JP2017525772A - 局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物およびその医薬品と使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物およびその医薬品と使用を開示する。本発明における組成物は、レスベラトロールとウコン抽出物を１：３０から１０：１の重量比で含有する。本発明の組成物およびその医薬品は、脂肪細胞の成長を抑制することができると共に、脂肪細胞のアポトーシスを促進することができるため、脂肪細胞を減少させ、局所の脂肪の蓄積量を減らし、体重を減少させる効果を有する。したがって、周辺細胞と組織の炎症反応や組織壊死を引き起こすことなく、末梢組織の炎症や痛みを生じさせることもなく、現有の脂肪吸引術や低侵襲性の脂肪分解機器を用いた技術における組織の損傷あるいは炎症や痛みの問題発生が避けられる。また、脂肪分解注射剤の成分であるホスファチジルコリン（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）やデオキシコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）に起因する細胞の崩壊壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）による末梢組織の炎症や壊死、感染などの問題も生じない。

Description

本発明は、局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物に関するものである。本発明は、局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物の使用に関するものである。本発明はさらに、局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物を含む医薬品に関する。本発明は、前記医薬品による局所の脂肪と体重の減少における使用に関するものである。

近年、美意識が変化し、また、健康、体型や体重などへの意識が高まっていることにつれ、肥満者のみならず、ダイエットやボディシェイプは多くの人々から注目されている。そのため、ダイエット、ボディシェイプや体重管理市場が盛んになり、ダイエット食品、ボディシェイプ保健品、ダイエット臨床管理、医療機器、フィットネス運動器具などの関連産業の発展を推進する。Ｍａｒｋｅｔｓａｎｄ Ｍａｒｋｅｔｓの統計レポート「Ｇｌｏｂａｌ Ｗｅｉｇｈｔ Ｌｏｓｓ ａｎｄ Ｇａｉｎ Ｍａｒｋｅｔ２００９−２０１４」によると、世界の体重管理市場（Ｗｅｉｇｈｔ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ）は、２０１４年に５８６３億ドルに達し、２０１５年にはさらに６５０９億ドルに達すると見込まれている。その中、アメリカが主な市場であり、その市場規模は３１００億ドルに達すると予測される。その次は、ヨーロッパであり、その市場規模は２３８０億ドルに達すると予測される。それと同時に、消費者の健康意識が高まり、特に肥満に伴う各種の慢性疾患による影響に関しては、各国において日々重要なテーマとなっている。さらに、肥満者のみならず、健康者の体重管理やフィットネス等に対する関心も高まっているため、多くの人々からフィットネスが重要視されるようになり、関連産業が急速に発展する。上記は、市場全体の安定な成長の主な原因となっている。２０１２年のアメリカ形成外科学会（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｓｕｒｇｅｏｎｓ）の統計によると、ボディコンター（Ｂｏｄｙ Ｃｏｎｔｏｕｒｉｎｇ）に対する需要は、形成外科において一位を保っており、さらに、２０１７までには毎年１２．３％の成長率で増加すると予測されている。Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｍａｒｋｅｔｓより出版された「Ｇｌｏｂａｌ Ｐｉｐｅｌｉｎｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ Ｌａｎｄｓｃａｐｅ ａｎｄ Ｍａｒｋｅｔ Ｆｏｒｅｃａｓｔｓ」によると、２０１０年に世界のフィットネス機器設備の市場は９億ドルに達しており、さらに、２０１７年には２０億ドルまで増加すると予測されている。市場の需要量が大きく、かつ毎年増加しているため、市場に出ている脂肪吸引・脂肪分解法が様々であり、リスクが高いあるいは保障されない医療行為等も続々と増えている。

周知の脂肪吸引術は早くも１９７０年代から発展しており、当時採用された脂肪吸引方法は、液体を注入しない状態で、直接に陰圧によって乾式脂肪吸引を行う方法であったため、皮下神経や血管に大きな損傷を与えることがあり、出血が多く、リスクの高い手術であった。その後、インフレータブル脂肪吸引やスーパーウェット脂肪吸引方法が発展してきており、インフレータブル脂肪吸引は、麻酔薬と血管収縮薬が添加される注入液を用いる方法であり、この方法で脂肪吸引を行う際、静脈麻酔の代わりに局所麻酔が採用される。しかし、大量の液体を注入した結果、麻酔薬が代謝されるまでは少なくとも１２時間体内に残ってしまうため、局所麻酔により人体に有害な影響をもたらす可能性がある。最近医者によってよく使われる大量の脂肪を吸引する方法は、スーパーウェット脂肪吸引である。この方法は、注入液の量は抽出された脂肪量と同じであるという特徴を有し、これによって注入液の過負荷の可能性を有効に減少させることができる。しかし、臨床上、脂肪吸引術の施行部位は、主に腹部、ふとももなどの脂肪量が多い部位に限られている。また、脂肪吸引術の有効性と安全性は大抵医者本人の技術の習熟度に依存しており、脂肪吸引による身体への損害が大きく、回復には時間がかかる。さらに術後に、患者は深刻なあざ、腫れ、痛みや感覚麻痺、瘢痕組織や皮膚表面の凹凸などの副作用を受忍しなければならない。その回復期は４週から６週ほど長くかかり、さらに、手術の期間が長いため、大量出血は手術のリスクを高める要因になっている。そのため、様々な脂肪吸引の補助機械が開発され、超音波、レーザー等の脂肪吸引の補助方法も相次いで登場しているが、依然としてもっとも重要なことは、脂肪吸引を行う医者の技術にある。また、関連の補助機械による組織の火傷や手術失敗などの問題も多く発生する。脂肪吸引術が直面している困難に応じ、様々な技術や設備が改良されている。１９８０年代より欧米の医学美容産業は医学美容設備の開発に力を入れている。ボディコンターを例にすれば、大手各社は伝統な脂肪吸引術にとってかわり、低侵襲や非侵襲的な脂肪分解機器などを主力製品としており、脂肪分解製品か機器などに関しては、従来の方法における多い出血量・長い回復期や術後の傷痕などの欠点を改善することを主な目的として開発されている。つまり、低侵襲性、高安全性、高い利便性、小さい傷、短い回復期という方向に向かっている。しかし、それと同時に有効性と価格競争力がなければ、現在の医学美容市場に入る優位性もない。

それ以外にも、メソセラピーによって脂肪を分解させる方式があり、これは主に、ホスファチジルコリン（Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）やデオキシコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）を有効成分として、肥満部位へ注射することによって脂肪分解をさせる方法である。このような成分は、細胞膜の成分と類似するため、脂肪細胞の細胞膜を破壊することで細胞の崩壊壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）をもたらせる。このような薬物を中胚葉へ注射すれば脂肪細胞が大量に壊死することによって脂肪は溶出されるが、特異性のない薬物であるため、脂肪細胞に限って作用するのではなく、周囲の正常細胞も影響され壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）してしまう。細胞の壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ） に伴って末梢組織の一連の炎症反応を起こし、それによって実施部位の炎症反応と激しい痛みと腫れをもたらす。さらに、局所の組織の壊死や感染などのリスクがある。注射剤による脂肪分解の方法を用いることにより、大型機器を使用するときに遭遇する治療部位の制限を克服することができるが、脂肪分解の効果を得るために一回の治療で数十回の注射を行わなければならないし、またその治療過程では二週ごとに注射を行う必要があり、１〜６回の治療を行うべきである。注射の成分には麻酔薬が添加されているが、麻酔薬の効果が切れると、注射部位は、深刻な炎症反応と痛みが発生する。また、治療回数と注射回数の改善が必要とされる。さらに、術後に深刻な痛みや神経麻痺感覚と局所の組織壊死や感染などのリスクがあり、一回の注射量が限られており、適用部位も顔に限られている。そのため、上述の成分を注射することで局所の脂肪を減少させる方法はあまり使われなくなっている。アメリカでは最初のデオキシコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）からなる脂肪分解注射の製品が認められているが、この製品はある程度の上述の副作用があり、また、二重顎にしか適用されないため、その適用範囲が非常に限られている。

総じていえば、局所の脂肪を有効に減少させることができ、副作用が少なく、安全性が高いという条件を満たす製品は現在の市場に存在していない。そのため、医者と消費者の要望に応じて、安全性があり、副作用が少なく、かつ上述の脂肪分解方法の制限や欠点を有しない局所注射剤を開発することは、今後の重要課題となっている。

本発明は、レスベラトロールとウコン抽出物を１：３０から１０：１の重量比で含有する、局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物を提供する。好ましくは、レスベラトロールとウコン抽出物の重量比は１：１９である。

本発明の組成物は脂肪細胞の成長を抑制することができると共に、脂肪細胞のアポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）を促進することができるため、局所の脂肪の蓄積量を減らし、脂肪細胞を減少させる効果をもたらし、または体重を減少できる。周辺細胞や組織の炎症反応や組織壊死を引き起こすことなく、末梢組織の炎症反応や深刻な痛みを生じさせることもないため、上述の脂肪吸引術や低侵襲性の脂肪分解機器による組織の損傷や炎症、痛みの問題発生が避けられる。さらに、脂肪分解注射剤の成分であるホスファチジルコリン（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）やデオキシコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）に起因する細胞の崩壊壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）による末梢組織の炎症反応や壊死、感染などの問題発生も避けられる。また、本発明は体重減少の効果を有する。

本発明に係る「ウコン抽出物」は、クルクミンを含有する抽出物である。また、ウコン抽出物におけるクルクミンの濃度は、８０％から１００％である。

本発明はさらに、レスベラトロールとウコン抽出物を含有する組成物と、少なくとも一種の医学薬学上許容される塩組成物、医学薬学上許容される安定剤、静菌剤や医学薬学上許容される乳化剤、界面活性剤などの賦形剤、麻酔薬と、を混合して注射剤を製造する、レスベラトロールとウコン抽出物を含有する組成物の製造方法を提供する。

上述の安定剤としては、キシリトール、ソルビトール、ポリデキストロース、イソマルト、デキストロースが挙げられるが、これらに限定されない。

上述の「医学薬学上許容される賦形剤」としては、潤滑剤（ｌｕｂｒｉｃａｎｔ）、懸濁剤（ｓｕｓｐｅｎｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、可溶化剤（ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｒ）、流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）、乳化剤（ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒ）、界面活性剤（ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。賦形剤の使用量は、活性成分の量により決まる。また、一種の賦形剤は一つ以上の機能を発揮しうる。

上述の潤滑剤としては、寒天、ステアリン酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ ｓｔｅａｒａｔｅ）、オレイン酸エチル（ｅｔｈｙｌ ｏｌｅａｔｅ）、ラウリル酸エチル（ｅｔｈｙｌ ｌａｕｒａｔｅ）、グリセリン（ｇｌｙｃｅｒｉｎ）、パルミトステアリン酸グリセリル（ｇｌｙｃｅｒｙｌ ｐａｌｍｉｔｏｓｔｅａｒａｔｅ）、水素化植物油（ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｅｄ ｖｅｇｅｔａｂｌｅ ｏｉｌ）、酸化マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｏｘｉｄｅ）、ステアリン酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｔｅａｒａｔｅ）、マンニトール（ｍａｎｎｉｔｏｌ）、ポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）、エチレングリコール（ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）、安息香酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｂｅｎｚｏａｔｅ）、ラウリル硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｌａｕｒｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ）、ステアリン酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｓｔｅａｒｏｙｌ ａｃｉｄ）、ソルビトール、ステアリン酸（ｓｔｅａｒｉｃ ａｃｉｄ）、タルク（ｔａｌｃ）、ステアリン酸亜鉛（ｚｉｎｃ ｓｔｅａｒａｔｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。

上述の懸濁剤としては、マンニトール、カルボキシメチルセルロース（ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，ＣＭＣ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−ＮＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。

上述の可溶化剤としては、ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ−ｂｅｔａ−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ）、ポリソルベート８０（ｔｗｅｅｎ ８０）、ヒマシ油（ｃａｓｔｏｒ ｏｉｌ）が挙げられるが、これらに限定されない。

上述の流動促進剤としては、ステアリン酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｔｅａｒａｔｅ）、二酸化ケイ素（ｓｉｌｉｃｏｎ ｄｉｏｘｉｄｅ）、三ケイ酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｔｒｉｓｉｌｉｃａｔｅ）、粉末セルロース（ｐｏｗｄｅｒｅｄ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、デンプン、タルク、三塩基性リン酸カルシウム（ｔｒｉｂａｓｉｃ ｃａｌｃｉｕｍ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ケイ酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ ｓｉｌｉｃａｔｅ）、マグネシウムシリケート（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｉｌｉｃａｔｅ）、コロイド状シリカ、シリカゲル（ｓｉｌｉｃｏｎ ｈｙｄｒｏｇｅｌ）が挙げられるが、これらに限定されない。

好ましくは、上述の乳化剤は、自然に存在するホスファチドであり、大豆リン脂質、レシチン、モノグリセリド、ジグリセリド、ステアリン酸ナトリウム、ソルビタン脂肪酸エステル（ｓｏｒｂｉｔａｎ ｅｓｔｅｒｓ ｏｆ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ）、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートを含むが、これらに限定されない。

上述の界面活性剤としては、ポリオキシエチレン−ソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリエチレン−ポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレン−モノステアレート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル）、アルキルベンゼンイルポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ）、ポリオキシエチレン − ポリオキシプロピレンコポリマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が挙げられるが、これらに限定されない。

本発明はさらに、上述の組成物の局所の脂肪と体重の減少に用いられる医薬品の製造のための使用を提供する。

本発明はさらに、有効量の局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物および医学薬学上許容される担体を含有する、局所の脂肪と体重の減少に用いられる医薬品を提供する。

本発明の医薬品はいろんな形態で存在しうる。その形態は、液体、半固体、固体薬剤が挙げられるが、これらに限定されない。液体溶液（例えば、注射可能や注入可能な溶液など）、分散液、懸濁液、粉末、凍結乾燥粉末、リポソーム、経皮吸収軟膏とパップ剤等が可能である。その形態は予定される投薬方式や治療の使用により決まる。本発明の医薬品は、好ましくは、注入可能な医薬品であり、投薬方式は、好ましくは、非経腸方式（たとえば、溶液の注射）である。本発明の実施例において、局所の脂肪を減少させることができる有効量のレスベラトロールおよびウコン抽出物の組成物を含有する医薬品は、皮下注射によって投薬されている。好ましくは、局所の脂肪を減少させることができる有効量のレスベラトロールおよびウコン抽出物の組成物を含有する医薬品は、皮下注射によって皮下脂肪層に注射されている。具体的実施例において、軟膏の調製は、当業者が公知しているように、活性剤、ワックス、水、ワセリン、防腐剤、高級アルコール、多価アルコール、乳化剤、溶媒、増粘剤、可塑剤、香料、緩衝剤、抗生物質、トランキライザーやその混合物を含むが、これらに限定されない。

本発明の医薬組成物の含有量は異なるパラメータに従い適切に調整しうる。上述のパラメータは受容者の種類、受容者の体重、受容者の局所の脂肪の厚さと面積などを含むが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物の投与は単回投与、２４時間内に複数回若しくは連続投与、または毎週若しくは毎月複数回若しくは連続投与でありうる。投与方式としては注射、皮下埋込、埋め込み式輸液、軟膏剤、パップ剤が挙げられる。上述注射は、皮下注射、皮下埋込、点滴静脈注射、静脈注射ポンプ、埋め込み式注射ポンプを含むが、これらに限定されない。

本発明はさらに有効量のレスベラトロールとウコン抽出物の組成物を含有する医薬品を受容者の局所部位に投与することにより、受容者の局所部位の脂肪細胞の成長を抑制すると共に、脂肪細胞のアポトーシスを促進し、蓄積脂肪および体重を減少する効果をもたらす、上述医薬品の局所の脂肪と体重の減少における使用を提供する。

好ましくは、上述の受容者はヒトあるいは動物である。

好ましくは、上述の有効量は、毎回受容者に投与する医薬品の量として、０．４ｍｇ／Ｋｇから１００ｍｇ／Ｋｇである。好ましくは、上述の有効量は、毎回受容者に投与する医薬品の量として、１ｍｇ／Ｋｇから６０ｍｇ／Ｋｇである。

好ましくは、上述の体重減少とは、受容者の体重増加率を５％から３０％減少させることである。

本発明によれば、「局所の脂肪を減少する」とは、本発明の有効量のレスベラトロールとウコン抽出物を含有する組成物を投与した後に、脂肪細胞の成長を抑制し、また脂肪細胞においてアポトーシスを誘導し、さらに局所の脂肪の蓄積量を減少させることを意味する。本発明に例示されるように、局所の脂肪を減少させることは、局所部位に特定量のレスベラトロールとウコン抽出物を含有する組成物を投与した後に、特定時間内の脂肪細胞の成長が阻害される程度、脂肪細胞のアポトーシスの程度、ラットの皮下脂肪量および内臓脂肪量の変化を測ることによって測定できる。好ましくは、上述の局所の脂肪は、皮下脂肪、内臓脂肪、局所に蓄積された脂肪や脂肪細胞が挙げられるが、これらに限定されない。

好ましくは、上述の局所の脂肪は、顔、顎、腕、腰、腹部や太ももなどの部位の脂肪を含むが、これらに限定されない。

本発明の組成物や医薬物は、レスベラトロールまたはウコン抽出物を単独で投与するよりも優れた効果を有する。それのみならず、従来、単独でまたはレスベラトロールとウコン抽出物を併用して、局所注射の投薬方式によって局所の脂肪を減少させるために投与するという前例も存在していない。さらに、本発明は、主に局所注射で投薬することによって脂肪細胞の成長を抑制すると共に、脂肪細胞のアポトーシスを促進することによって局所の脂肪を減少させるため、周辺細胞や組織に影響を及ばさない。動物実験においては著しい副作用が発生しないため、本発明の組成物や医薬品の安全性が高いと共に、副作用が低いので、現有技術や製品とは完全に異なり、現有の脂肪吸引術、集束超音波脂肪分解などの脂肪分解機器やホスファチジルコリン、デオキシコール酸ナトリウムなどの脂肪分解注射剤の成分に起因する、局所の細胞の壊死、激しい痛み、周辺組織の炎症反応や壊死、感染などの問題発生が避けられる。さらに、患者が経験する術後のあざ、腫れ、痛みやしびれ感を軽減することができ、術後の回復期も短くなる。

細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を用いて測定した、各グループの前駆脂肪細胞に対する成長抑制効果を示すヒストグラムである。 細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を用いて測定した、各グループの分化中の脂肪細胞に対する成長抑制効果を示すヒストグラムである。 細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を用いて測定した、ＵＬ００３Ｃとデオキシコール酸ナトリウムの成熟脂肪細胞に対する成長抑制効果を示すヒストグラムである。 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩで染色された後に、フローサイトメトリーでＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 ｃａｓｐａｓｅ ３で染色された後に、フローサイトメトリーでＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 ｃａｓｐａｓｅ ３で染色された後に、フローサイトメトリーでウコン抽出物、レスベラトロール、ＵＬ００３Ｃによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩで染色された後に、フローサイトメトリーでＵＬ００３Ｃ、デオキシコール酸ナトリウムによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの体重変化を示す折れ線グラフである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの皮下脂肪の減少比例を示すグラフである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの血清生化学値（クレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）、グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（ｇｌｕｔａｍｉｃ ｏｘａｌｏａｃｅｔｉｃ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ，ＧＯＴ））を示すヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの血清生化学値（尿素（ｕｒｅａ）、グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（ｇｌｕｔａｍｉｃ ｐｙｒｕｖｉｃ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ，ＧＴＰ））を示すヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後、ウエスタンブロット法で測定した、各グループの細胞のアポトーシスに関与する蛋白質であるＢａｘ、Ｂｃｌ−２の発現量およびＢａｘ／Ｂｃｌ−２比率を示すヒストグラムである。

以下は図面と本発明の実施例に基づいて、本発明の目的を達成するための技術的手段をさらに説明する。

実施例１．前駆脂肪細胞の成長抑制実験
本実施例では、前駆脂肪細胞３Ｔ３−Ｌ１をウェルごとに１×１０^４の細胞（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）で９６ウェルプレートに培養した。ＤＭＳＯ溶媒対照群（コントロール）以外、異なるウェルにそれぞれ、５０ｐｐｍのレスベラトロール、５０ｐｐｍのウコン抽出物、８０ｐｐｍの緑茶抽出物と１００ｐｐｍの本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒを添加して実験を行った。合わせて７つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。薬を添加して４８時間培養した後、細胞の成長状況を写真で記録し、細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）によって、各グループの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞に対する成長抑制効果を測定した。そのうち、ＵＬ００３Ａグループのレスベラトロールと緑茶抽出物の重量比は９：１であり、ＵＬ００３Ｃグループのレスベラトロールとウコン抽出物の重量比は１：１９であり、ＵＬ００３Ｒグループのレスベラトロールとウコン抽出物の重量比は９：１であった。各グループのデータは、平均値±ＳＤ（Ｍｅａｎ±ＳＤ）によって表示される。統計の結果は、アルファベットのａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅによって表示され、異なるアルファベットは、グループ間には統計的に有意差があることを意味する（ｐ＜０．０５）。

その結果は図１に示されているように、ＤＭＳＯ溶媒対照群に対して、本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３ＣおよびＵＬ００３Ｒは全て有効に前駆脂肪細胞の成長を抑制することができ（ｐ＜０．０５）、かつその他の単一植物エキスよりも著しく高い抑制効果を有する（ｐ＜０．０５）。

実施例２．分化中の脂肪細胞の成長抑制実験
本実施例では、３Ｔ３−Ｌ１を１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで１２ウェルプレートに培養し、四日目に、５ｕｇ／ｍｌの分化誘導剤インスリン、１μＭのデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）と０．５ｍＭの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（３−ｉｓｏｂｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）を含有する培養液に交換し、異なるウェルにそれぞれ、ＤＭＳＯ溶剤（対照群として）、５０ｐｐｍのレスベラトロール、５０ｐｐｍのウコン抽出物、８０ｐｐｍの緑茶抽出物および１００ｐｐｍの本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒを添加して実験を行った。合わせて７つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。薬を添加して４８時間培養した後、細胞の成長状況を写真で記録し、細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）によって各実験物質の分化中の脂肪細胞に対する抑制効果を測定した。各グループのデータは平均値±ＳＤ（Ｍｅａｎ±ＳＤ）によって表示される。統計の結果は、アルファベットのａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆによって表示され、異なるアルファベットは、グループ間には統計的に有意差（ｐ＜０．０５）があることを意味する。

その結果は図２に示されているように、ＤＭＳＯ溶媒対照群に対して、本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３ＣおよびＵＬ００３Ｒは全て有効に分化中の脂肪細胞の成長を抑制することができる（ｐ＜０．０５）。そのうち、組成物ＵＬ００３Ｃの分化中の脂肪細胞に対する成長抑制効果が最も優れている（ｐ＜０．０５）。また、組成物ＵＬ００３Ｃは、その他の単一植物エキスよりも優れた分化中の脂肪細胞に対する成長抑制効果を有する（ｐ＜０．０５）。

実施例３．成熟脂肪細胞の成長抑制実験
本実施例は本発明の組成物と従来の局所脂肪分解成分であるデオキシコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）の成熟脂肪細胞に対する抑制効果を比較するものである。本実施例では、３Ｔ３−Ｌ１細胞を３×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで１２ウェルプレートに培養し、四日目に、５ｕｇ／ｍｌのインスリン、１μＭのデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）と０．５ｍＭの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（３−ｉｓｏｂｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）を含有する培養液に交換し、二日後に５ｕｇ／ｍｌのインスリンの培養液でさらに四日間培養した。３Ｔ３−Ｌ１細胞が分化成熟した後、ＰＢＳおよびＤＭＳＯ溶媒対照群以外、異なるウェルにそれぞれ、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍの組成物ＵＬ００３Ｃとデオキシコール酸ナトリウムを添加して実験を行った。合わせて６つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。薬を添加して４８時間培養した後、細胞の成長状況を写真で記録し、細胞生存率試験によって各実験物質の成熟脂肪細胞に対する抑制効果を測定した。

その結果は図３に示されているように、本発明の組成物は成熟脂肪細胞の成長を有効に抑制することができ、５０ｐｐｍ又は１００ｐｐｍの濃度において、本発明の組成物ＵＬ００３Ｃの成熟脂肪細胞の成長を抑制する効果がデオキシコール酸ナトリウムより著しく高い（ｐ＜０．００１）。

実施例４．脂肪細胞アポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）実験Ｉ
本実施例では、３Ｔ３−Ｌ１細胞を１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで１２ウェルプレートに培養し、四日目に、５ｕｇ／ｍｌの分化誘導剤インスリン、１μＭのデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）と０．５ｍＭの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（３−ｉｓｏｂｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）を含有する培養液に交換し、分化誘導剤を含有する培養液の中で四日培養し、細胞が成熟分化した後、ＤＭＳＯ溶媒対照群以外、異なるウェルにそれぞれ、５０ｐｐｍの本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒを添加して実験を行った。合わせて４つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。薬を添加して２４時間培養した後、細胞を集めてＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩ染色を行い、フローサイトメトリーでアポトーシス細胞（ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｃｅｌｌｓ）を分析した。そのうち、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＰＩ−は生存する成熟脂肪細胞の数であり、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ＋ＰＩ＋はアポトーシスを起こした成熟脂肪細胞の数である。この方法により異なるグループの薬が添加された後のアポトーシス率を評価した。

その結果は図４に示されているように、成熟脂肪細胞を上述各実験物質で２４時間培養後、ＤＭＳＯ溶媒対照群に対して、本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３ＣおよびＵＬ００３Ｒは全て著しく成熟脂肪細胞のアポトーシスを促進した（ｐ＜０．０５）。そのうち、組成物ＵＬ００３Ｃの成熟脂肪細胞のアポトーシス促進効果が最もよく、ＵＬ００３ＡおよびＵＬ００３Ｒよりも著しく高い抑制効果を有する（ｐ＜０．０５）。

実施例５．脂肪細胞アポトーシス実験ＩＩ
本実施例では、３Ｔ３−Ｌ１細胞を１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで１２ウェルプレートに培養し、四日目に、５ｕｇ／ｍｌの分化誘導剤インスリン、１μＭのデキサメタゾン（ｄｅｘｍｅｔｈａｓｏｎｅ）と０．５ｍＭの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（３−ｉｓｏｂｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）を含有する培養液に交換し、分化誘導剤を含有する培養液の中で四日培養し、脂肪細胞が成熟分化した後、ＤＭＳＯ溶媒対照群以外、異なるウェルにそれぞれ５０ｐｐｍおよび１００ｐｐｍの本発明の組成物ＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒを添加して実験を行った。合わせて７つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。薬を添加して３時間培養した後、細胞を集めてｃａｓｐａｓｅ ３染色を行い、フローサイトメトリーでアポトーシス細胞を分析した。そのうち、ｃａｓｐａｓｅ ３に染色された細胞はアポトーシスを起こした脂肪細胞であり、これにより異なるグループの薬が添加された後のアポトーシス率を評価した。

その結果は図５に示されているように、ＤＭＳＯ溶媒対照群に対して、本発明の組成物ＵＬ００３Ｃを５０ｐｐｍ若しくは１００ｐｐｍのいずれの濃度で脂肪細胞に添加しても、ｃａｓｐａｓｅ ３に染色された細胞数は著しくＤＭＳＯ溶媒対照群より高い（ｐ＜０．００１）。これは、組成物ＵＬ００３Ｃは成熟脂肪細胞のアポトーシスを著しく促進し、かつ最も効果的であることを示した。

実施例６．脂肪細胞アポトーシス実験III
本実施例では、３Ｔ３−Ｌ１細胞を１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで１２ウェルプレートに培養し、四日目に、５ｕｇ／ｍｌの分化誘導剤インスリン、１μＭのデキサメタゾン（ｄｅｘｍｅｔｈａｓｏｎｅ）と０．５ｍＭの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（３−ｉｓｏｂｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）を含有する培養液に交換して、分化誘導剤を含有する培養液の中で四日培養し、脂肪細胞が成熟分化した後、ＤＭＳＯ溶媒対照群以外、異なるウェルにそれぞれ、５０ｐｐｍのウコン抽出物、５０ｐｐｍのレスベラトロール、５０ｐｐｍ若しくは１００ｐｐｍの本発明の組成物ＵＬ００３Ｃを添加して実験を行った。合わせて５つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。先行文献によると、レスベラトロールが添加された細胞は１６時間後にｃａｓｐａｓｅ ３で染色される可能性が高いことが明らかにされており、その他の各グループは薬を添加して３時間培養した後、細胞を集めてｃａｓｐａｓｅ ３染色を行い、フローサイトメトリーでアポトーシス細胞を分析した。そのうち、ｃａｓｐａｓｅ ３に染色された細胞はアポトーシスを起こした脂肪細胞であり、これにより異なるグループの薬が添加された後のアポトーシス率を評価した。

その結果は図６に示されているように、成熟脂肪細胞に５０ｐｐｍの組成物ＵＬ００３Ｃを添加して培養した後、ｃａｓｐａｓｅ ３に染色された細胞数はＤＭＳＯ溶媒対照群よりも著しく高く（ｐ＜０．００１）、また、同量のウコン抽出物（ｐ＜０．０５）とレスベラトロール（ｐ＜０．００１）を添加したものと比較しても著しく高い。これは、組成物ＵＬ００３Ｃの成熟脂肪細胞のアポトーシスを促進する効果はいずれの植物エキスよりも著しく高いことを示した。

実施例７．脂肪細胞アポトーシス実験ＩＶ
本実施例は本発明の組成物ＵＬ００３Ｃと従来の局所脂肪分解成分であるデオキシコール酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ）の成熟脂肪細胞に対する抑制効果を比較するものである。本実施例では、３Ｔ３−Ｌ１細胞を１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで１２ウェルプレートに培養し、四日目に、５ｕｇ／ｍｌの分化誘導剤インスリン、１μＭのデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）と０．５ｍＭの３−イソブチル−１−メチルキサンチン（３−ｉｓｏｂｕｔｙｌ−１−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ）を含有する培養液に交換し、分化誘導剤を含有する培養液の中で四日培養し、脂肪細胞が成熟分化した後、ＤＭＳＯ溶媒対照群以外、異なるウェルにそれぞれ、１００ｐｐｍの本発明の組成物ＵＬ００３Ｃおよびデオキシコール酸ナトリウムを添加して実験を行った。合わせて３つのグループの実験があり、各グループの実験を３回繰り返して行った。薬を添加して２４時間培養した後、細胞を集めてＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩ染色を行い、フローサイトメトリーでアポトーシス細胞（ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｃｅｌｌｓ）を分析した。そのうち、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＰＩ−は生存する成熟脂肪細胞の数であり、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ＋ＰＩ＋はアポトーシスを起こした成熟脂肪細胞の数である。この方法で２つのグループの薬が添加された後のアポトーシス率を評価した。

その結果は図７に示されているように、ＤＭＳＯ溶媒対照群および同じ濃度のデオキシコール酸ナトリウムに対して、組成物ＵＬ００３Ｃは成熟脂肪細胞のアポトーシスを著しく促進した（ｐ＜０．００１）。一方、デオキシコール酸ナトリウムはＤＭＳＯ溶媒対照群とほぼ相違がない（ｐ＞０．０５）。これは、本発明の組成物により成熟脂肪細胞のアポトーシスを著しく促進することができるのに対し、従来の局所脂肪分解成分であるデオキシコール酸ナトリウムはそのような効果を有しないことを示した。

実施例８．ラットの動物実験
本実験では８週齢ＳＤ品系のオスのラットを使用した。本実験は三グループに分かれ、それぞれは対照組、ＵＬ００３Ｃ−２０組（２０ｍｇ／ｋｇ Ｂ．Ｗ．，低用量組ともよばれる）、およびＵＬ００３Ｃ−４０組（４０ｍｇ／ｋｇ Ｂ．Ｗ．，高用量組ともよばれる）である。各グループでは４匹の７週齢のオスのラットで実験を行った。ラットの最初の体重は２０７±６ｇであった。各グループに二週間連続で高脂肪の餌を与え、ラットの皮下脂肪量を厚くし、その体重が３３０±１０ｇまで増加されてから薬物を投与した。薬物は皮下注射によって皮下脂肪に注射し、異なる用量の本発明の組成物ＵＬ００３Ｃを与えた。注射の部位はラットの両側の鼠径部の脂肪であり、両側にそれぞれ上下二つの注射点（５ｍｇ／ｋｇ／点）がある。ラットごとの注射総量は、各受容者に毎回毎キロごとに２０ミリグラム（ｍｇ／ｋｇ／回）および４０ｍｇ／ｋｇ／回であるが、対照組には等容積の４ｍＬ／ｋｇ／回の滅菌注射用水（ｗａｔｅｒ ｆｏｒ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）を注射した。二日に一回を注射し、あわせて３回を注射によって投薬した。注射による投薬を始める日を最初日にし、３日目と５日目に上述の方法で再び投薬した。実験期間内に、毎日の体重変化と毎日の平均的な摂餌量を記録し、２１日目に最後に体重を量った後にラットを２４時間禁食させた。また、採血して肝臓と腎臓機能の指標を測った。その指標は、グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（ｇｌｕｔａｍｉｃ ｐｙｒｕｖｉｃ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ，ＧＰＴ）、グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（ｇｌｕｔａｍｉｃ ｏｘａｌｏａｃｅｔｉｃ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ，ＧＯＴ）、クレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）および尿素（ｕｒｅａ）である。また、ラットを犠牲死させた後にその腹部皮下、上鼠径部および下鼠径部の脂肪をとり、それらの重量をはかることによってその皮下脂肪量を測った。各グループの数値は平均値±ＳＤ（Ｍｅａｎ±ＳＤ）によって表示されており、統計の結果はアルファベットによって表示され、異なるアルファベットによって、グループ間には統計的有意差（ｐ＜０．０５）があることを示し、同じアルファベットによって、グループ間に統計的有意差（ｐ＞０．０５）がないことを示す。

その結果は図８に示されているように、本発明の組成物ＵＬ００３Ｃの高用量組か低用量組かを注射する場合、いずれの体重の総増加量は対照組よりも低い。そのうち、組成物ＵＬ００３Ｃ−４０組の体重総増加率が著しく対照組（ｐ＜０．０５）よりも少なく、１５．８％の体重を減少させることができた。組成物ＵＬ００３Ｃ−２０組の体重総増加率は対照組と比べると減少する傾向があり、１１．１％の体重を減少させるが、著しい統計的有意差に達していない（ｐ＞０．０５）。つまり、注射方式によって本発明の組成物を与えることによっても体重を減少させることができ、また、その効果は用量依存性である。

図９に示されているように、各グループのラットを犠牲死させ後にその注射された部位の皮下脂肪を測った結果と、対照組と比べると、本発明の組成物ＵＬ００３Ｃは著しく薬物注射された部位の皮下脂肪を減少させることができる（ｐ＜０．０５）。そのうち、低用量組において注射部位の皮下脂肪量の２４．３％（ｐ＜０．０５）を減少させることができる。また、高用量組において注射部位の皮下脂肪量の２１．６％（ｐ＜０．０５）を減少させることができる。

図１０Ａ、１０Ｂに示されているように、各グループのクレアチニン、尿素、ＧＯＴ、ＧＰＴ血清生化学値に統計的有意差がないため（ｐ＞０．０５）、低用量あるいは高用量の本発明の組成物ＵＬ００３Ｃを注射することは、安全性に問題はない。ここからは、本発明の組成物は良好な安全性があることがわかる。

実施例９．ラットの皮下注射された部位の脂肪組織細胞のアポトーシス分析
Ｂｃｌ−２とＢａｘとは細胞のアポトーシスのプロセスにおける二つの重要な調節因子である。両者のバランスは細胞のアポトーシスを調節する重要なメカニズムである。Ｂｃｌ−２の高度な作用によって細胞のアポトーシスは抑制されるが、Ｂａｘの作用によって細胞のアポトーシスは促進される。細胞がアポトーシスに向かうか生き続けるかは両者の比例によって決められる。

本実験では、ウエスタンブロット法によって各グループのラットの皮下注射された部位の脂肪組織の中の抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−２およびアポトーシスタンパク質Ｂａｘ２のたんぱく質の発現量を分析し、ＢａｘとＢｃｌ−２の比率を用いて本発明の組成物ＵＬ００３Ｃの脂肪細胞のアポトーシス促進効果を評価した。本実験では、実施例８で犠牲死させたラットの薬物が注射された部位である鼠径部の皮下脂肪組織を採り、４５０μｌのＴ−ＰＥＲ（登録商標）でたんぱく質の抽出を行った。各グループよりそれぞれ３０μｇのたんぱく質をとり、ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）を行い、たんぱく質をＰＶＤＦ膜に移転させた。また、ウエスタンブロット法に使われるＢｃｌ−２抗体は、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚから購入したものであり、モデルはｓｃ−７３８２である。Ｂａｘ抗体は、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚから購入したものであり、モデルはｓｃ−５２６である。各グループの数値は平均値±ＳＤ（Ｍｅａｎ±ＳＤ） によって表示される。統計の結果は、アルファベットによって表示され、異なるアルファベットによって、グループ間には統計的有意差（ｐ＜０．０５）があることを示し、同じアルファベットによって、グループ間に統計的有意差（ｐ＞０．０５）がないことを示す。

その結果は図１１に示されているように、対照組と比べると、本発明の組成物ＵＬ００３Ｃは高用量組においても低用量組においてもＢｃｌ−２の発現量（ｐ＜０．０５）を著しく増加させると共に、Ｂａｘの発現量（ｐ＜０．０５）を著しく減少させることができる。そのＢａｘ／Ｂｃｌ−２の比率は対照組よりも著しく高い（ｐ＜０．０５）。これにより、ラットに本発明の組成物ＵＬ００３Ｃを注射した後に、その脂肪組織の脂肪細胞のアポトーシスが有意に促進されたことがわかる。本発明は確実に脂肪細胞のアポトーシスを促進し、局所脂肪量を減らすことができる。動物実験の結果によって、本発明の組成物は脂肪細胞と局所脂肪量を抑制する働きを持って、それは脂肪細胞のアポトーシスを促進することによって達成する。

上述の説明は、単に本発明における最良の実施例を挙げたまでであり、本発明を限定するものではない。本発明をその最良の実施例に基づいて詳述してきたが、本発明はこれら特定の実施例に限られるものではない。当業者は、本発明の要旨を逸脱しない範囲において、上述した技術内容に対して変更や修正を行い、同様の効果を有する実施例を完成することができるが、本発明の要旨を逸脱しない範囲の変更や修正等が施されたものであっても、本発明の範囲に含まれる。

細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を用いて測定した、各グループの前駆脂肪細胞に対する成長抑制効果を示すヒストグラムである。 細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を用いて測定した、各グループの分化中の脂肪細胞に対する成長抑制効果を示すヒストグラムである。 細胞生存率試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を用いて測定した、ＵＬ００３Ｃとデオキシコール酸ナトリウムの成熟脂肪細胞に対する成長抑制効果を示すヒストグラムである。 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩで染色された後に、フローサイトメトリーでＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 ｃａｓｐａｓｅ ３で染色された後に、フローサイトメトリーでＵＬ００３Ａ、ＵＬ００３Ｃ、ＵＬ００３Ｒによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 ｃａｓｐａｓｅ ３で染色された後に、フローサイトメトリーでウコン抽出物、レスベラトロール、ＵＬ００３Ｃによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ＰＩで染色された後に、フローサイトメトリーでＵＬ００３Ｃ、デオキシコール酸ナトリウムによる脂肪細胞のアポトーシスの促進を測定したヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの体重変化を示す折れ線グラフである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの皮下脂肪量を示すヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの血清生化学値（クレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）、グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ（ｇｌｕｔａｍｉｃ ｏｘａｌｏａｃｅｔｉｃ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ，ＧＯＴ））を示すヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後の、各グループの血清生化学値（尿素（ｕｒｅａ）、グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（ｇｌｕｔａｍｉｃ ｐｙｒｕｖｉｃ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ，ＧＴＰ））を示すヒストグラムである。 ラットに高脂餌を与えて局所の脂肪の増加を誘導し、局所注射によって投薬した後、ウエスタンブロット法で測定した、各グループの細胞のアポトーシスに関与する蛋白質であるＢａｘ、Ｂｃｌ−２の表現量およびＢａｘ／Ｂｃｌ−２比率を示すヒストグラムである。

その結果は図１１に示されているように、対照組と比べると、本発明の組成物ＵＬ００３Ｃは高用量組においても低用量組においてもＢａｘの発現量（ｐ＜０．０５）を著しく増加させると共に、Ｂｃｌ−２の発現量（ｐ＜０．０５）を著しく減少させることができる。そのＢａｘ／Ｂｃｌ−２の比率は対照組よりも著しく高い（ｐ＜０．０５）。これにより、ラットに本発明の組成物ＵＬ００３Ｃを注射した後に、その脂肪組織の脂肪細胞のアポトーシスが有意に促進されたことがわかる。本発明は確実に脂肪細胞のアポトーシスを促進し、局所脂肪量を減らすことができる。動物実験の結果によって、本発明の組成物は脂肪細胞と局所脂肪量を抑制する働きを持って、それは脂肪細胞のアポトーシスを促進することによって達成する。

Claims (12)

1. レスベラトロールとウコン抽出物を１：３０から１０：１の重量比で含有することを特徴とする、局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物。
2. 前記レスベラトロールとウコン抽出物の重量比が１：１９である、請求項１に記載の組成物。
3. 請求項１または２に記載の組成物の、局所の脂肪と体重の減少に用いられる医薬品の製造のための使用。
4. 有効量の請求項１または２に記載の組成物および医学薬学上許容される担体を含有することを特徴とする、局所の脂肪と体重の減少に用いられる医薬品。
5. 受容者の局所部位の脂肪および受容者の体重を減少させるように、有効量の医薬品を受容者の局所部位に投与することを特徴とする、請求項４に記載の医薬品の局所の脂肪と体重の減少に用いられる医薬品の製造のための使用。
6. 受容者が、動物またはヒトである請求項５に記載の使用。
7. 局所部位は、顔、顎、腕、腰、腹部、または太ももなどを含む請求項５に記載の使用。
8. 投与方法は、注射、皮下埋込、埋め込み式輸液、軟膏剤、またはパップ剤である請求項５に記載の使用。
9. 注射方法は、皮下注射である請求項８に記載の使用。
10. 皮下注射は、脂肪層への注射である請求項９に記載の使用。
11. 有効量は、毎回受容者に投与する医薬品の量として、０．４ｍｇ／Ｋｇから１００ｍｇ／Ｋｇである請求項８に記載の使用。
12. 有効量は、毎回受容者に投与する医薬品の量として、１ｍｇ／Ｋｇから６０ｍｇ／Ｋｇである請求項１１に記載の使用。