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  1. カプセル化細胞を凍結乾燥する方法であって、少なくとも2つの連続したインキュベーションステップを含み、前記カプセル化細胞は、それぞれのインキュベーションステップにおいて凍結保護剤を含有するインキュベーション溶液中で適切な時間にわたってインキュベートされ、前記インキュベーション溶液中の前記凍結保護剤の濃度は、それぞれの後続のインキュベーションステップで増加されることを特徴とする方法。
  2. 3、4、5、6、7、8、9または10のインキュベーションステップを含み、それぞれのインキュベーションステップにおいて前記凍結保護剤の濃度が増加されることを特徴とする請求項1に記載の方法。
  3. それぞれのインキュベーションステップにおいて同じ凍結保護剤が用いられることを特徴とする請求項1または請求項2に記載の方法。
  4. 前記凍結保護剤は、スキムミルク、グリセロール、ジメチルスルホキシド(DMSO)、ホルムアミド、ホルムアミドおよびDMSOの混合物、N−メチルアセトアミド(MA)、ポリビニルピロリドン、プロパンジオール、プロピレングリコール、血清アルブミン、血清アルブミンのメタノールとの混合物、炭水化物アルギン酸塩およびそれらの混合物で構成するグループから選択されることを特徴とする請求項1ないし請求項3のいずれか1項に記載の方法。
  5. 前記炭水化物は、スクロース、メタノールと混合されたグルコース、ラクトース、トレハロース、ラフィノース、デキストラン、ペクチン、ヒドロキシエチルデンプン(HES)およびセルロース硫酸塩で構成するグループから選択されることを特徴とする請求項4に記載の方法。
  6. 前記凍結保護剤は、スキムミルクおよび炭水化物の混合物、または、スキムミルク、グリセロールおよび炭水化物の混合物であることを特徴とする請求項4または請求項5に記載の方法。
  7. 前記炭水化物は、スクロース、メタノールと混合されたグルコース、ラクトース、トレハロース、ラフィノースおよびデキストランで構成するグループから選択されることを特徴とする請求項6に記載の方法。
  8. 前記スキムミルクの濃度は、前記少なくとも2つの連続したインキュベーションステップのそれぞれにおいて増加されることを特徴とする請求項7に記載の方法。
  9. 前記炭水化物の濃度は、前記少なくとも2つの連続したインキュベーションステップにおいて一定に保たれることを特徴とする請求項8に記載の方法。
  10. 前記カプセル化細胞は、真核細胞または原核細胞であることを特徴とする請求項1ないし請求項9のいずれか1項に記載の方法。
  11. 前記真核細胞は、哺乳動物細胞、真菌細胞または酵母細胞であることを特徴とする請求項10に記載の方法。
  12. 前記細胞は、プロバイオティック細胞であることを特徴とする請求項10に記載の方法。
  13. 前記プロバイオティック細胞は、サッカロマイセス・セレビシエ、バチルス・コアギュランス、バチルス・リケニフォルミス、バチルス・サブチリス、ビフィドバクテリウム・アンギュラタム、ビフィドバクテリウム・アニマリス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ラクティス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロコッカス・フェカリス、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・アミロボラス、ラクトバチルス・アリメンタリウス、ラクトバチルス・ブルガリカス、ラクトバチルス・カゼイ亜種カゼイ、ラクトバチルス・カゼイ・シロタ、ラクトバチルス・クルヴァトゥス、ラクトバチルス・デルブルッキイ亜種ラクティス、ラクトバチルス・ファーメンタム、ラクトバチルス・ファルシミナス、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・ジョンソニイ、ラクトバチルス・ラクティ、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ペントサセウス、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・ロイテリ、ラクトバチルス・ラムノサス(ラクトバチルスGG)、ラクトバチルス・サケ、ラクトバチルス・サリヴァリウス、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトバチルス・サーモトレランス、ラクトバチルス・ムコサエ、マイクロコッカス・ヴァリアンス、ペディオコッカス・アシディラクティシ、ペディオコッカス・ペントサセウス、ペディオコッカス・アシディラクティシ、ペディオコッカス・ハロフィラス、ストレプトコッカス・フェカリス、ストレプトコッカス・サーモフィラス、スタフィロコッカス・カルノサスおよびスタフィロコッカス・キシロサスで構成するグループから選択されることを特徴とする請求項12に記載の方法。
  14. 請求項1ないし請求項13のいずれか1項で定められる方法により得られた凍結乾燥されたカプセル化細胞。
  15. 請求項14で定められるカプセル化細胞および適切なキャリアを含む組成物。
  16. 前記組成物は、食品添加物、石鹸製剤、化粧品組成物または医薬品組成物であることを特徴とする請求項15に記載の組成物。
  17. 下痢、抗生物質に起因する下痢、関節炎、肥満症、過敏性腸症候群、胸やけ、慢性疲労症候群、胃腸癌、および、腸内でのアンバランスな細菌集団から受ける他の状態療まは予における使用のための請求項14で定められるカプセル化細胞または請求項15もしくは請求項16で定められる組成物。
  18. 請求項14で定められるカプセル化細胞または請求項15もしくは請求項16で定められる組成物の医薬品としての使用、食品への添加物または化粧品への添加物としての使用。
  19. 凍結乾燥するためにカプセル化細胞を調製する方法であって、少なくとも2つの連続したインキュベーションステップを含み、前記カプセル化細胞は、それぞれのインキュベーションステップにおいて凍結保護剤を含有するインキュベーション溶液中で適切な時間にわたってインキュベートされ、前記インキュベーション溶液中の前記凍結保護剤の濃度は、それぞれの後続のインキュベーションステップで増加されることを特徴とする方法。
  20. 凍結乾燥されたカプセル化原核細胞または凍結乾燥されたカプセル化酵母細胞。
  21. カプセル化細胞を凍結するために適切な組成物において、スキムミルク、グリセロールおよびトレハロースを含むことを特徴とする組成物。
  22. スキムミルクが約3%(w/v)から約8%(w/v)の濃度で存在し、グリセロールが約0.5(w/v)から約2%(w/v)の濃度で存在し、トレハロースが約5%(w/v)から約13%(w/v)の濃度で存在することを特徴とする請求項21に記載の組成物。
  23. 凍結乾燥するためにカプセル化細胞を調製するための請求項21または請求項22で定められる組成物の使用。
  24. カプセル化細胞を凍結乾燥するための請求項21または請求項22で定められる組成物の使用。
  25. 凍結乾燥するためにカプセル化細胞を調製する方法であって、請求項21または請求項22で定められる組成物中でカプセル化細胞をインキュベートすることを含む方法。
JP2016522603A 2013-07-02 2014-07-02 カプセル化細胞を凍結乾燥する方法、凍結乾燥されたカプセル化細胞、凍結乾燥されたカプセル化細胞を含む組成物、ならびに、そのような細胞および組成物の使用 Active JP6643984B2 (ja)

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