JP5219038B2

JP5219038B2 - Skin keratinization promoter

Info

Publication number: JP5219038B2
Application number: JP2008276989A
Authority: JP
Inventors: フランソワニヨンサバ; 秀興小川; 暉公彦岡本; 文弘服部; 和則阪井田
Original assignee: Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd; Juntendo University
Current assignee: Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd; Juntendo University
Priority date: 2008-10-28
Filing date: 2008-10-28
Publication date: 2013-06-26
Anticipated expiration: 2028-10-28
Also published as: JP2010105924A

Description

本発明は、皮膚の角化を促進し、皮膚の老化防止、皮膚のトラブル改善に有用な組成物に関する。 The present invention relates to a composition that promotes skin keratinization and is useful for preventing skin aging and improving skin troubles.

皮膚は体の最も外側に存在しており、細菌などの外界からの刺激に対するバリアとしての役割を有している。皮膚においては、表皮細胞が基底細胞から有棘細胞、顆粒細胞、さらには角層細胞へと約４週間かけて変化（角化）し、これらの細胞中で細胞間脂質やＮＭＦ（天然保湿因子）、さらにはコーニファイドエンベローブを形成することによってバリア機能を成し遂げている。
しかし、皮膚の老化等によってこの角化の速度は低下することが知られており、角化の速度が低下すると皮膚のくすみや肌荒れなどを引き起こすといわれている。この皮膚の角化を促進する物質としては、タイソウ抽出物やハス胚芽抽出物などの生薬抽出物などが報告されている（特許文献１，２を参照）。
特開２００６−３１６０２８号公報特開２００２−６８９９３号公報 The skin exists on the outermost side of the body, and has a role as a barrier against external stimuli such as bacteria. In the skin, epidermal cells change from basal cells to spinous cells, granule cells, and horny cells over about 4 weeks (keratinization), and intercellular lipids and NMF (natural moisturizing factor) in these cells. ), And further, the barrier function is achieved by forming a converged envelope.
However, it is known that the rate of keratinization decreases due to skin aging, etc., and it is said that when the rate of keratinization decreases, skin dullness and rough skin are caused. As substances that promote the keratinization of the skin, herbal medicine extracts such as peanut extract and lotus germ extract have been reported (see Patent Documents 1 and 2).
JP 2006-316028 A JP 2002-68993 A

しかしながら、これら従来の角化促進成分の作用は十分ではなく、より優れた皮膚角化促進剤の開発が望まれている。
従って、本発明の目的は、皮膚のバリア機能の改善、皮膚の老化防止に有用な皮膚角化促進剤を提供することにある。 However, the action of these conventional keratinization promoting components is not sufficient, and the development of a better skin keratinization promoting agent is desired.
Accordingly, an object of the present invention is to provide a skin keratinization promoter useful for improving the barrier function of skin and preventing skin aging.

そこで本発明者らは、皮膚の角化とともにコーニファイドエンベローブの成分として生成される蛋白質の遺伝子発現量を指標として皮膚角化促進剤を探索してきたところ、真珠層由来のミネラルにロリクリンの遺伝子発現量を増強する作用があり、角化促進剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は真珠層由来のミネラルを含有する皮膚角化促進剤を提供するものである。 Therefore, the present inventors have searched for a skin keratinization promoter using the gene expression level of a protein produced as a component of a cornified envelope together with keratinization of the skin as an index. The present invention was completed by finding that it has an effect of enhancing the amount and is useful as a keratinization promoter.
That is, this invention provides the skin keratinization promoter containing the mineral derived from a pearl layer.

本発明の皮膚角化促進剤は、皮膚の角化とともにコーニファイドエンベローブの成分として生成されるロリクリンの発現を強く促進し、かつ皮膚の角化を促進する。従って、本発明の皮膚角化促進剤を用いれば、皮膚の老化防止、皮膚のトラブル改善効果が得られる。 The skin keratinization promoter of the present invention strongly promotes the expression of loricrin, which is produced as a component of a cornified envelope together with skin keratinization, and promotes skin keratinization. Therefore, if the skin keratinization promoter of the present invention is used, the effects of preventing skin aging and improving skin troubles can be obtained.

本発明に用いられる真珠層由来のミネラル成分は、真珠から脱核した真珠層又は貝殻の真珠層を焼成後、酸又は精製水でミネラルを溶解させ、濾過、中和することにより得ることができる。真珠層由来のミネラルは、カルシウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、亜鉛および微量なミネラルを含有する。乾燥物あたりの主なミネラルの組成比は、カルシウムを５０〜９９質量％、より好ましくは７０〜９５質量％含有する。ナトリウムは０〜４０質量％、より好ましくは１〜１５質量％含有する。マグネシウムは０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。鉄は０〜１０質量％、より好ましくは０．５〜５質量％含有する。亜鉛は０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。 The mineral component derived from the pearl layer used in the present invention can be obtained by firing the pearl layer denucleated from the pearl or the pearl layer of the shell, dissolving the mineral with acid or purified water, filtering, and neutralizing. . Minerals derived from the nacre contain calcium, sodium, magnesium, iron, zinc and trace minerals. The composition ratio of the main mineral per dry matter contains 50 to 99 mass%, more preferably 70 to 95 mass% of calcium. Sodium is contained in an amount of 0 to 40% by mass, more preferably 1 to 15% by mass. Magnesium is contained in an amount of 0 to 5% by mass, more preferably 0.01 to 1% by mass. Iron is contained in an amount of 0 to 10% by mass, more preferably 0.5 to 5% by mass. Zinc is contained in an amount of 0 to 5% by mass, more preferably 0.01 to 1% by mass.

後記実施例に示すように、真珠層由来のミネラルを添加すると、皮膚由来細胞はロリクリン遺伝子発現量を増大する。ここでロリクリンは、角質細胞の細胞膜を裏打ちするきわめて強靭で巨大な不溶性構造物である周辺帯の構成成分である。また、真珠層由来のミネラルには、３Ｄ皮膚モデルにおける角層形成を促進する作用を有する。従って、真珠層由来のミネラルは皮膚の角化促進剤として有用である。 As shown in Examples described later, when a pearl layer-derived mineral is added, the skin-derived cells increase the loricrin gene expression level. Here, loricrin is a component of the peripheral zone, which is a very strong and huge insoluble structure that lines the cell membrane of keratinocytes. Moreover, the mineral derived from a pearl layer has the effect | action which accelerates | stimulates the stratum corneum formation in a 3D skin model. Therefore, the mineral derived from the nacre is useful as a skin keratinization promoter.

本発明の皮膚角化促進剤は、経口、注射、外用のいずれでも薬効を発現するが、皮膚外用剤として用いるのが好ましい。皮膚外用剤には、皮膚化粧料、外用医薬部外品、医療用皮膚外用剤が含まれる。 The skin keratinization promoter of the present invention exhibits drug efficacy for oral, injection, and external use, but is preferably used as a skin external preparation. Skin external preparations include skin cosmetics, external quasi-drugs, and medical skin external preparations.

また、本発明の皮膚角化促進剤には、上記成分の他に医薬品や化粧品の各種製剤において使用されている界面活性剤、油性成分、保湿剤、高分子化合物、紫外線吸収剤、抗炎症剤、殺菌剤、酸化防止剤、金属イオン封鎖剤、防腐剤、ビタミン類、色素、香料、水等を配合することができる。 In addition, the skin keratinization promoter of the present invention includes surfactants, oily ingredients, moisturizers, polymer compounds, ultraviolet absorbers, anti-inflammatory agents used in various pharmaceutical and cosmetic preparations in addition to the above ingredients. , Fungicides, antioxidants, sequestering agents, preservatives, vitamins, pigments, fragrances, water and the like can be blended.

上記界面活性剤としては、アニオン性、カチオン性、非イオン性、天然、合成のいずれの界面活性剤も使用できるが、皮膚に対する刺激性を考慮すると非イオン性のものを使用することが好ましい。非イオン性界面活性剤としては、例えばグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、アルキルグリコシド等が挙げられる。 As the surfactant, any of anionic, cationic, nonionic, natural, and synthetic surfactants can be used, but it is preferable to use a nonionic surfactant in consideration of irritation to the skin. Examples of the nonionic surfactant include glycerin fatty acid ester, propylene glycol fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbite fatty acid ester, polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene polyoxypropylene glycol. , Polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether, polyethylene glycol fatty acid ester, polyoxyethylene castor oil, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, alkylglycoside and the like.

油性成分としては、油脂類、ロウ類、炭化水素類、高級脂肪酸類、高級アルコール類、エステル類、精油類、シリコーン油類などを挙げることができる。油脂類としては、例えば大豆油、ヌカ油、ホホバ油、アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ油、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、ヤシ油、ミンク油、牛脂、豚脂等の天然油脂、これらの天然油脂を水素添加して得られる硬化油及びミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド等の合成トリグリセリド等が；ロウ類としては、例えばカルナバロウ、鯨ロウ、ミツロウ、ラノリン等が；炭化水素類としては、例えば流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ブリスタン等が；高級脂肪酸類としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ラノリン酸、イソステアリン酸等が；高級アルコール類としては、例えばラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、２−ヘキシルデカノール等が；エステル類としては、例えばオクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、アジピン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル等が；精油類としては、例えばハッカ油、ジャスミン油、ショウ脳油、ヒノキ油、トウヒ油、リュウ油、テレピン油、ケイ皮油、ベルガモット油、ミカン油、ショウブ油、パイン油、ラベンダー油、ベイ油、クローブ油、ヒバ油、バラ油、ユーカリ油、レモン油、タイム油、ペパーミント油、ローズ油、セージ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ボルネオール、リナロール、ゲラニオール、カンファー、チモール、スピラントール、ピネン、リモネン、テルペン系化合物等が；シリコーン油類としては、例えばジメチルポリシロキサン等が挙げられる。これら上述の油性成分は一種又は二種以上を組み合わせて使用することができる。本発明においては、このうち特にミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド、ラノリン、流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、リノール酸、リノレン酸、イソステアリン酸、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、コレステロール、オクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、ミリスチレン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ハッカ油、トウヒ油、ケイ皮油、ローズ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ゲラニオール、ピネン、リモネン、ジメチルポリシロキサンを使用することが好ましい。 Examples of the oil component include fats and oils, waxes, hydrocarbons, higher fatty acids, higher alcohols, esters, essential oils, silicone oils, and the like. Examples of the fats and oils include soybean oil, nutka oil, jojoba oil, avocado oil, almond oil, olive oil, cacao oil, sesame oil, persic oil, castor oil, coconut oil, mink oil, beef fat, pork fat and the like, and these Hardened oil obtained by hydrogenation of natural fats and oils and synthetic triglycerides such as myristic acid glyceride and 2-ethylhexanoic acid triglyceride; waxes include, for example, carnauba wax, whale wax, beeswax, lanolin and the like; hydrocarbons For example, liquid paraffin, petrolatum, paraffin microcrystalline wax, ceresin, squalane, bristan etc .; higher fatty acids include, for example, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, behenic acid, oleic acid, linoleic acid, Linolenic acid, lanolinic acid, isostearic acid, etc .; Examples of the class alcohols include lauryl alcohol, cetyl alcohol, stearyl alcohol, oleyl alcohol, lanolin alcohol, cholesterol, 2-hexyldecanol, etc .; examples of the esters include cetyl octanoate, triglyceride octanoate, myristyl lactate, cetyl lactate, Examples of essential oils include mint oil, jasmine, isopropyl myristate, myristyl myristate, octyldodecyl myristate, isopropyl palmitate, isopropyl adipate, butyl stearate, decyl oleate, cholesterol isostearate, POE sorbite fatty acid ester, etc. Oil, pepper brain oil, cypress oil, spruce oil, ryu oil, turpentine oil, cinnamon oil, bergamot oil, mandarin oil, ginger oil, pine , Lavender oil, bay oil, clove oil, hiba oil, rose oil, eucalyptus oil, lemon oil, thyme oil, peppermint oil, rose oil, sage oil, menthol, cineole, eugenol, citral, citronellal, borneol, linalool, geraniol, Camphor, thymol, spirantol, pinene, limonene, terpene compounds, etc .; examples of silicone oils include dimethylpolysiloxane. These oily components described above can be used alone or in combination of two or more. In the present invention, among these, myristic acid glyceride, 2-ethylhexanoic acid triglyceride, lanolin, liquid paraffin, petrolatum, paraffin microcrystalline wax, squalane, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, linoleic acid, linolenic acid, isostearic acid , Cetyl alcohol, stearyl alcohol, oleyl alcohol, cholesterol, cetyl octanoate, triglyceride octanoate, isopropyl myristate, octyldodecyl myristate, cholesterol isostearate, POE sorbite fatty acid ester, peppermint oil, spruce oil, cinnamon oil, rose Oil, menthol, cineol, eugenol, citral, citronellal, geraniol, pinene, limonene, dimethylpolysiloxane It is preferable to use.

本発明の皮膚角化促進剤には、さらに下記のような成分を配合することができるが、その成分もこれらに限定されるものではない。
（ａ）色素類；黄色４号、青色１号、黄色２０２号等の厚生省令に定められたタール色素別表Ｉ及びIIの色素、クロロフィル、リボフラビン、クロシン、紅花、アントラキノン等の食品添加物として認められている天然色素等。
（ｂ）ビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ等。
（ｃ）その他；殺菌剤、防腐剤、その他製剤上必要な成分等。 The following components can be further blended in the skin keratinization promoter of the present invention, but the components are not limited thereto.
(A) Dyes: recognized as food additives such as tar dyes I and II dyes, chlorophyll, riboflavin, crocin, safflower, anthraquinone, etc. stipulated in the Ordinance of the Ministry of Health and Welfare such as Yellow No. 4, Blue No. 1, Yellow No. 202, etc. Natural pigments that are used.
(B) Vitamins; vitamin A, vitamin C, vitamin D, vitamin E, etc.
(C) Others: bactericides, preservatives, other ingredients necessary for the preparation, etc.

本発明の皮膚角化促進剤は、前記必須成分に必要に応じて前記任意成分を加え、常法に従って製造することができ、クリーム、乳液、化粧水等の形態とすることができる。 The skin keratinization promoter of the present invention can be produced according to a conventional method by adding the optional components to the essential components as necessary, and can be in the form of cream, milky lotion, lotion or the like.

本発明の皮膚角化促進剤中には、真珠層由来ミネラルを成分1日投与量（乾燥物換算）として１μｇ〜１g、特に１０μｇ〜１００mg配合するのが好ましい。また、本発明の皮膚角化促進剤中に、真珠層由来ミネラルは１０μｇ〜１０ｇ／１００ｇ、特に４０μｇ〜１g／１００ｇ含有するのが好ましい。 In the skin keratinization promoter of the present invention, it is preferable to blend 1 μg to 1 g, particularly 10 μg to 100 mg of the pearl layer-derived mineral as the daily dose of the ingredient (in terms of dry matter). Moreover, it is preferable to contain 10 micrograms-10 g / 100g, especially 40 micrograms-1 g / 100g of pearl layer origin minerals in the skin keratinization promoter of this invention.

次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する。 EXAMPLES Next, an Example is given and this invention is demonstrated in detail.

実施例１
（真珠層由来ミネラルの製造）
アコヤ貝真珠を脱核して、真珠層を取り出す。次に真珠層を破砕して粉末化し、真珠層を焼成する（１０５０℃、２時間）。水０．８５kgに対して、焼成物２ｇを加え、室温で６時間撹拌する。濾過して不溶分を除去し、濾液に希塩酸を加え中和することにより、アコヤ貝のミネラル溶液を得た。
得られたミネラル溶液には８０ｍｇ／１００ｍＬのカルシウムが含有されており、ミネラルの組成比は、カルシウム：ナトリウム：マグネシウム：鉄：亜鉛＝８９：８：０．２：３：０．１であった。 Example 1
(Manufacture of pearl layer-derived minerals)
Enucleate Akoyakai pearls and remove the nacreous layer. Next, the pearl layer is crushed and powdered, and the pearl layer is fired (1050 ° C., 2 hours). Add 2 g of the calcined product to 0.85 kg of water and stir at room temperature for 6 hours. The insoluble matter was removed by filtration, and the filtrate was neutralized with dilute hydrochloric acid to obtain a pearl oyster shell mineral solution.
The obtained mineral solution contained 80 mg / 100 mL of calcium, and the mineral composition ratio was calcium: sodium: magnesium: iron: zinc = 89: 8: 0.2: 3: 0.1 .

実施例２
＜試験方法＞
４系代目の人包皮由来ケラチノサイトを６ウェルのプレート１ウェルあたり２．２５×１０⁵個播種し、３日間培養（３７℃、９５％Ａｉｒ、５％ＣＯ₂）して７０〜８０％コンフルエントにする。真珠層由来ミネラルを加えて２４時間インキュベートし、その後、上清を捨てて、細胞を完全に溶解する。全ＲＮＡを抽出し、ＲＮＡを逆転写してｃＤＮＡを作成し、定量リアルタイムＰＣＲを用いて角化に関連するタンパク質の遺伝子発現量を検出する。 Example 2
<Test method>
4th generation human foreskin-derived keratinocytes are seeded at 2.25 × 10 ⁵ per well of a 6-well plate and cultured for 3 days (37 ° C., 95% Air, 5% CO ₂ ) to 70-80% confluence. To do. The nacreous mineral is added and incubated for 24 hours, after which the supernatant is discarded to completely lyse the cells. Total RNA is extracted, RNA is reverse transcribed to produce cDNA, and the gene expression level of protein related to keratinization is detected using quantitative real-time PCR.

＜結果＞
結果を図１に示す。その結果、真珠ミネラルはロリクリンの遺伝子発現量を増加させることが明らかとなった。 <Result>
The results are shown in FIG. As a result, it was revealed that pearl minerals increased the gene expression level of loricrin.

実施例３
＜試験方法＞
ケラチノサイトを１２ウェルのプレートに播種し、アスコルビン酸を添加した培地で３日間培養（３７℃、９５％Ａｉｒ、５％ＣＯ₂）する。真珠層由来ミネラル及び塩化カルシウムを不織布に馴染ませた後、１２ウェルの細胞培養表面に乗せて培養する。播種１０日後に表皮組織をサンプリングし、固定後パラフィン切片を作成し、ＨＥ染色して標本を作製した。
＜結果＞
結果を図２に示す。その結果、塩化カルシウムを添加したものと比較し、真珠層由来ミネラルを添加した皮膚は、すでに角層下層の形成が始まっていることが確認できた。このことより真珠層由来ミネラルに角化促進効果のあることがわかる。 Example 3
<Test method>
Keratinocytes are seeded in a 12-well plate and cultured for 3 days (37 ° C., 95% Air, 5% CO ₂ ) in a medium supplemented with ascorbic acid. The pearl layer-derived mineral and calcium chloride are mixed with the non-woven fabric and then placed on a 12-well cell culture surface and cultured. Ten days after sowing, the epidermis tissue was sampled, and after fixing, a paraffin section was prepared, and stained with HE to prepare a specimen.
<Result>
The results are shown in FIG. As a result, it was confirmed that the formation of the stratum corneum lower layer had already started in the skin to which the pearl layer-derived mineral was added, compared with the case in which calcium chloride was added. This indicates that the pearl layer-derived mineral has a keratinization promoting effect.

真珠層由来ミネラルによるロリクリンの遺伝子発現量変化を示す図である。It is a figure which shows the gene expression level change of the loricrin by the pearl layer origin mineral. ３Ｄ皮膚モデルを用いた角化促進結果（Ａ：真珠ミネラル、Ｂ：塩化カルシウム）を示す図である。It is a figure which shows the keratinization promotion result (A: pearl mineral, B: calcium chloride) using a 3D skin model.

Claims

A lolicrin expression promoter containing a nacreous-derived mineral solution obtained by firing a nacre and dissolving the fired product in acid or purified water, followed by filtration and neutralization .