JP2016507729A5 - - Google Patents

Claims (10)

1. １種以上の夾雑物質から１種以上の目的生体分子をクロマトグラフィー分離する方法であって、
   （ａ）分離マトリックス粒子の圧密化ベッドを有する軸流クロマトグラフィーカラムを用意するステップであって、圧密化ベッドは下部担体ネットと可動上部アダプターの間に納められている、ステップ、
   （ｂ）カラムで目的生体分子を１種以上の夾雑物質から分離するステップ、
   （ｃ）アダプターを圧密化ベッドの高さの１０％以上持ち上げるステップ、
   （ｄ）第１の洗浄液を、ベッドを液状化するのに十分な条件下で、ベッドを上方向に通過させるステップ、及び
   （ｅ）液状化ベッドのマトリックス粒子を再充填して圧密化ベッドを作り、アダプターを下降させて充填ベッドと接触させ、適宜圧縮させるステップ、及び
   （ｆ）カラムで目的生体分子を１種以上の夾雑物質から分離するステップ
   を含む、方法。
2. １種以上の夾雑物質から１種以上の目的生体分子をクロマトグラフィー分離する方法であって、
   （ａ）分離マトリックス粒子の圧密化ベッドを有する軸流クロマトグラフィーカラムを用意するステップであって、圧密化ベッドは下部担体ネットと可動上部アダプターの間に納められている、ステップ、
   （ｂ）カラムで目的生体分子を１種以上の夾雑物質から分離するステップ、
   （ｃ）圧密化ベッドを充填解除し、マトリックス粒子を別の洗浄容器に移送するステップ、
   （ｄ）洗浄容器内のマトリックス粒子を第１の洗浄液と接触させるステップ、
   （ｅ）洗浄済みのマトリックス粒子をカラムに戻し、圧密化ベッドを再充填するステップ、及び
   （ｆ）カラムで目的生体分子を１種以上の夾雑物質から分離するステップ
   を含む、方法。
3. さらに、ステップ（ｂ）の後、第２の洗浄液を圧密化ベッドに送って通過させることによってカラムを洗浄するステップ（ｂ’）、及び適宜ステップ（ｂ）とステップ（ｂ’）を少なくとも１度繰り返すことを含む、請求項１又は請求項２記載の方法。
4. さらに、ステップ（ｄ）で液状化ベッドを撹拌することを含んでおり、適宜、撹拌が、（ｉ）液状化ベッド又はマトリックス粒子を震動又は超音波処理すること、（ｉｉ）１以上のノズルからのジェット流による撹拌、及び／又は（ｉｉｉ）ステップ（ｄ）での振動流を含む、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
5. 分離マトリックス粒子が、純水と平衡化したときに、１．０ｇ／ｍｌ〜１．４ｇ／ｍｌ、例えば１．０ｇ／ｍｌ〜１．０５ｇ／ｍｌ、の密度を有する、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
6. マトリックス粒子が、固定化タンパク質リガンド、例えば固定化されたプロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＬ、ラクダ科の動物の一本鎖抗体又はそれらの機能的異種、を含む、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
7. 第１の洗浄液がアルカリ性、例えば１０以上、１２以上、１３以上又は１３〜１４のｐＨ値を有するもの、である、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
8. （ｉ）クロマトグラフィーカラムの内径が２．５ｃｍ以上、例えば１０ｃｍ以上、２０ｃｍ以上又は１０ｃｍ〜２００ｃｍ、であり、（ｉｉ）圧密化ベッドの高さが５ｃｍ〜５０ｃｍであり、及び／又は（ｉｉｉ）クロマトグラフィーカラムの内径と圧密化ベッドの高さの比が０．４以上、例えば０．４〜４０、である、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
9. さらに、ステップ（ｄ）とステップ（ｅ）の間に、洗浄済みのマトリックス粒子の試料を回収し、試料を純度に関し分析するステップ、及び／又はステップ（ｆ）の後、第２の目的生体分子を回収し、適宜さらに精製してから薬剤調合に使用するステップを含む、請求項１乃至請求項２０のいずれか１項記載の方法。
10. 充填ベッドクロマトグラフィーカラムを洗浄及び／又は衛生化する方法であって、
    （ａ）分離マトリックス粒子の圧密化ベッドを有する軸流クロマトグラフィーカラムを用意するステップであって、圧密化ベッドは下部担体ネットと可動上部アダプターの間に納められている、ステップ、
    （ｂ）アダプターを圧密化ベッドの高さの１０％以上持ち上げるステップ、
    （ｃ）洗浄液を、ベッドを液状化するのに十分な条件下で、ベッドを上方向に通過させるステップ、及び
    （ｄ）充填流体を下方向にカラムを通過させて液状化ベッドのマトリックス粒子を再充填して圧密化ベッドを作り、アダプターを下降させて充填ベッドと接触させ、適宜圧縮させるステップ
    を含む、方法。