JP2018117615A - 試験試料がExserohilum属の植物病原性真菌を含有するかどうかを判定する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
非特許文献2は、Exserohilum属の真菌のみがよく成長する半選択培地を開示している。
(a) 貫通孔を有さないセルロースフィルムの表側の面に、前記試験試料を配置する工程、
(b) 工程(a)の後、前記試験試料を所定時間、静置する工程、
(c) 工程(b)の後、前記フィルムの裏面を観察する工程、および
(d) 工程(c)において前記フィルムの裏面に前記セルロースフィルムを貫通した真菌が見いだされた場合には、前記試験試料は前記Exserohilum属の植物病原性真菌を含有すると判定する工程、
ここで、
前記方法は、さらに
前記工程(b)の前に、前記試験試料に培地を供給する工程を具備し、かつ
前記培地は、
カルベンダジウム、
キャプタン、
ストレプトマイシン硫酸塩、および
ネオマイシン硫酸塩を含有している
ラクトースカゼイン加水分解寒天培地である。
(a) 貫通孔を有さないセルロースフィルムの表側の面に、前記試験試料を配置する工程、
(b) 工程(a)の後、前記試験試料を所定時間、静置する工程、
(c) 工程(b)の後、前記フィルムの裏面を観察する工程、および
(d) 工程(c)において前記フィルムの裏面に前記セルロースフィルムを貫通した真菌が見いだされた場合には、前記試験試料は前記Exserohilum属の植物病原性真菌を含有すると判定する工程、
ここで、
前記工程(b)において、前記セルロースフィルムの裏面を培地に接触させながら、前記試験試料が静置され、かつ
前記培地は、
カルベンダジウム、
キャプタン、
ストレプトマイシン硫酸塩、および
ネオマイシン硫酸塩を含有している
ラクトースカゼイン加水分解寒天培地である。
工程(a)では、14.5マイクロメートル以下の厚みを有するセルロースフィルムの表側の面に試験試料が配置される。一例として、セルロースフィルムは、0.04マイクロメートル以上14.5マイクロメートル以下の厚みを有する。0.04マイクロメートル未満の厚みを有するセルロースフィルムを形成することは困難であろう。一方、14.5マイクロメートルを超える厚みを有するセルロースフィルムをExserohilum属の植物病原性真菌が貫通するにはあまりにも長い時間を要する。従って、そのような厚みを有するセルロースフィルムは実用的ではない。
工程(b)では、工程(a)の後、試験試料200が所定の培養時間、静置される。一例として、培養時間は、24時間である。
工程(c)では、工程(b)の後、セルロースフィルム104の裏面104bが観察される。光学顕微鏡を用いて裏面104bが観察されることが望ましい。
工程(d)では、工程(c)においてセルロースフィルム104の裏面104bに真菌が見いだされた場合には、試験試料はExserohilum属の植物病原性真菌を含有すると判定される。言うまでもないが、工程(c)においてセルロースフィルム104の裏面104bに真菌が見いだされなかった場合には、試験試料はExserohilum属の植物病原性真菌を含有しないと判定される。
以下の実施例を参照しながら、本発明がさらにより詳細に説明される。
(Exserohium turcicumの培養)
植物病原菌の一種であるExserohium turcicumが、V−8寒天培地に接種された。次いで、培地は摂氏25度の温度下で1週間静置された。Exserohium turcicumは、テキサスA&M大学の植物病理学微生物学部門に所属するシム教授より与えられた。
本発明者らは、非特許文献2の開示内容に従って、以下の4つの試薬をラクトースカゼイン加水分解寒天培地に添加して、液体培地302を調製した。
カルベンダジウム 60ミリグラム/リットル
キャプタン 30ミリグラム/リットル
ストレプトマイシン硫酸塩 600ミリグラム/リットル
ネオマイシン硫酸塩 300ミリグラム/リットル
このようにして調製された液体培地302は、第2容器300に供給された。
実験例1は、実施例1A〜実施例1Gからなる。
図1に示される第1容器100が以下のように用意された。
実験例2では、Exserohium turcicumに代えてGibberella fujikuroiを用いたこと以外は、実験例1と同様の実験が行われた。実験例2は、比較例2A〜比較例2Gからなる。Gibberella fujikuroiは、Exserohium turcicumと同様、植物病原性真菌の1種である。
実験例3では、Exserohium turcicumに代えてFusarium avenaceumを用いたこと以外は、実験例1と同様の実験が行われた。実験例3は、比較例3A〜比較例3Gからなる。Fusarium avenaceumは、Exserohium turcicumと同様、植物病原性真菌の1種である。
実験例4では、Exserohium turcicumに代えてGlomerella tucumanensisを用いたこと以外は、実験例1と同様の実験が行われた。実験例4は、比較例4A〜比較例4Gからなる。Glomerella tucumanensisは、Exserohium turcicumと同様、植物病原性真菌の1種である。
102 フランジ
104 セルロースフィルム
104a 表側の面
104b 裏側の面
170 基板
170a 表側の面
170b 裏側の面
200 試験試料
202 植物病原性真菌
202a 植物病原性真菌の一部分
300 第2容器
302 液体の培地
304 固体の培地
402 真菌染色液
500 光源
600 顕微鏡
Claims (22)
- 試験試料が、Exserohilum属の植物病原性真菌を含有するかどうかを判定する方法であって、以下の工程を具備し、
(a) 貫通孔を有さないセルロースフィルムの表側の面に、前記試験試料を配置する工程、
(b) 工程(a)の後、前記試験試料を所定時間、静置する工程、
(c) 工程(b)の後、前記フィルムの裏面を観察する工程、および
(d) 工程(c)において前記フィルムの裏面に前記セルロースフィルムを貫通した真菌が見いだされた場合には、前記試験試料は前記Exserohilum属の植物病原性真菌を含有すると判定する工程、
ここで、
前記方法は、さらに
前記工程(b)の前に、前記試験試料に培地を供給する工程を具備し、かつ
前記培地は、
カルベンダジウム、
キャプタン、
ストレプトマイシン硫酸塩、および
ネオマイシン硫酸塩を含有している
ラクトースカゼイン加水分解寒天培地である、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記工程(b)および前記工程(c)の間に、前記セルロースフィルムの裏面を真菌染色液に接触させる工程をさらに具備する、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記培地が液体培地である、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記培地が固体培地である、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記セルロースフィルムは、前記セルロースフィルムの表側の面および裏側の面の少なくともいずれか一方に設けられた基板によって支持されており、かつ
前記基板は、貫通孔を具備している、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記試験試料が固体である、
方法。 - 請求項6に記載の方法であって、
前記固体が、土壌および破砕された植物からなる群から選択される少なくとも1つである、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記試験試料が液体である、
方法。 - 請求項8に記載の方法であって、
前記液体が、農業用水、水耕栽培のために用いられた液体、植物を洗浄するために使用した後の液体、植物から抽出された液体、農業資材を洗浄するために使用した後の液体、および衣類または靴を洗浄するために使用した後の液体からなる群から選択される少なくとも1つである、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記Exserohilum属の植物病原性真菌が、Exserohilum turcicumである、
方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記セルロースフィルムは、0.04マイクロメートル以上14.5マイクロメートル以下の厚みを有している、
方法。 - 試験試料が、Exserohilum属の植物病原性真菌を含有するかどうかを判定する方法であって、以下の工程を具備し:
(a) 貫通孔を有さないセルロースフィルムの表側の面に、前記試験試料を配置する工程、
(b) 工程(a)の後、前記試験試料を所定時間、静置する工程、
(c) 工程(b)の後、前記フィルムの裏面を観察する工程、および
(d) 工程(c)において前記フィルムの裏面に前記セルロースフィルムを貫通した真菌が見いだされた場合には、前記試験試料は前記Exserohilum属の植物病原性真菌を含有すると判定する工程、
ここで、
前記工程(b)において、前記セルロースフィルムの裏面を培地に接触させながら、前記試験試料が静置され、かつ
前記培地は、
カルベンダジウム、
キャプタン、
ストレプトマイシン硫酸塩、および
ネオマイシン硫酸塩を含有している
ラクトースカゼイン加水分解寒天培地である、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記工程(b)および前記工程(c)の間に、前記セルロースフィルムの裏面を真菌染色液に接触させる工程をさらに具備する、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記培地が液体培地である、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記培地が固体培地である、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記セルロースフィルムは、前記セルロースフィルムの表側の面および裏側の面の少なくともいずれか一方に設けられた基板によって支持されており、かつ
前記基板は、貫通孔を具備している、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記試験試料が固体である、
方法。 - 請求項17に記載の方法であって、
前記固体が、土壌および破砕された植物からなる群から選択される少なくとも1つである、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記試験試料が液体である、
方法。 - 請求項19に記載の方法であって、
前記液体が、農業用水、水耕栽培のために用いられた液体、植物を洗浄するために使用した後の液体、植物から抽出された液体、農業資材を洗浄するために使用した後の液体、および衣類または靴を洗浄するために使用した後の液体からなる群から選択される少なくとも1つである、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記植物病原性真菌が、Exserohilum turcicumである、
方法。 - 請求項12に記載の方法であって、
前記セルロースフィルムは、0.04マイクロメートル以上14.5マイクロメートル以下の厚みを有している、
方法。
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