JP2016010392A - 培養袋及び培養方法 - Google Patents

Abstract

【課題】培養液が漏れるおそれを低減した培養袋を提供する。【解決手段】培養袋１０は、被培養物８ａを含む培養液８を収容して被培養物を培養する。培養袋は、前後方向ｄ１に対向して配置された一対の主面フィルム１２、１３と、一対の主面フィルム１２、１３の間で、上下方向ｄ２に対向して配置された一対の他面フィルム１４、１５と、を備える。互いに重ねられたフィルム１２〜１５の周縁がヒートシールされてシール領域１６、１７が形成される。上他面フィルム１４の周縁のうちの、表主面フィルム１２とヒートシールされた第１部分１４ａと裏主面フィルム１３とヒートシールされた第２部分１４ｂとの境界となる境界部分１４ｃに沿って、上他面フィルム１４を折り畳んだときに、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとの重なり合う位置に、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する固定領域９０が設けられている。【選択図】図１０

Description

本発明は、被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋及び当該培養袋を有する培養装置を用いて被培養物を培養する培養方法に関する。

抗体医薬やワクチンなどのバイオ医薬品の開発や製造において、シングルユース製品（使い捨て製品）が着実に浸透しつつある。シングルユース製品は洗浄や滅菌のバリデーション作業が必要ないこと、交叉汚染がないこと、簡易的に無菌環境が得られることなどのメリットがあるため、バイオ医薬品の開発コストを大幅に削減できる場合がある。

近年シングルユース製品として、被培養物を含む培養液を収容して培養を行う３Ｄ培養装置が注目されてきている（例えば特許文献１乃至４参照）。３Ｄ培養装置では、エアーを培養袋内に供給しながら撹拌器によって培養液を撹拌して被培養物を培養する。

典型的な培養液を収容する培養袋は、前後方向に対向する一対の主面フィルム本体と、一対の主面フィルム本体の間で上下方向に対向する一対の他面フィルム本体と、を有している。培養袋は、一対の主面フィルム本体及び一対の他面フィルム本体の重ねられた周縁をヒートシールすることにより製袋される。この場合、各他面フィルム本体の周縁に、一方の主面フィルム本体とヒートシールされた部分と、他方の主面フィルム本体とヒートシールされた部分と、の境界となる境界部分が規定される。したがって、この境界部分付近には、この境界部分を含む他面フィルム本体及び当該境界部分を挟んで対面する２つの主面フィルム本体の合計で３つのフィルムが集まることになる。

特開２０１２−１７０３６４号公報 特開２０１２−４４９４３号公報 特許第５１４８７１８号明細書 特許第４９８６６５９号明細書

培養中に、培養袋内に供給されるエアーあるいは培養液圧送等、培養袋に加えられるなんらかの負荷によって培養袋に大きな応力が発生すると、前記境界部分周りに応力が集中してしまう場合がある。境界部分周りに応力が集中すると、当該境界部分を含む他面フィルム本体及び当該境界部分を挟んで対面する２つの主面フィルム本体が平面状に引き延ばされる。この結果、当該３つのフィルムの間に隙間が形成され、この隙間から培養袋内の培養液が漏れてしまうおそれがあった。

本発明はこのような点を考慮してなされたものであり、培養液が漏れるおそれを低減した培養袋及び当該培養袋を有する培養装置を用いて被培養物を培養する培養方法を提供することを目的とする。

本発明による第１の培養袋は、被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋であって、一方向に対向する一対の主面フィルム本体を含む主面フィルムと、前記一対の主面フィルム本体の間で、前記一方向に交差する他方向に対向して配置された一対の他面フィルム本体と、を備え、主面フィルム本体の周縁と他面フィルム本体の周縁とがヒートシールされて第１シール領域が形成され、主面フィルム同士がヒートシールされて第２シール領域が形成され、一方の他面フィルム本体の周縁のうちの、一方の主面フィルム本体とヒートシールされた第１部分と他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第２部分との境界となる境界部分に沿って、前記一方の他面フィルム本体を折り畳んだときに、前記第１部分と前記第２部分との重なり合う位置に、前記第１部分と前記第２部分とを固定する固定領域が設けられている。

本発明による第１の培養袋において、前記第１部分と前記第２部分とを接合する接合材料によって、前記固定領域が形成されていてもよい。

本発明による第１の培養袋において、前記第１部分に孔が形成され、前記境界部分に沿って前記一方の他面フィルム本体を折り畳んだときに前記第１部分に形成された孔と重なり合う前記第２部分の位置に、孔が形成され、前記接合材料は、前記第１部分に形成された孔と、前記第２部分に形成された孔とに、充填されていてもよい。

本発明による第１の培養袋において、前記第１部分とヒートシールされた前記一方の主面フィルム本体の部分と、前記第２部分とヒートシールされた前記他方の主面フィルム本体の部分と、に亘って貼り付けられた接合テープによって前記第１部分と前記第２部分とが互いに固定され、前記固定領域が規定されていてもよい。

本発明による第１の培養袋において、前記第１部分とヒートシールされた前記一方の主面フィルム本体の部分と、前記第２部分とヒートシールされた前記他方の主面フィルム本体の部分と、を挟持するクリップ部材によって前記第１部分と前記第２部分とが互いに固定され、前記固定領域が規定されていてもよい。

本発明による第１の培養袋において、前記固定領域は、前記境界部分から前記他方向にずれた位置に配置されていてもよい。

本発明による第２の培養袋は、被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋であって、一方向に対向する一対の主面フィルム本体を含む主面フィルムと、前記一対の主面フィルム本体の間で、前記一方向に交差する他方向に対向して配置された一対の他面フィルム本体と、を備え、主面フィルム本体の周縁と他面フィルム本体の周縁とがヒートシールされて第１シール領域が形成され、主面フィルム同士がヒートシールされて第２シール領域が形成され、一方の主面フィルム本体の第１シール領域及び第２シール領域をなす部分以外の部分と、一方の他面フィルム本体の第１シール領域をなす部分以外の部分と、が重なる位置に、前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体とを固定する固定領域が設けられていて、前記固定領域は、前記一方の他面フィルム本体の周縁のうちの、前記一方の主面フィルム本体とヒートシールされた第１部分と他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第２部分との境界となる境界部分よりも袋内方に位置している。

本発明による第２の培養袋において、前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体とがヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されていてもよい。

本発明による第２の培養袋において、前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体との間に追加フィルム片が配置されていて、前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体と共に前記追加フィルム片がヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されていてもよい。

本発明による第３の培養袋は、被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋であって、一方向に対向する一対の主面フィルム本体を含む主面フィルムと、前記一対の主面フィルム本体の間で、前記一方向に交差する他方向に対向して配置された一対の他面フィルム本体と、を備え、主面フィルム本体の周縁と他面フィルム本体の周縁とがヒートシールされて第１シール領域が形成され、主面フィルム同士がヒートシールされて第２シール領域が形成され、一対の主面フィルム本体の第１シール領域及び第２シール領域をなす部分以外の部分が互いに重なる位置に、当該一対の主面フィルム本体を互いに固定する固定領域が設けられていて、前記固定領域は、一方の主面フィルム本体の周縁のうちの、他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第３部分と一方の他面フィルム本体とヒートシールされた第４部分との境界となる境界部分よりも袋内方に位置している。

本発明による第３の培養袋において、前記一対の主面フィルム本体の互いに重なる部分がヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されていてもよい。

本発明による第３の培養袋において、一対の主面フィルム本体の互いに重なる部分の間に追加フィルム片が配置されていて、一対の主面フィルム本体の互いに重なる部分と共に前記追加フィルム片がヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されていてもよい。

本発明による培養方法は、前記いずれかの特徴をもつ培養袋を有する培養装置を用いて被培養物を培養する培養方法であって、前記培養袋内に加圧状態で培養液を注入する工程と、前記培養袋内にエアーを供給し前記培養袋内を加圧状態にして被培養物を培養する工程と、を備える。

本発明によれば、固定領域が境界部分の周りに応力が集中することを緩和するように機能する。これにより、境界部分を含む他面フィルム本体及び境界部分を挟んで対面する２つの主面フィルム本体が平面状に引き延ばされて形成され得る隙間から培養液が漏れるおそれを低減することができる。

本発明の第１の実施の形態による培養装置を示す正面図。 図１に示す培養装置の培養袋を示す斜視図。 図２に示す培養袋の分解斜視図。 図２に示す培養袋の表主面フィルム本体を示す正面図。 図２に示す培養袋の裏主面フィルム本体を示す正面図。 図２に示す培養袋の上他面フィルム本体を示す平面図。 図２に示す培養袋の下他面フィルム本体を示す平面図。 図２に示す培養袋を構成する各フィルムの層構成の一例を示す断面図。 図２に示す線IX−IXに沿った培養袋の断面を示す断面図。 図２に示す一点鎖線で囲まれた領域Ａを拡大して示す部分斜視図。 図１０に対応する図であって、固定領域の変形例を示す部分斜視図。 図１０に対応する図であって、固定領域のさらなる変形例を示す部分斜視図。 図１０に対応する図であって、本発明の第２の実施の形態による培養装置を示す部分斜視図。 図１３に対応する図であって、固定領域の変形例を示す部分斜視図。 図９に対応する図であって、本発明の第３の実施の形態による培養装置を示す部分斜視図。 図１５に対応する図であって、固定領域の変形例を示す部分斜視図。

≪第１の実施の形態≫
以下、図面を参照して本発明の一実施の形態について説明する。なお、本明細書に添付する図面においては、図示と理解のしやすさの便宜上、適宜縮尺及び縦横の寸法比等を、実物のそれらから変更し誇張してある。図１乃至図１０は、本発明による第１の実施の形態を説明するための図である。このうち図１は、本発明の第１の実施の形態による培養装置１を示す正面図であり、図２は、図１に示す培養装置１の培養袋１０を示す斜視図である。

図１に示す培養装置１は、細胞、微生物、菌等の被培養物８ａを含む培養液８を収容して被培養物８ａを培養するためのものである。図１に示すように、培養装置１は、培養液８を収容する培養袋１０と、培養袋１０内で回転可能に設けられた攪拌器３０と、を備えている。このうち、培養袋１０は、図２に示すように、一方向ｄ１に対向して配置された一対の主面フィルム本体１２、１３を含む主面フィルム１１と、一対の主面フィルム本体１２、１３の間で、一方向ｄ１に交差する他方向ｄ２に対向して配置された一対の他面フィルム本体１４、１５と、を有している。培養装置１の設置状態において、一対の主面フィルム本体１２、１３は前後方向に対向し、一対の他面フィルム本体１４、１５は上下方向に対向する。したがって、培養装置１の設置状態において、一方向ｄ１は前後方向に一致し、他方向ｄ２は前後方向に直交する上下方向に一致する。以下では、培養装置１の設置状態を基準として、培養装置１を構成する各構成要素について説明していく。したがって、一方向を前後方向ｄ１とし、他方向を上下方向ｄ２とする。

攪拌器３０は、培養袋１０内で回転可能に設けられ、上下方向ｄ２に延びる回転シャフト３１と、回転シャフト３１に設けられた複数の撹拌翼３２と、を有している。回転シャフト３１の上端部及び下端部は、培養袋１０に回転可能に支持されている。すなわち、培養袋１０の上面をなす上他面フィルム本体１４には、回転シャフト３１の上端部を回転可能に支持する上側軸受部３３が設けられ、培養袋１０の下面をなす下他面フィルム本体１５には、回転シャフト３１の下端部を回転可能に支持する下側軸受部３４が設けられている。攪拌器３０の回転シャフト３１の上端部には、撹拌駆動装置６から磁気カップリング方式で駆動力が伝達されるようになっている。

複数の撹拌翼３２は、上下方向ｄ２に沿って並べて配置されている。本実施の形態では、２つの撹拌翼３２が上下方向ｄ２に沿って間隔をあけて配置されている。撹拌器３０が複数の撹拌翼３２を有することにより、培養袋１０内の培養液８をよりムラなく攪拌することができるようになっている。

撹拌器３０によれば、撹拌駆動装置６から伝達される駆動力によって、攪拌器３０の回転シャフト３１および撹拌翼３２が回転するようになっている。

次に、培養液８を収容する培養袋１０について図３乃至図７も参照して説明する。図３は、培養袋１０を示す分解斜視図である。上述のように、培養袋１０は、前後方向ｄ１に対向して配置された表主面フィルム本体１２及び裏主面フィルム本体１３を含む主面フィルム１１と、表主面フィルム本体１２と裏主面フィルム本体１３との間で、上下方向ｄ２に対向して配置された上他面フィルム本体１４及び下他面フィルム本体１５と、を有している。培養袋１０は、各フィルム１２〜１５の縁部をヒートシールすることにより製袋されている。そして、各フィルム１２〜１５に囲まれる空間内に培養液８を収容する収容空間Ｓが形成されている。なお、図示する例では、主面フィルム１１は、２つのフィルム材料からなり、各フィルム材料が１つの主面フィルム本体を構成する例を示しているが、このような例に限定されない。主面フィルム１１は、単一のフィルム材料からなり、単一のフィルム材料が一方向ｄ１に対向する一対の主面フィルム本体を含んでもよい。

図４乃至図７は、それぞれ、培養袋１０の表主面フィルム本体１２、裏主面フィルム本体１３、上他面フィルム本体１４及び下他面フィルム本体１５を示す図である。図４及び図５に示すように、各主面フィルム本体１２、１３の周縁は、円弧状の上縁及び下縁と、上縁及び下縁の端部の間を延びる２つの側縁と、を有している。より詳細には、上縁は、上下方向ｄ２における上方に凸となる半円弧状の形状をもち、下縁は、上下方向ｄ２における下方に凸となる半円弧状の形状をもつ。各側縁は、上縁及び下縁の端部の間を上下方向ｄ２に沿って延びる直線状の形状をもつ。一方、図６及び図７に示すように、上他面フィルム本体１４及び下他面フィルム本体１５の周縁は、略楕円形の形状を有している。図２に示すように、培養袋１０が製袋された状態において、上他面フィルム本体１４は、下方に凸となるように撓み、前後方向ｄ１及び上下方向ｄ２に直交する横方向ｄ３に延びる折目線１４ｆに沿って折り畳み可能になっている。同様に、下他面フィルム本体１５は、上方に凸となるように撓み、前後方向ｄ１及び上下方向ｄ２に直交する横方向ｄ３に延びる折目線１５ｆに沿って折り畳み可能になっている。

上述のように、各フィルム１２、１３、１４、１５の縁部は、ヒートシールにより接合されている。ヒートシールとしては、例えばインパルスシールやバーシール、超音波溶着、振動溶着、高周波溶着、半導体レーザー溶着、スピン溶着が挙げられる。本実施の形態では、互いに重ねられた主面フィルム本体１２、１３の周縁と他面フィルム本体１４、１５の周縁とがヒートシールされて第１シール領域１６が形成されている。とりわけ、表主面フィルム本体１２の上縁と上他面フィルム本体１４の周縁とがヒートシールにより接合された領域を、上表第１シール領域１６ａと呼び、裏主面フィルム本体１３の上縁と上他面フィルム本体１４の周縁とがヒートシールにより接合された領域を、上裏第１シール領域１６ｂと呼ぶ。

上述のように、各主面フィルム本体１２、１３の上縁部は、上方に凸となるように湾曲状に形成されている。このことにより、上縁部に沿って形成される上表第１シール領域１６ａ及び上裏第１シール領域１６ｂは、上方に凸となるように湾曲状に形成されている。同様に、各主面フィルム本体１２、１３の下縁部は、下方に凸となるように湾曲状に形成されており、下縁部に沿って形成される各第１シール領域１６は、下方に凸となるように湾曲状に形成されている。

また、互いに重ねられた一対の主面フィルム本体１２、１３の周縁がヒートシールされて第２シール領域１７が形成されている。すなわち、表主面フィルム本体１２の両側縁部と裏主面フィルム本体１３の両側縁部とがヒートシールにより接合されて、第２シール領域１７がそれぞれ形成されている。図２に示す例では、各第２シール領域１７は、上下方向ｄ２に沿って略直線状に延びている。

図４に示すように、表主面フィルム本体１２には、複数の物性用開孔２３が互いに間隔を空けて配置されている。図４に示す例では、３つの物性用開孔２３が設けられており、図１に示す温度センサ５６、ｐＨセンサ５７およびＤｏ（溶存酸素）センサ５８が、対応する物性用開孔２３に挿入されている。温度センサ５６は、培養袋１０内の培養液８の温度を計測し、ｐＨセンサ５７は、培養袋１０内の培養液８のｐＨを計測し、Ｄｏセンサ５８は、培養袋１０内の培養液８の溶存酸素量を計測するためのものである。

加えて、これら３つの物性用開孔２３に並べてサンプリング用開孔２４が配置されている。サンプリング用開孔２４には、図１に示すサンプリングチューブ５９が挿入されている。表主面フィルム本体１２にサンプリングチューブ５９が取り付けられていることにより、培養中の培養液８をサンプリングチューブ５９から取り出し可能となる。

図６に示すように、上他面フィルム本体１４には、前述の上側軸受部３３を装置するための上側軸受開孔２０が形成されている。また、培養袋１０の上他面フィルム本体１４には、図１に示す培養液注入チューブ５０、気体排出部５１及び気体供給チューブ５３を取り付けるための上面開孔２１が設けられている。培養液注入チューブ５０は、不図示の培養液供給部から供給される被培養物８ａを含む培養液８を、培養袋１０内に注入するべく設けられている。

気体供給チューブ５３は、気体供給部５３ａから培養袋１０内の培養液８に空気９を供給するためのものである。気体供給チューブ５３は、上面開孔２１を通って裏主面フィルム本体１３に沿って延び、培養袋１０内に配置された気体導入部５２に接続されている。ここで、図５に示すように、気体供給チューブ５３を培養袋１０内に固定するべく、裏主面フィルム本体１３の内面に３つの保持バンド５４が取付けられている。

気体供給チューブ５３に接続された気体導入部５２は、スパージャーとも呼ばれる。気体導入部５２は、気体供給チューブ５３から供給される空気９等の気体を、培養袋１０内の培養液８に分散させて供給するためのものである。気体導入部５２は、下他面フィルム本体１５に沿って配置されている。

図７に示すように、下他面フィルム本体１５の内面には、気体導入部５２を培養袋１０内に固定するための３つの保持バンド５５が取付けられている。加えて、下他面フィルム本体１５には、前述の下側軸受部３４を装置するための下側軸受開孔２２が形成されている。

なお、培養袋１０に取り付けられる上述した培養液注入部５０、サンプリングチューブ５９のような各チューブ類及び温度センサ５６のような各種センサ類の配置は、図１に示すような配置に限られることはなく、仕様に応じて任意に設定可能である。例えば、培養袋１０の仕様の一例として、２００Ｌまで培養液を収容可能な２００Ｌ用の培養袋と、５０Ｌまで培養液を収容可能な５０Ｌ用培養袋が知られている。典型的には、図示する２００Ｌ用の培養袋では、裏主面フィルム本体１３に気体導入部５２を保持する３つの保持バンド５４が設けられ、不図示の５０Ｌ用の培養袋では、裏主面フィルム本体１３に２つの保持バンド５４が設けられ得る。

次に、培養袋１０を構成する各フィルム１２〜１５の層構成について説明する。図８は、培養袋１０を構成する各フィルム１２〜１５の層構成の一例を示す断面図である。図８に示すように、各フィルム１２〜１５をなす積層体６０は、ポリエチレン層６１、エチレンビニルアルコール層６２、ナイロン層６３及びポリエチレンテレフタレート層６４をこの順で含んでいる。一例として、積層体６０の厚みは、１００μｍ〜３５０μｍ程度に設定される。

このうち、ポリエチレン層６１は、主としてポリエチレン成分からなる層である。ポリエチレン層６１は、ヒートシール性をもち、他のフィルム１２〜１５にヒートシールされる。ポリエチレン層６１は、積層体６０の一方の表面をなしている。したがって、積層体６０からなる各フィルム１２〜１５は、ポリエチレン層６１が配置された面が他のフィルム１２〜１５側に向くようにして配置される。

エチレンビニルアルコール層６２は、主としてエチレンビニルアルコール共重合体成分からなる層である。エチレンビニルアルコール層６２は、積層体６０にガスバリア性を付与すべく設けられている。ナイロン層６３は、主としてナイロン成分からなる層である。ナイロン層６３は、積層体６０に耐ピンホール性とりわけ耐突き刺し性、耐屈曲性及び耐摩耗性を付与するべく設けられている。ポリエチレンテレフタレート層６４は、主としてポリエチレンテレフタレート成分からなる層である。ポリエチレンテレフタレート層６４は、ポリエチレン層６１、エチレンビニルアルコール層６２及びナイロン層６３を支持する基材として機能する。また、ポリエチレンテレフタレート層６４は、積層体６０に耐熱性を付与する機能をもつ。

さて、上述のように、各他面フィルム本体１４、１５は横方向ｄ３に平行な折目線１４ｆ、１５ｆに沿って折り畳み可能に構成されおり、折目線１４ｆ、１５ｆに対して表側となる他面フィルム本体１４、１５の周縁は、表主面フィルム本体１２にヒートシールされ、折目線１４ｆに対して裏側となる他面フィルム本体１４、１５の周縁は、裏主面フィルム本体１３にヒートシールされる。したがって、各他面フィルム本体１４、１５の周縁には、表主面フィルム本体１２とヒートシールされた第１部分１４ａと、裏主面フィルム本体１３とヒートシールされた第２部分１４ｂと、第１部分１４ａと第２部分１４ｂと境界となり且つ折目線１４ｆが通過する境界部分１４ｃと、が規定される。図９に、境界部分１４ｃ付近を拡大して示す。

図９に示すように、この境界部分１４ｃの周りには、この境界部分１４ｃを含む上他面フィルム本体１４及び当該境界部分１４ｃを挟んで対面する２つの主面フィルム本体１２、１３の合計で３つのフィルム１２、１３、１４が集まることになる。前述のように、培養中に、培養袋１０に大きな応力が負荷されると、境界部分１４ｃ周りに応力が集中し、当該境界部分１４ｃを含む他面フィルム本体１４及び当該境界部分１４ｃを挟んで対面する２つの主面フィルム本体１２、１３が平面状に引き延ばされ得る。これら３つのフィルム１２、１３、１４が平面状に引き延ばされた結果、当該３つのフィルム１２、１３、１４の間に隙間が形成され、この隙間から培養袋１０内の培養液８が漏れてしまうおそれがあった。そこで、図２に示すように、培養装置１は、境界部分１４ｃ周りに応力が集中することを緩和すべく、境界部分１４ｃに沿って他面フィルム本体１４を折り畳んだときに第１部分１４ａと第２部分１４ｂとの重なり合う位置に、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する固定領域９０が形成されている。このような形態によれば、固定領域９０が境界部分１４ｃの周りに集まる応力を緩和するように機能する。

なお、図２から理解されるように、このような境界部分は、上他面フィルム本体１４の周縁に２箇所形成され、下他面フィルム本体１５の周縁に２箇所形成され、合計で４つある。したがって、本実施の形態では、各境界部分にそれぞれ対応する固定領域９０が配置され、合計で４つの固定領域が設けられている。以下の説明では、図２に一点鎖線で囲まれた領域Ａに配置された固定領域９０について説明するが、その他の３つの固定領域９０についても略同様に構成することが可能である。

上述のように、固定領域９０とは、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する領域をいう。図１０に、図２に一点鎖線で囲まれた領域Ａに配置された固定領域９０を拡大して示す。図１０に示すように、固定領域９０は、境界部分１４ｃから上下方向ｄ２における上方にずれた位置に配置されている。言い換えると、固定領域９０は、境界部分１４ｃと上下方向ｄ２に対面した位置に配置されている。また、固定領域９０の輪郭は、第１部分１４ａの輪郭に囲まれる部分よりも内方に位置し、且つ、第２部分１４ｂの輪郭に囲まれる部分よりも内方に位置する。

本実施の形態の固定領域９０は、表主面フィルム本体１２の正面方向からみて略円形の輪郭を有している。ただし、固定領域９０の輪郭は、略円形の例に限定されず、種々の形状からなる例が想定され得る。

図１０に示す例では、上他面フィルム１４の周縁のうちの、表主面フィルム本体１２とヒートシールされた第１部分１４ａに、孔１４ａ１が形成され、上他面フィルム１４の周縁のうちの、裏主面フィルム本体１３とヒートシールされた第２部分１４ｂに、孔１４ｂ１が形成されている。この第１部分１４ａに設けられた孔１４ａ１と第２部分１４ｂに設けられた孔１４ｂ１とは、境界部分１４ｃに沿って上他面フィルム本体１４を折り畳んだときに、重なり合うようになっている。そして、上他面フィルム本体１４を折目線１４ｆに沿って折り畳んで第１部分１４ａの孔１４ａ１と第２部分１４ｂの孔１４ｂ１とが重なり合った状態で、第１部分１４ａの孔１４ａ１と第２部分１４ｂの孔１４ｂ１とに、接合材料９２が充填されている。したがって、接合材料９２によって第１部分１４ａと第２部分１４ｂとが固定されて、固定領域９０が形成されることになる。

次に、以上のような構成からなる本実施の形態の培養装置１の使用方法について説明する。

まず、培養袋１０内に加圧状態で培養液８を注入する工程を行う。具体的には、図１に示すように、上他面フィルム本体１４に接続された培養液注入チューブ５０から、培養袋１０内に被培養物８ａを含む培養液８が加圧状態で注入される。この際、上他面フィルム本体１４に接続された気体排出部５１から、培養袋１０内の気体が排出される。加圧状態で培養液８を注入することにより、素早く培養液８を培養袋１０内に注入することができる。

次に、培養袋１０内に気体を供給し培養袋１０内を加圧状態にして被培養物８ａを培養する工程を行う。具体的には、撹拌駆動装置６から伝達される駆動力によって、攪拌器３０の回転シャフト３１および撹拌翼３２を回転させる。これにより、培養袋１０内の培養液８が撹拌されていく。培養を行っている間、培養装置１の気体供給部５３ａから気体供給チューブ５３を通って気体導入部５２に空気９が供給される。そして、気体導入部５２から、対流している培養液８に空気９が供給され、培養袋１０内が加圧状態にされる。培養袋１０内が加圧状態となるように培養袋１０内に空気９を供給することにより、培養液８に充分な酸素を行き渡せることが可能となる。

培養が終了すると、攪拌器３０を停止させ、培養袋１０内での培養液８の撹拌が止まる。その後、培養袋１０から下側軸受部３４を介して培養液８が排出される。なお、培養中に必要に応じて、サンプリングチューブ５９から培養中の培養液８が取り出されて、培養状態の確認が行われてもよい。

以上のように、本実施の形態によれば、一方向ｄ１に対向して配置された一対の主面フィルム本体１２、１３と、一対の主面フィルム本体１２、１３の間で、一方向ｄ１に交差する他方向ｄ２に対向して配置された一対の他面フィルム本体１４、１５と、を備え、主面フィルム本体１２、１３の周縁と他面フィルム本体１４、１５の周縁とがヒートシールされて第１シール領域１６が形成され、主面フィルム１１同士がヒートシールされて第２シール領域１７が形成され、一方の他面フィルム本体１４の周縁のうちの、一方の主面フィルム本体１２とヒートシールされた第１部分１４ａと他方の主面フィルム本体１３とヒートシールされた第２部分１４ｂとの境界となる境界部分１４ｃに沿って、一方の他面フィルム本体１４を折り畳んだときに、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとの重なり合う位置に、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する固定領域９０が設けられている。このような形態によれば、固定領域９０が境界部分１４ｃの周りに集まる応力を緩和するように機能する。これにより、境界部分１４ｃを含む他面フィルム本体１４及び境界部分１４ｃを挟んで対面する２つの主面フィルム本体１２、１３が平面状に引き延ばされることを抑制することができる。この結果、３つのフィルム１２、１３、１４が平面状に引き延ばされて形成され得る隙間から培養液８が漏れるおそれを低減することができる。この結果、培養袋１０内に供給される気体あるいは培養袋１０に加えられるなんらかの負荷によって培養袋１０に大きな応力が発生しても、培養袋１０が培養液８の漏れに対して充分な耐性を発揮することができる。

さらに、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとが重なる位置に固定領域９０が設けられていることから、固定領域９０を設けることに起因して培養液８を収容する収容空間Ｓを狭める、というおそれもない。

また、本実施の形態によれば、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを接合する接合材料９２によって固定領域９０が形成されている。このような形態によれば、ヒートシールされた第１部分１４ａと、ヒートシールされた第２部分１４ｂとを、互いに堅固に固定することができる。

とりわけ、本実施の形態によれば、第１部分１４ａに孔１４ａ１が設けられ、境界部分１４ｃに沿って一方の他面フィルム本体１４を折り畳んだときに第１部分１４ａに設けられた孔１４ａ１と重なり合う第２部分１４ｂの位置に、孔１４ｂ１が設けられ、接合材料９２は、第１部分１４ａに設けられた孔１４ａ１と、第２部分１４ｂに設けられた孔１４ｂ１とに、充填されている。一般に、第１部分１４ａ及び第２部分１４ｂに孔１４ａ１、１４ｂ１を精度よく形成することは容易である。このことから、接合材料９２を、第１部分１４ａの孔１４ａ１と第２部分１４ｂの孔１４ｂ１とに充填することにより、接合材料９２を精度よく位置決めすることができる。結果として、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する固定領域９０を精度よく形成することに寄与する。

また、本実施の形態によれば、固定領域９０は、境界部分１４ｃから他方向ｄ２にずれた位置に配置されている。この場合、境界部分１４ｃに相対的に近い位置に固定領域９０を配置することができるため、収容空間Sを狭めることなく、境界部分１４ｃの周りに集まる応力を効果的に緩和することができる。

≪変形例≫
なお、上述した実施の形態に対して様々な変更を加えることが可能である。以下、図面を参照しながら、変形の一例について説明する。以下の説明および以下の説明で用いる図面では、上述した実施の形態と同様に構成され得る部分について、上述の実施の形態における対応する部分に対して用いた符号と同一の符号を用いることとし、重複する説明を省略する。

上述した実施の形態では、図１０に示すように、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを接合する接合材料９２によって、固定領域９０が形成された例を示したが、固定領域９０の形態はこのような例に限定されない。図１１及び図１２に、固定領域９０の変形例を示す。このうち、図１１に示す例では、上表第１シール領域１６ａと上裏第１シール領域１６ｂとに亘って、接合テープ９３が貼り付けられている。言い換えると、第１部分１４ａとヒートシールされた一方の主面フィルム本体１２の部分と、第２部分１４ｂとヒートシールされた他方の主面フィルム本体１３の部分と、に亘って接合テープ９３が貼り付けられている。この接合テープ９３によって、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとが互いに固定される。したがって、接合テープ９３によって、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する固定領域９０が実現される。図１１に示す例では、固定領域９０は、境界部分１４ｃから上下方向ｄ２にずれた位置に配置されている。このような形態によれば、固定領域９０が境界部分１４ｃの周りに集まる応力を緩和するように機能する。これにより、境界部分１４ｃを含む他面フィルム本体１４及び境界部分１４ｃを挟んで対面する２つの主面フィルム本体１２、１３が平面状に引き延ばされることを抑制することができる。この結果、３つのフィルム１２、１３、１４が平面状に引き延ばされて形成され得る隙間から培養液８が漏れるおそれを低減することができる。

一方、図１２に示す例では、上表第１シール領域１６ａと上裏第１シール領域１６ｂとを、クリップ部材９４が挟持している。言い換えると、第１部分１４ａとヒートシールされた一方の主面フィルム本体１２の部分と、第２部分１４ｂとヒートシールされた他方の主面フィルム本体１３の部分と、をクリップ部材９４が挟持している。このクリップ部材９４によって、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとが互いに固定される。したがって、クリップ部材９４によって、第１部分１４ａと第２部分１４ｂとを固定する固定領域９０が実現される。図１２に示す例では、固定領域９０は、境界部分１４ｃから上下方向ｄ２にずれた位置に配置されている。このような形態によれば、固定領域９０が境界部分１４ｃの周りに集まる応力を緩和するように機能する。これにより、境界部分１４ｃを含む他面フィルム本体１４及び境界部分１４ｃを挟んで対面する２つの主面フィルム本体１２、１３が平面状に引き延ばされることを抑制することができる。この結果、３つのフィルム１２、１３、１４が平面状に引き延ばされて形成され得る隙間から培養液８が漏れるおそれを低減することができる。

≪第２の実施の形態≫
次に、図１３を参照して、本発明の第２の実施の形態について説明する。図１３は、本発明の第２の実施の形態における培養装置１の要部を示す部分斜視図である。図１３を参照して説明する第２の実施の形態は、固定領域９０の形態が異なるが、その他の構成は第１の実施形態と同様に構成することができる。第２の実施の形態に関する以下の説明および以下の説明で用いる図面では、上述した第１の実施の形態と同様に構成され得る部分について、上述の第１の実施の形態における対応する部分に対して用いた符号と同一の符号を用いることとし、重複する説明を省略する。

図１３に示すように、表主面フィルム本体１２の第１シール領域１６及び第２シール領域１７をなす部分以外の部分と、上他面フィルム本体１４の第１シール領域１６をなす部分以外の部分と、が重なる位置に、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４とを固定する固定領域９０が設けられている。固定領域９０は、上他面フィルム本体１４の境界部分１４ｃよりも袋内方に位置している。本実施の形態では、固定領域９０は、境界部分１４ｃの周りに配置されている。つまり、固定領域９０は、境界部分１４ｃの周りに集まる応力を有効に緩和するように機能するような位置に配置されている。

上述のように、各フィルム１２、１４をなす積層体６０は、ヒートシール性をもつポリエチレン層６１が他のフィルム１２、１４に面するように配置されている。したがって、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４の互いに重なる部分をヒートシールすることにより、当該表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４とを互いに固定することができる。つまり、固定領域９０は、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４とがヒートシールされることにより、形成されている。

以上のように、本実施の形態によれば、一方の主面フィルム本体１２の第１シール領域１６及び第２シール領域１７をなす部分以外の部分と、一方の他面フィルム本体１４の第１シール領域１６をなす部分以外の部分と、が重なる位置に、一方の主面フィルム本体１２と一方の他面フィルム本体１４とを固定する固定領域９０が設けられていて、固定領域９０は、一方の他面フィルム本体１４の周縁のうちの、一方の主面フィルム本体１２とヒートシールされた第１部分１４ａと他方の主面フィルム本体１３とヒートシールされた第２部分１４ｂとの境界となる境界部分１４ｃよりも袋内方に位置している。このような形態によれば、固定領域９０が境界部分１４ｃの周りに集まる応力を緩和するように機能する。これにより、境界部分１４ｃを含む他面フィルム本体１４及び境界部分１４ｃを挟んで対面する２つの主面フィルム本体１２、１３が平面状に引き延ばされることを抑制することができる。この結果、３つのフィルム１２、１３、１４が平面状に引き延ばされて形成され得る隙間から培養液８が漏れるおそれを低減することができる。

また、固定領域９０は、一方の主面フィルム本体１２と一方の他面フィルム本体１４とをヒートシールすることにより、形成されている。この場合、培養袋１０を製袋するために設けられたヒートシール性をもつ層６１を利用して、固定領域９０を実現することができる。このため、固定領域９０を設けるために別個の材料を準備する必要がなく、材料コストを抑えることができる。

ただし、固定領域９０は、ヒートシールを利用して形成される例に限定されない。別の例として、表主面フィルム本体１２の第１シール領域１６及び第２シール領域１７をなす部分以外の部分と、上他面フィルム本体１４の第１シール領域１６をなす部分以外の部分と、をクリップ部材で挟持してもよい。クリップ部材が表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４とを挟持することによって、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４とを固定し、この結果、固定領域９０が実現される。

なお、上述した実施の形態に対して様々な変更を加えることが可能である。例えば、図１４は、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４との間に追加フィルム９５をさらに設けた例を示す部分斜視図である。図１４に示す例では、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４との間に帯状の追加フィルム片９５が配置されている。追加フィルム片９５は、表主面フィルム本体１２及び上他面フィルム本体１４と共にヒートシールされている。これにより、表主面フィルム本体１２と上他面フィルム本体１４とを互いに固定する固定領域９０が実現されている。このような形態によれば、一方の主面フィルム本体１２と一方の他面フィルム本体１４とをヒートシールすることにより生じる各フィルム１２、１４の厚みの減少を、追加フィルム片９５によって補償することが可能となる。これにより、各フィルム１２、１４の厚みの減少に伴い起こり得る耐圧の減少等を抑制することができる。

≪第３の実施の形態≫
次に、図１５を参照して、本発明の第３の実施の形態について説明する。図１５は、本発明の第３の実施の形態における培養装置１の要部を示す部分斜視図である。図１５を参照して説明する第３の実施の形態は、固定領域９０の形態が異なるが、その他の構成は第１の実施形態と同様に構成することができる。

図１５に示すように、一対の主面フィルム本体１２，１３の第１シール領域１６及び第２シール領域１７をなす部分以外の部分が互いに重なる位置に、当該一対の主面フィルム本体１２、１３を互いに固定する固定領域９０が設けられている。

ここで、図９に示すように、表主面フィルム本体１２の周縁は、裏主面フィルム本体１３とヒートシールされた第３部分１２ａと、上他面フィルム本体１４とヒートシールされた第４部分１２ｂと、第３部分１２ａと第４部分１２ｂとの境界となる境界部分１２ｃを含んでいる。そして、固定領域９０は、この境界部分１２ｃよりも袋内方に位置している。本実施の形態では、固定領域９０は、境界部分１２ｃの周りに配置されている。つまり、固定領域９０は、境界部分１２ｃの周りに集まる応力を有効に緩和するように機能するような位置に配置されている。

上述のように、各主面フィルム本体１２、１３をなす積層体６０は、ヒートシール性をもつポリエチレン層６１が他方の主面フィルム本体１２、１３に面するように配置されている。したがって、一対の主面フィルム本体１２、１３の互いに重なる部分をヒートシールすることにより、当該一対の主面フィルム本体１２、１３を互いに固定することができる。つまり、固定領域９０は、一対の主面フィルム本体１２、１３の互いに重なる部分がヒートシールされることにより、形成されている。

以上のように、本実施の形態によれば、一対の主面フィルム本体１２、１３の第１シール領域１６及び第２シール領域１７をなす部分以外の部分が互いに重なる位置に、当該一対の主面フィルム本体１２、１３を互いに固定する固定領域９０が設けられていて、固定領域９０は、一方の主面フィルム本体１２の周縁のうちの、他方の主面フィルム本体１３とヒートシールされた第３部分１２ａと一方の他面フィルム本体１４とヒートシールされた第４部分１２ｂとの境界となる境界部分１２ｃよりも袋内方に位置している。このような形態によれば、固定領域９０が境界部分１２ｃの周りに集まる応力を緩和するように機能する。これにより、境界部分１２ｃを含む表主面フィルム本体１２及び境界部分１４ｃの周りに位置する裏主面フィルム本体１３及び上他面フィルム本体１４が平面状に引き延ばされることを抑制することができる。この結果、３つのフィルム１２、１３、１４が平面状に引き延ばされて形成され得る隙間から培養液８が漏れるおそれを低減することができる。

また、固定領域９０は、一対の主面フィルム本体１２、１３の互いに重なる部分をヒートシールすることにより、形成されている。この場合、培養袋１０を製袋するために設けられたヒートシール性をもつ層６１を利用して、固定領域９０を実現することができる。このため、固定領域９０を設けるために別個の材料を準備する必要がなく、材料コストを抑えることができる。

ただし、固定領域９０は、ヒートシールを利用して形成される例に限定されない。別の例として、一対の主面フィルム本体１２，１３の第１シール領域１６及び第２シール領域１７をなす部分以外の部分をクリップ部材で挟持してもよい。クリップ部材が一対の主面フィルム本体１２、１３を挟持することによって、一対の主面フィルム本体１２、１３を互いに固定し、この結果、固定領域９０が実現される。

なお、上述した実施の形態に対して様々な変更を加えることが可能である。例えば、図１６は、一対の主面フィルム本体１２、１３の間に追加フィルム９５をさらに設けた例を示す部分斜視図である。図１６に示す例では、一対の主面フィルム本体１２、１３の互いに重なる部分の間に帯状の追加フィルム片９５が配置されている。追加フィルム片９５は、一対の主面フィルム本体１２、１３の互いに重なる部分と共にヒートシールされている。これにより、一対の主面フィルム本体１２、１３を互いに固定する固定領域９０が実現されている。このような形態によれば、一対の主面フィルム本体１２、１３をヒートシールすることにより生じる各主面フィルム本体１２、１３の厚みの減少を、追加フィルム片９５によって補償することが可能となる。これにより、各主面フィルム本体１２、１３の厚みの減少に伴い起こり得る耐圧の減少等を抑制することができる。

なお、以上、複数の変形例について説明してきたが、当然に複数の変形例を組み合わせることも可能である。

以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこの実施例に限定されるものではない。以下に説明するようにして、実施例及び比較例に係る培養袋を作製し、各培養袋の耐圧性を評価した。

〔実施例１〕
実施例１は、図２に示す培養袋に対応している。先ず、図８に示す積層体、すなわち、ポリエチレン層、エチレンビニルアルコール層、ナイロン層及びポリエチレンテレフタレート層をこの順で含む積層体を用いて、各フィルムを作製した。作製された各フィルムの周縁同士をヒートシールして５０Ｌ用の培養袋を製袋した。次に、他面フィルムの周縁のうちの、一方の主面フィルム本体とヒートシールされた第１部分に、孔を形成した。続いて、第１部分に設けられた孔に合わせて、他面フィルムの周縁のうちの、他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第２部分に、孔を形成した。次に、他面フィルム本体を折目線に沿って折り畳み、第１部分に設けられた孔と第２部分に設けられた孔とに、接合材料を充填した。その後、硬化した接合材料が第１部分と第２部分とを接合することにより、第１部分と第２部分とを固定する固定領域を形成した。なお、固定領域は、折目線と一致する上述の境界部分から上下方向に約１０ｍｍずれた位置に配置した。

〔比較例１〕
比較例１は、実施例１に係る培養袋において固定領域を設けなかった形態に対応している。

（評価結果）
上記で得られた実施例１及び比較例１に係る培養袋について、耐圧性を評価した。実施例１及び比較例１に係る培養袋に２ｋＰａのエアーを充填していく毎に、１分間放置して圧力が低下しないかを確認した。確認した結果を表１に示す。なお、表１において、各加圧状態において１分間放置して圧力が低下しなかった場合を○とし、各加圧状態において１分間放置して圧力が低下した場合を×とした。

表１に示すように、実施例１に係る培養袋は、１２ＫＰａの圧力をかけても圧力が低下しなかった。一方、比較例１に係る培養袋は、８ＫＰａの圧力をかけたときに培養袋内からエアーが漏れて、圧力が低下することが確認された。このとき、他面フィルム本体の境界部分の周りから、当該他面フィルム本体と各主面フィルム本体とがヒートシールされた領域がシール後退していく、言い換えると、剥離していくことが確認された。

以上のことから、実施例１に係る培養袋は、比較例１に係る培養袋よりも、培養袋内に収容された培養液の漏れを防止する優れた機能を発揮するとみなすことができる。

１ 培養装置
１０ 培養袋
８ａ 被培養物
８ 培養液
１２、１３ 主面フィルム本体
１２ａ 第３部分
１２ｂ 第４部分
１２ｃ 境界部分
１４、１５ 他面フィルム本体
１４ａ 第１部分
１４ａ１ 孔
１４ｂ 第２部分
１４ｂ１ 孔
１４ｃ 境界部分
１４ｆ、１５ｆ 折目線
１６ 第１シール領域
１７ 第２シール領域
３０ 撹拌器
５０ 培養液注入チューブ
５１ 気体排出部
５２ 気体導入部
５３ 気体供給チューブ
９０ 固定領域
９２ 接合材料
９３ 接合テープ
９４ クリップ部材
９５ 追加フィルム片
ｄ１ 前後方向
ｄ２ 上下方向

Claims (13)

1. 被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋であって、
   一方向に対向する一対の主面フィルム本体を含む主面フィルムと、
   前記一対の主面フィルム本体の間で、前記一方向に交差する他方向に対向して配置された一対の他面フィルム本体と、
   を備え、
   主面フィルム本体の周縁と他面フィルム本体の周縁とがヒートシールされて第１シール領域が形成され、
   主面フィルム同士がヒートシールされて第２シール領域が形成され、
   一方の他面フィルム本体の周縁のうちの、一方の主面フィルム本体とヒートシールされた第１部分と他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第２部分との境界となる境界部分に沿って、前記一方の他面フィルム本体を折り畳んだときに、前記第１部分と前記第２部分との重なり合う位置に、前記第１部分と前記第２部分とを固定する固定領域が設けられている、培養袋。
2. 前記第１部分と前記第２部分とを接合する接合材料によって、前記固定領域が形成されている、請求項１に記載の培養袋。
3. 前記第１部分に孔が形成され、
   前記境界部分に沿って前記一方の他面フィルム本体を折り畳んだときに前記第１部分に設けられた孔と重なり合う前記第２部分の位置に、孔が形成され、
   前記接合材料は、前記第１部分に形成された孔と、前記第２部分に形成された孔とに、充填されている、請求項２に記載の培養袋。
4. 前記第１部分とヒートシールされた前記一方の主面フィルム本体の部分と、前記第２部分とヒートシールされた前記他方の主面フィルム本体の部分と、に亘って貼り付けられた接合テープによって前記第１部分と前記第２部分とが互いに固定され、前記固定領域が規定されている、請求項１に記載の培養袋。
5. 前記第１部分とヒートシールされた前記一方の主面フィルム本体の部分と、前記第２部分とヒートシールされた前記他方の主面フィルム本体の部分と、を挟持するクリップ部材によって前記第１部分と前記第２部分とが互いに固定され、前記固定領域が規定されている、請求項１に記載の培養袋。
6. 前記固定領域は、前記境界部分から前記他方向にずれた位置に配置されている、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の培養袋。
7. 被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋であって、
   一方向に対向する一対の主面フィルム本体を有する主面フィルムと、
   前記一対の主面フィルム本体の間で、前記一方向に交差する他方向に対向して配置された一対の他面フィルム本体と、
   を備え、
   主面フィルム本体の周縁と他面フィルム本体の周縁とがヒートシールされて第１シール領域が形成され、
   主面フィルム同士がヒートシールされて第２シール領域が形成され、
   一方の主面フィルム本体の第１シール領域及び第２シール領域をなす部分以外の部分と、一方の他面フィルム本体の第１シール領域をなす部分以外の部分と、が重なる位置に、前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体とを固定する固定領域が設けられていて、
   前記固定領域は、前記一方の他面フィルム本体の周縁のうちの、前記一方の主面フィルム本体とヒートシールされた第１部分と他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第２部分との境界となる境界部分よりも袋内方に位置している、培養袋。
8. 前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体とがヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されている、請求項７に記載の培養袋。
9. 前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体との間に追加フィルム片が配置されていて、
   前記一方の主面フィルム本体と前記一方の他面フィルム本体と共に前記追加フィルム片がヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されている、請求項８に記載の培養袋。
10. 被培養物を含む培養液を収容して被培養物を培養する培養袋であって、
    一方向に対向する一対の主面フィルム本体を含む主面フィルムと、
    前記一対の主面フィルム本体の間で、前記一方向に交差する他方向に対向して配置された一対の他面フィルム本体と、
    を備え、
    主面フィルム本体の周縁と他面フィルム本体の周縁とがヒートシールされて第１シール領域が形成され、
    主面フィルム同士がヒートシールされて第２シール領域が形成され、
    一対の主面フィルム本体の第１シール領域及び第２シール領域をなす部分以外の部分が互いに重なる位置に、当該一対の主面フィルム本体を互いに固定する固定領域が設けられていて、
    前記固定領域は、一方の主面フィルム本体の周縁のうちの、他方の主面フィルム本体とヒートシールされた第３部分と一方の他面フィルム本体とヒートシールされた第４部分との境界となる境界部分よりも袋内方に位置している、培養袋。
11. 前記一対の主面フィルム本体の互いに重なる部分がヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されている、請求項１０に記載の培養袋。
12. 前記一対の主面フィルム本体の互いに重なる部分の間に追加フィルム片が配置されていて、
    前記一対の主面フィルム本体の互いに重なる部分と共に前記追加フィルム片がヒートシールされることにより、前記固定領域が形成されている、請求項１１に記載の培養袋。
13. 請求項１乃至１２のいずれか一項に記載の培養袋を有する培養装置を用いて被培養物を培養する培養方法であって、
    前記培養袋内に加圧状態で培養液を注入する工程と、
    前記培養袋内にエアーを供給し前記培養袋内を加圧状態にして被培養物を培養する工程と、
    を備える、培養方法。

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