JP2016188262A - 口腔用組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】殺菌剤として塩化セチルピリジニウムを選択し、且つこれをケイヒ又はその抽出物と一体不可分の関係で組み合わせることにより、これらが相乗的に作用して、口腔内でバイオフィルムを形成している細菌に対して殺菌作用を顕著に発揮させることが可能になる。
【選択図】なし
Description
項1. (A)塩化セチルピリジニウムと、(B)ケイヒ、チョウジ、及びそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも1種とを含有することを特徴とする、口腔用組成物。項2. (A)成分100重量部当たり、(B)成分が(抽出物の場合は原料重量換算)が0.0005〜10000000重量部である、項1に記載の口腔用組成物。
項3. 製剤形態がトローチである、項1又は2に記載の口腔用組成物。
項4. う蝕予防剤又は歯周病予防剤である、項1〜3のいずれかに記載の口腔用組成物。
項5. 口臭予防剤である、項1〜3のいずれかに記載の口腔用組成物。
また、本発明の口腔用組成物は、歯周病及び口臭の原因菌であるフゾバクテリウム・ヌクレアータム及びポルフィロモナス・ジンジバリスがバイオフィルムを形成している場合に対して、殺菌作用をとりわけ強く発揮できるので、歯周病予防や口臭予防に対して特に有効である。
、本発明について詳述する。
ケイヒの抽出物の製造原料として使用されるケイヒは、ケイヒそのまま、その粉砕物又は細切物であってもよく、また乾燥後、必要に応じて粉砕又は細切したものであってもよい。
塩化セチルピリジニウム及びケイヒについて、バイオフィルムを形成しているフゾバクテリウム・ヌクレアータム及びポルフィロモナス・ジンジバリスに対する殺菌作用を評価するために以下の試験を行った。
表1に示す組成の試験液を以下の手法で調製した。セチルピリジニウム塩化物水和物(CPC)(和光純薬工業株式会社製)を蒸留水に溶解し、その後、ろ過滅菌フィルターを用いて滅菌して、0.02w/v%のCPC水溶液を作製した。別途、ケイヒ末(日本粉末薬品株式会社製)を蒸留水に懸濁し、1w/v%のケイヒ末懸濁液を作製し、これを37℃で時々軽く振り混ぜながら5分間インキュベートした後に、3000rpmで3分間遠心して、上澄みを回収し、これを1w/v%のケイヒ末水溶液とした。1w/v%のケイヒ末水溶液をろ過滅菌フィルターを用いて滅菌し、その後、蒸留水で100倍希釈して、0.01w/v%のケイヒ水溶液を作製した。斯して得られた0.02w/v%のCPC水溶液、0.01w/v%のケイヒ末水溶液、及び滅菌蒸留水を適宜混合することにより、表1に示す試験液を調製した。
15mL遠沈管に液体培地(5μg/mlヘミン及び0.5μg/mlメナジオン添加GAMブイヨン培地)10mLを入れ、そこへ25%グリセロールストック(−80℃で凍結)状態のポルフィロモナス・ジンジバリスとフゾバクテリウム・ヌクレアータムを各々適量植菌し、35℃で2〜3日間嫌気培養した。これらの2菌種の培養液を液体培地でOD660が0.002となるよう希釈し、両希釈液を1:1の容量比で混合した。この混合液を96ウェルプレートへ200μL/ウェルとなるよう分注し、35℃で7日間嫌気培養することにより、ウェル中でバイオフィルムを形成させた。次いで、ウェルの壁面に付着しているバイオフィルムが残存するように、ウェル中の培養液をやさしく除き、その後、ウェルに表1に示す各試験液を220μLずつやさしく添加し、室温で5分間静置した。その後、各ウェルから試験液を除去し、50mMのHEPESバッファー200μLをやさしく添加した。その後、各ウェルを最小出力で10秒間超音波処理し、ウェル中のバイオフィルムを剥離・分散させて、菌懸濁液を得た。なお、この超音波処理条件では、試験に使用した細菌が死なないことを予め確認している。得られた菌懸濁液を50mMのHEPESバッファーを用いて適宜希釈し、希釈液100μLを平板培地(5μg/mlヘミン、0.5μg/mlメナジオン、及び1.5%寒天末添加GAMブイヨン培地)に塗布して、2〜3日間嫌気培養を行い、形成されたコロニー数をカウントすることにより、残存細菌数を求めた。
得られた結果を表1に示す。表1には、比較例1の試験液における残存細菌数を1とした場合の各試験液における相対残存菌数を示した。本試験の結果から、CPC単独(比較例1)又はケイヒ単独(比較例2)の場合では、バイオフィルムを形成している細菌を僅かに殺菌するに止まっており、バイオフィルムに深在する細菌を殺菌できなかった。一方、CPCとケイヒを併用した場合(実施例1)では、バイオフィルムを形成している細菌を大幅に死滅させることができ、バイオフィルムに深在する細菌も殺菌できることが示唆された。この結果から、CPCとケイヒを併用することにより、バイオフィルムを形成している細菌に対する殺菌効果が相乗的に増強されて奏されることが明らかとなった。
CPC及びケイヒの濃度を変えたこと以外は、上記試験例1と同様の方法で、バイオフィルムを形成しているフゾバクテリウム・ヌクレアータム及びポルフィロモナス・ジンジバリスに対する殺菌作用を評価した。本試験で使用した試験液のCPC及びケイヒの濃度は、表2に示す通りである。
ケイヒ末の代わりにチョウジ末(日本粉末薬品株式会社製)を使用したこと以外は、上記試験例1と同様の方法で、バイオフィルムを形成しているフゾバクテリウム・ヌクレアータム及びポルフィロモナス・ジンジバリスに対する殺菌作用を評価した。本試験で使用した試験液のCPC及びチョウジの濃度は、表3に示す通りである。
CPC(和光純薬工業株式会社製)、イソプロピルメチルフェノール(IPMP)(大阪化成株式会社製)、塩酸クロルヘキシジン(CHX)(相互薬工株式会社製)、トリクロサン(TC)(BASFジャパン株式会社製)、ケイヒ末(日本粉末薬品株式会社製)、アセンヤク末(日本粉末薬品株式会社製)を使用して、上記試験例1と同様の方法で、バイオフィルムを形成しているフゾバクテリウム・ヌクレアータム及びポルフィロモナス・ジンジバリスに対する殺菌作用を評価した。なお、なお、各試験液に配合したケイヒ末及びアセンヤク末については、試験例1で調製した0.01w/v%のケイヒ末水溶液と同様の方法で、0.01w/v%の濃度の水溶液を調製し、CPC、IPMP、CHX及びTCについては、試験例1で調製した0.02w/v%のCPC水溶液と同様の方法で、0.02w/v%の濃度の水溶液を調製し、これらを使用した。本試験で使用した試験液の組成は、表4に示す通りである。
表5に示す試験液を上記試験例及び比較試験例と同様の方法で調製した。この試験液をバイオフィルムに作用させた後に、バイオフィルムの細菌臭の経時的変化を測定した。具体的には、試験例1と同様の方法で、96ウェルプレートの各ウェル中に、ポルフィロモナス・ジンジバリスとフゾバクテリウム・ヌクレアータムを用いてバイオフィルムを形成させた。次いで、ウェルの壁面に付着しているバイオフィルムが残存するように、ウェル中の培養液をやさしく除き、その後、ウェルに表5に示す各試験液を220μLずつやさしく添加し、室温で5分間静置した。その後、各ウェルを最小出力で10秒間超音波処理し、ウェル中のバイオフィルムを剥離・分散させて、菌懸濁液を得た。なお、この超音波処理条件では、試験に使用した細菌が死なないことを予め確認している。得られた菌懸濁液100μLを液体培地(5μg/mlヘミン、0.5μg/mlメナジオンを含むGAMブイヨン培地)10mLに添加し、25℃で120時間嫌気培養を行った。嫌気培養期間中、経時的に培養液の臭気を確認し、以下の判定基準に従って評価した。
<臭気の判定基準>
○:悪臭(細菌臭)は全く感じられない(培地の臭いのみが感じられる)
△:僅かに悪臭(細菌臭)が感じられる
×:強い悪臭(細菌臭)が感じられる
Claims (5)
- (A)塩化セチルピリジニウムと、(B)ケイヒ、チョウジ、及びそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも1種とを含有することを特徴とする、口腔用組成物。
- (A)成分100重量部当たり、(B)成分(抽出物の場合は原料重量換算)が0.0005〜10000000重量部である、請求項1に記載の口腔用組成物。
- 製剤形態がトローチである、請求項1又は2に記載の口腔用組成物。
- う蝕予防剤又は歯周病予防剤である、請求項1〜3のいずれかに記載の口腔用組成物。
- 口臭予防剤である、請求項1〜3のいずれかに記載の口腔用組成物。
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