LT6463B - Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose - Google Patents

Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose Download PDF

Info

Publication number
LT6463B
LT6463B LT2015103A LT2015103A LT6463B LT 6463 B LT6463 B LT 6463B LT 2015103 A LT2015103 A LT 2015103A LT 2015103 A LT2015103 A LT 2015103A LT 6463 B LT6463 B LT 6463B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
liquid composition
bacteria
encapsulated
composition according
gram
Prior art date
Application number
LT2015103A
Other languages
English (en)
Other versions
LT2015103A (lt
Inventor
Juozas Šiurkus
ŠIURKUS Juozas
Jolanta Liesienė
LIESIENĖ Jolanta
Aušra Šipailienė
ŠIPAILIENĖ Aušra
Aistė Gružinskaitė
GRUŽINSKAITĖ Aistė
Original Assignee
Uab "Probiosanus"
UAB „Probiosanus“
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Uab "Probiosanus", UAB „Probiosanus“ filed Critical Uab "Probiosanus"
Priority to LT2015103A priority Critical patent/LT6463B/lt
Priority to PCT/LT2015/000009 priority patent/WO2017099559A1/en
Priority to US16/060,364 priority patent/US20180360707A1/en
Priority to EP15848140.8A priority patent/EP3386478B1/en
Publication of LT2015103A publication Critical patent/LT2015103A/lt
Publication of LT6463B publication Critical patent/LT6463B/lt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/11—Encapsulated compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
    • A61K8/41—Amines
    • A61K8/416—Quaternary ammonium compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/46—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur
    • A61K8/463—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur containing sulfuric acid derivatives, e.g. sodium lauryl sulfate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/731—Cellulose; Quaternized cellulose derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/733—Alginic acid; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/922—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/10—Washing or bathing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/41—Particular ingredients further characterized by their size
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/48—Thickener, Thickening system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/59—Mixtures
    • A61K2800/596—Mixtures of surface active compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Šis išradimas pateikia būdą išlaikyti ir apsaugoti probiotines bakterijas (PB) nuo paviršiaus aktyviųjų medžiagų, esančių asmens higienos produktuose. Daugeliu atvejų Gram+ PB ir (arba) probiotinių bakterijų metabolitai dedami kaip papildai į detergentų turinčius asmens higienos ir buities priežiūros produktus, siekiant pagerinti produkto funkcines savybes. Mes panaudojome probiotinių bakterijų saugojimo būdą nuo detergentų, kurie turi baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų – katijoninių, amfoterinių ir nejoninių detergentų, fitoekstraktų, terpenų, naudojamų kaip konservantai, ir kvapniųjų medžiagų, bei minėtų medžiagų kompozicijų. PB apsaugos mechanizmas yra pagrįstas bakterijų imobilizacija/inkapsuliacija į polimerus. Mes panaudojome alginato kapsules, kurių polimerinis barjeras suteikia galimybę išlaikyti bakterijų gyvybingumą detergentų turinčiose asmens higienos arba buities priežiūros produktų kompozicijose. Inkubuojant inkapsuliuotas ir laisvas žinomo titro probiotines Bacillus coagulans ląsteles įvairiose detergentų kompozicijose patikrinome ląstelių gyvybingumą.

Description

Išradimo sritis
Šis išradimas susijęs su nauju probiotinių bakterijų išsaugojimo būdu, kur panaudojamos polimerinės dalelės siekiant apsaugoti bakterijas nuo paviršiaus aktyviųjų medžiagų ir kitų ardančių junginių, kurie paprastai naudojami asmens higienos produktuose, įskaitant jų galutines formules.
Išradimo apžvalga
Probiotinės bakterijos (PB), tai grupė nepatogeninių mikroorganizmų, kurie yra naudingi žmonių ir gyvūnų sveikatai įvairiais skirtingais būdais. Probiotinis poveikis gali būti susijęs su šiais mechanizmais: (i) baktericidinių medžiagų sekrecija - metabolitų, peptidų ir fermentų gamyba, pH keitimas, bio-konkurencija, (ii) bioplėvelių arba barjerų formavimas ir imunomoduliacija (1 - VValker WA. (2008) Mechanisms of action of probiotics. Clin Infect Dis. 46 (Supplement 2): S87-S91 ). Probiotikai gali keisti odos būklę, pavyzdžiui, jie geba efektyviai stabdyti atopinio dermatito vystymąsi (2Yeęilova, Y., Qalka, O., Akdeniz, N., & Berktaę, M. (2012). Effect of Probiotics on the T reatment of Children with Atopic Dermatitis. Annals of Dermatology, 24(2), 189-193.), įskaitant ir kitų odos ligų prevenciją ir odos būklės pagerėjimą (3 - Reid, G., Jass, J., Sebulsky, M. T., & McCormick, J. K. (2003). Potential Uses of Probiotics in Clinical Practice. Clinical Microbiology Reviews, 16(4), 658-672.). Kai kurie bakteriniai metabolitai gali veikti kaip antioksidantai ir mažinti arba padėti išvengti melanogenezės ar kitų reaktyviojo deguonies, ar cheminių medžiagų sukeltų odos pažeidimų (4 - Tsao, R., Yang, R. and Young, J.C. (2003) Antioxidant isoflavones in orange, maclura pomifera (Raf.) Scheneid. J Agric Food Chem 51, 6445-6451., 5 - Wang, Y.C., Yu, R.C. and Chou, C-C. (2006) Antioxidative activities of soymilk fermented with lactic acid bacteria and bifidobacteria. Food Microbiol 23, 128-135). Sveikatai naudingas probiotikų ir/arba jų metabolitų poveikis odai buvo vienas iš veiksnių paskatinusių jų naudojimą asmens higienos ir kosmetikos gaminiuose. Probiotinių bakterijų įterpimo į kosmetikos gaminius tikslas yra sumažinti odos infekcijų, odos riebalų balansavimo ir dermatito padarinius. Vienas iš pavyzdžių yra EP 2306970 A1 patentas, kuriame nurodomas kosmetinės sudėties išradimas susidedantis iš pieno rūgšties ir/arba bifido bakterijų mišinio, kurio procentinė sudėtis yra 0,001-20 % (w/w) kartu su vitaminais (B3, B5, B6, C, D, E, PP), niacinu, karotenoidais, polifenoliais ir mineralais (Zn, Ca,
Mg, Cu, Fe, I, Mn, Se, Cr) bei fitoestrogenais, baltymais, amino rūgštimis, mono- ir polisacharidais, fitoterpenais, fitosteroliais ir gliukozaminais. Šiuose mišiniuose buvo naudojamos Lactobacillus paracasei ST1 bakterijos. Patento paraiškoje taip pat aprašomos probiotikais paremtų kremų, gelių, miltelių ir tablečių sudėtys (6- Patent application EP 2306970 A1).
Patento paraiška FR 2889057 apibrėžia kosmetinės sudėties medžiagą su pienarūgštėmis bakterijomis ir nesočiosiomis riebalų rūgštimis bei jų esteriais (7Patento paraiška FR 2889057). Panašiai, patento paraiška WO 2006/07922 apibrėžia kosmetinės sudėties junginį jautriai odai, kuris paremtas Lactobacillus paracasei arba casei ir Bifidobacterium longum arba Bifidobacterium lactis bakterijų naudojimu kartu su kitomis aktyviosiomis medžiagomis (8 - WO 2006/07922). Paraiškos WO 02/28402 irWO 03/070260 apibrėžia mikroorganizmais paremtus kosmetinės sudėties junginius jautriai odai su raminamosiomis savybėmis ir apsauga nuo odą žalojančio UV poveikio, atitinkamai (9- Patento paraiška WO 02/28402,10- Patento paraiška WO 03/070260).
Nei viename iš šių patentais apsaugotų produktų nepabrėžiama probiotikų ar jų metabolitų stabilumo išsaugojimo, esant tiesioginiam kontaktui su kosmetikos produktuose esančiomis cheminėmis medžiagomis, problema. Probiotinių bakterijų stabilumo įvairiuose mišiniuose problema gali būti susijusi su baktericidinėmis, bakteriostatinėmis ir lizuojančiomis kosmetikos gaminių savybėmis, ypač tų, kurie turi paviršiaus aktyviųjų medžiagų, konservantų, terpenų, alkoholių ir pan. Paviršiaus aktyvios medžiagos (PAM) yra pagrindiniai kosmetikos ir asmens higienos gaminių junginiai, kurie gali būti naudojami valymui, drėkinimui, putojimui arba putojimo stabdymui bei, kaip emulsikliai ardispersantai. PAM yra vandenyje tirpūs polimerai dėl savo amfofilinių savybių, t.y. jų molekulė sudaryta iš hidrofobinės “uodegos” ir hidrofilinės “galvos”. Vandeniniuose tirpaluose PAM sudaro miceles - struktūrinius vienetus, dėl savo hidrofobinės uodegos, kuri atstumia polines grupes, ir hidrofilinės liekanos, kuri nukreipta į tirpinį. Pagal molekulinius parametrus PAM yra skirstomos į anijonines, katijonines ir nepolines (11- Surface-Active Agents: Advances in Research and Application: 2011 Edition. Edited by Ashton Acto). Stipriausias bakterijas lizuojantis poveikis pasireiškia veikiant polinėms PAM, kurių veikimo mechanizmas paremtas sąveika su bakterijų membranų hidrofobinėmis ir hidrofilinėmis dalimis, atitinkamai. Dėl šito poveikio bakterijų sienelių membranos suplyšta ir įvyksta ląstelės ližė bei jos turinio - tirpių baltymų, ribosomų, DNR ir RNR, išsiliejimas į aplinką (12 3
Vasily N. Danilevich, Lada E. Petrovskaya, Eugene V. Grishin (2008) A Highly Efficient Procedure for the Extraction of Soluble Proteins from Bacterial Cells with Mild Chaotropic Solutions. Chem. Eng. Technol. 31, 6: 904-910). Bakterijų atsparumas įvairiems fiziniams ir cheminiams veiksniams gali būti padidintas inkapsuliuojant jas j įvairių polimerų kapsules arba įmobilizuojant ant įvairių kietųjų dalelių paviršių (13 Riaz QU, Masud T.Recent trends and applications of encapsulating materials for probiotic stability. (2013) Crit Rev Food Sci Nutr. 53(3):231-44). Yra keletas technologijų naudojamų bakterijų inkapsuliacijai: purškiamasis džiovinimas, ekstruzija ir emulgavimas. Po to, susidarę dalelės dar gali būti stabilizuojamos jas liofilizuojant. Medžiagos, kurios gali būti naudojamos bakterijų inkapsuliacijai yra polisacharidai, pavyzdžiui alginatas, polisacharidai ir lipidai bei baltymai. Priklausomai nuo inkapsuliavimo metodikos ir medžiagų galima išgauti kelis pagrindinius polimerinių kapsulių tipus: rezervuarus (bakterinės ląstelės yra suspensijoje, kapsulės vidinėje ertmėje), bakterijos įterptos į polimerinę matricą arba padengtos polimerine matrica. Be to, skirtingų polimerų ir inkapsuliavimo metodikų deriniai leidžia išgauti įvairaus dydžio kapsulės nuo 3 pm iki 5 mm. Galiausiai, bakterinių ląstelių paleidimas iš kapsulių, gali būti išgaunamas veikiant temperatūra, keičiant drėgmės kiekį, reguliuojant pH, paveikus fermentais ar mechanine jėga. Dabar egzistuojančių bakterinių preparatų inkapsuliavimo tikslas yra apsaugoti probiotines bakterijas nuo žalingų sąlygų susidarančių žmonių ir gyvūnų virškinimo trakte t.y. labai žemo pH (13 - Riaz QU, Masud T. Recent trends and applications of encapsulating materials for probiotic stability. (2013) Crit Rev Food Sci Nutr. 53(3):231-44).
Išradimo santrauka
Probiotines bakterijos (PB) yra gerai žinoma grupė mikroorganizmų dėl jų naudingo poveikio žmogaus sveikatai. Taigi jos yra plačiai naudojamos, kaip maisto ir kosmetikos bei asmens higienos papildai (K/AHP).
PB teigiamas poveikis kosmetikos gaminiuose gali būti susijęs su žmogaus mikrobiotos papildymu, įvairių antioksidantų gamyba, drėkinimu, biocidinio poveikio junginių gamyba ar kitais fermentacijos produktais, kurie tiesiogiai ar netiesiogiai daro poveikį žmogaus odai ar kitoms organų sistemoms.
Daugeliu atvejų Gram+ ir/arba Gram- PB metabolitais papildomi asmens higienos ar buities priežiūros produktai siekiant pagerinti produktų plaunamąsias savybes. Tačiau pagrindiniai K/AHP junginiai: paviršiaus aktyviosios medžiagos (detergentai: katijoniniai - natrio laurilsulfatas (SLS), natrio kokoilgliutamatas; amfoteriniai - benzalkoniumo chloridas, cetrimoniumo chloridas, kokamidopropilbetainas, kokoamfoacetatas, natrio kokoilglicinatas; ne joniniai dietanolaminas ir kokogliukozidas), konservantai ir terpenai probiotines bakterijas tiesiogiai veikia kaip biocidai, todėl inkubaciniu produktų laikotarpiu, pvz., produktų saugojimo ir naudojimo metu, probiotines bakterijos yra inaktyvinamos - nužudomos, dėl ko pakinta produkto sudėtis ir funkcijos. Taipogi, PB metabolitai gali sąveikauti su produkto junginiais, būti paveikti UV spindulių ir/arba oksiduotis, todėl pasikeičia jų cheminė sudėtis arba jie yra inaktyvinami.
Mes panaudojome probiotinių bakterijų saugojimo būdą ir pritaikėme jį PB apsaugojimui nuo asmens higienos arba buities priežiūros produktuose esančių detergentų, kurie pasižymi baktericidiniu poveikiu, t.y. paviršiaus aktyviųjų medžiagų katijoninių, amfoterinių ir nejoninių detergentų, konservantų, terpenų (kvapų) ir jų mišinių. PB apsaugos mechanizmas remiasi bakterijų imobilizacijos/inkapsuliacijos į polimerines pektino/alginato arba alginato kapsules, kurių polimerinis apvalkalas padeda palaikyti stabilų bakterijų gyvybingumą asmens higienos ar buities priežiūros produktuose.
PB apsaugos mechanizmas remiasi bakterijų imobilizacijos/inkapsuliacijos į polimero, pvz., polisacharido (pektino/alginato arba alginato) ir/arba polisacharidų ir lipidų, ir/arba baltymų, kapsules, kurių polimerinis barjeras leidžia išlaikyti bakterijų gyvybingumą asmens higienos ar buities priežiūros produktuose.
Kaip pavyzdį mes panaudojome Bacillus coagulans bakterijas ir jų metabolitus, inkubuodami žinomo titro inkapsuliuotas ir laisvas bakterines ląsteles su įvairiais detergentų mišiniais bei asmens higienos produktais.
Mes eksperimentiškai įrodėme, kad polimerinis inkapsuliavimas stabilizuoja gyvų PB titrus arba sulėtina bakterijų yrimą 120 valandų laikotarpyje esant 37°C temperatūrai, (kas gali būti 120 dienų ekvivalentas esant kambario temperatūrai) inkubuojant bakterijas įvairiose asmens higienos produktų sudėtinėse dalyse. Šiomis eksperimentinėmis sąlygomis mes nustatėme, kad gyvybingų inkapsuliuotų bakterijų išlikimas yra 60-90% geresnis lyginant su analogiškomis ne inkapsuliuotomis bakterijomis, kur nuo 60 iki 90% bakterijų buvo inaktyvintos per tą patį laiką, tomis pačiomis inkubavimo sąlygomis.
Trumpas brėžinių aprašymas
Pav. 1. Pateikiami laisvų ir inkapsuliuotų liofilizuotų bei ne liofilizuotų B. coagulans bakterijų išgyvenamumo rezultatai po inkubacijos tirpale, kurį sudaro amfoterinė paviršiaus aktyvioji medžiaga - kokamido propil betainas.
Pav. 2. Pateikiami inkapsuliuotų ir laisvų B. coagulans bakterijų išgyvenamumo rezultatai po inkubacijos tirpale, kurj sudaro anijoninė paviršiaus aktyviosios medžiaga - natrio laurilsulfatas.
Pav. 3. Pateikiami inkapsuliuotų ir laisvų B. coagulans bakterijų išgyvenamumo rezultatai po inkubacijos tirpaluose, kuriuos sudaro - 2% kokogliukozido metiloleatas arba, 3% kokamido dietanolaminas, arba 7% kokogliukozidas.
Pav. 4. Pateikiami inkapsuliuotų ir laisvų B. coagulans bakterijų išgyvenamumo rezultatai po inkubacijos tirpale, kurį sudaro greipfrutų sėklų ekstraktas (konservantas) arba d-limonenas (terpenas), arba Azadirachta indica ekstraktas.
Pav. 5. Pateikiami inkapsuliuotų ir laisvų B. coagulans bakterijų išgyvenamumo rezultatai po inkubacijos tirpale, kurį sudaro nejoninės paviršiaus aktyviosios medžiagos esančios šiuose produktuose: SKYSTAS RANKŲ MUILAS SU PROVITAMINU B5 (UAB Probiosanus) arba NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNAS ILGAM KAILIUI (UAB Probiosanus), arba NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNAS TRUMPAM KAILIUI (UAB Probiosanus).
Priemonės ir metodai
Bakterinių ląstelių paruošimas
Visiems eksperimentams buvo naudojamos probiotinės padermės Bacillus coagulans DSM 2311 bakterijos gautos iš DSMZ. Bakterinių ląstelių suspensija paruošta auginant B. coagulans ląsteles 100 ml skystos mitybinės terpės (Oxoid) 1000 ml tūrio Erlenmejerio kolbose, 24 valandas esant 37°C temperatūrai bei purtant 180 rmp greičiu. Prieš inkapsuliavimą ląstelės buvo surinktos centrifuguojant jas 6000 rpm greičiu Rotofix 32 A Hettich centrifūgoje, vėliau du kartus nuplautos ir patalpintos į sterilų 0,9 % NaCI tirpalą, kuriame ląstelių koncentracija buvo 1011/ml.
Bakterinių ląstelių inkapsuliavimas
B. coagulans ląstelių inkapsuliavimas buvo atliekamas naudojant emulsijos formavimo metodą. 200 ml emulsijos, sudarytos iš 40 % vandens fazės ir 60 % saulėgrąžų aliejaus, buvo paruošta ir sumaišyta iki homogeniškos konsistencijos.
Vandens fazė buvo sudaryta iš 2,4 % alginato ir B. coagulans bakterijų ląstelių, kur bakterinių ląstelių skaičius - 109-1010 vienam gramui kapsulių. Aliejinė fazė buvo sudaryta iš 99,5% saulėgrąžų aliejaus su 1 % polisorbato 80. Siekiant išgauti emulsiją, bakterijų-alginato vandens fazė buvo lėtai pilama į aliejaus fazės tirpalą ir maišyta bent 20 minučių kambario temperatūroje. Po to, kai buvo suformuota emulsija, lėtai supiltas sterilus 5,5 % CaCb tirpalas, kad jo galutinė koncentracija pasiektų 3 %. Tada reakcijos mišinys buvo inkubuojamas kambario temperatūroje keletą valandų. Inkubacijos metu tirpalas buvo apšviečiamas UV šviesa, siekiant sumažinti mikrobinio užterštumo galimybę. Gautos bakterinių ląstelių kapsulės buvo surinktos centrifuguojant žemame slėgyje ir plaunamos du kartus steriliu dejonizuotu vandeniu bei laikomos 0,1 % triptono vandenyje, esant 4 °C temperatūrai. Buvo gautas 1010 bakterinis titras 1g kapsulių drėgno svorio.
Pasirinktinai, tolimesniems eksperimentams, kapsulės buvo liofilizuotos 24 vai. -110°C temperatūroje Christ ALPHA 2-4 LSC aparate ir laikomos -20°C arba -80°C. Subrendusių kapsulių dydis nustatytas naudojant Malvern Mastersizer 2000 ir svyravo nuo 0.2 mm iki 0.24 mm liofilizuotų (30 minučių po rehidratacijos vandenyje), ir 0.20.260mm neliofilizuotų.
Inkapsuliuotų bakterijų gyvybingumo analizė detergentų tirpaluose g liofilizuotų ir rehidratuotų ar šviežių mikrokapsulių turinčių ~101° bakterijų buvo įdėtas į pastovaus tūrio (100 ml) tirpalą, t.y. detergentų mišinį, kosmetikos produktų turintį tirpalą arba galutinės formulės detergentų turintį produktą ir inkubuotas 37 °C temperatūroje. Mėginiai buvo paimami tam tikrais laiko momentais norint įvertinti bakterijų išgyvenamumą. Po mėginio paėmimo, bakterinės kapsulės buvo plaunamos du kartus su steriliu vandeniu ir į jas įdedamas pastovaus kiekio sterilus 2 % natrio citrato tirpalas, kuris padeda išlaisvinti inkapsuliuotas bakterijas. Ląstelių suspensija buvo skiedžiama nuo 101 iki 105 kartų ir 100 pi tirpalo buvo sėjama ant Petri lėkštelių su kieta mitybine terpe. Inkapsuliuotų ir laisvų bakterijų išgyvenamumas [%] buvo vertinamas lyginant KFV (kolonijas formuojantys vienetai) vidurkius kiekviename laiko momente iš 3 pakartojimų.
Formulės:
z x (KFV * Vfd\ (κρν)=Η?Λ)
N- numanomas KFV;
KFV - suskaičiuotų kolonijų iš kiekvienos įvertintos Petri lėkštelės suma Vp - lėkštelių tūris Vfd- galutinis praskiedimo tūris D - praskiedimo kartai
Bakterijų išgyvenamumas [%] = N(i+n)/Ni*100
Ni - bakterijų KFV pirmame mėginyje
N(i+n) - bakterijų KFV mėginiuose tam tikrais laiko momentais
Pavyzdžiai pavyzdys.
g liofilizuotų ir rehidratuotų ar šviežių mikrokapsulių turinčių 101° bakterijų buvo įdėtas j pastovaus tūrio (100 ml) detergento tirpalą ir inkubuotas 120 valandų 37°C temperatūroje. Paralelinis eksperimentas buvo atliktas su ne inkapsuliuotomis ląstelėmis (kontrolinė grupė). Po mėginio paėmimo, bakterinės kapsulės buvo plaunamos du kartus su steriliu vandeniu ir įdėtos į pastovaus kiekio sterilų 2% natrio citrato tirpalą, kuris padeda išlaisvinti inkapsuliuotas bakterijas. Ląstelių suspensija buvo skiedžiama nuo 101 iki 105 kartų ir 100 pi tirpalo buvo sėjama ant lėkštelių su kieta mitybine terpe. Inkapsuliuotų ir laisvų bakterijų išgyvenamumas [%] buvo vertinamas, kaip aprašyta skyriuje - Inkapsuliuotų bakterijų gyvybingumo analizė detergentų tirpaluose, lyginant KFV vidurkius kiekviename laiko momente iš 3 pakartojimų.
Laisvų ir inkapsuliuotų bakterijų išgyvenamumas tirpale turinčiame amfoterinę paviršiaus aktyviąją medžiagą - kokamido propilbetainą (CAPB) 6,7% (medžiagos pradinė koncentracija - 99 %, BASF).
Eksperimentai parodė, kad 97% laisvų bakterijų (nuo pradinių titrų) buvo inaktyvuotos po 0,5 vai. dėl CAPB poveikio, o ~50 % liofilizuotų ir ~35 % neliofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno po inkubacijos praėjus 120 vai., esant 37 °C temperatūrai (Pav. 1).
Inkapsuliacija efektyviai išsaugojo B. coagulans bakterijas amfoterinės paviršiaus aktyviosios medžiagos - kokamido propilbetaino tirpale, nors šis junginys inaktyvavo tos pačios rūšies ne inkapsuliuotas bakterijas.
Laisvų ir liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyvenamumas tirpale turinčiame anijoninę paviršiaus aktyviąją medžiagą - 6,7 % natrio laurilsulfatą (SLS) (medžiagos pradinė koncentracija - 98 %, BASF).
Eksperimentai parodė, kad 80 % laisvų bakterijų buvo inaktyvuotos dėl SLS poveikio, o ~80 % liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno po inkubacijos praėjus 120 vai., esant 37 °C temperatūrai (Pav. 2).
Inkapsuliacija efektyviai išsaugojo B. coagulans bakterijas SLS tirpale nors šis junginys inaktyvavo tos pačios rūšies ne inkapsuliuotas bakterijas.
Laisvų ir liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyvenamumas tirpaluose turinčiuose nejonines paviršiaus aktyviąsias medžiagas: 2 % kokogliukozido metiloleatą (medžiagos pradinė koncentracija - 98 %, BASF), 3 % kokamido dietanolaminą (medžiagos pradinė koncentracija - 98 %, BASF) ir 7 % kokogliukozidą (medžiagos pradinė koncentracija - 98 %, BASF) (Pav. 3).
Eksperimentai parodė, kad 98 % laisvų bakterijų buvo inaktyvuotos dėl kokogliukozido metiloleato poveikio po 0,5 vai inkubacijos, o -50% liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno po 120 vai. inkubacijos (Pav. 3, A dalis); 75 % laisvų bakterijų buvo inaktyvuotos dėl kokamido dietanolamino (B dalis) ir kokogliukozido (C dalis) poveikio, o >95 % liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno po 120 vai. inkubacijos, 37 °C temperatūroje (B ir C dalys).
Inkapsuliacija efektyviai išsaugojo B. coagulans bakterijas tirpaluose turinčiuose natūralių nejoninių paviršiaus aktyviųjų medžiagų nors šie junginiai inaktyvavo tos pačios rūšies ne inkapsuliuotas bakterijas.
pavyzdys.
g liofilizuotų ir rehidratuotų mikrokapsulių turinčių 101° bakterijų buvo įdėtas į pastovaus tūrio (100 ml) tirpalus: greipfrutų sėklų ekstrakto, d-limoneno arba Azadirachta indica ekstrakto, ir inkubuotas 120 valandų 37°C temperatūroje. Paralelinis eksperimentas buvo atliktas su ne inkapsuliuotomis ląstelėmis. Po mėginio paėmimo, bakterinės kapsulės buvo plaunamos du kartus su steriliu vandeniu ir jdėtos j pastovaus kiekio sterilų 2 % natrio citrato tirpalą, kuris padeda išlaisvinti inkapsuliuotas bakterijas. Ląstelių suspensija buvo skiedžiama nuo 101 iki 105 kartų ir 100 pi tirpalo buvo sėjama ant lėkštelių su kieta mitybine terpe. Inkapsuliuotų ir laisvų bakterijų išgyvenamumas [%] buvo vertinamas, kaip aprašyta skyriuje - Inkapsuliuotų bakterijų gyvybingumo analizė detergentų tirpaluose, lyginant KFV vidurkius kiekviename laiko momente iš 3 pakartojimų.
Laisvų ir liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyvenamumas tirpaluose turinčiuose: 0,6% konservanto - greipfrutų sėklų ekstrakto ((Citrus paradisi) medžiagos pradinė koncentracija - 98 %, LemonConcentrate) (Pav. 4, A dalis)), 0,7 % terpeno, d-limoneno (medžiagos pradinė koncentracija - 99 %, LemonConcentrate) (B dalis) arba 5% Azadirachta indica ekstrakto (medžiagos pradinė koncentracija - 90 %, JSC„Baltkos“) (C dalis).
Eksperimentai parodė, kad 98 % laisvų B. coagulans bakterijų buvo inaktyvuotos dėl konservanto - greipfrutų sėklų ekstrakto poveikio po 6 vai. inkubacijos, o >50 % liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno po 24 vai. ir >35 % po 120 vai. inkubacijos (A dalis); 100% laisvų B. coagulans bakterijų buvo inaktyvuotos po 2 valandų dėl terpenų poveikio (B dalis) ir 75% dėl Azadirachta indica ekstrakto poveikio (C dalis), o -80% liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno po inkubacijos praėjus 6 vai. ir 75% po 120 vai., 37°C temperatūroje (Pav. 4, B ir C dalys).
Inkapsuliacija efektyviai išsaugojo B. coagulans bakterijas tirpaluose turinčiuose natūralių, iš sėklų ekstraktų išgautų konservantų, terpenų ir Azadirachta indica ekstrakto, nors šie junginiai inaktyvavo tos pačios rūšies ne inkapsuliuotas bakterijas.
pavyzdys.
Šiame eksperimente, kaip detergentų turintys gaminiai buvo naudojami trys komerciniai produktai iš UAB ProBioSanus”: SKYSTAS RANKŲ MUILAS SU PROVITAMINU B5 (sudėtis 1 lentelėje), NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNAS ILGAM KAILIUI (sudėtis 2 lentelėje) ir NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNAS TRUMPAM KAILIUI (sudėtis 3 lentelėje).
g liofilizuotų ir rehidratuotų mikrokapsulių turinčių 101° bakterijų buvo įdėtas į pastovaus tūrio (100 ml) detergentų turinčius produktų tirpalus, ir inkubuotas 120 valandų 37 °C temperatūroje. Paralelinis eksperimentas buvo atliktas su ne inkapsuliuotomis ląstelėmis. Po mėginio paėmimo, bakterinės kapsulės buvo plaunamos du kartus su steriliu vandeniu ir įdėtos į pastovaus kiekio sterilų 2 % natrio citrato tirpalą, kuris padeda išlaisvinti inkapsuliuotas bakterijas. Ląstelių suspensija buvo skiedžiama nuo 101 iki 105 kartų ir 100 pi tirpalo buvo sėjama ant lėkštelių su kieta mitybine terpe. Inkapsuliuotų ir laisvų bakterijų išgyvenamumas [%] buvo vertinamas, kaip aprašyta skyriuje - Inkapsuliuotų bakterijų gyvybingumo analizė detergentų tirpaluose, lyginant KFV vidurkius kiekviename laiko momente iš 3 pakartojimų.
Ne inkapsuliuotų ir alginato mikrokapsulėse (skersmuo - 0,24 mm) inkapsuliuotų liofilizuotų bakterijų išgyvenamumas detergentų turinčiuose komercinių produktų tirpaluose.
Lentelė 1. SKYSTAS RANKŲ MUILAS SU PROVITAMINU B5 (UAB ProBioSanus)
Junginys CAS Nb. Masė, [%]
Natrio laurilsulfatas (SLS koncentracija 70 %) 68891-38-3 6,4
Alkil (C8-C10) poligliukozidas (koncentracija 70 %) 68515-73-1 3,6
(Kokamido DEA, koncentracija 85 %) 68603-42-9 2,8
Glicerolis 56-81-5 4
Apelsinų terpenai 5989-27-5 0,35
Kvapai 233799 0,1
D-pantenolis - 0,4
Etilhidroksietil celiuliozė (EHEC) 9004-58-4 0,9
Konservantas (apelsinų terpenai) 26172-55-4 2682-20-4 100-51-6 0,2
Citrinų rūgštis 5949-29-1 0,015
Lentelė 2. NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNAS ILGAM KAILIUI (UAB ProBioSanus)
Junginys CAS Nb. Masė, [%]
Natrio kokoilgliutamatas (koncentracija 99 %) 68187-30-4 10
Kokogliukozidas (koncentracija 99%) 110615-47-9, 68515-73-1 7,0
Kokobetainas (koncentracija 99%) 66455-29-6 5,0
Nimbamedžio ekstraktas (Azadirachta indica) 84696-25-3/ 90063-92-6 1
Ramunėlių (Chamomila recutita) ekstraktas 1
Dilgėlių (Urtica dioica) ekstraktas 84012-40-8 1
Ksantano guma 11138-66-2 0,75
Pieno rūgštis /80 598-82-3 0,5
Konservantas ACNIBIO C PLŪS 90045-43-5 0,06
Lentelė 3. NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNAS TRUMPAM KAILIUI (UAB ProBioSanus)
Junginys CAS Nb. Masė, [%]
Kaprilil kaprilgliukozidas (koncentracija 99 %) 68515-73-1 5,38
Natrio kokoilgliutamatas (koncentracija 99 %) 68187-30-4 4
Kokobetainas (koncentracija 99 %) 66455-29-6 6,7
Gliceril oleatas (ir) 77-92-9, 3,85
kokogliukozidas 141464-42-8
Nimbamedžio ekstraktas (Azadirachta indica) 84696-25-3/ 90063-92-6 1
Ramunėlių (Chamomila recutita) ekstraktas 1
Dilgėlių (Urtica dioica) ekstraktas 84012-40-8 1
Ksantano guma 11138-66-2 0,75
Konservantas (citrusinių vaisių ekstraktai) 90045-43-5 0,06
Eksperimentai parodė (Pav. 5), kad 80% laisvų bakterijų buvo inaktyvuotos po 120 vai. inkubacijos su SKYSTU RANKŲ MUILU SU PROVITAMINU B5 37 °C temperatūroje, nes jame randami šie baktericidiniai junginiai (i) PAM: natrio laurilsulfatas, alkil (C8-C10) poligliukozidas ir kokamido DEA (ii) terpenai: apelsinų terpenai, kai tuo tarpu >95 % liofilizuotų inkapsuliuotų bakterijų išgyveno tos pačios sudėties tirpale (A dalis); 60 % laisvų bakterijų buvo inaktyvuotos po 120 vai. inkubacijos 37 °C temperatūroje su NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNU ILGAM KAILIUI, kurio sudėtyje yra šių (i) PAM: natrio kokoilgliutamatas, kokogliukozidas, kokobetainas (ii) augalų ekstraktai: nimbamedžio ekstraktas (Azadirachta indica), dilgėlių (Urtica dioica) ir (iii) konservantas: ACNIBIO C PLŪS kuris sudarytas iš askorbo rūgšties (vitaminas C) ir bioflavanoidų iš citrusinių vaisių (vitaminas P) (B dalis); o ~75 % laisvų bakterijų buvo inaktyvuotos po inkubacijos su NAMINIŲ GYVŪNŲ ŠAMPŪNU TRUMPAM KAILIUI (C dalis) kurio sudėtyje yra šių (i) PAM: natrio kokoilgliutamatas, kokogliukozidas, kokobetainas ir gliceriloleatas (ir) kokogliukozidas, (ii) augalų ekstraktai: nimbamedžio ekstraktas (Azadirachta indica) ir ramunėlių (Chamomila recutita) bei dilgėlių (Urtica dioica) ekstraktai, (iii) konservantai: pagaminti iš citrusinių vaisių sėklų ekstraktų. Tuo tarpu, ~>90 % B. coagulans bakterijų patalpintų j liofilizuotas mikrokapsules išgyveno po inkubacijos praėjus 120 vai. 37 °C temperatūroje tos pačios sudėties tirpaluose (Pav. 5, B ir C dalys).
Išvados: inkapsuliacija efektyviai išsaugojo B. coagulans probiotines bakterijas asmens higienos ir buities priežiūros produktuose turinčiuose anijoninių ir/arba nejoninių, ir/arba amfoterinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų su natūraliais vaisių sėklų ekstraktais, ir konservantais pagamintais iš terpenų ir vitaminų, kai, tuo tarpu, tokios pačios sudėties tirpaluose ne inkapsuliuotos B. coagulans bakterijos neišgyveno.
Literatūra:
VValker WA. (2008) Mechanisms of action of probiotics. Clin Infect Dis. 46 (Supplement 2): S87-S91
Yeęilova, Y., Qalka, O., Akdeniz, N., & Berktaę, M. (2012). Effect of Probiotics on the Treatment of Children with Atopic Dermatitis. Annals of Dermatology, 24(2), 189-193.
Reid, G., Jass, J., Sebulsky, M. T., & McCormick, J. K. (2003). Potential Uses of Probiotics in Clinical Practice. Clinical Microbiology Revievvs, 16(4), 658-672.
Tsao, R., Yang, R. and Young, J.C. (2003) Antioxidant isoflavones in orange, maclura pomifera (Raf.) Scheneid. J Agric Food Chem 51, 6445-6451.
Wang, Y.C., Yu, R.C. and Chou, C-C. (2006) Antioxidative activities of soymilk fermented with lactic acid bacteria and bifidobacteria. Food Microbiol 23,128-135.
Patento paraiška EP 2306970 A1
Patento paraiška FR 2889057
Patento paraiška WO 2006/07922
Patento paraiška WO 02/28402
Patento paraiška WO 03/070260
Surface-Active Agents: Advances in Research and Application: 2011 Edition. Edited by Ashton Acton
Vasily N. Danilevich, Lada E. Petrovskaya, Eugene V. Grishin (2008) A Highly Efficient Procedure for the Extraction of Soluble Proteins from Bacterial Cells with Mild
Chaotropic Solutions. Chem. Eng. Technol. 31,6: 904-910
Riaz QU, Masud T.Recent trends and applications of encapsulating materials for probiotic stability. (2013) Crit Rev Food Sci Nutr. 53(3):231-44.
Patento paraiška VV02015000972A1 Patento paraiška VV02015019307A1 Patento paraiška US20080107699A1 Patento paraiška VV02004035885A1
VVO2013188626A2
US20140065218A1
US9157054B2
WO2010045541A1
US20150071977A1

Claims (15)

  1. Išradimo apibrėžtis
    1. Skysta kompozicija, besiskirianti tuo, jog ją sudaro:
    polimerinės kapsulės su inkapsuliuotomis gyvybingomis Gram+ ir (arba) gyvybingomis Gram- bakterinėmis ląstelėmis, kur minėtos polimerinės kapsulės sudarytos iš polisacharidų ir (arba) polisacharidų ir lipidų, ir (arba) baltymų; ir bent viena baktericidinė paviršiaus aktyvioji medžiaga arba jų derinys, kur baktericidinės paviršiaus aktyviosios medžiagos yra parinktos iš joninių ir (arba) nejoninių, ir (arba) amfoterinių medžiagų; ir bent vienas fito-ekstraktas ir (arba) terpenas, ir (arba) alkoholis, ir (arba) riebalų rūgštis, ir (arba) jų metabolitas, ir (arba) organinė rūgštis, ir (arba) vitaminas, ir (arba) baktericidinis/statinis konservantas, ir kvapioji medžiaga, bei tirštiklis.
  2. 2. Skysta kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad polimerinių kapsulių dydis svyruoja nuo 0,2 mm iki 5 mm.
  3. 3. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-2 punktų, besiskirianti tuo, kad inkapsuliuotų gyvybingų Gram+ ir (arba) Gram- bakterinių ląstelių skaičius yra nuo 1 iki 1-109 vienoje polimero dalelėje, t.y. nuo 1 iki 1-1012 gyvų ląstelių kiekviename šlapių kapsulių grame.
  4. 4. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-3 punktų, kur tirštiktis yra ksantano guma arba celiuliozė, arba jų mišinys.
  5. 5. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-4 punktų, besiskirianti tuo jog aprašytas polimeras sudarytas iš alginato.
  6. 6. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-5 punktų, besiskirianti tuo jog bent viena iš baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų yra kokogliukozido 17 metiloleatas ir (arba) kokamido dietanolaminas ir (arba) kokogliukozidas.
  7. 7. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-5 punktų, besiskirianti tuo jog bent viena iš baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų yra kokamido propilbetainas.
  8. 8. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-5 punktų, besiskirianti tuo jog bent viena iš baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų yra natrio laurilsulfatas.
  9. 9. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-8 punktų, besiskirianti tuo jog aprašytas konservantas yra greipfrutų sėklų ekstraktas ir (arba) terpenas ir (arba) d-limonenas.
  10. 10. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-9 punktų, besiskirianti tuo jog aprašytos kvapiosios medžiagos yra iš augalų vaisiakūnių, vaisių ar sėklų ekstraktų/aliejų iš Azadirachta indica, Urtica dioica, Chamomila recutita.
  11. 11. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-5, 8 punktų besiskirianti tuo jog sudėtyje yra 1g polimerinių kapsulių su inkapsuliuotomis gyvybingomis bakterijų ląstelėmis mišinyje su 100 ml baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų, kurių sudėtis ir santykis nurodytas lentelėje:
    Junginys CAS Nb. Masė, [%] Natrio laurilsulfatas (SLS 70 %) 68891-38-3 6,4 Alkil (C8-C10) poligliukozidas (70 %) 68515-73-1 3,6 (Kokamido DEA 85 %) 68603-42-9 2,8 Glicerolis 56-81-5 4 Apelsinų terpenai 5989-27-5 0,35 Kvapai 233799 0,1 D-pantenolis - 0,4
    Etil hidroksietil (EHEC) celiuliozė 9004-58-4 0,9 Konservantas terpenai) (Apelsinų 26172-55-4 2682-20-4 100-51-6 0,2 Citrinų rūgštis 5949-29-1 0,015
  12. 12. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-5 punktų, besiskirianti tuo jog sudėtyje yra 1g polimerinių kapsulių su inkapsuliuotomis gyvybingomis bakterijų ląstelėmis mišinyje su 100 ml baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų, kurių sudėtis ir santykis nurodytas lentelėje:
    Junginys CAS Nb. Masė, [%] Natrio kokoilgliutamatas 68187-30-4 10 Kokogliukozidas 110615-47-9, 68515-73-1 7,0 Kokobetainas 66455-29-6 5,0 Nimbamedžio ekstraktas (Azadirachta indica) 84696-25-3/ 90063-92-6 1 Ramunėlių ekstraktas - 1 Dilgėlių ekstraktas 84012-40-8 1 Ksantano guma 11138-66-2 0,75 Pieno rūgštis/80 598-82-3 0,5 Konservantas ACNIBIO C PLŪS 90045-43-5 0,06
  13. 13. Skysta kompozicija pagal bet kurį iš 1-5 punktų, besiskirianti tuo jog sudėtyje yra 1g polimerinių kapsulių su inkapsuliuotomis gyvybingomis bakterijų ląstelėmis mišinyje su 100 ml baktericidinių paviršiaus aktyviųjų medžiagų, kurių sudėtis ir santykis nurodytas lentelėje:
    Junginys CAS Nb. Masė, [%] Kaprililas/kaprilgliukozidas 68515-73-1 5,38 Natrio kokoilgliutamatas 68187-30-4 4 Kokobetainas 66455-29-6 6,7
    Gliceriloleatas (ir) kokogliukozidas 77-92-9, 141464-42-8 3,85 Nimbamedžio ekstraktas (Azadirachta indica) 84696-25-3/ 90063-92-6 1 Ramunėlių ekstraktas - 1 Dilgėlių ekstraktas 84012-40-8 1 Ksantano guma 11138-66-2 0,75 Konservantas (citrusinių vaisių ekstraktai) 90045-43-5 0,06
  14. 14. Inkapsuliuotų gyvybingų Gram+ ir (arba) Gram- bakterinių ląstelių naudojimas skystos kompozicijos mišinyje pagal bet kurį iš 1-13 punktų.
  15. 15. Inkapsuliuotų gyvybingų Gram+ ir (arba) Gram- bakterinių ląstelių naudojimas pagal 14 punktą, besiskiriantis tuo jog bakterijos yra B. coagulans.
LT2015103A 2015-12-10 2015-12-10 Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose LT6463B (lt)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
LT2015103A LT6463B (lt) 2015-12-10 2015-12-10 Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose
PCT/LT2015/000009 WO2017099559A1 (en) 2015-12-10 2015-12-31 Composition and method for increase of survival and stabilization of probiotic bacteria (pb) in detergent based compositions of personal hygiene and domestic products
US16/060,364 US20180360707A1 (en) 2015-12-10 2015-12-31 Composition and method for increase of survival and stabilization of probiotic bacteria (pb) in detergent based compositions of personal hygiene and domestic products
EP15848140.8A EP3386478B1 (en) 2015-12-10 2015-12-31 Composition and method for increase of survival and stabilization of probiotic bacteria (pb) in detergent based compositions of personal hygiene and domestic products

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
LT2015103A LT6463B (lt) 2015-12-10 2015-12-10 Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT2015103A LT2015103A (lt) 2017-06-26
LT6463B true LT6463B (lt) 2017-10-10

Family

ID=55640800

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT2015103A LT6463B (lt) 2015-12-10 2015-12-10 Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20180360707A1 (lt)
EP (1) EP3386478B1 (lt)
LT (1) LT6463B (lt)
WO (1) WO2017099559A1 (lt)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11376207B2 (en) 2017-10-31 2022-07-05 L'oreal Hair care compositions
US11123276B2 (en) 2018-02-28 2021-09-21 L'oreal Cosmetic compositions

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002028402A1 (en) 2000-10-06 2002-04-11 Société des Produits Nestlé S.A. Use of probiotic lactic acid bacteria for balancing the skin's immune system
WO2003070260A1 (en) 2002-02-21 2003-08-28 Societe Des Produits Nestle S.A. A photoprotective orally administrable composition for skin
FR2889057A1 (fr) 2005-08-01 2007-02-02 Oreal Composition cosmetique et/ou dermatologique pour la prevention et/ou le traitement des peaux sensibles ou seches
EP2306970A1 (en) 2008-07-29 2011-04-13 L'Oréal Cosmetic use of microorganisms for the treatment of oily skin

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004035885A1 (en) 2002-10-13 2004-04-29 Nizo Food Research B.V. Wet spinning process
EP1778021B1 (en) 2004-07-19 2008-09-03 Unilever Plc Ice-containing products
US20080107699A1 (en) 2006-10-25 2008-05-08 Mark Spigelman Method of using topical probiotics for the inhibition of surface contamination by a pathogenic microorganism and composition therefor
AU2008323624B2 (en) 2007-11-14 2014-01-30 The University Of Queensland Device and method for preparing microparticles
ES2595733T3 (es) 2008-10-16 2017-01-03 Ganeden Biotech, Inc. Composiciones probióticas a base de cereales
US9186642B2 (en) 2010-04-28 2015-11-17 The Procter & Gamble Company Delivery particle
RU2651466C2 (ru) 2011-05-16 2018-04-19 ОРГАНОБАЛАНС Медикал АГ Новые молочнокислые бактерии и содержащие их составы против бактериальных простудных заболеваний
WO2013188626A2 (en) 2012-06-15 2013-12-19 Dow Global Technologies Llc Probiotic-containing particles having improved probiotic stability when in aqueous formulations
EP3016511B1 (en) 2013-07-02 2019-10-09 Austrianova Singapore Pte Ltd. A method of freeze-drying encapsulated cells, compositions suitable for freezing of encapsulated cells and use of such compositions
WO2015019307A1 (en) 2013-08-07 2015-02-12 University Of Saskatchewan Microcapsules containing probiotics and methods of making same

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002028402A1 (en) 2000-10-06 2002-04-11 Société des Produits Nestlé S.A. Use of probiotic lactic acid bacteria for balancing the skin's immune system
WO2003070260A1 (en) 2002-02-21 2003-08-28 Societe Des Produits Nestle S.A. A photoprotective orally administrable composition for skin
FR2889057A1 (fr) 2005-08-01 2007-02-02 Oreal Composition cosmetique et/ou dermatologique pour la prevention et/ou le traitement des peaux sensibles ou seches
EP2306970A1 (en) 2008-07-29 2011-04-13 L'Oréal Cosmetic use of microorganisms for the treatment of oily skin

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
REID, G. ET AL.: "Potential Uses of Probiotics in Clinical Practice.", CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, 2003
RIAZ QU ET AL.: "Recent trends and applications of encapsulating materials for probiotic stability.", CRIT REV FOOD SCI NUTR., 2013
TSAO, R. ET AL.: "Antioxidant isoflavones in orange, maclura pomifera", J AGRIC FOOD CHEM, 2003
VASILY N. ET AL.: "A Highly Efficient Procedure for the Extraction of Soluble Proteins from Bacterial Cells with Mild Chaotropic Solutions", CHEM. ENG. TECHNOL., 2008
WALKER WA: "Mechanisms of action of probiotics", CLIN INFECT DIS., 2008
WANG, Y.C., YU, R.C. AND CHOU, C-C.: "Antioxidative activities of soymilk fermented with lactic acid bacteria and bifidobacteria", FOOD MICROBIOL, 2006
YESILOVA, Y. ET AL.: "Effect of Probiotics on the Treatment of Children with Atopic Dermatitis", ANNALS OF DERMATOLOGY, 2002

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017099559A1 (en) 2017-06-15
US20180360707A1 (en) 2018-12-20
EP3386478B1 (en) 2024-03-13
LT2015103A (lt) 2017-06-26
EP3386478A1 (en) 2018-10-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zahi et al. Enhancing the antimicrobial activity of d-limonene nanoemulsion with the inclusion of ε-polylysine
KR101955683B1 (ko) 천연 추출물을 함유하는 친환경 손소독제 조성물
Silva et al. Co-encapsulation of guaraná extracts and probiotics increases probiotic survivability and simultaneously delivers bioactive compounds in simulated gastrointestinal fluids
AU2017289331B2 (en) Preservation of microorganisms
JP2017007984A (ja) 皮膚常在菌バランスを改善する皮膚洗浄料
KR100666830B1 (ko) 고추냉이 추출물이 봉입된 알긴산염 마이크로캡슐 및 그제조방법
LT6463B (lt) Probiotinių bakterijų (pb) gyvybingumo ir stabilumo padidinimas detergentų turinčiuose asmens higienos ir buities priežiūros produktuose
WO2004091569A2 (en) Activated citrus peel extract
KR20060117875A (ko) 항균 세정제 조성물
KR102630857B1 (ko) 우모 세탁용 친환경 세제 조성물
AU2013289294B2 (en) Use of zinc coceth sulfate as an antibacterial agent against Propionibacterium acnes
CN110106039A (zh) 一种含胶态银的婴幼儿抑菌洗衣液
KR20200064622A (ko) 박하, 오레가노, 생강 및 계피의 복합추출물을 함유하는 탈취 및 항균용 화장료 조성물
KR102283637B1 (ko) 과피 발효물을 포함하는 고기능성 화장료 조성물
KR101581706B1 (ko) 고사리 열수추출물 발효액을 함유하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법
KR102031354B1 (ko) 계지 추출물을 유효성분으로 포함하는 미생물 균총 개선용 조성물
KR102235917B1 (ko) 천연물질을 포함하는 항균 조성물
Lopes et al. Lipid-based nanostructures for the delivery of herbal antimicrobials
US11877987B2 (en) Method for preparing an Eruca sativa extract and use for shaving
KR101648130B1 (ko) 미생물 라멜라 구조물의 제조방법 및 미생물 라멜라 구조물을 포함하는 조성물
KR20190011448A (ko) 이질풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 조성물 및 이를 포함하는 손 세정제
Assis et al. Applications of (Nano) encapsulated Natural Products by Physical and Chemical Methods
KR102054911B1 (ko) 아미그달린을 유효성분으로 포함하는 미생물 균총 개선용 조성물
KR102031362B1 (ko) 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 미생물 균총 개선용 조성물
KR20240083000A (ko) 맥주효모 추출물 및 1,3-프로판디올을 포함하는 피부의 마이크로바이옴 균형 유지용 화장료 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
BB1A Patent application published

Effective date: 20170626

FG9A Patent granted

Effective date: 20171010