JP2017522270A

JP2017522270A - 全身性エリテマトーデスの治療のための３−（４−（（４−（モルホリノメチル−ベンジル）オキシ）−１−オキソイソインドリン−２−イル）ピペリジン−２，６−ジオン

Info

Publication number: JP2017522270A
Application number: JP2016568653A
Authority: JP
Inventors: エイチ．シャフェルピーター; ウウレイ; イエイイング
Original assignee: Celgene Corp
Current assignee: Celgene Corp
Priority date: 2014-05-19
Filing date: 2015-05-18
Publication date: 2017-08-10
Also published as: US20220008427A1; JP2020143083A; TWI794885B; US10596179B2; US11660302B2; WO2015179276A1; US10980812B2; US20170173029A1; TWI745271B; EP3145513A1; EP3145513B1; US20190262348A1; TW201622728A; US10245266B2; JP2022058443A; TW202216156A; US20240041894A1; US20200360396A1

Abstract

本明細書においては、全身性エリテマトーデス(SLE)を治療、管理、及び/又は予防するための化合物及び組成物を用いる方法が提供される。また、本明細書においては、該方法における使用のための医薬組成物及び投薬計画も提供される。【選択図】なし

Description

本出願は、2014年5月19日に出願された米国仮出願第62/000,428号及び2014年9月22日に出願された米国仮出願第62/053,626号の優先権を主張し、それらの全体が引用により本明細書中に組み込まれている。

（1. 分野）
本明細書においては、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオンを含む化合物I又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を用いる全身性エリテマトーデス(SLE)又はその1以上の症状を治療、予防、及び/又は管理する方法が提供される。また、本明細書においては、そのような治療、予防、及び/又は管理のための医薬組成物及び投薬計画も提供される。

（2. 背景）
全身性エリテマトーデス(SLE)は、多くの臨床的徴候を有する病因が不明の多臓器自己免疫疾患である。ほぼすべての器官が関与し得るが、最も好発する徴候は、皮膚、筋骨格、及び腎臓のものである。SLEは、典型的には、15歳〜44歳の間の年齢の出産可能な若年女性に影響を及ぼす。SLEの患者数は、米国で300,000人、全世界では4百万人であり、年間の発生数は、米国のみで15,000件である。

SLEの病態形成には、遺伝要因及び環境要因の双方に関連する一連の構成要素が関与するようである。疾患感受性は、免疫応答に関連する遺伝子及び主要組織適合複合体クラスI及びII遺伝子に影響される。さらなる感受性は、ホルモン環境及び視床下部・下垂体・副腎皮質系間の相互作用に由来する。さらに、SLEの発症は、アポトーシス細胞クリアランス及び免疫複合体に影響を及ぼす免疫応答の欠陥に関連している。免疫寛容の喪失、過剰なT細胞の援助、B細胞抑制の欠陥、及びTヘルパー1(Th1)からTh2及びTh17免疫応答への移行が、B細胞の活動亢進及び病原性抗体の産生を引き起こす。化学薬品、薬物、紫外線、食事、及びウイルス等の外部要因もまた、疾患の発症に寄与する。

漸増及び漸減する疾患であるために、SLEはしばしばNSAIDにより、又はより軽症の総体症状(筋骨格の(muscoskeletal)徴候、皮膚の徴候、及び漿膜炎)に対しては低効力の免疫抑制薬(抗マラリア薬及び低用量コルチコステロイド)により制御される。より長期かつより強力なコルチコステロイド及び非生物学的疾患修飾性抗リウマチ薬(DMARD)の使用は、主要器官の関与がみられる患者の治療にも利用可能な標準的な治療である。標準的な療法に関連して、生物学的DMARD療法が、より広範囲にわたる疾患を有する患者の治療を増強するために存在する。モノクローナル抗体であり、B-リンパ球刺激因子特異的阻害剤でもあるベリムマブが、コルチコステロイド及び自己抗体陽性のSLEのための他の標準的な療法と組み合わせての使用のために最近認可された。さらに、B細胞枯渇剤であるリツキシマブは、しばしば標準的な治療が奏功しない患者のための救急薬として適応外使用される。しかしながら、SLEの治療又は予防に使用し得る予防又は治療薬の必要性がいまだ存在する。

（3. 概要)
本明細書においては、全身性エリテマトーデス(SLE)を治療、管理、改善、及び/又は予防する方法であって、治療的に有効な量の式Iの化合物

、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を投与することを含む、前記方法が提供される。

一実施態様において、前記化合物は、3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオンである。

一実施態様において、前記化合物は、3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオンの医薬として許容し得る塩である。

一実施態様において、前記化合物は、3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である。

一実施態様において、前記化合物は、以下の構造:

を有する(S)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、もしくは互変異性体である。

一実施態様において、前記化合物は、(S)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオンである。

一実施態様において、前記化合物は、(S)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオンの医薬として許容し得る塩である。

一実施態様において、前記化合物は、(S)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である。

一実施態様において、前記化合物は、以下の構造:

を有する(R)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、もしくは互変異性体である。

一実施態様において、前記化合物は、(R)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオンである。

一実施態様において、前記化合物は、(R)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオンの医薬として許容し得る塩である。

一実施態様において、前記化合物は、(R)-3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である。

ある実施態様において、SLEの1以上の症状が、治療、管理、及び/又は予防される。

また、本明細書においては、任意に1以上の他の治療剤と組み合わせて、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を含む、SLEの治療、予防、改善、及び/又は管理における使用に適した医薬組成物、1回単位剤形、及びキットも提供される。

また、本明細書においては、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物による治療が奏功することが見込めるSLEに罹患している対象を識別するための方法も提供される。

また、本明細書においては、SLEの治療、予防、又は管理における、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物の有効性を評価するための方法も提供される。

（4. 図面の簡単な説明）
図1は、全身性エリテマトーデスにおける化合物1Aの臨床試験計画全体の概略図である。

図2A、図2B、及び図2Cは、SLE末梢血単核球におけるCRBN、IKZF1、及びIKZF3 mRNAの過剰発現を示す図である。

図3A、図3B、図3C、及び図3Dは、化合物1Aが、全血白血球サブセットにおけるAiolos及びIkarosタンパク質レベルを低減させたことを示す図である。

図4A及び図4Bは、B細胞の刺激及び化合物1Aの、Ikaros及びAiolosタンパク質レベルに対する経時的な作用を示す図である。

図5A及び図5Bは、化合物1Aが、インビトロでのSLE自己抗体産生を阻害したことを示す図である。

図6Aは、化合物1Aが、健康な志願者のCD19+ B細胞におけるAiolosの発現を低減させたことをを示す図である。

図6Bは、化合物1Aが、健康な志願者のCD3+ T細胞におけるAiolosの発現を低減させたことを示す図である。

図7Aは、化合物1Aが、健康な志願者における末梢血CD19+ B細胞数を低減させたことを示す図である。

図7Bは、健康な志願者における末梢血CD3+ T細胞数に対する化合物1Aの作用を示す図である。

図8Aは、化合物1Aが、健康な志願者におけるIL-2産生を用量依存的に増加させたことを示す図である。

図8Bは、化合物1Aが、健康な志願者における生体外IL-1β産生を用量依存的に減少させたことを示す図である。

(5. 詳細な説明)
別途定義されない限り、本明細書で使用される技術用語及び科学用語は全て、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。特許、出願、公開出願、及び他の刊行物は全て、その全体が引用により組み込まれる。本明細書において、1つの用語に複数の定義がある場合、別段の記載がない限り本セクションの定義が優先される。

別途示されない限り、本明細書で使用される「治療する(treat)」、「治療する(treating)」、及び「治療(treatment)」という用語は、疾患又は治療されている該疾患もしくは病態に伴う症状の重症度を軽減又は低減させることを指す。該用語は、本明細書において提供される化合物が、疾患又は治療されている該疾患もしくは病態に伴う症状の発症後に投与されることを企図している。

本明細書で使用される「予防する(prevent)」、「予防(prevention)」、及び該単語の他の形態は、疾患もしくは障害、又は該特定の疾患又は障害の症状の発症又は増悪の抑制を含む。いくつかの実施態様において、がんの家族歴を有する対象は、予防的治療計画の候補者である。一般に、がんの文脈では、「予防する(preventing)」という用語は、治療されている疾患の兆候又は症状の発生の前の薬物の投与を指す。

別途示されない限り、本明細書で使用される「管理する(managing)」という用語は、特定の疾患又は障害に罹患していた対象において該疾患又は障害の再発を予防すること、疾患又は障害に罹患していた対象が寛解のままでいる時間を延長すること、該対象の死亡率を低減させること、及び/又は管理されている該疾患もしくは病態に伴う症状の重症度の低減もしくは該症状の回避を継続することを包含する。

本明細書で使用される「対象」又は「患者」という用語は、動物、典型的には、ヒトを含む哺乳動物を意味する。

別途明記されなければ、本明細書で使用される、化合物の「治療的に有効な量」及び「有効量」という用語は、疾患の治療、予防、及び/又は管理において治療の利益を提供し、治療される疾患又は障害に関連する1以上の症状を遅らせる又は最小にするために十分な量を指す。「治療的に有効な量」及び「有効量」という用語は、療法全体を改善する、疾患又は障害の症状又は原因を低減するもしくは回避する、又は他の治療剤の治療効果を高める量を包含し得る。

別途明記されなければ、本明細書で使用される、化合物の「予防的に有効な量」という用語は、疾患もしくは病態又は該疾患もしくは病態に伴う1以上の症状の予防又はその再発の予防に十分な量である。化合物の予防的に有効な量とは、単独での若しくは他の薬剤との組合せでの、疾患の予防において、予防の利益を提供する治療剤の量を意味する。「予防的に有効な量」という用語は、総合的な予防を改善する又は他の予防剤の予防有効性を高める量を包含し得る。

別途示されなければ、本明細書で使用される「医薬として許容し得る塩」という用語には、本明細書において提供される化合物に存在し得る酸性の基の塩が含まれるが、これらに限定されない。ある酸性の条件において、化合物は、種々の無機及び有機の酸と多様な塩を生成し得る。そのような塩基性化合物の医薬として許容し得る塩を製造するために使用し得る酸は、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、酒石酸水素塩、臭化物、カルシウムエデト酸塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、クエン酸塩、ジヒドロクロリド、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシレート塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、ヒドロキシナフトエ酸塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩(メシル酸塩)、メチル硫酸塩、ムスケート（muscate）、ナプシル酸塩、硝酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩/二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トリエチオジド、及びパモ酸塩を含むがこれらに限定されない、薬理学的に許容し得るアニオンを含む塩を生成する酸である。

別途示されなければ、本明細書で使用される「水和物」という用語は、非共有結合性の分子間力により結合した化学量論量又は非化学量論量の水をさらに含む、本明細書において提供される化合物又はその塩を意味する。水和物は、結晶性又は非結晶性であり得る。

別途示されなければ、本明細書で使用される「溶媒和物」という用語は、本明細書において提供される化合物への1分子以上の溶媒の会合から生成する溶媒和物を意味する。「溶媒和物」という用語は、水和物(例えば、一水和物、二水和物、三水和物、四水和物等)を含む。溶媒和物は、結晶性又は非結晶性であり得る。

別途明記されなければ、本明細書で使用される、「立体異性体」という用語は、鏡像異性的に/立体異性的に（stereomerically）純粋な及び鏡像異性的に/立体異性的に富化された本明細書において提供される化合物の全てを包含する。

別途示されない限り、本明細書で使用される「立体異性的に純粋」又は「鏡像異性的に純粋」という用語は、1種類の立体異性体を含み、その反対の立体異性体又はエナンチオマーを実質的に含まない化合物を意味する。例えば、化合物は、80%、90%、又は95%以上の1種類の立体異性体及び20%、10%、又は5%以下の反対の立体異性体を含有する場合に、立体異性的に又は鏡像異性的に純粋である。ある場合には、本明細書において提供される化合物は、約80% ee(鏡像体過剰率)以上、好ましくは、特定のキラル中心に関し90% eeと等しいかそれを超える、より好ましくは、特定のキラル中心に関し95% eeと等しいかそれを超える場合に、キラル中心に関して光学活性である又は立体異性的に/鏡像異性的に純粋(すなわち、実質的にR-体又は実質的にS-体)であるとみなされる。

別途示されない限り、本明細書で使用される「立体異性的に富化された」又は「鏡像異性的に富化された」という用語は、本明細書において提供される化合物のラセミ混合物及びその立体異性体の他の混合物(例えば、R/S=30/70、35/65、40/60、45/55、55/45、60/40、65/35、及び70/30)を包含する。

「共投与」及び「との組合せで」という用語は、2種以上の治療剤(例えば、本明細書において提供される化合物I又は組成物、並びにB細胞及び/もしくはT細胞、単球、マクロファージ、及び他のリンパ系もしくは骨髄系由来細胞種の活性を含む白血球活性の他のモジュレーター又は他の活性な剤)を、同時、同時的、又は特に時間制限無く順次のいずれかで投与することを含む。一実施態様において、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物、及び少なくとも1種の他の剤は、細胞内又は対象の体内に同時に存在し、言い換えれば、それらは、生物学的又は治療的効果を同時に発揮する。一実施態様において、治療剤(複数可)は、同一の組成物又は単位剤形中に存在する。別の実施態様において、治療剤(複数可)は、別個の組成物又は単位剤形中に存在する。

(5.1 化合物I)
ある実施態様において、組合せ療法を含む本明細書において提供される方法、及び本明細書において提供される組成物における使用のための化合物Iは、以下の式の化合物

又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物である。

一実施態様において、前記化合物は、以下の構造:

一実施態様において、前記化合物は、以下の構造:

一実施態様において、前記化合物は、3-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-ピペリジン-2,6-ジオン、3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩、(R)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン、(R)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン、及び(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩から選択される。

化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物は、当業者に公知の方法によって、例えば、その全体が引用により本明細書中に組み込まれている米国特許出願公開公報第2011/0196150号に記載の手順に従い調製することができる。

例示的な製造のための方法を、実施例1に記載した。

（5.2 治療方法)
ある実施態様において、治療的に又は予防的に有効な量の化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を、全身性エリテマトーデス(SLE)に罹患している患者に投与することを含む、SLE又はその症状を治療、予防、及び/又は管理する方法が本明細書において提供される。一実施態様において、治療的に有効な量の(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物を、SLEに罹患している患者に投与することを含む、SLE又はその症状を治療、予防、及び/又は管理する方法が本明細書において提供される。

一実施態様において、有効量の化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を、SLEに罹患するリスクのあるの患者に投与することを含む、SLE又はその症状を予防する方法が本明細書において提供される。一実施態様において、有効量の(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物を、SLEに罹患するリスクのある患者に投与することを含む、SLE又はその症状を予防する方法が本明細書において提供される。

「全身性エリテマトーデス」という表現は、本明細書において、SLE及びループスと互換的に使用され、本技術分野で知られているこの疾患の徴候のすべてを指す(寛解及び再燃も含まれる)。SLEにおいては、Bリンパ球の異常な活動亢進及び免疫グロブリンガンマ(IgG)自己抗体の異常な大量生産が、重要な役割を果たしている。この病理学的プロセスの結果、Igで覆われた細胞の隔離及び破壊、補体タンパク質の固定化及び切断、並びにケモタキシン、血管作動性ペプチド、及び破壊酵素の組織への放出が起こる(Kasper DL, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson, JL編の文献「ハリソン内科学(Harrison's Principles of Internal Medicine)」((16版). New York (US): McGraw-Hill; 2005. pp.1960-1967)中のHahn BHの文献「全身性エリテマトーデス(Systemic Lupus Erythematosus)」)。

SLEの症状は、個人個人で異なり、現れたり消えたりすることもある。大部分の患者において、症状としては、関節痛及び腫脹が含まれる。手の指、手、手首、及び膝の関節がよく冒される。関節炎を発症する患者もいる。他の好発する症状としては:深呼吸時胸痛、疲労、他の原因が無い発熱、全身違和感、不安、もしくは気分不快(倦怠感)、脱毛、口腔痛、リンパ節腫脹、太陽光過敏、皮疹（SLE患者の約半数が冒される、頬及び鼻梁にわたる「蝶形の」発疹。太陽光下で発疹が悪化する患者もおり、また、発疹が広範囲に広がることもある)が挙げられる。

他の症状は、体のどの部位が冒されるかにより決まり、以下のものを挙げることができる:
脳及び神経系:頭痛、しびれ、刺痛、発作、視力障害、人格変化、
消化管:腹痛、嘔気、及び嘔吐、
心臓:心拍リズムの異常(不整脈)、
肺:喀血及び呼吸困難、並びに
皮膚:斑状の皮膚色、寒冷時に変色する手指(レイノー現象)。

一実施態様において、皮膚症状のみが、SLEにおいて現れる、すなわち、円板状ループス。

一実施態様において、SLEは、皮膚が主体のSLEである。

一実施態様において、中程度の、重篤な、又は非常に重篤なSLEを治療する方法が本明細書において提供される。本明細書で使用される「重篤なSLE」という用語は、1以上の重篤な又は生命の危険がある症状(溶血性貧血、広範性の心臓もしくは肺の合併症、腎疾患、又は中枢神経系の合併症等)を患者が有しているSLEの病態を指す。

さらに、有効量の化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を、それを必要としている患者に投与することを含む、SLEに関連する1以上の臨床エンドポイントを達成するための方法が本明細書において提供される。

さらに、有効量の化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を、患者に投与することを含む、SLEに罹患している患者の全生存、客観的奏効率、無増悪期間、無増悪生存期間、及び/又は、治療成功期間を増加するための方法が本明細書において提供される。

患者に投与される化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物の用量は、かなり大きく変動するものであり、医療従事者の判断に委ね得るものである。化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物の用量は、治療、予防、又は管理される具体的な適応症又は症状;患者の年齢及び病態;並びに、使用するのであれば、第2の活性薬剤の量等の因子次第で変わる。一般的に、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物は、1日あたり1〜4回又はそれ以上の回数、患者における患者の体重1kgあたり、約0.005mg〜約10mgの用量で投与し得るが、上述の投与量は、患者の年齢、体重、及び医学的状態並びに投与の種類に応じて適切に変更してもよい。一実施態様において、用量は、患者の体重1kgあたり約0.01mg〜約5mg、患者の体重1kgあたり約0.05mg〜約1mg、患者の体重1kgあたり約0.1mg〜約0.75mg、又は患者の体重1kgあたり約0.25mg〜約0.5mgである。

一実施態様において、1日あたり1回投与される。いかなる場合においても、投与される化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物の量は、活性成分の溶解性、使用される製剤、及び投与の経路等の因子次第で決まるものである。一実施態様において、外用濃度の適用は、細胞内曝露又は約0.01〜10μMの濃度を提供する。

ある実施態様において、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物は、1日あたり約0.1mg〜約1000mgの量で使用され、従来のやり方(例えば、治療、予防、又は管理期間の各日に、同一の量を投与する)に、周期的(例えば、1週間投薬し、1週間休薬する)に、又は治療、予防、又は管理の過程で増加又は減少する量に調整できる。他の実施態様において、用量は、約1mg〜約300mg、約0.1mg〜約150mg、約1mg〜約200mg、約10mg〜約100mg、約0.1mg〜約50mg、約1mg〜約50mg、約10mg〜約50mg、約20mg〜約30mg、又は約1mg〜約20mgであり得る。他の実施態様において、用量は、約0.1mg〜約100mg、約0.1mg〜約50mg、約0.1mg〜約25mg、約0.1mg〜約20mg、約0.1mg〜約15mg、約0.1mg〜約10mg、約0.1mg〜約7.5mg、約0.1mg〜約5mg、約0.1mg〜約4mg、約0.1mg〜約3mg、約0.1mg〜約2mg、又は約1mg〜約1mgであり得る。

いくつかの実施態様において、化合物1A又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物が投与される。いくつかの実施態様において、化合物1A、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物の用量は、1日あたり約0.15mg〜約0.6である。一実施態様において、化合物1A、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物の用量は、1日おきに与えられる0.3mgである。一実施態様において、化合物1A、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物の用量は、毎日与えられる0.3mgである。一実施態様において、化合物1A、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物の用量は、1日ごとに交互に与えられる0.6mg及び0.3mgである。一実施態様において、化合物1A、又はその医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物の用量は、毎日与えられる0.6mgである。

いくつかの実施態様において、患者には、高用量の治療を開始し、重大な有害作用が持続する場合には、それに合わせて用量を調整、すなわち、減量する。例えば、患者は、毎日与えられる0.6mgの化合物1A、又はそれに対する医薬として許容し得る塩もしくは溶媒和物の用量から開始してもよく、重大な有害作用が持続する場合には、1日ごとに交互に与えられる0.6mg及び0.3mgへ、その後毎日与えられる0.3mgへ、そして1日おきに与えられる0.3mgへと段階的に用量を調節してもよい。

いくつかの実施態様において、前記化合物の投与を、約2週間〜約16週間続ける。一実施態様において、前記化合物の投与を、約28日間続ける。別の実施態様において、前記化合物の投与を、約56日間続ける。さらに別の実施態様において、前記化合物の投与を、約84日間続ける。

いくつかの実施態様において、前記化合物は、経口投与される。一実施態様において、前記化合物は、カプセル剤で投与される。一実施態様において、前記カプセル剤は、約0.3mgの量である。別の実施態様において、前記化合物は、錠剤で投与される。

いくつかの実施態様において、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物による治療が奏功することが見込める全身性エリテマトーデス(SLE)に罹患している対象を識別するための方法であって、
(a)該対象からの第1のサンプル中の、CRBN、IKZF1(Ikaros)、及びIKZF3(Aiolos)からなる群から選択されるバイオマーカーのレベルを決定すること;及び
(b)該第1のサンプル中の該バイオマーカーの該レベルを、該バイオマーカーのリファレンスレベルと比較すること;を含み、該第1のサンプル中の該バイオマーカーの該レベルが、該バイオマーカーの該リファレンスレベルよりも高い場合に、該対象が、該治療が奏功することが見込めるものである、前記方法が本明細書において提供される。

一実施態様において、前記方法は、前記対象に、有効量の前記化合物を投与することをさらに含む。

一実施態様において、前記リファレンスは、SLEに罹患していない健康な対象から得た第2のサンプルを用いて調製され;かつ、該第2のサンプルが、前記第1のサンプルと出所が同一のものである。

一実施態様において、前記バイオマーカーは、CRBNである。別の実施態様において、前記バイオマーカーは、IKZF1である。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、IKZF3である。

一実施態様において、前記バイオマーカーのうちの1種のみのレベルを測定する。別の実施態様において、前記バイオマーカーのうちの2種以上のレベルを、同時にモニターする。

一実施態様において、前記第1のサンプルは、末梢血単核球(PBMC)である。別の実施態様において、前記第1のサンプルは、全血白血球である。一実施態様において、前記全血白血球は、CD19+ B細胞、CD3+ T細胞、CD14+単球、又は顆粒球である。

一実施態様において、前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのmRNAレベルを決定することにより測定する。別の実施態様において、前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのcDNAレベルを決定することにより測定する。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのタンパク質レベルを決定することにより測定する。

一実施態様において、前記化合物は、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオンである。別の実施態様において、前記化合物は、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である。

いくつかの実施態様において、全身性エリテマトーデス(SLE)の治療、予防、又は管理における、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物の有効性を評価する方法であって、
(a)SLEに罹患している対象に、該化合物を投与すること;
(b)該対象から第1のサンプルを得ること;
(c)該第1のサンプル中のバイオマーカーのレベルを決定すること;及び
(d)工程(c)の該バイオマーカーの該レベルを、該バイオマーカーのリファレンスレベルと比較することを含み、該リファレンスと比較した該レベルの変化が、SLEの治療における該化合物の該有効性を示すものである、前記方法が本明細書において提供される。

一実施態様において、前記方法は、前記対象に投与される前記化合物の量を調整することをさらに含む。

一実施態様において、前記リファレンスは、SLEに罹患していない健康な対象から得た第2のサンプルを用いて調製され;かつ、該第2のサンプルは、前記第1のサンプルと出所が同一のものである。別の実施態様において、前記リファレンスは、前記化合物の投与前に前記対象から得た第2のサンプルを用いて調製され;かつ、該第2のサンプルは、前記第1のサンプルと出所が同一のものである。

一実施態様において、前記バイオマーカーは、CRBNである。別の実施態様において、前記バイオマーカーは、IKZF1である。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、IKZF3である。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、SLE自己抗体である。一実施態様において、前記SLE自己抗体は、抗dsDNA自己抗体である。別の実施態様において、前記SLE自己抗体は、抗リン脂質自己抗体である。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、末梢血B細胞数である。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、末梢血T細胞数である。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、IL-1βである。さらに別の実施態様において、前記バイオマーカーは、IL-2である。

一実施態様において、前記リファレンスと比較した前記第1のサンプル中の前記バイオマーカーの前記レベルの低下が、SLEの治療における前記化合物の有効性を示すものである。別の実施態様において、前記リファレンスと比較した前記第1のサンプル中の前記バイオマーカーの前記レベルの増加が、SLEの治療における前記化合物の有効性を示すものである。

（5.3 組合せ療法)
本明細書において提供される方法及び組成物において、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物は、他の薬理学的に活性な化合物(「第2の活性薬剤」)と組み合わせることができる。ある種の組合せが、SLE並びにSLEに伴う病態及び症状の治療において相乗的に働くことがある。化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物は、ある種の第2の活性薬剤に関連する有害作用を軽減するよう機能し得ることがあり、その逆もあり得る。

1種以上の第2の活性成分又は薬剤を、本明細書において提供される方法及び組成物において使用し得る。第2の活性薬剤は、大分子(例えば、タンパク質)又は小分子(例えば、合成の無機、有機金属、もしくは有機分子)であり得る。

別の実施態様において、本明細書において提供される治療の方法は、第2の治療剤の投与を含み、該第2の治療剤は、抗炎症薬、例えば、ステロイド性抗炎症薬又は非ステロイド性抗炎症薬(NSAID)、アセトアミノフェン、ナプロキセン、イブプロフェン、アセチルサリチル酸等である。NSAIDが投与されるより具体的な実施態様においては、プロトンポンプ阻害剤(PPI)、例えば、オメプラゾールも投与してもよい。一実施態様において、前記抗炎症剤は、コルチコステロイドである。別の実施態様において、前記抗炎症剤は、コルヒチンである。

別の実施態様において、前記第2の治療剤は、アザチオプリン(Imuran(商標)、Azasan(商標))、メトトレキサート(Rheumatrex(商標)、Trexall(商標))、ペニシラミン(Depen(商標)、 Cuprimine(商標))、シクロホスファミド(Cytoxan(商標))、ミコフェナレート(mycophenalate) (CellCept(商標)、Myfortic(商標))、ボセンタン(Tracleer(登録商標))、プレドニゾン(Deltasone(商標)、Liquid Pred(商標))等の免疫調節性の化合物又は免疫抑制性の化合物、及びPDE5阻害剤である。患者が指潰瘍及び肺高血圧症に冒されている別の実施態様においては、プロスタサイクリン(イロプロスト)等の血管拡張剤を投与してもよい。

別の実施態様において、前記第2の治療剤は、ロミデプシン、ボリノスタット、パノビノスタット、バルプロ酸、もしくはベリノスタット等のHDAC阻害剤;又はインターロイキン、免疫調節性モノクローナル抗体、もしくはカルメット・ゲラン桿菌(BCG)等の生物学的製剤である。

別の実施態様において、前記第2の治療剤は、ActRII受容体の阻害剤、又はアクチビン-ActRII阻害剤である。ActRII受容体の阻害剤には、ActRIIA阻害剤及びActRIIB阻害剤が含まれる。ActRII受容体の阻害剤は、ActRIIのアクチビン結合領域を含むポリペプチドであり得る。ある実施態様において、ポリペプチドを含む前記アクチビン結合領域は、抗体のFc部分に結合している(すなわち、ActRII受容体のポリペプチドを含むアクチビン結合領域及び抗体のFc部分を含む複合体が、形成される)。ある実施態様において、前記アクチビン結合領域は、リンカー、例えば、ペプチドリンカーを介して抗体のFc部分に結合している。

アクチビン又はActRIIAの結合のために選択される非抗体タンパク質、並びにその設計及び選択のための方法の例は、それぞれ、その全体が参照によって本明細書に組み込まれているWO/2002/088171、WO/2006/055689、WO/2002/032925、WO/2005/037989、US2003/0133939、及びUS 2005/0238646に記載されている。

一実施態様において、前記ActRII受容体の阻害剤は、ACE-11である。別の実施態様において、前記ActRII受容体の阻害剤は、ACE-536である。

別の実施態様において、前記第2の治療剤は、SLEを治療するために慣用される薬剤である。そのような薬剤の例としては、NSAID、コルチコステロイド、非生物学的疾患修飾性抗リウマチ薬(DMARD)、及び生物学的DMARD療法(例えば、ベリムマブ及びリツキシマブ)が挙げられるが、これらに限定されない。

SLE又はその症状の治療に適した上述の治療剤の任意の組合せを投与し得る。そのような治療剤は、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物との任意の組み合わせで、同時に又は別の治療過程として投与し得る。

(5.4 サイクリング療法)
ある実施態様において、化合物I、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物は、周期的に患者に投与される。サイクリング療法は、ある期間の活性な剤の投与と、それに続くある期間の休薬(すなわち、投与の中断)、及びこの連続的な投与の繰り返しを含む。サイクリング療法は、1以上の療法への抵抗性の発現を低減することができ、療法のうちの１つの副作用を回避又は低減でき、及び/又は治療の有効性を改善することができる。

従って、一実施態様において、本明細書において提供される化合物は、約1又は2週間の休薬期間を伴う4〜6週周期で、1回量又は分割した量で、毎日投与される。サイクリング療法は、さらに、投薬周期の頻度、数、及び長さを増加することを許容する。従って、別の実施態様は、単独で投与される場合に標準的である周期よりもより多くの周期での、本明細書において提供される化合物の投与を包含する。さらに別の実施態様において、本明細書において提供される化合物は、第2の活性成分がさらに投与されていない患者において一般的に用量を制限する毒性を生じさせるであろう周期数よりも多い周期数で投与される。

一実施態様において、本明細書において提供される化合物は、1日あたり約0.03mg〜約10mgの用量で3又は4週間連続的に毎日投与され、それに1又は2週間の休薬が続く。他の実施態様において、用量は、約0.1mg〜約8mg、約0.3mg〜約6mg、約1mg〜約4mg、又は約2mgであり得、それに休薬が続く。

一実施態様において、本明細書において提供される化合物及び第2の活性成分は経口的に投与され、4〜6週間の周期中、本明細書において提供される前記化合物の投与は、第2の活性成分の30〜60分前に行われる。別の実施態様において、本明細書において提供される化合物及び第2の活性成分の組合せが、各サイクル約90分間にわたる静脈内注入により投与される。

典型的には、患者に組合せ治療がなされる周期数は、約1〜約24周期、約2〜約16周期、又は約4〜約3周期であろう。

(5.5 医薬組成物及び剤形)
医薬組成物は、個々の1回単位剤形の調製物中に使用し得る。本明細書において提供される医薬組成物及び剤形は、本明細書において提供される化合物、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、ラセミ体、クラスレート、もしくはプロドラッグを含む。医薬組成物及び剤形は、1種以上の賦形剤をさらに含み得る。

本明細書において提供される医薬組成物及び剤形は、1種以上の追加の活性成分も含み得る。任意選択の第2の又は追加の活性成分の例は、上で開示されている.

本明細書において提供される1回単位剤形は、患者に対する経口、経粘膜(例えば、経鼻、舌下、膣内、頬側、又は直腸内)、非経口(例えば、皮下、静脈内、ボーラス注入、筋肉内、又は動脈内)、外用(例えば、点眼薬又は他の眼科調製物)、経皮(transdermal)又は経皮的(transcutaneous)投与に適している。剤形の例としては、錠剤;カプレット剤;軟弾性ゼラチンカプセル剤等のカプセル剤;カシェ剤;トローチ剤;ロゼンジ錠;分散剤;坐剤;散剤;エアロゾル剤(例えば、経鼻スプレー剤又は吸入器);ゲル剤;懸濁剤(例えば、水性又は非水性懸濁液、水中油型乳剤、又は油中水型液体乳剤)、液剤、及びエリキシル剤を含む患者への経口又は経粘膜投与に適した液体剤形;患者への非経口投与に適した液体剤形;外用に適した点眼薬又は他の眼科調製物;及び患者への非経口投与に適した液体剤形を提供するよう再構成し得る無菌固体(例えば、結晶性又はアモルファス固体)が挙げられるが、これらに限定されない。

剤形の組成、形状、及び種類は、典型的には、それらの用途次第で変わるものである。例えば、疾患の急性治療において用いられる剤形は、それが含む1種以上の活性成分を、同一疾患の慢性治療において用いられる剤形よりも多い量で含有していてもよい。同様に、非経口の剤形は、それが含む1種以上の活性成分を、同一疾患の治療に用いられる経口の剤形よりも少ない量で含有していてもよい。具体的な剤形が用いられるこれらの方法及び他の方法は、それぞれ異なるものであり、当業者にとっては容易に明らかとなるものである。例えば、「Remingtonの薬科学(Remington’s Pharmaceutical Sciences)」(第20版, Mack Publishing, Easton PA (2000))を参照されたい。

一実施態様において、医薬組成物及び剤形は、1種以上の賦形剤を含む。好適な賦形剤は、薬学の当業者にとって周知であり、好適な賦形剤の非限定的な例は、本明細書において提供される。特定の賦形剤が、医薬組成物又は剤形への配合に適するか否かは、剤形が患者に投与される方法を含むがこれらに限定されない本技術分野で周知の様々な因子に依存する。例えば、錠剤等の経口の剤形は、非経口の剤形における使用には適さない賦形剤を含有してもよい。特定の賦形剤の適合性は、剤形中の具体的な活性成分にも依存し得る。例えば、ある種の活性成分の分解は、ラクトース等のある種の賦形剤により、又は水に暴露された時に加速され得る。一級又は二級アミンを含む活性成分は、そのような加速された分解の影響を特に受けやすい。従って、ラクトース又は他のモノ又はジサッカライドを仮にあったとしてもほとんどない量で含有する医薬組成物及び剤形が提供される。本明細書で使用される「ラクトースフリー」という用語は、存在するラクトースの量が、仮にあったとしても、活性成分の分解速度を実質的に増大させるには不十分なものであることを意味する。

ラクトースフリーの組成物は、本技術分野で周知の賦形剤を含み得、例えば、米国薬局方(the U.S. Pharmacopeia (USP)) 25 NF20 (2002)に掲載されている。一般的に、ラクトースフリーの組成物は、活性成分、結合剤/充填剤、及び滑沢化剤を、医薬として混合可能であり医薬として許容し得る量で含む。一実施態様において、ラクトースフリーの剤形は、活性成分、微結晶性セルロース、α化デンプン、及びステアリン酸マグネシウムを含む。

また、活性成分を含む無水の医薬組成物及び剤形も提供される。水はある種の化合物の分解を促進し得るためである。例えば、水の添加(例えば、5%)は、有効期間又は製剤の経時安定性等の特性を決定するために、長期保存をシミュレーションする手段として、医薬分野において広く受け入れられている。例えば、 Jens T. Carstensenの文献「薬物の安定性:原理及び実践(Drug Stability: Principles & Practice)」(第2版, Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp. 379-80.) を参照されたい。実際、水及び熱は、ある種の化合物の分解を加速する。従って、製剤に対する水の作用は、大きな意義を有し得る。これは、水分及び/又は湿気は、製剤の製造、取扱い、包装、貯蔵、輸送、及び使用の間に通常接するものであるからである。

無水の医薬組成物及び剤形は、無水又は低含水の成分及び低水分又は低湿条件を用いて製造することができる。製造、包装、及び/又は貯蔵の間に水分及び/又は湿気との実質的な接触が予想される場合には、ラクトース及び一級又は二級アミンを含む少なくとも1種の活性成分を含む医薬組成物及び剤形は無水のものである。

無水の医薬組成物は、その無水の性質が維持されるように製造され貯蔵すべきである。従って、一実施態様において、無水の組成物は、適当な処方キットに含めることができるように、水への曝露を予防することが知られている材料を用いて包装されている。適当な包装の例としては、密封ホイル、プラスチック、単位用量容器(例えば、バイアル)、ブリスター包装、及びストリップ包装が挙げられるが、これらに限定されない。

また、活性成分が分解する速度を低減させる1種以上の化合物を含む医薬組成物及び剤形が提供される。本明細書において「安定化剤」と称されるそのような化合物としては、アスコルビン酸等の抗酸化剤、pH緩衝剤、又は塩緩衝剤が挙げられるが、これらに限定されない。

賦形剤の量及び種類と同様に、剤形中の活性成分の量及び具体的な種類は、それが患者へ投与される経路等が挙げられるがそれらに限定されない因子により異なり得る。一実施態様において、剤形は、本明細書において提供される化合物を、約0.10〜約500mgの量で含む。他の実施態様において、剤形は、本明細書において提供される化合物を約0.1、1、2、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、50、100、150、200、250、300、350、400、450、又は500mgの量で含む。

他の実施態様において、剤形は、第2の活性成分を1〜約1000mg、約5〜約500mg、約10〜約350mg、又は約50〜約200mgの量で含む。勿論、第2の活性薬剤の具体的な量は、使用される具体的な薬剤、治療又は管理されている疾患又は障害、並びに本明細書において提供される化合物及び患者に同時に投与される任意選択の追加の活性な剤の量次第で決まるものである。

(5.5.1 経口剤形)
経口投与に適する医薬組成物は、錠剤(例えば、チュワブル錠)、カプレット剤、カプセル剤、及び液剤(例えば、風味付けされたシロップ剤)等が挙げられるがこれらに限定されない、個々に分離した剤形として提供することができる。そのような剤形は、所定の量の活性成分を含有し、当業者に周知の薬学方法により製造し得る。一般に、「Remingtonの薬科学」(第20版, Mack Publishing, Easton PA (2000))を参照されたい。

本明細書において提供される経口の剤形は、従来の医薬配合技術に従って、よく混じった混合物中の活性成分を、少なくとも1種の賦形剤と組み合わせることにより製造される。賦形剤は、投与のために所望される調製物の形態に応じて、多様な形態を取り得る。例えば、経口の液体又はエアロゾルの剤形における使用に適した賦形剤としては、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、及び着色剤が挙げられるが、これらに限定されない。固体の経口剤形(例えば、散剤、錠剤、カプセル剤、及びカプレット剤)における使用に適した賦形剤の例としては、デンプン、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、及び崩壊剤が挙げられるが、これらに限定されない。

一実施態様において、経口の剤形は、錠剤又はカプセル剤であり、その場合、固体の賦形剤が採用される。別の実施態様において、錠剤は、標準的な水性又は非水性の技術により被覆され得る。そのような剤形は、薬学の方法のうちのいずれかにより製造することができる。一般的に、医薬組成物及び剤形は、活性成分を、液体の担体、微粉化した固体の担体、又はその両者と均一によく混ぜ合わせ、その後、必要であれば、生成物を、所望の体裁に成形することにより製造される。

例えば、錠剤は、圧縮又は成型により製造することができる。圧縮錠は、任意に賦形剤と混合された、粉末又は顆粒等の、自由流動形態にある活性成分を、適当な装置で圧縮することにより製造することができる。湿製錠は、不活性な液体希釈剤で湿らせた粉末状の化合物の混合物を、適当な装置で成型することにより製造し得る。

本明細書において提供される経口の剤形において使用し得る賦形剤の例としては、結合剤、充填剤、崩壊剤、及び滑沢化剤が挙げられるが、これらに限定されない。医薬組成物及び剤形における使用に適した結合剤としては、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、又は他のデンプン、ゼラチン、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギン酸塩、粉末状のトラガント、グアーガム等の天然及び合成のガム、セルロース及びその誘導体(例えば、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム)、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、α化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(例えば、No.2208、2906、2910)、微結晶性セルロース、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。

微結晶性セルロースの好適な形態としては、AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook, PAより入手可能)として販売されている材料、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。具体的な結合剤は、AVICEL RC-581として販売されている、微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウムの混合物である。好適な無水又は低水分の賦形剤又は添加剤としては、AVICEL-PH-103(商標)及びStarch1500LMが挙げられる。

本明細書において提供される医薬組成物及び剤形における使用に適した充填剤の例としては、タルク、炭酸カルシウム(例えば、顆粒又は粉末)、微結晶性セルロース、粉末化セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、α化デンプン、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。一実施態様において、医薬組成物中の結合剤又は充填剤は、医薬組成物又は剤形の約50〜約99重量パーセントで存在する。

組成物において、崩壊剤を用いて、水性環境に曝されたときに崩壊する錠剤を提供してもよい。過剰量の崩壊剤を含有する錠剤は、貯蔵中に崩壊することがあり、一方で、過少量を含有する錠剤は、所望の速度又は所望の条件下で崩壊しないことがある。従って、活性成分の放出を有害に変化させてしまうほどに過剰でも過少でもない十分な量の崩壊剤を、固体経口の剤形を形成するために用い得る。使用される崩壊剤の量は、製剤の種類によって変化し、当業者により容易に認識され得る。一実施態様において、医薬組成物は、約0.5〜約15重量パーセントの崩壊剤、又は約1〜約5重量パーセントの崩壊剤を含む。

医薬組成物及び剤形において使用し得る崩壊剤としては、寒天、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ジャガイモ又はタピオカデンプン、他のデンプン、α化デンプン、他のデンプン、クレイ、他のアルギン、他のセルロース、ガム、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。

医薬組成物及び剤形において使用し得る滑沢化剤としては、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽油(light mineral oil)、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、硬化植物油(例えば、ピーナッツ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油)、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。追加の滑沢化剤としては、例えば、シロイド(syloid)シリカゲル(AEROSIL200、W.R. Grace Co., Baltimore, MDにより製造)、合成シリカの凝固エアロゾル剤(Degussa Co., Plano, TXにより販売)、CAB-O-SIL(Cabot Co., Boston, MAにより販売されている焼成二酸化ケイ素製品)、及びそれらの混合物が挙げられる。仮に使用するのであれば、滑沢化剤は、それが配合される医薬組成物又は剤形の約1重量パーセント未満の量で用いてもよい。

一実施態様において、固体の経口の剤形は、本明細書において提供される化合物、無水のラクトース、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸、無水コロイダルシリカ、及びゼラチンを含む。

(5.5.2 制御放出剤形)
本明細書において提供される化合物等の活性成分は、当業者に周知の制御放出手段により、又は送達装置により投与し得る。例としては、それぞれが引用により本明細書中に組み込まれている米国特許第3,845,770号;同3,916,899号;同3,536,809号;同3,598,123号;及び同4,008,719号;同5,674,533号;同5,059,595号;同5,591,767号;同5,120,548号;同5,073,543号;同5,639,476号;同5,354,556号;同5,639,480号;同5,733,566号;同5,739,108号;同5,891,474号;同5,922,356号;同5,972,891号;同5,980,945号;同5,993,855号;同6,045,830号;同6,087,324号;同6,113,943号;同6,197,350号;同6,248,363号;同6,264,970号;同6,267,981号;同6,376,461号;同6,419,961号;同6,589,548号;同6,613,358号;同6,699,500号に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。そのような剤形は、様々な割合で、所望の放出プロファイルを提供するために、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過性膜、浸透圧システム、多層コーティング、微粒子、リポソーム、ミクロスフェア、又はそれらの組合せを用いて、1種以上の活性成分の緩徐放出又は制御放出を提供するために使用し得る。本明細書において記載されるものを含む当業者に公知の好適な制御放出製剤は、本明細書において提供される活性成分との使用のために容易に選択し得る。従って、提供される組成物は、制御放出に適した錠剤、カプセル剤、ゼラチンカプセル(gelcap)、及びカプレット等が挙げられるがこれらに限定されない、経口投与に適した1回単位剤形を包含する。

制御放出医薬製品は全て、薬物療法を、それらの非制御対応物によって達成されるものと比べて向上させるという共通の目的を有する。理想的には、医学的治療における最適に設計された制御放出調製物の使用は、病態を、最小限の時間で治癒させる又は制御するために最小限の薬剤物質が利用されることを特徴とする。制御放出製剤の利点としては、薬物活性の延長、投薬頻度の低減、及び対象の服薬遵守の向上が挙げられる。また、制御放出製剤を用いて、作用の開始時間又は薬物の血中レベル等の他の特性に影響を及ぼすことができ、従って、副作用(例えば、有害作用)の発生に影響を及ぼすことができる。

制御放出製剤の大部分は、所望の治療効果を即座に生じさせる量の薬物(活性成分)を最初に放出し、かつ、長期間にわたってこのレベルの治療又は予防効果を維持するために別の量の薬物を徐々にかつ継続的に放出するように設計される。この一定レベルの薬物を体内で維持するためには、薬物は、代謝され、体から排出されつつある薬物の量を補う速度で剤形から放出されなければならない。活性成分の制御放出は、pH、温度、酵素、水、又は他の生理的条件を含むがこれらに限定されない様々な条件によって、又は化合物によって刺激することができる。

ある実施態様において、薬物は、静脈内注入、埋め込み型浸透圧ポンプ、経皮パッチ剤、リポソーム、又は他の投与様式を用いて投与されてもよい。一実施態様において、ポンプを用いてもよい(Seftonの文献:CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201 (1987);Buchwaldらの文献:Surgery 88:507 (1980);Saudekらの文献N. Engl. J. Med. 321:574 (1989)を参照されたい)。別の実施態様において、ポリマー材料を使用し得る。さらに別の実施態様において、制御放出システムを、対象における、熟練した専門家により決定された適切な部位に配置することができ、すなわち、そのために、全身用量の一部のみしか必要としない(例えば、Goodsonの文献「制御放出の医学的応用（Medical Applications of Controlled Release）」、第2巻、115-138頁(1984)を参照されたい)。他の制御放出システムは、Langerによる総説(Science 249:1527-1533 (1990))に記載されている。活性成分は、体液に不溶である高分子外膜により囲まれた固体の内部マトリックスに分散することができる。ここで、固体の内部マトリックスとしては、例えば、ポリメチルメタクリレート、ポリブチルメタクリレート、可塑化又は非可塑化ポリ塩化ビニル、可塑化ナイロン、可塑化ポリエチレンテレフタレート、天然ゴム、ポリイソプレン、ポリイソブチレン、ポリブタジエン、ポリエチレン、エチレン-酢酸ビニルコポリマー、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、シリコーン-カーボネートコポリマー、アクリル及びメタクリル酸のエステルのヒドロゲル等の親水性ポリマー、コラーゲン、架橋ポリビニルアルコール、及び架橋部分加水分解ポリ酢酸ビニルが挙げられる。また、高分子外膜としては、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン/プロピレンコポリマー、エチレン/アクリル酸エチルコポリマー、エチレン/酢酸ビニルコポリマー、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、ネオプレンゴム、塩素化ポリエチレン、ポリ塩化ビニル;酢酸ビニル、塩化ビニリデン、エチレン、及びプロピレンとの塩化ビニルコポリマー;イオノマーポリエチレンテレフタレート、ブチルゴムエピクロロヒドリンゴム、エチレン/ビニルアルコールコポリマー、エチレン/酢酸ビニル/ビニルアルコールターポリマー、及びエチレン/ビニルオキシエタノールコポリマーが挙げられる。その後、活性成分は、放出速度制御段階で高分子外膜から拡散する。そのような非経口組成物における活性成分の割合は、その具体的な性質、及び対象の必要性に大きく左右される。

(5.5.3 非経口の剤形)
非経口の剤形は、皮下、静脈内(ボーラス注入を含む)、筋肉内、及び動脈内を含むがこれらに限定されない種々の経路により患者に投与し得る。いくつかの実施態様において、非経口の剤形の投与は、汚染物質に対する患者の自然防御を迂回するため、これらの実施態様においては、非経口の剤形は、無菌のもの、又は患者への投与前に滅菌することができるものである。非経口の剤形の例としては、すぐに注射可能な液剤、医薬として許容し得る注射用ビヒクルに溶解又は懸濁できるようになっている乾燥製品、すぐに注射可能な懸濁剤、及び乳剤が挙げられるが、これらに限定されない。

非経口の剤形を提供するために使用し得る好適なビヒクルは、当業者に周知である。例としては、注射用水USP;塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、ブドウ糖注射液、ブドウ糖及び塩化ナトリウム注射液、及び加乳酸リンゲル注射液等が挙げられるがこれらに限定されない水性ビヒクル;エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール等が挙げられるがこれらに限定されない水混和性のビヒクル;並びにトウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジルが挙げられるがこれらに限定されない非水性ビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書において開示される1種以上の活性成分の溶解性を増加させる化合物もまた、非経口の剤形に配合し得る。例えば、シクロデキストリン及びその誘導体が、本明細書において提供される化合物の溶解性を増加するために使用し得る。例えば、引用により本明細書中に組み込まれている米国特許第5,134,127号を参照されたい。

(5.5.4 外用及び経粘膜剤形)
本明細書において提供される外用及び経粘膜剤形としては、スプレー剤、エアロゾル剤、液剤、乳剤、懸濁剤、点眼薬もしくは他の眼科調製物、又は当業者に公知の他の形態が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、「Remingtonの薬科学」(第16、18、及び20版, Mack Publishing, Easton PA (1980, 1990 and 2000));及び「医薬剤形入門(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms)」(第4版, Lea & Febiger, Philadelphia (1985))を参照されたい。口腔内での粘膜組織の治療に適した剤形は、マウスウォッシュ又は口腔ゲル剤として製剤化され得る。

本明細書において包含される、外用及び経粘膜剤形を提供するために使用し得る好適な賦形剤(例えば、担体及び希釈剤)及び他の材料は、医薬分野の当業者に周知であり、所与の医薬組成物又は剤形が投与される特定の組織次第で決まる。一実施態様において、賦形剤としては、毒性が無く、医薬として許容し得る液剤、乳剤、又はゲル剤を形成するための、水、アセトン、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタン-1,3-ジオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、鉱油、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。保湿剤又は湿潤剤も、医薬組成物及び剤形に添加することができる。追加の成分の例は、本技術分野で周知である。例えば、「Remingtonの薬科学」(第16、18、及び20版, Mack Publishing, Easton PA (1980、1990、及び2000))を参照されたい。

医薬組成物又は剤形のpHを調整して、1種以上の活性成分の送達を改善してもよい。また、溶剤担体の極性、そのイオン強度、又は浸透圧を調整して送達を改善できる。ステアレート等の化合物を、医薬組成物又は剤形へ添加して、送達を改善するように1種以上の活性成分の親水性又は親油性を変化させることもできる。他の実施態様において、ステアレートは、製剤のための脂質ビヒクルとして、乳化剤もしくは界面活性剤として、又は送達向上又は透過向上剤として機能し得る。他の実施態様において、活性成分の塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、クラスレート、又は立体異性体を使用し、得られた組成物の性質をさらに調整し得る。

(5.5.5 キット)
一実施態様において、本明細書において提供される活性成分は、同時に又は同一の投与経路では、患者に投与されない。別の実施態様において、適切な量の活性成分の投与を簡単にすることができるキットが提供される。

一実施態様において、キットは、本明細書において提供される化合物の剤形を含む。キットは、他の抗炎症性、免疫調節性、もしくは免疫抑制性の化合物、又はそれらの組合せ等の追加の活性成分をさらに含み得る。追加の活性成分の例としては、本明細書において開示されるものが挙げられるが、それらに限定されない。

他の実施態様において、キットは、活性成分を投与するために使用される装置をさらに含み得る。そのような装置の例としては、注射器、点滴バッグ、パッチ、及び吸入器が挙げられるが、これらに限定されない。

キットは、移植用の細胞又は血液、及び1種以上の活性成分を投与するために使用し得る医薬として許容し得るビヒクルをさらに含み得る。例えば、活性成分が、非経口投与のために再構成されなければならない固体形態で提供される場合には、該キットは、該活性成分が、その中に溶解されて、非経口投与に適した粒子を含まない無菌溶液を形成し得る適当なビヒクルの密閉容器を含み得る。医薬として許容し得るビヒクルの例としては、注射用水USP;塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、ブドウ糖注射液、ブドウ糖及び塩化ナトリウム注射液、及び加乳酸リンゲル注射液等が挙げられるがこれらに限定されない水性ビヒクル;エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール等が挙げられるがこれらに限定されない水混和性のビヒクル;並びにトウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジル等が挙げられるがこれらに限定されない非水性ビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。

（6. 実施例)
以下の実施例は、限定としてではなく例示として提供されるものである。実施例において、試験化合物とは、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオンを指す。

(6.1 実施例1:(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩の調製

(6.1.1 3-ヒドロキシ-2-メチル-安息香酸メチルエステル)

冷却器、温度計、及び撹拌棒を備えた2Lの三つ口丸底フラスコ中、3-ヒドロキシ-2-メチル安息香酸(105g、690mmol)を、MeOH(800mL)に添加し、その後、MeOH(250ml)を添加した。上記溶液に、H₂SO₄(10mL、180mmol)を添加した。反応混合物を、62℃にて、17時間撹拌した。溶媒を、真空下除去した。室温で、残渣(200mL)を、水(600mL)にゆっくりと添加したところ、白色固体が生成した。懸濁液を、氷浴中で、30分間撹拌し、濾過した。固体を、水(5×250mL)で洗浄し、乾燥し、3-ヒドロキシ-2-メチル-安息香酸メチルエステルを、白色固体として得た(100g、収率87%)。該化合物は、さらなる精製なしに、次の工程で使用した:LCMS MH=167;

(6.1.2 3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-2-メチル-安息香酸メチルエステル)

撹拌棒及び温度計を備えた1Lの三つ口丸底フラスコに、DMF(300mL)、3-ヒドロキシ-2-メチル安息香酸メチル(90g、542mmol)、及びイミダゾール(92g、1,354mmol)を添加した。TBDMS-Cl(90g、596mmol)を、上記溶液に、内部温度を15〜19℃に制御するよう20分間にわたって分割して添加し、添加の後、内部温度を、1℃未満に低下させた。氷浴を除去し、反応混合物を、室温で16時間撹拌した。反応混合物を、氷水(500mL)に添加し、得られた溶液を、二分した(700mL×2)。各部分を、EtOAc(700mL)で抽出した。各有機層を、冷水(350mL)及び塩水(350mL)で洗浄した。有機層を合わせ、MgSO₄で乾燥した。合わせた有機層を濃縮して、3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-2-メチル-安息香酸メチルエステルを、淡褐色のオイルとして得た(160g、粗収率100%)。該化合物は、さらなる精製なしに、次の工程で使用した:LCMS MH=281;

(6.1.3 2-ブロモメチル-3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-安息香酸メチルエステル)

酢酸メチル(500mL)中、3-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-2-メチル安息香酸メチル(78.4g、280mmol)に、室温で、NBS(49.8g、280mmol)を添加したところ、オレンジ色の懸濁液が生じた。得られた反応混合物を、油浴中で40℃にて加熱し、還流下で4時間、300wtの太陽光電球によって照射した。反応混合物を冷却し、Na₂SO₃溶液(2×600mL、50%飽和濃度)、水(500mL)、及び食塩水(600mL)で洗浄した。有機層を、MgSO₄で乾燥し、活性炭で脱色した。有機層を濃縮し、2-ブロモメチル-3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-安息香酸メチルエステルを、淡褐色のオイルとして得た(96g、粗収率91%)。該化合物は、さらなる精製なしに、次の工程で使用した: LCMS M-Br=279;

(6.1.4 4-カルバモイル-酪酸メチルエステル)

2Lの丸底フラスコ中、撹拌下にあるアセトニトリル(1100mL)中の2-(ブロモメチル)-3-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)安息香酸メチル(137.5g、325mmol)の溶液に、4,5-ジアミノ-5-オキソペンタン酸メチル・塩酸塩(70.4g、358mmol)を添加した。その懸濁液に、滴下漏斗を通じて10分間かけてDIPEA(119ml、683mmol)を添加し、懸濁液を室温で1時間撹拌し、その後、該混合物を油浴中で40℃にて23時間加熱した。反応混合物を、真空下に濃縮した。残渣を、エーテル(600mL)中で撹拌したところ、白色固体が沈殿した。混合物を濾過し、固体をエーテル(400mL)で洗浄した。濾液を、HCl(1N、200mL)、NaHCO₃(飽和、200mL)、及び食塩水(250mL)で洗浄した。酸の水層及び塩基性の水層を別々にとっておいた。その後、固体をさらにエーテル(250mL)で洗浄し、その液体を上記酸溶液及び塩基性溶液で洗浄した。二つの有機層を合わせ、真空下に濃縮し、4-[4-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-4-カルバモイル-酪酸メチルエステルを、褐色のオイルとして得た(152g、粗収率115%、H NMRでの純度77%)。該化合物は、さらなる精製なしに、次の工程で使用した: LCMS MH=407。

(6.1.5 4-カルバモイル-4-(4-ヒドロキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-酪酸メチルエステル)

DMF(500mL)及び水(55mL)中の5-アミノ-4-(4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-1-オキソイソインドリン-2-イル)-5-オキソペンタン酸メチル(152g、288mmol)の撹拌している冷たい溶液に、K₂CO₃(19.89g、144mmol)を5分間かけて分割して添加した。得られた反応混合物を、室温で40分間撹拌した。反応混合物を氷浴中で冷却した。その混合物に、HCl(12M、23.99ml、288mmol)をゆっくりと添加した。添加の後、その混合物にアセトニトリル(280mL)を添加したところ、固体が沈殿した。混合物を、室温で10分間撹拌し、濾過した。固体をアセトニトリル(50mL×4)で洗浄した。濾液を高真空下で濃縮し、黄色オイル(168g)を得た。オイルを、アセトニトリル(600mL)に溶解し、室温で10分間撹拌した。混合物を濾過し、固体をアセトニトリル(25mL×2)で洗浄した。濾液を高真空下で濃縮し、黄色オイル(169g)を得て、それを水(1200mL)とエーテル(1000mL)との混合物に添加した。混合物を3分間撹拌し、層を分離した。水溶液を高真空下で濃縮し、残渣をアセトニトリル(160mL)中で撹拌し、一晩撹拌の後、白色固体が生じた。混合物を濾過し、4-カルバモイル-4-(4-ヒドロキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-酪酸メチルエステルを白色固体として得た(46g、収率54%)。濾液を濃縮し、残渣をアセトニトリル(60mL)中でさらに結晶化し、さらなる4-カルバモイル-4-(4-ヒドロキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-酪酸メチルエステルを白色固体として得た(11.7g、収率14%)。濾液を濃縮し、残渣をISCOクロマトグラフィーで精製し、さらなる4-カルバモイル-4-(4-ヒドロキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-酪酸メチルエステルを白色固体として得た(13.2g、収率15%)。得られた全生成物は、収率83％で70.9gであった： LCMS MH=293;

(6.1.6 3-(4-((4-(モルホリノメチル)ベンジル)オキシ)-1-オキソイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオン)

工程1:THF(60mL)中の3-(4-ヒドロキシ-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-ピペリジン-2,6-ジオン(2.5g、8.56mmol)の溶液に、トリフェニルホスフィン(1.6mmol/gでポリマーに担持されている、12g、18.8mmol)を添加した。混合物を、室温で15分間撹拌した。0℃にてアゾジカルボン酸ジイソプロピル(3.96mL、18.8mmol)を添加し、混合物を、0℃にて30分間撹拌した。0℃にて(4-モルホリン-4-イルメチル-フェニル)-メタノール(2.62g,12.4mmol)を添加し、混合物を室温まで昇温し、室温で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。結果として生じたオイルを、シリカゲルカラムで、塩化メチレン及びメタノールで溶出(グラジエント、生成物は、6%メタノールの時溶出した)することにより精製し、4-カルバモイル-4-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-酪酸メチルエステル(2.2g、収率54%)を得た。生成物は、さらなる精製なしに、次の工程で使用した。

工程2:4-カルバモイル-4-[4-(4-モルホリン-4-イルメチル-ベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル]-酪酸メチルエステル(2.2g、4.57mmol)のTHF溶液(50mL)に、0℃にてカリウムtert-ブトキシド(0.51g、4.57mmol)を添加した。混合物を、0℃にて10分間撹拌し、1N HCl(5mL、5mmol)及びそれに続く飽和NaHCO₃(25mL)でクエンチした。混合物をEtOAc(2×50mL)で抽出した。有機層を、水(30mL)、塩水(30mL)で洗浄し、MgSO₄で乾燥し、濃縮した。得られた固体に、EtOAc(10mL)を添加し、その後撹拌下にヘキサン(10mL)を添加した。懸濁物を濾過し、3-(4-((4-(モルホリノメチル)ベンジル)オキシ)-1-オキソイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオンを白色固体として得た(1.5g、収率73%)。HPLC: Waters Symmetry C₁₈、5μm、3.9×150mm、1mL/分、240nm、グラジエントは5分で95/5アセトニトリル/0.1%H₃PO₄まで:t_R=4.78分(97.5%);mp:210-212℃;

LCMS:465;元素分析C₂₅H₂₇N₃O₅+0.86H₂Oについての計算値: C, 64.58; H, 6.23; N, 9.04; 実測値: C, 64.77; H, 6.24; N, 8.88.

(S)-3-(4-((4-(モルホリノメチル)ベンジル)オキシ)-1-オキソイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオン及び(R)-3-(4-((4-(モルホリノメチル)ベンジル)オキシ)-1-オキソイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオンは、キラル分離により3-(4-((4-(モルホリノメチル)ベンジル)オキシ)-1-オキソイソインドリン-2-イル)ピペリジン-2,6-ジオンから調製した。

(6.2 実施例2:臨床試験-SLE)
(6.2.1 試験計画)
SLEの対象における化合物1の予備的な有効性、安全性、認容性、薬物動態、薬力学、及び遺伝薬理学を評価するために、第2相、無作為化、プラセボ対照、二重盲検、パイロット、多施設試験を行う。本試験は、2部構成で行う。

(第1部)
第1部は、SLE対象における化合物1Aの安全性及び認容性を評価するための無作為化、二重盲検、プラセボ対照、漸増用量試験である。第1部における対象の参加は、3相からなる:
・治療前スクリーニング相:被験薬(IP)の初回投与前の28日間まで
・治療相:84日間まで
・観察相:治療後84日間

合計で約40名の対象を、自動音声応答システム(IVRS)を用いて、化合物1A(0.3mgを1日おき[QOD]、0.3mgを毎日[QD]、0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互、並びに0.6mgをQD)又は対応するプラセボを4:1の比率とした4用量群に無作為化する(各用量群について、IPアームに対象8名、プラセボアームに対象2名)。対象は、並行して、0.3mgをQOD及び0.3mgをQDの2種類の初期用量群に無作為化される。2種類の初期用量群の安全性が確認された後に、残りの対象を、連続的かつ用量が増加するやり方で、0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互並びに0.6mgをQDの用量群に無作為化する(初め0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互の用量群、その後0.6mgをQDの用量群)。治療相は、全ての用量群の期間において、最長で84日間である。早期にIPを中断する対象は、84日間の観察追跡相に参加する。試験を早期に終了した全ての例において、対象は、早期終了受診を完了するよう促される。第1部投薬実施スケジュールを図1に図示する。

試験の間、対象の全てが、安定的用量のヒドロキシクロロキン、クロロキン、及び/又はキナクリンの継続を許可される。但し、対象が、ベースライン受診の前≧16週間にわたりこれらの抗マラリア薬のうちの1種を投与されており、少なくとも投薬前の4週間及び試験の始めから終わりまで安定的用量を継続する場合に限る。他の全身免疫抑制剤は許可されない。さらに、必要に応じ(PRN)、全身用鎮痒薬及び/又は全身用鎮痛薬による治療が許可されるが、対象は、全ての試験のための受診の48時間前に全ての全身用鎮痒薬の使用、及び全ての試験のための受診の12時間前に全身用鎮痛薬の使用を中止しなければならない。経口の非ステロイド性抗炎症薬(NSAID)をPRNで用いてもよいが、全ての試験のための受診の12時間前に中止しなければならない。経口のコルチコステロイドの使用は、1日あたり10mg以下の用量でのみ許可され、試験へ参加している間は安定的用量で継続されなければならない。試験の間、IVコルチコステロイドは許可されない。ループスの皮膚科学的な徴候のための他の局所的又は全身的な治療は許可されない。

用量群1(0.3mgQOD)及び用量群2(0.3QD)において、少なくとも8名の対象による治療相の初めの28日間が完了した後に、安全性及び認容性の評価が行われる。用量群1及び2が、安全であるとみなされる場合、対象は、試験薬物を最長で84日間受け続け、用量群3(0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互)への対象の登録が開始される。用量群3(0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互)において少なくとも8名の対象による治療相の初めの28日間が完了した後に、安全性及び認容性の評価が行われる。用量群3が安全であるとみなされる場合、対象は、試験薬物を最長で84日間受け続け、用量群4(0.6mgQD)への対象の登録が開始される。用量群4(0.6mgQD)において、少なくとも8名の対象による治療相の初めの28日間が完了した後に、安全性及び認容性の評価が行われる。用量群4が、許容し得るとみなされる場合、対象は、試験薬物を最長で84日間受け続ける。

対象は、割り当てられた治療を、最長で84日間続ける。対象に、臨床的に意味のあるIP関連有害事象(AE)が発生した場合には、最長で14日間まで投与の中断が許可される。対象が、割り当てられた用量を続けることができない場合には、該対象は、用量を次に低い投薬計画に低減する。用量の低減は、以下のように行う:
・0.6mgQDの対象は、用量を、0.6mg/0.3mgで1日ごとに交互に低減する
・0.6mg/0.3mgを1日ごとに交互の対象は、用量を、0.3mgQDに低減する
・0.3mgQDの対象は、用量を、0.3mgQODに低減する
・0.3mgQODの対象は、用量を、プラセボに低減する

対象は、試験の間1回のみ用量の低減を許可される。IPの投薬を変更する決定は、治験責任医師の臨床的判断に基づくものとする。投薬の変更の前に、用量低減の意図を治験依頼者に知らせるべきである。28日間の治療を完了する前に試験を中断する対象は、治験依頼者の裁量で入れ替えてもよい(第1部については合計で10名までの対象)。

この試験の第1部に参加する対象が、試験の第2部に参加することは許されない。

（第2部）
第2部は、皮膚が主体のSLE対象における化合物1Aの有効性及び安全性を評価するための無作為化、プラセボ対照、二重盲検、並行群試験である。第2部は、ひとたび8名までの対象が第1部の0.6mgQD用量群における28日間の治療を完了し、第1部における0.6mgQD用量群の28日間の安全性評価が完了してからのみ開始される。

第2部における対象の参加は、3相からなる:
・治療前スクリーニング相:IPの開始前28日間まで
・治療相:84日間まで
・観察相:治療後84日間

合計で約100名までの対象が、IVRSを用いて、化合物1A(0.3mgQOD、0.3mgQD、0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互、及び0.6mgQD)又は対応するプラセボの4用量群(各化合物1A投薬アームに対象20名、及びプラセボアームに対象20名)に無作為化される。第2部に含まれる用量群は、第1部の結果次第で決まる。適切な安全性、認容性、又はPDを示さなかった用量群はいかなるものでも、第2部で用いてはならない。第2部の治療相は、84日までの期間である。早期にIPを中断する対象は、84日間の観察追跡相に参加する。試験を早期に終了する全ての症例において、対象は、早期終了受診を完了するよう促される。

試験の間、対象の全てが安定的用量のヒドロキシクロロキン、クロロキン、及び/又はキナクリンの継続を許可される。但し、対象が、ベースライン受診の前≧16週間にわたりこれらの抗マラリア薬のうちの１種を投与されており、少なくとも投薬前の4週間及び試験の始めから終わりまで安定的用量を継続するという場合に限る。他の全身免疫抑制剤は許可されない。さらに、必要に応じ(PRN)全身用鎮痒薬及び/又は全身用鎮痛薬による治療が許可される。しかしながら、対象は、全ての試験のための受診の48時間前に全ての全身用鎮痒薬の使用を、及び全ての試験のための受診の12時間前に全身用鎮痛薬の使用を中止しなければならない。経口のNSAIDをPRNで用いてもよいが、全ての試験のための受診の12時間前に中止しなければならない。経口のコルチコステロイドの使用は、1日あたり10mg以下の用量でのみ許可され、試験へ参加している間は安定的用量で継続されなければならない。試験の間、IVコルチコステロイドは許可されない。SLEの皮膚科学的な徴候のための他の外用的、局所的、又は全身的な治療は許可されない。

対象は、割り当てられた治療を最長で84日間続ける。対象に、臨床的に意味のあるIP関連AEが発生した場合には、最長で14日間までの投与の中断が許可される。対象が、割り当てられた用量を続けることができない場合には、該対象は、用量を、次に低い投薬計画に低減する。用量の低減は、以下のように行う:
・0.6mgQDの対象は、用量を、0.6mg/0.3mgを1日ごとに交互に低減する
・0.6mg/0.3mgを1日ごとに交互の対象は、用量を、0.3mgQDに低減する
・0.3mgQDの対象は、用量を、0.3mgQODに低減する
・0.3mgQODの対象は、用量を、プラセボに低減する

対象は、試験の間1回のみ用量の低減を許可される。IPの投薬を変更する決定は、治験責任医師の臨床的判断に基づくものとする。投薬の変更の前に、用量低減の意図を治験依頼者に知らせるべきである。

28日間の治療を完了する前に試験を中断する対象は、治験依頼者の裁量で入れ替えてもよい(第2部においては合計で10名までの対象)。

第1部及び第2部の双方について、対象はIP活性及び安全性を評価するための定期的に予定される診察を受ける。要求される評価は、表1及び2に示されるように完成される。

第1部又は第2部の治療相の完了又は中断に続いて、対象の全て(途中での中止を含む)は、28日間の観察追跡相のうちの初めの28日間は隔週で、その後、残りの56日間は月1回で、追跡される。本試験は、プロトコール、優良臨床試験基準(GCP)、及び該当する規制上の要件に従って実施される。

（6.2.2. 試験対象集団)
第1部及び第2部双方に関し、試験対象集団は、同意説明文書(ICD)に署名した時点で18歳以上の年齢の男性及び女性の対象からなる。

第1部における対象は、1982年米国リウマチ学会(ACR)改訂スクリーニングにおけるSLEの分類基準の1997年更新版（the 1997 Update of the 1982 American College of Rheumatology (ACR) Revised Criteria for Classification of SLE at Screening）で定義されるSLEの確定診断を受けている必要がある。

第2部における対象は、以下を要求される:
・1982年ACR改訂スクリーニングにおけるSLEの分類基準の1997年更新版で定義されるSLEの確定診断、
・スクリーニング前の少なくとも16週間にわたるループス疾患の皮膚科学的な徴候を伴うSLEの臨床診断、及び、Gilliamによる分類に基づく矛盾のない皮膚生検の所見、
・ベースラインでの、皮膚ループス面積及び重症度インデックス(the Cutaneous Lupus Area and Severity Index)(CLASI)に基づく十分な重症度の活性な皮膚病変(CLASI活動性スコア≧10)、
・ベースラインにおいて圧痛のある関節が少なくとも3関節として定義される活性なSLE関節炎
・SLEに関連する陽性の抗体、以下のうちの一つが含まれなければならない:
○スクリーニング期間中の、免疫蛍光アッセイ(IFA)による力価が1:160以上として定義される抗核抗体(ANA)
○スクリーニング期間中の、≧30IUとして定義される陽性ds-DNA抗体
○スクリーニング期間中の、抗核抗体(SS-A[Ro]、SS-B(La)、Smith、又はRNP)。

（6.2.3 試験期間)
第1部及び第2部双方の参加者ともに、各対象についての試験参加期間は、196日間である(最長で、28日間のスクリーニング相、84日間の治療相、84日間の観察追跡相)。

試験の終了は、試験を完了するための最後の対象の最後の受診の日付、又はプロトコール及び/又は統計解析計画に前もって明記されている一次、二次、及び/又は探索的解析で求められる最後のデータポイントを、最後の対象から受け取った日付のうちのいずれか遅い方と定義される。

(6.2.4. 試験治療)
化合物1Aは、0.3mgカプセル剤として提供される。標準的な対応するプラセボカプセル剤もまた提供される。カプセル剤は、食物と共に又は食物を伴わずに口から(PO)摂取される。

第1部については、対象は以下の4用量群のうちの1つに無作為に割り当てられる。第1部の間、4用量群の全てが、十分な安全性、認容性、及び/又は有効性を示す場合は、同一の4用量群が第2部で用いられる。被験薬は、以下に示されるようにPOで投与される:
化合物1A
・0.3mgQOD
対象は、0.3mgを1日おきに1回与えられる
・0.3mgQD
対象は、0.3mgを毎日与えられる
・0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互
対象は、0.6mg及び0.3mgを1日ごとに交互に与えられる
・0.6mgQD
対象は、0.6mgを毎日与えられる

(プラセボ)
プラセボ群に割り当てられた対象は、対応するプラセボカプセル剤を毎日与えられる。プラセボの対象に、臨床的に意味のあるIP関連AEが発生した場合には、最長で14日間までの投与の中断が許可される。対象がプラセボを続けることができない場合には、該対象は、早期にIPを中断し、第1部については84日間の観察追跡相、第2部については28日の追跡相のいずれかに参加してもよい。試験を早期に終了した全ての症例において、対象は早期終了受診を完了するよう促される。IPの投薬を変更する決定は、治験責任医師の臨床的判断に基づくものとする。治験依頼者は、投薬の変更の前に用量低減の意図を知らされるべきである。観察追跡期間中に対象に、再燃が起こった場合には、対象が試験に残り、評価スケジュールにより示される予定された受診及び評価を続けることができるように、治験責任医師(PI)は、標準治療で対象を治療してもよい。

(6.2.5 安全性評価の概要)
安全性は、以下の基準に基づき評価される:
・有害事象
・身長、体重、脈拍、体温、及び血圧を含むバイタルサイン
・血液学的検査、血清化学検査、尿検査
・炎症パネル
・血清ベータ-ヒト絨毛性ゴナドトロピン(HCG)及び尿妊娠検査(妊娠可能な女性[FCBP]に対して)
・破傷風トキソイド、髄膜炎菌、肺炎球菌、及びインフルエンザワクチン力価
・集中型(Centralized)12誘導心電図(ECG)
・身長及び体重を含む身体検査
・併用薬及び併用処置
・眼科的検査
・肝炎スクリーニング

(6.2.6 薬物動態学的評価の概要)
試験の間、血漿中の化合物1Aの定量のための血液サンプルを、指定の時点(表1及び2)で採取する。第1部及び第2部における4治療群のうちの各群において最少で4名の対象(最少で合計32名の対象)が、本試験の集中的PK部分への参加ターゲットとされる。IVRSを用い、1用量群あたり最少で4名の集中的PK参加者が含まれることを確実なものとする。化合物1AのノンコンパートメントPKパラメーターは、これらの対象から見積もられる。本試験の集中的PK部分に参加しない他の対象は全て、疎なPKサンプルを採取される。

(6.2.7 薬力学的評価の概要)
薬力学的なプロファイルは、以下に基づき評価される:
・第1部及び第2部において、末梢の白血球細胞中のPDマーカーであるAiolos及びIkarosが測定される
・第1部及び第2部において、末梢血リンパ球サブセットが測定される
・第1部及び第2部における、ループス自己抗体/補体パネル(抗Ro、抗La抗dsDNA、抗smith、リウマトイド因子、抗RNP、C3、C4、細胞結合性補体活性化産物(CB-CAP)、CH50、ANA、ANCA、抗甲状腺抗体)

(6.2.8 有効性評価の概要)
有効性は、以下に基づき評価される:
・皮膚ループス面積及び重症度インデックス(CLASI)
・ハイブリッドSELENA 全身性エリテマトーデス疾患活性インデックス(SLEDAI)
・医師総合評価(PGA)
・腫脹及び圧痛関節数
・心膜痛/胸膜痛数値評価スケール

(6.2.9 生活の質の評価の概要)
総合的な生活の質は、以下に基づき評価される:
・慢性疾患療法の機能評価-疲労(FACIT-F)
・ショートフォーム-12(SF-12)
・EQ-5D
・皮膚科学生活の質インデックス(DLQI)
・健康評価質問表の身体障害インデックス(HAQ-DI)
・ループス患者レポートアウトカムツール(LupusPRO)

(6.2.10 遺伝薬理学的評価の概要)
遺伝薬理学的プロファイルは、これらに限定されないが、IKZF1及びIKZF3等のSLEに関連する遺伝子における一塩基多型を用いて評価でききる。

(6.2.11 手順)
(A. 試験への登録)
表1及び2に示されるように要求される評価を完了する。
・何らかの試験手順を開始する前に、治験責任医師又は指名された者により対象の全てについてインフォームドコンセントを得なければならない。何らかの試験手順を開始する前に、対象の全ては、ICDの副試験部分(集中的PK、免疫化、及びPG)を見直し、試験の当該部分への参加に同意するか否かを表明しなければならない。
・各対象についての、関連性のある病歴(関連性のあるGI症状、神経学的症状、アルコール及びタバコの使用等を含む)情報が、収集される。
・各対象についての、以前の薬物及び併用薬物の使用に関する情報が収集される。スクリーニング及びベースライン受診において、併用薬物は、要求される休薬期間が満たされていることを確実にするために、禁止された薬物のリストと照らし合わせ確認すべきである。対象が休薬要件を満たさない場合には、試験のための受診計画を変更しなければならない。

(B. 安全性評価)
試験のための受診をする日に、対象は、その場所でその対象のIP用量を服用する。

表1及び2に示されるように、要求される評価が完成される。治験責任医師が臨床的に正当化されるものと思う場合には、評価は試験の間の別の時期に行ってもよい。
・ICDへの署名の時点から観察相を含む時点までの試験の期間における任意の時点に発生した全てのAEに関する情報は、IP(化合物1A又はプラセボ)との因果関係にかかわらず、収集される。
・バイタルサインには、体温、脈拍、及び着席時血圧が含まれる。血圧は、対象が着席し5分間安静にした後に測定される。
ECG及びPK評価が行われる試験のための受診時には、血圧測定を先に完了すべきである。投与前ECGをその後行い、それに続き、投与前PK採血及びIPの投薬を行うべきである。
・完全な身体検査には、身長(スクリーニング受診)及び体重(スクリーニング及び最終治療受診、靴を脱ぎ日常着を着て行われる)、皮膚、鼻腔、眼、耳、呼吸器、心血管、胃腸管、神経、リンパ、及び筋骨格系評価が含まれる。身体検査の結果は、原文書にのみ記録される。スクリーニング身体検査中に確認される臨床的に意味のある異常な所見は、病歴としてe-CRFに記録される;最終治療受診身体検査中に確認される臨床的に意味のある所見は、有害事象として記録される。婦人科及び泌尿生殖器の検査は、正当な理由がない限り行われない。
・ターゲットとされる身体検査には、皮膚、呼吸器、心血管、リンパ、及び筋骨格系の評価が含まれる。身体検査の結果は、原文書にのみ記録される。ターゲットとされる身体検査中に確認される臨床的に意味のある異常な所見は、有害事象としてeCRFに記録される。婦人科及び泌尿生殖器の検査は、正当な理由がない限り行われない。
・試験のための受診のほとんどで、標準12誘導ECGを測定する。ECG及びPKの時点が一致する場合には、評価完了のために±15分間の期間が許容される(常にECGを先に評価すべきである)。第2回の受診以降のECGはすべて、対象が仰臥位を3分間保ったのちに、5分間の間隔をあけて測定すべきである。
○スクリーニングでは:ECGを1回測定する
○要求される治療受診時には:ECGを投与前に3回測定する
○観察追跡相においては:ECGを1回測定する
ECG実施前の刺激剤及び/又は薬物、例えば、カフェイン、エナジードリンク、甘草、テオフィリン等は避けるべきである。
試験の始めから終わりまで、同一のECG装置が使用される。ECGの記録はすべて、QT測定及びBazett及びFridericiaの式を用いたQTc計算のために、ECG中核検査室において心臓専門医により継続的に人力でオーバーリードされる。
・検査評価
○全てのFCBPに対する妊娠検査(尿及び/又は血清)
○血清化学検査(総蛋白、アルブミン、カルシウム、リン、グルコース、尿酸、総ビリルビン、アルカリホスファターゼ、AST[SGOT]、ALT[SGPT]、リパーゼ、ナトリウム、カリウム、塩化物、炭酸水素、血中尿素窒素、クレアチニン、乳酸デヒドロゲナーゼ、[LDH]、マグネシウムを含む)
○血液学検査(全血球数及びその分類、並びに血小板、白血球絶対数、アポリポタンパク質、総コレステロール)
○脂溶性ビタミン(A、D、E、K)
○PT、INR、及びPTT
○尿検査(微視的及び定量的タンパク質)
○破傷風トキソイド、髄膜炎菌、肺炎球菌、及びインフルエンザ力価
○炎症パネル(赤血球沈降速度[ESR]、フィブリノーゲン、高感度C反応性タンパク質[hs-CRP]、血清アミロイドAを含む)
○肝炎検査(B型肝炎表面抗原及び抗体、B型型肝炎コア抗体(IgG/IgM)、並びに
C型肝炎に対する抗体の検査を含む)
○免疫グロブリン[免疫グロブリンA(IgA)、免疫グロブリンM(IgM)、及び免疫グロブリンG(IgG)]の定量的評価
○ループス抗リン脂質プロファイル(ループス抗凝固因子、抗カルジオリピン抗体、ベータ-2-糖タンパク質I及びホスファチジルセリンに対する抗体)
サンプルの採取、処理、保管、輸送、及び取扱いに関する詳細な指示は、別個のマニュアルのその部分に提供される。
・眼科検査は、認定眼科医により行われる。試験には、視力、並びに前眼房、虹彩、及び前部硝子体に注目した散瞳後のフルオレセイン染色を伴うスリットランプ検査(例えば、過敏症によるもの等、フルオレセインが禁忌でない場合に限る)が含まれる。

(セルジーン妊娠予防カウンセリングプログラム(CPPCP))

(C. 有効性評価)
対象が、試験のための受診の12時間以内に全身用鎮痛薬を服用していた場合及び/又は受診の48時間以内に全身用鎮痒薬を服用していた場合には、その対象の受診の計画を変更するべきである。試験のための受診よりも前の対象の経験が回答に最も正確に反映されるように、健康評価質問表は、他のいかなる試験行為よりも先に完了されなければならない。対象が、質問表を完了するのに支援を必要とする場合には、支援は、試験スタッフによってのみ提供されるべきであり、家族の一員によって提供されるべきではない。CLASI、DAS28、ハイブリッドSELENA SLEDAI、及びPGA評価は、試験の始めから終わりまで、同一の訓練された治験責任医師又は治験分担医師により行われるべきである。

(CLASI活動性スコア評価)
CLASI活動性スコアは、0〜70の範囲である。活動性スコアを出すためには、0(無し)〜3(暗赤色;紫色(purple)/青紫色(violaceous)/痂皮性/出血性)のスケールで、紅斑のスコアをつけ、0(無し)〜2(いぼ状/肥厚性)のスケールで鱗屑/肥厚のスコアをつける。紅斑及び鱗屑/肥厚スコアの双方は、13か所の異なる解剖学的部位において評価される。また、0(無し)〜1(病変又は潰瘍)のスケールで、粘膜病変の存在についてのスコアをつけ、最近の脱毛の発生を捕捉し(1=yes;0=no)、0(無し)〜3(2四半部以上において局所的又は斑状)のスケールで、非瘢痕性脱毛症のスコアをつける。活動性スコアを計算するために、紅斑、鱗屑/肥厚、粘膜病変、及び脱毛症のスコアを全て足し合わせる。

(CLASI損傷スコア評価)
CLASI損傷スコアは、0〜56の範囲である。損傷スコアを出すために、0(無し)〜1(色素沈着異常)のスケールで、色素沈着異常のスコアをつけ、0(無し)〜2(重度に萎縮性の瘢痕又は脂肪織炎)のスケールで、瘢痕/萎縮/脂肪織炎のスコアをつける。色素沈着異常及び瘢痕/萎縮/脂肪織炎スコアの双方が、対象にとって、通常12ヶ月を超えて続くもの、又は12ヶ月未満続くものとして評価される。色素沈着異常が、通常12ヶ月を超えて続くものである場合には、13ヶ所の解剖学的部位について行った色素沈着異常スコアーを2倍にする。また、0(無し)〜6(頭皮全体が冒されている)のスケールで、頭皮の瘢痕(臨床的に判断したもの)のスコアをつける。損傷スコアを計算するために、色素沈着異常、瘢痕/萎縮/脂肪織炎、及び頭皮の瘢痕のスコアを全て足し合わせる。

(医師総合評価(PGA))
PGAでは、疾患の悪化を表すために、スコアが0〜3の間である視覚的アナログスケールが使用される。スコア付けは、以下のようである:
・0=無し
・1=軽度の疾患
・2=中程度の疾患
・3=重篤な疾患
これは、対象の総合的な健康状態を計測するために用いられる医師により実施される手段である。10%(0.3ポイント)の増加は、疾患の臨床的に意義のある悪化とみなされる。

(腫脹及び圧痛関節数)
本ツールを用いて、関節の圧痛及び腫脹を、重症度を定量化することなく、「有り」又は「無し」として記述する。試験の始めから終わりまで一貫性を保つために、任意のある対象に関しては、1か所の試験場所において、試験のための受診それぞれにおいて、同一の評価者が関節評価を行うべきである。

(ハイブリッドSELENA SLEDAI)
ハイブリッドSELENA SLEDAIでは、1〜8点の重み付きのスコアを用いた24種のループスの徴候の評価を通じて疾患の活動性が測定される。ハイブリッドSELENA SLEDAIでの4点以上の減少は、臨床的に意味があるものとみなされる。重症度にかかわらず、又は徴候が改善しようとも悪化しようとも、その徴候がそれまでの10日間を超えて存在している場合には、その徴候は記録される。ハイブリッドSELENA SELEDAIとSELENA SLEDAIの違いは、蛋白尿症の定義にある。ハイブリッドSELENA SLEDAIは、蛋白尿症を>0.5gm/24時間と定義しており、「0.5gm/24時間を超える新たな発症又は最近の増加」は、定義から除かれている。

(心膜炎/胸膜炎数値疼痛スケール)
1〜10の数値を用いて各スケールのスコアをつける。1は、「疼痛無し」を表し、10は「考え得る最悪の疼痛」を表す。疼痛スケールの双方は、対象により自己実施され、これにより、心臓周囲及び胸膜炎不快感に関連するSLE疼痛の重症度が計測される。疼痛に加えて、臨床的に意味のあるSLEの心臓周囲の又は胸膜炎の徴候を示す対象又は試験評価から示されることは、いかなるものであれ徹底的に調査されなければならない。臨床的に意味のあるSLE関連合併症がみられた場合には、対象は試験を中止して観察追跡期間に入り、適切に治療されるべきである。

(D. QoL評価)
要求される評価が、表1及び2に示されるように完成される。

(SF-12)
SF-12は、以下の8つの健康領域を評価する8種の複数項目スケールからなる自己実施型手段である:1)健康上の問題による身体活動の制限;2)身体的又は感情的な問題による社会的活動の制限;3)身体的な健康問題による通常の役割活動の制限;4)体痛;5)メンタルヘルス全般(心理的苦痛及び良好な状態にあること);6)感情的な問題による通常の役割活動の制限;7)活力(エネルギー及び疲労);並びに8)健康認識全般。SF-12によって測定される概念は、いかなる年齢、疾患、又は治療群にも特有のものとはならず、異なる疾患の相対的な負荷及び異なる治療の相対的な利益の比較を可能とする。

(FACIT-F)
FACIT-疲労スケールは、疲労の身体的及び機能的帰結の双方を評価する13項目の自己実施型質問表である。各質問は、0が「全く無い」を意味し、4が「非常にある」を意味する5点スケールで回答される。より高いスコアは、疲労のより高いレベルを意味する。対象のSLEが改善されるにつれて、FACIT疲労スコアが減少することが期待される。

(EQ-5D)
EQ-5Dでは、対象の健康状態全般が垂直VASとして、及び6種の生活の質ドメイン:移動能力、セルフケア、主活動(仕事、勉学、家事)、家庭/余暇活動、疼痛/不快感、及び不安/うつ状態が多項選択式の質問として測定される。これらの組合せにより、216種の健康状態が生じ得る。

(DLQI)
DLQIは、到着次第、他のいかなる手順又は評価が行われるよりも前に、その場所で対象により評価される。DLQIは、皮膚疾患の影響と関連する制約を評価するための、皮膚科の臨床状況における使用のための簡単、小型、かつ実用的な質問表として開発された。この手段には、対象の皮膚を扱う10項目が含まれる。項目番号7を除けば、対象は、「非常にある」から「全く無い」までの範囲の4点スケールで回答する。項目番号7は、複数部分からなる項目であり、その第1部では、対象の皮膚が仕事又は学問の実施を不可能としたかどうかが確認され(Yes又はNo)、「No」の場合には、対象は、この1週間で仕事又は学問においてどの程度皮膚が問題であったかを尋ねられる。ここで、回答の選択肢は、「大いにある」、「少しある」、又は「全く無い」である。DLQIの合計スコアは、0〜30の範囲を取り得、30が最悪の生活の質に対応し、0が最高スコアに対応する。開発者は、DLQIが6つのサブスケール:症状及び感情;日常の活動;余暇;仕事/学校;人間関係;並びに治療にグループ化できることを示唆している。サブスケールのうちの4種(症状及び感情、日常の活動、余暇、並びに人間関係)のスコアは、0〜6の範囲である;サブスケールのうちの2種(仕事/学校及び治療)のスコアは、0〜3の範囲である。より高いスコアは、より低い生活の質に対応する。

(LupusPRO)
LupusPROは、SLEの患者のための疾患標的患者レポートアウトカムツールである。LupusPROは、民族的に多様な米国のSLE患者から開発された。LupusPROは、米国における使用に有効とされている。LupusPROは、43項目を有し、そのうちの30項目は、健康に関連する生活の質のためのものである(Jolly, 2007; Jolly, 2008; Cervera, 2010)。

(健康評価質問表の身体障害インデックス(HAQ-DI))
HAQ-DIは、対象の機能的能力を、4レベルの困難度スケール(0〜3で、0は正常又は困難ではないを表し;3は遂行できないことを表す)で測定する20個の質問からなる自己実施型手段である。機能に関する8つのカテゴリー:身じたく、起立、食事、歩行、衛生、リーチング動作、握力、及び日常活動が含まれる(Bruceらの文献J. Rheumatol., 2003, 30:167-78)。このスケールは、変化に高感度であり、将来の身体障害のよい予測材料となる(Aletahaらの文献Rheum. Dis. Clin. North Am., 2006, 32:9-44)。

(E. 他の評価-薬物動態)
対象の全ては、主試験の参加者として疎なPKに参加する。集中的薬物動態の完了には、副試験のインフォームドコンセントフォームを用いて対象の同意を得る必要がある。化合物1AのPKを評価するために、集中的PKサンプル及び疎なPKサンプル双方が採取される。また、集中的PKサンプルは、R-エナンチオマーについて測定してもよい。化合物1Aの用量レベル、投薬日、投薬時刻(24時間表記)、及び実際のPK血液サンプリング時刻(24時間表記)を含む投薬及びサンプル採取情報は、eCRFの適切な頁に正確に記録すべきである。

(疎なPKサンプリング)
本試験の集中的PK部分に参加しない他の対象の全ては、疎なPKサンプルを採取される。薬物動態学的血液サンプル(合計約12mL)が、集中的PKサンプリングに参加しない対象において(その部位がPK能力を有さない場合を除く)、以下の時点:第15、29、57、及び85日で採取される。受診１回あたり１投与前サンプルが採取される。

(集中的PKサンプリング)
集中的PK評価への参加は、スクリーニングにおいて別個の同意書に署名が行われる選択制の副試験である。１治療群あたり最少で4名の対象(最少で合計32名の対象)において、頻回のPK血液サンプル(合計約57mL)の採取が、以下の時点で行われる:
・第2回の受診(ベースライン-第1日):IPの投与前(時間=0)、並びにIP投与の1、2、3、4、6〜8時間後、及び24時間(±5時間)後。
・第4回の受診(第15日):1受診あたり1投与前サンプル
・第6回の受診(第29日):IPの投与前(時間=0)、並びにIP投与の1、2、3、4、6〜8時間後、及び24時間(±5時間)後。
・第8及び10回の受診(第57及び85日):1受診あたり1投与前サンプル

IVRSを用い、1用量群あたり最少で4名の集中的PK参加者が含まれることを確実なものとする。薬物動態学的サンプルは、以下の採取期間内に採取すべきである:
・投与前サンプルについては、-30〜-5分
・1〜4時間の時点で採取されるサンプルについては、±10分間
・6〜8時間の時点で採取されるサンプルについては、±20分間
・24時間の時点で採取されるサンプルについては、±5時間(本サンプルは、第2の投与の前に採取されなければならない)
各時点において、約3mLの血液が採取される。血漿中の化合物1Aの濃度が決定される。

PK受診時の全てで、対象はIPを試験センターに持参しなければならなず、投与前PK血液サンプルの採取後に、当該試験センターにおいて対象にIPが投与されなければならない。試験センターでの受診中に、対象は、最後のIP投与(今回の試験のための受診日よりも前のもの)の日付及び時刻を、試験スタッフに報告するよう求められる。PKサンプル採取日のIP投薬時刻もまた、試験スタッフにより文書として記録されるべきである。

ECG及びPKの時点が一致した場合には、±15分間の期間がPKの完了のために許容される(ECGが常に先に評価されるべきである)。

(F. 他の評価-薬力学)
(末梢血バイオマーカー)
PD血液バイオマーカー測定値は、以下のように収集される:
・薬物標的エンゲージメント:第1部の第1日、第29日、第57日、及び第85日、並びに第2部の第1日におけるフローサイトメトリーによる末梢血Aiolos及びIkaros。
・免疫系:第1日、第29日、第57日、及び第85日におけるフローサイトメトリーによる末梢血B細胞、T細胞、CD3+、CD4+、CD8+、CD16+/56、CD19+リンパ球サブセット、及び樹状細胞(DC)。
・疾患マーカー: 第1日、8、29、57日及び第85日(又は早期終了)、並びに観察追跡相の第113日、第141日(第1部のみ)、及び第169日(第1部のみ)におけるループス自己抗体/補体パネル(抗Ro、抗La 抗dsDNA、抗smith、リウマトイド因子、抗RNP、C3、C4、CB-CAP、CH50、ANA、ANCA、抗甲状腺抗体)。

(G. 他の評価-薬物性の)
PG評価への参加は、スクリーニングにおいて別個の同意書に署名が行われる選択制の副試験である。妥当な限り多くの対象を得るよう試みる。１つの血液サンプルを、化合物1Aの有効性又は安全性に関連する遺伝子マーカーを評価する遺伝子解析のためにベースラインにおいて得る。遺伝薬理学的試験が、ベースラインにおいて採取された血液から単離されたDNAを用いて行われる。DNAは、SLEに関連する遺伝子(以下の遺伝子を含むが、これらに限定されない:IKZF1(Ikarosをコードする遺伝子)、IKZF3(Aiolosをコードする遺伝子)、PRDM1(BLIMP-1をコードする遺伝子)、HLA-DRB1、BLK、BANK1、TNFAIP3、STAT4、IRF5、TNFSF4、TRIM27、OR2H2、MICB、CREBL1、HSD17B、JAZF1、ATG5、PTTG1、PXK、ITGAM、ETS1、LRRC18- WDFY4、RASGRP3、SLC15A4、TNIP1、IRF8、IL10、NCF2、IFIH1、TYK2、並びに化合物1A標的関連遺伝子であるCRBN(セレブロンをコードする遺伝子)及びCUL4A)内又はその近傍において多型が存在するか否かに関し試験される。

(H. 他の評価-免疫化)
免疫化副試験への参加は、スクリーニングにおいて別個の同意書に署名が行われる任意のものである。SLE対象における免疫化に対する化合物1Aの作用は、試験の間に破傷風トキソイド、髄膜炎菌、及び肺炎球菌力価を測定することによりモニターされる。適格である対象(病歴に基づく)は、治療期間の開始時に破傷風トキソイド及び髄膜炎菌又は肺炎球菌免疫化を受けるものである免疫化副試験に参加する機会が与えられる。

免疫化副試験に参加することに同意する対象は、以下の基準群に従い各ワクチン接種タイプに適格とならなければならない:
・破傷風トキソイド
○ワクチンを受けたのが、ベースラインの5年未満前である。
○治験責任医師の判断によれば、対象への提供が安全である。
・髄膜炎菌/肺炎球菌
○対象は、肺炎球菌又は髄膜炎菌ワクチンのいずれかのみを受けることができ、双方を受けることはできない。対象が、ベースライン受診の前5年以内にどちらのワクチンも受けていない場合には、肺炎球菌ワクチンのみが与えられるべきである。ベースライン受診の5年以内に肺炎球菌ワクチンを受けており、ベースライン受診の5年以内に髄膜炎菌ワクチンを受けていない場合にのみ、対象は髄膜炎菌ワクチンに適格となる。対象が、ベースライン受診の5年以内に髄膜炎菌ワクチンも受けている場合には、該対象はどちらのワクチンを受けるのにも適格ではない。
○治験責任医師の判断によれば、対象への提供が安全である。

(6.3 実施例3:SLEのPBMCにおけるCRBN、IKZF1、及びIKZF3 mRNAの過剰発現)
健康な志願者(N=10)又はSLE患者(N=11)由来の生存可能に凍結したPBMCを、Conversant Bio (Huntsville, AL)より得た。細胞を、37℃で素早く解凍し、PBS中で洗浄し、遠心分離でペレット化し、直ちにRLT緩衝液に溶解させた。全RNAを、QIAcube(商標)システム(Qiagen, Valencia, CA)を用いて、RNeasyミニスピンカラムキット(カタログ番号:74104)で精製した。精製したRNAを、逆転写酵素キット(Applied Biosystems)を用いてcDNAへと逆転写した。ViiA7リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)システム(Applied Biosystems)において、CRBN(A)、IKZF1(B)、及びIKZF3(C)に対して特異的なTaqman(登録商標)PCRプローブを用いてリアルタイム定量的RT-PCRを2度行った。生成物の量は、内在性ハウスキーピング遺伝子としてのグリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素に対し規格化された。遺伝子発現の倍数表示での増加を比較Ct法(2^-ΔΔCt)を用いて計算した。独立t検定を用いて、P値を求めた。

正常なコントロールと比較したSLE患者由来の末梢血単核球におけるCereblon(CRBN)、Ikaros(IKZF1)、及びAiolos(IKZF3)をコードする遺伝子の発現を、図2A、図2B、及び図2Cにそれぞれ示す。結果より、SLEのPBMCにおけるCRBN、IKZF1、及びIKZF3 mRNAの過剰発現が示される。正常なPBMC(N=10)と比較して、SLEのPBMC(N=11)は、有意により高いレベルのセレブロン(CRBN)、Ikaros(IKZF1)、及びAiolos(IKZF3)を発現した。

(6.4 実施例4:AIOLOS及びIKAROSタンパク質レベルに対する化合物1Aの作用)
健常な志願者(Bioreclamation, Westbury, NY)由来のヘパリン処置したヒト全血を、0.1%のDMSO及び化合物1A(1、10、100nM)で、37℃、5%CO₂で18時間処理した。18時間後、血液を溶解させ、1 X Lyse/Fix Buffer(BD Biosciences)を用いて、37℃で10分間固定した。細胞を冷PBSで洗浄し、細胞を、先ず、マウス抗ヒトCD3-PE mAb、マウス抗ヒトCD19-APC mAb、及びマウス抗ヒト-CD14-PerCP mAb(全てBD Biosciencesより入手)により多色に染色し、CD3+ T細胞、CD19+ B細胞、及びCD14+単球をそれぞれ確認した。その後、細胞をBD Perm/Wash Buffer Iを加えることにより透過処理した。細胞内Aiolos又はIkaros 含量のための染色の前に、添加したFcR Blocking Reagent(Miltenyi Biotech)により非特異的な結合を10分間ブロックした。その後、細胞を、ウサギ抗ヒトAiolosポリクローナルAb(Santa Cruz, Perm/Wash Buffer中に1:200で希釈)又は抗ヒトIkarosポリクローナルAb(Santa Cruz, Perm/Wash Buffer中に1:50で希釈)で染色し、続いて、ヤギ-抗ウサギmAb-AF488 Ab(Invitrogen, Perm/Wash Buffer中に1:400で希釈)で染色し、細胞内Aiolos又はIkarosレベルを試験した。アイソタイプコントロールとして、正常なウサギIgG(R&D Systems)も用いた。B細胞、T細胞、単球、及び顆粒球におけるAiolos及びIkarosタンパク質レベルを、CD3+細胞、CD19+細胞、CD14+細胞、及び顆粒球(FSC/SSC)のゲーティングに基づき、 FACSDiva 6を備えたFACSCanto(BD Biosciences)で分析した。データ解析は、Flowjo(Tree Star)ソフトウェアを用いて行った。

結果より、化合物1Aが、CD19+ B細胞(図3A)、CD3+ T細胞(図3B)、CD14+単球(図3C)、及び顆粒球(図3D)を含む全血白血球サブセットにおけるAiolos及びIkarosタンパク質レベルを、低減させることが示された。

Ficoll-Paque法を用いて、ヒトバフィーコートからPBMCを精製した。CD19+ B細胞を、EasySepヒトB細胞濃縮カクテルプロトコール(StemCell Technologiesカタログ番号:19054)に従い、PBMCから単離した。50μg/mLのヒトトランスフェリンを、B細胞培地(10%のPFBS、1%のP/S、及び5μg/mLのヒトインスリンを含むIscoveの培地)に加えることにより、新鮮なB細胞カクテルを調製した。必要とされる体積の実験に必要とされる培地を、0.22ミクロンのフィルターでろ過した。B細胞分化カクテル(終濃度):遺伝子組換えヒトインターロイキン(IL)-2(20U/mL)、IL-10(50ng/mL)、IL-15(10ng/mL)、CD40リガンド/TNFSF5/ヒスチジン標識(50ng/mL)、ポリヒスチジンマウスIgG1抗体(5μg/mL)、及びODN 2006-ヒトTLR9リガンド(10μg/mL)。CD19+細胞は、化合物1A、又はSyk阻害剤、又は0.1%のDMSOで1時間前処理し、その後、示された期間、B-細胞分化培地とインキュベートした。

インキュベーションした後に、細胞を回収し、遠心分離でペレット化し、10mMのTris-HCl(pH 8.0)、10mMのEDTA、150mMのNaCl、1%のNP-40、0.5%のSDS、1mMのDTT、1mMのNa3VO4、及びComplete(商標)プロテアーゼ阻害剤カクテル(Roche Applied Science, Indianapolis, Indiana)を含有する0.1mLの溶解バッファーに直ちに溶解させ、その後、QIAshredder(商標)(Qiagen)で1分間処理し、ドライアイス上で凍結させた。サンプルを、6×SDSサンプルバッファーで希釈し、その後5分間煮沸した。Criterion Precast 10% Tris-HClゲル(Bio-Rad Laboratories, Hercules, California)上に、1レーンあたり約15μLでこの混合物を載せ、電気泳動し、ニトロセルロースメンブレン(Bio-Rad)に転写した。これらのメンブレンを、ブロッキングバッファー(LI-COR Biosciences, Lincoln, Nebraska)を用いて室温で1時間ブロックし、その後、Aiolos、Ikaros、又はβ-アクチンのうちのいずれかに対する抗体と共に4℃で一晩インキュベートした。メンブレンを洗浄し、IRDye Secondary Antibodies(1:25,000)と共に室温で1時間インキュベートした。その後、標準プロトコールに従い、Odyssey(登録商標)Infrared Imaging System及びソフトウェア(LI-COR Biosciences)を用い、シグナルの検出及びバンドの定量化を行った。

CD19+ B細胞培養中のAiolos及びIkarosタンパク質レベルに対する化合物1Aの作用を、図4A及び図4Bにそれぞれ示す。Ikaros及びAiolosをウエスタンブロットにより測定した。

SLEと確認された患者由来の全血サンプルを、Sanguine Biosciences社から得た。血液を、無菌のDulbeccoリン酸緩衝食塩水溶液(DPBS)により希釈し、3本の50mLコニカルチューブに入れた。各チューブに、約12mLのFicoll-Plaqueを、下層として静かに加え、該チューブを1000gで35分間連続して遠心分離した。単核細胞を含む界面を採取し、2本の50mLのコニカルチューブに移し、各コニカルチューブ中の体積を、DPBSを用いて50mLに調整した。単核細胞をDPBSで洗浄してFicoll及び血小板を取り除き、3回の洗浄の後に、細胞ペレットを40mLのB細胞培地(Iscove改変Dulbecco培地+10%のウシ胎仔血清(FBS)、1%のペニシリン/ストレプトマイシンP/S、及び2mMのL-グルタミン)に再懸濁し、トリパンブルー色素排除法を用いて生存率及び細胞数を得た。PBMCを、図4A及び図4Bに関連して上で記載したB細胞分化カクテルを用いて活性化した。細胞培養液上清を回収し、抗二本鎖DNA抗体ELISAキット(Orgentec ORG 604S)及び抗カルジオリピン/リン脂質ELISAキット(Orgentec ORG-529)を用いて自己抗体について分析した。

化合物1Aは、また、インビトロでSLE自己抗体産生を阻害した(図5A及び図5B)。SLEのPBMCの培養において、化合物1Aは、約10nMのIC50で、抗dsDNA自己抗体(N=9)及び抗リン脂質自己抗体(N=8)の産生を阻害した。

(6.5 実施例5:健康な志願者における化合物1Aの作用)
健康な志願者に、プラセボ(n=10)又は0.03mg、0.1mg、0.3mg、1mg、又は2mgの用量の化合物1A(それぞれN=6)を投与した。投薬の前又は投薬後3時間、12時間、及び24時間に、血液サンプルを採取した。血液サンプルを溶解し、1体積の血液を20体積の1 × Lyse/Fix バッファー(BD Biosciences、カタログNo.558049)と混合し、チューブを数回反転させることでよく混合することにより直ちに固定した。このサンプル混合物を、37℃の水浴で10分間インキュベートし、細胞を、800×gで5分間遠心分離することによりペレット化し、吸引により上清を取り除いた。細胞を、2mLの冷リン酸緩衝生理食塩水(PBs)で2回洗浄し、その後、2mLの冷BD Cytofix/cytopermバッファーを加えることにより透過処理し、氷上で15分間インキュベートした。細胞を遠心分離後、BD perm/washバッファーで2回洗浄し、その後、40ulのBD perm/washバッファーに再懸濁した。細胞を、抗CD3又は抗CD19抗体、及び20ulの抗Aiolos Ab(Santa Cruz Santa Cruz、ウサギポリクローナルIgG、カタログNo.sc-101982、染色バッファーで1:200に希釈)、又は20uLの細胞に対する適当なアイソタイプコントロールで染色した。細胞をよく混合し、暗所で室温で30分間インキュベートし、BD perm/washバッファーで1回洗浄し、その後、80ulのBD perm/washバッファーに再懸濁し、20uLの二次抗体を添加し、フローサイトメーターで分析した。

結果より、化合物1Aが、健康な志願者における0.3mg、1mg、及び2mgコホートで、B細胞(図6A)及びT細胞(図6B)におけるAiolosの発現を低減させることが示された。図6Aは、健康な志願者に化合物1Aの1回用量を投与した後に、処置に関連したB細胞内Aiolosの減少があったことを示す。投与後12時間では、1及び2mg群は、それぞれ、28.2%及び25.0%のベースライン値のパーセントを有した。投与後24時間では、0.3mg群は、24.8%のベースライン値のパーセントを有した。図6Bは、健康な志願者に化合物1Aの1回用量を投与した後に、処置に関連したT細胞内Aiolosの減少があったことを示す。投与後12時間では、1及び2mg群は、それぞれ22.3%及び26.1%のベースライン値のパーセントを有し;投与後24時間では、0.3mg群は、0%のベースライン値のパーセントを有した。

また、化合物1Aは、健康な志願者における末梢血B細胞数(図7A)を用量依存的に低減させた。化合物1Aの0.3及び2mgの間で用量に関連した絶対CD19+細胞における最大反応の減少があり、ベースライン値の平均パーセントは、0.3mgについて第3日において73.5%、1mgについて第2日において67.3%、及び2mgについて第3日において51.3%であった。末梢血におけるB細胞絶対数は、抗CD19抗体を用いてフローサイトメトリーにより上述のように測定した。

また、化合物1Aは、健康な志願者における末梢血T細胞数(図7B)を低減させた。結果から、T細胞の減少は、B細胞の減少よりも穏やかであることが示された。第2日において、0.3mg群は84.1%、1mg群は79.4%のベースライン値のパーセントを有した。第5日において、2mg群は、73.8%のベースライン値のパーセントを有した。末梢血におけるT細胞絶対数は、抗CD3抗体を用いて、フローサイトメトリーにより、上述のように測定した。

全血を、抗CD3抗体で刺激し、Myriad Rules Based Medicine(Austin, TX)によるCD3 TruCultureシステム(パーツ番号782-001202)を用いて、IL-2について分析した。図8Aは、健康な志願者における化合物1Aの投薬が、生体外において抗CD3により刺激された全血におけるIL-2産生(pg/mL)を増加させたことを示す。0.3、1、及び2mg群において、用量に関連した最大IL-2の増加があり、ベースライン値の平均パーセントは、第1日の投与後12時間で、それぞれ315%、973%、及び915%であった。

全血を、リポ多糖(lipopolysachharide)で刺激し、Myriad Rules Based Medicine(Austin, TX)によるLPS TruCultureシステム(パーツ番号782-001087)を用いて、IL-1βについて分析した。図8Bは、化合物1Aが、0.3mg、1mg、及び2mgコホートで用量依存的に、健康な志願者における生体外IL-1β産生を減少させたことを示す。用量レベル0.3、1、及び2mgに関しては、用量に関連した最大IL-1β反応の減少があり、ベースライン値の平均パーセントは、投与後12時間で、それぞれ42.2%、21.8%、及び16.3%であった。

Claims

全身性エリテマトーデス(SLE)を治療、予防、又は管理する方法であって、それを必要としている患者に、有効量の式Iの化合物

、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物を投与することを含む、前記方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン又はその医薬として許容し得る塩、固体形態、溶媒和物、水和物、互変異性体、立体異性体、もしくはラセミ体である、請求項1記載の方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオンである、請求項1記載の方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である、請求項1記載の方法。
前記SLEが、皮膚が主体のSLEである、請求項1〜4のいずれか1項記載の方法。
全身性エリテマトーデス(SLE)の症状を低減、阻害、又は予防するための方法であって、有効量の化合物を、全身性エリテマトーデスの該症状を有する患者に投与することを含み、該症状が、関節痛、関節腫脹、関節炎、深呼吸時胸痛、疲労、他の原因が無い発熱、全身違和感、不安、脱毛、口腔痛、リンパ節腫脹、太陽光過敏、皮疹、頭痛、しびれ、刺痛、発作、視力障害、人格変化、腹痛、嘔気、嘔吐、心拍リズムの異常、喀血及び呼吸困難、斑状の皮膚色、並びにレイノー現象からなる群から選択され、かつ、該化合物が、式I

、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物に相当する、前記方法。
前記化合物が、1日あたり約0.15mg〜約0.6の量で投与される、請求項1〜6のいずれか1項記載の方法。
前記化合物が、約0.3mgの量で1日おきに(QOD)投与される請求項7記載の方法。
前記化合物が、約0.3mgの量で毎日(QD)投与される、請求項7記載の方法。
前記化合物が、約0.6mg及び約0.3mgの量で1日ごとに交互に投与される、請求項7記載の方法。
前記化合物が、約0.6mgの量で毎日(QD)投与される、請求項7記載の方法。
前記化合物の投与を、約2週間〜約16週間続ける、請求項1〜11のいずれか1項記載の方法。
前記化合物の投与を、約28日間続ける、請求項12記載の方法。
前記化合物の投与を、約56日間続ける、請求項12記載の方法。
前記化合物の投与を、約84日間続ける、請求項12記載の方法。
前記化合物が、経口投与される、請求項1〜15のいずれか1項記載の方法。
前記化合物が、カプセル剤で投与される、請求項16記載の方法。
前記カプセル剤が、約0.3mgの量である、請求項17記載の方法。
前記化合物が、錠剤で投与される、請求項16記載の方法。
式Iの化合物

、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物による治療が奏功することが見込める全身性エリテマトーデス(SLE)に罹患している対象を識別するための方法であって、
(a)該対象からの第1のサンプル中の、CRBN、IKZF1(Ikaros)、及びIKZF3(Aiolos)からなる群から選択されるバイオマーカーのレベルを決定すること;及び
(b)該第1のサンプル中の該バイオマーカーの該レベルを、該バイオマーカーのリファレンスレベルと比較すること;を含み、該第1のサンプル中の該バイオマーカーの該レベルが、該バイオマーカーの該リファレンスレベルよりも高い場合に、該対象が、該治療が奏功することが見込めるものである、前記方法。
前記対象に、有効量の前記化合物を投与することを更に含む、請求項20記載の方法。
前記リファレンスが、SLEに罹患していない健康な対象から得た第2のサンプルを用いて調製され;かつ、該第2のサンプルが、前記第1のサンプルと出所が同一のものである、請求項20又は21記載の方法。
前記バイオマーカーが、CRBNである、請求項20〜22のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、IKZF1である、請求項20〜22のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、IKZF3である、請求項20〜22のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種のみのレベルを測定する、請求項20〜25のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの2種以上のレベルを、同時にモニターする、請求項20〜25のいずれか1項記載の方法。
前記第1のサンプルが、末梢血単核球(PBMC)である、請求項20〜27のいずれか1項記載の方法。
前記第1のサンプルが、全血白血球である、請求項20〜27のいずれか1項記載の方法。
前記全血白血球が、CD19+ B細胞、CD3+ T細胞、CD14+単球、又は顆粒球である、請求項29記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのmRNAレベルを決定することにより測定する、請求項20〜30のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのcDNAレベルを決定することにより測定する、請求項20〜30のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのタンパク質レベルを決定することにより測定する、請求項20〜30のいずれか1項記載の方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオンである、請求項20〜33のいずれか1項記載の方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である、請求項20〜33のいずれか1項記載の方法。
全身性エリテマトーデス(SLE)の治療、予防、又は管理における式Iの化合物

、又はその医薬として許容し得る塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、互変異性体、もしくはラセミ混合物の有効性を評価する方法であって、
(a)SLEに罹患している対象に、該化合物を投与すること;
(b)該対象から第1のサンプルを得ること;
(c)該第1のサンプル中のバイオマーカーのレベルを決定すること;及び
(d)工程(c)の該バイオマーカーの該レベルを、該バイオマーカーのリファレンスレベルと比較することを含み、該リファレンスと比較した該レベルの変化が、SLEの治療における該化合物の該有効性を示すものである、前記方法。
前記対象に投与される前記化合物の量を調整することをさらに含む、請求項36記載の方法。
前記リファレンスが、SLEに罹患していない健康な対象から得た第2のサンプルを用いて調製され;かつ、該第2のサンプルが、前記第1のサンプルと出所が同一のものである、請求項36又は37記載の方法。
前記リファレンスが、前記化合物の投与前に前記対象から得た第2のサンプルを用いて調製され;かつ、該第2のサンプルが、前記第1のサンプルと出所が同一のものである、請求項36又は37記載の方法。
前記バイオマーカーが、CRBNである、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、IKZF1である、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、IKZF3である、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、SLE自己抗体である、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記SLE自己抗体が、抗dsDNA自己抗体である、請求項43記載の方法。
前記SLE自己抗体が、抗リン脂質自己抗体である、請求項43記載の方法。
前記バイオマーカーが、末梢血B細胞数である、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、末梢血T細胞数である、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、IL-1βである、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記リファレンスと比較した前記第1のサンプル中の前記バイオマーカーの前記レベルの低下が、SLEの治療における前記化合物の有効性を示すものである、請求項40〜48のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーが、IL-2である、請求項36〜39のいずれか1項記載の方法。
前記リファレンスと比較した前記第1のサンプル中の前記バイオマーカーの前記レベルの増加が、SLEの治療における前記化合物の有効性を示すものである、請求項50記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種のみのレベルを測定する、請求項36〜51のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの2種以上のレベルを、同時にモニターする、請求項36〜51のいずれか1項記載の方法。
前記第1のサンプルが、末梢血単核球(PBMC)である、請求項36〜53のいずれか1項記載の方法。
前記第1のサンプルが、全血白血球である、請求項36〜53のいずれか1項記載の方法。
前記全血白血球が、CD19+ B細胞、CD3+ T細胞、CD14+単球、又は顆粒球である、請求項55記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのmRNAレベルを決定することにより測定する、請求項36〜56のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのcDNAレベルを決定することにより測定する、請求項36〜56のいずれか1項記載の方法。
前記バイオマーカーのうちの1種以上のレベルを、該バイオマーカーのタンパク質レベルを決定することにより測定する、請求項36〜56のいずれか1項記載の方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオンである、請求項36〜59のいずれか1項記載の方法。
前記化合物が、(S)-3-[4-(4-モルフリン-4-イルメチルベンジルオキシ)-1-オキソ-1,3-ジヒドロ-イソインド-2-イル]ピペリジン-2,6-ジオン塩酸塩である、請求項36〜59のいずれか1項記載の方法。