JP2017537140A - 蛍光合成レチノイド - Google Patents

Abstract

蛍光合成レチノイド一般式Ｉの、新規化合物が開示されている。式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、本明細書で定義される通りである。

Description

［発明の分野］
本発明は、新規化合物、それらの使用およびそれらに関連する治療方法に関する。

より詳細には、本発明は、新規な蛍光性合成レチノイド化合物、および細胞分化の制御におけるそれらの使用に関する。本発明はまた、本発明の新規化合物を用いた医学的治療方法を提供する。

［発明の背景］
ビタミンＡ（レチノール）およびその誘導体は、レチノイドとして知られる化合物のクラスに属する。レチノイドは、胚発生から成人の恒常性までの多くの重要な生物学的経路および、幹細胞増殖、分化およびアポトーシスのような幹細胞の発展の多くの局面を制御することに関与するシグナリング分子の重要なクラスである。

レチノイドは、ビタミンＡと、構造的および／または機能的に関連している。そして、全トランス−レチノイン酸（ＡＴＲＡ）を含む、その多くが、生物学的活性を有する。ＡＴＲＡは、最も豊富な内在性レチノイドであり、そして、長年にわたって広く研究されてきた。ＡＴＲＡは、生理学的および実験的条件下で、異性化し、異なる受容体を活性化する異なる異性体を有し、このために、これらの小分子で観察される様々な生物学的効果を示す。

レチノイドは、正常および腫瘍細胞の両方で、分化およびアポトーシスを制御する能力のために、レチノイドは、毒性が広範な使用を妨げているが、化学予防剤および化学療法剤として作用する可能性を有する。

しかし、ＡＴＲＡは、特に、光に暴露されると、安定性が乏しい。ＡＴＲＡ化合物は、光に暴露すると、異性化し、そして、分解する。これを克服するために、暗闇の中で、ＡＴＲＡを保管して作業する努力がなされているが、そのような予防措置は、ＡＴＲＡの使用に伴うコストを増加させ、そして、問題を完全に緩和しない。さらに、ＡＴＲＡは、保存時に、光異性化および分解を受けやすいので、単回投与で投与される活性化合物の量を正確に予測することは困難である。安定したレチノイド化合物を合成することによって、ＡＴＲＡに付随する問題を克服する努力がなされてきた。ＡＴＲＡは、その共役リンカー基のために、光異性化を受けやすいと一般に考えられている。

国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ２００７／００３２３７（ＷＯ２００８／０２５９６５）は、良好な安定性を示し、細胞分化を誘導した新規レチノイド化合物を開示した。

特に、関心のある１つの化合物は、レインナベート（Ｒｅｉｎｎｅｒｖａｔｅ）として市販されている、ＥＣ２３^(R)であった。

ＥＣ２３^(R)は、一般的に、光に曝露された場合に、良好な安定性を示すだけでなく、貯蔵時にも、良好な安定性を示す。ＥＣ２３^(R)は、また、代謝分解されやすくないと判明したため、ヒトまたは動物の体内で、比較的に、長い付随した半減期を有することができる。しかし、ＥＣ２３^(R)は、非常に弱い蛍光性であり、そして、生物学的サンプルに損傷を与える可能性のあるＵＶ励起を必要とする。

蛍光イメージングは、特に、生物学的文脈において、細胞事象が観察される、生きた細胞において、生物学的プロセスを研究するための強力なツールに、急速になった。単一分子視覚化技術の開発は、そのような用途のための蛍光顕微鏡の有用性を大幅に高め、それらの内在性環境における、タンパク質および小分子の追跡を可能にした。

蛍光は、光、または、他の電磁放射線を吸収した物質が、電気的に励起された状態から、光を放出する、ルミネセンスの形態である。蛍光では、放出される光は、通常、吸収された光よりも、より長い波長（およびより低いエネルギー）である。この現象は、ストークス シフトとして知られており、そして、吸収された光子が放出される前に、第一励起状態の最低エネルギーレベル（Ｓ１）に、通常は、振動緩和を介する、エネルギーの損失に起因する。量子収率は、蛍光過程の効率を与える：それは、放出された光子の数の、吸収された光子の数に対する比率（最大値＝１、すなわち、すべての吸収された光子は、光子の放射を齎す）として定義される。蛍光減衰は、一般に、指数関数的であり、そして、蛍光寿命は、基底状態に戻る緩和を受ける前に、励起状態にある分子の半減期の測定を指す。燐光においては、より長い励起状態の寿命が観察され、次いで、励起三重項状態からの放射性崩壊（すなわち、光子放出）が観察される。

ドキソルビシンは、白血病、ホジキンリンパ腫、膀胱癌、乳癌、胃癌、肺癌、卵巣癌および甲状腺癌を含む、広範囲の癌の治療に使用される化学療法薬である。その分子の両親媒性および両性の性質は、薬物が細胞膜およびタンパク質の両方に結合できることを意味する。

化合物の固有の蛍光のために、ドキソルビシンは、また、蛍光イメージングの分野で一般的な研究ツールとなり、したがって、その分布は、様々な細胞および組織において視覚化された。ドキソルビシンの蛍光強度は、その濃度および微小環境に依存することが判明しているので、卵巣癌であるＡ２７８０細胞における薬剤の細胞内取り込みおよび輸送は、ＤＮＡ、ヒストン、リン脂質などの細胞成分とのその相互作用を考慮することによって特徴付けることができた。

現在、ドキソルビシンは、顕著な生物学的活性とともに、内因性蛍光発光を有する唯一の既知の低分子である。したがって、幹細胞発生の低分子モジュレーターに蛍光を組み込むことができれば、それ自体が強力なプローブとなり、そして、蛍光色素、タンパク質、量子ドット（ｑｕａｎｔｕｍ ｄｏｔｓ）の使用の必要性を否定するだろう。特に、生細胞追跡技術の使用は、細胞の取込みおよび局在化に関する貴重な情報を提供し、それによって、レチノイド活性および代謝に関する新しい洞察を提供する。さらに、それは、もはや、興味のある分子に大きい蛍光体を付する必要がないであろうから、後者は、その自然環境の生理学的な文脈で、続いて行ってもよい。さらに、有用な蛍光特性を有し得る不活性蛍光プローブを、生成することも有利であり得る。

したがって、改良された蛍光のイメージング（ｉｍａｇｉｎｇ）のため、良好な貯蔵安定性を示し、体内において、比較的長い半減期を有する、代謝分解を受け難い、新規なフルオロフォアが必要とされている。従って、本発明の目的は、安定な蛍光レチノイドを提供することである。

［発明の概要］
本発明は、高度に共役構造を提供するために、電子供与性の窒素を有する、新規な分子システムの調製により、ＥＣ２３^(R)型分子の蛍光バージョンを提供する。

したがって、本発明の第１の態様によれば、式Ｉの化合物が提供される。
式中、
Ｒ^１は、水素、Ｃ１−１０のアルキルまたはアシルを示し；
Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素またはＣ１−４アルキルであるか、または、一緒になって、Ｒ^２およびＲ^４、または、Ｒ^３およびＲ^５の一対で、単結合を示し；
Ｒ^６とＲ^７は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素、Ｃ１−４アルキルまたは、一対になって、Ｒ^４およびＲ^６、または、Ｒ^５およびＲ^７の一対で、単結合を示し、または、Ｒ^６およびＲ^７が、一緒になって、以下の基を示す：
＝ＣＲ^１１Ｒ^１２；
ただし、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５からの一対が、単結合を示す場合、Ｒ^４およびＲ^６または、Ｒ^５およびＲ^７の一対は、単結合を示さない。
Ｒ^８およびＲ^９は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素、Ｃ１−１０アルキル、アリール、アラルキル、ハロゲン、トリフルオロアルキル、シアノ、ニトロ、−ＮＲ^a Ｒ^b、−ＯＲ^a、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^a、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^a、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^a、−Ｓ（Ｏ）Ｒ^aＲ^b、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^aＲ^bを示す。
Ｒ^１１およびＲ^１２は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素またはＣ１−１０アルキルを示し、そして、
Ｒ^aおよびＲ^bは、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素またはＣ１−１０アルキルを示し；
Ｒ^１０は、基ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸまたはＸＩを示す：

式中、
Ｒ^１３は、水素またはＣ１−１０アルキルを示す；
およびこれらの異性体；
フリー体または塩。

本明細書で使用される「アルキル」という用語は、完全飽和、分枝、非分枝または環状炭化水素部分、すなわち、第一級、第二級または第三級アルキル、または、場合により、シクロアルキルまたはシクロアルキルで置換されたアルキルを意味し、それらはまた、飽和でも、不飽和のアルキルでもよい。特に断らない限り、好ましくは、アルキルは、１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜７個の炭素原子、または１〜４個の炭素原子を含む。アルキルの代表例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、オクチル、ｎ−ノニル、n-デシル等が挙げられ、これらに限定されない。

本明細書で使用される用語「アリール」は、水素と炭素のみからなり、６〜１９個の炭素原子、好ましくは６〜１０個の炭素原子を含有する、芳香族単環式または多環式炭化水素環系を指し、環系は部分的に飽和していてもよい。アリール基としては、フルオレニル、フェニル、インデニルおよびナフチルのような基が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書中で特に明記しない限り、用語「アリール」または接頭辞「ａｒ−」（「アラルキル」などの）は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、アミジン、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルからなる群から選択される１以上の置換基によって置換されていてもよいアリールラジカルを含むものを意味する。好ましいアリール基は、必要に応じて置換されたフェニルまたはナフチル基である。

アリール基は、単環式、二環式、三環式または多環式、好ましくは一、二または三環式、より好ましくは単環式または二環式であってもよい。

本明細書で定義される、本発明の１つの態様において、Ｒ^１０は、基ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶである。
本発明の一つの局面では、Ｒ^１は、Ｃ１−１０アルキル、好ましくは、Ｃ１−３アルキルである。

本発明の一の態様では、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、それぞれ水素である。

本発明の一の態様では、Ｒ^２およびＲ^４または、Ｒ^３およびＲ^５の一対は単結合を表す。

本発明の一つの態様で、Ｒ^６およびＲ^７は、同一または異なって、Ｒ^６およびＲ^７は、それぞれ、Ｃ１−４アルキル、例えばメチルを表す。

本明細書で使用する「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを指す。

本明細書で定義される本発明の別の態様において、Ｒ^１０は、基ＩＩである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＩＩＩである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＩＶである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基Ｖである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＶＩである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＶＩＩである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＶＩＩＩである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＩＸである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基Ｘである。

本明細書で定義される本発明の別の態様では、Ｒ^１０は、基ＸＩである。

−ＣＯ_２Ｒ^１３部分は、好ましくは、４位であり、すなわち、エチニル基に対してパラ位にあり、好ましくは、Ｒ^１３は、水素である。

挙げることのできる、式Ｉの特定の化合物は、以下からなる群から選択されるものを含む。
４−２−［４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（９）；および、
６−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−ナフタレン−２−カルボン酸 メチルエステル（１１）；
３−［４−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−フェニル］−アクリル酸 メチルエステル（１３）；および、
４−２−［２，４，４−トリメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，４−ジヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（１７）；
および、その異性体；
フリー体または塩。

ＡＴＲＡのようなレチノイド化合物は、貯蔵時に不安定である。特に、このような化合物は、３００から４００ｎｍ領域の光に暴露されると、光異性化および分解を受けやすい。驚くべきことに、本発明の式Ｉの化合物は、光に暴露されても安定であり、ＡＴＲＡよりはるかに少ない光異性化および分解を受ける。一般に、式１の化合物は、ＡＴＲＡのようなレチノイドよりはるかに優れた安定性を有し、特に、式１の化合物は、光異性化の影響をはるかに受けにくい。一般的に、３日間、３００から４００ｎｍの波長を有する光への曝露後、本発明の化合物は、はるかに少ない異性化および分解を受ける。典型的には、３日間、３００から４００ｎｍの波長の光への曝露後、本発明の化合物の少なくとも６０重量％（ＡＴＲＡの４０重量％未満と比較して）が残存した。

典型的には、本発明の化合物は、ヒト神経幹細胞から神経サブタイプへのような、幹細胞の分化を誘導する。一般に、本発明の化合物は、ＡＴＲＡのような既知のレチノイドと同程度またはそれ以上の程度で、細胞の分化を誘導する。

幹細胞、例えば、ヒト胎児脳組織の腹側中脳から誘導された細胞、を含むサンプルを、本発明の化合物で補充された培地に曝露した後、神経マーカーを発現する分化細胞の数を実質的に増加させることができる。典型的には、サンプルは、このような培地に約７日間曝露され得る。

本発明による好ましい使用では、幹細胞の、少なくとも１つの分化した細胞型への分化において、本明細書で定義される化合物または組成物の使用が提供される。

幹細胞は、典型的には、ヒトまたは動物の全能性幹細胞（ｔｏｔｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）、特に、例えば、哺乳動物の全能性細胞（ｔｏｔｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）のような非ヒト全能性幹細胞（ｔｏｔｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）であり得る。

あるいは、幹細胞は、ヒトまたは動物の多能性幹細胞（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）、好ましくは、ヒト多能性幹細胞（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）であってもよい。

本発明の別の好ましい実施形態において、前記幹細胞は、ヒトまたは動物の多分化能性幹細胞（ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）である。

本発明の好ましい実施形態において、前記多分化能幹細胞は、造血幹細胞、神経幹細胞、骨幹細胞、筋幹細胞、間葉系幹細胞、皮膚幹細胞（例えば、皮膚、胃腸粘膜、腎臓、膀胱、乳腺、子宮、前立腺および、脳下垂体（ｐｉｔｕｉｔａｒｙ）のような内分泌腺などの臓器から誘導される）、外胚葉性幹細胞（ｅｃｔｏｄｅｒｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）、中胚葉性幹細胞（ｍｅｓｏｄｅｒｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）または内胚葉性幹細胞（ｅｎｄｏｄｅｒｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ）（例えば、肝臓、膵臓、肺および血管のような臓器に由来する）からなる群から選択される。

本発明のさらなる態様によれば、幹細胞の分化を誘導する方法を提供するものであって、
（ｉ）前記幹細胞を維持するのに適した、細胞培養培地中に、幹細胞の調製物を形成する工程であって、前記培養培地が、式Ｉの化合物を含む工程；そして
（ｉｉ）前記幹細胞を、少なくとも１つの分化した細胞型に分化させることを可能にする条件下で、培養することを含む方法、からなる。

本発明の好ましい方法において、前記幹細胞は、多分化能性または多能性幹細胞である。一実施形態によれば、幹細胞は全能性幹細胞ではない。好ましくは、前記幹細胞は、ヒト起源である。

本発明の好ましい方法において、前記分化した細胞は、ケラチノサイト、線維芽細胞（例えば、真皮、角膜、腸粘膜、口腔粘膜、膀胱、尿道、前立腺、肝臓）、上皮細胞（例えば、真皮、角膜、腸粘膜、口腔粘膜、膀胱、尿道、前立腺、肝臓）、神経膠細胞または神経細胞、肝細胞、間充織細胞、筋細胞（心筋細胞または筋管細胞）、腎臓細胞、血液細胞（例えば、ＣＤ４＋リンパ球、ＣＤ８＋リンパ球）、膵臓細胞、または内皮細胞からなる群から選択される。

一般的に、培地は、本発明の化合物の０．１乃至２０μΜの濃度を有し；典型的には、約１０μＭである。

本発明の好ましい方法において、この方法は、可視光および／またはＵＶ光、５０℃を超えない温度、および／または、例えば、空気またはＤＭＳＯのような、酸化試薬の存在下に行われる。本発明の方法は、ｅｘ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで行うことができる。

本発明の化合物は、良好な安定性を示し、そして、細胞分化および細胞アポトーシスを制御するために使用することができる。

したがって、本発明のさらなる態様によれば、レチノイド治療から利益を得る疾患または状態の治療または予防における、式Ｉの化合物の使用が提供される。

式Ｉの化合物は、良好な安定性を示し、そして、ＡＴＲＡよりもはるかに光異性化を受けにくく、一方、ＡＴＲＡと同程度またはそれ以上の程度で、細胞分化およびアポトーシスを制御する。

本発明のさらなる態様によれば、細胞分化またはアポトーシスの制御に使用するための、式Ｉの化合物が提供される。

疾患または状態は、典型的には、細胞分化またはアポトーシスの制御から利益を得る。

レチノイド治療から利益を得ることができる、疾患または状態には、癌（例えば、神経新生物）、ざ瘡、皮膚創傷（火傷、ＵＶ損傷、老化皮膚など）などの皮膚疾患が含まれる。

本発明の化合物は、正常および腫瘍細胞における、分化およびアポトーシスを制御する、それらの能力のために、化学療法剤または化学予防剤として作用し得る。特に、本発明の化合物は、皮膚、口腔、喉頭、肺、膀胱、外陰部、乳房、消化管のものを含む、前癌性または癌性状態の、治療または予防に特によく適している。本発明の化合物は、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌（頭頸部、膀胱腫瘍のものを含む）の治療または予防に使用することができる。本発明の化合物の使用による、治療または予防に、特に、適した癌には、骨髄性白血病などの白血病、特に、急性前骨髄球性白血病が含まれる。

なお、本発明の化合物は、インビトロでの細胞の形質転換を抑制し、そして、発癌を阻害すると考えられている。したがって、本発明の化合物は、腫瘍促進および／または腫瘍発生に対する抑制効果を示すと考えられる。化学療法剤として使用する場合、本発明の化合物は、一般に、明らかな悪性腫瘍の臨床的結果を低減または回避して、発癌性段階を停止または逆行させる。

なお、本発明の化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏにおいて、増殖、分化、および、正常、前悪性、および悪性細胞のアポトーシスを調節するそれらの能力に起因して、化学療法および／または化学予防の特性を示すと考えられている。

本発明のさらなる態様によれば、細胞増殖、例えば、皮膚または神経細胞増殖の促進における、本発明の化合物の使用が提供される。

本発明のさらなる態様によれば、組織の健康および発達を促進するため、特に、ヒトまたは動物の体の、皮膚、骨、神経、歯、毛および／または粘膜の健康および発達の促進において、本発明の化合物の使用が提供される。本発明の化合物は、老化の徴候（特に、しわおよび老人斑）、ざ瘡のような皮膚状態（特に、重度および／または難治性ざ瘡）、乾癬、ストレッチ マーク、毛孔性角化症、気腫、脱毛症などの予防または治療に使用することができる。

本発明のさらなる態様によれば、本発明の化合物は、眼の疾患または状態の治療または予防に使用され得るか、または視力を維持または最大化するために使用され得る。

本発明のさらなる態様によれば、本発明の化合物は、抗酸化剤として、特に、ヒトまたは動物の体内または体表での使用のための使用することができる。

ヒトまたは動物の体に投与される、本発明の化合物の投与量は、意図する用途に依存する。例えば、局所適用に適した製剤は、一般に、本発明の化合物０．０２５乃至１重量％、特に、０．０２５乃至０．１重量％を含む。化学療法用途のために、２０乃至８０ミリグラム／ｍ^２／日の用量が通常で、好適には、４０乃至５０ミリグラム／ｍ^２／日であり、より好適には、約４５ミリグラム／ｍ^２／日である。

本明細書に記載のように、本発明の化合物は、本質的に蛍光性である。

したがって、本発明のさらなる態様によれば、本明細書に記載の式Ｉの化合物を含むプローブが提供される。

本発明は、さらに、有効量の式Ｉの化合物を投与し、蛍光医学イメージングによって、式Ｉの化合物によって放出される蛍光を検出することを含む、細胞分化またはアポトーシスをモニタリングする方法を提供する。

本発明は、また、蛍光寿命マッピング顕微鏡法（ＦＬＩＭ）を含むが、これに限定されるものではない、技術を使用して、化合物によって放出される蛍光を検出することにより、式Ｉの化合物の分布を画像化することによって、細胞の分化またはアポトーシスをモニターする方法を提供する。

別の局面において、本発明は、また、コヒーレント アンチ−ストークス ラマン散乱（ＣＡＲＳ）および励起されたラマン散乱（ＳＲＳ）を含むが、これに限定されるものではない、技術を使用して、励起されたラマン散乱信号を検出することにより、式Ｉの化合物の分布を画像化することによって、細胞の分化またはアポトーシスをモニターする方法を提供する。

本発明は、また、ｅｘ ｖｉｖｏで、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで、式Ｉの化合物の濃度マップの作製を可能にする、ラマン散乱信号の多変量曲線解像度（ＭＣＲ）と最小二乗分析を含むが、これに限定されるものではない、技術を使用して、式Ｉの化合物の、細胞内または細胞外の、濃度と分布をモニターする方法を提供する。

また、本発明は、式Ｉの化合物が発する蛍光を、式Ｉの化合物から励起された、ラマン散乱信号と、重ね合わせる（ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｉｎｇ）方法を提供する。この放出される蛍光を重ね合わせる（ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｉｎｇ）方法は、本明細書に記載された、細胞分化またはアポトーシスをモニターする方法において有用である。

式Ｉの化合物は、また、化合物が異なる細胞タイプに対して選択的に使用され得ること、すなわち、可視、蛍光および／またはラマンイメージングが、本発明の合成分子に、より応答性のある細胞型を同定するために使用され得るという点で、有意性がある。これは、セル識別方法を提供することができる。本発明の化合物の蛍光寿命を観察することは、局所環境および潜在的に、化合物の進行する作用に関する情報を提供することができる。また、本発明の蛍光性化合物で処理された細胞は、次いで、他の分子を用いて処理することができ、例えば、蛍光化合物を、「強制（displace）」して、とりわけ、薬物スクリーニングのために有用であり得る、相対的親和性の尺度を与えることができる。したがって、本発明の蛍光化合物は、他の適切に知られている化合物と組み合わせて、使用することができる。

本発明のさらなる態様によれば、１種以上の本発明の化合物を、１種以上の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて含む組成物が提供される。

本発明の組成物は、また、１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、アジュバントまたは希釈剤を含む。「薬学的に許容される」という句は、健全な医学的判断の範囲内で、または合理的な利益／リスク比に見合う、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題または合併症のない、ヒト、または、場合によっては、動物の組織と接触して使用するのに適した化合物、材料、組成物および／または剤形を指すために、本明細書において、用いられる。

本発明の組成物が、経口投与のために調製される場合、上記の化合物は、薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と一般に組み合わされて、医薬製剤または単位剤形を形成する。

経口投与の場合、組成物は、粉末、顆粒形成物、溶液、懸濁液、エマルジョンの形態であってもよく、またはチューインガムからの活性成分の摂取のための、天然または合成ポリマーまたは樹脂であってもよい。組成物は、また、ボーラス（ｂｏｌｕｓ）、口内速溶（ｅｌｅｃｔｕａｒｙ）またはペースト（ｐａｓｔｅ）として提供されてもよい。本発明の経口投与組成物は、また、持続的放出のために製剤化することもでき、例えば、上記の化合物は、コーティング、マイクロカプセル化、または持続送達装置内に他の方法で配置することができる。そのような製剤中において、全有効成分は、製剤の０．１乃至９９．９重量％を含む。

したがって、本発明の化合物を含む、１つ以上の適切な単位剤形は、経口、非経口（皮下、静脈内、筋肉内および腹腔内を含む）、直腸、経皮（ｄｅｒｍａｌ）、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）、胸腔内、肺内、粘膜、眼内および鼻腔内（呼吸器系）を含む、様々な経路によって投与することができる。組成物は、また、脂質製剤として、または、例えば、マイクロカプセル化を用いた持続放出のために、製剤化されてもよい。製剤は、適切な場合、好ましくは、別個の単位剤形で提供されてもよく、そして、薬学分野で周知の方法のいずれかによって調製することができる。このような方法は、治療剤を、液体担体、固体マトリックス、半固体担体、微細固体担体またはそれらの組み合わせと混合し、次いで、必要に応じて、所望の送達系に製品を導入または成形する工程を含み得る。

本発明の化合物を含む医薬製剤は、周知で容易に入手可能な成分を用いて、当該分野で公知の手順によって調製することができる。例えば、化合物は、一般的な賦形剤、希釈剤または担体を用いて製剤化し、そして、錠剤、カプセル、溶液、懸濁液、粉末、エアロゾルなどに形成することができる。そのような製剤に適した賦形剤、希釈剤および担体の例には、緩衝剤だけではなく、例えば、デンプン、セルロース、糖類、マンニトールおよびケイ酸誘導体のような充填剤および増量剤、が含まれる。

カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、およびポリビニルピロリドンのような結合剤を、また、含むこともできる。保湿剤、例えば、グリセロール、例えば、炭酸カルシウムおよび重炭酸ナトリウムのような崩壊剤を含めることができる。例えば、パラフィンのような溶解を遅延させるための薬剤も、また、含有させることができる。第４級アンモニウム化合物のような吸収促進剤も、また、含めることができる。セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなどの界面活性剤を含めることができる。カオリンおよびベントナイトのような吸着性担体を添加することができる。滑石、例えばタルク、ステアリン酸カルシウムおよびマグネシウム、および固体のポリエチルグリコールのような滑沢剤も、また、含まれ得る。防腐剤を添加することもできる。本発明の組成物は、例えば、セルロースおよび／またはセルロース誘導体のような増粘剤も含有することができる。これらは、また、キサンタン、グアーまたはカルボガムまたはアラビアゴムなどのガム、あるいは、代わりに、ポリエチレングリコール、ベントンおよびモンモリロナイトなどを含み得る。

例えば、本発明の化合物を含有する錠剤またはカプレットは、炭酸カルシウム、酸化マグネシウムおよび炭酸マグネシウムのような緩衝剤を含むことができる。適当な緩衝剤は、また、酢酸の塩、クエン酸の塩、ホウ酸の塩およびリン酸の塩を含み得る。カプレットおよび錠剤は、また、セルロース、アルファ化デンプン（ｐｒｅｇｅｌａｔｉｎｉｓｅｄ ｓｔａｒｃｈ）、二酸化ケイ素、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、微晶質セルロース、デンプン、タルク、二酸化チタン、安息香酸、クエン酸、トウモロコシデンプン、鉱油、ポリプロピレングリコール、リン酸ナトリウム、ステアリン酸亜鉛などの不活性成分を含有できる。本発明の少なくとも１つの化合物を含有する、硬質または軟質ゼラチンカプセルは、ゼラチン、微結晶性セルロース、ラウリル硫酸ナトリウム、デンプン、タルク、および二酸化チタンなどの不活性成分、ならびに、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）および植物油のような液体ビヒクルを含むことができる。さらに、本発明の１つ以上の化合物を含有する腸溶性コーティングされたカプレットまたは錠剤は、胃における崩壊に抵抗し、十二指腸のより中性からアルカリ性の環境で溶解するように設計されている。

本発明の治療化合物は、また、便利な経口投与のためのエリキシル剤または溶液として、または、例えば、筋肉内、皮下、腹腔内または静脈内経路による非経口投与に適した溶液として製剤化することもできる。本発明の治療用化合物の医薬製剤は、また、水性または無水の溶液または分散液の形態、またはエマルジョンもしくは懸濁液もしくは軟膏の形態を取ることができる。

したがって、治療化合物は、非経口投与のために製剤化され得（例えば、ボーラス注射または連続注入などの注射による）、そして、アンプル、予備充填注射器、小容量注入容器または複数回投与の、単位用量形態で提供され得る。上記のように、剤形の貯蔵寿命を維持するのを助けるために、防腐剤を添加することができる。活性化合物および他の成分は、懸濁液、溶液または、油性または水性ビヒクルによる乳濁液を形成してもよく、そして、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤のような、製剤用試薬を含有してもよい。あるいは、活性化合物および他の成分は、粉末形態であってもよく、無菌固体の無菌単離によって、または使用前に、適切なビヒクル（例えば、無菌の発熱物質を含まない水）を用いて構成するための溶液からの凍結乾燥によって得られる。

酸化防止剤、界面活性剤、他の防腐剤、フィルム形成性、角質溶解性またはコメドリック性の薬剤（ｋｅｒａｔｏｌｙｔｉｃ ｏｒ ｃｏｍｅｄｏｌｙｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ）、香料（ｐｅｒｆｕｍｅｓ）、香料（ｆｌａｖｏｕｒｉｎｇｓ）および着色料から選択される補助剤を、必要に応じて、添加することが可能である。例えば、ｔ−ブチルヒドロキノン、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエンおよびα−トコフェロールおよびその誘導体などの抗酸化剤を添加することができる。

これらの製剤は、当技術分野において周知である、薬学的に許容される担体、ビヒクルおよび補助剤を含むことができる。

例えば、生理学的観点から許容され、水に加えて、アセトン、酢酸、エタノール、イソプロピルアルコール、ジメチルスルホキシド、「Ｄｏｗａｎｏｌ^(R)」の名称で販売されている製品のようなグリコールエーテル、ポリグリコールおよびポリエチレングリコール、短鎖酸のＣ１〜Ｃ４アルキルエステル、乳酸エチルまたはイソプロピル、「ミグリオール^(R)」の名称で販売されている製品のような脂肪酸トリグリセリド、ミリスチン酸イソプロピル、動物、鉱物および植物の油およびポリシロキサンのような、溶媒から選択された、一つ以上の有機溶媒を使用して、溶液を調製することが可能である。

好ましくは、組成物は、上記の１つ以上の化合物を含む溶媒または希釈剤の形態である。溶媒または希釈剤は、酸の溶液、ジメチルスルホン、Ｎ−（２−メルカプトプロピオニル）グリシン、２−ｎ−ノニル］、３−ジオキソランおよびエチルアルコールを含むことができる。好ましくは、溶媒／希釈剤は、酸性溶媒、例えば、酢酸、クエン酸、ホウ酸、乳酸、プロピオン酸、リン酸、安息香酸、酪酸、リンゴ酸、マロン酸、シュウ酸、コハク酸または酒石酸である。

本発明の医薬製剤は、任意成分として、薬学的に許容される担体、希釈剤、可溶化剤または乳化剤、および当該技術分野で利用可能なタイプの塩を含むことができる。そのような物質の例は、生理学的に緩衝された食塩溶液および水などの通常の生理食塩溶液を含む。本発明の医薬製剤において有用である、担体および／または希釈剤の、特定の非限定的な例としては、水および、リン酸緩衝生理食塩水溶液のｐＨが７．０−８．０のような、生理学的に許容される緩衝食塩溶液を含む。

溶媒は、酢酸溶液を含むことができる。溶媒は、例えば、酢酸溶液、例えば、酢酸の１％、０．５％、０．２５％、０．１％、０．０５％または０．０１％ｗ／ｗ未満の酸の濃度で組成物中に存在してもよい。

本発明の組成物は、１つまたは複数の追加の治療薬を含んでいてもよい。例えば、本発明の組成物が、癌の治療または予防において、有用である場合、１つ以上の追加の化学療法剤およびまたは化学予防剤が含まれていてもよい。組成物が、スキンケアに有益である場合、１つまたは複数の保湿または抗菌剤のような、１つ以上の追加のスキンケア剤を、使用することができる。

また、本発明の化合物は、持続放出剤形などの製剤によく適している。製剤は、それらが、おそらくある期間にわたって、例えば、腸管または気道の特定の部分で、活性化合物を放出するように構成することができる。コーティング、エンベロープ、および保護マトリックスは、例えば、ポリ乳酸 ポリグリコール酸（ｐｏｌｙｌａｃｔｉｄｅ−ｇｌｙｃｏｌａｔｅｓ）、リポソーム、マイクロエマルジョン、微小粒子、ナノ粒子、またはワックスなどのポリマー物質から、製造することができる。これらのコーティング、エンベロープ、および保護マトリックスは、例えば、ステント、カテーテル、腹膜透析チューブ（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｄｉａｌｙｓｉｓ ｔｕｂｉｎｇ）、排出装置等の、コート留置デバイス（ｉｎｄｗｅｌｌｉｎｇ ｄｅｖｉｃｅｓ）に有用である。

局所投与の場合、活性成分は、標的領域への直接適用のために、当該技術分野で知られているように製剤化することができる。主として、局所適用のために調整された形態は、例えば、クリーム、乳液、ゲル、粉末、分散液またはマイクロエマルジョン、多かれ少なかれ増粘されたローション、含浸パッド、軟膏またはスティック、エアロゾル製剤（例えば、スプレーまたは泡）、石鹸、洗剤、ローションまたは石鹸のケーキの形態をとる。この目的のための他の従来の他の形態は、創傷包帯、コーティングされた包帯または他のポリマー被覆、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゼリー、スプレー、およびエアロゾルが挙げられる。従って、本発明の治療用化合物は、経皮投与用のパッチまたは包帯を介して送達することができる。あるいは、治療用化合物は、例えば、ポリアクリレートまたはアクリレート／酢酸ビニル共重合体などの、接着性ポリマーの一部であるように製剤化することができる。長期的な適用の場合には、微多孔性および／または通気性バッキングラミネート（ｂａｃｋｉｎｇ ｌａｍｉｎａｔｅｓ）を使用することが望ましいかもしれず、その場合、皮膚の水和または浸軟を最小限に抑えることができる。バッキング層（ｂａｃｋｉｎｇ ｌａｙｅｒは、所望の保護および支持機能を提供する、任意の適切な厚さとすることができる。適切な厚さは、一般に、約１０から約２００μｍである。

局所投与のための医薬製剤は、処置されるべき適応症または疾患に特異的な、一つ以上の本発明の化合物を、例えば、０．１ミリグラム／ミリリットル乃至１０ミリグラム／ミリリットルの間のような、約０．００１ミリグラム／ミリリットルから約１００ミリグラム／ミリリットルの間、で含有する、例えば、生理学的に許容される緩衝性生理食塩水を含んでいてもよい。

軟膏およびクリームは、例えば、適切な増粘剤および／またはゲル化剤を添加して、水性または油性基剤を用いて製剤化することができる。ローションは、水性または油性基剤を用いて製剤化することができ、一般に、１種以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、または着色剤も、また、含有するであろう。活性化合物は、また、イオン導入（ｉｏｎｔｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）を介しても送達することができる。局所製剤中の本発明の治療剤の重量パーセントは、種々の要因に依存するが、一般に、製剤の総重量の０．０１重量％から、９５％、および、典型的には、０．１から８５重量パーセントである。

点眼薬または点鼻薬のような滴剤は、また、一つ以上の、分散剤、可溶化剤または懸濁剤をも含む、水性または非水性基剤中に、治療化合物の一つ以上を用いて製剤化することができる。液体スプレーは、ポンピングすることができ、または、加圧パックから、便利に送達される。滴剤は、キャップされたボトルの単純な点眼器を介して、液体内容物を、１滴１滴、送達するように適合されたプラスチックボトルを介して、または特殊な形状の閉鎖物（ｃｌｏｓｕｒｅ）を介して送達することができる。

治療用化合物は、さらに、口または咽喉での局所投与用に製剤することができる。例えば、活性成分はさらに、風味付けした基剤、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカントを含むキャンディー（ｌｏｚｅｎｇｅ）として；例えばゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤中に組成物を含むトローチ（ｐａｓｔｉｌｌｅｓ）として；そして、適切な液体担体中に本発明の組成物を含む漱口剤として、製剤化することができる。

本発明の化合物は、また、気道に投与することができる。したがって、本発明は、また、本発明の方法における使用のための、エアロゾルの医薬製剤および剤形を提供する。一般に、このような剤形は、特定の感染、徴候、または疾患の臨床症状を治療または予防するのに有効な、本発明の少なくとも一つの薬剤の量を含む。本発明の方法に従って治療されている感染症、徴候、または疾患の１つ以上の症状の、いずれかの統計的に有意な減衰が、本発明の範囲内において、そのような感染、徴候、または疾患の治療であると考えらる。

あるいは、吸入または吹入（ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ ｏｒ ｉｎｓｕｆｆｌａｔｉｏｎ）による投与のために、組成物は、例えば、治療剤およびラクトースまたはデンプンなどの適切な粉末基剤の粉末混合物である、乾燥粉末の形態をとることができる。粉末組成物は、例えば、カプセルまたはカートリッジ、または、インヘラー、吹入（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）、または定量吸入器を補助で用いて、粉末を投与することができる、例えば、ゼラチンまたはブリスターパックの単位投与剤型で提供することができる。

エアロゾルまたは吸入形態で投与される場合、本発明の化合物はまた、水溶液で投与することができる。したがって、他のエアロゾル医薬製剤は、例えば、治療すべき適応症または疾患に特異的な、１つまたは複数の本発明の化合物の、約０．００１ミリグラム／ミリリットルおよび約１００ミリグラム／ミリリットルの間で含有する、生理学的に許容される緩衝生理食塩水を含んでいてもよい。液体に溶解または懸濁されない上述の化合物の微細に分割された固体粒子の形態の、乾燥エアロゾルも、また、本発明の実施において有用である。本発明の化合物は、散布剤（ｄｕｓｔｉｎｇ ｐｏｗｄｅｒｓ）として製剤化することができ、そして、約１と５μｍの間、または２と３ミクロンの間の平均粒子サイズを有する、微細分割粒子を含む。微細に分割された粒子は、当技術分野で周知の技術を用いて、粉砕し、スクリーン濾過することによって調製することができる。粒子は、粉末の形態であることができる、微細な分割材料の所定の量を吸入することによって投与することができる。

必要な有効量は、複数回の投与単位の投与により到達することができるので、各剤形の個々のエアゾール用量に含まれる活性成分または成分の単位含有量は、それ自体、特定の感染、徴候、または疾患を治療するために有効な量を含む必要はないことが理解されるであろう。また、有効量は、個々に、または、一連の投与のいずれかで、剤形中の用量よりも少ない使用により達成することができる。

吸入による、上部（鼻）または下気道への投与のために、本発明の治療用化合物は、好ましくは、噴霧器または加圧パックまたはエアロゾルスプレーを送達する他の便利な手段から送達される。加圧パックは、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切なガスなどの適切な噴射剤を含んでもよい。加圧エアロゾルの場合、投薬単位は、計量された量を送達するためのバルブを提供することによって決定することができる。

また、活性成分は、例えば、一つ以上の鎮痛剤、抗炎症剤、抗ヒスタミン剤、気管支拡張剤、化学的保護剤、化学療法剤、抗菌剤等のような、他の治療剤と組み合わせても、使用することができる。

本発明のさらなる態様によれば、式ＸＩＩの化合物と、

式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ、本明細書に定義されているとおりであり；そして、
Ｚは脱離基であり、例えば、ハロゲン、擬ハロゲン、ボロン酸またはボロン酸エステルである。

式ＸＩＩＩの化合物とを、
Ｒ^１０Ｈ ＸＩＩＩ
式中、Ｒ^１０は、本明細書に定義されたとおりである。
を反応させることを含む、本明細書に記載の、式Ｉの化合物の製造方法が提供される。

代替的に、本明細書に記載の式Ｉの化合物の製造方法は、式ＸＶの化合物と
式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ、本明細書に定義されているとおりである。
式ＸＩＶの化合物：
Ｒ^１０Ｚ ＸＩＶ
式中、Ｚは、脱離基、例えば、ハロゲン、擬ハロゲンであり、ボロン酸またはボロン酸エステルである。
とを反応させることを含む。

Ｒ^１０が、水素である、式Ｉの化合物は、本明細書に記載されるように、Ｒ^１０が、アルキルである、式Ｉの化合物の脱アルキル化により調製することができる。

式Ｉ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩおよびＸＩＶの化合物は、当業者に公知の方法を用いて、または本明細書に記載される方法によって、調製することができる。このような調製の例は、概略的に示される。

ナフタレンエステル（化合物１１）およびアクリル酸エステル化合物（化合物１３）は、それぞれ、適当なアリール ボロネートと、適当なナフタレン部分（例えば、６−ブロモ−ナフタレン−２−カルボン酸 メチルエステル）、および適切な桂皮酸エステル（例えば、３−ブロモ−メチル シンナメート）とをカップリングさせることにより調製することができる。

アリール ボロネートは、Ｂ_２ｐｉｎ_２またはＢ_２ｎｅｏｐ_２のいずれかを用いて、５モル％のＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２触媒および、ＤＭＳＯ中の酢酸カリウム塩基の２当量の存在下に、ヨウ化物１４の、パラジウムで触媒されたボリル化により調製することができ、電子供与アミノ基に対して、パラ位の選択的官能化のための有効な方法を与え、アリールボロン酸１２および１０を良好な収率で製造できた。
１７のような、ジヒドロキノリン由来化合物は、アミド３の初期グリニャールメチル化、その後、薗頭カップリングおよび鹸化により、調製することができる。

本発明は、これから、下記の添付の図面のみを参照しながら、実施例として説明される。

図１は、種々の溶媒の、ＥＣ２３^(R)の正規化された励起スペクトルを示す。 図２は、種々の溶媒の、３００ｎｍで励起した、ＥＣ２３^(R)の正規化された、発光スペクトルを示す。 図３は、種々の溶剤の、実施例３の化合物９の正規化された、励起のスペクトルを示す。 図４は、２７５から３００ナノメートルの範囲内で励起された、種々の溶剤の、実施例３の化合物９の正規化された、発光スペクトルを示す。 図５は、クロロホルム中の、実施例６の化合物１７の正規化された、励起スペクトルを示す。 図６は、３７８ｎｍで励起した、クロロホルム中の、実施例６の化合物１７の正規化された発光スペクトルを示す。 図７は、光の非存在下で、周囲温度で保存した後の、実施例３の化合物９の^１Ｈ ＮＭＲのスペクトルを示す。 図８は、周囲温度で、７２時間、典型的な実験室光で処理した後の、実施例３の化合物９の^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを示す。 図８−１は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯ−ネスチン染色と比較した、実施例３の化合物９の幹細胞における活性を示す。 図８−２は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯ−ＣＫ８染色と比較した、実施例３の化合物９の幹細胞における活性を示す。 図８−３は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯ−ＴＵＪ−１染色と比較した、実施例３の化合物９の幹細胞における活性を示す。 図８−４は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯ−Oct 4染色と比較した、実施例３の化合物９の幹細胞における活性を示す。 図８−５は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯ−Sox 2 染色と比較した、実施例３の化合物９の幹細胞における活性を示す。 図９は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯと比較した、実施例３の化合物９のフローサイトメトリー評価（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ）を示し、幹細胞マーカーのＳＳＥＡ−３の発現が測定される。 図１０は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯと比較した、実施例３の化合物９のフローサイトメトリー評価（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ）を示し、幹細胞マーカーである、ＴＲＡ１６０の発現が測定される。 図１１は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯと比較した、実施例３の化合物９のフローサイトメトリー評価（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ）を示し、幹細胞マーカーである、Ａ２Ｂ５の発現が測定される。 図１１−１は、実施例３の化合物９、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯで処理された、細胞集団の位相差顕微鏡のイメージ（ｐｈａｓｅ ｃｏｎｔｒａｓｔ ｉｍａｇｅｓ）を示す。 図１２は、１mＭの処理濃度で、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯと比較した、実施例３の化合物９のＭＴＴ細胞生存分析を示す。 図１３は、１０mＭの処理濃度で、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)およびＤＭＳＯと比較した、実施例３の化合物９のＭＴＴ細胞生存分析を示す。 図１４は、濃度範囲にわたって、化合物９で処理されたＴＥＲＡ−２幹細胞の、７日後に共焦点顕微鏡を用いて画像化されたものを示す。 図１５は、実施例３の化合物９（１０mＭ）で処理し、そして、８時間後に共焦点顕微鏡を使用して撮像されたたＳＨＳＹ５Ｙ細胞（神経芽細胞腫）を示す。 図１６は、実施例３の化合物９（１０mＭ）で処理し、そして、２４時間後に共焦点顕微鏡を用いて撮像された、線維芽細胞を示す。 図１７は、実施例３の化合物９（１０mＭ）で、７日間、処理され、４％パラホルムアルデヒドで固定され、そして、共焦点顕微鏡を用いて画像化された、ＴＥＲＡ−２幹細胞を示す。 図１８は、実施例３の化合物９（１０mＭ）で、５日間、処理された、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。 図１９は、実施例３の化合物９（１０mＭ）で、５日間、処理され、そして、インボルクリンとＫ１４で染色された、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。 図２０は、実施例６の化合物１７（１０mＭ）で、５日間、処理された、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。 図２１は、実施例６の化合物１７（１０mＭ）で、５日間、処理され、そして、インボルクリンとＫ１４で染色された、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。 図２２は、実施例３の化合物９のラマンスペクトルを示す。高強度のアセチレンバンドが、２１９０センチメートル^−１で観察され、例えば、アミド結合のような、生物由来の信号が観察できない、細胞サイレント領域（１８００〜２８００センチメートル^−１）に存在する。

図で、ＤＣ２７１へのいかなる参照は、実施例３の化合物９への参照である。

以下の略語が、実施例および明細書の他の部分で使用される。
ＡＴＲＡ：全てトランスのレチノイン酸
Ｂ_２ｐｉｎ_２：ビス（ピナコラト）ジボロン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ｄｐｐｆ：１，１’−フェロセンジイル−ビス（ジフェニルホスフィン）
ＥＤＴＡ：エチレンジアミンテトラ酢酸
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＧＣＭＳ：ガスクロマトグラフィー−質量分析
ｈ：時間
ＫＯＡｃ：酢酸カリウム
ＲＴ：室温
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン

［一般的実験］
試薬は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ社、アルファ・エイサー社とＦｌｕｏｒｏｃｈｅｍ社から購入し、特に明記しない限り、さらに精製することなく使用した。溶媒は、供給されたまま使用され、そして、述べた場合、使用する前に、適切な乾燥剤で、乾燥した。反応は、ＴＬＣ、またはＮＭＲ分光法によって、in situでモニターした。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、メルク・ミリポア社のシリカゲル６０Ｇ Ｆ２５４ ２５ガラスプレートを用いて、ＵＶランプによって可視化して行われた。フラッシュカラムクロマトグラフィーを、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社のシリカゲル（２３０〜４００メッシュ、４０−６３ミクロン、６０Å）を用いて行い、およびＴＬＣを用いてモニターした。ＮＭＲスペクトルは、バリアンＶＮＭＲＳ−７００、バリアンＶＮＭＲＳ−６００、ブルカーアバンス−４００またはバリアン マーキュリー−４００分光計において、特に明記しない限り、周囲プローブ温度（ａｍｂｉｅｎｔ ｐｒｏｂｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）で操作して、記録した。ＮＭＲスペクトルは、Ｇｏｓｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入した、ＣＤＣｌ_３またはＤＭＳＯ−ｄ_６中で記録した。ＮＭＲピークは、シングレット（ｓ）、ダブレット（ｄ）、トリプレット（ｔ）、カルテット（ｑ）、ブロード（ｂｒ）、ヘプテット（ｈｅｐｔ）、それらの組み合わせ、または多重（ｍ）として、報告された。ＥＳ−ＭＳは、ＴＱＤ（ウォーターズＵＫ）質量分析計およびアクイティーＵＰＬＣ（ウォーターズ社、ＵＫ）を使用して、ダラム大学部門サービスによって実行され、そして、正確な質量測定は、ＱＴＯＦプレミア質量分析計およびアクイティーＵＰＬＣ（ウォーターズ株式会社、ＵＫ）を使用して得られた。ＧＣＭＳは、島津ＱＰ２０１０−ウルトラを使用して、ダラム大学部門のサービスによって実行された。ＩＲスペクトルは、パーキンエルマーＦＴ−ＩＲ分光計で記録した。融点は、Ｇａｌｌｅｎｋａｍｐ融点装置を使用して得た。元素分析は、エクセター分析ＣＥ−４４０アナライザーを使用して、ダラム大学部門のサービスによって得た。

［合成手順］

実施例１
６−ヨード−４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（４）
１（ａ）Ｎ−（４−ヨードフェニル）−３−メチルブタ−２−エナミド（１）
４−ヨードアニリン（２５．０グラム、１１４．０ミリモル）の、ＤＣＭ（４００ミリリットル）の溶液に、３，３−ジメチルアクロロイル クロリド（１３．３６ミリリットル、１２０．０ミリモル）を加え、得られた白色懸濁液を、０．５時間撹拌し、その後、ピリジン（９．７０ミリリットル、１２０ミリモル）を添加し、そして、溶液を、室温で、１６時間撹拌した。
溶液を、水でクエンチし、ＤＣＭで希釈し、飽和塩化アンモニウム、水および飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）して、そして、減圧留去して、粗淡褐色固体（３３グラム）を得た。
これを、エタノールから再結晶し、１を、白色結晶性固体として得た（３１．８グラム、９３％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（７００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１．９１（ｓ，３Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），５．６８（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｍ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．８ヘルツ，２Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
２０．２，２７．７，８７．２，１１８．５，１２１．８，１３８．０，１３８．２，１５４．５，１６５．２；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｖ_ｍａｘ／ｃｍ^-１ ３２９４ｍ，３０９４，２９６４ｗ，２８９０ｗ，１６６６ｍ，１５８６ｍ，１４３０ｍ，８２１ｓ，６５０ｍ；
ＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ＝３０２．０［Ｍ＋Ｈ］^＋；
ＨＲＭＳ（ＥＳ）計算値Ｃ_１１Ｈ_１３ＮＯＩとして、［Ｍ＋Ｈ］^＋：３０２．００４２，実測値３０２．００５０；実測値：Ｃ，４３．８７；Ｈ，４．０２；Ｎ４．６４．計算値Ｃ_１１Ｈ_１２ＮＯＩとして：Ｃ，４３．８８；Ｈ，４．０２；Ｎ４．６５％；
融点＝１３６−１３８℃。

１（ｂ）６−ヨード−４，４−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−２−オン（２）
ＡｌＣｌ_３（７．６６グラム、５７．５ミリモル）を、無水ＤＣＭ（１５０ミリリットル）に加え、そして、得られたスラリーを、０．５時間撹拌した。これに、１（１１．５グラム、３８．３ミリモル）を添加し、そして、その溶液を、室温で、２．５時間、激しく撹拌した。
反応を、水でゆっくりとクエンチし、ＤＣＭで希釈し、溶液がオフホワイトに変わるまで、５％ＮａＯＨで洗浄し、その後、さらに、水と飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、そして、減圧留去し、粗黄色固体を得た。
これを、エタノールから再結晶して、２を、白色結晶性固体として得た（１０．２グラム、８８％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（７００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１．３２（ｓ，６Ｈ），２．４７（ｓ，２Ｈ），６．６２（ｄ，Ｊ＝８．３ヘルツ，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．９ヘルツ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝１．８ヘルツ，１Ｈ），９．２０（ｓ，１Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
２７．７，３４．２，４５．２，８６．８，１１８．１，１３３．７，１３５．１，１３５．９，１３６．６，１７１．３；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｖ_ｍａｘ／ｃｍ^-１ ３１６４ｍ，３１０２，３０４０ｗ，２９５３ｍ，１６７１ｓ，１５９６ｍ，１４８４ｍ，８１７ｓ；
ＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ＝３０２．０［Ｍ＋Ｈ］^＋；
ＨＲＭＳ（ＥＳ）計算値Ｃ_１１Ｈ_１３ＮＯＩとして［Ｍ＋Ｈ］^＋：３０２．００４２，実測値３０２．００４２；計算値Ｃ，４３．９１；Ｈ，４．０２；Ｎ４．６３．計算値Ｃ_１１Ｈ_１２ＩＮＯとして：Ｃ，４３．８７；Ｈ，４．０２；Ｎ４．６５％；
融点＝１９９−２０２℃。

１（ｃ）６−ヨード−４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−２−オン（３）
２（７．０５グラム、２３．４ミリモル）の無水ＤＭＦ（２００ミリリットル）溶液に、ＫＯＨ（４．０８グラム、７０．２ミリモル）を粉砕して加え、そして、得られたスラリーを、５０℃で、１時間撹拌した。これに、２−ヨードプロパン（７．００ミリリットル、７０．２ミリモル）を添加し、そして、溶液を、５０℃で、４０時間、撹拌した。
反応を、水でクエンチし、酢酸エチルで希釈し、飽和塩化アンモニウム、水及び飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、そして、減圧下留去し、粗透明な油状物を得た（７．２グラム）。
これを、シリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して（溶離剤として、１％のトリエチルアミンを含む、ヘキサン：酢酸エチル＝９：１）、３を、無色の油として得た（３．９３グラム、４９％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（７００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１．２５（ｓ，６Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，２Ｈ），４．６６（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．０ヘルツ，１Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝８．６ヘルツ，１Ｈ），７．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．１ヘルツ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝２．１ヘルツ，１Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
２０．３，２６．８，３３．１，４７．２，４８．８，８６．９，１１８．９，１３３．４，１３５．７，１３８．９，１３９．１，１６９．５；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｖ_ｍａｘ／ｃｍ^-１ ２９６１ｍ，２９３４ｗ，２８７０ｗ，１６６７ｓ，１５８２ｍ，１４８２ｍ，８０９ｓ；
ＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ＝３４４．０［Ｍ＋Ｈ］^＋；
ＨＲＭＳ（ＥＳ）計算値Ｃ_１１Ｈ_１３ＮＯＩとして［Ｍ＋Ｈ］^＋：３４４．０５１１，実測値：３４４．０５１２。

１（ｄ）６−ヨード−４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（４）
３（１．２５グラム、３．６３ミリモル）の、無水トルエン（１５ミリリットル）の溶液に、０℃で、ボラン ジメチルスルフィド錯体（ＴＨＦ中、２．０Ｍ、１．９１ミリリットル、３．８１ミリモル）を滴下し、そして、得られた溶液を、１６時間、還流撹拌した。溶液を室温に冷却し、そして、１０％のＮａ_２ＣＯ_３水溶液（２５ミリリットル）を加えて、そして、溶液を、０．５時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水と飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、そして、減圧下留去し、粗無色油状物（１．１２グラム）を得た。
これを、シリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して（溶離剤として、１％のトリエチルアミンを含む、ヘキサン：酢酸エチル＝９：１）、４を、無色の油（１．０８グラム、９０％）として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（７００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１．１９（ｓ，３Ｈ），１．１９（ｓ，３Ｈ），１．２４（ｓ，６Ｈ），１．６５−１．６７（ｍ，２Ｈ），３．１４−３．１７（ｍ，２Ｈ），４．０６（ｈｅｐｔ，Ｊ＝６．６ヘルツ，１Ｈ），６．４６（ｄ，Ｊ＝８．８ヘルツ，１Ｈ），７．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．１ヘルツ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝２．２ヘルツ，１Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１８．９，３０．３，３２．４，３６．６，３６．８，４７．３，７６．１，１１３．４，１３４．５，１３４．８，１３５．６，１４４．０；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｖ_ｍａｘ／ｃｍ^-１ ２９５７ｍ，２９２７ｗ，２８６３ｗ，１５８０ｍ，１４８９ｍ，７９２ｓ，６８４ｗ；
ＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ＝３３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋；
ＨＲＭＳ（ＥＳ）計算値Ｃ_１１Ｈ_１３ＮＯＩとして［Ｍ＋Ｈ］^＋：３３０．０７１９，実測値：３３０．０７１７。

実施例２

メチル ４−エチニル安息香酸（７）

２（ａ）メチル ４−ヨードベンゾエート（５）
４−ヨード安息香酸（２５グラム、１００．８ミリモル）を、メタノール（２５０ミリリットル）に懸濁し、そして、濃Ｈ_２ＳＯ_４（５ミリリットル）を加え、そして、得られた溶液を、一晩、還流撹拌した。透明な溶液を、次に、室温にゆっくり冷却し、次いで、０℃にした。
得られた固体を濾過し、冷たいメタノールで洗浄し、そして、乾燥させて、５を、無色の結晶性固体（２３．７グラム、９０％）として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（６００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
３．９０（ｓ，３Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．６ヘルツ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．６ヘルツ，２Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
５２．５，１００．９，１２９．８，１３１．２，１３７．９，１６６．７；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｖ_ｍａｘ／ｃｍ^-１ ３０４０ｗ，２９９６ｗ，２９４６ｗ，１７０９ｓ，１５９６ｍ，１４３６ｍ，１２６９ｓ，１１１４ｓ，８４３ｓ，６８３ｍ；
ＭＳ（ＧＣ）：ｍ／ｚ＝２６１．９［Ｍ］^＋；実測値：Ｃ，３６．５４；Ｈ，２．７１．計算値Ｃ８Ｈ７ＩＯ２として：Ｃ，３６．６７；Ｈ，２．６９％。

２（ｂ）メチル ４−（（トリメチルシリル）エチニル）安息香酸（６）
Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（１．１８グラム、１．６８ミリモル）、ＣｕＩ（１．６８グラム、１．６８ミリモル）および５（２２．０グラム、８３．９８ミリモル）を添加する前に、オーブンで乾燥した５００ミリリットルのシュレンクフラスコを減圧排気し、そして、アルゴンを再充填し、フラスコをセプタムで密封した。トリエチルアミン（２００ミリリットル）およびトリメチルシリルアセチレン（１３．９４ミリリットル、１００．８ミリモル）を加え、そして、フラスコを排気／再度アルゴンを充填することを３回行った。混合物を、室温で、一晩攪拌した。溶液を、ヘキサンで希釈し、真空下、セライト／シリカゲルを通過させ、そして、減圧留去して、６を、オフホワイトの固体として得た（１９．８グラム）。これは、精製することなく、次の工程に使用した。
ＭＳ（ＧＣ）：ｍ／ｚ＝２３２．１［Ｍ］＋；実測値：Ｃ，６６．９０；Ｈ，６．８８．計算値Ｃ１３Ｈ１６Ｏ２Ｓｉとして：Ｃ，６７．２；Ｈ，６．９４％。

２（ｃ）メチル ４−エチニル安息香酸（７）
メタノール：ＤＣＭ溶液（２：１、３００ミリリットル）に、６（１８．５グラム、７９．５ミリモル）およびＫ_２ＣＯ_３（２２．０グラム、１５９ミリモル）を加えた。混合物を、６時間、アルゴン下で攪拌した。次いで、溶液を、減圧留去して、３分の１の量にして、ヘキサンで希釈し、セライトを通過させ、そして、減圧留去して、淡褐色固体を得た。
減圧下昇華により精製し、７を、白色固体として得た（１１．１グラム、２つのステップで８３％）
^１Ｈ ＮＭＲ（６００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
３．２３（ｓ，１Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．４ヘルツ，２Ｈ，），７．９８（ｄ，Ｊ＝８．６ヘルツ，２Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
５２．５，８０．２，８３．０，１２６．９，１２９．６，１３０．３，１３２．３，１６６．６；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ｖ_ｍａｘ／ｃｍ^-１ ３０３５ｗ，３００６ｗ，２９５０ｗ，２１０３ｗ，１６９９ｓ，１６０５ｍ，１４３３ｍ，１２７７ｓ，１１０７ｓ，８５９ｓ；
ＭＳ（ＧＣ）：ｍ／ｚ＝１６０．１［Ｍ］＋；実測値：Ｃ，７４．６２；Ｈ，５．０１．計算値Ｃ１０Ｈ８Ｏ２として：Ｃ，７４．９９；Ｈ，５．０３％。

実施例３
４−２−［４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（９）
３（ａ）４−２−［４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（８）
Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（０．０７４４グラム、０．１０６ミリモル）、ＣｕＩ（０．０２０２グラム、０．１０６ミリモル）および、７（０．２１９グラム、１．３７ミリモル）を添加する前に、オーブンで乾燥したシュレンクフラスコを減圧排気し、アルゴンを再充填し、フラスコをセプタムで密封した。４（０．３４９グラム、１．０６ミリモル）のトリエチルアミン（６ミリリットル）溶液を加え、フラスコを排気し、再度アルゴンを充填することを３回行った。混合物を、７２時間、室温で攪拌した。
混合物をジエチルエーテルで希釈し、真空下、セライト／シリカゲルを通過させ、そして、減圧留去して、粗橙色固体（０．４７グラム）を得た。
これを、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して（溶離液として、１％のトリエチルアミンを有する、ヘキサン：酢酸エチル＝８：２）、８を、オレンジ色の固体として得た（０．１０５グラム、２７％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（７００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１．２１／１．２３（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ，），１．６６−１．７１（ｍ，２Ｈ），３．１９−３．２４（ｍ，２Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），４．１５（ｈｅｐｔ，Ｊ＝６．６ヘルツ，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝８．７ヘルツ，１Ｈ），７．２４−７．２５（ｍ，１Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝１．８ヘルツ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．３ヘルツ，２Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝８．３ヘルツ，２Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１５１メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１９．１，３０．１，３２．２，３６．７，３６．８，４７．４，５２．３，８６．８，９５．２，１０８．０，１１０．６，１２８．５，１２９．５，１２９．６，１３１．１，１３１．２，１３１．７，１４５．０，１６７．０；
ＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ＝３６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；
ＨＲＭＳ（ＥＳ）計算値Ｃ２４Ｈ２８ＮＯ２として［Ｍ＋Ｈ］^＋：３６２．２１２０，実測値：３６２．２１１４。

３（ｂ）４−２−［４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（９）
Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（０．２５３グラム、０．３６ミリモル）、ＣｕＩ（０．０６８６グラム、０．３６ミリモル）および７（０．６３４グラム、３．９６ミリモル）を添加する前に、オーブン乾燥したシュレンクフラスコを減圧排気し、アルゴンを再充填し、フラスコを、セプタムで密封した。４（１．１８５グラム、１．０６ミリモル）のトリエチルアミン（３０ミリリットル）溶液を、真空下で超音波処理により脱気し、アルゴンで再充填することを３回行った。次いで、この溶液を、シュレンクフラスコに添加され、真空下で脱気し、そして、再び、アルゴンを充填し、そして、得られた混合物を、７２時間、室温で撹拌した。
次いで、反応混合物を蒸発乾固し、そして、薄いセライト／ＳｉＯ_２プラグを介して、ヘキサン次いで、ヘキサン：酢酸エチル（９：１）で溶離した。有機層を、次いで、飽和ＮＨ_４Ｃｌ、３％ＥＤＴＡ水溶液、水および飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、そして、減圧留去し、オレンジ色の固体（１．３８グラム）を得た。
これを、ＴＨＦ（３０ミリリットル）に溶かし、そして、２０％のＮａＯＨ水溶液（３ミリリットル）を加えた。得られた溶液を、４０時間、還流撹拌し、混合物を冷却し、水を加えた。溶液を、５％ＨＣｌで中和し、酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水および飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、そして、減圧留去して、粗黄色固体（１．０グラム）を得た。
これを、溶媒積層（ＤＣＭ／ヘキサン）により、２回再結晶し、１７を、明るい黄色の針状晶として得た（０．７３グラム、２つの工程にわたって５８％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（７００メガヘルツ；（ＣＤ_３）_２ＳＯ）δ
１．１６（ｓ，３Ｈ），１．１７（ｓ，３Ｈ），１．２２（ｓ，６Ｈ），１．６０−１．６４（ｍ，２Ｈ），３．１７−３．２１（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．０ヘルツ），６．７０（ｄ，Ｊ＝９．３ヘルツ，１Ｈ），７．１９（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．１ヘルツ，１Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝２．１ヘルツ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ，２Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝８．６ヘルツ，２Ｈ），１３．０２（ｓ，１Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（７００メガヘルツ，（ＣＤ_３）_２ＳＯ）δ
１８．６，２９．７，３１．６，３５．８，３６．１，４６．７，８６．５，９４．９，１０６．５，１０９．５，１１０．５，１２８．９，１２９．４，１３０．７，１３０．７，１３１．２，１４４．７，１６６．８；
ＭＳ（ＥＳ）：ｍ／ｚ＝３４８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；
ＨＲＭＳ（ＥＳ）計算値Ｃ_２３Ｈ_２６ＮＯ_２として、［Ｍ＋Ｈ］^＋：３４８．１９６４，実測値：３４８．１９６５。

実施例４
３−［４−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−フェニル］−アクリル酸メチルエステル（１３）

４（ａ）メチル−（３−メチル−ブト−２−エニル）−フェニル−アミン
５００ミリリットルの丸底フラスコの中に、Ｎ−メチルアナリン（３．２４グラム、３０．３２ミリモル）、１−ブロモ−３−メチル−ブタ−２−エン（５．０グラム、３３．５６ミリモル）およびＫ_２ＣＯ_３（４．６３グラム、３３．５６ミリモル）を、１６０ミリリットルのＭｅＣＮに溶かした溶液を入れ、８５℃で、１８時間加熱した。その時点でのｉｎ ｓｉｔｕのＥＳ^＋−ＭＳによる分析は、反応が完了したことを示した。混合物を、ジエチルエーテル（１００ミリリットル）で希釈し、そして、水で洗浄した（３×１００ミリリットル）。有機層を、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発させると、粗油状物を得た。
これを、シリカパッドを通して濾過し、ヘキサンで溶出した。溶媒を、減圧下に除去し、表題化合物を、透明な油として得た（３．８２グラム、７２％）。
ｍ／ｚ（ＥＳ^＋−ＭＳ）１７６（ＭＨ^＋）；
^１Ｈ ＮＭＲ（４９９．７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
７．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０ヘルツ），６．７９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０ヘルツ），６．７５（１Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝７．０ヘルツ），５．２５（１Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），３．９３（２Ｈｄ，Ｊ＝６．０ヘルツ），２．９３（３Ｈ，ｓ）１．７６（６Ｈ，ｓ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１００．６１メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１４９．８６，１３４．５４，１２９．０８，１２０．９１，１１６．４２，１１２．９７，５０．５３，３７．９１，２５．７０．１７．９２；
ＨＲＭＳ計算値、Ｃ_１２Ｈ_１８Ｎとして_-（［Ｍ＋Ｈ］^＋）１７６．１４３３８，実測値１７６．１４３３６。

４（ｂ）１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン
５００ミリリットルの丸底フラスコに、メチル−（３−メチル−ブト−２−エニル）−フェニルアミン（１８．０グラム、１０２．８６ミリモル）およびポリリン酸（７５ミリリットル）の混合物を加え、１２０℃で１８時間、加熱した。その時点で、混合物の精製されたアリコートの、^１Ｈ ＮＭＲ分光分析による分析は、反応が完了したことを示した。
混合物を、５分かけて、水（１００ミリリットル）をゆっくりと添加することによって希釈した。溶液を、注意深く、ＫＯＨ水溶液の添加によりアルカリ性にし、そして、その後、ジエチルエーテル（１リットル）で抽出した。有機層を、水（３×２００ミリリットル）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、そして、溶媒を、減圧下、除去し、粗油状物を得た。
これを、シリカパッドを通して、ヘキサンで溶出した。溶媒を、減圧下、除去し、表題化合物を、透明な油状物として得た（１４．９３グラム、８３％）。
ｍ／ｚ（ＥＩ−ＭＳ）１７５（５０％，Ｍ^＋），１６０（６０％，Ｍ^＋−Ｍｅ）；
^１Ｈ ＮＭＲ（４９９．７６メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
７．２３（ｉＨ，ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．５ヘルツ），７．１１（１Ｈ，ｔｒｉｐｌｅｔ ｏｆ ｄｏｕｂｌｅｔｓ，Ｊ＝７．５，１．５ヘルツ），６．６３（１Ｈ，ｔｒｉｐｌｅｔ ｏｆ ｄｏｕｂｌｅｔｓ，Ｊ＝７．５，１．５ヘルツ），６．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５ヘルツ），３．２５（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），２．９２（３Ｈ，ｓ），１．８０（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１２５．６７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１４５．７４，１３１．６１，１２６．９４，１２６．０２，１１６．２５，１１１．０９，４７．８８，３９．５０，３７．５０，３２．１９，３１．２１，
ＨＲＭＳ計算値、Ｃ_１２Ｈ_１８Ｎとして_-（［Ｍ＋Ｈ］^＋）１７６．１４３３８，実測値１７６．１４３３２。

４（ｃ）６−ヨード−１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン
１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（２．１０グラム、１２．０ミリモル）およびヨウ素（３．０５グラム、１２．０ミリモル）を、ＤＣＭ（１００ミリリットル）に溶かした溶液に、赤色ＨｇＯを添加した（２．５９グラム、１２．０ミリモル）。^１Ｈ ＮＭＲによる分析が、反応が完結（２時間）したことを示すまで、反応液を、室温で撹拌した。混合物を濾過し、希釈したＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３水溶液（１００ミリリットル）および水（１００ミリリットル）で洗浄した。有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして、溶媒を減圧下除去した。残渣を、アルミナのプラグを通して濾過して、ＤＣＭで溶出し、溶媒を減圧下に除去すると、表記化合物を、淡黄色油状物として得た（２．５０グラム、６９％）。
ｍ／ｚ（ＥＩ−ＭＳ）３０１（１００％，Ｍ^＋），２８６（８０％，Ｍ^＋−Ｍｅ）；
^１Ｈ ＮＭＲ（４９９．６７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
７．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０ヘルツ），７．３２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．０ヘルツ），６．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ），３．２４（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），２．８９（３Ｈ，ｓ），１．７４（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ）１．２７（６Ｈ，ｓ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１２５．６７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１４４．９２，１３５．４９，１３４．３４，１２７．２２，１２６．５２，１１３．３５，４７．５８，３９．３０，３６．８７，３２．２９，３０．７９；
ＨＲＭＳ計算値。Ｃ_１２Ｈ_１７ＮＩとして_-（［Ｍ＋Ｈ］^＋）３０２．０４００３，実測値３０２．０４００８。

４（ｄ）１，４，４−トリメチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（１２）
乾燥した、Ｎ_２で充填されたグローブボックスにおいて、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（０．１２６グラム、０．１５ｍｍｏｌ）、６−ヨード−１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（０．９３グラム、３．０９ミリモル）、Ｂ_２ｐｉｎ_２（０．７８グラム、３．０９ミリモル）および酢酸カリウム（０．６１グラム、６．１８ミリモル）をヤングタップを取り付けた厚肉ガラス管中で混合した。脱気したＤＭＳＯ（１０ミリリットル）を添加し、そして、混合物を、８０℃で、１８時間、加熱した。その際、ＧＣＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。
混合物を、ジエチルエーテル（１００ミリリットル）で希釈し、そして、水で洗浄した（３×１００ミリリットル）。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そして、溶媒を、減圧下、除去し、残渣を得た。
これを、シリカパッドを通して濾過し、１：１のＤＣＭ／ヘキサンで溶出した。溶媒を、減圧下、除去し、粗生成物が得られた。それを、−２０℃で、メタノールから再結晶すると、１２を、白色針状晶として得た（０．６６グラム、７０％）。
融点１４０−１４１℃
ｍ／ｚ（ＥＩ−ＭＳ）３０１（１００％，Ｍ^＋），２８６（１００％，Ｍ^＋−Ｍｅ）；
^１Ｈ ＮＭＲ（６９９．７３メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
７．６３（１Ｈ、ｓ）、７．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ヘルツ），６．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ヘルツ），３．２９（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），２．９４（３Ｈ，ｓ），１．７５（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），１．３３（１２Ｈ，ｓ），１．３１（６Ｈ，ｓ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ＮＭＲ（１７５．７３メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）：δ
１４７．８，１３４．４，１３２．３，１３０．３，１１０．１，８３．２，４７．７，３９．２，３７．２，３２．１，３０．７，２５．０、
ボロンに結合する炭素の共鳴は観察されなかった。
^１１Ｂ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１２８．３８メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
３１．０１；
元素分析：計算値（％）Ｃ_１８Ｈ_２８ＢＮＯ_２として：Ｃ７１．７７，Ｈ９．３７，Ｎ４．６５；実測値：Ｃ７１．７９，Ｈ９．２７，Ｎ４．６０。

４（ｅ）３−［４−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−フェニル］−アクリル酸 メチルエステル（１３）
乾燥した、Ｎ_２で充填されたグローブボックスにおいて、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（２５ミリグラム、０．０３ミリモル）、１，４，４−トリメチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（０．４９グラム、１．５５ミリモル）、３−（４−ブロモ−フェニル）−アクリル酸 メチルエステル（０．３７グラム、０．８３ミリモル）およびＫ_３ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ（０．７７グラム、３．１０ミリモル）を、ヤングタップを取り付けた厚肉ガラス管中で混合した。脱気した、イソプロピルアルコール（１０ミリリットル）および水（１ミリリットル）を添加し、混合物を、１８時間、８０℃で加熱し、その際、ＧＣＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。
溶媒を、減圧下、除去し、そして、残留物を、ＤＣＭ（１００ミリリットル）に溶解し、そして、水で洗浄した（３×２０ミリリットル）。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そして、溶媒を、減圧下、除去し、残渣を得た。
それを、シリカパッドを通して濾過し、ＤＣＭで溶出した。溶媒を、減圧下、除去すると、黄色の固体を得た。
それを、−２０℃で、メタノールから再結晶し、１３を、黄白色針状晶として得た（０．３２グラム、６２％）。
融点１２１−１２３℃
ＵＶ−ｖｉｓ（ＣＨＣｌ_３）λ_ｍａｘ（ε）３８０ｎｍ（２３９００Ｌｍｏｌ^−１ｃｍ^−１）；λ_ｅｍ（ＣＨＣｌ_３）５３６ｎｍ；
ｍ／ｚ（ＥＳ^＋−ＭＳ）３３６（［Ｍ−Ｈ］^＋）；
^１Ｈ ＮＭＲ（４９９．７７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０ヘルツ），７．５８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ），７．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ），７．４８（１Ｈ，ｓ），７．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ヘルツ），６．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ヘルツ），６．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０ヘルツ），３．８３（３Ｈ，ｓ），３．３０（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝５．５ヘルツ），２．９７（３Ｈ，ｓ），１．８１（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝５．５ヘルツ），１．３５（６Ｈ，ｓ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１２５．６７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１６７．８７．１４５．４９，１４４．９８，１４３．８９，１３１．８５（２つのピークが重なった），１２．７１，１２７．４５，１２６．４９，１２５．６３，１２４．５６，１１６．５６，１１１．２８，５１．７９，４７．７５，３９．４０，３７．２４，３２．３４，３０．９７；
ＨＲＭＳ計算値Ｃ_２２Ｈ_２６ＮＯ_２として_-（［Ｍ−Ｈ］^＋）３３６．１９５８１，実測値３３６．１９５７７。

実施例５
６−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−ナフタレン−２−カルボン酸 メチルエステル（１１）
５（ａ）６−（５，５−ジメチル−［１，３，２］ジオキサボリナン−２−イル）−１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（１０）
乾燥した、Ｎ_２で充填された、グローブボックス内で、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（０．１３５グラム、０．１７ｍｍｏｌ）、６−ヨード−１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（１．０グラム、３．３２ミリモル）、Ｂ_２ｐｉｎ_２（０．７５グラム、３．３２ミリモル）および酢酸カリウム（０．６５グラム、６．６４ミリモル）を、ヤングタップを取り付けた厚肉ガラス管中で混合した。脱気したＤＭＳＯ（１０ミリリットル）を加え、そして、混合物を、８０℃で、１８時間、加熱した。その際、ＧＣＭＳ分析が、反応は完了したことを示した。混合物を、ジエチルエーテル（１００ミリリットル）で希釈し、そして、水で洗浄した（３×１００ミリリットル）。有機層を、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、そして、溶媒を、減圧下、除去し、残渣を得た。
それを、シリカパッドを通して濾過し、１：１のＤＣＭ／ヘキサンで溶出した。溶媒を、減圧下、除去し、粗生成物が得られた。
これを、−２０℃で、メタノールから再結晶し、白色針状晶として、１０を得た（０．８０グラム、８８％）。
融点１５１−１５３℃
ｍ／ｚ（ＥＩ−ＭＳ）２８７（９０％，Ｍ^＋），２７２（１００％，Ｍ^＋−Ｍｅ）；
^１Ｈ ＮＭＲ（４９９．７７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５ヘルツ），７．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．５ヘルツ），７．２７（１Ｈ，ｓ），６．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ），３．７５（４Ｈ，ｓ），３．２８（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），２．９４（３Ｈ，ｓ），１．７６（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），１．３２（６Ｈ，ｓ），１．０２（６Ｈ，ｓ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１２５．６７メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１４７．４９，１３３．２９，１３１．４２，１３０．１９，１１０．０９，７２．３３，４７．７５，３９．２４，３７．２９，３２．０５，３２．０３，３０．８３，２０．１２，
ボロンに結合する炭素の共鳴は観察されなかった。
^１１Ｂ｛^１Ｈ｝ ＮＭＲ（１２８．３８メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
２７．０２；
元素分析：計算値（％）Ｃ_１７Ｈ_２６ＢＮＯ_２として：Ｃ７１．０９，Ｈ９．１２，Ｎ４．８８；実測値：Ｃ７１．００，Ｈ９．１２，Ｎ４．８１。

５（ｂ）６−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−ナフタレン−２−カルボン酸 メチルエステル（１１）
乾燥した、Ｎ_２で充填されたグローブボックスにおいて、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（１３ミリグラム、０．０２ミリモル）、６−（５，５−ジメチル−［１，３，２］ジオキサボリナン−２−イル）−１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（０．２５グラム、０．８７ミリモル）、６−ブロモナフタレン−２−カルボン酸 メチルエステル（０．２２グラム、０．８３ミリモル）およびＫ_３ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ（０．４３グラム、１．７４ミリモル）を、ヤングタップを取り付けた厚肉ガラス管中で混合した。脱気したＤＭＳＯ（１５ミリリットル）および水（３ミリリットル）を添加し、そして、混合物を、８０℃で、１８時間、加熱し、その際、ＧＣＭＳ分析が、反応は完了したことを示した。混合物を、ジエチルエーテル（１００ミリリットル）で希釈し、そして、水で洗浄した（３×１００ミリリットル）。有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして、溶媒を、減圧下、除去し、残渣を得た。
これを、シリカパッドを通して濾過し、ＤＣＭで溶出した。溶媒を、減圧下、除去し、黄色固体を得、−２０℃で、メタノールから再結晶して、黄白色の針状晶の１１を得た（０．２８グラム、９４％）。
融点１６６−１６７℃
ＵＶ−ｖｉｓ（ＣＨＣｌ_３）λ_ｍａｘ（ε）２４３ｎｍ（５３２００Ｌｍｏｌ^−１ｃｍ^−１）；λ_ｅｍ（ＣＨＣｌ_３）４９４ｎｍ；
ｍ／ｚ（ＥＩ−ＭＳ）３５９（１００％，Ｍ^＋），３４４（６０％，Ｍ^＋−Ｍｅ）；
^１Ｈ ＮＭＲ（６９９．７３メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
８．６０（１Ｈ，ｓ），８．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．５ヘルツ），７．９９（１Ｈ，ｓ），１．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ），７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０ヘルツ），７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．５ヘルツ），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０ヘルツ），７．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．０ヘルツ），６．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５ヘルツ），３．９９（３Ｈ，ｓ），３．３２（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），２．９９（３Ｈ，ｓ），１．８４（２Ｈ，ｔｒ，Ｊ＝６．０ヘルツ），１．３９（６Ｈ，ｓ）；
^１３Ｃ｛^１Ｈ｝ＮＭＲ（１７５．７３メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１６７．５５，１４５．４９，１４１．７２，１３６．２９，１３１，９９，１３１．０８，１２９．７４，１２８．７４，１２８．１８，１２６．６２，１２６．３１，１２６．０５，１２５．６２，１２４．９７，１２３．７４，１１１．４１，５２．２９，４７．７９，３９．４３，３７．３１，３２．４０，３１．０３；
ＨＲＭＳ計算値Ｃ_２４Ｈ_２５ＮＯ_２-として（Ｍ^＋）３５９．１８７９８，実測値３５９．１８７８９。

実施例６
４−２−［２，４，４−トリメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，４−ジヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（１７）

６（ａ）６−ヨード−２，４，４−トリメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，４−ジヒドロキノリン（１５）
３（１．１７グラム、３．４２ミリモル）の無水ＴＨＦ（５０ミリリットル）の溶液に、ＭｅＭｇＢｒ（３．０Ｍのジエチルエーテルを２．２８ミリリットル、６．８４ミリモル）を加え、得られた溶液を、１６時間、還流下に撹拌した。溶液を冷却し、２０％のＨＣｌ（１．１４ミリリットル）および水でクエンチした。酢酸エチルで希釈し、水と飽和食塩水で洗い、乾燥（硫酸マグネシウム）し、減圧留去して、粗無色油状物（０．９５グラム）を得た。
これを、すぐに、シリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として、１％のトリエチルアミンを含む、ヘキサン：酢酸エチル＝９７．５：２．５）により精製して、１５を、ピンク色の油として得た（０．３５グラム、３０％）。これを、直ぐに、次の反応に使用した。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００メガヘルツ，ＣＤＣｌ_３）δ
１．２０（ｓ，６Ｈ），１．４５（ｓ，３Ｈ），１．４６（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｄ，Ｊ＝０．９ヘルツ，３Ｈ），４．１６（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．１ヘルツ，１Ｈ），４．５０（ｑ，Ｊ＝１．２ヘルツ，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝８．７ヘルツ，１Ｈ，），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．２ヘルツ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝２．１ヘルツ，１Ｈ）。

６（ｂ）４−２−［２，４，４−トリメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，４−ジヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（１７）
Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（０．０７３グラム、０．１０４ミリモル）、ＣｕＩ（０．０１９８グラム、０．１０４ミリモル）および、７（０．１７６グラム、１．１０ミリモル）を、アルゴン下で、シュレンクフラスコに添加した。フラスコを排気し、アルゴンを再充填した。１５（０．３５６グラム、１．０４ミリモル）を、トリエチルアミン（１２ミリリットル）に溶解したものを添加し、そして、フラスコを排気／再びアルゴンで満たした（３×）。混合物を、７２時間、室温で攪拌した。溶液を、ジエチルエーテルで希釈し、真空下に、セライト／ＳｉＯ_２に通し、そして、減圧留去して、粗緑色固体（０．４グラム）を得た。
これを、シリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として、１％のＥｔ_３Ｎを含む、ヘキサン：酢酸エチル＝８：２）により、精製して、１６（スキームＩＶ）を、淡緑色固体として得た（０．１２グラム、３０％）。
１６（０．０７３グラム、０．１９５ミリモル）を、その後、ＴＨＦ（１０ミリリットル）に溶解し、そして、これに、２０％のＮａＯＨ水溶液（２ミリリットル）を添加した。得られた溶液を、還流下で、４０時間、撹拌し、混合物を冷却し、水とジエチルエーテルを加えた。溶液を、５％ＨＣｌを用いて、ｐＨ７に酸性化し、ジエチルエーテルで希釈し、飽和食塩水で洗浄し、乾燥（硫酸マグネシウム）し、減圧下、溶媒を除去して、１７を、黄色固体として得た（０．０７０グラム、９９％）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００メガヘルツ；ＣＤＣｌ_３）δ
１．２４（ｓ，６Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｄ，Ｊ＝０．９ ヘルツ，３Ｈ），４．２３（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．２ヘルツ，１Ｈ），４．５３（ｄ，Ｊ＝１．１ヘルツ，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．６ヘルツ，１Ｈ），７．２７−７．２９ （ｍ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝２．０ヘルツ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．３ヘルツ， ２Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４ヘルツ，２Ｈ）。

実施例７
実施例３の化合鬱９および実施例６の化合物１７の初期蛍光の特性

９の吸収および発光スペクトルを、種々の溶媒において得た（図３および図４）。９を、ＥＣ２３^(R)と比較すると（図１および図２）、最大の吸収および発光の波長において、有意な増加を示す。９からの蛍光は、１ｎＭという低い濃度で、容易に検出され、そして、溶媒依存性効果が観察され、非極性溶媒において、高い強度の蛍光が検出された。一方、顕著な蛍光消光は、特に、水中で観察された。蛍光発光波長も、また、溶媒の極性に強く依存し、非極性溶媒と比較したとき、極性溶媒において、著しい赤色シフトが起こった。
細胞に適用した場合、９の蛍光は、局所の極性に依存して、離散的な細胞位置で識別可能であると予想することができることを、この初期特性は示す。

化合物１７は、化合物９と同様の発光プロファイルを示す（図６）だけでなく、より長い極大吸収波長（図５）を示す。この吸収帯は、約３７９ｎｍでのピーク、および、インジゴ／青（４４０ｎｍ）にトレイルする（ｔｒａｉｌｓ）。この、より長波長吸収帯は、蛍光顕微鏡で典型的である、４０５ｎｍの励起源において、化合物１７は、化合物９よりも、より効果的に励起されるであろうことを示す。

実施例３の化合物９の光安定性
ＤＭＳＯ−ｄ６の中の、化合物９の^１Ｈ ＮＭＲのスペクトルは、光の非存在下に、周囲温度で保存した後に記録された（図７）。化合物９の同じサンプルは、次いで、標準的な実験室光に、７２時間、３０ｃｍの距離で露出され、そして、^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを記録した（図８）。小さな割合が、構造的に同様のエナミン体に変換するが、この期間にわたって、典型的な実験室の照明に対して、化合物９は、安定である。化合物９は、おおよそ１６日間の暴露まで安定であり、劣化のいくつかの兆候が明らかになった。化合物９は、依然として、サンプルの主な成分であるが（＞６０％）、より顕著な分解は、２２日間の曝露後に観察される。

化合物９および化合物１７の生物学的評価
レチノイドの定義特性は、特定の細胞型の分化を誘導する、および、定義された配列のＤＮＡ（レチノイン酸応答エレメント、ＲＡＲＥｓ）に連結されることにより、レチノイン酸に直接応答する遺伝子の発現を誘導するそれらの能力である。レチノイン酸応答エレメントは、リガンド活性化レチノイン酸リセプター（ＲＡＲｓ）に結合し、それにより遺伝子のメッセンジャーＲＮＡ転写が発現されるために必要な、遺伝子調節配列（プロモーター）に、遺伝子転写機構の動員を可能にする。

蛍光レチノイドが、レチノイド活性を有することを示すため、ＴＥＲＡ−２細胞（胚性癌腫細胞株）を、１および１０μＭの、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９を用いて処理し、次いで、得られたサンプルを、様々な免疫細胞化学染料で染色した。図８−１は、神経幹細胞において典型的に発現される中間フィラメントである、ネスチンの存在下、１および１０μＭの、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９を用いて、およびビヒクル溶媒である、ＤＭＳＯを用いて、ＴＥＲＡ−２細胞を処理した結果を示す。すべての条件は、１０μＭのＥＣ２３^(R)および化合物９のサンプルにおけるより、おそらくより少ない程度に、ネスチンの染色は、陽性であった。

図８−２は、ＴＥＲＡ−２細胞を、１および１０μＭのＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で そして、ビヒクル溶媒のＤＭＳＯで、非神経分化のマーカーである、サイトケラチン８（ＣＫ８）の存在下に、処理した結果を示す。ＡＴＲＡとＥＣ２３^(R)の両方の、１０μＭのサンプルにおいて、非神経分化における典型的な減少のように、より弱い強度の染色が見られた。しかし、１μＭのサンプルと比較した場合、化合物９では僅かに明るくなった。ＤＭＳＯ処理は、ＣＫ８に対して、非常に明るい染色を示す。

図８−３は、ＴＥＲＡ−２細胞を、１および１０μＭのＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で そして、ビヒクル溶媒のＤＭＳＯで、パン・ニューロン・マーカー（ｐａｎ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｍａｒｋｅｒ）であるＴＵＪ−１の存在下に、処理した結果を示す。ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で処理したサンプルは、ＴＵＪ−１に対して、１０μＭでの処理で明らかな増加染色を有する、顕著な染色を示した。ＤＭＳＯで処理した細胞は、唯一限定されたＴＵＪ−１染色を示した。

図８−４は、ＴＥＲＡ−２細胞を、１および１０μＭのＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で、そして、ビヒクル溶媒のＤＭＳＯで、多能性のマーカーである転写因子であるＯｃｔ ４の存在下に、処理した結果を示す。ＤＭＳＯで処理した細胞は、Ｏｃｔ ４に対して、明らかな陽性染色を示し、そして、染色は、１μＭのＡＴＲＡ処理においても明らかである。他のすべての条件で、Ｏｃｔ ４に対して、染色を示さず、ＥＣ２３^(R)および化合物９は、容易に、分化の促進を通して、多能性のマーカーを抑制的に制御することを示す。

図８−５は、ＴＥＲＡ−２細胞を、１および１０μＭのＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で そして、ビヒクル溶媒のＤＭＳＯで、多能性のマーカーである転写因子である、Ｓｏｘ２の存在下に、処理した結果を示す。ＤＭＳＯで処理した細胞は、Ｓｏｘ２に対して、明らかな陽性染色を示し、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で処理した細胞において、著しい染色の低下を有する、顕著な染色を示した。この観察は、ＡＴＲＡ，ＥＣ２３^(R)および化合物９は、容易に、分化の促進を通して、多能性のマーカーを抑制的に制御することを示す。

図９は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で、および、ＤＭＳＯで処理した、ＴＥＲＡ−２細胞のフローサイトメトリー分析を示す。幹細胞マーカーであるＳＳＥＡ−３の発現を測定した。一般的には、細胞を、レチノイドを用いて処理した場合、発現は低下する。ＳＳＥＡ−３のフローサイトメトリーは、ＤＭＳＯで処理した細胞と比較して、ＳＳＥＡ−３の発現は、レチノイドで処理された細胞において、有意に減少していることを示す。化合物９で処理した細胞は、１および１０μＭの処理の両方で、ＡＴＲＡおよびＥＣ２３^(R)よりも、より高いレベルのＳＳＥＡ−３を示した。

図１０は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９およびＤＭＳＯで処理した、ＴＥＲＡ−２細胞のフローサイトメトリー分析を示す。細胞がレチノイドで処理された場合、一般的に低減される、幹細胞マーカーであるＴＲＡ１６０の発現を測定した。ＴＲＡ１６０のフローサイトメトリーは、ＤＭＳＯで処理された細胞と比較して、レチノイドで処理された細胞において、ＴＲＡ１６０の発現が大幅に減少することを示す。化合物９で処理した細胞は、１および１０μＭの両方において、ＡＴＲＡおよびＥＣ２３^(R)よりも、ＴＲＡ１６０がわずかに高いレベルであることを示した。

図１１は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９およびＤＭＳＯで処理した、ＴＥＲＡ−２細胞のフローサイトメトリー分析を示す。レチノイドを用いて細胞を処理した場合には、一般的に上昇する、早期神経マーカーであるＡ２Ｂ５の発現が測定された。Ａ２Ｂ５のフローサイトメトリーは、Ａ２Ｂ５の発現は、ＤＭＳＯで処理された細胞と比較して、レチノイド処理細胞において、著しく増加することを示す。ＡＴＲＡで処理した細胞は、Ａ２Ｂ５のレベルより、より高い発現をし、次いで、ＥＣ２３^(R)および化合物９が続く。

図１１−１は、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９、およびＤＭＳＯで処理された細胞集団の位相コントラスト画像を示す。ＤＭＳＯで処理した細胞集団において、細胞は小さく、そして、密に一緒にパックされた。対照的に、ＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９で処理された細胞集団は、より低密度であり、そして細胞は、はるかに広がっている。

図１２および図１３は、１および１０μＭのＡＴＲＡ、ＥＣ２３^(R)および化合物９、およびＤＭＳＯで処理した、ＭＴＴ細胞生存率分析を示す。すべての処理は、ＤＭＳＯと同等の生存率を示し、レチノイドで処理された細胞は、重大な毒性作用を示さないことを示唆する。

図１４は、化合物９について、１０、１、０．１、０．０１μＭの濃度で処理され、そして、７日後に共焦点蛍光顕微鏡を用いて画像化された、ＴＥＲＡ−２細胞を示す。最も低い処理濃度でさえ、０．１乃至１０μＭの処理は、容易に画像化でき、化合物９の蛍光を見ることができた。化合物９は、主に、核エンベロープ（ｎｕｃｌｅａｒ ｅｎｖｅｌｏｐｅ）の周りに局在し、そして、また、他の細胞構造の周りに局在するように見える。

図１５、１６および１７は、それぞれ、１０μＭの化合物９で処理され、そして、８時間（ＳＨＳＹ５Ｙ）および２４時間（線維芽細胞）および７日間（ＴＥＲＡ−２）の後、共焦点蛍光顕微鏡を用いて画像化した、ＳＨＳＹ５Ｙ細胞（神経芽腫）および線維芽細胞およびＴＥＲＡ−２細胞を示す。化合物９は、再び、核エンベロープ（ｎｕｃｌｅａｒ ｅｎｖｅｌｏｐｅ）周囲に明らかに局在化がはっきりと見える。

図１８は、１０μＭの化合物９で、５日間、処理され、固定され、そして、共焦点蛍光顕微鏡を用いて、画像形成された、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。

図１９は、化合物９（１０mＭ）で、５日間処理した、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。固定されたカバースリップは、次いで、インボルクリン（緑）およびＫ１４（赤）で染色され、共焦点顕微鏡を用いて画像化された。化合物９の蛍光は、青色に着色される。インボルクリンは、選択的に、核の中および周りへ、レチノイドを輸送する、細胞レチノイン酸結合タンパク質（ＣＲＡＢＰ）を染色する。Ｋ１４は、基底ケラチノサイトの分割の原型マーカーであり、表皮細胞形状の維持に働く。

図２１は、５日間、化合物１７（１０mＭ）で処理した、ＨａＣａｔケラチノサイト皮膚細胞を示す。固定化されたカバースリップは、次いで、インボルクリン（緑）およびＫ１４（赤）で染色され、共焦点顕微鏡を用いて画像化した。化合物１７の蛍光は、青色に着色された。インボルクリンは、核の中及び周りへ、レチノイドを輸送する、細胞レチノイン酸結合タンパク質（ＣＲＡＢＰ）を、選択的に染色する。Ｋ１４は、基底ケラチノサイトの分割の原型マーカーであり、表皮細胞形状の維持に役立つ。図２０のように、同一の条件下で、化合物１７からの蛍光は、化合物９によって示されるものよりも、有意により強い（図１９）。

図２２は、化合物９のラマンスペクトルを示す。高強度アセチレン帯域が、２１９０ｃｍ^−１で観察される。これは、例えば、アミド結合のような、生物学的起源のシグナルが観察されない、細胞サイレント領域（１８００〜２８００ｃｍ^−１）に存在する。このスペクトルの分離は、細胞サイレント領域におけるラマンバンドが、ラマン顕微鏡／分光法を用いて、細胞サンプルを撮像または分析する際に、より容易に検出できることを可能する。

Claims (48)

1. 式Ｉの化合物：
   式中、
   Ｒ^１は、水素、Ｃ１−１０のアルキルまたはアシルを示し；
   Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素またはＣ１−４アルキルであるか、または、一緒になって、Ｒ^２およびＲ^４、または、Ｒ^３およびＲ^５の一対は、単結合を示し；
   Ｒ^６とＲ^７は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素、Ｃ１−４アルキルまたは、一緒になって、Ｒ^４およびＲ^６、または、Ｒ^５およびＲ^７の一対は、単結合を示し、または、Ｒ^６およびＲ^７が、一緒になって、以下の基を示す：
   ＝ＣＲ^１１Ｒ^１２；
   ただし、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４およびＲ^５からの一対が、単結合を示す場合、Ｒ^４およびＲ^６または、Ｒ^５およびＲ^７の一対は、単結合を示さない。
   Ｒ^８およびＲ^９は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素、Ｃ１−１０アルキル、アリール、アラルキル、ハロゲン、トリフルオロアルキル、シアノ、ニトロ、−ＮＲ^a Ｒ^b、−ＯＲ^a、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^a、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^a、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^a、−Ｓ（Ｏ）Ｒ^aＲ^b、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^aＲ^bを示す。
   Ｒ^１１およびＲ^１２は、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素またはＣ１−１０アルキルを示し、そして、
   Ｒ^aおよびＲ^bは、同一または異なっていてもよく、それぞれ、水素またはＣ１−１０アルキルを示し；
   Ｒ^１０は、基ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸまたはＸＩを示す：
   式中、Ｒ^１３は、水素またはＣ１−１０アルキルを示す；
   およびこれらの異性体；
   フリー体または塩。
2. Ｒ^１０が、基ＩＩである、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ^１０が、基ＩＩＩである、請求項１に記載の化合物。
4. Ｒ^１０が、基ＩＶである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｒ^１０が、基Ｖである、請求項１に記載の化合物。
6. Ｒ^１０が、基ＶＩである、請求項１に記載の化合物。
7. Ｒ^１０が、基ＶＩＩである、請求項１に記載の化合物。
8. Ｒ^１０が、基ＶＩＩＩである、請求項１に記載の化合物。
9. Ｒ^１０が、基ＩＸである、請求項１に記載の化合物。
10. Ｒ^１０が、基Ｘである、請求項１に記載の化合物。
11. Ｒ^１０が、基ＸＩである、請求項１に記載の化合物。
12. −ＣＯ_２Ｒ^１３が、４位にある、先行するいずれかの請求項の化合物。
13. −ＣＯ_２Ｒ^１３が、３位にある、先行するいずれかの請求項の化合物。
14. Ｒ^１０が、水素である、先行するいずれかの請求項の化合物。
15. ３００〜４００ｎｍの波長を有する光に３日間暴露後、少なくとも６０重量％の化合物が、残存する、先行するいずれかの請求項の化合物。
16. 細胞分化またはアポトーシスの制御に使用するための、先行するいずれかの請求項の化合物。
17. 以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
    ４−２−［４，４−ジメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（９）；そして、
    ６−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−ナフタレン−２−カルボン酸 メチルエステル（１１）；
    ３−［４−（１，４，４−トリメチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イル）−フェニル］−アクリル酸 メチルエステル（１３）；そして、
    ４−２−［２，４，４−トリメチル−１−（プロパン−２−イル）−１，４−ジヒドロキノリン−６−イル］エチニル安息香酸（１７）；
    およびこれらの異性体；
    フリー体または塩。
18. 少なくとも一つの分化細胞型への幹細胞の分化における、式Ｉの化合物の使用。
19. 幹細胞が、ヒトまたは動物の全能性（ｔｏｔｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞である、請求項１７に記載の使用。
20. 幹細胞が、ヒトまたは動物の多能性（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞である、請求項１７に記載の使用。
21. 幹細胞が、ヒトまたは動物の多分化能（ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞である、請求項１７に記載の使用。
22. 多分化能（ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞が、造血幹細胞、神経幹細胞、骨幹細胞、筋肉幹細胞、間葉系幹細胞、上皮幹細胞（例えば、皮膚、胃腸粘膜、腎臓、膀胱、乳腺、子宮、前立腺のような器官、および、脳下垂体のような内分泌腺、に由来する）、外胚葉幹細胞、中胚葉幹細胞または内胚葉幹細胞（例えば、肝臓、膵臓、肺および血管などの臓器に由来する）からなる群から選択される、請求項２０に記載の使用。
23. 以下の工程を含む、幹細胞の分化を誘導する方法：
    （i）前記培養培地が、式Ｉの化合物を含む、前記幹細胞を維持するのに適した細胞培養培地中で、幹細胞の調製物を形成する工程；および、
    （ｉｉ）少なくとも一つの分化細胞型への分化を可能にする条件下で、前記幹細胞を培養する工程。
24. 幹細胞が、多分化能性または多能性幹細胞である、請求項２２に記載の方法。
25. 分化した細胞が、ケラチノサイト、線維芽細胞（例えば、皮膚、角膜、腸粘膜、口腔粘膜、膀胱、尿道、前立腺、肝臓）、上皮細胞（例えば、皮膚、角膜、腸粘膜、口腔粘膜、膀胱、尿道、前立腺、肝臓）、神経膠細胞または神経細胞、肝細胞、間葉系幹細胞、筋肉細胞（心筋細胞（ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅ）や筋管細胞（ｍｙｏｔｕｂｅ ｃｅｌｌ））、腎臓細胞、血球（例えば、ＣＤ４＋リンパ球、ＣＤ８＋リンパ球）、膵臓細胞、または内皮細胞、からなる群から選択される、請求項２２または２３のいずれか１項に記載の方法。
26. 方法が、エクスビボ、インビボで、または、インビトロで、行なわれる、請求項２２乃至２４のいずれか１項に記載の方法。
27. レチノイド療法から利益を得る、疾患または状態の治療または予防における、式Ｉの化合物の使用。
28. 疾患または状態が、細胞分化またはアポトーシスの制御から利益を受ける、請求項２６の使用。
29. 疾患または状態が、癌（例えば、神経腫瘍）、にきび皮膚の創傷（例えば、火傷、ＵＶ損傷、皮膚の老化のような）などの皮膚疾患、を含む、請求項２６または２７の使用。
30. 化合物が、化学療法剤または化学予防剤として作用する、請求項２２乃至２８のいずれか１項に記載の使用。
31. 化合物が、化学療法剤または化学予防剤として、皮膚、口腔、喉頭、肺、膀胱、外陰部、乳房、消化管のものを含む、前癌または癌性状態の治療または予防において、作用する、請求項２９に記載の使用。
32. 化合物が、頭頸部、膀胱腫瘍のものを含む、基底細胞癌、扁平上皮癌の治療または予防において、化学療法剤または化学予防剤として作用する、請求項２９に記載の使用。
33. 化合物が、骨髄性白血病（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋａｅｍｉａ）などの白血病、特に、急性前骨髄球性白血病（ａｃｕｔｅ ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｅ ｌｅｕｋａｅｍｉａ）における、治療または予防において、化学療法剤または化学予防剤として作用する、請求項２９に記載の使用。
34. 化合物が、増殖、分化、および、正常、前悪性および悪性細胞のアポトーシスを調節する能力のために、化学療法剤または化学予防剤として、インビトロで、および、インビボで作用する、請求項２９乃至３２のいずれか一項に記載の使用。
35. 例えば、皮膚または神経細胞の増殖のような、細胞増殖の促進における、式Ｉの化合物の使用。
36. 組織の健康と発展の促進、特に、皮膚、骨、神経、歯、髪、および／または、ヒトまたは動物の体の粘膜の健康と発展を促進する、式Ｉの化合物の使用。
37. 式Ｉの化合物を含むプローブ。
38. 式Ｉの化合物の有効量を投与し、そして、蛍光医用イメージングにより、化合物によって放出される蛍光を検出することを含む、細胞分化またはアポトーシスをモニターする方法。
39. 化合物によって放出される蛍光を検出することによって、式Ｉの化合物の分布を画像化することによる、細胞分化またはアポトーシスをモニターする方法。
40. ラマン散乱信号を検出することにより、式Ｉの化合物の分布を画像化することによって、細胞分化またはアポトーシスをモニターする方法。
41. 式Ｉの化合物の濃度マップの作成を可能にするように、エクスビボ、インビボでまたはインビトロで、式Ｉの化合物の、細胞内または細胞外の濃度および分布をモニターする方法。
42. 式Ｉの化合物から励起されたラマン散乱信号と、式Ｉを有する化合物によって放出される蛍光を、重ね合わせる（ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｉｎｇ）方法。
43. 請求項４０に従って、式Ｉの化合物から励起されたラマン散乱信号から計算された濃度マップと、請求項３７乃至３８に従って、式Ｉを有する化合物によって放出される蛍光を、重ね合わせる（ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓｉｎｇ）方法。
44. １つ以上の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせた、式Ｉの化合物を含む組成物。
45. 式ＸＩＩの化合物を、
    式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ、請求項１で定義した通りであり、そして、
    Ｚは、脱離基を示す；
    式ＸＩの化合物、
    Ｒ^１０Ｈ ＸＩＩＩ
    Ｒ^１０Ｚ ＸＩＶ
    式中、Ｒ^１０は、請求項１で定義した通りである：
    とを反応させることを含む、式Ｉの化合物の製造方法。
46. 式ＸＶの化合物を、
    式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９は、それぞれ、請求項１に規定したとおりである：
    Ｒ^１０Ｚ ＸＩＶ
    式中、Ｒ^１０は、請求項１で定義した通りであり、そして、
    Ｚは 脱離基である：
    とを反応させることを含む、式Ｉの化合物の製造方法。
47. Ｒ^１０が、水素である、式Ｉの化合物を製造する方法であって、Ｒ^１０が、アルキルである、式Ｉの化合物の脱アルキル化を含む方法。
48. 本明細書に添付の説明および図面を参照して説明した、化合物、使用、方法、プローブ、組成物または方法。