JP2017015607A - 飲酒に伴う高血圧発症の予測用ペプチドおよびそれを用いた飲酒に伴う高血圧発症の予測方法 - Google Patents
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Abstract
Description
しかし、これらのタンパク質フラグメントと飲酒による高血圧のリスクとの関連は何ら報告されていない。
本発明者は、上記の結果に基づいて、これらのペプチドを用いて飲酒に伴う高血圧発症の予測方法を確立し、本発明を完成するに至った。
[1]飲酒していない状態の被験者より採取した生体試料中の、C4Aの分解産物およびフィブリノーゲンα鎖の分解産物からなる群より選ばれる1以上のペプチドの量を測定することを含む、該被験者の飲酒に伴う高血圧発症の予測のための検査方法:
[2]C4Aの分解産物が、配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチドであり、フィブリノーゲンα鎖の分解産物が、配列番号2および3に示される各アミノ酸配列からなるペプチド群である、[1]に記載の方法:
[3]飲酒していない状態の被験者より採取した生体試料中の、以下の(1)および(2)のペプチドの量を測定することを含む、該被験者の飲酒に伴う高血圧発症の予測方法;
(1)配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、
(2)配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチドおよび/または配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチド:
[4]生体試料が体液である、[1]〜[3]のいずれか1つに記載の方法:
[5]体液が血液、血漿、血清、唾液、尿、髄液、骨髄液、胸水、腹水、関節液、涙液、眼房水、硝子体液およびリンパ液からなる群より選択される、[4]に記載の方法:
[6]生体試料を質量分析にかけることによって上記ペプチドの量が測定されることを特徴とする、[1]〜[5]のいずれか1つに記載の方法:
[7]測定するペプチドを特異的に認識する抗体を用いることによって上記ペプチドの量が測定されることを特徴とする、[1]〜[5]のいずれか1つに記載の方法:
[8]配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体、配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体、配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体からなる群から選択される少なくとも1つの抗体を含む、飲酒に伴う高血圧発症の予測用キット:
[9]配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチドから選択される、飲酒に伴う高血圧発症の予測用ペプチド:
などを提供する。
(1)配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、
(2)配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチドおよび/または配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチド。
血清や血漿を用いる場合、常法に従って被験者から採血し、液性成分を分離することにより調製することができる。測定対象である本発明の高血圧予測用ペプチドが比較的低分子量であるため、必要に応じ、スピンカラムなどを用いて濃縮し、予め高分子量のタンパク質画分などを分離除去しておくこともできる。
飛行時間型質量分析計に適合可能なプレートは、検出対象である本発明の高血圧予測用ペプチドを効率よく吸着し得る表面構造を有している限り、いかなるものであってもよい。そのような表面構造としては、例えば、官能基付加ガラス、Si、Ge、GaAs、GaP、SiO2、SiN4、改質シリコン、広範囲のゲル又はポリマー(例えば、(ポリ)テトラフルオロエチレン、(ポリ)ビニリデンジフロリド、ポリスチレン、ポリカーボネート、又はこれらの組合せなど)によるコーティングが挙げられる。複数のモノマー又はポリマー配列を有する表面構造としては、例えば、核酸の直鎖状及び環状ポリマー、ポリサッカライド、脂質、α-、β-又はω-アミノ酸を有するペプチド、クロマトグラフィーで使用されるゲル表面の担体(陰イオン性/陽イオン性化合物、炭素鎖1〜18からなる疎水性化合物、親水性化合物(例えば、シリカ、ニトロセルロース、セルロースアセテート、アガロース等)と架橋した担体など)、人工ホモポリマー(例えば、ポリウレタン、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリウレア、ポリアミド、ポリエチレンイミン、ポリアリーレンスルフィド、ポリシロキサン、ポリイミド、ポリアセテート等)、上記化合物のいずれかに既知の薬物又は天然化合物が結合(共有及び非共有結合)したヘテロポリマー等によるコーティングが挙げられる。
薄層の厚さは、本発明の高血圧予測用ペプチドの転写効率および質量分析の測定感度等に好ましくない影響を与えない範囲で適宜選択することができるが、例えば、約0.001〜約100 μm、好ましくは約0.01〜約30 μmである。
「塗布」する場合、コーティング分子を、適当な溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド(dimethyl formamide;DMF)などの有機溶媒に適当な濃度(例えば、約1〜約100 mg/mL程度)で溶解したもの(コーティング分子含有溶液)を、刷毛などの適当な道具を用いて基材に塗布することができる。
「噴霧」する場合、上記と同様にして調製したコーティング分子含有溶液を噴霧器に入れ、基材上に均一にPVDFが堆積されるように噴霧すればよい。
「蒸着」する場合、通常の有機薄膜作製用真空蒸着装置を用い、基材を入れた真空槽中でコーティング分子(固体でも溶液でもよい)を加熱・気化させることにより、基材表面上に該分子の薄層を形成させることができる。
「浸漬」させる場合、上記と同様にして調製したコーティング分子含有溶液中に基材を浸漬させればよい。
「印刷(プリント)」する場合は、基材の材質に応じて通常使用され得る各種印刷技術を適宜選択して利用することができ、例えば、スクリーン印刷などが好ましく用いられる。
「スパッタリング」する場合は、例えば、真空中に不活性ガス(例、Arガス等)を導入しながら基材とコーティング分子間に直流高電圧を印加し、イオン化したガスを該分子に衝突させて、はじき飛ばされたコーティング分子を基材上に堆積させて薄層を形成させることができる。
コーティングは基材全面に施してもよいし、質量分析に供される面(画分)のみに施してもよい。
質量分析装置は、ガス状の試料をイオン化した後、その分子や分子断片を電磁場に投入し、その移動状況から質量数/電荷数によって分離、物質のスペクトルを求めることにより、物質の分子量を測定・検出する装置である。試料とレーザー光を吸収するマトリックスを混合、乾燥させて結晶化し、マトリックスからのエネルギー移動によるイオン化とレーザー照射による瞬間加熱により、イオン化した分析対象物を真空中に導くマトリックス支援レーザー脱イオン化(MALDI)と、初期加速による試料分子イオンの飛行時間差で質量数を分析する飛行時間型質量分析(TOFMS)とをあわせて用いるMALDI-TOFMS法、1分析対象物を1液滴にのせて液体から直接電気的にイオン化する方法、試料溶液を電気的に大気中にスプレーして、個々の分析対象物多価イオンをunfoldの状態で気相に導くナノエレクトロスプレー質量分析(nano-ESMS)法等の原理に基づく質量分析装置を使用することができる。
質量分析用プレート上の分子を質量分析する方法自体は公知である。例えば、WO 2004/031759に記載の方法を、必要に応じて適宜改変して使用することができる。
競合法では、被験試料中の抗原と標識抗原とを抗体に対して競合的に反応させた後、未反応の標識抗原(F)と、抗体と結合した標識抗原(B)とを分離し(B/F分離)、B,Fいずれかの標識量を測定し、被験試料中の抗原量を定量する。本反応法には、抗体として可溶性抗体を用い、B/F分離にポリエチレングリコール、前記抗体に対する第2抗体などを用いる液相法、および、第1抗体として固相化抗体を用いるか、あるいは、第1抗体は可溶性のものを用い第2抗体として固相化抗体を用いる固相化法とが用いられる。
イムノメトリック法では、被験試料の抗原と固相化抗原とを一定量の標識化抗体に対して競合反応させた後固相と液相を分離するか、あるいは、被験試料中の抗原と過剰量の標識化抗体とを反応させ、次に固相化抗原を加え未反応の標識化抗体を固相に結合させた後、固相と液相を分離する。次に、いずれかの相の標識量を測定し被験試料中の抗原量を定量する。
また、ネフロメトリーでは、ゲル内あるいは溶液中で抗原抗体反応の結果生じた不溶性の沈降物の量を測定する。被験試料中の抗原量が僅かであり、少量の沈降物しか得られない場合にもレーザーの散乱を利用するレーザーネフロメトリーなどが好適に用いられる。
例えば、入江 寛編「ラジオイムノアッセイ」(講談社、昭和49年発行)、入江 寛編「続ラジオイムノアッセイ」(講談社、昭和54年発行)、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」(医学書院、昭和53年発行)、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」(第2版)(医学書院、昭和57年発行)、石川栄治ら編「酵素免疫測定法」(第3版)(医学書院、昭和62年発行)、「Methods in ENZYMOLOGY」 Vol. 70 (Immunochemical Techniques (Part A))、同書 Vol. 73 (Immunochemical Techniques (Part B))、同書 Vol. 74 (Immunochemical Techniques (Part C))、同書 Vol. 84 (Immunochemical Techniques (Part D: Selected Immunoassays))、同書 Vol. 92 (Immunochemical Techniques (Part E: Monoclonal Antibodies and General Immunoassay Methods))、同書 Vol. 121 (Immunochemical Techniques(Part I: Hybridoma Technology and Monoclonal Antibodies)) (以上、アカデミックプレス社発行)などを参照することができる。
27歳〜46歳の健常男性10名を被験者として選抜した。被験者のプロフィールを表1に示す。各被験者のALSTは飲酒時の3つの症状(動悸、顔面紅潮、顔面以外の皮膚の発赤)から判定した。ALSTが3.1を超える場合にはアルコール感受性が高い(即ち、アルコールに弱い)と判定される。被験者10名の中で、4名はアルコール感受性が高く、6名は感受性が低かった。被験者の飲酒習慣については、8名がほぼ毎日飲酒しており、2名は機会飲酒者であった。前記被験者に白ワイン(体重kgあたり3ml)を10分以内に経口投与し、その45分後と2〜3時間後に血圧を測定し、アルコール負荷前を含めた3つの時点で静脈採血を行い、血清を分離して、-80℃で保存した。図1にアルコール負荷前後の被験者の血圧の変化を示す。アルコール負荷前に比べて、アルコール負荷後45分および2〜3時間には収縮期血圧と拡張期血圧は有意に低下したが、アルコール負荷後45分後および2〜3時間後の収縮期血圧と拡張期血圧は有意差がなかった。前記の各被験者の3つの時点(アルコール負荷前、アルコール負荷後45分、アルコール負荷後2〜3時間)で採取した各血清1.5μLを電気泳動用サンプル処理液(NuPAGE(登録商標)LDS Sample Buffer 4x ; Life Technologies)4.5μLと混合し、70℃で10分間、加熱処理した後、4-12%グラジェントポリアクリルアミドゲル(Life Technologies)にアプライし電気泳動を行った。
電気泳動終了後、ゲルを切り出しBLOTCHIP(登録商標)(Protosera, Inc.)に積層し、電気転写用バッファー(BLOTBufferTM;Protosera, Inc.)中で90mA、120分間転写した。転写終了後、チップの表面を超純水でリンスし、チップ全体にマトリックス(α-Cyano-4-hydroxy cinnamic acid)を塗布後、matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometer (Bruker Daltnics社製UltraFlexII)で質量分析を行った。測定パラメータは、Detector voltage 1685V, Suppression1000, Laser Intensity は28〜35のFuzzyモードで、1チップあたり415点、1点あたり500回のレーザー照射で、総計207,500回レーザー照射を行った。得られたスペクトル中の各ピーク強度をm/z毎に積算し、1個の積算スペクトルに変換した。図2に、アルコール負荷前、アルコール負荷後45分およびアルコール負荷後2〜3時間の3時点で採取された血清検体を電気転写したBLOTCHIP(登録商標)上での質量分析の典型的な各スペクトルを重ねて示す。積算スペクトルに対してClinProTools (Bruker Daltonik GmbH) を用いて、ディファレンシャルプロファイリング解析を行った。解析は解析ソフトClinPro Tools 2.2(Bruker Daltonik GmbH)を使用し、3群(アルコール負荷前群、アルコール負荷後45分群、アルコール負荷後2〜3時間群)のうちの2群間で比較を行い、有意差のあったピークを抽出した。解析については複数の条件で実施し、ClinPro Tools 2.2の平均積算スペクトルは、群内の積算スペクトルをノーマライゼーション(標準化)した。
ディファレンシャルプロファイリング解析の結果、有意差を有したピークをピックアップし、バイオマーカー候補(ターゲットペプチド)群とした。結果を表2に示す。また、図3にアルコール負荷前、アルコール負荷後45分およびアルコール負荷後2〜3時間の3時点で生じうるペプチドレベル変動のパターンを示す。A2型の変化を示したペプチドが1種、B2型の変化を示したペプチドが2種、C2型の変化を示したペプチドが6種、D1型の変化を示したペプチドが3種、D2型の変化を示したペプチドが1種検出された。13個のターゲットペプチドのうち、7個のペプチド(表2中の○または△印)が精密質量測定が可能であった。この中から、ペプチドレベルの変動パターンがD1型とD2型を示した3つのペプチド(表2中のm/z 1467, m/z 2380, m/z 2662)の同定を試みた。
3つのペプチドを比較的高濃度に含む検体血清4_2および7_1各100μLをトリフルオロ酢酸にて酸性化し、Sep-Pak Plus C18 Cartridge固相抽出にて、ペプチド画分を脱脂、脱塩した。これらのサンプルをCosmosil 5C18-AR-II (ナカライテスク)を接続した逆相クロマトグラフィーでグラジエントをかけて20フラクションに分画し、遠心濃縮機で10μL以下になるまで濃縮した。
上記(3)で得た各フラクションをマトリックスと混合してground steelターゲットプレートにスポットし、MALDI-TOF型質量分析計UltraflexIIのLinearモードで測定して、ターゲットペプチドの有無とm/zを確認した。ターゲットペプチドのあったフラクションのスポットに対し、MALDI-TOF型質量分析計UltraflexIIのReflectorモードでモノアイソトピック質量[M+H]+を測定した。得られたモノアイソトピック質量[M+H]+をParent Massに指定して、Liftモード(PSD)でMS/MS測定を行った(図4)。測定結果をMASCOT Serverで検索し、ペプチドを同定した。結果を表3に示す。
精製・同定した3つのペプチド(m/z 1467、m/z 2380およびm/z 2662)のアルコール負荷前後における血中レベルの変化を確認した(図5)。m/z 1467のペプチドはアルコール負荷前に比べ、アルコール負荷後45分には有意な変化を示さなかったが、アルコール負荷後2〜3時間には有意に増加した。m/z 2380およびm/z2662のペプチドは、いずれもアルコール負荷前に比べ、アルコール負荷後45分には有意な変化を示さなかったが、アルコール負荷後2〜3時間には有意に減少した。
アルコール負荷前後における血圧の変化率とアルコール負荷前の精製・同定した3つのペプチド(m/z 1467、m/z 2380およびm/z 2662)の血中レベルの相関関係を検討した。相関関係は相関係数rを算出し、表4に記載の基準に従って評価した。結果を表5および図6に示す。m/z 2380ペプチドの血中レベルは収縮期および拡張期血圧の変化率と負の相関を示した。また、m/z 1467ペプチドの血中レベルは収縮期血圧の変化と負の相関を示し、拡張期血圧とも負の相関傾向(p = 0.074)を示した。さらに、m/z 2662ペプチドの血中レベルは収縮期血圧および拡張期血圧と負の相関傾向を示した。従って、アルコール負荷前の被験者のm/z 1467、m/z 2380およびm/z 2662ペプチドレベルが高いほど、アルコール負荷後の血圧低下率が大きくなることが分かった。
アルコール負荷前の補体タンパク質C4の血中レベルとアルコール負荷前のm/z 2380ペプチドの血中レベルの相関関係を検討した。アルコール負荷前の補体タンパク質C4の部分ペプチドであるm/z 2380の血中レベルと血中補体タンパク質C4濃度との相関関係を図7に示す。その結果、両者間には負の相関が認められた。
アルコール負荷前後における血圧の変化率とアルコール負荷前の補体タンパク質C4の血中レベルの相関関係を検討した。アルコール負荷前の血中補体タンパク質C4濃度とアルコール負荷前後の収縮期および拡張期血圧の変化率との相関関係を図8に示す。その結果、両者間には相関が認められなかった。
アルコール負荷前後における血圧の変化率とALSTスコアの相関関係を検討した。ALSTスコアとアルコール負荷前後における収縮期および拡張期血圧の変化率との相関関係を図9に示す。その結果、両者間には相関が認められなかった。
Claims (9)
- 飲酒していない状態の被験者より採取した生体試料中の、C4Aの分解産物およびフィブリノーゲンα鎖の分解産物からなる群より選ばれる1以上のペプチドの量を測定することを含む、該被験者の飲酒に伴う高血圧発症の予測のための検査方法。
- C4Aの分解産物が、配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチドであり、フィブリノーゲンα鎖の分解産物が、配列番号2および3に示される各アミノ酸配列からなるペプチド群である、請求項1に記載の方法。
- 飲酒していない状態の被験者より採取した生体試料中の、以下の(1)および(2)のペプチドの量を測定することを含む、該被験者の飲酒に伴う高血圧発症の予測方法;
(1)配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、
(2)配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチドおよび/または配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチド。 - 生体試料が体液である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 体液が血液、血漿、血清、唾液、尿、髄液、骨髄液、胸水、腹水、関節液、涙液、眼房水、硝子体液およびリンパ液からなる群より選択される、請求項4に記載の方法。
- 生体試料を質量分析にかけることによって上記ペプチドの量が測定されることを特徴とする、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 測定するペプチドを特異的に認識する抗体を用いることによって上記ペプチドの量が測定されることを特徴とする、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
- 配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体、配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体、配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチドを特異的に認識する抗体からなる群から選択される少なくとも1つの抗体を含む、飲酒に伴う高血圧発症の予測用キット。
- 配列番号1に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、配列番号2に示されるアミノ酸配列からなるペプチド、配列番号3に示されるアミノ酸配列からなるペプチドから選択される、飲酒に伴う高血圧発症の予測用ペプチド。
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JP2011080775A (ja) * | 2009-10-02 | 2011-04-21 | Juntendo | 妊娠高血圧症候群マーカーおよびそれを用いた診断 |
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