JP2004534544A

JP2004534544A - 使い捨て容器

Info

Publication number: JP2004534544A
Application number: JP2003512391A
Authority: JP
Inventors: ケネス・ビー・カール
Original assignee: Alcan Packaging Pharmaceutical and Personal Care Inc
Current assignee: Amcor Pharmaceutical Packaging USA Inc
Priority date: 2001-07-09
Filing date: 2002-07-09
Publication date: 2004-11-18
Also published as: WO2003006633A1; MXPA04000182A; HK1069847A1; CA2452619A1; EP1407001A4; EP1407001A1; US6844186B2; US20030008389A1; AU2002346088B2; US20040142462A2; US20040029263A1; CN1316013C; US6670171B2; CN1531589A; IL159621A0

Abstract

本発明は、改良された混合用容器（１００）及びそれを使用するための方法に関する。本発明に係る容器（１００）は、内部表面部（１１０）、外部表面部（１１５）及び上部周辺部とを有する折りたたみ可能なバッグ（１０５）と、外周端部（１３０）を有する頭部プレート（１２５）とを備え、このバッグ（１２０）の上部周辺部は、前記頭部プレート（１２５）の外周端部に対して密閉されていることを特徴とする。また、本発明は、この容器と共に使用するための羽根車（１４０）及び混合方法に関する。

Description

【０００１】
（技術分野）
本発明は、実験用容器に関する。より詳細には細胞培養のための改良された容器およびその使用方法に関する。
【０００２】
（背景技術）
試験管内で培養される細胞には２つのタイプがある。即ち、浮遊性細胞（支えに依存しない細胞）及び付着性細胞（支えに依存する細胞）である。支えに依存する浮遊性細胞は、表面に固定されることなく試験管内で増殖する。対照的に、支えに依存する付着性細胞は、試験管内で成長するためには表面に取り付いている必要がある。
【０００３】
支えに依存しない浮遊性細胞は、一般的に、ガラス製、金属製、若しくは硬いプラスティック製の容器の中で成長する。しかし、これらの細胞培養容器を使用することに対して不都合が生じていた。ガラス製及び金属製の細胞培養容器は高価である。さらにこれらの容器はメンテナンスを必要とする。これは、これらの容器が使い捨て可能でなく、滅菌されていないからである。細胞の培養のために、殺菌された環境若しくは無菌の環境に保つために、通常滅菌器を使用することによって容器を殺菌する必要がある。それゆえ、この細胞培養容器は、これらを使用する前及び／又は使用した後に洗浄し殺菌しなければならない。さらに、ガラス製及び金属製の細胞培養容器は使い捨てではないので、ガラス製及び金属製の容器を保管するため十分なスペースが必要になる。このように、ガラス製、金属製及び硬いプラスティック製の細胞培養容器は高価であり、使い捨て可能ではなく、大掛かりなメンテナンスが必要であるので、高価でなく、使い捨て可能で、折りたたみ可能で、さらに予め殺菌された細胞培養容器が必要とされている。
【０００４】
さらに、支えに依存しない生物細胞が成長するために、その細胞は絶えず浮遊している必要がある。細胞を浮遊した状態に保つため、細胞培養容器は、その細胞を浮遊した状態に保つ手段を備えていなければならない。多くの細胞培養容器は、細胞を浮遊した状態に保つために回転する羽根車であって、ブレードを有する羽根車を備えている。もし、その羽根車の回転及び動きが強すぎるか、ブレードが硬すぎるか若しくは長すぎると、羽根車若しくはブレードの力により細胞を破砕してしまう。同様に、もし羽根車の回転若しくはその動きがあまりにも弱すぎるか若しくはブレードが短すぎると、細胞を浮遊させた状態に保つことができない。そのため、細胞の破砕を抑え、さらに細胞を浮遊した状態に保つために緩やかな攪拌を行う改良細胞培養容器が必要とされている。
【０００５】
（発明の開示）
本発明は、内部表面部、外部表面部、及び上部周辺部を備えるバッグと、外周端部を有する頭部プレートとを備え、バッグの上部周辺部が、頭部プレートの外周端部に対して密閉されていることを特徴とする折りたたみ可能な細胞培養用容器を提供するものである。また、本発明は、上部領域及び底部領域を有する中空状柔軟性シャフトを備え、上記底部領域が柔軟性ブレードを有することを特徴とする羽根車を提供するものである。さらに、本発明は、液体を混合する方法であって、中空状柔軟性シャフトを有する羽根車を備える折りたたみ可能バッグを有する容器を準備する工程と、磁石を上記羽根車の中空状シャフトに挿入する工程と、調整可能な外的磁力を加えることにより、上記磁石と相互作用させ、その磁石と中空状シャフトに動作を与える工程を備える混合方法を提供するものである。
【０００６】
新規であると考えられる本発明の特徴及び本発明の特性を示している構成要素は、特に添付の特許請求の範囲の詳細と共に述べられている。図面は、例示のためだけのものであり、また一定の比率で描いていない。しかし、オペレーションに関する物及び方法の両方の発明は、添付の図面と共に、次の詳細な説明を参照することによりよく理解されるだろう。
【０００７】
（発明の詳細な説明）
本発明は、内部表面部、外部表面部及び上部周辺部を有する折りたたみ可能なバッグと、頭部プレートとを有する細胞培養用容器を提供するものである。このバッグは、その上部周辺部を頭部プレートの外周端部に密閉するように外周端部を保持する。また、本発明は、上部領域と底部領域を有する中空状柔軟性シャフトを備え、この底部領域が柔軟性ブレードを有することを特徴とする羽根車を提供するものである。さらに、本発明は、液体を混合するための方法であって、中空状柔軟性シャフトからなる羽根車を有する容器であって、折りたたみ可能なバッグを備える容器を準備する工程と、羽根車の中空状シャフトに磁石を挿入する工程と、調整可能な外的磁力を加えて、上記磁石と相互作用させ、この磁石と中空状シャフトに動作を与える工程を備える方法を提供するものである。また、この方法は、容器を処分する前に、この羽根車の中空状シャフトから磁石を取り外す工程を含んでいてもよい。
【０００８】
本発明に係る具体的な実施の形態の容器は、薄い柔軟性ブレードと、再使用可能な磁石を設置することができる中空状シャフトとを有する羽根車を備える。この羽根車のシャフト内に磁石があることにより、また、この羽根車のシャフト上に制限手段（オーリング等）を配することにより、調節可能な磁力（磁気攪拌プレート等）をこの容器に加えたとき、羽根車を緩やかに回転させ、柔軟性ブレードの連続的なうねり動作を引き起こす。これにより、細胞を緩やかに攪拌することができ、このことによって細胞を浮遊した状態に保つことができ、さらに細胞の破砕を防ぐことができる。
【０００９】
図１は、内部表面部１１０、外部表面部１１５、及び上部周辺部１２０を有する折りたたみ可能なバッグ１０５と、頭部プレート１２５とを備える細胞培養用容器１００を示している。頭部プレート１２５は、外周端部１３０を有する。この外周端部１３０は、バッグ１０５の上部周辺部１２０に対して密閉されている。ある密閉方法では、単に端部１３０を頭部プレート１２５に溶接することが含まれる。しかし、接着剤、ホットメルト接着剤、若しくは当業者により理解することができる他の密閉方法を含む方法を使用してもよい。さらに、折りたたみ可能バッグ１０５は、外部端部１２８を含む底部１２７を有する。この底部１２７により、バッグ１０５はその構造自体で立っていることができる。この具体的実施の形態では一般的であるが、バッグ１０５が形成されるとき、外部端部１２８が形成される。バッグ１０５は、折りたたみ可能なプラスティックから形成され、継ぎ目１２９に沿って密閉される。これらの継ぎ目の下部は、バッグ１０５を安定させ、プラットフォームを形成する。バッグ１０５を真直ぐ立った状態に安定させることを保証する他の方法であって、本発明と矛盾がなく、頭部プレート１２５と同様のベースを使用することを含む他の方法を考え出すこともできる。
【００１０】
しかし、この容器内において良好な混合を保証するため、流れの遅い領域若しくは小さな渦のポケット（eddy pocket）を防止することが重要である。例えば、図１ではバッグ１０５が外部端部１２８まで延びていないことが示されている。内部表面部１１０の底部１２１は、良好な混合を達成するため丸みを帯びている。
【００１１】
本発明のある実施の形態では、容器１００はポリエチレンから形成されている。さらに、容器１００は、予め殺菌されている。たいていの細胞培養は、いわゆる滅菌技術を用いることにより無菌の状態下で行われるので、容器１００を予め殺菌することにより、培養チャンバー及び液体経路を閉じられた無菌の環境に保つ。最良の目的が、培養プロセスを、培養チャンバー及び液体経路が機能的に外部環境に対して閉じられているシステムにおいて実行することであるため、予備殺菌のためには、容器１００が折りたたみ可能であり、また使い捨て可能であることが理想的である。これは、その装置が製造されたときからその器具が配置されたときまで無菌の完全性を維持するためである。当業者により知られた他の方法を使用してもよい。
【００１２】
他の実施の形態では、頭部プレート１２５は、少なくとも１つのポート１３５を有する。容器１００に充填するためのポート１３５を、本発明に従って使用してもよい。ポート１３７は、ガス供給のためのポートであってもよい。この具体的実施の形態では、ポート１３８により、磁石１３９を挿入することができる。これらは、頭部プレート１２５に備えられた様々な多くのポートの単なる具体例である。当業者であれば、特定の細胞培養のために必要とされるものを知ることができ、特定の応用のために必要なポートを容易に与えることができる。
【００１３】
ある具体的実施の形態では、容器１００は羽根車１４０を有し、この羽根車１４０は柔軟性ブレード１４５を備える。柔軟性ブレード１４５は、ポリエチレンから形成されていても良い。柔軟性ブレード１４５は、単一のブレード、一対のブレード、若しくは複数のブレードであってもよい。羽根車１４０は、中空状柔軟性シャフト１５０からなる。この中空状柔軟性シャフト１５０は、上部領域１５５及び底部領域１６０を有し、この上部領域１５５は頭部プレート１２５に接続され、さらにこの柔軟性ブレード１４５はシャフト１５０の底部領域１６０に接続されている。本発明の具体的実施の形態では、柔軟性ブレード１４５がシャフト１５０と接触している。羽根車１４０のシャフト１５０は、磁石１３９を含んでいてもよい。本発明の具体的実施の形態では、シャフト１５０の上部領域１５５は、シャフト１５０の動作を略一定周期の楕円形振り子状の回転に制限する手段を備える。本発明では、シャフト１５０の動作を制限する手段は、オーリング１５２、ノッチ、若しくは羽根車１４０のシャフト１５０の上部領域１５５において比較的弱いポイントを作り出して羽根車１４０のツイスト運動を防止する他の手段であってもよい。
【００１４】
図２は容器１００の構成要素を示している。上記のように、容器１００の構成要素は、折りたたみ可能バッグ１０５、頭部プレート１２５、及び羽根車１４０である。バッグ１０５は、内部表面部１１０、外部表面部１１５、及び上部周辺部１２０を有する。上記のように、バッグ１０５の上部１２０を熱密閉してもよいし、若しくは頭部プレート１２５の端部１３０に取り付けてもよい。バッグ１０５の底部１２７は、バッグ１０５を支えるため外部端部１２８を有していてもよい。外部端部１２８は、バッグ１０５の外部表面部１１５の角部において三角形状を形成する。ここで、この外部端部は、バッグ１０５の内部表面部１１０から分離している。羽根車１４０は、中空状柔軟性シャフト１５０からなり、このシャフトは上部領域１５５と底部領域１６０を有し、この上部領域１５５は、例えば熱密閉により、頭部プレート１２５のポート１３８の底部２００と接続され、シャフト１５０の底部領域１６０は柔軟性ブレード１４５に接続される。
【００１５】
図３は、液体３００及び粒子３０５が充填された容器１００であって、調整可能磁気攪拌プレート３１０上に置かれた容器を示している。この実施の形態では、液体３００は細胞培養のための媒体であり、粒子３０５は生物細胞である。
【００１６】
図４Ａ〜４Ｄは、調整可能な磁気攪拌プレート３１０を用いて磁力を容器１００に加えたときの、容器１００内の羽根車１４０のシャフト１５０の柔軟性ブレード１４５及び粒子３０５の連続的な動きを示している。調整可能磁気攪拌プレート３１０は、シャフト上に備えられた棒状磁石であって、モータにより駆動される磁石を含む。当業者であれば、そのような攪拌プレートに精通している。モータの速度は、一般的に加減抵抗器により制御される。本発明によれば、図４Ａに示しているように、調整可能磁気攪拌プレート３１０のような磁力が容器１００に加えられたとき、磁気攪拌プレート３１０内の棒状磁石（図示せず）の回転により、容器１００内の磁石１３９の楕円状回転運動を引き起こす。攪拌プレート３１０内の磁石の回転に対応した磁石１３９の動きにより、楕円形振り子状の回転運動を始める。羽根車１４０が矢印４００の方向に移動するとき、柔軟性ブレード１４５に対する液体の抵抗により、柔軟性ブレード１４５を矢印４００の逆方向に押しやり、その結果粒子３０５を攪拌する。図４Ｂは、羽根車１４０が矢印４０５の方向に移動し始めたとき、柔軟性ブレード１４５及び粒子３０５が矢印４０５の逆方向に押しやられることを示している。図４Ｃは、楕円形の振り子状の回転により運動を続けている羽根車１４０を示している。羽根車１４０は、矢印４１０の方向に移動し続けるので、柔軟性ブレード１４５及び粒子３０５は、矢印４１０の逆方向に押しやられる。図４Ｄは、楕円形振り子状の回転が続けて行われている羽根車であって、矢印４１５の方向に移動し始めた羽根車１４０を示している。柔軟性ブレード１４５及び粒子３０５は、同じように、矢印４１５と逆方向に押しやられる。羽根車１４０及び柔軟性ブレード１４５が、楕円形振り子状の回転により連続して運動することにより、粒子３０５は連続して浮遊することとなる。
【００１７】
図４Ａ〜４Ｄに示すように、締付け具１５２が存在することにより、シャフト上に”旋回点”若しくは”弱部ポイント”を作り出す。磁石１３９及び調整可能外部磁力（攪拌プレート３１０等）が相互作用するとき、この装置は、羽根車１４０の動きに影響を与える。その結果、羽根車１４０は楕円形振り子状に回転することとなる。締付け具１５２は、リング若しくは結んだ状態の材料を含む多くの形態を取ることができる。具体的な締付け具は、シャフトの周りに配された一般的なオーリングである。別の実施の形態では、そのシャフト自身の中のノッチにより、望ましい楕円形振り子状回転を起こす”旋回ポイント”を作り出すことができる。羽根車１４０が楕円形振り子状に回転する結果、柔軟性ブレード１４５は緩やかに回転し、液体３００及び粒子３０５を緩やかに攪拌する。液体３００が細胞培養のための媒体であり、粒子３０５が生物細胞である場合、一般的に、柔軟性ブレード１４５を緩やかに動かし、液体３００及び粒子３０５を緩やかに攪拌する。
【００１８】
図５Ａ及び５Ｂは、磁力を容器１００に加えたときの羽根車１４０の楕円形振り子状の回転と、攪拌プレート内の磁石の回転の柔軟性ブレード１４５及び粒子３０５に与える影響とを示している。
【００１９】
また、本発明は上部領域１５５及び底部領域１６０を有する中空状柔軟性シャフト１５０を備え、底部領域１６０が柔軟性ブレード１４５を有することを特徴とする羽根車１４０に関する。羽根車１４０は、ポリエチレンから形成されていても良い。具体的実施の形態では、羽根車１４０の底部領域１６０は、２つの柔軟性ブレード１４５を備える。羽根車１４０の中空状柔軟性シャフト１５０は磁石１３９を有していてもよく、磁石１３９を取り外し可能であってもよい。磁石１３９を羽根車１４０から取り外すことが可能であるため、羽根車１４０は使い捨て可能であり、追加された羽根車若しくは容器に磁石１３９を再利用することができる。磁石１３９を再利用することができることにより有利な効果を奏することができる。これは、それぞれの使用毎に磁石を取り替えなければならない場合、磁石１３９を使い捨てることによりコストがかかるためである。
【００２０】
また、本発明は液体を混合する方法に関する。最初に、中空状柔軟性シャフトからなる羽根車を有する容器であって、折りたたみ可能バッグを含む容器を準備する。その後、磁石をこの羽根車の中空状シャフトに挿入する。調整可能な外部磁力（磁気攪拌プレート等）を加えることにより、上記磁石と相互作用させ、この中空状シャフトに動作を与える。その後、この磁石を羽根車の中空状シャフトから取り外す。さらにこの方法は、頭部プレートと、上部領域及び底部領域を有する、羽根車の中空状柔軟性シャフトとを備え、この上部領域が頭部プレートと接続されていることを特徴とする容器を含んでいてもよい。
【００２１】
また、本発明は、本発明に係る容器を使用する最も好ましい方法であって、細胞を培養する方法に関する。最初に、予め殺菌された容器であって、頭部プレートと、上部領域及び底部領域を有する中空状柔軟性シャフトからなる羽根車とを有する折りたたみ可能バッグを含み、この上部領域が上記頭部プレートと接続され、前記底部領域が柔軟性ブレードを備えることを特徴とする容器を準備する。その後、羽根車の中空状シャフトに磁石を挿入し、細胞系（cell line）と媒体とを充填ポートを介して容器に導入する。その後、この細胞系を増殖させ、この細胞系及び媒体を容器から取り除く。最終的に、この磁石を羽根車の磁石用ポートを介して羽根車の中空状シャフトから取り除き、その容器を処分する。
【００２２】
特に、本発明は、詳細な好ましい実施の形態と共に記載されているけれども、当業者が多くの変更、修正、及びバリエーションに至ることは明白である。それゆえ、添付のクレームが、例えば、本発明の技術的範囲及びその精神内にあるような変更、修正、及びバリエーションを包含することは予期されることである。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１は、本発明のある実施の形態を示している。
【図２】図２は、本発明に係る容器の構成要素を示している。
【図３】図３は、液体で満たされ、さらに粒子を有する本発明に係る容器を、調整可能な磁気攪拌プレート上に置いた状態を示している。
【図４】図４Ａは、本発明に係る容器の部分側面図であって、磁力をこの容器に加えたときの、羽根車、柔軟性ブレード及び粒子の最初の回転動作を描いている。図４Ｂは、本発明に係る容器の部分側面図であって、磁力をこの容器に加えたときの、羽根車、柔軟性ブレード及び粒子のその続きの回転動作を描いている。図４Ｃは、本発明に係る容器の部分側面図であって、磁力によりこの羽根車を、図４Ｂに描いた回転の方向と逆に移動させたときの、羽根車、柔軟性ブレード及び粒子の続きの回転動作を描いている。図４Ｄは、本発明に係る容器の部分側面図であって、磁力を容器に加えたときの、図４Ｃに描いたような羽根車、柔軟性ブレード及び粒子のその続きの回転動作を描いている。
【図５】図５Ａは、本発明に係る容器の上面図であって、磁力を容器に加えたときの最初の回転動作による羽根車、柔軟性ブレード及び粒子の動きを示している。図５Ｂは、本発明に係る容器の上面図であって、図５Ａに描かれた容器に磁力を加えたときの、反対方向の回転による、羽根車、柔軟性ブレード及び粒子の動きを描いている。

Claims

（補正）細胞培養のための容器であって、
外周端部を有する頭部プレートと、
内部表面部、外部表面部及び上部周辺部を有する折りたたみ可能バッグであって、前記バッグの上部周辺部が、前記頭部プレートの外周端部に対して密閉されているバッグと、
柔軟性ブレード及び中央軸を有し、羽根車が中心軸に関して回転しないように前記頭部プレートに取り付けられている羽根車とを備える容器。
前記バッグが、ポリエチレンからなることを特徴とする請求項１記載の容器。
予め殺菌されていることを特徴とする請求項１記載の容器。
前記頭部プレートが、少なくとも一つのポートを有することを特徴とする請求項１記載の容器。
（削除）
（補正）前記羽根車が、ポリエチレンからなることを特徴とする請求項１記載の容器。
（補正）前記羽根車が、上部領域と底部領域とを有する中空状柔軟性シャフトからなり、前記上部領域が前記頭部プレートに接続されていることを特徴とする請求項１記載の容器。
前記柔軟性ブレードが、前記シャフトの底部領域に接続されていることを特徴とする請求項７記載の容器。
前記柔軟性ブレードが、前記シャフトに隣接することを特徴とする請求項８記載の容器。
前記シャフトが、磁石を含むことを特徴とする請求項７記載の容器。
前記シャフトの上部領域が、前記シャフトの動きを周期的な振り子状の回転に制限するための手段を有することを特徴とする請求項７記載の容器。
前記手段が、オーリングを含むことを特徴とする請求項１１記載の容器。
細胞を培養するための容器であって、
頭部プレートと、
前記頭部プレートに対して密閉されたバッグであって、予め殺菌された折りたたみ可能バッグと、
前記頭部プレートと接続された中空状柔軟性シャフトを有する羽根車と、
前記羽根車に取り付けられた２つの柔軟性ブレードと、
前記柔軟性シャフト上に配された締付け具オーリングとを備えることを特徴とする容器。
前記頭部プレートが、前記羽根車の中空状柔軟性シャフトにアクセスするためのポートを有することを特徴とする請求項１３記載の方法。
（補正）上部領域と底部領域とを有しさらに磁石を含む中空状柔軟性シャフトを備える羽根車であって、前記底部領域が柔軟性ブレードを含み、前記磁石を前記中空状柔軟性シャフトの上部から取り出すことができることを特徴とする羽根車。
前記底部領域が、２つの柔軟性ブレードを有することを特徴とする請求項１５記載の羽根車。
（削除）
ポリエチレンからなることを特徴とする請求項１５記載の羽根車。
（削除）
（補正）液体を混合するための方法であって、
中空状柔軟性シャフトからなる羽根車を含む容器であって、折りたたみ可能バッグを有する容器を準備する工程と、
前記羽根車の中空状シャフトに磁石を挿入する工程と、
外部磁力を加えることにより、前記磁石と相互作用させ、前記磁石と前記中空状シャフトに動作を与える工程と、
前記羽根車の中空状シャフトの上部から前記磁石を取り出す工程とを備えることを特徴とする方法。
さらに、前記容器を処分する工程を含むことを特徴とする請求項２０記載の方法。
前記容器が、さらに頭部プレートを含み、前記羽根車の中空状柔軟性シャフトが、上部領域と底部領域を有し、前記上部領域が前記頭部プレートに接続されていることを特徴とする請求項２０記載の方法。
（補正）予め殺菌された容器内で細胞を培養する方法であって、
前記容器は、頭部プレートと、上部領域及び底部領域を有する中空状柔軟性シャフトと共に、折りたたみ可能バッグを備え、
前記上部領域が前記頭部プレートに接続され、前記底部領域が柔軟性ブレードを含み、さらに、
前記羽根車の中空状シャフトに磁石を挿入する工程と、
前記細胞系を増殖させる工程と、
前記細胞系と媒体を前記容器から取り出す工程と、
前記磁石を、前記羽根車の中空状シャフトから取り出す工程と、
前記容器を処分する工程とを備えることを特徴とする方法。
（補正）折りたたみ可能容器の中で細胞を培養する方法であって、
前記容器は、中空状シャフトを有する羽根車を含み、さらに、
前記中空状シャフト内に磁石を挿入する工程と、
外部磁力を加えることにより、前記磁石と相互作用させ、前記磁石と前記中空状シャフトとに動作を与える工程と、
前記中空状シャフトの上部から前記磁石を取り出す工程とを備えることを特徴とする方法。
さらに、前記容器を処分する工程を備えることを特徴とする請求項２４記載の方法。
（補正）外周端部を有する頭部プレートと、
内部表面部、外部表面部及び上部周辺部を有する折りたたみ可能バッグであって、前記バッグの上部周辺部が前記頭部プレートの外周端部に対して密閉されているバッグと、
前記折りたたみ可能バッグ内に、中央軸及びブレードを有する柔軟性羽根車であって、軸に関して回転しないように前記頭部プレートに取り付けられている羽根車とを備える容器。
前記バッグが、ポリエチレンからなることを特徴とする請求項２６記載の容器。
予め殺菌されていることを特徴とする請求項２６記載の容器。
前記頭部プレートが、少なくとも１つのポートを有することを特徴とする請求項２６記載の容器。
前記羽根車が、ポリエチレンからなることを特徴とする請求項２６記載の容器。
（補正）前記羽根車が、中空状柔軟性シャフト及び柔軟性ブレードからなることを特徴とする請求項２６記載の容器。
前記柔軟性ブレードが、前記シャフトの底部領域に接続されていることを特徴とする請求項３１記載の容器。
前記柔軟性ブレードが、前記シャフトに隣接することを特徴とする請求項３２記載の容器。
前記シャフトが、磁石を包含することを特徴とする請求項３１記載の容器。
前記シャフトの上部領域が、前記シャフトの動きを、周期的な振り子状の回転に限定するための手段を含んでいることを特徴とする請求項３１記載の容器。
前記手段が、オーリングを含むことを特徴とする請求項３５記載の容器。
頭部プレートと、
前記頭部プレートに対して密閉されたバッグであって、予め殺菌された折りたたみ可能バッグと、
前記頭部プレートに接続された中空状柔軟性シャフトを有する羽根車と、
前記羽根車に取り付けられた２つの柔軟性ブレードと、
前記柔軟性シャフト上に配されたオーリングと、
前記羽根車の中空状柔軟性シャフトにアクセスするためのポートであって、前記頭部プレート内に配されたポートとを備えることを特徴とする容器。
（補正）容器の内容物を混合するための方法であって、
前記容器が中空状シャフトを有する羽根車を含み、
前記中空状シャフトの上部から磁石を挿入する工程と、
外部磁力を加えることにより、前記磁石と相互作用させ、前記磁石と前記中空状シャフトとに動作を与える工程とを備える方法。
さらに、前記容器を処分する工程を備えることを特徴とする請求項３８記載の方法。
（補正）予め殺菌された容器内の内容物を混合する方法であって、
前記容器が、
頭部プレートと、
内部、上部領域及び底部領域を有する中空状柔軟性シャフトからなる羽根車と、
を備える折りたたみ可能バッグを有し、
前記シャフトの内側が前記頭部プレートのホールに通じるように、前記上部領域が前記頭部プレートに接続され、前記底部領域が柔軟性ブレードを含み、さらに、
前記羽根車の中空状シャフトに、前記頭部プレートのホールを介して磁石を挿入する工程と、
前記容器に内容物を導入する工程と、
外部磁力を加えることにより、前記磁石と相互作用させ、前記磁石と前記中空状シャフトに動作を与える工程と、
前記内容物を混合する工程と、
前記容器から前記内容物を取り出す工程と、
前記容器を処分する工程とを備えることを特徴とする方法。
（新たに追加）中央軸、上端部および下端部を有するシャフトと、前記シャフトから突出した１以上のブレードとを備え、
前記シャフトの上端部が、中央軸に関して回転しないように制限されていることを特徴とする羽根車。
（新たに追加）前記ブレードが、柔軟性であることを特徴とする請求項４１記載の羽根車。
（新たに追加）前記柔軟性ブレードが、第一の角度で前記シャフトから突出しており、使用中において、シャフトから突出する複数のブレードのなす角度が前記第一の角度より小さくなり、その後前記第一の角度より大きくなるように交互に曲がることを特徴とする請求項４１記載の羽根車。