JP2017503173A - 基質タンパク質のタンパク質分解を検出及びモニターするためのシステム及び方法 - Google Patents
基質タンパク質のタンパク質分解を検出及びモニターするためのシステム及び方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017503173A JP2017503173A JP2016544060A JP2016544060A JP2017503173A JP 2017503173 A JP2017503173 A JP 2017503173A JP 2016544060 A JP2016544060 A JP 2016544060A JP 2016544060 A JP2016544060 A JP 2016544060A JP 2017503173 A JP2017503173 A JP 2017503173A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electroactive species
- current
- sample
- electrode
- diffusion
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/27—Association of two or more measuring systems or cells, each measuring a different parameter, where the measurement results may be either used independently, the systems or cells being physically associated, or combined to produce a value for a further parameter
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6887—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from muscle, cartilage or connective tissue
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Description
本明細書においては、別に定義されない限り、本開示において参照された種々の用語は、当業者によって理解される、その確立された意味をもつものとする。明確にするため、以下の用語は、本開示の目的のため以下の通り定義される。
1.タンパク質性基質
本発明のタンパク質性基質は、当該技術分野において既知の任意の基質タンパク質であり得る。用語「タンパク質性基質」及び「基質タンパク質」は、本明細書で用いる場合、互換性がある。様々な実施形態によれば、基質タンパク質は、細胞外マトリックスのように天然に存在し得、或いは、例えば血液の凝固又はフィブリノーゲンに対するトロンビンの作用により、天然に形成され得る。いくつかの実施形態では、合成タンパク質性基質は、インビトロで形成される。いくつかの実施形態では、タンパク質性基質は、自発的にマトリックスを形成する1つ以上のタンパク質から形成される。いくつかの実施形態では、タンパク質性基質は、タンパク質と、1つ以上のポリアニオン及び/又は架橋剤との反応により形成される。いくつかの実施形態では、タンパク質性基質はフィブリノーゲンをトロンビンと接触させることにより形成される。他の実施形態では、タンパク質性基質はコラーゲンマトリックス(例えば、I型コラーゲン分子の、天然の又は再構築された凝集)である。
種々の実施形態において、タンパク質性基質用の及びそれに関連した支持体もまた提供される。支持体は、多孔質支持体であり得る。支持体の孔が実質的に相互連結し、及び/又は支持体の体積中に延在し得ることが理解されよう。別の実施形態では、孔は実質的に非連結であり、かつ支持体の体積中に延在し得る。好ましくは、タンパク質性基質の少なくとも一部は、孔中に含有される。多孔質支持体の例示的な例は、吸着剤、フィルタ紙、フィルタ膜、焼結ガラス、ポリ(フッ化ビニリデン)膜、及びゲルを包含する。本発明のタンパク質性基質含有固体支持体は、それらが、固体支持体及びタンパク質性基質の、一方及び好ましくは双方の孔径及び孔容積に、より強い一貫性をもって大量に製造され得、そのことがアッセイ間又はアッセイ内の信頼度及び一貫性を適切に改善することから、特に有利である。
いくつかの実施形態においては、本明細書に開示された方法、システム、及びキットにおいて適用されるタンパク質性基質として、合成フィブリンクロットが提供される。1つの実施形態によれば、フィブリンクロット又は「メッシュ」は:
(a)フィブリノーゲン含有材料を含んでなる、第1の成分を提供すること;
(b)フィブリノーゲンをフィブリンクロットに変換する物質を含んでなる、第2の成分を提供すること;
(c)第1の成分を第2の成分と組合せること及び混合することにより、フィブリンクロット含有材料を形成すること;及び(d)フィブリンクロット含有材料を、電極の少なくとも一部と接触させること、
を含んでなるプロセスにより調製される。
いくつかの実施形態によれば、基質タンパク質のタンパク質分解は、ボルタンメトリを含む電気化学的方法により検出される。ボルタンメトリは、典型的には電気分解のメカニズムを調べるべく使用される技術であるが、本明細書に開示されたように、タンパク質性基質のタンパク質分解の検出又はモニタリングにおいて、とりわけタンパク質分解に対する応答において応用される。この検出においては、様々な形状のボルタンメトリが使用され得る;これらの形態は、方形波ボルタンメトリ、ステアケースボルタンメトリ、アノーディック又はカソーディックストリッピングボルタンメトリ、吸着ストリッピングボルタンメトリ、交流ボルタンメトリ、回転電極ボルタンメトリ、方形波又は微分パルスボルタンメトリ、クロノアンペロメトリ、クロノクーロメトリ、又は電流対時間を包含する。本開示の方法及びシステムの代表的な実施形態では、ポテンシャルステップボルタンメトリ、直線掃引ボルタンメトリ、及びサイクリックボルタンメトリが利用される。ピーク電流、又は定常電流、又は全電荷移動のいずれかが、測定変数として使用され得る。
一般に、基質タンパク質は、単相の粘弾性系として見なされ得る。しかしながら、いくつかの実施形態によるある基質タンパク質は、2相系と考えられ、これは、第1の相としてポリマー骨格を含んでなり、それが第2相としての液体中に含浸されている。第1相のポリマー骨格は、剛性又は弾性であり得、第2相の液体は、水又は他の適当な溶媒であり得る。かかるマトリックスはまた、いくつかの実施形態により、また関連技術分野との整合性から、ヒドロゲルとも称される。
いくつかの実施形態では、クロノアンペロメトリ測定法が、他のボルタンメトリ測定法と同様に、本開示の方法及びシステムにおいて用いられる。当業者に既知のように、クロノアンペロメトリ測定法は、医療診断において、例えば、グルコースレベル測定において使用されてきており、これにおいて、特定の時点における電気化学的電流が測定される。単純化及び低コストのため、これらの測定法はしばしば、参照電極のない2電極セルにおいて実施されてきた。こうしたセットアップでは、電位は2つの電極を横切って印加され、電流は作用電極において測定される。電気的中性を維持するためには、それ故、大きさの等しい電流が他方の(対)電極に供給されることとなる。
1.タンパク質分解を検出及びモニターするための方法
様々な実施形態において、特にタンパク質分解による、タンパク質性基質の分解を検出及び/又はモニターするための方法が提供される。更には、試料のタンパク質分解活性、例えば、試料のfibrinoytic活性、又はコラゲナーゼ活性を検出及び/又はモニターするための方法が提供される。
いくつかの実施形態では、基質タンパク質分解の検出及び/又はモニタリングにおける使用のための装置が提供される。装置は、典型的には少なくとも電極と、タンパク質性基質とを含んでなり、かつそれは、臨床及び医療用デバイス、又はホームユースモニタリングデバイスとして、種々の実施形態において利用され得る。いくつかの実施形態では、装置はポイントオブケアデバイス又は健康モニタリングツールとして提供される。マトリックスは、典型的には、電極の少なくとも一部と接触している。
別の実施形態では、基質タンパク質中のエラクトマーの阻害された拡散が、交流(AC)又は多重DCパルスに基づく他の測定技術の使用を可能にする。これらの実施形態では、エラクトマー反応物は、電圧極性又は振幅が変わるたびに電極表面から前後に拡散し、それにより拡散距離を有効に延長し、かつ初期状態の又はタンパク質分解されたマトリックスにおける拡散係数の差異を誇張し得る。
以下の記載は、特定の実施形態の例として提供されるものであり、本開示の種々の実施形態の範囲を制限するためのものではない。
ヒトフィブリノーゲン及びヒトトロンビンのストック溶液を混合して、10μLの最終溶液(2%フィブリノーゲン+0.1Uのトロンビン最終濃度)を得、これをボルテックス処理して直ちに5×5mmのフィルタ紙ストリップ(Whatman No.4、大孔径、粒子保持能:30〜40μm)に適用した。紙ストリップの孔内にフィブリンクロットが形成され、紙ストリップを室温で2時間乾燥させた。フィブリノーゲン濃度に起因して、クロットの孔径は、フィルタ紙の孔よりも小さい。
クロノアンペロメトリ測定に用いたWES及びCESの前述の混合組成物を参照のこと。一例として、上記で議論されたFc−PEGエラクトマーにおいては、電気活性Fc成分は、+0.641Vの標準的な電極電位E0を有し、エラクトマー自体は、アミド結合のパイ電子のため、さらに高いE0を有する(測定されたE0は+0.7V〜0.75Vの範囲)。WESの還元型がWEにおける測定に使用されれば、酸化に対するこの高い抵抗(他の一般に使用される電気活性種に比較して)が、多数の酸化性CESに対し耐性を提供する。それにもかかわらず、上記に議論されたように、CESの過剰な濃度の故に、弱い酸化剤をCESとして用いて、WESが主にその還元型で存在するようにすることは有利である。
Claims (24)
- 基質タンパク質のタンパク質分解を検出又はモニターするための装置であって、(i)合成基質タンパク質と、(ii)作用電極と、(iii)対電極とを含んでなり、これにおいて、前記合成基質タンパク質は、各々の前記電極の少なくとも一部と接触しており、ここで、第1及び第2の電気活性種が、前記合成基質タンパク質に接触して供給されており、かつこれにおいて、試料への暴露に際し、前記第1の電気活性種により作用電極において拡散限界電気化学的電流が発生され、また前記第2の電気活性種により対電極において対向電流が発生され、前記拡散限界電気化学的電流が測定され、かつ前記測定値が前記合成基質タンパク質のタンパク質分解のレベルの指標である、該装置。
- 前記合成基質タンパク質が、フィブリンクロット、血餅、多血小板血漿クロット、ゼラチン、コラーゲンマトリックスの1つであり、かつこれにおいて前記基質が支持体の上か、中か、又は周囲に形成される、請求項1に記載の装置。
- 前記作用電極が前記対電極よりも大きい、請求項1に記載の装置。
- 前記第1及び第2の電気活性種が、反対の酸化状態にある同じ分子である、請求項1に記載の装置。
- 前記第1の電気活性種がエラクトマーである、請求項1に記載の装置。
- 前記エラクトマーが、ポリエチレングリコール類(PEGs)、ポリビニルアルコール(PVA)、及びそれらの誘導体の1つである、請求項5に記載の装置。
- 前記第2の電気活性種が、低分子電気活性種であり、かつここで、前記第2の電気活性種の拡散係数が、前記エラクトマーのものと異なる、請求項6に記載の装置。
- 前記第1及び第2の電気活性種の相対濃度が、基本的に、作用電極における全電流が第1の電気活性種によって発生され、かつ第2の電気活性種にはよらずに発生されるよう決定される、請求項7に記載の装置。
- 前記第1の電気活性種がPEG−Fc(Fc−CO−NH−(CH2CH2O)n−NH−CO−Fc)であり、かつ前記第2の電気活性種がルテニウム(III)ヘキサミン(Ru(NH3)6 3+)である、請求項1に記載の装置。
- 前記試料が血液、血漿、間質液、他の体液の1つ、及び既知のタンパク質分解活性をもつ対照試料である、請求項1に記載の装置。
- 予め決められた式又は方法論を用いて拡散限界電流の前記測定値を分析するべく適合された、データプロセシングユニットをさらに含んでなり、これにより前記基質タンパク質のタンパク質分解の指標となる結果を生じる、請求項1に記載の装置。
- 拡散限界電流の前記測定値及びタンパク質分解の指標である前記結果を出力するべく適合された出力ユニットをさらに含んでなる、請求項11に記載の装置。
- 前記データプロセシング及び出力ユニットの1つが、モバイルデバイス又はモバイルアプリの1つである、請求項11に記載の装置。
- 前記対電極がさらに、参照電極及び補助電極を含んでなる、請求項1に記載の装置。
- 試料のタンパク質分解活性を検出又はモニターするための方法であって、(i)前記タンパク質分解活性に供される合成基質タンパク質基材を提供することであって、前記合成基質タンパク質は作用電極及び対電極と接触していること、(ii)第1及び第2の電気活性種を、前記合成基質タンパク質に接触して供給すること、(iii)前記合成基質タンパク質を前記試料に対し暴露し、これによって、前記第1の電気活性種により作用電極において拡散限界電気化学的電流が、また前記第2の電気活性種により対電極において対向電流が発生されること、及び(iv)前記拡散限界電気化学的電流を測定することであり、前記測定値が前記試料中のタンパク質分解活性のレベルの指標であること、を含んでなる該方法。
- 前記測定が、クロノアンペロメトリ、ポテンシャルステップボルタンメトリ、直線掃引ボルタンメトリ、サイクリックボルタンメトリ、方形波ボルタンメトリ、ステアケースボルタンメトリ、アノーディック又はカソーディックストリッピングボルタンメトリ、吸着ストリッピングボルタンメトリ、交流ボルタンメトリ、回転電極ボルタンメトリ、方形波又は微分パルスボルタンメトリ、及びクロノクーロメトリの1つに基づく、請求項15に記載の方法。
- 前記測定が、交流及び多重直流パルスの1つに基づき実施される、請求項16に記載の方法。
- 前記測定が、電気化学インピーダンス分光法に基づいており、これにおいて、周波数領域における変化が前記試料中の前記タンパク質分解活性のレベルの指標である、請求項17に記載の方法。
- 前記試料が、血液、血漿、間質液、他の体液の1つ、及び既知のタンパク質分解活性をもつ対照試料である、請求項15に記載の方法。
- 前記第1の電気活性種がエラクトマーであり、かつ、前記第2の電気活性種が低分子電気活性種である、請求項15に記載の方法。
- 前記第1の電気活性種がPEG−Fc(Fc−CO−NH −(CH2CH2O)n−NH−CO−Fc)であり、かつ前記第2の電気活性種がルテニウム(III)ヘキサミン(Ru(NH3)6 3+)である、請求項15に記載の方法。
- 前記測定が、ベースラインの指標であり、前記方法がさらに、第2の前記合成基質タンパク質を第2の試料に対し暴露すること、及び第2の前記拡散限界電気化学的電流を測定することを含んでなり、前記第2の測定値と前記ベースラインとの間の差異が、タンパク質分解活性における変化の指標である、請求項15に記載の方法。
- 試料の線維素溶解活性を検出又はモニターするための方法であって、(i)合成フィブリンストリップを提供することであり、前記ストリップはその上に印刷された作用電極と対電極とを有していること;(ii)エラクトマー及び低分子電気活性種を、前記フィブリンストリップと接触させて供給すること、(iii)前記フィブリンストリップを前記試料に対し暴露し、これによって、前記エラクトマーにより作用電極において拡散限界電気化学的電流が、また前記低分子電気活性種により対電極において対向電流が発生されること、及び(iv)前記拡散限界電気化学的電流を測定することであり、前記測定値が前記試料中の繊維素溶解活性のレベルの指標であること、を含んでなる該方法。
- 試料のコラゲナーゼ活性を検出又はモニターするための方法であって、(i)ゼラチンストリップを提供することであり、前記ストリップはその上に印刷された作用電極と対電極とを有すること、(ii)エラクトマー及び低分子電気活性種を供給すること、(iii)前記ゼラチンストリップを前記試料に対し暴露し、これによって、前記エラクトマーにより作用電極において前記拡散限界電気化学的電流が、一方前記低分子電気活性種により対電極において対向電流が発生されること、及び(iv)前記拡散限界電気化学的電流を測定することであり、前記測定値が前記試料中のコラゲナーゼ活性のレベルの指標であること、を含んでなる該方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US14/145,986 US9453833B2 (en) | 2011-01-07 | 2014-01-01 | System and method for detecting and monitoring proteolysis of protein matrices |
US14/145,986 | 2014-01-01 | ||
CN201410028684.6A CN104792850B (zh) | 2014-01-21 | 2014-01-21 | 用于检测和监测蛋白质基质的蛋白水解的系统和方法 |
CN201410028684.6 | 2014-01-21 | ||
PCT/US2014/073030 WO2015103410A1 (en) | 2014-01-01 | 2014-12-31 | System and method for detecting and monitoring proteolysis of protein matrices |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017503173A true JP2017503173A (ja) | 2017-01-26 |
Family
ID=53494022
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016544060A Pending JP2017503173A (ja) | 2014-01-01 | 2014-12-31 | 基質タンパク質のタンパク質分解を検出及びモニターするためのシステム及び方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP3090255A4 (ja) |
JP (1) | JP2017503173A (ja) |
KR (1) | KR20160130989A (ja) |
AU (1) | AU2014373646B2 (ja) |
CA (1) | CA2935400A1 (ja) |
WO (1) | WO2015103410A1 (ja) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000006761A1 (en) * | 1998-07-29 | 2000-02-10 | Hemosense, Inc. | Method and device for measuring blood coagulation or lysis by viscosity changes |
JP2009139114A (ja) * | 2007-12-04 | 2009-06-25 | Toyobo Co Ltd | 免疫測定用電気化学センサー |
JP2011501181A (ja) * | 2007-10-26 | 2011-01-06 | ユニバーサル バイオセンサーズ ピーティーワイ リミテッド | 電気化学検出のための装置および方法 |
WO2012092646A1 (en) * | 2011-01-07 | 2012-07-12 | The University Of Queensland | Proteolysis detection |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0600607A3 (en) * | 1992-10-28 | 1996-07-03 | Nakano Vinegar Co Ltd | Coulometric analysis method and a device therefor. |
AU2001265403A1 (en) * | 2000-05-26 | 2001-12-11 | Minerva Biotechnologies Corporation | Metallocenes as signal-transducer for detection of chemical or biological events |
KR100945571B1 (ko) * | 2009-07-02 | 2010-03-08 | 주식회사 아이센스 | 단백질 측정용 바이오센서 |
US8969069B2 (en) * | 2011-09-15 | 2015-03-03 | Ndd, Inc. | Glycated protein measurement sensor and portable glycated protein measurement apparatus including same |
-
2014
- 2014-12-31 KR KR1020167021023A patent/KR20160130989A/ko unknown
- 2014-12-31 EP EP14877454.0A patent/EP3090255A4/en not_active Withdrawn
- 2014-12-31 AU AU2014373646A patent/AU2014373646B2/en not_active Ceased
- 2014-12-31 WO PCT/US2014/073030 patent/WO2015103410A1/en active Application Filing
- 2014-12-31 CA CA2935400A patent/CA2935400A1/en not_active Abandoned
- 2014-12-31 JP JP2016544060A patent/JP2017503173A/ja active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000006761A1 (en) * | 1998-07-29 | 2000-02-10 | Hemosense, Inc. | Method and device for measuring blood coagulation or lysis by viscosity changes |
JP2011501181A (ja) * | 2007-10-26 | 2011-01-06 | ユニバーサル バイオセンサーズ ピーティーワイ リミテッド | 電気化学検出のための装置および方法 |
JP2009139114A (ja) * | 2007-12-04 | 2009-06-25 | Toyobo Co Ltd | 免疫測定用電気化学センサー |
WO2012092646A1 (en) * | 2011-01-07 | 2012-07-12 | The University Of Queensland | Proteolysis detection |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
DENIZ B. ET AL.: "Rapid Method for Quantitative Determination of Proteolytic Activity with Cyclic Voltammetry", ELECTROANALYSIS, vol. 22, no. 3, JPN6015033785, 2010, pages 265 - 267, XP055110568, ISSN: 0003923425, DOI: 10.1002/elan.200900344 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2015103410A1 (en) | 2015-07-09 |
CA2935400A1 (en) | 2015-07-09 |
KR20160130989A (ko) | 2016-11-15 |
AU2014373646B2 (en) | 2019-07-04 |
EP3090255A1 (en) | 2016-11-09 |
AU2014373646A1 (en) | 2016-07-14 |
EP3090255A4 (en) | 2017-06-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6131192B2 (ja) | タンパク質分解の検出 | |
US9453833B2 (en) | System and method for detecting and monitoring proteolysis of protein matrices | |
KR101854883B1 (ko) | 전기화학적 검출용의 장치 및 방법 | |
US6066504A (en) | Coagulation or lysis assays using an electroactive species | |
DE69828319T2 (de) | Verfahren und gerät zur messung der blut-koagulation oder lyse mit hilfe von viskositätsveränderungen | |
CN108007992A (zh) | 检测血红蛋白的聚离子液体@3d纳米金簇修饰电极的制备方法 | |
CN102608177B (zh) | 基于离子通道和适配体制备生物传感器检测凝血酶的方法 | |
AU2014373646B2 (en) | System and method for detecting and monitoring proteolysis of protein matrices | |
ES2309442T3 (es) | Procedimiento y dispositivo para medir la coagulacion o la lisis de la sangre mediante los cambios de viscosidad. | |
CN104792850B (zh) | 用于检测和监测蛋白质基质的蛋白水解的系统和方法 | |
JP2004251900A5 (ja) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20171212 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20181108 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20181120 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190205 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20190730 |