JP2016507535A - 安定したノカチアシン凍結乾燥製剤 - Google Patents
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Abstract
ノカチアシン、安定化剤、賦形剤、ｐＨ調整剤と注射用水からなる薬液を凍結乾燥して調製してなり、安定化剤はポリエチレングリコール、ポリソルベート又は両者の混合物から選ばれるものであり、薬液のｐＨ値は１．０〜６．０である、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤。【選択図】なし
Description
本発明は医薬分野に属し、具体的には、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤に関するものである。
ノカチアシンは土壌から分離された、新たな構造と著しい抗菌力を有する新型抗薬剤耐性菌薬物であり、チオペプチド類抗生物質の中で最も臨床応用の見込みのある一員である（Ｊ． Ａｎｔｉｂｉｏｔ． ２００３， ２６： ２３２〜２４２参照）。チオペプチド類抗生物質の共通の特徴として、ノカチアシンはその他の同類の抗生物質と同様に特別の強疎水性多環構造を有することから、極めて劣る水溶性を招いた。ノカチアシンの水溶性を改善するために、そのデヒドロアラニン側鎖、インドールとピリジン環におけるヒドロキシ基に対して、一連の化学と生物的修飾、改造、検討を多く行ったが、調製が複雑であること、安全問題を起こすこと等の要因により、いずれも成功しなかった（Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ， ２００２， ６７（２４）： ８６９９〜８７０２； Ｊ Ｎａｔ Ｐｒｏｄ， ２００５， ６８（４）： ５５０〜５５３； Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ， ２００４， １４（１４）： ３７４３〜３７４６参照）。
しかしながら、先行文献によると、ノカチアシンは１μｇ／ｍｌのレベルを下回る場合、殆どのグラム陽性菌、特にメチシリン耐性菌の黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ペニシリン耐性肺炎球菌（ＰＲＳＰ）、バンコマイシン耐性の腸球菌（ＶＲＥ）及び薬剤耐性を有する結核菌に対して、超強の殺菌活性（Ｊ． Ａｎｔｉｂｉｏｔ． ２００３， ５６： ２２６〜２３１参照）を備える。これは、ノカチアシンは臨床上で極僅かな投与量だけあれば、治療効果に達することが可能であることを示している。このような臨床投与量が極僅かな薬物については、開発される製剤の規格が小さいので、溶解度が低いという問題は薬剤学的方法で解決しやすいことが多く、その臨床応用を制限する重要な要素とならない。ところが、ノカチアシンはポリペプチド類薬物として、安定性が却ってその製剤開発における最も解決する必要のある大問題となる。
出願番号は２０１０１０５４８１２９．８であり、名称は「乳化剤含有ノカチアシン抗生物質薬物組成物」である中国特許では、ノカチアシンと薬物キャリヤーに加え、さらに水溶性乳化剤と脂溶性乳化剤を含み、前記薬物キャリヤーは水相及び油相からなるノカチアシン抗生物質含有薬物組成物が開示されている。出願番号は２０１０１０５４８１４２．３であり、名称は「脂質材料含有ノカチアシン抗生物質の薬物組成物」である中国特許では、主薬のノカチアシンと脂質材料を含み、前記脂質材料はリン脂質又はコレステロールから選ばれるノカチアシン抗生物質含有薬物組成物が開示されている。出願番号は２０１０１０５４８１３４．９であり、名称は「ノカチアシン抗生物質含有薬物組成物」である中国特許では、具体的にはノカチアシン、薬物キャリヤー及び親水性物質を含み、前記親水性物質は共溶媒又は可溶化剤から選ばれ、前記薬物キャリヤーはｐＨ４〜９の生理的溶解媒体であるノカチアシン抗生物質含有薬物組成物が開示されている。上記特許はそれぞれ異なる製剤手段によって、ノカチアシンの溶解度を向上させた。しかしながら、上記特許はいずれもノカチアシンの液体製剤であり、ノカチアシンの溶解性が悪いという問題しか解決せず、ノカチアシンの安定性については考察していなかった。ノカチアシンはチオペプチド類化合物であり、湿気、熱、光等の環境要素に敏感になり、分解しやすいので、ノカチアシンの溶解度を向上するとともに、安定したノカチアシン製剤を得ることは現在非常に必要な検討方向である。
タンパク質又はポリペプチド類薬物の活性に影響する要素が多く、主として二つある。一つは分子量の大きさ、アミノ酸組成、アミノ酸配列、ジスルフィド結合の有無、ジスルフィド結合の位置、空間構造を含む構造要素であり、もう一つはタンパク質分子周囲の環境要素であり、タンパク質又はポリペプチドは複雑な物理化学的要素に影響されて、凝集、沈澱、加水分解、脱アミド等の変化が生じる。凍結乾燥とは、薬品を低温で凍結させた後、真空条件にて昇華乾燥させ、氷晶を除去し、昇華終了後、また脱離乾燥を行い、一部の結合水を除去する乾燥方法を言う。凍結乾燥技術は条件が温和で、製品の含水量が小さいため、長期間に亘り、タンパク質、ポリペプチドの活性を保持することが可能である。従って、タンパク質又はポリペプチド類薬物は凍結乾燥製剤を採用することが多い。
凍結乾燥はその他の製剤方法に比べ、以下のようなメリットがある：
１）薬液は凍結乾燥前に分割充填されるので、分割充填しやすく、正確で連続性が図れる；２）処理条件が温和で、低温低圧下にて乾燥されることにより、熱敏物質の活性保持に寄与し、高温高圧下の分解変性を回避でき、タンパク質が変性しないことを実現させる；３）含水量が低く、凍結乾燥製品の含水量は一般的に１％〜３％であり、同時に、真空、更にはＮ２バブリングして保護する状況において乾燥と保存が可能であり、製品は酸化されにくく、長距離輸送と長期間保存に有利である；４）製品は外観が優良で、多孔質でほぐれた構造である上に色が殆ど変化せず、再水和性がよく、凍結乾燥薬品が迅速に吸水して凍結乾燥前の状態に戻ることが可能である；５）凍結乾燥設備は閉塞作業のため、取付環境の清浄度が高く、雑菌と微粒子の汚染を低減し、乾燥中と封止後における酸素欠乏は、殺菌及びある細菌の活力抑制の働きをする。
１）薬液は凍結乾燥前に分割充填されるので、分割充填しやすく、正確で連続性が図れる；２）処理条件が温和で、低温低圧下にて乾燥されることにより、熱敏物質の活性保持に寄与し、高温高圧下の分解変性を回避でき、タンパク質が変性しないことを実現させる；３）含水量が低く、凍結乾燥製品の含水量は一般的に１％〜３％であり、同時に、真空、更にはＮ２バブリングして保護する状況において乾燥と保存が可能であり、製品は酸化されにくく、長距離輸送と長期間保存に有利である；４）製品は外観が優良で、多孔質でほぐれた構造である上に色が殆ど変化せず、再水和性がよく、凍結乾燥薬品が迅速に吸水して凍結乾燥前の状態に戻ることが可能である；５）凍結乾燥設備は閉塞作業のため、取付環境の清浄度が高く、雑菌と微粒子の汚染を低減し、乾燥中と封止後における酸素欠乏は、殺菌及びある細菌の活力抑制の働きをする。
しかしながら、ポリペプチドとタンパク質薬物は凍結乾燥製剤を採用する時に、補助材料を選択する要求が厳しく、補助材料の不適切な選択は製品が安定せず活性を失うことにつながる。なお、凍結乾燥前に薬液を調製するための溶剤は任意に選択してはならず、水又はある氷点の高い有機溶剤のみに限定されるものとする。凍結乾燥品は再水和溶解時に濁る現象が現れることがあり、これらはいずれも凍結乾燥製剤開発において考慮及び実験検討しなければならないものである。
現在は凍結乾燥ノカチアシン製剤及び安定性について検討した先行文献がない。
本発明の目的は、ノカチアシンの溶解度を向上するとともに、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤を提供することにある。
本発明の具体的な技術方案は以下の通りである：
ノカチアシン、安定化剤、賦形剤、ｐＨ調整剤と注射用水からなる薬液を凍結乾燥調製してなり、前記安定化剤はポリエチレングリコール、ポリソルベート又は両者の混合物から選ばれるものであり、前記薬液のｐＨ値は１．０〜６．０である、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤。
ノカチアシン、安定化剤、賦形剤、ｐＨ調整剤と注射用水からなる薬液を凍結乾燥調製してなり、前記安定化剤はポリエチレングリコール、ポリソルベート又は両者の混合物から選ばれるものであり、前記薬液のｐＨ値は１．０〜６．０である、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤。
前記ノカチアシンの薬液に占める重量／体積パーセント（単位体積あたり重量パーセント）は０．００５％〜２％である。
前記安定化剤の薬液に占める重量／体積パーセントは６％〜３０％であり、好ましくは８％〜１８％である。
前記賦形剤の種類と使用量は当業者に周知の種類と通常に使用される量であり、塩化ナトリウム、ブドウ糖、乳糖、マンニトール、トレハロース、キシリトール、蔗糖、ソルビトール、デキストラン、アルブミン、ヒドロキシエチル澱粉、グリシン中の一種類又は複数種類の混合物が好ましく、好ましくは賦形剤の薬液に占める重量／体積パーセントは５％〜５０％であり、より好ましくは５〜３０％である。
前記ｐＨ調整剤は当業者に周知の種類であり、塩酸、クエン酸、リン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸中の一種類又は複数種類の混合物が好ましく、その使用量は溶液がｐＨ１〜６となるように調整する量である。
本発明に記載されるノカチアシン凍結乾燥製剤は、さらに緩衝剤を含み、前記緩衝剤はクエン酸塩、乳酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、リン酸塩中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれ、緩衝剤の使用量は当業者が通常に使用する量であり、好ましくは０．０４〜１．０％である。
本発明に記載されるノカチアシンはノカチアシンＩ、ノカチアシンＩＩ又はノカチアシンＩＩＩから選ばれるものである。
本発明に記載されるノカチアシン凍結乾燥製剤の規格は０．１ｍｇ〜１００ｍｇである。
本発明に記載されるポリエチレングリコールは、ポリエチレングリコール２００、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール６００中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれる。
本発明に記載されるポリソルベートは、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれる。
上記のノカチアシン凍結乾燥製剤は、好ましくは薬液のｐＨは２．０〜５．０であり、より好ましくはｐＨは２．０〜３．５である。
生理的ｐＨ条件で、ノカチアシンの溶解度は約１０μｇ／ｍＬに過ぎない。本発明はノカチアシンの溶解度がｐＨ依存性となる特徴を利用して、ｐＨ調整剤により、適切にｐＨ値を下げ、ノカチアシンの水中における溶解度を向上する。
本発明は処方検討にあたって、含有量が６〜３０％であるポリエチレングリコール又はポリソルベート又は両者の混合物は凍結乾燥製剤の再溶解性とノカチアシンの安定性を向上することができる。
出願番号は２０１０１０５４８１３４．９であり、名称は「ノカチアシン抗生物質含有薬物組成物」である中国特許では、共溶媒としてポリエチレングリコールを用い、可溶化剤としてポリソルベートを用いる技術方案を含むが、当該特許においては、ポリエチレングリコールが高い濃度でしかよい溶解補助効果が得られず、低分子量のＰＥＧの融点が低いので、ポリエチレングリコールの含有量が高すぎると製品が凍結乾燥されにくく、賦形性が悪いこととなる。なお、注射製品において、ＰＥＧの体積分率が４０％よりも大きい時、溶血現象が観察できる。当該特許ではポリソルベートの使用量が低く、可溶化の役割しか果たさず、剤形の安定化と薬物の活性保持の働きをすることができない。
本発明に記載されるノカチアシン凍結乾燥製剤は通常の凍結乾燥方法で調製でき、好ましくは以下のような方法で調製する。
（１）ノカチアシン薬液の調製：
（１ａ）配合量の最終の薬液体積で、重量体積比（単位体積あたり重量パーセント）で、０．００５％〜２％のノカチアシンを６％〜３０％のポリエチレングリコール又はポリソルベート又は両者の混合物、あるいは対応する飽和水溶液中に溶解させる；
（１ｂ）ｐＨ調整剤と賦形剤あるいはｐＨ調整剤、賦形剤と他の補助材料を８０％の最終薬液体積量の注射用水中に溶解させる；
（１ｃ）以上の二種類の溶液を均一に混合し、溶液がｐＨ１〜６となるように調整する；
（１ｄ）注射用水を配合量までに補充し、均一に混合し、除菌ろ過し、充填を行う；
（２）ノカチアシン薬液を凍結乾燥させる：
（２ａ）予備凍結：ノカチアシン薬液の温度を−４０±２℃まで低減した後、２〜４時間保温し、予備凍結製品を得る；
（２ｂ）昇華乾燥：真空ポンプを開いて、凍結乾燥箱内が真空度?２０Ｐａとなるように制御し、棚板温度を−２０±２℃まで上昇させ、６〜８時間保持した後、棚板温度を０±２℃まで上昇させ、２〜４時間保温する；
（２ｃ）二次乾燥：棚板温度が０±２℃となるように保持し、凍結乾燥箱内を真空度?５Ｐａまで低減させ、２〜４時間維持後、昇華乾燥製品の温度を２５±２℃まで上昇させるとともに、凍結乾燥箱内を真空度?３Ｐａまで低減させ、８〜１２時間保温し、ノカチアシン凍結乾燥製剤を調製する。
（１）ノカチアシン薬液の調製：
（１ａ）配合量の最終の薬液体積で、重量体積比（単位体積あたり重量パーセント）で、０．００５％〜２％のノカチアシンを６％〜３０％のポリエチレングリコール又はポリソルベート又は両者の混合物、あるいは対応する飽和水溶液中に溶解させる；
（１ｂ）ｐＨ調整剤と賦形剤あるいはｐＨ調整剤、賦形剤と他の補助材料を８０％の最終薬液体積量の注射用水中に溶解させる；
（１ｃ）以上の二種類の溶液を均一に混合し、溶液がｐＨ１〜６となるように調整する；
（１ｄ）注射用水を配合量までに補充し、均一に混合し、除菌ろ過し、充填を行う；
（２）ノカチアシン薬液を凍結乾燥させる：
（２ａ）予備凍結：ノカチアシン薬液の温度を−４０±２℃まで低減した後、２〜４時間保温し、予備凍結製品を得る；
（２ｂ）昇華乾燥：真空ポンプを開いて、凍結乾燥箱内が真空度?２０Ｐａとなるように制御し、棚板温度を−２０±２℃まで上昇させ、６〜８時間保持した後、棚板温度を０±２℃まで上昇させ、２〜４時間保温する；
（２ｃ）二次乾燥：棚板温度が０±２℃となるように保持し、凍結乾燥箱内を真空度?５Ｐａまで低減させ、２〜４時間維持後、昇華乾燥製品の温度を２５±２℃まで上昇させるとともに、凍結乾燥箱内を真空度?３Ｐａまで低減させ、８〜１２時間保温し、ノカチアシン凍結乾燥製剤を調製する。
従来技術と比べ、本発明は以下のようなメリットを有する：
１、ｐＨ調整剤と安定化剤の使用により、乳剤、脂質体、ミセル、クロスフェア等の複雑な製剤を調製する必要がなく、ノカチアシン溶解度を向上するとともに、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤を得ることができる。
２、本発明に使用されるポリエチレングリコールの含有量は先行文献よりも低く、製品をよく賦形し、ポリエチレングリコールによる溶血のリスクも軽減された。そして、本発明に使用される安定化剤は同時に可溶化効果を有し、補助材料の品類と数量を少なくし、さらに製品の安全性に有利である。
３、本発明の製品の配合工程が簡単で実行しやすいので、工業的に生産を拡大しやすい。工程において有機溶剤を使用せず、環境にやさしい。
４、現在ノカチアシンについての検討は、主としてその溶解度向上の面に集中しており、本発明はノカチアシンの溶解度を向上するとともに、製剤における化学安定性を解決したため、ノカチアシンが臨床応用へ移行することが可能となる。処方の選別により、具体的には、本発明は、０００５％〜２％のノカチアシン、６％〜３０％の安定化剤、ｐＨ調整剤、組成物を含み、凍結乾燥法で調製され、組成物は２５℃、相対湿度６０％にで六ヶ月間密閉して放置され、ノカチアシンの含有量は放置前の９０％を下回らない安定した薬物組成物を提供する。
１、ｐＨ調整剤と安定化剤の使用により、乳剤、脂質体、ミセル、クロスフェア等の複雑な製剤を調製する必要がなく、ノカチアシン溶解度を向上するとともに、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤を得ることができる。
２、本発明に使用されるポリエチレングリコールの含有量は先行文献よりも低く、製品をよく賦形し、ポリエチレングリコールによる溶血のリスクも軽減された。そして、本発明に使用される安定化剤は同時に可溶化効果を有し、補助材料の品類と数量を少なくし、さらに製品の安全性に有利である。
３、本発明の製品の配合工程が簡単で実行しやすいので、工業的に生産を拡大しやすい。工程において有機溶剤を使用せず、環境にやさしい。
４、現在ノカチアシンについての検討は、主としてその溶解度向上の面に集中しており、本発明はノカチアシンの溶解度を向上するとともに、製剤における化学安定性を解決したため、ノカチアシンが臨床応用へ移行することが可能となる。処方の選別により、具体的には、本発明は、０００５％〜２％のノカチアシン、６％〜３０％の安定化剤、ｐＨ調整剤、組成物を含み、凍結乾燥法で調製され、組成物は２５℃、相対湿度６０％にで六ヶ月間密閉して放置され、ノカチアシンの含有量は放置前の９０％を下回らない安定した薬物組成物を提供する。
以下に具体的実施例に基づき、さらに本発明を説明する。これらの実施例は本発明を説明するためのものであり、本発明の応用範囲を制限することに用いられるものではないことが理解される。なお、本発明に教示されている内容を読み上げた後、当業者は本発明について様々な変更又は修正を行うことができ、これらの等価形態は同様に本出願の添付する請求の範囲に限定される範囲内にあることが理解される。
［実施例１：ノカチアシンＩ溶解度とｐＨとの関係］
過剰量のノカチアシンＩ原料をそれぞれプラグ付き試験管に入れて、一定量のｐＨ２、ｐＨ３、ｐＨ４、ｐＨ５、ｐＨ６とｐＨ７の緩衝液を仕込み、溶液が常に過飽和状態にあるように保証し、室温で２４時間振とうさせた。その後、薬液を０．２２μｍの精密ろ過膜によりろ過し、次のろ液を高速液体クロマトグラフに取って、薬物の含有量を測定した。クロマトグラフの条件は以下の通りである：
クロマトグラフィーカラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ、１５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ。
移動相：Ａ：蒸留水に０．０５％ＴＦＡが含まれる；Ｂ：ニトリルに０．０５％ＴＦＡが含まれる。
グラジエント：グラジエント溶離３２ｍｉｎ、３０％〜６０％Ｂ。
カラム温度：４０℃、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
波長：３６２ｎｍ、注入量：１０μｌ。
過剰量のノカチアシンＩ原料をそれぞれプラグ付き試験管に入れて、一定量のｐＨ２、ｐＨ３、ｐＨ４、ｐＨ５、ｐＨ６とｐＨ７の緩衝液を仕込み、溶液が常に過飽和状態にあるように保証し、室温で２４時間振とうさせた。その後、薬液を０．２２μｍの精密ろ過膜によりろ過し、次のろ液を高速液体クロマトグラフに取って、薬物の含有量を測定した。クロマトグラフの条件は以下の通りである：
クロマトグラフィーカラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ、１５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ。
移動相：Ａ：蒸留水に０．０５％ＴＦＡが含まれる；Ｂ：ニトリルに０．０５％ＴＦＡが含まれる。
グラジエント：グラジエント溶離３２ｍｉｎ、３０％〜６０％Ｂ。
カラム温度：４０℃、流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
波長：３６２ｎｍ、注入量：１０μｌ。
結果は図１に示すように、ｐＨ１〜７の範囲内において、ノカチアシンＩの溶解度がｐＨの向上に伴い低くなることが分かった。薬液のｐＨを６以下に抑えれば、濃度が０．５ｍｇ／ｍＬ以上のノカチアシンＩ溶液を得ることができる。
［実施例２：安定化剤の選別］
採用される配合成分は以下の通りである：
採用される配合成分は以下の通りである：
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
異なる安定化剤から調製した凍結乾燥製品の再溶解安定性を考察し、結果を表２に示す。
以上の結果から、ポリエチレングリコール類とポリソルベート類補助材料は安定化剤として用いられる場合、再溶解安定性が最も良いことが分かった。
［実施例３］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ２．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例４］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例５］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例６］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ５．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例７］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．５までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例８］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ４．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例９］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ４．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例１０］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ１．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例１１］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例１２］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ６．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［比較例１］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ２．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［比較例２］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［比較例３］
工程：配合量のノカチアシンＩと安定化剤を量り取り、撹拌溶解させた。配合量の他の各補助材料を量り取り、８００ｍＬの注射用水を仕込み、撹拌溶解させた。二つの溶液を混合させ、ｐＨ３．０までに調整し、注射用水を１０００ｍＬまでに補充し、０．２２μｍの微孔濾膜にてろ過し、分割充填し、凍結乾燥させ、ノカチアシン凍結乾燥粉末が得られた。
［実施例１３：ノカチアシンＩ凍結乾燥製剤の再溶解安定性］
各比較例と実施例から得られた凍結乾燥製剤の外観を観察し、再溶解させ、３時間静置し、再溶解後の現象を観察した。結果を表１６に示す。
各比較例と実施例から得られた凍結乾燥製剤の外観を観察し、再溶解させ、３時間静置し、再溶解後の現象を観察した。結果を表１６に示す。
表１６の結果から、凍結乾燥前に薬液に安定化剤を含まないノカチアシン粉末注射剤は再溶解安定性が悪い（比較例１、２）が、安定化剤含有量が３０％以上の粉末注射剤（比較例３）は、再溶解性が良好であるが、凍結乾燥製品が粘稠で半固体状となり、賦形性に劣ることが分かった。
［実施例１４］
実施例３、９、１１を例にして、安定化剤を含まないノカチアシンＩ凍結乾燥製剤（比較例１、２）と安定化剤を含有するノカチアシンＩ凍結乾燥製剤（実施例３、９、１１）を２５℃、相対湿度６０％において六ヶ月間放置し、それぞれ１、２、３、６ヶ月の時にサンプリングし、実験例１中の高速液体クロマトグラフィーの条件に従い、関連物質の含有量を測定した。結果を表１７に示す。
実施例３、９、１１を例にして、安定化剤を含まないノカチアシンＩ凍結乾燥製剤（比較例１、２）と安定化剤を含有するノカチアシンＩ凍結乾燥製剤（実施例３、９、１１）を２５℃、相対湿度６０％において六ヶ月間放置し、それぞれ１、２、３、６ヶ月の時にサンプリングし、実験例１中の高速液体クロマトグラフィーの条件に従い、関連物質の含有量を測定した。結果を表１７に示す。
以上の結果から、安定化剤の使用により、明らかにノカチアシンＩの凍結乾燥製剤における安定性を向上できることが分かった。
Claims (10)
- ノカチアシン、安定化剤、賦形剤、ｐＨ調整剤および注射用水からなる薬液を凍結乾燥して調製してなり、前記安定化剤はポリエチレングリコール及び／またはポリソルベートから選ばれ、前記薬液のｐＨ値は１．０〜６．０である、安定したノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記ノカチアシンの薬液に占める単位体積あたり重量パーセントは０．００５％〜２％であることを特徴とする、請求項１に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記安定化剤の薬液に占める単位体積あたり重量パーセントは６％〜３０％であることを特徴とする、請求項１に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記安定化剤の薬液に占める単位体積あたり重量パーセントは８％〜１８％であることを特徴とする、請求項３に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記賦形剤の薬液に占める単位体積あたり重量パーセントは５％〜５０％であることを特徴とする、請求項１に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- さらに緩衝剤を含み、前記緩衝剤はクエン酸塩、乳酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、リン酸塩中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記ポリエチレングリコールはポリエチレングリコール２００、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、ポリエチレングリコール６００中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれ、前記ポリソルベートはポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記薬液のｐＨは２．０〜５．０であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記ｐＨ調整剤は、塩酸、クエン酸、リン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
- 前記賦形剤は塩化ナトリウム、ブドウ糖、乳糖、マンニトール、トレハロース、キシリトール、蔗糖、ソルビトール、デキストラン、アルブミン、ヒドロキシエチル澱粉、グリシン中の一種類又は複数種類の混合物から選ばれることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項に記載のノカチアシン凍結乾燥製剤。
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