JP2018135307A

JP2018135307A - Transglutaminase activity promoter

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Publication number: JP2018135307A
Application number: JP2017031647A
Authority: JP
Inventors: 秀須藤; Hide Sudo
Original assignee: Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-02-23
Filing date: 2017-02-23
Publication date: 2018-08-30
Anticipated expiration: 2037-02-23
Also published as: JP6885582B2

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a skin external preparation effective for promoting the activity of transglutaminase, normalizing epidermal keratinocytes, reducing symptoms of dry skin and atopic dermatitis, preventing and treating ichthyosis, improving skin quality and an agent for improving hair and preventing hair loss.SOLUTION: Preparations promoting the activity of transglutaminase could be obtained by using an unsaturated fatty acid as an active ingredient. Therefrom, it was found that palmitoleic acid, γ linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, docosahexaenoic acid are more effective in promoting the activity of transglutaminase. Furthermore, it was found that the unsaturated fatty acid promotes the activity of transglutaminase even in the horny layer which has a low calcium ion concentration.SELECTED DRAWING: Figure 1

Description

本発明は、トランスグルタミナーゼ活性促進剤に関する。 The present invention relates to a transglutaminase activity promoter.

トランスグルタミナーゼはヒトを含めた動物の臓器中に分布する。分子量は３万から１０万程度のタンパク質である。
主な作用は皮膚最外層に存在する遊離のグルタミン酸残基とリシン残基との反応を触媒し，ε−リシン（γ−グルタミル）結合からなる架橋を形成することにより，表面構造を緻密化することである。反応系の組成によって３つの反応様式がある。いずれの場合もペプチド鎖中のグルタミン酸残基のγ−カルボキシアミド基がアシル供与体となるが，アミン化合物が存在する場合にはそのアミノ基がアシル受容体となり，アミン化合物のペプチドへの付加反応が起こる。ペプチド中のリジン残基のε−アミノ基がアシル受容体として反応すると，ε−リシン−イソペプチド結合によるペプチド鎖間の架橋が形成される。
以上の反応は、角化過程でインボルクリンやロリクリンなど疎水性のタンパク質が共有結合で架橋されて、不溶性のコーニファイドエンベロップ(cornified envelope(角質肥厚膜))と呼ばれる細胞膜の裏打ちタンパク質となり角層の安定化に寄与する。この形成において最も重要な役割を担うトランスグルタミナーゼの活性欠乏は、魚鱗癬など皮膚バリアを失う重篤な疾患となる。近年は、セラミドも単独では充分なバリア効果を発揮できず当該酵素による架橋が角質バリアの充実に重要であることも明らかになりつつある。
したがって、トランスグルタミナーゼの発現の促進や活性の増強は、表皮角質細胞を正常化し、乾燥肌やアトピー性皮膚炎症状の軽減、及び魚鱗癬の予防や治療に有効である。
また、トランスグルタミナーゼ産生促進は、毛髪においてはキューティクルやコルテックスの生合成が進ませ、毛質が太く丈夫なものに改善されると共に毛根における固定構造が強化され脱毛が起こりにくくなり、また、皮膚においては、皮膚角層の生合成が促進されることにより、肌質が改善され、ハリや潤いのある肌が得られることが期待される。(特許文献１) Transglutaminase is distributed in organs of animals including humans. It is a protein with a molecular weight of about 30,000 to 100,000.
The main action is to catalyze the reaction between free glutamic acid residues and lysine residues present in the outermost skin layer, and to form a cross-link consisting of ε-lysine (γ-glutamyl) bonds, thereby densifying the surface structure. That is. There are three reaction modes depending on the composition of the reaction system. In either case, the γ-carboxyamide group of the glutamic acid residue in the peptide chain becomes an acyl donor, but when an amine compound is present, the amino group becomes an acyl acceptor, and the addition reaction of the amine compound to the peptide Happens. When the ε-amino group of a lysine residue in a peptide reacts as an acyl acceptor, a bridge between peptide chains is formed by an ε-lysine-isopeptide bond.
In the above reaction, hydrophobic proteins such as involucrin and loricrin are covalently cross-linked during the keratinization process and become an insoluble, confined envelope (cornified envelope) cell membrane lining protein that stabilizes the stratum corneum. Contributes to The lack of activity of transglutaminase, which plays the most important role in this formation, becomes a serious disease that loses the skin barrier, such as ichthyosis. In recent years, ceramide alone cannot exert a sufficient barrier effect, and it is becoming clear that crosslinking with the enzyme is important for enhancement of the keratin barrier.
Therefore, promotion of transglutaminase expression and enhancement of activity are effective in normalizing epidermal keratinocytes, reducing dry skin and atopic skin inflammation, and preventing or treating ichthyosis.
In addition, transglutaminase production promotion promotes cuticle and cortex biosynthesis in hair, improving the hair quality to be thick and durable, strengthening the fixing structure in the hair root, and preventing hair loss. In, the biosynthesis of the stratum corneum is promoted, so that the skin quality is improved, and it is expected that firmness and moisture can be obtained. (Patent Document 1)

トランスグルタミナーゼ産生促進剤として、マツヨイグサ属植物抽出物、パントテインスルホン酸カルシウムやグルコン酸カルシウム等の外用剤が提案されている。(特許文献２〜３)
しかし、トランスグルタミナーゼの量が増えても、その活性の上昇が起こらなければその効果は得られない。
一方、不飽和脂肪酸は血液凝固防止作用、抗高脂血症作用、抗炎症作用、抗アレルギー作用、美白作用が知られ食品、化粧品等に応用されている。(特許文献４〜５) As transglutaminase production promoters, external preparations such as evening primrose plant extract, calcium pantothein sulfonate and calcium gluconate have been proposed. (Patent Documents 2 to 3)
However, even if the amount of transglutaminase is increased, the effect cannot be obtained unless the activity is increased.
On the other hand, unsaturated fatty acids have known anticoagulant action, antihyperlipidemic action, anti-inflammatory action, antiallergic action, and whitening action, and are applied to foods, cosmetics and the like. (Patent Documents 4 to 5)

特開平０８−２０５２３号公報Japanese Patent Laid-Open No. 08-20523 特開２００４−９１３７６号公報JP 2004-91376 A 特開平１１−１００３２０号公報Japanese Patent Laid-Open No. 11-100320 特開平０５−２７９２４０号公報JP 05-279240 A 国際公開番号第２０１２／１０２３６４号International Publication Number 2012/102364

本発明の目的はトランスグルタミナーゼの活性を促進し、表皮角質細胞を正常化し、乾燥肌やアトピー性皮膚炎症状の軽減、及び魚鱗癬の予防や治療、肌質改善に有効な皮膚外用剤や毛髪改善、脱毛予防剤を得ることにある。 The object of the present invention is to promote the activity of transglutaminase, normalize epidermal keratinocytes, reduce dry skin and atopic skin inflammation, and prevent or treat ichthyosis. It is to obtain an improvement and a hair loss prevention agent.

本発明者らが鋭意検討した結果、不飽和脂肪酸が上記目的を達することがわかった。特にパルミトレイン酸、γリノレン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸より選ばれる１種又は２種以上の不飽和脂肪酸がその効果が非常に強いことがわかった。
これらの不飽和脂肪酸或いは不飽和脂肪酸で構成されるトリグリセライドを多く含む、魚油、肝油、海洋性微細藻類、微生物より任意の精製を経て使用することができる。
具体的に例示すれば、γ−リノレン酸の場合は、ボラージ油、黒スグリ油、および糸状菌等の菌体、パルミトレイン酸は珪藻、アラキドン酸はモルティエラ糸状菌、ハエカビ属菌体、エイコサペンタエン酸はシュワネラ属菌、ドコサヘキサエン酸はマイクロアルジェ属菌体等を例示することができる。
また、トランスグルタミナーゼはカルシウムイオン依存性であるが、表皮のカルシウムイオンの分布は顆粒層で最も高いが、角層との間にあるタイトジャンクション等の障壁によって角層でのカルシウム濃度は低い。
発明者の検討によってこれらの不飽和脂肪酸はカルシウムイオンが高濃度よりむしろ低濃度において、トランスグルタミナーゼの活性を促進することがわかり、皮膚外用剤として塗布した場合に最も皮膚外用剤の影響を受ける角層でのトランスグルタミナーゼ活性促進作用が強いことがわかった。
このことは本発明品が他のトランスグルタミナーゼ活性促進に比較して、より早く、より強く効果を発揮する要因と考えられる。
なお、トランスグルタミナーゼ産生促進剤と本発明のトランスグルタミナーゼ活性促進剤を併用することは本発明の効果をより強くすることは当然である。 As a result of intensive studies by the present inventors, it was found that unsaturated fatty acids achieve the above object. In particular, it was found that one or more unsaturated fatty acids selected from palmitoleic acid, γ-linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, and docosahexaenoic acid have a very strong effect.
It can be used after arbitrary purification from fish oil, liver oil, marine microalgae and microorganisms containing a large amount of these unsaturated fatty acids or triglycerides composed of unsaturated fatty acids.
Specifically, in the case of γ-linolenic acid, borage oil, black currant oil, and fungi such as filamentous fungi, palmitoleic acid is diatom, arachidonic acid is Mortierella filamentous fungus, fly fungus, eicosapentaenoic acid Can be exemplified by Shuwanella spp., Docosahexaenoic acid can be exemplified by microalgiers.
Transglutaminase is dependent on calcium ions, but the distribution of calcium ions in the epidermis is highest in the granular layer, but the calcium concentration in the stratum corneum is low due to a barrier such as a tight junction between the stratum corneum.
According to the inventor's investigation, these unsaturated fatty acids have been found to promote the activity of transglutaminase at a low calcium ion concentration rather than a high concentration. It was found that the transglutaminase activity promoting action in the layer was strong.
This is considered to be a factor that the product of the present invention exerts its effect faster and more strongly than other transglutaminase activity promotion.
It should be noted that the combined use of the transglutaminase production promoter and the transglutaminase activity promoter of the present invention naturally enhances the effect of the present invention.

本発明の製剤は、経口、注射、外用のいずれでも薬効を発現するが、皮膚外用剤として用いるのが好ましい。皮膚外用剤には、皮膚化粧料、外用医薬部外品、医療用皮膚外用剤が含まれる。
これらの不飽和脂肪酸の製剤への配合量は、０．０００１〜１０．０重量％、好ましくは０．００１〜３．０重量％である。 The preparation of the present invention exhibits drug efficacy for oral, injection, and external use, but is preferably used as a skin external preparation. Skin external preparations include skin cosmetics, external quasi-drugs, and medical skin external preparations.
The blending amount of these unsaturated fatty acids in the preparation is 0.0001 to 10.0% by weight, preferably 0.001 to 3.0% by weight.

また、本発明の製剤には、上記成分の他に医薬品や化粧品の各種製剤において使用されている界面活性剤、油性成分、保湿剤、高分子化合物、紫外線吸収剤、抗炎症剤、殺菌剤、酸化防止剤、金属イオン封鎖剤、防腐剤、ビタミン類、色素、香料、水等を配合することができる。 In addition to the above ingredients, the preparations of the present invention include surfactants, oily ingredients, moisturizers, polymer compounds, ultraviolet absorbers, anti-inflammatory agents, bactericides, and other agents used in various pharmaceutical and cosmetic preparations. Antioxidants, sequestering agents, preservatives, vitamins, pigments, fragrances, water and the like can be blended.

上記界面活性剤としては、アニオン性、カチオン性、非イオン性、天然、合成のいずれの界面活性剤も使用できるが、皮膚に対する刺激性を考慮すると非イオン性のものを使用することが好ましい。非イオン性界面活性剤としては、例えばグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、アルキルグリコシド等が挙げられる。 As the surfactant, any of anionic, cationic, nonionic, natural, and synthetic surfactants can be used, but it is preferable to use a nonionic surfactant in consideration of irritation to the skin. Examples of the nonionic surfactant include glycerin fatty acid ester, propylene glycol fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbite fatty acid ester, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene polyoxypropylene glycol. , Polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether, polyethylene glycol fatty acid ester, polyoxyethylene castor oil, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, alkylglycoside and the like.

油性成分としては、油脂類、ロウ類、炭化水素類、高級脂肪酸類、高級アルコール類、エステル類、精油類、シリコーン油類などを挙げることができる。油脂類としては、例えば大豆油、ヌカ油、ホホバ油、アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ油、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、ヤシ油、ミンク油、牛脂、豚脂等の天然油脂、これらの天然油脂を水素添加して得られる硬化油及びミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド等の合成トリグリセリド等が；ロウ類としては、例えばカルナバロウ、鯨ロウ、ミツロウ、ラノリン等が；炭化水素類としては、例えば流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ブリスタン等が；高級脂肪酸類としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ラノリン酸、イソステアリン酸等が；高級アルコール類としては、例えばラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、２−ヘキシルデカノール等が；エステル類としては、例えばオクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、アジピン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル等が；精油類としては、例えばハッカ油、ジャスミン油、ショウ脳油、ヒノキ油、トウヒ油、リュウ油、テレピン油、ケイ皮油、ベルガモット油、ミカン油、ショウブ油、パイン油、ラベンダー油、ベイ油、クローブ油、ヒバ油、バラ油、ユーカリ油、レモン油、タイム油、ペパーミント油、ローズ油、セージ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ボルネオール、リナロール、ゲラニオール、カンファー、チモール、スピラントール、ピネン、リモネン、テルペン系化合物等が；シリコーン油類としては、例えばジメチルポリシロキサン等が挙げられる。これら上述の油性成分は一種又は二種以上を組み合わせて使用することができる。本発明においては、このうち特にミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド、ラノリン、流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、リノール酸、リノレン酸、イソステアリン酸、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、コレステロール、オクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、ミリスチレン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ハッカ油、トウヒ油、ケイ皮油、ローズ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ゲラニオール、ピネン、リモネン、ジメチルポリシロキサンを使用することが好ましい。 Examples of the oil component include fats and oils, waxes, hydrocarbons, higher fatty acids, higher alcohols, esters, essential oils, silicone oils, and the like. Examples of the fats and oils include soybean oil, nutka oil, jojoba oil, avocado oil, almond oil, olive oil, cacao oil, sesame oil, persic oil, castor oil, coconut oil, mink oil, beef fat, pork fat and the like, and these Hardened oil obtained by hydrogenation of natural fats and oils and synthetic triglycerides such as myristic acid glyceride and 2-ethylhexanoic acid triglyceride; waxes include, for example, carnauba wax, whale wax, beeswax, lanolin and the like; hydrocarbons For example, liquid paraffin, petrolatum, paraffin microcrystalline wax, ceresin, squalane, bristan etc .; higher fatty acids include, for example, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, behenic acid, oleic acid, linoleic acid, Linolenic acid, lanolinic acid, isostearic acid, etc .; Examples of the class alcohols include lauryl alcohol, cetyl alcohol, stearyl alcohol, oleyl alcohol, lanolin alcohol, cholesterol, 2-hexyldecanol, etc .; examples of the esters include cetyl octanoate, triglyceride octanoate, myristyl lactate, cetyl lactate, Examples of essential oils include mint oil and jasmine. Oil, pepper brain oil, cypress oil, spruce oil, ryu oil, turpentine oil, cinnamon oil, bergamot oil, mandarin oil, ginger oil, pine , Lavender oil, bay oil, clove oil, hiba oil, rose oil, eucalyptus oil, lemon oil, thyme oil, peppermint oil, rose oil, sage oil, menthol, cineole, eugenol, citral, citronellal, borneol, linalool, geraniol, Camphor, thymol, spirantol, pinene, limonene, terpene compounds, etc .; examples of silicone oils include dimethylpolysiloxane. These oily components described above can be used alone or in combination of two or more. In the present invention, among these, myristic acid glyceride, 2-ethylhexanoic acid triglyceride, lanolin, liquid paraffin, petrolatum, paraffin microcrystalline wax, squalane, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, linoleic acid, linolenic acid, isostearic acid , Cetyl alcohol, stearyl alcohol, oleyl alcohol, cholesterol, cetyl octanoate, triglyceride octanoate, isopropyl myristate, octyldodecyl myristate, cholesterol isostearate, POE sorbite fatty acid ester, peppermint oil, spruce oil, cinnamon oil, rose Oil, menthol, cineol, eugenol, citral, citronellal, geraniol, pinene, limonene, dimethylpolysiloxane It is preferable to use.

本発明の製剤には、さらに下記のような成分を配合することができるが、その成分もこれらに限定されるものではない。
色素類；黄色４号、青色１号、黄色２０２号等の厚生省令に定められたタール色素別表Ｉ及びIIの色素、クロロフィル、リボフラビン、クロシン、紅花、アントラキノン等の食品添加物として認められている天然色素等。
ビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ等。
その他；殺菌剤、防腐剤、その他製剤上必要な成分等。
本発明の製剤は、前記必須成分に必要に応じて前記任意成分を加え、常法に従って製造することができる。 The following components can be further added to the preparation of the present invention, but the components are not limited thereto.
Colors: Yellow color No. 4, Blue No. 1 and Yellow No. 202 are recognized as food additives such as tar color dyes I and II, chlorophyll, riboflavin, crocin, safflower, anthraquinone, etc. Natural pigments.
Vitamins; vitamin A, vitamin C, vitamin D, vitamin E, etc.
Others: bactericides, preservatives, other ingredients necessary for formulation.
The preparation of the present invention can be produced according to a conventional method by adding the optional components to the essential components as necessary.

以下に不飽和脂肪酸のトランスグルタミナーゼの活性促進効果を以下の方法で確認した。
＜トランスグルタミナーゼ活性測定＞
24well-plateを用い、2継代目のヒト包皮由来表皮細胞（クラボウ）を50−70％コンフルエントとなるようにHuMedia-KG2培地（フェノールレッド不含）で培養後、カルシウム濃度を1.8mMに変更し、翌日、試験を実施した。各種不飽和脂肪酸濃度、カルシウム濃度を変更した培地に加え、Biotinilated-X-cadaverine(Thermo Fisher Scientific)を添加し、一定時間作用した後、PBS(-)で洗浄し、中性ホルマリン固定した。再度洗浄の後、Streptavidin-conjugated Alexa Fluor488(Thermo Fisher Scientific)を加えて1時間放置し、洗浄後、POWERSCAN(登録商標)H1(DS PHARMA BIOMEDICAL)を用い、Ex488/Em516, Area scan(3×3)の条件(n=3)で蛍光を測定した。蛍光画像の観察には、Chamber Slide(Thermo Fisher Scientific)を用い、蛍光顕微鏡(OLYMPUS FSX100)を使って行った。 The activity promoting effect of unsaturated fatty acid transglutaminase was confirmed by the following method.
<Measurement of transglutaminase activity>
Using a 24-well-plate, culture the human foreskin-derived epidermis cells (Kurabo) at passage 2 in HuMedia-KG2 medium (without phenol red) to 50-70% confluence, and then change the calcium concentration to 1.8 mM. The next day, the test was conducted. Biotinilated-X-cadaverine (Thermo Fisher Scientific) was added to the medium in which various unsaturated fatty acid concentrations and calcium concentrations were changed. After acting for a certain period of time, the plate was washed with PBS (−) and fixed with neutral formalin. After washing again, Streptavidin-conjugated Alexa Fluor488 (Thermo Fisher Scientific) was added and allowed to stand for 1 hour. ) Was measured under the conditions (n = 3). The fluorescence image was observed using a Chamber Slide (Thermo Fisher Scientific) and a fluorescence microscope (OLYMPUS FSX100).

実験１
不飽和脂肪酸の作用濃度は５００μＭ、検体作用時のカルシウム濃度は０．１５ｍＭ、作用時間は４０分間で実験した結果を図１に示す。
実験２
エイコサペンタエン酸に関して作用濃度を変えて実験した。検体作用時のカルシウム濃度は０．１５ｍＭ、作用時間は４０分間で実験した結果を図２に示す。
実験３
エイコサペンタエン酸に関して作用濃度を５００μＭ、検体作用時のカルシウム濃度は０．１５ｍＭ、作用時間を変化させて実験した結果を図３に示す。
実験４
エイコサペンタエン酸に関して作用濃度を５００μＭ、作用時間は４０分間、検体作用時のカルシウム濃度を変化させて実験した結果を図４に示す。
なお、いずれのコントロールも不飽和脂肪酸を配合せず、実験した結果である。 Experiment 1
FIG. 1 shows the results of an experiment in which the action concentration of unsaturated fatty acid is 500 μM, the calcium concentration at the time of sample action is 0.15 mM, and the action time is 40 minutes.
Experiment 2
Experiments were conducted with varying concentrations of eicosapentaenoic acid. FIG. 2 shows the results of an experiment in which the calcium concentration at the time of sample action was 0.15 mM and the action time was 40 minutes.
Experiment 3
FIG. 3 shows the results of an experiment conducted with eicosapentaenoic acid at an action concentration of 500 μM, a calcium concentration at the time of sample action of 0.15 mM, and an action time.
Experiment 4
FIG. 4 shows the results of experiments conducted on eicosapentaenoic acid with an action concentration of 500 μM, an action time of 40 minutes, and varying the calcium concentration during sample action.
In addition, all controls are the results of experiments without adding unsaturated fatty acids.

実験１の結果、５００μＭの作用濃度で、オレイン酸、リノール酸、パルミトレイン酸、γリノレン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸はトランスグルタミナーゼの活性を促進することがわかった。特にパルミトレイン酸、γリノレン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸はトランスグルタミナーゼの活性促進効果が非常に強いことが分かった。
パルミチン酸、ステアリン酸等の飽和脂肪酸はトランスグルタミナーゼの活性を促進する効果は認められなかった。
実験２の結果、エイコサペンタエン酸のトランスグルタミナーゼの活性促進は明確な濃度依存性があることがわかった。
実験３の結果、エイコサペンタエン酸のトランスグルタミナーゼの活性促進は作用時間に比例していることがわかった。
実験４の結果、カルシウム濃度が低いときにトランスグルタミナーゼの活性促進が強いことが分かった。
皮膚は表皮の顆粒層で、細胞死に伴うカルシウムイオンの細胞内への流入が起こるが、タイトジャンクション等の存在によって角層はカルシウム濃度が低い。エイコサペンタエン酸をはじめとする本願発明の不飽和脂肪酸は、角層等のカルシウム濃度が低い部位でもトランスグルタミナーゼの活性を促進することがわかった。 As a result of Experiment 1, it was found that oleic acid, linoleic acid, palmitoleic acid, γ-linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, and docosahexaenoic acid promote the activity of transglutaminase at a working concentration of 500 μM. In particular, it was found that palmitoleic acid, γ-linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, and docosahexaenoic acid have a very strong activity to promote transglutaminase activity.
Saturated fatty acids such as palmitic acid and stearic acid were not effective in promoting the activity of transglutaminase.
As a result of Experiment 2, it was found that the activity promotion of transglutaminase of eicosapentaenoic acid has a clear concentration dependency.
As a result of Experiment 3, it was found that the activity promotion of eicosapentaenoic acid transglutaminase was proportional to the action time.
As a result of Experiment 4, it was found that the transglutaminase activity was strongly promoted when the calcium concentration was low.
The skin is a granular layer of the epidermis, and calcium ions flow into the cells due to cell death. However, due to the presence of tight junctions, the stratum corneum has a low calcium concentration. It has been found that the unsaturated fatty acids of the present invention, including eicosapentaenoic acid, promote the activity of transglutaminase even at sites where the calcium concentration is low, such as the stratum corneum.

また、パルミトレイン酸、γリノレン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸等の不飽和脂肪酸を配合した外用剤を作成し、実際に使用してみた結果、乾燥肌、アトピー性皮膚炎に改善がみられた。また、毛髪用の外用剤としては毛髪改善、脱毛予防の効果が確認できた。 In addition, we made external preparations containing unsaturated fatty acids such as palmitoleic acid, γ-linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, docosahexaenoic acid, etc. It was seen. Moreover, the effect of hair improvement and hair loss prevention was confirmed as an external preparation for hair.

実験１の結果を示す。縦軸はＲＦＵ（相対蛍光強度）であり、横軸は左よりコントロール、オレイン酸、リノール酸、パルミトレイン酸、γリノレン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸の結果である。The result of Experiment 1 is shown. The vertical axis represents RFU (relative fluorescence intensity), and the horizontal axis represents the results of control, oleic acid, linoleic acid, palmitoleic acid, γ-linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, and docosahexaenoic acid from the left. 実験２の結果を示す。縦軸はＲＦＵ（相対蛍光強度）であり、横軸は左よりコントロール、エイコサペンタエン酸１００μＭ、２００μＭ、３００μＭ、５００μＭの結果である。The result of Experiment 2 is shown. The vertical axis represents RFU (relative fluorescence intensity), and the horizontal axis represents the results of control, eicosapentaenoic acid 100 μM, 200 μM, 300 μM, and 500 μM from the left. 実験３の結果を示す。縦軸はＲＦＵ（相対蛍光強度）であり、横軸は左よりコントロール（作用時間１０分間）、エイコサペンタエン酸５００μＭで作用時間１０分間、２０分間、３０分間、４０分間、６０分間、８０分間の結果であり、一番右はコントロール（作用時間８０分間）である。The result of Experiment 3 is shown. The vertical axis is RFU (relative fluorescence intensity), and the horizontal axis is control from the left (action time 10 minutes), eicosapentaenoic acid 500 μM, action time 10 minutes, 20 minutes, 30 minutes, 40 minutes, 60 minutes, 80 minutes. It is a result and the rightmost is a control (action time 80 minutes). 実験４の結果を示す。縦軸はＲＦＵ（相対蛍光強度）であり、横軸は左よりコントロール、エイコサペンタエン酸５００μＭでカルシウムイオン濃度が０ｍＭ、０．１ｍＭ、０．３ｍＭ、０．６ｍＭ、０．９ｍＭ、１．８ｍＭの結果である。The result of Experiment 4 is shown. The vertical axis is RFU (relative fluorescence intensity), the horizontal axis is control from the left, eicosapentaenoic acid 500 μM, and the calcium ion concentration is 0 mM, 0.1 mM, 0.3 mM, 0.6 mM, 0.9 mM, 1.8 mM. It is a result.

Claims

A transglutaminase activity promoter containing at least one unsaturated fatty acid as an active ingredient.

The transglutaminase activity promoter according to claim 1, wherein the unsaturated fatty acid is palmitoleic acid, γ-linolenic acid, eicosapentaenoic acid, arachidonic acid, or docosahexaenoic acid.