JP2018172391A5 - - Google Patents
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Claims (27)
- 血清アルブミンに対する抗原結合フラグメント(Fab)であって、
(a)配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5および配列番号6からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン(VHドメイン);および
(b)配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11および配列番号12からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン(VLドメイン)
を含み、
Fabは、血清アルブミン(SA)に特異的に結合する、
前記Fab。 - 血清アルブミン(SA)に対して結合する、抗原結合フラグメント(Fab)であって、
(a)VHドメインのCDRを決定する配列番号13(CDR1)、14(CDR2)および15(CDR15)のアミノ酸配列;および
(b)VLドメインのCDRを決定する配列番号16(CDR1)、17(CDR2)および18(CDR3)のアミノ酸配列
を含む、前記Fab。 - VHドメインが重鎖定常1ドメイン(CH1ドメイン)に結合され、およびVLドメインが軽鎖定常ドメイン(CκLドメイン)に結合されている、請求項2に記載のFab。
- VHドメインが配列番号6のアミノ酸配列を有し、およびVLドメインが配列番号12のアミノ酸配列を有する、請求項3に記載のFab。
- CH1ドメインおよびCκLドメインのシステインのアミノ酸が欠失しているか、またはセリンを含み、システインを除く、任意の他のアミノ酸残基で置換されている、請求項1〜4のいずれか一項に記載のFab。
- CH1ドメインのシステインのアミノ酸が、CH1ドメインのN末端から数えて233番のアミノ酸であり、およびCκLドメインのシステインがCκLドメインのN末端から数えて214番のアミノ酸である、請求項5に記載のFab。
- CH1ドメインのシステインのアミノ酸およびFabのCκLドメインのシステインのアミノ酸は欠失しているか、またはセリンを含み、システインを除く任意の他のアミノ酸残基で置換され;および生理活性エフェクター部分がタンパク質または(ポリ)ペプチドであり;およびFabと生理活性エフェクター部分とが遺伝子的融合によって共有結合されている、抗原結合フラグメント(Fab)と生理活性エフェクター部分との融合コンストラクト。
- 生理活性エフェクター部分がタンパク質または(ポリ)ペプチドであり;およびFabと生理活性エフェクター部分とが遺伝子的融合によって共有結合されている、請求項1〜6のいずれか一項に記載の抗原結合フラグメント(Fab)と生理活性エフェクター部分との融合コンストラクト。
- Fabと生理活性エフェクター部分とが、0〜20アミノ酸のペプチドリンカーを使用して遺伝子的融合によって共有結合されている、請求項7または8に記載の融合コンストラクト。
- 生理活性エフェクター部分が、ホルモン、サイトカイン、酵素、抗体、成長因子、転写因子、血液因子、ワクチン、構造タンパク質、リガンドタンパク質、およびレセプターからなる群から選択される1つである、請求項7〜9のいずれか一項に記載の融合コンストラクト。
- 請求項7〜9のいずれか一項に記載の融合コンストラクトであって、生理活性エフェクター部分が、ヒト成長ホルモン(hGH)、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン、インターフェロンレセプター、コロニー刺激因子(CSF)、グルカゴン様ペプチド、Gタンパク質結合レセプター、インターロイキン、インターロイキンレセプター、酵素、インターロイキン結合タンパク質、サイトカイン結合タンパク質、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、B細胞因子、T細胞因子、タンパク質A、アレルギーインヒビター、細胞ネクローシス糖タンパク質、イムノトキシン、リンフォトキシン、腫瘍ネクローシス因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、アルファ−1抗トリプシン、アルブミン、アルファ−ラクトアルブミン、アポリポタンパク質E、エリトロポエチン、高グリコシル化エリトロポエチン、アンジオポエチン、ヘモグロビン、トロンビン、トロンビンレセプター活性化ペプチド、トロンボモジュリン、第VII因子、第VIIa因子、第VIII因子、第IX因子、第XIII因子、プラズミノゲン活性化因子、フィブリン結合ペプチド、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ヒルジン、タンパク質C、C反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、上皮成長因子、表皮成長因子、アンギオスタチン、アンギオテンシン、骨成長因子、骨刺激タンパク質、カルシトニン、インシュリン、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、エルカトニン、結合組織活性化因子、組織因子経路インヒビター、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インシュリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、グルカゴン、コレシストキニン、膵臓ポリペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、オートタキシン、ラクトフェリン、ミオスタチン、レセプター、レセプターアンタゴニスト、細胞表面抗原、ウイルス由来ワクチン抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントからなる群から選択される1つである、前記融合コンストラクト。
- 生理活性エフェクター部分が、hGH、GCSF、またはIFNである、請求項11に記載の融合コンストラクト。
- 生理活性(ポリ)ペプチド(またはタンパク質)のFabに対するモル比が、1:1と10:1との間、好ましくは1:1と4:1との間である、請求項7〜12のいずれか一項に記載の融合コンストラクト。
- (a)プロモーター;(b)請求項1〜5のいずれか一項に記載のFabをコードする第一の核酸配列;および(c)生理活性(ポリ)ペプチドまたはタンパク質および任意にリンカーをコードする第二の核酸配列を含む、発現ベクターであって、プロモーター、第一の核酸配列および第二の核酸配列が作動可能に連結されている、前記発現ベクター。
- 請求項14に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
- 宿主細胞が大腸菌である、請求項15に記載の宿主細胞。
- 宿主細胞がSUPEX5(KCTC 12657BP)である、請求項17に記載の宿主細胞。
- 大腸菌のペリプラズムにおける生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドの可溶性発現を増加させる方法であって、大腸菌中に発現ベクターを導入することを含み;ここで、発現ベクターが、(a)プロモーター、(b)抗原結合フラグメント(Fab)をコードする第一の核酸配列、および(c)リンカーおよび生理活性(ポリ)ペプチドまたはタンパク質をコードする第二の核酸配列を含み;プロモーター、第一の核酸配列および第二の核酸配列が、作動可能に連結され;ならびにFabのCH1ドメインおよびCκLドメインのシステインのアミノ酸が、欠失しているか、またはセリン残基で置換されている、前記方法。
- 大腸菌がSUPEX5(KCTC 12657BP)である、請求項18に記載の大腸菌のペリプラズムにおいて生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドの可溶性発現を増加させる方法。
- 請求項13に記載の発現ベクターを大腸菌中に導入することを含む、大腸菌のペリプラズムにおいて生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドの可溶性発現を増加させる方法。
- 大腸菌がSUPEX5(KCTC 12657BP)である、請求項20に記載の大腸菌のペリプラズムにおいて生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドの可溶性発現を増加させる方法。
- 生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドが、ホルモン、サイトカイン、酵素、抗体、成長因子、転写因子、血液因子、ワクチン、構造タンパク質、リガンドタンパク質、およびレセプターからなる群から選択される1つである、請求項18〜21のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項18〜21のいずれか一項に記載の方法であって、生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドが、ヒト成長ホルモン(hGH)、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン、インターフェロンレセプター、コロニー刺激因子(CSF)、グルカゴン様ペプチド、Gタンパク質結合レセプター、インターロイキン、インターロイキンレセプター、酵素、インターロイキン結合タンパク質、サイトカイン結合タンパク質、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、B細胞因子、T細胞因子、タンパク質A、アレルギーインヒビター、細胞ネクローシス糖タンパク質、イムノトキシン、リンフォトキシン、腫瘍ネクローシス因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、アルファ−1抗トリプシン、アルブミン、アルファ−ラクトアルブミン、アポリポタンパク質−E、エリトロポエチン、高グリコシル化エリトロポエチン、アンジオポエチン、ヘモグロビン、トロンビン、トロンビンレセプター活性化ペプチド、トロンボモジュリン、第VII因子、第VIIa因子、第VIII因子、第IX因子、第XIII因子、プラズミノゲン活性化因子、フィブリン結合ペプチド、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ヒルジン、タンパク質C、C反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、上皮成長因子、表皮成長因子、アンギオスタチン、アンギオテンシン、骨成長因子、骨刺激タンパク質、カルシトニン、インシュリン、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、エルカトニン、結合組織活性化因子、組織因子経路インヒビター、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インシュリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、グルカゴン、コレシストキニン、膵臓ポリペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、オートタキシン、ラクトフェリン、ミオスタチン、レセプター、レセプターアンタゴニスト、細胞表面抗原、ウイルス由来ワクチン抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントからなる群から選択される1つである、前記方法。
- 請求項1〜6のいずれか一項に記載のFabに対して生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドを遺伝子的融合によって連結させることを含む、生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドのインビボの半減期を増加させる方法。
- Fabに対して生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドが0〜20アミノ酸のペプチドリンカーによって連結されている、請求項24に記載の生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドのインビボの半減期を増加させる方法。
- 請求項24または25に記載の方法であって、生理活性タンパク質または(ポリ)ペプチドが、ヒト成長ホルモン(hGH)、成長ホルモン放出ホルモン(GHRH)、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン(IFN)、インターフェロンレセプター、コロニー刺激因子(CSF)、顆粒球コロニー刺激因子(GCSF)、グルカゴン様ペプチド、Gタンパク質結合レセプター、インターロイキン、インターロイキンレセプター、酵素、インターロイキン結合タンパク質、サイトカイン結合タンパク質、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、B細胞因子、T細胞因子、タンパク質A、アレルギーインヒビター、細胞ネクローシス糖タンパク質、イムノトキシン、リンフォトキシン、腫瘍ネクローシス因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、アルファ−1抗トリプシン、アルブミン、アルファ−ラクトアルブミン、アポリポタンパク質−E、エリトロポエチン、高グリコシル化エリトロポエチン、アンジオポエチン、ヘモグロビン、トロンビン、トロンビンレセプター活性化ペプチド、トロンボモジュリン、第VII因子、第VIIa因子、第VIII因子、第IX因子、第XIII因子、プラズミノゲン活性化因子、フィブリン結合ペプチド、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ヒルジン、タンパク質C、C反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、上皮成長因子、表皮成長因子、アンギオスタチン、アンギオテンシン、骨成長因子、骨刺激タンパク質、カルシトニン、インシュリン、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、エルカトニン、結合組織活性化因子、組織因子経路インヒビター、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インシュリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、グルカゴン、コレシストキニン、膵臓(ポリ)ペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、オートタキシン、ラクトフェリン、ミオスタチン、レセプター、レセプターアンタゴニスト、細胞表面抗原、ウイルス由来ワクチン抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントからなる群から選択される1つである、前記方法。
- 請求項7〜13のいずれか一項に記載の融合コンストラクト、および薬学的に許容された賦形剤を含む、医薬組成物。
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