JP2016521123A - 骨粗鬆症の治療または予防に使用するプロバイオティクス菌株 - Google Patents
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Abstract
Description
材料と方法
輸送用溶液:全容積6ml
輸送用溶液には、Ca、Mg、Hepes(2%)、グルタミン(4mM)、D−Glc(3.5g/l)およびCaCl2・2H2O(1.47g/l)を含むハンクス平衡塩溶液(HBSS)が含まれる。溶液の[Ca2+]濃度は10.65mMである。
輸送用溶液と類似であるが外在のカルシウムを添加していない。この溶液の[Ca2+]濃度は1.22mMである。
1.輸送用溶液のみのコントロール
2.輸送用溶液中に4.02×108菌/6ml相当の凍結乾燥した0.788mgのラクトバチルス・プランタラム 299v株
3.輸送用溶液中に4.02×108菌/6ml相当のラクトバチルス・プランタラム 299v株
4.輸送用溶液中に4.95×108菌/6ml相当のラクトバチルス・プランタラム 299株
5.輸送用溶液中に4.95×108菌/6ml相当のラクトバチルス・プランタラム HEAL 19株
6.輸送用溶液中に4.95×108菌/6ml相当のAMJ 1277株。AMJ 1277はラクトバチルス・プランタラム 299vの変異株である。
1.ラクトバチルス・アシドフィルス CNCM I−2332株(La10):輸送用溶液中に+4.95×108菌/6ml相当
2.ラクトバチルス・プランタラム 299 v株:輸送用溶液中に4.02×108菌/6ml相当
3.コントロール:輸送用溶液のみ
実験1および2の結果を比較するために、検討した菌株の輸送データおよび取り込みデータを菌を含まないコントロール溶液で標準化した。したがって、すべての結果はコントロールに対するパーセントで示されている(国際公開WO99/02170での実施と同様)。また、実験1および2は、それぞれ細胞培養の16日目と21日目に実施したことに意味がある。一般的に、得られる結果の標準誤差は比較的大きい。これは菌体とCa2+の凝集によるものであり、Ca2+の利用可能性のバラつきを導く。これは、標準誤差が残りのサンプルと比較して比較的小さかった凍結乾燥菌体では観察されない。
実験1の結果は、AMJ 1277株が存在する場合のCa2+輸送が有意に改善していることを示す(134.7±18.9%,p=0.002)(図1参照)。他の菌株(Lp299vの凍結乾燥および生菌、Lp299,Lp HEAL 19)では、Ca2+輸送に有意な違いはなかった(表1参照)。La10とLp299vを検討した実験2では、Lp299vと菌体を含まないコントロールのサンプルを比較した場合、Ca2+輸送に有意な差は検出されなかった(p=0.2)。La10に関しては、同じ菌体の存在下でCa2+輸送の僅かな減少がみられ(79.5±19.3%)、この変化は有意なものであった(p=0,049)。
ここに示す取り込みデータは、2時間後に細胞中に存在するCa2+の量を示している。
実際の取り込みデータを推量するためには、細胞内のCa2+量に外側部分で検出されたCa2+量を加えるべきである。これらのデータの合計は、腸管側の膜を通して輸送されたCa2+の総量を示している。一般的に、これらの実験の結果は、菌体を含まないコントロールと比較すると、菌体の存在下で細胞内[Ca2+]が減少していることを示している(図2参照)。しかしながら、Lp299v凍結乾燥菌体とLp299v生菌の間にのみ有意な差が認められた(p=0.04およびp=0.02)。備考:中間の細胞内Ca2+レベルはCa2+の輸送量に比べてわずか数パーセントである。そのため、示されたCa2+の取り込みへの影響は輸送への影響と同じではない。高い細胞内[Ca2+]を有しているが、輸送の改善が認められないことは、Lp 299vの凍結乾燥菌および生菌で観察される。
ラクトバチルス・プランタラム299vの変異株であるAMJ1277株の存在下において、コントロールおよび他の菌株の両方に比べて、カルシウムの輸送および総取り込み量が増加した。すなわち、検討した菌株間で違いがみられた。
卵巣摘出マウスモデルとプロバイオティクス投与
卵巣摘出(ovx)は免疫状態の変化に関連した骨量減少をもたらす。本実験の目的は、プロバイオティクス投与がマウスの卵巣摘出による誘導骨量減少を予防するかどうかを検討することであった。卵巣摘出手術の2週間前から開始し、6週間飲料水で与えることによって1種類の乳酸菌(L)株であるL.paracasei DSM 13434株(L.para)、またはL.paracasei DSM 13434株、L.plantarum DSM 15312株およびDSM 15313株の3種類の菌株の混合物のいずれかをマウスに投与した。
70μm,asの解像度で作動するpQCT XCT RESEARCH M(version 4.5B,ノーランド,Fort Atkinson,Wl,USA)を用いてコンピューター断層撮影スキャンを実施した。皮質骨パラメータは大腿骨の中間骨幹領域をex vivoで解析した。
高解像度μCT解析は1172モデルμCT(Bruker micro−CT,アールツェラール、ベルギー)を使用することによって、遠位大腿骨で実施した。X線管 電圧50kV、電流201μΑ、0.5mmアルミニウムフィルターを用いて大腿骨の画像を撮った。走査回転角は180°、増大角は0.70°であった。ボクセルサイズは等方向的に4.48μmであった。スキャンの後、再構成するためにNRecon(version 1.6.9)を使用した。大腿骨において遠位成長板の近位にある海綿骨を選択し、対象物(皮質骨を除く)の適合体積内で、成長板から538.5μmの距離から開始し、近位方向においてさらに134.5μmの縦の距離に広げて解析した。皮質の測定は大腿骨の骨幹領域において、成長板から3.59mmの距離で開始し、さらに近位方向に縦134.5μmの距離に広げて実施した。BMD解析のためにセラミックの標準サンプルを用いて装置を較正した。
TriZol試薬(Invitrogen,リディンゲ,スウェーデン)を用いて皮質骨(大腿骨の末端を切り離し、凍結前にPBSで骨髄を洗い流したもの)および骨髄から全RNAを準備した。高容量cDNA逆転写キット(#4368814,Applied Biosystems,ストックホルム,スウェーデン)を用いて、このRNAをcDNAに逆転写した。ABI Prism 7000 遺伝子配列検出システム(PE Applied Biosystems)を用いてRT−PCR解析を実施した。IL−6(Mm00446190_m1)、IL−1β(Mm00434228_m1)、TNFα(Mm00443258_m1)、RANKL(Mm00441908_m1)、OPG(Mm00435452_m1)、Runx2(Mm00501580_m1)、Col1α1(Mm00801666_g1)、オステオカルシン(Mm01741771_g1 )およびTGFβ1(Mm03024053_m1)のmRNAレベルを解析するために事前に設定されたApplied Biosystems(スウェーデン)のRT−PCRアッセイを使用した。「標準曲線法」を用いてそれぞれの遺伝子のmRNA量を算出し(ユーザー報告2:PE Applied Biosystems)、18S(4308329)リボゾームRNAの発現量で補正した。
血清および尿中のカルシウム量[QuantiChrom(商品名)Calcium Assay Kit(DICA−500),Bioassays systems,Hayward,CA,USA]並びに血清および尿中のクレアチニン量(Mouse Creatinine Kit,Crystal Chem,Downers Grove,IL,USA)は、取り扱い説明書に従って解析を行った。骨吸収のマーカーとしてタイプIコラーゲン断片の血清レベルをRatLaps ELISAキット(Nordic Bioscience Diagnostics,Herlev,Denmark)を用いて評価した。骨形成のマーカーであるオステオカルシンの血清レベルは、マウスのオステオカルシン免疫放射測定キット(Immutopics,San Clemente,CA)を用いて測定した。
シリンジを用いて1つの大腿骨の骨腔内に5mlのPBSを通して洗い流すことによって骨髄細胞を採取した。515gで5分間遠心した後、赤血球を溶解するために、沈殿した細胞をTris緩衝液0.83% NH4Cl溶液(pH 7.29)に5分間再懸濁した後、PBSで洗浄した。使用する前に骨髄細胞をRPMI培養液(PAA Laboratories,パシング、オーストリア)に再懸濁した。骨髄細胞中の総白血球数は自動細胞数測定装置(Sysmex,ハンブルク、ドイツ)を用いて算出した。フローサイトメトリー解析のために、ヘルパーT細胞を検出するためのアロフィコシアニン(APC)を結合したCD4抗体(Beckton−Dickinson)および細胞障害性T細胞を検出するためのフルオレセイン・イソチオシアネート(FITC)を結合したCD8抗体(Beckton−Dickinson)、または顆粒球を測定するためのGr−1/Ly−6Gに対するペリジニンクロロフィルタンパク(PerCP)を結合した抗体(BioLegend)およびOCL前駆体細胞を検出するためのFITCを結合したCD11b抗体(Beckton−Dickinson)を用いて細胞を染色した。その後、その細胞をFACSCalibur(BD Pharmingen,フランクリン・レイクス,NJ USA)の蛍光活性化自動細胞測定装置(FACS)で処理し、FlowJoソフトウエアを用いて解析した。結果は細胞比率(%)として示した。
すべての統計結果をmeans±SEMとして示す。群間差は対応のないt検定を用いて解析した。多群間の比較は一元配置分散分析(ANOVA)を用いて解析し、多重比較を補正するためにDunnett検定を実施した。両側検定においてp≦0.05は、有意差があると判断した。
ovxによる皮質骨量減少に対するプロバイオティック投与の予防効果を検討するために、8週齢のマウスにビヒクル(veh)、1種類の乳酸菌(L)株(L.para)、または3種類の菌株の混合物(L.mix)をovxまたは偽手術の2週間前から開始し、6週間投与した(図3A)。子宮重量はエストロゲン状態の指標として使用でき、ovxはすべての投与群で同じように子宮重量が予想どおりに減少した。さらに、すべての投与群においてovxにより体重、脂肪量および胸腺重量が増加した(図3B、表2)。
ovx誘導性の皮質骨量減少に対するプロバイオティクス投与の効果のメカニズムを調べるために、皮質骨の骨関連のmRNA転写物を測定した(図5)。破骨細胞形成を促進する骨髄細胞によって産生される炎症性サイトカインであるTNFαおよび骨のTNFαの効果を抑制制御するIL−1βのmRNAレベルは、ovxマウスのビヒクル投与と比較するとプロバイオティクス投与によって有意に減少した(TNFα−46%,p<0.05;IL−1β−61%,p<0.05,図5aおよび図5b)。IL−6の発現は投与群間で差はなかったが、プロバイオティクス投与群において発現が減少する傾向にあった(−20%,p=0.12,図5c)。
プロバイオティクス菌によって生じる抗炎症効果のいくつかは制御性T細胞(Treg)誘導を介していると考えられる。骨髄のFACS解析では、Treg細胞(CD4+ CD25+ Foxp3+)の発現頻度がビヒクル投与されたマウスではovxによって減少したが、プロバイオティクス投与マウスでは減少しなかった(表2)。Treg細胞は、その誘導や維持がTGFβに依存しており、TGFβ1の発現はビヒクル投与したovxマウスと比較すると、プロバイオティクス投与したovxマウスの骨髄において増加した(+77±19%,p<0.01)。
カルシウムの尿分画排泄率(FECa=(尿中Ca×血清クレアチニン)/(血清Ca×尿中クレアチン))は、ビヒクル投与したマウスではovxによって増加した(+86%,p<0.05,図6)。ovxによるFECaの増加はプロバイオティクス投与によって完全に阻害され、カルシウム増加を増大させることが示唆された(図6)。ビヒクル投与したマウスでは、ovx後に血清カルシウムレベルの増加傾向がみられたが、プロバイオティクス投与マウスでは認められなかった(+13%,p=0.05,表3)。尿中カルシウム/クレアチニン比はいずれの投与群でもovxの影響を受けなかった(表3)。
海綿骨パラメータは、大腿骨の遠位骨幹端領域の高解像度μCTによって解析された:組織体積あたりの海綿骨パーセンテージ(BV/TV);海綿骨の無機物密度(BMD)。大腿骨骨髄細胞をCD4,Foxp3,CD25,CD11bおよびGr1を認識する抗体を用いて染色した。値は総骨髄細胞数中のTreg細胞(CD4+、Foxp3+、CD25+)またはpre−OCL細胞(CD11b+、Gr1−)のパーセンテージで示す。結果は各群、mean±SEM,n=6〜10、群間は**p<0.01,*p<0.05,Student’s t test ovx vs.sham,#p<0.05,ANOVA−Dunnettsで示す。
本実験では、上述のものと同じプロバイオティクスが、卵巣摘出し、それにより既に骨量が減少している雌マウスにおいて、上記と同じパラメータ(すなわち、皮質骨量、骨無機質含量、骨再吸収)に影響するかどうかを検討する。卵巣摘出雌マウスは女性の閉経後の骨量減少のモデルとして確立されている。実験のタイムラインを下記に示す。
卵巣摘出マウス→4週間→6週間のプロバイオティクス投与→終了
Claims (9)
- 哺乳動物、好ましくはヒトにおける骨粗鬆症の治療もしくは予防用、またはCa2+イオンの吸収の増加に用いるラクトバチルス・パラカゼイから選択される少なくとも1つのプロバイオティクス菌株、またはラクトバチルス・プランタラムから選択される少なくとも1つのプロバイオティクス菌株と併用されるラクトバチルス・パラカゼイから選択される少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 骨粗鬆症の治療もしくは予防が、皮質骨量の減少、骨ミネラル含量の減少および骨再吸収を防止することによりなされる請求項1に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 前記ラクトバチルス・パラカゼイから選択される少なくとも1つのプロバイオティクス菌株が、ラクトバチルス・パラカゼイ 8700:2,DSM 13434およびラクトバチルス・パラカゼイ 02:A,DSM 13432から選択される請求項1に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 前記ラクトバチルス・プランタラムから選択される少なくとも1つのプロバイオティクス菌株が、ラクトバチルス・プランタラム 299,DSM 6595、ラクトバチルス・プランタラム 299v,DSM 9843、ラクトバチルス・プランタラム HEAL 9,DSM 15312、ラクトバチルス・プランタラム HEAL 19,DSM 15313およびラクトバチルス・プランタラム HEAL 99,DSM 15316から選択される請求項1〜3のいずれか一項に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 前記少なくとも1つのプロバイオティクス菌株が、さらに少なくとも1つの担体を含む組成物中に存在する請求項1〜4のいずれか一項に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 前記組成物が含有するCa2+の量が、8〜320mg、好ましくは120〜240mgである請求項5に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 前記組成物が、食品、補助食品、医療食、機能性食品および栄養製品から成る群から選択される請求項5または6に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 前記菌株が、約1×106〜約1×1014CFUの量で、好ましくは1×108〜1×1012CFUの量で、より好ましくは1×109〜1×1011CFUの量で存在している請求項1〜7のいずれか一項に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
- 更年期と関連した骨粗鬆症の治療もしくは予防用の請求項1〜8のいずれか一項に記載の少なくとも1つのプロバイオティクス菌株。
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KR102107443B1 (ko) * | 2018-08-31 | 2020-05-07 | (주)바이오리듬 | 여성 갱년기 증상 예방 또는 치료용 유산균 프로바이오틱스 제제 |
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EP3846830A4 (en) * | 2018-09-05 | 2022-07-06 | Solarea Bio, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF MUSCULOSKELETAL DISEASES |
KR102120479B1 (ko) * | 2018-10-30 | 2020-06-09 | 주식회사 종근당바이오 | 프로바이오틱스를 유효 성분으로 포함하는 이차성 골다공증의 예방 또는 치료용 조성물 |
GB201905386D0 (en) * | 2019-04-16 | 2019-05-29 | Probi Ab | Probiotic compositions and uses thereof |
CN111109607A (zh) * | 2020-01-10 | 2020-05-08 | 青岛康益生物科技有限公司 | 一种用于预防和治疗骨质疏松症的健康食品 |
CN111718903A (zh) * | 2020-06-24 | 2020-09-29 | 江南大学 | 一种筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物的方法 |
CN111621449B (zh) * | 2020-07-02 | 2022-07-12 | 安徽善和生物科技有限公司 | 一种益生菌及其在继发性骨质疏松中的应用 |
TWI770811B (zh) * | 2021-02-05 | 2022-07-11 | 國立臺灣大學 | 一種益生菌、其組合物及用途 |
CN115607595B (zh) * | 2021-07-13 | 2023-12-22 | 百岳特生物技术(上海)有限公司 | 诺丽果发酵物于制备改善体态及肌肤状况的组合物的用途 |
WO2023092150A1 (en) | 2021-11-22 | 2023-05-25 | Solarea Bio, Inc. | Methods and compositions for treating musculoskeletal diseases, treating inflammation, and managing symptoms of menopause |
US20230190834A1 (en) | 2021-12-21 | 2023-06-22 | Solarea Bio, Inc. | Immunomodulatory compositions comprising microbial entities |
CN114634901B (zh) * | 2022-05-18 | 2022-08-30 | 微康益生菌(苏州)股份有限公司 | 一种促进骨骼健康的干酪乳杆菌lc16及其培养方法与应用 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001015715A2 (en) * | 1999-08-31 | 2001-03-08 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Composition for maintenance of bone or dental health or treatment of bone or dental disorders |
JP2008544753A (ja) * | 2005-07-05 | 2008-12-11 | プロビ エービー | Fe、Zn、Caから選択される金属およびこれらのイオンの吸収を増大させるための乳酸桿菌の使用 |
JP2009114112A (ja) * | 2007-11-06 | 2009-05-28 | Tsujido Kagaku Kk | 抗骨粗鬆症剤 |
JP2009144111A (ja) * | 2007-12-18 | 2009-07-02 | Kansai Paint Co Ltd | 塗料組成物及び塗膜形成方法 |
JP2012526551A (ja) * | 2009-05-14 | 2012-11-01 | プロビ アクチエボラグ | プロバイオティックジュース飲料 |
KR20130002543A (ko) * | 2011-06-29 | 2013-01-08 | 주식회사 쎌바이오텍 | 골다공증 예방 또는 치료용 조성물 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1003532B2 (en) * | 1997-07-05 | 2008-11-05 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Lactobacilli to increase absorption of minerals by intestinal cells |
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CN1927010A (zh) * | 2005-09-06 | 2007-03-14 | 天津科技大学 | 具有增加骨密度、抑制血管紧张素转化酶功能的无乳糖发酵大豆乳及其制备方法 |
WO2007040446A1 (en) * | 2005-10-06 | 2007-04-12 | Probi Ab | Use of lactobacillus for treatment of autoimmune diseases |
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Patent Citations (6)
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WO2001015715A2 (en) * | 1999-08-31 | 2001-03-08 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Composition for maintenance of bone or dental health or treatment of bone or dental disorders |
JP2008544753A (ja) * | 2005-07-05 | 2008-12-11 | プロビ エービー | Fe、Zn、Caから選択される金属およびこれらのイオンの吸収を増大させるための乳酸桿菌の使用 |
JP2009114112A (ja) * | 2007-11-06 | 2009-05-28 | Tsujido Kagaku Kk | 抗骨粗鬆症剤 |
JP2009144111A (ja) * | 2007-12-18 | 2009-07-02 | Kansai Paint Co Ltd | 塗料組成物及び塗膜形成方法 |
JP2012526551A (ja) * | 2009-05-14 | 2012-11-01 | プロビ アクチエボラグ | プロバイオティックジュース飲料 |
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