JP2016527308A - エンテカビル微小球及びこれを含む非経口投与用医薬組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】エンテカビル微小球及びそれを含む注射剤組成物を提供する。【解決手段】本発明は、エンテカビル及び生分解性生体適合性高分子を１種以上の溶媒に溶解させる工程と、前記エンテカビル及び前記生分解性生体適合性高分子の溶液を親水性高分子水溶液に添加し、撹拌して微小球を形成させる工程と、溶媒を除去する工程と、を含む方法により製造されたエンテカビル微小球は、投入されたエンテカビルの約８０％以上が微小球内に十分に封入され、３０日以上溶出が維持され、持続的に効果を発揮することができ、患者の服薬コンプライアンスを改善することができる。【選択図】図４

Description

本発明は、エンテカビル微小球及びこれを含む注射剤組成物に関し、従来経口用のみに使用されてきたエンテカビルを生分解性生体適合性高分子の微小球を製造し、徐放性非経口投与用医薬組成物として提供するためものである。

エンテカビル（Entecavir）は、下記式のグアノシンヌクレオシド類似体であり、慢性Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染治療剤として使われる。

慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染治療剤としてエンテカビルは、生涯毎日服用しなければならなく、経口投与時の生体利用率が１００％に近いが、食事により吸収率が低下されるので、食事２時間前に経口服用しなければならない不都合があった。

現在、市販されているエンテカビル経口製剤の処方パターンを見れば、初期１〜２年間は、約１〜３３カ月単位で処方を出しており、ＨＢＶが安定化された後には、６カ月単位処方が普通となっている。このような方式で治療を進める初回患者の場合、1年投与後、約７０％の患者からＨＢＶ未検出、３年後には９０％の患者からＨＢＶ未検出の水準に治療される。このように、ＨＢＶ感染治療には、エンテカビル製剤の長期間服用が必要とされるが、毎日経口投与をしなければならないことに対する服薬コンプライアンスが劣るという短所があるので、徐放性製剤が求められている。しかし、現在までエンテカビルを徐放性微小球として開発された事例は皆無である。

一方、徐放性注射製剤（以下、デポー（depot）という）とは、皮下注射または筋肉注射をしたとき、体内で薬物が生物学的活性を維持しながら持続、且つ均一に放出され得るように製剤化された注射製剤をいう。このようなデポー製剤は、高分子担体として開発され、使われる脂肪族ポリエステルは、既にその生体適合性が認定され、米国食品医薬局（ＦＤＡ）により承認され、薬物送達用担体または手術用縫合糸などの用途で広く使われている。脂肪族ポリエステルの具体的な例には、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリグリコール酸、ポリ−Ｄ−乳酸−コ−グリコール酸、ポリ−Ｌ−乳酸−コ−グリコール酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸−コ−グリコール酸（以下、‘ＰＬＧＡ’という。）、ポリ−カプロラクトン、ポリ−バレロラクトン、ポリ−ヒドロキシブチレート及びポリ−ヒドロキシバリレートなどが含まれる（非特許文献１）。

このようなデポー製剤の製造方法としては、一般に、相分離法、噴霧乾燥法、溶媒抽出法、溶媒蒸発法などが知られている。

特許文献１では、相分離法を使用して、デポー製剤を製造しており、この場合、塩化メチレン溶媒以外にシリコン油、ヘプテン、エチルアルコールなどを共に使用しなければならず、使用された全ての有機溶媒を全部除去しなければならない等の工程が複雑であるという短所を有している。

特許文献２では、噴霧乾燥法を使用しており、ここでは、６０℃以上の高温で噴霧、乾燥させることによって、使われた活性成分ないしは薬物送達用担体にダメージを与える恐れがあり、低い温度で噴霧されると使われた有機溶媒を除去することができないという短所がある。また、特許文献３では、噴霧乾燥法を使用して活性成分をコレステロールに封入する方法を開示しており、使われたコレステロールの限定された分子量種類及び活性成分との相互作用によって様々な放出時間遅延効果を期待することが難しく、適用が限定的になる恐れがある。

特許文献４では、生分解性高分子内に薬物を組み込んだインプラント形態の徐放性薬物放出製剤を開示しているが、インプラント自体の大きさに応じて注射器の注射針が大きくなり、患者の服薬コンプライアンスが低下するという短所がある。

特許文献５では、溶媒抽出法を使用して活性成分を徐放化する方法を開示しているが、使用する溶媒の沸点が非常に高く、溶媒を抽出、洗浄するのに長時間必要となり、製造コストの増加を引き起こすだけでなく、長時間抽出しても溶媒が完全に除去されなく、残留溶媒による製品の安定性低下を引き起こすという短所がある。

特許文献６でも、溶媒抽出法を使用して微小球を製造する方法を開示しているが、この方法も使用溶媒の沸点が高く、抽出をしても洗浄後の微小球内に溶媒が相当量存在するという短所がある。

特許文献７では、活性成分を含有する３相エマルジョンを形成した後、水中乾燥法で活性成分を高分子内に封入して、微小球を製造しているが、水溶性活性成分の場合、外部水相に露出され、その封入率が減少されるので、高含量の薬剤を有する微小球を得ることが困難であるという問題がある。

特許文献８では、水溶性のペプチド薬物を溶媒揮発法の多重エマルジョン方法で製造する方法が開示されているが、この方法は、水への溶解度が高い活性成分のみに適用が可能で、水への溶解度が低い活性成分には適用することは困難である。

現在まで、徐放性注射剤として開発された薬物は、注射剤として毎日投与する薬物（ＧｎＲＨ類薬物：トリプトレリン、ロイプロリド、ゴセレリン等）と精神神経系薬物（リスペリドン、オランザピン、パリペリドン、ナルトレキソン等）とがある。ＧｎＲＨ類薬物は、患者が毎日注射を打たれなければならない不便を解消するために、そして、精神神経系薬物の場合には、患者が薬物服用自体を敬遠しているという点を考慮し、１回投与で一定期間薬効が維持される剤形が臨床現場で求められており、これにより、徐放性注射剤として開発された。即ち、精神神経系薬物と共に特殊な場合でなければ、経口用製剤を注射用製剤として開発する必要がないが、エンテカビルは、投薬が容易な経口溶剤として開発されたため、注射剤を開発する必要性がなく、さらに微小球を利用して徐放性を開発することは容易に考えられなかったため、現在までエンテカビルは経口用製剤としてのみ投与されている。

また、従来の微小球製造方法は、有機相として塩化メチレン、ベンジルアルコール、酢酸エチルなどを使用して、主成分とポリマーを溶解し、これを水相連続相に添加し、微小球を製造することが通常であるが、エンテカビルの場合、これらの有機溶媒に対する溶解度が高くなく、微小球を製造するのが難しい実状である。

本発明では、このように徐放性注射剤開発の着想自体が容易でなく、微小球製造技術的にも困難のあるエンテカビルを徐放性注射剤として開発して、服薬コンプライアンスを改善しようとしており、そのために、本発明者らは鋭意研究を繰り返し、従来微小球製造に通常的に使用する有機溶媒の代わりに、エンテカビルに対する溶解度が十分に高い溶媒を選択することによって本発明の完成に至った。

米国特許第４，６７３，５９５号明細書 韓国登録特許第０５６６５７３号公報 韓国登録特許第０５３７７１３号公報 米国特許第５，３６６，７３４号明細書 韓国登録特許第０４３２６７７号公報 韓国公開特許第２００２−００１１９７５号公報 米国特許第４，６５２，４４１号明細書 韓国登録特許第０９９４６５８号公報

Peppas, L. B., Int. J. Pharm., 116, 1-9, 1995

前記目的を達成するために、本発明では、エンテカビルまたはその医薬的に許容される塩と生分解性生体適合性高分子とを含むエンテカビル微小球を提供する。

本発明に係るエンテカビル微小球の製造方法は、エンテカビル及び１種以上の生分解性生体適合性高分子を１種以上の溶媒に溶解させる工程と、前記エンテカビル及び生分解性生体適合性高分子の溶液を親水性高分子水溶液に添加し、撹拌して微小球を形成させる工程と、溶媒を除去する工程と、を含む。

本発明において、生分解性生体適合性高分子は、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）グルコース、ポリカプロラクトン、ゼラチン、及びヒアルロネートから選択されていてもよく、ポリグリコリド、ポリラクチド、及びポリ（ラクチド−コ−グリコリド）から選択されることが好ましい。特に、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）の場合、ラクチド対グリコリドのモル比が、５０：５０〜９０：１０が好ましい。

本発明に用いられるこれらの生分解性生体適合性高分子は、０．１〜１．９ｄｌ／ｇの固有粘度を有していてもよく、固有粘度０．３〜１．９ｄｌ／ｇの高分子１種以上を用いることが好ましい。

本発明に係るエンテカビル微小球は、１〜９０重量％のエンテカビルを含有していてもよく、好ましくは、１０〜６０重量％のエンテカビルを含有する。

また、エンテカビル微小球の大きさが、１〜２５０μｍであってもよく、１０〜２００μｍが好ましい。

本発明によって製造されたエンテカビル微小球は徐放性であり、３０日以上放出が持続される。

本発明によって製造されたエンテカビル微小球は、投入されたエンテカビルの平均８０％以上が微小球内に十分に封入され、３０日以上溶出が維持されるので、注射剤等非経口投与用製剤として製造する場合、安全且つ持続的に効果を発揮することができ、患者の服薬コンプライアンスを改善することができる。

実施例と比較例で製造された微小球のＳＥＭ写真であり、図１ａは実施例６の微小球、図１ｂは比較例の微小球である。 実施例４で製造された微小球の粒子径分布を示したものである。 実施例と比較例で製造した微小球のin-vitro長期溶出試験での時間に対する溶出率（％）を示したグラフである。 実施例と比較例で製造した微小球のin-vitro長期溶出試験での時間に対する溶出率（％）を示したグラフである。 エンテカビル及び賦形剤の皮下投与４週経過後のラットの注射部位における顕微鏡写真であり、図５ａはエンテカビル２．３３ｍｇ／ｋｇ／日投与群の写真であり、図５ｂは賦形剤投与群の写真である。

以下、本発明を具体的に説明する。

従来の徐放性微小球製造方法は、薬物及び高分子を塩化メチレンや酢酸エチルのような有機溶媒に溶かした後、これを水性媒体に添加して、微小球を形成したが、エンテカビルの場合は、塩化メチレンに溶けないので、このような方法を使用することができない。本発明では、エンテカビルをよく溶解する溶媒に溶解させた後、高分子が溶解された溶液と混合して、分散相を製造する方法を用いた。従来の方法で微小球を製造する場合、封入率が低いのに対して、本発明の方法によれば封入率に優れていることが確認された。

本発明において、エンテカビルを溶解させるのに使用可能な溶媒は、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、酢酸、塩酸、メタノール、エタノール及び注射用水などが挙げられ、特に、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミドないしは酢酸、塩酸などの酸性溶液が好ましい。

また、高分子溶解に使用可能な有機溶媒には、塩化メチレン、アセトン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミドなどが挙げられる。

そして、エンテカビル溶液と高分子溶液との分散液を加えて、微小球を製造するための親水性高分子水溶液には、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの高分子が用いられる。

本発明のエンテカビル微小球製造工程において、有機溶媒除去は、通常的に用いられる任意の溶媒除去方法、例えば、撹拌、加熱、窒素パージなどを適用して実施することができる。

また、本発明では、前記のように製造されたエンテカビル微小球及び薬剤学的担体を含む非経口投与用医薬組成物を提供する。ここで、非経口投与用医薬組成物は特に注射剤が好ましい。

本発明に係るエンテカビル微小球を含む医薬組成物は、慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染治療剤として用いられていてもよく、投与容量は、患者の年齢、症状、投与剤形などによって多様に調節可能であり、エンテカビルを０．１〜５．０ｍｇ／日、好ましくは、０．２〜３．０ｍｇ／日、より好ましくは、０．５〜１．０ｍｇ／日投与することができる。

また、本発明に係る医薬組成物は、医薬的に許容される通常の担体を使用して製造していてもよく、高い生物学的利用能を達成するために通常の製造方法を使用することができる。

本発明のエンテカビル微小球は、最終投与時注射可能な懸濁溶剤に懸濁して投与される製剤として提供される。注射可能な懸濁溶剤は、水溶性有機担体であり、例えば、等張化剤、増粘剤、界面活性剤、緩衝剤などを含む。使用可能な等張化剤は、マンニトール、スクロース、ソルビトール、トレハロース、ラクトースなどの水溶性賦形剤または糖類であってもよく、増粘剤は、特に限定されておらず、カルメロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポビドンなどが挙げられる。界面活性剤は、特に限定されておらず、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０などのポリオキシエチレンソルビタンやスパン８０、スパン２０などのソルビタンエステルが挙げられる。また、緩衝剤は、特に限定されておらず、リン酸一水素ナトリウム、無水クエン酸、水酸化ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。

以下、実施例を通して本発明を詳細に説明する。但し、これらの実施例は本発明の例示するものであり、本発明の範囲がこれらによって制限されるものではない。

実施例１〜３：微小球製造
エンテカビル（EstechPharma社製）２．５ｇをジメチルスルホキシド４０．０ｇに溶解し（第１有機相）、下記表１に示した生分解性高分子（Boehringer Ingelheim社製）７．５ｇを塩化メチレン（Merck社製）２７．０ｇに溶解した（第２有機相）。完全に溶解された第１及び第２有機相を混合し、十分に混ぜて分散液にした後、この分散液を２０℃の０．５％ポリビニルアルコール（Ｍｎ＝３０，０００〜７０，０００、Sigma社製）水溶液にゆっくり添加しながら３，０００ｒｐｍのＬ４ＲＴミキサー（Siverson社製, UK）を用いて微小球を製造した。その後、温度を４７℃に昇温し、有機溶媒を揮発し、再び２０℃に冷却し、微小球をろ過した。ろ過された微小球を注射用水で数回洗浄した後、凍結乾燥して、微小球を製造した。

本実施例で使用した生分解性高分子は下記表１の通りである。

前記実施例に使用した高分子は、いずれも共重合体であり、ＲＧはポリラクチドグリコリド共重合体を意味、Ｈは高分子末端が親水性末端基を意味し、Ｓは疎水性末端基を意味する。中間の数字において、前から２桁は共重合体中のラクチド割合を意味し、例えば、５０はラクチドが５０％の共重合体を、７５はラクチドが７５％の共重合体を意味する。また、数字の最後の桁は高分子等級、固有粘度の差を示しており、例えば、５０２Ｈは固有粘度が０．１６〜０．２４ｄｌ／ｇ、５０４Ｈは０．４５〜０．６０ｄｌ／ｇである。

実施例４：微小球製造
エンテカビル（EstechPharma社製）２．５ｇ及び生分解性高分子（Boehringer Ingelheim社製）ＲＧ７５６Ｓ ７．５ｇを称量し、それぞれをジメチルスルホキシド４０．０ｇ及び塩化メチレン２７．０ｇに加えて溶解した（第１有機相）。各有機相を十分に混合後、溶解された有機相を２０℃の０．５％ポリビニルアルコール（Ｍｎ＝３０，０００〜７０，０００、Sigma社製）水溶液にゆっくり添加しながら３，０００ｒｐｍのＬ４ＲＴミキサー（Siverson社製, UK）を利用して微小球を製造した。その後、温度を４７℃に昇温し、有機溶媒を揮発し、再び２０℃に冷却し、微小球をろ過した。ろ過された微小球を注射用水で数回洗浄した後、凍結乾燥して微小球を製造した。

実施例５：微小球製造
エンテカビル（EstechPharma社製）２．５ｇ及びＲＧ７５６Ｓ：ＲＧ５０４Ｈ＝８：２の割合である生分解性高分子（Boehringer Ingelheim社製）７．５ｇを称量し、それぞれを酢酸３０．０ｇおよび塩化メチレン３７．０ｇに加えて溶解した（第１有機相）。各有機相を十分に混合後、溶解された有機相を２０℃の０．５％ポリビニルアルコール（Ｍｎ＝３０，０００〜７０，０００、Sigma社製）水溶液にゆっくり添加しながら３，０００ｒｐｍのＬ４ＲＴミキサー（Siverson社製, UK）を利用して微小球を製造した。その後、温度を４７℃に昇温し、有機溶媒を揮発し、再び２０℃に冷却し、微小球をろ過した。ろ過された微小球を注射用水で数回洗浄した後、凍結乾燥して微小球を製造した。

比較例
９０．６１ｇの１％ポリビニルアルコール、２．９７ｇのベンジルアルコール、及び６．５３ｇの酢酸エチルを混合して、水相を製造した。そして、２．９３ｇの生分解性高分子ＲＧ７５７Ｓを１０．８７ｇの酢酸エチル及び１０．８４ｇベンジルアルコールに溶解し、高分子が完全に溶解されれば、１．５７ｇのエンテカビルを添加して、有機相とした。製造された有機相を水相に注入しながら３０００ｒｐｍのＬ４ＲＴミキサー（Siverson社製, UK）を利用して微小球を形成した。その後、微小球が分散されたポリビニルアルコール懸濁液を１２７．６ｇの酢酸エチル、９．２３ｇの無水重炭酸ナトリウム及び１１．６２ｇの無水炭酸ナトリウムを含有する１０℃の注射用水に添加し、有機溶媒を抽出し、微小球を洗浄した。製造された微小球をろ過し、ろ過された微小球を注射用水で数回洗浄した後、凍結乾燥して微小球を製造した。

本比較例は、韓国特許第１０−０３５４２７０号公報に記載されたリスペリドン微小球の実施例で、主成分をエンテカビルに変更して実施したものである。

試験例１：微小球形態測定
実施例と比較例で製造された微小球の表面を観察するために、微小球約１０ｍｇをアルミニウムスタブに固定し、真空度０．１ｔｏｒｒ及び高電圧（１０ｋＶ）下で、３分間白金コーティングを行った後、ＳＥＭ（Hitachi社製S-4800 FE-SEM）に粉体を取り付け、イメージ分析プログラムを用いて微小球の表面を観察した。

図１は実施例と比較例で製造された微小球のＳＥＭ写真であり、図１ａは実施例６の微小球、図１ｂは比較例の微小球である。

図１に示されるように、実施例で製造された微小球が比較例に比べて、表面の気孔率が低く、封入率増加が期待されることが分かり、表面の気孔率が低くすることによって表面積が減少し、薬物放出の期間を個々で調節することが容易であると分かる。

試験例２：微小球粒子径分布測定
微小球の粒子径分布を観察するために、湿式法で粒子径を観察した。粒子径測定は、ＨＥＬＯＳ／ＫＦＳ（SYMPATEC社製）装置、ＳＵＣＥＬＬディスペンサー、Ｒ５レンズを使用した。

図２は、実施例４で製造された微小球の粒子径分布を示したものである。

試験例３：微小球のエンテカビル封入率測定
微小球約５０ｍｇを１００ｍＬ容量フラスコに入れ、ジメチルスルホキシド２０ｍＬに入れ、完全に溶解した後、塩酸試液（０．０１ｍｏｌ／Ｌ）で標線を合わせた。０．４５μｍのシリンジフィルタでろ過し、検液として用い、ＨＰＬＣを利用して微小球内に封入されているエンテカビルの含量を測定した。このとき、使われたカラムはＹＭＣ Ｃ１８ＯＤＳ ５μｍ、４．６×１５０ｍｍであり、注入量は１００μＬ、検出波長は２５４ｎｍとした。移動相は、水：アセトニトリル（９２：８）を使用して測定した。測定結果を表２に示す。

表２に示されるように、本発明の方法によれば、投入されたエンテカビルの約８０％以上が微小球内に封入されたことが分かる。反面、比較例の方法では薬物封入率が実施例の５０％程度かそれ以下である。

試験例４：微小球のin-vitro長期溶出試験
実施例１〜５及び比較例で製造したそれぞれの微小球約２０ｍｇを２５０ｍＬ広口瓶に入れた後、２００ｍＬのｐＨ７．４ ＨＥＰＥＳ溶液を入れ、３７℃で培養した。定期的に上清を取りつつ、１〜５ヶ月間、ＨＰＬＣでエンテカビルの溶出量を測定した。測定結果及びそのグラフを表３及び図３、４に示す。

図３及び図４は、実施例と比較例で製造した微小球のin-vitro長期溶出試験での時間に対する溶出率（％）を示したグラフである。

上記表３及び図３、４に示されるように、本発明によって製造されたエンテカビル微小球は、生分解性生体適合性高分子の種類を変更することによって、３０日以上薬物を放出するように調節可能であることが確認できた。また、ポリラクチドグリコリド共重合体中のラクチドの割合が高いほど溶出が遅れることが分かった。

試験例５：エンテカビルの局所毒性組織病理試験
エンテカビルをラットに皮下投与したとき、局所刺激が生じるかを試験した。

エンテカビル２.３３ｍｇ／ｋｇ／日を雄性ラット群当たり１５匹に皮下投与した後、１、４、５、８及び１２週目に死亡率、一般症状、体重、解剖検査所見及び組織病理学的検査を観察し、賦形剤投与対照群と比較した。

試験結果、全ての群で死亡動物は観察されなく、試験物質投与と関連した異常症状及び異常な体重変化は観察されなかった。解剖検査所見観察結果でも異常所見は観察されなく、エンテカビルの投与群で炎症が観察されたが、いずれも回復して毒性学的に意味ある変化ではないことが判断された。

図５は、エンテカビル及び賦形剤の皮下投与から４週経過後のラットの注射部位における顕微鏡写真（Ｈ＆Ｅ染色、１００倍）である。図５ａはエンテカビル２．３３ｍｇ／ｋｇ／日投与群の写真であり、図５ｂは賦形剤投与群の写真である。図５ａでは注射部位で微小な皮下組織炎症細胞が観察されたが、これは、図５ｂの賦形剤注射部位でも観察されるもので有意的なものではなかった。

以上の結果から、エンテカビルの皮下投与群は、毒性学的に有害な局所毒性を示していないことが分かる。

製造例：注射剤製造
希釈液調製：カルボキシメチルセルロースナトリウム２３０ｍｇ、ポリソルベート２０ １０ｍｇ、リン酸一水素ナトリウム１０ｍｇ、及び塩化ナトリウム６０ｍｇを注射用精製水に溶かし、１０ｍＬを製造した後、水酸化ナトリウムを入れ、ｐＨ７．０に調整した。

患者投与時には、エンテカビル微小球２７０ｍｇが充填されたバイアルに前記希釈液２ｍＬを入れ、懸濁して注射した。

Claims (16)

1. エンテカビルまたはその医薬的に許容される塩と生分解性生体適合性高分子とを含むエンテカビル微小球。
2. 前記生分解性生体適合性高分子は、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）グルコース、ポリカプロラクトン、ゼラチン、及びヒアルロネートの少なくとも一つであることを特徴とする請求項１に記載のエンテカビル微小球。
3. 前記生分解性生体適合性高分子が、ポリグリコリド、ポリラクチド、及びポリ（ラクチド−コ−グリコリド）の少なくとも一つであることを特徴とする請求項２に記載のエンテカビル微小球。
4. 前記ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）は、ラクチド対グリコリドのモル比が、５０：５０〜９０：１０であることを特徴とする請求項３に記載のエンテカビル微小球。
5. １０〜６０重量％のエンテカビルを含有することを特徴とする請求項１に記載のエンテカビル微小球。
6. 前記微小球の大きさが、１０〜２００μｍであることを特徴とする請求項１に記載のエンテカビル微小球。
7. エンテカビル放出が３０日以上持続されることを特徴とする請求項１に記載のエンテカビル微小球。
8. エンテカビル及び１種以上の生分解性生体適合性高分子を１種以上の溶媒に溶解させる工程と、
   前記エンテカビル及び生分解性生体適合性高分子の溶液を親水性高分子水溶液に添加し、撹拌して微小球を形成させる工程と、
   溶媒を除去する工程と、
   を含むエンテカビル微小球の製造方法。
9. 前記生分解性生体適合性高分子は、固有粘度が０．１〜１．９ｄＬ／ｇであることを特徴とする請求項８に記載の製造方法。
10. 前記生分解性生体適合性高分子は、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）グルコース、ポリカプロラクトン、ゼラチン、及びヒアルロネートの少なくとも一つであることを特徴とする請求項８に記載の製造方法。
11. 前記生分解性生体適合性高分子が、ポリグリコリド、ポリラクチド、及びポリ（ラクチド−コ−グリコリド）の少なくとも一つであることを特徴とする請求項１０に記載の製造方法。
12. 前記ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）は、ラクチド対グリコリドのモル比が、５０：５０〜９０：１０であることを特徴とする請求項１１に記載の製造方法。
13. エンテカビルを溶解させる前記溶媒が、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、酢酸、塩酸、メタノール、エタノール、及び注射用水の少なくとも一つであることを特徴とする請求項８に記載の製造方法。
14. 前記溶媒が、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、酢酸、及び塩酸の少なくとも一つであることを特徴とする請求項１３に記載の製造方法。
15. 請求項１に記載のエンテカビル微小球及び薬剤学的担体を含む非経口投与用医薬組成物。
16. 注射剤用である請求項１５に記載の医薬組成物。