JP2015507472A5 - - Google Patents

Claims (20)

1. クルイベロマイセス・ラクティス種の、異種遺伝子として伝染性ファブリキウス嚢病のウイルス（IBDV）のVP2抗原を有し、かつ異種タンパク質としての伝染性ファブリキウス嚢病のウイルス（IBDV）のVP2抗原の発現を可能にする組み換え酵母であって、該クルイベロマイセス・ラクティス種が、
   クルイベロマイセス・ラクティスVAK 890 DSM 25405、
   クルイベロマイセス・ラクティスVAK 910 DSM 25406、および
   クルイベロマイセス・ラクティスVAK 911 DSM 25407
   から選択されることを特徴とする組み換え酵母。
2. 請求項１に記載の組み換え酵母であって、前記組み換え酵母が、防御的体液性免疫応答の生成のために使用されることを特徴とする組み換え酵母。
3. 請求項１または２に記載の組み換え酵母であって、前記組み換え酵母がサブユニットマーカーワクチンとして使用されることを特徴とする組み換え酵母。
4. 請求項３に記載の組み換え酵母であって、前記サブユニットマーカーワクチンが、予防接種された個体と自然感染した個体とを区別するために使用されることを特徴とする組み換え酵母。
5. 請求項３または４に記載の組み換え酵母であって、前記サブユニットマーカーワクチンが、同時に強いアジュバント特性を有することを特徴とする組み換え酵母。
6. 請求項３か５までのいずれか１項の組み換え酵母であって、前記サブユニットマーカーワクチンが、強い免疫原性を有することを特徴とする組み換え酵母。
7. 請求項１から６までのいずれか１項の組み換え酵母であって、前記異種遺伝子の組み込みが、追加のベクター配列または選択マーカーなくして行われていることを特徴とする組み換え酵母。
8. 請求項１から７までのいずれか１項の組み換え酵母であって、前記異種遺伝子発現が構成的に行われるか、または前記異種遺伝子発現が誘導可能であることを特徴とする組み換え酵母。
9. 請求項１から８までのいずれか１項の組み換え酵母であって、前記異種遺伝子発現が、内因性のリポーター遺伝子の発現を介して間接的に定量化できることを特徴とする組み換え酵母。
10. 請求項１から９までのいずれか１項の組み換え酵母であって、前記異種遺伝子が、抗原特性を有する異種タンパク質の発現を可能にすることを特徴とする組み換え酵母。
11. 請求項１から１０までのいずれか１項の組み換え酵母であって、前記組み換え酵母は、誘導可能にまたは構成的に、かなりの量の異種タンパク質もしくはこの異種タンパク質のドメインを発現し、またはこの異種タンパク質のドメインと異なる種類のタンパク質ドメインとが融合されたものを発現することを特徴とする組み換え酵母。
12. 請求項１から１１までのいずれか１項に記載の組み換え酵母であって、前記伝染性ファブリキウス嚢病のウイルス（IBDV）のVP2抗原が、配列番号１、配列番号３および配列番号５から選択される１つのヌクレオチド配列によってコードされることを特徴とする組み換え酵母。
13. 請求項１から１２までのいずれか１項に記載の組み換え酵母であって、前記伝染性ファブリキウス嚢病のウイルス（IBDV）のVP2抗原が、配列番号２、配列番号４および配列番号６から選択される１つのアミノ酸配列を有するか、または伝染性ファブリキウス嚢病のウイルス（IBDV）の突然変異されたVP2抗原であり、かつ配列番号４によるアミノ酸配列を有するか、または伝染性ファブリキウス嚢病のウイルス（IBDV）のコドン最適化されたVP2抗原であり、かつ配列番号６によるアミノ酸配列を有することを特徴とする組み換え酵母。
14. 請求項１から１３までのいずれか１項に記載の組み換え酵母であって、皮下的な予防接種のための方法において使用するための組み換え酵母。
15. 組み換え酵母の完全な酵母細胞による皮下的な予防接種の方法における組み換え酵母の使用であって、該方法は、以下の工程：
    ａ）組み換え酵母を培養および増殖させる工程、
    ｂ）酵母を回収し、不活性化させる工程、
    ｃ）組み換え酵母を決められた免疫化スキームに従って適用する工程、
    ｄ）形成された抗体の力価を測定する工程、および／または
    ｅ）免疫化を検証する工程
    を含むことを特徴とする使用。
16. 組み換え酵母の完全な酵母細胞による皮下的な予防接種の方法であって、該方法は、以下の工程：
    ａ）組み換え酵母を培養および増殖させる工程、
    ｂ）酵母を回収し、不活性化させる工程、
    ｃ）組み換え酵母を決められた免疫化スキームに従って適用する工程、
    ｄ）形成された抗体の力価を測定する工程、および／または
    ｅ）免疫化を検証する工程
    を含むことを特徴とする方法。
17. 請求項１５に記載の使用または請求項１６に記載の方法であって、クルイベロマイセス・ラクティス種の組み換え酵母の完全な酵母細胞の皮下的な適用によって、発現された異種タンパク質に対して体液性免疫化が、好ましくは防御的体液性免疫化が生ずることを特徴とする使用または方法。
18. 配列番号７、配列番号８または配列番号９による核酸配列を有するオリゴヌクレオチド。
19. 異種遺伝子を有する発現ベクターKlp3またはKlp3-MCS（配列番号１０）であって、前記異種遺伝子が、配列番号１、配列番号３または配列番号５による核酸配列を有することを特徴とする発現ベクター。
20. 請求項１８に記載の発現ベクターであって、前記異種遺伝子が、配列番号２によるアミノ酸配列を有するIBDVのVP2タンパク質または配列番号４によるアミノ酸配列を有するIBDVのVP2-T2Sタンパク質または配列番号６によるアミノ酸配列を有するIBDVのoVP2-T2Sタンパク質をコードすることを特徴とする発現ベクター。