JP2018199706A

JP2018199706A - 糖鎖化合物および糖鎖化合物の製造方法

Info

Publication number: JP2018199706A
Application number: JP2018160867A
Authority: JP
Inventors: 眞鍋　史乃; Sino Manabe; 史乃眞鍋; 一之石井; Kazuyuki Ishii; 佐藤　寛子; Hiroko Sato; 寛子佐藤
Original assignee: Research Organization of Information and Systems; RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Current assignee: Research Organization of Information and Systems; RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date: 2013-03-01
Filing date: 2018-08-29
Publication date: 2018-12-20
Also published as: JPWO2014132468A1; JP6455857B2; WO2014132468A1

Abstract

【課題】１，２−シス型のアミノ糖を含む新規なオリゴ糖または多糖を提供する。【解決手段】（ｇ）に記載の糖鎖化合物であって、１，２−シス型の糖残基を含む、糖鎖化合物を提供する：（ｇ）式（Ｖ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖【化１】（式（Ｖ）中、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）【選択図】なし

Description

本発明は、アミノ糖を含むオリゴ糖または多糖である糖鎖化合物、および糖鎖化合物の製造方法に関する。

アミノ糖を含む生物資源由来の糖鎖として、例えば、キチンおよびキトサン、ならびにヘパロサン、ヘパリンおよびヘパラン硫酸等が知られている。

キチンおよびキトサンは、それぞれＮ−アセチルグルコサミンおよびグルコサミンがβ１，４−結合している分子量数千から数万の化合物であり、甲殻類の殻から得られる生物資源由来の糖鎖である。キチンおよびキトサンは、（ｉ）枯渇の恐れがない、（ｉｉ）安全性が高い、および（ｉｉｉ）生物分解性である、などの特徴をもつことから、手術糸などの医療材料、食品および化粧品に応用されている。

ヘパリンおよびヘパラン硫酸は、グルクロニル−、あるいはイズロニル−β−１→４−Ｎ−アセチルグルコサミン二糖ユニットの繰り返し構造を基本骨格とする多糖であり、この基本骨格に対してＮ−硫酸化、およびＯ−硫酸化などの多くの修飾がなされている。

ヘパリンは、抗血液凝固剤として用いられており、一般的には、ブタ腸管から単離精製されたヘパリンが抗血液凝固剤として用いられている。また、使用されるヘパリンは、未分画ヘパリン、分画ヘパリン、低分子ヘパリンおよび超低分子ヘパリンなど様々である。中でも、低分子ヘパリンは、出血などの副作用が少ないといった利点がある。

日本国公開特許公報「特開２００４−１８８４０号公報」国際公開第２０１１／０２８６６８号米国特許出願公開第２０１０／００３６００１号明細書国際公開第２００９／０１４５５９号

Shino Manabe, et al., "N-Benzyl-2,3-Oxazolidinone as a Glycosyl Donor for Selective α-Glycosylation and One-Pot Oligosaccharide Synthesis Involving 1,2-cis-Glycosylation" J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 10666-10667. Hiroko Satoh, et al., "Low Barrier Pathway for Endo-cleavage Induced Anomerization of Pyranosides with N-benzyl-2,3-trans Oxazolidinone" Eur. J. Org. Chem. 2009, 1127-1131. Shino Manabe, et al., "Evidence for Endocyclic Cleavage of Conformationally Restricted Glycopyranosides" Chem. Eur. J. 2009, 15, 6894-6901. Shino Manabe, et al., "Significant Solvent Effect in Anomerization Reaction of Pyranosides" Tetrahedron Lett. 2009, 50, 4827-4829. Shino Manabe, et al., "N-benzyl 2,3-trans Carbamates Bearing Glycosyl Donors for 1,2-cis Selective Glycosylation Reactions" Eur. J. Org. Chem. 2011, 497-516. Hiroko Satoh, et al., "Endocyclic Cleavage in Glycosides with 2,3-trans Cyclic Protecting Groups" J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 5610-5619. Olsson, Johan D. M. et al., "Stereoselective Glycosylationsusing a 2-N-acyl-2N,3O-oxazolidinone protected GlcNAc donor."J. Org. Chem. 2008, 73(18), 7181-7188. Boysen, Mike, et al., "Ethyl 2-acetamido-4,6-di-O-benzyl-2,3-N,O-carbonyl-2-deoxy-1-thio-β-D-glycopyranoside as a versatile GlcNAc donor." Chemical Communications (Cambridge, United Kingdom), 2005, (24), 3044-3046. Crich, D., et al., "6-O-Benzyl- and 6-O-Silyl-N-acetyl-2-amino-2-N,3-O-carbonyl-2-deoxyglucosides: Effective Glycosyl Acceptors in the Glucosamine 4-OH Series. Effect of Anomeric Stereochemistry on the Removal of the Oxazolidinone Group."J. Org. Chem. 2005, 70, 1291-1296. Wei, P., et al., "Factors Affecting Stereocontrol during Glycosidation of 2,3-Oxazolidinone-Protected 1-Tolylthio-N-acetyl-d-glucosamine." J. Org. Chem. 2005, 70, 4195-4198. Geng, Y., et al., "Pre-activation protocol leading to highly stereoselectivity-controllable glycosylations of oxazolidinone protected glucosamines." Chem. Commun. 2008, 597-599. Barreteau, Helene, et al., "Production of intracellular heparosan and derived oligosaccharides by lyase expression in metabolically engineered E.coli K-12" Carbohydrate Research, 2012, 360, 19-24. Chavaroche, Anais A. E., et al., "Synthesis of heparosan oligosaccharides by Pasteurella multocida PmHS2 single-action transferases" Applied Microbiology and Biotechnology, 2012, 95(5), 1199-1210. Liu, Yanfeng, et al., "Effects of carbon sources and feeding strategies on heparosan production by Escherichia coli K5" Bioprocess and Biosystems Engineering, 2012, 35(7), 1209-1218. Zhang, Chunyu, et al., "Metabolic engineering of Escherichia coli BL21 for biosynthesis of heparosan, a bioengineered heparin precursor" Metabolic Engineering, 2012, 14(5), 521-527. Chavaroche, Anais A. E., et al., "Production methods for heparosan, a precursor of heparin and heparan sulfate" Carbohydrate Polymers. Otto, Nigel J., et al., "Structure/Function Analysis of Pasteurella multocida Heparosan Synthases: Toward Defining Enzyme Specificity andEngineering Novel Catalysts" Journal of Biological Chemistry, 2012, 287(10), 7203-7212. Chen, Xiang'e, et al., "Effects of heparosan and heparin on the adhesion and biofilm formation of several bacteria in vitro" Carbohydrate Polymers, 2012, 88(4), 1288-1292. Masuko, Sayaka, et al., "Ozonolysis of the double bond ofthe unsaturated uronate residue in low-molecular-weight heparin and K5 heparosan"Carbohydrate Research, 2011, 346(13), 1962-1966. Higashi, Kyohei, et al., "Controlled photochemical depolymerization of K5 heparosan, a bioengineered heparin precursor" Carbohydrate Polymers, 2011, 86(3), 1365-1370. Wang, Zhenyu, et al., "Control of the heparosan N-deacetylation leads to an improved bioengineered heparin" Applied Microbiology and Biotechnology, 2011, 91(1), 91-99. Chavaroche, Anais A. E., et al., "Analysis of the Polymerization Initiation and Activity of Pasteurella multocida Heparosan Synthase PmHS2, and Enzyme with Glycosyltransferase and UDP-sugar Hydrolase Activity"Journal of Biological Chemistry, 2011, 286(3), 1777-1785. Wang, Zhenyu, et al., "E. coli K5 fermentation and the preparation of heparosan, a bioengineered heparin precursor" Biotechnology and Bioengineering, 2010, 107(6), 964-973. Ly, Mellisa, et al., "Analysis of E. coli K5 capsular polysaccharide heparosan" Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2011, 399(2), 737-745. Chavaroche, Anais A. E., et al., "In vitro synthesis of heparosan using recombinant Pasteurella multocida heparosan synthase PmHS2" Applied Microbiology and Biotechnology, 2010, 85(6), 1881-1891. Legoux, Richard, et al., "N-Acetyl-heparosan lyase of Escherichia coli K5: gene cloning and expression" Journal of Bacteriology, 1996, 178(24), 7260-7264. Wang Zhenyu, et al., "Escherichia coli K5 heparosan fermentation and improvement by genetic engineering" Bioengineered bugs, 2011, 2(1), 63-67. 東恭平ら，「光分解法による低分子Ｋ５ヘパロサンの調製」，日本薬学会第１３２年会要旨集, 2012, 132(3), 183. 眞鍋史乃ら，「エンド開裂反応を利用した１，２−ｃｉｓアミノグリコシドアノマー位立体制御と新規糖鎖合成」，第５４回天然有機化合物討論会，予稿集，2012.

グルコース１，４−β結合からなるセルロース、およびグルコース１，４−α結合からなるアミロースは、構成ユニットが同じグルコースであり、結合位置も同じ１，４−結合である。しかし、アノマー位の立体化学が互いに異なるために、高次立体構造が相違し、溶解性などの物理化学的性質が相違している。グルコサミンユニットまたはＮ−アセチルグルコサミンユニットから構成される糖鎖化合物において、セルロースに相当する１，４−β結合からなる糖鎖化合物であるキチンおよびキトサンが存在するが、アミロースに相当するグルコサミン１，４−α結合からなる糖鎖化合物およびＮ−アセチルグルコサミン１，４−α結合からなる糖鎖化合物は知られていない。

グルコサミン１，４−α結合からなるオリゴ糖およびＮ−アセチルグルコサミン１，４−α結合からなるオリゴ糖（以下、両者をまとめて、１，４−α（Ｎ−アセチル）グルコサミンオリゴマーという）を取得する方法としては、１，４−α結合を生じさせるグリコシル化反応を繰り返して行う合成方法が考えられる。しかしながら、アセチルグルコサミンおよびＮ−アセチルグルコサミン等のアミノ糖に関して、完全なα−選択的グリコシル化反応が開発されていないため、１，４−α（Ｎ−アセチル）グルコサミンオリゴマーを合成することは困難であり、これまで合成に成功した例は報告されていない。

また、一般的に用いられているヘパリンは、分子量および硫酸化の位置が相違している数多くの化合物の混合物である。そのため、ヘパリンを抗血液凝固剤として用いる場合、副作用の問題および投与後の管理の問題が指摘されている。また、近年、製剤中に過硫酸化されたコンドロイチン硫酸が混入していたことによって死者が発生するという事故が起こっている。そのため、厳密な管理が可能である化学合成品が求められている。これまでに、血液凝固系の凝固因子Ｘａにのみ作用するはじめての合成医薬品として、化学合成５糖であるフォンダパリヌクスが開発されているものの、今なお新たな化学合成品が求められている。

ヘパリンは、イズロニル−、あるいはグルクロニル−β−１→４−Ｎ−アセチルグルコサミン二糖ユニットの繰り返し構造であるヘパロサンを前駆物質として生合成されていると考えられている。したがって、生合成過程にならって、ヘパロサンを出発原料として、種々の酵素反応を経ることによりヘパリンまたはヘパラン硫酸を合成することが可能になると考えられる。ヘパロサンは大腸菌Ｋ５株の細胞壁に見出されるため、化学的および酵素的に大腸菌細胞壁を分解することにより、ヘパロサンを得ることが可能である。そして、大腸菌細胞壁から得られたヘパロサンを低分子化させることにより、低分子量のヘパロサンを取得することができる。しかしながら低分子化処理により得られる化合物でも十分に小さな分子量ではなく、すなわち、オリゴ糖レベルの分子量ではない。また、オリゴ糖レベルのヘパロサンの合成に成功した例も報告されていない。

そこで、本発明は上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、これまでに合成の例がない、１，２−シス型のアミノ糖を含む新規なオリゴ糖または多糖を提供することにある。

本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様は、上記課題を解決するために、下記（ａ）または（ｂ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ａ）下記式（Ｉ）または（Ｉ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｂ）下記式（ＩＩ）または（ＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。

（式（Ｉ）および（Ｉ’）中、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表し、Ｒ^３およびＲ^４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アシル基、アリル基、アリール基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基またはスルホ基を表し、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。式（Ｉ’）中、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。）

（式（ＩＩ）および（ＩＩ’）中、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表し、Ｒ^３およびＲ^５は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アシル基、アリル基、アリール基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基またはスルホ基を表し、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。式（ＩＩ’）中、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。）
本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様は、上記課題を解決するために、下記（ｃ）または（ｄ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｃ）下記式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｄ）下記式（ＩＶ）または（ＩＶ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

（式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）中、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表し、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６およびＲ^７は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表し、Ｒ^８は、−ＣＨ_２ＯＲ^９または−ＣＯＯＲ^１０を表し、Ｒ^９は、水素原子、アルキル基、アシル基、アリル基、アリール基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、リン酸基、スルホ基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表し、Ｒ^１０は、水素原子、メチル基、エチル基、ベンジル基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基またはｔｅｒｔ−ブチル基を表し、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。式（ＩＩＩ’）中、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。）

（式（ＩＶ）および（ＩＶ’）中、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表し、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表し、Ｒ^８は、−ＣＨ_２ＯＲ^９または−ＣＯＯＲ^１０を表し、Ｒ^９は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、リン酸基、スルホ基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表し、Ｒ^１０は、水素原子、メチル基、エチル基、ベンジル基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基またはｔｅｒｔ−ブチル基を表し、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。式（ＩＶ’）中、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。）
本発明に係る糖鎖化合物の第三の態様は、上記課題を解決するために、下記（ｇ）または（ｈ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｇ）下記式（Ｖ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｈ）下記式（ＶＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。

（式（Ｖ）中、Ｒ^１６は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）

（式（ＶＩ）中、Ｒ^１７は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
本発明に係る糖鎖化合物の第四の態様は、上記課題を解決するために、下記（ｉ）または（ｊ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｉ）下記式（ＶＩＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。（ｊ）下記式（ＶＩＩＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

（式（ＶＩＩ）中、Ｒ^１６およびＲ^１８〜Ｒ^２０は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）

（式（ＶＩＩＩ）中、Ｒ^１７〜Ｒ^２０は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
本発明に係る糖鎖化合物の製造方法は、上記課題を解決するために、１，２−シス型の糖残基を含む糖鎖化合物の製造方法であって、
（ｉ）下記（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）または（ｎ）に記載の糖鎖化合物を準備する工程、
（ｋ）下記式（Ｉｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖、
（ｌ）下記式（ＩＩｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖、
（ｍ）下記式（ＩＩＩｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖、
（ｎ）下記式（ＩＶｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖、

（式（Ｉｂ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５およびＲ^１６は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）

（式（ＩＩｂ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５およびＲ^１７は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）

（式（ＩＩＩｂ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５、Ｒ^１６、Ｒ^１８およびＲ^１９は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２０は、−ＣＨ_２ＯＲ^２１または−ＣＯＯＲ^２２を表し、Ｒ^２１は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２２は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基またはアシル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）

（式（ＩＶ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５、Ｒ^１７、Ｒ^１８およびＲ^１９は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２０は、−ＣＨ_２ＯＲ^２１または−ＣＯＯＲ^２２を表し、Ｒ^２１は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、スルホ基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２２は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基またはアシル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
（ｉｉ）上記（ｉ）の工程で準備した上記糖鎖化合物にカルバメート基を導入する工程、および、
（ｉｉｉ）カルバメート基が導入された上記糖鎖化合物を、有機溶媒中、塩酸、ビス（トリフルオロメチルスルホニル）イミドもしくはトリフルオロ酢酸または弱酸性のルイス酸と反応させる工程、
を含む、糖鎖化合物の製造方法である。

本発明によれば、これまでに知られていない、Ｎ−アセチルグルコサミンもしくはその誘導体、またはグルコサミンもしくはその誘導体がα１，４−結合しているオリゴ糖または多糖を提供することができる。

また、本発明によれば、これまでに知られていない、ヘパロサンのオリゴ糖を提供することができる。

アミノ糖に関して完全な１，２−シス型選択的グリコシル化反応が開発されていないために、１，２−シス型のアミノ糖のオリゴ糖または多糖の製造方法はこれまで知られていないが、本発明者らが鋭意検討した結果、１，２−トランス型のアミノ糖からなる糖鎖を異性化させることで１，２−シス型のアミノ糖のオリゴ糖を製造することに成功し、本願発明を完成させるに至った。

本発明に係る糖鎖化合物および糖鎖化合物の製造方法の一実施形態について、以下に説明する。

〔１．糖鎖化合物〕
（第一の態様）
本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様は、次の（ａ）または（ｂ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ａ）式（Ｉ）または（Ｉ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｂ）式（ＩＩ）または（ＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。

式（Ｉ）および（Ｉ’）ならびに式（ＩＩ）および（ＩＩ’）において、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表している。

アルキル基としては、炭素数１〜２０のアルキル基、好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基およびペンチル基等を挙げることができる。また、
ハロアルキル基としては、上述のアルキル基において、少なくとも一つの水素原子がハロゲン原子に置換された基を挙げることができ、例えば、トリフルオロメチル基等が挙げられる。

アリール基としては、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、ナフチル基、トリル基およびｐ−ニトロベンジル基等を挙げることができる。

アシル基としては、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基およびトリフルオロアセチル基を挙げることができる。

アルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基およびトリクロロエトキシカルボニル基を挙げることができる。

アリールオキシカルボニル基としては、ベンジルオキシカルボニル基を挙げることができる。

また、Ｒ^１とＲ^２とが結合して窒素原子とともに環状構造を形成しているものであってもよい。例えば、アシル基であるＲ^１とＲ^２とが結合している例として、スクシニル基およびフタロイル基を挙げることができる。

中でもＲ^１およびＲ^２としては、それぞれ独立に、水素原子、アシル基、アルコキシカルボニル基およびアリールオキシカルボニル基が好ましく、それぞれ独立に、水素原子、アセチル基、トリフルオロアセチル基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基およびトリクロロエトキシカルボニル基がより好ましく、それぞれ独立に、水素原子およびアセチル基が特に好ましい。

式（Ｉ）および（Ｉ’）ならびに式（ＩＩ）および（ＩＩ’）において、Ｒ^３は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表している。

アルキル基としては、例えば、上記した炭素数１〜２０のアルキル基を挙げることができる。

アシル基としては、アセチル基、トリフルオロアセチル基、ピバロイル基、ｐ−メトキシベンゾイル基、ｐ−ニトロベンゾイル基およびベンゾイル基を挙げることができる。

ヒドロキシアルキル基としては、ヒドロキシエチル基、ヒドロキシプロピル基、グリセリル基等の炭素数１〜１０のヒドロキシアルキル基を挙げることができる。

カルボキシアルキル基としては、カルボキシメチル基等のアルキル部分の炭素数が１〜２０のカルボキシアルキル基を挙げることができる。

アルコキシカルボニル基としては、エチルオキシカルボニル基およびトリクロロエチルオキシカルボニル基等のアルキル部分の炭素数が１〜２０のアルコキシカルボニル基を挙げることができる。

アルキルシリル基としては、ｔｅｒｔ−ブチルシリル基およびトリエチルシリル基等を挙げることができる。

フルオロアルキル基、フルオロアシル基およびカルボキシフルオロアルキル基は、それぞれ、上記したアルキル基、アシル基およびカルボキシアルキル基において１以上の水素原子がフッ素原子で置換したものであり得る。

中でもＲ^３は、水素原子、アシル基およびアリール基が好ましく、水素原子、アセチル基およびベンジル基がより好ましく、水素原子が特に好ましい。

式（Ｉ）および（Ｉ’）において、Ｒ^４は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表している。いずれの基についてもＲ^３に例示した基と同じ基を例示することができる。中でもＲ^４は、水素原子、アシル基およびアリール基が好ましく、水素原子、アセチル基およびベンジル基がより好ましく、水素原子が特に好ましい。

式（ＩＩ）および（ＩＩ’）において、Ｒ^５は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表している。いずれの基についてもＲ^３に例示した基と同じ基を例示することができる。中でもＲ^５は、水素原子、アシル基およびアリール基が好ましく、水素原子、アセチル基およびベンジル基がより好ましく、水素原子が特に好ましい。

式（Ｉ’）および（ＩＩ’）において、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。アルキル基、ハロアルキル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基およびアリールオキシカルボニル基としては、Ｒ^１およびＲ^２の説明において例示したものを挙げることができる。

式（Ｉ）および（Ｉ’）ならびに式（ＩＩ）および（ＩＩ’）において、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表している。すなわち、１位の炭素原子における結合に関して言えば、２位の炭素原子に結合している−ＮＲ^１Ｒ^２との関係で、１，２−シス型となる結合、または１，２−トランス型となる結合であることを表している。１，２−シス型となる結合は、式（Ｉ）に示される化合物に関していえば、α１，４−結合を生じさせる結合であり、式（ＩＩ）に示される化合物に関していえば、α１，６−結合を生じさせる結合である。また、１，２−トランス型となる結合は、式（Ｉ）に示される化合物に関していえば、β１，４−結合を生じさせる結合であり、式（ＩＩ）に示される化合物に関していえば、β１，６−結合を生じさせる結合である。同様に、４位の炭素原子における結合に関して言えば、２位の炭素原子に結合している−ＮＲ^１Ｒ^２との関係で、２，４−シス型となる結合、または２，４−トランス型となる結合であることを表している。換言すれば、２，４−シス型となる結合は、４位の結合に関し、グルコサミンと同様の立体配置を表しており、２，４−トランス型となる結合は、ガラクトサミンと同様の立体配置を表している。

本態様における糖鎖化合物においては、１，２−シス型となっている糖残基が少なくとも１つ含まれていればよいが、糖鎖化合物中の１０％以上の糖残基が１，２−シス型であることが好ましく、１５％以上の糖残基が１，２−シス型であることがより好ましく、２０％以上の糖残基が１，２−シス型であることがさらに好ましく、全ての糖残基が１，２−シス型であることが特に好ましい。

本態様における糖鎖化合物は、オリゴ糖および多糖の何れであってもよい。本明細書においてオリゴ糖とは、単糖単位が２以上かつ１６以下重合している重合糖を意味している。また、多糖とは、単糖単位が１７以上重合している重合糖を意味している。

本態様における糖鎖化合物がオリゴ糖である場合、糖残基の数は２以上１６以下であることが好ましく、２以上１０以下であることがより好ましく、２以上８以下であることが特に好ましい。

一方、本態様における糖鎖化合物が多糖である場合、質量平均分子量が１，０００以上３０，０００以下であることが好ましく、１，０００以上１０，０００以下であることがより好ましく、１，０００以上５，０００以下であることが特に好ましい。

本態様における糖鎖化合物の還元末端および非還元末端は、いずれも、それぞれ独立に、アセチル基；ベンジル基；ｐ−メトキシフェニル基；アミノ基を含むアルキル基；およびアリル基；ならびに蛍光標識基等で修飾されていてもよい。あるいは、他の単糖が結合していてもよい。

本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様における糖鎖化合物のより好ましい形態は、下記式（ＩＸ）で示されるオリゴ糖（ＩＸ）である。

式（ＩＸ）中、Ｒ^１〜Ｒ^４の定義は、式（Ｉ）におけるＲ^１〜Ｒ^４の定義と同じである。Ｒ^１１は、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、グルコサミン、グルクロン酸、イズロン酸またはアシル基を表し、Ｒ^１２は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、グルコサミン、グルクロン酸、イズロン酸またはアシル基を表し、ｎは２〜１６の整数を表す。

オリゴ糖（ＩＸ）の中でも、Ｒ^１が水素原子、アシル基、アルコキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基、Ｒ^２が水素原子、アセチル基またはトリフルオロアセチル基、ベンゾイル基またはアルキル基、Ｒ^３が水素原子、アセチル基またはベンジル基、Ｒ^４が水素原子、アセチル基またはベンジル基、ｎが２〜１６の整数であるオリゴ糖がさらに好ましく、Ｒ^１が水素原子、Ｒ^２が水素原子またはアセチル基、Ｒ^３が水素原子、Ｒ^４が水素原子、ｎが４〜８の整数であるオリゴ糖が特に好ましい。

本態様における糖鎖化合物は、後述する〔２．糖鎖化合物の製造方法〕において説明する製造方法により製造することができる。しかしながら本態様における糖鎖化合物の製造方法は当該製造方法に限定されるものではない。

第一の態様に係る糖鎖化合物は、キチンおよびキトサンと同様に、（ｉ）創傷被覆材、止血剤、手術用縫合糸および人工骨などの医用材料の原料、（ｉｉ）化粧品に抗菌性および保湿性を付与するための助剤の原料、（ｉｉｉ）衣類品、寝装品、家電製品およびベビー用品等の繊維製品における繊維原料、（ｉｖ）甘味料および増粘安定剤等の食品添加物または健康食品としての食品材料の原料、（ｖ）植物病の予防剤、成長促進剤、土壌改良剤、飼料添加材および動物病治療剤等の農業用品材料の原料、（ｖｉ）廃水処理担体としての材料、（ｖｉｉ）ドラッグ・デリバリー・システムに使用可能な担体、ならびに（ｖｉｉｉ）液晶添加物など、種々の技術分野の材料原料として用いることができる。

なお、本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様は、次の（ａ’）および（ｂ’）のように表現することもできる。
（ａ’）式（Ｉ）または（Ｉ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖であって、１以上のα１，４−グリコシド結合を含む、多糖またはオリゴ糖。
（ｂ’）式（ＩＩ）または（ＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖であって、１以上のα１，６−グリコシド結合を含む、多糖またはオリゴ糖。

（第二の態様）
本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様は、次の（ｃ）または（ｄ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｃ）式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｄ）式（ＩＶ）または（ＩＶ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）ならびに式（ＩＶ）および（ＩＶ’）における、Ｒ^１〜Ｒ^３および波線の定義は、上記式（Ｉ）および（ＩＩ）におけるＲ^１〜Ｒ^３および波線の定義と同じである。また、式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）におけるＲ^４の定義ならびに式（ＩＶ）および（ＩＶ’）におけるＲ^５の定義は、それぞれ式（Ｉ）におけるＲ^４の定義および式（ＩＩ）におけるＲ^５の定義と同じである。

式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）ならびに式（ＩＶ）および（ＩＶ’）におけるＲ^６およびＲ^７は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表している。

アシル基としては、アセチル基、ベンゾイル基、ｐ−メトキシベンゾイル基、ｐ−ニトロベンゾイル基およびピバロイル基を挙げることができる。

ヒドロキシアルキル基としては、ヒドロキシエチル基、ヒドロキシプロピル基、グリセリル基等の炭素数１〜２０のヒドロキシアルキル基を挙げることができる。

アルコキシカルボニル基としては、エチルオキシカルボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基およびベンジルオキシカルボニル基等のアルコキシ部分の炭素数が１〜２０のアルコキシカルボニル基を挙げることができる。

中でもＲ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７としては、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基およびリン酸基が好ましく、それぞれ独立に、水素原子およびアシル基がより好ましく、それぞれ独立に、水素原子およびアセチル基がさらに好ましく、水素原子が特に好ましい。

式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）ならびに式（ＩＶ）および（ＩＶ’）におけるＲ^８は、−ＣＨ_２ＯＲ^９または−ＣＯＯＲ^１０を表している。

ここで、Ｒ^９は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表している。

中でもＲ^９としては、水素原子、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基およびカルボキシフルオロアルキル基が好ましく、水素原子がより好ましい。

また、Ｒ^１０は、水素原子、メチル基、エチル基、ベンジル基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基またはｔｅｒｔ−ブチル基を表している。中でもＲ^１０としては、水素原子、メチル基およびベンジル基が好ましく、水素原子がより好ましい。

また、Ｒ^８としては、−ＣＯＯＲ^１０が好ましい。

式（ＩＩＩ’）および式（ＩＶ’）において、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。アルキル基、ハロアルキル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基およびアリールオキシカルボニル基としては、Ｒ^１およびＲ^２の説明において例示したものを挙げることができる。

式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）ならびに式（ＩＶ）および（ＩＶ’）において、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表している。すなわち、式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）中、左側の糖（アミノ糖）の１位の炭素原子における結合に関して言えば、同じ糖の２位の炭素原子に結合している−ＮＲ^１Ｒ^２との関係で、１，２−シス型となる結合、または１，２−トランス型となる結合であることを表している。１，２−シス型となる結合は、式（ＩＩＩ）に示される糖単位に関していえば、式（ＩＩＩ）に示される糖単位中でα１，４−結合を生じさせる結合であり、式（ＩＶ）に示される糖単位に関していえば、式（ＩＶ）に示される糖単位中でα１，４−結合を生じさせる結合である。また、１，２−トランス型となる結合は、式（Ｉ）に示される糖単位に関していえば、式（ＩＩＩ）に示される糖単位中でβ１，４−結合を生じさせる結合であり、式（ＩＶ）に示される化合物に関していえば、式（ＩＶ）に示される糖単位中でβ１，４−結合を生じさせる結合である。同様に、式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）中、左側の糖の４位の炭素原子における結合に関して言えば、２位の炭素原子に結合している−ＮＲ^１Ｒ^２との関係で、２，４−シス型となる結合、または２，４−トランス型となる結合であることを表している。換言すれば、２，４−シス型となる結合は、４位の結合に関して、グルコサミンと同様の立体配置を表しており、２，４−トランス型となる結合は、ガラクトサミンと同様の立体配置を表している。

本態様における糖鎖化合物においては、１，２−シス型となっている糖残基が少なくとも１つ含まれていればよいが、糖鎖化合物に含まれる式（ＩＩＩ）もしくは（ＩＩＩ’）または式（ＩＶ）もしくは（ＩＶ’）で示される糖単位のうち、１０％以上の糖単位が１，２−シス型を含む糖単位であることが好ましく、３０％以上の糖単位が１，２−シス型を含む糖単位であることがより好ましく、全ての糖単位が１，２−シス型を含む糖単位であることが特に好ましい。換言すれば、式（ＩＩＩ）もしくは（ＩＩＩ’）または式（ＩＶ）もしくは（ＩＶ’）で示される糖単位のうち、１０％以上の糖単位がα１，４−結合で構成された糖単位であることが好ましく、３０％以上の糖単位がα１，４−結合で構成された糖単位であることがより好ましく、全ての糖単位がα１，４−結合で構成された糖単位であることが特に好ましい。

本態様における糖鎖化合物の還元末端および非還元末端は、いずれも、それぞれ独立に、アセチル基；ベンジル基；ｐ−メトキシフェニル基；アミノ基を含むアルキル基；アリル基；および蛍光標識基等で修飾されていてもよい。あるいは他の単糖が結合していてもよい。

本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様におけるより好ましい形態は、具体的には、次の（ｅ）または（ｆ）に記載の糖鎖化合物である。
（ｅ）式（ＩＩＩａ）または（ＩＩＩａ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｆ）式（ＩＶａ）または（ＩＶａ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

式（ＩＩＩａ）および（ＩＩＩａ’）において、Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^８および波線は、上記式（ＩＩＩ）における定義と同じである。同様に、式（ＩＶａ）および（ＩＶａ’）において、Ｒ^１〜Ｒ^３、Ｒ^５〜Ｒ^８および波線は、上記式（ＩＶ）における定義と同じである。式（ＩＩＩａ’）および式（ＩＶａ’）において、Ｒ^２４は、それぞれ式（ＩＩＩ’）および式（ＩＶ’）におけるＲ^２４における定義と同じである。

本態様におけるオリゴ糖は、糖残基の数が４以上１６以下であるオリゴ糖であり、糖残基の数が４以上１０以下であることがより好ましく、４以上８以下であることが特に好ましい。

本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様におけるさらに好ましい形態は、下記式（Ｘ）で示されるオリゴ糖（Ｘ）である。

式（Ｘ）において、Ｒ^１〜Ｒ^４およびＲ^６〜Ｒ^８の定義は、式（ＩＩＩ）におけるＲ^１〜Ｒ^４およびＲ^６〜Ｒ^８の定義と同じである。Ｒ^１１およびＲ^１２の定義は、式（ＩＸ）におけるＲ^１１およびＲ^１２の定義と同じである。ｍは２〜８の整数を表す。

オリゴ糖（Ｘ）の中でも、Ｒ^１およびＲ^２が、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６およびＲ^７が、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基またはリン酸基、Ｒ^８が−ＣＯＯＲ^１０で表される基であって、Ｒ^１０が水素原子、メチル基またはベンジル基を表し、ｍが２〜８の整数であるオリゴ糖がさらに好ましく、Ｒ^１が水素原子、Ｒ^２が水素原子またはアセチル基、Ｒ^３が水素原子、Ｒ^４が水素原子、Ｒ^６が水素原子、Ｒ^７が水素原子、Ｒ^８が−ＣＯＯＨを表し、ｍが２〜４の整数であるオリゴ糖が特に好ましい。

本態様に係る糖鎖化合物の酸素原子、低分子ヘパリンの合成の前駆体として利用することができる。したがって、本態様に係る糖鎖化合物を用いることにより、化学合成によって低分子ヘパリンを製造することができる。そのため、大腸菌由来のエンドトキシンなどの異物混入を防ぐことができ、品質に関して厳密な管理が可能となる。

なお、本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様は、次の（ｃ’）および（ｄ’）のように表現することもできる。
（ｃ’）式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖であって、１以上のα１，４−グリコシド結合を含む、オリゴ糖。
（ｄ’）式（ＩＶ）または（ＩＶ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖であって、１以上のα１，４−グリコシド結合を含む、オリゴ糖。

〔２．糖鎖化合物の製造方法〕
本発明の糖鎖化合物の製造方法は、上述の第一の態様に係る糖鎖化合物または第二の態様に係る糖鎖化合物を好適に製造できる方法である。本製造方法は、（ｉ）基質となる糖鎖化合物を準備する準備工程、（ｉｉ）準備した糖鎖化合物にカルバメート基を導入するカルバメート基導入工程、および（ｉｉｉ）カルバメート基が導入された糖鎖化合物を有機溶媒中、特定の酸と反応させる異性化工程を含んでいる。本製造方法は、これらの工程が含まれていればよく、糖鎖化合物に対する他の修飾を行う工程など、他の工程が含まれていてもよい。本実施の形態では、（ｉｖ）異性化工程の後に脱保護を行う脱保護工程も含めて、各工程の詳細について説明する。

（１．準備工程）
準備工程は、次の（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）または（ｎ）に記載の糖鎖化合物を準備する工程である。
（ｋ）式（Ｉｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｌ）式（ＩＩｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｍ）式（ＩＩＩｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｎ）式（ＩＶｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

式（Ｉｂ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩＩｂ）および（ＩＶｂ）において、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表している。中でもＲ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子およびアシル基が好ましく、それぞれ独立に、水素原子およびアセチル基がより好ましい。

式（Ｉｂ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩＩｂ）および（ＩＶｂ）において、Ｒ^１５は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表している。中でもＲ^１５は、水素原子およびアシル基が好ましく、水素原子およびアセチル基がより好ましい。

式（Ｉｂ）および（ＩＩＩｂ）において、Ｒ^１６は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表している。中でも、Ｒ^１６は、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリメチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が好ましく、アリル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、スルホ基、リン酸基、メチルオキシカルボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ジメチルブチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基がより好ましく、ベンジル基、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基がさらに好ましく、ベンジル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が特に好ましく、ベンジル基が最も好ましい。

式（ＩＩｂ）および（ＩＶｂ）において、Ｒ^１７は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表している。中でもＲ^１７は、水素原子、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリメチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が好ましく、水素原子、アリル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、メチルオキシカルボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ジメチルブチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基がより好ましく、水素原子およびアセチル基がさらに好ましく、水素原子が特に好ましい。

式（ＩＩＩｂ）および（ＩＶｂ）において、Ｒ^１８は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表している。中でもＲ^１８は、水素原子、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリメチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が好ましく、水素原子、アリル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、スルホ基、リン酸基、メチルオキシカルボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ジメチルブチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基がより好ましく、水素原子およびアセチル基がさらに好ましく、水素原子が特に好ましい。

式（ＩＩＩｂ）および（ＩＶｂ）において、Ｒ^１９は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表している。中でもＲ^１９は、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリメチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が好ましく、アリル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、ナフチル基、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、スルホ基、リン酸基、メチルオキシカルボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ジメチルブチルシリル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基がより好ましく、アリル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基およびナフチル基がさらに好ましく、アリル基およびベンジル基が特に好ましく、ベンジル基が最も好ましい。

式（ＩＩＩｂ）および（ＩＶｂ）において、Ｒ^２０は、−ＣＨ_２ＯＲ^２１または−ＣＯＯＲ^２２を表している。

ここで、Ｒ^２１は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表している。中でもＲ^２１は、アリル基、アリール基、アシル基およびｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が好ましく、ベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、ｐ−メトキシベンジル基およびアリル基がより好ましく、ベンジル基およびｐ−メトキシベンジル基がさらに好ましく、ベンジル基が特に好ましい。

また、Ｒ^２２は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基またはアシル基を表している。中でもＲ^２２は、水素原子、アルキル基およびアリール基が好ましく、水素原子、メチル基およびベンジル基がより好ましく、水素原子が特に好ましい。なお、Ｒ^２０としては、−ＣＨ_２ＯＲ^２１がより好ましい。

波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表している。

糖鎖化合物が（ｋ）または（ｌ）に記載の化合物のうちのオリゴ糖である場合、糖残基の数は２以上１６以下であることが好ましく、２以上１０以下であることがより好ましく、２以上８以下であることが特に好ましい。

糖鎖化合物が（ｋ）または（ｌ）に記載の化合物のうちの多糖である場合、質量平均分子量が１，０００以上３０，０００以下であることが好ましく、１，０００以上１０，０００以下であることがより好ましく、１，０００以上５，０００以下であることが特に好ましい。

糖鎖化合物が（ｍ）または（ｎ）に記載のオリゴ糖である場合、糖残基の数は４以上１６以下であることが好ましく、４以上１０以下であることがより好ましく、４以上８以下であることが特に好ましい。

これら糖鎖化合物の準備は、化学合成による調製、市販品の購入、他者からの提供、天然に存在するものの単離精製など、特に制限されるものではない。また、（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）または（ｎ）に記載の糖鎖化合物の誘導体を取得し、この誘導体に対して修飾処理あるいは低分子化処理などを行うことにより、（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）または（ｎ）に記載の糖鎖化合物を準備するものであってもよい。化学合成による調製によれば、異物の混入を防ぐことができる。

（２．カルバメート基導入工程）
カルバメート基導入工程では、準備した糖鎖化合物にカルバメート基を導入する工程である。カルバメート基を導入する方法としては、例えば、準備した糖鎖化合物をトリホスゲンと反応させる手法が挙げられる。カルバメート基は、アミノ糖の２位の炭素に結合している−ＮＲ^１３Ｒ^１４（Ｒ^１３，Ｒ^１４がヒドロキシ基）および３位の炭素に結合している−ＯＲ^１５（Ｒ^１５がヒドロキシ基）を利用して導入される。そのため、形成されるカルバメート基は、２，３−トランスカルバメート基となる。

反応に用いられるトリホスゲンの量は、反応に供される糖鎖化合物が上記（ｋ）または（ｌ）に記載の糖鎖化合物の場合、糖鎖化合物に対して、例えば、０．４倍モル〜１００倍モルであり、好適には、０．４倍モル〜２０倍モルであり、より好適には、０．４倍モル〜１０倍モルである。一方、反応に供される糖鎖化合物が上記（ｍ）または（ｎ）に記載の糖鎖化合物の場合、糖鎖化合物に対して、例えば、０．７倍モル〜５０倍モルであり、好適には、０．７倍モル〜１０倍モルであり、より好適には、０．７倍モル〜５倍モルである。トリホスゲンは、複数回に分けて添加してもよい。

使用される溶媒としては、アセトニトリル、塩化メチレンおよびトルエン等の非プロトン性極性溶媒が用いられる。中でも、アセトニトリル、および塩化メチレンが好ましく、アセトニトリルが特に好ましい。アセトニトリルを用いる場合、塩化メチレン等の他の溶媒に比して、反応速度が速くなる。

反応温度および反応時間は、用いられる溶媒および糖鎖化合物の種類等に応じて適宜設定することができる。例えば、反応温度は、−４０℃〜４０℃であり、好適には−３０℃〜０℃である。また、反応時間は、例えば、０．１時間〜７２時間であり、好適には０．１時間〜１２時間である。

また、カルバメート基を導入する方法としては、他にも、糖鎖化合物をｐ−ニトロギ酸クロロエステルと反応させる手法が挙げられる。ｐ−ニトロギ酸クロロエステルの場合、その使用量は、糖鎖化合物に対して、２倍モル〜１０倍モルである。このとき使用される溶媒としては、アセトニトリル、塩化メチレンまたはトルエンと水との２相系の溶媒を用いることができる。中でもアセトニトリル−水系でおこなうことが望ましい。

カルバメート基導入工程を行うことにより、糖鎖化合物における、式（Ｉｂ）で示される糖単位、式（ＩＩｂ）で示される糖単位、式（ＩＩＩｂ）で示される糖単位、および式（ＩＶｂ）で示される糖単位は、具体的に、それぞれ、次の式（Ｖｂ）で示される糖単位、式（ＶＩｂ）で示される糖単位、式（ＶＩＩｂ）で示される糖単位、および式（ＶＩＩＩｂ）で示される糖単位に変換される。

式（Ｖｂ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩＩｂ）および（ＶＩＩＩｂ）において、Ｒ^２３は、水素原子、アセチル基、ベンジル基または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。

ここで、糖鎖化合物のカルバメート基の窒素原子に水素原子が結合している場合、すなわちＲ^２３が水素原子である場合、次の異性化工程の反応を行う前に、この水素原子を、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基で置換することが好ましい。

Ｒ^２３を、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基とすることにより、次の異性化工程において、より効率良く１，２−トランス型から１，２−シス型への異性化を実現することができる。

水素原子を、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基で置換する方法としては、公知の類似の反応に用いられている方法を用いることができる。

例えば、水素原子をアセチル基に置換する方法としては、ピリジンの存在下、またはピリジンおよびＮ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で、糖鎖化合物を無水酢酸と反応させる方法が挙げられる。

また、水素原子をメトキシカルボニル基に置換する方法としては、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中、ｎ−ブチルリチウムを糖鎖化合物に作用させ、クロロギ酸メチルを加えて合成する方法が挙げられる。

また、水素原子をアリルオキシカルボニル基に置換する方法としては、ＴＨＦ中、ｎ−ブチルリチウムを糖鎖化合物に作用させ、クロロギ酸アリルを加えて合成する方法が挙げられる。

また、水素原子をベンジルオキシカルボニル基に置換する方法としては、ＴＨＦ中、ｎ−ブチルリチウムを糖鎖化合物に作用させ、クロロギ酸ベンジルを加えて合成する方法が挙げられる。

また、水素原子を２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基に置換する方法としては、ＴＨＦ中、ｎ−ブチルリチウムを糖鎖化合物に作用させ、クロロギ酸２，２，２−トリクロロエチルを加えて合成する方法が挙げられる。

（３．異性化工程）
異性化工程では、カルバメート基が導入された糖鎖化合物を、有機溶媒中、塩酸、ビス（トリフルオロメチルスルホニル）イミドもしくはトリフルオロ酢酸または弱酸性のルイス酸と反応させることにより、１，２−トランス型であったアミノ糖部分を１，２−シス型のアミノ糖部分に変換させる。なお、本明細書において、この変換のことを異性化という。

本明細書において、弱酸性のルイス酸とは、非プロトン性環境下でピラノシドのエンド開裂反応を行う際に従来用いられているルイス酸である四塩化スズ（ＳｎＣｌ_４）およびジメチル臭化ホウ素（Ｍｅ_２ＢＢｒ）よりも酸性度の弱いルイス酸の意味である。このようなルイス酸としては、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（ＢＦ_３・ＯＥｔ_２）、塩化鉄（ＩＩＩ）、およびトリフルオロメタンスルホン酸銅（ＩＩ）（Ｃｕ（ＯＴｆ）_２）が挙げられる。

異性化反応に用いる酸としては、中でも、弱酸性のルイス酸が好ましく、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体が特に好ましい。

異性化反応に用いる酸の量は、反応に供される糖鎖化合物に対して、０．１倍モル〜１０倍モルであることが好ましく、０．１倍モル〜５倍モルであることがより好ましく、０．１倍モル〜２倍モルであることが特に好ましい。

反応に用いる有機溶媒としては、アセトニトリル、塩化メチレンおよびトルエン等の非プロトン性極性溶媒を挙げることができる。中でも、アセトニトリル、および塩化メチレンが好ましく、アセトニトリルが特に好ましい。

反応温度は、２５℃以下であることが好ましく、−４０℃〜２０℃であることがより好ましく、−３０℃〜０℃であることが特に好ましい。

反応時間は、用いられる溶媒および糖鎖化合物の種類、ならびに反応温度に応じて適宜設定することができる。例えば、０．１時間〜７２時間であり、好適には０．１時間〜１２時間である。

異性化工程までの反応により、次の（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）または（ｊ）に記載の糖鎖化合物であって、１，２−シス型の糖残基を含む、糖鎖化合物が得られる。
（ｇ）下記式（Ｖ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｈ）下記式（ＶＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｉ）下記式（ＶＩＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｊ）下記式（ＶＩＩＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

式（Ｖ）において、Ｒ^１６およびＲ^２３は、それぞれ上記式（Ｖｂ）におけるＲ^１６はおよびＲ^２３と同じである。また、式（ＶＩ）において、Ｒ^１７はおよびＲ^２３は、それぞれ上記式（ＶＩｂ）におけるＲ^１７およびＲ^２３と同じである。また、式（ＶＩＩ）において、Ｒ^１６、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０およびＲ^２３は、それぞれ上記式（ＶＩＩｂ）におけるＲ^１６、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０およびＲ^２３と同じである。また、式（ＶＩＩＩ）において、Ｒ^１７、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０およびＲ^２３は、それぞれ上記式（ＶＩＩＩｂ）におけるＲ^１７、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０およびＲ^２３と同じである。式（Ｖ）〜式（ＶＩＩＩ）において、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表している。

とりわけ、糖鎖化合物がオリゴ糖である場合には、各条件を好適な条件に設定して反応を行うことにより、全てのアミノ糖部分において、１，２−シス型への異性化を行うことができる。

上記（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）または（ｊ）に記載の糖鎖化合物であって、１，２−シス型の糖残基を含む、糖鎖化合物は、本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様および第二の態様の好適な中間体化合物である。そのため、上記（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）または（ｊ）に記載の糖鎖化合物であって、１，２−シス型の糖残基を含む、糖鎖化合物もまた、本発明の範疇に含まれるものである。また、この中間体化合物における糖残基の数および１，２−シス型の糖残基の存在量の好ましい態様は、上述の糖鎖化合物の第一の態様および第二の態様における糖残基の数および１，２−シス型の糖残基の存在量の好ましい態様と同じである。

なお、次の脱保護工程において効果的に脱保護を行うために、Ｒ^１６およびＲ^２０は、アセチル基またはベンジル基であることが特に好ましい。

なお、α型（１，２−シス型）では１位（アノマー位)の１Ｈ−ＮＭＲのカップリング定数が２〜３Ｈｚであるのに対し、β型（１，２−トランス型）では８〜１０Ｈｚであること、およびα型はβ型に比べて化学シフト値が低磁場に移動することから、これらを確認することによりα型への異性化を確認することができる。

（４．脱保護工程）
脱保護工程では、異性化工程までの反応により得られた糖鎖化合物において、ヒドロキシ基およびアミノ基に施されていた保護の脱保護を行う。これにより、上述の第一の態様に係る糖鎖化合物のうち、式（Ｉ）においてＲ^１、Ｒ^３およびＲ^４が水素原子、Ｒ^２が水素原子またはアセチル基である糖鎖化合物、および式（ＩＩ）においてＲ^１、Ｒ^３およびＲ^５が水素原子、Ｒ^２が水素原子またはアセチル基である糖鎖化合物、ならびに上述の第一の態様に係る糖鎖化合物のうち、式（ＩＩＩ）においてＲ^１、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^９、およびＲ^１０が水素原子、Ｒ^２が水素原子またはアセチル基である糖鎖化合物、および式（ＩＶ）においてＲ^１、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^９、およびＲ^１０が水素原子、Ｒ^２が水素原子またはアセチル基である糖鎖化合物を得ることができる。

脱保護は、類似の公知の反応に用いられる方法を使用することができる。例えば、水酸化ナトリウム−メタノール、あるいはナトリウムメトキシドを用いた加メタノール分解による方法、および水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、あるいは水酸化カリウムを用いた加水分解による方法などにより脱保護を行うことができる。

脱保護工程の後、ヒドロキシ基および（Ｎ−アセチル）アミノ基への修飾を行ってもよい。当該修飾としては、ヒドロキシ基または（Ｎ−アセチル）アミノ基の水素原子を、アルキル基、ハロアルキル基、アシル基、アリル基、アリール基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、またはアルキルシリル基等へ置換することが挙げられる。

水素原子におけるこれらの基への置換は、当業者であれば従来公知の類似の方法を参照して適宜条件設定を行い、実施することが可能である。

（まとめ）
本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様は、下記（ａ）または（ｂ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を含む、糖鎖化合物である。
（ａ）下記式（Ｉ）または（Ｉ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｂ）下記式（ＩＩ）または（ＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。

（式（ＩＩ）および（ＩＩ’）中、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表し、Ｒ^３およびＲ^５は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アシル基、アリル基、アリール基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基またはスルホ基を表し、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。式（ＩＩ’）中、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。）
また、本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様では、オリゴ糖であることが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様において、糖残基の数は２〜１６であることが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様において、全ての糖残基が１，２−シス型であることが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の第一の態様において、１０％以上の糖残基が１，２−シス型であることが好ましい。

本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様は、下記（ｃ）または（ｄ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｃ）下記式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｄ）下記式（ＩＶ）または（ＩＶ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

（式（ＩＶ）および（ＩＶ’）中、Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表し、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表し、Ｒ^８は、−ＣＨ_２ＯＲ^９または−ＣＯＯＲ^１０を表し、Ｒ^９は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、リン酸基、スルホ基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基またはカルボキシフルオロアルキル基を表し、Ｒ^１０は、水素原子、メチル基、エチル基、ベンジル基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基またはｔｅｒｔ−ブチル基を表し、波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。式（ＩＶ’）中、Ｒ^２４は、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基またはアリールオキシカルボニル基を表す。）
また、本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様では、下記（ｅ）または（ｆ）に記載の糖鎖化合物であることが好ましい。
（ｅ）下記式（ＩＩＩａ）または（ＩＩＩａ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。
（ｆ）下記式（ＩＶａ）または（ＩＶａ’）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

（式（ＩＩＩａ）および（ＩＩＩａ’）におけるＲ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^８および波線は、上記式（ＩＩＩ）および（ＩＩＩ’）における定義と同じである。また、式（ＩＩＩａ’）におけるＲ^２４は、上記式（ＩＩＩ’）における定義と同じである。）

（式（ＩＶａ）および（ＩＶａ’）におけるＲ^１〜Ｒ^３、Ｒ^５〜Ｒ^８および波線は、上記式（ＩＶ）および（ＩＶ’）における定義と同じである。また、式（ＩＶａ’）におけるＲ^２４は、上記式（ＩＶ’）における定義と同じである。）
また、本発明に係る糖鎖化合物の第二の態様では、糖残基の数が４〜１５であることが好ましい。

本発明に係る糖鎖化合物の第三の態様は、下記（ｇ）または（ｈ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｇ）下記式（Ｖ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。
（ｈ）下記式（ＶＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。

（式（ＶＩ）中、Ｒ^１７は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
本発明に係る糖鎖化合物の第四の態様は、下記（ｉ）または（ｊ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物である。
（ｉ）下記式（ＶＩＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。（ｊ）下記式（ＶＩＩＩ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖。

（式（ＶＩＩＩ）中、Ｒ^１７〜Ｒ^２０は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
本発明に係る糖鎖化合物の製造方法は、１，２−シス型の糖残基を含む糖鎖化合物の製造方法であって、
（ｉ）下記（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）または（ｎ）に記載の糖鎖化合物を準備する工程、
（ｋ）下記式（Ｉｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖、
（ｌ）下記式（ＩＩｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖、
（ｍ）下記式（ＩＩＩｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖、
（ｎ）下記式（ＩＶｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されているオリゴ糖、

（式（ＩＩＩｂ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５、Ｒ^１６、Ｒ^１８およびＲ^１９は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２０は、−ＣＨ_２ＯＲ^２１または−ＣＯＯＲ^２２を表し、Ｒ^２１は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２２は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基またはアシル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）

（式（ＩＶｂ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５、Ｒ^１７、Ｒ^１８およびＲ^１９は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２０は、−ＣＨ_２ＯＲ^２１または−ＣＯＯＲ^２２を表し、Ｒ^２１は、水素原子、アルキル基、アリル基、アリール基、アシル基、ヒドロキシアルキル基、カルボキシアルキル基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンゾイルオキシカルボニル基、スルホ基、リン酸基、スルホ基、アルキルシリル基、フルオロアルキル基、フルオロアシル基、カルボキシフルオロアルキル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２２は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基またはアシル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
（ｉｉ）上記（ｉ）の工程で準備した上記糖鎖化合物にカルバメート基を導入する工程、および、
（ｉｉｉ）カルバメート基が導入された上記糖鎖化合物を、有機溶媒中、塩酸、ビス（トリフルオロメチルスルホニル）イミドもしくはトリフルオロ酢酸または弱酸性のルイス酸と反応させる工程、
を含む、糖鎖化合物の製造方法である。

また、本発明に係る糖鎖化合物の製造方法において、上記（ｉｉ）の工程で得られた上記糖鎖化合物のカルバメート基の窒素原子には、水素原子が結合しており、上記（ｉｉｉ）の工程に先立って、該水素原子を、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基で置換することを含むことが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の製造方法では、上記（ｉｉｉ）の工程を２５℃以下で行うことが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の製造方法において、上記（ｉｉｉ）の工程で得られる上記糖鎖化合物の保護基の脱保護を行う工程をさらに含むことが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の製造方法において、上記（ｉｉｉ）の工程では、上記糖鎖化合物を、弱酸性のルイス酸である三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体と反応させることが好ましい。

また、本発明に係る糖鎖化合物の製造方法において、上記（ｉｉｉ）の工程の反応に供される上記糖鎖化合物のカルバメート基の窒素原子に、アセチル基が結合していることが好ましい。

以下に実施例を示し、本発明の実施の形態についてさらに詳しく説明する。もちろん、本発明は以下の実施例に限定されるものではなく、細部については様々な態様が可能であることはいうまでもない。さらに、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、それぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本願の優先権主張の基礎となる日本国特許出願「特願２０１３−０４１３１２」、および本明細書において言及されている全ての特許文献、および他の刊行物は、その全体が参照として本明細書に組み込まれる。

実施例に示す化学式中、「ＮＰｈｔｈ」は、フタルイミドを表し、「ＭＰ」は、ｐ−メトキシフェニルを表し、「Ｂｎ」は、ベンジルを表し、「Ｂｚ」は、ベンゾイルを表し、「Ａｃ」は、アセチルを表し、「ＴＢＤＰＳ」は、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルを表し、「ＴＢＳ」は、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを表し、「ＳＰｈ」はチオフェニルを表す。波線は、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。また、式（１）で示される化合物を化合物（１）と称し、式（２）で示される化合物を化合物（２）と称する。式（３）以降の化合物も同様である。

〔実施例１：１，４−α（Ｎ−アセチル）グルコサミンオリゴマーの合成１〕
（１−１：二糖の合成）

化合物（１）（０．７４ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）および化合物（２）（０．６３ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１５ｍＬ）に溶解した溶液に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（２１μＬ、０．１７４ｍｍｏｌ）を、−６０℃で添加した。１２時間後、混合液中にトリエチルアミンを添加して、混合液を中和した。次いで、混合液をクロロホルムおよび飽和炭酸水素ナトリウム溶液にて希釈した。クロロホルムを用いて水層を抽出し、合わせた層をブラインにて洗浄した後、硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濃縮した。粗製物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝７：３〜１：１）を用いて精製し、化合物（３）を得た（１．０３ｇ、収率：９２％）。
¹H-NMR δ 7.82-7.79 (m, 4H), 7.71-7.58 (m, 4H), 7.42-7.10 (m, 8H), 6.76 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 5.82 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.71 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 4.39 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.28-4.16 (m, 4H), 4.10 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.71-3.69 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 1.95 (s, 3H), 1.85 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 170.2, 169.7, 167.9, 155.5, 150.5, 137.9, 136.7, 134.3, 131.4, 129.2, 129.0, 128.2, 128.2, 128.2, 127.5, 127.4, 126.2, 126.2, 125.3, 123.6, 119.0, 114.3, 101.7, 98.4, 97.4, 79.0, 75.5, 74.4, 72.7, 72.1, 69.6, 68.6, 67.3, 66.1, 55.7, 55.5, 54.9, 21.4, 20.8, 20.5; HRMS calcd for [C₅₃H₄₈N₂O₁₆+Na]⁺991.2896, found 991.2908.
（１−２：四糖の合成）

化合物（３）（０．６４ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、トリエチルシラン（１．２ｍＬ、７．５１ｍｍｏｌ）および三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（０．１９ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）を、４℃で添加した。２時間後、混合液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびクロロホルムにて希釈した。クロロホルムを用いて水層を抽出し、有機層をブラインにて洗浄した。抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝７：３〜１：１）を用いて精製し、化合物（４）を得た（０．５５ｇ、収率：８２％）。
¹H-NMR δ 7.81 (m, 4H), 7.69 (m, 4H), 7.33-7.16 (m, 10H), 7.33-7.16 (m, 1H), 6.76 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.72 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.57 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 5.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.42-4.27 (m, 3H), 4.14-4.09 (m, 2H), 3.84-3.74 (m, 2H), 3.77-3.45 (m, 8H), 3.71 (s, 3H), 1.89 (s, 3H), 1.86 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 171.0, 170.0, 155.5, 150.6, 138.1, 137.4, 134.2, 131.5, 128.5, 128.2, 127.9, 127.7, 127.4, 123.5, 118.9, 114.3, 97.4, 97.2, 74.5, 74.4, 73.6, 73.5, 73.2, 72.7, 71.6, 70.0, 67.5, 55.5, 54.9, 20.6; HRMS calcd for [C₅₃H₅₀N₂O₁₆+Na]⁺993.3053, found 993.3070.

化合物（４）（０．３０ｇ、０．３０９ｍｍｏｌ）をピリジン（３ｍＬ）に溶解し、ここに無水酢酸（１ｍＬ）を添加した。混合液を室温にて一晩攪拌した後、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝４：１）を用いて精製し、化合物（５）を得た（０．３１ｇ、収率：１００％）。
¹H-NMR δ 7.81 (m, 4H), 7.70-7.69 (m, 4H), 7.35-7.17 (m, 10H), 6.76 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.63 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 5.73 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 5.70 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.57 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 5.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.42-4.27 (m, 3H), 4.14-4.09 (m, 2H), 3.81 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.76 (dd, J = 10.0, 4.4 Hz, 1H), 3.69-3.66 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.58 (m, 1H), 3.51-3.42 (m, 3H), 1.88 (s, 3H), 1.85 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 171.0, 170.0, 155.5, 150.6, 138.1, 137.3, 134.2, 131.4, 128.5, 128.2, 127.9, 127.7, 127.4, 123.5, 118.9, 114.3, 97.3, 97.2, 74.5, 74.4, 73.6, 73.5, 73.2, 72.7, 71.6, 71.4, 70.0, 67.5, 55.5, 54.9, 54.9, 21.6, 20.6; HRMS calcd for [C₅₅H₅₂N₂O₁₇+Na]⁺1035.3158, found 1035.3168.

化合物（５）（１．１９ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）をトルエン（１４ｍＬ）に溶解した溶液に、アセトニトリル（１８ｍＬ）、水（１４ｍＬ）およびヘキサニトラトセリウム（ＩＶ）酸アンモニウム（３．２ｍＬ、３．６６ｍｍｏｌ）を、４℃で添加した。２時間後、混合液を水およびクロロホルムにて希釈した。水層と有機層とを分離させた後、クロロホルムを用いて水層を抽出し、合わせた層をブラインにて洗浄した。合わせた層を硫酸ナトリウム上で乾燥させて、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル）を用いて精製し、ヘミアセタールを得た。

このヘミアセタールを塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解し、ここに三フッ化Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ硫黄（０．２３ｍＬ）を添加した。３０分後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させた。クロロホルムを用いて水層を抽出し、合わせた層をブラインにて洗浄した。濃縮後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル）を用いて精製し、化合物（６）を１．１０g得た。

化合物（６）（１．２２ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）および化合物（４）（０．９７ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸ハフニウム（１．１６ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を−４０℃で添加した。混合物を、−４０℃で１時間攪拌した後、−２０℃で１時間攪拌し、さらに、０℃で３時間攪拌した。次いで、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させた。酢酸エチルにて希釈し、セライト濾過した。酢酸エチルにて水層を抽出した。合わせた有機層をブラインにて洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝７：３〜１：１）を用いて残留物を精製し、４糖である化合物（７）を得た（１．５４ｇ、収率：８３％）。
¹H-NMR δ 7.88-7.85 (m, 4H), 7.78-7.72 (m, 8H), 7.67-7.65 (m, 4H), 7.33-7.18 (m, 17H), 7.15-7.12 (m, 2H), 7.12-7.10 (m, 2H), 6.90 (m, 1H), 6.74-7.64 (m, 2H), 6.61-6.60 (m, 2H), 5.66-5.61 (m, 3H), 5.46-5.43 (m, 2H), 5.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.23-5.13 (m, 3H), 4.50-4.32 (m, 10H), 4.14-3.98 (m, 7H), 3.65 (s, 3H), 3.56-3.46 (m, 4H), 3.40-3.32 (m, 4H), 3.26 (dd, J = 10.4, 8.4, Hz, 1H), 3.18 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 2.74 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 1.83 (s, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.77 (s, 3H), 1.63 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 170.3, 170.2, 169.4, 168.1, 167.2, 155.4, 150.6, 138.2, 138.1, 137.9, 137.6, 134.3, 131.4, 129.0, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.4, 127.3, 127.2, 127.1, 126.9, 125.3, 123.6, 123.5, 118.8, 114.3, 97.4, 96.5, 96.4, 95.9, 74.4, 73.9, 73.6, 73.4, 73.3, 72.8, 72.6, 72.5, 72.2, 72.2, 72.1, 70.9, 70.9, 70.7, 69.4, 55.5, 55.3, 55.2, 55.0, 54.8, 21.4, 20.6, 20.5, 20.4; [α] -3.2 (c 1.2, CHCl₃); HRMS calcd for [C₁₀₁H₉₄N₄O₃₁+Na]⁺1181.5794, found 1881.5810.
（１−３：カルバメート基の導入）

化合物（７）（２．００ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）およびエチレンジアミン（５ｍＬ）の混合溶液に溶解し、窒素雰囲気下で２日間、８０℃で攪拌した。濃縮後、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０（クロロホルム：メタノール＝１：１）を用いて粗製物を精製し、化合物（８）を得た（１．２８ｇ、収率：１００％）。

化合物（８）（４３０．０ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（６４０ｍｇ、７．６２ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（１２ｍＬ）および水（３ｍＬ）の混合溶液に溶解し、ここにトリホスゲン（３６２．０ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を添加した。１２時間後、トリホスゲン（１８０．０ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（３２０．０ｍｇ、３．８１ｍｍｏｌ）をさらに添加した。混合液をクロロホルムおよびブラインにて希釈し、クロロホルムを用いて抽出した。合わせた層をブラインにて洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝９：１）を用いて残留物を精製し、化合物（９）を得た（３０３ｍｇ、収率：６４％）。
¹H-NMR δ7.31-7.24 (m, 20H), 6.97 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.21 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 5.00 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.69-4.43 (m, 11H), 4.21 (m, 2H), 4.20 (m, 2H), 3.98-3.96 (m, 4H), 3.78-3.60 (m, 12H), 3.76 (s, 3H), 3.53-3.45 (m, 4H), 3.31-3.30 (m, 3H), 3.14 (s, 1H),¹³C-NMR δ 159.2, 159.1, 154.9, 150.0, 138.8, 138.5, 138.4, 128.2, 128.2, 127.5, 118.1, 114.5, 100.2, 100.2, 98.9, 79.2, 78.8, 78.6, 77.1, 76.5, 74.4, 72.6, 72.2, 68.1, 66.7, 58.7, 58.5, 55.4, 55.4; [α] -24.5 (c 0.60, CHCl₃).

化合物（９）（３９．０ｍｇ、０．０３１６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（１．１ｍｇ、０．００６３ｍｍｏｌ）をピリジン（０．１ｍＬ）に溶解し、ここに無水酢酸（０．１ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を、室温にて一晩攪拌した。濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝７：３）を用いて粗製物を精製し、化合物（１０）を得た（３１．９ｍｇ、収率：７０％）。
¹H-NMR δ 7.38-7.26 (m, 20H), 7.09 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.54 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.30-5.26 (m, 4H), 4.65-4.35 (m, 12H), 4.35-3.05 (m, 10H), 3.89-3.66 (m, 10H), 3.77 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.45 (s, 6H), 2.46 (s, 3H), 2.12 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 170.6, 170.4, 170.3, 169.8, 155.4, 153.2, 153.1, 153.1, 150.9, 138.0, 137.9, 137.8, 137.5, 128.4, 127.9, 127.8, 118.5, 114.6, 99.3, 99.3, 97.8, 96.9, 79.4, 78.5, 78.4, 78.4, 75.9, 75.8, 75.7, 75.5, 75.1, 74.9, 74.8, 73.6, 73.3, 71.2, 71.0, 70.9, 70.9, 70.4, 60.5, 60.4, 60.0, 55.7, 24.5, 24.4, 24.4, 10.8; [α] - 110 (c 0.55, CHCl₃).
（１−４：異性化反応）

化合物（１０）（６０．０ｍｇ、０.０４１６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（０．６ｍＬ）に溶解した溶液に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１１μｌ、０．０８３２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合液を、０℃で１０時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させた。クロロホルムを用いて水層を抽出し、合わせた層をブラインにて洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて残留物を精製し、化合物（１１）を得た（３８．２ｍｇ、収率：５４％）。
¹H-NMR δ7.31-7.21 (m, 20H), 6.94 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.17 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.02 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.37 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.79 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 4.53-4.26 (m, 15H), 3.90-3.60 (m, 14H), 3.72 (s, 3H), 3.50 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 3.35-3.34 (m, 2H), 2.48 (s, 6H), 2.47 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 1.99 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 177.6, 171.5, 171.3, 171.1, 168.9, 155.8, 152.7, 152.5, 152.5, 152.5, 149.9, 137.7, 137.6, 137.4, 128.4, 128.4, 127.9, 127.8, 127.5, 127.4, 127.3, 118.7, 114.7, 95.8, 95.5, 95.5, 75.4, 75.2, 75.2, 74.6, 74.2, 73.9, 73.8, 73.5, 73.5, 73.0, 72.7, 72.1, 68.1, 67.8, 67.7, 67.6, 67.3, 59.9, 59.9, 59.8, 55.6, 23.7, 23.6, 20.6; HRMS calcd for [C₇₃H₇₈N₄O₂₇+Na]⁺1465.4746, found 1465.4747.
〔実施例２：１，４−α（Ｎ−アセチル）グルコサミンオリゴマーの合成２〕
化合物（１０）の合成までは、実施例１と同様にして行った。

（２−１：化合物（１０）のアセチル化）

化合物（１０）（２００ｍｇ，０．１６２ｍｍｏｌ）と２０％Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ（５０ｍｇ）のエタノール（８ｍＬ）と酢酸（８ｍＬ）との懸濁液を、水素雰囲気下、２時間撹拌した。触媒をろ紙で濾過し、酢酸で洗浄した。反応液を濃縮した後、ペンタノールカルバメート化合物を得た（７１．０ｍｇ，５２％）。得られたペンタノールカルバメート化合物（３５．３ｍｇ，０．０４０４ｍｍｏｌ）にＤＭＡＰ（１ｍｇ，０．００８ｍｍｏｌ）を加え、ここにピリジン（０．５ｍＬ）および無水酢酸（０．５ｍＬ）を加えて、室温にて終夜撹拌した。反応液を濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物（４３）を得た（３９．７ｍｇ，７８％）。
¹H-NMR δ 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.64 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.31-5.28 (m, 3H), 5.14 (dd, J = 9.6, 3.2 Hz, 1H), 4.61-4.08 (m, 25H), 3.97 (dd, J = 12.8, 6.4 Hz, 1H), 3.90-3.83 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.52 (s, 12H), 2.14 (s, 3H), 2.12 (s, 12H); ¹³C-NMR δ 170.4, 170.4, 169.6, 155.4, 153.0, 152.7, 152.7, 152.6, 150.7, 118.2, 114.5, 98.9, 98.7, 98.2, 98.1, 78.3, 76.2, 76.1, 76.0, 75.9, 75.6, 74.6, 70.1, 64.5, 64.4, 64.3, 60.5, 55.7, 24.3, 21.0, 20.8.
（２−２：異性化反応）

化合物（４３）（３９．０ｍｇ、０.３２０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（０．３ｍＬ）に溶解した溶液に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（９μＬ、０．０６２４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合液を、０℃で３時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させた。クロロホルムを用いて水層を抽出し、合わせた層をブラインにて洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて残留物を精製し、化合物（４４）を得た（３２．２ｍｇ、収率：８３％）。
¹H-NMR δ 6.96 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.17 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.32 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.79 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.76-4.40 (m, 6H), 4.28-4.08 (m, 9H), 4.02-3.98 (m, 2H), 3.91-3.37 (m, 4H), 3.87-3.74 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 2.56 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.09 (s, 3H); ¹³C-NMR δ 171.9, 171.8, 171.8, 171.1, 170.5, 170.4, 170.3, 169.1, 156.0, 152.4, 152.3, 152.1, 149.7, 118.7, 114.7, 96.7, 96.6, 96.3, 95.4, 76.3, 75.9, 75.5, 75.0, 74.5, 74.4, 73.7, 71.9, 71.9, 71.3, 71.1, 67.7, 62.0, 61.8, 61.8, 61.4, 59.8, 59.8, 59.8, 59.7, 55.7, 23.7, 20.8, 20.7.
〔実施例３：ヘパロサンオリゴマーの合成〕
（３−１：二糖の合成）

化合物（２１）（１．００ｇ、１．２８ｍｍｏｌ）、３−フェニルプロパノール（３５０μＬ、２．５６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヨードスクシンイミド（５７６ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）およびモレキュラーシーブス（ＭＳ）４Ａ（１．００ｇ）を塩化メチレン（１０ｍＬ）に攪拌懸濁させた溶液に、アルゴン雰囲気下、０℃でトリフルオロメタンスルホン酸（３５μＬ）を添加した。混合液を、アルゴン雰囲気下、０℃で３０分攪拌した後、チオ硫酸ナトリウムの１０％水溶液を添加して反応を停止させ、セライトパッドを通して濾過した。次いで、クロロホルムを用いて濾液を抽出した。飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブラインにて元の層を洗浄した。抽出物は、硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥にて濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝９７：３〜９５：５）を用いて精製し、化合物（２２）を得た（８５４ｍｇ、収率：８３％、無色油状）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.06-8.04 (m, 2H), 7.68-7.63 (m, 4H), 7.57-7.55 (m, 1H), 7.46-7.31 (m, 8H), 7.19-7.09 (m, 8H), 6.98-6.94 (m, 2H), 5.35 (dd, J = 9.6, 7.8 Hz, 1H), 5.26 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.91-3.85 (m, 2H), 3.73-3.68 (m, 2H), 3.65-3.60 (m, 2H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.48-3.39 (m, 1H), 2.59-2.46 (m, 2H), 1.89-1.78 (m, 2H), 1.03 (s, 9H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 165.6, 164.9, 141.5, 137.6, 135.6, 135.6, 133.2, 133.1, 129.7, 129.6, 128.4, 128.3, 128.3, 128.1, 128.0, 127.7, 127.6, 127.6, 125.6, 100.9, 80.1, 74.6, 73.8, 73.6, 71.3, 68.4, 62.6, 40.3, 31.8, 31.0, 26.6, 19.1; [α]²⁰ _D+15.6 (c 0.68, CHCl₃); HRMS calcd for [C₄₇H₅₁ClO₇Si+Na]⁺829.2939, found 829.2932.

化合物（２２）（８５４ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）およびピリジン（４ｍＬ）の混合溶液に溶解した攪拌溶液に、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（５９３ｍｇ、５．２９ｍｍｏｌ）を室温にて添加した。混合液を５５℃で２．５時間攪拌した後、真空乾燥にて濃縮した。０．５ＭＨＣｌを用いて残留物を酸性化し、酢酸エチルを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：４〜３：７）を用いて精製し、化合物（２３）を得た（６６１ｍｇ、収率：８６％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.07 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.72-7.70 (m, 4H), 7.58 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.47-7.36 (m, 8H), 7.28-7.10 (m, 8H), 6.94 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 5.28 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.77 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.96-3.81 (m, 4H), 3.71 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.29-3.44 (m, 1H), 3.41-3.37 (m, 1H), 2.84 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 2.57-2.44 (m, 2H), 1.87-1.72 (m, 2H), 1.31-1.26 (m, 1H), 1.07 (s, 9H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ165.2, 141.6, 138.0, 135.7, 135.6, 133.1, 133.0, 132.8, 130.0, 129.8, 129.8, 128.4, 128.4, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 125.6, 101.0, 82.3, 74.8, 74.4, 73.5, 72.2, 68.3, 64.5, 31.8, 31.0, 26.8, 19.2; [α]²⁰ _D+3.4 (c 0.64, CHCl₃); HRMS calcd for [C₄₅H₅₀O₇Si+Na]⁺753.3223, found 753.3220.

化合物（２３）（１．０１ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、化合物（２４）（１．１０ｇ、２．０７ｍｍｏｌ）、トリフルオロメタンスルホン酸銀（５３２ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）およびＭＳ４Ａ（２．００ｇ）を塩化メチレン（１０ｍＬ）に攪拌懸濁させた溶液に、アルゴン雰囲気下、−２０℃でフェニルスルフェニルクロリド（２４０μＬ、２．０７ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を、アルゴン雰囲気下、−２０℃で３０分攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させた。室温で１５分間攪拌した後、セライトパッドを通して濾過した。次いで、クロロホルムを用いて濾液を抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１〜３：２）を用いて精製し、化合物（２５）を得た（１．０３ｇ、収率：６５％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.00-7.96 (m, 2H), 7.77-7.71 (m, 6H), 7.68-7.65 (m, 2H), 7.53 (m, 1H), 7.47-7.41 (m, 8H), 7.38-7.31 (m, 6H), 7.28-7.26 (m, 1H), 7.18-7.16 (m, 3H), 7.12-7.06 (m, 3H), 6.89-6.87 (m, 2H), 5.90 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.18 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.33-4.26 (m, 3H), 3.76-3.54 (m, 8H), 3.16-3.11 (m, 2H), 2.48-2.36 (m, 2H), 1.89 (s, 3H), 1.78-1.64 (m, 2H), 1.07 (s, 9H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 170.1, 167.6, 165.1, 141.6, 138.4, 136.9, 136.2, 135.8, 134.4, 133.6, 133.0, 132.9, 131.2, 130.1, 129.8, 129.7, 129.6, 129.1, 128.3, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.7, 127.4, 127.4, 126.2, 125.6, 123.5, 101.6, 100.5, 96.8, 80.1, 79.4, 75.6, 74.2, 73.7, 73.2, 69.6, 68.6, 67.8, 66.0, 62.3, 56.1, 31.7, 30.9, 26.8, 20.6, 19.5; [α]²⁰ _D+13.1 (c 0.91, CHCl₃); HRMS calcd for [C₆₈H₆₉NO₁₄Si+Na]⁺1174.4385, found 1174.4387.
（３−２：三糖の合成）

化合物（２５）（３．６２ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３０ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（８９０μＬ、６．２８ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（６ｍＬ、３７．７ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、０℃で添加した。混合液を、アルゴン雰囲気下、０℃で３．５時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させ、クロロホルムを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝７：３〜３：２）を用いて精製し、化合物（２６）を得た（３．４３ｇ、収率：９４％、無色非晶質）。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.96 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.77-7.72 (m, 6H), 7.69-7.64 (m, 2H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.45-7.40 (m, 5H), 7.36-7.26 (m, 15H), 7.19-7.15 (m, 4H), 7.09-7.06 (m, 6H), 6.89-6.87 (m, 2H), 5.77 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 5.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.18 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.41 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.24 (dd, J = 10.8, 8.4 Hz, 1H), 3.84-3.70 (m, 5H), 3.63-3.60 (m, 3H), 3.16-3.11 (m, 2H), 2.47 -2.42 (m, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.79-1.71 (m, 1H), 1.68-1.63 (m, 1H), 1.04 (s, 9H), ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 170.8, 167.7, 165.2, 141.6, 138.4, 137.4, 136.1, 135.8, 134.2, 133.7, 132.9, 131.3, 130.1, 129.8, 129.6, 129.6, 128.5, 128.3, 128.3, 128.1, 128.1, 127.9, 127.7, 127.4, 127.2, 125.6, 123.5, 100.5, 96.4, 79.9, 75.6, 74.0, 73.7, 73.6, 73.2, 73.0, 72.5, 70.4, 67.8, 62.3, 55.3, 31.7, 30.9, 26.8, 20.7, 19.5; [α]²⁰ _D+18.4 (c 0.87, CHCl₃); HRMS calcd for [C₆₈H₇₁NO₁₄Si+Na]⁺1176.4541, found 1176.4541.

化合物（２６）（３０９ｍｇ、０．２６８ｍｍｏｌ）および化合物（２７）（２４４ｍｇ）を塩化メチレン（１．９ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、塩化メチレンに溶解した三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（７５μＬ／ｍＬ、０．１ｍＬ、０．０５３６ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、−４０℃で添加した。混合液を、アルゴン雰囲気下、−４０℃で１．５時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させ、クロロホルムを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１〜１：１）を用いて精製し、化合物（２８）を得た（３４９ｍｇ、収率：８２％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.91 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.72-7.62 (m, 8H), 7.54-7.47 (m, 4H), 7.41-7.22 (m, 21 H), 7.13-7.05 (m, 11 H), 7.00-6.94 (m, 3H), 6.86 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.67 (dd, J = 10.4, 8.8 Hz, 1H), 5.55 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.54 (s, 1H), 5.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 12.4Hz, 1H), 4.67-4.63 (m, 2H), 4.51 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.39-4.31 (m, 2H), 4.28-4.21 (m, 3H), 4.07 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.77-3.57 (m, 7H), 3.47 (dd, J = 11.6, 2.4 Hz, 1H), 3.36-3.24 (m, 3H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.43-2.37 (m, 2H), 1.86 (s, 3H), 1.73-1.61 (m, 2H), 0.83 (s, 9H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ169.7, 167.6, 165.2, 164.4, 141.6, 138.4, 138.1, 137.9, 137.1, 136.1, 135.6, 134.2, 134.0, 133.3, 133.2, 132.9, 131.4, 130.1, 129.8, 129.5, 129.4, 129.1, 128.5, 128.3, 128.3, 128.2, 128.2, 128.1, 127.9, 127.9, 127.8, 127.7, 127.5, 127.4, 127.1, 126.0, 125.
5, 123.6, 123.4, 101.3, 101.0, 100.5, 96.1, 81.7, 79.6, 77.7, 77.3, 75.6, 75.6, 74.5, 73.7, 73.5, 73.2, 73.1, 71.3, 68.7, 67.8, 66.6, 66.0, 62.3, 55.6, 31.7, 30.9, 26.5, 20.7, 19.3; [α]²⁰ _D +36.6 (c 0.77, CHCl₃); HRMS calcd for [C₉₅H₉₅NO₂₀Si+Na]⁺1620.6115, found 1620.6125.
（３−３：四糖の合成）

化合物（２８）（３．９０ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を酢酸（７２ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、６０℃で水（１８ｍＬ）を添加した。混合液を６０℃で２３時間攪拌した後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：酢酸エチル＝７：３〜クロロホルム：メタノール＝９７：３）を用いて精製し、化合物（２９）を得た（２．８１ｇ、収率：７６％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.92 (dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 2H), 7.82 (dd, J = 8.0, 0.8 Hz, 2H), 7.69-7.62 (m, 8H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.41-7.13 (m, 22H), 7.09-7.05 (m, 3H), 7.00-6.94 (m, 3H), 6.85 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 2H), 5.67 (dd, J = 10.8, 8.8 H, 1H), 5.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.12 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.70-4.63 (m, 3H), 4.55 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.28-4.23 (m, 2H), 4.09 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 12.0, 3.2 Hz, 1H), 3.73-25.57 (m, 6H), 3.51-3.47 (m, 2H), 3.42 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.38-3.28 (m, 2H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.44-2.44 (m, 3H), 1.86 (s, 3H), 1.73-1.63 (m, 4H), 0.82 (s, 9H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 170.1, 167.7, 165.2, 164.4, 141.6, 138.4, 138.1, 137.8, 136.1, 135.7, 134.3, 134.0, 133.3, 133.3, 132.9, 132.8, 131.4, 130.1, 129.8, 129.7, 129.5, 129.3, 128.5, 128.5, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 128.0, 127.9, 127.9, 127.8, 127.7, 127.4, 127.1, 125.5, 123.5, 100.5, 100.2, 96.1, 82.5, 79.7, 75.6, 75.2, 74.7, 74.4, 73.8, 73.6, 73.4, 73.3, 73.1, 71.4, 70.8, 67.8, 66.8, 62.8, 62.3, 55.7, 31.7, 30.9, 26.5, 20.6, 19.3; [α]²⁰ _D +19.0 (c 0.88, CHCl₃); HRMS calcd for [C₈₈H₉₁NO₂₀Si+Na]⁺1532.5802, found 1532.5798.

化合物（２９）（４５０ｍｇ、０．２９８ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、２，６−ルチジン（１００μＬ、０．８９４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホン酸（１４０μＬ、０．５９６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合液を０℃で１０分間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液を添加して反応を停止させ、クロロホルムを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝７：３）を用いて精製し、化合物（３０）を得た（４１５ｍｇ、収率：８６％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.91 (dd, J = 8.4, 1.2 Hz, 2H), 7.77 (dd, J = 8.4 0.8Hz, 2H), 7.71 (m, 8H), 7.54-7.47 (m, 2H), 7.40-7.21 (m, 15H), 7.15-7.04 (m, 10H), 6.99-6.93 (m, 3H), 6.85 (dd, J = 7.6, 2.0 Hz, 2H), 5.64 (dd, J = 10.8, 8.8 Hz, 1H), 5.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.14 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 9.2, 8.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.26-4.20 (m, 2H), 4.04 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 10.0, 4.4 Hz, 1H), 3.79-3.57 (m, 6H), 3.54-3.46 (m, 2H), 3.37 (m, 1H), 3.26-3.20 (m, 3H), 3.12-3.07 (m, 2H), 2.42-2.37 (m, 2H), 1.86 (s, 3H), 1.74-1.59 (m, 4H), 0.89 (s, 9H), 0.80 (s, 9H), 0.08 (s, 3H), 0.07 (s, 3H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 169.9, 167.6, 165.2, 164.4, 141.6, 138.4, 138.2, 138.2, 136.1, 135.6, 134.2, 133.9, 133.2, 133.0, 132.9, 132.8, 131.5, 131.4, 130.1, 129.8, 129.7, 129.5, 128.5, 128.3, 128.2, 128.1, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.5, 127.4, 127.1, 125.5, 123.6, 123.4, 100.5, 100.3, 96.1, 81.9, 79.6, 75.6, 75.1, 74.6, 74.1, 73.9, 73.7, 73.6, 73.5, 73.4, 73.1, 72.9, 71.0, 67.7, 66.7, 64.9, 62.3, 55.7, 31.7, 30.9, 26.5, 25.8, 20.7, 19.3, 18.2, -5.5, -5.6; [α]²⁰ _D+20.6 (c 0.82, CHCl₃); HRMS calcd for [C₉₄H₁₀₅NO₂₀Si₂+Na]⁺1646.6666, found 1646.6659.

化合物（３０）（１．２３ｇ、０．７５７ｍｍｏｌ）および化合物（３１）（７５２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、アルゴン雰囲気下、−４０℃で三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（２０μＬ、０．１５１ｍｍｏｌ）を添加した。混合
液を、アルゴン雰囲気下、−４０℃で１時間攪拌した後、−２０℃まで昇温させ、さらに１．５時間攪拌した。攪拌後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させ、クロロホルムを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝７：３〜１：１）およびゲル濾過クロマトグラフィー（Ｂｉｏ−ＢｅａｄｓＳＸ−３、ＢＩＯ−ＲＡＤ社、トルエン：酢酸エチル＝１：１）を用いて精製し、化合物（３２）を得た（１．１５ｇ、収率：７１％、無色非晶質）。また、未反応の化合物（３０）を回収した（２０３ｍｇ、収率：１７％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.86 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.80-7.60 (m, 9H), 7.52-7.49 (m, 2H), 7.40-7.02 (m, 35H), 7.00-6.90 (m, 3H), 6.85 (dd, J = 6.0, 2.0 Hz, 2H), 5.76 (dd, J = 10.8, 8.8, Hz, 1H), 5.62 (dd, J = 10.8, 8.8, Hz, 1H), 5.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.19 (t, J =9.6 Hz, 1H), 5.14 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.01 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.38-4.26 (m, 4H), 4.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.07 (dd, J = 10.8, 8.4 Hz, 1H), 3.97 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.83-3.53 (m, 10H), 3.46-3.31 (m, 4H), 3.24 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.10-3.04 (m, 3H), 2.45-2.30 (m, 2H), 1.83 (s, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.50-1.80 (m, 2H), 0.84 (s, 18H), 0.00 (s, 3H), -0.09 (s, 3H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 170.2, 169.9, 167.6, 166.3, 165.2, 164.6, 141.6, 138.4, 138.2, 138.1, 137.5, 136.1, 135.7, 134.5, 133.4, 133.1, 132.9, 132.8, 130.1, 129.8, 129.7, 129.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.7, 127.5, 127.4, 127.3, 127.0, 125.5, 123.5, 100.5, 100.0, 96.5, 96.0, 80.1, 79.5, 76.3, 75.6, 75.3, 74.7, 74.4, 73.7, 73.6, 73.5, 73.4, 73.2, 73.1, 73.0, 72.4, 71.9, 71.4, 70.3, 68.8, 67.7, 62.3, 55.7, 55.3, 40.5, 31.7, 30.9, 26.6, 25.8, 20.6, 20.4, 19.3, 18.0, -5.3, -5.3; [α]²⁰ _D+21.6 (c 0.55, CHCl₃); HRMS calcd for [C₁₁₉H₁₂₇ClN₂O₂₈Si₂+Na]⁺2145.7700, found 2145.7690.
（３−４：カルバメート基の導入）

化合物（３２）（２．７３ｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を、４０％メチルアミンのメタノール溶液（５００ｍＬ）に溶解し、４０℃で３日間攪拌した。次いで、混合液を真空乾燥により濃縮し、残留物を、ゲル濾過クロマトグラフィー（ＬＨ−２０、ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社、クロロホルム：メタノール＝１：１）を用いて精製し、化合物（３３）を得た（１．７２ｇ、収率：９０％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.64-7.60 (m, 5H), 7.34-7.26 (m, 10H), 7.18-7.02 (m, 30H), 4.97 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.69 (dd, J = 12.0, 4.0 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.26-4.08 (m, 7H), 3.97-3.59 (m, 7H), 3.56 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 3.43 (dd, J = 9.6, 2.0 Hz, 1H), 3.42-3.28 (m, 16Hz, 1H), 3.19-3.09 (m, 3H), 2.63-2.59 (m, 3H), 2.54 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 1.84 (m, 2H), 0.90 (s, 9H), 0.79 (s, 9H), 0.01 (s, 3H), 0.00 (s, 3H); ¹³C-NMR (100 MHz, CD₃OD) δ 143.3, 140.7, 140.6, 140.1, 140.0, 137.2, 136.8, 135.1, 134.2, 130.8, 129.5, 129.4, 129.2, 129.2, 129.0, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 128.3, 128.2, 128.2, 126.8, 105.0, 104.3, 102.9, 102.8, 84.4, 83.8, 82.2, 77.8, 77.2, 76.8, 76.3, 76.1, 75.6, 75.5, 75.3, 75.0, 74.9, 74.8, 74.6, 74.5, 72.2, 70.9, 70.0, 69.8, 63.6, 62.9, 59.2, 58.9, 33.3, 32.7, 27.5, 26.6, 20.3, 19.2, -4.9, -5.0; [α]²⁰ _D +2.6 (c 0.83, MeOH); HRMS calcd for [C₈₃H₁₁₀N₂O₁₉Si₂+Na]⁺1517.7139, found 1517.7146.

アセトニトリル（１０ｍＬ）および水（２．５ｍＬ）の混合溶液に化合物（３３）（５４０ｍｇ、０．３３６１ｍｍｏｌ）を溶解した攪拌溶液に、炭酸水素ナトリウム（１５２ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）およびトリホスゲン（８５．７ｍｇ、０．２８９ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合液を０℃で２．５時間攪拌した後、ブラインを用いて希釈し、クロロホルムを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝９７：３〜９５：５）を用いて精製し、化合物（３４）を得た（５３６ｍｇ、収率：９６％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.61-7.58 (m, 4H), 7.32-7.09 (m, 31H), 6.15 (bs, 1H), 5.18 (bs, 1H), 4.91-4.87 (m, 2H), 4.83 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.74-4.69 (m, 2H), 4.64 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.13 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.03-4.89 (m, 3H), 3.86-3.73 (m, 9H), 3.65-3.39 (m, 4H), 3.44-3.10 (m, 12H), 2.62-2.60 (m, 2H), 1.93-1.85 (m, 2H), 0.96 (s, 9H), 0.79 (s, 9H), 0.00 (s, 6H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 158.9, 158.9, 141.6, 138.9, 138.6, 137.6, 137.2, 135.9, 135.4, 133.2, 132.4, 130.0, 129.9, 128.5, 128.4, 128.0, 127.9, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 125.9, 102.8, 102.4, 101.4, 100.8, 83.5, 82.4, 81.4, 81.0, 76.3, 75.6, 75.3, 75.1, 75.0, 74.6, 74.3, 74.0, 73.7, 73.5, 70.3, 70.1, 68.8, 62.1, 61.2, 60.2, 59.8, 32.3, 31.2, 26.8, 26.0, 19.3, 18.4, -4.9, -5.2; [α]²⁰ _D+3.5 (c 0.64, CHCl₃); HRMS calcd for [C₈₅H₁₀₆N₂O₂₁Si₂+Na]⁺1570.6754, found 1570.6754.

化合物（３４）（５１９ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、０℃で酢酸（５０μＬ、０．８３８ｍｍｏｌ）およびフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（１．０ＭＴＨＦ溶液、０．８４ｍＬ、０．８４ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を室温で１６時間攪拌した後、１ＭＨＣｌおよび酢酸を添加して反応を停止させた。次いで、ゲル濾過クロマトグラフィー（ＬＨ−２０、ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社、クロロホルム：メタノール＝１：１）およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝９７：３〜９３：７）を用いて精製し、化合物（３５）を得た（３２３ｍｇ、収率：８１％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.24-7.06 (m, 25H), 6.93 (bs, 1H), 6.84 (bs, 1H), 4.83-4.69 (m, 5H), 4.44-4.32 (m, 4H), 4.14 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.95 (m, 2H), 3.84-3.31 (m, 21H), 3.22-3.16 (m, 5H), 2.58 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.87-1.79 (m, 2H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 159.8, 159.5, 141.5, 138.6, 138.4, 137.6, 137.5, 128.5, 128.4, 128.4, 128.1, 127.9, 127.8, 127.8, 127.7, 127.6, 125.9, 102.9, 102.7, 101.6, 101.2, 83.6, 83.4, 81.6, 80.6, 75.0, 74.8, 74.7, 74.5, 74.4, 74.1, 73.8, 73.6, 69.7, 69.4, 69.0, 68.3, 60.3, 60.1, 60.0, 32.0, 30.9; [α]²⁰ _D -3.7 (c 0.40, CHCl₃); HRMS calcd for [C₆₃H₇₄N₂O₂₁+Na]⁺1217.4681, found 1217.4712.

化合物（３５）（３０７ｍｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）をピリジン（２ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、０℃で酢酸（２ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（９．４ｍｇ、０．０７７１ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を室温で１５時間攪拌した後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：酢酸エチル＝７：３〜２：３）を用いて精製し、化合物（３６）を得た（３２３ｍｇ、収率：８４％、黄白色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.33-7.14 (m, 25H), 5.28 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.03-4.97 (m, 2H), 4.91 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 11.2H, 1H), 4.83 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.53-4.35 (m, 6H), 4.24 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.16-4.06 (m, 5H), 4.00 (m, 1H), 3.92-3.78 (m, 8H), 3.76-3.72 (m, 3H), 3.71-3.65 (m, 2H), 3.54 (dd, J = 10.4, 4.8 Hz, 1H), 3.48-3.36 (m, 3H), 2.67-2.56 (m, 2H), 2.44 (s, 6H), 2.08 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.77 (s, 3H); ¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ171.1, 170.9, 170.6, 170.2, 169.8, 169.3, 169.3, 153.2, 153.0, 141.7, 138.5, 138.3, 137.8, 137.6, 128.5, 128.5, 128.4, 128.3, 127.9, 127.6, 127.6, 127.5, 127.4, 125.8, 100.6, 99.8, 99.7, 99.1, 81.3, 80.9, 78.4, 77.9, 76.5, 76.4, 75.6, 75.1, 74.2, 74.1, 73.4, 73.3, 73.1, 73.1, 73.0, 70.7, 70.1, 68.6, 63.3, 63.2, 61.6, 61.3, 31.9, 31.1, 24.5, 24.4, 21.0, 20.9, 20.7, 20.7; [α]²⁰ _D-28.0 (c 0.40, CHCl₃); HRMS calcd for [C₇₇H₈₈N₂O₂₈+Na]⁺1512.5421, found 1512.5410.
（３−５：異性化反応）

化合物（３６）（１８０ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．２ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、アルゴン雰囲気下、−２０℃で三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（３４μＬ、０．２４２ｍｍｏｌ）を添加した。混合液を、アルゴン雰囲気下、−２０℃で１０分間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させ、クロロホルムを用いて抽出した。有機層をブラインにて洗浄し、抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、真空乾燥により濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：トルエン＝３：７）を用いて精製し、化合物（３７）を得た（１６５ｍｇ、収率：９２％、無色非晶質）。
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.27-7.09 (m, 25H), 6.16 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.35 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 5.00 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.97 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.59-4.49 (m, 8H), 4.46-4.36 (m, 4H), 4.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.18-4.12 (m, 2H), 4.08 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 3.98 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.81-3.76 (m, 3H), 3.67-3.44 (m, 12H), 3.39-3.33 (m, 1H), 2.64-2.52 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.96 (s, 2H), 1.87 (s, 3H), 1.84-1.82 (m, 3H), 1.78 (s, 3H);¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 171.6, 171.3, 170.4, 170.4, 169.3, 169.2, 169.0, 152.7, 152.6, 141.6, 137.9, 137.9, 137.7, 137.4, 128.5, 128.4, 128.4, 128.3, 128.0, 127.8, 127.8, 127.7, 127.6, 127.3, 127.1, 125.8, 100.6, 99.8, 95.9, 95.2, 82.0, 81.7, 76.0, 75.1, 74.9, 74.3, 74.0, 74.0, 73.8, 73.6, 73.1, 73.0, 73.0, 73.0, 72.9, 72.2, 68.5, 68.3, 67.5, 67.2, 62.9, 62.2, 60.2, 60.0, 31.9, 31.1, 23.4, 23.3, 20.8, 20.7, 20.6; [α]²⁰ _D+72.9 (c 0.55, CHCl₃); HRMS calcd for [C₇₇H₈₈N₂O₂₈+Na]⁺1512.5421, found 1512.5422.
（３−６：環状保護基からアセトアミド基への変換）

化合物（３７）（１．７６g，１．１８ｍｍｏｌ）をアリルアルコール（２０ｍＬ）に溶解し、ＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１．９８ｇ，４７．２ｍｍｏｌ）を室温で加え、３.５時間撹拌した。反応液をそのままＬＨ−２０（セファデックス社、ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３：９／１）に通すことにより、ＬｉＯＨを除去し、アリルカルバメートとアセトアミドとの混合物を得た。得られたアリルカルバメートとアセトアミドの混合物をピリジン（１０mL）に溶解し、無水酢酸（１０ｍＬ）を加えた。室温にて２時間撹拌した後、反応液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ：９７／３）により精製した。酢酸パラジウム（II）（７９．５ｍｇ，０．３５４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（３ｍＬ）に溶解し、ここに、トリエチルアミン（１５０μＬ，１．０６ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（１．７ｍＬ，１０．６ｍｍｏｌ）を添加し、アルゴン雰囲気下、室温にて１５分撹拌した。その溶液に、精製したアリルカルバメートとアセトアミドとの混合物を塩化メチレン（９ｍＬ）に溶解したものを、加えた。反応液を１１時間撹拌した後、５０％酢酸水溶液（１．７ｍＬ）を加え、減圧下で濃縮し、高度真空下、乾燥した。残渣をピリジン（５ｍＬ）に溶解し、無水酢酸（５ｍＬ）を加え、室温で１．５時間反応させ、反応液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３／ＡｃＯＥｔ：２／３〜１／９）により精製し、ジアセトアミドを得た。得られたジアセトアミドをテトラヒドロフラン（６ｍＬ）とメタノール（６ｍＬ）との混合溶液に溶解し、フェノールフタレイン存在下、ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液，４０μＬ，０．０７１０ｍｍｏｌ）を加え、終夜撹拌した。反応液にＡｍｂｅｒｌｙｓｔ１５Ｅを加えて、反応を停止した後、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ１５Ｅを濾過し、濃縮して、化合物（３８）（８３３ｍｇ，６２％，５ｓｔｅｐｓ）を得た（無色非晶質）。
¹H-NMR (CD₃OD) δ7.40-7.14 (m, 25H), 5.44 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.40 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.09 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.64-4.55 (m, 6H), 4.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.07-3.30 (m, 35H), 2.73 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.97-1.89 (m, 2H), 1.78 (s, 3H), 1.77 (s, 3H); ¹³C-NMR (CD₃OD) δ 173.4, 173.3, 143.3, 139.7, 139.6, 139.4, 120.5, 129.5, 129.4, 129.4, 129.3, 129.0, 128.8, 128.7, 128.6, 126.8, 104.6, 104.5, 99.0, 98.5, 86.1, 85.8, 81.0, 76.7, 76.5, 76.2, 75.9, 75.4, 75.4, 75.5, 74.5, 74.1, 73.9, 73.9, 73.2, 72.5, 72.2, 71.3, 70.8, 70.0, 69.7, 62.2, 62.1, 55.0, 54.7, 33.1, 32.7, 22.6, 22.6; [
α]²⁰ _D +40.4 (c 0.80, MeOH).
（３−７：ウロン酸への変換）

化合物（３８）（２０ｍｇ，０．０１６３ｍｍｏｌ）と１５％炭酸水素ナトリウム水溶液（５０μＬ）とをアセトン（０．１５ｍＬ）に溶解し、ここに、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）（０．５ｍｇ，０．０３２６ｍｍｏｌ）およびトリクロロイソシアル酸（７．６ｍｇ，０．０３２６ｍｍｏｌ）を４℃で添加した。添加後、反応液を室温にて２時間撹拌し、イソプロパノールにて反応を停止させた。ＬＨ−２０（セファデックス社、ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ：１／１）およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ：４／１〜１／１）により精製を行い、化合物（３９）を得た。
¹H-NMR (CD₃OD) δ 7.38-7.13 (m, 25H), 5.49 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.44 (d, J = 3.2Hz, 1H), 5.03 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.08 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.68-4.50 (m, 8H), 4.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.08 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.99-3.46 (m, 24H), 2.71 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.01 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.90-1.87 (m, 2H).
〔実施例４：１，４−α（Ｎ−アセチル）グルコサミンポリマーの合成〕

１．０ｇのキトサン（５〜２０ｍＰａ・ｓ、東京化成工業社製）（化合物（４３））を１−ブチル−メチルイミダゾリウムクロリド（１０ｍＬ）に溶解し、ここにトリエチルアミン（１ｍＬ）を添加し、１００℃で攪拌した。混合物を室温まで冷却した後、トリホスゲン（０．５ｇ）を添加した。混合物を１００℃で２日間攪拌し、混合物をメタノール中に懸濁した。遠心分離の後、残留物をメタノールおよびジエチルエーテルを用いて洗浄した。褐色の沈殿物（１．２ｇ）を、１−ブチル−メチルイミダゾリウムクロリド（１０ｍＬ）に溶解し、ここにピリジン（５ｍＬ）、無水酢酸（５ｍＬ）およびＤＭＡＰ（１００ｍｇ）を添加し、６０℃で攪拌した。攪拌後、混合物をメタノール中に懸濁した。遠心分離により、化合物（４４）（１．４ｇ）を得た。得られた化合物（４４）を塩化メチレン（３０ｍＬ）中に懸濁し、次いで、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１ｍＬ）を−２０℃で添加した。混合物を５時間攪拌した後、ジエチルエーテル（３０ｍＬ）およびトリエチルアミン（１ｍＬ）を添加した。遠心分離により、褐色固体の沈殿物（１．０ｇ）を回収し、化合物（４５）の粗体を得た。

〔実施例５：カルバメート基窒素上の置換基の相違による、単糖における異性化反応の検討〕

化合物（４０）のカルバメート基窒素上の置換基Ｒを種々のものに設計し、１，２−トランス型から１，２−シス型への異性化反応の効率の検討を行った。異性化反応は、１，２−トランス型である化合物（４０）を塩化メチレンに溶解した溶液に、化合物（４０）に対して２倍モル量の三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体を−３０℃で添加し、１２時間攪拌させることにより行った。攪拌後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応を停止させた。クロロホルムを用いて抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮した後、残留物を精製した。得られた試料中の、１，２−トランス型である化合物（β１）（すなわち、異性化を起こさなかった化合物（４０））の存在量、および化合物（４０）の異性化により生じる１，２−シス型である化合物（α１）の存在量を測定し、異性化反応の効率を調べた。

化合物（４０）としては、カルバメート基窒素上の置換基Ｒが、アセチル基（Ａｃ）、メトキシカルボニル基（ＣＯ_２Ｍｅ）、アリルオキシカルボニル基（ＣＯ_２Ａｌｌ）、ベンジルオキシカルボニル基（ＣＯ_２Ｂｎ）、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基（ＣＯ_２ＣＨ_２ＣＣｌ_３）、ベンジル基（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル基（ＰＭＢ）、ｏ−ニトロベンジル基、アセトニトリル基（ＣＨ_２ＣＮ）、または水素原子（Ｈ）である化合物を用いた。結果を表１に示す。

表１に示されるように、カルバメート基窒素上の置換基Ｒが、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基である場合には、出発原料である化合物（β１）を生じさせずに完全に異性化することが示された。

〔実施例６：カルバメート基窒素上の置換基の相違による、二糖における異性化反応の検討〕

化合物（４１）のカルバメート基窒素上の置換基Ｒを種々のものに設計し、アミノ糖部分における１，２−トランス型から１，２−シス型への異性化反応の効率の検討を行った。異性化反応は、化合物（４０）の代わりに化合物（４１）を用いた点を除き、実施例３と同様にして行った。最終的に得られた試料中の、１，２−トランス型である化合物（β２）（異性化を起こさなかった化合物（４１））の存在量、および化合物（４１）の異性化により生じる１，２−シス型である化合物（α２）の存在量を測定し、異性化反応の効率を調べた。

化合物（４１）としては、カルバメート基窒素上の置換基Ｒが、アセチル基、ベンジル基、または水素原子である化合物を用いた。結果を表２に示す。

表２に示されるように、カルバメート基窒素上の置換基Ｒがアセチル基である場合には、二糖における異性化反応でも、出発原料である化合物（β２）を生じさせずに完全に異性化することが示された。

〔実施例７：酸の使用量の相違による、単糖における異性化反応の検討〕

異性化反応に使用する三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体の量を種々設定し、化合物（４２）の、１，２−トランス型から１，２−シス型への異性化反応の効率の検討を行った。異性化反応は、化合物（４０）の代わりに化合物（４２）を用いた点、および添加する三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体の量を２倍モル量、１倍モル量、０．５倍モル量、または０．１倍モル量にした点を除き、実施例３と同様にして行った。なお、０．１倍量の三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体を使用した試験では、攪拌時間を７２時間にした場合についても検討した。得られた試料中の、１，２−トランス型である化合物（β３）（すなわち、異性化を起こさなかった化合物（４２））の存在量、および化合物（４２）の異性化により生じる１，２−シス型である化合物（α３）の存在量を測定し、異性化反応の効率を調べた。結果を表３に示す。

本発明は、製薬および医用材料分野、化粧品分野、衣料用品分野、食品分野、ならびに農業分野など様々な技術分野において利用することができる。

Claims

下記（ｇ）に記載の糖鎖化合物であって、該糖鎖化合物は複数の糖残基を有し、１，２−シス型の糖残基を１以上含む、糖鎖化合物：
（ｇ）下記式（Ｖ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖。

（式（Ｖ）中、Ｒ^１６は、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、ベンジル基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表し、Ｒ^２３は、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。糖鎖末端は、還元末端または非還元末端を形成し、それぞれ独立に、アセチル基；ベンジル基；ｐ−メトキシフェニル基；アミノ基を含むアルキル基；およびアリル基で修飾されていてもよい。）
糖残基の数が２〜１６であるオリゴ糖である、請求項１に記載の糖鎖化合物。
全ての糖残基が１，２−シス型である、請求項１または２に記載の糖鎖化合物。
１０％以上の糖残基が１，２−シス型である、請求項１または２に記載の糖鎖化合物。
請求項１〜４の何れか１項に記載の糖鎖化合物の製造方法であって、
（ｉ）下記（ｋ）に記載の糖鎖化合物を準備する工程、
（ｋ）下記式（Ｉｂ）で示される糖単位が繰り返し結合して形成されている多糖またはオリゴ糖、

（式（Ｉｂ）中、Ｒ^１３およびＲ^１４は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、ベンジル基、アシル基、スルホ基またはリン酸基を表し、Ｒ^１５およびＲ^１６は、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基、ハロアルキル基、アリル基、アリール基、ベンジル基、アシル基、スルホ基、リン酸基、アルコキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、トリアルキルシリル基またはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を表す。波線は、独立に、エクアトリアルまたはアキシアルの立体配置を示す結合を表す。）
（ｉｉ）上記（ｉ）の工程で準備した上記糖鎖化合物にカルバメート基を導入し、２，３−トランスカルバメート基を形成する工程、および、
（ｉｉｉ）カルバメート基が導入された上記糖鎖化合物を、有機溶媒中、塩酸、ビス（トリフルオロメチルスルホニル）イミドもしくはトリフルオロ酢酸または弱酸性のルイス酸、と反応させる工程、
を含み、
カルバメート基の窒素原子に水素原子が結合している場合、上記（ｉｉｉ）の工程に先立って、カルバメート基の窒素原子に結合している水素原子を、アセチル基、メトキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、または２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基で置換することを含む、糖鎖化合物の製造方法。
上記（ｉｉｉ）の工程を２５℃以下で行う、請求項５に記載の糖鎖化合物の製造方法。
上記（ｉｉｉ）の工程では、上記糖鎖化合物を、弱酸性のルイス酸である三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体と反応させる、請求項５または６に記載の糖鎖化合物の製造方法。
上記（ｉｉｉ）の工程の反応に供される上記糖鎖化合物のカルバメート基の窒素原子に、アセチル基が結合している、請求項５〜７の何れか１項に記載の糖鎖化合物の製造方法。