JP2017534675A - 脂質化アミド系インスリンプロドラッグ - Google Patents
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Abstract
Description
(電子提出資料の参照による包含)本明細書と同時に提出され、以下のとおりのコンピュータ読み出し可能ヌクレオチド/アミノ酸配列表は、参照によりその全体が本明細書に含まれる(22KB ACIIテキスト、2015年9月22日作成)。
(技術分野)
本開示はインスリンプロドラッグ誘導体に関する。
インスリンは実質的に全ての糖尿病型で絶大なブドウ糖低下能力を示す。残念なことに、インスリンの薬理はブドウ糖感受性ではなく、したがってインスリンは生命にかかわる低血糖をもたらしうる過剰作用を起こしかねない。相反する薬理は、インスリンが低血糖を生じることなく血糖を正常化することが極めて困難であるようにインスリン療法の最重要課題である。さらにまた、自然のままのインスリンは作用時間が短く、基礎ブドウ糖管理での使用に適切であるように改変が要求される。インスリン作用の開始を遅らせる確立されたアプローチには可溶性の低下及びアルブミン結合が含まれる。
市場で入手できるインスリン誘導体のあるものは[LysB29-テトラデカノイル、des(B30)]インスリンである(前記ではLysB29はC14脂肪酸でアシル化されている(Mayer et al., Peptide Science, 88, 5, 687-713))。脂肪酸鎖の存在はペプチドと血清アルブミンの結合を強化し、血漿半減期の延長をもたらす。しかしながら、この誘導体はin vivoでの効能の低下という欠点を抱える。加えて、このインスリン誘導体はまた患者ごとに生物学的作用の変動性を示す。この変動性は、部分的には可溶化及び皮下組織の貯蔵部から血漿循環への移動における相違、並びにk1がk2よりも遅いという事実による。
インスリンのその受容体への結合は生物学的刺激を生じるであろうが、この結合はまたインスリンによって誘発される薬理作用のその後の脱活性化をインスリンペプチドの酵素的分解を介して開始させるであろう。インスリンプロドラッグ誘導体を使用することで付け加えられる利点は、そのようなアプローチはまた対応する受容体によるプロドラッグの認識阻害戦略によってインスリンの生物学的半減期を延長するということである。プロドラッグ誘導体に随伴するこれらの利点にもかかわらず、そのようなプロドラッグの調製の複雑性はこれまで効果的なインスリンプロドラッグ誘導体の調製を妨げてきた。思い通りのプロドラッグホルモンを構築するためには、プロドラッグの構造的エレメントの可逆的付着のための基礎を形成することができる活性部位の構造的対処が要求される。構造的対処は2つの重要な特色を提供しなければならない:(1)選択的な化学的改変のための潜在能力及び(2)プロドラッグの構造要素の除去に際して自然のままの形態で高度な活性を提供する能力。本明細書に開示するインスリンプロドラッグは、受容体によって認識されうる構造に化学的に変換され、この場合、前記化学的変換の速度はin vivoにおける生物学的作用の開始及び持続時間を決定するであろう。本出願で開示するプロドラッグの化学構造は、追加の化学添加物、又は酵素若しくは酵素阻害剤に依存しない分子内化学反応を拠りどころとする。
理想的なプロドラッグは生理学的条件(例えばpH7.2及び37℃)で水溶性であり、長期保存中に散剤形で安定であるべきである。それはまた免疫学的にサイレントであり、親薬剤と比較して低い活性を示すべきである。典型的には、プロドラッグは親薬剤の10%を超えない活性を示すであろう。ある実施態様では、プロドラッグは、親薬剤に対して10%未満、5%未満、約1%、又は1%未満の活性を示す。さらにまた、身体に注射されたとき、プロドラッグは、所定の時間内に活性な薬剤に定量的に変換されるべきである。出願人らは、これらの目的のそれぞれに適合するインスリンプロドラッグを開示する最初の者である。
ある実施態様にしたがえば、インスリンのプロドラッグ誘導体は、アミド結合を介してジペプチドをインスリンペプチドに共有結合させることによって調製され、ここで当該ジペプチドは共有結合により連結される部分(例えば自然のままではないアルキル又はアシル基)を含み、前記部分は哺乳動物の血漿タンパク質(例えば哺乳動物血清アルブミン)を不可逆的に結びつけるために十分なサイズである。生理学的条件下及び酵素活性の非存在下における分子内反応によるその後のジペプチドの除去(ジケトピペラジン又はジケトモルホリン形成をもたらす)によって、当該インスリンペプチドは完全な活性を取り戻す。ある実施態様では、ジペプチドの置換基を選択して、血清中及び生理学的条件下で約2から約168時間又は約12から約168時間の切断半減期が得られる。ある実施態様では、ジペプチドの置換基を選択して、血清中及び生理学的条件下で約0.5日から約10日又は約2から約10日の切断半減期が得られる。
ある実施態様にしたがえば、糖尿病を治療する方法、又は高血圧を治療/予防する方法は、本明細書に開示のインスリンプロドラッグを投与する工程を含む。ある実施態様では、インスリンプリドラッグは、生理学的条件下の血清中でのプロドラッグの半減期に基づいて分割投薬量で毎日投与される。例えば、プロドラッグがn(nは1日以上)の半減期を有するならば、1日の投薬量は、対応する非プロドラッグ形の当該インスリンペプチドの最適投薬量の1/nである。したがって、10日の半減期を有するインスリンプロドラッグは、対応する非プロドラッグ形の当該インスリンペプチドの最適投薬量の1/10で毎日投与される。
Qはインスリンペプチドであり;
Aはアミノ酸又は(C1-C8アルキル)NH2側鎖を含むヒドロキシ酸であり、ここでAの側鎖は、哺乳動物の血漿タンパク質(例えば哺乳動物血清アルブミンを含む)と不可逆的に結合する部分に共有結合により連結される。ある実施態様では、Aの側鎖は、長さが好ましくは少なくとも16、18又は20炭素である、アシル又はアルキル基(脂肪酸、コール酸、胆汁酸の胆汁塩又はステロイド部分を含む)に共有結合により連結される。ある実施態様では、Aの側鎖はC16-C30アシル基又はC16-C30アルキル基に共有結合により連結され;
BはN-アルキル化アミノ酸であり;さらに
Cはアミド結合、X70又はX70X71であり、ここで、X70及びX71は、グリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から独立に選択されるアミノ酸であり、
A-B-Cは、Qの脂肪族アミノ基によるアミド結合を介してQと連結される。任意的に、Aの側鎖とアシル又はアルキル基との間の連結はスペーサーを介し、スペーサーは1つ又は2つの荷電アミノ酸を含む。ある実施態様にしたがえば、構造A-B-Cは、脂肪族アミノ基でアミド結合による連結を介してQに連結され、前記脂肪族アミノ基は、A鎖又はB鎖のN-末端アミノ酸のアルファアミノ基、又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基から選択される。ある実施態様にしたがえば、Bは、C1-C18アルキル、C3-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、又は(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)でN-アルキル化されたアミノ酸である。
ここでQはインスリンペプチドであり、さらにA-B-Cは以下の構造を含み、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2はH又はC1-C6アルキルであり;
R3は、C2-C4アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)、及び(C1-C4アルキル)(C6-C10ヘテロアリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R4及びR8は独立に、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR8は、それらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R5はNHR6又はOHであり;
R6はH又はC1-C8アルキルであり;
R7はH、OH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)NH2、及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R9はC18-C30アシルから成る群から選択され;
R10、R11、R12及びR13は、独立にH、CH2、CHOH、CH2SH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;
S1はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであり、ここでA-B-CはQの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQに連結される。ある実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;R3は、C2-C4アルキルから成る群から選択され;R2、R4、R11及びR13は各々Hであり;R5はNH2であり;R8はH又はC1-C8アルキルであり;R9はC18-C30アシルであり;R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2及び(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択され;さらにS1はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸を含むスペーサーであり、A-B-CはインスリンのB鎖のN-末端アミンを介してアミド結合によりQに連結される。
ここでQはインスリンペプチドであり、さらにA-B-Cは以下の構造を含み、
R1はC18-C30アルキル、(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R3はC2-C4アルキルから成る群から選択され;
R4、R11及びR13は各々Hであり;
R5はNH2であり;
R8はH又はC1-C8アルキルであり;
R9はC18-C30アシルであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであり、ここでA-B-CはQの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQに連結される。ある実施態様では、R1は(CH2)4-S1-NHR9又は(CH2)4NHR9であり;R3は、C3-C4アルキルであり;R5はNH2であり;R9はC18-C28アシルであり;さらにA-B-CはインスリンのB鎖のN-末端アミンを介してアミド結合によりQに連結される。
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され;
X21はアスパラギン、オルニチン、グリシン、アラニン、スレオニン、及びセリンから成る群から選択され;
X25はヒスチジン及びスレオニンから成る群から選択され;
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され;
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、及びシステイン酸から成る群から選択され;
X33はアスパラギン酸及びグルタミン酸から成る群から選択され;
X34はアラニン及びスレオニンから成る群から選択され;
X41はグルタミン酸、アスパラギン酸又はアスパラギンから成る群から選択され;
X42はアラニン、オルニチン、リジン及びアルギニンから成る群から選択され;
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり;
R22は、AYRPSE(配列番号:14)、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、PGPE(配列番号:11)、トリペプチドのグリシン-プロリン-グルタミン酸、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのプロリン-グルタミン酸、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、及びN-末端アミンから成る群から選択され;さらに
R44はCOOH又はCONH2である。
R22は結合であるか、又はFVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、VNQ、NQ及びQから成る群から選択される1から4アミノ酸の配列であり;
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され;
X21はアスパラギン、リジン、グリシン、アラニンから成る群から選択され;さらに
X45はヒスチジン、チロシン又はフェニルアラニンである。
ある実施態様では、A鎖は配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN-R44(配列番号:1)を含み、前記B鎖は、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)、FVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む(式中R44はCOOH又はCONH2である)。
ある実施態様では、プロドラッグのエレメントのアミノ酸A及び/又はBはD立体異性体配置のアミノ酸である。いくつかの例示的実施態様では、AはD立体異性体の立体配置のアミノ酸であり、BはL立体異性体配置のアミノ酸である。いくつかの例示的実施態様では、AはL立体異性体の立体配置のアミノ酸であり、BはD立体異性体の立体配置のアミノ酸である。いくつかの例示的実施態様では、AはD立体異性体立体配置のアミノ酸であり、BはD立体異性体立体配置のアミノ酸である。ある実施態様では、BはN-アルキル化アミノ酸であるが、置換プロリン又はプロリンアナローグではない。
Zは、B鎖のN-末端アミノ酸又はB鎖のB28若しくはB29の側鎖の脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQと連結され;
R1は、H、C18-C30アルキル、(C1-C4アルキル)NHR9、(C1-C4アルキル)O-S1-R9、(C1-C4アルキル)S-S1-R9、(C1-C4アルキル)CONH-S1-R9、(C1-C4アルキル)COO-S1-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、及び(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)-S1-R9から成る群から選択され;
R2及びR8は独立に、H、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONHH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NHH、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキルから成る群から選択されるか(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子である)、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキル又はアリールを形成し;
R3は、C1-C18アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)であるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R4はH、C1-C18アルキル、(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R5はOH、NHR6又はNHR9であり;
R6はH、C1-C8アルキルであり;
R7はH、OH及びOR9から成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は独立に、H、CH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであるが、ただしR4がH又はC1-C18アルキルであるときR1はH以外であることを条件とする。ある実施態様では、R1は(CH2)4-S1-NHR9又は(CH2)4NHR9であり;R3はC3-C4アルキルであり;R5はNH2であり;さらにR9はC18-C28アシルであり、Zはアミド結合によりインスリンのB鎖のN-末端アミンに連結される。
さらに別の実施態様では、本発明のインスリンプロドラッグは、保存中及び患者への投与前のペプチドプローブの切断を防ぐためにさらに改変される。ある実施態様では、ペプチドプロドラッグエレメントのN-末端アミンは、N-末端との結合状態を患者への投与まで維持する部分に連結される。ある実施態様では、式A-B-C-Qのインスリンプロドラッグはさらに血清酵素切断性部分を含み、前記部分はAのN-末端アミンを介してAに連結される。ある実施態様では、酵素切断性部分は、ジペプチジルペプチダーゼIV(DPP-IV)によって切断されるペプチドである(例えばArg-Pro、Lys-Pro又はGlu-Proを含む)。
アシル化又はアルキル化は循環中のインスリンペプチドの半減期を増加させることができる。アシル化又はアルキル化は作用の開始を有益に遅らせるか、及び/又はプロドラッグの活性化時にインスリン受容体での作用の持続時間を延長することができる。インスリンアナローグは、親水性部分が連結される同じアミノ酸場所で、又は異なるアミノ酸場所でアシル化又はアルキル化されうる。
ある実施態様にしたがえば、インスリン依存患者の血糖レベルの調節の改善方法が提供される。前記方法は、本明細書開示のインスリンプロドラッグアナローグを糖尿病の管理に治療的に有効な量で投与する工程を含む。ある実施態様では、インスリンプロドラッグアナローグは、高親和性を有するアルブミンの結合に十分なサイズのアシル基でアシル化されるか、及び/又は約5,000から約40,000ダルトンの範囲から選択される分子量を有するPEG鎖でPEG化される。
本発明を記述しさらに特許請求の範囲を記載するに際して、下記に説明する定義にしたがって以下の用語が用いられるであろう。
本明細書で用いられるように、“プロドラッグ”という用語は、その薬理学的効果を示す前に化学的改変を経る任意の化合物と定義される。
“生物活性ポリペプチド”は、in vitro及び/又はin vivoで生物学的作用を示すことができるポリペプチドを指す。
本明細書で用いられるように“アミノ酸”という用語は、アミノ及びカルボキシ官能基の両方を含む任意の分子を包含し、ここでアミノ及びカルボキシレート基は同じ炭素(アルファ炭素)に結合される。アルファ炭素は、任意的に1つ又は2つの更なる有機置換基を有することができる。その立体空間配置が特定されないアミノ酸の指定は、当該アミノ酸のL若しくはD型又はラセミ混合物のどちらかを包含することを意図する。しかしながら、アミノ酸がその三文字コードによって指定されかつ上付き数字を含む場合には、当該アミノ酸のD型は三文字コードの前の小文字d及び上付き数字を含むことによって特定され(例えばdLys-1)、小文字を欠く指定(例えばLys-1)は当該アミノ酸の自然のままのL型を特定することを意図する。この命名法では、上付き数字の含有はIGFペプチド配列におけるアミノ酸の位置を指定し、この場合、IGF配列内に位置するアミノ酸はN-末端から連続して番号付けされる正の上付き数字によって指定される。N-末端で又は側鎖を介してIGFペプチドに連結される追加アミノ酸は、0で始まりIGF配列からさらに移動するにつれ負の整数値として増加する番号が付与される。例えば、IGFのN-末端に連結されるジペプチド内のアミノ酸の位置は、aa-1-aa0-IGFと指定される(ここでaa0はジペプチドのカルボキシ末端アミノ酸を表しaa-1はジペプチドのアミノ末端アミノ酸を示す)。
本明細書で用いられるように“非コードアミノ酸”という用語は、以下の20アミノ酸(Ala、Cys、Asp、Glu、Phe、Gly、His、Ile、Lys、Leu、Met、Asn、Pro、Gln、Arg、Ser、Thr、Val、Trp、Tyr)のいずれかのL-異性体ではないアミノ酸を包含する。
“ジペプチド”は、アルファアミノ酸又はアルファヒドロキシ酸と別のアミノ酸のペプチド結合を介する連結によって形成される化合物である。
本明細書で定義するペプチドプロドラッグエレメントは、N-末端自己切断ジペプチドを含むペプチドであり、ここで当該ジペプチドは、生理学的条件下で偶発的にアミド結合の化学的切断を経てジケトピペラジン又はジケトモルホリンを形成する。ペプチドプロドラッグエレメントはジペプチドから成りうるが、自己切断ジペプチドのカルボキシ末端にアミド結合を介して連結される追加のアミノ酸を含むことも可能である。
本明細書で用いられるように、更なる指定が全くない“化学的切断”という用語は、化学的共有結合の破壊をもたらす非酵素的反応を包含する。
血清酵素切断性部分は、ペプチドに共有結合により連結され酵素活性の非存在下で安定な構造を形成できる化合物である。哺乳動物の血清で見出される酵素への暴露に際して、当該完全部分はペプチドから切断される。例えば、血清酵素切断性部分は、アミド結合を介してポリペプチドに連結される血清酵素切断性ペプチドであることができ、ここで当該酵素切断性ペプチドはジペプチジルペプチダーゼIV(DPP-IV)による切断に感受性である。
本明細書で用いられるように、ペプチドと一般的にいう場合は、改変されたアミノ及びカルボキシ末端を有するペプチドを包含することが意図される。例えば、標準的アミノ酸を指定するアミノ酸配列は、N-及びC-末端の標準的アミノ酸とともにN-末端の対応するヒドロキシ酸及び/又は末端カルボン酸の代わりにアミドを含むように改変された対応するC-末端アミノ酸を含むことが意図される。
本明細書で用いられるように“アシル化”アミノ酸は、生成される手段に関係なく、天然に存在するアミノ酸と対比して自然のままではないアシル基を含むアミノ酸である。アシル化アミノ酸及びアシル化ペプチドを生成する例示的方法は当業界で公知であり、ペプチドへの挿入前にアミノ酸をアシル化する方法又はペプチド合成の後で当該ペプチドを化学的にアシル化する方法が含まれる。ある実施態様では、アシル基によってペプチドは以下の1つ以上を有するようになる:(i)循環中の半減期の延長、(ii)作用開始の延期、(iii)作用持続時間の延長、(iv)プロテアーゼ(例えばDPP-IV)耐性の改善、及び(v)インスリンペプチド受容体での効能の増加。
本明細書で用いられるように、“アルキル化”アミノ酸は、生成される手段に関係なく、天然に存在するアミノ酸と対比して自然のままではないアルキル基を含むアミノ酸である。アルキル化アミノ酸及びアルキル化ペプチドを生成する例示的方法は当業界で公知であり、ペプチドへの挿入前にアミノ酸をアルキル化する方法又はペプチド合成の後で当該ペプチドを化学的にアルキル化する方法が含まれる。いずれの特定の理論にも拘束されないが、ペプチドのアルキル化は、ペプチドのアシル化と(たとえ同じでないとしても)類似する効果(例えば循環中の半減期の延長、作用開始の延期、作用持続時間の延長、プロテアーゼ(例えばDPP-IV)耐性の改善、及びインスリンペプチド受容体での効能の増加)を達成するであろうと考えられる。
本明細書で用いられるように“医薬的に許容できる塩”という用語は、親化合物の生物学的活性を保持する化合物の塩を指し、さらに当該塩は生物学的に又は他の態様でも望ましくないものではない。本明細書に開示する化合物の多くが、アミノ及び/又はカルボキシル基又はそれらに類似する基の存在により酸及び/又は塩基塩を形成することができる。
医薬的に許容できる塩基付加塩は無機及び有機塩基から調製することができる。無機塩基から誘導される塩には、単に例示としてナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム及びマグネシウム塩が含まれる。有機塩基から誘導される塩には第一、第二及び第三アミンの塩が含まれるが、ただしこれらに限定されない。
医薬的に許容できる酸付加塩は無機及び有機酸から調製できる。無機酸から誘導される塩は塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含む。有機酸から誘導される塩は酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、サリチル酸などを含む。
本明細書で用いられるようにプロドラッグの“有効な量”又は“治療的に有効な量”は、所望の効果を提供するために無害であるが十分な量を指す。例えば、所望される効果のあるものは高血糖症の予防又は治療であろう。“有効な”量は、個体の年齢及び一般的状態、投与態様などに応じて対象動物ごとに変動するであろう。したがって、厳密な“有効量”を特定することは常に可能であるとは限らない。しかしながら、任意の個体例における適切な“有効”量は、当業者が日常的な実験を用いて決定できる。
“非経口的”という用語は、消化管を介さないでいくつかの他のルート(例えば鼻内、吸収、皮下、筋肉内、脊髄内又は静脈内)を介することを意味する。
本明細書で用いられるように、“単鎖インスリンアナローグ”という用語は、インスリンA鎖及びB鎖が直鎖として共有結合により連結される、構造的に関連するタンパク質の一群を包含する。
本明細書で用いられるように“置換”は1つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で入れ替えることを指す。本出願を通して、文字及び数字による具体的なアミノ酸の言及は全て、自然のままのヒトインスリンA鎖(配列番号:1)若しくはB鎖(配列番号:2)又は前記の任意のアナローグの対応するアミノ酸の位置と対比させたA鎖(例えばA5位)又はB鎖(例えばB5位)の位置のアミノ酸を指す。例えば、本明細書で(更なる説明を全く含まずに)“B28位”と言えば、配列番号:2の第一のアミノ酸が欠失しているインスリンアナローグのB鎖の対応するB27位を意味するであろう。
本明細書で用いられるように“保存的アミノ酸置換”という用語は、本明細書では以下の5グループの1つの中での交換と定義される:
I. 小さな脂肪族の非極性又はわずかに極性の残基:Ala、Ser、Thr、Pro、Gly;
II. 極性の陰性荷電残基及びそれらのアミド:Asp、Asn、Glu、Gln;
III.極性の陽性荷電残基:His、Arg、Lys、オルニチン(Orn);
IV. 大きな脂肪族の非極性残基:Met、Leu、Ile、Val、Cys、ノルロイシン(Nle)、ホモシステイン;
V. 大きな芳香族残基:Phe、Tyr、Trp、アセチルフェニルアラニン。
本明細書で用いられるように“PEG化”という用語及び同様な用語は、ある化合物にポリエチレングリコール鎖を連結することによってその自然のままの状態から改変されてある化合物を指す。“PEG化ポリペプチド”は、PEG鎖が当該ポリペプチドに共有結合されたポリペプチドである。
本明細書で用いられるように“リンカー”は、2つの別個の実体を結合させて別の1つの実体にする結合、分子又は分子群である。リンカーは2つの実体の最適な間隙を提供することができ、さらにまた2つの実体を互に分離させることができる不安定な結合を供給することができる。不安定な結合には光切断性基、酸不安定性部分、塩基不安定性部分、及び酵素切断性基が含まれる。
本明細書で用いられるように“インスリンダイマー”は、リンカーを介して互に共有結合された2つのインスリンペプチドを含む複合体である。インスリンダイマーという用語は、制限的語句を全く含まずに用いられるときインスリンホモダイマー及びインスリンヘテロダイマーの両方を包含する。インスリンホモダイマーは2つの同一のサブユニット(各々はA鎖及びB鎖を含む)を含み、一方、インスリンヘテロダイマーは、異なる2つのサブユニット(各々はA鎖及びB鎖を含む)を含むが、ただしこの2つのサブユニットは実質的に互いに類似する。
本明細書で用いられる“C2-Cnアルケニル”という用語は、2から規定数の炭素原子及び少なくとも1つの二重結合を有するオレフィン系列不飽和の分枝又は直鎖基を表す。そのような基の例には、1-プロペニル、2-プロペニル(-CH2-CH=CH2)、1,3-ブタジエニル(-CH=CHCH=CH2)、1-ブテニル(-CH=CHCH2CH3)、ヘキセニル、ペンテニルなどが含まれるが、ただしこれらに限定されない。
“C2-Cnアルキニル”という用語は、2からn炭素原子及び少なくとも1つの三重結合を有する不飽和の分枝又は直鎖基を表す。そのような基の例には、1-プロピニル、2-プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、1-ペンチニルなどが含まれるが、ただしこれらに限定されない。
本明細書で用いられるように“アリール”という用語は、1つ又は2つの芳香環を有する単環式又は二環式炭素環式環系と定義され、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどが含まれるがただしこれらに限定されない。アリール環のサイズ及び置換基又は連結基の存在は、存在する炭素の数を指定することによって示される。例えば“(C1-C3アルキル)(C6-C10アリール)”という用語は、親部分に1から3員のアルキル鎖を介して結合される6から10員のアリールを指す。
“C3-Cnシクロアルキル”という用語は、非芳香環性、単環式又は多環式環であり存在する炭素原子の数を示す下付き数字を有する炭素及び水素原子を含むものと定義される。例えば、C3-C8シクロアルキルという用語は、化合物シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルを表す。
“C3-Cn複素環”という用語は、1つから“n−1”個のヘテロ原子を含むシクロアルキル環系と定義され、ここでヘテロ原子は酸素、硫黄及び窒素から成る群から選択される。例えば“5員の複素環”又は“C5複素環”という用語には、1つのヘテロ原子を含む5員の複素環(例えばチオフェン、ピロール、フラン);1,2又は1,3位に2つのヘテロ原子を含む5員の複素環(例えばオキサゾール、ピラゾール、イミダゾール、チアゾール、プリン);3つのヘテロ原子を含む5員の複素環(例えばトリアゾール、チアジアゾール)が含まれるが、ただしこれらに限定されない。
本明細書で用いられるように“ハロ”という用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素から成る群の1つ以上のメンバーと定義される。
本明細書で用いられるように“荷電アミノ酸”という用語は、生理学的pHの水溶液中で陰性に荷電する(すなわち脱プロトン化する)又は陽性に荷電する(すなわちプロトン化する)側鎖を含むアミノ酸と定義される。例えば、陰性荷電アミノ酸にはアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、及びホモグルタミン酸が含まれ、一方、陽性荷電アミノ酸にはアルギニン、リジン及びヒスチジンが含まれる。荷電アミノ酸は、ヒトのタンパク質で通常的に見いだされる20アミノ酸の中の荷電アミノ酸とともに非定型又は天然に存在しないアミノ酸も同様に含む。
本明細書で用いられるように、更なる指定を含まない“患者”という用語は、飼い馴らされた温血脊椎動物(例えば家畜、ウマ、ネコ、イヌ及び他のペットを含むが、ただしこれらに限定されない)、哺乳動物及び人間を包含することが意図される。
本明細書で用いられるように“血漿タンパク質との不可逆結合”又は“血清アルブミンとの不可逆結合”という語句は、結合された血漿タンパク質/血清アルブミンが生理学的条件下で実質的に遊離されない、高親和性結合と定義される。アシル化インスリンの文脈では、アルブミンと“不可逆的に結合する”ために十分に大きいアシル又はアルキル基は、患者への投与に際して血糖を低下させる基礎インスリンペプチドの能力を、投与後6時間経過したとき、当該アシル又はアルキル基を欠く同じインスリンペプチドで達成される能力の10%未満に抑制するアシル又はアルキル基と定義される。
特定の実施態様では、インスリンアナローグはコレステロール酸を含み、前記コレステロール酸は、アルキル化des-アミノCysスペーサー(すなわちアルキル化3-メルカプトプロピオン酸スペーサー)を介してインスリンアナローグのLys残基に連結される。アルキル化des-アミノCysスペーサーは、例えばドデカエチレングリコール部分を含むdes-アミノCysスペーサーでありうる。
この新規な生物体にやさしいプロドラッグ化学構造は生理学的条件下で(例えば水性環境下でpH約7、37℃)偶発的に分解し、ここで、プロドラッグエレメントの切断は結合された血漿タンパク質(例えばアルブミン)をインスリンペプチドから分離させて当該インスリンペプチドに活性を取り戻させる。ある実施態様では、アシル又はアルキル基が本明細書に開示のペプチドプロドラッグエレメントに連結され(ここでアルキル又はアシル基は直鎖状又は分枝状)、さらにある実施態様では、前記はC18からC30の炭化水素骨格の鎖である。例えばアシル又はアルキル基はC18、C20、C22、C24、C26、C28又はC30の炭化水素骨格鎖のいずれかでありうる。ある実施態様では、開示するプロドラッグの化学構造は、C16からC20の脂肪酸(例えばC18脂肪酸又はC20脂肪酸)に化学的に連結される。プロドラッグ誘導体の持続時間はペプチドプロドラッグエレメントの配列を選択することによって決定され、したがってプロドラッグ処方物の融通性を可能にする。
有利には、プロドラッグの切断(したがって活性化)の速度は、ジペプチドプロ部分の構造及び立体空間配置さらにまた求核性の強度に左右される。本明細書に開示するプロドラッグは最終的には、当該薬剤の自然のままの受容体によって認識されうる構造に化学的に変換され、この場合、この化学的変換の速度はin vivoの生物学的作用の開始時間及び持続時間を決定するであろう。本出願で開示するプロドラッグの化学構造は、追加の化学添加物又は酵素に依存しない分子内化学反応を拠りどころとする。変換の速度はジペプチドの置換基の化学的性質及び生理学的条件下でのその切断によって制御される。生理学的pH及び温度は高度に規定された範囲内で厳密に調節されるので、プロドラッグからドラッグ(薬剤)への変換の速度は一患者内でさらに患者間で高い再現性を示すであろう。
生理学的条件下で分子内分解を促進して活性インスリンペプチドを遊離させる、天然又は合成アミノ酸から構成される具体的なジペプチドが同定された。ペプチドは、自然のままのインスリンに存在するアミノ基に、又は自然のままのインスリンペプチドを改変することによりインスリンに導入されたアミノ基に(アミド結合を介して)連結できる。追加のアミノ酸をジペプチドのカルボキシ末端に付加して、トリペプチド又はテトラペプチド(前記はアミド結合を介してインスリンペプチドに連結できる)を生成することができる。追加の1つ又は2つのアミノ酸が最初のジペプチドエレメントに付加されてあるそれら実施態様では、ジケトピペラジン又はジケトモルホリンを形成するジペプチドの切断に際して、追加の1つ又は2つのアミノ酸はインスリンペプチドに付着されたままであろう。ある実施態様では、1つ又は2つの追加アミノ酸は荷電アミノ酸である。
本明細書に開示するように、ある実施態様では、インスリンプロドラッグのプロドラッグエレメントのA又はBアミノ酸は、A又はBの側鎖のアミン、ヒドロキシル又はチオ―ルの直接的又はスペーサー部分を介するアシル化によってアシル基を含むように改変される。ある実施態様にしたがえば、C16-C30アシル基又はC16-C30アルキル基はスペーサーを介してAに連結され、ここでスペーサーはインスリンペプチドのアミノ酸とアシル又はアルキル基との間に配置される。例示的実施態様では、スペーサーは、アミノ酸、ジペプチド若しくはトリペプチド、又は親水性二官能基スペーサーである。
ある実施態様では、スペーサーは1つ又は2つの荷電アミノ酸を含む。ある実施態様では、スペーサーはただ1つの荷電アミノ酸である。別の実施態様では、スペーサーはジペプチドであり、ここでジペプチドは1つ又は2つの荷電アミノ酸を含む。ある実施態様では、スペーサーはAsp、Glu、His、Arg、Lys及びNH2(CH2CH2O)n(CH2)mCOOHを含むスペーサーから成る群から選択される(式中、mは1から6の任意の整数で、nは2から12の任意の整数である)。ある実施態様では、Aは、ジペプチドガンマグルタミン酸-ガンマグルタミン酸スペーサーを介してC18-C22脂肪酸でアシル化された(C1-C8アルキル)NH2側鎖を含む。
ある実施態様にしたがえば、式A-B-CのCはアミノ酸又はジペプチドである。ある実施態様では、Cを含むアミノ酸は、以下から成る群から独立に選択される側鎖を有する少なくとも1つのアミノ酸を含む:H、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)SO3H、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2。ある実施態様では、Cはジペプチドであり、ここでジペプチドのアミノ酸の一方又は両方が、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)SO3H、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択される側鎖を含む。ある実施態様では、Cのアミノ酸は、独立にグリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される。ある実施態様では、Cのアミノ酸は、独立にグリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される。
R1は、C18-C30アルキル、(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2はH又はC1-C6アルキルであり;
R3は、C2-C4アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R4及びR8は独立に、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R5はNHR6又はOHであり;
R6はH又はC1-C8アルキルであり;
R7はH、OH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)NH2、及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R9はC18-C30アシルから成る群から選択され;
R10、R11、R12及びR13は独立にH、CH2、CH2OH、CH2SH、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであり、ここでA-B-Cは、Qの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQに連結される。ある実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;R3はC2-C4アルキルから成る群から選択され;R2、R4、R11及びR13は各々Hであり;R5はNH2であり;R8はH又はC1-C8アルキルであり;R9はC18-C30アシルであり;R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらにS1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸を含むスペーサーであり、A-B-Cは、インスリンのB鎖のN-末端アミンを介してアミド結合によりQに連結される。
R1はC18-C30アルキル、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R3はC2-C4アルキルから成る群から選択され;
R4、R11及びR13は各々Hであり;
R5はNH2であり;
R8はH又はC1-C8アルキルであり;
R9はC18-C30アシルであり;さらに
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであり、ここでA-B-Cは、Qの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQに連結される。ある実施態様では、R1は(CH2)4-S1-NHR9又は(CH2)4-NHR9であり、R3はC3-C4アルキルであり、R5はNH2であり、R9はC18-C28アシルであり、A-B-Cは、インスリンのB鎖のN-末端アミンを介してアミド結合によりQに連結される。
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され、
X21はアスパラギン、オルニチン、グリシン、アラニン、スレオニン及びセリンから成る群から選択され、
X25はヒスチジン及びスレオニンから成る群から選択され、
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され、
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、及びシステイン酸から成る群から選択され、
X33はアスパラギン酸及びグルタミン酸から成る群から選択され、
X34はアラニン及びスレオニンから成る群から選択され、
X41はグルタミン酸、アスパラギン酸又はアスパラギンから成る群から選択され、
X42はアラニン、オルニチン、リジン及びアルギニンから成る群から選択され、
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり、
R22は、AYRPSE(配列番号:14)、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、PGPE(配列番号:11)、トリペプチドのグリシン-プロリン-グルタミン酸、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのプロリン-グルタミン酸、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、及びN-末端アミンから成る群から選択され、
さらにR44はCOOH又はCONH2である。
R22は、結合又は、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、VNQ、NQ及びQから成る群から選択される1から4アミノ酸の配列であり、
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され、
X21はアスパラギン、リジン、グリシン、アラニンから成る群から選択され、さらに
X45はヒスチジン、チロシン又はフェニルアラニンである。
ある実施態様では、A鎖は配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN-R44(配列番号:1)を含み、B鎖は、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)、及びFVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む(式中R44はCOOH又はCONH2である)。
ある実施態様では、生理学的条件下の血清中でQから切断されるA-B-Cの切断半減期は約2から約168時間である。別の実施態様では、生理学的条件下の血清中におけるQからのA-B-Cの切断半減期は約0.5日から約10日である。
Aは(C1-C4アルキル)NH2側鎖を含むアミノ酸であり、ここで、前記側鎖は血漿タンパク質に不可逆的に結合する部分と共有結合により連結され、前記部分はスペーサーを介してAの側鎖に連結され、前記スペーサーは1つ又は2つの荷電アミノ酸を含み;
BはN-アルキル化アミノ酸であり;
Cはアミド結合、X70又はX70X71であり、ここでX70及びX71は、H、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)SO3H、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から独立に選択される側鎖を有するアミノ酸であり;
A-B-Cは、Qの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQと連結され、前記脂肪族アミノ基は、A鎖若しくはB鎖のN-末端アミノ酸のアルファアミノ基又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基から選択される。ある実施態様では、血漿タンパク質に不可逆的に結合する部分はC16-C30アシル基又はC16-C30アルキルであり、ここでAの側鎖と前記アシル又はアルキル基との間の連結は前記スペーサーを介する。ある実施態様では、Cはアミノ酸又はジペプチドであり、ここでCのアミノ酸は、グリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される。ある実施態様では、Cはジペプチドであり、ここで前記ジペプチドのアミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される。ある実施態様では、Cはジペプチドであり、ここで前記2つのアミノ酸の一方はグリシン又はアラニンであり、ジペプチドの他方のアミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される。さらに別の実施態様では、Bは、C1-C18アルキル、C3-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、又は(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)でN-アルキル化されたアミノ酸である。
R1は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2はH又はC1-C6アルキルであり;
R3は、C2-C4アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R4及びR8は独立に、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R10、R11、R12及びR13は独立にH、CH3、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;
R5はNHR6又はOHであり;
R6はH又はC1-C8アルキルであり;
R7はH、OH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)NH2、及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R9はC18-C30アシルから成る群から選択され;
S1は結合又は1つから6つのアミノ酸から成るスペーサーであり、ここで前記スペーサーはアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択される1つ以上の荷電アミノ酸を含む。ある実施態様では、S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
R3はC2-C4アルキルから成る群から選択され、
R4、R11及びR13は各々Hであり、
R5はNH2であり、
R8はH又はC1-C8アルキルであり、
R9はC18-C30アシルであり、
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、及び(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択され、さらに
S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであり、インスリンのA若しくはB鎖のN-末端アミノ基に又はB3、B28若しくはB29位のリジンの側鎖に連結される。ある実施態様では、S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。ある実施態様では、式A-B-Cによって表されるペプチドは、インスリンのB鎖のN-末端アミノ基に連結される。さらに別の実施態様では、R1は(CH2)4-R9又は(CH2)4-S1-NHR9であり、R3はC3-C4アルキルであり、R5はNH2であり、さらにR9はC18-C28アシルである。さらに別の実施態様では、R1は(CH2)4NHCO(CH2)17CH3、(CH2)4NHCO(CH2)19CH3及び(CH2)4NHCO(CH2)21CH3から成る群から選択される。
R1は、H、(C1-C4アルキル)O-S1-R9、(C1-C4アルキル)S-S1-R9、(C1-C4アルキル)CONH-S1-R9、(C1-C4アルキル)COO-S1-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、(C1-C6アルキル)NHR9及び(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)-S1-R9から成る群から選択され;
R2及びR8は、独立にH、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONHH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NHH、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)であるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキル又はアリールを形成し;
R3は、C1-C18アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)であるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R4はH、C1-C18アルキル、(C1-C6アルキル)NHR9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R5はOH又はNHR6であり;
R6はH、C1-C8アルキルであり;
R7はH、OH及びOR9から成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々H又はC1-C6アルキルであり;
R10及びR12は、独立にH、CH3、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は結合又は1つから6つのアミノ酸から成るスペーサーであり、ここで前記スペーサーは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ以上の荷電アミノ酸を含むが、ただしR4がH又はC1-C18アルキルであるときR1はH以外であることを条件とする。さらに別の実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NHR9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、R2、R4、R11及びR13は各々Hであり、R5はNH2であり;R8はH又はC1-C8アルキルであり、R9はC18-C30アシルであり、さらにS1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。別の実施態様では、R1は(C3-C5アルキル)NH-S1R9又は(C3-C5アルキル)NHR9であり、R2、R4、R11及びR13は各々Hであり、R5はNH2であり;R8はH又はC1-C8アルキルであり、さらにR9はC18-C30アシルである。
A-B-Cは、A鎖若しくはB鎖のN-末端アミノ酸又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQと連結され;R2、R4、R8、R11及びR13は各々Hであり;R1は(C1-C6アルキル)NHR9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;R3は、C2-C8アルキルであり;R5はNH2であり;R10及びR12は独立に、H、CH3、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;R9はC18-C30アシル及びC18-C30アルキルから成る群から選択され;さらにS1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。さらに別の実施態様では、R1は(CH2)4NHR9又は(CH2)4NH-S1-R9であり、R3はC3-C4アルキルであり、R9はC18-C28アシルである。
ある実施態様にしたがえば、本明細書に開示するプロドラッグのインスリン構成要素は、GIVX4X5CCX8X9X10CX12LX14X15LX17X18YCX21-R44(配列番号:19)のA鎖配列及びR22-X25LCGX29X30LVX33X34LYLVCGX41X42GFX45(配列番号:20)のB鎖配列を含み(前記B鎖はジスルフィド結合を介して前記A鎖に連結される)、
X4はグルタミン酸又はアスパラギン酸であり、
X5はグルタミン又はグルタミン酸であり、
X8はヒスチジン、スレオニン又はフェニルアラニンであり、
X9はセリン、アルギニン、リジン、オルニチン又はアラニンであり、
X10はイソロイシン又はセリンであり、
X12はセリン又はアスパラギン酸であり、
X14はチロシン、アルギニン、リジン、オルニチン又はアラニンであり、
X15はグルタミン、グルタミン酸、アルギニン、アラニン、リジン、オルニチン又はロイシンであり、
X17はグルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、リジン、オルニチン又はグルタミンであり、
X18はメチオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸又はスレオニンであり、
X21は、アラニン、グリシン、セリン、バリン、スレオニン、イソロイシン、ロイシン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、ヒスチジン、トリプトファン、チロシン、及びメチオニンから成る群から選択され、
X25はヒスチジン又はスレオニンであり、
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され、
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸及びシステイン酸から成る群から選択され、
X33はアスパラギン酸及びグルタミン酸から成る群から選択され、
X34はアラニン及びスレオニンから成る群から選択され、
X41はグルタミン酸、アスパラギン酸又はアスパラギンから成る群から選択され、
X42はアラニン、オルニチン、リジン及びアルギニンから成る群から選択され、
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり、
R22はAYRPSE(配列番号:14)、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、PGPE(配列番号:11)、トリペプチドのグリシン-プロリン-グルタミン酸、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのプロリン-グルタミン酸、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、及びN-末端アミンから成る群から選択され;さらに
R44はCOOH又はCONH2である。
A-B-Cは、A鎖又はB鎖のN-末端アミノ酸又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQに連結され;
R1は、H、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C4アルキル)O-S1-R9、(C1-C4アルキル)S-S1-R9、(C1-C4アルキル)CONH-S1-R9、(C1-C4アルキル)COO-S1-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、(C1-C6アルキル)NHR9、及び(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)-S1-R9から成る群から選択され;
R2及びR8は独立に、H、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONHH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NHH、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキル又はアリールを形成し;
R3は、C1-C18アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)であるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R4は、H、C1-C18アルキル又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R5はOH又はNHR6であり;
R6はH、C1-C8アルキルであり;
R7はH、OH及びOR9から成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は結合又は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであるが、ただしR4がH又はC1-C18アルキルであるときR1はH以外であることを条件とする。ある実施態様では、R1は(C3-C5アルキル)NH-S1-R9又は(C3-C5アルキル)NHR9であり;R2、R4、R11及びR13は各々Hであり;R5はNH2であり;R8はH又はC1-C8アルキルであり;R9はC18-C30アシルであり;R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、及び(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択され;さらにS1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。ある実施態様では、R3はC1-C8アルキルであるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成する。ある実施態様では、R1は(CH2)4NHR9又は(CH2)4NH-S1-R9であり、R3はC3-C4アルキルであり、さらにR9はC18-C28アシルである。
ある実施態様にしたがえば、高血糖症又は糖尿病を治療する方法が提供され、前記方法は、本明細書に開示するインスリンプロドラッグを含む医薬組成物の有効量を投与する工程を含む。ある実施態様では、インスリンプロドラッグは哺乳動物の血清中で1日より長い半減期を有するように設計される。そのような実施態様では、インスリンプロドラッグは、当該インスリンタンパク質の対応する活性な非プロドラッグが投与される場合に投与されるはずの投薬量の一部分である一日の投薬量で投与されうる。ある実施態様では、プロドラッグは、対応する非プロドラッグインスリンペプチドの最適投薬量の一部分、1/nで毎日投与される(ここでnは生理学的条件下の血清でA-B-CがQから切断される半減期(日数による)を表す)。
ジペプチドプロドラッグエレメントは、生理学的条件下及び酵素活性の非存在下で当該インスリンアナローグとのアミド結合を偶発的に切断するように設計される。ある実施態様では、ジペプチド伸長部のN-末端アミノ酸はC-アルキル化アミノ酸(例えばアミノイソ酪酸)を含む。ある実施態様では、ジペプチドのC-末端アミノ酸はN-アルキル化アミノ酸(例えばプロリン又はN-メチルグリシン)を含む。ある実施態様では、ジペプチドは、N-アルキル化アミノ酸がその後に続くN-末端C-アルキル化アミノ酸の配列を含む。
R1及びR8は、独立にH、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C5アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W)C1-C12アルキル(式中、WはN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキル又はアリールを形成し;
R2及びR4は、独立にH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C5アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W)C1-C12アルキル(式中、WはN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R3は、C1-C18アルキル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)NH2、(C1-C18アルキル)SH、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、及び(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R5はNHR6又はOHであり;
R6はH、C1-C8アルキルであるか、又はR6及びR2はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R7はH及びOHから成る群から選択されるが、ただしR4及びR3がそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成するときは、R1及びR2はともにH以外であることを条件とし;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は結合又は1−6ペプチドを含むスペーサーであり、ここで前記1−6ペプチドは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1、2又は3つの荷電アミノ酸を含むが、ただしR1又はR8の一方が(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であることを条件とする。ある実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、R2及びR4はHである。
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2及びR8はH又はC1-C8アルキルであり;
R4は、H、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、及びCH2(C3-C9ヘテロアリール)から成る群から選択され;
R3は、C1-C8アルキル、(C3-C6)(C5-C6シクロアルキル)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に5又は6員の複素環式環を形成し;
R5はNHR6であり;
R6はH、C1-C8アルキルであり;さらに
R7は水素、C1-C18アルキル、(C0-C4アルキル)COOH、(C0-C4アルキル)NH2、(C0-C4アルキル)OH及びハロから成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
ある実施態様では、下記一般式のプロドラッグエレメントが提供され、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2はHであり;さらに
R4は、独立にH、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7及びCH2(C5-C9ヘテロアリール)から成る群から選択され;
R3は、C1-C8アルキル、(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C5-C10シクロアルキル)及びCH2(C5-C9ヘテロアリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に5又は6員の複素環式環を形成し;
R5はNH2であり;
R7はH及びOHから成る群から選択され;
R8はHであり;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであるが、ただしR4がH又はC1-C18アルキルであるときR1はH以外であることを条件とする。ある実施態様では、R3はC1-C8アルキルであり、R4はH、C1-C6アルキル、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7及びCH2(C5-C9ヘテロアリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に5又は6員の複素環式環を形成する。
ある実施態様では、一般構造A-B-C-Q(Qはインスリンペプチド)を有するインスリンプロドラッグが提供され、前記インスリンペプチドはA及びB鎖を含み、ここでA鎖は配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN(配列番号:1)を含み、B鎖は、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)、FVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含み、さらにA-B-Cは下記の構造を有するペプチドプロドラッグエレメントであり、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2は水素及びC1-C8アルキルから成る群から選択され;
R3はC1-C8アルキルであり;
R4はH、C1-C8アルキル又は(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7であり;
R5はNH2であり;
R7は水素、C1-C8アルキル及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R8は水素であり;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。さらに別の実施態様では、R2は水素であり;R3はC1-C18アルキルであり;R4及びR8は各々水素であり;R5はNH2であり;R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;R11及びR13は各々Hであり;R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択され;さらにS1はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され;
X21はアスパラギン、オルニチン、グリシン、アラニン、スレオニン及びセリンから成る群から選択され;
X25はヒスチジン及びスレオニンから成る群から選択され;
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され;
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸及びシステイン酸から成る群から選択され;
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり;
R22は、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、及びN-末端アミンから成る群から選択され;さらに
R44はCOOH又はCONH2である。Z及びJは、独立にH又は下記の一般構造を含むペプチドプロドラッグエレメントであり、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9及び(C1-C6アルキル)NH-S1-R9から成る群から選択され;
R2、R4及びR8は、独立にH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W)C1-C12アルキル(式中、WはN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキル又はアリールを形成しているか;又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R3は、C1-C18アルキル、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、及び(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R5はNHR6であり;
R6はH、C1-C8アルキルであり;
R7はH及びOHから成る群から選択され;
R13はCOOH又はCONH2であり;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は結合、又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
ある実施態様では、本明細書に開示するインスリンアナローグは、A鎖及び/又はB鎖のC-末端カルボキシレートの代わりにC-末端アミド又はエステルを含む。
ある実施態様にしたがえば、下記の一般構造を有する、本明細書に開示するインスリンペプチドプロドラッグエレメントは、
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され;
X21はアスパラギン、グリシン、アラニン、スレオニン及びセリンから成る群から選択され;
X4はヒスチジン及びスレオニンから成る群から選択され;
X5はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され;
X6はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸及びシステイン酸から成る群から選択され;さらに
X14は結合、X9VNQ(配列番号:21)、VNQ、NQ及びQから成る群から選択され;さらに
X9はフェニルアラニン及びデスアミノ-フェニルアラニンから成る群から選択され、
さらにここで、下記構造を含むペプチドプロドラッグエレメントは、
式中、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9から成る群から選択され;
R2、R4及びR8はHであり;
R3はC1-C6アルキルであり;
R5はNH2であり;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は結合、又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。ある実施態様では、A鎖は配列GIVEQCCX8SICSLYQLENYCX21R13(配列番号:3)を含み、B鎖は配列R22-X25LCGAX30LVDALYLVCGDX42GFY(配列番号:65)を含み、ここで、
X8はフェニルアラニン又はヒスチジンであり;
X21はアラニン又はアスパラギンであり;
X25はヒスチジン又はスレオニンであり;
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸及びシステイン酸から成る群から選択され;
X42はアラニン、オルニチン及びアルギニンから成る群から選択され;
R22は、AYRPSE(配列番号:14)、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、PGPE(配列番号:11)、トリペプチドのグリシン-プロリン-グルタミン酸、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのプロリン-グルタミン酸、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸及びN-末端アミンから成る群から選択され;さらに
R44はCOOH又はCONH2である。さらに別の実施態様では、A鎖は配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN-R44(配列番号:1)を含み、B鎖は、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)、FVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む。
R1及びR2は、独立に水素、C1-C8アルキル及び(C1-C4アルキル)NH2から成る群から選択されるか、又はR1及びR2は(CH2)p(式中pは2−9)を介して連結され;
R3はC1-C8アルキルであるか、又はR3及びR4はそれらに結合する原子と一緒に4−6複素環式環を形成し;
R4は水素及びC1-C8アルキルから成る群から選択され;さらに
R5はNH2であるが、ただしR1及びR2はともに水素ではないことを条件とする。
ある実施態様では、インスリンA又はB鎖ペプチドのN-末端アミノ酸に連結されたジペプチドプロドラッグエレメントを有し、かつ例えば約12から約72時間(又はある実施態様では約12から約48時間)のt1/2を有するプロドラッグは、下記構造のジペプチドプロドラッグエレメントを含み、
R1及びR2は、独立に水素、C1-C8アルキル及び(C1-C4アルキル)NH2から成る群から選択され;
R3はC1-C6アルキルであり;
R4は水素であり;さらに
R5はNH2であるが、ただしR1及びR2はともに水素ではないことを条件とする。
R1及びR2は、独立に水素、C1-C8アルキル及び(C1-C4アルキル)NH2から成る群から選択されるか、又はR1及びR2は(CH2)p(式中pは2−9)を介して連結され;
R3はC1-C8アルキルであり;
R4は(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7であり;
R5はNH2であり;さらに
R7は水素、C1-C8アルキル及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択されるが、ただしR1及びR2はともに水素ではないことを条件とする。
さらにまた、インスリンA又はB鎖ペプチドのN-末端アルファアミノ酸に連結されたジペプチドプロドラッグエレメントを有し、かつ例えば約72から約168時間のt1/2を有するプロドラッグが提供され、ここでジペプチドプロドラッグエレメントは下記構造を有し、
R1は、水素、C1-C8アルキル及び(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7から成る群から選択され;
R3はC1-C18アルキルであり;
R4及びR8は各々水素であり;
R5はNHR6又はOHであり;
R6はH、C1-C8アルキルであるか、又はR6及びR1はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R7は、水素、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)CONH2、(C0-C4アルキル)COOH、(C0-C4アルキル)NH2、(C0-C4アルキル)OH、及びハロから成る群から選択されるが、ただしR1がアルキル又は(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7であるならば、R1及びR5はそれらに結合する原子と一緒に4−11複素環式環を形成することを条件とする。
ある実施態様では、A鎖配列及びB鎖配列を含むインスリンプロドラッグが提供され、ここで、A鎖は配列GIVEQCCX1SICSLYQLENYCX3(配列番号:3)を含み、B鎖配列はX14-X4LCGX5X6LVEALX7LVCGERGFX8(配列番号:14)の配列を含み、式中、X1はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択される。
別の実施態様では、GIVEQCCX1SICSLYQLENYCX3(配列番号:3)のA鎖配列及びZ-X4LCGX5X6LVEALYLVCGERGFF(配列番号:4)の配列を含むB鎖配列を含むインスリンプロドラッグが提供され、式中、
Zは下記の一般構造を含むペプチドであり、
X1はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され;
X3はアスパラギン、グリシン、アラニン、スレオニン又はセリンから成る群から選択され;
X4はヒスチジン及びスレオニンから成る群から選択され;
X5はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され;
X6はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸及びシステイン酸から成る群から選択され;
ここで、R1はH、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9及びC1-C8アルキルから成る群から選択され;
R2及びR8は独立にH又はC1-C4アルキルから選択され;
R4は、H、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C1-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、CH2(C5-C9ヘテロアリール)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R3は、C1-C8アルキル、(C1-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、及び(C1-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R5はNH2であり;
R7はH及びOHから成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
X1はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され;
X3はアスパラギン、グリシン、アラニン、スレオニン又はセリンであり;
X4はヒスチジン及びスレオニンから成る群から選択され;
X5はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され;
X6はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸及びシステイン酸から成る群から選択され;
X9はフェニルアラニン及びデスアミノ-フェニルアラニンから成る群から選択される。
ある実施態様にしたがえば、単鎖インスリンプロドラッグアナローグが提供され、ここで、ヒトインスリンB鎖又はヒトインスリンB鎖の機能的アナローグのカルボキシ末端は、ヒトインスリンA鎖又はヒトインスリンB鎖の機能的アナローグのN-末端に共有結合により連結され、さらにここで、下記一般構造を有するペプチドプロドラッグ部分は単鎖インスリンアナローグのN-末端アミンにアミド結合により連結され、
R1は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9又は(C1-C6アルキル)NH-R9であり;
R2はH又はC1-C6アルキルであり;
R3は、C1-C6アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R4及びR8は、独立にH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R10、R11、R12及びR13は、独立にH、CH3、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;
R5はNH2であり;
R7はH、OH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)NH2及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R9はC18-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;さらに
S1は結合又は1つから6つのアミノ酸から成るスペーサーであり、ここで前記スペーサーは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ以上の荷電アミノ酸を含む。ある実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9又は(C1-C6アルキル)NH-R9であり、R2及びR8はともにHであり、R3は、C1-C6アルキルである。さらに別の実施態様では、R9はC18-C30アシルであり、R11及びR13は各々Hであり、R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され、さらにS1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。ある実施態様では、インスリンペプチドは、GIVEQCCX8SICSLYQLENYCX21(配列番号:3)のA鎖配列及びR22-HLCGSHLVEALYLVCGERGFX45(配列番号:15)のB鎖配列を含み、ここで前記B鎖はジスルフィド結合を介して前記A鎖に連結され、
R22は、アミノ基、又はFVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、VNQ、NQ及びQから成る群から選択される1から4アミノ酸の配列であり、
X8はスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され、
X21はアスパラギン、リジン、グリシン、アラニンから成る群から選択され、さらに
X45はヒスチジン、チロシン又はフェニルアラニンである。
さらに別の実施態様では、A鎖は配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN-R44(配列番号:1)を含み、さらに前記B鎖は、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)及びFVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む。
さらに別の実施態様では、ペプチドリンカーは以下から成る群から選択される配列を含む:AGRGSGK(配列番号:35)、AGLGSGK(配列番号:36)、AGMGSGK(配列番号:37)、ASWGSGK(配列番号:38)、TGLGSGQ(配列番号:39)、TGLGRGK(配列番号:40)、TGLGSGK(配列番号:41)、HGLYSGK(配列番号:42)、KGLGSGQ(配列番号:43)、VGLMSGK(配列番号:44)、VGLSSGQ(配列番号:45)、VGLYSGK(配列番号:46)、VGLSSGK(配列番号:47)、VGMSSGK(配列番号:48)、VWSSSGK(配列番号:49)、VGSSSGK(配列番号:50)、VGMSSGK(配列番号:51)、TGLGSGR(配列番号:52)、TGLGKGQ(配列番号:53)、KGLSSGQ(配列番号:54)、VKLSSGQ(配列番号:55)、VGLKSGQ(配列番号:56)、TGLGKGQ(配列番号:57)、SRVSRRSR(配列番号:60)、GYGSSSRRAPQT(配列番号:23)及びVGLSKGQ(配列番号:58)。ある実施態様では、リンカーはGSSSRRAP(配列番号:62)又はSRVSRRSR(配列番号:60)を含む。
本明細書に開示するインスリンプロドラッグは、リンカーを介して結合される少なくとも2つ、3つ若しくは4つ以上のペプチドを含むダイマー、トリマー又はより高次のマルチマーの部分であることができ、ここで少なくとも一方又は両方のペプチドはインスリンペプチドに連結されたペプチドプロドラッグエレメントを含む。ダイマーはホモダイマー又はヘテロダイマーであることができ、自然のままのインスリン、自然のままのIGF-1、自然のままのIGF-II及び本明細書に開示のインスリンアナローグペプチドから成る群から選択されるペプチドを含む。ある実施態様では、リンカーは、二官能性チオ―ル架橋リンカー及び二官能性アミン架橋リンカーから成る群から選択される。ある種の実施態様では、リンカーはPEG、例えば5kDa PEG、20kDa PEGである。いくつかの実施態様では、リンカーはジスルフィド結合である。
ある実施態様にしたがえば、本明細書に開示するインスリンプロドラッグは、B鎖のN-末端アミノ酸又はB鎖のカルボキシ末端に位置するリジンアミノ酸(例えば配列番号:9の28位又は配列番号:2の29位)の側鎖に親水性部分を連結することによってさらに改変される。ある実施態様では、単鎖インスリンプロドラッグアナローグが提供され、この場合、ペプチドリンカーのアミノ酸の1つが当該ペプチドリンカーの側鎖に親水性部分を連結することによって改変される。ある実施態様では、改変されるアミノ酸はシステイン、リジン又はアセチルフェニルアラニンである。
ある実施態様では、親水基はポリエチレンオキシド鎖であり、ある実施態様では、2つ以上のポリエチレンオキシド鎖が当該インスリンプロドラッグアナローグの2つ以上のアミノ酸側鎖に共有結合により付着される。ある実施態様にしたがえば、親水性部分は、A9、A14、A15、B3、B22、B28、B29及びB鎖のC-末端又はN-末端から成る群から選択される位置で、本明細書開示のインスリンプロドラッグアナローグのアミノ酸側鎖に共有結合により付着される。複数のポリエチレンオキシド鎖を有するインスリンプロドラッグアナローグについては、当該ポリエチレンオキシド鎖は、B鎖のN-末端アミノ酸に又はB鎖のカルボキシ末端に位置するリジンアミノ酸の側鎖に付着されるか、又は当該ペプチドのC-末端にただ1つのアミノ酸を付加することによって付着される(前記付加されるアミノ酸はその側鎖に連結されたポリエチレンオキシド鎖を有する)。ある実施態様にしたがえば、ポリエチレンオキシド鎖又は他の親水性部分は、ジペプチドプロドラッグエレメントを構成する2つのアミノ酸の一方の側鎖に連結される。ある実施態様では、ペプチドプロドラッグエレメントはリジン(D又はL立体配置)を含み、当該リジンの側鎖アミンにポリエチレンオキシド鎖は付着される。
ある実施態様では、本明細書に開示するインスリンアナローグの可溶性は、親水性部分をペプチドに共有結合により連結することによって強化される。親水性部分は、タンパク質を活性化ポリマー分子と反応させるために用いられる任意の適切な条件下でインスリンアナローグに付着させることができる。当業界で公知の任意の手段を用いることができ、前記には以下を介するものが含まれる:アシル化、還元アルキル化、マイケル付加、チオールアルキル化、又はPEG部分の反応基(例えばアルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α-ハロアセチル、マレイミド又はヒドラジノ基)を介する標的化合物の反応基(例えばアルデヒド、アミノ、エステル、チオール、α-ハロアセチル、マレイミド又はヒドラジノ基)との他の化学選択的連結/ライゲーション方法。水溶性ポリマーを1つ以上のタンパク質に連結するために用いることができる活性化基にはスルホン、マレイミド、スルフヒドリル、チオール、トリフレート、トレシレート、アジヂリン、オキシラン及び5-ピリジルが含まれるが、ただしこれらに限定されない。還元アルキル化によってペプチドに付着される場合には、選択されるポリマーは、重合化度を制御できるようにただ1つの反応性アルデヒドを有するべきである(例えば以下を参照されたい:Kinstler et al., Adv.Drug.Delivery Rev.54: 477-485, 2002;Roberts et al., Adv.Drug Delivery Rev.54: 459-476, 2002;及びZalipsky et al., Adv.Drug Delivery Rev.16: 157-182, 1995)。
ある実施態様にしたがえば、親水性部分(例えばポリエチレングリコール鎖)は、約500から約40,000ダルトンの範囲から選択される分子量を有する。ある実施態様では、親水性部分(例えばPEG)は、約500から約5,000ダルトン又は約1,000から約5,000ダルトンの範囲から選択される分子量を有する。別の実施態様では、親水性部分(例えばPEG)は、約10,000から約20,000ダルトンの分子量を有する。さらに他の例示的実施態様では、親水性部分(例えばPEG)は、約20,000から約40,000ダルトンの分子量を有する。
ある実施態様では、デキストランが親水性部分として用いられる。デキストランは、もっぱらα1-6結合によって連結されたグルコースサブユニットの多糖類ポリマーである。デキストランは、多くの分子量範囲(例えば約1kDaから約100kDa、又は約5、10、15若しくは20kDaから約20、30、40、50、60、70、80若しくは90kDa)で利用できる。
直鎖状又は分枝状ポリマーが考えられる。得られる連結調製物は本質的に単分散又は多分散であることができ、ペプチド当たり約0.5、0.7、1.2、1.5又は2ポリマー部分を有しうる。ある実施態様では、親水性部分は当該ペプチドプロドラッグエレメントのアミノ酸に連結される。
ある実施態様では、インスリンプロドラッグアナローグはB鎖のカルボキシ末端に付加された単一のシステイン残基を有するか、又はインスリンプロドラッグアナローグは少なくとも1つのシステイン残基で置換され、この場合、当該システイン残基の側鎖はさらにチオール反応性試薬(例えばマレイミド、ビニルスルホン、2-ピリジルチオ、ハロアルキル及びハロアシルを含む)で改変される。これらのチオール反応性試薬は、カルボキシ、ケト、ヒドロキシル及びエーテル基を他の親水性部分(例えばポリエチレングリコールユニット)と同様に含むことができる。また別の実施態様では、インスリンプロドラッグアナローグはB鎖のカルボキシ末端に付加された単一のリジン残基を有するか、又はインスリンプロドラッグアナローグはリジンで置換され、さらに当該置換リジン残基の側鎖は、アミン反応性試薬(例えばカルボン酸の活性エステル(スクシンイミド、無水物など))又は親水性部分(例えばポリエチレングリコール)のアルデヒドを用いてさらに改変される。
ある実施態様にしたがえば、インスリンプロドラッグアナローグが提供され、この場合、免疫グロブリン分子のFc部分を表す直鎖状アミノ酸配列は、本明細書に開示するインスリンプロドラッグアナローグのアミノ酸側鎖に共有結合により連結され、当該インスリンプロドラッグアナローグの可溶性、安定性及び/又は薬物動態が改善される。例えば、免疫グロブリン分子のFc部分を表すアミノ酸配列は、B鎖のN-末端又はA若しくはB鎖のC-末端、又は末端が伸長されてあるA若しくはB鎖のC-末端に共有結合できる。例えば、免疫グロブリン分子のFc部分を表すアミノ酸配列はB鎖のC-末端に共有結合することができ、例えば配列番号:9の28位又は配列番号:2の29位に対応するアミノ酸との連結が含まれる。当該Fc部分は典型的にはIgGから単離されたものであるが、任意の免疫グロブリンのFcペプチドフラグメントも同等に機能するはずである。
例示的連結物には、異種ペプチド若しくは異種ポリペプチド(例えば血漿タンパク質を含む)、向標的物質、免疫グロブリン若しくはそのフラグメント(例えば可変領域、CDR又はFc領域)、診断用標識(例えば放射性同位元素、発蛍光団又は酵素標識)、ポリマー(水溶性ポリマーを含む)、又は他の治療薬若しくは診断薬が含まれるが、ただしこれらに限定されない。ある実施態様では、本開示のインスリンプロドラッグアナローグ及び血漿タンパク質を含む連結物が提供され、この場合、血漿タンパク質はアルブミン、トランスフェリン及びフィブリノゲンから成る群から選択される。ある実施態様では、連結物の血漿タンパク質部分はアルブミン又はトランスフェリンである。ある実施態様では、リンカーは1から約60、又は1から30原子以上、2から5原子、2から10原子、5から10原子、又は10から20原子の長さの原子の鎖を含む。ある実施態様では、鎖の原子は全て炭素原子である。ある実施態様では、リンカー骨格の鎖の原子はC、O、N及びSから成る群から選択される。鎖の原子及びリンカーは、より可溶性の連結物を提供するために期待される可溶性(親水性)にしたがって選択できる。ある実施態様では、リンカーは官能基を提供し、前記官能基は、標的組織若しくは器官若しくは細胞で見出される酵素若しくは他の触媒又は加水分解性条件による切断に付される。ある実施態様では、リンカーの長さは立体障害ゆえにその潜在能力を低下させるために十分に長い。リンカーが共有結合又はペプチジル結合であり、連結物がポリペプチドである場合、完全な連結物は融合タンパク質でありうる。そのようなペプチジルリンカーは任意の長さでありうる。例示的リンカーは、長さが約1から50アミノ酸、長さが5から50、3から5、5から10、5から15、又は10から30アミノ酸である。そのような融合タンパク質は、また別には当業者に公知の組換え遺伝子操作方法によって作製できる。
ある実施態様にしたがえば、本明細書に開示するインスリンアナローグは改変されてアシル基又はアルキル基を含む。アシル化又はアルキル化は循環中のインスリンアナローグの半減期を増加させることができる。アシル化又はアルキル化は、有利には作用の開始を遅らせ、及び/又はインスリン及び/又はIGF-1受容体における作用の持続時間を延長し、及び/又はプロテアーゼ(例えばDPP-IV)に対する耐性を改善し、及び/又は可溶性を改善することができる。インスリンアナローグは、親水性部分が連結される同じアミノ酸の位置で、又は異なるアミノ酸の位置でアシル化又はアルキル化されうる。
ある実施態様では、本発明は改変されたインスリンアナローグを提供し、前記アナローグは、自然のままのインスリンのA10、B28、B29に対応する位置のアミノ酸に又はA若しくはB鎖のC-末端若しくはN-末端に共有結合により連結されたアシル基又はアルキル基を含む。インスリンアナローグは、さらにインスリンアナローグのアミノ酸とアシル基又はアルキル基との間にスペーサーを含むことができる。ある実施態様では、アシル基は、脂肪酸又は胆汁酸又はその塩、例えばC4からC30脂肪酸、C8からC24脂肪酸、コール酸、C4からC30アルキル、C8からC24アルキル、又は胆汁酸のステロイド部分を含むアルキルである。スペーサーは、アシル又はアルキル基を付着させる適切な反応基を有する任意の部分である。例示的な実施態様では、スペーサーは、アミノ酸、ジペプチド、又はトリペプチド、又は親水性二官能基スペーサーを含む。ある実施態様では、スペーサーは、Trp、Glu、Asp、Cys、及びNH2(CH2CH2O)n(CH2)mCOOH(式中mは1から6の任意の整数、nは2から12の任意の整数)含有スペーサーから成る群から選択される。そのようなアシル化又はアルキル化インスリンペプチドはさらに親水性部分(任意的にポリエチレングリコール)もまた含むことができる。前述のインスリンはいずれも2つのアシル基又は2つのアルキル基、又はその組合せを含むことができる。
いくつかの例示的実施態様では、式IVのアミノ酸は、nが4(Lys)であるか、nが3(Orn)であるアミノ酸である。
他の実施態様では、側鎖ヒドロキシルを含むアミノ酸は下記式Vのアミノ酸であり、
いくつかの例示的実施態様では、式Vのアミノ酸は、nが1(Ser)であるアミノ酸である。
さらに他の実施態様では、側鎖チオールを含むアミノ酸は下記式VIのアミノ酸であり、
いくつかの例示的実施態様では、式VIのアミノ酸は、nが1(Cys)であるアミノ酸である。
いくつかの例示的実施態様では、インスリンアナローグは、スペーサーのアミン、ヒドロキシル又はチオールのアシル化によってアシル基を含むように改変され、当該スペーサーはB3、B28又はB29位(野生型インスリンのアミノ酸の番号付けにしたがう)のアミノ酸の側鎖に付着されるか、又はペプチドプロドラッグエレメントのA若しくはBアミノ酸に付着される。スペーサーに結合するアミノ酸は、当該スペーサーとの連結を許容する部分を含む任意のアミノ酸でありうる。例えば、側鎖NH2、-OH又は-COOH(例えばLys、Orn、Ser、Asp又はGlu)を含むアミノ酸が適切である。ある実施態様では、スペーサーは、側鎖アミン、ヒドロキシル若しくはチオールを含むアミノ酸、又は側鎖アミン、ヒドロキシル若しくはチオールを含むアミノ酸を含むジペプチド若しくはトリペプチドである。
アシル化がスペーサーのヒドロキシル基を介して生じるとき、アミノ酸又はジペプチド若しくはトリペプチドのアミノ酸の1つは式IIのアミノ酸でありうる。具体的な例示的実施態様では、アミノ酸はSerである。
ある実施態様では、当該スペーサーは親水性の二官能性スペーサーを含む。具体的な実施態様では、スペーサーはアミノポリ(アルキルオキシ)カルボキシレートを含む。これに関して、スペーサーは、例えばNH2(CH2CH2O)n(CH2)mCOOH(式中mは1から6の任意の整数で、nは2から12の任意の整数)を含むことができ、前記は例えば8-アミノ-3,6-ジオキサオクタン酸(ペプチドインターナショナル社(Peptides International, Inc., Louisville, KY)から市場で入手できる)である。
アミン、ヒドロキシル及びチオールを介するペプチドアシル化の適切な方法は当業界で公知である。例えば以下を参照されたい:Miller, Biochem Biophys Res Commun 218: 377-382, 1996;Shimohigashi and Stammer, Int J Pept Protein Res 19: 54-62, 1982;及びPreviero et al., Biochim Biophys Acta 263: 7-13, 1972(ヒドロキシルを介するアシル化の方法に関する);並びにSan and Silvius, J Pept Res 66: 169-180, 2005(チオールを介するアシル化の方法に関する);Bioconjugate Chem.“Chemical Modifications of Proteins: History and Applications” pages 1, 2-12, 1990;Hashimoto et al., Pharmacuetical Res.“Synthesis of Palmitoyl Derivatives of Insulin and their Biological Activity” Vol.6, No: 2 pp.171-176, 1989。
また別の実施態様では、アシル基は胆汁酸である。胆汁酸は任意の適切な胆汁酸であることができ、コール酸、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、リソコール酸、タウロコール酸、グリココール酸、及びコレステロール酸が含まれるが、ただしこれらに限定されない。
具体的な実施態様では、インスリンアナローグはコレステロール酸を含み、前記は当該インスリンアナローグのLys残基に、アルキル化デスアミノCysスペーサー(すなわちアルキル化3-メルカプトプロピオン酸スペーサー)を介して連結される。アルキル化デスアミノCysスペーサーは、例えばドデカエチレングリコール部分を含むデスアミノCysスペーサーでありうる。ある実施態様では、インスリンアナローグは下記の構造を含む:
また別には、アシル化インスリンペプチドはスペーサーを含むことができ、この場合、スペーサーはアシル化され、かつ親水性部分を含むように改変される。適切なスペーサーの非限定的な例には、Cys、Lys、Orn、ホモ-Cys及びAc-Pheから成る群から選択される1つ以上のアミノ酸を含むスペーサーが含まれる。
ある実施態様にしたがえば、インスリンアナローグは改変されてアルキル基を含み、前記アルキル基は、エステル、エーテル、チオエーテル、アミド又はアルキルアミン結合を介してインスリンアナローグに付着され、アルキル基付着の目的は、循環中での半減期の延長及び/又は作用の開始の延期及び/又は作用持続時間の延長及び/又はプロテアーゼ(例えばDPP-IV)に対する耐性の改善である。
アルキル化インスリンペプチドのアルキル基は任意のサイズ(例えば任意長の炭素鎖)であることができ、さらに直鎖状でも分枝状でもよい。本発明のある実施態様では、アルキル基はC1からC30アルキル基である。例えば、アルキル基はC1アルキル、C2アルキル、C3アルキル、C4アルキル、C6アルキル、C8アルキル、C10アルキル、C12アルキル、C14アルキル、C16アルキル、C18アルキル、C20アルキル、C22アルキル、C24アルキル、C26アルキル、C28アルキル、C30アルキルである。ある実施態様では、アルキル基はC18からC20アルキル、例えばC18アルキル、C19アルキル又はC20アルキルである。
いくつかの具体的な実施態様では、アルキル基は胆汁酸(例えばコール酸、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、リソコール酸、タウロコール酸、グリココール酸、及びコレステロール酸)のステロイド部分を含む。
本明細書に先きに記載したように、ジペプチドプロドラッグエレメントA-Bの生物活性ペプチドからの切断速度(したがってプロドラッグ活性化速度)は、構造(N-アルキル化、置換基の数、長さ又はかさ高性を含む)、及びジペプチドプロドラッグエレメントのアミノ酸の立体空間配置に左右される。ジペプチドプロドラッグエレメントA-Bの(例えばインスリンペプチド(Q)からの)切断速度はまた、ジケトピペラジン形成時のQの脱離基の立体障害、求核性及び安定性に左右される。これらの構造的特色のいくつかは、下記のカテゴリーI、カテゴリーII、及びカテゴリーIII(前記は本発明の部分を形成する)に記載される。これらカテゴリーI、II及びIIIのいずれからも、国際出願PCT/US2009/68745(2009年12月18日出願)又はその配列表に開示されたペプチド配列、並びに国際出願PCT/US2009/68745(2009年12月18日出願)に開示された(1)ジペプチドプロドラッグエレメント、(2)Aアミノ酸、及び/又は(3)Bアミノ酸のサブカテゴリーは、それらが本明細書に記載のサブカテゴリーのいずれかに完全に収まるか及び/又はその一部分とオーバーラップするかぎり、さらには、もっぱら特許請求の範囲の主題の新規性付与に必要である場合にかぎり明確に除外される。
ある実施態様にしたがえば、自己切断ジペプチドエレメント(A-B)は、A-B-Cとインスリンペプチド(Q)の脂肪族アミノ基との間のアミド結合を介してQと共有結合により連結される。例えば、脂肪族アミノ基は、A鎖又はB鎖のN-末端アミノ酸の脂肪族アミノ基でありうる。また別には、脂肪族アミノ基は、Qの側鎖の脂肪族アミノ基でありうる。ある実施態様では、A-B-Cはリジン(例えば、B鎖配列FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)のB29位又はB鎖配列FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)のB28位を含む)の側鎖アミンに連結される。
ある実施態様では、QはA鎖及びB鎖を含むインスリンペプチドであり、この場合、A鎖は配列GIVEQCCX1SICSLYQLENYCX3(配列番号:3)を含み、B鎖は、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)及びFVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む。
いくつかの実施態様では、プロドラッグの半減期(例えば、生理学的条件下のPBS中で少なくとも約1時間から約1週間である、A-B-CのQからの化学切断半減期(t1/2))は、Bアミノ酸におけるN-アルキル置換基の存在及び長さに左右される。例えば、Bアミノ酸により短いN-アルキル置換基(例えばGly(N-メチル))を有するプロドラッグは、より長いN-アルキル置換基(例えばGly(N-へキシル))をBアミノ酸に有するプロドラッグより遅い速度でA-B-Cが切断され、より長い半減期を有するであろう。
いくつかの実施態様では、プロドラッグの半減期は、ジペプチドプロドラッグエレメントのBアミノ酸のアルキル側鎖の有無及びアルキル側鎖のベータ位の置換度に左右される。例えば、ベータ位で二置換されるN-アルキル化Bアミノ酸(例えばN-アルキル化イソロイシン)を有するプロドラッグは、ベータ位で一置換されるN-アルキル化Bアミノ酸(例えばN-アルキル化ロイシン)を有するプロドラッグよりも長い半減期を有する。さらにまた、ベータ位で一置換されるN-アルキル化Bアミノ酸(例えばN-アルキル化ロイシン)を有するプロドラッグは、ベータ位で置換されていないN-アルキル化Bアミノ酸(例えばN-アルキル化アラニン)を有するプロドラッグよりもA-B-Cがよりゆっくりと切断され、より長い半減期を有するであろう。さらにまた、置換されていないベータ位を有するN-アルキル化Bアミノ酸(例えばN-アルキル化アラニン)は、Bアミノ酸としてグリシン又はN-アルキル化グリシンを有するプロドラッグよりもA-B-Cがよりゆっくりと切断され、より長い半減期を有するであろう。
いくつかの実施態様では、プロドラッグの半減期はBアミノ酸の側鎖のかさ高性に左右される。例えば、Bアミノ酸の側鎖がかさ高い(例えばN-アルキル化フェニルアラニン)プロドラッグは、Bアミノ酸の側鎖のかさ高性が小さい(例えばN-アルキル化アラニン)プロドラッグよりもA-B-Cがよりゆっくりと切断され、より長い半減期を有するであろう。ジペプチドの切断速度は、当該ジペプチドに付着する薬剤(例えばインスリン)のアミンによってさらに差別化されうる。より具体的には、同じペプチドが、芳香族アミンに連結されるときN-末端アミンと比べてより速い速度で切断され、この場合、N-末端アミンに連結されたジペプチドは、リジン残基の側鎖アミンにペプチドが連結されるときと比べてより速い速度で切断されるであろう。
ジペプチドプロドラッグエレメントのBアミノ酸の組成は、下記のサブカテゴリーIA、IB及びICに分類することができる。概して、サブカテゴリーIAのジペプチドプロドラッグエレメントは最も速く切断され、サブカテゴリーICのジペプチドプロドラッグエレメントは最もゆっくりと切断される。
いくつかの実施態様では、インスリンプロドラッグは構造A-B-C-Qを含み、式中、Qはインスリンペプチドであり、A-B-Cは下記構造を含み、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2は、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子である)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキルを形成し;
R3はC1-C18アルキルであり;
R4及びR8は各々Hであり;
R5はNHR6であり;
R6はH又はC1-C4アルキルであるか、又はR5及びR2はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環であり;
R7はH、OHから成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合、又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
いくつかの実施態様では、Bアミノ酸は、グリシン(N-メチル)、グリシン(N-エチル)、グリシン(N-プロピル)、グリシン(N-ブチル)、グリシン(N-ペンチル)、グリシン(N-へキシル)、グリシン(N-ヘプチル)、及びグリシン(N-オクチル)から成る群から選択される。例えば、Bアミノ酸はグリシン(N-メチル)又はグリシン(N-へキシル)でありうる。
いくつかの実施態様では、R2は水素であり、R3はC1-C4アルキルである。
いくつかの実施態様では、インスリンプロドラッグは構造A-B-C-Qを含み、式中、Qはインスリンペプチドであり、A-B-Cは下記構造を含み、
R1はH、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9から成る群から選択され;
R2は、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子である)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキルを形成し;
R3はC1-C18アルキルであり;
R4は、CH3、CH2(C1-C10アルキル)、CH2(C2-C10アルケニル)、CH2(C0-C10アルキル)OH、CH2(C0-C10アルキル)SH、CH2(C0-C3アルキル)SCH3、CH2(C0-C3アルキル)CONH2、CH2(C0-C3アルキル)COOH、CH2(C0-C3アルキル)NH2、(C1-C6アルキル)NH-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、CH2(C0-C3アルキル)NHC(NH2 +)NH2、CH2(C0-C3アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、CH2(C0-C3アルキル)(C2-C5複素環)、CH2(C0-C3アルキル)(C6-C10アリール)R7、CH2(C1-C3アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びCH2(C0-C12アルキル)(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R8はHであり;
R5はNHR6であるか、又はR5及びR2はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R6はH又はC1-C4アルキルであり;
R7はH及びOHから成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合、又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーであるが、ただしR4が(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であるときは、R1はHであることを条件とする。
いくつかの実施態様では、R1は、(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、さらにR4は、CH3、CH2(C1-C4アルキル)、CH2(C1-C4アルケニル)、CH2(C0-C4アルキル)OH、CH2(C0-C4アルキル)SH、CH2(C0-C3アルキル)SCH3、CH2(C0-C3アルキル)CONH2、CH2(C0-C3アルキル)COOH、CH2(C0-C4アルキル)NH2及びCH2(C0-C3アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択される。
いくつかの実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、さらにBアミノ酸は、アラニン(N-C1-C6アルキル)、ロイシン(N-C1-C6アルキル)、メチオニン(N-C1-C6アルキル)、アスパラギン(N-C1-C6アルキル)、グルタミン酸(N-C1-C6アルキル)、アスパラギン酸(N-C1-C6アルキル)、グルタミン(N-C1-C6アルキル)、ヒスチジン(N-C1-C6アルキル)、リジン(N-C1-C6アルキル)、アルギニン(N-C1-C6アルキル)、セリン(N-C1-C6アルキル)、及びシステイン(N-C1-C6アルキル)から成る群から選択される。
例えば、Bアミノ酸にはアラニン(N-メチル)、ロイシン(N-メチル)、メチオニン(N-メチル)、アスパラギン(N-メチル)、グルタミン酸(N-メチル)、アスパラギン酸(N-メチル)、グルタミン(N-メチル)、ヒスチジン(N-メチル)、リジン(N-メチル)、アルギニン(N-メチル)、セリン(N-メチル)、及びシステイン(N-メチル)が含まれうる。
いくつかの実施態様では、R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、さらにR4は、CH2(C0-C3アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、CH2(C0-C3アルキル)(C2-C5複素環)、CH2(C0-C3アルキル)(C6-C10アリール)R7、CH2(C1-C3アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びCH2(C0-C12アルキル)(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択され、ここでR7はH及びOHから成る群から選択される。
これらの実施態様におけるBアミノ酸の非限定的な例には、フェニルアラニン(N-C1-C10アルキル)、チロシン(N-C1-C10アルキル)及びトリプトファン(N-C1-C10アルキル)が含まれる。いくつかの実施態様では、Bアミノ酸は、フェニルアラニン(N-C1-C6アルキル)、チロシン(N-C1-C6アルキル)及びトリプトファン(N-C1-C6アルキル)から成る群から選択される。例えば、Bアミノ酸には、フェニルアラニン(N-メチル)、チロシン(N-メチル)及びトリプトファン(N-メチル)が含まれうる。
いくつかの実施態様では、Bアミノ酸はプロリンである。いくつかの実施態様では、プロリンはサブカテゴリーIBから除外される。
いくつかの実施態様では、インスリンプロドラッグは構造A-B-C-Qを含み、式中、Qはインスリンペプチドであり、A-B-Cは下記構造を含み、
R1は(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2は、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2がそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキルを形成するか、又はR1及びR2がそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキルを形成し;
R3はC1-C18アルキルであり;
R4は、独立にCH(C1-C8アルキル)2、CH(C2-C8アルケニル)2、CH(C1-C8アルキル)(OH)、CH(C1-C8アルキル)((C1-C8アルキル)SH)、CH(C1-C3アルキル)((C1-C8アルキル)NH2)から成る群から選択され;
R8はH又はC1-C18アルキルであり;
R5はNHR6であるか、又はR5及びR2はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R6はH又はC1-C4アルキルであり;
R7はH及びOHから成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々Hであり;
R10及びR12は独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は、結合、又はアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、ホモシステイン酸、ホモグルタミン酸、アルギニン、リジン及びヒスチジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである。
いくつかの実施態様では、R4はCH(C1-C8アルキル)2又はCH(C1-C8アルキル)OHである。
Bアミノ酸の非限定的な例には、イソロイシン(N-C1-C10アルキル)、バリン(N-C1-C10アルキル)及びスレオニン(N-C1-C10アルキル)が含まれる。いくつかの実施態様では、Bアミノ酸は、イソロイシン(N-C1-C6アルキル)、バリン(N-C1-C6アルキル)及びスレオニン(N-C1-C6アルキル)から成る群から選択される。例えば、Bアミノ酸には、イソロイシン(N-メチル)、バリン(N-メチル)及びスレオニン(N-メチル)が含まれうる。
いくつかの実施態様では、プロドラッグの半減期はAアミノ酸のアルファ位の置換基の数に左右される。例えば、α-一置換アミノ酸(例えばAla)であるAアミノ酸を含むプロドラッグは、α,α-二置換アミノ酸(例えばAib)であるAアミノ酸を含むプロドラッグよりもゆっくりと切断され、より長い半減期を有するであろう。
いくつかの実施態様では、プロドラッグの半減期は、Aアミノ酸のアルファアミノ基におけるアルキル化度に左右される。概して、アルキル化度が高ければ高いほど、切断速度は遅くプロドラッグの半減期は長い。例えば、N-アルキル化Alaを有するジペプチドプロドラッグエレメントは、Alaよりも遅い速度で分離し、より長い半減期を有するであろう。
ジペプチドプロドラッグエレメントのAアミノ酸の組成は下記のサブカテゴリーIIA及びIIBに分類できる。概して、サブカテゴリーIIAのジペプチドプロドラッグエレメントは、サブカテゴリーIIBのジペプチドプロドラッグエレメントよりも速く分離する。
いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントのAアミノ酸はアルファ位で二置換される。これらの実施態様では、サブカテゴリーIA、IB及びICに記載された構造のR1及びR2は、独立にC1-C10アルキル、C2-C10アルケニル、(C1-C10アルキル)OH、(C1-C10アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキルを形成し、さらにR7はH及びOHから成る群から選択される。
例えば、Aアミノ酸にはアミノイソ酪酸(Aib)が含まれる。
いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントのAアミノ酸はアルファ位で置換されていないか又は一置換される。これらの実施態様では、サブカテゴリーIA、IB及びICに記載された構造のR1はHであり、サブカテゴリーIA、IB及びICに記載された構造のR2は、H、C1-C10アルキル、C2-C10アルケニル、(C1-C10アルキル)OH、(C1-C10アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキルから成る群から選択されるか(ここでR7はH及びOHから成る群から選択され、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子である)、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキルを形成するか、又はR2及びR5は、それらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成する。
いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントのAアミノ酸は‘D’立体空間配置を有する。これらの実施態様のAアミノ酸の非制限的な例にはリジン、システイン及びアラニン、例えばd-リジン、d-システイン及びd-アラニンが含まれる。いくつかの実施態様では、d-立体空間配置は、プロドラッグペプチドのタンパク分解性分解を低下させることにより半減期を延長することができる。
いくつかの実施態様では、Aアミノ酸は、1から4つの炭素原子を有する基でN-アルキル化され、例えばAla(N-C1-C4アルキル)、Lys(N-C1-C4アルキル)、及びCys(N-C1-C4アルキル)である。例えば、Aアミノ酸は、Ala(N-メチル)、Lys(N-メチル)、及びCys(N-メチル)でありうる。Aアミノ酸のN-アルキル化はジペプチドプロドラッグエレメントのQからの切断速度を低下させ、より長い半減期を提供する。
いくつかの実施態様では、プロドラッグの半減期は、ジケトピペラジン形成時の脱離基の立体障害、求核性及び安定性に左右される。脱離基の立体障害が少ないほど、脱離基の求核性が低いほど、又は切断後の脱離基が安定であればあるほど、プロドラッグの半減期は短い。Qの脱離基のタイプは、下記のサブカテゴリーIIIA及びIIIBに記載するように、A-B-CとQのアミノ基との間の連結のタイプによって決定できる。概して、サブカテゴリーIIIBのジペプチドプロドラッグエレメントは、サブカテゴリーIIIAのジペプチドプロドラッグエレメントより速くQから分離し、より短い半減期を有する。
サブカテゴリーIIIA:Qの脂肪族アミノ基に連結されるA-B
いくつかの実施態様では、A-B-Cは、A-B-CとQの脂肪族アミノ基との間でアミド結合によりQに連結され、本明細書で先きに記載したように、生理学的条件下のPBSにおいて少なくとも約1時間から約1週間のA-BのQからの化学的切断半減期(t1/2)を有するプロドラッグが得られる。
いくつかの実施態様では、A-B-Cは、A-B-CとQのN-末端アミノ酸のアルファアミノ基との間でアミド結合によりQに連結される。例えば、サブカテゴリーIA、IB及びICのいずれかのBアミノ酸並びにサブカテゴリーIIA及びIIBのいずれかのAアミノ酸を有するジペプチドプロドラッグエレメントをQのN-末端アミノ酸に、より具体的にはインスリンA又はB鎖のN-末端アミンに連結し、生理学的条件下のPBSにおいて少なくとも約1時間から約1週間のA-BのQからの化学的切断半減期(t1/2)を有するプロドラッグを得ることができる。
いくつかの実施態様では、A-B-Cは、A-B-CとQのアミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基との間でアミド結合によりQに連結される。例えば、サブカテゴリーIA、IB及びICのいずれかのBアミノ酸並びにサブカテゴリーIIA及びIIBのいずれかのAアミノ酸を有するジペプチドプロドラッグエレメントをQのアミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基に連結し、生理学的条件下のPBSにおいて少なくとも約1時間から約1週間のA-BのQからの化学的切断半減期(t1/2)を有するプロドラッグを得ることができる。
いくつかの実施態様では、A-B-Cが、A-B-CとQの脂肪族アミノ基との間でアミド結合によりQに連結されるとき、Aはα,α-二置換アミノ酸(サブカテゴリーIIA)であるか又はBはN-アルキル化(サブカテゴリーIA、IB又はIC)されるべきであるか又はその両方である。例えば、Aがα-一置換アミノ酸(例えばAla)であり、BがN-アルキル化されず、さらにA-B-CがQの脂肪族アミノ基を介してQに結合するとき、A-Bの有意な切断はないであろう。
他の実施態様では、A-B-Cが、A-B-CとQの脂肪族アミノ基との間でアミド結合によりQに連結され、さらにAがアルファ位で非置換であり(例えばグリシン)かつBがサブカテゴリーIAのアミノ酸(N-アルキル化グリシン)であるとき、Bアミノ酸のN-アルキル置換基は少なくとも5つの炭素原子の長さを有する(例えばN-C5-C8アルキル)。
さらに他の実施態様では、A-B-Cが、A-B-CとQの脂肪族アミノ基との間でアミド結合によりQに連結され、さらにAアミノ酸がアルファ位で非置換又は一置換(サブカテゴリーIIB)であるとき、Bアミノ酸はプロリンではない。
いくつかの実施態様では、A-B-Cは、A-B-CとQのアミノ酸の側鎖の芳香族アミノ基との間でアミド結合によりQに連結され、本明細書で先きに記載したように、生理学的条件下のPBSにおいて少なくとも約1時間から約1週間のA-BのQからの化学的切断半減期(t1/2)を有するプロドラッグが得られる。例えば、サブカテゴリーIA、IB及びICのいずれかのBアミノ酸並びにサブカテゴリーIIA及びIIBのいずれかのAアミノ酸を有するジペプチドプロドラッグエレメントをQのアミノ酸の側鎖の芳香族アミノ基に連結し、生理学的条件下のPBSにおいて少なくとも約1時間から約1週間のA-BのQからの化学的切断半減期(t1/2)を有するプロドラッグを得ることができる。
カテゴリーIによって規定されるBアミノ酸のいずれかをカテゴリーIIによって規定されるAアミノ酸のいずれかと結合させてジペプチドプロドラッグエレメントを形成できる。このジペプチドをカテゴリーIIIで述べた位置のいずれかに連結することができる。プロドラッグの半減期は以下の選択により調整することができる:
(i)Aアミノ酸のアルファ位の置換基の数;
(ii)A及びBアミノ酸のN-アルキル化度;
(iii)Bアミノ酸のベータ位の置換基の数;
(iv)Bアミノ酸の側鎖のかさ高性;
(v)ジケトピペラジン形成時のQの脱離基の立体障害、求核性及び安定性。
上記に記載のジペプチドプロドラッグエレメントは、本明細書で先きに記載したように、親水性部分、アシル基又はアルキル基を含むようにさらに改変できる。いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントはリジンを含み、前記リジンはその側鎖アミノ基を介してアシル基又はアルキル基に連結される。いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントはシステインを含み、前記システインは側鎖スルフヒドリル基を介して親水性部分(例えば40kDのPEG)に連結される。親水性部分、アシル基又はアルキル基はジペプチドプロドラッグエレメントに直接又はスペーサーを介して連結される。いくつかの例示的実施態様では、親水基、アルキル基及び/又はアシル基は、ジペプチドプロドラッグエレメントのAアミノ酸に連結される。
いくつかの実施態様では、以下のジペプチドプロドラッグエレメントはPEG化される:dCys-Gly(N-へキシル)、dCys-Gly(N-メチル)、及びdCys-Phe(N-メチル)。いくつかの実施態様では、以下のジペプチドプロドラッグエレメントはアシル基を含む:dLys-Gly(N-へキシル)、dLys-Gly(N-メチル)、及びdLys-Phe(N-メチル)。いくつかの実施態様では、以下のジペプチドプロドラッグエレメントはアルキル基を含む:dLys-Gly(N-へキシル)、dLys-Gly(N-メチル)、及びdLys-Phe(N-メチル)。
本発明のジペプチドプロドラッグエレメントは、カテゴリーIのBアミノ酸のいずれかとカテゴリーIIのAアミノ酸のいずれかとの組み合わせを含むことができる。ジペプチドプロドラッグエレメントのAアミノ酸として及びBアミノ酸として適切なアミノ酸の非限定的な例は下記の表に列挙される。
いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントのBアミノ酸はN-アルキル化グリシンである。Bアミノ酸としてN-アルキル化グリシンを有するジペプチドプロドラッグエレメントの非限定的な例は下記の表に示される。
いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントのBアミノ酸はベータ位で置換されていないか又は一置換され、相対的にかさ高くない側鎖を有する。ベータ位で置換されず又は一置換され、かつ側鎖が相対的にかさ高くないBアミノ酸を有するジペプチドプロドラッグエレメントの非限定的な例は下記の表に示される。
いくつかの実施態様では、ジペプチドプロドラッグエレメントのBアミノ酸はベータ位で二置換される。ベータ位で二置換されるBアミノ酸を有するジペプチドプロドラッグエレメントの非限定的な例は下記の表に示される。
ある実施態様にしたがえば、ジペプチドエレメントは、A-BジペプチドのBに以下の3つのアミノ酸の1つを含む:Gly(N-ヘキシル)、Gly(N-メチル)、又はPhe(N-メチル)。ジペプチドのこれら3つのグループの1つから選択されるジペプチドは、他の全ての要件が同等であるならばGly(N-ヘキシル)>Gly(N-メチル)>Phe(N-メチル)の相対的切断速度を有する。ある実施態様では、Cys又はLysが第一位(すなわちAアミノ酸)に提供され、アシル化又はPEG化の場所を与える。ある実施態様では、AlaがAアミノ酸として用いられ、この場合にはアシル化又はPEG化は所望されない。ある実施態様では、第一位(すなわちAアミノ酸)のAibは、天然のアミノ酸(例えばAla、Cys及びLys)と比較して切断速度を高める。例示的ジペプチドには以下が含まれる:dAla-Phe(N-メチル)、dCys-Phe(N-メチル)、dLys-Phe(N-メチル)、Aib-Phe(N-メチル)、dAla-Gly(N-メチル)、dCys-Gly(N-メチル)、dLys-Gly(N-メチル)、Aib-Gly(N-メチル)、dAla-Gly(N-ヘキシル)、dCys-Gly(N-ヘキシル)、dLys-Gly(N-ヘキシル)、Aib-Gly(N-ヘキシル)。
ある実施態様では、第一及び第二のインスリンプロドラッグアナローグの混合物を含む組成物が提供され、この場合、第一及び第二のインスリンプロドラッグアナローグは、プロドラッグエレメントの構造を基準にして互に相違する。より具体的には、第一のインスリンプロドラッグアナローグは、第二のインスリンプロドラッグアナローグのジペプチドプロドラッグエレメントとは実質的に異なる半減期を有するジペプチドプロドラッグエレメントを含むことができる。したがって、ジペプチドエレメントの置換基の種々の組み合わせを選択して、所望の時間枠にわたってかつ所定の時間的間隔において制御された態様で活性化されるインスリンプロドラッグアナローグの混合物を含む組成物を調製することができる。例えば、食事時間に活性なインスリンを放出し、その後、活性化の時間に基づいて放出される適切な投薬により夜間にインスリンを活性化するように組成物を調合することができる。別の実施態様では、医薬組成物は、本明細書に開示するインスリンプロドラッグアナローグ及び自然のままのインスリン又は公知の生物活性インスリン誘導体の混合物を含む。
本開示にしたがって高血糖症を治療する1つの方法は、本開示のインスリンプロドラッグアナローグを患者に標準的な投与ルート(非経口(例えば静脈内、腹腔内、皮下又は筋肉内、髄腔内、経皮、経直腸)、経口、経鼻又は吸入を含む)を用いて投与する工程を含む。ある実施態様では、組成物は皮下又は筋肉内に投与される。ある実施態様では、組成物は非経口的に投与され、インスリンプロドラッグアナローグ組成物は注射器に予め梱包される。
ある実施態様では、キットは、インスリンプロドラッグアナローグ組成物を患者に投与するための装置とともに提供される。キットはさらに多様な容器(例えばバイアル、チューブ、ビンなど)を含むことができる。好ましくは、キットはまた使用のための指示を含むであろう。ある実施態様にしたがえば、キットの装置はエーロゾル分配装置であり、組成物はエーロゾル装置内に予め梱包される。別の実施態様では、キットは注射器及び針を含み、ある実施態様では、インスリンアナローグ組成物は注射器内に予め梱包される。
本発明の化合物は、標準的な合成方法、組換えDNA技術、又はペプチド及び融合タンパク質を調製する任意の他の方法によって調製できる。ある種の非天然アミノ酸は標準的な組み換え技術では発現させることはできないが、それらの調製のための技術は当業界では公知である。非ペプチド部分を含む本発明の化合物は、適用可能な場合には、標準的なペプチド化学反応に加えて標準的な有機化学反応によって合成することができる。
インスリンA及びB鎖は、Boc化学反応を用いて、4-メチルベンゾヒドリルアミン(MBHA)樹脂又は4-ヒドロキシメチル-フェニルアセトアミドメチル(PAM)樹脂で合成した。ペプチドは、HF/p-クレゾール(95:5)を0℃で1時間用いて樹脂から切断した。HF除去及びエーテル沈殿の後で、ペプチドを50%酢酸水に溶解し凍結乾燥させた。また別には、ペプチドはFmoc化学反応を用いて合成した。ペプチドは、トリフルオロ酢酸(TFA)/トリイソプロピルシラン(TIS)/H2O(95:2.5:2.5)を室温で2時間用いて樹脂から切断した。過剰量のジエチルエーテルの添加によりペプチドを沈殿させ、ペレットを酸性緩衝水に溶解した。ペプチドの品質はRP-HPLCでモニターし、質量分析法で確認した(ESI又はMALDI)。
インスリンA鎖はアミノ酸7位にただ1つの遊離システインを有し、他の全てのシステインはアセトアミドメチルA-(SH)7(Acm)6,11,20として保護されるように合成した。インスリンB鎖は7位にただ1つの遊離システインを有し、他のシステインはアセトアミドメチルB-(SH)7(Acm)19として保護されるように合成した。粗ペプチドは通常のRP-HPLCによって精製した。
合成A及びB鎖は、US-2011-0257076(その開示は参照により本明細書に含まれる)で以前に開示されたように、それらの自然のままのジスルフィド結合により連結された。対応するB鎖をDMF又はDMSOに溶解してCys7-Npys誘導体に活性化させ、2,2’-ジチオビス(5-ニトロピリジン)(Npys)と1:1のモル比により室温で反応させた。活性化はRP-HPLCによりモニターし、生成物をESI-MSで確認した。
最初のB7-A7ジスルフィド結合は、対応するA-(SH)7(Acm)6,11,20及びB-(Npys)7(Acm)19(1:1モル比)を合計ペプチド濃度10mg/mLで溶解することによって形成させた。鎖の結合反応が完了したとき、混合物を50%酢酸水濃度に希釈した。最後の2つのジスルフィド結合は、ヨウ素の添加により同時に形成させた。40倍モル過剰のヨウ素を溶液に添加し、混合物を室温でさらに1時間撹拌した。反応はアスコルビン酸水溶液の添加により終了させた。混合物をRP-HPLCにより精製し、最終化合物をMALID-MSにより確認した。表1のデータで示すように、この手順にしたがって調製した合成インスリンはインスリン受容体結合について精製インスリンと良好な類似を示す。
改変アミノ酸(例えばA19位の4-アミノフェニルアラニン)を含むインスリンペプチドもまた、非コードアミノ酸のタンパク質への取り込みを可能にする系を用いてin vivoで合成することができる(前記系には、例えば米国特許7,045,337号及び7,083,970号に教示された系が含まれる)。
表1:自然のままのインスリンと対比した合成インスリンの活性
a.合成
インスリン(又はインスリンアナローグ)、mPEG20k-アルデヒド、及びNaBH3CN(モル比1:2:30)を酢酸緩衝液(pH4.1−4.4)に溶解した。反応溶液は、0.1N NaCl、0.2N酢酸及び0.1N Na2CO3から構成された。インスリンペプチド濃度は約0.5mg/mLであった。反応は室温で6時間に及んだ。反応の程度をRP-HPLCによりモニターし、反応収率は約50%であった。
b.精製
反応混合物を0.1% TFAで2−5倍に希釈し、調製用RP-HPLCカラムに適用した。HPLC条件:C4カラム;流速10mL/分;A緩衝液は10% ACN及び0.1% TFA水溶液;B緩衝液はACN中0.1% TFA、0−40%(0−80分)のB%直線勾配;PEG-インスリン又はアナローグは約35%B緩衝液で収集された。所望の化合物はMALDI-TOFで確認し、続いて亜硫酸分解又はトリプシン分解により化学的に改変した。
a.合成
インスリン(又はインスリンアナログ)をmPEG20k-NHSと共に、0.1Nのビシンバッファー(pH8.0)に1:1のモル比で溶解した。インスリンペプチド濃度は反応の進行をRP-HPLCによりモニターした。反応収率は室温2時間後に約90%であった。
b.精製
反応混合物を2−5倍に希釈し、RP-HPLCにロードした。HPLC条件:C4カラム;流速10mL/分;A緩衝液は10% ACN及び0.1% TFA水溶液;B緩衝液はACN中0.1% TFA;0−40%(0−80分)のB%直線勾配;PEG-インスリン又はアナローグは約35%Bで収集された。所望の化合物はMALDI-TOFで確認し、続いて亜硫酸分解又はトリプシン分解により化学的に改変した。
a.合成
インスリン(又はインスリンアナローグ)、mPEG20k-ヒドラジド、及びNaBH3CN(モル比1:2:20)を酢酸緩衝液(pH4.1から4.4)に溶解した。反応溶液は、0.1N NaCl、0.2N酢酸及び0.1N Na2CO3から構成された。インスリン又はインスリンアナローグ濃度は室温で24時間に約0.5mg/mLであった。反応プロセスをRP-HPLCによりモニターした。変換反応は約50%であった(HPLCにより計算)。
b.精製
反応混合物を2−5倍に希釈し、RP-HPLCにロードした。HPLC条件:C4カラム;流速10mL/分;A緩衝液は10% ACN及び0.1% TFA水溶液;B緩衝液はACN中に0.1% TFA;0−40%(0−80分)のB%直線勾配;PEG-インスリン又はPEG-インスリンアナローグは約35%B緩衝液で収集された。所望の化合物はMALDI-TOEで確認し、続いて亜硫酸分解又はトリプシン分解により化学的に改変した。
インスリン又はIGF-1受容体に対する各ペプチドの親和性を、シンチレーション近接技術を利用する競合結合アッセイで測定した。トリス-Cl緩衝液(0.05Mトリス-HCl(pH7.5)、0.15M NaCl、0.1% w/vウシ血清アルブミン)でペプチドの3倍連続希釈物を作成し、0.05nM (3-[125I]-ヨードチロシル) A TyrA14インスリン又は(3-[125I]-ヨードチロシル) IGF-1(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)と96ウェルプレート(Corning Inc., Acton, MA)で混合した。ヒトインスリン又はIGF-1受容体を過剰発現する細胞から調製した形質膜フラグメントの1−6マイクログラムアリコットを各ウェルに提供し、ポリエチレンイミン処理コムギ胚芽アグルチニンA型シンチレーション近接アッセイビーズ(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ)を0.25mg/ウェルで添加した。800rpmで5分振盪後、プレートを室温で12時間インキュベートし、MicroBeta1450液体シンチレーションカウンター(Perkin-Elmer, Wellesley, MA)で放射能を測定した。非特異的結合(NSB)放射能は、試験サンプルの最高濃度よりも4倍過剰濃度の“コールド”の自然のままのリガンドを含むウェルで測定した。全結合放射能は競合物を含まないウェルで検出した。パーセント特異的結合は以下のように計算した:%特異的結合=(結合−NSB/総結合−NSB)x100。IC50値はOriginソフトウェア(OriginLab, Northampton, MA)を用いることによって決定した。
インスリン又はインスリンアナローグの受容体リン酸化を測定するために、受容体をトランスフェクトしたHEK293細胞を96ウェルの組織培養プレート(Costar #3596, Cambridge, MA)に播種し、以下を補充したダルベッコー改変イーグル培地(Dulbecco’s modified Eagle medium、DMEM)で、37℃、5% CO2及び90%湿度で16−20時間培養した:100IU/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、10mM HEPES及び0.25%ウシ成長血清(HyClone SH30541, Logan, UT)。0.5%ウシ血清アルブミン(Roche Applied Science #100350, Indianapolis, IN)を補充したDMEMでインスリン又はインスリンアナローグの連続希釈物を調製し、付着細胞を含むウェルに添加した。5% CO2を含む37℃の湿潤雰囲気中で15分間インキュベートした後、細胞を室温で20分間パラホルムアルデヒドにより固定し、リン酸緩衝食塩水(pH7.4)で2回洗浄し、さらにPBSに2%のウシ血清アルブミンで1時間ブロックした。続いてプレートを3回洗浄し、製造業者の推奨により2%のウシ血清アルブミンを含むPBSで再構成した、ホスホチロシンに対するセイヨウワサビペルオキシダーゼ結合抗体(Upstate biotechnology #16-105, Temecula, CA)を満たした。室温で3時間インキュベートした後、4回洗浄し、0.1mLのTMB単溶液基質(Invitrogen, #00-2023, Carlbad, CA)を各ウェルに添加した。発色は0.05mLの1N HCLの添加により5分後に停止させた。450nmの吸収をTitertek Multiscan MCC340(ThermoFisher, Pittsburgh, PA)で測定した。吸収対ペプチド濃度の用量応答曲線をプロットし、EC50値をOriginソフトウェア(OriginLab, Northampton, MA)を用いて決定した。
ジペプチドN-末端伸長部の切断速度を調べることができる、特定のヘキサペプチド(HSRGTF-NH2(配列番号:17))をモデルペプチドとして用いた。ジペプチド伸長モデルペプチドをBoc保護サルコシンで調製し、続けてリジンをモデルペプチド結合樹脂に付加してペプチドA(Lys-Sar-HSRGTF-NH2(配列番号:18))を生成した。ぺプチドAをHFで切断し、調製用HPLCで精製した。
対応するプロペプチドの切断速度を決定した。プロペプチド及びモデル親ペプチドの濃度をそれらの対応するピーク面積によって決定した。種々の時間間隔におけるプロドラッグの濃度の対数をプロットすることによって、プロドラッグの一次解離速度定数を決定した。この図の勾配は速度定数‘k’を提供する。多様なプロドラッグの切断半減期を以下の式を用いて計算した:t1/2=.693/k。このモデルペプチドHSRGTF-NH2(配列番号:17)のLys-Sar伸長部分の半減期は14.0時間と決定された。
また別のモデルヘキサペプチド(dHdTdRGdTdF-NH2(配列番号:21))を用いてジペプチド血中切断速度を決定した。各アミノ酸のd-異性体を用いて、プロドラッグ伸長部分を除きモデルペプチドの酵素的切断を防いだ。このモデルd-異性体ヘキサペプチドはl-異性体と同様な態様で合成された。ペプチドAについて先きに報告したように、サルコシン及びリジンを連続的にN-末端に付加して、ペプチドB(dLys-dSar-dHdTdRGdTdF-NH2(配列番号:59))を調製した。
対応するプロペプチドの切断速度を決定した。プロペプチド及びモデル親ペプチドの濃度をそれらの対応するピーク面積によって決定した。種々の時間間隔におけるプロドラッグの濃度の対数をプロットすることによって、プロドラッグの一次解離速度定数を決定した。この図の勾配は速度定数‘k’を提供する。このモデルペプチドdHdTdRGdTdF-NH2(配列番号:21)のLys-Sar伸長部分の半減期は18.6時間と決定された。
表3B
インスリンアナローグMIU-30a:B1(Y16,L17,Y25)29a:A1(dLys(Ac),Sar-aF19)(A19 4-アミノPheを介しかつそれとのアミド結合により連結されたジペプチド)、20%血漿を含むPBS(pH7.4)に溶解し37℃で48時間インキュベートしたMIU30(“MIU-30c”を生じる)を投与されたC57/Blkマウスを用いるin vivo耐糖試験。0時間(MIU30a)及び48時間(MIU30c)インキュベートしたサンプルを取り出し、C57ブラックマウスに90nmol/kg及び270nmol/kgで注射し、糖低下を測定した(インスリン耐性試験)。図1Aでは、8時間の間の種々の時点におけるMIU30a及びMIU30cの糖低下プロフィールが示されている。親化合物は低い効能を有するが、20%血漿で48時間インキュベートした後では(“MIU30c”を生じる)効能は増加する(図1A参照)。図1Bでは、ビヒクルと比較したMIU30a及びMIU30cの総血糖は弁別的な曲線下面積(AUC)として示されている。90nmol/kgでは、MIU30aは糖変化をほとんど示さないが、MIU30cは相当な低下を引き起こす。270nmol/kgでは、MIU30a及びMIU30cはともに糖低下を示すが、後者のサンプルははるかに強い低血糖効能を有する。要約すれば、インスリンアナローグMIU30のプロドラッグ型は、生理学的条件下での親インスリンアナローグへのex vivo変換前に注射したときには相当に弱い糖低下効能を示す。これらのin vivoの結果はin vitro分析と一致する。プロドラッグの半減期は約20時間と概算される。
正常マウスにインスリンヘテロダイマーアナローグ[B1(Y16,L17,Y25)29a:A1(aF19-NH2)]又はそのプロドラッグ誘導体を投与した。プロドラッグ誘導体MIU-29:[B1(Y16,L17,Y25)29a:A1(aF19-dLys(Ac),NLeu)]は4-アミノ-フェニルアラニン置換基をA19位に含み、ここでジペプチドdLys(Ac),NLeuはA19残基の4-アミノの位置に共有結合で連結されている。このジペプチドは生理学的条件下で約4.4時間の半減期で自己切断するであろう。プロドラッグ誘導体[B1(Y16,L17,Y25)29a:A1(aF19-dLys(Ac),NLeu)]をex vivoで24時間インキュベートした後、生じた化合物をマウスに投与し、その血糖低下能力を親化合物と比較した。2つの化合物はほぼ同一の性能を示した。
インスリンプロドラッグアナローグのアシル化を精査し、in vivo保持時間が強化されるか否かを決定した。MIU42 [B1(Y16,L17,Y25)29a:A1(dLys(rE-C14),Sar-aF19)](アシル化ジペプチドプロドラッグエレメントを有する)のin vitro活性は、非アシル化プロドラッグと比較して、30%のACN/PBS中でのex vivoインキュベーション(pH7.4、37℃)時間(プロドラッグ変換の時間を提供する)とともに増加する(図2参照)。予備インキュベーション工程無しに投与されるMIU42プロドラッグを用いて実施した比較インスリン効能試験は、このプロドラッグは非プロドラッグ親化合物(MIU-27)と比較してあまり強力ではないことを示した。このことはまた、アシル化インスリンアナローグMIU-46 [B1(H5,10 Y16,L17,Y25, K29-C14)28a:A1(N18,21, aF19NH2)](B29位にアシル化を有する)に関してもその通りであることが見出された。この化合物は、マウスでin vivo試験を実施したときに所望のin vivo効能又は基礎プロフィールを示さなかった。したがって、少なくともマウスではアシル化は所望のプロフィールをもたらさない。
固相Boc化学反応を用いて、IGF1 B鎖(2-25) H5,10 Y16 L17 SH7 Acm19アミドをMBHA樹脂で合成した。このペプチドをアミノ酸側鎖保護の同時除去により樹脂から切断した後、粗B鎖をDMSO中で2,2’-ジチオビス(5-ニトロピリジン)と混合してCys7のシステイン-NpyS誘導体を得た。Boc-アミノオキシアセチル(Aoa)のB鎖N-末端への添加は、B鎖とBoc-Aoa-OSuとの間の反応を介して達成された。US-2011-0257076(その開示は参照により本明細書に含まれる)に記載された“1+2”の方法を用いて、精製IGF1 B鎖(2-25)(BocAoa)0 H5,10 Y16 L17 SH7 Acm19アミドをIGF1 A鎖Acm6,7,11 N18,21 (aa1aa2)-pNH-F19酸と結合させて、B鎖のN-末端にBoc-Aoaを有するインスリンアナローグを生成した。スカベンジャとしてO-(カルボキシメチル)ヒドロキシルアミンヘミヒドロクロリドの存在下での6N HClによる簡単な処理により前記ペプチドを処理してBocを除去した。Boc除去及び精製の後で、前記ペプチドを3mg/mLの濃度で1%アミン/30% ACN/0.2M NaOAc(pH4.6)に溶解した。2倍過剰量の20KD PEG-プロピオンアルデヒドを前記溶液に添加し、反応物を室温で1時間撹拌し、続いて最終的な精製を実施してPEG化インスリンアナローグを得た。
二鎖インスリンアナローグのアミノ末端への20kDa PEGの添加はインスリンアナローグの効能を低下させる。自己切断性ジペプチドプロドラッグエレメント(dLys(rE-C14),Nleu)のA19位への添加は当該化合物の効能を約100倍さらに低下させる。しかしながら、このプロドラッグのPBS中での37℃で78時間(ジペプチドは約4.4時間の半減期を有する)の予備インキュベーションは親のPEG化された化合物に近い値にその効能を回復させる。
表4を参照されたい(表4は、in vitroリン酸化アッセイで測定したときのインスリン受容体A及びBサブタイプにおける当該アナローグのEC50を列挙する)。
表4:PEG化インスリンプロドラッグの活性
IGF-I C鎖を介して自然のままのインスリンB及びA鎖を含む(B0-C1-A0)インスリンIGF-Iミニジーンを、酵母ピキア・パストリス(Pichia pastoris)での構成的発現及び組換えタンパク質の精製のために、GAPプロモーター(グリセロアルデヒド-3-ホスフェートデヒドロゲナーゼ(GAPDH)のプロモーター)下にて発現ベクターpGAPZαA(Invitrogenから購入)でクローニングした。ミニジーンを、サッカロミセス・セレビシアエ(Saccharomyces cerevisiae)のα-接合因子リーダーシグナルをコードするN-末端ペプチドに当該組換えタンパク質の培養液への分泌のために融合させた。ミニジーンと先導α-接合因子配列との間のKex2切断部位を用いて、自然のままのアミノ末端を有するミニジーンの分泌のためにリーダー配列を切断した。B0-C1-A0ミニジーンのCペプチドの1位(G1A)、2位(Y2A)、3位(G3A)、4位(S4A)、5位(S5A)、6位(S6A)、7位(R7A)、8位(R8A)、10位(P10A)、11位(Q11A)及び12位(T12A)に単部位アラニン変異を導入した。
エレクトロポレーションによって、B0-C1-A0ミニジーンを含むミニジーン、11のアラニン変異体、及び他の選別誘導体を酵母ピキア・パストリスに形質導入した。陽性形質転換体を最少メタノールプレートで選別し、各ピキア単離株のゲノム調製を実施し、さらに酵母ゲノムへの構築物の組み込みをPCRによって確認した。833塩基対のPCR生成物がアガロースDNAゲルで可視化された。インスリンアナローグは対応する酵母株の発酵によって生成された。酵母細胞を20分間5Kの遠心分離によって500mLのベックマン(Beckman)遠心分離管でペレットにし、培養液をその後のタンパク質精製のために維持した。
B0-C1-A0アナローグは、インスリン受容体アイソフォーム及びIGF-1受容体の両方で等しく有効であることを示した。2位のチロシンのアラニンへの変異又はC9-12の欠失によるCペプチドの8アミノ酸への短縮は、IGF-1受容体活性の顕著な低下によってインスリン作用の特異性で選択的強化を提供した。表5A及び5Bに提供されるデータを参照されたい。
表5A:インスリン結合及びリン酸化分析(B 0 C 1 A 0 )
表5B:IGF-1結合及びリン酸化分析(B 0 C 1 A 0 )
インスリン/IGFキメラの安定性を、インスリンアナローグをインスリン特異的分解酵素(IDE)に暴露し活性をアッセイすることによって精査した。
インスリン分解アッセイ:rDNAラットIDEはEMDケミカルズ社から入手した。ペプチドは重炭酸アンモニウム緩衝液中の15mMアリコットとして調製した。初期濃度は276nmでのUV吸収を基準に概算し、さらに内部標準物とのHPLC分析によって確認した。溶液のpHは7.8−8.4に維持した。IDEを添加し、消化は時間経過の間37℃で実施した(12から48時間)。実験にしたがって1:350−450の酵素:基質比を用いた。HPLC分析のために、時間間隔にしたがってアリコットをTFA緩衝溶液(参照ペプチドを含む)に取り出した。活性の評価のために、別のアリコットをDMEMアッセイ培養液に取り出した。全てのアリコットは直ちにドライアイス上で凍結され、分析まで-55℃で維持された。
HPLC分析:被験ペプチドの分解プロフィールをHPLCアッセイで評価した。TFA緩衝液を用いるベックマンコールター系に接続したAgilant Zorbax C8カラムで各アリコットについて2回の試験を実施した(10分の間に20から60% Bの勾配、ここでB=90% AcN)。
生物活性:IDEとのインキュベーション後のアナローグの残留効能を、インスリン受容体リン酸化ELISAアッセイの50%有効濃度(EC50)として決定した。酵素分解時に調製されたペプチドをインスリン受容体リン酸化による生物活性アッセイに付したとき、我々は、全てのインスリン及びIGF-2 A-鎖アナローグは実質的に全ての活性を失うが、IGF-1 A-鎖アナローグはいずれも活性を維持することに気付いた。インスリンアナローグのインスリン特異的分解酵素(IDE)による切断は極端に激しく、A鎖が自然のままのインスリン配列から誘導されるインスリンでは容易に検出される。対照的に、A鎖がIGF-1の配列から誘導されるアナローグはタンパク質分解に極端に耐性であるように思われる。
安定性の増加が分裂促進性の増加を生じるかもしれないという予想は、しかしながらより高インスリン効能アナローグと増殖増加との相関性であるとは思われなかった。さらにまた、かつタンパク質分解安定性にとって特に重要であるが、IDEに対しより耐性であるアナローグがより強い分裂促進性潜在能力を有するとは思われなかった。
一連のインスリンアナローグを正常マウス(Melior Research Labs)でのin vivo試験に付した。標準的インスリン治療と比較したとき、問題のペプチドは全て同様な又は強化されたブドウ糖低下効能を示した。しかしながら、同じB鎖を有するインスリンA鎖のアナローグとIGF1 A鎖のアナローグを比較したとき、効能に顕著な相違は観察されなかった。このことは、インスリンのIDE分解及びクリアランスは主要な又は生理的に関係のあるメカニズムではないという結論を支持する。
1.図14Aで概略したトリペプチドの液相合成
Ugi反応の一般的手順(8a、8b)
第一アミンの溶液及びMeOH中のアルデヒドを室温で1時間撹拌し、続いてt-Boc-D-Lys(Fmoc)又はFmoc-D-Lys(t-Boc)及びメチルイソシアノアセテートを添加した。反応混合物を室温で10時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して生成物を得た。
脂肪酸アシル化のための一般的手順(9a、9b)
リジン側鎖の保護基を、1% ピペリジン/1% 1,8-ジアザビシクロウンデカ-7-エン(DBU)/ジクロロメタン(8aのため)又は50% TFA/DCM(8bのため)を用いて除去した。遊離アミンを適切な脂肪酸により、N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N’-エチルカルボジイミドヒドロクロリド/DCN中の6-クロロ-1-ヒドロキシベンゾトリアゾール脱水物の存在下でアシル化し、得られた生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。
メチルエステルの加水分解のための一般的手順(10a、10b)
メチルエステルを、塩基性条件下で水酸化リチウムのTHF/水の溶液で加水分解した。続いてHCl溶液の添加により反応物をpH2に調整し、反応混合物をDCMで抽出し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによって生成物を回収した。
カルボン酸活性化のための一般的手順(11a、11b)
カルボン酸をNMP中のDIC/NHSを用いてNMP活性化するか、又はDIC/NHS/NMPによって活性化して次の工程で用いた。
Fmoc保護アミノ酸のローディングのための一般的手順(1)
1.0g(1.1mmol)の2-クロロトリチルクロリド樹脂(100-200メッシュ;1% DVB;ローディング1.1mmol/g)、Fmoc保護アミノ酸(2.2mmol、2eq.)及び350μLのN,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.2mmol、2eq.)をDCM(10mL)中に懸濁し、室温で一晩振盪した。樹脂を水切りし、DMF(10mL)で3回、DCM(10mL)で3回洗浄し、続いてDCM(10mL)、MeOH(2mL)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(1mL)の溶液で処理して未反応の2-クロロトリチルクロリドを脱活性化した。最後に、樹脂をDMF(10mL)で3回、及びDCM(10mL)で3回洗浄し、真空乾燥させた。
樹脂結合α-ブロモアシル-Gly-アミノ酸のための一般的手順(2)
樹脂結合1をDMF中の20%ピペリジンで15分間2回処理し、この樹脂をDMF(10mL)、DCM(10mL)及びDMF(10mL)で再び繰り返し洗浄した。樹脂の0.2g(0.22mmol)部分を、146mgのa-ブロモ酢酸(1.1mmol、5eq.)、187mgの6-クロロ-1-ヒドロキシベンゾトリアゾール脱水物(1.1mmol、5eq.)及び154μLのN,N-ジイソプロピルカルボジイミド(1.1mmol、5eq.)でDMF(3mL)中にて室温で処理した。2時間後、樹脂の水を切り、DMF(10mL)及びDCM(10mL)で3回洗浄した。
樹脂結合a-N-(R1)-Glyのための一般的手順(3)
0.2gの樹脂を3.0mmolの第一アミン及び525μL(3mmol)のDIEAと3mLのDMSO中で室温にて一晩処理した。続いて樹脂の水を切り、DMF及びDCMで洗浄した。
樹脂結合t-Boc-D-Lys(Fmoc)-N-(R1)-Gly(4)
0.2g(0.22mmol)の樹脂3をDMF(10mL)中の20%ピペリジンで処理し、この樹脂をDMF(10mL)、DCM(10mL)及びDMF(10mL)で再び洗浄し、続いて515mgのt-Boc-D-Lys(Fmocl)-OH(1.1mmol, 5eq.)、330mgの3-(ジエトキシホスホリルオキシ)-1,2,3-ベンゾトリアジン-4(3H)-オン(DEPBT)(1.1mmol, 5eq.)及び192μLのDIEA(1.1mmol, 5eq.)とDMF(3mL)中で一晩室温にて混合した。樹脂の水を切り、DMF(10mL)及びDCM(10mL)で洗浄した。
樹脂結合t-Boc-D-Lys(脂肪酸)-N-R1-Gly-アミノ酸(5)
樹脂結合4をDMF中の20%ピペリジンで脱保護し、この樹脂をDMF(10mL)、DCM(10mL)及びDMF(10mL)で再び洗浄した。樹脂の0.2g(0.22mmol)部分を、長鎖脂肪酸(1.1mmol, 5eq.)、399mgの1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)(1.05mmol, 4.75eq.)及び193μLのDIEA(1.05mmol, 4.75eq.)とDCM(2mL)及びDMF(2mL)中にて室温で一晩処理した。樹脂の水を切り、DMF(10mL)及びDCM(10mL)で洗浄し、真空化で乾燥させた。
t-Boc-D-Lys(脂肪酸)-N-R1-Gly-アミノ酸(6)
樹脂結合5をDCM中の0.1% TFA、20%トリフルオロエタノール(TFE)の10mLで切断した。1時間後、ろ液を収集し、樹脂を5mLのDCMで洗浄した。ろ液とDCM洗浄物を一緒にまとめ、減圧下で蒸発させた。この粗物質をフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶離液としてDCM中の4%−12% MeOH)で精製し、白色固体又は黄色油として生成物を得た。
t-Boc-D-Lys(脂肪アシル)-N-R1-Gly-アミノ酸-NHSエステル(7)
12.8mgの遊離酸6(0.02mmol)を、4.6mg NHS(0.04mmol, 2eq.)及び5.6μLのDIC(0.04mmol, 2eq.)を用い1mLのNMP中で一晩活性化し、さらに精製することなく用いた。
A1,B29-ジ-tBoc-インスリンを用いる脂質化インスリンプロドラッグの合成(図14C)
A1,B29-ジ-tBoc-インスリンの調製(12)
インスリン(150 mg, 0.026mmol)を、2% DIEA/DMF(15mL)に懸濁し、12.7mgの2-(tert-ブチルオキシカルボニル-オキシイミノ)-2-フェニルアセトニトリル(0.052 mmol, 2eq.)を加えて白濁溶液とし、室温で4時間撹拌した。4時間後に溶液は透明になり、続いて反応を1% AcOH及び20% ACN緩衝液の135mLで停止させた。調製用HPLCにより所望の生成物を白色粉末として得ることができた(60.2mg, 38.5%収量)。
トリペプチドとA1, B29-ジ-tBoc-インスリンとのカップリングのための一般的手順(14)
NMP/ビシン緩衝液混合物(pH8.2)(3:1)中のA1,B29-ジ-tBoc-インスリンの溶液に、NMP中のトリペプチドスクシネートエステル(2eq.)の2当量を加えた。反応の進行はLC-MSでモニターした。室温で4時間後に反応混合物を過剰な85%リン酸で処理し、水で希釈して反応を停止させ、調製用HPLCで精製して生成物を得た。
A1, B29-ジ-(Fmoc)-インスリンを用いる脂質化インスリンプロドラッグの合成(図14D)
A1, B29-ジ-(Fmoc)-インスリン(15)
インスリン(116mg, 0.02mmol)をNMP(4mL)及びビシン緩衝液(pH8.2)(1mL)の5mL混合物に溶解した。得られた溶液にFmoc-NHSエステル(13.5mg, 0.04mmol, 2eq.)をゆっくりと添加し、反応混合物を室温で撹拌し、LC-MSでモニターした。完了後、1% AcOHと20% ACN緩衝液の135mLを用いて反応を停止させた。調製用HPLCは所望の生成物を白色粉末として提供した(25.2mg、20.5%収量)。
トリペプチド部分とA1, B29-ジ-(Fmoc)-インスリンのカップリングのための一般的手順(17)
NMP/ビシン緩衝液混合物(pH8.2)(3:1)中のA1,B29-ジ-tBoc-インスリンの溶液をNMP中のトリペプチドスクシネートエステル(2eq.)で処理し、反応をLC-MSでモニターした。室温で4時間後に反応混合物をDMF中の20%ピペリジンで処理し、0.1Nの塩酸溶液の添加によって反応を停止させ、調製用HPLCで精製して最終生成物を得た。
Claims (43)
- 構造A-B-C-Qを含むインスリンプロドラッグであって、
式中、Qはインスリンペプチドであり;
Aは、血漿タンパク質に不可逆的に結合する部分にスペーサーを介して共有結合により連結された側鎖を含むアミノ酸であり;
BはN-アルキル化アミノ酸であり;さらに
CはX70又はX70X71であり、ここで、X70及びX71は独立に、H、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)SO3H、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択される側鎖を有するアミノ酸であり;
A-B-Cは、Qの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQと連結され、前記脂肪族アミノ基は、A鎖若しくはB鎖のN-末端アミノ酸のアルファアミノ基又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基から選択される、前記インスリンプロドラッグ。 - Aが(C1-C8アルキル)NH2側鎖を含むアミノ酸であり、前記部分がC16-C30アシル基又はC16-C30アルキル基であり、Aの側鎖とアシル又はアルキル基との間の結合が前記スペーサーを介する、請求項1に記載のプロドラッグ。
- X70及びX71が独立に、グリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択されるアミノ酸である、請求項1又は2に記載のプロドラッグ。
- Bが、C1-C18アルキル、C3-C18アルケニル、(C1-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C1-C4アルキル)(C3-C5複素環)、又は(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)によりN-アルキル化されたアミノ酸である、請求項1−3のいずれかに記載のプロドラッグ。
- 構造M1-A-B-C-Qを含むインスリンプロドラッグであって、
式中、Qはインスリンペプチドであり;
Aは、血漿タンパク質に不可逆的に結合する部分に共有結合により連結された側鎖を含むアミノ酸であり、任意的に前記部分はスペーサーを介してAの側鎖に連結され、前記スペーサーは1つ又は2つの荷電アミノ酸を含み;
BはN-アルキル化アミノ酸であり;
Cはアミド結合、X70又はX70X71であり;
M1は、AのN-末端アミンを介してAに連結される血清酵素切断性部分であり;
ここで、X70及びX71は独立に、H、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)SO3H、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択される側鎖を有するアミノ酸であり、さらにA-B-CはQの脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQと連結され、前記脂肪族アミノ基は、A鎖若しくはB鎖のN-末端アミノ酸のアルファアミノ基又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基から選択される、前記インスリンプロドラッグ。 - 血清酵素切断性部分がジペプチジルペプチダーゼIV(DPP-IV)によって切断されるペプチドである、請求項5に記載のプロドラッグ。
- 血清酵素切断性ペプチド部分が配列Z-プロリン又はZ-アラニンを有するジペプチドであり、ここでZが、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、スレオニン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸から成る群から選択される、請求項6に記載のプロドラッグ。
- 血清酵素切断性ペプチド部分がArg-Pro、Lys-Pro又はGlu-Proである、請求項7に記載のプロドラッグ。
- 生理学的条件下の血清におけるA-B-CのQからの切断半減期が約2から約168時間である、請求項1−8のいずれか1項に記載のプロドラッグ。
- 生理学的条件下の血清におけるA-B-CのQからの切断半減期が約0.5日から約10日である、請求項1−8のいずれか1項に記載のプロドラッグ。
- A-B-Cが以下の構造を含む、請求項5から10のいずれか1項に記載のプロドラッグ:
R1は、C18-C30アルキル、(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R2はH又はC1-C6アルキルであり;
R3は、C2-C4アルキル、C3-C8アルケニル、(C0-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)から成る群から選択されるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員複素環式環を形成し;
R4及びR8は独立に、H、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C1-C18アルキル)OH、(C1-C18アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONH2、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキル(式中W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子)から成る群から選択されるか、又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し;
R10、R11、R12及びR13は独立に、H、CH3、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;
R5はNHR6又はOHであり;
R6はH又はC1-C8アルキルであり;
R7はH、OH、C1-C18アルキル、C2-C18アルケニル、(C0-C4アルキル)NH2、及び(C0-C4アルキル)OHから成る群から選択され;
R9はC18-C30アシルから成る群から選択され;
S1は結合又は1つから6つのアミノ酸から成るスペーサーであり、ここで前記スペーサーはアスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択される1つ以上の荷電アミノ酸を含む)。 - A-B-Cが以下の構造を含む請求項5−11のいずれか1項に記載のプロドラッグ:
R1はC18-C30アルキル、(C1-C6アルキル)NH-R9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R3はC2-C4アルキルから成る群から選択され;
R4、R11及びR13は各々Hであり;
R5はNH2であり;
R8はH又はC1-C8アルキルであり;
R9はC18-C30アシルであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、及び(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択され;さらに
S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである)。 - A-B-Cが以下の構造を含む請求項1から12のいずれか1項に記載のプロドラッグ:
R1は(CH2)4-S1-NHR9であり;
R3はC3-C4アルキルであり;
R4、R11及びR13は各々Hであり;
R5はNH2であり;
R8はH又はC1-C8アルキルであり;
R9はC18-C30アシルであり;
R10及びR12は、独立に(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、及び(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択され;さらに
S1は、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン、及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである)。 - R1が、(CH2)4NHCO(CH2)17CH3及び(CH2)4NHCO(CH2)19CH3から成る群から選択される、請求項13に記載のプロドラッグ。
- インスリンペプチドが、GIVEQCCX8SICSLYQLENYCX21(配列番号:3)のA鎖配列及びR22-HLCGSHLVEALYLVCGERGFX45(配列番号:15)のB鎖配列を含み、
ここで、前記B鎖がジスルフィド結合を介して前記A鎖と連結され、
R22が、結合又は、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、VNQ、NQ及びQから成る群から選択される1から4アミノ酸の配列であり、
X8がスレオニン及びヒスチジンから成る群から選択され、
X21がアスパラギン、リジン、グリシン、アラニンから成る群から選択され、さらに
X45がヒスチジン、チロシン又はフェニルアラニンである、
請求項1−14のいずれかに記載のプロドラッグ。 - インスリンペプチドが、GIVX4X5CCX8X9X10CX12LX14X15LX17X18YCX21-R44(配列番号:19)のA鎖配列及びR22-X25LCGX29X30LVX33X34LYLVCGX41X42GFX45(配列番号:20)のB鎖配列を含み、
ここで、前記B鎖がジスルフィド結合を介して前記A鎖と連結され、
X4はグルタミン酸又はアスパラギン酸であり、
X5はグルタミン又はグルタミン酸であり、
X8はヒスチジン、スレオニン又はフェニルアラニンであり、
X9はセリン、アルギニン、リジン、オルニチン又はアラニンであり、
X10はイソロイシン又はセリンであり、
X12はセリン又はアスパラギン酸であり、
X14はチロシン、アルギニン、リジン、オルニチン又はアラニンであり、
X15はグルタミン、グルタミン酸、アルギニン、アラニン、リジン、オルニチン又はロイシンであり、
X17はグルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、リジン、オルニチン又はグルタミンであり、
X18はメチオニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸又はスレオニンであり、
X21はアラニン、グリシン、セリン、バリン、スレオニン、イソロイシン、ロイシン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、ヒスチジン、トリプトファン、チロシン、及びメチオニンから成る群から選択され;
X25はヒスチジン又はスレオニンであり;
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され;
X30は、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、及びシステイン酸から成る群から選択され;
X33はアスパラギン酸及びグルタミン酸から成る群から選択され;
X34はアラニン及びスレオニンから成る群から選択され;
X41はグルタミン酸、アスパラギン酸又はアスパラギンから成る群から選択され;
X42はアラニン、オルニチン、リジン及びアルギニンから成る群から選択され;
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり;
R22は、AYRPSE(配列番号:14)、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、PGPE(配列番号:11)、トリペプチドのグリシン-プロリン-グルタミン酸、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのプロリン-グルタミン酸、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、及びN-末端アミンから成る群から選択され;さらに
R44はCOOH又はCONH2である、
請求項1−14のいずれかに記載のプロドラッグ。 - A鎖が配列GIVEQCCX8SICSLYQLENYCX21R44(配列番号:3)を含み、さらにB鎖が配列R22-X25LCGAX30LVDALYLVCGDX42GFY(配列番号:65)を含み、ここで、
X8はフェニルアラニン又はヒスチジンであり、
X21はアラニン又はアスパラギンであり、
X25はヒスチジン又はスレオニンであり、
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、及びシステイン酸から成る群から選択され、
X42はアラニン、オルニチン及びアルギニンから成る群から選択され、
R22は、AYRPSE(配列番号:14)、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、PGPE(配列番号:11)、トリペプチドのグリシン-プロリン-グルタミン酸、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのプロリン-グルタミン酸、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、グルタミン酸、及びN-末端アミンから成る群から選択され、さらにR44はCOOH又はCONH2である、請求項16に記載のプロドラッグ。 - B鎖が配列R22-X25LCGX29X30LVX33X34LYLVCGX41X42GFX45YT-Z1-B1(配列番号:67)を含み、X25はヒスチジン又はスレオニンであり、
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され、
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、及びシステイン酸から成る群から選択され、
X33はアスパラギン酸及びグルタミン酸から成る群から選択され、
X34はアラニン及びスレオニンから成る群から選択され、
X41はグルタミン酸、アスパラギン酸又はアスパラギンから成る群から選択され、
X42はアラニン、オルニチン、リジン、及びアルギニンから成る群から選択され、
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり、
R22は、FVNQ(配列番号:12)、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン及びN-末端アミンから成る群から選択され、
Z1は、アスパルテート-リジン、リジン-プロリン、及びプロリン-リジンから成る群から選択されるジペプチドであり、
B1はスレオニン、アラニン、又はスレオニン-アルギニン-アルギニントリペプチドから成る群から選択される、
請求項17に記載のプロドラッグ。 - A鎖が配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN-R44(配列番号:1)を含み、B鎖が、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)、及びFVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む、請求項15に記載のプロドラッグ。
- 構造A-B-C-Qを含むインスリンプロドラッグであって、式中、Qはインスリンペプチドであり、さらに、
A-B-Cは以下の構造を含み:
A-B-Cは、A鎖若しくはB鎖のN-末端アミノ酸又はQのB3、B28若しくはB29アミノ酸の側鎖の脂肪族アミノ基を介してアミド結合によりQと連結され;
R1は、H、(C1-C4アルキル)O-S1-R9、(C1-C4アルキル)S-S1-R9、(C1-C4アルキル)CONH-S1-R9、(C1-C4アルキル)COO-S1-R9、(C1-C6アルキル)NH-S1-R9、(C1-C6アルキル)NHR9、及び(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)-S1-R9から成る群から選択され;
R2及びR8は独立に、H、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONHH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NHH、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキルから成る群から選択されるか(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子である)、又はR1及びR2はそれらに結合する原子と一緒にC3-C12シクロアルキル又はアリールを形成し;
R3は、C1-C18アルキル、C3-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C1-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)であるか、又はR4及びR3はそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成し;
R4は、H、C1-C18アルキル、(C1-C6アルキル)NHR9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり;
R5はOH又はNHR6であり;
R6はH、C1-C8アルキルであり;
R7はH、OH及びOR9から成る群から選択され;
R9はC16-C30アシル及びC16-C30アルキルから成る群から選択され;
R11及びR13は各々H又はC1-C6アルキルであり;
R10及びR12は独立に、H、CH3、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NH2、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、及びCH2(C3-N2複素環)から成る群から選択され;さらに
S1は結合又は1つから6つのアミノ酸から成るスペーサーであり、ここで前記スペーサーは、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ以上の荷電アミノ酸を含むが、ただしR4がH又はC1-C18アルキルであるときR1はH以外であることを条件とする、前記インスリンプロドラッグ。 - R1が、(C1-C6アルキル)NHR9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、
R2、R4、R11及びR13が各々Hであり、
R5がNH2であり;
R8がH、C1-C8アルキル、C2-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)OH、(C1-C4アルキル)SH、(C2-C3アルキル)SCH3、(C1-C4アルキル)CONHH、(C1-C4アルキル)COOH、(C1-C4アルキル)NHH、(C1-C4アルキル)NHC(NH2 +)NH2、(C0-C4アルキル)(C3-C6シクロアルキル)、(C0-C4アルキル)(C2-C5複素環)、(C0-C4アルキル)(C6-C10アリール)R7、(C1-C4アルキル)(C3-C9ヘテロアリール)、及びC1-C12アルキル(W1)C1-C12アルキルであり(式中、W1はN、S及びOから成る群から選択されるヘテロ原子である)、
R9がC18-C30アシルであり、さらに
S1が、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである、請求項20に記載のプロドラッグ。 - R3が、C1-C18アルキル、C3-C8アルケニル、(C1-C4アルキル)(C4-C6シクロアルキル)、(C1-C4アルキル)(C3-C5複素環)、(C1-C4アルキル)(C6-C10アリール)であり、R8がH又はC1-C8アルキルである、請求項21に記載のプロドラッグ。
- R1が、(C1-C6アルキル)NHR9であり、R2、R4、R11及びR13が各々Hであり、R5がNH2であり、R8がH又はC1-C8アルキルであり、さらにR9がC18-C30アシルである、請求項22に記載のプロドラッグ。
- R3がC1-C8アルキルであるか、又はR4及びR3がそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成している、請求項21、22又は23のいずれか1項に記載のプロドラッグ。
- R2、R4、R8、R11及びR13が各々Hであり、R1が、(C1-C6アルキル)NHR9又は(C1-C6アルキル)NH-S1-R9であり、R3がC2-C8アルキルであり、R5がNH2であり、さらにR9がC18-C30アシル及びC18-C30アルキルから成る群から選択され、さらにS1が、アスパラギン酸、グルタミン酸、システイン酸、アルギニン及びリジンから成る群から選択される1つ又は2つの荷電アミノ酸から成るスペーサーである、請求項20に記載のプロドラッグ。
- R1が(CH2)4NHR9又は(CH2)4NH-S1-R9であり、R3がC3-C4アルキルであり、さらにR9がC18-C28アシルである、請求項25に記載のプロドラッグ。
- AのN-末端アミンを介してAに連結される血清酵素切断性部分をさらに含む、請求項20−26のいずれかに記載のプロドラッグ。
- 血清酵素切断性部分がジペプチジルペプチダーゼIV(DPP-IV)によって切断されるペプチドである、請求項27に記載のプロドラッグ。
- 血清酵素切断性ペプチド部分が配列Z-プロリン又はZ-アラニンを有するジペプチドであり、ここでXが、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、セリン、スレオニン、システイン、メチオニン、アスパラギン、グルタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、及びグルタミン酸から成る群から選択される、請求項28に記載のプロドラッグ。
- 当該血清酵素切断性ペプチド部分がArg-Pro又はLys-Proである、請求項29に記載のプロドラッグ。
- インスリンペプチドが、GIVEQCCX8X9ICSLYQLENYCX21-R44(配列番号:73)のA鎖配列及びR22-X25LCGX29X30LVX33X34LYLVCGX41X42GFX45(配列番号:20)のB鎖配列を含み、
ここで、前記B鎖はジスルフィド結合を介して前記A鎖と連結され、
X8はヒスチジン又はスレオニンであり、
X9はセリン、リジン又はアラニンであり、
X21は、アラニン、グリシン又はアスパラギンであり、
X25はヒスチジン又はスレオニンであり、
X29はアラニン、グリシン及びセリンから成る群から選択され、
X30はヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン酸、及びシステイン酸から成る群から選択され、
X33はアスパラギン酸及びグルタミン酸から成る群から選択され、
X34はアラニン及びスレオニンから成る群から選択され、
X41は、グルタミン酸、アスパラギン酸又はアスパラギンから成る群から選択され、
X42はアラニン、オルニチン、リジン及びアルギニンから成る群から選択され、
X45はチロシン又はフェニルアラニンであり、
R22は、FVNQ(配列番号:12)、FVKQ(配列番号:8)、トリペプチドのバリン-アスパラギン-グルタミン、ジペプチドのアスパラギン-グルタミン、グルタミン、及びN-末端アミンから成る群から選択され;さらに
R44はCOOH又はCONH2である、
請求項20−30のいずれかに記載のプロドラッグ。 - A鎖が配列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN-R44(配列番号:1)を含み、さらにB鎖が、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT(配列番号:2)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(配列番号:9)、FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTDKT(配列番号:5)及びFVKQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTEKT(配列番号:6)から成る群から選択される配列を含む、請求項31に記載の結合物。
- R2がHであり、Bが、グリシン(N-メチル)、グリシン(N-エチル)、グリシン(N-プロピル)、グリシン(N-ブチル)、グリシン(N-ペンチル)、グリシン(N-へキシル)、グリシン(N-ヘプチル)、及びグリシン(N-オクチル)から成る群から選択される、請求項20に記載のプロドラッグ。
- R2及びR4がともにHであり、さらにR8がCH3、CH2(C1-C4アルキル)、CH2(C1-C4)アルケニル、CH2(C0-C4アルキル)OH、CH2(C0-C4アルキル)SH、CH2(C0-C3アルキル)SCH3、CH2(C0-C3アルキル)CONH2、CH2(C0-C3アルキル)COOH、CH2(C0-C4アルキル)NH2及びCH2(C0-C3アルキル)NHC(NH2 +)NH2から成る群から選択される、請求項20に記載のプロドラッグ。
- R2がHであり、Bが、アラニン(N-C1-C6アルキル)、ロイシン(N-C1-C6アルキル)、メチオニン(N-C1-C6アルキル)、アスパラギン(N-C1-C6アルキル)、グルタミン酸(N-C1-C6アルキル)、アスパラギン酸(N-C1-C6アルキル)、グルタミン(N-C1-C6アルキル)、ヒスチジン(N-C1-C6アルキル)、リジン(N-C1-C6アルキル)、アルギニン(N-C1-C6アルキル)、セリン(N-C1-C6アルキル)、及びシステイン(N-C1-C6アルキル)から成る群から選択される、請求項20に記載のプロドラッグ。
- R2、R4及びR8が独立にH及びC1-C18アルキルから成る群から選択されるか、又はR4及びR8はそれらに結合する原子と一緒にC3-C6シクロアルキルを形成し、
R1は、(C1-C8アルキル)OR9、(C1-C8アルキル)SR9、及び(C1-C4アルキル)NHR9から成る群から選択され、さらに
R3はC1-C8アルキルであるか、又はR4及びR3がそれらに結合する原子と一緒に4、5又は6員の複素環式環を形成している、請求項20に記載のプロドラッグ。 - AがD-立体空間配置を有する、請求項1−36のいずれかに記載のプロドラッグ。
- プロドラッグに共有結合された親水性部分をさらに含む、請求項1−37のいずれかに記載のプロドラッグ。
- 親水性部分がポリエチレングリコールである、請求項38に記載のプロドラッグ。
- 請求項1−39のいずれか1項に記載のプロドラッグ及び医薬的に許容できる担体を含む、医薬組成物。
- 高血糖症又は糖尿病を治療する方法であって、請求項40に記載の医薬組成物の有効量を投与する工程を含む、前記方法。
- プロドラッグが、対応する非プロドラッグ処方物の最適投薬量の1/nで毎日投与され、ここでnは生理学的条件下の血清中のA-B-CのQからの切断半減期(日数による)を表す、請求項41に記載の方法。
- 高血糖症又は糖尿病治療用医薬の製造のための請求項1−39のいずれか1項に記載のプロドラッグの使用。
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BR112023000270A2 (pt) | 2020-07-22 | 2023-01-31 | Novo Nordisk As | Composto, composição farmacêutica, e, peptídeo |
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WO2024110614A1 (en) | 2022-11-25 | 2024-05-30 | Novo Nordisk A/S | Oral administration of peptide therapeutics, such as glp-1 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005524677A (ja) * | 2002-02-22 | 2005-08-18 | ニュー リバー ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 活性物質送達系及び活性物質を保護し投与する方法 |
JP2006525235A (ja) * | 2003-05-08 | 2006-11-09 | カー・イュー・ルーベン・リサーチ・アンド・ディベロップメント | Cd26によって開裂可能なプロドラッグ |
JP2012512901A (ja) * | 2008-12-19 | 2012-06-07 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーション | アミド系インスリンプロドラッグ |
JP2013531660A (ja) * | 2010-06-24 | 2013-08-08 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーション | アミド系インスリンプロドラッグ |
Family Cites Families (70)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3740385A (en) | 1970-05-07 | 1973-06-19 | M Ondetti | N-terminal derivatives of secretin |
US4275152A (en) | 1977-02-03 | 1981-06-23 | Eastman Kodak Company | Hydrolysis of protein-bound cholesterol esters |
DK119785D0 (da) | 1985-03-15 | 1985-03-15 | Nordisk Gentofte | Insulinpraeparat |
PT83613B (en) | 1985-10-28 | 1988-11-21 | Lilly Co Eli | Process for the selective chemical removal of a protein amino-terminal residue |
US4741897A (en) | 1986-07-08 | 1988-05-03 | Baxter Travenol | Thyroxine analogs and reagents for thyroid hormone assays |
US4876242A (en) | 1987-09-21 | 1989-10-24 | Merck & Co., Inc. | Human insulin-like growth factor analoges with reduced binding to serum carrier proteins and their production in yeast |
GB8728561D0 (en) | 1987-12-07 | 1988-01-13 | Glaxo Group Ltd | Chemical compounds |
US5514646A (en) | 1989-02-09 | 1996-05-07 | Chance; Ronald E. | Insulin analogs modified at position 29 of the B chain |
US6225449B1 (en) | 1991-10-04 | 2001-05-01 | Washington University | Hormone analogs with multiple CTP extensions |
WO1990012814A1 (en) | 1989-04-20 | 1990-11-01 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Hepatospecific insulin analogues |
US5268453A (en) | 1991-08-08 | 1993-12-07 | Scios Inc. | Tissue-selective insulin analogs |
CA2157767A1 (en) | 1993-03-09 | 1994-09-15 | Elaine M. Brate | Genetically engineered enzymes and their conjugates for diagnostic assays |
US5359030A (en) | 1993-05-10 | 1994-10-25 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized polypeptide compositions, therapeutic delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
US6476290B1 (en) | 1995-04-19 | 2002-11-05 | Dalhousie University | Transgenic tilapia comprising a humanized insulin gene |
CA2223272A1 (en) | 1995-05-05 | 1996-11-07 | Ronald Eugene Chance | Single chain insulin with high bioactivity |
US6180767B1 (en) | 1996-01-11 | 2001-01-30 | Thomas Jefferson University | Peptide nucleic acid conjugates |
AU724326B2 (en) | 1996-09-09 | 2000-09-14 | Zealand Pharmaceuticals A/S | Peptide prodrugs containing an alpha-hydroxyacid linker |
UA65549C2 (uk) | 1996-11-05 | 2004-04-15 | Елі Ліллі Енд Компані | Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція |
CN1241942C (zh) | 1998-02-23 | 2006-02-15 | 纽罗克里恩生物科学有限公司 | 使用胰岛素的肽类似物治疗糖尿病的方法 |
IL138214A0 (en) | 1998-03-09 | 2001-10-31 | Zealand Pharmaceuticals As | Pharmacolgically active peptide conjugates having a reduced tendency towards enzymatic hydrolysis |
US6875741B2 (en) | 1998-09-02 | 2005-04-05 | Renuka Pillutla | Insulin and IGF-1 receptor agonists and antagonists |
US20030236190A1 (en) | 1998-09-02 | 2003-12-25 | Renuka Pillutla | Isulin and IGF-1 receptor agonists and antagonists |
DE19908041A1 (de) | 1999-02-24 | 2000-08-31 | Hoecker Hartwig | Kovalent verbrückte Insulindimere |
MXPA01009805A (es) | 1999-03-29 | 2004-07-30 | Univ Ulster | Peptido. |
US6746853B1 (en) | 1999-05-19 | 2004-06-08 | Xencor, Inc. | Proteins with insulin-like activity useful in the treatment of diabetes |
AUPQ661800A0 (en) | 2000-03-31 | 2000-05-04 | Metabolic Pharmaceuticals Limited | Insulin-potentiating compounds |
CA2417100A1 (en) | 2000-08-02 | 2002-02-07 | Theratechnologies Inc. | Modified peptides with increased potency |
AU2001284697A1 (en) | 2000-08-04 | 2002-02-18 | Dmi Biosciences, Inc. | Method of synthesizing diketopiperazines |
EP1324779B1 (en) | 2000-09-29 | 2011-07-20 | Schering Corporation | Pegylated interleukin-10 |
KR100449454B1 (ko) | 2000-10-02 | 2004-09-21 | 이현철 | 단일사슬 인슐린 유도체의 유전자를 포함하는 당뇨병치료용 벡터 |
KR101229995B1 (ko) | 2000-12-11 | 2013-02-06 | 씨제이 주식회사 | 생체내 에리스로포이에틴 활성이 증진된 융합단백질 |
EP1243276A1 (en) | 2001-03-23 | 2002-09-25 | Franciscus Marinus Hendrikus De Groot | Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs |
DK2128246T3 (da) | 2001-04-19 | 2014-05-12 | Univ California | Fremgangsmåder og sammensætninger til fremstilling af ortogonale tRNA-aminoacyl-tRNA-syntetasepar. |
KR20040070237A (ko) | 2001-12-20 | 2004-08-06 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | 연장된 작용 시간을 갖는 인슐린 분자 |
FR2842209B1 (fr) | 2002-07-09 | 2007-11-23 | Nouvelle protease aspartique dite saspase et son utilisation dans le domaine cosmetique et therapeutique | |
WO2004067548A2 (en) | 2003-01-31 | 2004-08-12 | Theratechnologies Inc. | Chemically modified metabolites of regulatory peptides and methods of producing and using same |
WO2004078777A2 (en) | 2003-03-04 | 2004-09-16 | Biorexis Pharmaceutical Corporation | Dipeptidyl-peptidase protected proteins |
SI1605897T1 (sl) | 2003-03-19 | 2012-11-30 | Lilly Co Eli | Polietilen glikol povezane GLP spojine |
DK1620118T3 (da) | 2003-04-08 | 2014-09-29 | Yeda Res & Dev | Reversible pegylerede lægemidler |
TW200526254A (en) | 2003-09-19 | 2005-08-16 | Novo Nordisk As | Novel GLP-1 derivatives |
WO2005035003A2 (en) | 2003-09-22 | 2005-04-21 | Dihedron Corporation | Compositions and methods for increasing drug efficiency |
EP1680443B9 (en) | 2003-11-05 | 2014-09-03 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized alpha helical peptides and uses thereof |
WO2005054291A1 (en) | 2003-12-03 | 2005-06-16 | Novo Nordisk A/S | Single-chain insulin |
WO2006047214A2 (en) | 2004-10-21 | 2006-05-04 | Igf Oncology, Llc | Toxins and radionuclides coupled to igf-1 receptor ligands for treatment of cancer |
WO2006097521A1 (en) | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Novo Nordisk A/S | Pegylated single-chain insulin |
US7521211B2 (en) | 2005-04-05 | 2009-04-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc | IGF-1 and IGF-2 chimeric polypeptides and therapeutic uses thereof |
US20090209453A1 (en) | 2005-04-13 | 2009-08-20 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Glycoprotein Hormone Analogs |
US8304386B2 (en) | 2006-02-03 | 2012-11-06 | Prolor Biotech, Inc. | Long-acting growth hormone and methods of producing same |
JP2009527526A (ja) | 2006-02-21 | 2009-07-30 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 単鎖インスリンのアナログとその製薬的製剤 |
US20090054305A1 (en) | 2006-03-15 | 2009-02-26 | Novo Nordisk A/S | Mixtures of Amylin and Insulin |
JP5256199B2 (ja) | 2006-08-07 | 2013-08-07 | テヴァ バイオファーマシューティカルズ ユーエスエー,インコーポレーティッド | アルブミン−インスリン融合タンパク質 |
WO2008021560A2 (en) | 2006-08-17 | 2008-02-21 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Dpp-iv resistant gip hybrid polypeptides with selectable properties |
CL2007002502A1 (es) | 2006-08-31 | 2008-05-30 | Hoffmann La Roche | Variantes del factor de crecimiento similar a insulina-1 humano (igf-1) pegilados en lisina; metodo de produccion; proteina de fusion que la comprende; y su uso para tratar la enfermedad de alzheimer. |
EP2069396B1 (en) | 2006-09-08 | 2015-10-21 | Ambrx, Inc. | Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses |
US20090098130A1 (en) | 2007-01-05 | 2009-04-16 | Bradshaw Curt W | Glucagon-like protein-1 receptor (glp-1r) agonist compounds |
EP2036923A1 (en) | 2007-09-11 | 2009-03-18 | Novo Nordisk A/S | Improved derivates of amylin |
EP2036539A1 (en) | 2007-09-11 | 2009-03-18 | Novo Nordisk A/S | Stable formulations of amylin and its analogues |
US8261025B2 (en) | 2007-11-12 | 2012-09-04 | International Business Machines Corporation | Software pipelining on a network on chip |
NZ603812A (en) | 2007-11-20 | 2014-06-27 | Ambrx Inc | Modified insulin polypeptides and their uses |
WO2009099763A1 (en) | 2008-01-30 | 2009-08-13 | Indiana University Research And Technology Corporation | Ester-based peptide prodrugs |
US8906847B2 (en) | 2008-02-01 | 2014-12-09 | Ascendis Pharma A/S | Prodrug comprising a drug linker conjugate |
WO2010011313A2 (en) | 2008-07-23 | 2010-01-28 | President And Fellows Of Harvard College | Ligation of stapled polypeptides |
CN102300580A (zh) | 2008-12-19 | 2011-12-28 | 印第安纳大学研究及科技有限公司 | 二肽连接的药剂 |
AR074811A1 (es) | 2008-12-19 | 2011-02-16 | Univ Indiana Res & Tech Corp | Profarmaco de peptido de la superfamilia de glucagon basados en amida |
WO2010080606A1 (en) | 2008-12-19 | 2010-07-15 | Indiana University Research And Technology Corporation | Insulin analogs |
US8569231B2 (en) | 2009-03-20 | 2013-10-29 | Smartcells, Inc. | Soluble non-depot insulin conjugates and uses thereof |
EP2292306B1 (en) | 2009-09-02 | 2013-05-01 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Method for separation of racemic compound-forming chiral substances by a cyclic crystallization process and a crystallization device |
CA2802485C (en) | 2010-06-16 | 2019-09-17 | Indiana University Research And Technology Corporation | Single chain insulin agonists exhibiting high activity at the insulin receptor |
WO2011163460A1 (en) | 2010-06-24 | 2011-12-29 | Indiana University Research And Technology Corporation | Yl-based insulin-like growth factors exhibiting high activity at the insulin receptor |
WO2011163012A2 (en) | 2010-06-24 | 2011-12-29 | Indiana University Research And Technology Corporation | Amide based glucagon superfamily peptide prodrugs |
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005524677A (ja) * | 2002-02-22 | 2005-08-18 | ニュー リバー ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 活性物質送達系及び活性物質を保護し投与する方法 |
JP2006525235A (ja) * | 2003-05-08 | 2006-11-09 | カー・イュー・ルーベン・リサーチ・アンド・ディベロップメント | Cd26によって開裂可能なプロドラッグ |
JP2012512901A (ja) * | 2008-12-19 | 2012-06-07 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーション | アミド系インスリンプロドラッグ |
JP2013531660A (ja) * | 2010-06-24 | 2013-08-08 | インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーション | アミド系インスリンプロドラッグ |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
BIOCHEMISTRY (2000) VOL.39, PP.11893-11900, JPN6019033064, ISSN: 0004102893 * |
BIOCHEMISTRY (2004) VOL.43, PP.5987-5995, JPN6019033068, ISSN: 0004102894 * |
BIOCONJUGATE CHEM., 2005, VOL.16, P.913-920, JPN6014022958, ISSN: 0004102891 * |
INT. J. PEPTIDE PROTEIN RES. (1987) VOL.30, PP.460-473, JPN6019033070, ISSN: 0004102895 * |
PHARMACEUTICAL RESEARCH (2004) VOL.21, NO.8, PP.1498-1504, JPN6019033061, ISSN: 0004102892 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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---|---|---|
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