JP2015194495A - イムノクロマトキット - Google Patents
イムノクロマトキット Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015194495A JP2015194495A JP2015064125A JP2015064125A JP2015194495A JP 2015194495 A JP2015194495 A JP 2015194495A JP 2015064125 A JP2015064125 A JP 2015064125A JP 2015064125 A JP2015064125 A JP 2015064125A JP 2015194495 A JP2015194495 A JP 2015194495A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- metal fine
- fine particles
- developing solution
- test
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 282
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 179
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims abstract description 179
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 claims abstract description 151
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 110
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 82
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims abstract description 32
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims abstract description 30
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 96
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 claims description 88
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 19
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims description 16
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 claims description 7
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims description 6
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 claims description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 abstract description 57
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 abstract description 27
- 239000004332 silver Substances 0.000 abstract description 27
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 abstract description 17
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 abstract description 6
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 254
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 94
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 70
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 70
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 70
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 48
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 39
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 37
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 34
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 28
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 27
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 26
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 25
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 25
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 25
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 22
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 21
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 21
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 20
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 19
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 19
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 18
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 16
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 15
- -1 silver ions Chemical class 0.000 description 15
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 14
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 14
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 13
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 11
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 9
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 9
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 9
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 8
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 8
- 238000013461 design Methods 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 7
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 7
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 7
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 6
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 5
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 229910001111 Fine metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 4
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 4
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 4
- 229940050906 magnesium chloride hexahydrate Drugs 0.000 description 4
- DHRRIBDTHFBPNG-UHFFFAOYSA-L magnesium dichloride hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[Cl-].[Cl-] DHRRIBDTHFBPNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 4
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 4
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 3
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 3
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Substances N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 239000000275 Adrenocorticotropic Hormone Substances 0.000 description 2
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 2
- 241000220451 Canavalia Species 0.000 description 2
- 235000010520 Canavalia ensiformis Nutrition 0.000 description 2
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 2
- 102400000739 Corticotropin Human genes 0.000 description 2
- 101800000414 Corticotropin Proteins 0.000 description 2
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 2
- 101000867232 Escherichia coli Heat-stable enterotoxin II Proteins 0.000 description 2
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108010079855 Peptide Aptamers Proteins 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 2
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000005409 aflatoxin Substances 0.000 description 2
- 229940065181 bacillus anthracis Drugs 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L calcium chloride dihydrate Chemical compound O.O.[Cl-].[Cl-].[Ca+2] LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940052299 calcium chloride dihydrate Drugs 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N corticotropin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N 0.000 description 2
- 229960000258 corticotropin Drugs 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 150000004662 dithiols Chemical group 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 229910000510 noble metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 2
- 229920000172 poly(styrenesulfonic acid) Polymers 0.000 description 2
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 2
- 229940005642 polystyrene sulfonic acid Drugs 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 2
- 125000000101 thioether group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INLFWQCRAJUDCR-IQVMEADQSA-N (1R,2S,4S,5'S,6R,7S,8R,9S,12S,13S)-5',7,9,13-tetramethylspiro[5-oxapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosane-6,2'-oxane] Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CCCCC4CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@H](C)CO1 INLFWQCRAJUDCR-IQVMEADQSA-N 0.000 description 1
- ZHSOTLOTTDYIIK-ZDUSSCGKSA-N (2S)-2-amino-3-[4-(4-hydroxyphenoxy)-3,5-diiodophenyl]propanoic acid Chemical compound IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C=C1 ZHSOTLOTTDYIIK-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- OIZGSVFYNBZVIK-FHHHURIISA-N 3'-sialyllactose Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@@]1(C(O)=O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@@H]1O OIZGSVFYNBZVIK-FHHHURIISA-N 0.000 description 1
- 229930195730 Aflatoxin Natural products 0.000 description 1
- XWIYFDMXXLINPU-UHFFFAOYSA-N Aflatoxin G Chemical compound O=C1OCCC2=C1C(=O)OC1=C2C(OC)=CC2=C1C1C=COC1O2 XWIYFDMXXLINPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710186708 Agglutinin Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091008102 DNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101710146024 Horcolin Proteins 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 101100540311 Human papillomavirus type 16 E6 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 101710189395 Lectin Proteins 0.000 description 1
- 101710179758 Mannose-specific lectin Proteins 0.000 description 1
- 101710150763 Mannose-specific lectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710150745 Mannose-specific lectin 2 Proteins 0.000 description 1
- 229920000877 Melamine resin Polymers 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000052651 Pancreatic hormone Human genes 0.000 description 1
- 101800001268 Pancreatic hormone Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108010047320 Pepsinogen A Proteins 0.000 description 1
- 102000013469 Placental Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010065857 Placental Hormones Proteins 0.000 description 1
- 229920002845 Poly(methacrylic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001665 Poly-4-vinylphenol Polymers 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000531795 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Paratyphi A Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 108010017898 Shiga Toxins Proteins 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000607760 Shigella sonnei Species 0.000 description 1
- 208000033809 Suppuration Diseases 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 241000589886 Treponema Species 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000607272 Vibrio parahaemolyticus Species 0.000 description 1
- SMEGJBVQLJJKKX-HOTMZDKISA-N [(2R,3S,4S,5R,6R)-5-acetyloxy-3,4,6-trihydroxyoxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](O1)O)OC(=O)C)O)O SMEGJBVQLJJKKX-HOTMZDKISA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081735 acetylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000003172 anti-dna Effects 0.000 description 1
- 230000002529 anti-mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229960002713 calcium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003913 calcium metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000003177 cardiotonic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 229960003399 estrone Drugs 0.000 description 1
- 238000005530 etching Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000003629 gastrointestinal hormone Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 239000000960 hypophysis hormone Substances 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- JDSHMPZPIAZGSV-UHFFFAOYSA-N melamine Chemical compound NC1=NC(N)=NC(N)=N1 JDSHMPZPIAZGSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 239000004025 pancreas hormone Substances 0.000 description 1
- 229940032957 pancreatic hormone Drugs 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000002281 placental hormone Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920000083 poly(allylamine) Polymers 0.000 description 1
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 229940001470 psychoactive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000004089 psychotropic agent Substances 0.000 description 1
- 210000004915 pus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940115939 shigella sonnei Drugs 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 229940043517 specific immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 239000005495 thyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229940036555 thyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Description
前記検出ラインの色は、1種の金属微粒子(a)の色又は異なる色を呈する複数種の金属微粒子(a)の混色に基づいている。
前記クロマトグラフ担体は、異なる被験物質に対して結合性を有する複数種の分子(b)がそれぞれ異なる位置に固定されている。
なお、本発明における検出感度は、目視判定と、輝度差解析によって数値化できる。目視判定はイムノクロマト試験後の検出ライン有無を目視によって確認し、検出ラインが確認可能な最低被験物質濃度を検出感度とすることができる。輝度解析では、下記1から2を引いた値の絶対値が2(検出限界輝度差)以上である時の最低被験物質濃度を検出感度とすることができる。
1.被験物質を含まない展開液を使用したイムノクロマト試験時の検出ラインと検出ライン以外の部分の輝度差
2.被験物質を含む展開液を使用したイムノクロマト試験時のイムノクロマト担体上の検出ラインと検出ライン以外の部分の輝度差
上記分子(b)の例としては、抗コンカナバリンA抗体、マンノースおよびその誘導体(被験物質:コンカナバリンA)、抗ベロ毒素抗体、グロボ三糖およびその誘導体(被験物質:ベロ毒素)、シアリルラクトースおよびその誘導体、抗インフルエンザ抗体(被験物質:インフルエンザウイルスおよびその抗原)、抗B型肝炎ウイルス抗体(被験物質:B型肝炎ウイルスおよびその抗原)、抗インスリン抗体(被験物質:インスリン)、抗アフラトキシン抗体(被験物質:アフラトキシン)、抗ヒト絨毛性ゴナドトロピン抗体(被験物質:ヒト絨毛性ゴナドトロピン)、抗ヒト免疫不全ウイルス抗体(被験物質:ヒト免疫不全ウイルスおよびその抗原)、抗リシン抗体、ガラクトースおよびその誘導体(被験物質:リシン)、抗サルモネラ抗体(被験物質:サルモネラ菌)等の抗体や、炭疽菌(Bacillus anthracis)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、D群赤痢菌・ソンネ赤痢菌(Shigella sonnei)、大腸菌(Escherichia coli)、ネズミチフス菌(Salmonella typhimurium)、溶連菌(Streptococcus hemolyticus)、パラチフス(Salmonella paratyphi A)、ブドウ球菌エンテロトキシンB(Staphylococcal enterotoxin B)、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)、腸炎ビブリオ(Vibrio parahaemolyticus)等の細菌や、ムチン1等の上皮の細胞表面に表れるがんマーカー等と結合するDNAアプタマー、ヒトパピローマウイルス(HPV)の腫瘍性たんぱく質HPV16 E6と結合するペプチドアプタマー等が挙げられる。
クロマトグラフ担体がイムノクロマト試験後に複数種の検出ラインを呈する場合、該クロマトグラフ担体には、異なる被験物質に対して結合性を有する複数種の分子(b)がそれぞれ異なる位置に固定されていることが好ましい。この場合、異なる被験物質の検出を一度に行うことが可能になる。
また、イムノクロマト試験後に呈する検出ラインの色は、1種の金属微粒子(a)の色又は異なる色を呈する複数種の金属微粒子(a)の混色に基づいている。
このため、クロマトグラフ担体は、異なる被験物質に対して結合性を有する複数種の分子(b)により、複数の固定化部分を備える場合、金属微粒子(a)の色調の違いを利用して、それぞれの固定化部分を異なる色を呈する検出ラインとして機能させることも可能である(検出ラインの多色化)。これにより、複数の被験物質の検出が一度で可能になる。
図4(a)のクロマトグラフ担体では、ガラス繊維の吸収部に金属微粒子(a)と分子(b)の複合体を含む溶液を滴下、乾燥し、複合体担持イムノクロマトグラフ担体を作製している。
図4に示す展開液は、被験物質および緩衝液を含む展開液(実際には上述の生物学的試料等でもよい)である。図4に示すイムノクロマト試験によれば、イムノクロマト試験紙に展開液を展開させる(図4(b)、(c)、(d)及び(e))。ここで、図4のように被験物質が展開液に含まれる場合、該被験物質は、クロマトグラフ担体上に固定化された分子(b)に結合するが、図4(e)および(f)に示されるように、上記複合体が判定部分に残ることになる。ここで、上記複合体には金属微粒子(a)が含まれるため、金属微粒子(a)の色調による被験物質の検出が可能になる。
図6に示すイムノクロマト試験によれば、まず、イムノクロマト試験紙に第1の展開液を展開させる(図6(b)、(c))。ここで、図6のように複数の異種の被験物質1−3が第1の展開液に含まれる場合、該被験物質は、クロマトグラフ担体上に固定化された複数の異種の分子(b)1−3のうち対応する分子(b)に結合する(図6(c))。次に、クロマトグラフ担体上に残存する未結合の被験物質を除去するため、緩衝液を展開してクロマトグラフ担体を洗浄する(図6(d))。なお、除去された被験物質は吸収紙に回収される。次に、イムノクロマト試験紙に第2の展開液を展開させる(図6(e))。ここで、図6のように複数の異種の被験物質1−3が第1の展開液に含まれる場合、複数の異種の金属微粒子(a)1−3と複数の異種の分子(b)1−3の複合体が、クロマトグラフ担体上の各分子(b)に結合している被験物質に結合する(図6(e))。図6のように複数の異種の被験物質1−3が第1の展開液に含まれる場合、一つの判定部分に複数の異種の金属微粒子(a)が残るため、金属微粒子(a)1−3の混色の検出ラインが確認できる。
次に、図6に用いた第2の展開液の調製方法の一例を以下に記載する。金属微粒子(a)−1がイエロー調、金属微粒子(a)−2がマゼンタ調、金属微粒子(a)−3がシアン調の色であるとき、金属微粒子(a)−1と分子(b)−1、金属微粒子(a)−2と分子(b)−1をそれぞれ別々に複合体化し、これら複合体を等量ずつ混合することで赤色調の第2の展開液が調製可能である。同様に、金属微粒子(a)−2と分子(b)−2、金属微粒子(a)−3と分子(b)−2をそれぞれ別々に複合体化し、その後これら2種の複合体を等量ずつ混合することで青色調の第2の展開液が調製可能である。また、金属微粒子(a)−1と分子(b)−3、金属微粒子(a)−3と分子(b)−3をそれぞれ別々に複合体化し、その後これら2種の複合体を等量ずつ混合することで緑色調の第2の展開液が調製可能である。これら3種の第2展開液を同量混合することで黒色調の第2の展開液が調製でき、これを図6のイムノクロマト試験紙に展開すると、イムノクロマト紙に固定された分子(b)1−3に金属微粒子(a)の混色の検出ラインが確認される。図7に、図6に示すイムノクロマトキットに使用可能な第2展開液の一例を示す。なお、金属微粒子(a)や分子(b)の種類は、前述の3種に限定されず上限無く増やすことが可能であるため、検出部分の色を自由に制御することが可能である。
2.5mMのクエン酸ナトリウム水溶液20mLに、0.5g/Lの分子量70,000ポリスチレンスルホン酸水溶液1mLと、10mMの水素化ほう素ナトリウム水溶液1.2mLとを添加し、次いで、20mL/minで攪拌しながら、0.5mMの硝酸銀水溶液50mLを添加した。得られた溶液をインキュベーター(30℃)中に60分間静置し、プレート状銀ナノ粒子の種粒子の水分散液を作製した。調製した水分散液(原液)の光学特性を図8に示す。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。最大吸収を示す波長は球状銀ナノ粒子のLSPRである396nm(消光度3.3)であった。なお、本発明の消光度とは分散液を分光光度計で測定した際の吸光度の値である。また、SEM写真を図28に示す。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。粒子径は主に3nm以上、10nm未満のプレート状粒子であった。
蒸留水200mlに、10mMのアスコルビン酸水溶液4.5mLを添加し、上述のプレート状銀ナノ粒子の種粒子の分散液(以下、種粒子水分散液という)12mlを添加した。得られた溶液に、0.5mMの硝酸銀水溶液120mLを30mL/minで攪拌しながら添加した。硝酸銀水溶液の添加が終了した4分後に攪拌を停止し、25mMのクエン酸ナトリウム水溶液20mlを添加し、得られた溶液を大気雰囲気下のインキュベーター(30℃)中に100時間静置し、プレート状銀ナノ粒子Aの水分散液を調製した。調製した分散液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図9に示す。最大吸収を示す波長は454nm(消光度1.0)であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。水分散液中のプレート状銀ナノ粒子AをSEMにより観察したところ、プレート状銀ナノ粒子Aの平均粒子径は18nmであり、平均厚さは8nmでアスペクト比は2.2であった。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
上記種粒子水分散液の添加量を12mlから4mlに変更した以外は、プレート状銀ナノ粒子Aの調製と同様にして、プレート状銀ナノ粒子Bの水分散液を調製した。調製した分散液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図9に示す。最大吸収を示す波長は526nm(消光度1.1)であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。水分散液中のプレート状銀ナノ粒子BをSEMにより観察したところ、プレート状銀ナノ粒子Bの平均粒子径は31nmであり、平均厚さは8nmでアスペクト比は3.8であった。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
上記種粒子水分散液の添加量を12mlから2mlに変更した以外は、プレート状銀ナノ粒子Aの調製と同様にして、プレート状銀ナノ粒子Cの水分散液を調製した。調製した分散液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図9に示す。最大吸収を示す波長は626nm(消光度1.1)であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。水分散液中のプレート状銀ナノ粒子CをSEMにより観察したところ、プレート状銀ナノ粒子Cの平均粒子径は50nmであり、平均厚さは10nmでアスペクト比は5.0であった。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
上記種粒子水分散液の添加量を12mlから1mlに変更した以外は、プレート状銀ナノ粒子Aの調製と同様にして、プレート状銀ナノ粒子Dの水分散液を調製した。調製した分散液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図9に示す。最大吸収を示す波長は704nm(消光度1.0)であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。水分散液中のプレート状銀ナノ粒子DをSEMにより観察したところ、プレート状銀ナノ粒子Dの平均粒子径は74nmであり、平均厚さは8nmでアスペクト比は9.2であった。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
上記プレート状銀ナノ粒子Aの水分散液120mlに、5質量%のポリビニルピロリドン(PVP)水溶液8mlを添加し、ジエチルアミン1.2mlを添加し、0.5Mのアスコルビン酸水溶液1.6mlを添加した後、0.16mMの塩化金酸水溶液9.6mlを0.5mL/minで攪拌しながら添加した。得られた溶液をインキュベーター(30℃)中に24時間静置し、プレート状銀ナノ粒子Aの表面が金で被覆された金属微粒子Aの水分散液(イエロー調)を調製した。この金属微粒子Aの水分散液を原液とした。原液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図10に示し、CIE1931xy色度図における原液の色度座標を図33に示す。最大吸収を示す波長は464nm(消光度0.8)であり、色度座標はx=0.5070、y=0.4774であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。色度座標の測定は、同分光光度計を用い、光路長:1cm及び分光光度計操作用ソフトウェア「カラー測定ソフトウェア P/N 206−65207(株式会社島津製作所製)」にて照明:D65、視野:2°と設定した条件下で行われた。また、SEM写真を図29に示す。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
プレート状銀ナノ粒子Aの水分散液120mlに代えてプレート状銀ナノ粒子Bの水分散液120mlを使用した以外は、金属微粒子Aの調製と同様にして、プレート状銀ナノ粒子Bの表面が金で被覆された金属微粒子Bの水分散液(マゼンタ調)を調製した。この金属微粒子Bの水分散液を原液とした。原液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図10に示し、CIE1931xy色度図における原液の色度座標を図33に示す。最大吸収を示す波長は534nm(消光度0.9)であり、色度座標はx=0.4276、y=0.1751であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。色度座標の測定は、同分光光度計を用い、光路長:1cm及び分光光度計操作用ソフトウェア「カラー測定ソフトウェア P/N 206−65207(株式会社島津製作所製)」にて照明:D65、視野:2°と設定した条件下で行われた。また、SEM写真を図30に示す。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
プレート状銀ナノ粒子Aの水分散液120mlに代えてプレート状銀ナノ粒子Cの水分散液120mlを使用した以外は、金属微粒子Aの調製と同様にして、プレート状銀ナノ粒子Cの表面が金で被覆された金属微粒子Cの水分散液(シアン調)を調製した。この金属微粒子Cの水分散液を原液とした。原液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図10に示し、CIE1931xy色度図における原液の色度座標を図33に示す。最大吸収を示す波長は634nm(消光度0.9)であり、色度座標はx=0.1467、y=0.2090であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。色度座標の測定は、同分光光度計を用い、光路長:1cm及び分光光度計操作用ソフトウェア「カラー測定ソフトウェア P/N 206−65207(株式会社島津製作所製)」にて照明:D65、視野:2°と設定した条件下で行われた。また、SEM写真を図31に示す。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
原液である金属微粒子Aの水分散液及び金属微粒子Bの水分散液を等しい質量で混合したところ、赤色調の混合液A(色度座標 x:0.6057、y:0.3317)が得られた。原液である金属微粒子Bの水分散液及び金属微粒子Cの水分散液を等しい質量で混合したところ、青色調の混合液B(色度座標 x:0.1731、y:0.0675)が得られた。原液である金属微粒子Aの水分散液及び金属微粒子Cの水分散液を等しい質量で混合したところ、緑色調の混合液C(色度座標 x:0.2549、y:0.5712)が得られた。CIE1931xy色度図における混合液A、B及びCの色度座標を図34に示す。色度座標の測定は、同分光光度計を用い、光路長:1cm及び分光光度計操作用ソフトウェア「カラー測定ソフトウェア P/N 206−65207(株式会社島津製作所製)」にて照明:D65、視野:2°と設定した条件下で行われた。
プレート状銀ナノ粒子Aの水分散液120mlに代えてプレート状銀ナノ粒子Dの水分散液120mlを使用した以外は、金属微粒子Aの調製と同様にして、プレート状銀ナノ粒子Dの表面が金で被覆された金属微粒子Dの水分散液を調製した。調製した分散液を蒸留水で4倍容に希釈した水分散液の光学特性を図10に示す。最大吸収を示す波長は714nm(消光度0.8)であった。光学特性の測定は、株式会社島津製作所製の紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PCを用い、光路長:1cm及び測定波長:190−1300nmの条件下で行われた。また、SEM写真を図32に示す。SEM写真の解析には株式会社日立製作所製の走査電子顕微鏡SU−70を用いた。
[プレート状銀ナノ粒子の緩衝液中での安定性]
先に調製されたプレート状銀ナノ粒子Bの分散液1mLを蒸留水3mLおよび10mM PBS(+)緩衝液(塩化カルシウム二水和物(関東化学株式会社製)0.133g、塩化マグネシウム六水和物(関東化学株式会社製)0.1gを蒸留水800mLで溶解し、市販の200mM PBS(−)溶液(関東化学株式会社製)50mLを添加し、全量を1Lとして調製)3mLにそれぞれ添加し、4倍希釈とした。
調製した溶液の消光度(Extinction)を紫外可視近赤外分光光度計(装置名:紫外可視近赤外分光光度計MPC3100UV−3100PC、製造元:株式会社島津製作所)で測定した。プレート状銀ナノ粒子Bの波長542nmの消光度減少率は約90%であり、大幅に低下した。消光度測定結果を図11に示す。
先に調製された金属微粒子Bの水分散液1mLを蒸留水3mLおよび10mM PBS(+)緩衝液(塩化カルシウム二水和物(関東化学株式会社製)0.133g、塩化マグネシウム六水和物(関東化学株式会社製)0.1gを蒸留水800mLで溶解し、市販の200mM PBS(−)溶液(関東化学株式会社製)50mLを添加し、全量を1Lとして調製)3mLにそれぞれ添加し、4倍希釈とした。
調製した溶液の消光度(Extinction)を紫外可視近赤外分光光度計(装置名:紫外可視近赤外分光光度計 MPC3100UV−3100PC、製造元:株式会社島津製作所)で測定した。金属微粒子Bの波長556nmの消光度減少率は約1.4%であり、殆ど変化が無く安定であった。消光度測定結果を図12に示す。
金属微粒子A〜Dを使用したコンカナバリンAのイムノクロマト試験
(コンカナバリンAイムノクロマト試験用展開液A〜Dの調製)
5mMのPBS(+)緩衝液(200mM PBS溶液(製品名:PBS溶液20倍濃縮液、製造元:関東化学株式会社)を40倍容に希釈し5mM PBS(−)緩衝液を1L調製し、塩化カルシウム(関東化学株式会社製)の1g/mL水溶液0.1mL及び、塩化マグネシウム六水和物(関東化学株式会社製)の1g/mL水溶液0.05mLを添加して調製)中における濃度50μg/mLの抗コンカナバリンA抗体(品名:Anti Concanavalin A、製造元:EY Laboratories,Inc.)の溶液0.2mLと、先に調製された金属微粒子Aの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうした。次いで、遠心分離(75000rpm、4℃、1時間)を行い、抗体−金属微粒子複合体を沈殿させ、上澄み液を除去した。その後、抗体−金属微粒子複合体を純水500μL中に再分散させ、紫外可視分光光度計Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)0.55になるように調整し、展開液Aを調製した。同様に、金属微粒子B〜Dの分散液を用いて、展開液B〜Dを調製した。
図1に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗コンカナバリンA抗体が直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗コンカナバリンA抗体を直線状に固定する際、抗コンカナバリンA抗体溶液を5mM PBS(−)緩衝液(上記の市販品の200mM PBS溶液を蒸留水で200倍容 希釈して作製)で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、5mMのPBS(+)緩衝液中におけるコンカナバリンA(品名:Canavalia ensiformis(Jack Bean)[Con A],Jack bean(−)、株式会社J−オイルミルズ製)の溶液であり、コンカナバリンAの濃度が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nM、0.06nM及び0Mの溶液を用意した(pH7.4)。洗浄用展開液は5mMのPBS(+)緩衝液である(pH7.4)。第2の展開液には、上述の展開液A〜Dを用いた(pH7.0)。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液15μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である5mMのPBS(+)緩衝液30μLを展開させた。最後に、各種第2の展開液60μLを展開させた。展開液A〜Dを用いた全てのイムノクロマト試験において、コンカナバリンAの検出が展開液Aでは6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nM、0.06nMの濃度に亘って目視により確認され、展開液B、C、Dでは6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nMの濃度に亘って目視により確認された。結果を図13に示す。
図2に示されるようなイムノクロマト試験を行った。イムノクロマト試験1と同じイムノクロマト試験紙を用いた。展開液には、展開液A〜Dのうち1種の展開液60μLと、5mMのPBS(+)緩衝液中における濃度が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nM、0.06nM又は0MのコナカバリンAである溶液15μLとを混合したものを用いた(pH7.0)。具体的には、イムノクロマト試験紙に各種展開液を展開させた。全ての展開液において、コンカナバリンAの検出が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nMの濃度に亘って目視により確認できた。
コンカナバリンAのイムノクロマト試験1での試験後のイムノクロマト試験紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、キヤノン株式会社)し、判定部分(抗コンカナバリンA抗体の固定化部分)と、判定部分以外の部分の最低輝度を画像解析ソフト(Image−J)で測定することにより、検出感度を数値化することができる。なお、Image−Jは、アメリカ国立衛生研究所でWayne Rasbandが開発したオープン・ソースで公有の画像処理ソフトウェアである(http://imagej.nih.gov/ij/)。検出感度は各部分をそれぞれ5回測定し、得られた数値の中央値の差とすることができる。輝度差解析の結果、金属微粒子A、BではコンカナバリンAの検出が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nM、0.06nMの濃度に亘って確認でき、金属微粒子C、DではコンカナバリンAの検出が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nMの濃度に亘って確認できた。輝度解析の結果を図14〜17、後述する球状金コロイドとの比較を図19に示す。
金属微粒子Bを使用したB型肝炎ウイルス抗原のイムノクロマト試験
(B型肝炎ウイルス抗原イムノクマト試験用展開液の調製)
先に調製された金属微粒子Bの分散液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金属微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金属微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。
5mMのPBS(−)緩衝液(市販の200mM PBS溶液を40倍希釈して調製)中における濃度50μg/mLの抗B型肝炎ウイルス抗原抗体(品名:Goat anti HBsAg、製造元:Arista Biologicals,Inc.)の溶液0.2mLと、先に遠心分離によりpHを7.4に調整された金属微粒子Bの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうした。次いで、遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、抗体−金属微粒子複合体を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、抗体−金属微粒子複合体を5mM PBS(−)緩衝液で再分散させ、紫外可視分光光度計 Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)0.35になるように調整し、展開液Eを調製した。
図1に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体が直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体を直線状に固定する際、抗B型肝炎ウイルス抗原抗体溶液を5mM PBS(−)緩衝液(上記の市販品の200mM PBS溶液を蒸留水で40倍希釈して作製)で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、1mMのPBS(−)緩衝液中におけるB型肝炎ウイルス抗原(品名:HBsAg Protein(Subtype adr)、製造元:Fitzgerald Industries International Inc.)の溶液であり、B型肝炎ウイルス抗原の濃度が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0M(Blank)の溶液を用意した。洗浄用展開液は5mMのPBS(−)緩衝液である。第2の展開液には、上述の展開液Eを用いた。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液15μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である5mMのPBS(−)緩衝液30μLを展開させた。最後に、第2の展開液60μLを展開させた。本イムノクロマト試験において、B型肝炎ウイルス抗原の検出が6μM、0.60μM、0.06μMの濃度に亘って目視により確認された。結果を図20に示す。
B型肝炎ウイルス抗原のイムノクロマト試験での試験後のイムノクロマト試験紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、製造元:キヤノン株式会社)し、判定部分(抗B型肝炎ウイルス抗原抗体の固定化部分)と、判定部分以外の部分の最低輝度を画像解析ソフト(Image−J)で測定することにより、検出感度を数値化することができる。検出感度は各部分をそれぞれ5回測定し、得られた数値の中央値の差とすることができる。輝度差解析の結果、B型肝炎ウイルス抗原の検出が6μM、0.60μM、0.06μMの濃度に亘って確認された。輝度解析の結果を図21、球状金コロイドとの比較を図23に示す。
多色イムノクロマト試験
(多色イムノクロマト試験用展開液の調製)
先に調製された金属微粒子A〜Cの分散液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金属微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金属微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。
5mMのPBS(−)緩衝液(市販の200mM PBS溶液を40倍希釈して調製)中における濃度50μg/mLの抗B型肝炎ウイルス抗原抗体(品名:Goat anti HBsAg、製造元:Arista Biologicals,Inc.)の溶液0.2mLと、先に遠心分離によりpHを7.4に調整された金属微粒子A〜Cの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうした。次いで、遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、抗体−金属微粒子複合体を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去し抗体-金属微粒子複合体の13.3倍濃縮液を調製した。該濃縮液を紫外可視分光光度計 Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)2.0になるように5mM PBS(−)緩衝液で14倍希釈し、展開液F〜Hを調製した。また、前述の濃縮液を7倍希釈し、2倍濃度の濃縮展開液F〜Hを調製し、これらを図24に従って調合し、展開液I〜Lを調製した。展開液F〜Lの分光特性測定結果を図25、26に示す。図25、26に示すように球状金コロイドを使用した展開液の場合、単色設計しかできないが、本発明のように、金属微粒子A、B、Cを使用した場合は多色設計が可能であった。
図1に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体が直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体を直線状に固定する際、抗B型肝炎ウイルス抗原抗体溶液を5mM PBS(−)緩衝液(上記の市販品の200mM PBS溶液を蒸留水で40倍希釈して作製)で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、1mMのPBS(−)緩衝液中におけるB型肝炎ウイルス抗原(品名:HBsAg Protein(Subtype adr)、製造元:Fitzgerald Industries International Inc.)の溶液であり、B型肝炎ウイルス抗原の濃度が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0M(Blank)の溶液を用意した。洗浄用展開液は5mMのPBS(−)緩衝液である。第2の展開液には、上述の展開液F〜Lを用いた。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液15μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である5mMのPBS(−)緩衝液30μLを展開させた。最後に、第2の展開液60μLを展開させた。本イムノクロマト試験において、B型肝炎ウイルス抗原の検出が6μM、0.60μM、0.06μMの濃度に亘って目視により確認された。また、検出ラインの色が展開液により異なり、展開液F使用時はイエロー調、展開液G使用時はマゼンタ調、展開液H使用時はシアン調、展開液I使用時は赤色調、展開液J使用時は青色調、展開液K使用時は緑色調、展開液L使用時は黒色調の色を呈した。
よって、図5や図6に示されるようなイムノクロマト試験を行う場合(クロマトグラフ担体に、複数の異種の分子(b)が異なる位置に直線状に固定化され、判定部分が形成されている場合)、金属微粒子(a)の色調の違いを利用して、それぞれの固定化部分を異なる色を呈する検出ラインとして機能できることが分かる(検出ラインの多色化)。これにより、複数の被験物質を一度に検出できることも分かる。
多色イムノクロマト試験により得られたイムノクロマト紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、製造元:キヤノン株式会社)し、得られた画像をビットマップ画像編集ソフトウェアのAdobe Photoshopで取り込み、検出ラインのCIELAB D50を測定した。測色の結果を図27に示す。
金属微粒子B及びCを使用したB型肝炎ウイルス抗原及びヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの二検体二色検出イムノクロマト試験
(B型肝炎ウイルス抗原およびヒト絨毛性性腺刺激ホルモンイムノクマト試験用複合体分散液Aの調製)
先に調製された金属微粒子Bの分散液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金属微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金属微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。5mMのPBS(−)緩衝液(市販の200mM PBS溶液を40倍希釈して調製)中における濃度50μg/mLの抗B型肝炎ウイルス抗原抗体(品名:Goat anti HBsAg、製造元:Arista Biologicals,Inc.)の溶液0.2mLと、先に遠心分離によりpHを7.4に調整された金属微粒子Bの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて60分間振とうした。その後、3.26wt% ウシ血清アルブミン(BSA)−5mM PBS(−)溶液100μLを添加し、得られた混合物を室温にて60分間振とうした。次いで、遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、抗体−金属微粒子複合体を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、抗体−金属微粒子複合体を5mM PBS(−)緩衝液で再分散させ、紫外可視分光光度計 Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)1.0になるように調整し、複合体分散液Aを調製した。
先に調製された金属微粒子Cの分散液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金属微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金属微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。5mMのPBS(−)緩衝液(市販の200mM PBS溶液を40倍希釈して調製)中における濃度50μg/mLの抗ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン抗体(品名:MONOCLONAL ANTI−HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN、製造元:Medix Biochemica製)の溶液0.2mLと、先に遠心分離によりpHを7.4に調整された金属微粒子Cの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうし、その後4℃にて24時間静置した。次いで、遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、抗体−金属微粒子複合体を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、抗体−金属微粒子複合体を5mM PBS(−)緩衝液で再分散させ、紫外可視分光光度計 Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)1.0になるように調整し、複合体分散液Bを調製した。
先に調製された金属微粒子Aの分散液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金属微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金属微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。その後、pH7.4に調整した金属微粒子Aの分散液を紫外可視分光光度計 Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)1.0になるように調整し、pH調整分散液Aを調整した。pH調整分散液Aと、複合体分散液Aと、複合体分散液Bとを等しい体積比で混合し、展開液M(色調:黒色調)を調製した。
図5に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体および抗ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン抗体がそれぞれ直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙(展開液が展開する方向から見て下流側に抗ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン抗体が固定され、展開液が展開する方向から見て上流側に抗B型肝炎ウイルス抗原抗体が固定される)を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体および抗ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン抗体を直線状に固定する際、各抗体溶液を5mM PBS(−)緩衝液(上記の市販品の200mM PBS溶液を蒸留水で40倍希釈して作製)で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、5mMのPBS(−)緩衝液中におけるB型肝炎ウイルス抗原(品名:HBsAg Protein(Subtype adr)、製造元:Fitzgerald Industries International Inc.)とヒト絨毛性性腺刺激ホルモン(品名:hCG Human(−)、製造元:Meridian Life Science, Inc.製)の混合溶液であり、両抗原濃度が0.3μM、0.03μM、0.003M、0M(Blank)である混合溶液を用意した。洗浄用展開液は5mMのPBS(−)緩衝液である。第2の展開液には、展開液Mを用いた。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液30μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である5mMのPBS(−)緩衝液30μLを展開させた。最後に、第2の展開液120μLを展開させた。本イムノクロマト試験において、B型肝炎ウイルス抗原の検出が0.3μM、0.030μM、0.003μMの濃度に亘って目視により確認され、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの0.3μM、0.03μMの濃度に亘って確認された。結果を図35に示す。また、検出ラインの色調は、抗ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン抗体の固定化部分がシアン調、抗B型肝炎ウイルス抗原抗体の固定化部分がマゼンタ調であった。
二検体二色検出イムノクロマト試験により得られたイムノクロマト紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、製造元:キヤノン株式会社)し、得られた画像をビットマップ画像編集ソフトウェアのAdobe Photoshopで取り込み、検出ラインのCIELAB D50を測定した。測色の結果を図36に示す。
二検体二色検出イムノクロマト試験での試験後のイムノクロマト試験紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、製造元:キヤノン株式会社)し、判定部分(抗B型肝炎ウイルス抗原抗体および抗ヒト絨毛性性腺刺激ホルモン抗体の固定化部分)と、判定部分以外の部分の最低輝度を画像解析ソフト(Image−J)で測定することにより、検出感度を数値化することができる。検出感度は各部分をそれぞれ5回測定し、得られた数値の中央値の差とすることができる。輝度差解析の結果、B型肝炎ウイルス抗原の検出が0.3μM、0.03μM、0.003μMの濃度に亘って確認され、ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの0.3μM、0.03μMの濃度に亘って確認された。輝度解析の結果を図37に示す。
高精彩多色イムノクロマト試験
(高精彩多色イムノクロマト試験用展開液の調製)
先に調製された金属微粒子A〜Cの分散液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金属微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金属微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。
5mMのPBS(−)緩衝液(市販の200mM PBS溶液を40倍希釈して調製)中における濃度50μg/mLの抗B型肝炎ウイルス抗原抗体(品名:Goat anti HBsAg、製造元:Arista Biologicals,Inc.)の溶液0.2mLと、先に遠心分離によりpHを7.4に調整された金属微粒子A〜Cの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうした。その後、3.26wt% ウシ血清アルブミン(BSA)−5mM PBS(−)溶液100μLを該混合物に添加し、得られた混合物を室温にて60分間振とうした。次いで、遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、抗体−金属微粒子複合体を沈殿させ、上澄み液1.75mLを除去し、その後、沈殿物に0.16wt% BSA−5mM PBS(−)緩衝液0.75mLを添加し、抗体−金属微粒子複合体の2倍濃縮液を調製した。該濃縮液を0.16wt% BSA−5mM PBS(−)緩衝液で3.0倍希釈し、展開液N〜Pを調製した。また、前述の濃縮液を図38に従って調合し、展開液Q〜Tを調製した。
図1に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体が直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体を直線状に固定する際、抗B型肝炎ウイルス抗原抗体溶液を5mM PBS(−)緩衝液(上記の市販品の200mM PBS溶液を蒸留水で40倍希釈して作製)で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、1mMのPBS(−)緩衝液中におけるB型肝炎ウイルス抗原(品名:HBsAg Protein(Subtype adr)、製造元:Fitzgerald Industries International Inc.)の溶液であり、B型肝炎ウイルス抗原の濃度が0.60μM、0M(Blank)の溶液を用意した。洗浄用展開液は5mMのPBS(−)緩衝液である。第2の展開液には、上述の展開液N〜Tを用いた。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液15μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である5mMのPBS(−)緩衝液30μLを展開させた。最後に、第2の展開液60μLを展開させた。本イムノクロマト試験において、B型肝炎ウイルス抗原の検出が0.6μMの濃度で目視により確認され、0μM(Blank)の濃度では確認されず、非特異検出が無いことが確認された。また、検出ラインの色が展開液により異なり、展開液N使用時はイエロー調、展開液O使用時はマゼンタ調、展開液P使用時はシアン調、展開液Q使用時は赤色調、展開液R使用時は青色調、展開液S使用時は緑色調、展開液T使用時は黒色調の色を呈した。
高精彩多色イムノクロマト試験により得られたイムノクロマト紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE220、製造元:キヤノン株式会社)し、得られた画像をビットマップ画像編集ソフトウェアのAdobe Photoshopで取り込み、検出ラインのCIELAB D50を測定した。測色の結果を図39に示す。
球状金コロイドを使用したコンカナバリンAのイムノクロマト試験
(球状金コロイドを使用したコンカナバリンAのイムノクマト試験用展開液の調製)
市販の球状金コロイド分散液(品名:Auコロイド溶液−SC、粒径:40nm、製造元:田中貴金属株式会社)10mLに5質量%のポリビニルピロリドン(PVP)水溶液3.5mLを添加、攪拌後、一晩静置し、金コロイド調整液を作製した。
上記の金コロイド調整液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金微粒子を5mMのPBS(+)緩衝液(200mM PBS溶液(製品名:PBS溶液20倍濃縮液、製造元:関東化学株式会社)を40倍容に希釈し5mM PBS(−)緩衝液を1L調製し、塩化カルシウム(関東化学株式会社製)の1g/mL水溶液0.1mL及び、塩化マグネシウム六水和物(関東化学株式会社製)の1g/mL水溶液0.05mLを添加して調製)1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。
5mMのPBS(+)緩衝液中における濃度50μg/mLの抗コンカナバリンA抗体(品名:Anti Concanavalin A、製造元:EY Laboratories,Inc.)の溶液0.2mLと、先に調製された金コロイドの分散液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうした。次いで、遠心分離(75000rpm、4℃、1時間)を行い、抗体−金コロイド複合体を沈殿させ、上澄み液を除去した。その後、抗体−金コロイド複合体を純水500μL中に再分散させ、紫外可視分光光度計Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)0.35になるように調整し、抗体−金コロイド展開液Iを調製した。
図1に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗コンカナバリンA抗体が直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗コンカナバリンA抗体を直線状に固定する際、抗コンカナバリンA抗体溶液を5mM PBS(+)緩衝液で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、5mMのPBS(+)緩衝液中におけるコンカナバリンA(品名:Canavalia ensiformis(Jack Bean)[Con A],Jack bean(−)、株式会社J−オイルミルズ製)の溶液であり、コンカナバリンAの濃度が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0.6nM、0.06nM及び0Mの溶液を用意した。洗浄用展開液は5mMのPBS(+)緩衝液である。第2の展開液には、上述の抗体−金コロイド展開液Iを用いた。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液15μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である5mMのPBS(+)緩衝液30μLを展開させた。最後に、第2の展開液である抗体−金コロイド展開液I60μLを展開させた。イムノクロマト試験の結果、コンカナバリンAの検出が6μM、0.60μM、0.06μM、6nMの濃度に亘って目視により確認された。結果を図13に示す。
球状金コロイドを使用したコンカナバリンAのイムノクロマト試験での試験後のイムノクロマト試験紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、キヤノン株式会社)し、判定部分(抗コンカナバリンA抗体の固定化部分)と、判定部分以外の部分の最低輝度を画像解析ソフト(Image−J)で測定することにより、検出感度を数値化することができる。検出感度は各部分をそれぞれ5回測定し、得られた数値の中央値の差とすることができる。輝度差解析の結果、球状金コロイドではコンカナバリンAの検出が6μM、0.60μM、0.06μM、6nMの濃度に亘って確認できた。輝度解析の結果を図18、金属微粒子A〜Dとの比較を図19に示す。
球状金コロイドを使用したB型肝炎ウイルス抗原のイムノクロマト試験
(球状金コロイドを使用したB型肝炎ウイルス抗原イムノクマト試験用展開液の調製)
市販の球状金コロイド分散液(品名:Auコロイド溶液−SC、粒径:40nm、製造元:田中貴金属株式会社)10mLに5質量%のポリビニルピロリドン(PVP)水溶液3.5mLを添加、攪拌後、一晩静置し、金コロイド調整液を作製した。
上記の金コロイド調整液2.0mLの遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、金微粒子を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去した。その後、金微粒子を5mM PBS(−)緩衝液1.85mLで再分散した。この作業を二回繰り返し、分散液のpHを7.4に調整した。
5mMのPBS(−)緩衝液(市販の200mM PBS溶液を200倍希釈して調製)中における濃度50μg/mLの抗B型肝炎ウイルス抗原抗体(品名:Goat anti HBsAg、製造元:Arista Biologicals,Inc.)の溶液0.2mLと、先に遠心分離によりpHを7.4に調整された金コロイド調整液1.8mLを混合し、得られた混合物を室温にて30分間振とうした。次いで、遠心分離(25000rpm、4℃、10分間)を行い、抗体−金コロイド複合体を沈殿させ、上澄み液1.85mLを除去し、抗体−金コロイド複合体の13.3倍濃縮液を調製した。その後、該濃縮液を5mM PBS(−)緩衝液で希釈、紫外可視分光光度計Agilent 8453(アジレント・テクノロジー株式会社製)を使用して消光度(Extinction)0.35になるように調整し、抗体−金コロイド展開液IIを調製した。また、該濃縮液を3倍希釈し消光度2.0の抗体−金コロイド展開液IIIを調製し、後述するB型肝炎ウイルス抗原イムノクロマト試験結果の測色に使用するイムノクロマト試験に使用した。
図1に示されるようなイムノクロマト試験を行った。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体が直線状に固定化されたイムノクロマト試験紙を用いた。イムノクロマト試験紙はイムノクロマト試験紙の受託作製会社(有限会社バイオデバイステクノロジー)より購入したものを使用した。抗B型肝炎ウイルス抗原抗体を直線状に固定する際、抗B型肝炎ウイルス抗原抗体溶液を1mM PBS(−)緩衝液(上記の市販品の200mM PBS溶液を蒸留水で200倍希釈して作製)で濃度1g/mLに調整したものを使用した。第1の展開液は、1mMのPBS(−)緩衝液中におけるB型肝炎ウイルス抗原(品名:HBsAg Protein(Subtype adr)、製造元:Fitzgerald Industries International Inc.)の溶液であり、B型肝炎ウイルス抗原の濃度が6μM、0.60μM、0.06μM、6nM、0M(Blank)の溶液を用意した。洗浄用展開液は1mMのPBS(−)緩衝液である。第2の展開液には、先に調製された消光度0.35に調整した抗体−金コロイド展開液IIを用いた。具体的には、イムノクロマト試験紙に、各濃度の第1の展開液15μLをそれぞれ展開させた。次いで、洗浄用展開液である1mMのPBS(−)緩衝液30μLを展開させた。最後に、第2の展開液60μLを展開させた。本イムノクロマト試験において、B型肝炎ウイルス抗原の検出が6μM、0.60μMの濃度に亘って目視により確認できた。結果を図20に示す。また、検出ラインの色は赤紫色であった。
球状金コロイドを使用したB型肝炎ウイルス抗原のイムノクロマト試験での試験後のイムノクロマト試験紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、製造元:キヤノン株式会社)し、判定部分(抗B型肝炎ウイルス抗原抗体の固定化部分)と、判定部分以外の部分の最低輝度を画像解析ソフト(Image−J)で測定することにより、検出感度を数値化することができる。検出感度は各部分をそれぞれ5回測定し、得られた数値の中央値の差とすることができる。輝度差解析の結果、B型肝炎ウイルス抗原の検出が6μM、0.60μMの濃度に亘って確認された。輝度解析の結果を図22、金属微粒子Bとの比較を図23に示す。
(金コロイドを使用したB型肝炎ウイルス抗原イムノクロマト試験結果の測色)
先に調製された消光度2.0に調整した抗体−金コロイド展開液IIIを使用したB型肝炎ウイルス抗原イムノクロマト試験により得られたイムノクロマト紙をスキャニング(装置名:Cano Scan LiDE500F、製造元:キヤノン株式会社)し、得られた画像をビットマップ画像編集ソフトウェアのAdobe Photoshopで取り込み、検出ラインのCIELAB D50を測定した。抗体−金コロイド展開液IIIの分光特性を図25、測色の結果を図27に示す。
Claims (4)
- プレート状銀ナノ粒子及び該プレート状銀ナノ粒子の表面を被覆する金からなる金属微粒子(a)と、被験物質に対して特異的な結合性を有し且つ該金属微粒子(a)に対して結合性を有する分子(b)とを備えることを特徴とするイムノクロマトキット。
- イムノクロマト試験後に1種又は複数種の検出ラインを呈するクロマトグラフ担体を備えるイムノクロマトキットであって、
前記検出ラインの色は、1種の金属微粒子(a)の色又は異なる色を呈する複数種の金属微粒子(a)の混色に基づいていることを特徴とする請求項1に記載のイムノクロマトキット。 - イムノクロマト試験後に複数種の検出ラインを呈するクロマトグラフ担体を備えるイムノクロマトキットであって、
前記クロマトグラフ担体は、異なる被験物質に対して結合性を有する複数種の分子(b)がそれぞれ異なる位置に固定されていることを特徴とする請求項1又は2に記載のイムノクロマトキット。 - 前記被験物質に対して結合性を有さず且つ前記金属微粒子(a)に対して結合性を有する水溶性高分子(c)を更に備えることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載のイムノクロマトキット。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015064125A JP6440166B2 (ja) | 2014-03-28 | 2015-03-26 | イムノクロマトキット |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2014068683 | 2014-03-28 | ||
JP2014068683 | 2014-03-28 | ||
JP2015064125A JP6440166B2 (ja) | 2014-03-28 | 2015-03-26 | イムノクロマトキット |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015194495A true JP2015194495A (ja) | 2015-11-05 |
JP6440166B2 JP6440166B2 (ja) | 2018-12-19 |
Family
ID=54433618
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015064125A Active JP6440166B2 (ja) | 2014-03-28 | 2015-03-26 | イムノクロマトキット |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6440166B2 (ja) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6133478B1 (ja) * | 2016-07-15 | 2017-05-24 | 株式会社ニチレイバイオサイエンス | 着色粒子 |
WO2017154989A1 (ja) * | 2016-03-09 | 2017-09-14 | 大日本塗料株式会社 | 金ナノプレートを含む被験物質を検出するための組成物及びその用途 |
CN112143632A (zh) * | 2020-09-27 | 2020-12-29 | 浙江农林大学 | 一种供兽医临床使用的高通量快速药敏检测试剂盒 |
CN112601949A (zh) * | 2018-08-21 | 2021-04-02 | 电化株式会社 | 使用载体粒子增强表面等离子体共振的免疫层析法 |
JP2021179008A (ja) * | 2020-05-12 | 2021-11-18 | 大日本塗料株式会社 | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液並びにその用途及び製造方法 |
WO2021230267A1 (ja) * | 2020-05-12 | 2021-11-18 | 大日本塗料株式会社 | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液、その用途及び製造方法、並びにイムノクロマトキット |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009192223A (ja) * | 2008-02-12 | 2009-08-27 | Fujifilm Corp | 金属粒子及びそれを用いた検査方法 |
JP2010529460A (ja) * | 2007-06-06 | 2010-08-26 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 表面増強ラマン散乱レポーターとしての近赤外色素 |
JP2010537155A (ja) * | 2007-03-20 | 2010-12-02 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 表面増強ラマン分光法(sers)活性粒子を使用するアッセイ |
JP4787938B2 (ja) * | 2003-03-28 | 2011-10-05 | ザ・プロウボウスト・フェロウズ・ファウンデーション・スカラーズ・アンド・ザ・アザー・メンバーズ・オブ・ボード・オブ・ザ・カレッジ・オブ・ザ・ホリー・アンド・アンデバイデッド・トリニティ・オブ・クイーン | 銀ナノ粒子を用いた検体検出用センサ |
JP2011220705A (ja) * | 2010-04-05 | 2011-11-04 | Furukawa Electric Co Ltd:The | イムノクロマトグラフィー用複合粒子 |
-
2015
- 2015-03-26 JP JP2015064125A patent/JP6440166B2/ja active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4787938B2 (ja) * | 2003-03-28 | 2011-10-05 | ザ・プロウボウスト・フェロウズ・ファウンデーション・スカラーズ・アンド・ザ・アザー・メンバーズ・オブ・ボード・オブ・ザ・カレッジ・オブ・ザ・ホリー・アンド・アンデバイデッド・トリニティ・オブ・クイーン | 銀ナノ粒子を用いた検体検出用センサ |
JP2010537155A (ja) * | 2007-03-20 | 2010-12-02 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 表面増強ラマン分光法(sers)活性粒子を使用するアッセイ |
JP2010529460A (ja) * | 2007-06-06 | 2010-08-26 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 表面増強ラマン散乱レポーターとしての近赤外色素 |
JP2009192223A (ja) * | 2008-02-12 | 2009-08-27 | Fujifilm Corp | 金属粒子及びそれを用いた検査方法 |
JP2011220705A (ja) * | 2010-04-05 | 2011-11-04 | Furukawa Electric Co Ltd:The | イムノクロマトグラフィー用複合粒子 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
CUI, Y. ET AL.: "Synthesis of AgcoreAushell Bimetallic Nanoparticles for Immunoassay Based on Surface-Enhanced Raman", THE JOURNAL OF PHYSICAL CHEMISTRY B, vol. 110, no. 9, JPN6016023096, 2006, pages 4002 - 4006, XP055059934, ISSN: 0003899485, DOI: 10.1021/jp056203x * |
GAO, C., ET AL.: "Highly Stable Sliver Nanoplates for Surface Plasmon Resonance Biosensing", ANGEWANDTE CHEMIE INTERNATIONAL EDITION, vol. 51, no. 23, JPN6016023095, June 2012 (2012-06-01), pages 5629 - 5633, ISSN: 0003899484 * |
MOHAMMAD MEHDI SHAHJAMALI ET AL.: "Gold Coating of Silver Nanoprisms", ADVANCED FUNCTIONAL MATERIALS, vol. Volume 22, Issue 4, JPN6015027318, 22 February 2012 (2012-02-22), pages 849 - 854, ISSN: 0003899486 * |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2017154989A1 (ja) * | 2016-03-09 | 2017-09-14 | 大日本塗料株式会社 | 金ナノプレートを含む被験物質を検出するための組成物及びその用途 |
JPWO2017154989A1 (ja) * | 2016-03-09 | 2018-03-22 | 大日本塗料株式会社 | 金ナノプレートを含む被験物質を検出するための組成物及びその用途 |
JP6133478B1 (ja) * | 2016-07-15 | 2017-05-24 | 株式会社ニチレイバイオサイエンス | 着色粒子 |
JP2018009946A (ja) * | 2016-07-15 | 2018-01-18 | 株式会社ニチレイバイオサイエンス | 着色粒子 |
CN112601949A (zh) * | 2018-08-21 | 2021-04-02 | 电化株式会社 | 使用载体粒子增强表面等离子体共振的免疫层析法 |
JP2021179008A (ja) * | 2020-05-12 | 2021-11-18 | 大日本塗料株式会社 | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液並びにその用途及び製造方法 |
WO2021230267A1 (ja) * | 2020-05-12 | 2021-11-18 | 大日本塗料株式会社 | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液、その用途及び製造方法、並びにイムノクロマトキット |
CN112143632A (zh) * | 2020-09-27 | 2020-12-29 | 浙江农林大学 | 一种供兽医临床使用的高通量快速药敏检测试剂盒 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6440166B2 (ja) | 2018-12-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6440166B2 (ja) | イムノクロマトキット | |
JP5960374B2 (ja) | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液 | |
US11733241B2 (en) | Marker, immunoassay method, immunoassay reagent, method for assaying analyte, analyte measurement kit, and lateral-flow chromatographic test strip | |
CN103201057B (zh) | 免疫学测定用蓝色金纳米颗粒、其制造方法以及使用该蓝色金纳米颗粒的测定方法 | |
TWI724639B (zh) | 樹脂-白金複合體、標記物質、免疫學測定法、免疫學測定用試劑、分析物的測定方法、用以對分析物進行檢測或定量的分析物測定用套組、側向流型層析用測試條 | |
JP6381642B2 (ja) | 樹脂−金属複合体、標識物質、免疫学的測定法、免疫学的測定用試薬、アナライトの測定方法、アナライト測定用キット、及び、ラテラルフロー型クロマト用テストストリップ | |
WO2013072213A2 (fr) | Nanoparticules coeur-coquille métal-silice, procédé de fabrication et dispositif de test par immunochromatographie comprenant de telles nanoparticules | |
Chafer-Pericas et al. | Functionalized inorganic nanoparticles used as labels in solid-phase immunoassays | |
JP6987939B2 (ja) | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液並びにその用途及び製造方法 | |
TW201825604A (zh) | 金屬-樹脂複合體、標記物質、免疫學測定法、免疫學測定用試劑、分析物的測定方法、用以對分析物進行測檢或定量的分析物測定用套組及測向流型層析用測試條 | |
US20210255179A1 (en) | Method for detecting a test substance | |
JP2017095744A (ja) | 金ナノロッドを含む被験物質を検出するための組成物及びその用途 | |
WO2021230267A1 (ja) | 金被覆銀ナノプレートの懸濁液、その用途及び製造方法、並びにイムノクロマトキット | |
JP6716632B2 (ja) | パラジウム被覆異方性金ナノ粒子を含む被験物質を検出するための組成物及びその用途 | |
JP2022161209A (ja) | イムノクロマトキット | |
Sarlak et al. | Design of an Immunochromatographic Kit Using Hybrid Nanomaterial for Rapid Detection of Disease | |
CN117229780A (zh) | 一种金属增强量子点荧光纳米球及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20161013 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20161013 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161017 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180312 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180312 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20180919 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20181023 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20181114 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6440166 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |