在减轻伴侣动物、特别是狗中腹泻的严重度和持续时间、以及增加它们对治疗的耐受性和从治疗恢复中是有效的。

发明背景

腹泻是伴侣动物诸如狗和猫的兽医办公室就诊的最常见原因之一，并且是到兽医急诊室就诊的第二大常见原因，然而还没有FDA批准的用于治疗犬科和猫科伴侣动物的抗腹泻或分泌性产品。在美国，每年据估计，兽医处理约600万例狗的急性和慢性水泻，其中约三分之二是急性水泻。

另外，截至2012年，美国约有7400万只猫。估计显示，兽医每年看约290万例猫的急性和慢性水泻病例，其中约三分之二为急性水泻。兽医通常用与用于狗的治疗相同的治疗(即抗生素、益生菌、饮食限制和被批准和配制用于人的产品(诸如洛哌丁胺(IMODIUM)和其它抗能动剂(Anti-Motility Agent))，以及吸收水的结合剂(诸如白陶土和果胶制剂(Kaopectate)和pepto-Bismol))来治疗猫的水泻。然而，目前的治疗方案是非常有限的，因为没有一种方法解决与水泻相关的水分损失。

分泌性腹泻，也称为水泻，是年幼和成年非人动物的主要病患和死亡原因，其特征在于体液和电解质通过肠道的损失，从而导致严重并通常危及生命的脱水。分泌性腹泻是由各种细菌、病毒和原生动物病原体引起的，也由其它非感染性病因学诸如溃疡性结肠炎、炎性肠病、环境和应激状况、胃肠道的癌症和肿瘤以及用于受累动物的化学疗法治疗引起。所有类型的腹泻病可能具有分泌组分。

目前没有直接解决伴侣动物诸如狗中与水泻相关的水分损失的FDA批准的抗-分泌剂。用于水泻的目前治疗包括口服再水化体液(rehydration solution)、或ORS、抗能动剂、吸收剂和抗生素。然而，这些方法中的每一种都有已知的限制。当ORS替代与腹泻相关的水分损失时，其通常可延长动物中腹泻的持续时间和扩大其严重度。通常通过便秘机制或通过暂时麻痹正常肠收缩或蠕动活动起作用的抗能动剂被禁止用于长期使用，因此不适合某些慢性腹泻病状。抗能动剂也可引起疼痛、痉挛和反弹腹泻(rebound diarrhea)。吸收剂只是尝试吸收肠道中的毒素，经常引起额外的疼痛和痉挛，并且不直接解决水分损失。抗生素试图治疗产生毒素的感染药，但不直接解决失水问题，并具有改变肠道菌群的风险，所述改变本身可引起腹泻。由于与抗生素抗性相关的问题，因此抗生素的普遍使用也已受到FDA日益严格的监督。

据估计，美国每年有超过23万只接受化学疗法治疗癌症的狗，超过25％的狗遭受化学疗法引发的腹泻或CID。严重腹泻是最常施用的化疗药物的常见副作用。如果不治疗，狗的CID可产生类似于人类经历的效果，例如体液和电解质损失，这可导致脱水、电解质失衡和肾功能不全；胃肠道运输和消化的改变引起的营养不良；以及增加的感染性并发症风险。如果CID严重度要求降低化学疗法的吸收、频率和/或剂量，则潜在的癌症治疗的功效也可能受到损害。从狗所有者的角度来看，CID在狗中存在可影响生活安排，以及每天清洁和照顾狗及其周围环境所需的成本、时间和注意力的重大实际意义。兽医有时会开出人类使用的药物，以努力治疗狗的CID；然而，缺乏关于功效或给药的临床资料的支持。另外，向狗施用潜在的令人不快的人制剂通常是困难的，并且可导致围绕动物实际摄取的量的额外的不确定性。

对于影响伴侣动物的几种类型的腹泻的可用和常用的治疗通常包括重要补液治疗(vital fluid replacement)和电解质补充以对抗或阻止体液和电解质损失。其它类型的治疗包括口服抗生素和非甾体抗炎药物的施用。取决于腹泻和/或其相关疾病或病状的原因、时间周期、严重度和病程，各种已知的治疗可能是有效的或可能是无效的，并且动物可能作出或可能没有作出足够或及时的反应，从而导致在许多情况下过早死亡。

因为腹泻及其相关病状对受累伴侣动物、其处理人员和照顾者的经济和人道影响如此之大，所以迫切需要替代性的、安全的和医疗上有效的以及具有成本效益的用于伴侣动物(特别地，诸如狗和猫)的腹泻及其相关症状的治疗和补救措施。本发明有利地解决了此类需要。

发明概述

本发明提供了治疗在非人伴侣动物的各种形式的腹泻(诸如水泻、普通急性水泻或化学疗法诱导的腹泻(CID))的方法。在实施方案中，所述伴侣动物是狗和猫。在一个具体实施方案中，所述方法涉及治疗狗的多种形式的腹泻，例如水泻、普通急性水泻(generalacute watery diarrhea)或CID。所述方法涉及向有此需要的动物施用药学上可接受的组合物，其包含来自秘鲁巴豆(Croton lechleri)的水溶性(aqueous soluble)原花色素，其中以治疗动物的腹泻的有效量配制所述组合物。在一个方面，所述方法有效治疗受累动物的与腹泻相关的症状；所述症状可包括但不限于脱水、体重减轻和电解质损失。这些症状中的一些症状可以迅速表现出来，对伴侣动物具有长期的健康影响，甚至导致死亡。在一个实施方案中，腹泻是间歇性腹泻。在一个实施方案中，腹泻是急性腹泻。

在一个方面，本发明的方法可用于治疗有此需要的伴侣动物的普通急性水泻，以及由进行此类治疗的动物的化学疗法治疗引起的腹泻。虽然狗特别顺从于本文所述的方法，但使用此类方法来治疗其它伴侣动物或宠物诸如猫、小型啮齿类动物(口袋啮齿类动物)的各种形式的腹泻(例如水泻)，不旨在特别地限制。在其各个方面，所述方法可用于治疗和/或预防伴侣动物(例如狗和猫)以及处于患有腹泻病状的风险中的动物的各种形式的腹泻。

在一个方面，本发明的方法可用于治疗正在接受各种类型的癌症的治疗或疗法的伴侣动物(特别是狗)的化学疗法诱导的腹泻(CID)。平均而言，狗的癌症很常见，特别是在老年动物中。例如，50％的十岁以上的狗经常在某些时候发展成为癌症。狗的典型的癌症包括但不限于恶性淋巴瘤，例如在淋巴结中；皮肤癌和肿瘤，诸如肥大细胞肿瘤；乳腺肿瘤；软组织肉瘤；黑色素瘤和骨癌，例如骨肉瘤和骨瘤。通过更好地照顾伴侣动物和宠物，动物的寿命增加，并且可以更容易地检测和治疗癌症。本发明的组合物和方法用于腹泻的治疗，所述腹泻与伴侣动物(诸如狗)的癌症疗法和治疗例如化学疗法或放射治疗(取决于癌症类型)相关。

目前的方法和抗腹泻产品通常通过使肠腔中的离子和水的流动正常化来起作用，所述离子和水的流动的失调是水泻表现出来的共同的最后一步。因此，此类方法和产品可以有效地解决水泻，不管原因如何。另外，调节离子和水的流动的通道，包括称为CFTR和CaCC的通道(本文所述的胃肠组合物和产品的作用部位)通常存在于哺乳动物中。因此，预期本发明的组合物和产品有效地防止伴侣动物(诸如典型的温血非人宠物)的水泻的衰弱和破坏性后果。

在本发明方法的实施方案中，组合物、制剂或产品是药学上可接受的秘鲁巴豆原花色素组合物，其是肠溶或肠溶包衣制剂。在其它实施方案中，药学上可接受的秘鲁巴豆原花色素组合物是非肠溶制剂。在该方法的实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是SB 300、SP 303或克罗来姆(crofelemer)。在一个实施方案中，非人动物是年幼或幼龄(少年(幼[态]的))伴侣动物。在一个实施方案中，非人动物是成年伴侣动物。本发明的方法对于伴侣动物的种类没有特别限制，可以包括例如本文所述的犬科、猫科和啮齿类动物的物种。在具体实施方案中，伴侣动物是狗、小狗、猫或小猫。应当理解，如本文中所用，术语‘组合物’和‘制剂’可以互换使用。

在上述方法的其它实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物或包含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物以至少1mg至500mg的量或5mg至250mg的量或10mg至200mg的量向动物施用。在一个实施方案中，以20mg至100mg的治疗剂量向动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物或包含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物。在一个实施方案中，以20mg至50mg，例如40mg的治疗剂量向动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物或包含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物。在一个实施方案中，以40mg的治疗剂量向动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物或包含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物。在一个实施方案中，以60mg至100mg(例如80mg)的治疗剂量向动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物或包含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物。在一个实施方案中，以80mg的治疗剂量向动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物或包含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物。在该方法的其它实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物以用选自口服电解质、奶、奶替代物、生理盐水或水的液体重构的粉末的形式施用。在该方法的其它实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物以大丸剂(诸如丸剂、片剂或胶囊剂)的形式施用。在一个实施方案中，口服施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。在一个实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物呈可咀嚼型固体形式，例如丸剂、片剂、胶囊剂或其它固体形式，将其向有需要的伴侣动物，特别是狗和猫口服施用。在一个实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物在软的可咀嚼型制剂(在本文中也被称为软的可咀嚼型形式)中提供，其被口服施用于有需要的伴侣动物，特别是狗和猫。通常将可咀嚼型固体形式或软的可咀嚼型形式调成例如牛肉味、鸡肉味或鱼肉味，例如以适合其所被施用于的动物的口味。可将可咀嚼型固体剂型或软的可咀嚼型固体剂型模制成适用于和适合于对伴侣动物口服施用的形状、大小和/或构型或构象。另外，可在动物的食物或饮料中施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

在该方法的实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物可呈特别适用于正在进行治疗的动物，诸如狗的多种形式。例如，组合物可呈凝胶、糊剂或凝胶糊剂的形式，其可通过局部施用，例如在动物口腔的顶部向动物施用。在一些情况下，含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物包括药学上可接受的成分和/或以提供具有可由动物咀嚼、切咬或啃咬的稠度或质地的产品的方式制备。在特定情况下，含秘鲁巴豆原花色素聚合物的组合物包括药学上可接受的成分和/或以提供具有可咀嚼型的稠度或质地的产品(例如软或半软的可咀嚼型制剂)的方式制备或配制。在一些情况下，可将组合物包含在递送装置中，该递送装置可以是注射器，诸如无针注射器。在该方法的一些实施方案中，呈各种形式的组合物包含含有秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的聚合物微粒或纳米颗粒。在一个实施方案中，所述聚合物微粒或纳米颗粒是pH敏感性的。

在一个具体的实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物，在本文中也称为秘鲁巴豆原花色素聚合物制剂或产品，是用于治疗狗的腹泻诸如CID的口服施用的可咀嚼型的经调味的制剂。在一个具体实施方案中，可咀嚼型制剂是固体形式，诸如但不限于片剂、丸剂或胶囊剂。在一个具体实施方案中，可咀嚼型制剂是软或半软的固体形式，并且可以容易地被动物咀嚼和吞咽。在一个具体实施方案中，可咀嚼型固体形式含有调味剂或调味物质，以便对其所被口服施用于的动物更可口。在一个实施方案中，可咀嚼型固体形式是牛肉味的或被调成符合待治疗的特定动物的品味(爱好)的风味，诸如家禽味、鱼肉味或蔬菜味。在另一个实施方案中，以0.1mg/kg至50mg/kg的剂量量；或以0.5mg/kg至30mg/kg的量；或以0.5mg/kg至25mg/kg的量每天口服一次或两次含有秘鲁巴豆原花色素聚合物制剂的可咀嚼型固体形式例如SP 303或SB 300。其它更具体的剂量范围可以为0.1mg/kg至0.5mg/kg；或0.1mg/kg至0.3mg/kg；或0.2mg/kg至0.3mg/kg；或从0.4mg/kg至1.5mg/kg；或从0.8mg/kg至10mg/kg；或1mg/kg至4或5mg/kg。其它剂量可以为约0.1mg/kg；0.2mg/kg；0.3mg/kg；0.4mg/kg；0.5mg/kg；0.6mg/kg；0.7mg/kg；0.8mg/kg；1mg/kg；2mg/kg；3mg/kg；4mg/kg；或5mg/kg等，这取决于伴侣动物的体重或体重。在一个具体的实施方案中，可咀嚼型固体形式是秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的牛肉味的软的可咀嚼型形式，将其每天两次以2mg/kg或4mg/kg的剂量向动物诸如犬科动物口服施用。在另一个实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物施用三天。在另一个实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是SP-303。

举例来说，狗的重量通常可在2kg与80kg之间。对于狗，秘鲁巴豆原花色素聚合物或聚合物组合物(例如SP 303或SB 300)的剂量可以为0.5mg/kg至25mg/kg，更特别为2mg/kg，并且可根据动物的体重加以适当地调整。对于不同重量和体重的其它伴侣动物，可相应地调整剂量。

在一个实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物进行肠溶包衣以在肠中靶向释放活性药物成分(API)。在一个实施方案中，活性成分或API是克罗来姆，例如SP 303。在一个实施方案中，活性成分以1mg至100mg；或10mg至50mg的剂量，或以20mg至50mg的剂量，或可选地，特别是对于较大的狗(大于20kg)，以60mg至100mg的剂量存在。在一个具体实施方案中，剂量为40mg的活性成分，在替代实施方案中，特别是对于较大的狗，剂量为80mg的活性成分。在一个实施方案中，对于约20kg的伴侣动物诸如狗，剂量为10mL的以4mg/mL的量存在的含有肠溶包衣秘鲁巴豆原花色素聚合物微粒(例如，40mg活性SP 303)的重构混悬剂。参见例如实施例1、2、3和5。在一个实施方案中，肠溶包衣产品包含含有秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物或秘鲁巴豆的植物提取物的微粒或纳米颗粒。在一个实施方案中，肠溶包衣产品包含含有秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物作为活性物质的微粒或纳米颗粒，所述组合物为SP 303，用于以每天(或每剂量，每天2次)2mg/ml/天的量给药，持续3天。

在一个实施方案中，所述方法通过以有效量提供来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物来控制或治疗所治疗的伴侣动物的腹泻，来在受累伴侣动物中改善肠健康和控制腹泻。在一个实施方案中，原花色素聚合物是来自秘鲁巴豆的制剂、组合物或提取物。在一个实施方案中，来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物是含有原花色素聚合物或低聚物的更高度纯化的组合物，诸如本文所述的克罗来姆或SB 300组合物。在一个实施方案中，原花色素聚合物是来自秘鲁巴豆的制剂、组合物或植物提取物。在一个实施方案中，来自秘鲁巴豆的制剂，组合物或植物提取物为糊剂或凝胶的形式。在一个具体实施方案中，所述组合物或制剂包含含有肠溶包衣SB 300或SP 303的珠粒(纳米粒或微粒)，并将其向有需要的动物口服施用。在一个具体实施方案中，所述组合物或制剂是可咀嚼的产品，并且包含含有肠溶包衣SB 300或SP 303的珠粒(纳米粒或微粒)。在一个具体实施方案中，将肠溶包衣产品每天一次或每天两次向狗或伴侣动物口服施用。在具体实施方案中，将肠溶包衣产品每天两次向狗或伴侣动物口服施用，持续一天或多天，例如2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天或两周。在一些实施方案中，将产品口服施用连续多天，诸如至少连续2天或3天。在具体实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的肠溶包衣微粒诸如克罗来姆(例如，SP 303)以2mg/kg/天(或每天两次)，或4mg/kg/天(或每天两次)的剂量向伴侣动物诸如患有腹泻的狗口服施用。在一个实施方案中，施用所述剂量，持续3天。

在一个实施方案中，如本文所述，在用于治疗伴侣动物，特别是狗的化学疗法诱导的腹泻(CID)的方法中提供了秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物、制剂或产品。在一个具体的实施方案中，所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是肠溶包衣的，包含纳米颗粒或微粒，并且呈可咀嚼型固体口服剂型。

附图简述

图1显示如实施例3中所述的研究中测定的每日粪便得分的条形图。在x轴上指示天数；在y轴上指示每日粪便得分。在图中按日计的条的分组中的每一个分组中，三个条中的第一个(最左边的条)表示“肠溶包衣”治疗药物；三个条中的第二个(中间的条)表示“非肠溶包衣”治疗药物；三个条中的第三个(最右边的条)表示安慰剂治疗。

图2显示根据实施例5中所述的研究的百分比反应者对比治疗日的图。治疗A表示接受克罗来姆(crofelemer)SP-303产品的治疗组，而治疗B表示在研究期间接受安慰剂的治疗组。如图2所示，SP-303治疗臂(治疗组)中的反应在所有天数中比安慰剂治疗组大至少10％。根据研究，反应者是随着日子一天天过去具有成形粪便而随访没有未成形粪便的受试狗。

发明详述

腹泻是粪便的频率、流动性或体积的增加。其是伴侣动物诸如狗和猫中的常见问题，其特征在于持续时间(急性对比慢性)、解剖位置和病理生理机制。最常见的病理生理机制之一是由肠上皮细胞中的异常离子转运引起的分泌性腹泻。狗和猫的分泌性腹泻的最常见原因是导致细胞内环腺苷单磷酸(cAMP)、环鸟苷单磷酸(cGMP)、钙和/或蛋白激酶的变化的异常介质，其反过来导致氯离子分泌增加。此类介质包括但不限于内源性肠激素或神经肽、炎症细胞产物、细菌内毒素、轻泻剂、脂肪酸、胆汁酸和各种类型的药物。

化学疗法诱导的腹泻(CID)可在正在进行用于各种类型的癌症的治疗或疗法的伴侣动物(特别是狗)中发生。用于治疗癌症的药物、药剂和化合物可导致腹泻作为副作用，类似于接受癌症或肿瘤治疗的人的情况。说明性地，腹泻可由以下引起：对伴侣动物(诸如狗)的癌症(诸如淋巴瘤；恶性淋巴瘤；皮肤癌和肿瘤，例如肥大细胞肿瘤；乳腺肿瘤；软组织肉瘤；黑色素瘤；和骨癌，例如骨肉瘤和骨瘤)的化学疗法或放射治疗。伴侣动物诸如狗的某些品种，特别是遗传上近亲交配的那些品种或某些物种的那些品种，具有高于特定癌症正常发生率的发生率。因此，需要本发明的治疗方法和组合物的癌症可以是基于遗传的，但也可以是由一种或多种环境或自发原因引起的。本发明的组合物和方法提供了与用于伴侣动物(诸如接受化学疗法或放射治疗的狗)的癌症治疗和疗法相关的腹泻的治疗。

本文所述的抗腹泻治疗方法和组合物不限于与特异性癌症类型或原因相关的CID，并且在治疗或预防源自化学疗法和癌症治疗的各种类型、形式以及组合的腹泻中可以是有利的。各种化疗药物可用于治疗伴侣动物诸如狗中的各种类型的癌症。药物可以单独使用或组合使用，并且可能导致腹泻，即在24小时内水样便的排便。许多相同的化学治疗剂用于治疗人患者的癌症，也可能引起腹泻。可与在进行癌症治疗的犬科物种中引起腹泻相关的化学治疗药物的实例包括但不限于放线菌素D、L-天冬酰胺酶、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰胺、阿糖胞苷、多柔比星、洛莫司汀、甲氨蝶呤、米托蒽醌、长春碱、长春新碱。最常用的抗癌药物包括L-天冬酰胺酶、卡铂、环磷酰胺、多柔比星和长春新碱。

多药物方案经常用作狗的化学疗法治疗方案。已经在狗中用于癌症治疗的一些药物组合举例说明性地包括长春新碱/L-天冬酰胺酶/环磷酰胺/多柔比星/甲氨蝶呤/泼尼松龙；长春新碱//多柔比星；多柔比星/环磷酰胺/长春新碱/泼尼松龙；长春新碱/L-天冬酰胺酶/环磷酰胺/多柔比星/泼尼松龙；长春新碱/环磷酰胺/多柔比星；多柔比星/环磷酰胺；环磷酰胺/长春新碱/泼尼松龙/L-天冬酰胺酶/多柔比星；多柔比星/卡铂(骨肉瘤)；泼尼松龙/L-天冬酰胺酶/长春新碱/环磷酰胺/多柔比星/放射线(化学放射疗法)。

被批准专门用于狗的两种化学治疗药物包括磷酸托西尼布(toceranibphosphate,PALLADIA)，一种被批准用于治疗2级或3级肥大细胞肿瘤的酪氨酸激酶抑制剂；和马赛替尼(KINAVET-或MASTIVET)，一种被批准用于治疗不可切除的犬肥大细胞肿瘤的酪氨酸激酶受体抑制剂。

不希望受理论限制，在犬科动物中，化学疗法治疗中使用的细胞毒性药物对胃肠(GI)道中的分裂细胞的直接作用通常在开始治疗后1至5天(偶尔长达10天)内引起不良效应。典型的模式包括第1天的厌食症，其次是第2-3天时的呕吐和/或腹泻。需要进行对症治疗以减轻与腹泻相关的脱水作用。此类治疗通常涉及静脉内液体、电解质、止吐药、肠道保护剂、酸度调节剂和/或抗生素的施用。如果GI毒性导致上皮损伤，则存在脓毒症和嗜中性粒细胞减少症的更大风险，因为肠粘膜成为对细菌移位不太有效的屏障。

目前，市场上还没有有效治疗伴侣动物诸如狗和猫的腹泻而不论病因如何的具有抗分泌性能的产品。目前，对症治疗的主要目标包括恢复和维持体液及电解质平衡、饮食调整以及向受累动物施用抗微生物药物和驱肠虫药物(在有必要的话)。鉴于与化疗药物施用有关的不良影响，本发明的制剂和方法提供了需要的、有利的和有效的药物种类，其减少与腹泻和严重腹泻相关的电解质和体液损失。

如本文中所用，通过本发明的方法治疗的伴侣动物是驯养的非人动物，也称为宠物，所述动物通常且主要用于人的公司、社会或情感享受和/或疗法，或保护，并且通常不会用于表演、生产、研究或农业价值。除非另有说明，否则本文中术语“动物”的使用是指被当作人的伴侣或宠物的许多不同物种的非人温血哺乳动物。举例说明性地且非限制性地，本发明的方法可用于治疗和/或预防伴侣动物诸如狗；猫；兔子(养兔)；雪貂；啮齿类动物/口袋啮齿类动物诸如小鼠、沙鼠、仓鼠、毛丝鼠、非实验室大鼠和豚鼠中的各种形式的腹泻。作为一般的指导而非限制，某些类型的伴侣动物的体重可能落入以下近似范围：狗(2kg-100kg)；猫(2kg-20kg)；兔(0.4kg-5kg)；雪貂(0.5kg-2kg)；沙鼠(40g-130g)；仓鼠(50g-150g)；大鼠(200g-700g)；和豚鼠(100g-1.2kg)。在优选实施方案中，使用本发明的方法和产品治疗其腹泻的伴侣动物是狗。在另一个优选实施方案中，使用本发明的方法和产品治疗其腹泻的伴侣动物是猫。

在一个实施方案中，本发明提供的用于治疗狗的各种类型的水泻的制剂和产品通过使动物的肠腔中的离子和水流动正常化而在水泻表现的最后生理步骤中有效地起作用(无论原因如何)。根据本发明，水泻的最佳治疗将直接解决水分损失而不引发便秘，影响正常的蠕动活动，或改变其它药物的正常身体吸收或肠道的正常生理功能。通过本发明的方法解决与水泻相关的水分损失，改善了狗的生活质量，并为狗所有者提供了附带益处。含有克罗来姆或来自秘鲁巴豆的植物提取物的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物以及本文所述的SB 300和SP 303组合物，提供了通过使肠腔中的离子和水流动正常化而发挥作用的产品，所述离子和水的流动的失调是水泻表现的共同的最后一步。另外，调节该离子和水流动的通道，包括作为本发明胃肠道产品的作用部位的CFTR和CaCC通道，通常存在于哺乳动物中。因此，此类产品可有效地解决水泻而无论原因如何，并且有效地防止伴侣动物中水泻的衰弱和破坏性后果。

鉴于腹泻在非人动物中的不愉快和衰弱作用，本发明的方法提供了治疗受累伴侣动物的腹泻的新手段。本发明的方法提供了利用有效量的来自巴豆属的种或红厚壳属的种的聚合原花色素组合物，或利用源自其的胶乳、提取物或食品补充剂植物提取物对例如狗和猫中由许多不同来源和原因引起的腹泻的治疗。鉴于患有腹泻和相关病状的家养伴侣动物缺乏此类治疗，因此利用来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物组合物或利用源自其的胶乳、提取物或食品补充剂植物提取物有效地治疗腹泻是有利的。

克罗来姆，例如下文描述的SP 303，是巴豆属的种诸如秘鲁巴豆的纯化提取物，其含有一种或多种具有强力抗分泌性质和独特作用模式的成分。根据本发明，克罗来姆及其形式用于治疗伴侣动物诸如狗和猫以及其它伴侣动物物种的腹泻。更具体地说，聚合原花色素组合物或纯化的提取物诸如克罗来姆的作用机制是通过抑制囊性纤维化跨膜传导调节蛋白(CFTR)氯离子通道和钙激活的氯离子通道(CaCC)两者。聚合原花色素组合物通过阻断氯离子通道分泌和伴随腹泻发生的高体积水分损失，从而使胃肠(GI)道中氯离子和水的流动正常化来起作用。

本发明提供了用于在年幼和成年非人伴侣动物诸如狗中治疗因各种原因引起的水泻的衰弱问题的方法。该方法在有此需要的此类非人动物中有效地减少和/或减轻水泻或CID。特别地，所述方法涉及伴侣动物的由许多导致腹泻的因素引起的腹泻，特别是分泌性腹/水泻的治疗。例如，在成年和年幼伴侣动物中，动物可因单独的或与其它感染因子、疾病或环境条件组合的感染(诸如细菌感染、病毒感染、寄生虫/原生动物感染(贾第虫属(Giardia)))、环境条件、胰腺炎、化学疗法诱发的治疗、饮食不慎、土壤和不健康污染物的摄入等而患腹泻。本发明还提供了高度适合于治疗年幼和成年狗的腹泻的制剂和组合物。“年幼”或“幼龄(少年(幼[态]的))”动物通常为1岁，或年龄在1岁以下，而“新生儿”动物通常为两周龄或更小。

本发明特别地涉及利用生理和药学上可接受的制剂和组合物治疗成年或年幼伴侣动物诸如狗的水泻、急性水泻或CID，所述制剂和组合物包含治疗有效量的止泻药，其包含获自巴豆属某些种，优选秘鲁巴豆(C.lechleri)的原花色素聚合物。原花色素聚合物组合物也可获自红厚壳属某些种，特别是红厚壳(Calophyllum inophylum)。在一个具体实施方案中，药学上可接受的组合物包含来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物。在一个具体实施方案中，原花色素聚合物是在肠道中受保护的珠粒，包括肠珠(包括SB 300或SP 303)。

狗的化学疗法诱导的腹泻(CID)的治疗

在一个具体的实施方案中，本发明的方法和产品提供了狗的化学疗法诱导的腹泻(CID)的必要治疗。严重腹泻是最常施用的化疗药物的常见副作用。如果不治疗，狗的CID可以产生类似于人经历的效果，例如体液及电解质损失，其可导致脱水、电解质失衡和肾功能不全；胃肠道运输和消化改变引起的营养缺乏；并增加感染性并发症的风险。如果CID严重度要求降低化学疗法的吸收、频率和/或剂量，则潜在癌症治疗的功效也可能受到损害。兽医有时会开出人使用的药物，以努力治疗狗的CID；然而，缺乏关于功效或给药的临床资料的支持。另外，向狗施用潜在的令人不快的人制剂通常是困难的，并且可导致围绕动物实际摄取的量的额外的不确定性。化学治疗药物的类型和药物组合的例子以及其施用后的效果已示于上文中。

在一些实施方案中，可将本文所述的方法、组合物和制剂预防性地提供给进行癌症的化学(包括放射)治疗的动物，以在伴随副作用和腹泻的症状表现和/或变得太严重之前减少、消除、缓和或除去所述伴随副作用和腹泻的症状。因为腹泻可在化学疗法治疗后1-5天或2-3天内跟着发生，因此可基于上述情况，以及由兽医人员斟酌决定，在动物接受化学疗法治疗之前在预定的时间向有需要的动物施用本发明的治疗方法、组合物和制剂，记住腹泻发病的一般时期。另外，可将本文所述的治疗方法、组合物和制剂与化学疗法治疗一起提供，或在动物接受化学疗法治疗的当天提供。另外，还可在腹泻发作后，例如在出现症状之后尽快施用所述治疗方法、组合物和制剂，以抵抗不良效应，减少动物的电解质及体液损失和/或恢复动物体系中的正常电解质平衡、水分及体液平衡。应当理解，有需要的动物可以每天接受本发明的组合物和制剂一次或多于一次，例如每天两次、三次、四次或更多次，无论前述施用是在一种或多种化疗药物施用之前、与其相伴/在同一天进行，还是在所述化疗药物施用后进行。

为了治疗狗的CID，本发明提供了特别为狗设计的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物、制剂或产品。此类适合犬科动物口味的产品构成肠溶包衣秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物，所述组合物为被调味的(例如牛肉味)、可咀嚼型的，优选软的可咀嚼型固体形式，向有需要的动物口服施用其以用于治疗CID。在一个实施方案中，每天两次向有需要的动物施用所述产品。如本文所述，固体口服剂型的稠度和/或调味剂不旨在是限制性的。秘鲁巴豆原花色素聚合物治疗产品具有已证明的抗分泌作用机制；其在肠道中局部作用，并被最低限度地全身性吸收。另外，其不改变胃肠动力，对发挥正常功能的肠道离子通道和电解质或体液运输没有显著影响；并且没有与安慰剂不同的副作用。这些特性通过其对口服或通过其它施用途径施用的共施用的化疗药物的吸收和/或代谢缺乏影响得到进一步增强。不期望受理论的束缚，本发明的产品通过使肠腔中的过量离子和水的流动正常化来起作用。过量的离子和水流入肠腔是水泻表现的共同的最后一步。因此，所述产品为此可有效地治疗与CID相关的水泻而无论原因如何。例如，在口服给药2或3天后，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物(例如克罗来姆或SP 303)与ORS一起可显著减少水泻，如通过水样便排便的减少以及腹泻、紧急状况和脱水的减少的持续时间所证明的。

在涉及狗的CID治疗的一个具体实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是可咀嚼型固体产品，优选地，被调为牛肉味以用于治疗狗的腹泻诸如CID的软的可咀嚼型固体产品。在一个实施方案中，以2mg/kg的量(更具体，每天两次)口服施用软的可咀嚼型产品。将含有秘鲁巴豆原花色素聚合物的产品配制成肠溶包衣微粒，作为用于在狗肠内靶向释放的活性成分。在一个实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物活性成分是克罗来姆或SP303。在一个具体实施方案中，活性成分以40mg的剂量存在。在一个实施方案中，肠溶包衣产品包含含有秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物或秘鲁巴豆的植物提取物的微球或纳米颗粒。

一般来说，根据本发明方法“治疗”动物是指实现或获得期望的生理和/或药理作用，无论是预防性的、治疗性的还是两者。如本文中所用，“医治”或“治疗”可指改善、预防、抑制、逆转、弱化、缓解、消除、最小化、压抑、减轻、减少、减弱、稳定、根除、治愈或消除疾病或病状的不良效应或疾病或病状的进展或恶化。例如，成功的治疗可包括减轻疾病或病状的一个或多个症状，尽管不一定是疾病或病状的所有症状，或弱化疾病或病状的症状或进展。治愈或消除动物的疾病或病状是实施本发明方法的最佳结果。根据本方法治疗伴侣动物可以是治疗性或预防性的。

根据本发明，对有此需要的动物的治疗通常涉及使用或施用有效量或治疗有效量的优选来自巴豆属某些种(特别是秘鲁巴豆)的原花色素聚合物或原花色素聚合物组合物(肠溶性的或非肠溶性的)。有效量是指在施用或递送至动物中时在动物受试者中诱导所需反应的组合物等的量(数量)。最佳地，有效量在动物中在不良影响或细胞毒性不存在，或几乎没有或实际上没有不良影响或细胞毒性的情况下产生治疗效果。或者，与有效量相关的任何不良影响最佳地被所获得的治疗益处超过。

本发明的治疗方法涉及改善、预防、抑制、逆转、弱化、缓解、消除、最小化、压抑、减轻、减少、减弱、稳定、根除、治愈或消除腹泻和/或不良地影响年幼和成年伴侣动物的健康、生长和生存能力的其相关症状。在一个实施方案中，腹泻是分泌性腹泻/水泻。此类腹泻可以是动物的胃肠道(GI)疾病的临床体征；其还可反映消化系统外的原发性疾病，诸如影响大肠或小肠的病症。本文所述的方法还适用于治疗伴侣动物中的感染诸如细菌感染引起的腹泻，所述伴侣动物可具有通过参与其发病机制的不同机制引起腹泻(例如渗透性腹泻、分泌性腹泻、偶发性腹泻或炎性和感染性腹泻)的共病病状或病症。在一个实施方案中，年幼或成年伴侣动物可患有与结肠衬里的炎症诸如结肠炎或急性结肠炎相关的腹泻，其可由肠的感染或炎症引起。

其它形式的腹泻的治疗

渗透性腹泻与肠内水的吸收相关，其取决于溶质的充分吸收。如果过量的溶质保留在肠腔内，则水将不会被吸收，从而导致腹泻。渗透性腹泻通常由吸收不良的底物(例如碳水化合物或二价离子)的摄入，或由任何类型的吸收不良(诸如不能吸收某些碳水化合物)导致。当水至肠腔内的分泌超过吸收时，发生分泌性腹泻。在正常条件下，大量的水分泌至小肠腔中，但大部分的该水在到达大肠之前被高效地吸收。

分泌性腹泻可由动物对来自某种类型的细菌的毒素(肠毒素类)(诸如霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的霍乱毒素和大肠杆菌(E.coli)的不耐热毒素)的暴露导致。由于此类微生物的毒素强烈激活腺(嘌呤核)苷酰环化酶，这导致隐窝肠细胞内的环AMP的细胞内浓度的持续增加，因此此类微生物引起大量腹泻。这种增加又导致氯化物通道的长时间打开，这促成水从隐窝分泌，从而允许不受控制的水分泌。这些细菌毒素还可影响肠神经系统，导致独立的水分泌刺激。

炎性和感染性腹泻可由因微生物或病毒病原体而引起的肠上皮破裂导致。通常，通过构成胃肠屏障的多种机制来保护消化管的上皮免受损伤。然而，胃肠屏障可被破坏并导致腹泻。上皮的破坏不仅导致血清和血液渗漏至管腔中，而且通常与吸附性上皮的显著破坏有关。当这种情况发生时，水的吸收变得非常低效，从而导致腹泻。经常与感染性腹泻相关的病原体包括细菌，诸如大肠杆菌，弯曲杆菌属(Campylobacter)和沙门氏菌属(Salmonella)；病毒，诸如轮状病毒(rotaviruses)、冠状病毒(coronaviruses)、细小病毒(parvoviruses)和诺罗病毒(norovirus)；和原生动物，诸如球虫属的种，隐孢子虫属(Cryptosporium)和贾第虫属(Giardia)。另外，免疫系统对肠中的炎性病状的反应极大地促成了腹泻的发展。刺激活化的白细胞以产生和分泌刺激分泌的炎症介质和细胞因子。因此，分泌组分被强加并加剧炎性腹泻。此外，由白细胞产生的活性氧种类可以损害或破坏肠上皮细胞，所述细胞被营养物和水的吸收所必需的刷状缘酶和转运蛋白中通常缺少的未成熟细胞替代。因此，渗透性(吸收不良)腹泻的组分为受累伴侣动物提供了另外的病理学和问题。

在某些情况下，伴侣动物的腹泻由感染细菌的入侵和非感染因素的组合导致。通常，年幼或成年伴侣动物的腹泻的非感染性原因被认为是可使或促使动物对感染剂易感和引起腹泻的原因。无论动物腹泻的原因是感染性的还是非感染性的，体液从肠的吸收都被改变，并且危及生命的电解质失衡可发生。受累动物会失去体液，迅速脱水，并遭受电解质损失和酸中毒。虽然感染剂可对动物的肠道造成初步的损害，但动物由水泻(严重腹泻)造成的实际死亡通常是脱水、酸中毒和电解质损失的结果，这可能难以以足够的量在足够的时间内补充。因此，本发明的方法和制剂适用于治疗各种形式的腹泻，例如分泌性腹泻/水泻和CID，以及腹泻的症状，诸如脱水和电解质损失，以努力减少和/或消除腹泻，防止伴侣动物更严重的脱水或甚至死亡。

获自植物提取物的原花色素和单宁

原花色素是缩合单宁的类型，其在大量植物中被发现，并且被分类为可水解的或缩合的。在传统医学中用于腹泻的治疗或预防的许多植物中包含单宁，特别是原花色素(参见，例如，Yoshida等，1993,Phytochemistry,32:1033；Yoshida等，1992,Chem.Pharm.Bull.,40:1997；Tamaka等，1992,Chem.Pharm.Bull.,40:2092)。

原花色素由至少两个或更多个可具有相同或不同单体结构的单体单元组成。单体单元(通常称为“无色花色素”)通常是单体类黄酮化合物，其包括儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素(没食子儿茶精)、表没食子儿茶素(表没食子儿茶精)、黄烷醇、黄酮醇、黄烷-3,4-二醇、无色矢车菊素和花青素。因此，聚合物链基于不同的结构单元，产生聚合物原花色素的大量变型和大量可能的异构体(Hemingway等，1982,J.C.S.Perkin,1:1217)。类黄酮(黄碱素)(flavonoid)3-醇单元的较大聚合物在大多数植物中占主体，并且通常具有高于2,000道尔顿(Da)的平均分子量，包含6个或更多个单元(Newman等，1987,Mag.Res.Chem.,25:118)。

原花色素聚合物和原花色素存在于各种各样的植物中，特别是具有木本生长习性的那些植物(例如，巴豆属的种和红厚壳属的种)。许多不同的巴豆属树的种，包括南美洲特有的Croton sakutaris、Croton gossypifolius、Croton palanostima、秘鲁巴豆、树皮红唇巴豆(Croton erythrochilus)和拟龙血巴豆(Croton draconoides)，产生被称为墨西哥紫檀(Sangre de Drago)或“血竭(Dragon’s Blood)”的红色粘稠胶乳树液。红色粘稠胶乳因其药用性质而闻名。例如，美国专利第5,211,944号描述了从巴豆属的种分离水溶性原花色素聚合物组合物。(也参见，Ubillas等，1994,Phytomedicine,1:77)。在美国专利第5,211,944号中描述了从红厚壳分离水溶性原花色素聚合物组合物。

在一个实施方案中，来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物或其组合物是克罗来姆。克罗来姆(CAS 148465-45-6)是具有不同链长度的寡聚原花色素，源自秘鲁巴豆(一种大戟科的树，其在亚马逊在公平的贸易工作实践下可被持续收获)的血竭。其具有为约1900Da至约2700Da的平均分子量。包含克罗来姆的单体包括儿茶素、表儿茶素、没食子儿茶素(没食子儿茶精)和表没食子儿茶素(表没食子儿茶精)。克罗来姆的链长范围为约3个至约30个单元，平均链长为约个7或8个单位。克罗来姆具有化学式：(C_15·nH_12·n+2O_6.5·n，其中n＝单元数)，分子质量为860-9100g/mol(约2500Da)。克罗来姆的抗分泌作用机制涉及靶向和抑制两种不同的肠氯化物通道，即作为cAMP刺激的Cl^-通道的囊性纤维化跨膜调节剂传导(CFTR)通道和钙激活的氯化物通道(CaCC)，如例如，由Tradtrantip,L.等，2010,“Crofelemer,an Antisecretory Antidiarrheal Proanthocyanidin OligomerExtracted from Croton lechleri,Targets Two Distinct Intestinal ChlorideChannels”,Mol.Pharmacol.,77(1):69-78)报导的。下面显示克罗来姆的一般结构。在所述结构中，结构的R位上的H表示原花色素；结构的R位上的OH表示原翠雀素(原翠雀定)。

根据本发明的一个实施方案，在治疗方法中将克罗来姆或包含克罗来姆的药学上可接受的制剂或组合物用作来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物。

在一个实施方案中，SP 303(一种来自秘鲁巴豆的寡聚原花色素，(也称为克罗来姆))是来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物，或者包含SP 303的药学上可接受的制剂或组合物，其适用于本发明的治疗方法。SP-303(R.Ubillas等，1994,Phytomedicine,1:77-106)主要由纯化的原花色素寡聚物(-)-表没食子儿茶素(表没食子儿茶精)、(+)-没食子儿茶素(没食子儿茶精)、(-)-表儿茶素和(+)-儿茶素组成，并且适合用于肠溶和非肠溶制剂和组合物(用于在本文所述的治疗方法中施用)。

在另一个实施方案中，SB 300(一种来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物提取物)是来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物，或者包含SB 300的药学上可接受的制剂或组合物，其适用于本发明的治疗方法。SB 300，如例如由Fischer，H.等，(2004,J.Ethnopharmacol.,93(2-3):351-357)所述，提供天然产物提取物，其特别适用于肠溶和非肠溶制剂和组合物，并且在本文所述的治疗方法中具有高度功能性和成本效益。

用于本发明治疗方法的包含来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物的药学上可接受的组合物可从秘鲁巴豆获得(例如，如属于Shaman Pharmaceuticals，Inc.的WO 00/47062(其内容通并入本文)中所述的)，并被配制为食物或膳食补充剂或营养制剂。

在其它实施方案中，用于本发明的方法的组合物包含获自巴豆属的种或红厚壳属的种的生胶乳，或获自巴豆属的种或红厚壳属的种的提取物，其不专门是聚合的原花色素聚合物组合物。示例性提取物描述于Persinos等，1979,J.Pharma.Sci.,68:124和Sethi,1977,Canadian J.Pharm.Sci.,12:7中。

在一个实施方案中，以本领域已知的多种剂型用肠溶包衣或基质配制来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物(参见，例如，WO 00/47062和美国专利第7,441,744号和第7,323,195号，其内容并入本文，并且如下文中简要描述的)。在另一个实施方案中，原花色素聚合物是没有肠溶包衣或基质的制剂，来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物的肠溶和非肠溶形式例如SB300或SP 303均旨在用于本发明的方法。

原花色素聚合物组合物和制剂的制备

根据本发明的有效治疗分泌性腹泻的原花色素聚合物组合物由无色花色素的单体单元组成或包括无色花色素的单体单元。更具体地，该组合物由具有2个至30个类黄酮单元，优选2个至15个类黄酮单元，更优选2个至11个类黄酮单元，最优选平均7至8个类黄酮单元的原花色素聚合物组成(数均分子量为约2500Da)。原花色素聚合物组合物优选溶于水溶液。优选用于根据本发明的方法是来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物；此类秘鲁巴豆原花色素聚合物可呈药学上可接受的组合物的形式。

优选通过本领域已知的任何方法从巴豆属的种(即，秘鲁巴豆)或红厚壳属的种分离或纯化用于本发明的原花色素聚合物组合物的实例。例如，通过美国专利第5,211,944号或Ubillas等(1994,Phytomedicine,1:77-106,在本文中称为SP 303)(所述两者均通过引用并入本文)中公开的方法从巴豆属的种或红厚壳属的种分离原花色素聚合物组合物。美国专利第7,556,831号和第8,067,041号(实施例2)中描述了其它分离方法，所述美国专利的内容并入本文。作为WO 00/47062公开的PCT申请PCT/US00/02687(其内容并入本文)也公开了制备从巴豆属的种或红厚壳属的种分离的原花色素聚合物组合物的方法和原花色素聚合物膳食补充剂的肠溶制剂，以及它们的制备方法。用于从秘鲁巴豆分离原花色素聚合物(例如克罗来姆)的另一种说明性方法见于美国专利第7,341,744号和第7,323,195号(其内容明确地并入本文)。如上所述，来自秘鲁巴豆的寡聚原花色素聚合物的SP 303和SB 300纯化形式适用于本发明的治疗方法。

在一个实施方案中，原花色素聚合物组合物通常可通过以下方法(诸如美国专利第7,341,744号(其内容并入本文)中提供的)分离。将从秘鲁巴豆植物收集的胶乳与纯水(优选一份胶乳对两份纯水)混合。使胶乳溶液中的任何不溶物质沉降，例如通过将混合物在4℃下放置过夜(12小时)。将上清液从残余物中泵出并用短链醇诸如正丁醇提取。提取优选进行多次，诸如三次。每次提取后，弃去醇相并保留水相。浓缩水相，例如，使用具有1kD截止膜的超滤装置。该膜可以是低蛋白结合纤维素膜，或可选地，可使用聚丙烯、特氟隆或尼龙膜。使用的膜应与丙酮相容。超滤的目的是从材料中除去水分。

然后将来自超滤的渗余物浓缩至干，例如使用约37℃(±2℃)的盘式干燥器。随后将干燥的材料溶解在水中，然后在阳离子交换柱(例如，CM-琼脂糖凝胶柱)和尺寸排阻柱(例如，LH-20柱)上进行色谱分离。在优选的两个柱系统中，将材料在CM-琼脂糖凝胶上运行，然后在一系列LH-20柱上运行。具体来说，将溶解的材料装载至阳离子交换柱上，然后用纯水洗涤。原花色素聚合物材料用丙酮水溶液(优选30％丙酮)从阳离子交换柱洗脱，从而将原花色素聚合物材料装载至尺寸测量柱(sizing column)上。将尺寸测量柱与阳离子交换柱断开，然后用丙酮水溶液(优选45％丙酮)将材料从尺寸测量柱上洗脱出来。收集级分并例如在460nm的波长处用UV检测器监测。将含有原花色素聚合物材料的级分合并并浓缩，例如通过使用例如1kD截止膜(如上文中针对色谱步骤之前的超滤步骤所描述的)的超滤进行浓缩。然后可使用合适的干燥方法(诸如，但不限于，旋转蒸发器)，在约37℃(±2℃)的温度下将渗余物浓缩至干。其它合适的干燥方法包括但不限于盘式干燥和喷雾干燥。美国专利第7,341,744号的实施例10提供了另外的非限制性的制备包含原花色素聚合物的组合物的方法，其可根据本发明来使用。用于分离适用于本发明方法的富集的原花色素聚合物提取物的详细方案描述于如上所述的WO 00/47062中。

治疗方法及应用

本发明涉及治疗年幼和成年伴侣动物的腹泻，尤其是由各种致病性和非致病性原因(例如病患或疾病、胰腺炎、环境条件、细菌、寄生虫、原生动物、病毒、感染、蠕虫或蠕虫感染、饮食不慎、CID等)导致的水泻的方法。所述方法包括以有效地治疗腹泻的量向需要此类治疗的伴侣动物施用药学上可接受的组合物，所述组合物包含来自巴豆属的种和红厚壳属的种的原花色素聚合物。在优选实施方案中，原花色素聚合物来自巴豆属的种，即秘鲁巴豆。治疗腹泻可包括减轻动物腹泻的严重程度和持续时间。治疗腹泻还可包括提增强在进行治疗的动物的存活力，例如通过减少或消除动物的脱水。在一个实施方案中，腹泻是分泌性腹泻或水泻。用来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物治疗患腹泻的动物导致改善动物的整体健康，使得它们的天然免疫系统可以在整体健康维持和防止其它或次要问题(从而降低发病率和死亡率)中起作用。

另外，本发明的方法还包括预防或降低已暴露于或怀疑已暴露于可导致腹泻的病状(条件)或病原体的年幼和成年伴侣动物的腹泻的发病率或严重程度的方法。例如，当已知伴侣动物已经接触或被怀疑已接触另一具有腹泻或引起腹泻的病患或感染的动物或宠物接触时，可向已经接触或可能已经接触患病或被感染的动物或其粪便或体液的伴侣动物施用本发明的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物，以防止腹泻疾病或至少降低所述疾病或其症状的发病率或严重程度。

在本发明的一个实施方案中，所述方法涉及治疗患有水泻或CID的伴侣动物，包括成年动物和年幼动物，所述伴侣动物已经接触或被怀疑已经接触带来引起伴侣动物的腹泻病状的风险的一个或多个其它动物。在实施方案中，所述方法涉及治疗重量(但不限于)达40kg、50kg或60kg或重量平均为20kg的伴侣动物或宠物。

根据本发明的方法，可使用来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物(例如SB 300)，使用克罗来姆(例如，SP 303)或源自秘鲁巴豆的植物提取物治疗年幼和成年伴侣动物，持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天等。可连续数天或间歇地(诸如每隔一天、每隔两天、每隔三天、每隔四天一次等)向动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物。在一个实施方案中，将秘鲁巴豆原花色素聚合物以每天一个或两个剂量向伴侣动物施用，持续连续两天或三天。本发明的方法提供了利用来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物或其组合物对患有腹泻特别是水泻或处于患有前述疾病的风险中的伴侣动物的治疗，所述组合物在动物的肠道中提供了足够量的原花色素聚合物及其适当分布，以治疗腹泻和/或其症状，并最佳地治愈动物的腹泻。

在本发明的腹泻治疗方法的一个实施方案中，向有此需要的伴侣动物口服施用如本文所述的来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物的固体口服剂型，包括可咀嚼型制剂，尤其是软的可咀嚼型制剂。

在本发明的腹泻治疗方法的一个实施方案中，以1至50mL诸如10mL的体积向年幼或成年动物(或暴露于或被怀疑已暴露于引起腹泻的病状(条件)或试剂的那些动物)口服施用来自秘鲁巴豆的原花色素聚合物的制剂的重构混悬剂。举例来说，可以以2mg/kg的剂量每天两次，持续3天(或6个治疗剂量)向20kg的狗施用10mL体积的含有40mg秘鲁巴豆原花色素聚合物的口服混悬剂。

在一个具体实施方案中，可在剂型例如凝胶剂、糊剂或凝胶糊剂或可咀嚼型(例如硬或软的可咀嚼型)固体剂型或混悬剂制剂中提供包含源自秘鲁巴豆的植物提取物的制剂或组合物SB 300或SP 303，可以每天两次，持续3天(优选连续3天)向年幼或成年伴侣动物口服施用所述制剂或组合物。在一个具体实施方案中，所述制剂包含含有肠溶包衣SB 300或SP 303的珠粒(纳米粒或微粒)，并且用于向动物口服施用。在具体实施方案中，剂型含有20至50mg特别地40mg的活性成分。所述方法和制剂尤其适用于在被治疗的患有腹泻的伴侣动物中在短时间内(例如少于一周或少于两周)使粪便形成正常化；缓解体重减轻；以及减少支持性护理成本、补液疗法诸如口服补液。

根据所描述的方法，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物减少穿过肠上皮细胞的氯化物通量，并减少至肠腔内的体液运动，这导致与与分泌性腹泻相关的体液损失和脱水。因此，本发明的药学上可接受的制剂和方法在治疗各种原因引起的分泌性腹泻/水泻的预防和治疗性应用中，尤其在预防伴随腹泻(例如分泌性腹泻/水泻)的脱水和电解质损失症状中是有用的。

在一个实施方案中，可用肠溶或非肠溶形式的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物(诸如SB 300或SP 303)预防性地治疗年幼和成年伴侣动物，以预防或降低水泻的衰弱作用及其相关症状例如脱水和体重减轻的风险或严重度。根据该处理方法，在合适的时间向年幼和成年伴侣动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物，以保护动物免受通常由感染、疾病和/或不良环境条件引起的腹泻爆发。还根据该治疗方法，在接受癌症治疗例如化学疗法之前的合适时间，预防性地向年幼和成年伴侣动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物，例如固体口服剂型(包括可咀嚼型形式)，以保护动物免受通常与此类癌症治疗相关或作为其后果的腹泻暴发。向伴侣动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物还可用于在疾病或感染爆发之前或期间，或在死于CID之前，相对于未被提供秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的动物，改善或降低动物患更重或严重形式的腹泻的风险。在实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物可以作为肠溶或非肠溶制剂提供，并且可以是例如SB 300或SP 303。

秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物施用的剂量和方案在实践者的测定技能范围内，并将取决于待治疗的动物的环境条件和健康。可在症状或疾病发作之前使用根据本发明的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物预防性处理动物，例如但不限于持续1至7天，1至6天，1至4天，1至3天，或1天或2天。治疗方案可包括每天一次或多次(例如，2次、3次或4次)向动物施用1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天或更多天的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物，所述方案根据需要或期望进行修改或调整。可定期观察和监测动物的健康改善和体重增加。

生理和药学上可接受的制剂

秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物可以以任何生理上、药学上或治疗上可接受的形式提供。药学上可接受的组合物可被配制来用于口服施用，举例说明性地如(但不限于)粉剂；晶体；颗粒；小颗粒，包括粒径为微米级的颗粒，例如微球和微胶囊；尺寸为毫米级的颗粒，尺寸为纳米级的颗粒，例如纳米颗粒；珠粒；微珠；微丸；丸剂；片剂；微片剂；压缩片剂或片剂研磨剂；模塑片剂或片剂研磨剂；以及在胶囊中，其是硬的或软的并且以粉末、颗粒、珠粒、溶液或混悬剂形式包含组合物。如上所述，此类片剂、丸剂、胶囊剂、软的可咀嚼型形式等可含有在向有需要的动物口服施用中提供适口性和/或方便性的风味添加剂。药学上可接受的组合物还可被配制来作为水性液体中的溶液或混悬剂、作为包含在凝胶胶囊内的液体、作为凝胶、作为糊剂或凝胶糊剂、作为可咀嚼型组合物、制剂或产品或作为任何其它方便的施用制剂用于口服施用。所述组合物可以是经调味的软的可咀嚼型形式。所述组合物可被配制来作为栓剂、灌肠剂或其它方便的形式用于直肠给药。还可将原花色素聚合物组合物作为受控释放系统来提供(参见，例如，Langer,1990,Science 249:1527-1533)。组合物可被配制来作为例如如WO 00/47062中所述的膳食补充剂或食品补充剂，以用于根据本发明向有此需要的动物施用。

药学上可接受的制剂还可包括任何类型的药学上可接受的赋形剂、添加剂、载体或媒介物。如本领域技术人员将理解的，可组合此类药学上可接受的成分、赋形剂、添加剂、载体或媒介物以产生上述可施用的形式或剂型。通过非限制性实例举例，可将稀释剂或填充剂诸如葡聚糖结合剂(dextrates)、磷酸二钙、硫酸钙、乳糖、纤维素、高岭土、甘露醇、氯化钠、干淀粉、山梨糖醇、蔗糖、肌醇、糖粉、膨润土、微晶纤维素或羟基丙基甲基纤维素添加至原花色素聚合物组合物中以增加组合物的体积。另外，可将粘合剂(诸如但不限于淀粉、明胶、蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糖蜜、乳糖、阿拉伯树胶、藻酸钠(海藻酸钠)、爱尔兰苔藓的提取物、潘瓦尔胶(panwar gum)、印度树胶、车前子壳粘胶、羧甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、硅酸镁铝和淀粉阿拉伯半乳聚糖、聚乙二醇、乙基纤维素和蜡)添加至制剂中以增加其内聚性质。另外，可将润滑剂，诸如但不限于滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、氢化植物油、聚乙二醇、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠、亮氨酸、碳蜡、月桂基硫酸钠和月桂基硫酸镁添加至制剂中。此外，可添加助流剂，诸如但不限于胶体二氧化硅或滑石，以改善粉末制剂的流动特性。还可添加崩解剂，诸如但不限于淀粉、粘土、纤维素、藻朊(藻胶)、树胶、交联聚合物(例如，交联羧甲基纤维素、交聚维酮和羟基乙酸淀粉钠)、硅酸铝镁、甲基纤维素、琼脂、膨润土、纤维素和木制品、天然海绵、阳离子交换树脂、藻酸(海藻酸)、瓜尔胶、柑橘浆、羧甲基纤维素或十二烷基硫酸钠与淀粉以促进制剂在肠中的崩解。

在一些实施方案中，除了另一种药学上可接受的媒介物以外，药学上可接受的制剂还含有具有肠溶包衣的原花色素聚合物组合物。在一个实施方案中，原花色素聚合物组合物可被直接压制成片剂或丸剂。片剂或丸剂可以不含赋形剂和具有药学上可接受的硬度和脆性，任选地具有润滑剂，例如但不限于硬脂酸镁，以及是肠溶包衣的。在另一个实施方案中，含有原花色素聚合物组合物的药学上可接受的组合物可选择地包括中和胃酸和/或酶或者具有防止胃酸分泌的活性的一种或多种物质。这些制剂可通过本领域已知的方法制备(参见，例如，Remington's“The Science and Practice of Pharmacy,”第22版，主编：Lloyd V.Allen,Jr.,Pharmaceutically acceptable Press,Royal Pharmaceuticallyacceptable Society,London,UK,2013；和美国专利第7,323,195号中描述的方法)。

在一个实施方案中，用保护原花色素聚合物和/或聚合物组合物免受胃环境破坏的物质配制原花色素聚合物组合物。对于此类保护，可将原花色素聚合物组合物包被肠溶包衣。肠溶包衣包括在胃中保持完整的那些涂层，但一旦其到达小肠，就会溶解并释放剂型的内容物。使用具有酸性基团的成分制备大量肠溶包衣，以使得在胃中存在的极低的pH即pH 1.5至2.5，酸性基团不被离子化，并且涂层保持为未离解的不溶形式。在较高的pH值下，诸如在肠的环境中，肠溶包衣被转化成离子化形式，其可被溶解以释放原花色素聚合物组合物。其它肠溶包衣在它们被小肠中的酶降解之前保持完整，并且其它肠溶包衣在确定的对水分暴露后分解，以使得涂层在通过进入小肠中之前保持完整。多种聚合物可用于制备肠溶包衣，并且可通过本领域已知的用于施用肠溶包衣的任何方法来实现肠衣对原花色素聚合物组合物的应用，如可以例如(但不限于)在美国专利第7,323,195号和第7,341,744号(通过引用并入本文)中找到的。

在另一个实施方案中，将原花色素聚合物组合物的药学上可接受的组合物配制为于硬壳明胶胶囊中提供的或悬浮于用于儿科施用的口服溶液中的肠溶包衣颗粒或粉末(直径为300-500微米的微球)。还可将肠溶包衣原体花青素聚合物组合物粉末或颗粒与食物或饮料混合，特别地用于向年幼动物或特别地患病动物施用。可使用本领域熟知的技术制备此类制剂。另外，原花色素聚合物组合物颗粒和粉末可使用本领域已知的任何方法来制备，所述方法是例如但不限于结晶、喷雾干燥或任何粉碎方法，优选使用高速混合器/造粒机，如例如(但不限于)美国专利第7,323,195号(通过引用并入本文)中描述的。

在其它实施方案中，原花色素聚合物组合物呈与适当赋形剂混合的水性混悬剂的形式。适用于制备水性混悬剂的赋形剂的非限制性实例包括悬浮剂，例如甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟基-丙基甲基纤维素、藻酸钠(海藻酸钠)、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂，其可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或环氧乙烷与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯或盐，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七碳乙烯氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，诸如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，诸如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性混悬剂还可含有一种或多种防腐剂，例如乙基或正丙基对羟基苯甲酸酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿斯巴甜。

适用于通过加水制备水性混悬剂的可分散性粉末和颗粒提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的原花色素聚合物组合物。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂通过上述的那些来举例。另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂也可存在于可分散性粉末、颗粒和最终的水性混悬剂中。

在一个实施方案中，原花色素聚合物组合物是凝胶或凝胶制剂。在一个实施方案中，原花色素聚合物组合物是糊剂制剂。在一个实施方案中，糊剂制剂含有源自秘鲁巴豆的纯化的植物提取物。在另一个实施方案中，糊剂制剂含有包含SB 300或SP 303的肠溶包衣珠粒。在一个实施方案中，糊剂制剂含有肠溶保护的SB 300珠粒。在一个实施方案中，凝胶或糊剂被包含或预加载在递送装置(诸如注射器，例如无针注射器或其它类型的涂药器或递送系统(尤其是用于口服递送的))中。凝胶或糊剂制剂特别适用于向年幼动物施用，但也适用于成年动物，尤其是病重的那些动物。在一个实施方案中，不将凝胶或糊剂包含在递送装置中，而将其施用于动物(特别是失能或病得太重以至不能进食或饮水的动物)口腔的顶部，从而避免口服或其它施用模式。在一个实施方案中，凝胶包含pH敏感性聚合物颗粒，诸如微粒或纳米颗粒，以允许活性化合物至细胞内的pH依赖性摄取和/或活性化合物在动物中的不同pH环境中的pH依赖性释放。用于生成包含原花色素聚合物组合物的粒剂(颗粒剂)和颗粒或其可压缩形式的方法是如本领域已知的和实践的，并且是如例如在美国专利第7,341,744号(其内容通过引用并入本文)中提供的。在一个实施方案中，制备用于口服递送并含有共聚物，诸如不同类型的泊洛沙姆和普朗尼克(普流尼克)(例如普朗尼克(普流尼克)F)的凝胶。

在其它实施方案中，原花色素聚合物组合物存在于糊剂制剂中(优选用于口服施用)，或存在于固体剂型，诸如软的可咀嚼型固体剂型中(优选用于口服施用)。通过举例的方式，口服糊剂可包含但不限于油性媒介物或赋形剂，诸如疏水性油性媒介物、碱化剂、调味剂和着色剂。疏水性油性媒介物的举例说明性和非限制性实例包括植物油、甘油三酯或聚丙二醇，以及增稠剂，例如硬脂酸铝。调味剂可包括例如本领域技术人员已知的水果香料(水果风味剂，水果调味剂)、薄荷香料(薄荷风味剂，薄荷调味剂)、蜂蜜香料(蜂蜜风味剂，蜂蜜调味剂)、牛肉风味剂(牛肉调味剂)、家禽风味剂(家禽调味剂)、鱼肉风味剂(鱼肉调味剂)、蔬菜风味剂(蔬菜调味剂)和其它天然及有机调味剂。着色剂可包括例如氧化铁或二氧化钛。或者，油性媒介物可以是液体石蜡或其它合适的蜡，包括增稠剂。在一个实施方案中，糊剂或固体制剂含有具有肠溶包衣SB 300或SP 303的珠粒，将其以2mg/kg的剂量或以4mg/kg的剂量施用于伴侣动物，诸如，例如狗或猫。更具体地，以2mg/kg的剂量，每天两次向动物施用含有肠溶包衣SB 300或SP 303微粒或珠粒的糊剂或固体制剂，持续一天、两天、三天或更多天。在一个实施方案中，每天2次向有些需要的伴侣动物施用含有肠溶保护的SB 303微粒的糊剂或固体形式。在一个实施方案中，将有效量的秘鲁巴豆原花色素聚合物作为活性成分配制成可咀嚼型形式，诸如片剂、丸剂或胶囊剂，将其口服施用，并调成适合伴侣动物可接受的口味。在一个实施方案中，肠溶包衣SP 303的微粒被配制成经调味的软的可咀嚼型组合物或产品，以用于向动物诸如狗口服施用。

在另一个实施方案中，油性混悬剂可通过将秘鲁巴豆原花色素聚合物作为活性成分悬浮在植物油(例如，花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油诸如液体石蜡中来配制。油性混悬剂可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。口服制剂可包含如上所述的甜味剂和调味剂以改善适口性。还可将药学上可接受的防腐剂，例如抗氧化剂诸如抗坏血酸添加至此类组合物中。

用于本发明的方法的秘鲁巴豆原花色素聚合物药物组合物也可呈水包油乳剂的形式。油相可以是植物油诸如橄榄油或花生油，或矿物油诸如液体石蜡或这些油的混合物。乳化剂的实例包括但不限于天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂和衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯，以及偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如，聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯。可将增甜剂、着色剂和调味剂包含在乳剂中。

还可用甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制含有秘鲁巴豆原花色素聚合物的糖浆和酏剂。此类制剂还可含有缓和剂、防腐剂以及调味剂和着色剂。药物组合物可呈无菌的、口服递送的或可施用的水性或油性混悬剂的形式。可根据本领域已知的方法使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂(例如上述那些试剂)来配制该混悬剂。无菌药物制剂还可以是无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌溶液或混悬剂，例如1,3-丁二醇溶液中的溶液。可用于制剂中的举例说明性、可接受的载体和溶剂包括水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。还可包括共溶剂，例如乙醇、丙二醇或聚乙二醇。另外，无菌不挥发油，例如任何温和的不挥发油诸如合成的甘油单酯或甘油二酯还可被常规地用作溶剂或悬浮介质，以及可被使用。另外，脂肪酸，诸如油酸等可用于可注射制剂中。

剂型和施用

在一个实施方案中，为了治疗伴侣动物(例如但不限于狗和猫)的水泻(包括CID)，原花色素聚合物组合物呈粉末(例如可复水(可重构)的粉末)形式。在另一个实施方案中，为了治疗伴侣动物(例如但不限于狗和猫)的水泻(包括CID)，原花色素聚合物组合物呈固体剂型，例如可咀嚼型固体形式。所述组合物可以是肠溶包衣的或不是肠溶包衣的。用于治疗的原花色素聚合物组合物的粉末形式采用液体诸如口服电解质、奶或奶替代物、水、生理盐水进行复水(重构)或混合，以产生液体形式或混悬剂。奶替代物通常是给予年幼动物以代替母乳的来自不同来源(例如，来自不同物种的奶、大豆或鸡蛋)的蛋白质和能量(乳糖和脂肪)的来源。可对可咀嚼型固体剂型进行调味(例如调成牛肉味、鸡肉味或鱼肉味)，以获得对于待治疗的动物的最佳适口性。

在一个实施方案中，将原花色素聚合物组合物的粉末形式在包(小包)中以单个剂量的形式(例如包装的剂型)提供，其中一定数量的单独包(小包)被提供用于治疗方案。在某些实施方案中，总包装剂型含有0.5mg至1000mg的原花色素聚合物组合物。在其它实施方案中，总包装剂量含有1mg至100mg、5mg至500mg、10mg至50mg、50mg至200mg、100至300mg、100至250mg或250mg的原花色素聚合物组合物。可以一起包装和提供的单个剂量的数量不旨在是限制性的，并且可包括例如1至20个包装的剂量；1至10个包装的剂量；2个、4个、6个、8个、10个、12个或更多个包装的剂量，以及上述数字之间的包装的剂量的数量，以用于使用、处理的功效，和商业功效。本领域技术人员将理解，由于组合物诸如SP-303或克罗来姆和SB-300的较高纯度的原因，因此需要在制剂中使用比SP-303更多(按重量计)的SB-300，以获得相同量的原花色素聚合物组合物的活性成分。SB-300通常具有按重计约67％的原花色素聚合物组合物，而SP-303具有较高的纯度，例如99-100％。

在一个实施方案中，通过在可咀嚼型固体剂型中提供化合物来向有此需要的患有腹泻的年幼或成年伴侣动物施用或递送秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。在一个实施方案中，直接在口中向患有腹泻或其症状的动物口服施用配制为大丸剂(即丸剂、胶囊剂、片剂或固体可咀嚼型形式)的原花色素聚合物组合物。在一些实施方案中，治疗方案包括考虑到伴侣动物的重量，施用0.05mg/kg至100mg/kg的剂量、或0.1mg/kg至100mg/kg的剂量或0.1mg/kg至10mg/kg的剂量、或0.5mg/kg至50mg/kg的剂量、或0.5mg/kg至25mg/kg的剂量、或1mg/kg至25mg/kg的剂量、或2mg/kg至10mg/kg的剂量或1mg/kg至5mg/kg的剂量以及介于其间的剂量增量的秘鲁巴豆原花色素聚合物产品。在一个具体实施方案中，治疗方案包括施用2mg/kg或4mg/kg的剂量的产品(例如，如由每有需要的动物一个剂量所包含的)，持续确定的一段时间，例如每天一次、两次或三次，持续1天、2天、3天或更多天。可将该产品以肠溶包衣或非肠溶包衣制剂提供给动物。可将该产品以完整剂量的部分提供给有此需要的动物，其中每天施用所述部分一次或两次或更多次。或者，可以每天一次或两次或更多次向有此需要的动物施用完整剂量。在一个具体实施方案中，治疗包括每天两次(20mg/剂量)向重量达约20kg的动物施用40mg的总剂量。对于较大的动物，大于20kg并且优选小于40kg的那些动物，剂量为80mg，每天给予两次。在一个实施方案中，计量的产品是以约2mg/kg的剂量或约4mg/kg的剂量存在的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物SP 303，其呈肠溶或非肠溶形式，例如重构粉末形式或固体剂型，包括可咀嚼型固体形式(任选地根据待治疗的动物的特定味道偏好而调味的)。在一个实施方案中，计量的产品是呈肠溶形式的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物SB 300或SP 303。在一个实施方案中，计量的产品是呈非肠溶形式的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物SB 300或SP 303。

向受累动物施用秘鲁巴豆原花色素聚合物产品的途径并不旨在是限制性的。举例说明性地，施用可以通过任何合适的，方便的或优选的施用途径，包括口服、经颊、经牙、牙周、通过食物来源(动物饲料)、营养来源或释放源、经耳、吸入、子宫颈内、肌内、皮下、真皮内、颅内、淋巴内、眼内、腹膜内、胸膜内、鞘内、气管内、子宫内、血管内、静脉内、膀胱内、鼻内、经眼、胆道灌注、心脏灌注、经脊髓、舌下、局部、经皮肤、阴道内、经直肠、经输尿管或尿道。在某些实施方案中，口服、经颊和食物和/或饮料补充剂是特别合适的途径。在一个实施方案中，产品是水性制剂，并且以浸液的形式，或直接从定向至食管腔的即用型(RTU)瓶提供给动物，以便更有效地到达动物的肠/肠道以获得最佳活性。在相关实施方案中，施用也可以通过包含在动物的常规或特殊饮食中，诸如在用于动物或伴侣动物的功能性食物中。在一个具体实施方案中，该产品是可咀嚼型经调味的固体形式，诸如片剂、丸剂、胶囊剂、微丸(pellet)或其它合适的固体、可口服施用形式。

剂量形式可包括但不限于口服、可注射、经皮肤、气溶胶(包括计量气雾剂)、可咀嚼型产品或微丸、胶囊剂、含包衣颗粒的胶囊、纳米颗粒或微丸、含延迟释放颗粒的胶囊剂、含有延长释放颗粒的胶囊剂、浓缩物、霜剂和增强霜剂、栓剂软膏、圆盘剂(discs)、敷料、酏剂、乳剂、灌肠剂、延长释放膜或纤维、气体、凝胶、计量凝胶、颗粒、延迟释放颗粒、泡腾颗粒、植入物、吸入剂、可注射脂质复合物、可注射脂质体、插入物或装置、延长释放插入物、宫内避孕装置(intrauterine device)、果冻(胶冻剂)、液体、延长释放液体、洗剂、增强洗剂、油、软膏、增强软膏、糊剂、锭片(锭剂,软锭剂)(pastilles)、微丸、粉剂、重构粉剂、延长释放粉剂、计量粉剂、溶液、滴剂、浓缩溶液、凝胶形成溶液/滴剂、海绵、喷雾剂、计量喷雾剂、栓剂、混悬剂、混悬剂/滴剂、延长释放混悬剂、糖浆剂、片剂/丸剂、咀嚼片/丸剂、含有包衣颗粒(纳米粒或微粒)的片剂/丸剂、延迟释放片剂/丸剂、可分散片剂/丸剂、泡腾片/丸剂、延长释放片剂/丸剂、口服崩解片剂/丸剂、胶带、糖锭/锭剂或其它形式。剂量可以作为固体、液体或混悬剂制剂、组合物、药学上可接受的制剂和组合物、生理上可接受的制剂和组合物提供，并且可包括本领域已知和使用的药学上和生理上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或媒介物。

对于口服给药，优选利用合适的载体等，以固体剂型包封和配制秘鲁巴豆原花色素聚合物产物或其组合物。合适的载体、赋形剂、稀释剂和媒介物的非限制性实例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐(海藻酸盐)、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、明胶、糖浆、甲基纤维素、甲基-和丙基羟基苯甲酸酯、滑石、镁、硬脂酸酯或盐、水、矿物油、食用油等。制剂还可包括润滑剂、润湿剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂、甜味剂和/或调味剂。可通过使用本领域熟知的方案和方法将组合物配制来在向动物施用后提供活性成分的快速、持续、延长或延迟释放。制剂还可包括减少蛋白水解降解和促进吸收的化合物或物质，诸如，例如表面活性剂。

如本领域技术人员将理解的，可以根据动物的近似重量、体重或身体表面积或要占据的体间隙和质量的体积来计算具体剂量。剂量还取决于由实施者选择的特定施用途径。本领域普通技术人员例如使用适当的测定和分析程序(诸如已针对某些化合物所描述的测定和分析程序(例如Howitz等，Nature,425:191-196,2003))，常规地进行确定用于治疗的适当剂量所需的计算的进一步改进。可基于标准剂量-反应研究确定精确剂量。用于治疗受累动物的治疗有效剂量可以通过滴定给予动物的活性产物的量至达到所需的治疗效果，同时使副作用降至最低来确定。

为了根据本发明的方法用于治疗年幼和成年伴侣动物的水泻或CID及其症状，以每天0.1至100mg/kg的范围的量，每天1次、2次或更多次地施用，特别地口服施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的治疗上可接受的形式。在其它实施方案中，该量的范围可以为约0.1至约25mg/kg/天，每天1次、2次或更多次；或约0.1至约10mg/kg/天，每天1次，2次或更多次；或约0.1至约5mg/kg/天，每天1次、2次或更多次；或约0.1至约0.5mg/kg/天、每天1次、2次或更多次；或约0.5至约25mg/kg/天，每天1次、2次或更多次。在其它实施方案中，剂量可以为0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、0.6mg/kg、0.7mg/kg、0.8mg/kg、0.9mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg等，以及其间的增量剂量。在其它实施方案中，该量的范围可为约1至约10mg/kg/天，每天1次、2次或更多次；或约1至约5mg/kg/天，每天1次、2次或更多次，或约1至约4mg/kg/天，每天1次、2次或更多次；或约0.1至约4mg/kg/天，每天1次、2次或更多次，或约2mg/kg/天至约4mg/kg/天，每天1次、2次或更多次。在其它实施方案中，例如，每天2次、每天3次、每天4次，或每天多于4次而不是每天1次地施用上述量的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

在其它实施方案中，对于这些治疗方法，适用于秘鲁巴豆原花色素聚合物产品或秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物(诸如SP 303或SB 300)的合适剂量的范围可为约0.01mg至约1000mg，每天1次或每天多次。在一个实施方案中，合适的剂量的范围可为约0.1mg至约100mg或1mg至约10mg，每天1次或每天多次。在一个实施方案中，合适的剂量的范围可为约10mg至约350mg，每天1次或每天多次。在一个实施方案中，合适的剂量的范围可为约20mg至约400mg，每天1次或每天多次。在一个实施方案中，合适的剂量的范围可为约50mg至约100mg，每天1次或每天多次；约100mg至约250mg每天1次或每天多次。在一个实施方案中，合适的剂量的范围可为约40mg至约300mg，每天1次或每天多次。应当理解，所述范围包括指定的较低和较高的量以及其间的量。在一些实施方案中，可以连续数天(例如2天、3天、4天、5天、6天、7天或更多天)给予每天多次施用的剂量。每天多次施用的剂量可包括每天2次、3次、4次、5次、6次或更多次。本发明还包括其它给药方案，诸如每隔一天，或每三天，每四天一次等。另外，本领域技术人员将理解，鉴于正在进行治疗的伴侣动物的重量的范围很宽以及动物种间的差异，向动物施用的剂量和量可以变化，并且可以比上述的代表性范围和量更少或更多。在一个实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物是SB 300或SP 303。在一个实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物是肠溶包衣SB 300或SP 303。在一个实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物是非肠溶包衣SB 300或SP 303。

在一些实施方案中，秘鲁巴豆原花色素聚合物产品的每日剂量(包括多次每天剂量，例如每天2次或3次)的日剂量可为每动物0.1mg、0.5mg、1mg、2mg、4mg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、40mg、50mg、80mg、100mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、500mg(或其间的值)。这些剂量的近似值也包括在所述方法中。还可改变施用时间表以获得治疗如本文所述的腹泻及其症状的秘鲁巴豆原花色素聚合物的治疗有效浓度。通过具体但非限制性的实例，用于根据本发明的方法的合适的剂量为每天两次施用的2mg/kg，或每天两次施用的4mg/kg/剂量。在一些实施方案中，可以每天1次，每天2次，每天3次，每天4次，每天5次，每天7次或每天10次施用所述化合物。通常将剂量分为一整天施用的多个相等部分，然而在一些实施方案中涉及治疗更加严重或顽固的症状，可能有用的是定制剂量给药方案，以使得在一天的预定时间(例如，一天的前半天)施用大部分每日治疗。举例来说，可向动物施用第一剂量，然后可在给定数量的小时后，诸如1至3小时、1至6小时、1至12小时(或其间的小时数)之后施用第二剂(或随后的)剂量。在一些实施方案中，在一天的前半天施用约50％、60％、70％或80％的剂量。在其它实施方案中，在一天的后半天施用大部分剂量(以使得在一天的后半天中施用约50％、60％、70％或80％的剂量)可能更合适。

应当理解，实际施用的剂量可由实施者根据相关情况(包括所治疗的疾病、病状或其症状的严重度、待施用的产品的形式、接受治疗的个体动物的年龄、体重和反应以及选择的施用途径)来确定实际施用的剂量。

本发明的方法还包括单独地或与用于治疗或改善分泌性腹泻的症状的其它补充剂或药剂组合地施用原花色素聚合物组合物的药学上可接受的制剂，所述其它补充剂或药剂是诸如复水(重构)剂、电解质(例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁及其制剂)、抗生素、肠衬里保护剂诸如高岭土、果胶或铋液，以及体液吸附剂，例如绿坡缕石。其它药剂可以包括抗能动剂。还可以使用天然生物产品，例如乳酸杆菌属(Lactobacillus)或屎链球菌(Streptococcus faecium)或益生菌作为添加剂，以恢复受累年幼或成年伴侣动物的肠道菌群的自然平衡。

实施例

实施例1

对狗的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物克罗来姆(SP 303)的口服施用的评价

本实施例中描述的是具有急性水泻的狗的多中心概念验证研究。该研究在兽医医院进行，以提供受控的环境。该研究是一种双盲随机区组化格式，用于将基于腹泻原因的五个不同的治疗组与五个相关安慰剂组中的每一个相比较，以及用于全局分析。该研究包括招募呈现不足3天的普通急性水泻的狗。对每只狗进行彻底临床检查，以确定腹泻的原因是化学疗法、细菌感染、胰腺炎、饮食不慎还是贾第虫属感染。这五个原因中的每一个被当作一个亚组，并且具有任何其它腹泻原因的狗被排除在研究之外。

招募的狗在诊所住院四天，并按照它们的重量分类用2-4mg/kg(根据狗种的大小和体重变化性的剂量范围)包含秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物(克罗来姆)的肠溶包衣微粒或肠溶包衣安慰剂(每天两次，持续三天)进行治疗。另外，所有招募的狗都按照用于“腹泻”的“护理标准”(SOC)进行治疗，所述护理标准包括用于补液的口服或静脉注射液体和疾病特异性药物，诸如用于贾第虫属感染、胰腺炎的疼痛控制的芬苯达唑和用于呕吐的止吐药(柠檬酸马诺匹坦(马罗匹坦)(Maropitant citrate))。正被评估的终点是粪便稠度、综合胃肠道评分、腹泻持续时间、排便频率、食欲、态度和体温。每天检查狗两次，持续四天，并使用两个经过验证的评分系统：Nestle Purina粪便和Waltham粪便评分系统进行评估。每天一次采集粪便样品以建立或确认腹泻原因，并测量粪便的干物质含量。还研究血液化学分析。该设计提供了按亚组的和作为整体的横跨一系列相关临床终点的评估数据。因此，该研究可允许确认对普通急性水泻的这些亚组的全部或一些的临床益处。

对于概念验证研究，在检品包(小包)中提供SP 303。每个检品包(小包)用测试动物编号标记和每个动物(试验研究中招募的)分配的12个包(小包)的顺序(即，狗1，12个袋中的袋1等)进行标记。每只狗在研究过程中接受12个包(小包)，因为每只研究狗共接受6次治疗。每个包(小包)含250mg检品(SP 303)，其足以对20kg的狗进行一个疗程的治疗。因此，对于治疗重量达40kg的狗，每次治疗需要总共2个包(小包)。治疗剂量为2mg/kg，每天2次，进行6次治疗(3天)。每个具有250mg检品的包(小包)含有40mg活性成分或安慰剂成分，并通过添加10mL自来水重构成混悬剂，以产生4mg/mL活性成分的混悬剂。因此，对于接受测试剂量(20kg x 2mg/kg x 4mg/mL)的20kg的狗，给予狗10mL的混悬剂。

实施例2

用于治疗狗的腹泻的秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物克罗来姆(SP 303)的口服施用的临床功效的评估

本实施例涉及评估口服施用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物产品即克罗来姆SP303在治疗腹泻中的临床疗效的盲法随机对照研究(由兽医使用通过救援组织、收容所和客户所有者获得的犬科动物进行的)。在研究结束之前，调查员对治疗任务不了解。在4个月的时期内从来自同一地理区域的不同兽医诊所招募每个试验地点最少60只狗。因在试验中招募救援组织、收容所和所有者的动物而为救援组织、收容所和所有者提供经济奖励。给予动物被限制在研究现场最多6天的同意书。在隔离的前24小时期间，通过兽医或辅助检查、观察和所有者输入来评估腹泻严重度。如果在最初24小时的限制结束时确定该动物的基线粪便评分为6或更高，则该动物被招募参加随机化并限制为期5天的试验，治疗开始于第二个24小时限制的开始。

研究目标是确认口服施用克罗来姆产品SP 303在缓解狗的腹泻临床症状方面的临床功效。本研究还提供数据以支持关键功效研究，所述研究用于在狗的化学疗法诱导的腹泻(CID)以及更普通的急性腹泻/水泻适应症的治疗中评估克罗来姆产品。

在研究中使用区组大小为6的区组随机化。评估的主要临床终点包括粪便稠度和腹泻持续时间；次要终点包括被治疗的狗的安全性、态度/活动。获得了关于所有狗参与本研究的书面知情同意书。适用于研究的狗包括年龄在4个月至12岁之间并且体重在2kg至50kg之间的任何品种的雄性和雌性。在研究中只允许呈现腹泻，粪便评分为6或更大(即，具有少量颗粒物质的水样液体粪便)的狗。允许进入研究的所有狗目前进行细小病毒疫苗接种，并进行彻底检查以确定最终的纳入。狗应当已腹泻3天或更少天以符合入选资格。

排除标准：具有其它医学病状或正在接受其它医学病的治疗的狗以及粪便评分为4或以下的狗不允许参与本研究。排除具有血性腹泻和怀疑具有细小病毒的狗。在所有者签署知情同意书后7天内已用任何禁用药物治疗的狗不纳入本研究。

最终纳入：只有诊断为贾第虫属、急性细菌性肠道感染、CID、胰腺炎和饮食不慎的狗才能保留在本研究中，并可完成治疗。将每只狗放入五个亚组之一。分别对所有亚组进行分析，并所有亚组作为一组进行汇总，以进行单独分析。禁用药物包括甲硝唑、阿苯达唑、Forti Flora，生特灵和磺胺二甲氧嘧啶(磺胺地托辛)。根据主要研究者(PI)的判断，允许使用急救药物进行治疗。

检品和剂量：向临床医生/PI提供两个检品。将检品单独包装用研究中的每只狗，在每个包装上只有资助人提供的代码。一个检品是剂量为2mg/kg的SP 303(克罗来姆)。第二个检品是安慰剂，例如盐水溶液。最终剂型是SP 303的肠溶包衣微粒，其以少量的水施用于狗：每1mL水中20mg的活性成分(SP 303)，直接置于口中，通过训练的兽医技师施用。活性物质的量基于动物的重量。每只狗每天治疗两次，持续3天–总共6次剂量。

评估：评估者(兽医、助理或技术人员)进行以下评估：1)按照下面提供的粪便评分系统在研究的基线以及第1治疗日、第2治疗日、第3治疗日、第4治疗日和第5治疗日测定粪便得分：

评估者还根据下面所列的参数对基线和第1-5日的一般态度/活动、脱水状态和食欲进行评分：

态度/活动	得分
		正常	0
稍微下降	1
		适度下降	2
严重下降，动物无反应	3
		补液	得分
正常	0
		轻微变化	1
适度变化	2
		严重变化，需要IV液	3
食欲	得分
		正常	0
吃掉大多数	1
		吃掉少许	2
不吃	3

评估人员还量取和报告每只狗的体温。另外，通过从基线至整个治疗期观察动物来记录每天的排便次数。

文档编制：对于文档编制，将适当的源文件提供给研究现场；文件保存在每个动物的医疗档案中，并随着研究进展而完成。现场人员使用电子数据采集(EDC)软件在研究基线中输入记录在源文件上的数据。临床研究监视器访问网站以验证EDC系统中的所有数据是否与每只动物的源文档匹配。

程序：进入研究前所有狗的诊断评估包括：医疗史：持续时间和临床体征；疫苗接种史；饮食史；环境/病史：饮食不慎的可能性：食物、异物、垃圾、堆肥、粪肥；紧张情景：登机、整理内务、旅行、住院、家庭日常的变化、最近的举动等；近期药物；身体检查/临床评价：粘膜颜色、补液、姿势、活动/态度、身体状况、腹部触诊、直肠检查、动物排便观察，即下坠、疼痛的体征、粪便特征等；实验室检查：在直肠检查期间收集粪便。寄生虫的存在或出现通过直接涂片和浮选来确定，包括硫酸锌浮选、卵、幼虫、贾第虫属、能动的原生动物。临床实验室得出的：招募前和治疗期结束时的CBC/SMAC和腹泻小组。筛查结肠弯曲杆菌(Campylobacter coli)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)、犬瘟热病毒、犬冠状病毒、犬细小病毒2、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)α毒素、隐孢子虫属的种(Cryptosporidium spp.)、贾第虫属和沙门氏菌属的种的腹泻小组。当兽医认为必要或适当时可进行其它测试。

如果狗符合要纳入研究的标准，则评估人员将继续填写第1天的评分表并施用第一剂量。评估人员还可自行酌情施用和开具任何必要的其它药物，并记录对同期用药病例报告表的处理。评估者还在第2天、第3天和第5天对狗进行评分。每天对狗进行两次治疗，持续3天(总共6个剂量)，并观察五天。对于每只狗，研究在五天后终止，不管结果如何。为每只动物完成适当的研究终止病例报告表。

撤出：将任何不符合治疗时间表的动物从研究中撤出。从研究中撤出任何在治疗过程中遭受无关问题(例如伤害)的动物。在用于研究的数据分析中使用直至从研究撤出的时间或研究完成的时间(以较短者为准)记录的数据。

不良事件：在数据收集表上报告所有不良事件。研究调查员对不良事件与指定的治疗的相关性做出初步决定。

统计方法：该研究是在患有急性腹泻的狗中进行的秘鲁巴豆原花色素聚合物SP303相较于安慰剂的随机、双盲、前瞻性比较研究。统计分析的目的是确定测试产品在减轻狗的腹泻临床症状方面的功效和安全性。研究中心被定义为在同一PI控制和监督下的治疗管理现场。对研究中的5个亚组的每个亚组和整个群体进行数据分析。

随机化方法：使用SAS PROC PLAN生成单个随机化列表，以便随机化研究。在大小大于2的排列块生成随机化列表，以便最小化研究点的分配偏差。该列表仅显示指定治疗的治疗代码。每个动物的代码破译信封都会发给研究点，以便在紧急情况下使动物解盲。汇集研究中心的所有统计分析。

功效变量：研究的主要功效变量是在基线和给药第1-5天记录的兽医粪便得分(记录在7点量表上的，其中7是最差的腹泻症状)。主要功效终点是每个给药日(第1-5天)相较于基线粪便得分的变化。相较于基线粪便得分的变化计算为基线粪便得分减去治疗期间的粪便得分，即相较于基线得分的正变化表明腹泻症状的改善。

次要功效变量：针对每只动物测量的次要功效变量包括态度/活动；补液；体温；每日排便次数；粪便稠度和食欲。动物的态度/活动、补液、食欲和粪便稠度按0-3的等级测量，3是最严重的评级。在基线和治疗期的第1-5天对每只动物进行评级。在基线和治疗的第1-5天测量体温(以℃表示)。次要功效变量是每个治疗日(第1-5天)的每个变量相对于基线值的变化。

安全变量：主要安全变量：主要安全变量是在治疗期间针对每只动物观察到的不良事件。样本容量的合理性：本研究是SP 303/克罗来姆化合物在治疗狗腹泻中的早期阶段研究；其不是针对假设检验按统计学定制的。

分析群体：意向治疗(ITT)群体由参加研究并接受至少一个剂量的研究药物的所有受试者组成。对ITT群体进行主要和次要功效终点的分析。对ITT群体进行所有安全分析。

基线和人口学特征分析：概括了安全群体中的所有动物的基线和人口学特征。通过按治疗组的汇总统计(平均值、中位数、样本容量、标准偏差、最小值和最大值)显示连续变量。分类变量通过按治疗组的计数和百分比进行概括。

主要变量的分析：在α＝0.025的相对于主要变量的单侧显著性水平上在每个时间点(第1-5治疗日)测试以下假设：H_a0:μ_T≤μ_P对H_a1:μ_T>μ_P，其中μ_T是SP 303治疗组的相对于基线粪便量表得分的平均变化，μ_P是安慰剂组的相对于基线粪便量表得分的平均变化。使用包含每个时间点的治疗组和基线粪便得分的项的线性模型，利用用于来自ANOVA分析的治疗效果的F检验来测试该假设。由治疗组在每个时间点(第1-5治疗日)计算概括统计(平均值、中位数、样本容量、标准偏差、最小值和最大值)。另外，在每个时间点从ANOVA模型计算相较于基线平均粪便得分的调整的治疗组变化。

次要变量的分析：对于每个次要变量，在每个时间点使用具有治疗组的项和参数的基线值的线性模型和进行ANOVA分析。由治疗组在每个时间点计算概括统计。在每个时间点，从ANOVA模型计算相较于基线平均值的调整的治疗组变化。

安全性变量分析：对于安全性分析，计算概括统计。从招募直至研究终止，观察每个动物的所有不良事件(AE)。由治疗组概括治疗紧急不良事件。治疗紧急不良事件是在动物的第一治疗日期时或之后具有开始日期的不良事件。如果不良事件的开始日期丢失，则其被认为是紧急事件。在分析之前，所有不良事件(AE)均使用“兽医医学管理活动词典(Veterinary Medical Dictionary for Regulatory Activities)”(VMedDRA)进行编码。基于这些编码的术语，使用系统器官类和优选术语来概括AE。所有AE都列出。

缺失值：对于在主要和次要端点进行的所有统计分析，进行完整的案例分析，即不输入缺失值。另外，本研究期间不进行正式的中期分析。

实施例3

用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物(SB 300)治疗狗的腹泻

本实施例描述了在患有腹泻并用秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物SB 300治疗的狗中进行的小规模研究。在Bogota,Columbia的3个小动物兽医诊所进行盲法对照研究。本研究的目的是评估口服施用的SB 300在减轻被治疗的狗的腹泻临床症状方面的临床功效。该研究评估了被区组随机分入3组的48只狗。一组用SB 300肠溶包衣片剂以约4mg/kg/剂量的剂量进行治疗；第二组用安慰剂进行治疗；第三组用SB 300的非肠道形式(作为粉剂)以约4mg/kg/剂量的剂量进行治疗。测试动物包括体重至少为20kg的雄性和雌性狗。每天向动物给药两次，持续3天(6个剂量)，并观察5天。

研究中使用的检品如下：

检品1：来自秘鲁巴豆的SB 300纯化提取物；最小剂量约为4mg/kg；剂型：肠溶包衣片；1片，每天两次。

检品2：来自秘鲁巴豆的SB 300纯化提取物；最小剂量约为4mg/kg；剂型：非肠溶粉末形式，用于食物的顶层敷料，每天两次。作为替代方案，如果狗不吃，则将粉末溶解在少量水中并口服施用。

检品3：安慰剂(不含活性SB 300产品的剂型)。为了确保研究的盲性，将50％的安慰剂配制成片剂，50％配制成粉末，每天两次给药。

为了评价适用于研究的动物和研究治疗的结果，使用从1至9的粪便/大便评分系统测量粪便稠度，如下所示。

评分为5分以上的狗参加了研究。粪便得分每天由兽医在研究的第1天、第2天、第3天、第4天和第5天每天测定一次，持续总共5天。除了SB 300以外，所有的狗还接受了“护理标准”治疗。实施例1中描述了此类护理标准治疗。主要临床终点包括粪便稠度和腹泻持续时间；次要终点包括研究动物的安全性、脱水状态和态度/活动。

下表列出了狗治疗研究的结果，结果显示，第1天至第5天的粪便得分的降低在接受肠溶包衣SB 300治疗的治疗组与接受安慰剂的组之间是显著的(P＝0.0413，ANOVA F检验)。

本实施例中所述的研究表明，第1天与第5天之间的粪便得分的降低存在显著差异，从而表明SB 300在治疗腹泻方面是有效的。参见图1。研究结果进一步表明，肠溶包衣与用于治疗研究动物的SB 300秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的活性相关。与其它类型的腹泻相比，研究结果支持分泌性腹泻/水泻(小肠腹泻)的有效治疗。从研究结果得出的另外的结论是，自我解决疾病需要比每天一次更频繁地观察狗以确定组间差异，以及狗需要在收容所和/或救援中心进行住院治疗或定位，以控制数据的收集。

实施例4

含秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的可咀嚼型固体口服制剂

在本实施例中提供了包含肠溶包衣SP 303微粒(珠粒)的代表性可咀嚼型固体口服剂型。对于向动物(诸如狗)的施用，如上所述，制剂口服提供，并被进行治疗的动物咀嚼并吞咽。含有肠溶包衣SP 303珠粒的软的可咀嚼型固体制剂包含以下组分，并不旨在限制：

举例说明性地，软的可咀嚼型制剂是用于狗的2.5g软咀嚼物。omalass成分是用作甜味剂的干燥糖蜜。

在研究中作为安慰剂施用的可咀嚼型固体口服制剂，除了没有SP 303肠溶珠粒(活性成分)外，含有所有与针对上述制剂所列出的成分相同的成分，并且以271.8g的量使用omalass成分。

提供了用于如本文实施中描述的研究的包含秘鲁巴豆原花色素聚合物/聚合物组合物(例如，SB 300或SP 303)的微粒(珠粒)的代表性肠溶制剂：

如本领域技术人员所理解的，肠溶包衣的目的是使活性成分(API)例如SP 303在胃的低pH下存活并且安全地进入肠中，在肠中肠溶包衣溶解，并且释放活性物质。肠溶包衣活性成分的制备通常包括三步法，其包括：

步骤1：用活性成分包被微晶纤维素(MCC)颗粒。优选地，获得最少50％的涂层。

步骤2：涂敷底涂层。底涂层未对整个珠粒增加太多重量，但用于制备用于肠溶包衣的MCC颗粒。

步骤3：涂敷肠溶包衣(面涂层)。肠溶包衣通常占颗粒的30％至45％重量增加。

对于由该方法产生的最终肠溶制剂，涂敷的药物层(小单元(cellet)上的wg)为52.6％；涂敷的底涂层(wg)为2％；涂敷的肠溶面涂层(wg)为40％。

最终的珠粒(颗粒)重约1g，其中活性成分构成重量的约23％。23％的值可用于确定必须添加至最终制剂中以获得所需剂量的珠粒数。软的可咀嚼型形式的API％的目标范围为15％至70％。在某些情况下，制剂中的API％增加至50％。

实施例5

介绍

本实施例概括来自随机、盲法、双臂(双组)多中心研究(Cana001)的结果，该研究评估了化合物SP-303在减轻狗的与分泌性腹泻相关的临床体征中的临床功效。本研究中使用的Canalevia^TM产品是克罗来姆的犬特异性制剂SP-303(一种活性药物成分)，其是从可持续收获的秘鲁巴豆树分离和纯化的。所述研究产品是被开发用于治疗狗的分泌性腹泻或水泻及其急性形式以及化学疗法诱导的腹泻(或CID)而不影响动物的肠动力的克罗来姆的口服肠溶包衣(每天2次)牛肉味的可咀嚼型制剂SP-303。SP-303产品不被全身性吸收，但在胃肠道中局部作用。Canalevia^TM是安全的，因为其已在犬模型中以至少50倍剂量进行了评估，没有明显的病变。

研究目标和概述

研究的目的是调查在对SP-303或安慰剂的3天暴露期间，患有水泻的狗中相较于基线粪便稠度和频率的变化的治疗组差异。这是概念验证研究，目的是详细说明终点评估和统计分析，将关键监管狗Canalevia^TM研究的试验设计通知FDA。兽医或训练有素的兽医技术人员在五个月内使用通过救援组织、收容所和客户所有者获得的动物进行了盲法随机、安慰剂对照的概念验证研究。根据下面粪便评分图中所述的粪便形成的六点评分，在研究中评估了39只狗。如果狗经测定具有4或5的基线粪便得分，则它们被招募入试验。排除了具有血性腹泻(即，粪便评分为6)和/或怀疑具有细小病毒的狗。招募后，每只狗都被限制，并在得分确认开始时施用治疗。

研究方案和数据收集

要参加研究，狗必须满足以下纳入标准：粪便得分为4或5(水样或液体粪便，少许或无颗粒物)。雄性或雌性；完好的或已灭菌的；年龄为2个月至12岁；重量在2至40kg之间；和任何品种或杂种。该研究的排除标准如下：具有其它医学病状的狗，根据研究者的意见将它们排除参加研究；粪便得分为3或更低；具有血性腹泻和/或怀疑具有细小病毒的狗；以及在7天的招募内已用任何禁用药物进行治疗的狗。

将狗以1:1的比例随机分配到两个治疗臂(治疗组)之一。治疗为以约2mg/kg BID(实际上以40mg包(小包)(对于重量为2至20kg的动物)和两个40mg包装(对于重量为20至40kg的狗)给药)的口服给药的SP-303(克罗来姆)(治疗A)和安慰剂(治疗B)。基于如下显示的粪便得分量表，在狗满足粪便形成得分等于4(水样，液体粪便)或5(严重水泻)的招募标准的后开始治疗施用。

粪便得分量表

对每只狗进行基线评估，包括身体检查、医疗史(如果可得的话)、血液学(CBC)、化学和粪便检查。对于收容所的狗，计划在3个治疗日的每一日和另外一个随访日，每天进行6次粪便得分评估。对于在诊所招募的狗，数据收集可能较少，因为如果腹泻已经解决，则可在四次治疗后释放动物。因此，收容所的狗的治疗期由在第一次治疗(T₀)后开始的每10至12小时施用一次的治疗组成，并在总共进行6次治疗后结束。除如果腹泻已经解决、则治疗可在第二治疗区组(即4次治疗)之后结束外，客户拥有的狗的治疗期与上述相同。在它们的研究时间期间，狗被放在狗舍并提供水，以及喂食试验点提供的标准饮食。必要时提供标准医疗服务。

每只狗在3×24小时治疗期(区组)的过程中每天被隔离并给药两次，持续总共6个剂量。根据研究，治疗区组被定义为24小时的时期，在所述时期中施用两次治疗。第一个治疗区块在第一次剂量施用时(T₀)开始。间隔10至12小时施用剂量。如上所述，被招募进研究的狗被随机分配到SP-303(克罗来姆)(治疗A)或安慰剂(治疗B)，但是为了分析的目的，研究评估者对治疗分配是对应于利用SP-303的治疗还是对应于利用安慰剂的治疗是不知情的。

评估和终点定义

使用上面的图表定义粪便评分终点。在本研究中，粪便评分量表中的最低得分为1分(良好成形的，潮湿的粪便)，且最高得分为6(出血性腹泻)。如果狗在预定时间内没有粪便用于评估，则也可将评估记录为“无粪便”。通过使用药物治疗数据，确定检品施用的第一剂量，并将其标记为时间0(基线)。在时间0之前的末次粪便评估是基线粪便得分；根据方案，该得分将为4或5。治疗施用和粪便评估均按日期和时间记录，使得可为粪便得分分配相对于第一剂量的时间。将第一剂量后的第一个24小时中的得分分组在区组1(第1天)中；第25小时至第48小时分组在区组2(第2天)中；第49小时至第72小时分组在区组3(第3天)中。继续观察区组4中的第72小时至第96小时(第4天)。

评估员(兽医或助理)进行了以下每日评估：使用上述粪便评分图，在基线时获得粪便得分，并在3-区组治疗期和观察期期间每4小时获得粪便得分。如果观察到的话，注意有或没有粪便产生的下坠或急走的情景。根据本领域中使用的量表对狗的一般态度、活动、水化状态、食欲和对腹部触诊的反应以及体温进行评分。

根据记录的粪便得分计算至末次未成形的粪便的时间(TLUS)。将TLUS定义为第一剂量/时间0与末次未成形粪便之间的经过时间。未成形粪便以3种不同的方式定义：(1)粪便得分为2、3、4、5或6；(2)粪便得分为3、4、5或6；和(3)粪便得分为4、5或6。如果狗没有为未成形粪便的基线后粪便得分，则将TLUS设置为等于0。在本研究中，TLUS定义仅限于第一剂量后72小时(其为整个给药期)中的粪便得分。分析了具有缓解的急性水泻体征的狗的比例。将腹泻的解决方案定义为在任何基线后时间上为1或2的粪便得分。没有记录为1或2的得分的狗被认为没有解决。

也考虑了另一个探索性反应者分析。对于每个基线后日，按时间顺序显示每只狗的粪便得分。建立了以下指导原则：(a)3、4、5或6的得分被认为是稀便，(b)1或2的得分或持续18个小时无粪便被认为是良好成形的粪便。在该框架下临床检查得分，在每个基线后日将每只狗编码为反应者或无反应者。

本研究中考虑的探索性终点如下：

腹泻的解决：定义为在研究期间的任何时间获得成形粪便(即，1或2的得分)。

反应者分析：定义为在研究期间的任何24小时治疗区组期间获得成形粪便(即，1或2的得分)。在治疗和观察期间进行测量。

治疗区组：治疗区组为24小时的时期。本研究中有3治疗区组。第一治疗区组从T₀持续至T₂₄，其中T₀是第一剂量施用的时间。还有一个观察区组，其在施用最终剂量后12小时开始，并持续长达24小时。

研究材料和管理

在本研究中使用两种研究材料：活性药物(SP-303)和安慰剂。将这两种物质配制成肠溶包衣(EC)珠粒，并包装在含有250mg EC珠粒的包(小包)中，代表研究兽医产品(IVP)或安慰剂。具有250mg EC珠粒的IVP包(小包)含有40mg的活性物质克罗来姆(SP-303)。为每个活性药物和安慰剂的包(小包)分配治疗具体代码。IVP与安慰剂包(小包)之间的区别是不知晓的。出于随机化目的，用数字标记每个包(小包)。基于每只狗在每个研究点的序贯进入，所述研究点被委派来为狗分配包(小包)。IVP的最终制剂由被认为对于动物的使用是安全的成分组成。安慰剂含有与除去SP-303活性成分的测试材料中的成分相同的配方成分。

在犬治疗诸如但不限于GREENIES PILL Allergy Formula中，基于狗的重量，以约2-4mg/kg口服施用每个剂量。重量<20kg的狗每次治疗接受一(1)个包(小包)，共接受六(6)个包(小包)。重量>20kg但<40kg的狗每次治疗接受两(2)个包(小包)，共接受十二(12)个包(小包)。

粪便得分分析

本研究中初步收集了48只狗的数据：24只狗在治疗A(SP-303)中，24只狗在治疗B(安慰剂)中。在48只狗完成了研究之后，资助者决定暂停研究的盲部分，旨在评估数据。用于终点参数的分析群体是可评价群体(按照方案)，并被定义为所有已完成研究并在治疗阶段和观察阶段中具有足够的粪便得分评价用于终点分析的狗。共有26个调查点参加了本研究，其中21个招募了共48只狗。在48只招募的狗中，39只被列入可评价群体。指定为编号067、128、130、145、146、175、199、205、207的9只狗由于观察数据收集和记录的不可靠性而被排除在分析之外。因此，共分析39只狗，23只在治疗A(SP-303)中，16只在治疗B(安慰剂)。包含在本分析中的狗001没有记录在数据库中的基线粪便得分。来自该点的记录指出，“她的粪便得分在所有周末在4与5之间变化”。这只狗的第一剂量是在星期一，因此这是治疗前观察。

两个治疗组的平均基线粪便评分为4.2。分析中只有一只狗低于按照方案进入的要求。狗038是按照方案招募的，粪便得分为4，尽管正好在第一治疗之前，记录了为3的得分。因此，以基线评分为3记录了这只狗。分析了具有缓解的急性水泻体征的狗的比例。腹泻的解决被定义为在任何基线后时间上为1或2的粪便得分。没有记录为1或2的得分的狗被认为没有解决。

至末次未成形粪便的时间(TLUS)

使用所有3种方法，治疗A中的狗具有比接受治疗B的那些狗短的中位数TLUS。通过使用时序检验比较卡普兰-迈耶图(Kaplan-Meier plot)，逼近统计显著性，但是对于方法中的2个方法(方法1和方法2)不相交。治疗A在对于成形粪便的更严格要求下似乎表现更好。

至末次未成形粪便的时间(72小时)

注意：在方法1中，未成形粪便的粪便得分为2、3、4、5或6。

在方法2中，未成形粪便的粪便得分为3、4、5或6。

在方法3中，未成形粪便的粪便得分为4、5或6。

腹泻的解决

使用在任何基线后时间粪便得分为1或2的腹泻解决的定义，用SP-303(治疗A)治疗的23只狗中有21只(91.3％)作出反应。这与使用安慰剂(治疗B)治疗的狗形成对比，其中16只狗中有8只(50.0％)作出反应。这些反应率支持这样的结论：与安慰剂(治疗B)相比，较大比例的SP-303(治疗A)中的狗作出反应。Fisher精确检验的双侧p值为0.0073。

临床反应者评估

在上文在“终点定义”下所述的框架下，每天将每只狗编码为反应者或非反应者。狗202(治疗B)未包括在分析中，因为数据太稀疏以至于不能作出判断。根据类似的理由，狗001在第二天是不可估计的。

如在图2和下表中看到，在所有治疗区组期间，接受治疗A(SP-303)的狗的反应比接受治疗B(安慰剂)的狗的反应大至少10％。反应者是随着日子一天天过去具有成形粪便但在随访中没有未成形粪便的狗。使用Fisher精确检验，在第三治疗区组、观察期(第4天)后发生显著差异。由于缺乏随访，因此第4天的样本容量约为另外日期的一半。

所有狗在治疗期间接受6个剂量。然而，并非所有的狗在区组3以后(即，在观察阶段期间)都被评价。应该注意的是，只有从那T₀开始超过72小时报告粪便得分的那些狗才被纳入观察阶段(T₇₃至T₉₆)的统计分析。

按日分层的Cochran-Mantel-Haenszel试验证明接受治疗A的狗的临床反应大于接受治疗B的狗的临床反应(p＝0.013)。使用Fisher精确检验，在治疗后，在第4天发生明显差异(p＝0.046)。然而，因为同样的狗出现在每个每日评价中，因此还考虑了替代模型。一种逻辑重复测量模型是适合的，其解释每只狗内的相关性。该模型提示在治疗后期间存在显著性，p值为0.059。

按日计的临床反应

基于24小时的治疗期

注意：4、5或6的得分被认为是稀粪/非反应者，1或2的得分或持续18小时无粪便被认为是良好成形的粪便/反应者，因为作用机制不造成便秘。

^a来自比较每天的反应率的Fisher精确检验。

^b来自按日分层的CMH检验。

^c来自逻辑重复测量模型。

^d“末次评价”包括来自没有观察得分的那些狗的观察期和治疗区组3的数据。

使用末次观察推进分析，对治疗A和B分别产生了83％和53％的反应。这给出了p＝0.073的双侧Fisher精确p值。然而，比值比(优势率)为4.2，并且这转化成0.79的Cohen d影响大小，该影响大小被认为是大的。反应者分析成功地用作研究的主要终点。

这一分析表明效应(狗腹泻解决的天数多于无腹泻的天数)的持续存在，如通过对曲线分离的分析表明的。Fischer精确检验证实，在研究过程中，动物可能会暴露于水泻或分泌性腹泻的其它原因。Cochran检验证实，在治疗区组1期间为反应者的任何狗在治疗区组2期间和以后更可能为反应者。

结论

本研究评价了以盲法方式随机分配至2个治疗臂(治疗组)SP-303和安慰剂的狗的功效。等于1或2的任何基线后粪便得分的简单解决定义支持治疗A(SP-303治疗)优于治疗B(安慰剂)(p＝0.007)的结论。72小时内至最终未成形粪便(其中未成形粪便被定义为粪便得分为3至6)的时间比较，逼近统计显著性。最后，通过使用临床判断和标准(其中粪便得分为1和2，以及持续18小时无粪便是反应者)，治疗A在所有日子都是优越的，并且在第4天逼近显著性，尽管在整个第4天，不能对所有狗进行随访。

另外，通过使用临床判断和标准(其中粪便得分为1和2，以及持续18小时无粪便被认为是反应者)，治疗A在所有24小时治疗期中是优越的。值得注意的是，在整个观察阶段(治疗后)，不能对所有狗进行评价，整个研究中反应者的比例的比较表明治疗A(克罗来姆)是优越的(p＝0.013)。

研究包括招募标准内允许的所有来者和所有导致水泻的原因。由于预计在收容所的观察时间可能较长，并且具有较大的总体招募研究容量，因此进一步探究收容所和诊所亚组是有利的。也可考虑其它亚组，诸如腹泻病因学、饮食和饲养模式。

从本实施例中描述的研究获得的结果支持SP-303治疗优于安慰剂的结论，其中91％的SP-303治疗的狗对比50％的安慰剂治疗的狗在研究期间获得成形粪便。

从该研究获得的结果进一步支持如上所述的SP-303的抗分泌性质和作用机制。SP-303产品在肠道中局部作用，并最低程度地被全身性吸收。其不改变胃肠动力，对发挥正常功能的肠道离子通道和电解质或体液运输没有显著影响，并且没有与安慰剂不同的副作用。这些特性通过其对口服或通过其它施用途径施用的共施用的化疗药物的吸收和/或代谢缺乏影响得到进一步增强。SP-303通过使肠腔中的过量离子和水的流动正常化来起作用。因此过量的离子和水流入肠腔是急性腹泻表现的共同的最后一步，所以SP-303(Canalevia^TM)为狗的急性腹泻(包括CID)提供有效治疗而无论病因如何。

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应理解，本文所述的实施方案和实施例用于说明性目的，并且根据其产生的各种修改或变化可为本领域技术人员所想到，且欲包括在本申请的精神和权限以及随附权利要求书的范围内。应当理解，本文描述了适合的方法和材料用于实施方案的实践；然而，与本文所述的方法和材料类似或等效的方法和材料可以用于本发明以及所述的实施方案的实践或测试中。

Claims

1.一种治疗非人伴侣动物的分泌性腹泻或水泻的方法，所述方法包括向有此需要的动物口服施用肠溶包衣或非肠溶包衣组合物，所述组合物在可咀嚼型且经调味的固体剂型中以有效地治疗所述伴侣动物的腹泻的量包含来自秘鲁巴豆的水溶性原花色素聚合物。

2.一种治疗犬科伴侣动物的化学疗法诱导的腹泻(CID)的方法，所述方法包括向有此需要的动物口服施用肠溶包衣或非肠溶包衣组合物，所述组合物在可咀嚼型且经调味的固体剂型中以有效地治疗所述伴侣动物的CID的量包含来自秘鲁巴豆的水溶性原花色素聚合物。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述伴侣动物是幼龄或年幼伴侣动物。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述伴侣动物是成年伴侣动物。

5.根据权利要求1、3或4中任一项所述的方法，其中所述伴侣动物是狗或猫。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述伴侣动物是狗。

7.根据权利要求1、3、4或5中任一项所述的方法，其中所述伴侣动物是猫。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中以0.5mg/kg至25mg/kg的量施用所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

9.根据权利要求8所述的方法，其中以2mg/kg至4mg/kg的量施用所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

10.根据权利要求9所述的方法，其中以2mg/kg的量每天2次施用所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

11.根据权利要求10所述的方法，其中持续3天施用所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

12.根据权利要求9所述的方法，其中以4mg/kg的量每天两次施用所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述伴侣动物患有分泌性腹泻/水泻、急性腹泻、偶发性腹泻或化学疗法诱导的腹泻。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的可咀嚼型固体剂型为片剂、丸剂或胶囊剂。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述可咀嚼型固体剂型为软的可咀嚼型固体形式。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的可咀嚼型固体剂型是牛肉味的。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述可咀嚼型固体剂型包含含有所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物的聚合物微粒或纳米颗粒。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述聚合物微粒或纳米颗粒是pH敏感性的。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中以至少20mg至50mg的总剂量向所述动物施用作为活性成分的所述秘鲁巴豆原花色素聚合物。

20.根据权利要求19所述的方法，其中以40mg的总剂量向所述动物施用作为活性成分的所述秘鲁巴豆原花色素聚合物。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中与所述伴侣动物中的分泌性腹泻/水泻或CID相关的症状或健康风险包括脱水、电解质失衡、电解质损失、肾功能不全、营养缺乏、胃肠道运输和消化的改变或增加的感染风险中的一种或多种。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物选自由以下组成的组：SB 300、SP 303、克罗来姆或秘鲁巴豆植物提取物。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是克罗来姆。

24.根据权利要求22所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物为SP 303。

25.根据权利要求22所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是SB 300。

26.根据权利要求22至25中任一项所述的方法，其中所述剂量为40mg，每天两次。

27.根据权利要求22至25中任一项所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是肠溶包衣组合物。

28.根据权利要求22至25中任一项所述的方法，其中所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物是非肠溶包衣组合物。

29.根据权利要求27或权利要求28所述的方法，其中将所述秘鲁巴豆原花色素聚合物组合物配制成片剂、丸剂、胶囊剂或粉剂。

30.根据权利要求1或权利要求5至7中任一项所述的方法，其中所述腹泻由细菌感染、寄生虫感染、原生动物感染、细菌感染、病患、疾病、胰腺炎、蠕虫感染或饮食不慎中的一种或多种引起。